SK285133B6 - Dolastatin-15 deriváty v kombinácii s taxanmi a ich použitie - Google Patents

Dolastatin-15 deriváty v kombinácii s taxanmi a ich použitie Download PDF

Info

Publication number
SK285133B6
SK285133B6 SK1251-99A SK125199A SK285133B6 SK 285133 B6 SK285133 B6 SK 285133B6 SK 125199 A SK125199 A SK 125199A SK 285133 B6 SK285133 B6 SK 285133B6
Authority
SK
Slovakia
Prior art keywords
compound
formula
pro
tert
carbonyl
Prior art date
Application number
SK1251-99A
Other languages
English (en)
Other versions
SK125199A3 (en
Inventor
Teresa Barlozzari
Andreas Haupt
Original Assignee
Abbott Gmbh & Co. Kg
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Abbott Gmbh & Co. Kg filed Critical Abbott Gmbh & Co. Kg
Publication of SK125199A3 publication Critical patent/SK125199A3/sk
Publication of SK285133B6 publication Critical patent/SK285133B6/sk

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/07—Tetrapeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/08—Peptides having 5 to 11 amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Epoxy Compounds (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

Opísané sú farmaceutické prostriedky na liečbu rakoviny obsahujúce zlúčeniny všeobecného vzorca (I), v ktorom jednotlivé symboly majú špecifické významy uvedené v opise, v množstve účinnom na zaistenie synergického účinku v kombinácii s paclitaxolom, taxoterom, modifikovaným taxanom alebo taxoidnýmanalógom. Tiež je opísané použitie týchto derivátov na výrobu farmaceutických prostriedkov.

