SK283820B6 - Tricyklická amidová zlúčenina, farmaceutický prostriedok s jej obsahom a jej použitie - Google Patents

Abstract

Je opísaná tricyklická amidová zlúčenina alebo jej farmaceuticky prijateľné soli a solváty, ktoré sú účinnou zložkou farmaceutického prípravku. Táto tricyklická amidová zlúčenina sa používa najmä na inhibíciu nenormálneho rastu buniek, inhibíciu farnezyl-proteíntransferázy a na liečenie rôznych typov rakovín. ŕ

Description

Oblasť techniky

Tento vynález opisuje tricyklickú amidovú zlúčeninu, farmaceutický prostriedok, ktorý ju obsahuje ako účinnú látku ajej použitie na inhibíciu nenormálneho rastu buniek, inhibíciu farnezyl-proteíntransferázy a na liečenie rôznych typov rakovín.

Podstata vynálezu

Podstatou vynálezu je tricyklická amidová zlúčenina, vybraná zo skupiny, obsahujúcej:

Doterajší stav techniky

Biologický význam Ras-onkogénu a úloha Ras a enzýmu, známeho ako farnezyl-proteíntransferáza, pri premene normálnych buniek na rakovinové bunky, sú opísané v PCT Intemational Publication No. WO 95/00497 a WO 95/10516. Obidve tieto publikácie tiež opisujú rozdielne skupiny zlúčenín, ktoré inhibujú aktivitu enzýmu farnezylproteíntransferázy a tým famezyláciu Ras-proteínu.

PCT WO 95/10516 sa týka tricyklických amidových a močovinových zlúčenín všeobecného vzorca (1.0)

Br a ich použitia pri inhibícii funkcie Ras a nenormálneho rastu buniek. Je v nej opísaný rad podskupín zlúčenín vzorca (1.0), ktoré zahŕňajú zlúčeniny vzorcov (5.0c), (5.1c) a (5.2a), rovnako ako 11-R-izomér a 11-S-izoméry zlúčenín (5.0c) a (5.1c). Je v nej tiež opísaný rad konkrétnych zlúčenín v každej podskupine, rovnako ako biologická aktivita týchto zlúčenín.

I

Br

PCT WO 96/30363 opisuje spôsob inhibície Ras funkcie a teda inhibíciu abnormálneho rastu buniek. Tento spôsob obsahuje podávanie zlúčeniny vzorca (1.0) (ako je opísané v opise) biologickému subjektu, najmä cicavcom, akým je človek. Sú opísané zlúčeniny, v ktorých substituentom X je N, C alebo CH a R je (I) alebo (II).

EP 0270818 opisuje deriváty benzo[5,6]cykloheptapyridínu a jeho farmaceutický prijateľné soli a solváty, ktoré majú antialergickú a protizápalovú účinnosť. Je opísaný taktiež spôsob prípravy týchto derivátov.

EP 0396083 opisuje deriváty hcterocyklických N-oxidov substituovaných benzo[5,6]cykloheptapyridinmi, prostriedok s ich obsahom, spôsob prípravy a ich použitie.

SK 283820 Β6

alebo ich farmaceutický prijateľné soli alebo solváty.

Optické rotácie zlúčenín ((+)- alebo (-)-) sú merané v metanole alebo etanole pri 25° C. Tento vynález zahrnuje uvedené zlúčeniny v amorfnom alebo kryštalickom stave.

Medzi zlúčeniny tohto vynálezu teda patria zlúčeniny, vybrané zo skupiny, obsahujúce: zlúčeniny 1,0, 2,0, 3,0, 4,0, 5.0, 7,0 a 6,0. alebo ich farmaceutický prijateľné soli, kde sú uvedené také zlúčeniny, aké boli definované.

Medzi zlúčeniny tohto vynálezu tiež patria zlúčeniny vybrané zo skupiny, obsahujúce: zlúčeniny 10,0, 11,0, 12,0, 13,0, 16,0 17,0, 18,0, 19,0, 20,0, 21,0 a 22,0, alebo ich far maceutický prijateľné soli, kde sú uvedené také zlúčeniny, aké boli uvedené.

Medzi zlúčeniny tohto vynálezu tiež patria zlúčeniny vybrané zo skupiny, obsahujúce: zlúčeniny 8,0, 9,0, 14,0 a 15,0 alebo ich farmaceutický prijateľné soli, kde sú uvedené také zlúčeniny, aké boli uvedené.

Medzi zlúčeniny tohto vynálezu tiež patria zlúčeniny vybrané zo skupiny, obsahujúce: zlúčeniny 23,0, 25,0, 26,0, 27,0, 28,0, 29,0, 30,0, 31,0, 32,0, 33,0, 34,0, 60,0, 61,0, 62,0, 63,0, 64,0 alebo ich farmaceutický prijateľné soli, kde sú uvedené také zlúčeniny, aké boli uvedené.

Medzi zlúčeniny tohto vynálezu tiež patria zlúčeniny vybrané zo skupiny, obsahujúce: zlúčeniny 23,0A, 24,0, 35,0, 36,0, 37,0, 38,0, 39,0, 40,0, 41,0, 42,0, 47,0, 48,0, 49,0, 50,0, 51,0, 52,0, 53,0, 54,0, 55,0, 56,0, 57,0, 58,0, 59,0, a 65,0 alebo ich farmaceutický prijateľné soli, kde sú uvedené také zlúčeniny, aké boli uvedené.

Medzi zlúčeniny tohto vynálezu tiež patria zlúčeniny vybrané zo skupiny, obsahujúce: zlúčeniny 43,0, 44,0, 45,0 a 46,0 alebo ich farmaceutický prijateľné soli, kde sú uvedené také zlúčeniny, aké boli uvedené.

Medzi uprednostňované zlúčeniny patria zlúčeniny 5.0, 7,0, 25,0, 27,0, 29,0 a 34,0.

Medzi uprednostňované zlúčeninv tiež patria zlúčeniny 51,0 a 53,0.

Medzi uprednostňované zlúčeniny tiež patria zlúčeniny 40,0 a 42,0.

Medzi viac uprednostňované zlúčeniny patria zlúčeniny 25,0, 27,0, 51,0 a 53,0.

Odborníci v odbore pochopia, že je tento tricyklický systém číslovaný:

Odborníci v odbore tiež pochopia, že S a R priestorové usporiadanie na väzbe C-l 1 sú:

Inhibícia farnezyl-proteíntransferázy tricyklickými zlúčeninami ešte nebola opísaná. Tento vynález teda poskytuje spôsob inhibície farnezyl-proteíntransferázy pri použití tricyklických zlúčenín tohto vynálezu, ktoré: (i) účinne inhibujú farnezyl-proteíntransferázu, ale nie geranylgeranylproteíntransferázu 1, in vitro; (ii) blokujú fenotypickú zmenu, indukovanú formou transformujúceho Ras, ktorá je akceptor farnezylu, ale nie formou transformujúceho Ras, ktorá bola vytvorená tak, aby bola akceptorom geranylgeranylu; (iii) blokuje intracelulárnu úpravu Ras, ktorý je akceptorom farnezylu, ale nie Ras, ktorý bol vytvorený tak, aby bol akceptorom geranylgeranylu, a (iv) blokuje nenormálny bunkový rast v kultúrach, indukovaných transformujúcim Ras.

Tento vynález poskytuje spôsob inhibície alebo liečenia nenormálneho rastu buniek vrátane transformovaných buniek, podávaním účinného množstva zlúčeniny tohto vynálezu. Nenormálny rast buniek označuje bunkový rast, ktorý je nezávislý od normálnych regulačných mechanizmoch (napr. strata kontaktnej inhibície). Zahŕňa nenormálny rast: (1) nádorových buniek (nádorov), exprimujúcich aktivovaný Ras-onkogén; (2) nádorových buniek, v ktorých je Ras-proteín aktivovaný ako výsledok onkogénnej mutácie v inom géne; (3) benígnych a malígnych buniek iných proliferatívnych porúch, v ktorých dochádza k chybnej aktivácii Ras.

Tento vynález tiež poskytuje spôsob inhibície alebo liečenia nádorového rastu (rakoviny) podávaním účinného množstva tricyklických, tu opísaných zlúčenín, cicavcovi (napr. človekovi), ktorý takú liečbu potrebuje. Konkrétne tento vynález poskytuje spôsob inhibície alebo liečenia rastu nádorov, exprimujúcich aktivovaný Ras-onkogén, podávaním účinného množstva uvedených zlúčenín. Príklady nádorov, ktoré môžu byť inhibované alebo liečené, zahrnujú, ale nielen rakovinu pľúc (napr. pľúcny adenokarcinóm), rakovinu slinivky brušnej (napr. pankreatický karcinóm, ako je napr. exokrinný pankreatický karcinóm), rakovinu hrubého čreva (napr. kolorektálne karcinómy, ako je napr. adenokarcinóm hrubého čreva a adenom hrubého čreva), miechovú leukémiu (napr.akútnu myelogénnu leukémiu(AML)), rakovinu folikulov štítnej žľazy, myelodisplastický syndróm (MDS), karcinóm žlčníka, epidermálny karcinóm, rakovinu prsníka a rakovinu prostaty.

Tento vynález tiež poskytuje spôsob inhibície proliferatívnych porúch, tak benígnych, ako aj malígnych, kde sú Ras-proteíny chybne aktivované, ako výsledok onkogénnej mutácie v iných génoch, t. j. Ras-gén sám nie je aktivovaný mutáciou na onkogénnu formu, kde je spomenutej inhibície dosiahnuté podávaním účinného množstva tricyklických, tu opísaných, zlúčenín cicavcovi, (napr. človekovi), ktorý takú liečbu potrebuje. Tu opísanými tricyklickými zlúčeninami môže byť inhibovaná napr. genígna proliferatívna porucha neurofibromatóza, alebo nádory, v ktorých je aktivácia Ras spôsobená mutáciou alebo nadexpresiou tyrosinkinázových onkogénov (napr.neu,src,abl,lck a fyn).

Zlúčeniny tohto vynálezu inhibujú farnezylproteíntransferázu a farnezyláciu onkogénneho proteínu Ras. Tento vynález ďalej poskytuje pôsob inhibície Ras famezylproteíntransferázy u cicavcov, najmä u človeka, podávaním účinného množstva tricyklických zlúčenín, opísaných skôr. Podávanie zlúčenín tohto vynálezu pacientom, na účely inhibície famezyl-proteín-transferázy, je užitočné pri liečení opísaných rakovín.

