CZ20013339A3 - Kompozice obsahující derivát resorcinolu - Google Patents

Description

Oblast techniky

Vynález se vztahuje na použití derivátu resorcinolu, tj.

4-(2,4-dihydroxyfenyl)cyklohexanolu, jako prostředku pro zesvětlení kůže.

Dosavadní stav techniky

Výrazy prostředek pro zesvětlení a prostředek pro depigmentaci používané v této přihlášce jsou vzájemně zaměnitelné.

Barva kůže člověka je určená komplexem postupných buněčných procesů probíhajících ve zvláštní populaci buněk nazývaných melanocyty. Melanocyty se vyskytují ve spodní části epidermu, a jejich funkcí je syntetizovat pigment melanin, který chrání povrch těla před škodlivými účinky ultrafialového záření.

Při vystavení kůže ultrafialovému záření jakým je sluneční světlo, melanocyty zvyšují svoji produkci melaninu. Melanin se ukládá v melanosomech, což jsou vezikula vyskytující se v buňce. Melanosomy pronikají z buňky a dostávají se na povrch kůže v keranocytech, ve kterých melanosomy obsahující melanin ukládají. Konečným výsledkem je, že viditelné vrstvy kůže mají hnědé zbarvení obvykle označované jako tříslové. Vizuálně patrná tmavost kůže je úměrná množství melaninu syntetizovaného melanocyty a převedeného do keratinocytů.

Mechanismus vzniku pigmentace kůže, tj. melanogeneze je zvláště složitý proces který schematicky zahrnuje následující hlavní stupně: tyrosin -> L-Dopa —> dopachinon -> dopachrom —> melaniny. První dvě reakce uvedené série jsou katalyzované enzymem tyrosinasou. Aktivita tyrosinasy vedoucí k tvorbě melaninu závěrečně vedoucí ke zbarvení pokožky je podporovaná účinkem hormonu stimulujícího α-melanocyty nebo UV zářením. Je již dobře známé, že k depigmentačnímu účinku nějaké substance dochází, jestliže tato substance působí přímo na vitalitu epidermálních melanocytů ve kterých melanogeneze obvykle probíhá a/nebo jestliže interferuje s jedním ze stupňů biosyntézy melaninu. Účinné sloučeniny použité v různých způsobech a kompozicích podle vynálezu inhibují tyrosinasu a tím inhibují nebo snižují biosyntézu melaninu.

Velmi potřebné jsou prostředky umožňující obnovu kůže určitých depozitních ploch jako jsou skvrny nebo pihy na normální vzhled. Pro uvedený účel již bylo vyvinuto a jsou známé různé způsoby a na trhu je dostupných více prostředků pro tento účel. Příklady těchto způsobů zahrnují a) způsob orálního podávání vysokých dávek vitaminu C (kyseliny Laskorbové) který má vysokou schopnost redukovat; b) způsob zahrnující parenterální podávání glutathionu; c) způsob, při kterém se podává peroxid, jako je peroxid vodíku, peroxid zinku, peroxid sodíku a podobně, kde se předpokládá bělící účinek na melanin; a d) způsob, kde vitamin C nebo cystein se podává topicky ve formě masti, krému nebo omývadla nebo v podobné formě. U vitaminu C dochází k problémům se stabilitou, kde vitamin C je v systémech obsahujících vodu natolik nestabilní že dochází ke změnách barvy a k zápachu. Thiolové sloučeniny jako glutathion a cystein nemají uspokojivý depigmentační účinek protože k vývoji tohoto účinku dochází velmi pomalu.

φ φ Φ · · ΦΜ *4 φφφ Φ · ·φ«φ· φ · · Φ · · Φ Φ 4 · _η φ φ4φφ Φ Φ Φ ···· Φ Φ 44

J 4 4 444444

ΦΦΦΦ 4 · ·· ΦΦΦΦ

V současné době se jako depigmentační prostředky nejvíce používají prostředky obsahující hydrochinon a jeho deriváty, zejména ethery jako je hydrochinon(monomethyl)ether. Je však známé, že uvedené sloučeniny i když jsou účinpé, mají vedlejší účinky které mohou být škodlivé. Hydrochinon, jehož použití je omezené na koncentraci 2 %, má účinky jak dráždivě tak cytotoxické vůči melanocytům.

V U.S.patentu č. 4,525,179 jsou popsané určité estery hydrochinonu s mastnými kyselinami, které mají vhodnou účinnost a jsou méně dráždivě a mají lepší stabilitu než hydrochinon.

V japonské patentové přihlášce č. 27909/86 jsou popsané další deriváty hydrochinonu, které nevykazují nedostatky které má hydrochinon ale mají relativně nižší účinnost.

V U.S.patentu č. 5,449,518 jsou popsané deriváty

2,5-dihydroxyfenylkarboxylové kyseliny jako prostředky pro depigmentaci kůže.

V evropské patentové přihlášce EP 341664A1 jsou popsané určité deriváty resorcinolu jako inhibitory tyrosinasy a prostředky pro depigmentaci kůže.