Description

Vynález sa týka farmaceutických prostriedkov užitočných v liečbe rakoviny cicavcov a ich použitia.
Doterajší stav techniky
Rakovina je ochorenie, na ktorého liečbu je veľa potenciálne účinných postupov. Ale z dôvodov rozšírenia rakoviny rôznych typov a rôznych závažných účinkov, ktoré tieto typy môžu mať, sú potrebné účinnejšie spôsoby liečby, obzvlášť tie, ktoré majú zmenšené nepriaznivé vedľajšie účinky oproti súčasne dostupným spôsobom liečby.
Podstata vynálezu
Vynález sa týka farmaceutických prostriedkov užitočných na liečbu rakoviny cicavcov. Farmaceutický prostriedok v predloženom vynáleze obsahuje účinné množstvo prvej zlúčeniny, ktorá sa vyberie paclitaxola, taxotera, modifikovaného taxana alebo taxoidný analógov; a množstvo druhej zlúčeniny účinné na zaistenie synergického účinku všeobecného vzorca (I):
R1 R2 N-CHX-CO-A-B-D-(E)S-(F),-(G)U-K (I).
Vzorec (I) je diskutovaný ďalej v texte. Niektoré príklady zlúčenín všeobecného vzorca (I) sú špecifikované na tomto mieste. Napr. zlúčeniny všeobecného vzorca sú tie, v ktorých R1 a R2 sú metyl alebo etyl; X je izopropyl, secbutyl alebo tert-butyl; s je 1; t a u sú 0; A je valyl, izoleucyl alebo 2-tert-butylglycyl; D je tiamzolidinyl-karbonyl, 3,4-dehydroprolyl alebo propyl; E je proryl, tiazolidinyl-4-karbonyl, homoprolyl, hydroxyprolyl alebo 3,4-dehydroprolyl; K je substituovaná aminoskupina, ktorá má všeobecný vzorec R5-N-R6, kde R5 je vodík alebo C]-C4-alkoxy a R6 je monovalentný substituent ako (I)- alebo (2)-adamantyl; (CH2)v - fenyl, kde v = 1; α,α-dimetylbenzyl; Cj-C2-l>ncáma alebo rozvetvená hydroxyalkyl skupina, ako C(CH3)2-CH2-OH, čo je 3-hydroxy-l,l-dimetylpropyl; CrC4-cykloalkyl skupina ako bicyklo[3.3.0]okta-l-yl, 1-metylcyklopentyl alebo 1-metylcyklohexyl; alebo C;-C4lineáme alebo rozvetvené alkylové skupiny ako
-C(CH3) 3 čo je tert-butyl; -C-CH2CH3 čo je 1,1-dimetylpropyl;
(CH3)2
-C(CFfCH3) čo je 1-metyl-1-etylpropyl;
I ch3 -CH-C(CH3)3 čo je (S)- alebo (R)- l-metyl-2,2dimetyl -propyl
I ch3 -CH-C(CH3)2 čo jc (S)- alebo (R)-l-etyl-2-metyl-propyl
I c2h5 -CH-C(CH3)·. čo je l-izopropyl-2-metyl-propyl; alebo
I
CH(CH3)2 -C(CH3)2-CH(CH3)2 čo je l,l-dimetyl-2-metyl-propyl; -C(CH3)2, čo je izopropyl;
-CH(CHj)-CH2CH3, sec. Butyl [(S) alebo (R)]; alebo -CH(CH3)-CH(CH3)2, čo je 1,2-dimetylpropyl.
Každá zlúčenina je vo farmaceutickom prostriedku prítomná v účinnom množstve. Farmaceutický prostriedok môže obsahovať jeden alebo viac typov zlúčeniny (napr. jeden alebo viac typov prvej zlúčeniny, ako je paclitaxol alebo paclitaxol a taxoter a jednu alebo viac zlúčenín všeobecného vzorca (I)).
Tento vynález sa tiež opisuje použitie farmaceutických prostriedkov na liečbu rakoviny cicavcov, pri ktorom sa používajú tu opísané farmaceutické zlúčeniny. Podľa predloženého vynálezu je farmaceutický prostriedok vo forme na podávanie dvoch zlúčenín alebo sú tieto dve zlúčeniny podávané individuálne/separátne v dostatočne krátkom časovom rozmedzí tak, aby mali požadovaný účinok.
Bolo prekvapivo objavené, že kombinácia paclitaxola, taxotera alebo modifikovaného taxana alebo taxoidového analóga, tu opísaných, a zlúčeniny všeobecného vzorca (I), tu opísané, poskytujú zlepšený, alebo terapeuticky synergický protirakovinový účinok in vivo. Na účel tohto vynálezu sú dve podávané liečiva považované za synergické, ak kombinovaný režim produkuje viacej zabitých tumorových buniek, ako jeho najlepšia zložka, keď je podávaná samostatne v optimálnej alebo maximálne tolerovanej dávke. Rozdiely v množstve zabitých tumorových buniek, ktoré sú nižšie, ako je polovica desatiny, nie sú považované za signifikanmé.
Vynález sa týka farmaceutických prostriedkov užitočných v liečbe rakoviny cicavcov. Farmaceutické prostriedky z predloženého vynálezu obsahujú dve látky: prvou zlúčeninou je paclitaxol, taxoter alebo modifikovaný taxan alebo taxoidný analóg a druhá zlúčenina je zlúčenina všeobecného vzorca (I), ktorý je opísaný. Každá zlúčenina je prítomná vo farmaceutickom prostriedku v účinnom množstve. Farmaceutický prostriedok môže obsahovať jeden alebo viacej typov zlúčeniny, alebo môže byť podávaný podľa predloženého spôsobu. Tu použitý termín „účinné množstvo“ sa týka takého dostatočného množstva, ktoré vyvolá žiaducu biologickú reakciu. V tomto vynáleze je žiaduca biologická reakcia inhibícia (čiastočná alebo totálna) vzniku tumoru alebo zhubných ochorení krvi, zvrátenie vývoja tumoru alebo ďalšieho zhubného prejavu, alebo prevenciu alebo redukciu jeho ďalšieho vývoja.
Paclitaxol, taxoter alebo modifikovaný taxan alebo taxoidný analóg
Paclitaxol (Taxoľ8·), ktorý je jedným príkladom prvej zlúčeniny farmaceutického prostriedku, je diterpén izolovaný z kôry tisu západného (pacifického), Taxus brevifolia, a je reprezentantom triedy terapeutického agensu, ktorý má systém taxanového kruhu. Pre ciele tohto vynálezu je akýkoľvek terapeutický agens, ktorý má taxanový kruh, definovaný ako „taxan“. Vzorec paclitaxola je:
Paclitaxol a jeho analógy môžu byť vyrobené čiastočnou syntézou z 10-deacetylbaccatinu III, prekurzora, ktorý je získaný z ihličiek a vetvičiek tisa, a ďalej môžu byť získané totálnou syntézou. Pozri Holton, et al., J. Am. Chem. Soc. 116: 1597 -1601 (1994) a Nicolau, et. al., Náture 367: 630 (1994). U paclitaxola bola preukázaná antineoplazmic ká aktivita. V poslednom čase bolo preukázané, že tieto aktivity sú dôsledkom podpory polymerácie mikrotubúl. Pozri Kumar, N., J. Biol. Chem. 256: 10435 - 10441 (1981); Rowinsky, et al., J. Natl. Cancer Inst. 82: 1247: 1259 (1990); a Schiff, et al., Náture 277: 656 - 667 (1997). Bola dokázaná účinnosť paclitaxola na niektoré ľudské tumory v klinických prípadoch. Pozri McGuire, et al., Ann. Int. Med. 111: 237 - 279 (1989); Holmes, et al., J. Natl. Cancer Inst. 83: 1797 - 1805 (1991); Kohn et al., J. Natl. Cancer Inst. 836: 18 - 24 (1994); a Kohn, et al., Američan Society for Clinical Oncology 12 (1993).
Paclitaxol je dostupný pod obchodným menom Taxol® od Bristol-Myers Squibb Company, New York, NY.
Prvou zlúčeninou vo farmaceutickom prostriedku je obvykle paclitaxol (Taxol®), taxoter alebo modifikovaný taxan alebo taxoidný analóg. Modifikovaný taxan alebo taxoidné analógy sú také zlúčeniny, ktoré majú taxanový kruh s modifikovanými postrannými reťazcami. Veľký počet týchto analógov má zlepšené vlastnosti, ako napr. vyššiu rozpustnosť vo vode a stabilitu oproti prírodné sa vyskytujúcemu paclitaxolu. Napr. RPR 109881 je nový orálny a iv aktívny taxoidný analóg, ktorý je vyvíjaný Rhône Poulenc Rhoreer a v súčasnosti je v I fáze klinických testov. Tieto analógy sú známe odborníkom, ktorí sa pohybujú na tomto poli vedy a sú opísané napr. v U. S. Patent Nos. 5 278 324; 5 272 171; 5 254 580; 5 250 683; 5 248 769; 5 227 400 opisy týchto vynálezov sú tu zahrnuté v referenciách. Taxoter môže byť pripravený spôsobom, ktorý je opísaný v WO 93/18210, opis vynálezu je tu zahrnutý v referenciách. V konkrétnych prevedeniach vynálezu je prvá zlúčenina vo farmaceutickom prostriedku paclitaxol alebo taxoter.
Zlúčeniny všeobecného vzorca (I)
Počet krátkych peptidov so signifikantnou aktivitou ako inhibítory rastu buniek boli izolované z morského zajaca z indického oceánu Dolabella auricularia (Bai, et. al., Biochem. Pharmacology, 40: 1859 - 1864 (1990); Beckwith et al., J. Natl. Cancer Inst., 85: 483 - 488 (1993) a referencie tu uvedené). Tieto zahrnujú Dolastatiny 1-10 (U. S. Patent No. 4 816 444, vydaný Pettit et al.) a Dolastatin-15 (Eurpean Patent Application No. 3985558). Dolastatin-15 napr. nepochybne inhibuje rast buniek rodu National Cancer Inštitúte P388 lymfatickej leukémie, čo silne predpovedá účinnosť proti rôznym ľudským karcinómom. Táto zlúčenina bohužiaľ je prítomná v morskom zajaci len v stopových množstvách aje ťažké ju izolovať, je drahé ju syntetizovať a ma zlú rozpustnosť vo vode.
Zlúčeniny všeobecného vzorca (I) sú deriváty Dolastatinu-15, ktoré netrpia zmienenými nevýhodami, i keď si zachovali antineoplazmickú aktivitu alebo ju vykazujú väčšiu v porovnaní s prírodným produktom. Deriváty Dolastatinu15 všeobecného vzorca (I), ktoré sú kombinované s paclitaxolom, taxoterom alebo s modifikovaným taxanom alebo s taxoidným analógom v predloženom vynáleze, sú syntetizované tak, ako bolo opísané v súhrnnej aplikácii U. S. S. N. 08/472,453 zo 7. júna 1995, poznatky z tejto aplikácie sú tu inkorporované v ich celistvosti.
Deriváty Dolastatinu-15 všeobecného vzorca obvykle obsahujú L-amino kyseliny, ale môžu tiež obsahovať jednu alebo viac D-amino kyselín, ako je opísané v súhrnnej aplikácii U.S.S.N. 08/472 453 z 7. júna 1995. Zlúčeniny všeobecného vzorca môžu byť prítomné ako soli s fyziologicky prijateľnými kyselinami ako sú, ale neobmedzujú použitie ďalších, kyselina chlorovodíková, kyselina citrónová, kyselina vinná, kyselina mliečna, kyselina fosforečná, kyselina metansulfonová, kyselina octová, kyselina mravčia, kyselina maleinová, kyselina fumarová, kyselina jablčná, kyselina jantárová, kyselina malonová, kyselina sírová, kyselina L-glutámová, kyselina L-asparagová, pyrohroznová, kyselina galaktarová, kyselina benzoová, kyselina glukuronová, kyselina šťaveľová, kyselina askorbová a acetyl glycín.
V zmysle predloženého vynálezu termín „monovalentný radikál“ znamená elektrický neutrálny molekulárny fragment schopný vytvoriť jednu kovalentnú väzbu s druhým neutrálnym molekulárnym fragmentom. Monovalentné radikály zahŕňajú atóm vodíka, alkylové skupiny (napr. metylovú, etylovú, propylovú a tertbutylovú skupinu), cykloalkylová skupiny, hydroxy alkylové skupiny, adamantylové skupiny, atómy halogénov (napr. atómy fluóru, chlóru a brómu), arylové skupiny (napr. fenyl, benzy a naftyl skupina) a alkoxy skupiny (napr. metoxy a etoxy skupina). Dva monovalentné radikály na dvoch susedných atómoch, ktoré sú spojené sigma väzbou, môžu tvoriť pi väzbu susediacich atómov. Dva monovalentné radikály môžu byť tiež spojené spolu napr. polymetylenovou jednotkou, a tak tvoriť cyklickú štruktúru. Napr. jednotka -N(R)R', kde R a R' sú monovalentné radikály, môže spoločne s atómom dusíka tvoriť heterocyklický kruh. Dva monovalentné radikály s väzbou na jeden atóm tvoria divalentný radikál, ako je alkylidenová skupina, napr. propylidenová skupina alebo atóm kyslíka.
Bližšie v zlúčeninách všeobecného vzorca (I):
R1 je alkyl, ako Ci-C3; cykloalkyl, ako je cyklopropyl; alkylsulfonyl, ako je Cf-Cj; fluóroalkyl, ako je fluóroetyl, difluóroetyl, fluóroizopropyl; aminosulfonyl, ktorý môže byť substituovaný alkylom, ako je metyl;
R2 je vodík; alkyl ako je Ci-C5; fluóroalkyl, ako je fluóroetyl, difluóroetyl, fluóroizopropyl; cykloalkyl, ako je cyklopropyl;
R'-N-R2 dohromady môžu byť pyrrolidinové alebo piperidinové segmenty;
Aje valyl, izoleucyl, leucyl, allo-izoleucyl, 2,2-dimetylglycyl, 2-cyklopropylglycyl, 2-cyklopentylglycyl, 3-tert-butylalanyl, 2-tert-butylglycyl, 3-cyklohexylalanyl, 2-etylglycyl, 2-cyklohexyIglycyl, norleucylové alebo norvalylové segmenty;
B je N-alkyl-valyl, -norvalyl, -leucyl, -izoleucyl, -2-tert-butylglycyl, -3-tert 5 butylalanyl, -2-etylglycyl, -2-cyklopropylglycyl, -2-cyklopentylglycyl, norleucylové alebo -2-cyklohexylglycylové segmenty, kde A-alkyl je výhodne N-metyl nebo N-etyl;
D je prolyl, homoprolyl, hydroxyprolyl, 3,4- dehydroprolyl, 4-fluóroprolyl, 3-metylprolyl, 4-metylprolyl, 5-metylprolyl, azetidin-2-karbonyl, 3,3-dimetylprolyl, 4,4-difluóroprolyl, oxazolidin-4-karbonyl alebo tiazolidin-4-karbonylové segmenty;
E je prolyl, homoprolyl, hydroxyprolyl, 3,4-dehydroprolyl, 4-fluóroprolyl, 3-metylprolyl, 4-metylpropyl, 5-metylprolyl, azetidin-2-karbonyl, 3,3-dimetylprolyl, 4,4-difluóroprolyl, oxazolidin-4-karbonyl alebo tiazolidin-4-karbonyl-segmenty;
F a G sú nezávisle od seba vybrané zo skupiny, ktorá obsahuje prolyl, homoprolyl, hydroxyprolyl, tiazolidinyl-4-karbonyl, 1-aminopentyl-l -karbonyl, valyl, 2-tert-butylglycyl, izoleucyl, leucyl, 3-cyklohexylalanyl, fenylalanyl, N-metylfenylalanyl, tetrahydrosichinolyl-2-histidyl, 1-aminoindyl1 karbonyl, 3-pyridylalanyl, 2-cyklohexylglycyl, norleucyl, norvalyl, neopentylglycyl, trytophanyl, glycyl, 2,2-dimetylglycyl alanyl, β-alanylové a 3-naftylalanylové segmenty;
X je vodík, alkyl (ako je CrC':), cykloalkyl (ako je C3-C5), -CH2-cyklohexyl alebo arylalkyl (ako je benzyl alebo fe netyl);
s, t a u sú nezávisle od seba 0 alebo 1; a
K je hydroxy, alkoxy (ako je CrC4), fenoxy, benzyloxy alebo substituovaná alebo nesubstituovaná amino skupina.
Ďalej, zlúčeniny všeobecného vzorca (I) môžu byť soli s fyziologicky prijateľnými kyselinami.
Jedna podskupina zlúčenín z predloženého vynálezu zahŕňa zlúčeniny všeobecného vzorca (1), kde R’-N-R2 je pyrrolidinylový alebo piperidinylový segment.
Ďalšia podskupina zlúčenín z predloženého vynálezu zahŕňa zlúčeniny všeobecného vzorca (I), kde K je aminoskupina všeobecného vzorca R'-N-R2, kde:
R5 je vodík, alebo hydroxy, alebo C].7 alkoxy, alebo benzyloxy, alebo fenyloxy alebo C,.^ lineárny alebo rozvetvený hydroxyalkyl, ako je 3-hydroxy-l,l-dimetyipropyl, alebo C]_7 lineárny alebo rozvetvený alkyl (ktorý môže byť substituovaný jedným alebo viacerými atómami fluóru), alebo C3_io cykloalkyl, ako je bicyklo [3.3.0]octalyl, 1-metylcyklopentyl alebo 1 -metylcyklohexyl; alebo benzyl (ktorý môže byť substituovaný až troma substituentmi, ktoré sú nezávislé od seba CF3, nitro skupina, C|_7 alkylsulfonyl, C]4 alkoxy, fenoxy, benzoxy, halogén,
C|.4-alkyl, kyano skupina, hydroxy, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr, alebo COONH2);
R5 je vodík, alebo C,.7 lineárny alebo rozvetvený alkyl (ktorý môže byť substituovaný jedným alebo viacerými atómami fluóru), alebo Cbl2 lineárny alebo rozvetvený hydroxyalkyl, ako je 3-hydroxy-l,l-dimetylpropyl, alebo C3.10 cykloalkyl, ako je bicyklo[3.3.0]octalyl, 1-metylcyklopentyl alebo 1-metylcyktohexyl; alebo -(CH2) v-C3.7-cykloalkyl (v = 0,1,2, alebo 3), alebo norefedryl, alebo norpseudoefedryl.; alebo chinolyl, alebo pyrazyl, alebo -CH2-benzimidazolyl, alebo (l)-adamantyl, alebo (2)-adamantyl- -CH2-adamantyl, alebo alfa-metyl-benzyl, alebo alfa-dimetylbenzyl, alebo (CH2)V -fenyl (v = 0,1,2, alebo 3;) ktorý môže byť substituovaný až troma substituentmi, ktoré sú nezávislé na sebe CF3, nitro skupina, Ci_7 alkylsulfonyl, Ct_4 alkoxy, fenoxy, benzoxy, halogén, C|_4-alkyl, ktorý môže tvoriť cyklický systém, kyano skupina, hydroxy, N(CH3)2, CO-OMe, COOEt, COOiPr, alebo COONH2) alebo -(CH2)m - naftyl (m = 0 alebo 1); alebo -(CH2)W benzhydryl (w = 0, 1, alebo 2); alebo bifenyl alebo pikolyl alebo benzotiazolyl alebo benzoizotiazolyl alebo benzopyrazolyl alebo benzoxazolyl alebo -(CH2)m-fluórenyl (m = 0 alebo 1); alebo pyrimidyl alebo -(CH2)m-indanyl (m = 0 alebo 1); alebo -(CH2CH2O)y-CH3 (y = 0,1,2,3,4, alebo 5), alebo -(CH2CH2O)y-CH2CH3 (y = 0,1,2,3,4, alebo 5), alebo NH-C6H5 (ktorý môže byť substituovaný až dvoma substituentmi, ktoré sú nezávislé od seba CF3, nitro skupina, C1.7 alkylsulfonyl, C,.4 alkoxy, fenoxy, benzoxy, halogén, Cj^-alkyl, ktorý môže tvoriť cyklický systém, kyano skupina, hydroxy, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr, alebo COONH,), alebo -NCH3-C6H5 alebo -NH-CH2-C6H5 alebo -NCH3-CH2-C6H5 alebo 5-členným heteroarylom, ktorý môže byť substituovaný až dvoma substituentmi, ktoré sú nezávislé od seba CF3, nitro skupina, tiometyl, tioetyl, C3.6 cykloalkyl, -CH2 COOEt, C3.4-alkylenová skupina, ktorá tvorí bicylický systém s heterocyklom, fenyl; alebo -CHR7-5-členným heteroarylom (ktorý môže byť substituovaný až dvoma substituentmi, ktoré sú nezávislé od seba CF3, nitro skupina, kyano skupina, halogén, COOMe, COOEt, COOiPr, CONH2, Ci.4-alkyl, Ci_4-alkoxy, fenyl, benzyl, naftyl, alebo C|.7 alkylsulfonyl, [R7 = vodík, lineárny alebo rozvetvený C|_5 alkyl, benzyl; alebo R7 a R5 spoločne tvoria a skupinu -(CH2)3- alebo -(CH2)4-).