Tieto tricyklické zlúčeniny, užitočné v metódach tohto vynálezu, inhibujú nenormálny rast buniek. Domnienka je, že tieto zlúčeniny môžu fungovať cez inhibiciu funkcie G-proteínu, ako je Ras p21, blokovaním izoprenylácie G-proteínu, čím sa stávajú užitočnými pri liečení proliferatívnych porúch, ako je nádorový rast a rakovina. Domnienka je, že tieto zlúčeniny inhibujú Ras famezylproteíntransferázu a vykazujú teda antiproliferatívnu aktivitu pri bunkách transformovaných Ras.

Keď sú tu použité, sú nasledujúce termíny použité tak, ako je definované neskôr, pokiaľ nie je uvedené inak: M⁺ - predstavuje molekulový ión molekuly v hmotnostnom spektre;

MH⁺ - predstavuje molekulový ión plus vodík molekuly v hmotnostnom spektre;

Pyridyl-N-oxidy sú tu predstavované skupinou

diisobutylhliníka (DIBAL); izopropanol (iPrOH); dimetylsulfoxid (DMSO).

Niektoré zlúčeniny predkladaného vynálezu môžu existovať v rôznych izomémych formách (napr. enantioméry alebo diastereoizoméry) vrátane atropizomérov (t. j. zlúčenín, ktoré majú 7-členný kruh v ustálenej konformácii tak, že je uhlíkový atóm v pozícii 11 umiestnený nad rovinou alebo pod rovinou fuzovaných benzénových kruhov, pre prítomnosť hromového substituentu v pozícii 10). Tento vynález zahrnuje všetky také izoméry tak v čistej forme, ako aj v zmesiach vrátane zmesí racemických. Enol formy sú zahrnuté tiež.

Niektoré zásadité tricyklické zmesi tiež vytvárajú farmaceutický prijateľné soli, napr. soli vzniknuté pridaním kyselín. Napríklad, dusíkové atómy pyridínu môžu vytvárať soli so silnými kyselinami. Príklady vhodných kyselín na tvorbu solí sú kyselina sírová, fosforečná, octová, citrónová, oxalová, malónová, salicylová, jablčná, fumarová, jantárová, askorbová, maleínová, metánsulfonová a iné anorganické a karboxylové kyseliny, dobre známe v odbore. Tieto soli sú pripravené stretnutím formy s voľnou bázou, s dostatočným množstvom požadovanej kyseliny na vznik soli bežným spôsobom. Formy s voľnou bázou môžu byť obnovené tak, že je na soľ pôsobené rozriedeným, vodným roztokom vhodnej bázy, ako je napr. rozriedený vodný NaOH, uhličitan draselný, hydrogenuhličitan sodný alebo amónny. Formy s voľnou bázou sa trochu líšia od ich podobných solí v niektorých fyzikálnych vlastnostiach, ako je rozpustnosť v polárnych rozpúšťadlách, ale soli kyselín alebo bázy sú inak na účely tohto vynálezu rovnocenné formám s voľnou bázou.

Všetky také soli sú považované za farmaceutický prijateľné a na účely tohto vynálezu považované za rovnocenné voľným formám im zodpovedajúcich zlúčenín.

Zlúčeniny predkladaného vynálezu môžu byť pripravené pomocou postupov, ktoré sú opísané neskôr.

Príprava piperidínových zlúčenín

Zlúčeniny tohto vynálezu, majúce piperidínový kruh (kruh IV):

môžu byť pripravené technikami, ktoré sú v odbore dobre známe, zo zodpovedajúcich neoxidovaných pyridylových zlúčenín:

Nasledujúce rozpúšťadlá a činidlá sú predstavované uvedcnými skratkami: tetrahydrofúrán (THF); etanol (EtOH); metanol (MeOH); kyselina octová (HOAc alebo AcOH); etylacetát (EtOAc); Ν,Ν-dimetylformamid (DMF); kyselina trifluóroctová (TFA); anhydrid kyseliny trifluóroctovej (TFAA); 1-hydroxybonzotriazol (HOBT); kyselina m-chlórbenzoová (MCPBA); trietylamín (Et₃N); dietyléter (Et₂O); etylchlórmravenčan (ClCO₂Et); hydrochlorid l-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimidu (DEC); hydrid

Zlúčeniny tohto vynálezu teda môžu byť pripravené z:

Br Br

Br

Br

ĽJ Br

Piperidínové zlúčeniny (vzorec I) tohto vynálezu môžu byť pripravené z uvedených pyridylových zlúčenín oxidáciou kyselinou metachlórperoxybenzoovou. Táto reakcia je uskutočňovaná vo vhodnom organickom rozpúšťadle, napr. dichlórmetáne (bežne bezvodom) alebo metylénchloride, pri vhodnej teplote, počas vzniku zlúčeniny tohto vynálezu, ktoré majú v pozícii 1 kruhu I tricyklického systému N-Osubstituent.

Všeobecne je roztok východiskovej tricyklickej zlúčeniny v organickom rozpúšťadle pred pridaním kyseliny metachlór-peroxybenzoovej ochladený na 0 °C. Reakčná zmes potom v priebehu reakcie sa nechá zohriať na izbovú teplotu. Požadovaný produkt môže byť získaný štandardnými separačnými spôsobmi. Reakčná zmes môže byť napríklad premytá vodným roztokom vhodnej bázy, napr. nasýteným hydrogenuhličitanom sodným alebo NaOH (napr. 1 N NaOH) a potom vysušená pomocou bezvodého síranu horečnatého. Roztok obsahujúci produkt môže byť zahustený vo vákuu. Produkt môže byť purifikovaný štandardnými spôsobmi, napr. chromatografiou pri použití silikagélu (napr. flash kolónovou chromatografiou).

Alternatívne môžu byť piperidínové zlúčeniny (vzorec I) tohto vynálezu vytvorené z intermediátových zlúčenín vzorcov (1.1) až (65.1), pri použití oxidačného postupu kyselinou m-chlórperoxybenzoovou. Tieto oxidované intermediátové zlúčeniny sa potom nechajú reagovať pri použití metód známych v odbore, aby vznikli zlúčeniny tohto vynálezu. Napríklad, 3,8-dihalogénové zlúčeniny môžu byť vytvorené z tohto intermediátu:

ktorý je vytvorený oxidáciou tejto pyridylovej zlúčeniny

o kyselinou m-chlórperoxybenzoovou.

3,7,8-trihalogénové zlúčeniny, 3,8,10-trihalogénové zlúčeniny, 3,8-dihalogénové zlúčeniny a 3,10-dihalogénové zlúčeniny môžu byť vytvorené jednotlivo z týchto intermediátov:

Zlúčeniny (III) až (VI) môžu byť jednotlivo pripravené pri použití uvedeného oxidačného postupu kyselinou mchlórperoxybenzoovou a pyridylových zlúčenín jednotlivo pri vzniku týchto zlúčenín.

!

jednotlivo pri vzniku týchto zlúčenín.

Zlúčeniny (XI) až (XIV) môžu byť jednotlivo premenené na zlúčeniny (III) až (IV), metódami známymi v odbore.

Pri uvedených zlúčeninách predstavuje prerušovaná čiara (—) voliteľnú väzbu a X predstavuje CH, keď táto voliteľná väzba chýba, a C, keď je táto voliteľná väzba prítomná. N-0 intcrmcdiáty sa potom nechajú ďalej reagovať, aby vznikli zlúčeniny tohto vynálezu.

Odborníci v odbore ocenia, že táto oxidačná reakcia môže byť uskutočnená pri racemických zmesiach a izoméry môžu byť potom oddelené známymi technikami, alebo môžu byť izoméry najskôr oddelené a potom oxidované na zodpovedajúce N-oxidy.

Odborníci v odbore pochopia, že keď je uskutočnená oxidačná reakcia pri zlúčeninách, majúcich v C-l 1 piperidínového kruhu IV dvojitú väzbu (napr. zlúčeniny 5,1, 6,1, 9,1 a pod.), je uprednostňované vyvaľovanie sa prebytku kyseliny m-chlór-peroxybenzoovej. V týchto reakciách by prebytok kyseliny m-chlórperoxybenzoovcj mohol spôsobiť oxidáciu dvojitej väzby v pozícii C-l 1.

Intermediátové zlúčeniny VII, VIII, IX a X sú pripravené metódami známymi v odbore napr. metódami, opísanými vo WO 95/10516, v U.S. 5 151 423 a opísanými neskôr. Napr. zlúčeninami (VII) až (X) môžu byť jednotlivo pripravené reakcie zlúčenín halogén

c) reakciu tejto kyanozlúčeniny alebo tohto aldehydu s derivátom piperidínu vzorca

MgL

Ó ,

I kde L je odštepovaná skupina, vybraná zo skupiny, obsahujúcej Cl a Br, na získanie alebo ketónu alebo alkoholu

d) i) cyklizáciou tohto ketónu CF3SO3H, na získanie zlúčeniny vzorca s C₂H₅OCOC1 a EtjN v nejakom inertnom rozpúšťadle (napr.CH₂Cl₂).

Intermediátové zlúčeniny (XV), (XVI), (XVII) a (XVIII), kde je pozícia C-3 pyridínového kruhu tricyklickej štruktúry substituovaná brómom, môžu byť tiež pripravené postupom, obsahujúcim nasledujúce kroky:

a) reakciou amidu vzorca

kde R¹¹ je Br, R⁵ je vodík a R⁶ je C]-C6-alkyl, aryl alebo heteroaryl; R⁵“ je C,-C6-alkyl, aryl alebo heteroaryl a R^6a je vodík; R^5a a R^6a sú nezávisle vybrané zo skupiny obsahujúcej C|-C6-alkyl a aryl; alebo R⁵“ a R^6a, spoločne s dusíkovým atómom, na ktorý sú viazané, vytvára kruh, obsahujúci 4 až 6 uhlíkových atómov alebo obsahuje 3 až 5 uhlíkových atómov a jednu heteroskupinu, vybranú zo skupiny, obsahujúcu-O- a-NR⁹“-, kde R⁹“ je H, CrC₆-alkyl alebo fenyl; so zlúčeninou vzorca

kde R^la, R²“, R³“ a R⁴“ sú nezávisle vybrané zo skupiny, obsahujúcej vodík a halogén, a R⁷“ je Cl alebo Br, počas prítomnosti nejakej silnej bázy, na získanie zlúčeniny vzorca

R¹⁸

NR^5aR^fe R⁴³

b) reakciou zlúčeniny z kroku a) s

i) POC1₃ na získanie kyanozlúčeniny vzorca

kde prerušovaná čiara predstavuje dvojitú väzbu alebo ii) cyklizáciou tohto alkoholu kyselinou polyfosforečnou na získanie intermediátovej zlúčeniny, kde prerušovaná čiara predstavuje jednoduchú väzbu.