Použití topických prostředků pro depigmentaci s vhodnou účinností a bez nežádoucích vedlejších účinků je zvláště žádoucí v následujících případech: při regionální hyperpigmentaci vyvolané hyperaktivitou melanocytů jako je idiopatická melasma objevující se buď v těhotenství (maskované těhotenství nebo chloasma) nebo sekundárně po estrogenprogesteronové antikoncepci; při lokální hyperpigmentaci

vyvolané benigní hyperaktivitou a proliferací melanocytů jako je lentigo senilis nebo jaterní skvrny; při vedlejší hyperpigmentaci po fotosenzibilizaci při hojení ran a jizvení; a při určitých formách leukoderma jako je vitiligo, kde pokud nemůže dojít k repigmentaci poškozené kůže, zbytkové zóny normální kůže se depigmentují a celkový povrch kůže je pak homogenně bílý.

Sloučenina vzorce (I), tj. 4-(2,4-dihydroxyfenyl)cyklohexanol, a její farmaceuticky přijatelné soli které se používají v různých způsobech podle vynálezu a v kompozicích podle vynálezu, jsou vhodné pro léčbu výše popsaných dermatologických stavů a rovněž pro léčbu dalších dermatologických stavu z nichž některé jsou popsané dále v tomto popisu přihlášky vynálezu, pacienta vyžadujícího léčení ze zdravotních nebo z kosmetických důvodů vedoucí k zesvětlení kůže nebo k redukci pigmentace kůže vyvolané daným stavem.

4-(2,4-dihydroxyfenyl)cyklohexanol a jeho farmaceuticky přijatelné sole jsou rovněž vhodné pro léčení zánětlivých chorob jako je psoriáza a akné a pro léčbu lupů.

Podstata vynálezu

Vynález se vztahuje na použití 4-(2,4-dihydroxyfenyl)cyklohexanolu vzorce (I)

OH

OH • » ·

Vynález se rovněž vztahuje na použití farmaceuticky přijatelných solí sloučeniny vzorce (I).

Vynález se dále vztahuje na farmaceutickou kompozici pro topickou aplikaci pro zesvětlení kůže nebo pro redukci pigmentaci kůže člověka, která obsahuje takové množství sloučeniny vzorce (I) nebo její farmaceuticky přijatelné soli které je účinné pro zesvětlení kůže nebo pro snížení pigmentace kůže a farmaceuticky přijatelný nosič.

Vynález se rovněž vztahuje na způsob zesvětlování kůže nebo snížení pigmentace u člověka který zahrnuje podávání danému pacientovi takového množství sloučeniny vzorce (I) nebo její farmaceuticky přijatelné soli které je účinné pro zesvětlení kůže nebo pro snížení pigmentace kůže.

Vynález se rovněž vztahuje na topickou farmaceutickou kompozici pro inhibici tyrosinkinasy u člověka která obsahuje takové množství sloučeniny vzorce (I) nebo její farmaceuticky přijatelné soli které je účinné pro inhibici tyrosinkinasy a farmaceuticky přijatelný nosič.

Vynález se rovněž vztahuje na způsob inhibice tyrosinkinasy u člověka který zahrnuje podávání danému pacientovi takového množství sloučeniny vzorce (I) nebo její farmaceuticky přijatelné soli které je účinné pro inhibici tyrosinkinasy.

Vynález se rovněž vztahuje na topickou farmaceutickou kompozici pro zesvětlení kůže nebo pro snížení pigmentace kůže u člověka, která obsahuje takové množství sloučeniny vzorce β

(I) nebo jeji farmaceuticky přijatelné soli které je účinné pro inhibici tyrosinkinasy a farmaceuticky přijatelný nosič.

Vynález se rovněž vztahuje na způsob zesvětleni kůže nebo redukce pigmentace u člověka, který zahrnuje podávání danému pacientovi takového množství sloučeniny vzorce (I) nebo její farmaceuticky přijatelné soli které je účinné pro inhibici tyrosinkinasy.

Vynález se rovněž vztahuje na farmaceutickou kompozici pro topické nebo transdermální podání pro léčbu zanětlivé choroby člověka jako je psoriáza, dermatitida nebo akné nebo lupy, která obsahuje takové množství sloučeniny vzorce (I) nebo její farmaceuticky přijatelné soli které je účinné pro léčení dané choroby nebo stavu a farmaceuticky přijatelný nosič.

Vynález se rovněž vztahuje na způsob léčení zanětlivých chorob člověka jako je psoriáza, dermatitida nebo akné nebo lupy, který zahrnuje podávání danému pacientovi takového množství sloučeniny vzorce (I) nebo její farmaceuticky přijatelné soli které je účinné pro léčení dané choroby nebo stavu.

Vynález se rovněž vztahuje na farmaceutickou kompozici pro topické nebo transdermální podání pro léčbu zanětlivé choroby člověka jako je psoriáza, dermatitida nebo akné nebo lupy, která obsahuje takové množství sloučeniny vzorce (I) nebo její farmaceuticky přijatelné soli které je účinné pro inhibici tyrosinkinasy a farmaceuticky přijatelný nosič.

Vynález se rovněž vztahuje na způsob léčení zánětlivých chorob člověka jako je psoriáza, dermatitida nebo akné nebo ·· φ φφ ·· • · » · ♦ φ · • « · « · · · • · φ φ · · · · φ · · • · φ · · · φφ φ φφ · ··· lupy, který zahrnuje podávání danému pacientovi takového množství sloučeniny vzorce (I) nebo její farmaceuticky přijatelné soli které je účinné pro inhibici tyrosinkinasy.