Táto podskupina zahŕňa zlúčeniny všeobecného vzorca (1), kde s, t a u sú nezávislé od seba 0 alebo 1; R1, R2 a X sú nižšie alkyly, A je amino kyselina s nižším alkylom, B je N-alkylovaná nižším alkylom je amino kyselina s nižším alkylom; D,E,F,G a K sú podľa predchádzajúcej definície. Podľa predloženého opisu sú tri sady takýchto zlúčenín opísané nasledujúcimi všeobecnými vzorcami (II), (III), a (IV):
R1 R2 N-CXH-CO-A-B-Pro-Pro-F-G-K(II)
R1 R2 N-CXH-CO-A-B-Pro-Pro-F-K(III)
R1 R2 N -CXH-CC-A-B-Pro-Pro-K(IV)
-CHR7 -5-členný heteroaryl môže byť reprezentovaný napr. jedným z nasledujúcich segmentov:
XCHí c.., ''CH, ''CH, SCH,
SÁ-K
Ή \=^
C002E COOHft COOBll CGNHSžl CONH·
^C8j *^ch2 ''CH, s'ki
ch3 CONICHj w. h CHj COOEt CHj j
CHl
-CHR7 -5-členný heteroaryl môže byť reprezentovaný napr. jedným z nasledujúcich segmentov:
5-členný heteroaryl môže byť reprezentovaný nasledujúcimi segmentmi:
V nasledujúcej podskupine zlúčenín z tohto vynálezu R5-N-R6 spoločne môžu tvoriť štruktúry, ktoré sú vybrané z nasledujúcich skupín:
—\ — Aj° — AAo
Ďalšia podskupina zlúčenín z tohto vynálezu zahŕňa napr. zlúčeniny všeobecného vzorca (I), kde s, t, a u sú 1 a K je hydroxy, alkoxy, fenoxy alebo benzyloxy skupina.
Ďalšia podskupina zlúčenín z tohto vynálezu zahŕňa napr. zlúčeniny všeobecného vzorca (I), kde s a t sú 1, u je 0 a K je hydroxy, alkoxy, fenoxy alebo benzyloxy skupina.
Ďalšia podskupina zlúčenín z tohto vynálezu zahŕňa napT. zlúčeniny všeobecného vzorca (I), kde s je 1, t a u sú 0 a K je hydroxy, alkoxy, fenoxy alebo benzyloxy skupina.
V jednotlivých prevedeniach vynálezu je druhá zlúčenina vo farmaceutickom prostriedku zlúčenina všeobecného vzorca (I), v ktorom R1 a R2 sú metyl alebo etyl; X je izopropyl, sec-butyl alebo tert-butyl; s je 1; t a u sú 0; A je valyl, izoleucyl alebo 2-tert-butylglycyl; B je N-metylvalyl, 1-izoleucyl alebo -2-tert-butylglycyl; D je prolyl, tiazolidinyl-4-karbonyl alebo 3,4 dehydroprolyl; E je prolyl, tiazolidinyl-4-karbonyl, homoprolyl, 3,4-dehydroprolyl alebo hydroxyprolyl; a K je substituovaná alebo nesubstituovaná amino skupina všeobecného vzorca R5-N-R1>.
V ďalších prevedeniach vynálezu je druhá zlúčenina vo farmaceutickom prostriedku zlúčenina všeobecného vzorca (I), v ktorom R1 a R2 sú metyl alebo etyl; X je izopropyl, sec-butyl alebo tert-butyl; s je 1; t a u sú 0; A je valyl, izoleucyl alebo 2-tert-butylglycyl; B je N-metylvalyl, I-izoleucyl alebo -2-tert-butylglycyl; D je prolyl, tiazolidinyl-4-karbonyl alebo 3,4 dehydroprolyl; E je prolyl, tiazolidinyl-4-karbonyl, homoprolyl, 3,4-dehydroprolyl alebo hydroxyprolyl; a K je substituovaná alebo nesubstituovaná amino skupina všeobecného vzorca R5-N-R6, kde R5 je vodík alebo CrC5 alkoxy a R6 je C1-C12 lineárna alebo rozvetvená alkyl skupina alebo C|-Cj2 lineárna alebo rozvetvená hydroxyalkyl skupina reprezentovaná napr. nasledujúcimi monovaletnými radikálmi: -C(CH3)3 čo je tert-butyl;
-C-CH2CH3 čo je 1,1-dimetylpropyl;
I (CH3)2 -C(CH2CH3) čo je 1-metyl-l-etylpropyl;
I ch3 -CH-C(CH3) 3 čo je (S)- alebo (R)-1 -metyl-2,2dimetyl-propyl
I ch3 -CH-C(CH3)2 čo je (S)- alebo (R)-l-etyl-2-metyl-propyl c2h5
-CH-C(CH3)2 čo je l-izopryl-2-metyl-propyl; alebo
CH(CH3)2 -C(CH3)2-CH(CH3)2 čo je l,l-dimetyI-2-metyl-propyl; -C(CK3)2, Čo je izopropyl;
-CH(CH3)-CH2CH3, sec. Butyl [(S) alebo (R)]; alebo -CH(CH3)-CH(CH3)2, čo je 1,2-dimetypropyl.
V ďalších prevedeniach vynálezu je druhá zlúčenina vo farmaceutickom prostriedku zlúčenina všeobecného vzorca (I), v ktorom R1 a R2 sú metyl alebo etyl; X je izopropyl, sec-butyl alebo tert-butyl; s jc 1; t a u sú 0; A je valyl, izoleucyl alebo 2-tert-butylglycyl; B je N-metylvalyl, I-izoleucyl alebo -2-tert-butylglycyl; D je prolyl, tiazolidinyl-4-karbonyl alebo 3,4 dehydroprolyl; E je prolyl, tiazolidinyl-4-karbonyl, homoprolyl, 3,4-dehydroprolyl alebo hydroxyprolyl; a K je substituovaná alebo nesubstituovaná amino skupina všeobecného vzorca R5-N-R6, kde R5 je vodík alebo C,-C5 alkoxy a R6 je monovalentný radikál, ako je C3-C,o cykloalkyl skupina (napr. cyklobutyl, cyklopentyl, cyklohexyl, alebo 1 -metylcyklopentyl, alebo 1-metylcyklohexyl alebo bicyklo[3.3.0]octa-l-yl); a (1)- alebo (2)-adamantyl skupina; (CH2)v-fenyl s v = 1 alebo α,a dimetylbenzyl.
V ďalších prevedeniach vynálezu je druhá zlúčenina vo farmaceutickom prostriedku zlúčenina všeobecného vzorca (I), v ktorom R1 a R2 je metylová skupina; X je izopropyl; s je 1; t a u sú 0; A je valyl; B je N-metylvalyl, D je prolyl; E je prolyl; a K je substituovaná amino skupina všeobecného vzorca R5-N-R6, kde R5 je benzyl a R6 je vodík. Táto zlúčenina zodpovedá zlúčenine (xvii), ktorá je zobrazená na obrázku. Výsledky použitia zlúčeniny (xvii) všeobecného vzorca (I) v kombinácii s paclitaxolom sú prezentované v tabuľkách 1 - 4.
Farmaceutické prostriedky z predloženého vynálezu môžu výhodne obsahovať farmaceutický prijateľný nosič. Odborníkom tohto odboru sú tieto farmaceutický prijateľné nosiče dobre známe. Výber nosičov je určený čiastočne jednotlivými zlúčeninami v kombinácii tak, ako i jednotlivým použitým spôsobom podávania farmaceutického prostriedku. Teda je veľké množstvo variantov vhodných prostriedkov z farmaceutických prostriedkov z predloženého vynálezu. Napr. paclitaxol (Taxol®) je dostupný ako sterilný nepyrogénny roztok, ktorý obsahuje polyoxyetylovaný ricínový olej (Cremophor®) a suchý alkohol, USP).
Ďalšou stránkou predloženého vynálezu je spôsob čiastočnej alebo úplnej inhibície tvorby, alebo iný spôsob liečby (napr. zvrátenie alebo inhibícia ďalšieho vývinu) pevných nádorov (napr. nádory pľúc, prsníkov, hrubého čreva, prostaty, močového mechúra, konečníka alebo sliznice maternice) alebo hematologických malignít (napr. leukémia, lymfatické ochorenia) cicavcov, napr. človeka podávaním účinného množstva prvej zlúčeniny, ktorou je paclitaxol, taxoter alebo modifikovaný taxan alebo taxoidnýanalóg, a podaním účinného množstva druhej zlúčeniny, ktorou je zlúčenina všeobecného vzorca (I).
Dve zlúčeniny sú podávané v kombinácii v súlade s vynálezom. Termín v kombinácii v tomto zmysle znamená to, že lieky sú podávané buď súčasne, alebo následne po sebe. Ak sú podávané následne za sebou, je jedna z dvoch zlúčenín obvykle detegovateľná v sére subjektu pri začiatočnom podávaní ďalšej zlúčeniny. V jednom prevedení je zlúčenina všeobecného vzorca (I) podávaná prvá a podanie opísanej zlúčeniny, ako je paclitaxol, nasleduje za týmto podávaním. V určitom prevedení je paclitaxol podávaný hodinu po podaní zlúčeniny všeobecného vzorca (I). Alternatívne prvá zlúčenina a druhá zlúčenina môžu byť podané súčasne, alebo môže byť ako prvá podaná prvá zlúčenina a po nej môže byť pridaná druhá zlúčenina, čo je zlúčenina všeobecného vzorca (1).
Prvá a druhá zlúčenina môžu byť podané samotné, alebo s farmaceutický prijateľným nosičom, alebo v diluente príslušnom k žiadanému spôsobu podávania. Podanie môže byť konvenčným spôsobom podávania farmaceutických, výhodne onkologických, prostriedkov, ako je orálny spôsob a parenterálny spôsob, ako napríklad subkutánny, intravenózny, intramuskulámy, intraperitoneálny, nazálny alebo rektálny. Tieto farmaceutické prostriedky môžu tiež obsahovať ďalšie terapeuticky aktívne prísady. Podávaná dávka cicavcom, ako je človek, zahŕňa kombináciu účinného množstva paclitaxola, taxotera alebo modifikovaného taxana alebo taxoidného analógu tak, ako je tu opísané. Pre jednotlivé podmienky a pre spôsob liečby, je dávka určená empiricky a závisí od faktorov, ako je biologická aktivita, mechanizmus účinku, nepriaznivá rezistencia, prekrývanie toxicity a profil toxicity jednotlivých použitých zlúčenín; prostriedky podávania; vek, zdravotný stav a telesná hmotnosť príjemcu; povaha a rozsah symptómov; častosť liečby; spôsob ďalšej liečby; a požadovaný účinok.
Obvyklá denná dávka zlúčenín všeobecného vzorca (I) je od 5 do 250 miligramov na kilogram telesnej hmotnosti pri orálnom spôsobe podávania a jeden až 100 miligramov na kilogram telesnej hmotnosti pri parenterálnom spôsobe podávania. Bežná denná dávka paclitaxola, taxotera, alebo modifikovaného taxanu alebo taxoidného analóga je obvykle 5 do 250 miligramov na kilogram telesnej hmotnosti.
Prvá a druhá zlúčenina z predloženého vynálezu môže byť podávaná bežne v pevnej alebo kvapalnej forme farmaceutického podávania, napr. nepotiahnuté alebo potiahnuté tabletky, kapsuly, prášky, granuly, čapíky alebo roztoky. Tieto sú vyrábané bežnými spôsobmi. Aktívne látky môžu byť na tento účel spojené bežnými farmaceutickými pomocnými látkami, ako sú spojovadlá tabliet, plnidlá, konzervačné látky, tabletové disintegranty, regulátory tečenia, plastifikátory, zmáčadlá, disperganty, cmulgátory, rozpúšťadlá, prostriedky umožňujúce postupné uvoľňovanie, antioxidanty a/alebo propelentné plyny (cf. H. Sucker et, ak: Pharmazeutische Technológie, Thime- Verlag, Stuttgart, 1978). Podávacie formy takto získané obvykle obsahujú 1 až 90 hmotn. % aktívnej látky.
Zlúčeniny všeobecného vzorca (1) sú detailnejšie opísané skôr. V určitom prevedení spôsob podľa vynálezu používa zlúčeninu všeobecného vzorca (I), v ktorom R1 a R2 sú metyl alebo etyl; X je izopropyl, sec-butyl alebo tert-butyl; s je 1; t a u sú 0; A je valyl, izoleucyl alebo 2-tertbutylglycyl; B je N-metylvalyl, I-izoleucyl alebo -2-tertbutylglycyl; D je prolyl, tiazolidinyl-4-karbonyl alebo 3,4 dehydroprolyl; E je prolyl, tiazolidinyl-4-karbonyl, homoprolyl, 3,4-dehydroprolyl alebo hydroxyprolyl; a K je substituovaná alebo nesubstituovaná amino skupina všeobecného vzorca R5-N-R6.
V určitom prevedení spôsob podľa vynálezu používa zlúčeninu všeobecného vzorca (I), v ktorom R1 a R2 sú metyl alebo etyl; X je izopropyl, sec-butyl alebo tert- butyl; s je 1; t a u sú 0; A je valyl, izoleucyl alebo 2-tertbutylglycyl; B je N- metylvalyl, I-izoleucyl alebo -2-tertbutylglycyl; D je prolyl, tiazolidinyl-4-karbonyl alebo 3,4 dehydroprolyl; E je prolyl, tiazolidinyl-4-karbonyl, homoprolyl, 3,4- dehydroprolyl alebo hydroxyprolyl; a K je substituovaná alebo nesubstituovaná amino skupina všeobecného vzorca R5-N-R6, kde R5 je vodík alebo C(-C4 alkoxy a R6 je C|-C|2 lineána alebo rozvetvená alkyl skupina alebo C)-C|2 lineárna alebo rozvetvená hydroxyalkyl skupina reprezentovaná napr. nasledujúcimi monovaletnými radikálmi:
-C(CH3) 3 čo je tert-butyl; -C-CH2CH3, čoje 1,1-dimetylpropyl;
I (CH3)2 -C(CH2CH3), čoje 1-metyl-l-etylpropyl;
I ch3 -CH-C(CH3)3, čoje (S)- alebo (R)-l-metyl-2,2dimetyl-propyl
I ch3 -CH-C(CH3)i, čoje (S)- alebo (R)-l-etyl-2-metyl-propyl
I c2h5 -CH-CŕCHjk čoje l-izopropyl-2-metyl-propyl; alebo
I
CH(CH3)2 -C(CH3)2-CH(CH3)2, čoje 1,1 -dimetyl-2-metyl-propyl; -C(CH3)2, čoje izopropyl;
-CH(CH3)-CH2CH3, sec. Butyl [(S) alebo (R)]; alebo -CH(CH3)-CH(CH3)2, čoje 1,2-dimetylpropyl.
V určitom prevedení spôsob podľa vynálezu používa zlúčeninu všeobecného vzorca (I), v ktorom R1 a R2 sú metyl alebo etyl; X je izopropyl, sec-butyl alebo tert-butyl; s je 1; t a u sú 0; A je valyl, izoleucyl alebo 2-tert-butylglycyl; B je N-metylvalyl, I-izoleucyl alebo -2-tert-butylglycyl; D je prolyl, tiazolidinyl-4-karbonyl alebo 3,4 dchydroprolyl; E je prolyl, tiazolidinyl-4-karbonyl, homoprolyl, 3,4-dehydroprolyl alebo hydroxyprolyl; a K je substituovaná alebo nesubstituovaná amino skupina všeobecného vzorca R5-N-R6, kde R5 je vodík alebo CrC4 alkoxy a R6 je monovalentný radikál, ako je C3-C10 cykloalkyl skupina (napr. cyklobutyl, cyklopentyl, cyklohexyl, alebo 1-metylcyklopentyl, alebo 1-metylcyklohexyl alebo bicyklo[3.3.0]octa-l-yl); a (1)- alebo (2)-adamantyl skupina; (CHZ)v-fenyl s v=l alebo α,a dimetybenzyl.
V určitom prevedení spôsob podľa vynálezu používa zlúčeninu všeobecného vzorca (I), v ktorom R1 a R2 sú metylová skupina; X je izopropyl; s je 1; t a u sú 0; A je valyl; B je N-metylvalyl; D je prolyl; E je prolyl; a K je substituovaná amino skupina všeobecného vzorca Rs-N-R6, kde R5 je benzyl a R6 je vodík. Táto zlúčenina zodpovedá zlúčenine (xvii), ktorá je zobrazená na obrázku. Výsledky použitia zlúčeniny (xvii) všeobecného vzorca (I) v kombinácii s paclitaxolom sú prezentované v tabuľkách 1 - 4.
Syntetické metódy
Zlúčeniny všeobecného vzorca môžu byť pripravené známymi spôsobmi syntézy peptidov tak, ako je tu opísané a v U. S: Patent Application Seriál No.08/470 453 z 7. júna 1995, ktorého poznatky sú tu inkorporované a citované. Peptidy môžu byť zostavované sekvenčne z jednotlivých aminokyselín alebo spojovaním vhodných malých peptidových fragmentov. V sekvenčnom skladaní sa peptidový reťazec zväčšuje postupne od C-konca o jednu aminokyselinu pri jednom kroku. Pri spojovaní fragmentov sú spojované fragmenty rôznej dĺžky a tieto fragmenty môžu byť získané sekvenčným skladaním z aminokyselín alebo spojovaním fragmentov z ešte kratších peptidov.
Tak pri sekvenčnom skladaní, ako i pri spojovaní fragmentov je nevyhnutné spojovať jednotky tvorbou amidovej väzby, ktorá môže byť vytvorená rôznymi enzymatickými alebo chemickými spôsobmi. Spôsoby tu opísané na tvorbu peptidových amidových väzieb, sú tiež vhodné na tvorbu peptidových amidových väzieb.
Chemické spôsoby tvorby amidovej väzby sú detailne opísané v štandardných prameňoch peptidovej chémie, vrátane Muller, Methoden der organische Chemie Vol. XV/2,1-364, Thieme Verlag, Stuttgart, (1974); Stewart and Young, Solid Phase Peptide Synthesis, 31 - 34 a 71 - 82, Pierce Chemical Company, Rockford, IL (1984); Bodanszky et al. Peptide Synthesis 85 - 128, John Wiley & Sons, New York, (1976); Practice of Peptide Synthesis. M. Bodansky, A. Bodansky, Springer-Verlag, 1994 a ďalšie štandardné práce v peptidovej chémii. Výhodné spôsoby zahŕňajú azidový spôsob, spôsob pomocou symetrických a zmiešaných anhydridov, použitie in silu generovaných alebo pTedpripravených aktívnych esterov, použitie uretánom chránených N-karboxy anhydridov aminokyselín a tvorbu amidovej väzby kondenzačných činidiel, ako je dicyklohexylkarbodiimid (DCC), dizopropylkarbodiimid (DIC), -etoxykarbonyl-2-etoxy-l,2-dihydrochinolin (EEDQ), pivaloyl chlorid, l-etyl-3-(3-dimetylaminopropyl)karbodiimid (PPA), N,N-bis(2-oxo-3-oxazollidinyl)amido fosforyl chlorid (BOP-CI), brom-tris-pyrrolodinofosfonium hexafluorofosfát (PyBrop), difenylfosforyl azid (DPPA), Castrovo činidlo (BOP, PyBop), O-benzotriazolyl-N,N,N',N'-tetrametyluronium soli (HBTU), O- azabezotriazolyl-Ν,Ν,Ν',Ν'-tetrametyluronium soli (TATU), dietylfosforyl kyanid (DEPCN), 2,5-difenyl-2,3-dihydro-3-oxo-hydroxytifen dioxid (Steglichovo činidlo; HOTDO), a l,ľ-karbonyldiimidazol (CDI). Kondenzačné činidlá môžu byť použité samotné alebo v spojení s aditívami, ako je N,N-dimetyl-4-aminopyridin (DMAP), N-hydroxybenzotriazol (HOBt), N-hydroxybenzotriazin (HOOBt), N-hydroxysukcinimid (HOSu) alebo 2-hydroxypyridín.
