BG64338B1 - Производни на доластатин-15 в комбинация с таксани - Google Patents

Производни на доластатин-15 в комбинация с таксани Download PDF

Info

Publication number
BG64338B1
BG64338B1 BG103728A BG10372899A BG64338B1 BG 64338 B1 BG64338 B1 BG 64338B1 BG 103728 A BG103728 A BG 103728A BG 10372899 A BG10372899 A BG 10372899A BG 64338 B1 BG64338 B1 BG 64338B1
Authority
BG
Bulgaria
Prior art keywords
compound
formula
pro
tert
carbonyl
Prior art date
Application number
BG103728A
Other languages
English (en)
Other versions
BG103728A (bg
Inventor
Teresa Barlozzari
Andreas Haupt
Original Assignee
Basf Aktiengesellschaft
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Basf Aktiengesellschaft filed Critical Basf Aktiengesellschaft
Publication of BG103728A publication Critical patent/BG103728A/bg
Publication of BG64338B1 publication Critical patent/BG64338B1/bg

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/07—Tetrapeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/08—Peptides having 5 to 11 amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Epoxy Compounds (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

Изобретението се отнася до състав и метод за приложението му за лечение на рак. Съединения с формула I, посочена в описанието, се комбинират с паклитаксел, таксотер или модифициран таксан, или таксоид аналози. В резултат се осигурява повишен противотуморен ефект в сравнение с ефекта, постиган с отделните съединения. а