Sloučenina vzorce (I), tj. 4-(2,4-dihydroxyfenyl)cyklohexanol může existovat v různých diastereomerních. formách. Vynález zahrnuje všechny stereoisomery 4-(2,4dihydroxyfenyl)cyklohexanolu a jejich směsi a všechny farmaceutické kompozice a způsoby léčení popsané výše které je obsahují nebo ve kterých se používají.

Vzorec (I) zahrnuje rovněž sloučeniny mající výše uvedený vzorec až na skutečnost, že jeden nebo více atomů vodíku, uhlíku nebo jiných atomů je nahrazeno jejich izotopy. Tyto sloučeniny mohou být vhodné ve výzkumu a jako diagnostické prostředky ve farmakokinetických studiích metabolismu a ve stanoveních vazby.

Podrobný popis vynálezu

Sloučeninu vzorce (I) je možné připravit podle níže uvedeného reakčního schématu a následujícího popisu.

*· ·

Schéma

I

Sloučeninu vzorce (1) na výše uvedeném schématu je možné připravit zavedeních chránících skupin na obchodně dostupný 4bromresorcinol. Vhodnou chránící skupinu jako je methoxymethylová skupina (MOM) je možné zavést obvyklými způsoby pracovníkům v oboru obecně známými. Alkylaci 4bromresorcinolu je možné například provést použitím dvou ekvivalentů methoxymethylchloridu v přítomnosti diisopropylaminu v halogenovaném rozpouštědle při teplotě od asi 0 °C do teploty místnosti.

·· · • · ·· · ·· ·· ♦ · · · · · · • ♦ · ♦ · · ·

Sloučenina vzorce (2) je známá a je obchodně dostupná.

Sloučeninu vzorce (3) lze připravit reakcí sloučeniny vzorce (1) s butyllithiem v přítomnosti N, N, Ν', N'-tetramethylethylendiaminu v etherovém rozpouštědle s následným přídavkem sloučeniny (2). Dehydratací sloučeniny vzorce (3) za standardních podmínek, například zahříváním sloučeniny vzorce (3) při asi 110 °C v Dean-Starkově destilačním zařízení v přítomnosti kyseliny kafrsulfonové ve vhodném rozpouštědle (např. v toluenu) se získá sloučenina vzorce (4). Hydrogenací za standardních podmínek, například pomocí plynného vodíku a palladia na aktivním uhlí v ethanolu se získá sloučenina vzorce (5). Sejmutím chránících skupin za vhodných podmínek se získá resorcinol vzorce (6). Sloučeninu vzorce (6) je možné dále derivatizovat standardními způsoby v oboru obecně známými na derivát resorcinolu vzorce (I). Sloučeninu vzorce (I) je možné připravit například redukcí sloučeniny vzorce (6) redukčním prostředkem jako je tetrahydroboritan sodný ve vhodném rozpouštědle jako je ethanol při teplotě v rozmezí od 0 °C do teploty místnosti.

Sloučenina vzorce (I) je sama o sobě slabě kyselá a může tvořit sole s bázemi obsahujícími farmaceuticky přijatelné kationy. Příklady těchto solí zahrnují soli alkalických kovů a soli kovů alkalických zemin a zejména soli sodné a draselné. Uvedené soli se připravují obvyklými způsoby. Chemické baze vhodné jako činidla k přípravě farmaceuticky přijatelných solí sloučeniny podle vynálezu s bázemi jsou baze tvořící se sloučeninou vzorce (I) netoxické soli. Uvedené netoxické soli zahrnují soli obsahující farmaceuticky přijatelné kationy jako je sodík, draslík, vápník, hořčík atd. Uvedené soli lze snadno připravit zpracováním odpovídající kyselé sloučeniny s vodným roztokem obsahujícím požadované farmaceuticky přijatelné

• 9

9 «999 9 • 4· • 9 «9

99999 99

99

9999 kationy a odpařením získaného roztoku do sucha, výhodně za sníženého tlaku. Alternativně je možné je připravit smísením roztoku kyselé sloučeniny v alkanolu s roztokem alkoxidu alkalického kovu v alkanolu a odpařením získaného roztoku do sucha. V obou případech se výhodně použiji stechiometrická množství reaktantů aby se zajistil kvantitativní průběh reakce a maximální výtěžek požadovaného konečného produktu.

Sloučenina podle vynálezu, tj. 4-(2,4-dihydroxyfenyl)cyklohexanol a jeho farmaceuticky přijatelné sole (dále označované jako účinné sloučeniny pro použití podle vynálezu) jsou vhodné k léčení poruch pigmentace u lidí zahrnujících solární lentigo i lentigo simplex (včetně stařeckých/jaternich skvrn), melasma/chloasma a pozánětlivou hyperpigmentaci. Uvedené sloučeniny redukuji hladiny melaninu v kůži inhibicí tvorby melaninu, a to ať již je melanin produkován konstitučně nebo v odezvě na ozáření UV paprsky (jako při vystavení slunečním paprskům). Účinné sloučeniny pro použiti podle vynálezu lze tedy použít k redukci obsahu melaninu v kůži v nepatologických případech s cílem vyvolat světlejší odstín kůže podle přání zákazníka. Uvedené sloučeniny je také možné použit v kombinaci s prostředky pro peeling (zahrnujících prostředky pro použití na obličej obsahující kyselinu glykolovou nebo kyselinu trichloroctovou) k získáni světlejšího odstínu kůže a k prevenci repigmentace.