Hoci použitie chrániacich skupín nie je všeobecne nutné v enzymatickej syntéze peptidov, reverzibilná ochrana reaktívnych skupín, ktoré nie sú zapojené do tvorby amidovej väzby, je nutná pre obidva reaktanty. Tri bežne chrániace skupiny sú typicky použité v chemickej syntéze peptidov: benzyloxykarbony (Z), t-butyloxykamonyl (Boe) a 9-fluómylmetoxykarbonyl (Fmoc). V každom prípade je chrániaca skupina na α-amino skupine jednotky rozširujúcej reťazec. Detailný článok o chrániacich skupinách pre aminokyseliny je v Muller, Methoden der organische Chemie Vol. XV/1, pp 20 - 906, Thieme Verlag, Stuttgart, (1974). Jednotky, z ktorých je zostavovaný peptidový reťazec, môžu reagovať v roztoku, v suspenzii alebo spôsobom podobným tomu, ktorý opísal Menifield v J. Amer. Chem. Soc. 85 (1963) 2149. Podľa jedného spôsobu sú peptidy skladané sekvenčne alebo spojovaním fragmentov použitím Z, Boe alebo Fmoc chrániacich skupín, s jedným reaktantom zakotveným na nerozpustnom polymémom nosiči (tiež tu nazývané živica). Tento obvykle vyžaduje skladanie peptidov sekvenčne na polymémom nosiči použitím Boe alebo Fmoc chrániacich skupín s tým, že narastajúci reťazec je zakotvený C-koncom na nerozpustných časticiach živice. Táto metóda dovoľuje odstránenie reagentov a vedľajších produktov filtrácie, čo odstraňuje potrebu rekryštalizácie medziproduktov.
Chránené aminokyseliny môžu byť zakotvené na akýkoľvek vhodný polymér, ktorý musí byť nerozpustný v použitých rozpúšťadlách a musí mať stabilnú fyzikálnu formu, ktorá umožňuje filtráciu. Polymér musí obsahovať funkčnú skupinu, za ktorou je prvá aminokyselina na ňu kovalentne zakotvená. Na tento účel je vhodné široké pole polymérov, napr. celulóza, polyvinyl alkohol, polymetakrylát, sulfonovaný polystyrén, chlórmetylovaná kopolymér styren/divinylbenzen (merrifieldová živica), 4-metylbenzhydrylamín živica (MBHA-živica), fenylacetamidometyl živica (Pam-živica), p-benzyloxy-benzyl-alkohol živica, benzhydryl-amín-živica (BHA-živica), 4-(hydroxymetyl)-benzoyloxymetyl-živica, živica podľa Breipohla et al. (Tetrahedron Letters 28 (1987) 565; dodávaná fy BACHEM), 4-(2,4-dimetoxyfenylaminometyl)fenoxy živica (dodávaná fy Novabiochem) alebo o-chlórtrityl-živica (dodávaná fy Biohellas). Vhodné rozpúšťadlá na syntézu peptidov sú tie rozpúšťadlá, ktoré sú inertné v podmienkach reakcie, napr. voda, Ν,Ν-dimetylformamid, dimetylsulfoxid (DMSO), acetonitril, dichlórmetán (DCM), 1,4-dioxan, tetrahydrofurán (THF), N-metyl-2-pyrrolidon (NMP) a zmesi týchto rozpúšťadiel.
Syntéza peptidov na polymémom nosiči je prevádzaná vo vhodnom inertnom organickom rozpúšťadle, v ktorom sú deriváty aminokyselín a použité východiskové látky rozpustné. Zvlášť vhodné rozpúšťadla sú napr. DMF, DCM, NMP, acetonitril, DMSO a zmesi týchto rozpúšťadiel, a to pre ich vlastnosti vzhľadom na napučanie živice. Po dokončení syntézy je peptid odstránený z polymémeho nosiča (toto sa bežne nazýva odštiepenie). Podmienky, za ktorých dochádza k odštiepeniu, sú dobre známe z peptidovej chémie a syntézy peptidov, a závisí od druhu použitej živice. Odštiepenia sú najbežnejšie katalyzované kyselo alebo pomocou paládia, kyselo katalyzované odštiepenie môže byť vyvolané napr. kvapalným bezvodným fluorovodíkom, bezvodovou trifluórmetasulfonovou kyselinou, rie denou alebo koncentrovanou trifluóroctovou kyselinou a zmesami octová kyselina/dichlórmetanltrifluóretanol. Paládiom katalyzované odštiepenie môže byť vyvolané v THF alebo zmesiach THF/DCM v prítomnosti slabej bázy, ako je morfolin. Za týchto podmienok dochádza i k jednoznačnému odstráneniu chrániacich skupín.
Pred ďalšími derivatizačnými reakciami môže byť tiež nevyhnutná čiastočná deprotekcia peptidov. Napr. dialkylované peptidy na N-konci môžu byť pripravené kondenzáciou príslušnej Ν,Ν-diaIkylaminokyseliny k peptidu v roztoku, alebo k peptidu, ktorý je zakotvený polymémym nosičom, alebo reduktívnou alkyláciou peptidu zakotveného na živici v DMF 1 % octovej kyseliny s NaCNBH3 a príslušného aldehydu alebo hydrogenáciou peptidu v roztoku v prítomnosti aldehydu alebo ketónu a Pd/C.
Tu opísané rôzne neprírodné aminokyseliny tak, ako aj rôzne neaminokyselinové skupiny, môžu byť získané z komerčných zdrojov alebo môžu byť pripravené spôsobmi, ktoré sú známe. Napr. aminokyselinové stavebné bloky s R1 a R2 * * * * * * * * skupinami môžu byť pripravené podľa E. Wuensch, Huben Weyl, Methoden der organischen Chemie Vol. XV/1, p. 306 Thieme Verlag, Stuttgart (1974) a tam uvedené citácie. Peptidy s gama- alebo delta-laktámovými spojmi môžu byť pripravené zapojením príslušných laktámom spojených dipeptidových jednotiek (R. Freidinger, J. Org. Chem. (1982) 104 - 109) do peptidového reťazca. Peptidy s dipeptidovými stavebnými jednotkami s tiazolom, tiazolínom neo oxazolinom môžu byť pripravené zapojením príslušnej dipeptidovej jednotky (P. Jouin et ak, Tetrahedron Letters (1992), pp. 2087 - 2810; P. Wipf et al. Tetrahedron Letters (1992), pp. 907 - 910; W.R. Tully J. Med. Chem. (1991) p. 2065; Synthesis (1987), p. 235) do peptidového reťazca.
Prehľad obrázkov na výkresoch
Obrázok zobrazuje zlúčeniny i-xvii, ktoré sú príkladmi zlúčenín všeobecného vzorca (1).
Príklady uskutočnenia vynálezu
Nasledujúce postupy majú za účel ilustrovať užitočné spôsoby prípravy zlúčenín všeobecného vzorca (I). Kde je to možné, sú aminokyseliny skrátené použitím známeho spôsobu pomocou trojpísmenového kódu. Ďalšie skratky znamenajú: Me2Val = Ν,Ν-dimetylvalin, MeVal = N-metylvalin, TFA = trifluóroctová kyselina, Ac = octová kyselina, Bu = butyl, Et = etyl, Me = metyl, Bzl = benzyl, Nal = = 3-naflylalanin, Cha = 3-cyklohexylalanin, Npg = neopentyl glycín, Abu = 2-amino butyryl, Dab = 2,4- diaminobutyryl, iPr = izopropyl.
Všeobecné syntetické postupy
I. Zlúčeniny všeobecného vzorca (1) z vynálezu sú synte- tizované buď klasickou syntézou v roztoku použitím štandardnej Z- a Boe- metodológie, ako bolo opísané, a alebo štandardnými spôsobmi syntézy na pevnej fáze na plne automatickom syntetizátore model 413A, ktorý dodáva firma APPLIED BIOSYSTEMS. Aparatúra používa odlišné syntetické cykly na ochranu pomocou Bos a Fmoc.
V prípade syntézy na pevnej fáze sú N,N-dialkyl-penta alebo hexapeptidy uvoľnené z pevného nosiča a ďalej kondenzované so zodpovedajúcim C koncom amínu v roztoku.
Ako činidlo na kondenzáciu aminokyselín a aminokyseliny, ktorá je kondenzovaná k N-metylaminokyseline, sú použité
BOP-CI a Py Brop. Na reduktívnu alkyláciu N konca je odchránený N-koniec v systéme peptid- živica, a potom je reagovaný s trojnásobným molámym prebytkom aldehydu alebo ketónu v DMF/1 % octová kyselina s prídavkom 3 ekvivalentov NaCNBH3. Po ukončení reakcie (negatívny Kaiser test) je živica niekoľkokrát omytá vodou, izopropanolom, DMF a dichlórmetánom.
Na syntézu v roztoku je najvýhodnejšie použiť buď Boc-chránené amino kyseliny NCAs (N-tert-butyloxykarbonyl-amino kyselina-N-karboxy-anhydridy), Z-chránené amino kyseliny NCAs (N-benzyloxykarbonyl-amino kyselina-N-karboxy-anhydridy) alebo použiť ako kondenzačné činidlá pivaloylchlorid na kondenzáciu aminokyseliny a aminokyseliny, ktorá je kondenzovaná ku N-metylaminokyseline. Reduktívna alkylácia môže byť prevedená napr. reakciou N-konca peptidu po deprotekcii alebo aminokyselín s aldehydmi alebo ketónmi s použitím NaCNBH3 alebo vodíka, Pd/C.
a) Syntetický cyklus pri chránení pomocou Boe 1 x 3 min.
1. 30 % trifluóroctová kyselina v DCM
2. 50 % trifluóroctová kyselina v DCM 1 x I min.
3. DCM oplach
4. 5 % diizopropyletylamín v DCM 5 x 1 min.
5. 5 % diizopropyletylamín v NMP 1 x 1 min.
6. NPM oplach 5 x 1 min.
7. prídavok aktivovanej chránenej kyseliny (DCC a 1 ekvivalent HOBt v NPM/DCM); kondenzácia peptidu (1. časť) 1 x 30 min.
8. prídavok DMSO do reakčnej zmesi tak, aby obsahovala 20 obj. % DMSO kondenzácia peptidu (2. časť) 1 x 16 min.
9. Prídavok 3,8 ekvivalentu diizopropyletylamínu do reakčnej zmesi kondenzácia peptidu (3. časť) 1 x 7 min.
10. DCM oplach 3 x 1 min.
11. Ak nie je konverzia úplná, tak opakovanie kondenzácie (od bodu 6)
12. 10 % acetanhydrid, 5 % diizopropyletylamín v DCM 1 x 2 min.
13. 10 % acetanhydrid v DCM 1 x 4 min.
14. DCM oplach 4 x 1 min.
15. Naspäť k bodu 1
BOP-CI a PyBrop boli použité ako činidlá na kondenzáciu aminokyseliny a následne N-metylaminokyselín. Tomu zodpovedajú zvýšené reakčné časy. Pri syntéze v roztoku je najvýhodnejšie na tento typ kondenzácie použiť Boe -chránené amino kyseliny NCAs (N-tert-butyloxykarbonyl-amino kyselina-N-karboxy-anhydridy).
b) Syntetický cyklus pri chránení pomocou Fmoc
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
DMF oplach % piperidín v DMF % piperidín v DMF
DMF oplach prídavok aktivovanej chránenej kyseliny (aktivácia 1 ekvivalentu TBTU a 5 ekvivalentov DIPEA v DMF)); kondenzácia peptidu (1. časť)
DMF oplach
Ak nie je konverzia úplná, tak opakovanie kondenzácie (od bodu 6) % acetanhydrid v DMF
DMF oplach naspäť k bodu 2 xlmin.
x4 min.
x 16min.
x 1 min.
x 61 min.
x lmin.
x 8min.
x lmin.
BOP-CI a PyBrop boli použité ako činidlá na kondenzáciu aminokyseliny a následne N-metylaminokyselín. Tomu zodpovedajú zvýšené reakčné časy.
II. Reduktívna alkylácia N.konca
V pripravenom peptide na živici podľa la alebo la bol odchránený N-koniec (kroky 2 - 4 v lb alebo 1 - 6 v la) a ten bol reagovaný s trojnásobným molámym prebytkom aldehydu alebo ketónu v DMF/1 % octová kyselina s prídavkom 3 ekvivalentov NaCNBH3. Po dokončení reakcie (negatívny Kaiser test) bola živica niekoľkokrát omytá vodou, izopropanolom, DMF a dichlórmetánom.
III. Spracovanie peptidu na živice, ktoré boli získané v la a II
Peptid na živici bol vysušený pri zníženom tlaku a vložený do reakčnej nádoby z Teflon HF aparatúry (dodávané firmou PENINSULA). Po pridaní čistiacej látky, napr. anizolu (1 ml/g živice) a v prípade peptidov, ktoré obsahujú tryptofán, je pridaný tiol na odstránenie indolylformylovej skupiny, napr. etánditiol (0,5 ml/ g živice), a potom je do reakčnej nádoby kondenzovaný fluorovodík (10 ml/ g živice) pri chladení kvapalným dusíkom. Zmes bola temperovaná na 0 °C a miešaná 45 minút. Potom bol odstránený pri zníženom tlaku a odparok bol premytý etylacetátom na odstránenie zvyškov scavengeru. Peptid bol vytrepaný do 30 % octovej kyseliny a odfiltrovaný, a potom bol filtrát lyofilyzovaný.
IV. Spracovanie peptidu na živice, ktoré boli získané v Ib a II
Peptid na živici bol vysušený pri zníženom tlaku a potom podrobený jednému z nasledujúcich postupov odštiepenia, ktorý závisí od obsahu aminokyselín (Wade, Tregear, Howard Florey Fmoc Workshop Manual, Melboume 1985).
Podmienky odštiepenia:
TFA Scavenger Čas reakcie
1. 95% 5% vody 1,5 hod
2. 95% 5 % etantiol/anizol (1 : 3) 1,5 hod
Suspenzia peptidu na živici vo vhodnej zmesi TFA bola miešaná pri teplote miestnosti počas udanej doby, a potom bola živica odfiltrovaná a premytá TFA a DCM. Filtrát a rozpúšťadlo použité na opláchnutie boli skoncentrované a peptid bol precipitovaný dietyetermom. Po ochladení ľadovým kúpeľom bol precipitát odfiltrovaný a rozpustený v 30 % kyseline octovej lyofilizovaný.
V. Ak bola použitá o-chlórtrityl- živica (dodávaná fy Biohellas) suspenzia peptidu na živici v zmesi octová kyselina/trifluóretanol/dichlórmetán (1;1:3) bola miešaná pri izbovej teplote 1 hodinu. Živica bola pomocou vákua odfiltrovaná a dôkladne premytá štiepiacim roztokom. Kombinované filtráty boli zakoncentrované vo vákuu a spracované vodou. Precipitát bol získaný filtráciou alebo v centrifúge, premytý dietyletermom a vysušený pri zníženom tlaku.
VI. Purifikácia a charakterizácia peptidov. Purifikácia bola uskutočnená gélovou chromatografiou (SEPHDEX 6-10, G- 15/10 % HOAc, SEPHADEX L H20/MeOH), stredne tlaková chromatografia (stacionárna fáza: HD-SIL C-18, 20-45 mikrónov, 10 nm; mobilná fáza: gradient s A % 0,1 % TFA/meOH, B % 0,1 % TFA/voda) alebo preparatívna HPLC (stacionárna fáza: voda Delta-Pak C-18, 15 mikrón, 10 nm; mobilná fáza: gradient s A % 0,1 % TFA/meOH, B % 0,1 % TFA/voda).
Čistota výsledných produktov bola určená analytickou HPLC (stacionárna fáza 100 2,1 mm VYDAC C-18, 51, 30 nm; mobilná fáza gradient acetonitril - voda, pufrované 0,4 % TFA, 40 °C).
Produkt bol charakterizovaný analýzou aminokyselín a FAB hmotnostnou spektroskopiou.
Špecifické syntetické postupy
Príklad 1A: N, N-dimetyl-Val-Val-N-metyl-Vat-Pro-Pro-Val-Phe-NH2
1,98 g Fmoc-Rink-živica (substitúcia 0,46 mmol/g) čo zodpovedá počiatočnému množstvu 0,84 mmol) reagovalo postupom Ib s 1,26 mmol Fmoc-Phe-OH
Fmoe-Val-OH Fmoc-Pro-OH Fmoc-Pro-OH Fmoc-N-metyl-Val-OH Fmoc-Val-OH Fmoc-Val-OH
Aminokyselina, ktorá nasledovala za N-metyl aminokyselinou, bola kondenzovaná s PyBrop ako kondenzačným činidlom. Po vzájomných syntetických cykloch bola prevedená deprotekcia N-konca peptidu na živici (kroky 2 až 4 v Ib) a ten bol ďalej reagovaný s vodným roztokom formaldehydu, ako bolo opísané v II, a potom bola živica vysušená pri zníženom tlaku. Výsledná živica bola podrobená TFA odštiepeniu tak, ako bolo opísané v IV. Surový produkt (590 mg) bol purifikovaný gélovou filtráciou (SEPHADEX-LH-20). Výťažok bol 295 mg.
Príklad 1A:
Látka z príkladu 1 môže byť tiež pripravená klasickým spôsobom syntézy v roztoku. Syntéza N,N-dimetyl-Val-Val-N-metyl-Val-Pro-Pro-Val-Phe-NH2 a jeho príslušných medziproduktov je opísaná v nasledujúcom odseku.
a) Z-MeVal-Pro-OMe
66,25 g (mmol) Z-MeVal-Oh bolo rozpustené v 250 ml suchého dichlórmetánu. Po pridaní 36,41 ml (262,5) trietylamínu bola reakčná zmes ochladená na -25 °C bolo k nej pridané 32,37 ml (26,2,5 mmol) pivaloyl chloridu. Po 2,5 hodinách miešania bolo do reakčnej zmesi pridané 41,89 (250 mmol) H-Pro-OMe-HCl v 250 ml dichlórmetánu, voľná báza bola uvoľnená prídavkom 36,41 ml (262,5) trietylamínu. Reakčná zmes bola miešaná ďalšie 2 hodiny pri -25 °C a cez noc pri izbovej teplote. Potom bola reakčná zmes nariedená dichlórmetánom a dôkladne premytá nasýteným vodným roztokom NaHCO3 (3X), vodou (IX), 5 % citrónovou kyselinou (3X) a nasýteným roztokom NaCl. Organická fáza bola sušená nad síranom sodným, prefiltrovaná a potom odparená. Odparok (91,24 g) bol miešaný s petroletermom počas noci a odfiltrovaný. Bolo získané
62,3 g produktu.
b) H-MeVal-Pro-OMe
48,9 g (130 mmol) Z-MeVal-Pro-Ome bolo rozpustené v 490 ml metanolu. Po pridaní 10,9 ml (130 mmol) koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej a 2,43 10 % Pd/C bola reakčná zmes hydrogenovaná. Filtráciou a odparením bolo získané 36,43 g produktu.
c) Z-Val-MeVal-Pro-OMe
18,1 g (65 mmol) H-MeVal-Pro-OMe, 21,6 g (78 mmol) Z-Val-karboxyanhydrid a 22,8 ml (130 mmol) diizopropyletylamiíu bolo miešané 2 dni pri 40 °C. Po odparení DMF bol k odparku pridaný dichlórmetán a organická fáza bola dôkladne premytá nasýteným vodným roztokom NaHCO3 (3X), vodou (IX), 5 % citrónovou kyselinou (3X) a nasýteným roztokom NaCl. Organická fáza bola sušená nad síranom sodným, prcfiltrovaná a potom odparená. Produkt (29,3 g) bol získaný ako viskózny olej.
d) H-Val-MeVal-Pro-OMe
29,3 g (61,6 mmol) Z-Val-MeVal-Pro-OMe bolo rozpustené v 230 ml metanolu. Po pridaní 1,15 10 % Pd/C bola reakčná zmes hydrogenovaná. Filtráciou a odparením bolo získané 21,96 g produktu.
e) Z-Val-Val-MeVal-Pro-OMe
15,29 (61 mmol) Z-Val-OH a 21,96 g (61,6 mmol) H-Val-MeVal-Pro-OMe bolo rozpustené v 610 ml dichlórmetánu a ochladené na 0 °C. Po pridaní 8,16 ml (73,2 mmol) N-metylmorfolinu, 2,77 g (20,3 mmol) HOBt a 11,74 g (61 mmol) EDCI bola reakčná zmes miešaná počas noci pri izbovej teplote, potom bola reakčná zmes nariedená dichlórmetánom a dôkladne premytá nasýteným vodným roztokom NaHCO3 (3X), vodou (IX), 5 % citrónovou kyselinou (3X) a nasýteným roztokom NaCl. Organická fáza bola sušená nad síranom sodným, prefiltrovaná a potom odparená do sucha. Bolo získané 31,96 g produktu.
