CZ298939B6

CZ298939B6 - Farmaceutické kompozice a léciva pro zesvetlení nebo snížení pigmentace kuže nebo pro lécení zánetlivého onemocnení nebo lupu u cloveka

Info

Publication number: CZ298939B6
Application number: CZ20013339A
Authority: CZ
Inventors: William Collington@Eric
Original assignee: Pfizer Inc.
Priority date: 1999-03-22
Filing date: 2000-03-14
Publication date: 2008-03-19
Also published as: SK13222001A3; EA200100853A1; TWI224011B; MA26726A1; EE200100489A; BG65146B1; KR100468250B1; CZ20013339A3; GT200000030A; CA2366623C; CR6452A; ZA200106681B; JP2002539234A; GEP20043231B; HK1044478A1; EP1165031A1; DE60020682T2; BR0009194A; DE60020682D1; AU2823000A

Abstract

Popisuje se topická farmaceutická kompozice pro zesvetlení nebo snížení pigmentace kuže nebo inhibici tyrosinázy cloveka, která obsahuje resorcinol vzorce I nebo jeho farmaceuticky prijatelnou sul a farmaceuticky prijatelný nosic. Farmaceutická kompozice pro topické nebo transdermální podání pro lécení zánetlivého onemocnení nebo lupu u cloveka s obsahem stejné úcinné látky. Zánetlivým onemocnením pritom muže být zejména psoriáza, dermatitida nebo akné. Použití resorcinolu vzorce I nebo jeho farmaceuticky prijatelné soli pro výrobu odpovídajících léciv.

Description

Vynález se týká farmaceutické kompozice a léčiva pro zesvětlení nebo snížení pigmentace kůže nebo pro léčení zánětlivého onemocnění nebo lupů u člověka.

Dosavadní stav techniky

Výrazy „prostředek pro zesvětlení“ a „prostředek pro depigmentaci“ používané v této přihlášce jsou vzájemně zaměnitelné.

Barva kůže člověka je určená komplexem postupných buněčných procesů probíhajících ve zvláštní populaci buněk nazývaných melanocyty. Melanocyty se vyskytují ve spodní části epidermu, a jejich funkcí je syntetizovat pigment melanin, který chrání povrch těla před škodlivými účinky ultrafialového záření.

Při vystavení kůže ultrafialovému záření jakým je sluneční světlo, melanocyty zvyšují svoji produkci melaninu. Melanin se ukládá v melanosomech, což jsou vezikula vyskytující se v buňce. Melanosomy pronikají z buňky a dostávají se na povrch kůže v keranocytech, ve kterých melanosomy obsahující melanin ukládají. Konečným výsledkem je, že viditelné vrstvy kůže mají hnědé zbarvení obvykle označované jako „tříslové“. Vizuálně patrná tmavost kůže je úměrná množství melaninu syntetizovaného melanocyty a převedeného do keratinocytů.

Mechanismus vzniku pigmentace kůže, tj. melanogeneze je zvláště složitý proces který schématicky zahrnuje následující hlavní stupně: tyrosin -> L-Dopa -> dopachinon -> dopachrom ->

melaniny. První dvě reakce uvedené série jsou katalyzované enzymem tyrosinázou. Aktivita tyrosinázy vedoucí k tvorbě melaninu závěrečně vedoucí ke zbarvení pokožky je podporovaná účinkem hormonu stimulujícího α-melanocyty nebo UV zářením. Je již dobře známé, že k depigmentačnímu účinku nějaké substance dochází, jestliže tato substance působí přímo na vitalitu epidermálních melanocytů ve kterých melanogeneze obvykle probíhá a/nebo jestliže interferuje sjedním ze stupňů biosyntézy melaninu. Účinné sloučeniny použité v různých způsobech a kompozicích podle vynálezu inhibují tyrosinázu a tím inhibují nebo snižují biosyntézu melaninu.

Velmi potřebné jsou prostředky umožňující obnovu kůže určitých depozitních ploch jako jsou skvrny nebo pihy na normální vzhled. Pro uvedený účel již bylo vyvinuto a jsou známé různé způsoby a na trhuje dostupných více prostředků pro tento účel. Příklady těchto způsobů zahrnují a) způsob orálního podávání vysokých dávek vitaminu C (kyseliny L-askorbové), který má vysokou schopnost redukovat; b) způsob zahrnující parenterální podávání glutathionu; c) způsob, při kterém se podává peroxid, jako je peroxid vodíku, peroxid zinku, peroxid sodíku a podobně, kde se předpokládá bělicí účinek na melamin; a d) způsob, kde vitamin C nebo cystein se podává topicky ve formě masti, krému nebo omývadla nebo v podobné formě. U vitaminu C dochází k problémům se stabilitou, kde vitamin C je v systémech obsahujících vodu natolik nestabilní že dochází ke změnám barvy a k zápachu. Thiolové sloučeniny jako glutathion a cystein nemají uspokojivý depigmentační účinek protože k vývoji tohoto účinku dochází velmi pomalu.