Description

(54) ПРОИЗВОДНИ НА ДОЛАСТАТИН-15 В КОМБИНАЦИЯ С ТАКСАНИ
Област на техниката
Изобретението се отнася до фармацевтични състави, които се прилагат за лечение на рак при бозайници.
Предшестващо състояние на техниката
Ракът е заболяване, за което са достъпни много потенциално ефективни лечения. Поради широко разпространение на рак от различни типове и сериозните проблеми, които той създава, са необходими повече ефективни лечения, по-специално такива с малко неблагоприятни странични ефекти спрямо прилаганите понастоящем форми на лечение.
Техническа същност на изобретението
Изобретението се отнася до фармацевтичен състав за лечение на рак при бозайници, който съдържа две съединения: първо, което е паклитаксел, таксотер или модифициран таксан или таксоид аналог и второ - съединение с формула (I)
R1R2N-CHX-CO-A-B-D-(E)i-(F),(G)u-K (I)
Формула (I) е пояснена по-долу. Някои примери на съединения с формула (I) специално са включени тук. Съединения с формула (1) , в която R1 и R2 са метил или етил, X е изопропил, втор-бутил или трет-бутил, s е 1, t и и са всеки 0, А е валил, изолевцил или 2трет-бутилглицил, В е N-метилвалил, 1-изолевцил или 2-трет-бутилглицил, D е тиазолидинил-4-карбонил, 3,4-дехидропролил или пролил, Е е пролил, тиазолидинил-4-карбонил, хомопролил, 3,4-дехидропролил или хидроксипролил и К е заместена аминочаст с формула R5-N-R‘, където R5 е водород или С,-С4 алкокси и R6 е моновалентен радикал като (1)- или (2) -адамантил, (СН2)у фенил с v = 1, α,α-диметилбензил, С^С^хидроксиалкил с права или разклонена верига като С(СН3)2-СН2-СН2-ОН, наречен още 3-хидрокси-1,1-диметилпропил, С3С10 циклоалкилова група като бицикло [3.3.0] окта-1-ил, 1-метилциклопентил или 1-метил циклохексил или С{-С12 алкилова група с права или разклонена верига като
-С(СН3)3, наречен още трет-бутил, —с—CTi,—сн,.
(CHih , , , наречен <mte I, I-дим стил пропил, —MWtt, ί»Ι> . , наречен още 1-иртил-1-стилпропнл,
-£Н— ’ наречен още ($)- или (К)-1-метн.т-2,2диметилпропкл, —сп-сшаьъ, наречен още (S)· илн (Я)-1-етил-2метнлпропял, •ч^Н—CH(CHih аКСН,), , „ , наречен още 1-июпропнл-2-метмлпроиил илн
-С(СН3)2-СН(СН3)2 - наречен още 1,1диметил-2-метилпропил,
СН(СН3)2- наречен още изопропил,
СН(СН3)СН2СН3, втор-бутил [(S) или (R)] или
СН(СН3)СН(СН3)2, наречен също 1,2диметил пропил.
Всяко съединение присъства във фармацевтичния състав в ефективно количество. Фармацевтичният състав може да включва едно или повече от всеки тип съединения (напр. едно или повече от първия тип съединение като паклитаксел или паклитаксел и таксотер и едно или повече съединения с формула (I).
Изобретението се отнася също до използване на фармацевтичния състав за лечение на рак при бозайници, като рак на белия дроб, гърдата, дебелото черво, простатата, пикочния мехур, ректума или ендометриума или хематологични злокачествени заболявания. Поспециално, фармацевтичният състав се използва за производство на медикамент за лечение на рак при бозайници. В конкретните варианти на изпълнение двете съединения се прилагат като фармацевтичен състав или като индивидуални съединения, които се дават достатъчно близко във времето, за да имат желания ефект.
Установено е, че комбинацията от паклитаксел, таксотер или модифициран таксан или таксоид аналог, както са описани тук, и съединение с формула (I), както е описано тук, осигуряват засилен или терапевтичен синергитичен противораков ефект in vivo. За целите на изобретението, две лекарствени средства се считат за терапевтично синергитични, ако режимът на комбинирането им води до значител но по- добро умъртвяване на туморните клетки, отколкото когато двата компонента се прилагат поотделно при оптимално или максимално поносими дози. Разлика в умъртвяването на туморни клетки по-малка от пет, не се счита за значителна.
Кратко описание на фигурите
На фиг. 1 са описани съединения i-xvii, като примери за съединения с формула (I).
Изобретението се отнася до фармацевтичен състав, който се прилага за лечение на рак при бозайници. Фармацевтичният състав съгласно изобретението се състои от две съединения: първо съединение, което е паклитаксел, таксотер или модифициран таксан или таксоид аналог и второ съединение с формула (I), описано по-долу. Всяко съединение присъства във фармацевтичния състав в ефективно количество. Едно или повече от всеки тип съединения могат да присъстват във фармацевтичния състав или да се прилагат по настоящия метод. Както е използван тук, терминът “ефективно количество” се отнася до количество, което е достатъчно да предизвика желания биологичен отговор. Съгласно настоящото изобретение, желаният биологичен отговор е инхибиране (частично или общо) на образуването на тумор или хематологично злокачествено развитие, обратимост на развитието на твърд тумор или на други злокачествени заболявания, или предотвратяване, или намаляване на тяхното по-нататъшно развитие.
Паклитаксел (TaxolR), който е пример за първото съединение на фармацевтичния състав, е дитерпен, изолиран от корите на Taxus brevifolia и е представител на клас терапевтични средства с пръстенна система на таксан. За целите на настоящото изобретение, всяко терапевтично средство, което има пръстенна система на таксан, се дефинира като таксан. Формулата за паклитаксел е:
Паклитаксел и негови аналози се про извеждат чрез парциален синтез от 10-деацетилбакатин III, получен от игли и клонки на тисово дърво и чрез общ синтез. Виж Holton et al., J. Am. Chem. Soc. 116:1597-1601 (1994) и Nicolaou et al., Nature 367:630 (1994). Показано е, че паклитаксел притежава антинеопластична активност. Напоследък е доказано, че противотуморната активност на паклитаксел се дължи на предизвикване на микротубулна полимеризация. Виж Kumar, N., J. Biol. Chem., 256:10435-10441 (1981); и Schiff et al., Nature 277:655-667 (1979). За паклитаксел е установена ефикасност при някои човешки тумори при клинични опити. Виж McGuire et al., Ann. Int. Med., 111:237-279 (1989), Holmes et al., J. Natl. Cancer Inst., 83:1797-1805 (1991), Kohn et al., J. Natl. Cancer Inst., 86:18-24 (1994) и Kohn et al., American Society for Clinical Oncology 12 (1993). Паклитаксел се получава от Bristol-Myers Squib Company, New York, NY c регистрирана търговска марка TaxolR.
Първото съединение във фармацевтичния състав е обикновено паклитаксел (TaxolR), таксотер или модифициран таксан или таксоид аналог. Модифицираният таксан или таксоид аналози са тези съединения, които имат пръстенната система на таксан, носеща модифицирани странични вериги. Голяма част от тези аналози имат подобрени свойства, като по-голяма водоразтворимост и стабилност, отколкото природно срещащият се паклитаксел. Например RPR1O9881 е нов орално и интравенозно активен таксоид аналог, изпитан от RhonPoulenc Rhorer и понастоящем във фаза I клинични опити. Тези аналози са известни на специалистите в областта и са описани например в US NN 5278324, 5272171, 5254580, 5,250683, 5248796 и 5227400, описанието на които е включено за справка. Таксотер може да се получи по метода, описан във WO 93/18210, описанието на който е включено за справка. В предпочитано изпълнение, първото съединение във фармацевтичния състав е паклитаксел или таксотер.
Голям брой къси пептиди със съществена активност върху растежа на клетки са изолирани от водорасло в Индийски океан Dolabella auricularia (Bai et al., Bifchem. Pharmacology, 40: 1859-1864 (1990), Bechwith et al., J. Natl. Cancer Inst., 85, 483-488 (1993) и цитираната там справка). Те включват доластатини 1-10 (US N 4816444, издаден на Pettit et al.) и до ластатин-15 (EP № 398558). Доластатин-15, например, подчертано инхибира растежа на Р388 клетъчна линия лимфоцитна левкемия на National Cancer Institute, силно средство срещу различни видове човешки злокачествени образувания. Съединението обаче се намира само в следи в горното водорасло и е трудно да се изолира, скъпо да се синтезира и има слаба разтворимост във вода.
Съединенията с формула (I) са производни на доластатин-15, с които се преодоляват посочените недостатъци на доластатин-15, като запазват антинеопластичната активност или показват по-висока антинеопластична активност в сравнение с природния продукт. Производните на доластатин-15 с формула (I), които се използват в комбинация с паклитаксел, таксотер или модифициран таксан или таксоид аналог, съгласно настоящото изобретение, могат да се синтезират както е описано тук и свързаната заявка US,SN 08/472453, съдържанието на която е включено тук в цялост.
Производните на доластатин-15 с формула (I) най-общо съдържат L-аминокиселини, но те могат да съдържат също една или повече D-аминокиселини, както е описано в US,SN 08/ 472453. Съединенията с формула (I) могат също да присъстват като соли с физиологично приемливи киселини като, но не само: солна, лимонена, винена, млечна, фосфорна, метансулфонова, оцетна, мравчена, малеинова, фумарова, ябълчна, янтарна, малонова, сярна, Lглутамова, L-аспартова, пирогроздена, лигава, бензоена, глюкуронова, оксалова, аскорбинова киселина и ацетилглицин.
За целите на настоящото изобретение терминът “моновалентен радикал” означава електрически неутрален молекулен фрагмент, който може да образува една ковалентна връзка с втори неутрален молекулен фрагмент. Моновалентните радикали включват водороден атом, алкилови групи (напр. метил, етил, пропил и трет-бутил), групи циклоалкил, хидроксиалкил, адамантил, халоген (напр. флуор, хлор и бром), арил (напр. фенил, бензил и нафтил) и алкоксигрупи (напр. метокси и етоксигрупи). Два моновалентни радикала при съседни сигма-свързани атоми могат да образуват също пи-връзка между съседни атома. Два моновалентни радикала могат също да се свържат, например чрез полиметиленова единица, като образуват циклична структура. Например, единицата
N(R)R’, в която R и R’ са моновалентни радикали, могат с азотния атом да образуват хетероциклен пръстен. Освен това, два моновалентни радикала свързани със същия атом, могат също да образуват двувалентен радикал като алкилиденова група, например пропил иденова група или кислороден атом.
По-специално, за съединенията с формула (I)
R1 означава алкил като С}-С3, циклоалкил като циклопропил, алкилсулфонил като С,-С3, флуороалкил като флуороетил или аминосулфонил, който може да бъде заместен с алкил като метил,
R2 означава водород, алкил като С(-С3, флуороалкил като флуороетил, флуороизопропил или циклоалкил като циклопропил,
R‘-N-R2 заедно могат да означават пиролидинов или пиперидинов остатък,
А означава остатък валил, изолевцил, левцил, алоизолевцил, 2,2-диметилглицил, 2циклопропилглицил, 2-циклопентилглицил, 3трет-бутилаланил, 2-трет-бутилглицил, 3-циклохексилаланил, 2-етилглицил, 2-циклохексилглицил, норлевцил или норвалил,
В означава остатък N-алкилвалил, -норвалил, -левцил, -изолевцил, -2-трет-бутилглицил, -3-трет-бутилаланил, -2-етилглицил, -2циклопропилглицил. -2-циклопентилглицил. норлевцил или -2-циклохексилглицил, където N-алкил за предпочитане е N-петил или Nетил,
D означава остатък пролил, хомопролил, хидроксипролил, 3,4-дехидропролил, 4флуоропролил, 3-метилпролил, 4-метилпролил, 5-метилпролил, азетидин-2-карбонил, 3,3-диметилпролил, 4,4-дифлуоропролил, оксазолидин-4-карбонил или тиазолидин-4-карбонил,
Е означава остатък пролил, хомопролил, хидроксипролил, 3,4-дехидропролил, 4флуоропролил,3-метилпролил,4-метилпролил, 5-метилпролил, азетидин-2-карбонил, 3,3-диметилпролил, 4,4-дифлуоропролил, оксазолидин-4-карбонил или тиазолидин-4-карбонил,
F и G означават остатъци, независимо избрани от групата пролил, хомопролил, хидроксипролил, тиазолидинил-4-карбонил, 1-аминопентил-1 -карбонил, валил, 2-трет-бутилглицил, изолевцил, левцил, 3-циклохексилаланил, фенилаланил, N-метилфенилаланил, тетрахидроизохинолил-2-хистидил, 1-аминоиндил-1 -карбонил, 3-пиридилаланил, 2-циклохексилглицил, норлевцил, норвалил, неопентилглицил, тритофанил, глицил, 2,2-диметилглицил, аланил, аланил и 3-нафтилаланил,
X означава водород, алкил (като C,-C3), циклоалкил (като С3-С7), -СН2-циклохексил или арилалкил (като бензил или фенетил), s, t: и и са независимо 0 или 1 и
К означава хидрокси, алкокси (като С/С4), фенокси, бензилокси или заместена или незаместена аминочаст, и техни соли с физиологично приемливи киселини.
Съединенията с формула (I) могат да присъстват като техни соли с физиологично поносими киселини
Един подклас съединения съгласно настоящото изобретение, са съединения с формула (I), където R‘-N-R2 е пиролидинилов или пиперидинилов остатък.
Друг подклас съединения съгласно настоящото изобретение, са съединения с формула (I), в която К е аминочаст с формула R5-NR6, в която
R5 означава водород, хидрокси, С,., алкокси, бензилокси, фенилокси, С,_7 алкил с права или разклонена верига (който може да бъде заместен с един или повече флуорни атоми), С112 хидроксиалкил с права или разклонена верига като 3-хидрокси-1,1-диметилпропил, С310 циклоалкил като бицикло[3.3.0.]окталил, 1-метилциклопентил или 1 -метилциклохексил, незаместен бензил или моно-, ди- или тризаместен бензил, където заместителите са независимо избрани от CF3, нитро, С( 7 алкилсулфонил, С( 4 алкокси, фенокси, бензокси, халоген, С| 4 алкил, циано, хидрокси, N(CH3)2, СООМе, COOEt, СООизоРг или COONH2,
R6 означава водород, С,.|2 алкил с права или разклонена верига (който може да бъде заместен с един или повече флуорни атоми), Ct 12 хидроксиалкил с права или разклонена верига като 3-хидрокси-1,1-диметилпропил, С310 циклоалкил, като бицикло [3.3.0] окта-1-ил или 1-метилциклопентил или 1-метилциклохексил, или -(СН2)у-С37 циклоалкил (v=0,l,2 или 3), норефедрил, норпсевдоефедрил, хинолил, пиразил, -СН2-бензимидазолил, (1)-адамантил, (2)-адамантил, -СН2-адамантил, алфа-метилбензил, алфа-диметилбензил, - (СН2) у-фенил (v=0,l,2 или 3), където фениловата група е незаместена или моно- или дизаместена и заместителите са независимо избрани от CF3, нитро, С( 7 алкилсулфонил, С14 алкокси, фенокси, бензокси, халоген, С14алкил или цикличен алкил, циано, хидрокси, N(CH3)2, СООМе, COOEt, СООизоРг и COONH2, -(СН2)и-нафтил (m-О или 1), -(СН2)¥-бензхидрил (w=0,l или 2), бифенил, пиколил, бензотиазолил, бензоизотиазолил, бензопиразолил, бензоксазолил, -(СН2)т-флуоренил (m-О или 1), пиримидил, (СН2)т-инданил (т=0или 1), -(СН2СН2О)у-СН3 (у=0,1,2,3,4 или 5), -(СН2СН2О)У-СН2СН3 (у=0,1,2,3,4, или 5), NH-фенил, където фениловата група е незаместена или моно- или дизаместена и заместителите са независимо избрани от CF3, нитро, СЬ7 алкилсулфонил, С, 4 алкокси, халоген, СЬ4 алкил или цикличен алкил, циано, хидрокси, СООМе, COOEt, СООизоРг и COONH2, -NCH3-C6H5, -nh-ch2-c6h5, NCH3CH2-C6H3, 5-атомен незаместен или моно- или дизаместен хетероарил, където заместителите са избрани от CF3, нитро, тиометил, тиоетил, С3.6 циклоалкил, -CH2-COOEt, и С34 алкиленова група образуваща бициклична система с хетероцикъл, фенил или -CHR7-5-aTOмен хетероарил, където хетероариловата група е незаместена или моно- или дизаместена, като заместителите са независимо избрани от CF3, нитро, циано, халоген, СООМе, COOEt, СООизоРг, CONH2, С14 алкил, С14 алкокси, фенил, бензил, нафтил и Сь7 алкилсулфонил и R7означава водород, С13 алкил с права или разклонена верига, бензил или R7 и R5 заедно образуват група -(СН2)3- или -(СН2)4-.