f) Z-Val-Val-MeVal-Pro-OH
31,96 g (57 mmol) Z-Val-Val-MeVal-Pro-OMe bolo rozpustené v 250ml metanolu. K. roztoku bol pridaný IN roztok LiOH reakčná zmes bola miešaná cez noc pri izbovej teplote. Po pridaní 500 ml vody bola vodná fáza 3-krát vytrepaná etylacetátom. Organická fáza bola sušená nad síranom sodným, prefiltrovaná a potom odparená do sucha. Bolo získané 30,62 g bieleho pevného produktu.
g) Z-Val-Val-MeVal-Pro-Pro-Val-Phe-NHz g (43,3 mmol) Z-Val-Val-MeVal-Pro-OH a 15,59 g (43,3 mmol) H-Pro-Val- Phe-NH2 bolo suspendované v 430 ml suchého dichlórmetánu. Po ochladení na 0 °C bolo pridané 5,81 ml (52mmol) N-metylmorfolinu, 1,94 g (15 mmol) HOBt a 8,33 g (43,3 mmol) EDCI bola reakčná zmes miešaná cez noc pri izbovej teplote. Potom boli odparené rozpúšťadlá a odparok bol v 640 ml dichlórmetánu a ten dôkladne premytý nasýteným vodným roztokom NaHCO3 (3X), vodou (IX), 5 % citrónovou kyselinou (3X) a nasýteným roztokom NaCl. Organická fáza bola sušená nad síranom sodným, prefiltrovaná a potom odparená do sucha. Bolo získané 33,04 g produktu. Surový produkt bol čistený chromatograficky na silikagéli mobilná fáza 20 % MeOH/hexán. Bolo získané 18,32 čistého produktu.
h) N, N-dimetyl- Val-Val-MeVal-Pro-Pro-Val-Phe-NH2
18,32 g Z-Val-Val-MeVal-Pro-Pro-Val-Phe-NH2 bolo rozpustené v 80 ml MeOH. Pod atmosférou dusíka bolo k roztoku pridané 0,4 g 10 % Pd/C reakčná zmes bola 4 hodiny hydrogenovaná. Po pridaní 6,22 ml (81,24 mmol) 37 % vodného roztoku formaldehydu hydrogenácia pokračovala 5 hodín. Filtráciou a odparením bolo získané 15,6 g surového produktu. Ďalšia purifikácia bola prevedená rozpustením peptidu vo vode a úpravou pH roztoku na 2 a extrakciou vodnej fázy 3-krát etylacetátom. Potom bolo pH vodnej fázy upravené na 8-9 a ďalej bolo extrahované 4-krát etylacetátom. Organická fáza bola extrahovaná vodou a sušená nad síranom sodným, prefiltrovaná a potom odparená. Bolo získané 11,3 g produktu ako biely prášok. Zlúčenina bola charakterizovaná MS-FAB ([M+H]+ = 797).
Príklad 2A: N, N-dimetyl-Val-Val-MeVal-Pro-{l/[tiayol-(2)-yl]-2-fenyl) -etylamid 4,11 g Fmoc-Pro-p-alkoxylbenzyl-alkohol-živica (substitúcia 0,73 mmol/g), čo zodpovedá počiatočnému množstvu 3 mmol, reagovalo postupom lb s 4,5 mmol
Fmoc-N-MeVal-OH Fmoc-Val-OH Fmoc-Val-OH
Aminokyselina, ktorá nasledovala za N-metyl aminokyselinou, bola dvojnásobne kondenzovaná s PyBrop ako kondenzačným činidlom v predĺženom reakčnom čase. Po dokončení syntézy bola prevedená deprotekcia N-konca peptidu na živicu (kroky 2-4 v lb) a ten boí ďalej reagovaný s vodným roztokom formaldehydu, ako bolo opísané v II, a potom bola živica vysušená pri zníženom tlaku. Výsledná živica bola podrobená TFA odštiepeniu tak, ako bolo opísané v IV. Surový produkt (750 mg) bol hneď použitý na ďalšiu kondenzáciu. 100 mg tejto zlúčeniny reagovalo s 45 mg (S)-2-[l-amino-2-fenylctyl]tiazol a 230 mg PyBop s prídavkom 192 mikrolitrov v DMF počas 2 dní pri izbovej teplote. Reakčná zmes bola čistená gélovou filtráciou (SEPHADEX-LH-20, metanol) a frakcie, kde bol produkt boli kombinované. Bolo získaných 83 mg produktu.
Príklad 1B Me2-Val-Val-MeVal-Pro-Pro-NHCH(CH3)2
a) Z-MeVal-Pro-OMe
66,25 g (mmol) Z-MeVal-Oh bolo rozpustené v 250 ml suchého dichlórmetánu. Po pridaní 36,41 ml (262,5) trietylamínu bola reakčná zmes ochladená na -25 °C, bolo k nej pridané 32,37 ml (26,2,5 mmol) pivaloylchloridu. Po 2,5 hodinách miešania bolo do reakčnej zmesi pridané 41,89 (250 mmol) H-Pro-OMe-HCl v 250 ml dichlórmetánu, voľná báza bola uvoľnená prídavkom 36,41 ml (262,5) trietylamínu. Reakčná zmes bola miešaná ďalšie 2 hodiny pri -25 °C a cez noc pri izbovej teplote. Potom bola reakčná zmes nariedená dichlórmetánom a dôkladne premytá nasýteným vodným roztokom NaHCO3 (3X), vodou (IX), 5 % citrónovou kyselinou (3X) a nasýteným roztokom NaCl. Organická fáza bola sušená nad síranom sodným, prefiltrovaná a potom odparená. Odparok (91,24 g) bol miešaný s petroletermom cez noc a odfiltrovaný. Bolo získaných 62,3 g produktu.
b) H-MeVal-Pro-OMe
48,9 g (130 mmol) Z-MeVal-Pro-OMe bolo rozpustené v 490 ml metanolu. Po pridaní 10,9 ml (130 mmol) koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej a 2,43 10 % Pd/C bola reakčná zmes hydrogenovaná. Filtráciou a odparením bolo získaných 36,43 g produktu.
c) Z-Val-MeVal-Pro-OMe
18,1 g (65 mmol) H-MeVal-Pro-OMc, 21,6 g (78 mmol) Z-Val-karboxyanhydrid a 22,8 ml (130 mmol) diizopropyletylamínu bolo miešané 2 dni pri 40 °C. Po odparení DMF bol k odparku pridaný dichlórmetán a organická fáza bola dôkladne premytá nasýteným vodným roztokom NaHCO3 (3X), vodou (IX), 5 % citrónovou kyselinou (3X) a nasýteným roztokom NaCl. Organická fáza bola sušená nad síranom sodným, prefiltrovaná a potom odparená. Produkt (29,3 g) bol získaný ako viskózny olej.
d) H-Val-MeVal-Pro-OMe
29,3 g (61,6 mmol) Z-Val-MeVal-Pro-OMe bolo rozpustené v 230 mi metanolu. Po pridaní 1,15 10 % Pd/C bola reakčná zmes hydrogenovaná. Filtráciou a odparením bolo získaných 21,96 g produktu.
e) Z-Val-Val-MeVal-Pro-OMe
15,29 (61 mmol) Z-Val-OH a 21,96 g (61,6 mmol) H-Val-MeVal-Pro-OMe bolo rozpustených v 610 ml dichlórmetánu a ochladené na 0 °C. Po pridaní 8,16 ml (73,2 mmol) N-metylmorfolinu, 2,77 g (20,3 mmol) HOBt a 11,74 g (61 mmol) EDCI bola reakčná zmes miešaná cez noc pri izbovej teplote, potom bola reakčná zmes nariedená dichlórmetánom a dôkladne premytá nasýteným vodným roztokom NaHCOj (3X), vodou (IX), 5 % citrónovou kyselinou (3X) a nasýteným roztokom NaCl. Organická fáza bola sušená nad síranom sodným, prefiltrovaná a potom odparená do sucha. Bolo získaných 31,96 g produktu.
f) Z-Val-Val-MeVal-Pro-OH
31.96 g (57 mmol) Z-Val-Val-MeVal-Pro-OMe bolo rozpustených v 250 ml metanolu. K roztoku bol pridaný IN roztok LiOH reakčná zmes bola miešaná cez noc pri izbovej teplote. Po pridaní 500 ml vody bola vodná fáza 3-krát vytrepaná etylacetátom. Organická fáza bola sušená nad síranom sodným, prefiltrovaná a potom odparená do sucha. Bolo získaných 30,62 g bieleho pevného produktu.
g) Z-Val-Val-MeVal-Pro-Pro-NHCH(CH3)2 g (3,35 mmol) Z-Val-Val-MeVal-Pro-OH a 0,664 g (3,35 mmol) Η-Pro- NHCH(CH3)2 boli rozpustené v 34 ml suchého dichlórmetánu. Po ochladení na 0 °C bolo pridaných 1,35 ml (12,1 mmol) N-metylmorfolinu, 0,114 g (0,84 mmol) HOBt a 0,645 g (3,35 mmol) EDCI bola reakčná zmes miešaná cez noc pri izbovej teplote. Potom bolo k reakčnej zmesi pridaných 80 ml dichlórmetánu a organická fáza dôkladne premytá nasýteným vodným roztokom NaHCO3 (3X), vodou (IX), 5 % citrónovou kyselinou (3X) a nasýteným roztokom NaCl. Organická fáza bola sušená nad síranom sodným, prefiltrovaná a potom odparená do sucha. Bolo získaných 1,96 g produktu, ktorý bol použitý na ďalší reakčný krok bez ďalšieho čistenia.
h) Me2Val-Val-MeVal-Pro-Pro-NHCH(CH3)2
1.96 g Z-Val-Val-MeVal-Pro-Pro-NHCH(CH3)2 bolo rozpustených v 11 ml MeOH. Pod atmosférou dusíka bolo k roztoku pridaných 0,054 g 10 % Pd/C reakčná zmes bola 4 hodiny hydrogenovaná. Po pridaní 0,86 ml (11,24 mmol) 37 % vodného roztoku formaldehydu a 0,281 g 10 % Pd/C hydrogenácia pokračovala 5 hodín. Filtráciou a odparením bolo získaných 2,77 g surového produktu. Ďalšia purifikácia bola prevedená rozpustením peptidu vo vode a úpravou pH roztoku na 2 a extrakciou vodnej fázy 3-krát etylacetátom. Potom bolo pH vodnej fázy upravené na 8-9 a ďalej bolo extrahované 4-krát dichlórmetánom. Organická fáza bola extrahovaná vodou a sušená nad síranom sodným, prefiltrovaná a potom odparená, bolo získaných 1,37 g čisteného produktu vo forme bielej peny. Ďalšou čistiacou operáciou bola stredne tlaková kvapalinová chromatografia (10 až 50 % A v 10 minútach; 50 - 90 % A v 320 minútach.). Frakcie, ktoré obsahovali produkt, boli kombinované, lyofilizované, znovu rozpustené vo vode a pH roztoku bolo upravené na 9 IN LiOH. Po extrakcii dichlórmetánom bola organická fáza sušená nad síranom sodným, prefiltrovaná a potom odparená do sucha. Lyofilizáciou bolo získaných 500 mg čistého produktu, ktorý bol charakterizovaný MSFAB ([M+H]+ = 593).
Príklad 2B
Me2Val-Val-MeVal-Pro-Pro-NHCH(CH3)3
a) Z-Val-Val-MeVal-Pro-Pro-NHCH(C H3)3 g (3,35 mmol) Z-Val-Val-MeVal-Pro-OH a 0,664 g (3,35 mmol) H-Pro-NHCH(CH3)3 bolo rozpustených v 34 ml suchého dichlórmetánu. Po ochladení na 0 °C bolo pridaných 1,35 ml (12,1 mmol) N-metylmorfolinu, 0,114 g (0,84 mmol) HOBt a 0,645 g (3,35 mmol) EDCI bola reakčná zmes miešaná cez noc pri izbovej teplote. Potom bolo k reakčnej zmesi pridaných 80 ml dichlórmetánu a organická fáza dôkladne premytá nasýteným vodným roztokom NaHCO3 (3X), vodou (IX), 5 % citrónovou kyselinou (3X) a nasýteným roztokom NaCl. Organická fáza bola sušená nad síranom sodným, prefiltrovaná a potom odparená do sucha. Bolo získaných 1,8 g produktu, ktorý bol použitý na ďalší reakčný krok bez ďalšieho čistenia.
b) Me2Val-Val-MeVal-Pro-Pro-NHCH(CH3)3
1,8 g Z-Val-Val-MeVal-Pro-Pro-NHCH(CH3)3 bolo rozpustených v 10 ml MeOH. Pod atmosférou dusíka bolo k roztoku pridaných 0,045 g 10 % Pd/C reakčná zmes bola 4 hodiny hydrogenovaná. Po pridaní 0,86 ml (11,24 mmol) 37 % vodného roztoku formaldehydu a 0,252 g 10 % Pd/C hydrogenácia pokračovala 5 hodín. Filtráciou a odparením bolo získaných 1,82 g surového produktu. Čistiaca operácia bola stredne tlaková kvapalinová chromatografia (10 - 50 % A v 10 minútach.; 50 - 90 % A v 320 minútach.). Frakcie, ktoré obsahovali produkt, boli kombinované, lyofilizované, znovu rozpustené vo vode a pH roztoku bolo upravené na 9 IN LiOH. Po extrakcii dichlórmetánom bola organická fáza sušená nad síranom sodným, prefiltrovaná a potom odparená do sucha. Lyofilizáciou bolo získaných 547 mg čistého produktu, ktorý bol charakterizovaný MS-FAB ([M+H]+ = = 607).
Testy biologickej aktivity Metodológia In vivo
Kombinácia zlúčeniny všeobecného vzorca (I) a paclitaxola, taxotera alebo modifikovaného taxana alebo taxoidného analóga boli ďalej testované rôznymi predklinickými skúškami na in vivo aktivitu, ktorá indikuje klinickú použiteľnosť. Na použitie v tomto vynáleze sú vhodné tieto modelové tumory P 388 (ascites model), LX-1, CX-1 a PC-3 (modely s narubovanými ľudskými tumormi pľúc, hrubého čreva a prostaty). Všeobecne akýkoľvek režim dávkovania, ktorý zaisťuje prijateľnú hodnotu antitumorovej aktivity oboch účinných látok je vhodný. Akýkoľvek spôsob podávania lieku môže byť použitý v kombinovanej terapii podľa tohto vynálezu a môže byť určený použitím techník, ktoré sú známe z tohto odboru. Ďalej lieky môžu byť podávané buď súčasne alebo sekvenčne v akomkoľvek poradí.
Ako P388 tumorový model je použitý rod myších leukemických buniek (pozri Schabel et al. Pharmac. Ther. A, 1: 411 - 435). P388 tumorové bunky použité v tomto vynáleze boli získané od donorových myší peritoneálnym odberom 7 dní po prenesení. 1 xlO6 P388 tumorových buniek boli implantované intraperitoneálne v objeme 0,5 ml do myši.
Typický režim podávania zahŕňal začiatok liečby približne jeden deň po prenesení tumorových buniek ďalšie pokračovanie 5 a 9 deň po prenesení tumorových buniek. Zlúčeniny všeobecného vzorca boli podávané intravenózne (i. v.) a paclitaxol, taxoter alebo modifikovaný taxan alebo taxoidný analóg boli podávané intraperitoneálne (i. p.).
Terapeutické výsledky kombinácie podľa vynálezu proti P388 bunkám sú prezentované v čase vzrastu, čase života, čo zodpovedá relatívnej strednej dobe prežitia (MST) liečené (T) a kontrolné (C) skupiny (doba prežitia neliečených myší bola spravidla v rozmedzí 11-13 dní a je prezentovaná ako % T/C hodnôt. Podľa direktív National Can cer Inštitúte hodnoty % T/C v rozmedzí 128 - 190 % indikujú to, že liek má priemernú až dobrú aktivitu. Ďalej Net log Celí Kill (logaritmus (počtu) zabitých buniek) je použitý na porovnávanie účinnosti rôznych kombinácii a jc vypočítaný takto:
Net log Celí Kjp.KT-Q-dĺžkal.ečby] x_0,322 >
čas zdvojnásobenia kde čas zdvojnásobenia = čas potrebný aby kontrolný tumor zdvojnásobil svoju veľkosť (0,4 dňa)
T a C = relatívna stredná doba prežitia (dni) liečené (T) a kontrolné (C) myši.
Dĺžka liečby liekom 0,322 odvodená konštanta
Pozitívne číslo Net log Celí Kill znamená, že na konci liečby je menej tumorových buniek. Negatívne číslo znamená, že tumor behom liečby stále rástol.
Príklad 3: Kombinovaná liečba použitia, zlúčeniny (xvii) a paclitaxola v modeli P388 tumoru xlO6 P388 tumorových buniek bolo implantované intraperitoneálne v objeme 0,5 ml do myši. Liečba bola začatá približne jeden deň po prenesení tumorových buniek, ďalšie pokračovanie 5 a 9 deň po prenesení tumorových buniek. Zlúčenina (xvii) bola podávaná IV, zatiaľ čo paclitaxol bol podávaný IP. Zlúčenina (xvii) bola podávaná buď v 20, 40 alebo 60 mg/kg a paclitaxol buď v 10, 20 alebo 30 mg/kg. Podávanie bolo sekvenčné s tým, že ako prvá bola podávaná zlúčenina (xvii) a paclitaxol bol podávaný hodinu po nej.
Výsledky:
Výsledky príkladu 3 sú prezentované v tabuľke 1. Dáta z tabuľky 1 ukazujú, že liečba nekombinovaným liekom rezultuje vo výhodnom % T/C 175 % pre zlúčeninu (xvii), čo zodpovedá Net log Celí Kill (NICK) 0,66 pri intravenóznom podávaní v dávke 60 mg/kg, a vo výhodnom % T/C 183 % pre paclitaxol, čo zodpovedá NICK 1,33 pri intrapcritoneálnom podávaní v dávke 10 mg/kg. Pre liečbu kombinovaným liekom dáta v tabuľke 1 ukazujú, že kombinácia 60 mg/kg (xvii) a 20 mg/kg paclitaxola rezultuje v signifikantný vzrast doby prežitia (P hodnota nižšia ako 0,001, určená Mann-Whitney testom a vo výhodnom % T/C 242 %, čo zodpovedá NICK 5,98 s tým, že 38 % zvierat prežilo viac ako 60 dni.
Modely s narubovanými ľudskými tumormi
Ľudské tumory pľúc (LX-1), hrubého čreva (CX-1) a prostaty (PC-3), ktoré vyrástli na atymických bezsrstných myšiach boli prenesené (narubované) na novú myš (príjemca) podľa bežného postupu v tomto odbore. Transplantované časti tumoru boli približne 50 miligramové. Deň prenosu bol označený ako deň 0. Kombinovaná terapia podľa predloženého vynálezu mala určiť antitumorovú aktivitu podávaním lieku myši, ktorá niesla narubovaný tumor.
Pri kombinovanej terapii boli oba lieky podávané intravenózne. Hodinu po podaní zlúčeniny (xvii) bol podaný injektovaný paclitaxol podľa plánu Q2dx3;5,12 a 19.
Inými slovami sa liečba skladala z 23 cyklov začínajúc 5,12 a 19 dňom po implantácii tumoru. Jeden cyklus liečby sa skladal z liečby každý ďalší deň v celkovom počte 3 dní. Optimálna dávka pre jednotlivú dávku podania tak zlúčeniny (xvii), ako i paclitaxola pre LX-1 CX-1 typy testovaných modelov s narubovanými ľudskými tumormi môžeme nájsť v tabuľkách 2-3, nebola určená optimálna dávka pre PC-3 model.
Rozmery tumorov a hmotnosť tumorov boli merané dvakrát týždenne. Objem tumoru bol vypočítaný použitím rozmerov, ktoré boli namerané Vemierovým posuvným meradlom, podľa vzorca:
(dĺžka x šírka2)/2 = mg hmotnosť tumoru
Stredné hmotnosti tumorov (MTW) boli vypočítané pre každú liečenú skupinu a T/C hodnoty boli určené v každej skupine vo vzťahu ku neliečeným kontrolným tumorom.
Výsledky sú ďalej prezentované ako Net log Celí Kill a boli takto vypočítané:
Ν6ΐ10§ω1κπ1=[(]-ο^^ čas zdvojnásobenia
T a C = stredný počet dní, keď liečené i kontrolné tumory dosiahli špecifikovanej veľkosti, v tomto prípade 2000 mm3 Čas zdvojnásobenia = čas nutný aby kontrolný tumor zdvojnásobil svoju veľkosť (0,4 dňa)