V současné době se jako depigmentační prostředky nejvíce používají prostředky obsahující hydrochinon a jeho deriváty, zejména ethery jako je hydrochinon(monomethyl)ether. Je však známé, že uvedené sloučeniny i když jsou účinné, mají vedlejší účinky které mohou být škodlivé. Hydrochinon, jehož použití je omezené na koncentraci 2 %, má účinky jak dráždivě tak cytotoxické vůči melanocytům.

- 1 CZ 298939 B6

V patentu US 4 526 179 jsou popsané určité estery hydrochinonu s mastnými kyselinami, které mají vhodnou účinnost a jsou méně dráždivě a mají lepší stabilitu než hydrochinon.

V japonské patentové přihlášce JP 27909/86 jsou popsané další deriváty hydrochinonu, které nevykazují nedostatky které má hydrochinon ale mají relativně nižší účinnost.

V patentu US 5 449 518 jsou popsané deriváty 2,5-dihydroxyfenylkarboxylové kyseliny jako prostředky pro depigmentaci kůže.

ίο V evropské patentové přihlášce EP 341 664 Al jsou popsané určité deriváty resorcinolu jako inhibitoru tyrosinázy a prostředky pro depigmentaci kůže.

Použití topických prostředků pro depigmentaci s vhodnou účinností a bez nežádoucích vedlejších účinků je zvláště žádoucí v následujících případech: při regionální hyperpigmentaci vyvolané hyperaktivitou melanocytů jako je idiopatická melazma objevující se buď v těhotenství (maskované těhotenství nebo chloazma), nebo sekundárně po estrogen-progesteronové antikoncepci; při lokální hyperpigmentaci vyvolané benigní hyperaktivitou a proliferaci melanocytů jako je lentigo senilis nebo jatemí skvrny; při vedlejší hyperpigmentaci po fotosenzibilizaci při hojení ran a jizvení; a při určitých formách leukoderma jako je vitiligo, kde pokud nemůže dojít k repigmen20 taci poškozené kůže, zbytkové zóny normální kůže se depigmentují a celkový povrch kůže je pak homogenně bílý.

Podstata vynálezu

V souvislosti s vynálezem se zjistilo, že derivát resorcinolu dále uvedeného vzorce I, tj. 4-(2,4dihydroxyfenyl)cyklohexanol, ajeho farmaceuticky přijatelné soli, jsou vhodné pro léčení výše popsaných dermatologických stavů a rovněž pro léčení dalších dermatologických stavů z nichž některé jsou popsané dále v tomto popisu u člověka. Toto léčení vede k zesvětlení nebo redukci pigmentace kůže vyvolané daným stavem a může být vyžadováno jak ze zdravotních, tak i z kosmetických důvodů.

4-(2,4-dihydroxyfenyl)cyklohexanol ajeho farmaceuticky přijatelné soli jsou rovněž vhodné pro léčení zánčtlivých chorob jako je psoriáza a akné a pro léčbu lupů.

Předmětem vynálezu je topická farmaceutická kompozice pro zesvětlení kůže nebo pro snížení pigmentace kůže člověka, jejíž podstata spočívá v tom, že obsahuje resorcinol vzorce I

tj- 4-(2,4-dihydroxyfenyl)cyklohexanol, nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl v množství 40 účinném pro zesvětlení kůže nebo pro snížení pigmentace kůže a farmaceuticky přijatelný nosič.

-2CZ 298939 B6

Předmětem vynálezu je dále také použití resorcinolu vzorce I nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli pro výrobu topického léčiva pro zesvětlování kůže nebo snížení pigmentace kůže u člověka.

Předmětem vynálezu je dále také topická farmaceutická kompozice pro inhibici tyrosinázy u člo5 věka, jejíž podstata spočívá v tom, že obsahuje sloučeninu vzorce I nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl v množství účinném pro inhibici tyrosinázy a farmaceuticky přijatelný nosič.

Předmětem vynálezu je dále také použití resorcinolu vzorce I nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli v množství účinném pro inhibici tyrosinázy pro výrobu léčiva pro inhibici tyrosinázy u člo10 věka.

Předmětem vynálezu je dále také farmaceutická kompozice pro topické podání určená pro zesvětlení kůže nebo pro snížení pigmentace kůže člověka, jejíž podstata spočívá v tom, že obsahuje resorcinol vzorce I nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl v množství účinném pro inhibici tyro15 sinázy a farmaceuticky přijatelný nosič.

Předmětem vynálezu je dále také farmaceutická kompozice pro topické nebo transdermální podání pro léčení zánětlivého onemocnění nebo lupů u člověka, jejíž podstata spočívá vtom, že obsahuje resorcinol vzorce I nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl v množství účinném pro léčbu uvedeného onemocnění a farmaceuticky přijatelný nosič.