Този подклас включва съединения с формула (I), в която s, t и и са независимо 0 или 1, R1 и R2 и X са нисш алкил, А е нисш алкиламинокиселина, В е N-нисшалкилирана нисш алкиламино киселина, D, Е, F, G и К имат горните значения, като се има предвид горното, могат да се посочат три групи такива съединения с формули (II), (III), и (IV).
R'R2N-CXH-CO-A-B-Pro-Pro-F-G-K(II) R'R2N-CXH-CO-A-B-Pro-Pro-F-K (III) R‘R2N-CXH-CO-A-B-Pro-Pro-K (IV)
-СНИ7-5-атомният хетероцикъл може, например, да се представи със следните остатъци:
sAn сн5
S' \_ / V
YoCMc
COCEt
-NR5CHR7-5-aTOMHHOT хетероцикъл може да бъде представен със следните остатъци:
w /
В друг подклас съединения съгласно настоящото изобретение, R5-N-R6 заедно могат да образуват структура като:
Друг подклас съединения съгласно настоящото изобретение са например съединения с формула (I), в която s, t и и са 1 и К е хидрокси, алкокси, фенокси или бензилоксичаст.
Друг подклас съединения съгласно настоящото изобретение са например съединения с формула (I), в която SHtcalHueOnKe хидрокси, алкокси, фенокси или бензилоксичаст.
Друг подклас съединения съгласно настоящото изобретени, са например съединения с формула (I), в която s е 1, t и и са 0 и К е хидрокси, алкокси, фенокси или бензилоксичаст.
В особено предпочитано изпълнение, второто съединение във фармацевтичния състав съгласно изобретението, е съединение с формула (I), в която R1 и R2 са всеки метил или етил, X означава изопропил, втор-бутил или трет-бутил, s е 1, t и и са всеки 0, А е валил, изолевцил или 2-трет-бутилглицил, В е N-метилвалил, 1-изолевцил или 2-трет-бутилглицил, D е пролил, тиазолидинил-4-карбонил или 3,4-дехидропролил, Е е пролил, тиазолидинил-4-кар бонил, хомопролил, 3,4-дехидропролил или хидроксипролил и К е заместена аминочаст с формула R5-N-R6.
В друго изпълнение, второто съединение във фармацевтичния състав е съединение с формула (I), в която R1 и R2 са всеки метил или етил, X означава изопропил, втор-бутил или трет-бутил, s е 1, t и и са всеки 0, А е валил, изолевцил или 2-трет-бутилглицил, В е N-ме10 тилвалил, 1-изолевцил или 2-трет-бутилглицил,
D е пролил, тиазолидинил-4-карбонил или 3,4дехидропролил, Е е пролил, тиазолидинил-4карбонил, хомопролил, 3,4-дехидропролил или хидроксипролил и К е заместена аминочаст с 15 формула R5-N-R6, в която R5 е водород или
С,-С4 алкокси и R6 е Cj-Cl2 алкилова група с права или разклонена верига или С\-С12 хидроксиалкилова група избрани от групата моновалентни радикали:
-С(СН3)2-СН2-СН2-ОН, наречен още 3хидрокси-1,1 -диметилпропил
-С(СН3)3, наречен още трет-бутил, наречен още
1,1-диметнд пропил,
(CRjCHjh, наречен още 1-метил-1-етилпропил
наречен още (S)- или (К)-1 -метил-2,2диметилпропил.
наречен още (S)- или (Д)-1-етил-2метилпропил, ш , наречен още 1-июпропмл-2-мстил пропил или
-С(СН3)2-СН(СН3)2, наречен още 1,1-диметил-2-метилпропил,
-СН(СН3)2, наречен още изопропил, -СН (СН3) СН2СН3, наречен още втор-бутил [(S) или (R)] или
-СН(СН3)СН(СН3)2, наречен също 1,2диметилпропил.
В друго изпълнение, второто съединение във фармацевтичния състав съгласно изобре тението е съединение с формула (I), в която R1 и R2 са всеки метил или етил, X е изопропил, втор-бутил или трет-бугил, s е 1, t и и са всеки 0, А е валил, изолевцил или 2-трет-бутилглицил, В е N-метилвалил, 1-изолевцил или -2-трет-бутилглицил, D е пролил, тиазолидинил-4-карбонил или 3,4-дехидропролил, Е е пролил, тиазолидинил-4-карбонил, хомопролил,
3,4-дехидропролил или хидроксипролил и К е заместена аминочаст с формула RJ-N-R6, където R5 е водород или С14 алкокси и R6 е избран от групата моновалентни радикали като С3С|0 циклоалкилова група (напр. циклобутил, циклопентил, циклохексил или 1-метилциклопентил или 1-метилциклохексил или бицикло [3.3.0] окта-1-ил), (1)- или (2)-адамантил, (СН2)у-фенил (където ν е 1) или α,α-диметилбензил.
В друго изпълнение, второто съединение от фармацевтичния състав съгласно изобретението е съединение с формула (I), в която R1 и R2 е всеки метил, X е изопропил, s е 1, t и и са всеки 0, А е валил, В е N-метилвалил, D е пролил, Е е пропил, К е заместена аминочаст с формула R5-N-R6, където R5 е бензил и R6 е водород. Това съединение отговаря на съединението (xvii) от фигурата. Резултатите от използването на съединение (vxii) с формула (I) в комбинация с паклитаксел са дадени в таблици 1-4.
Фармацевтичният състав съгласно настоящото изобретение в даден случай може да съдържа фармацевтично приемлив носител. Фармацевтично приемливите носители са добре известни на специалистите в тази област. Изборът на носител зависи отчасти от конкретното съединение в комбинацията, както и от конкретния метод, използван за прилагане на фармацевтичния състав. Съответно тук има голямо разнообразие от подходящи готови форми на фармацевтичен състав съгласно настоящото изобретение. Например, паклитаксел (ТахоР) се произвежда като стерилен непирогенен разтвор, който включва полиоксиетилирано рициново масло (Cremophor* EL) и дехидратиран алкохол, USP.
В друг аспект, настоящото изобретение се отнася до метод за частично или общо инхибиране образуването на или по друг начин третиране (напр. обръщане или инхибиране на по-нататъшното развитие на) твърди тумори (напр. тумори на белия дроб, гърдата, дебелото черво, простатата, пикочния мехур, ректума или ендометриума) или хематологични злокачествени заболявания (напр. левкемии, лимфоми) у бозайник, например човек, чрез прилагане към бозайника на ефективно количество от първо съединение, което е паклитаксел, таксотер или модифициран таксан или таксоид аналог и прилагане на ефективно количество от второ съединение, което е съединение с фор мула (I).
Двете съединения се прилагат в комбинация съгласно изобретението. Терминът комбинация в този контекст означава, че лекарствените средства се използват или едновременно, или последователно. Ако се дават последователно, едното от двете съединения обикновено е откриваемо в серума на субекта в началото на прилагането на другото съединение. В едно изпълнение, първоначално се прилага съединението с формула (I). след това се прилага гореописаното първо съединение, като паклитаксел. В конкретно изпълнение, паклитаксел се прилага около един час след прилагането на съединение с формула (I). Алтернативно, първото и второто съединение се прилагат едновременно, или първото съединение може да се приложи първо и след това да се приложи второто съединение, което е съединение с формула (I).
Първото и второто съединение могат да се прилагат самостоятелно или с фармацевтично приемлив носител или разредител, подходящ за желания начин на прилагане. Прилагането може да бъде по който и да е от начините, които са обичайни за фармацевтични средства, за предпочитане онкологични, включително по орален и парентерален начини като подкожно, венозно, мускулно, перитонеално, назално, ректално. Такива фармацевтични състави могат да съдържат също и други фармацевтичноактивни компоненти.
Дозата, прилагана към бозайника, напр. човек, включва комбинация от ефективно количество от съединение с формула (I) и ефективно количество от паклитаксел, таксотер или модифициран таксан или таксоид аналог, както са описани тук. За специални случаи, дозата може да се определи емпирично, като се използват познати методи и ще зависи от фактори като биологична активност, механизъм на действие, кръстосана резистентност, припокриваща се токсичност, и токсичен профил на конкретно използваните съединения, начините на прилагане, възрастта, здравето и телесното тегло на реципиента, природата и степента на симптомите, честотата на лечение, прилагане на други терапевтици и желания ефект.
Обичайна дневна доза на съединения с формула (I) е от около 5 до около 250 mg/kg телесно тегло чрез орално прилагане и от около 1 до около 100 mg/kg телесно тегло при парентерално прилагане. Типична дневна доза паклитаксел, таксотер или модифициран таксан или таксоид аналог най-общо е от 5 до около 250 mg/kg.
Първото и второто съединение съгласно настоящото изобретение могат да се прилагат в обичайните твърди или течни фармацевтични форми за приложение, например непокрити или (филм) покрити таблети, капсули, прахове, гранули, супозитории или разтвори. Те се получават по общоприет начин. Активното вещество за тази цел може да бъде обработено с обичайни фармацевтични добавки като свързващи средства за таблети, пълнители, консерванти, дезинтегратори за таблети, регулатори на течливостта, пластификатори, омокрящи средства, диспергиращи средства, емулгатори, разтворители, вещества за забавяне на освобождаването, антиокислители и/или газове пропеланти (cf. Н. Sucker et al., Pharmaceutische Technologie, Thieme-Verlag, Stuttgart, 1978). Формите за прилагане, получени по този начин обикновено съдържат от около 1 до около 90 % тегловни от активния компонент.
Съединенията с формула (I) са описани подробно по-горе. В предпочитано изпълнение съгласно изобретението се използва съединение с формула (I), в която R1 и R2 са метил или етил, X означава изопропил, втор-бутил или трет-бутил, s е 1, t и и са всеки 0, А е валил, изолевцил или 2-трет-бутилглицил, В е N-метилвалил, 1-изолевцил или 2-трет-бутилглицил, 5 De пролил, тиазолидинил-4-карбонил или 3,4дехидропролил, Е е пролил, тиазолидинил-4карбонил, хомопролил, 3,4-дехидропролил или хидроксипролил и К е заместена аминочаст с формула R5-N-R6.
В друго изпълнение съгласно настоящото изобретение се използва съединение с формула (I), в която R1 и R2 са всеки метил или етил, X означава изопропил, втор-бутил или трет-бутил, s е 1, t и и са всеки 0, А е валил, изолевцил или 2-трет-бутилглицил, В е N-метилвалил, 1-изолевцил или 2-трет-бутилглицил, D е пролил, тиазолидинил-4-карбонил или 3,4дехидропролил, Е е пролил, тиазолидинил-4карбонил, хомопролил, 3,4-дехидропролил или хидроксипролил и К е заместена аминочаст с формула R5-N-R6, в която R5 е водород или С1-С4 алкокси и R6 е С,-С12 алкилова група с права или разклонена верига или С,-С|2 хидроксиалкил с права или разклонена верига, избрани от групата моновалентни радикали: -С(СН3)2-СН2-СН2-ОН, наречен още 3хидрокси-1,1 -диметилпропил
-С(СН3)3, наречен още трет-бутил, —c-air-CHj, наречен още 1,1-диметилпропил,
(CHjCHjh, наречен още 1-метил-1-етилпропил,
наречен още (S)- или СК)-1-метил-2,2дмметилпропил.
наречен още (S)- нли (К)-1-етил-2метилпропнл,
СНзк , наречен още
-С(СН3)2-СН(СН3)2, наречен още 1,1-диметил-2-метилпропил,
-СН(СН3)2, наречен още изопропил, -СН(СН3)СН2СН3, втор-бутил [(S) или
1-ншаропил-2-иетилпроаил или (R)] или
-СН(СН3)СН(СН3)2, наречен също 1,2диметилпропил.
В друго изпълнение, второто съединение във фармацевтичния състав съгласно изобретението е съединение с формула (I), в която R1 и R2 са метил или етил, X е изопропил, втор-бутил илитрет-бутил, s е 1, t и и са 0, Ае валил, изолевцил или 2-трет-бутилглицил, В е N-метилвалил, 1-изолевцил или 2-трет-бутилглицил, D е пролил, тиазолидинил-4-карбонил или 3,4-дехидропролил, Е е пролил, тиазолидинил-4-карбонил, хомопролил, 3,4-дехидропролил или хидроксипролил и К е заместена аминочаст с формула R5-N-R6, където R5 е водород или С14 алкокси и R6 е избран от групата моновалентни радикали като С3-С10 циклоалкилова група (напр. циклобутил, циклопентил, циклохексил или 1-метилциклопентил или 1-метилциклохексил или бицикло [3.3.0] окта-1ил), (1)-или (2)-адамантил, (СН2)у-фенил (където ν е 1) или α,α-диметилбензил.
В друго изпълнение, второто съединение от фармацевтичния състав съгласно изобретението е съединение с формула (I), в която R1 и R2 е метил, X е изопропил, s е 1, t и и са 0, А е валил, В е N-метилвалил, D е пролил, Е е пропил, К е заместена аминочаст с формула R5-N-R6, където R5 е бензил и R6 е водород. Това съединение отговаря на съединението (xvii) от фигурата. Резултатите от използването на съединение (vxii) с формула (I) в комбинация с паклитаксел са дадени в таблици 1 -4.
Методи за синтез
Съединенията с формула (I) могат да се получат по известни методи в пептидния синтез като тези, описани тук и в US N 08/470453, съдържанието на което е включено като цитат. Пептидите могат да бъдат сглобени последователно от отделни аминокиселини или чрез свързване на подходящи малки пептидни фрагменти. При последователно сглобяване, пептидната верига се удължава на етапи, като се излиза от С-края, чрез една аминокиселина на етап. При фрагментното свързване, фрагменти с различна дължина могат да се свържат заедно, а фрагменти могат да се получат чрез последователно сглобяване на аминокиселини, или чрез фрагментно свързване на още покъси пептиди. Както при последователното сглобяване, така и при фрагментното свързване е необходимо да се свържат единиците чрез образуване на амидна връзка, което може да се осъществи посредством различни ензимни и химични методи. Описаните тук методи за об разуване на пептидни амидни връзки са също подходящи за образуване на непептидни амидни връзки.
Химични методи за образуване на амидни връзки са описани подробно в стандартни методи от пептидна химия, включително Muller, Methoden der organischen Chemie, vol. XV/2, 1364, Thieme Verlag, Stuttgart, (1974), Stewart and Young, Solid Phase Peptide Synthesis, 31-34 and 71-82, Pierce Chemical Company, Rockford, IL (1984), Bodanszky et al., Peptide Synthesis, 85-128, John Wiley & Sons, New York, (1976), Practice of Peptide Synthesis, M. Bodansky, A. Bodansky, Springer-Verlag, 1994 и др. Предпочитаните методи включват азиден метод, симетричен и смесен анхидриден метод, използване на in situ получени или преобразувани активни естери, използване на защитени с уретан N-карбоксианхидриди на аминокиселини и образуване на амидно свързване, като се използват свързващи реагенти като дициклохексилкарбодиимид (DCC), диизопропилкарбодиимид (DIC), 1-етоксикарбонил-2-етокси-1,2-дихидрохинолин (EEDQ), пивалоилхлорид, 1етил-3- (3-диметиламинопропил) карбодиимид хидрохлорид (EDCI), норм-пропаифосфонов анхидрид (РРА), ^^бис(2-оксо-3-оксазолидинил)амидофосфорилхлорид (ВОР-С1), бромотрис-пиролидинофосфониев хексафлуорофосфат (РуВгор), дифенилфосфорилазид (DPPA), реагент на Castro (BOP, РуВор), О-бензотриазолил-N, N, N ’, N ’ -тетраметилхилурониева сол (HBTU), О-азабензотриазолил-^^№,№-тетраметилурониева сол (TATU), диетилфосфорилцианид (DEPCN), 2,5-дифенил-2,3-дихидро-З-оксо-4-хидрокситиофендиоксид (реагент на Steglich, HOTDO) и Ι,Γ-карбонилдиимидазол (CDI). Свързващите реагенти могат да се използват самостоятелно или в комбинация с добавки като ^Н-диметил-4-аминопиридин (DMAP), N-хидроксибензотриазол (HOBr), Nхидроксибензотриазин (HOOBt), N-хидроксисукцин-имид (HOSu) или 2-хидроксипиридин.