Účinné sloučeniny pro použiti podle vynálezu je také možné použít v kombinaci se slunečními filtry (s filtry pro zářeni UVA nebo UVB) k prevenci repigmentace, k ochraně před ztmavnutím indukovaným slunečním nebo UV zářením nebo ke zvýšení jejich schopnosti redukovat množství melaninu kůži a jejich bělícího účinku. Uvedené sloučeniny je možné kombinovat s kyselinou retinoovou nebo s jejími deriváty nebo se všemi ♦ · φ φ » · φ φ φ φ · • · · · φ φ φφ φ · »« ·

φ φ φ φ φ ···· sloučeninami které interagují s receptory kyseliny retinoové a urychlují nebo zvyšují účinky sloučenin pro použití podle vynálezu na snížení obsahu melaninu v kůži nebo bělícího účinku na kůži.

Účinné sloučeniny pro použití podle vynálezu je také možné použít v kombinaci s kyselinou askorbovou a jejími deriváty, s dalšími produkty na bázi kyseliny askorbové (jako je askorbát horečnatý) nebo s jinými produkty které mají antioxidační vlastnosti (jako je resveratrol) k urychlení nebo zvýšení schopnosti sloučenin vhodných pro použití podle vynálezu redukovat obsahu melaninu v kůži nebo zvýšit jejich bělící účinek.

Vynález se vztahuje jak na způsoby zesvětlování kůže nebo snížení pigmentace kůže, kde sloučeniny vhodné pro použití podle vynálezu a jedna nebo více účinných složek popsaných výše se podávají společně obsažené v jedné farmaceutické kompozici, tak na způsoby, kde se uvedené sloučeniny podávají samostatně ve vhodném podávacím režimu navrženém pro prospěšnou kombinační terapii. Vhodný režim podávání léčiv, dávka každého podávaného léčiva a specifické intervaly mezi dávkami jednotlivých léčiv jsou závislé na specifické kombinaci účinných prostředků, stavu pacienta a podstatě a závažnosti poruchy nebo stavu určeného k léčbě. Uvedené další účinné složky se obvykle podávají v dávkách menších nebo stejných které jsou účinné v jednosložkových přípravcích určených pro topické podání. Dávky uvedených účinných složek povolené FDA pro podání člověku jsou veřejně dostupné.

Účinné sloučeniny pro použití podle vynálezu se obecně podávají ve formě farmaceutické kompozice obsahující uvedenou sloučeninu společně s farmaceuticky přijatelným vehikulem nebo

φ ♦· · ···· • φφφφφφ· • φ φφφφ · ·· φφφφ·· ······· ·φ • · φ · · ·· • ·· φ φφ φφφφ ředidlem. Uvedená kompozice se obecně připraví obvykle používanými způsoby s použitím tuhých nebo tekutých vehikul nebo ředidel vhodných pro dané topické podání, ve formě roztoků, gelů, krémů, želé, past, omývadel, mastí, balzámů a podobně. Jako vehikulum je možné například použít roztok vodaalkohol, emulze typu olej-voda nebo voda-olej, emulgovaný gel nebo dvoufázový systém. Výhodně jsou kompozice podle vynálezu ve formě omývadel, krémů, pleťových mlék, gelů, masek, mikrosfér nebo nanosfér nebo vezikulárních disperzí. V případě vezikulárních disperzí lipidy tvořící vezikula mohou být jak iontového tak neiontového typu, nebo to může být směs obou typů.

Výraz množství sloučeniny vzorce (I) umožňující zesvětlení kůže nebo snížení pigmentace použitý v tomto textu a podobné výrazy znamenají koncentrace sloučeniny které umožňují stanovitelné zesvětlení kůže nebo redukci pigmentace u člověka, zjistitelné některým ze známých způsobů stanovení.

Výraz účinné množství sloučeniny vzorce (I) pro inhibici tyrosinasy použitý v tomto textu a podobné výrazy znamenají množství nebo koncentrace sloučeniny které umožňují stanovitelnou inhibici aktivity tyrosinasy zjistitelnou některým ze známých způsobů stanovení.

Výraz množství sloučeniny vzorce (I) schopné léčit zánětlivou chorobu jako je psoriáza, dermatitida nebo akné nebo pro léčbu lupů použitý v tomto textu nebo podobné výrazy, znamenají množství sloučeniny nebo koncentraci sloučeniny umožňující stanovitelné zmírnění, redukci, eliminaci, zpomalení nebo prevenci některého ze symptomů nebo stavu spojeného nebo vyvolaného uvedenou chorobou nebo stavem u

4· 4 • 4 ·

4 44

444·· ·4 • 44 člověka, které je možné stanovit některým ze známých způsobů stanoveni.

V kompozicích pro depigmentaci podle vynálezu je koncentrace účinných sloučenin vhodných pro použití podle vynálezu obecně v rozmezí 0,01 až 10 %, výhodně je v rozmezí 0,1 až 10 % vzhledem k celkové hmotnosti kompozice.

Kompozice podle vynálezu mohou případně obsahovat zvlhčovači prostředek, povrchově aktivní prostředek, keratolytikum, protizánětlivý prostředek, komplexotvorný prostředek, antioxidační prostředek, konzervační prostředek nebo sluneční filtr nebo jejich kombinace.

Schopnost účinných sloučenin používaných podle vynálezu inhibovat tyrosinasu je možné stanovit některým z níže uvedených způsobů.