Předmětem vynálezu je dále také použití resorcinolu vzorce I nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli pro výrobu léčiva pro léčení zánětlivého onemocnění nebo lupů u člověka.

Konečně je předmětem vynálezu je také farmaceutická kompozice pro topické nebo transdermální podání pro léčení zánětlivého onemocnění člověka, jejíž podstata spočívá v tom, že obsahuje resorcinol vzorce I, nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl v množství účinném pro inhibici tyrosinázy a farmaceuticky přijatelný nosič.

Sloučenina vzorce I, tj. 4-(2,4-dihydroxyfenyl)cyklohexanol může existovat v různých diastereomemích formách. Vynález zahrnuje všechny stereoizomery 4-(2,4-dihydroxyfenyl)cyklohexanolu a jejich směsi a všechny farmaceutické kompozice popsané výše které je obsahují nebo ve kterých se používají.

Vzorec I zahrnuje rovněž sloučeniny mající výše uvedený vzorec až na skutečnost, že jeden nebo více atomů vodíku, uhlíku nebo jiných atomů je nahrazeno jejich izotopy. Tyto sloučeniny mohou být vhodné ve výzkumu a jako diagnostické prostředky ve farmakokinetických studiích metabolismu a ve stanoveních vazby.

Podrobný popis vynálezu

Sloučeninu vzorce I je možné připravit podle níže uvedeného reakčního schématu a následujícího popisu.

-3CZ 298939 B6

Schéma

(6) (5) (4)

Sloučeninu vzorce (1) na výše uvedeném schématu je možné připravit zavedeních chránících skupin na obchodně dostupný 4-bromresorcinol. Vhodnou chránící skupinu jako je methoxymethylová skupina (MOM) je možné zavést obvyklými způsoby pracovníkům v oboru obecně známými. Alkylaci 4-bromresorcinolu je možné například provést použitím dvou ekvivalentů methoxymethylchloridu v přítomnosti diisopropylaminu v halogenovaném rozpouštědle při teplotě od asi 0 °C do teploty místnosti.

Sloučenina vzorce (2) je známá aje obchodně dostupná. Sloučeninu vzorce (3) lze připravit reakcí sloučeniny vzorce (1) s butyllithiem v přítomnosti Ν,Ν,Ν',Ν'-tetramethylethylendiaminu v etherovém rozpouštědle s následným přídavkem sloučeniny (2). Dehydratací sloučeniny vzorce (3) za standardních podmínek, například zahříváním sloučeniny vzorce (3) při asi 110 °C v Dean15 Stárkově destilačním zařízení v přítomnosti kyseliny kafrsulfonové ve vhodném rozpouštědle (např. v toluenu) se získá sloučenina vzorce (4). Hydrogenaci za standardních podmínek, například pomocí plynného vodíku a palladia na aktivním uhlí v ethanolu se získá sloučenina vzorce (5). Sejmutím chránících skupin za vhodných podmínek se získá resorcinol vzorce (6). Sloučeninu vzorce (6) je možné dále derivatizovat standardními způsoby v oboru obecně známými na derivát resorcinolu vzorce (I). Sloučeninu vzorce (I) je možné připravit například redukcí sloučeniny vzorce (6) redukčním prostředkem jako je tetrahydroboritan sodný ve vhodném rozpouštědle jako je ethanol při teplotě v rozmezí od 0 °C do teploty místnosti.

Sloučenina vzorce (I) je sama o sobě slabě kyselá a může tvořit soli s bázemi obsahujícími farmaceuticky přijatelné kationty. Příklady těchto solí zahrnují soli alkalických kovů a soli kovů

-4CZ 298939 B6 alkalických zemin a zejména soli sodné a draselné. Uvedené soli se připravují obvyklými způsoby. Chemické báze vhodné jako činidla k přípravě farmaceuticky přijatelných solí sloučeniny podle vynálezu s bázemi jsou báze tvořící se sloučeninou vzorce (I) netoxické soli. Uvedené netoxické soli zahrnují soli obsahující farmaceuticky přijatelné kationty jako je sodík, draslík, vápník, hořčík atd. Uvedené soli lze snadno připravit zpracováním odpovídající kyselé sloučeniny s vodným roztokem obsahujícím požadované farmaceuticky přijatelné kationty a odpařením získaného roztoku do sucha, výhodně za sníženého tlaku. Alternativně je možné je připravit smísením roztoku kyselé sloučeniny v alkanolů s roztokem alkoxidu alkalického kovu v alkanolů a odpařením získaného roztoku do sucha. V obou případech se výhodně použijí stechiometrická množství reaktantů aby se zajistil kvantitativní průběh reakce a maximální výtěžek požadovaného konečného produktu.