Въпреки че използването на защитни групи най-общо не е необходимо при ензимен пептиден синтез, необходимо е обратима защита на реактивоспособни групи, които не са включени в образуването на амидната връзка, за двата реагента при химическия синтез. Трите общоприети техники на защитни групи, обичайно използвани в химическия пептиден синтез, са: бензилоксикарбонилна (Z), трет-буток сикарбонина (Вос) и 9-флуоренилметоксикарбонилна (Fmoc) техники. Определена във всички случаи е защитната група върху -аминогрупата на удължаващата веригата единица. Подробен преглед на защитните групи на аминокиселини е даден от Muller, Methoden der organischen Chemie, vol. XV/1, pp 20-906, Thieme Verlag, Stuttgart (1974).
Единиците, използвани за сглобяване на пептидната верига, могат да взаимодействат в разтвор, в суспензия или по метод, подобен на този, описан от Merrifield в J. Amer. Chem., Soc., 85 (1963), 2149. При един метод пептидът се структурира последователно или чрез фрагментно свързване, като се използва Z, Вос или Fmoc техника на защитна група, с един от реагентите, по техниката на Merrifield, свързан към неразтворим полимерен носител (наричан също смола от тук нататък). Това обичайно води до сглобяване на пептидните последователности върху полимерния носител, като се използва Вос или Fmoc техника на защитна група, с нарастване на пептидната верига, ковалентно свързана при С-края към неразтворимите частици смола. Тази процедура позволява отстраняването на реагенти и странични продукти чрез филтруване, като се елиминира нуждата от прекристализация на междинни продукти.
Защитените аминокиселини могат да се свържат към всякакъв подходящ полимер, който трябва да бъде неразтворим в използваните разтворители, и имат стабилна физична форма, която позволява филтруване. Полимерът трябва да съдържа функционална група, към която може ковалентно да се прикрепи първата защитена аминокиселина. Подходящи са полимери за тази цел, например целулоза, поливинилов алкохол, полиметакрилат, сулфониран полистирен, хлорометилиран съполимер стирен/ дивинилбензен (Merrifield смола), 4-метилбензхидриламиносмола (МВНА-смола), фенилацетамидометилова смола (Pam-смола), р-бензилокси-бензил-алкохол-смола, бензхидрил-аминосмола (ВНА-смола), 4-(хидроксиметил)бензоилоксиметилова смола, смола на Breipohl et al (Tetrahedron Letters 28 (1987) 565, получавана чрез BACHEM), 4-(2,4-диметоксифениламинометил)феноксисмола (получавана чрез Novabiochim) или о-хлортритилова смола (получавана чрез Biohellas).
Подходящ разтворител за пептиден син тез е всеки разтворител, който е инертен при условията на реакцията, например вода, Ν,Νдиметилформамид (DMF), диметилсулфоксид (DMSO), ацетонитрил, дихлорометан (DCM),
1,4-диоксан, тетрахидрофуран (THF), N-метил-2-пиролидон (NMP) и смеси от тези разтворители.
Пептиден синтез върху полимерен носител може да се проведе в подходящ инертен органичен разтворител, в който използваните аминокиселинни производни и изходни продукти са разтворими. Особено подходящи разтворители са например DMF, DCM, NMP, ацетонитрил, DMSO и техни смеси, в зависимост от техните свойства за увеличаване на обема.
След синтеза пептидът се отстранява (се отцепва) от полимерния носител. Условията, при които се осъществява това отцепване, са добре известни в областта на пептидния синтез и зависят отчасти от вида на използваната смола. Най-общо използваните реакции на отцепване са катализирани от киселина или паладий, отцепването, катализирано с киселина, се провежда, например в течен безводен флуороводород, безводна трифлуорметансулфонова киселина, разредена или концентрирана трифлуороцетна киселина и смес от оцетна киселина/дихлорметан/трифлуоретанол. Отцепването, катализирано с паладий, може да се проведе в THF или THF-DCM в присъствие на слаба основа като морфолин. Някои защитни групи се отцепват също при тези условия.
Частично премахване на защитата на пептида може да е необходимо при някои реакции за получаване на производни. Например, диалкилирани пептиди при N-края могат да се получат или чрез свързване на подходяща Ν,Ν-диалкиламинокиселина към пептида в разтвор или върху полимерен носител, или чрез редуктивно алкилиране на свързания със смолата пептид в DMF/1% оцетна киселина с NaCNBH3 и подходящия алдехид или чрез хидрогениране на пептида в разтвор в присъствие на алдехид или кетон и Pd/C.
Различните неприродносрещащи се аминокиселинни части, описани тук, могат да се получат от търговски източници или се синтезират от търговско достъпни материали, като се използват методи, известни в тази област. Например, аминокиселинен структурообразуващ блок с R1 и R2 части може да се получи съгласно Е. Wuensch, Huben Weyl, Methoden der organischen Chemie, vol. XV/1, p. 306, Thieme Verlag, Stuttgart (1974) и литературата, цитирана там. Пептиди с гама- или делта-лактамни мостове могат да се получат чрез включ- 5 ване на подходящи дипептидни единици за лактамно свързване (R. Freidinger, J. Org. Chem., (1982), 104-109) в пептидната верига. Пептиди, съдържащи тиазолов, оксазолов, тиазолинов или оксазолинов дипептиден структурообразуващ блок, могат се получат чрез включване на подходящи дипептидни единици (Р. Jouin et al., Tetrahedron Letters (1992), pp. 2087-2810, P. Wipf et al., Tetrahedron Letters (1992), pp. 907-910, W. R. Tully, J. Med. Chem., 15 (1991), p. 2065, Synthesis (1987), p. 235) в пептидната верига.
Следващите процедури илюстрират метода, който се използва за получаване на съединения с формула (I). Когато се прилага, аминокиселините се означават съкратено, като се използват известни трибуквени кодове. Други използвани означения са Me2Val = Ν,Ν-диметилвалин, MeVal = N-метилвалин, TFA трифлуорвоцетна киселина, Ас = оцетна киселина, 25 Ви “ бутил, Et = етил, Ме - метил, Bzl = бензил, Hal - 3-нафтилаланин, Cha = 3-циклохексилаланин, Npg неопентилглицин, Abu = 2аминобутирил, Dab = 2,4-диаминобутирил, iPr - изопропил. 30
Общи синтезни процедури
I. Съединенията с формула (1) съгласно настоящото изобретение се синтезират по класически синтез в разтворител, като се използва стандартна Z и Вос методология, както е описано по-горе, или чрез стандартни методи на твърдофазен синтез върху напълно автоматичен модел 431 А синтезатор, получен чрез APPLIED BIOSYSTEMS. Апаратите използват различни синтезни цикли за техниките на Вос и Fmoc защитни групи.
В случай на твърдофазов синтез, Ν,Νдиалкилпента- или хексапептидните киселини се освобождават от твърдия носител и след това се свързват със съответните С-крайни ами10 ни в разтвор. ВОР-С1 и РуВгор се използват като реагенти за свързване на аминокиселината, следваща N-метиламинокиселините. Реакционното време съответно се увеличава. За редуктивно алкилиране на N-край, пептидната смола се освобождава от защита при N-края и след това взаимодейства с 3-кратен моларен излишък от алдехид или кетон в DMF/1 % -на оцетна киселина с добавяне на 3 еквивалента NaCNBH3. След завършване на реакцията (от20 рицателен тест на Kaiser) смолата се промива няколко пъти с вода, изопропанол, DMF и дихлорометан.
При синтез в разтвор, използването или на Вос-защитена аминокиселина NCAs (N-третбутоксикарбониламино-киселина-Ь}-карбоксиантидриди), Z-защитена аминокиселина NCAs (Nбензилоксикарбониламинокиселина-N-карбоксианхидриди), или голямо предимство е използването на пивалоилхлорид като кондензиращо средство за свързване на аминокиселина, следваща N-метиламинокиселини. Редуктивно аминиране на N-край може например да се извърши чрез реакция на пептиди с премахната защита в N-края или аминокиселини със съот35 ветни алдехиди или кетони, като се използва NaCNBH3 или водород, Pd/C.
а) Синтезен цикъл за техника с Вос-защитна група:
1. 30% трифлуороцетна киселина в DCM 1x3 min
2. 50% трифлуороцетна киселина в DCM lxl min
3. DCM промиване
4. 5% диизопропилетиламин в DCM 5x1 min
5. 5% диизопропиламин в NPM lxl min
6. NMP промиване 5x1 min
7. Добавяне на предварително активирана защитена аминокиселина (DCC и 1 еквивалент HOBt в NMP/DCM), Пептидно свързване (1-ва част) 1x30 min
8. Добавяне на DMSO към реакционната смес, докато се достигнат 25% обемни DMSO, Пептидно свързване (2-ра част) 1x16 min
9. Добавяне на 3,8 еквивалента диизопропилетиламин към реакционната смес Пептидно свързване (3-та част) 1x7 min
10. DCM промиване 3x1 min
11. Когато завърши превръщането, повторение на свързването (обратно до 6)
12. 10%-ен оцетен анхидрид 5 % диизопропилетиламин в DCM 1x2 min
13. 10%-ен оцетен анхидрид в DCM 1x4 min
14. DCM-промиване 4x1 min
15. Обратно до 1.
В0Р-С1 и PyBrop се използват като реа- ιθ генти за свързване на аминокиселина, следваща N-метиламинокиселини. Реакционното време съответно се увеличава. При синтез в разтвор, най-голямо предимство за този вид свърз ване е използването или на Вос-защитена ами нокиселина NCAs (N-трет-бутоксикарбонил· аминокиселина-Г4-карбоксианхидриди) или Z защитена аминокиселина NCAs респективно.
Ь) Синтезен цикъл за техниката на Fmoc-защитна група
1. DMF промиване
2. 20%-ен пиперидин в DMF
3. 20%-ен пиперидин в DMF
4. DMF-промиване
5. Добавяне на предварително активирана аминокиселина (активирана чрез 1 екв. TBTU и 5 екв. DIPEA в DMF
Пептидно свързване
6. DMF промиване
7. Когато завърши превръщането, повторение на свързването (обратно до 5)
8. 10%-ен оцетен анхидрид в DMF
9. DMF-промиване
10. Обратно до 2.
lxl min
1x4 min
1x6 min 5x1 min
1x61 min
3x1 min
1x8 min
3x1 min
BOP-CI и PyBrop се използват като реагенти за свързване върху аминокиселината, следваща N-метиламино-киселини. Реакционното време съответно се увеличава.
II. Редуктивно алкилиране на N-край
От пептид-смолата, получена в 1а или lb, се премахва защитата при N-края (етап 24 в lb или 1-6 в 1а) и след това взаимодейства с трикратен моларен излишък на алдехид или кетон в DMF/1%-Ha оцетна киселина с добавяне на 3 еквивалента NaCNBH3.
След като завърши взаимодействието (отрицателен тест по Kaiser),смолата се промива няколко пъти с вода, изопропанол, DMF и дихлорометан.
III. Обработка на получената пептид-смола като в 1а и II
Пептид-смолата се суши при понижено налягане и се прехвърля в реакционен съд TEFLON HF апарат (доставен от PENINSULA). Добавянето на акцептор, например, анизол (1 ml/g смола) и в случай на триптофан съдър40 жащи пептиди на тиол за отстраняване на индоловата формилна група, например етандитиол (0,5 mg/g смола), се последва от кондензиране в хидрогенфлуорид (10 ml/g смо35 ла), при охлаждане с течен азот. Сместа се оставя да се затопли до OL C и се разбърква при тази температура в продължение на 45 min. Флуороводородът след това се отделя при понижено налягане и остатъкът се промива с етилацетат, за да се отстрани остатъчния акцептор. Пептидът се екстрахира с 30%-на оцетна киселина и се филтрува и филтратът се лиофилизира.
IV. Обработка на получената пептидсмола както в 1в и II
Пептид-смолата се суши при понижено налягане и след това се подлага на една от следващите процедури на отцепване, в зависимост от аминокиселинния състав (Wade, Tregear, Howard Florey Emoc Workshop Manual, Melbourne 1985).
Условия на отцепване TFA Акцептор
Реакционно време
1.95% 5% вода 1,5 Н
2. 95% 5% етандиол/ анизол (1 :3) 1,5 h
Суспензията пептид-смола в подходяща TFA смес се разбърква при стайна температу ра според посоченото време и след това смолата се филтрува и промива с TFA и DCM. Филтратът и промивките се концентрират и пептидът се утаява чрез прибавяне на диетилов етер. След охлаждане в ледена баня, утайката се филтрува, разбърква се в 30%-на оцетна киселина и се лиофилизира.
V. Когато се използва о-хлортритил-смола (предлагана от Biohellas), при стайна температура в продължение на 1 h се разбърква суспензия от пептид-смола в смес от оцетна киселина/трифлуоретанол/дихлорметан (1:1:3). Смолата след това се филтрува с изсмукване и се промива пълно с разтвора за отцепване. Обединените филтрати се концентрират под вакуум и се обработват с вода. Утаеният твърд продукт се отстранява чрез филтруване или центрофугиране, промива се с диетилов етер и се суши при понижено налягане.
VI. Пречистване и охарактеризиране на пептидите
Пречистването се провежда чрез гелна хроматография (SEPHADEX G-10, g-15/10% HOAc, SEPHADEX LH20/MeOH), средно налягане (стационарна фаза: HD-SIL С-18, 2045 μ, 100 А, подвижна фаза: градиент с А0,1 % TFA/MeOH, В=0,1 % TFA/вода) или препаративна HPLC (стационарна фаза: вода Delta-Рак С- 18, 15 μ, 100 А, подвижна фаза: градиент с А=0,1 % TFA/MeOH, В=0,1 % TFA/ вода).
Чистотата на получените продукти е определена чрез аналитична HPLC (стационарна фаза: 100 2,1 mm VYDAC С-18, 51, 300 А, подвижна фаза: градиент ацетонитрил-вода, буфериран с 0,1% TFA, 40ОС).
Охарактеризирането е проведено с аминокиселинен анализ и масспектроскопия с бързо бомбардиране на атома.
Примери за изпълнение на изобретението
Пример 1А
N,N-3HMeTiui-Val-Val-N-MeTnn-Val-ProPro-Val-Phe-NH2
Както в lb по-горе, 1,98 g Fmoc-RINKсмола (заместване 0,46 mmol/g), съответстващи на зареждане от 0,84 ml, взаимодейства 5 както в lb по-горе с 1,26 mmol от всяка
Fmoc-Phe-OH
Fmoc-Val-OH Fmoc-Pro-OH Fmoc—Pro-OH
Fmoc-N-MeTwi-Val-OH
Fmoc-Val-OH Fmoc-Val-OH
Аминокиселината, следваща N-метиламинокиселината, се свързва с РуВгор като свърз15 ващо средство. След като завърши итеративния синтезен цикъл, пептид-смолата се подлага на защита на N-края (етапи 2-4 в lb) и след това взаимодейства с воден разтвор на формалдехид, както в II и след това се суши 20 при понижено налягане. Получената смола се подлага на TFA-отцепване, както в IV. Суровият продукт (500 mg) се пречиства чрез гелно филтране (SEPHADEX-LH-20). Добивът е 295 mg.
Пример 1А
Полученият продукт съгласно пример 1 може да се получи и по класически метод в разтвор. Синтез на N,N-flHMeTWi-Val-Val-N-Meтил-Val-Pro-Pro-Val-Phe-NHj и свързаните с не30 го междинни продукти са описани в следващия параграф.
a) Z-MeVal-Pro-OMe
В 250 ml сух дихлорометан се разтварят 66,25 g (250 mmol) Z-MeVal-OH. След доба35 вяне на 36,41 ml (262,5 mmol) триетиламин, реакционната смес се охлажда до -25DC и се прибавя 32,37 ml (262,5 mmol) пивалоилхлорид. След разбъркване в продължение на 2,5 h, към реакционната смес се прибавя 41,89 g (250 40 mmol) H-Pro-OMe-HCl в 250 ml дихлорометан, неутрализиран с 36,41 ml (262,5 mmol) триетиламин, при 0DC. Разбъркването продължава 2 h при -25 ПС и една нощ при стайна температура. Реакционната смес се разрежда 45 с дихлорметан и се промива пълно с наситен воден разтвор на NaHCO3 (Зх), вода (1х), 5% лимонена киселина (Зх) и наситен разтвор на натриев хлорид. Органичната фаза се суши над натриев сулфат, филтрува и изпарява до 50 сухо. Остатъкът (91,24 g) се разбърква с петролев етер една нощ и се филтрува. Получават се 62,3 g продукт.