1. Stanovení aktivity tyrosinasy (DOPA oxidasy) na buněčném lyzátu:

Při stanovení a ve srovnávacím hodnocení s použitím buněčného lyzátu se použije buněčná linie lidského melanomu SKMEL 188 (získané z Memoriál Sloan-Kettering). Při stanovení se hodnocené sloučeniny a L-dihydroxyfenylalanin (L-DOPA) (100 pg/ml) inkubují s buněčným lyzátem obsahujícím lidskou tyrosinasu a po 8 hodinách se provede vyhodnocení při 405 nm. Účinnost sloučenin při stanovení s DOPA oxidasou velmi dobře koreluje s účinností stanovenou s pomocí tyrosinhydroxylasy s použitím ³H-tyrosinu jako substrátu. 4-(2,4-dihydroxyfenyl)cyklohexanol má výše uvedeném stanovení IC50 0,2 μΜ.

Φ

Φ0 ···♦ ·· 00

Φ 0

2. Stanovení melaninu v primárních lidských melanocytech:

Hodnocené sloučeniny se inkubují s primárními lidskými melanocyty v přítomnosti α-melanocyty stimulujícího hormonu (a-MSH) 2-3 dny. Pak se buňky rozloží hydroxidem sodným a natrium-dodecylsulfátem (SDS) a vyhodnotí se signály odpovídající melaninu při 405 nm. Alternativně se k buňkám přidá ¹⁴C-DOPA s inhibitory tyrosinasy a ¹⁴C-melanin nerozpustný v kyselině se kvatintativně stanoví scintilačnim počítačem. Hodnota IC₅₀ vyjadřuje inhibiční účinnost sloučeniny v syntéze nového melaninu stimulované a-MSH.

3. Stanovení s tyrosinkinasou (TK):

TK stanovení lze provést s použitím přečištěné tyrosinkinasové domény c-met, erb-B2 nebo IGF-r. Při stanovení se použije specifická protilátka proti fosforylovanému tyrosinovému zbytku. Kolorimetrické signály se generují pomocí křenové peroxidasy která se konjuguje s protilátkou.

4. Model ekvivalentní lidské kůži:

Směs lidských melanocytů a keratinocytů se kultivuje v mezifázi vzduch-tekutina. Tkáňová kultura vytvoří třírozměrnou strukturu která se histologicky a mikroskopicky podobá epidermu kůže. Na horní povrch buněk se nanese hodnocená sloučenina čímž se simuluje topické podání léčiva. Po třídenní inkubaci s hodnocenými sloučeninami (10 μΜ) se buňky intenzivně promyjí a převedou se na lyzát pro stanovení DOPA-oxidasy.

5. Stanovení IL-1 (stanovení interleukinu-1):

4 44 · ···· • 44 444 44·· • 44 4 4 4 4 44· ···♦ 44 4 44·· 4 4 ·· « 4 4 · ·444 • 444 4 44 4 4 · 4444

K hodnocení vlivu zkoušené sloučeniny na sekreci IL-1 na modelu ekvivalentním lidské kůži lze použít IL-l-ELISA stanovení (systém R&D) . IL-Ια je prozánětlivý cytokin a má svoji úlohu v zánětu kůže indukovaném UV zářením.

6. Studie in vivo:

Ve studii je možné použít černá nebo tmavě hnědá morčata s homogenně zbarvenou kůží. Zvířatům se podává dvakrát denně roztok testované sloučeniny (5% v ethanolu:propylenglykolu 70:30) a vehikula pět dní v týdnu po dobu 4-8 týdnů. V této studii bylo zjištěno, že 4-(2,4-dihydroxyfenyl)cyklohexanol působí depigmentaci kůže.

Vynález je dále popsán následujícím příkladem. Vynález však není nijak omezen specifickými podrobnostmi uvedenými v tomto příkladu. Spektra protonové jaderné magnetické rezonance (‘'H NMR) jsou měřena v roztocích dg-DMSO, CDC1₃ nebo d₄-MeOH a polohy plků jsou vyjádřeny v dílech na milion dílů (ppm) vzhledem k tetramethylsilanu (TMS). Tvary píků jsou označované následovně: s, singlet; d, dublet, t, triplet; q, kvartet; m, multiplet; b, široký.

Níže uvedený příklad je určený pouze pro znázornění vynálezu a rozsah vynálezu nijak neomezuje.

Příklady provedení vynálezu

Meziprodukt 1

1,3-di(methoxymethoxy)-4-brombenzen

Do baňky s kulovým dnem objemu 250 ml vysušené v sušárně a opatřené magnetickým míchadlem se vnese v atmosféře argonu ·♦ ♦ • · • · · • ···♦ · • · ··· ·