Sloučenina podle vynálezu, tj. 4-(2,4-dihydroxyfenyl)cyklohexanol a jeho farmaceuticky přijatelné soli (dále označované jako „účinné sloučeniny pro použití podle vynálezu“) jsou vhodné k léčení poruch pigmentace u lidí zahrnujících solární lentigo i lentigo simplex (včetně stařeckých/jatemích skvrn), melazma/chloazma a pozánětlivou hyperpigmentaci. Uvedené sloučeniny redukují hladiny melaninu v kůži inhibici tvorby melaninu, a to ať již je melanin produkován konstitučně nebo v odezvě na ozáření UV paprsky (jako při vystavení slunečním paprskům). Účinné sloučeniny pro použití podle vynálezu lze tedy použít k redukci obsahu melaninu v kůži v nepatologických případech s cílem vyvolat světlejší odstín kůže podle přání zákazníka. Uvedené sloučeniny je také možné použít v kombinaci s prostředky pro „peeling“ (zahrnujících prostředky pro použití na obličej obsahující kyselinu glykolovou nebo kyselinu trichloroctovou) k získání světlejšího odstínu kůže a k prevenci repigmentace.

Účinné sloučeniny pro použití podle vynálezu je také možné použít v kombinaci se slunečními filtry (s filtry pro záření UVA nebo UVB) k prevenci repigmentace, k ochraně před ztmavnutím indukovaným slunečním nebo UV zářením nebo ke zvýšení jejich schopnosti redukovat množství melaninu kůži a jejich bělícího účinku. Uvedené sloučeniny je možné kombinovat s kyselinou retinoovou nebo sjejími deriváty nebo se všemi sloučeninami které interagují s receptory kyseliny retinoové a urychlují nebo zvyšují účinky sloučenin pro použití podle vynálezu na snížení obsahu melaninu v kůži nebo bělícího účinku na kůži.

Účinné sloučeniny pro použití podle vynálezu je také možné použít v kombinaci s kyselinou askorbovou a jejími deriváty, s dalšími produkty na bázi kyseliny askorbové (jakoje askorbát hořečnatý) nebo s jinými produkty které mají antioxidační vlastnosti (jakoje resveratrol) k urychlení nebo zvýšení schopnosti sloučenin vhodných pro použití podle vynálezu redukovat obsahu melaninu v kůži nebo zvýšit jejich bělicí účinek.

Účinné sloučeniny pro použití podle vynálezu se obecně podávají ve formě farmaceutické kom40 pozice obsahující uvedenou sloučeninu společně s farmaceuticky přijatelným prostředkem nebo ředidlem. Uvedená kompozice se obecně připraví obvykle používanými způsoby s použitím tuhých nebo tekutých prostředků nebo ředidel vhodných pro dané topické podání, ve formě roztoků, gelů, krémů, želé, past, omývadel, mastí, balzámů a podobně. Jako prostředek je možné například použít roztok voda-alkohol, emulze typu olej-voda nebo voda-olej, emulgovaný gel nebo dvoufázový systém. Výhodně jsou kompozice podle vynálezu ve formě omývadel, krémů, pleťových mlék, gelů, masek, mikrosfér nebo nanosfér nebo vezikulámích disperzí. V případě vezikulámích disperzí lipidy tvořící vezikula mohou být jak iontového, tak neiontového typu, nebo to může být směs obou typů.

Výraz „množství sloučeniny vzorce (I) umožňující zesvětlení kůže nebo snížení pigmentace“ použitý v tomto textu a podobné výrazy znamenají koncentrace sloučeniny které umožňují stanovitelné zesvětlení kůže nebo redukci pigmentace u člověka, zjistitelné některým ze známých způsobů stanovení.

-5CZ 298939 B6

Výraz „účinné množství sloučeniny vzorce (I) pro inhibici tyrosinázy“ použitý v tomto textu a podobné výrazy znamenají množství nebo koncentrace sloučeniny které umožňují stanovitelnou inhibici aktivity tyrosinázy zjistitelnou některým ze známých způsobů stanovení.

Výraz „množství sloučeniny vzorce (I) schopné léčit zánětlivou chorobu jako je psoriáza, dermatitida nebo akné nebo pro léčbu lupů“ použitý v tomto textu nebo podobné výrazy, znamenají množství sloučeniny nebo koncentraci sloučeniny umožňující stanovitelné zmírnění, redukci, eliminaci, zpomalení nebo prevenci některého ze symptomů nebo stavu spojeného nebo vyvolaného uvedenou chorobou nebo stavem u člověka, které je možné stanovit některým ze známých způsobů stanovení.

V kompozicích pro depigmentaci podle vynálezu je koncentrace účinných sloučenin vhodných pro použití podle vynálezu obecně v rozmezí 0,01 až 10 %, výhodně je v rozmezí 0,1 až 10 % vzhledem k celkové hmotnosti kompozice.

Kompozice podle vynálezu mohou případně obsahovat zvlhčovači prostředek, povrchově aktivní prostředek, keratolytikum, protizánětlivý prostředek, komplexotvomý prostředek, antioxidační prostředek, konzervační prostředek nebo sluneční filtr nebo jejich kombinace.