0,322 odvodená konštanta
Príklad 4: Kombinovaná liečba použitia, zlúčeniny (xvii) a paclitaxola v LX-1 modeli s narubovanými ľudskými tumormi
Bol použitý opísaný režim dávkovania Q2dx3;5,12 a 19. Paclitaxol bol podávaný iv hodinu po iv podaní zlúčeniny (xvii). Optimálnou dávkou na jednotlivú dávku podania tak zlúčeniny (xvii), ako i pactitaxela bola určená z tabuľky 2.
Príklad 5: Kombinovaná liečba použitia, zlúčeniny (xvii) a paclitaxola v CX-1 modeli s narubovanými ľudskými tumormi
Bol použitý opísaný režim dávkovania Q2dx3;5,12 a 19. Paclitaxol bol podávaný iv hodinu po i v podaní zlúčeniny (xvii). Optimálna dávka na jednotlivú dávku podania tak zlúčeniny (xvii), ako i paclitaxola bola určená z tabuľky
3.
Príklad 6: Kombinovaná liečba použitia zlúčeniny 103793 a paclitaxola v LX-1 modeli s narubovanými ľudskými tumormi
Bol použitý opísaný režim dávkovania Q2dx3;5,12 a 19. Paclitaxol bol podávaný iv hodinu po iv podaní zlúčeniny (xvii). Optimálna dávka na jednotlivú dávku podania tak zlúčeniny (xvii), ako i paclitaxola nebola určená .
Výsledky:
Výsledky získané modelmi s narubovanými ľudskými tumormi, ktoré mali určiť antitumorovú aktivitu kombinovanej terapie podľa predloženého vynálezu, sú prezentované v tabuľkách 2-4. Dáta predstavujú výsledky z predbežných experimentov. Dáta z tabuľky 2 ukazujú, že optimálna kombinácia zlúčeniny (xvii) a paclitaxola je 15 mg/kg a respektíve 10 mg/kg pre model LX-1. Kombinácia rezultuje v regresiu a spomalenie rastu tumoru. Avšak tá istá kombinácia pre model CX-1 nevykazuje v žiadnu výhodu oproti liečbe nekombinovaným liekom, ako to ukazuje tabuľka 3. Pre model PC-3 nebol nájdený žiadny prospešný účinok kombinácie pri porovnaní s liečbou nekombinovaným liekom. Takisto nebola určená optimálna dávka pre jednotlivú dávku podania.
Tabuľka 1
Reakcia na dávku zlúčeniny (xvii) s paclitaxolom alebo bez paclitaxolu proti tumorovému modelu P 338 in vivo
Lieky dávka (ma/kg) otravou % T/C Net log Celí Kill %6Q dn( liečby Celkový počet zvierat
(xvii) IV Paclitaxel IP
0 30 8 204 2,99 3 36
0 20 0 175 0,66 4 24
0 10 0 183 1,33 24
60 0 0 175 0,66 42
40 1 0 0 158 -0,66 2 42
20 0 0 158 -0,66 42
60 30 25 217 3,98 25 24
60 20 4 242 5,98 38 24
60 10 0 204 2,99 24
40 30 2! 212 3,65 8 24
40 20 0 212 3.65 12 24
40 10 0 183 1,33 24
20 30 8 217 3,98 25 24
20 20 0 217 3,98 14 22
20 10 0 183 1,33 4 24
Q 4 x 3;1 paclitaxol injektovaný hodinu po zlúčenine (xvii)
Tabuľka 2
Reakcia na dávku zlúčeniny (xvii) s paclitaxolom alebo bez paclitaxolu proti tumorovému modelu LX-1 in vivo. LX1#16
Lieky kettrasia
Zlúčenina («vn)(lVJ Paclitaxol ίίϊ) otravou MTW d 27 %T.C Ne) Loj Celí KlIJ Celkový fočet CililoCnl bolrá vyl Menia
0 10 10.5 -0,374 6 2
23 0 194 -0.042 6
tí 0 i 12,24 -0.465
7,5 0 19.06 •0.58)
25 10 1,2í 0,382 4
10 17 1,92 0.589 1
7.5 10 4,57 -0,033
*Q2DX3;5, 12, 19 paclitaxol injektovný hodinu po zlúčenine (xvii)
Tabuľka 3
Reakcia na dávku zlúčeniny (xvii) s paclitaxolom alebo bez paclitaxolu proti tumorovému modelu CX-1 in vivo. CXl#9
Lroky
Zlúčenina (xvii) (IV) Paclitaxol (IV) tonuli MTW d 27 %T,C Ne) Log Ceľ Celkový počet čiastočná tpha
0 10 38.12 •0.124 6 2
25 0 83
15 c 52,87 -0,313 6
7 5 0 109.7 6
25 10 47,64 -0,354 (, 2
1í 10 51.6) -039
7.5 10 73,»5 •0,531
*Q2DX3;5, 12, 19 paclitaxol injektovný hodinu po zlúčenine (xvii)
Tabuľka 4
Reakcia na dávku zlúčeniny (xvii) s paclitaxolom alebo bez paclitaxolu proti tumorovému modelu PC-3 in vivo. PX3#8
I.iekv
Zlúčenina l»vii)<lV) PKtiuxvl (IV) Hsrani MTW d 27 «T/C Nel Log Celí Celkový počet čiaioínl íp“ vyliečenia
divia iitijp\a)
0 30 17 2 toxickí s
0 20 2,86 !.♦» J
0 10 55.12 -0.672 2
30 33 o, m 0,967 8 1
50 30 33 0,09 0.603 6
)0 20 0,09 1,07 6 2
10 10 17 0,09 1.98 6 2
*Q2DX3;5, 12, 19 paclitaxol injektovný hodinu po zlúčenine (xvii)
Nasledujúce zlúčeniny boli pripravené, môžu byť pripravené v súlade s príkladmi:
3. Xaa Val Xab Pro Xac
4. Xaa Val Xab Pro Xad
5. Xaa Val Xab Pro Xae
6. Xaa Val Xab Pro Xaf
7. Xaa Val Xab Pro Xag
8. Xaa Val Xab Pro Xah
9. Xaa Val Xab Pro Xai
10. Xaa Val Xab ProXak
11. Xaa Val XabProXal
12. Xaa Val Xab ProXam
13. Xaa Val Xab Pro Xan
14. Xaa Val Xab Pro Xao
15. Xaa Val Xab Pro Xap
16. Xaa Val Xab Pro Xaq
17. Xaa Val Xab Pro Xar
18. Xaa Val Xab Pro Xas
19. Xaa Val Xab Pro Xat
20. Xaa Val Xab Pro Xau
21. Xaa Val XabProXav
22. Xaa Val Xab Pro Xaw
23. Xaa Val Xab Pro Xax
24. Xaa Val Xab Pro Xay
25. Xaa Val Xab Pro Xaz
26. Xaa Val Xab Pro Xba
27. Xaa Val Xab Pro Xbb
28. Xaa Val Xbc Pro Xay
29. Xaa Val Xab Pro Xbd
30. Xaa Val Xab Pro Xbe
31. Xaa Val XabProXbf
32. Xaa Val XabProXbg
33. Xaa Val Xab Pro Xbh
34. Xaa Val Xab Pro Xbl 85. Xaa Val Xab Pro Xbk
36. Xaa Val XabProXbl
37. Xaa Val Xab Pro Xbm
38. Xaa Val Xab Pro Xbn
39. Xaa Val Xab Pro Xbo
40. Xaa Val Xab Pro Xbp
41. Xaa Val Xab ProXbq
42. Xaa Val Xab Pro Xbr
43. Xaa Va1 XabProXbs
44. Xaa Val Xab PYo Xbt
45. Xaa Val Xab Pro Xbu
46. Xaa Val Xab PrO Xbv
47. Xaa Val Xab Pro Xbw 46. Xaa Val Xab Pro Xbx
49. Xaa Val Xab Pro Xby
50. Xaa Val Xab Pro Xbz
51. Xaa Val Xab Pro Xca
52. Xaa Val XabProXcb
53. Xaa Val XabProXcc
54. Xaa Val Xab Pro Xcd
55. Xaa Val Xab Pro Xce
56. Xaa Vai Xab Pro Xcf
57. Xaa Xáf Xab Pro Xay
58. Xaa Val Xab Pro Xch
59. Xaa Val Xab PYo Xci
60. Xaa Val Xab Pro Xck
61. Xaa Val Xab ProXd
62. Xaa Val Xab Pro Xcm
63. Xaa Val Xab Pre Xcn
64. Xaa Val Xab Pro Xco
65. XaaVal Xab ProXcp
66. Xaa Val Xab Pro Xcq
67. Xaa Val Xab Pro Xct 68 Xaa Val Xab Pro Xcs
69. Xaa Val Xab Pro Xct
70. Xaa Val Xab ProXcu
71. Xcw Val XabProXcv
72. Xcx Val Xab Pro Xcv
73. XaaVal Xab ProProXcy
74. Xaa Val Xab Pro Pro Xcz
75. Xaa Val Xda Pro Xcv
76. Xaa Xdb Xab Pro Xcv
77. Xde Val XabProXcv
78. Xaa lle Xab Pro Xcv
79. Xdd Val Xab Pro Xcv
80. Xde Val Xab Pro Xcv
81. Xaa Xdf Xab Pro Xcv
82. Xaa Val Xab ProXcg
83. Xaa Val Xab Pro Pro Xdg
84. Xaa Val Xab Pro Pro Xdh
85. Xaa Val Xab Pro Pro Xdi
86. Xaa Val Xab Pro Pro Xdk
87. Xaa Val Xd1 Fro Xcv
88. Xda Val Xab Pro Xay
89. Xaa Val Xdl Pro Xay
90. Xaa Val Xab Pro Xdm
91. XaaVal XabProXdn
92. Xaa Val Xab ProXdo
93. Xaa Val Xab Pro Xdp
94. XaaVal XabProXdq
95. Xaa Val Xab Pro Pro Xdr
96. Xaa Val Xab Pro Xds
97. XaaVal XbcPIroXcv
98. Xaa lle Xab Pro Xay
99. Xcw Val Xab Pro Xay
100. XaaValXbcProXal
101. Xaa Val Xdl Pro Xal
102. Xaa Xdf Xab Pro Xal
103. Xaa lle Xab Pro Xal
104. Xdd Val Xab Pro Xal
105. Xde Val Xab Pro Xal
106. Xcx Val Xab Pro Xcy
107. Xcw Val Xab Pro Xal
108. Xcx Val Xab Pro Xal
109. Xcw Val Xab Pro Xav
110. Xcx Val Xab Pro Xav
111. Xcw Val Xab Pro Xaw
112. Xcx Val Xab Pro Xaw
113. Xab Val Xab Pro Xay
114. Xab Val Xab Pro Xcv
115. Xab Val Xáb Pro Xal
116. Xab Val Xab Pro Xam
117. Xab Val Xab ProXan
118. Xab Val Xab ProXao
119. Xab Val Xab Pro Xav
120. Xab Val Xab Pro Xaw
121. Xab Val Xab ProXat 122 Xab Val Xab Pro Xau
123. Xab Val Xab ProXbf
124. Xab Val Xab Pro Xbm
125. Xab Val Xab ProXbn
126. Xab Val Xab ProXbo
127. Xab Val Xab Pro Xch
128. Xaa Val Xab Pro Xdt
129. Xaa Val Xab Pro Xdu
130. Xaa Val Xab ProXdv
131. Xaa Val Xab Pro Xdw
132. Xaa Val Xab Pro Xdx
133. Xaa Vai Xab Pro Xdy
134. Xaa Val Xab Pro Xdz
135. Xaa Val Xab Pro Xea
136. Xaa Val Xab Pro Xeb
137. Xaa Val Xab Pro Xec
138. Xaa Val Xab Pro Xed
139. Xaa Val Xab Pro Xef
140. Xaa Val Xab Pro Xeg
141. Xaa Val Xab Pro Xeh
142. Xaa Val Xab Pro Xei
143. Xaa Val Xab Pro Xek
144. Xaa Val Xab Pro Xel
145. Xaa Val Xab Pro Xem
146. Xaa Val Xab Pro Xen
147. Xaa Val Xab Pro Xeo
148 Xaa Val Xab Pro Xep
149 Xaa Val Xab Pro Xeq
150. Xaa Val Xab Pro Xar
151. Xaa Val Xab Pro Xcq
152. Xaa Val Xab Pro Pro Val Phe
153. Xaa Val Xab Pro Xet Val Phe NH2
154. Xaa Val Xer Pro Pro Val Phe NH2
155. Xaa Val Xbc Pro Pro Val Phe NH2
156. Xaa lle Xab Pro Pro Val Phe NH2
157. Xaa Leu Xab Pro Pro Val Phe NH2
158. Xde Val Xab Pro Pro Val Phe NH2
159. Xdd Val Xab Pro Pro Val Phe NH2
160. Xes Val Xab Pro Pro Val Phe NH2
161. Xeu Val Xab Pro Pro Val Phe NH2
162. Xaa Val Xab Pro Pro Phe Phe NH2
163. Xaa Val Xab Pro Pro Val NH2 163. Xaa Val Xab Pro Xav
165. Xaa Val Xab Pro Pro NH2
166. Xaa Val Xab Pro Pro
167. Xaa Val Xab Pro Xew
168. XaaVal XabXex
169. Xdd Val Xab Pro Pro NH2
170. Xaa Xdf Xab Pro Pro NH2
171. Xaa Val Xab Pro Xey
172. XaaVal Xab Pro Xez
173. Xfa Val Xab Pro Pro Val Phe NH2
174. Xaa Val Xab Pro Pro Xfb
175. Xaa Val Xab ProXfc
176. Xaa Val Xab Pro Xfd
177. Xaa Val Xab Pro Xfe
178. XaaVal Xab Pro Xff
179. Xaa Val Xab Pro Xfg
180. Xaa Val Xab Pro Xfh
181. Xaa Val Xab ProXfi
182. Xaa Val Xab Pro Xfj
183. Xaa Val Xdl Pro Pro NH2
184. Xaa Val Xfk Pro Pro Nffe
185. Xaa Val XH Pro Xfh
186. Xaa Val Xfk Pro Xfh
187. Xcx Val Xab ProXfh
188. Xaa Val Xab Pro Pro Xdf Phe NH2
189. Xaa Val Xab Pro Pro Leu Phe NH2
190. Xaa Val Xab Pro Pro lle Phe NHž
Charakterizácia pomocou MS pripravených pôvodných zlúčenín podľa príkladov
Príklad MS-Fab
3. 565
4.
579
5.
6.
7.
6.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
25.
26.
27.
31.
32.
33.
34.
35.
593
607
621
635
607
607
621
649
635
635
635
635
621
621
635
635
633
647
661
623
671
667
661
655
36.
37.
38.
39.
41.
42.
43.
44.
45.
46.
47.
655
669
621
635
649
621
633
667
607
647
668
48.
49.
50.
51.
52.
53.
55.
58.
61.
61.
62.
655
669
685
629
625
721
579
623
597
621
609
63.
64.
65.
66.
67.
68.
69.
70.
625
635
591
715
665
685
591
607
71. 621
74. 706
75. 579
76. 579
77. 579
78. 607
79. 607
80. 607
81. 607
82. 637
83. 692
84. 706
85. 706
88. 706
87. 607
90. 635
92. 659
93. 617
94. 636
95. 678
128. 671
131. 625
139. 625
151. 637
152. 798
153. 810
154. 812
155. 812
156. 812
157. 812
156. 812
159. 611
160. 825
161. 881
162. 645
163. 649
164. 737
165. 550
166. 551
167. 731
168. 550
169. 566
170. 566
171. 635
172. 704
173. 853
174. 740
175. 619
176. 845
177. 649
178. 691
179. 717
180. 641
181. 579
182. 595
183. 566
184. 566
185. 669
186. 656
187. 669
188. 811
189. 812
190. 812
71.
621
Symboly použité v opise zlúčeniny všeobecného vzorca (I) majú nasledujúci význam:
Xaa: N,N-Dimetylvalin
Xab: N-Metylvalin
Xac:
O
Xad:
Xae:
Xaf:
Xag:
Xao:
Xap;
Xaq:
O CK3
Xar:
Xas:
Xat:
Xau:
0 HjC
Xbg:
Xbtu
Xbi:
O
Xbk:
Xbpj
Xbr;
Xbz:
Xca:
S
O CHj
Xcc:
Xcd:
Proline adamantyl(l)aniô
O
Xcf:
xcrs
Xcg:
xch-
Xcs;
Xci:
Xck;
Xel:
XCV:
Xcw:
Xcx:
Xcy:
Xccn:
Xcn:
Xco:
XCp:
Xcq:
Xcz:
Xda:
Xdb:
Sdc:
C HjC
N-Metyl-N-etyl-valín
Ν,Ν-Dietylvalin
o
o
N-Metyl-2-aminobutyryol
2-aminobutyroyl
N,N-Dimetyl-2-aminobutyroyl
Xdd: N,N-Dimetyl-2-tert-butylglycín
Xde: N,N-Dimetyl-izoleucín
Xdf:
Mg:
Xdh:
2-tert.butylglycín
0 CH3
Xdi:
Xdfc:
Xdl:
Xdm:
Xdn:
Xdo:
Xdp:
Xdq:
Xdr:
Xds;
Xdt:
Xdu;
Xdv;
Xdwí
Xôk:
Zelt
Xem:
Xtn:
Xeo:
Xep:
xtz:
Xfa:
Xfb:
Xfd:
Xeq:
Xer:
Xes: Xet:
Xeu:
N-Metylleucín N-Acetyl-N-metylvalín pipccolinic acid N,N-Dibutylvalín
Xev:
Xew:
Xex:
Xfg;
Xfh:
Xfk: N-Etyl Xfl: N-Metyl-3-tert-butylalanín (D) (i·) (xi) topológia: lineárna typ molekuly: peptid opis sekvencie: sekvencia č. 4:
Priemyselná využiteľnosť Xaa Ila Xaa Pro Xaa 1 c
Predložený vynález poskytuje spôsob prípravy lieku a
spôsob liečby rakoviny, ktorý zahŕňa kombinovanú terapiu (2) Informácie pre sekvenciu č. 6:
s použitím prvej zlúčeniny, čo sú taxoidné analógy a druhej (i) charakteristika sekvencie
zlúčeniny, ktorá je reprezentovaná zlúčeninou všeobecného (A) dĺžka: 7 aminokyselín
vzorca (1). (B) typ: aminokyselina
(C) počet vlákien
Zoznam sekvencií (D) topológia: lineárna
(ii) typ molekuly: peptid
Informácie pre sekvenciu č. 1: (xi) opis sekvencie: sekvencia č. 6:
(i) charakteristika sekvencie
(A) dĺžka: 5 aminokyselín Xaa Val Xaa Pro Pro Val Phe
(B) typ: aminokyselina 1 5
(C) počet vlákien
(D) topológia: lineárna (2) Informácie pre sekvenciu č. 7:
(ii) typ molekuly: peptid (i) charakteristika sekvencie
(xi) opis sekvencie: sekvencia č. 1: (A) dĺžka: 7 aminokyselín
(B) typ: aminokyselina
Xaa Val Xaa Pro Xaa (C) počet vlákien
1 5 (D) topológia: lineárna
(ii) typ molekuly: peptid
Informácie pre sekvenciu č. 2: (xi) opis sekvencie: sekvencia č. 7:
(i) charakteristika sekvencie
(A) dĺžka: 5 aminokyselín Xaa Val Xaa Pro Xaa Val Phe
(B) typ: aminokyselina 1 5
(C) počet vlákien
(D) topológia: lineárna (2) Informácie pre sekvenciu č. 8:
(ii) typ molekuly: peptid (i) charakteristika sekvencie
(xi) opis sekvencie: sekvencia č. 2: (A) dĺžka: 7 aminokyselín
(B) typ: aminokyselina
Xaa Xaa Xaa Pro Xaa (C) počet vlákien
1 5 (D) topológia: lineárna
(ii) typ molekuly: peptid
(2) Informácie pre sekvenciu č. 3: (xi) opis sekvencie: sekvencia č. 8:
(i) charakteristika sekvencie
(A) dĺžka: 5 aminokyselín Xaa íle Xaa Pro Pro Val Phe
(B) typ: aminokyselina 1 5
(C) počet vlákien
(D) topológia: lineárna (2) Informácie pre sekvenciu č. 9:
(ii) typ molekuly: peptid (i) charakteristika sekvencie
(xi) opis sekvencie: sekvencia č. 3: (A) dĺžka: 7 aminokyselín
(B) typ: aminokyselina
Xaa Val Xaa Pro Xaa Pro (C) počet vlákien
1 5 (D) topológia: lineárna
(n) typ molekuly: peptid
(2) Informácie pre sekvenciu č. 4: (xi) opis sekvencie: sekvencia č. 9:
(i) charakteristika sekvencie
(A) dĺžka: 5 aminokyselín Xaa Leu Xaa Pro Pro Val Phe
(B) typ: aminokyselina 1 5
(C) počet vlákien
(D) topológia: lineárna (2) Informácie pre sekvenciu č. 10:
(ii) typ molekuly: peptid (i) charakteristika sekvencie
(xi) opis sekvencie: sekvencia č. 4: (A) dĺžka: 7 aminokyselín
(B) typ: aminokyselina
Xaa Xaa Xaa Pro Xaa (C) počet vlákien
1 5 (D) topológia: lineárna
(ii) typ molekuly: peptid
(2) Informácie pre sekvenciu č. 5: (xi) opis sekvencie: sekvencia č. 10:
(i) charakteristika sekvencie
(A) dĺžka: 5 aminokyselín Xaa Val Xaa Pro Pro Phe Phe
(B) typ: aminokyselina 1 5
(C) počet vlákien
(2) Informácie pre sekvenciu č. 11:
(1) charakteristika sekvencie (A) dĺžka: 6 aminokyselín (B) typ: aminokyselina (C) počet vlákien (D) topológia: lineárna (ii) typ molekuly: peptid (xi) opis sekvencie: sekvencia č. 11:
Xaa Val Xaa Pro Pro Val
5 (2) Informácie pre sekvenciu č. 12:
(1) charakteristika sekvencie (A) dĺžka: 5 aminokyselín (B) typ: aminokyselina (C) počet vlákien (D) topológia: lineárna (ii) typ molekuly: peptid (xi) opis sekvencie: sekvencia č. 12:
Xaa Val Xaa Pro Pro
5 (2) Informácie pre sekvenciu č. 13:
(1) charakteristika sekvencie (A) dĺžka: 4 aminokyselín (B) typ: aminokyselina (C) počet vlákien (D) topológia: lineárna (ii) typ molekuly: peptid (xi) opis sekvencie: sekvencia č. 13:
Xaa Val Xaa Xaa (2) Informácie pre sekvenciu č. 14:
(1) charakteristika sekvencie (A) dĺžka: 5 aminokyselín (B) typ: aminokyselina (C) počet vlákien (D) topológia: lineárna (ii) typ molekuly: peptid (xi) opis sekvencie: sekvencia č. 14:
Xaa Xaa Xaa Pro Pro
5 (2) Informácie pre sekvenciu č. 15:
(1) charakteristika sekvencie (A) dĺžka: 7 aminokyselín (B) typ: aminokyselina (C) počet vlákien (D) topológia: lineárna (ii) typ molekuly: peptid (xi) opis sekvencie: sekvencia č. 15: Xaa Val Xaa Pro Pro Xaa Phe
5 (2) Informácie pre sekvenciu č. 16:
(i) charakteristika sekvencie (A) dĺžka: 7 aminokyselín (B) typ: aminokyselina (C) počet vlákien (D) topológia: lineárna (ii) typ molekuly: peptid (xi) opis sekvencie: sekvencia č. 16:
Xaa Val Xaa Pro Pro Leu Phe
5 (2) Informácie pre sekvenciu č. 17:
(i) charakteristika sekvencie (A) dĺžka: 6 aminokyselín (B) typ: aminokyselina (C) počet vlákien (D) topológia: lineárna (iii) typ molekuly: peptid (xi) opis sekvencie: sekvencia č. 17:
Xaa Val Xaa Pro Pro íle Phe
5
Ekvivalenty
Odborníci z tejto oblasti techniky rozpoznávajú a môžu zistiť použitie nie len rutinným experimentovaním mnoho ekvivalentov k špecifickým prevedeniam, ktoré sú opísané vo vynáleze. Tieto ekvivalenty sú tiež zahrnuté v nárokoch.