4-bromresorcinol (9,45 g, 50 mmol) a CH₂C1₂ (50 ml). Suspenze se za mícháni ochladí na 0 °C a najednou se injekční stříkačkou přidá diisopropylamin (19,1 ml, 110 mmol). Červený roztok se míchá dalších minut a pak se po kapkách, injekční stříkačkou, přidá methyl(chlormethyl)ether (10,7 ml, 120 mmol) přičemž se zajistí aby vnitřní teplota nepřevýšila 10 °C. Získaný žlutý roztok se pak nechá přes noc ohřát na teplotu místnosti. Pak se do reakční baňky vlije roztok hydroxidu amonného (50 ml, 50%) a reakční směs se míchá 1 hodinu. Pak se směs vlije do dělící nálevky a fáze se oddělí. Vodná fáze se pak extrahuje CH₂C1₂ (3 x 30 ml) a spojené organické podíly se promyjí solným roztokem (20 ml), vysuší se bezvodým síranem horečnatým, zfiltrují se a zahuštěním ve vakuu se získá oranžový olej. Přečištěním rychlou chromatografií na sloupci (SiO₂, ethyl-acetát/petrolether 1:1 obj./obj.) se ve formě bledě žlutého oleje získá požadovaný titulní produkt (10,7 g, 77 %) . δ_Η (CDC1₃) 7,42 (1H, d) , 6,88 (1H, d) , 6,64 (1H, dd) , 5,24 (2H, s), 5,15 (2H, s), 3,53 (3H, s), 3,48 (3H, s).

Meziprodukt 2

1-hydroxy-l-(2,4-dihydroxyfenylbis(methoxymethylether))cyklohexan-4-on-ethylenketal

Do baňky s kulovým dnem obejmu 250 ml vysušené v sušárně a opatřené magnetickým míchadlem se vnese v atmosféře argonu 4-brom-resorcinol-bis(methoxymethyl)ether (2,00 g, 7,2 mmol) a THf (50 ml). Pak se injekční stříkačkou přidá v jedné dávce N, N, Ν', N'-tetramethylendiamin (2,3 ml, 15,2 mmol) a míchaný roztok se ochladí na -78 °C. Potom se injekční stříkačkou přidá po kapkách butyllithium (9,5 ml, 15,2 mmol) 1,6 mol/1 v hexanu). Získaný žlutý roztok se míchá 1 hodinu při -78 °C a pak se pomalu přidá injekční stříkačkou 1,4-cyklohexandionmonoethylenketal (1,35 g, 8,7 mmol) ve formě roztoku v THF (25 ml). Získaný roztok se míchá 1 hodinu při -78 °C a pak se

• 0	•	«·	•	0«	«0
• 0	♦	•	•	0	•	0	0 0
•	• ·	•	•	• 0	•		0
•	0000	• ·	•	♦ ···	• 0	•	*
•		•	•	•	•	0	0
000«	•	·«		•	• 0		000«

nechá přes noc ohřát na teplotu místnosti. Přidá se kyselina chlorovodíková (20 ml, 2 mol/1) a reakční směs se intenzivně míchá 15 minut. Pak se přidá ethyl-acetát (100 ml) a směs se vlije do dělící nálevky. Fáze se oddělí a vodná fáze se extrahuje ethyl-acetátem (3 x 20 ml). Spojené organické podíly se promyji solným roztokem (20 ml), vysuší se bezvodým síranem horečnatým, zfiltrují se a zahuštěním se získá oranžový olej který se přečistí rychlou chromatografii na sloupci (SiO₂, ethyl-acetát/petrolether 45:55 obj./obj.). Titulní produkt se získá ve formě bezbarvého oleje (1,42 g, 56 %); m/z (ES⁺) 337 (M-H2O + H)⁺; 5h (CDC1₃) 1,61-1,64 (2H, m) , 2,00-2,18 (6H, m) , 3,44 (3H, s), 3,48 (3H, s), 3,90-3,97 (4H, m), 5,11 (2H, s), 5,24 (2H, s), 6,64 (1H, dd), 6,82 (1H, d), 7,20 (1H, d).

Meziprodukt 3

1-(2,4-dihydroxyfenylbis(methoxymethylether)cyklohex-l-en-4-on-ethylenketal

1-hydroxy-l-(2,4-dihydroxyfenylbis(methoxymethylether))cyklohexan-4-on-ethylenketal (1,40 g, 3,95 mmol) se vnese do baňky s kulovým dnem objemu 50 ml opatřené magnetickým míchadlem a destilační aparaturou podle Dean-Starka. Přidá se toluen (30 ml) a potom kyselina kafrsulfonová (10 mg). Roztok se pak za míchání zahřívá při teplotě zpětného toku 1 hodinu. Vodná fáze se pak extrahuje ethyl-acetátem (2 x 15 ml) a spojené organické podíly se promyjí solným roztokem (15 ml), vysuší se bezvodým síranem horečnatým, zfiltrují se a zahuštěním ve vakuu se získá oranžový olej jehož přečištěním rychlou chromatografii na sloupci (SiO₂, ethylacetát/petrolether 45:55 obj./obj.) se ve formě bezbarvého oleje získá požadovaný titulní produkt (0,94 g). δ_Η (CDCI3) 1,84 (2H, t), 2,41-2,43 (2H, m) , 2,56-2,62 (2H, m), 3,47 (6H, φ φ * φ ΦΦΦΦ 9

Φ

s), 3,98-4,02 (4Η, m), 5,13 (4Η, s), 5,58-5,63 (1Η, m), 6,64 (1Η, dd), 6,78 (1Η, d), 7,08 (1Η, d).