Spôsoby na prípravu týchto intermediátových zlúčenín opísané v WO 95/10516, U.S. 5 151 423 a opísané neskôr, využívajú tricyklický ketónový intermediát. Takéto intermediáty vzorca

H¹·

kde R^llb, R^la, R²“, R³“ a R^4a sú nezávisle vybrané zo skupiny, obsahujúcej vodík a halogén, môže byť pripravený pomocou nasledujúceho postupu, ktorý zahrnuje:

a) reakciu zlúčeniny vzorca

i) s amínom vzorca NHR^5aR^6a, kde R^5a a R^6a sú definované v uvedenom postupe; za prítomnosti paládiového katalyzátora a oxidu uhličitého, na získanie amidu vzorca

ii) s alkoholom vzorca R¹⁰OH, kde R¹⁰ je nižšie C_rC₆-alkyl alebo C₃-C₆-cykloalkyl, za prítomnosti paládiového katalyzátora a oxidu uhličitého, na získanie esteru vzorca

OA'»>

a ďalej reakciou tohto esteru s amínom vzorca NHR^5aR^6a, na získania amidu;

b) reakciu tohto amidu s benzylovou zlúčeninou, substituovanou jódom vzorca

R⁴» kde R^Ia, R^2a, R^3a, R^4a a R^7a sú definované, za prítomnosti silnej bázy, na získanie zlúčeniny vzorca h¹·

c) cyklizáciu zlúčeniny kroku (b) činidlom vzorca R^8aMgL, kde R^8aje C_rC₆-alkyl, aryl alebo heteroaryl a L je Br alebo Cl, kde sa pred cyklizáciou zlúčeniny, kde je R^5a a R^6a vodík, nechajú reagovať s vhodnou N-blokujúcou skupinou.

(+)-Izoméry zlúčenín vzorca (XVI)

Ketón (XX) môže byť pripravený oxidáciou zodpovedajúcej pyridylovej zlúčeniny

o kyselinou m-chlórperoxybenzoovou

Ketón (XX) môže byť premenený na zodpovedajúcu C-l 1-hydroxyzlúčeninu, ktorá môže byť premenená na zodpovedajúcu zlúčeninu s chlórom v pozícii C-l 1.

Zlúčenina (XXIII) môže potom reagovať s piperazínom na vzniku tohto intermediátu

kde X je CH môžu byť pripravené vyššou enantioselektivitou, pri použití postupu, ktorý obsahuje enzýmom katalyzovanú transesterifikáciu. Prednostne sa racemická zlúčenina vzorca (XVI), kde X je C a dvojitá väzba je prítomná, nechá reagovať s enzýmom, ako je ToYobo LIP-300 a nejakým acylačným činidlom, ako je trifluoetylsobutyrát; výsledný (+)-amid je potom hydrolyzovaný, napríklad refluxovaním s nejakou kyselinou, ako je H₂SO₄, na získanie zodpovedajúceho opticky obohateného (+)-izoméru, kde X je CH.

Alternatívne je racemická zlúčenina vzorca (XVI), kde X je C a dvojitá väzba je prítomná, najskôr redukovaná na zodpovedajúcu racemickú zlúčeninu vzorca (XVI), kde X je CH a potom sa na ňu pôsobí enzýmom (Toyobo LIP300) a nejakým acylačným činidlom, ako je uvedené, na získanie (+)-amidu, ktorý je hydrolyzovaný, na získanie zodpovedajúceho opticky obohateného (+)-izoméru.

Zlúčenina príkladu 21 je získaná v kryštalickom stave. Odborníci v odbore pochopia, že zlúčeniny, získané v amorfnom stave môžu byť získané v kryštalickom stave kryštalizáciou amorfných látok z rozpúšťadiel, ako je acetón, dietyléter, etylacetát, etanol, 2-propanol, terc.butyléter, voda a pod. podľa postupu, v odbore dobre známych.

Odborníci v odbore tiež pochopia, že racemická zmes zlúčeniny (11.0) môže byť vytvorená podľa opísaných postupov. Napríklad na prípravu zlúčeniny (11.0) môže byť použitý interrnediát príkladu 6.

Príprava piperazínových zlúčenín

Zlúčeniny tohto vynálezu, majúce piperazínový kruh

môžu byť pripravené z tricyklického ketónu:

Interrnediát XXIV môže potom reagovať s tými činidlami, ktoré poskytnú požadovaný konečný produkt.

Uvedené reakcie sú v odbore dobre známe a sú objasnené v nasledujúcich príkladoch.

Nasledujúce príklady majú objasňovať tento nárokovaný vynález a nemali by byť chápané ako obmedzujúci opis alebo tento nárokovaný vynález.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklad 1

Krok A

Zmiešajte 10 g (60,5 mol) etyl-4-pyridylacetátu a 120 ml bezvodého pri CH3CI2 pri -20 °C, pridajte 10,45 g (60,5 mol) MCPBA a miešajte pri -20 °C počas 1 hodiny a potom pri 25°C počas 67 hodín. Pridajte ďalších 3,48 g (20,2 mol) MCPBA a miešajte pri 25 °C počas 24 hodín. Rozrieďte CII2CI2 a premyte nasýteným NaHCO₃ (vodným) a potom vodou. Vysušte pomocou MgSO₄, zahustite vo vákuu a chromatografujte (silikagél, 2 % - 5,5 % (10 % NH₄OH v MeOH)/CH₂Cl₂) na získanie 8,12 g produktu. Hmotn. spektr.: MH⁺= 182,15

Krok B

Zmiešajte 3,5 g (19,3 mol) produktu kroku A, 17,5 ml EtOH a 96,6 ml 10 % NaOH (vodného) a túto zmes zohrievajte pri 67 °C počas 2 hodín. Pridaním 2 N HCI (vodné) a upravte pH na 2,37 a zahustite vo vákuu. Pridajte 200 ml bezvodého EtOH, prefiltrujte cez celite® a filtračný koláč premyte bezvodým EtOH (2 x 50 ml). Zahustite zmiešané filtráty vo vákuu na získanie 2,43 g cieľovej zlúčeniny.

Príklad 2

Krok C (Cl

Cieľová zlúčenina bola pripravená postupom, opísaným v PCT International Publication No. WO 95/10516.

Príklad 3

Zmiešajte 14,95 g (39 mol) 8-chlór-ll-(l-etoxykarbonyl-4-piperi d inyl)-11 H-benzo[5,6]cyklohepta[ 1,2-b] -pyridinu a 150 ml CH₂C1₂, potom pridajte 13,07 (42,9 mol)(nBu)₄NN0₃ a túto zmes ochlaďte na 0 °C. Pomaly (po kvapkách), počas 1,5 hodiny, pridávajte roztok 6,09 ml (42,9 mol) TFAA v 20 ml CH₂C1₂. Zmes udržiavajte počas noci na 0 °C a potom ju postupne premyte nasýteným NaHCO₃ (vodným), vodou a roztokom NaCI. Tento organický roztok vysušte pomocou Na₂SO₄, zahustite vo vákuu a chrómatografujte (silikagél, EtOAc/hexánový gradient) na získanie 4,32 g a 1,90 g dvoch produktov 3A(i) a 3A(ii). Hmotn. spektrum pre zlúčeninu 3A(i): MH⁺= 428,2. Hmotn. spektrum pre zlúčeninu 3A(ii): MH⁺= 428,3.

Krok B

Zmiešajte 22 g (51,4 mol) produktu 3 A(i) kroku A, 150 ml 85 % EtOH (vodného), 25,85 g (0,463 mol) Fe prášku a 2,42 g (21,8 mol) CaCl₂ a zohrievajte počas noci pod spätným chladičom. Pridajte 12,4 g (0,222 mol) Fe prášku a 1,2 g (10,8 mol) CaCl₂ ml a zohrievajte pod spätným chladičom počas 2 hodín. Pridajte ďalších 12,4 g (0,222 mol) Fe prášku a 1,2 g (10,8 mol) CaCl₂ ml a zohrievajte pod spätným chladičom počas ďalších 2 hodín. Túto horúcu zmes prefiltrujte cez celíte®, tento celíte® premyte 50 ml horúceho EtOH a filtrát zahustite vo vákuu. Pridajte 100 ml bezvodého EtOH, zahustite a chrómatografujte (silikagél, MeOH/CH₂Cl₂ gradient) na získanie 16,47 g produktu. MH⁺= 398.

Zmiešajte 16,47 g (41,4 mol) produktu kroku B a 150 ml 48 % HBr (vodné) a ochlaďte na -3 °C. Pomaly (po kvapkách), pridajte 18 ml brómu, potom pomaly (po kvapkách), pridajte roztok 8,55 g (0,124 mol) NaNO₂ v 85 ml vody. Miešajte počas 45 minút pri -3 až 0 °C a potom upravte pH na 10, pridaním 50 % NaOH (vodného). Extrahujte EtOAc, extrakty premyte roztokom NaCI a vysušte pomocou Na₂SO₄. Zahustite a chrómatografujte (silikagél, EtOAc/hexánový gradient) na získanie 10,6 g a 3,28 g dvoch produktov 3C(i) a 3C(ii).

Hmotn. spektr. pre zlúčeninu 3C(i): MH⁺ = 461,2. Hmotn. spektr. pre zlúčeninu 3C(ii): MH¹ = 539.

Hydrolyzujte produkt 3C(i) kroku C rozpustením v koncentrovanej HCI a zohriatím na asi 100 °C počas 16 hodín. Zmes ochlaďte a potom ju neutralizujte 1 M NaOH (vodným). Extrahujte CH₂CI₂, extrakty vysušte pomocou MgSO₄, prefiltrujte a zahustite vo vákuu na získanie cieľovej zlúčeniny.

Hmotn. spektr.: MH⁺= 466,9.

Príklad 4

Zmiešajte 25,86 g (55,9 mol) etylesteru kyseliny 4-(8-chlór-3-bróm-5,6-dihydro-l lH-benzo[5,6]cyklohepta[l,2-b]-pyridin-1 l-ylidén)-l-piperidín-l-karboxylovej a 250 ml koncentrovanej H₂SO₄, pri -5 °C, potom pridajte 4,8 g (56,4 mol) NaNO₃ a miešajte počas 2 hodín. Túto zmes prilejte k 600 g ľadu a alkalizujte ju pridaním koncentrovaného NH₄OH (vodného). Zmes prefiltrujte a premyte 300 ml vody, potom extrahujte 500 ml CH₂C1₂. Exrakt premyte 200 ml vody, vysušte pomocou MgSO₄, potom prefiltrujte a zahustite vo vákuu. Chrómatografujte (silikagél, EtO

Ac/CH₂C12 gradient) na získanie 24,4 g (výťažok 86 % ) produktu.

m.p. = 165-176°C, hmotn. spektr.: MH⁺= 506 (Cl).

Prvková analýza: vypočítané -C-52,13; H-4,17; N-8,29; zistené -C-52J8; H-4,51; N-8,16.