Schopnost účinných sloučenin používaných podle vynálezu inhibovat tyrosinázu je možné stanovit některým z níže uvedených způsobů.

1. Stanovení aktivity tyrosinázy (DOPA oxidázy) na buněčném lyzátu:

Při stanovení a ve srovnávacím hodnocení s použitím buněčného lyzátu se použije buněčná linie lidského melanomu SKMEL 188 (získané z Memoriál Sloan-Kettering). Při stanovení se hodnocené sloučeniny a L-dihydroxyfenylalanin (L-DOPA) (100pg/ml) inkubují s buněčným lyzátem obsahujícím lidskou tyrosinázu a po 8 hodinách se provede vyhodnocení při 405 nm. Účinnost sloučenin při stanovení s DOPA oxidázou velmi dobře koreluje s účinností stanovenou s pomocí tyrosinhydroxylázy s použitím ³H-tyrosinu jako substrátu. 4-(2,4-dihydroxyfenyl)cyklohexanol má výše uvedené stanovení IC50 0,2 μΜ.

2. Stanovení melaninu v primárních lidských melanocytech:

Hodnocené sloučeniny se inkubují s primárními lidskými melanocyty v přítomnosti a-melanocyty stimulujícího hormonu (a-MSH) 2 až 3 dny. Pak se buňky rozloží hydroxidem sodným a natrium-dodecylsulfátem (SDS) a vyhodnotí se signály odpovídající melaninu při 405 nm. Alternativně se k buňkám přidá ¹⁴C-DOPA s inhibitory tyrosinázy a ¹⁴C-melanin nerozpustný v kyselině se kvantitativně stanoví scintilačním počítačem. Hodnota IC50 vyjadřuje inhibiční účinnost sloučeniny v syntéze nového melaninu stimulované a-MSH.

3. Stanovení s tyrosinkinázou (TK):

TK stanovení lze provést s použitím přečištěné tyrosinkinázové domény c-met, erb-B2 nebo

IGF-r. Při stanovení se použije specifická protilátka proti fosforylovanému tyrosinovému zbytku. Kolorimetrické signály se generují pomocí křenové peroxidázy která se konjuguje s protilátkou.

4. Model ekvivalentní lidské kůži:

Směs lidských melanocytů a keratinocytů se kultivuje v mezifázi vzduch-tekutina. Tkáňová kultura vytvoří třírozměrnou strukturu která se histologicky a mikroskopicky podobá epidermu kůže. Na horní povrch buněk se nanese hodnocená sloučenina čímž se simuluje topické podání léčiva. Po třídenní inkubaci s hodnocenými sloučeninami (10 μΜ) se buňky intenzivně promyjí a převedou se na lyzát pro stanovení DOPA-oxidázy.

-6CZ 298939 B6

5. Stanovení IL-1 (stanovení interleukinu-1):

K hodnocení vlivu zkoušené sloučeniny na sekreci IL-1 na modelu ekvivalentním lidské kůži lze použít IL-l-ELISA stanovení (systém R&D). IL-Ια je prozánětlivý cytokin a má svoji úlohu v zánětu kůže indukovaném UV zářením.

6. Studie in vivo:

ío Ve studii je možné použít černá nebo tmavě hnědá morčata s homogenně zbarvenou kůží. Zvířatům se podává dvakrát denně roztok testované sloučeniny (5% v ethanolu:propylenglykolu 70:30) a prostředky pět dní v týdnu po dobu 4 až 8 týdnů. V této studii bylo zjištěno, že 4-(2,4-dihydroxyfenyl)cyklohexanol působí depigmentaci kůže.

Vynález je dále popsán následujícím příkladem. Vynález však není nijak omezen specifickými podrobnostmi uvedenými v tomto příkladu. Spektra protonové jaderné magnetické rezonance (’HNMR) jsou měřena v roztocích d₆-DMSO, CDC1₃ nebo d₄-MeOH a polohy píků jsou vyjádřeny v dílech na milion dílů (ppm) vzhledem k tetramethylsilanu (TMS). Tvary píků jsou označované následovně: s, singlet; d, dublet, t, triplet; q, kvartet; m, multiplet; b, široký.

Níže uvedený příklad je určený pouze pro znázornění vynálezu a rozsah vynálezu nijak neomezuje.