Meziprodukt 4

1-(2,4-dihydroxyfenylbis(methoxymethylether))cyklohexan-4-on-ethylenketal

1-(2,4-dihydroxyfenylbis(methoxymethylether)cyklohex-l-en-4-on-ethylenketal (0,950 g, 2,83 mmol) a palladium (200 mg, 10% na uhlíku) se míchají v atmosféře vodíku 15 hodin. Pak se směs zfiltruje přes vrstvu Celitu s promytím ethyl-acetátem. Filtrát se odpaří do sucha a ve formě bezbarvého oleje se tak získá titulní produkt (0,955 g, 100 %). Ó_H (CDC1₃) 1, 67-1,87 (8H, m) , 2, 90-2, 99 (1H, m) , 3,46 (3H, s), 3,48 (3H, s), 3,97 (4H, s), 5,12 (2H, s), 5,18 (2H, s), 6,65 (1H, dd), 6,78 (1H, d), 7,12 (1H, d).

Meziprodukt 5

- (2,4-dihydroxyfenyl)cyklohexanon

Do baňky s kulovým dnem se vnese 1-(2,4-dihydroxyfenylbis (methoxymethylether )) cyklohexan-4-on-ethylenketal 1,30 g, 3,9 mmol) a methanol (15 ml). K získanému roztoku se za míchání přidá v jedné dávce vodná HC1 (15 ml 1 mol/1). Po jednohodinovém míchání při teplotě místnosti se reakční směs převede do dělící nálevky, fáze se oddělí a vodná fáze se extrahuje ethyl-acetátem (3 x 20 ml). Spojené organické podíly se promyji solným roztokem a rozpouštědlo se odpaří. Mírně vlhký surový produkt se spojí s methanolem (30 ml) a s kyselou iontoměničovovou pryskyřicí (4 g). Získaná směs se zahřívá za míchání 5 hodin při teplotě zpětného toku. Pak se směs zfiltruje přes vrstvu Celitu, promyje se ethyl-acetátem a odstraněním rozpouštědla ve vakuu se získá oranžový olej.

·* · *· · ·· *·

4 4 · 4 · 4 4 ··

4 · 4 · · » 4 4· * 4444 · 4 4 ···· 4 4 ♦« • 4 9·· · ··

4·4· 4 4· 4 ·♦4444

Přečištěním rychlou chromatografií na sloupci (SiO₂, ethylacetát/petrolether 1:1 obj./obj.) se ve formě bílého prášku získá požadovaný titulní produkt (0,54 g, 68 %); m/z (ES) 411 (2M-1); δ_Η (CD₃OD) 1,94 (2H, ddd) , 2,16-2,23 (2H, m) , 2,41 (2H, dt), 2,62 (1H, t), 2,63 (1H, t), 6,24 (1H, dd), 6,31 (1H, d), 6, 92 (1H, d) .

(anti)-4-(2,4-dihydroxyfenyl)cyklohexanol

Do baňky s kulovým dnem objemu 25 ml opatřené magnetickým míchadlem se vnese 4-(2,4-dihydroxyfenyl)cyklohexanol (18 mg). Pak se přidá ethanol (5 ml) a potom tetrahydroboritan sodný (3,3 mg) a reakční směs se míchá 16 hodin. Přidá se vodná HC1 (20 ml, 1 mol/1) a potom ethyl-acetát (20 ml), organická fáze se oddělí a promyje se solným roztokem (15 ml), vysuší se bezvodým síranem horečnatým, zfiltruje se a pak se zahustí ve vakuu. Přečištěním zbytku rychlou chromatografií na sloupci (SiO₂, ethyl-acetát/petrolether 60:40 obj./obj.) se ve formě bílého prášku získá požadovaný titulní produkt (14 mg, 78 %); m/z (ES) 267 ((M+60)-l); δ_Η (CD₃OD) 1,38-1,56 (4H, m) , 1,851,88 (2H, m), 2,04-2,07 (2H, m), 2,80 (1H, tt), 3,58-3,65 (1H, m) , 6,24-6,29 (2H, m) , 6,90 (1H, d) .

Všechny výše citované patenty, patentové přihlášky a publikace jsou plně včleněné do tohoto popisu odkazem.

Je nutné uvést, že vynález není omezený na specifická provedení popsaná výše, která jsou určená pro jednoduché znázornění jednotlivých aspektů vynálezu, ale že vynález zahrnuje funkčně ekvivalentní způsoby a složky. Pracovníkům v oboru budou na základě výše uvedeného popisu kromě popsaných způsobů jistě zřejmé i různé modifikace vynálezu. Rozumí se,

že uvedené modifikace jsou zahrnuté v rámci připojených patentových nároků.

Claims (25)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Farmaceutická kompozice pro topické podáni určená pro zesvětlení kůže nebo pro snížení pigmentace kůže člověka, vyznačující se tím, že obsahuje sloučeninu vzorce (I)