Zmiešajte 29 g (40,5 mol) produktu kroku A a 200 ml koncentrovanej H₂SO₄ pri 20 °C, potom zmes ochlaďte na 0 °C. K tejto zmesi pridajte 7,12 (24,89 mol) l,3-dibróm-5,5-dimetylhydantoinu a miešajte počas 3 hodín pri 20 °C. Ochlaďte na 0 °C, pridajte ďalší 1 g (3,5 mol) dibrómhydantoinu a miešajte pri 20 °C počas 2 hodín. Túto zmes pridajte do' 400 g ľadu a zvýšte pH pridaním koncentrovaného NH4OH (vodného) pri 0 °C a výslednú pevnú látku sústreďte filtráciou. Premyte ju 300 ml vody, suspendujte v 200 ml acetónu a prefiltrujte, na získanie 19,79 g (výťažok 85,6 %) produktu.

m.p. =236-237 °C

Hmotn. spektr.: MH⁺= 584 (Cl).

Prvková analýza: vypočítané-C-45,11; H-3,44; N-7,17; zistené-C-44,95; H-3,57; N-7,16.

Zmiešajte 25 g (447 mol) Fe náplne, 10 g (90 mol) CaCl₂ a suspenziu 20 g (34,19 mol) produktu kroku B v 700 ml zmesi EtOH /voda (90 : 10) pri 50 °C. Túto zmes zohrievajte pod spätným chladičom počas noci, prefiltrujte cez celíte® a filtračný koláč premyte 2 x 200 ml horúceho EtOH. Spojte filtrát a premytie a zahustite vo vákuu. Extrahujte 600 ml CH₂CI₂, premyte 300 ml vody a vysušte pomocou MgSO₄. Prefiltrujte a zahustite vo vákuu, potom chromatografujte (silikagél, 30 EtOAc/CH₂Cl₂) na získanie 11,4 g (výťažok 60 %) produktu.

m.p. = 211-212 °C

Hmotn. spektr.: MH⁺= 554 (Cl).

Prvková analýza: vypočitané-C-47,55; H-3,99: N-7,56; zistené-C-47,45; H-4,31; N-7,49.

Pomaly (po častiach), pridávajte 20 g (35,9 mol) produktu kroku C k roztoku 8 g (116 mol) NaNO₂ v 120 ml koncentrovanej HC1 (vodnej) pri -10 °C. Výslednú zmes miešajte pri 0 °C počas 2 hodín, potom pomaly (po kvapkách), pri 0 °C, počas 1 hodiny, pridávajte 150 ml (1,44 mol) 50 % H₃PO₄. Túto zmes miešajte pri 0 °C počas 3 hodín, potom ju pridajte k 600 g ľadu a alkalizujte pridaním koncentrovaného NH₄OH (vodného). Extrahujte 2 x 300 ml CH₂C1₂, extrakty vysušte pomocou MgSO₄, potom prefiltrujte a zahustite vo vákuu. Chromatografujte (silikagél, 25 % EtOAc/hexán) na získanie 13,67 g (výťažok 70 % ) produktu.

m.p. = 163 - 165 °C

Hmotn. spektr.: MH⁺= 539 (Cl).

Prvková analýza: vypočítané-C-48,97; H-4,05; N-5,22; zistené-C-48,86; H-3,91; N-5,18.

Zmiešajte 6,8 g (12,59 mol) produktu kroku D a 100 ml koncentrovanej HC1 (vodnej) a miešajte počas noci pri 85 °C. Zmes ochlaďte, nalejte na 300 g ľadu a alkalizujte pridaním koncentrovaného NH₄OH (vodného). Extrahujte 2 x x 300 ml CH₂C1₂, extrakty potom vysušte pomocou MgSO₄. Prefiltrujte a zahustite vo vákuu, potom chrómatografujte (silikagél, 10 % MeOH/EtOAc + 2 % NH₄OH (vodný) na získanie 5,4 (výťažok 92 %) produktu.

m.p. = 172-174°C Hmotn.spektr.: MH* = 467.

Prvková analýza: vypočítané-C-48.69; H-3,65; N-5,97; zistené-C-48,83; H-3,80; N-5,97.

Príklad 5

N H

Hydrolyzujte 2,42 g etylesteru kyseliny 4-(8-chlór-3-bróm-5,6-dihydro-l lH-benzo[5,6]cyklohepta[l ,2-b]-pyridin-11 -ylidén)-1-piperidín-1 -karboxylovej podľa v podstate rovnakého postupu, ako je ten, ktorý je opísaný v kroku D príkladu 3, na získanie 1,39 g (výťažok 69 % produktu). MH⁺=389.

Zmiešajte 1 g (2,48 mol) produktu kroku A a 25 ml bezvodého toluénu, pridajte 2,5 ml 1 M DIBAL v toluéne a túto zmes zohrievajte pod spätným chladičom. Po pol hodine pridajte ďalšie 2 ml 1 M DIBAL v toluéne a zohrievajte pod spätným chladičom počas 1 hodiny. (Reakcia je sledovaná pomocou TLC, pri použití 50 % MeOH/CH₂Cl₂ + + NH₄OH (bezvodý). Zmes ochlaďte na izbovú teplotu, pridajte 1 N HC1 (vodnú) a miešajte 5 minút. Pridajte 100 ml 1 N NaOH (vodného) a potom extrahujte EtOAc (3 x x 150 ml). Extrakty vysušte pomocou MgSO₄, prefiltrujte a zahustite vo vákuu na získanie 1,1 g cieľovej zlúčeninv. MH⁺=391.

Príklad 6

Zmiešajte 16,6 (0,03 mol) produktu kroku D príkladu 4 s roztokom (3:1) CH₃CN a vody (212,64 ml CH₃CN a 70,8 ml vody) a výslednú suspenziu miešajte počas noci pri izbovej teplote. Pridajte 32,833 g (0,153 mol) NalO₄ a potom 0,31 g (2,30 mol) a miešajte pri izbovej teplote (pridanie RuO₂ je sprevádzané exotermnou reakciou a zvýšením teploty z 20 °C na 30 °C). Túto zmes miešajte počas 1,3 hodiny (teplota asi po 30 min. znova klesne na 25 °C), potom ju prefiltrujte s cieľom odstrániť pevné látky a tie premyte CH₂C1₂. Filtrát zahustite vo vákuu a rozpusťte v CH₂C1₂. Prefiltrujte na účely odstrániť nerozpustné pevné látky a tie premyte CH₂C1₂. Filtrát premyte vodou, zahustite na objem asi 200 ml a premyte lúhom a potom vodou. Extrahujte 6 N HC1 (vodnou). Vodný extrakt ochlaďte na 0 °C a pomaly pridávajte 50 % NaOH (vodný), s cieľom upraviť pH na 4, a pritom udržuje teplotu nižšiu ako 30 °C. Extrahujte dvakrát CH₂C1₂, vysušte pomocou MgSO₄ a zahustite vo vákuu. Zvyšok suspendujte v 20 ml EtOH a ochlaďte na 0 °C. Sústreďte výsledné pevné látky filtráciou a vysušte vo vákuu, na získanie 7,95 g produktu. ’H NMR (CDC1₃ 200 Mhz):8,7(s,lH); 7,85(m, 6H); 7,5(d,2H); 3,45(m,2H); 3,15(m,2H).

Príklad 7

Zmiešajte 15 g (38,5 mol) etylesteru kyseliny 4-(8-chlór-3-bróm-5,6-dihydro-l lH-benzo[5,6]cyklohepta[l,2-b]-pyridin-1 l-y-lidén)-l-piperidín-l-karboxylovej a 150 ml koncentrovanej H₂SO₄ pri -5 °C, potom pridajte 3,89 g (38,5 mol) KNO₃ a miešajte počas 4 hodín. Túto zmes prilejte k 3 1 ľadu a alkalizujte ju pridaním 50 % NaOH (vodného). Extrahujte CH₂C1₂ vysušte pomocou MgSO₄, potom prefiltrujte a zahustite vo vákuu. Zvyšok prekryštalizujte z acetónu, na získanie 6,69 g produktu.

’H NMR (CDClj,200Mhz): 8.5 (s,lH); 7,75 (s,lH); 7,6 (s,lH); 7,35 (s,lH); 4,15 (q,2H); 3,8 (m,2H); 3,5-3,1 (m,4H); 3,0-2,8 (m,2H); 2,6-2,2 (m,4H); 1,25 (t,3H). MII⁺=506.

Krok B

Zmiešajte 6,69 g (13,1 mol) produktu kroku A a 100 ml 85 % roztoku EtOH/voda, potom pridajte 0,66 (5,9 mol) CaCI₂ a 6,56 g (117,9 mol) Fe a túto zmes zohrievajte počas noci pod spätným chladičom. Horúcu reakčnú zmes prefiltrujte cez celíte® a filtračný koláč premyte horúcim EtOH. Filtrát zahustite vo vákuu na získanie 7,72 g produktu.

Hmotn. spektr.: MH⁺ = 476,0.

Zmiešajte 7,70 g produktu kroku B a 35 ml HOAc, potom pridajte 45 ml roztoku Br₂ v HOAc a túto zmes miešajte počas noci pri izbovej teplote. Pridajte 300 ml 1 N NaOH (vodného), potom 75 ml 50 % NaOH (vodného) a extrahujte EtOAc. Extrakt vysušte pomocou MgSO₄ a zahustite vo vákuu. Chromatografujte (silikagél, 20 % EtOAc/hexán) pri vzniku 3,47 g produktu (spoločne s ďalšími 1,28 g čiastočne purifikovaného produktu).

Hmotn. spektr.: MH⁺= 554.

’H NMR (CDClj, 300 Mhz):8,5 (s,lH); 7,5 (s,lH); 7,15 (s,lH); 4,5 (s,2H); 4,15 (m,3H); 3,8 (br s,2H); 3,4-3,1 (m,4H); 9-2,75 (m,lH); 2,7-2,5 (m,2H); 2,4-2,2 (m,2H); 1,25 (m,3H).

Zmiešajte 0,557 g (5,4 g mol) dusitanu t-butylnatého a 3 ml DMF a túto zmes zohrievajte pri 60 - 70 “C. Pomaly (po kvapkách), pridajte zmes 2,00 g (3,6 mol) produktu kroku C a 4 ml DMF, potom zmes ochlaďte na izbovú teplotu. Pridajte ďalších 0,64 ml dusitanu t-butylnatého pri 40 °C a zmes znova zohrejte na 60 - 70 °C na čas 30 min. Ochlaďte na izbovú teplotu a prilejte túto zmes k 150 ml vody. Extrahujte CH₂C1₂, vysušte pomocou MgSO₄ a zahustite vo vákuu. Chromatografujte (silikagél, 10 - 20 % EtOAc/hexán) na získanie 0,74 produktu.

Hmotn. spektr.: MH⁺= 539.