b) H-MeVal-Pro-OMe
B 490 ml метанол се разтваря 48,9 g (130 mmol) Z-MeVal-Pro-OMe. След добавяне на 10,9 ml (130 mmol) концентрирана солна киселина и 2,43 g 10% Pd/C, реакционната смес се хидрогенира. След филтруване и сушене до сухо се получава 36,43 g продукт.
c) Z-Val-MeVal-Pro-OMe
В 110 ml DMF при 40СС в продължение на 2 дни се разбъркват 18,1 g (65 mmol) НMeVal-Pro-OMe, 21,6 g (78 mmol) Z-Val-N-kapбоксианхидрид и 22,8 ml (130 mmol) диизопропилетиламин. След изпаряване на DMF се прибавя дихлорометан и органичната фаза се промива с наситен воден разтвор на NaHCO3 (Зх), вода (1х), 5% лимонена киселина (Зх) и наситен разтвор на натриев хлорид. Органичната фаза се суши над натриев сулфат, филт-рува и изпарява до сухо. Продуктът (29,3 g) се получава като вискозно масло.
д) H-Val-MeVal-Pro-OMe
В 230 ml метанол се разтваря 29,3 (61,6 mmol) Z-Val-MeVal-Pro-OMe. След добавяне на 1,15 g 10% Pd/C, реакционната смес се хидрогенира. Филтруване и изпаряване до сухо води до получаване на 21,96 g продукт.
е) Z-Val-Val-MeVal-Pro-OMe
В 610 ml дихлорометан се разтварят 15,29 g (61 mmol) Z-Val-OH и 21,96 g (61 mmol) HVal-MeVal-Pro-OMe и се охлажда до ОГС. След добавяне на 8,16 mol (73,2 mmol) N-метилморфолин, 2,77 g (20,3 mmol) HOBt и 11,74 g (61 mmol) EDC1, реакционната смес се разбърква една нощ при стайна температура, разрежда се с дихлорометан и се промива пълно с наситен воден разтвор на NaHCO3 (Зх), вода (1х), 5% лимонена киселина (Зх) и наситен разтвор на натриев хлорид, филтрува и изпарява до сухо, като се получава 31,96 g продукт.
f) Z-Val-Val-MeVal-Pro-OH
В 250 ml метанол се разтваря 31,96 g (57 mmol) Z-Val-Val-MeVal-Pro-OMe. Прибавя се 102,6 ml IN разтвор на LiOH и сместа се разбърква една нощ при стайна температура. След добавяне на 500 ml вода, водната фаза се промива три пъти с етилацетат. Органичната фаза се суши над натриев сулфат, филтрува и изпарява до сухо, като се получава 30,62 g от желания продукт като бяло твърдо вещество.
g) Z-Val-Val-MeVal-Pro-Pro-Val-Phe-NH2
В 430 ml сух дихлорометан се суспендират 25 g (43,3 mmol) Z-Val-Val-MeVal-Pro-OH и 15,59 g (43,3 mmol) H-Pro-Val-Phe-NH2.Cnefl охлаждане до 0DC, се прибавя 5,81 ml (52 mmol) N-метилморфолин, 1,97 g (15 mmol) HOBt и 8,33 g (43,3 mmol) EDC1 и реакционната смес се разбърква една нощ при стайна температура. Разтворителят се изпарява, остатъкът се разтваря в 640 ml дихлорометан и се промива пълно с наситен воден разтвор на NaHCO3 (4х), вода, (1х), 5%-на лимонена киселина (Зх) и наситен разтвор на натриев хлорид. Органичната фаза се суши над натриев сулфат, филтрува и изпарява до сухо, като се получава 33,04 g от продукта. Суровият продукт се хроматографира върху колона от силикагел с 20% метанол/хексан. Получава се 18,32 g от желания продукт.
h) N,N-flHMenui-Val-Val-MeVal-Pro-ProVal-Phe-NH2
В 80 ml метанол се разтваря 18,32 g ZVal-Val-MeVal-Pro-Pro-Val-Phe-NH2. В азотна атмосфера се прибавя 0,4 g 10% паладий/ въглен и реакционната смес се хидрогенира при стайна температура в продължение на 4 h. След добавяне на 6,22 ml (81,24 mmol) 37 %ен воден разтвор на формалдехид, хидрогенирането продължава още 5 h. Филтруването и изпаряването на разтворителя води до получаване на 5,6 g суров продукт. Пречистване се постига чрез разтваряне на пептида във вода, коригиране на pH до 2 и екстрахиране на водната фаза три пъти с етилацетат. Стойността на pH на водната фаза след това се коригира на 8-9 и се екстрахира четири пъти с етилацетат. Органичната фаза се промива с вода и се суши над натриев сулфат, филтрува и изпарява, като се получават 11,3 g пречистен продукт като бял прах. Съединението се охарактеризира с масспектроскопия с бързо бомбардиране на атома ([М+Н]+ - 797).
Пример 2А
N,N-AHMeTiui-Val-Val-NMe-Val-Pro-{l[тиазол- (2) -ил] -2-феиил}етиламид
Както в lb, 4,11 g Emoc-Pro-р-алкоксибензилалкохол-смола (заместване 0,73 mmol/g), съответстващи на зареждане от 3 mmol, взаимодейства с 4,5 mmol от всяка
Fmoc-N-MeVal-OH
Fmoc-Val-OH Fmoc-Val-OH
Аминокиселината, следваща N-метиламинокиселината в този случай взаимодейства при двойно свързване, като се използва РуВгор или Βορ-Cl при увеличаване на реакционното време. След като завърши синтезът, пептидсмолата се подлага на защита на N-края (етапи 2-4 в lb) и след това взаимодейства с воден разтвор на формалдехид, както в II и, след това се суши при понижено налягане. Получената в този случай смола се подлага на TFA-отцепване както в IV. Суровият продукт (750 mg) се използва директно за следващото свързване. 100 mg от това съединение взаимодействат с 45 mg (8)-2-[1-амино-2-фенилетил]тиазал и 230 mg РуВор с добавка на 192 микрона DIPEA в DMF при стайна температура в продължение на 2 дни. Реакционната смес се пречиства чрез гелна хроматография (SEPHADEX-LH-20, метанол) и фракциите, съдържащи продукта, се обединавят.
Пример 1В
Me2Val-MeVal-Pro-Pro-NHCH (СН3)2
a) Z-MeVal-Pro-OMe
В 250 ml сух дихлорометан се разтваря 66,25 g (250 mmol) Z-MeVal-OH. След прибавяне на 36,41 ml (262,5 mmol) триетиламин, реакционната смес се охлажда до -25 ПС и се прибавя пивалоилхлорид. След разбъркване в продължение на 2,5 h, към реакционната смес се прибавя 41,89 g (250 mmol) H-Pro-OMe х НС1 в 250 ml дихлорометан, и се неутрализират с 36,41 ml (262,5 mmol) триетиламин при 0 С. Разбъркването продължава 2 h при -25 С и една нощ при стайна температура. Реакционната смес се разрежда с дихлорометан и се промива пълно с наситен воден разтвор на NaHCO3 (Зх), вода (1х), 5%-на лимонена киселина (Зх) и наситен разтвор на натриев хлорид. Органичната фаза се суши над натриев сулфат, филтрува и изпарява до сухо. Остатъкът (91,24 g) се разбърква с петролев етер една нощ и се филтрува. Получава се 62,3 g продукт.
b) H-MeVal-Pro-OMe
В 490 ml метанол се разтваря 48,9 g (130 mmol) Z-MeVal-Pro-OMe. След добавяне на 10,9 ml (130 mmol) концентрирана солна киселина и 2,43 g 10% паладий/въглен, реакционната смес се хидрогенира. Филтриране и изпаряване до сухо води до получаване на продукт с добив 36,43 g.
c) Z-Val-MeVal-Pro-OMe
В 110 ml DMF при 40DC в продължение на 2 дни се разбърква 18,1 g (65 mmol) НMeVal-Pro-OMe, 21,6 g (78 mmol) Z-Val-N-kap боксианхидрид и 22,8 ml (130 mmol) диизопропилетиламин. След изпаряване на DMF, се прибавя дихлорометан и органичната фаза се промива с наситен воден разтвор на NaHCO3 (Зх) и наситен разтвор на натриев хлорид. Органичната фаза се суши над натриев сулфат и се изпарява до сухо. Продуктът (29,3 g) се получава като вискозно масло.
d) H-Val-MeVal-Pro-OMe
В 230 ml метанол се разтварят 29,3 g (61,6 mmol) Z-Val-MeVal-Pro-OMe. След добавяне на 10%-ен паладий/въглен, реакционната смес се хидрогенира. Филтрирането и изпаряването до сухо водят до получаване на продукт с добив 21,96 g.
с) Z-Val-Val-MeVal-Pro-OMe
В 610 ml дихлорометан се разтваря 15,29 g (61 mmol) Z-Val-OH и 21,96 g (61 mmol) Ηο
Val-MeVal-Pro-OMe и се охлажда до 0 С. След добавяне на 8,16 ml (73,2 mmol) N-метилморфолин, 2,77 g (20,3 mmol) HOBT и 11,74 g (61 mmol) EDC1, реакционната смес се разбърква една нощ при стайна температура, разрежда се с дихлорометан и се промива пълно с наситен воден разтвор на NaHCO3 (Зх), вода (1х), 5%-на лимонена киселина и наситен разтвор на натриев хлорид. Органичната фаза се суши над натриев сулфат, филтрува и изпарява до сухо, като се получава продукта с добив 31,96 g.
f) Z-Val-Val-MeVal-Pro-OH
В 250 ml метанол се разтваря 31,96 g (57 mmol) Z-Val-Val-MeVal-Pro-OMe. Прибавя се 102,6 ml IN разтвор на LiOH и сместа се разбърква една нощ при стайна температура. След прибавяне на 500 ml вода, водната фаза се промива три пъти с етилацетат, pH се коригира 2 при 0 С и се екстрахира три пъти с етилацетат. Органичната фаза се суши над натриев сулфат, филтрува и изпарява до сухо, като се получават 30,62 g от желания продукт като бяло твърдо вещество.
g) Z-Vai-Val-MeVal-Pro-Pro-NHCH (СН3) 2 В 34 ml сух дихлорометан се разтварят g (3,35 mol) Z-Vai-Val-MeVal-Pro-OH и 0,664 g (3,35 mmol) H-Pro-NHCH(CH,),. След oxo л л лаждане до 0 С се прибавят 1,35 ml (12,1 mmol) N-метилморфолин, 0,114 g (0,84 mmol) HOBT и 0,645 g (3,35 mmol) EDC1 и реакционната смес се разбърква една нощ при стайна температура. Прибавят се 80 ml дихлорометан и органичната фаза се промива пълно с наситен воден разтвор на NaHCO3 (Зх), вода (1х), % -на лимонена киселина (Зх) и наситен разтвор на NaCI. Органичната фаза се суши над натриев сулфат, филтрува и изпарява до сухо, като се получава продукт с добив 1,96 g, който се използва в следващата реакция без понататъшно пречистване.
h) Me2Val-Val-MeVal-Pro-Pro-NHCH (СН3) 2
В 11 ml метанол се разтваря 1,96 g ZVal-Val-MeVal-Pro-Pro-NH-CH(CH3)2. Под атмосфера от азот се прибавя 0,054 g 10%-ен Pd/С и реакционната смес се хидрогенира при стайна температура в продължение на 4 h. След добавяне на 0,86 ml (11,24 mmol) 37%-ен воден разтвор на формалдехид и 0,281 g 10%-ен Pd/C, хидрогенирането продължава 5 h. Филтруване и изпаряване на разтворителя води до получаване на 2,77 g суров продукт. Следващо пречистване се осъществява чрез разтваряне на пептида във вода, коригиране на pH на 2 и екстрахиране на водната фаза три пъти с етилацетат. След това стойността на pH на водната фаза се коригира на 8-9 и се екстрахира четирикратно с дихлорометан. Органичната фаза се суши над натриев сулфат, филтрува и изпарява, като се получава 1,37 g пречистен продукт като бяла пяна. Съединението се пречиства по-нататък, като се използва течна хроматография при средно налягане (10-50% А в 10 min, 50-90% А в 320 min). Фракциите, съдържащи продукта, се обединяват, лиофилизират, повторно се разтварят във вода и pH се коригира на 9 с IN LiOH. След екстракция с дихлорометан, органичната фаза се суши над натриев сулфат, филтрува и изпарява до сухо. След лиофилизация се получава 500 mg чист продукт, който се характеризира чрез масспектроскопия с бързо бомбардиране на атома ([М+Н]+= 593).
Пример 2В
Me2Val-Val-MeVal-Pro-Pro-NHC (СН3) 3 a) Z-Vai-Val-MeVal-Pro-Pro-NHC (СН3)3 В 34 ml сух дихлорометан се разтваря 2 g (3,35 mmol) Z-Val-Val-Pro-OH и 0,692 g (3,35 mmol) H-Pro-NHC(CH,),. След охлаждане до 0 s 3 3
С се прибавя 1,35 ml (12,1 mmol) N-метилморфолин, 0,114 g (0,84 mmol) HOBt и 0,645 g (3,35 mmol) EDC1 и реакционната смес се разбърква една нощ при стайна температура. Прибавят се 80 ml дихлорометан и органичната фаза се промива пълно с наситен воден разтвор на NaHCO3 (Зх), вода (1х), 5%-на лимонена киселина (Зх) и наситен разтвор на нат риев хлорид (1х). Органичната фаза се суши над натриев сулфат, филтрува и изпарява до сухо, като се получава 1,8 g продукт, който се използва в следващата реакция без понататъшно пречистване.
b) Me2Val-Val-MeVal-Pro-Pro-NHC (СН3) 3
В 10 ml метанол се разтваря 1,8 g ZVal-Val-MeVal-Pro-Pro-NHC(CH3)3. Под атмосфера от азот се прибавя 0,045 g 10%-ен Pd/С и реакционната смес се хидрогенира при стайна температура в продължение на 4 h. След добавяне на 0,86 ml (11,24 mmol) 37%ен воден разтвор на формалдехид и 0,252 g 10%-ен Pd/C, хидрогенирането продължава 5 h. Филтруване и изпаряване на разтворителя води до получаване на 1,82 g суров продукт. Съединението се пречиства след това, като се използва течна хроматография при средно налягане (10-50% А в 10 min, 10-90% А в 320 min). Фракциите, съдържащи продукта, се обединяват, лиофилизират, разтварят се повторно във вода и pH се коригира на 9 с IN LiOH. След екстрахиране с дихлорометан, органичната фаза се суши над натриев сулфати се изпарява до сухо. Лиофилизирането води до получаване на 47 mg чист продукт, който се охарактеризира с масспектроскопия с бързо бомбардиране на атома ([М+Н]+ = 607).
Оценяване на биологичната активност In vivo-методология
Комбинирането на съединение с формула (I) и паклитаксел, таксотер или модифициран таксан или таксоид аналог след това се изпитва в различни предклинични изследвания за in vivo активност, които свидетелстват за клинична ефективност. Р388 (асцитен модел), LX-1, СХ-1 и РС-3 (човешки туморни ксенотрансплантатни модели за бял дроб, право черво и простата), които са подходящи за използване съгласно изобретението.
Най-общо, всеки режим на дозиране, който осигурява приемливо ниво на противотуморна активност за двете средства, е приемлив. Може да се използва всяко приемливо прилагане на лекарственото средство в комбинираната терапия съгласно настоящото изобретение и може да се определи, като се използват добре известни на специалистите от тази област техники. Лекарствените средства могат да се прилагат или едновременно или последователно във всякакъв ред.
Р388-модел
При Р388-туморния модел се използва от миша клетъчна линия на лимфоцитна левкемия (виж Schabel et al., Pharmdc. Ther. A., 1:411-435). Р388-туморните клетки, използвани съгласно настоящото изобретение, се събират от донори мишки чрез перитонеално отмиване на 7-ия ден след транспланта. След това lxlO6 Р388-туморни клетки се имплантират интраперитонеално в обем 0,5 ml в мишка.
Конкретният режим на дозиране включва започване на лечението приблизително 1 ден след трансплантирането, последвано от лечение на 5 и 9 ден след трансплантирането. Съединенията с формула (I) се прилагат интравенозно, а паклитаксел, таксотер или модифициран таксан или таксоид аналог се прилагат интраперитонеално.
Терапевтичните резултати от комбинацията съгласно изобретението, против Р388клетки, се представят като увеличение на про5 дължителността на живота, отразено чрез относително средно време на преживяване (MST) на лекуваните (Т) спрямо контролните групи (С) (периода на преживяване за нелекуваните мишки е най-общо в порядъка на 11 до 13 10 дни) и се представя като % Т/С стойности. Съгласно указанията на National Cancer Institute % Т/С в порядъка 128-190 % има лекарствено средство с умерена до добра активност. Чисто тегло убити клетки се използва за сравня15 ване на ефикасността на различни планове и комбинации и се изчислява както следва:
Чисто тегло убити клетки -1<Т-С>-пР°Д^ителност на лече-™е-1 х °>332 удвоено време където, удвоеното време е = времето, необходимо да се удвоят контролните тумори (0,4 дни)
Т и С = средното време на преживяване на контролните (С) и лекуваните (Т) мишки
Продължителност на лечението с лекарствено средство 0,332 = производна константа
Положителното число за чисто тегло убити клетки посочва, че в края на лечението има по-малко туморни клетки. Отрицателното число сочи, че туморът продължава да расте през време на лечението.
Пример 3. Комбинирано лечение при използване на съединението (xvii) и паклитаксел в Р388-туморен модел х 106 Р388-туморни клетки се трансплантират интраперитонеално в обем 0,5 ml в мишка. Лечението започва приблизително 1 ден по-късно, последвано от лечение 5 и 9 дни след трансплантирането. Съединението (xvii) се прилага или по 20, 40 или 60 mg/kg, а паклитакселът или по 10, 20 или 30 mg/kg. Дозирането е последователно, като съединението (xvii) се прилага първо, последвано от паклитакселът един час по-късно.