   OH

   OH nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl v množství účinném pro zesvětlení kůže nebo pro snížení pigmentace kůže a farmaceuticky přijatelný nosič.
2. 2. Kompozice podle nároku lvyznačující se tím, že dále obsahuje sluneční filtr.
3. 3. Kompozice podle nároku lvyznačující se tím, že dále obsahuje resveratrol nebo jinou učinnou složku která má antioxidační účinky.
4. 4. Kompozice podle nároku lvyznačující se tím, že dále obsahuje kyselinu retinoovou nebo derivát kyseliny retinoové.
5. 5. Kompozice podle nároku lvyznačující se tím, že dále obsahuje kyselinu glykolovou, kyselinu trichloroctovou nebo jiný prostředek pro peeling kůže.
6. 6. Kompozice podle nároku lvyznačujíci se tím, že je ve formě roztoku vody-alkoholu, emulze typu olej ve vodě, emulze typu voda v oleji, emulzního gelu nebo ve formě dvoufázového systému.
7. 7. Kompozice podle nároku lvyznačujíci se tím, že je ve formě omývadla, krému, mléka, gelu, želé, pasty, masti, balzámu, masky, mikrosfér, nanosfér nebo vezikulární disperze.
8. 8. Způsob zesvětlování kůže nebo sníženi pigmentace kůže člověka vyznačující se podáváni sloučeniny vzorce (I) nebo její farmaceuticky přijatelné soli danému pacientovi, v množství účinném pro zesvětlení kůže nebo snížení pigmentace kůže.
9. 9. Způsob podle nároku 8vyznačující se tím, že sloučenina vzorce (I) nebo její farmaceuticky přijatelná sůl je zpracovaná do formy roztoku vody-alkoholu, emulze typu olej ve vodě, emulze typu voda v oleji, emulzního gelu nebo do formy dvoufázového systému.

   • · nač s

   e
10. 10. Způsob tím, že nebo přijatelná u j i c i její farmaceuticky omývadla, krému, mléka, ůl je zpracovaná do formy pasty, masti, balzámu, masky, mikrosfér, nanosfér gelu, želé, nebo vezikulární disperze.
11. 11.Farmaceutická kompozice pro inhibici tyrosinasy člověka, v tím, že obsahuje sloučeninu topické podáni určená pro y z. n a č u j nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl v množství účinném pro inhibici tyrosinasy a farmaceuticky přijatelný nosič.
12. 12. Kompozice podle nároku 11 vyznačující se tím, že je ve formě roztoku vody-alkoholu, emulze typu olej ve vodě, emulze typu voda v oleji, emulzního gelu nebo ve formě dvoufázového systému.
13. 13. Kompozice podle nároku 11 vyznačující se tím, že je ve formě omývadla, krému, mléka, gelu, želé, pasty, masti, balzámu, masky, mikrosfér, nanosfér nebo vezikulární disperze.
14. 14. Způsob inhibice tyrosinasy člověka vyznačuj ící se t i m , že zahrnuje podávání sloučeniny vzorce (I) ·· * • · • · · ·· ·· • · • · · · 4>

    <

    ·«··

    OH

    OH

    OH nebo její farmaceuticky přijatelné soli danému pacientovi v množství účinném pro inhibici tyrosinasy.
15. 15. Způsob podle nároku 14 vyznačující se tím, že sloučenina vzorce (I) nebo její farmaceuticky přijatelná sůl je zpracovaná do formy roztoku vody-alkoholu, emulze typu olej ve vodě, emulze typu voda v oleji, emulzního gelu nebo do formy dvoufázového systému.
16. 16. Způsob podle nároku 14 vyznačující se tím, že sloučenina vzorce (I) nebo její farmaceuticky přijatelná sůl je zpracovaná do formy omývadla, krému, mléka, gelu, želé, pasty, masti, balzámu, masky, mikrosfér, nanosfér nebovezikulární disperze.
17. 17. Farmaceutická kompozice pro topické podání určená pro zesvětlení kůže nebo pro snížení pigmentace kůže člověka, vyznačující se tím, že obsahuje sloučeninu vzorce (I)

    OH

    OH

    OH nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl v množství účinném pro inhibici tyrosinasy a farmaceuticky přijatelný nosič.
18. 18. Způsob zesvětlování kůže nebo snížení pigmentace kůže člověka vyznačující se t i m , že zahrnuje podávání sloučeniny vzorce (I)

    OH nebo její farmaceuticky přijatelné soli danému pacientovi v množství účinném pro inhibici tyrosinasy.
19. 19. Farmaceutická kompozice pro topické nebo transdermální podání pro léčení zánětlivého onemocnění nebo lupů u člověka, vyznačující se tím, že obsahuje sloučeninu vzorce (I) nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl v množství účinném pro léčbu uvedeného onemocnění a farmaceuticky přijatelný nosič.

    ·· « ··
20. 20. Kompozice podle nároku 19 vyznačující se tím, že uvedeným zánětlivým onemocněním je psoriáza, dermatitida nebo akné.
21. 21. Způsob léčení zánětlivého onemocnění nebo lupů u člověka vyznačující se tím, že zahrnuje podávání sloučeniny vzorce (I)

    OH

    OH

    OH nebo její farmaceuticky přijatelné soli danému pacientovi v množství účinném pro léčení uvedeného onemocnění.
22. 22. Způsob podle nároku 21 vyznačující se tím, že uvedeným zánětlivým onemocněním je psoriáza, dermatitida nebo akné.
23. 23. Farmaceutická kompozice pro topické nebo transdermální podání pro léčení zánětlivého onemocnění člověka, vyznačující se tím, že obsahuje sloučeninu vzorce (I)

    OH

    OH

    OH nebo jeji farmaceuticky přijatelnou sůl v množství účinném pro inhibici tyrosinasy a farmaceuticky přijatelný nosič.
24. 24. Způsob léčeni zánětlivého onemocnění člověka vyznačující se tím, že zahrnuje podávání sloučeniny vzorce (I)

    OH

    OH nebo její farmaceuticky přijatelné soli danému pacientovi v množství účinném pro inhibici tyrosinasy.
25. 25. Způsob podle nároku 24 vyznačující se tím, že uvedeným zánětlivým onemocněním je psoriáza,