Claims (18)

1. Farmaceutický prostriedok, vyznačuj úci sa tým, že obsahuje účinné množstvo prvej zlúčeniny, ktorá sa vyberie z paclitaxola, taxotera modifikovaného taxana alebo taxoidných analógov; a množstvo druhej zlúčeniny účinné na zaistenie synergického účinku všeobecného vzorca (1)
R1 R2 N-CHX-CO-A-B-D-(E)5-(F), -(G) u -K (I), kde
R1 je alkyl, cykloalkyl, alkylysulfonyl, fluóroalkyl alebo aminosulfonyl;
R2 je vodík, alkyl, fluóroalkyl alebo cykloalkyl;
R’-N-R2 môžu spoločne tvoriť pyrrolidinový alebo piperidinový segment;
A je valyl, izoleucyl, leucyl, allo-izoleucyl, 2,2-dimetylglycyl, 2-cyklopropylglycyl, 2-cyklopentylglycyl, 3-tert-butylalanyl, 2-tert-butylglycyl, 3-cyklohexylalanyl, 2-etylglycyl, 2-cyklohexylglycyl, norleucylové alebo norvalylové segmenty;
B je N-alkyl-valyl, -norvalyl, -leucyl, -izoleucyl, -2-tert-butylglycyl, -3-tert-butylalanyl, -2-etylglycyl, -2-cyklopropylglycyl, -2-cyklopentylglycyl, norleucylové alebo -2-cykíohexylglycylové segmenty,
D je prolyl, homoprolyl, hydroxyprolyl, 3,4-dehydroprolyl, 4-fluóroprolyl, 3-metylprolyl, 4-metylprolyl, 5-metylprolyl, azetidin-2-karbonyl, 3,3-dimetylprolyl, 4,4-difluóroprolyl, oxazolidin-4-karbonyl alebo tiazolidin-4-karbonylové segmenty;
E je prolyl, homoprolyl, hydroxyprolyl, 3,4-dehydroprolyl, 4-fluóroprolyl, 3-metylprolyl, 4-metylpropyl, 5-metylprolyl, azetidin-2-karbonyl, 3,3-dimetylprolyl, 4,4-difluóroprolyl, oxazolidin-4-karbonyl alebo tiazolidin-4-karbonyl-segmenty;
F a G sú nezávisle od seba vybrané zo skupiny, ktorá obsahuje prolyl, homoprolyl, hydroxyprolyl, tiazolidinyl-4-karbonyl, í-aminopentyl-1-karbonyl, valyl, 2-tert-butylglycyl, izoleucyl, leucyl, 3-cyklohexylalanyl, fenylalanyl, N-metylfenylalanyl, tetrahydroxychinolyl-2-histidyl, 1 -aminoindyl-1-karbonyl, 3-pyridylalanyl, 2-cyklohexylglycyl, norleucyl, norvalyl, neopentylglycyl, trytofanyl, glycyl, 2,2-dimetylglycyl alanyl, β-alanylové a 3-naftylalanylové segmenty;
X je vodík, alkyl, cykloalkyl (ako je C3-C5), -CFL-cyklohexyl alebo arylalkyl;
s, t a u sú nezávisle od seba 0 alebo 1; a
K je hydroxy, alkoxy, fenoxy, benzyloxy alebo substituovaná alebo nesubstituovaná amino skupina.
a ich soli s fyziologicky prijateľnými kyselinami.
2. Farmaceutický prostriedok podľa nároku 1 vyznačujúci sa tým, že ďalej obsahuje farmaceutický prijateľný nosič.
3. Farmaceutický prostriedok podľa nároku 1 vyznačujúci sa tým, že v zlúčenine všeobecného vzorca (I) je K substituovaná aminoskupina všeobecného vzorca R5-N-R6, kde.
R5 je vodík, alebo hydroxy, alebo Cj.7 alkoxy, alebo benzyloxy, alebo fenyloxy, alebo C]_7 lineárny alebo rozvetvený alkyl (ktorý môže byť substituovaný jedným alebo viacerými atómami fluóru), C!.12 lineárny alebo rozvetvený hydroxyalkyl, alebo C3.lo cykloalkyl, alebo benzyl (ktorý môže byť substituovaný až troma substituentmi, ktoré sú nezávisle od seba CF3 nitro skupina, C,,7 alkylsulfonyl, C]_4 alkoxy, fenoxy, benzoxy, halogén, C].4-alkyl, kyano skupina, hydroxy, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr, alebo COONH2);
RĎ je vodík, alebo Cl 7 lineárny alebo rozvetvený alkyl (ktorý môže byť substituovaný jedným alebo viacerými atómami fluóru), C|.|2 lineárny alebo rozvetvený hydroxyalkyl, alebo C3.|0 cykloalkyl, alebo -(CH2) vC3.7-cykloalkyl (v = 0,1,2, alebo 3), alebo norefedryl, alebo norpseudoefedryl; alebo chinolyl, alebo pyrazyl, alebo -CH2-benzimidazolyl, alebo (l)-adamantyl, alebo (2)-adamantyl- alebo -CHj-adamantyl, alebo alfa-metyl-benzyl, alebo alfa-dimetylbenzyl, alebo (CH2) v -fenyl (v = 0,1,2, alebo 3; ktorý môže byť substituovaný až troma substituentmi, ktoré sú nezávisle od seba CF3, nitro skupina, C|.7 alkylsulfonyl, C|.4 alkoxy, fenoxy, benzoxy, halogén, C^-alkyl, ktorý môže tvoriť cyklický systém, kyano skupina, hydroxy, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr, alebo COONHj) alebo -(CH2) m -naftyl (m = O alebo 1); alebo -(CH2) w benzhydryl (w = O, 1, alebo 2); alebo bifenyl alebo pikolyl alebo benzotiazolyl alebo benzoizotiazolyl alebo benzopyrazolyl alebo benzoxazolyl alebo -(CH2) m -fluórenyl (m = = 0 alebo 1); alebo pyrimidyl alebo -(CH2) m -indanyl (m = = 0 alebo 1); alebo -(CH2CH2O) y-CH3 (y = 0,1,2,3,4, alebo 5), alebo -(CH2CH2O) y-CH2CH3 (y = 0, 1,2,3,4, alebo 5), alebo NH-C6H5 (ktorý môže byť substituovaný až dvoma substituentmi, ktoré sú nezávislé od seba CF3, nitro skupina, C,.7 alkylsulfonyl, Cj_4 alkoxy, fenoxy, benzoxy, halogén, C|.4-alkyl, ktorý môže tvoriť cyklický systém, kyano skupina, hydroxy, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr, alebo COONH2), alebo -NCH3-C6H5 alebo -NH-CH2-C6H5 alebo -NCH3 CH2 C6H5 alebo 5-členný heteroaryl, ktorý môže byť substituovaný až dvoma substituentmi, ktorc sú nezávislé od seba CF3, nitro skupina, tiometyl, tioetyl, C3.6-cykloalkyl, -CH2-COOEt, C3.4-alkylenová skupina, ktorá tvorí bicyklický systém s heterocyklom, fenyl; alebo -CHR7 -5-členný heteroaryl (ktorý môže byť substituovaný až dvoma substituentmi, ktoré sú nezávislé od seba CF3, nitro skupina, kyano skupina, halogén, COOMe, COOEt, COOiPr, CONH2, Ci_4-alkyl, Ci_4-alkoxy, fenyl, benzyl, naftyl, alebo Cb7 alkylsulfonyl, [R7 = vodík, lineárny alebo rozvetvený C|_5 alkyl, benzyl; alebo R7 a R5 spoločne tvoria skupinu -(CHj)3- alebo -(CH2) 4-].
4. Prostriedok podľa nároku 3 vyznačujúci sa tým, že v zlúčenine všeobecného vzorca (I) sú R1 a R2 metyl alebo etyl; X je izopropyl, sec-butyl alebo tert-butyl; s je 1; t a u sú 0; A je valyl, 2-etylglycyl, izoleucyl alebo 2-tert-butylglycyl; B je N-metylvalyl, I-izoleucyl alebo -2-tert-butylglycyl; D je prolyl, 4-fluórprolyl, tiazolidinyl-4-karbonyl alebo 3,4 dehydroprolyl; E je prolyl, 4-fluórprolyl, tiazolidinyl-4-karbonyl, homoprolyl, 3,4-de hydroprolyl alebo hydroxyprolyl; a K je substituovaná alebo nesubstituovaná amino skupina všeobecného vzorca R3-N-R6, kde R5 je vodík alebo CrC5 alkoxy a R6 je CrC12 lineárna alebo rozvetvená alkyl skupina, ktorá je reprezentovaná napr. nasledujúcimi monovaletnými radikálmi:
-C(CH3) 3 čo je tert-butyl;
-C-CHjCH3 čo je 1,1-dimetylpropyl;
I (CH3)2
-C(CHjCH3) čo je 1-metyl-1-etylpropyl;
I ch3 -CH-C(CH3)3 čo je (S)- alebo (R)-l-metyl-2,2dimetyl-propyl
I ch3 -CH-C(CH3)2 čo je (S)- alebo (R)-l-etyl-2-metyl-propyl
I
CjH5
-CH-C(CH3)2 čo je l-izopropyl-2-metyl-propyl; alebo
I
CH(CH3)j -C(CH3)2-CH(CH3)2 čo je l,l-dimetyl-2-metyl-propyl; -C(CH3)2> čo je izopropyl;
-CH(CH3)-CH2CH3, sec. Butyl [(S) alebo (R)]; alebo -CH(CH3)-CH(CH3)j, čo je 1,2-dimetylpropyl.
5. Prostriedok podľa nároku 4 vyznačujúci sa tým, že monovalentný radikál je -C(CH3)3> čo je terc-butyl.
6. Prostriedok podľa nároku 3 vyznačujúci sa tým, že v zlúčenine všeobecného vzorca (I) sú R1 a R2 metyl alebo etyl; X je izopropyl, sec-butyl alebo tertbutyl; s je 1; t a u sú 0; A je valyl, 2-etylglycyl, izoleucyl alebo 2-tert-butylglycyl; B je N-metylvalyl, 2-etylglycyl, 1-izoleucyl alebo -2-tert-butylglycyl; D je prolyl, 4-fluórprolyl, tiazolidinyl-4-karbonyl alebo 3,4 dehydroprolyl; E je prolyl, 4-fluórprolyl, tiazolidinyl-4-karbonyl, homoprolyl, 3,4-dehydroprolyl alebo hydroxyprolyl; a K je substituovaná alebo nesubstituovaná amino skupina všeobecného vzorca R!-N-R6, kde R5 je vodík alebo CrC5 alkoxy a R6 je vybraný zo skupiny monovalentných radikálov, ako sú (CH2) v-fenyl, kde v = 1, alebo α,α-dimetylbenzyl.
7. Prostriedok podľa nároku 3 vyznačujúci sa tým, že v zlúčenine všeobecného vzorca (I) sú R1 a R2 metyl alebo etyl; X je izopropyl, sec-butyl alebo tertbutyl; s je 1; t a u sú 0; A je valyl, 2-etylglycyl, izoleucyl alebo 2-tert-butylglycyl; B je N- metylvalyl, 2-etylglycyl, 1-izoleucyl alebo -2-tert-butylglycyl; D je prolyl, 4-fluórprolyl, tiazolidinyl-4-karbonyl alebo 3,4 dehydroprolyl; E je prolyl, 4-fluórprolyl, tiazolidinyl-4-karbonyl, homoprolyl, 3,4-dehydroprolyl alebo hydroxyprolyl; a K je substituovaná amino skupina všeobecného vzorca R5-N-R6, kde R5 je vodík alebo CrC4 alkoxy a R6 je CrC12 lineárna alebo rozvetvená hydroxyalkyl skupina.
8. Prostriedok podľa nároku 6 vyznačujúci sa tým, že R6 je 3-hydroxy-1,1-dimetylpropyl.
9. Prostriedok podľa nároku 3 vyznačujúci sa tým, že v zlúčenine všeobecného vzorca (I) sú R1 a R2 metyl alebo etyl; X je izopropyl, sec-butyl alebo tert-butyl; s je 1; t a u sú 0; A je valyl, 2-etylglycyl, izoleucyl alebo 2-tert-butylglycyl; B je N-metylvalyl, 2-etylglycyl, 1-izoleucyl alebo -2-tert-butylglycyl; D je prolyl, 4-fluórprolyl, tiazolidinyl-4-karbonyl alebo 3,4 dehydroprolyl; E je prolyl, 4-fluórprolyl, tiazolidinyI-4-karbonyl, homoprolyl, 3,4-dehydroprolyl alebo hydroxyprolyl; a K je substituovaná alebo nesubstituovaná amino skupina všeobecného vzorca R5-N-R6, kde R5 je vodík alebo CrC4 alkoxy a R6 je C3-Cl0 cykloalkyl skupina, ktorá sa vyberie zo skupiny obsahujúcej (l)-adamantyl, alebo (2)-adamantyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cyklohexyl, alebo 1-metylcyklopentyl, alebo 1-metylcyklohexyl a [3.3.0]okta-1 -yl).
10. Prostriedok podľa nároku 3 vyznačujúci sa tým, že v zlúčenine všeobecného vzorca (I) sú R1 a R2 metylové skupiny; X je izopropyl; s je 1; t a u sú 0; A je valyl; B je N- metylvalyl; D je prolyl; E je prolyl; R5 benzyl a R6 je vodík.
11. Prostriedok podľa nároku 3 vyznačujúci sa tým, že prvou zlúčeninou je paclitaxol a druhou zlúčeninou je zlúčenina všeobecného vzorca (I), kde R1 a Rx sú metylové skupiny; X je izopropyl; s je 1; t a u sú 0; A je valyl; B je N-metylvalyl; D je prolyl; E je prolyl; R5 benzyl a R6 je vodík.
12. Prostriedok podľa nároku 3 vyznačujúci sa tým, že v zlúčenine všeobecného vzorca (I) sú R1 a R2 metyl alebo etyl; X je izopropyl, sec-butyl alebo tertbutyl; s je 1; t a u sú 0; A je valyl, izoleucyl, 2-etylglycyl alebo 2-tert-butylglycyl; B je N-metylvalyl, 2-etylglycyl, 1-izoleucyl alebo -2-tert-butylglycyl; D je prolyl, 4-fluórprolyl, tiazolidinyl-4-karbonyl alebo 3,4 dehydroprolyl; E je prolyl, 3-metylprolyl, 4-fluórprolyl, tiazolidinyl-4-karbonyl, homoprolyl, 3,4-dehydroprolyl alebo hydroxyprolyl.
13. Použitie prvej zlúčeniny, vybratej z paclitaxola, taxotera a modifikovaného taxana alebo taxoidných analógov a druhej zlúčeniny v množstve účinnom na zaistenie synergického účinku, ktorou je zlúčenina všeobecného vzorca (I) podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 12 na výrobu lieku na liečbu rakoviny cicavcov, napríklad na liečbu rakoviny pľúc, prsníka, hrubého čreva, močového mechúra, konečníka, sliznice maternice a hematologickej zhubnosti.
14. Použitie prvej zlúčeniny, vybratej z paclitaxola, taxotera a modifikovaného taxana alebo taxoidných analógov na výrobu lieku na kombinovanú terapiu v spojení s druhou zlúčeninou v množstve účinnom na zaistenie synergického účinku, ktorou je zlúčenina všeobecného vzorca (1) podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 12 na liečbu rakoviny cicavcov, napríklad na liečbu rakoviny pľúc, prsníka, hrubého čreva, močového mechúra, konečníka, sliznice maternice a hematologickej zhubnosti.
15. Použitie podľa nároku 14, v ktorom liečba v kombinovanej terapii zahrnuje podávanie prvej zlúčeniny vybranej z paclitaxola, taxotera a modifikovaného taxana alebo taxoidných analógov ako prvej, po ktorom nasleduje podávanie zlúčeniny všeobecného vzorca (I).
16. Prostriedok podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že zlúčenina všeobecného vzorca (I) je vybratá zo skupiny pozostávajúcej z:
(vil) (viii) (Kíl) (xvi)
17. Použitie podľa nároku 14, v ktorom liečba v kombinovanej terapii zahrnuje podávanie zlúčeniny všeobecného vzorca (I) ako prvej, po ktorom nasleduje podávanie prvej zlúčeniny vybratej z paclitaxola, taxotera a modifikovaného taxana alebo taxoidných analógov.
18. Použitie podľa ktoréhokoľvek z nárokov 13 až 14, v ktorom liečba alebo kombinovaná terapia zahrnuje simultánne podávanie zlúčeniny všeobecného vzorca (I) a prvej zlúčeniny vybratej z paclitaxola, taxotera a modifikovaného taxana alebo taxoidných analógov.
SK1251-99A 1997-03-13 1998-03-09 Dolastatin-15 deriváty v kombinácii s taxanmi a ich použitie SK285133B6 (sk)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US08/819,101 US6103698A (en) 1997-03-13 1997-03-13 Dolastatin-15 derivatives in combination with taxanes
PCT/US1998/004594 WO1998040092A1 (en) 1997-03-13 1998-03-09 Dolastatin-15 derivatives in combination with taxanes