’H NMR (CDClj,200Mhz):8,52 (s,lH); 7,5 (d,2H); 7,2 (s,lH); 4,15 (q,2H); 3,9-3,7 (m,2H); 3,5-3,1 (m,4H); 3,0-2,5 (m,2H); 2,4-2,2 (m,2H)2,1-1,9 (m,2H); 1,26 (t,3H).

Zmiešajte 0,70 g (1,4 mol) produktu kroku D a 8 ml koncentrovanej HC1 (vodnej) a zohrievajte počas noci pod spätným chladičom. Pridajte 30 ml 1 N NaOII (vodného), potom 5 ml 50 % NaOH (vodného) a extrahujte CH₂C1₂. Extrakt vysušte pomocou MgSO₄ a zahustite vo vákuu na získanie 0,59 g cieľovej zlúčeniny.

Hmotn. spektr.: MH⁺= 467

m.p. = 123,9 - 124,2 °C.

Príklad 8

Pripravte roztok 8,1 g cieľovej zlúčeniny príkladu 7 v toluéne a pridajte 1 M roztok DIBAL v toluéne. Túto zmes zohrievajte pod spätným chladičom a pomaly (po kvapkách), pridávajte ďalších 21 ml 1 M roztoku DIBAL/toluén počas 40 min. Reakčnú zmes ochlaďte na asi 0 °C a pridajte 700 ml 1 M HC1 (vodnej). Oddeľte a odložte organickú fázu. Vodnú fázu premyte CH₂C1₂ a extrakt odložte, potom vodnú fázu alkalizujte pridaním 50 % NaOH (vodného). Extrahujte CH₂C1₂, vysušte pomocou MgSO₄ a zahustite vo vákuu na získanie 7,30 g cieľovej zlúčeniny, ktoráje racemickou zmesou enantiomérov.

MH⁺ = 469.

Krok B - oddelenie enantiomérov

chirálnou chromatografiou (Chiralpack AD, kolóna 5 cm x 50 cm, pri použití 20 % iPrOH/hexánu+0,2 % dietylamínu), počas vzniku (+)-enantioméru a (-)-enantioméru cieľovej zlúčeniny.

Fyzikálne chemické údaje pre (+)-enantiomér: m.p. = 148,8 °C. Hmotn. spektr.: MH⁺ = 469; [a]_D ²⁵ = +65,6 °(112,93 mg/2ml MeOH).

Fyzikálno-chemické údaje pre (-)-enantiomér: m.p. = 112 °C. Hmotn. spektr.: MH⁺ = 469; [a]_D ²⁵ = -65,2 °(3,65 mg/2ml MeOH).

Príklad 9

Zmiešajte 40 g (0,124 mol) východiskového ketónu a 200 ml H₂SO₄ a ochlaďte na 0 °C. Počas 1,5 hodiny pomaly pridávajte 13,78 g (0,136 mol) KNO₃, potom zohrejte na izbovú teplotu a miešajte počas noci. Reakčnú zmes spracujte pri použití v podstate rovnakého postupu, ako je ten, ktorý bol opísaný v kroku A, príkladu 4. Chromatografujte (silikagél,20 %, 30 %, 40 %, 50 %, EtOAc/hexán. Potom 100 % EtOAc) pri získaní 28 g 9nitrozlúčeniny, spoločne s menším množstvom 7nitrozlúčeniny a 19 g zmesi 7-nitro- a 9-nitrozlúčeniny. MH⁺ (9-nitro) = 367.

Krok B

Nechajte reagovať 28 g (76,2 mol) a 9-nitrozlúčeniny kroku A, 400 ml 85 % roztoku EtOH/voda, 3,8 g (34,3 mol) CaCl₂ a 38,28 g (0,685 mol) Fe, pri použití v podstate rovnakého postupu, ako je ten, ktorý bol opísaný v kroku C, príklad 4, na získanie 24 g produktu.

MH' = 337.

Krok C

Zmiešajte 13 g (38,5 mol) produktu kroku B, 140 ml HOAc a počas 20 min. pridávajte pomaly roztok 2,95 ml (57,8 mol) Br₂ v 10 ml HOAc. Túto reakčnú zmes miešajte pri izbovej teplote, potom zahustite vo vákuu. Pridajte CH₂C1₂ a vodu, potom 50 % NaOH (vodným) upravte pH na 8 - 9. Premyte organickú fázu vodou, potom roztokom NaCl a vysušte pomocou Na₂SO₄. Zahustite vo vákuu na získanie 11,3 g produktu.

‘H NMR (CDCl₃,200Mhz):8,73 (d,lH); 7,74 (d,lH); 7,14 (s,lH); 4,63 (s, 2H); 3,23-3,15 (m,2H); 3,07-2,98 (m,2H).

Ochlaďte 100 ml koncentrovanej HC1 (vodnej) naO °C, potom pridajte 5,61 g (81,4 mol) NaNO₂ a miešajte počas 10 minút. Pomaly (po častiach), pridajte 11,3 g (27,1 mol) produktu kroku C a túto zmes miešajte pri 0 - 3 °C počas 2,25 hodín. Pomaly (po kvapkách), pridajte 180 ml 50 % II₃PO₄ (vodné) a nechajte túto zmes stáť počas noci pri 0 °C. Počas 30 minút pomaly (po kvapkách), pridávajte 50 % NaOH, s cieľom upraviť pH na 9, potom extrahujte CH₂C1₂. Extrakt premyte vodou, potom roztokom NaCl a vysušte pomocou Na₂SO₄. Zahustite vo vákuu a chromato grafujte (silikagél, 2 % EtAc/CI I₂C1₂) na získanie 8,6 g produktu.

MH⁺= 399,9.

‘H NMR (200 Mhz, CDC1₃,):8,75 (d, 1 H); 7,77 (d,lH); 7,56 (d,lH); 7,21 (d, 1 H) a 3,3-3,3 (m,4H).

Príklad 10

Racemická rovnako ako (+)- a (-)-enantioméry

Zmiešajte 13 g (33,3 mol) cieľovej zlúčeniny kroku D príkladu 4 a 300 ml toluénu pri 20 °C, potom pridajte 32,5 ml (32,5 mol) 1 M DIBAL v toluéne. Túto zmes zahrievajte pod spätným chladičom počas 1 hodiny, ochlaďte na 20 °C, pridajte ďalších 32,5 ml 1 M roztoku DIBAL a zohrievajte pod spätným chladičom počas 1 hodiny. Zmes ochlaďte na 20 °C a prilejte do zmesi 400 g ľadu, 500 ml EtOAc a 300 ml 10 % NaOH (vodného). Vodnú vrstvu extrahujte CH₂C1₂ (3 x 200 ml), organickej vrstvy vysušte pomocou MgSO₄ a potom zahustite vo vákuu. Chromatografujte (silikagél, 12 % MeOH/CH₂Cl₂+4 % NfLOII) na získanie 10,4 g cieľovej zlúčeniny ako racemátu.

Hmotn. spektr.: MH⁺ = 469 (FAB).

Čiastočná 'H NMR (CDClj, 400 Mhz):8,38 (s,lH); 7,57 (s,lH): 7,27; (d,lH); 7,06 (d,IH) a3,95 (d,lH).

Krok B - oddelenie enantiomérov

Príklad 11

Krok A

Rozpusťte 1,160 g (2,98 mol) cieľovej zlúčeniny príkladu 3 v 20 ml DMF, miešajte pri izbovej teplote a pridajte 0,3914 g (3,87 mol) 4-metylmorfolínu, 0,7418 g (3,87 mol) DEC, 0,5229 g (3,87 mol) HOBT a 0,8795 g (8,37 mol) kyseliny l-N-t-butoxykarbonylpiperidinyl-4-octovej. Túto zmes miešajte pri izbovej teplote 2 dni, potom zahustite vo vákuu a zvyšok rozdeľte medzi CH₂C1₂ a vodu. Organickú fázu premyte postupne nasýteným NaHCO₃ (vodným), 10 % NaH₂PO₄ (vodným) a roztokom NaCl. Organickú fázu vysušte pomocou MgSO₄, prefíltrujte a zahustite vo vákuu. Chromatografujte (silikagél, 2 % MeOH/CH₂C1₂+NH₃) na získanie 1,72 g produktu, m.p. = 94,0 - 94,5 °C.

Hmotn. spektr.: MH⁺ = 614.

Prvková analýza: vypočítané-C-60,54; H-6.06: N-6,83; zistené-C-59,93,45; H-6,62; N-7,45.

Krok B

Zmiešajte 1,67 g (2,7 mol) produktu kroku A a 20 ml CH₂C1₂ a miešajte pri 0 °C. Pridajte 20 ml TFA, zmes miešajte počas 2 hodín, potom alkalizujte 1 N NaOH (vodným). Extrahujte CH₂C1₂. organickú fázu vysušte pomocou MgSO₄, prefíltrujte a zahustite vo vákuu pri vzniku 1,16 g produktu.

m.p. = 140,2 - 140,8 °C.

Hmotn. spektr.: MH⁺ = 514.

Krok C

Racemická zlúčenina kroku A bola rozdelená preparátnou chirálnou chromatografiou (Chiralpack AD, kolóna 5 cm x 50 cm, pri použití 5 % iPrOH/hexánu+0,2 % dietylamínu), na získanie (+)-enantioméru a (-)-enantioméru cieľovej zlúčeniny.

Fyzikálno-chemické údaje pre (+)-enantiomér:

Hmotn.spektr.: MH⁺ = 469(FABS); [<x]_D ²⁵ = +43,5°(c = = 0,402, EtOH).

Čiastočná ‘H NMR (CDC1₃, 400Mhz):8,38(s,lH);

7,57(s, 1 H); 7,27; (d, 1 H); 7,05(d, 1 H) a 3,95(d, 1 H). Fyzikálno-chemické údaje pre (-)-enantiomér:

Hmotn. spektr.: MH⁺ - 469(FAB); [a]_D ²⁵ = -41,8°(c = = 0,328 EtOH).

Čiastočná Ή NMR (CDC1₃, 400 Mhz):8,38(s,lH); 7,57(s,lH); 7,27; (d, 1 H); 7,05(d,lH) a 3,95(d,lH).

Zmiešajte 0,50 g produktu kroku B, 20 ml CH₂Cl_2i a 4,5 ekvivalentov (CH₃)₃ SinCO a miešajte pri izbovej teplote počas 3 hodín. Túto zmes extrahujte nasýteným NaHCO₃ (vodným) a organickú fázu vysušte pomocou MgSO₄. Prefiltrujte a zahustite vo vákuu na získanie hrubého produktu. Tento hrubý produkt chromatografujte (silikagél, 5 % MeOH/CH₂C1₂+NH₃) na získanie 0,26 g produktu, m.p. = 170,2- 170,5 °C.

Hmotn. spektr.: MH⁺= 557.