Příklady provedení vynálezu

Meziprodukt 1 l,3-di(methoxymethoxy)-4-brombenzen

Do baňky s kulovým dnem objemu 250 ml vysušené v sušárně a opatřené magnetickým míchadlem se vnese v atmosféře argonu 4-bromresorcinol (9,45 g, 50 mmol) a CH₂C1₂ (50 ml). Suspenze se za míchání ochladí na 0 °C a najednou se injekční stříkačkou přidá diizopropylamin (19,1 ml, 110 mmol). Červený roztok se míchá dalších 10 minut a pak se po kapkách, injekční stříkačkou, přidá methyl(chlormethyl)ether (10,7 ml, 120 mmol) přičemž se zajistí aby vnitřní teplota nepřevýšila 10 °C. Získaný žlutý roztok se pak nechá přes noc ohřát na teplotu místnosti. Pak se do reakční baňky vlije roztok hydroxidu amonného (50 ml, 50%) a reakční směs se míchá 1 hodinu. Pak se směs vlije do dělicí nálevky a fáze se oddělí. Vodná fáze se pak extrahuje CH₂C1₂ (3 x 30 ml) a spojené organické podíly se promyjí solným roztokem (20 ml), vysuší se bezvodým síranem hořečnatým, zfiltrují se a zahuštěním ve vakuu se získá oranžový olej. Přečištěním rychlou chromatografií na sloupci (SiO₂, ethyl-acetát/petrolether 1:1 obj./obj.) se ve formě bledě žlutého oleje získá požadovaný titulní produkt (10,7 g, 77 %). δ_Η (CDC1₃) 7,42 (1H, d), 6,68 (1H, d), 6,64 (1H, dd), 5,24 (2H, s), 5,15 (2H, s), 3,53 (3H, s), 3,48 (3H, s).

Meziprodukt 2

-hydroxy-1 -(2,4-dihydroxyfenylbis(methoxymethylether))cyklohexan-4-on-ethylenketal 50

Do baňky s kulovým dnem objemu 250 ml vysušené v sušárně a opatřené magnetickým míchadlem se vnese v atmosféře argonu 4-brom-resorcinol-bis(methoxymethyl)ether (2,00 g, 7,2 mmol) a THF| (50 ml). Pak se injekční stříkačkou přidá v jedné dávce Ν,Ν,Ν',Ν'-tetramethylendiamin (2,3 ml, 15,2 mmol) a míchaný roztok se ochladí na -78 °C. Potom se injekční stříkačkou přidá po kapkách butyllithium (9,5 ml, 15,2 mmol) 1,6 mol/1 v hexanu). Získaný žlutý

-7CZ 298939 B6 roztok se míchá 1 hodinu při -78 °C a pak se pomalu přidá injekční stříkačkou 1,4-cyklohexandionmonoethylenketal (1,35 g, 8,7 mmol) ve formě roztoku v THF (25 ml). Získaný roztok se míchá 1 hodinu při -78 °C a pak se nechá přes noc ohřát na teplotu místnosti. Přidá se kyselina chlorovodíková (20 ml, 2 mol/1) a reakční směs se intenzivně míchá 15 minut. Pak se přidá ethyl-acetát (100 ml) a směs se vlije do dělicí nálevky. Fáze se oddělí a vodná fáze se extrahuje ethyl-acetátem (3 x 20 ml). Spojené organické podíly se promyjí solným roztokem (20 ml), vysuší se bezvodým síranem hořečnatým, zfiltrují se a zahuštěním se získá oranžový olej který se přečistí rychlou chromatografií na sloupci (SiO₂, ethyl-acetát/petrolether 45:55 obj./obj.). Titulní produkt se získá ve formě bezbarvého oleje (1,42 g, 56 %); m/z (ES⁺) 337 (M-H₂0 + H)⁺;

δ_Η (CDC1₃) 1,61 - 1,64 (2H, m), 2,00- 2,18 (6H, m), 3,44 (3H, s), 3,48 (3H, s), 3,90- 3,97 (4H, m), 5,11 (2H, s), 5,24 (2H, s), 6,64 (1H, dd), 6,82 (1H, d), 7,20 (1H, d).

Meziprodukt 3 l-(2,4-dihydroxyfenylbis(methoxymethylether)cyklohex-l-en-4-on-ethylenketal

-hydroxy-1 -(2,4-dihydroxyfeny lbis(methoxymethy lether)cyklohexan-4-on-ethy lenketal (1,40 g, 3,95 mmol) se vnese do baňky s kulatým dnem objemu 50 ml opatřené magnetickým míchadlem a destilační aparaturou podle Dean-Starka. Přidá se toluen (30 ml) a potom kyselina kafrsulfonová (10 mg). Roztok se pak za míchání zahřívá při teplotě zpětného toku 1 hodinu. Vodná fáze se pak extrahuje ethyl-acetátem (2x15 ml) a spojené organické podíly se promyjí solným roztokem (15 ml), vysuší se bezvodým síranem hořečnatým, zfiltrují se a zahuštěním ve vakuu se získá oranžový olej jehož přečištěním lychlou chromatografií na sloupci (SiO₂, ethyl25 acetát/petrolether 45:55 obj./obj.) se ve formě bezbarvého oleje získá požadovaný titulní produkt (0,94 g). δ_Η (CDC1₃) 1,84 (2H, t), 2,41 - 2,43 (2H, m), 2,56 - 2,62 (2H, m), 3,47 (6H, s), 3,98 4,02 (4H, m), 5,13 (4H, s), 5,58 - 5,63 (1H, m), 6,64 (1H, dd), 6,78 (1H, d), 7,08 (1H, d).