Резултати:
Резултатите от пример 3 са показани в таблица 1.
Данните от таблица 1 показват, че лечението с едно лекарствено средство води до оптимален % Т/С от 175 % за съединението (xvii), отговарящ на чисто тегло броя на убити клетки (NICK) 0,66, когато е приложено венозно в доза 60 mg/kg, и оптимален % Т/С 183%, отговарящ на NICK 1,33 за паклитаксел, когато е приложен интраперитонеално в доза 10 mg/kg. За комбинирано лечение с лекарствените средства данните от таблица 1 сочат, че комбинацията от 60 mg/kg (xvii) и 20 mg/kg паклитаксел води до значително увеличение на продължителността на живота (Р стойност по-малка от 0,001, определена по теста на Mann-Witney) и оптимален % Т/С 242 %, отговарящ на NICK 5,98 с 38 % от животните, преживяващи повече от 60 дни.
Модел с ксенотрансплантат от човешки тумор
Човешки тумори от бял дроб (LX-1), дебелото черво (СХ-1) и простата (РС-3), които са развити в атимични голи мишки, се трансплантират (ксенотрансплантират) в нов миши приемник, както е добре известно на специалистите в областта. Трансплантираните туморни фрагменти са приблизително 50 mg по размер. Денят на трансплантирането се означава като ден 0. Комбинираната терапия съгласно настоящото изобретение се оценява за противотуморна ефикасност след прилагането към носещата ксенотрансплантата мишка.
Комбинираната терапия се осъществява чрез венозно приложение на двете лекарствени средства. Q 2dx3; 5, 12 и 19 план за инжектиране се последва от паклитаксел, приложен един час след съединение (xvii). Лечението се състои от три цикъла, като се започне от ден 5, 12 и 19 след имплантацията на тумора. Еди21 ният цикъл на лечение се състои в третиране всеки друг ден общо три пъти. Оптималната доза за едно приложение на двете (съединение xvii) и паклитаксел, използвана при LX-1 и СХ-1 типовете на изпитваните човешки ксенотпансплантатни модели, може да бъде намерена в таблици 2-3, като за РС-З-модела не е определена оптимална доза.
Диаметрите на туморите и телесното тегло се измерват два пъти седмично. Обемът на 10 туморите се изчислява, като се използват диаметрите, измерени с пергел на Vernier и формулата:
(дължина х ширина2)/ 2 “ mg от теглото на тумора
Средните тегла на туморите се изчисляват за всяка третирана група и се определят Т/С-стойностите,определени за всяка група спрямо туморите на нетретираните контроли.
Резултатите също се представят, като чисто тегло убити клетки (Net log Cell Kill) и се изчисляват както следва:
Net log Cell Kill = Кт’С)-продължителност на лечението] х 0,332
Време на удвояване
Т и С = Среден брой дни, който се изисква за контролните и третираните тумори да достигнат специфичен размер на тумора, в този случай 2000 mm3.
Време на удвояване = времето, което се изисква за контролните тумори да удвоят размера си.
0,332 = производна константа
Пример 4. Комбинирано лечение, като се използват съединение 103793 и паклитаксел в модел с човешки туморен ксенотрансплантат LX-1
В този пример се използва режимът на дозиране Q 2dx3; 5,12 и 19, описан по-горе. Паклитаксел се прилага IV един час след съединението (xvii). Оптималната единична доза както за паклитаксел, така и за съединение (xvii), може да бъде определена от Таблица 2.
Таблица 1
Доза отговор на съединението(xvii) с и без паклитаксел в сравнение с Р388 in vivo-туморен модел
Лекарствени средства
Доза img/кя)
(xvii) IV Паклитаксел IP ЧТоксичнв СМЪРТ ч т/с Net Log Cell Kill % 60 дни лечение Общо # животни
0 30 204 2,99 3 36
0 20 0 175 0,66 4 24
0 10 0 183 1.33 24
60 0 0 175 0.66 42
40 0 0 158 -0,66 2 42
20 0 0 158 -0,66 42
60 30 25 217 Г 3.98 25 24
60 20 4 242 5.98 38 24
60 10 0 204 2.99 24
40 30 21 212 3.65 8 24
40 20 0 212 3.65 12 24
40 10 0 183 1.33 24
20 30 8 217 3.98 25 24
20 20 0 217 3.98 14 22
20 ------------------------------------------------------------------------------------------1 ю 0 183 1.33 4 24
Q4J2X3J Паклитаксел се итгжектнрв 4 b слсц (xvii).
Пример 5. Комбинирано лечение като се използват съединение 103793 и паклитаксел в модел на човешки туморен ксенотрансплантат СХ-1. Режимът на дозиране Q2dx3; 5,12 и 19, описан по-горе, се използва и в този пример.
Паклитаксел се прилага IV един час след съединението (xvii). Оптималната единична доза и на паклитаксела и на съединение (xvii) могат да се определят от таблица 3.
Пример 6. Комбинирано лечение, като се използва съединение 103793 и паклитаксел в РС-3 модел с човешки туморен ксенотрансплантат. Режимът на дозиране Q2dx3; 5,12 и 19, описан по-горе, се използва и в този пример. Паклитаксел се прилага IV един час след 5 съединението (xvii). Оптималната единична доза и на паклитаксела и на съединение (xvii) не са рпределени.
Резултати: Резултатите, получени, като се използват човешки ксенотранспрантатни модели за определяне противотуморната ефикасност на комбинираната терапия съгласно настоящото изобретение са представени на таблици 2-4. Представените данни показват резултатите от предварителните експерименти. Дан ните в Таблица 2 показват, че оптималната комбинация от съединението (xvii) и паклитаксел е 15 mg/kg и 10 mg/kg респективно, при LX-1 модела. Комбинацията води до известно обратно развитие и отлагане на развитието на тумора. Същата комбинация в модела СХ-1 не води до никакви предимства пред лечението с едно лекарствено средство, както е показано в таблица 3.
В модела РС-3 няма благоприятен ефект от комбинацията в сравнение с лечението с едно лекарствено средство. Оптималната доза за прилагането на едно лекарствено средство не е определена.
Таблица 2
Доза отговор на съединението (xvii) с и без паклитаксел в сравнение с LX-1 in vivo-туморен модел
LX-1#16
Лекарствени средства Регресия
СъеД. (xvii) (IV) Паклитакс ел (IV) % Токсична смърт MTWd27 % т/с Net Log Cell Kill Общо 4 животни Частична Пълна Излекувани
Доза (mg/ki ?)
0 10 0 Ю.5 -0.374 6 2
25 0 0 3,94 -0,042 6
,15 0 0 12,24 -0,465 6
7,5 0 0 19.06 -0.581 6
25 10 0 1,2* 11,382 6 4 __
15 10 17 1,92 0.589 ,. z . 6 1
> 7.5 . fa-----—- 10 4,57 -0,033 6 ..
fa- - ---- I - — - — . 1 . _ _ I -----Д-------------------------1 ------*Q2l)x3; 5.12.19 Паклитаксел се инжектира I h след съединение (xvii).
Таблица 3
Доза отговор на съединението (xvii) с и без паклитаксел в сравнение с СХ-1 in vivo-туморен модел СХ-1 #9
Лекарствени средства Регресия
Съед. (xvii) (IV) Паклитакс ел (IV) % Токсична смърт MTW <355 % т/с Net Log Cell Kill Общо # животни Частична Пълна Излекувани
Дола (πιβ/ki t)
0 10 38,12 -0,124 6 2
25 15 7,5 0 0 0 «3 52.87 109,7 -0.313 .0,763 6 6 6
25 10 47.64 0,354 6 2
15 10 51,61 -0,39 6 2
7,5 10 73,85 -0.531 6 1
*Q2Dx3: 5,12,19 11аклигаксс;| сс инжектира 1 h след съединение (xvii).
Таблица 4
Доза отговор на съединението (xvii) с и без паклитаксел в сравнение с РС-3 in vivo-туморен модел РС-3#8
Лекарствени средства Регрес ия
Съел. (xvii) (IV) Паклитакс сл (IV) % Токсична смърт MTW d35 % т/с Net Log Cell Kill Общо й животни Частичка Пълна Излекувани
Дога (mg/ki р
0 30 17 2 токсичен 6 5
0 20 0 2,86 1.98 6 5 1
() 10 0 55,12 -0.672 6 2
30 0 33 0,09 0,967 6 3 1
30 30 33 0,09 0,603 6 4
30 20 0 0,09 1.07 6 4 2
30 10 17 0,09 1,98 6 3 2
*Q2Dx3: 5,12,19 Паклигакссл се инжектира един час след съединение (xvii).
Следните съединения се получават и мосе получат съгласно примерите:
3. Хаа Vai Xab Pro Хас
4. Хаа Vai Xab Pro Xad
5. Xaa Vai Xab Pro Xae
6. Xaa Vai Xab Pro Xaf
7. Xaa Vai Xab Pro Xag
8. Xaa Vat Xab Pro Xah
9. Xaa Vai Xab Pro Xai
10. Xaa Vai Xab Pro Xak
11. Xaa Vai Xab Pro Xal
12. Xaa Vai Xab Pro Xam
13. Xaa Vai Xab Pro Xan
14. Xaa Vai Xab Pro Xao
15. Xaa Vai Xab Pro Xap
16. Xaa Vai Xab Pro Xaq
17. Xaa Vai Xab Pro Xar
18. Xaa Vai Xab Pro Xaa
19. Xaa Vai Xab Pro Xat
20. Xaa Vai Xab Pro Xau
21. Xaa Vai Xab Pro Xav
22. Xaa Vai Xab Pro Xaw
23. Xaa Vai Xab Pro Xax
24. Xaa Vai Xab Pro Xay
25. Xaa Vai Xab Pro Xaz
26. Xaa Vai Xab Pro Xba
27. Xaa Vai Xab Pro Xbb
28. Xaa Vai Xbc Pro Xay
29. Xaa Vai Xab Pro Xbd
30 Хаа Vai Xab Pro Xbc
31. Хаа Vai Xab Pro Xbf
20
32. Хаа Vai Xab Pro Xbg
33 Хаа Vai Xab Pro Xbb
34. Хаа Vai Xab Pro Xbi
35. Хаа Vai Xab Pro Xbk
25 36. Хаа Vai Xab Pro Xbl
37 Хаа Vai Xab Pro Xbm
38 Хаа Vai Xab Pro Xbn
39 Хаа Vai Xab Pro Xbo
30 40 Хаа Vai Xab Pro Xbp
41. Хаа Vai Xab Pro Xbq
42. Хаа Vai Xab Pro Xbr
43. Хаа Vai Xab Pro Xba
44. Хаа Vai Xab Pro Xbr
45. Хаа Vai Xab Pro Xbu
46 Хаа Vai Xab Pro Xbv
47. Хаа Vai Xab Pro Xbw
48. Хаа Vai Xab Pro Xbx
40 49. Хаа Vai Xab Pro Xby
50 Хвд Vai Xab Pro Xbz
51. Хаа Vai Xab Pro Xca
52. Хаа Vai Xab Pro Xcb
45 53. Хаа Vai Xab Pro Xco
54. Хаа Vai Xab Pro Xcd
55. Хаа Va] Xab Pro Xce
56. Хаа Vai Xab Pro Xcf
57. Хаа Xdf Xab Pro Xay
50 58. Хаа
Vai Xab Pro Xch
59. Xaa Vai Xeb Pro Xci
60. Xaa Val Xab Pro Xck
Xia Val Xab Pro Xcl
62. Xaa Vaj Xab Pro Xcm
63. Xaa Val Xab Pro Xcn
64. Xaa Val Xab Pro Xco
65. Xaa Val Xab Pro Xcp
66. Xaa Val Xab Pro Xcq
Xaa Val Xab Pro Xcr
68. Xaa Val Xab Pro Xci
69. Xaa Val Xab Pro Xct
Xaa Val Xab Pro Xcu
71. Xcw Val Xab Pro Xcv
72. Xcx Val Xab Pro Xcv
73. Xaa Val Xab Pro Pro Xcy
74. Xaa Val Xab Pro Pro Xcz
75. Xaa Val Xda Pro Xcv
76. Xaa Udb Xab Pro Xcv
77. Xde Val Xab Pro Xcv
78. Xaa lie Xab Pro Xcv
79. Xdd Val Xab Pro Xcv
80. Xde Val Xab Pro Xcv
81. Xaa Xdf Xab Pro Xcv
Xaa Val Xab Pro Xcg
83. Xaa Va! Xab Pro Pro Xdg
84. Xaa Val Xab Pro Pro Xdh
85. Xaa Val Xab Pro Pro Xdi
86. Xaa Val Xab Pro Pro Xdk
87. Xaa Val Xdl Pro Xcv
88. Xde Val Xab Pro Xay
89. Xaa Val Xdl Pro Xay
90. Xaa Val Xab Pro Xdm
91. Xaa Val Xab Pro Xdn
92. Xaa Val Xab Pto Xdo
93. Xaa Val Xab Pro Xdp
94. Xaa Val Xab Pro Xdq
95. Xaa Val Xab Pro Pro Xdr
96. Xaa Val Xab Pro Xda
97. Xaa Val Xbc Pro Xcv
98. Xaa lie Xab Pro Xay
99. Xcw Val Xab Pro Xay
100. Xaa Val Xbc Pro Xal
101. Xaa Val Xdl Pro Xal
102. Хаа Xdf Xab Pro Xal
103. Xaa lie Xab Pro Xal
104. Xdd Val Xab Pro Xal
105. Xde Vai Xab Pro Xal
106. Xcx Val Xab Pro Xcy
107. Xcw Val Xab Pro Xal
108. Xcx Val Xab Pro Xal
109. Xcw Val Xab Pro Xav
110. Xcx Val Xab Pro Xcv
111. Xcw Val Xab Pro Xaw
112. Xcx Val Xab Pro Xaw
113. Xab Val Xeb Pro Xay
114. Xab Val Xab Pro Xcv
115. Xab Val Xeb Pro Xal
116. Xab Val Xab Pro Xam
117 . Xab Val Xab Pro Xao
118 Xab Val Xab Pro Xao
119. Xab Val Xab Pro Xav
120. Xab Val Xab Pro Xaw
121. Xab Val Xab Pro Xat
122. Xab Val Xab Pro Xau 123 . Xab Val Xab Pro Xbf 124. Xab Val Xab Pro Xbm 125 Xab Val Xab Pro Xbn
126. Xab Val Xab Pro Xbo
127. Xab Val Xab Pro Xch
128. Xaa Val Xab Pro Xdt
129. Xaa Val Xeb Pro Xdu
130. Xaa Val Xeb Pro Xdv
131. Xea Vel Xab Pro Xdw
132. Xaa Val Xab Pro Xdx
133. Xaa Val Xab pro Xdy
134. Xaa Val Xab Pro Xdz
135. Xaa Val Xeb Pro Xea
136. Xaa Val Xeb Pro Xeb 137 Xaa Val Xab Pro Xec
138. Xaa Val Xab Pro Xed
139. Xaa Val Xab Pro Xef
140. Xaa Val Xab Pro Xcg
141. Xaa Val Xab Pro Xeb
142. Xaa Val Xab Pro Xei
143. Xea Val Xab Pro Xck
144. Xaa Val Xeb Pro Xel
145. Xaa Val Xab Pro Xem
146. Xaa. Vai Xab Pro Xcn
147. Xaa Vai Xab Pro Xeo
148. Xaa Vai Xab Pro Xep
149. Xaa Vai Xab Pro Xeq $
150. Xaa Vai Xab Pro Xer
151. Xaa Vai Xab Pro Xcq
152. Xaa Vai Xab Pro Pro Vai Phe
153. Xaa Vai Xab Pro Xet Vai Phe NH2
154. Xaa V»1 Xer Pro Pro Vai Phe NH2
155 . Xaa Vai Xbc Pro Pro Vai Phe NH2
156. Xaa lie Xab Pro Pro Vai Phe NH2
157. Xaa Leu Xab Pro Pro Vai Phe NHZ
158. Xde Vai Xab Pro Pro Vai Phe NHj15
159. Xdd Vai Xab Pro Pro Vai Phe NHj
160. Xe* Vai Xab Pro Pro Vai Phe NH2
161 Xeu Vai Xab Pro Pro Vai phe NH2
162. Xaa Vai Xab Pro Pro Phe Phe NH,
163. Xaa Vai Xab Pro Pro Vai NH2
163. Хаа Vai Xab Pro Xev
164. Xaa Vai Xab Pro Pro NII2
166- Xaa Vai Xab Pro Pro
167. Xaa Vai Xab Pro Xew 25
168. Xaa Vai Xab Xex
169. Xdd Vai Xab Pro Pro NH,
170. Xaa Xdf Xab Pro Pro NH2
171. Xaa Vai Xab Pro Xey
172. Xaa Vd Xab Pro Xcz
173. Xfa Vul Xab Pro Pro Vai I’he NH2
174. Xaa Vai Xab Pro Pro Xfb
175. Xaa Vai Xab Pro Xfc
176. Xaa Vai Xab Pro Xfd
177. Xaa V*i Xab Pro Xfe
178 Xaa Vai Xab Pro Xff
179 Xaa Vai Xab Pro Xfg
180. Xaa Vai Xab Pro Xfh
181. Xaa Vai Xab Pro Xfi
182. Xaa Vai Xab Pro Xfj
183. Xaa Vai Xdl Pro Pro NH2
184. Xaa Vai Xflt Pro Pro NHZ
185. Xaa Vai ХЛ Pro Xfh
186. Xaa Vai Xflr Pro Xfh
187. Xex Vai Xab Pro Xfh
188. Xaa Vai Xab Pro Pro Xdf Phe NIL
189. Xaa Vai Xab Pro Pro Lou Pho NH2
190. Xaa Vai Xab Pro Pro lie Phe NHj
Таблица 5
Определяне на последователността на получените съединения съгласно примерите
Съедииевие № SEQ ID №
2А, 3-56, 58-72, 75, 77, 79-80, 82. 87-94, 96-97, 99-101, 104151,164, 167, 171-172, 175-182, 185-187 и съединевия i-xvii от фигурата 1
57 2
73-74, 83-86, 95, 174 3
76, 81, 102 4
78, 98, 103 5
1А, 152, 154-155, 158-161,173 6
153 7
156 8
157 9
162 10
163 11
IB, 2В, 165-166, 169, 183 12
ί 168 13 ------—
J Съединевве №' SEQ ID №
! 170 14
15
189 16
190 17
Примери за MS-характеристики на синтезираните съединения са изброени по-долу:
Пример
MS-аваяиз бързо бомбардиране на атом*
565 &
579
593
607
621
635
607
607
621
649
635
635
635
635
621
621
635
635
633
647
661
623
671
667
681
65$
655
669
621
635
649
621
633
667
607
647
668
655
669
685
629
625
721
579
623
597
621
609
625
635
591
715
685
685
591
607
621
706
579
579
579
607
607
607
607
637
692
706
706
706
607
635
659
617
636
678
671
131
139
151
152
153
154
155
156
137
158
159
160
161
162
163
164
165
166
167
168
169
170
171
172
173
174
175
176
177
178
179
180
181
182
183
184
185
186
187
188
189
190
625
625
637
798
810
812
812
812
812
812
811
825
881
845
649
737
550
551
73]
550
566
566
635
704
853
740
619
845
649
691
717
641
579
595
566
566
669
656
669
811
812
812
Символите, използвани в описанието за съединенията с формула (I), имат следните значения:
Хаа; Ν,Ν-диметилвалин
Хас^ N-метилвалин
Хас:
Xad:
Хае:
Xaf:
Xag:
СН3
Xah:
Xai:
Xak:
Xal:
Xam:
Xan:
Хао:
Xar:
Xas:
Xat:
Xau·
Xav:
Xaw:
Xax:
Xaz:
Xba:
Xbb:
Xbc:
N-метилизолевцин
Xbd:
CH3 ι J
Xbe:
Xbf:
Xbi:
Xbk:
Xbl:
Xbnr
Xbn:
Xbo:
Xbp:
Xbq:
Xbr:
Xbs:
Xbt:
Xbu:
Xbv:
Xbw:
Xbx:
Xby:
Xca:
Xcb:
CH3
CH3
Προ лин адамантил( 1 )амид
Хсе:
Xcf:
Xch:
Xci:
OH
Xck:
Xci:
Xcm:
O
Хсо:
Хср:
Xcq:
Хсг:
Xcs:
\\ л
Xcv:
Xcw:
Xcw:
Xcy:
Xcz:
N-MeTwi-N-eTHJiBajiHH
Ν,Ν-диетилвалин
CH3
O
Xda: К-метил-2-аминобугироил
Xdb: 2-аминобутироил
Xdc: Н,№диметил-2-аминобутироил
Xdd: НН-диметил-2-трет-бугилглицин
Xde: Ν,Ν-диметилизолевцин
Xdf 2-трет-бутилглицин НзС^^сНз
Xdg: СН3 НзС^сн,
Xdh: СН3 СН3 ИзС^^
Xdi: -Ν'ΛγΝΗγαι’ сн3 СНз
Xdk -Ν>γΝΗγ'<::Ηϊ 0¾
Xdl:
М-метил-2-трет-бутилглицин
Xdm:
Xdn:
Xdo:
Xdp:
Xdq:
Xdr:
Xds:
Xdt
Xdu:
Xdv:
Xdw:
Xdx:
Xdy:
Xdz:
Хеа:
Хес:
Xed:
Хее:
Xef:
Xeg:
Xeh:
Xei:
Xek:
Xel:
Xem:
Xen:
Xeo:
a
Xep:
Xeq:
Xer: N-метиллевцин
Xes: М-ацетил-^метилвалин
Xet: пипеколинова киселина
Xeu:
Ν,Ν-дибугилвалин
Λ ο II
Xew: < > '^^Ν(Βζ1)2
Xez:
Xfa:
Ν,Ν-дипропилвалин
Xfb:
Xfc:
Xfd:
Xfj:
N-етилвалин
Xft:
Xfl:
N-метил-З-трет-бугилаланин