Zmiešajte 0,5 g (1,06 mol) cieľovej zlúčeniny príkladu 4, 0,4 g (2,61 mol) cieľovej zlúčeniny príkladu 1, 5 ml bezvodého DMF a 0,5 ml (4,53 mol) 4-metylmorfolínu pri 0 °C, potom pridajte 0,6 g (3,12 mol) DEC a 0,4 g (2,96 mol) HOBT a túto zmes miešajte počas noci pri 20 °C. Zahustite vo vákuu a extrahujte CH₂C1₂ (2x50 ml). Extrakty premyte 25 ml vody, vysušte pomocou MgSO₄, potom zahustite vo vákuu a chromatografujte (silikagél, 10 % MeOH/EtOAc+2 % NH₄OH (vodný) na získanie 0,6 g (výťažok 93,7 % ) cieľovej zlúčeniny.

Hmotn. spektir.: MH⁺= 602 (FABS).

Čiastočná ’H NMR (CDClj, 300 Mhz):8,48 (s,lH); 8,16 (d,2H); 7,61; (s,lH); 7,29 (m,lH); 7,18 (d,2H); 7,04 (d, 1 H); 3,71 (s,2H).

Prvková analýza: vypočítané-C-48,81; H-4,10; N-6,57; zistené-C-49,10; H-3,79; N-6,74.

Rozpusťte 5,9 g (9,78 mol) cieľovej zlúčeniny príkladu 12 v 300 ml CH₂Cl₂/EtOAc (1:5) pri 0 °C. Pomaly (po kvapkách), pridajte 3 ml 4 NIIC1 (vodné) a túto zmes miešajte pri 0 °C počas 5 minút. Pridajte 200 ml Et₂O, sústreďte pevné látky filtráciou a premyte ich 50 ml Et₂O. Vysušte ich pri 20 °C a 0,2 mm Hg na získanie 5,9 g (výťažok 96 %) cieľovej zlúčeniny.

Hmotn. spektr.: MH⁺= 602 (FABS).

Čiastočná ‘H NMR (DMSO-d_& 300 Mhz):ô 8,66 (d,2H); 8,51 (s,lH); 7,95; (s,lH); 7,67 (d,2H); 7,47 (m,lH); 7,15 (m,lH); 3,99 (s,2H).

Prvková analýza: vypočítané-C-48,77; H-3,62; N-6,56; zistené-C-48,34; H-3,95; N-6,84.

Príklad 14

Zmiešajte 0,501 g (1,28 mol) cieľovej zlúčeniny príkladu 5 a 20 ml bezvodého DMF, potom pridajte 0,405 g (1,664 mol) kyseliny 1-N-butoxykarbonylpiperidinyl4octovej, 0,319 g (1,664 mol)DEC, 0,225 g (1,664 mol)HOBT a 0,168 g (1,664 mol) 4-metylmorfolínu a túto zmes miešajte počas noci pri izbovej teplote. Túto zmes za hustite vo vákuu a zvyšok rozdeľte medzi 150 ml CH₂C1₂ a 150 ml nasýteného NaHCO₃ (vodného). Vodnú fázu extrahujte ďalšími 150 ml CH₂C1₂. Organickú fázu vysušte pomocou MgSO₄ a zahustite vo vákuu. Chromatografujte (silikagél, 500 ml hexánu, 111 % MeOH/CH₂Cl₂+0,l % NH₄OH (vodný), potom 112 % MeOH/ CH₂CI₂+O,1 % NH₄OH (vodný) na získanie 0,575 g produktu.

m.p. = 115 °C-125 °C.

Hmotn. spektr.: MH⁺= 616.

Krok B

Zmiešajte 0,555 g (0,9 mol) produktu kroku A a 15 ml CH₂C1₂ a túto zmes ochlaďte na 0 °C, Pridajte 15 ml TFA a miešajte pri 0 °C počas 2 hodín. Zahustite vo vákuu pri 40 - 45 °C a zvyšok rozdeľte medzi 150 ml CH₂C1₂ a 100 ml nasýteného NaHCO₃ (vodného). Vodnú vrstvu extrahujte 100 ml CH₂C1₂, spojte extrakty a vysušte ich pomocou MgSO₄. Zahustite vo vákuu na získanie 0,47 g produktu, m.p =140 “C-150 °C. Hmotn. spektr.: MH⁺= 516.

Krok C

Zmiešajte 0,449 g (0,87 mol) produktu kroku B, 20 ml CH₂C1₂ a 0,501 g (0,59 mol) (CH₃)₃SiNCO a miešajte počas noci pri izbovej teplote. Pridajte 50 - 75 ml nasýteného NaHCO₃ (vodného) a miešajte počas 0,5 hodiny. Rozrieďte CH₂C1₂ oddeľte vrstvy a vodnú vrstvu extrahujte 2 x 100 ml CH₂C1₂. Spojené extrakty vysušte pomocou MgSO₄ a zahustite vo vákuu. Chromatografujte (silikagél, 500 ml hexánu, 111 % MeOH/CH₂Cl₂+0,l % NH₄OH; 112 % MeOH/CH₂C1₂+0,2 % NH₄OH; potom 3 % MeOH/ /CH₂C1₂+O,3 % NH₄OH) na získanie 0,33 g cieľovej zlúčeniny.

m.p. = 145 °C-155°C. Hmotn. spektr.: MH⁺ = 559.

Príklad 15

Nechajte reagovať cieľovú zlúčeninu príkladu 7 a cieľovú zlúčeninu príkladu 1, pri použití v podstate rovnakého postupu, ako je ten, ktorý bol opísaný v príklade 12, na získanie 0,25 g cieľovej zlúčeniny, ktorá jc racemickou zmesou atropisomérov.

Hmotn. spektr.: MH⁺- 602.

m.p. = 167,2 °C - 167,8 °C.

Soľ HC1 cieľovej zlúčeniny príkladu 15 je pripravená miešaním počas 1 hodiny s HC1/CH₂C1₂ a potom zahustením vo vákuu pri vzniku soli.

Cieľová zlúčenina príkladu 15 je racemickou zmesou atropisomérov. Tieto atropisoméry sú oddelené preparátnou chromatografiou (HPLC), pri použití kolóny Chiralpack AD (5 cm x 50 cm) a 40 % ÍPrOH/hexánu+0,2 % dietylamínu ako mobilnej fázy, pri získaní jednotlivo (+) a (-)-enantiomérov, príkladov 16B a 16A.

Fyzikálno-chcmickc údaje pre (-)-cnantiomér, príklad 16A: m.p. = 114,2 °C - 114,8 °C; [a]_D ²⁵ = -154,6 ⁰ (8,73 mg/2 ml MeOH).

Fyzikálno-chemické údaje pre (+)-enantiomér, príklad 16B: m.p. = 112,6 °C - 113,5 °C; [a]_D ²⁵ =+1 59,7 ⁰ (10,33 mg/2 ml MeOH).

Príklad 17

Krok A

Nechajte reagovať 6,0 g (12,8 mol) cieľovej zlúčeniny príkladu 7 s 3,78 g (16,6 mol) kyseliny 1-N-t-butoxykarbonylpiperidinyl-4-octovej, pri použití v podstate rovnakých postupov, ako sú tie, ktoré boli opísané pre krok A príkladu 14, na získanie 8,52 g produktu.

Hmotn. spektr.: MH⁺= 692(FAB).

‘H NMR (CDClj, 200 Mhz):8,5 (d,lH); 7,5 (d,2H); 7,2; (d,lH); 4,15-3,9 (m,3H); 3,8-3,6 (m,1H); 3,5-3,15 (m,3H); 2,9 (d,2H); 2,8-2,5 (m,4H) 2,4-1,8 (m,6FI); 1,8-1,6 (br d,2H); 1,4 (s,9H); 1,25-1,0 (m,2H).

Krok B

Zmiešajte 8,50 g produktu kroku A CH₂C1₂, potom ochlaďte na 0 °C a pridajte 50 ml TFA. Túto zmes miešajte pri 0 °C počas 3 hodín, potom pridajte 500 ml IN NaOH (vodného) a nasledovne 30 ml 50 % NaOH (vodného). Extrahujte CH₂C1₂, vysušte pomocou MgSO₂ a zahustite vo vákuu, na získanie 7,86 g produktu.

Hmotn. spektr.: MH⁺= 592 (FAB).

'H NMR (CDClj, 2OOMhz):8,51 (d,lH); 7,52 (d,2H); 7,20; (d,lH), 4,1-3,95 (m,2H); 3,8-3,65 (m,2H); 3,5-3,05 (m,5H); 3,0-2,5 (m,6H); 2,4-1,8 (m,6H); 1,4-1,1 (m,2H).

Krok C

Nechajte reagovať 7,80 g (13,1 mol) produktu kroku B s 12,1 g (105 mol)(CH₃)₃SiNCO, pri použití v podstate rovnakého postupu, ako je ten, ktorý bol opísaný pre krok C príkladu 14, na získanie 5,5 g cieľovej zlúčeniny, ktorá je racemickou zmesou atropisomérov.

m.p. = 163,6 °C - 164,0 “C.

Hmotn.spektr.: MH⁺= 635 (FAB).

'H NMR (CDC1,, 200 Mhz): 8,5 (d,l H); 7,52 (d,lH); 7,48; (d,lH); 7,21 (d,lH); 4,54 (s,2H); 4,1-3,6 (m,4H); 3,45-3,15 (m,4H); 3,0-2,5 (m,5H); 2,45-1,6 (m,7H); 1,4-1,0 (m,2H).

Cieľová zlúčenina príkladu 17 je racemickou zmesou atropisomérov. Tieto atropisoméry sú oddelené preparátnou chromatografiou (HPLC), pri použití kolóny Chiralpack AD (5cm x 50 cm) a 20 % ÍPrOH/hexánu+0,2 % dietylamínu ako mobilnej fázy, pri prietokovej rýchlosti lOOml/min., na získanie jednotlivo (+) a (-) -enantiomérov, príkladov 18A a 18B.

Fyzikálno-chemické údaje pre (-)-enantiomér, príklad 18A: m.p. = 142,9 °C - 143,5 °C; [<x]_D ²⁵ = -151,7 ⁰ (1 1,06 mg/2 ml MeOH).

Fyzikálno-chemické údaje pre (+)-enantiomér, príklad 18B: m.p. = 126,5 °C - 127,0 °C; [cx]_D ²⁵ = +145,6 ⁰ (8,38 mg/2 ml MeOH).