Meziprodukt 4 l-(2,4-dihydroxyfenylbis(methoxymethylether))cyklohexan-4-on-ethylenketal l-(2,4-dihydroxyfenylbis(methoxymethylether)cyklohex-l-en-4-on-ethylenketal (0,950 g,

2,83 mmol) a palladium (200 mg, 10% na uhlíku) se míchají v atmosféře vodíku 15 hodin. Pak se směs zfíltruje přes vrstvu Celitu s promytím ethyl-acetátem. Filtrát se odpaří do sucha a ve formě bezbarvého oleje se tak získá titulní produkt (0,955 g, 100 %). δ_Η (CDC1₃) 1,67- 1,87 (8H, m), 2,90- 2,99 (1H, m), 3,46 (3H, s), 3,48 (3H, s), 3,97 (4H, s), 5,12 (2H, s), 5,18 (2H, s), 6,65 (1H, dd), 6,78 (1H, d), 7,12 (1H, d).

Meziprodukt 5

4-(2,4-dihydroxyfenyl)cyklohexanon

Do baňky s kulovým dnem se vnese l-(2,4-dihydroxyfenylbis(methoxymethylether))cyklohexan-4-on-ethylenketal 1,30 g, 3,9 mmol) a methanol (15 ml). K získanému roztoku se za míchání přidá v jedné dávce vodná HCI (15 ml 1 mol/1). Po jednohodinovém míchání při teplotě místnosti se reakční směs převede do dělicí nálevky, fáze se oddělí a vodná fáze se extrahuje ethyl-acetátem (3 x 20 ml). Spojené organické podíly se promyjí solným roztokem a rozpouštědlo se odpaří. Mírně vlhký surový produkt se spojí s methanolem (30 ml) a s kyselou iontoměničovou pryskyřicí (4 g). Získaná směs se zahřívá za míchání 5 hodin při teplotě zpětného toku. Pak se směs zfíltruje přes vrstvu Celitu, promyje se ethyl-acetátem a odstraněním rozpouštědla ve vakuu se získá oranžový olej. Přečištěním rychlou chromatografií na sloupci (SiO₂, ethylacetát/petrolether 1:1 obj./obj.) se ve formě bílého prášku získá požadovaný titulní produkt

-8CZ 298939 B6 (0,54 g, 68 %); m/z (ES') 411 (2M-1); δ_Η (CD₃OD) 1,94 (2H, ddd), 2,16 - 2,23 (2H, m), 2,41 (2H, dt), 2,62 (1H, t), 2,63 (1H, t), 6,24 (1H, dd), 6,31 (1H, d), 6,92 (1H, d).

(anti)-4-(2,4-dihydroxyfenyl)cyklohexanol

Do baňky s kulovým dnem objemu 25 ml opatřené magnetickým míchadlem se vnese 4-(2,4-dihydroxyfenyl)cyklohexanol (18 mg). Pak se přidá ethanol (5 ml) a potom tetrahydroboritan sodný (3,3 mg) a reakční směs se míchá 16 hodin. Přidá se vodná HC1 (20 ml, 1 mol/l) a potom ethyl-acetát (20 ml), organická fáze se oddělí a promyje se solným roztokem (15 ml), ío vysuší se bezvodým síranem hořečnatým, zfiltruje se a pak se zahustí ve vakuu. Přečištěním zbytku rychlou chromatografií na sloupci (SiO₂, ethyl-acetát/petrolether 60:40 obj./obj.) se ve formě bílého prášku získá požadovaný titulní produkt (14 mg, 78 %); m/z (ES') 267 (M+60)-l); δ_Η (CD₃OD) 1,38 - 1,56 (4H, m), 1,85- 1,88 (2H, m), 2,04- 2,07 (2H, m), 2,80 (1H, tt),

3,58 - 3,65 (1H, m), 6,24 - 6,29 (2H, m), 6,90 (1H, d).

Všechny výše citované patenty, patentové přihlášky a publikace jsou plně včleněné do tohoto popisu odkazem.

Je nutné uvést, že vynález není omezený na specifická provedení popsaná výše, která jsou určená 20 pro jednoduché znázornění jednotlivých aspektů vynálezu, ale že vynález zahrnuje funkčně ekvivalentní způsoby a složky. Pracovníkům v oboru budou na základě výše uvedeného popisu kromě popsaných způsobů jistě zřejmé i různé modifikace vynálezu. Rozumí se, že uvedené modifikace jsou zahrnuté v rámci připojených patentových nároků.

Claims

1. Topická farmaceutická kompozice pro zesvětlení kůže nebo pro snížení pigmentace kůže člověka, vyznačující se tím, že obsahuje resorcinol vzorce I nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl v množství účinném pro zesvětlení kůže nebo pro snížení 35 pigmentace kůže a farmaceuticky přijatelný nosič.