Claims (20)

  1. Патентни претенции
    1. Фармацевтичен състав, характеризиращ се с това, че съдържа ефективно количество от първо съединение, избрано от групата паклитаксел, таксотер и модифицирани таксан или таксоид аналози и ефективно количество от второ съединение, което има формула (I)
    R1 R2N-CHX-CO-A-B-D-(E)s- (F),- (G) U-K (I) в която
    R1 означава алкил, циклоалкил, алкилсулфонил, флуоралкил или аминосулфонил,
    R2 означава водород, алкил, флуоралкил или циклоалкил,
    R‘-N-R2 заедно могат да означават пиролидинов или пиперидинов остатък,
    А означава остатък валил, изолевцил, левцил, алоизолевцил, 2,2-диметилглицил, 2циклопропилглицил, 2-циклопентилглицил, 3трет-бутилаланил, 2-трет-бутилглицил, 3-циклохексилаланил, 2-етилглицил, 2-циклохексилглицил, норлевцил или норвалил
    В означава остатък N-алкилвалил, -норвалил, -левцил, -изолевцил, -2-трет-бутилглицил, -3-трет-бутилаланил, -2-етилглицил, -2циклопропилглицил, -2-циклопентилглицил, норлевцил или -2-циклохексилглицил,
    D означава остатък пролил, хомопролил, хидроксипролил, 3,4-дехидропролил, 4флуоропролил, 3-метилпролил,4-метилпролил, 5-метилпролил, азетидин-2-карбонил, 3,3-диметилпролил, 4,4-дифлуоропролил, оксазолидин-
    4-карбонил или тиазолидин-4-карбонил,
    Е означава остатък пролил, хомопролил, хидроксипролил, 3,4-дехидропролил, 4-флуорпролил, 3-метилпролил,4-метилпролил, 5-метилпролил, азетидин-2-карбонил, 3,3-диметилпролил, 4,4-дифлуоропролил, оксазолидин-4карбонил или тиазолидин-4-карбонил,
    F и G означават остатъци, независимо избрани от групата пролил, хомопролил, хидроксипролил, тиазолидинил-4-карбонил, 1-аминопентил-1-карбонил, валил, 2-трет-бутилглицил, изолевцил, левцил, 3-циклохексилаланил, фенилаланил, N-метилфенилаланил, тетрахидроизохинолил-2-хистидил, 1 -аминоиндил-1 -карбонил, 3-пиридилаланил, 2-циклохексилглицил, норлевцил, норвалил, неопентилглицил, тритофанил, глицил, 2,2-диметилглицил, аланил, βаланил и 3-нафтилаланил,
    X означава водород, алкил, циклоалкил,
    -СН2-циклохексил или арилалкил, s, t и и са независимо 0 или 1 и
    К означава хидрокси, алкокси, фенокси, бензилокси или заместена или незаместена аминочаст, и техни соли с физиологично приемливи киселини.
  2. 2. Фармацевтичен състав съгласно претенция 1, характеризиращ се с това, че съдържа допълнително фармацевтично приемлив носител.
  3. 3. Фармацевтичен състав съгласно претенция 1, характеризиращ се с това, че в съединение с формула (I) К означава заместена аминочаст с формула R5-N-R6, в която R5 означава водород, хидрокси, С, 7 алкокси, бензилокси, фенилокси, флуорзаместен или незаместен С17 алкил с права или разклонена верига, С112 хидроксиалкил с права или разклонена верига, С3.10 циклоалкил, незаместен бензил или моно-, ди- или тризаместен бензил, където заместителите са независимо избрани от CF3, нитро, С] 7 алкилсулфонил, С14 алкокси, фенокси, бензокси, халоген, СЬ4 алкил, циано, хидрокси, N(CH3)2, COOMe, COOEt, СООизоРг или COONH2.
    R6 означава водород, флуорзаместен или незаместен С112 алкил с права или разклонена верига, С112 хидроксиалкил с права или разклонена верига, С310 циклоалкил, -(CH2)v-C3.7 циклоалкил (v=0, 1, 2 или 3), норефедрил, норпсевдоефедрил, хинолил, пиразил, -СН2-бензимидазолил, (1)-адамантил, (2)-адамантил,СН2-адамантил, α-метилбензил, а-диметилбензил, -(СН2)у-фенил (v=0, 1, 2 или 3), където фениловата група е незаместена или моно- или дизаместена и заместителите са независимо избрани от CF3, нитро, Сь7 алкилсулфонил, С|4 алкокси, фенокси, бензокси, халоген, Сь4 алкил или цикличен алкил, циано, хидрокси, N (СН3)2, COOMe, COOEt, СООизоРг и COONH2, -(СН2)т-нафтил (ш=0 или 1), - (СН2) ж-бензхидрил (w=O,l или 2), бифенил, пиколил, бензотиазолил, бензоизотиазолил, бензопиразолил, бензоксазолил, -(СН2)т-флуоренил (т-0 или 1), пиримидил, -(СН2)т-инданил (т=0 или 1), -(СН2СН2О)у-СН3 (у-0, 1, 2, 3, 4 или 5), -(СН2СН2О)у-СН2СН3 (у=0, 1, 2, 3, 4, или 5), NH-фенил, където фениловата група е незаместена или моно- или дизаместена и заместителите са независимо избрани от CF3, нитро, С,,7 алкилсулфонил, С14 алкокси, халоген, С14 алкил или цикличен алкил, циано, хидрокси, COOMe, COOEt, СООизоРг и COONH2, -NCH3
    C6H5, -NH-CH2-C6H5, NCH3CH2-C6H5, 5-атомен незаместен или моно- или дизаместен хетероарил, където заместителите са избрани от CF3, нитро, тиометил, тиоетил, С36 циклоалкил, CH2-COOEt, и С3.4 алкиленова група, образуваща бициклична система с хетероцикъл, фенил или -СНК7-5-атомен хетероарил, където хетероариловата група е незаместена или моноили дизаместена, като заместителите са независимо избрани от CF3, нитро, циано, халоген, COOMe, COOEt, СООизоРг, CONH2, С14 алкил, С14 алкокси, фенил, бензил, нафтил и С| 7алкилсулфонил и R7 означава водород, С15 алкил с права или разклонена верига, бензил или R7 и R5 заедно образуват група -(СН2)3- или -(СН2)4-.
  4. 4. Състав съгласно претенция 3, характеризиращ се с това, че в съединение с формула (I) R1 и R2 са метил или етил, X означава изопропил, втор-бутил или трет-бутил, s е 1, t и и са всеки 0, А е валил, 2-етилглицил, изолевцил или 2-трет-бутилглицил, В е N-метилвалил, 2етилглицил, изолевцил или 2-трет-бутилглицил, D е пролил, 4-флуорпролил, тиазолидинил-4карбонил или 3,4-дехидропролил, Е е пролил, 4-флуорпролил, тиазолидинил-4-карбонил, хомопролил, 3,4-дехидропролил или хидроксипролил и К е заместена аминочаст с формула R5- N - R6, където R5 е водород или С1-С4 алкокси и R6 е С,-С12 алкилова група с права или разклонена верига, избрана от групата моновалентни радикали:
    -С(СН3)3, —с-снг-сн», (П13)2 —gi—C(CHs)j, —CH—CHfCHih.
    ('41, —CH-CH(CHjh сщснл
    -С(СН3)2-СН(СН3)2,
    -СН(СН3)2,
    -СН(СН3)СН2СН3 и -СН(СН3)СН(СН3)2.
  5. 5. Състав съгласно претенция 4, характеризиращ се с това, че моновалентният радикал е -С(СН3)3.
  6. 6. Състав съгласно претенция 3, характе ризиращ се с това, че в съединение с формула (I) R1 и R2 са всеки метил или етил, X е изопропил, втор-бутил или трет-бутил, s е 1, t и и са всеки 0, А е валил, 2-етилглицил, изолев5 цил или 2-трет-бутилглицил, В е N-метилвалил, -2-етилглицил, -1 -изолевцил или -2-третбутилглицил, D е пролил, 4-флуорпролил, тиазолидинил-4-карбонил или 3,4-дехидропролил, Е е пролил, 4-флуорпролил,тиазолидинил-410 карбонил, хомопролил, 3,4-дехидропролил или хидроксипролил и К е заместена аминочаст с формула R5-N-R6, където R5 е водород или Сь 4 алкокси и R6 е избран от групата моновалентни радикали: (СН2\-фенил (където ν е 1) и 15 а,а- диметилбензил.
  7. 7. Състав съгласно претенция 3, характеризиращ се с това, че в съединение с формула (I) R1 и R2 са метил или етил, X е изопропил, втор-бутил или трет-бутил, s е 1, t и и са 0, А
    20 е валил, 2-етилглицил, изолевцил или 2-третбутилглицил, В е N-метилвалил, -2-етилглицил, -1-изолевцил или -2-трет-бутилглицил, D е пролил, 4-флуорпролил, тиазолидинил-4-карбонил или 3,4-дехидропролил, Е е пролил, 425 флуорпролил, тиазолидинил-4-карбонил, хомопролил, 3,4-дехидропролил или хидроксипролил и К е заместена аминочаст с формула R5-N-R6, където R5 е водород или С(-4 алкокси и R6 е С,-С12 хидроксиалкил с права или раз30 клонена верига.
  8. 8. Състав съгласно претенция 7, характеризиращ се с това, че R6 е З-хидрокси-1, 1диметилпропил.
  9. 9. Състав съгласно претенция 3, характе35 ризиращ се с това, че в съединение с формула (I) R1 и R2 са метил или етил, X е изопропил, втор-бутил или трет-бутил, sel,tHucaO, А е валил, 2-етилглицил, изолевцил или 2-третбутилглицил, В е N-метилвалил, -2-етилгли40 цил, -1-изолевцил или-2-трет-бутилглицил, D е пропил, 4-флуорпропил, тиазолидинил-4-карбонил или 3,4-дехидропролил, Е е пролил, 4флуорпропил, тиазолидинил-4-карбонил, хомопролил, 3,4-дехидропролил или хидроксип45 ролил и К е заместена амино част с формула R5-N-R6, R5 е водород или С14 алкокси и R6 е С3-С10 циклоалкил, избран от групата: (1)адамантил, циклобутил, циклопентил, циклохексил, 1-метил циклопентил, 1-метил циклохек50 сил и [3.3.0] окта-1-ил.
  10. 10. Състав съгласно претенция 3, характеризиращ се с това, че в съединение с фор мула (I) R1 и R2 е метил, X е изопропил, sei, t и и са 0, А е валил, В е N-метилвалил, D е пролил, R5 е бензил и R6 е водород.
  11. 11. Състав съгласно претенция 3, характеризиращ се с това, че първото съединение е паклитаксел и второто съединение е с формула (I), в която R1 и R2 са метил, X е изопропил, se 1, t и и са 0, А е валил, В е Nметилвалил, D е пролил, Е е пролил, R5 е бензил и R6 е водород.
  12. 12. Състав съгласно претенция 3, характеризиращ се с това, че в съединение с формула (I) R1 и R2 са метил или етил, X е изопропил, втор.-бутил или трет-бутил, s е 1, t и и са 0, А е валил, изолевцил, 2-етилглицил или 2трет-бутилглицил, В е N-метилвалил, 1-изолевцил, 2-етилглицил или 2-трет-бутилглицил, D е пролил, 4-флуорпролил, тиазолидинил-4-карбонил, хомопролил или 3,4-дехидропролил и Е е пролил, 3-метилпролил, 4-флуорпролил, тиазолидинил-4-карбонил, хомопролил, 3,4-дехидропролил или хидроксипролил.
  13. 13. Използване на първо съединение от групата паклитаксел, таксотер или модифициран таксан или таксоид аналог, както и на второ съединение, което е съединение с формула (I) съгласно една от претенциите от 1 до 12, за получаване на лекарствено средство за лечение на рак при бозайници, като рак на белите дробове, гърдите, дебелото черво, простатата, пикочния мехур, ректума, ендометриума или кръвта, при което второто съединение присъства в такова количество, че в комбинация с първото съединение да даде синергитичен ефект.
  14. 14. Използване на първо съединение от групата паклитаксел, таксотер или модифициран таксан или таксоид аналог за получаване на лекарствено средство за комбинирана терапия съвместно с второ съединение, което е съединение с формула (I) съгласно една от претенциите от 1 до 12 за лечение на рак при бозайници като рак на белите дробове, гърдите, дебелото черво, простатата, пикочния мехур, ректума, ендометриума или кръвта, при което второто съединение присъства в такова количество, че в комбинация с първото съеди нение дава синергитичен ефект.
  15. 15. Използване съгласно претенция 14, при което при лечението или комбинираната терапия първо се прилага първо съединение от групата на паклитаксел, таксотер или модифициран таксан или тасоид аналог и впоследствие се прилага съединение с формула (I).
  16. 16. Използване съгласно претенция 14, при което при лечението или комбинираната терапия първо се прилага съединение с формула (I) и в последствие се прилага първо съединение от групата на паклитаксел, таксотер или модифициран таксан или таксоид аналог.
  17. 17. Използване съгласно претенция 13 или 14, при което при лечението или комбинираната терапия съединение с формула (I) се прилага едновременно с първо съединение от групата на паклитаксел, таксотер или модифициран таксан или таксоид аналог.
  18. 18. Използване съгласно претенция 13 или 14, при което полученото лекарственото средство съдържа отделно първото съединение и второто съединение за последователно прилагане.
  19. 19. Използване съгласно претенция 13 или 14, при което полученото лекарственото средство съдържа заедно първото и второто съединение за съвместно прилагане на двете съединения.
  20. 20. Метод за получаване на лекарствено средство за лечение на рак при бозайници като рак на белите дробове, гърдата, дебелото черво, простатата, пикочния мехур, ректума, ендометриума или кръвта (напр. левкемия, лимфома), характеризиращ се с това, че като основен компонент на лекарственото средство се използва първо съединение от групата на паклитаксел, таксотер или модифициран таксан или таксоид аналог и второ съединение с формула (I) съгласно една от претенциите от 1 до 12, при което второто съединение се добавя в такова количество, че в комбинация с първото съединение действа синергитично.
BG103728A 1997-03-13 1999-09-13 Производни на доластатин-15 в комбинация с таксани BG64338B1 (bg)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US08/819,101 US6103698A (en) 1997-03-13 1997-03-13 Dolastatin-15 derivatives in combination with taxanes