Príklad 19

Zmiešajte 3,32 g (+)-enantioméru cieľovej zlúčeniny kroku B príkladu 8 a 2,38 g cieľovej zlúčeniny príkladu 1, l, 92 g HOBT, 2,70 g DEC, 156 ml N-metylmorfolínu a 50 ml bezvodého DMF a miešajte pri 25 “C počas 24 hodín. Zahustite vo vákuu, potom rozrieďte CH₂C1₂. Premyte 1 N NaOH (vodným), potom nasýteným NaH₂PO₄ (vodným) a vysušte pomocou MgSO₄ Zahustite vo vákuu a chromatografujte (silikagél, 2 % McOH/CILCL+NHjOI h na získanie 3,82 g cieľovej zlúčeniny.

Hmotn.spektr.: MH⁺= 604 (FAB).

Soľ kyseliny chlorovodíkovej bola pripravená rozpustením cieľovej zlúčeniny príkladu 19 v dichlórmetáne, nasýtenom chlorovodíkom. Zahustením vo vákuu bola získaná cieľová zlúčenina príkladu 19 ako soľ HCI.

m. p. = 166,5 °C; [a]_D ²² = +70,8 ⁰ (9,9 mg/2 ml MeOH).

(-)-enantiomér cieľovej zlúčeniny kroku B príkladu 8 (3,38 g) sa nechá reagovať s 2,20 g cieľovej zlúčeniny príkladu 1, podľa v podstate rovnakého postupu, ako je ten, ktorý bol opísaný pre príklad 19, na získanie 3,58 g cieľovej zlúčeniny príkladu 20A.

Soľ HC1 cieľovej zlúčeniny príkladu 20A bola pripravená rozpustením tejto cieľovej zlúčeniny v CH₂Cl₂, pridaním 6M HC1 (g) v CH₂C1₂, potom zahustením vo vákuu, na získanie tejto soli.

m.p. = 129 °C; [a]_D ²⁵ = -72,3 ° (3,32 mg/2 ml MeOH).

Racemická cieľová zlúčenina kroku A príkladu 8 sa nechá reagovať s 2,20 g cieľovej zlúčeniny príkladu 1, podľa v podstate rovnakého postupu, ako je ten, ktorý bol opísaný v príklade 20A, na získanie cieľovej zlúčeniny príkladu 20B.

m.p. = 145,0 °C.

Príklad 21

Krok A

Nechajte reagovať 1,33 g (+)-enantioméru cieľovej zlúčeniny kroku B príkladu 8 s 1,37 g kyseliny 1-N-t-butoxykarbonylpiperidinyl-4-octovej, pri použití v podstate rovnakého postupu, ako je ten, ktorý bol opísaný v kroku A príkladu 14, na získanie 2,78 g produktu.

Hmotn. spektr.: MH⁺=694,0°(FAB); [ct]_D ²⁵ =+34,1 °(5,45 mg/2 ml MeOH).

Krok B

Upravte 2,78 g produktu kroku A podľa v podstate rovnakého postupu, ako je ten, ktorý bol opísaný v kroku B príkladu 17, na získanie 1,72 g produktu.

m.p. = 104,1 °C.

Hmotn. spektr.: MH⁺ = 594; [a]_D ²⁵ = +53,4° (11,42 mg/2 ml MeOH).

Krok C

Hmotn. spektr.: MH⁺= 627; [a]_D ²⁵ = +49,1 ⁰ (4,24 mg/2ml MeOH).

Prekryštalizujte z acetónu na získanie cieľovej zlúčeniny ako pevnej látky.

m.p. = 214,5 °C - 215,9 °C.

Príklady 22A a 22B

Br

(príklad 22A)

(-)-enantiomér cieľovej zlúčeniny kroku B príkladu 8 (3,38 g) bol premenený na cieľovú zlúčeninu (príkladu 22A) v podstate rovnakým postupom, ktorý bol opísaný pre kroky A-C príkladu 21, na získanie cieľovej zlúčeniny príkladu 22A.

m.p. = 152 °C.

Hmotn. spektr.: MH⁺= 637; [a]_D ²³ = -62,5 ⁰ (1,12 mg/2ml MeOH).

Racemická cieľová zlúčenina kroku A príkladu 8 bola premenená na cieľovú zlúčeninu (príkladu 22B) v podstate rovnakým postupom, ktorý bol opísaný pre kroky A-C príkladu 10, na získanie cieľovej zlúčeniny príkladu 22B. m.p. = 111°C.

Príklad 23

Krok A

Nechajte reagovať 1,35 g (+)-enantioméru cieľovej zlúčeniny kroku B príkladu 10 s 1,4 g kyseliny 1-N-t-butoxykarbonylpiperidinyl-4-octovej a ďalej postupujte v podstate podľa rovnakého postupu, ktorý bol opísaný v kroku A príkladu 14, na získanie 2,0 g produktu.

Hmotn. spektr.: MH⁺= 694,0 (FAB);

Čiastočná 'H NMR (CDC1₃,3OO Mhz): 8,38 (s,lH); 7,60 (s,lH); 7,25 (d,IH); 7,05 (m,lH); 1,45 (s,9H).

Upravte 1,58 g produktu kroku B 6 ml (CH₃)₃SiNCO, pri použití v podstate rovnakého postupu, ako je ten, ktorý bol opísaný pre krok C príkladu 14, na získanie 1,40 g cieľovej zlúčeniny.

m.p. = 140 °C.

postupom, ktorý bol opísaný pre krok B príkladu 17, na získanie 1,63 g produktu.

Hmotn. spektr.: MH⁺= 594;

Čiastočná 'H NMR (CDC1₃, 3OOMhz):8,38 (s,lH); 7,60 (s, 1 H); 7,25 (d, 1 H); 7,03 (m, 1 H); 4,64 (d, 1 H); 3,90 (m,2H).

(CH₃)₃SiNCO, pri použití v podstate rovnakého postupu, ktorý bol opísaný pre krok C príkladu 14, na získanie 1,27 g cieľovej zlúčeniny.

Hmotn. spektr.: MH⁺ = 627(FABS); [a]_D ²⁵ = -33,1 °(c = = 0,58,EtOH).

Čiastočná 'H NMR (CDCl₃,400Mhz):8,38 (s,lH); 7,60 (s,lH); 7,25 (d, 1H); 7,04 (m,lH); 4,60 (d,lH),4,41 (s,2H).

Príklady 24A a 24B

(príklad 24A) (príklad 24B) (+)-enantiomér cieľovej zlúčeniny kroku B príkladu 8 (3,38 g) bol premenený na cieľovú zlúčeninu v podstate rovnakým postupom, ktorý bol opísaný pre kroky A - C príkladu 21, na získanie cieľovej zlúčeniny príkladu 24A. Hmotn. spektr.: MH⁺ = 637(FABS); [a]_D ²⁵ = +32,4 °(c = = 0,57,EtOH).

Čiastočná 'H NMR (CDCl₃,400Mhz): 8,39 (s,lH); 7,59 (s,lH); 07,25 (d, 1H); 7,04 (m,lH); 4,60 (d,lH),4,41 (s,2H).

Čiastočná 'H NMR (DMSO-d₆,400 Mhz): 8,42 (s,lH); 7,88 (s,lH); 7,41 (d, 1H); 7,29 (m,lH); 5,85 (s,2H),4,20 (d,lH).

Racemická cieľová zlúčenina kroku A príkladu 8 bola premenená na cieľovú zlúčeninu príkladu 22B podobným spôsobom.

Čiastočná 'H NMR (CDCl₃,400Mhz):8,38 (s,lH); 7,59 (S,1H); 7,25 (d, 1H); 7,04 (m,lH); 4,60 (d,l H),4,41 (s,2H). Čiastočná Ή NMR (DMSO-d₆,400Mhz): 8,42 (s,lH); 7,88 (s,lH); 7,41 (d, 1H); 7,29 (d, 1 H); 5,85 (s,2H) 4,20(d,lH).

Príklad 25

Br

Pevnú látku vysušte vo vákuu na získanie 0,936 g soli HCI príkladu 14.

[tx]_D ²² = +64,8 °(9,94m/g,EtOH).

Príklady 26A a 26B

Hr

(príklad 26A)

(-)-enantiomér cieľovej zlúčeniny kroku B príkladu 10 (0,60 g) sa nechal reagovať s 0,39 g cieľovej zlúčeniny príkladu 1, v podstate rovnakým postupom, ako je ten, ktorý bol opísaný pre príklad 19, na získanie 0,705 g cieľovej zlúčeniny.

Hmotn. spektr.: MH⁺= 604(FABS); [ct]D²⁵=41,8 “(EtOH). Čiastočná 'H NMR (CDCl3,300Mhz): 8,38 (s,lH); 8,15 (d,2H); 7,58 (s, 1H); 7,26 (d,lH); 7,15 (d,2H),7,03 (d,lH); 4,57 (d,1H).

Soľ HCI cieľovej zlúčeniny príkladu 26A bola pripravená v podstate rovnakým postupom, ako je ten, ktorý’ bol opísaný pre príklad 25.

[a]_D ²⁵ = -63,2 “(EtOH).

Racemická cieľová zlúčenina kroku A príkladu 10 bola premenená na cieľovú zlúčeninu príkladu 26B v podstate podľa rovnakého postupu, ako je ten, ktorý bol opísaný pre príklad 19.

Čiastočná Ή NMR (CDCl₃,400Mhz): 8,38 (s,lH); 8,15 (d,2H); 7,58 (s, 1H); 7,26 (d,lH); 7,15 (d,2H); 7,03 (d,lH); 4,57 (d, 1 H).

Čiastočná 'H NMR (DMSO-d₆,400Mhz): 8,77 (d,2H); 8,47 (s,lH): 7,95 (s,l H); 7,74 (d,2H); 7,43 (m,lH); 7,27 (d,l H); 4,35 (d,1H).

Príklad 27

Cieľová zlúčenina príkladu 4 sa nechá reagovať v podstate rovnakými spôsobmi, akú sú tie, ktoré boli opísané pre kroky A - C príkladu 17.

Hmotn.spektr.: MH⁺ = 635(FAB); 'H NMR (CDCI)₃ 8,45 (s,lH); 7,60 (s,lH); 7,35 (d, 1 H); 7,05 (d,lH); 4,45 (s,lH).

Príklad 28

Nechajte reagovať 2,6 g (+)-enantioméru cieľovej zlúčeniny kroku B príkladu 10 a 1,68 g cieľovej zlúčeniny príkladu 1 v podstate podľa rovnakého postupu, ktorý bol opísaný pre príklad 19, na získanie 2,10 g cieľovej zlúčeniny. Hmotn. spektr.: MH⁺= 604(FAB); [a]D²⁵ = +34,1 °(10,98 mg/2M EtOH). Čiastočná ‘H NMR (CDCl3,400Mhz): 8,38(s,lH); 8,15 (d,2H); 7,58 (s, 1H); 7,26 (d,lH); 7,15 (d,2H),7,03 (d,lH); 4,57 (d,lH).