2. Kompozice podle nároku 1,vyznačuj ící se tím, že dále obsahuje sluneční filtr.

3. Kompozice podle nároku 1,vyznačuj ící se tím, že dále obsahuje resveratrol nebo 40 jinou účinnou složku která má antioxidační účinky.

-9CZ 298939 B6

4. Kompozice podle nároku 1,vyznačující se tím, že dále obsahuje kyselinu retinovou nebo derivát kyseliny retinové.

5. Kompozice podle nároku 1,vyznačující se tím, že dále obsahuje kyselinu glyko5 lovou, kyselinu trichloroctovou nebo jiný prostředek pro peeling kůže.

6. Kompozice podle nároku 1,vyznačující se tím, že je ve formě vodně-alkoholického roztoku, emulze typu olej ve vodě, emulze typu voda v oleji, emulgovaného gelu nebo dvoufázového systému.

7. Kompozice podle nároku 1,vyznačující se tím, že je ve formě lotionu, krému, mléka, gelu, želé, pasty, masti, balzámu, masky, mikrosfér, nanosfér nebo vezikulámí disperze.

8. Použití resorcinolu vzorce I definovaného v nároku 1 nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli

15 pro výrobu topického léčiva pro zesvětlování kůže nebo snížení pigmentace kůže u člověka.

9. Použití podle nároku 8, kde resorcinol vzorce I nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl je zpracovaná do formy vodně-alkoholického roztoku, emulze typu olej ve vodě, emulze typu voda v oleji, emulgovaného gelu nebo dvoufázového systému.

10. Použití podle nároku 8, kde resorcinol vzorce I nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl je zpracovaná do formy lotionu, krému, mléka, gelu, želé, pasty, masti, balzámu, masky, mikrosfér, nanosfér nebo vezikulámí disperze.

25

11. Topická farmaceutická kompozice pro inhibici tyrosinázy u člověka, vyznač u j í cí se t í m , že obsahuje sloučeninu vzorce definovanou v nároku 1 nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl v množství účinném pro inhibici tyrosinázy a farmaceuticky přijatelný nosič.

12. Kompozice podle nároku 11,vyznačující se tím, že je ve formě vodně-alkoholic30 kého roztoku, emulze typu olej ve vodě, emulze typu voda v oleji, emulgovaného gelu nebo dvoufázového systému.

13. Kompozice podle nároku 11,vyznačující se tím, že je ve formě lotionu, krému, mléka, gelu, želé, pasty, masti, balzámu, masky, mikrosfér, nanosfér nebo vezikulámí disperze.

14. Použití resorcinolu vzorce I definovaného v nároku 1 nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli v množství účinném pro inhibici tyrosinázy pro výrobu léčiva pro inhibici tyrosinázy u člověka.

15. Použití podle nároku 14, kde resorcinol vzorce I nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl je

40 zpracovaná do formy vodně-alkoholického roztoku, emulze typu olej ve vodě, emulze typu voda v oleji, emulgovaného gelu nebo dvoufázového systému.

16. Použití podle nároku 14, kde resorcinol vzorce I nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl je zpracovaná do formy lotionu, krému, mléka, gelu, želé, pasty, masti, balzámu, masky, mikrosfér,

45 nanosfér nebo vezikulámí disperze.

17. Farmaceutická kompozice pro topické podání určená pro zesvětlení kůže nebo pro snížení pigmentace kůže člověka, vyznačující se tím, že obsahuje resorcinol vzorce I definovaný v nároku 1 nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl v množství účinném pro inhibici

50 tyrosinázy a farmaceuticky přijatelný nosič.

18. Farmaceutická kompozice pro topické nebo transdermální podání pro léčení zánětlivého onemocnění nebo lupů u člověka, vyznačující se tím, že obsahuje resorcinol vzorce I definovaný v nároku 1 nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl v množství účinném pro léčbu

55 uvedeného onemocnění a farmaceuticky přijatelný nosič.

-10CZ 298939 B6

19. Kompozice podle nároku 18, vyznačující se tím, že uvedeným zánětlivým onemocněním je psoriáza, dermatitida nebo akné.

5 20. Použití resorcinolu vzorce I definovaného v nároku 1 nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli pro výrobu léčiva pro léčení zánětlivého onemocnění nebo lupů u člověka.

21. Použití podle nároku 20, kde uvedeným zánětlivým onemocněním je psoriáza, dermatitida nebo akné.

o

22. Farmaceutická kompozice pro topické nebo transdermální podání pro léčení zánětlivého onemocnění člověka, vyznačující se tím, že obsahuje resorcinol vzorce I definovaný v nároku 1 nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl v množství účinném pro inhibici tyrosinázy a farmaceuticky přijatelný nosič.

20 Konec dokumentu