Publications (2)

Publication Number Publication Date
BG103728A BG103728A (bg) 2000-04-28
BG64338B1 true BG64338B1 (bg) 2004-10-29

Family

ID=25227196

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BG103728A BG64338B1 (bg) 1997-03-13 1999-09-13 Производни на доластатин-15 в комбинация с таксани

Country Status (30)

Country Link
US (2) US6103698A (bg)
EP (1) EP0981358B1 (bg)
JP (1) JP2001514659A (bg)
KR (1) KR100555604B1 (bg)
CN (1) CN1157223C (bg)
AT (1) ATE241376T1 (bg)
AU (1) AU728027B2 (bg)
BG (1) BG64338B1 (bg)
BR (1) BR9808249A (bg)
CA (1) CA2282720C (bg)
CO (1) CO4940498A1 (bg)
CZ (1) CZ293905B6 (bg)
DE (1) DE69815100T2 (bg)
DK (1) DK0981358T3 (bg)
ES (1) ES2200317T3 (bg)
HK (1) HK1026851A1 (bg)
HR (1) HRP980125A2 (bg)
HU (1) HU228860B1 (bg)
ID (1) ID23900A (bg)
IL (2) IL131597A0 (bg)
NO (1) NO323894B1 (bg)
NZ (1) NZ337416A (bg)
PL (1) PL197834B1 (bg)
PT (1) PT981358E (bg)
RU (1) RU2218174C2 (bg)
SK (1) SK285133B6 (bg)
TR (1) TR199902244T2 (bg)
TW (1) TWI277426B (bg)
WO (1) WO1998040092A1 (bg)
ZA (1) ZA982093B (bg)

Families Citing this family (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20010009901A1 (en) 1996-12-11 2001-07-26 Basf Aktiengesellschaft Germany Antineoplastic peptides
AU775373B2 (en) 1999-10-01 2004-07-29 Immunogen, Inc. Compositions and methods for treating cancer using immunoconjugates and chemotherapeutic agents
US20050192443A1 (en) * 2000-11-08 2005-09-01 Lorus Therapeutics Inc. Biological response modifier for the treatment of cancer
AU2002214876A1 (en) * 2000-11-08 2002-05-21 Lorus Therapeutics Inc. Combination preparation of a biological response modifier and an anticancer agent and uses thereof
CA2607940C (en) 2005-05-18 2009-12-15 Aegera Therapeutics Inc. Bir domain binding compounds
BRPI0711591A2 (pt) 2006-05-16 2011-11-16 Aegera Therapeutics Inc composto de ligação de domìnio bir da iap
TW201129384A (en) 2010-02-10 2011-09-01 Immunogen Inc CD20 antibodies and uses thereof
SG182724A1 (en) 2010-02-12 2012-08-30 Pharmascience Inc Iap bir domain binding compounds
KR20230019120A (ko) * 2020-06-03 2023-02-07 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 고난도 서열의 효율적 펩티드 축합법
CA3230737A1 (en) 2021-09-03 2023-03-09 Toray Industries, Inc. Pharmaceutical composition for cancer treatment and/or prevention

Family Cites Families (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4816444A (en) * 1987-07-10 1989-03-28 Arizona Board Of Regents, Arizona State University Cell growth inhibitory substance
US5676978A (en) 1989-02-14 1997-10-14 Amira, Inc. Methods of inhibiting undesirable cell growth using a combination of a cyclocreatine compound and a hyperplastic inhibitory agent
US4879278A (en) 1989-05-16 1989-11-07 Arizona Board Of Regents Isolation and structural elucidation of the cytostatic linear depsipeptide dolastatin 15
US5278324A (en) * 1990-08-28 1994-01-11 Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. Water soluble derivatives of taxol
MX9102128A (es) 1990-11-23 1992-07-08 Rhone Poulenc Rorer Sa Derivados de taxano,procedimiento para su preparacion y composicion farmaceutica que los contiene
DE69230824T2 (de) 1991-08-09 2000-07-27 Teikoku Hormone Mfg Co Ltd Neue tetrapeptidderivate
US5250683A (en) * 1991-09-23 1993-10-05 Florida State University Certain substituted taxanes and pharmaceutical compositions containing them
US5227400A (en) * 1991-09-23 1993-07-13 Florida State University Furyl and thienyl substituted taxanes and pharmaceutical compositions containing them
US5272171A (en) * 1992-02-13 1993-12-21 Bristol-Myers Squibb Company Phosphonooxy and carbonate derivatives of taxol
FR2688518B1 (fr) * 1992-03-13 1994-05-06 Rhone Poulenc Rorer Sa Procede de preparation de derives du taxane.
US5831002A (en) * 1992-05-20 1998-11-03 Basf Aktiengesellschaft Antitumor peptides
US5248796A (en) * 1992-06-18 1993-09-28 Bristol-Myers Squibb Company Taxol derivatives
US5254580A (en) * 1993-01-19 1993-10-19 Bristol-Myers Squibb Company 7,8-cyclopropataxanes
FR2697752B1 (fr) * 1992-11-10 1995-04-14 Rhone Poulenc Rorer Sa Compositions antitumorales contenant des dérivés du taxane.
DE69329425T2 (de) * 1992-12-16 2001-01-18 Basf Ag Dolastatin analog
US5484612A (en) * 1993-09-22 1996-01-16 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Method of treating a mammal having a solid tumor susceptible to treatment with cisplatin
CA2129282A1 (en) 1993-09-29 1995-03-30 George Weber Method for the treatment of neoplastic disease utilizing taxol and tiazofurin
US5447936A (en) * 1993-12-22 1995-09-05 Bionumerik Pharmaceuticals, Inc. Lactone stable formulation of 10-hydroxy 7-ethyl camptothecin and methods for uses thereof
US5565478A (en) * 1994-03-14 1996-10-15 The United States Of America As Represented By The Department Of Health & Human Services Combination therapy using signal transduction inhibitors with paclitaxel and other taxane analogs
US5494930A (en) * 1994-06-02 1996-02-27 Shimizu; Yuzuru Caribenolide I
US5525613A (en) * 1994-06-16 1996-06-11 Entropin, Inc. Covalently coupled benzoylecgonine ecgonine and ecgonidine
US5504191A (en) * 1994-08-01 1996-04-02 Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University Human cancer inhibitory pentapeptide methyl esters
US5530097A (en) * 1994-08-01 1996-06-25 Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University Human cancer inhibitory peptide amides
US5543423A (en) * 1994-11-16 1996-08-06 Vertex Pharmaceuticals, Incorporated Amino acid derivatives with improved multi-drug resistance activity
AU699442B2 (en) 1994-12-15 1998-12-03 Baker Norton Pharmaceuticals, Inc. Method and composition for reducing tumor development with a combination of a taxane compound and a tellurium and/or selenium compound

Also Published As

Publication number Publication date
TWI277426B (en) 2007-04-01
PT981358E (pt) 2003-09-30
DE69815100T2 (de) 2004-02-05
AU728027B2 (en) 2001-01-04
NO994408L (no) 1999-11-10
CN1157223C (zh) 2004-07-14
BG103728A (bg) 2000-04-28
CA2282720A1 (en) 1998-09-17
RU2218174C2 (ru) 2003-12-10
ATE241376T1 (de) 2003-06-15
DE69815100D1 (de) 2003-07-03
US6103698A (en) 2000-08-15
NO323894B1 (no) 2007-07-16
HK1026851A1 (en) 2000-12-29
HUP0001381A2 (hu) 2000-10-28
US6632795B1 (en) 2003-10-14
NO994408D0 (no) 1999-09-10
IL131597A0 (en) 2001-01-28
KR100555604B1 (ko) 2006-03-03
WO1998040092A1 (en) 1998-09-17
CA2282720C (en) 2009-12-29
EP0981358B1 (en) 2003-05-28
PL335579A1 (en) 2000-05-08
ID23900A (id) 2000-05-25
AU6694598A (en) 1998-09-29
IL131597A (en) 2006-06-11
DK0981358T3 (da) 2003-09-22
BR9808249A (pt) 2000-05-16
HU228860B1 (en) 2013-06-28
CO4940498A1 (es) 2000-07-24
HRP980125A2 (en) 1999-02-28
SK125199A3 (en) 2000-08-14
HUP0001381A3 (en) 2001-12-28
KR20000076211A (ko) 2000-12-26
NZ337416A (en) 2001-05-25
CZ321199A3 (cs) 2000-02-16
TR199902244T2 (xx) 1999-12-21
SK285133B6 (sk) 2006-07-07
EP0981358A1 (en) 2000-03-01
ES2200317T3 (es) 2004-03-01
ZA982093B (en) 1999-09-12
CZ293905B6 (cs) 2004-08-18
JP2001514659A (ja) 2001-09-11
PL197834B1 (pl) 2008-04-30
CN1252728A (zh) 2000-05-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU679479B2 (en) Dolostatin analog
AU669710B2 (en) Derivatives of dolastatin
EP0981358B1 (en) Dolastatin-15 derivatives in combination with taxanes
AU748465B2 (en) Methods and compositions for treating rheumatoid arthritis
IL166853A (en) Antineoplastic peptides, their preparation and various uses thereof
US8440626B2 (en) Antineoplastic peptides
MXPA99008066A (en) Dolastatin-15 derivatives in combination with taxanes
CZ20001211A3 (cs) Prostředky pro léčení revmatoidní artritidy
PL178351B1 (pl) Nowe peptydy