Publications (2)

Publication Number Publication Date
SK125199A3 SK125199A3 (en) 2000-08-14
SK285133B6 true SK285133B6 (sk) 2006-07-07

Family

ID=25227196

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SK1251-99A SK285133B6 (sk) 1997-03-13 1998-03-09 Dolastatin-15 deriváty v kombinácii s taxanmi a ich použitie

Country Status (30)

Country Link
US (2) US6103698A (sk)
EP (1) EP0981358B1 (sk)
JP (1) JP2001514659A (sk)
KR (1) KR100555604B1 (sk)
CN (1) CN1157223C (sk)
AT (1) ATE241376T1 (sk)
AU (1) AU728027B2 (sk)
BG (1) BG64338B1 (sk)
BR (1) BR9808249A (sk)
CA (1) CA2282720C (sk)
CO (1) CO4940498A1 (sk)
CZ (1) CZ293905B6 (sk)
DE (1) DE69815100T2 (sk)
DK (1) DK0981358T3 (sk)
ES (1) ES2200317T3 (sk)
HK (1) HK1026851A1 (sk)
HR (1) HRP980125A2 (sk)
HU (1) HU228860B1 (sk)
ID (1) ID23900A (sk)
IL (2) IL131597A0 (sk)
NO (1) NO323894B1 (sk)
NZ (1) NZ337416A (sk)
PL (1) PL197834B1 (sk)
PT (1) PT981358E (sk)
RU (1) RU2218174C2 (sk)
SK (1) SK285133B6 (sk)
TR (1) TR199902244T2 (sk)
TW (1) TWI277426B (sk)
WO (1) WO1998040092A1 (sk)
ZA (1) ZA982093B (sk)

Families Citing this family (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20010009901A1 (en) 1996-12-11 2001-07-26 Basf Aktiengesellschaft Germany Antineoplastic peptides
AU775373B2 (en) 1999-10-01 2004-07-29 Immunogen, Inc. Compositions and methods for treating cancer using immunoconjugates and chemotherapeutic agents
US20050192443A1 (en) * 2000-11-08 2005-09-01 Lorus Therapeutics Inc. Biological response modifier for the treatment of cancer
AU2002214876A1 (en) * 2000-11-08 2002-05-21 Lorus Therapeutics Inc. Combination preparation of a biological response modifier and an anticancer agent and uses thereof
CA2607940C (en) 2005-05-18 2009-12-15 Aegera Therapeutics Inc. Bir domain binding compounds
BRPI0711591A2 (pt) 2006-05-16 2011-11-16 Aegera Therapeutics Inc composto de ligação de domìnio bir da iap
TW201129384A (en) 2010-02-10 2011-09-01 Immunogen Inc CD20 antibodies and uses thereof
SG182724A1 (en) 2010-02-12 2012-08-30 Pharmascience Inc Iap bir domain binding compounds
KR20230019120A (ko) * 2020-06-03 2023-02-07 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 고난도 서열의 효율적 펩티드 축합법
CA3230737A1 (en) 2021-09-03 2023-03-09 Toray Industries, Inc. Pharmaceutical composition for cancer treatment and/or prevention

Family Cites Families (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4816444A (en) * 1987-07-10 1989-03-28 Arizona Board Of Regents, Arizona State University Cell growth inhibitory substance
US5676978A (en) 1989-02-14 1997-10-14 Amira, Inc. Methods of inhibiting undesirable cell growth using a combination of a cyclocreatine compound and a hyperplastic inhibitory agent
US4879278A (en) 1989-05-16 1989-11-07 Arizona Board Of Regents Isolation and structural elucidation of the cytostatic linear depsipeptide dolastatin 15
US5278324A (en) * 1990-08-28 1994-01-11 Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. Water soluble derivatives of taxol
MX9102128A (es) 1990-11-23 1992-07-08 Rhone Poulenc Rorer Sa Derivados de taxano,procedimiento para su preparacion y composicion farmaceutica que los contiene
DE69230824T2 (de) 1991-08-09 2000-07-27 Teikoku Hormone Mfg Co Ltd Neue tetrapeptidderivate
US5250683A (en) * 1991-09-23 1993-10-05 Florida State University Certain substituted taxanes and pharmaceutical compositions containing them
US5227400A (en) * 1991-09-23 1993-07-13 Florida State University Furyl and thienyl substituted taxanes and pharmaceutical compositions containing them
US5272171A (en) * 1992-02-13 1993-12-21 Bristol-Myers Squibb Company Phosphonooxy and carbonate derivatives of taxol
FR2688518B1 (fr) * 1992-03-13 1994-05-06 Rhone Poulenc Rorer Sa Procede de preparation de derives du taxane.
US5831002A (en) * 1992-05-20 1998-11-03 Basf Aktiengesellschaft Antitumor peptides
US5248796A (en) * 1992-06-18 1993-09-28 Bristol-Myers Squibb Company Taxol derivatives
US5254580A (en) * 1993-01-19 1993-10-19 Bristol-Myers Squibb Company 7,8-cyclopropataxanes
FR2697752B1 (fr) * 1992-11-10 1995-04-14 Rhone Poulenc Rorer Sa Compositions antitumorales contenant des dérivés du taxane.
DE69329425T2 (de) * 1992-12-16 2001-01-18 Basf Ag Dolastatin analog
US5484612A (en) * 1993-09-22 1996-01-16 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Method of treating a mammal having a solid tumor susceptible to treatment with cisplatin
CA2129282A1 (en) 1993-09-29 1995-03-30 George Weber Method for the treatment of neoplastic disease utilizing taxol and tiazofurin
US5447936A (en) * 1993-12-22 1995-09-05 Bionumerik Pharmaceuticals, Inc. Lactone stable formulation of 10-hydroxy 7-ethyl camptothecin and methods for uses thereof
US5565478A (en) * 1994-03-14 1996-10-15 The United States Of America As Represented By The Department Of Health & Human Services Combination therapy using signal transduction inhibitors with paclitaxel and other taxane analogs
US5494930A (en) * 1994-06-02 1996-02-27 Shimizu; Yuzuru Caribenolide I
US5525613A (en) * 1994-06-16 1996-06-11 Entropin, Inc. Covalently coupled benzoylecgonine ecgonine and ecgonidine
US5504191A (en) * 1994-08-01 1996-04-02 Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University Human cancer inhibitory pentapeptide methyl esters
US5530097A (en) * 1994-08-01 1996-06-25 Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University Human cancer inhibitory peptide amides
US5543423A (en) * 1994-11-16 1996-08-06 Vertex Pharmaceuticals, Incorporated Amino acid derivatives with improved multi-drug resistance activity
AU699442B2 (en) 1994-12-15 1998-12-03 Baker Norton Pharmaceuticals, Inc. Method and composition for reducing tumor development with a combination of a taxane compound and a tellurium and/or selenium compound

Also Published As

Publication number Publication date
TWI277426B (en) 2007-04-01
PT981358E (pt) 2003-09-30
DE69815100T2 (de) 2004-02-05
AU728027B2 (en) 2001-01-04
NO994408L (no) 1999-11-10
BG64338B1 (bg) 2004-10-29
CN1157223C (zh) 2004-07-14
BG103728A (en) 2000-04-28
CA2282720A1 (en) 1998-09-17
RU2218174C2 (ru) 2003-12-10
ATE241376T1 (de) 2003-06-15
DE69815100D1 (de) 2003-07-03
US6103698A (en) 2000-08-15
NO323894B1 (no) 2007-07-16
HK1026851A1 (en) 2000-12-29
HUP0001381A2 (hu) 2000-10-28
US6632795B1 (en) 2003-10-14
NO994408D0 (no) 1999-09-10
IL131597A0 (en) 2001-01-28
KR100555604B1 (ko) 2006-03-03
WO1998040092A1 (en) 1998-09-17
CA2282720C (en) 2009-12-29
EP0981358B1 (en) 2003-05-28
PL335579A1 (en) 2000-05-08
ID23900A (id) 2000-05-25
AU6694598A (en) 1998-09-29
IL131597A (en) 2006-06-11
DK0981358T3 (da) 2003-09-22
BR9808249A (pt) 2000-05-16
HU228860B1 (en) 2013-06-28
CO4940498A1 (es) 2000-07-24
HRP980125A2 (en) 1999-02-28
SK125199A3 (en) 2000-08-14
HUP0001381A3 (en) 2001-12-28
KR20000076211A (ko) 2000-12-26
NZ337416A (en) 2001-05-25
CZ321199A3 (cs) 2000-02-16
TR199902244T2 (xx) 1999-12-21
EP0981358A1 (en) 2000-03-01
ES2200317T3 (es) 2004-03-01
ZA982093B (en) 1999-09-12
CZ293905B6 (cs) 2004-08-18
JP2001514659A (ja) 2001-09-11
PL197834B1 (pl) 2008-04-30
CN1252728A (zh) 2000-05-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ286752B6 (en) Peptide and pharmaceutical preparation containing thereof
PL185763B1 (pl) Nowe peptydy stanowiące pochodne dolastatyny, ichzastosowanie w medycynie oraz kompozycja farmaceutyczna
IL105651A (en) History of dolastatin preparation and pharmaceutical preparations containing them
SK285133B6 (sk) Dolastatin-15 deriváty v kombinácii s taxanmi a ich použitie
EP1021200B1 (en) Methods and compositions for treating rheumatoid arthritis
IL166853A (en) Antineoplastic peptides, their preparation and various uses thereof
US20010009901A1 (en) Antineoplastic peptides
AU775090B2 (en) Antineoplastic peptides
MXPA99008066A (en) Dolastatin-15 derivatives in combination with taxanes
CZ20001211A3 (cs) Prostředky pro léčení revmatoidní artritidy

Legal Events

Date Code Title Description
PC4A Assignment and transfer of rights

Owner name: ABBVIE DEUTSCHLAND GMBH & CO. KG, WIESBADEN, DE

Free format text: FORMER OWNER: ABBOTT GMBH & CO. KG, WIESBADEN, DE

Effective date: 20141020

MM4A Patent lapsed due to non-payment of maintenance fees

Effective date: 20150309