Na prípravu soli HCI cieľovej zlúčeniny príkladu 25 rozpusťte 700 mg tejto cieľovej zlúčeniny v 4 ml CH₂C1₂, pridajte 4 ml Et₂O, ochlaďte na 0 °C a pomaly (po kvapkách), pridajte 1 ml dioxanu, pridajte 2 ml Et₂O a miešajte pri 0 °C počas 7 minút. Rozrieďte 30 ml Et₂O, prefiltrujte, s cieľom zhromaždiť pevný produkt a premyte 30 ml Et₂O.

Rozpusťte 9,90 g (18,9 mol) produktu kroku B príkladu 7 v 150 ml CH₂C1₂ a 200 ml CH₃CN a zohrejte na 60 °C. Pridajte 2,77 g (20,8 mol) N-chlórsukcinimidu a zohrievajte pod spätným chladičom počas 3 hodín, pri sledovaní reakcie na TLC (30 % EtOAc/ H₂O). Pridajte ďalších 2,35 g (10,4 mol) N-chlórsukcinimidu a zohrievajte pod spätným chladičom ďalších 45 minút. Ochlaďte reakčnú zmes na izbovú teplotu a extrahujte 1 N NaOH a CH₂C1₂. CH₂C1₂ vrstvu vysušte pomocou MgSO₄, prefiltrujte a purifikujte flash chromatografiou (1200 ml silikagélu, vymývané 30 % EtOAc/H₂O) na získanie 6,24 g požadovaného produktu, m.p. = 193 - 195,4 °C.

MH⁺=510.

K 160 ml kone. HCI pridajte pri -10 °C 2,07 g (30,1 mol) NaNO₂ a miešajte počas 10 minút. Pridajte 5,18 g (10,1 mol) produktu kroku A a túto reakčnú zmes zohrejte z -10 °C na 0 °C na 2 hodiny. Ochlaďte ju na -10 °C, pridajte 100 ml H₃PO₂ a nechajte stáť počas noci. Na účely extrakcie tejto reakčnej zmesi ju nalejte na rozdrvený ľad a alkalizujte 50 % NaOH/CH₂Cl₂. Organickú vrstvu vysušte pomocou MgSO₄, prefiltrujte a zahustite do sucha. Purifikujte flash chromatografiou (600 ml silikagélu, vymývané 20 % EtOAc/hexán) na získanie 3,98 g produktu. Hmotn. spekt.: MH⁺ = 495.

Rozpusťte 3,9 g produktu kroku B v 100 ml kone. HCI a refluxujte počas noci. Zmes ochlaďte, alkalizujte 50 % w/w NaOH a výslednú zmes extrahujte CH₂C1₂. CH₂C1₂ vrstvu vysušte pomocou MgSO₄, odparte rozpúšťadlo a vysušte vo vákuu na získanie 3,09 g požadovaného produktu. Hmotn. spekt.: MH⁺ = 423.

Krok D

Pri použití postupu, podobného tomu z príkladu 8, získajte 1,73 g požadovaného produktu.

m.p. 196,6 - 170,1 °C; [ct]_D ²⁵= +48,2 °(c=l, MeOH). Hmotn. spekt.: MH⁺= 425.

Krok E

Použite podobný postup ako v príklade 14, s produktom kroku D ako východiskovou látkou, na získanie cieľovej zlúčeniny.

m.p.152,3 - 153,3 °C; [a]_D ²³ = +53,0 °(c=l, MeOH). Hmotn. spekt.: MH⁺= 593.

príkladu 9 s 6,52 g (48,90 mol) N-chlórsukcinimidu spôsobom, podobným tomu, ktorý bol opísaný v kroku A príkladu 28 a extrahujte tak, ako je opísané, na získanie 16,56 g požadovaného produktu.

m.p.= 234,7-235,0 °C.

MH⁺=370.

Krok B

Upravte 16,95 g (45,6 mol) produktu kroku A spôsobom, ktorý bol opísaný v kroku B príkladu 28, na získanie 13,07 g požadovaného produktu.

m.p.= 191,7 - 192,1 °C.

MH⁺=356.

Príklad 30

Zohrievajte 200 mg východiskovej kyanatej látky v 17 g kyseliny polyfosforečnej pri 190 - 200 °C počas 45 minút. Výslednú zmes nalejte na ľad, pridajte 30 % HCI a miešajte počas 30 minút. Extrahujte CH₂C1₂, premyte roztokom NaCl, vysušte pomocou Na₂SO₄, prefiltrujte a zahustite. Purifíkujte preparátnou TLC, pri vymývaní EtOAc/hexánom, na získanie 21 mg požadovaného produktu (tiež je získané 59 mg produktu, ktorý je chlorovný v pozícii 10).

Príklad 31

Krok A

Rozpusťte pri izbovej teplote 10 g (29,6 mol) produktu kroku B príkladu 9 v 150 ml CH₂C1₂ a 200 ml CH₃CN. Túto zmes zohrejte na 60 °C, pridajte 10,45 g (32,6 mol) 1-fluór-4-hydroxy-l,4-diazoniabicyklo[2,2,2]oktán-bis-(tetrafluoborátu), zohrievajte pod spätným chladičom počas 4 hodín. Zmes ochlaďte na izbovú teplotu, extrahujte CH₂C1₂ a 1 N NaOH. CH₂C1₂ vrstvu vysušte pomocou MgSO₄, prefiltrujte a zahustite do sucha. Výsledný zvyšok purifíkujte flash chromatografiou, pri použití 1400 ml silikagélu, pri vymývaní 10 % EtOAc/CH₂Cl₂ + 2 kvapky NH₄OH, pri získaní 2,00 g produktu.

m.p. 103,2 - 103,5 °C.

MH⁺= 335.

Krok B

1,80 g (5,1 mol) produktu kroku A upravte pri použití v podstate rovnakého postupu, ako je ten, ktorý bol opísaný v kroku D príkladu 9. Hrubý produkt purifikuje flash chromatografiou, pri použití 200 ml silikagélu, pri vymývaní 20 % EtOAc/ hexánom.

Hmotn. spekt.: MH⁺= 339.

Príklad 32

Pri použití vhodných východiskových látok a postupov, ktoré boli opísané, by mohli byť pripravené nasledujúce zlúčeniny:

Príklad 33

Krok A

K roztoku 3-bróm-8-chlór-5,6-dihydro-l 1Hbenzo[5,6]cyklopenta [ 1,2-b]-pyridín-11-ónu (2 g) (6,2 mol) v bezvodom dichlórmetáne (14 ml) bol pri 0 °C v prostredí argónu počas 30 minút po kvapkách pridávaný roztok kyseliny 3-chlórbenzoovej (1,76 g) (10,4 mol) v bezvodom dichlórmetáne (35 ml). Táto zmes sa nechala zohriať na izbovú teplotu a po 18 hodinách bola pridaná ďalšia kyselina 3-chlórbenzoová (0,88 g)(5,2 mol) v bezvodom dichlórmetáne (25 ml) a táto zmes bola miešaná počas 42 hodín. Zmes bola rozriedená dichlórmetánom a premytá 1 N NaOH (200 ml). Vodná vrstva bola extrahovaná ďalším dichlórmetánom (2 x 200 ml) a spojené orga nické vrstvy boli vysušené pomocou síranu horečnatého, prefiltrované a odparené do sucha. Produkt bol chromatografovaný na silikagéli, pri vymývaní 0,25 % - 0,5 % - 1 % (10 % kone. NH₄OH v metanole) dichlórmetánom, na získanie cieľovej zlúčeniny (výťažok: 1,386 g, 66 % ): ESIMS; m/z338,l(MH⁺); 5_c(CDCl₃): CH₂:30,5,34,0; CH: 126,9, 127,6, 130,3, 132,5, 140,4; C:121,0. 135,1, 138,3, 139,7,141,6,145,3,188,0 ppm.

Krok B

Cieľová zlúčenina príkladu 33A(1,3422 g)(3,96 mol) bola rozpustená v metanole (18 ml) a dichlórmetáne (20 ml), bol pridaný hydrid sodnobóritý (0,219 g)(5,79 mol). Táto zmes bola miešaná pod argónom pri 0 °C počas 1 hodiny a potom sa zohriala na 25 °C na 1 hodinu. Zmes bola rozriedená dichlórmetánom (800 ml) a premytá 1 N NaOH (150 ml). Vodná vrstva bola extrahovaná dichlórmetánom (2 x 100 ml) a spojené organické vrstvy boli vysušené pomocou MgSO₄, prefiltrované a odparené do sucha. Produkt bol chromatografovaný na silikagéli, pri vymývaní 1 % (10 % kone. NH4OH v metanole) dichlórmetánom, na získanie cieľovej zlúčeniny (výťažok: 1,24g,92 % ):ESIMS; m/z340,l(MH⁺); 5_C (CDC1₃): CH₂: 31,2,32,0; CH: 69,1, 126,8, 129,5, 131,7, 136,7; C: 118,3, 134,7,

135,2, 139,7, 141,0, 148,9 ppm.

Krok C

Cieľová zlúčenina príkladu 3 3 B (1,19 g)(3,49 mol) bola rozpustená v bezvodom toluéne (22,5 ml) a tento roztok bol pod argónom ochladený na 0 °C. Bol pridaný tionylchlorid (0,472 g)(6,64 mol) v bezvodom toluéne (5 mi) a zmes bola pri 0 °C miešaná počas 1 hodiny. Zmes sa nechala zohriať na 25 °C na 2,5 hodiny. Roztok bol pridaný k 20 % roztoku etylacetátu v dichlórmetáne (800 ml) a bol premytý 1 N NaOH. Vodná vrstva bola extrahovaná dichlórmetánom (2 x x 200 ml) a spojené organické vrstvy boli vysušené pomocou Mg₄SO, prefiltrované a odparené do sucha, na získanie produktu, ktorý' hol použitý bez ďalšej purifikácie.

Cieľová zlúčenina príkladu 33C (3,49 mol) bola rozpustená v bezvodom THF (10 ml), bol pridaný roztok piperazínu (1,505 g)( 17,47 mol) v bezvodom THF (20 ml) a táto zmes bola miešaná pod argónom pri 25 “C počas 69 hodín. Táto zmes bola pridaná k dichlórmetánu (800 ml) a bola premytá 1 N NaOH. Vodná vrstva bola extrahovaná dichlórmetánom (2 x 200 ml) a spojené organické vrstvy boli vysušené pomocou síranu horečnatého, prefiltrované a odparené do sucha. Produkt bol chromatografovaný na silikagéli, pri vymývaní 5 % (10 % kone. NH₄0H v metanole) dichlórmetánom, na získanie cieľovej zlúčeniny (výťažok: 1,2772 g, 89 % ):FABMS; m/z408(MH⁺); ô_c(CDCl₃):CH₂: 30,1, 30,4, 46,2, 46,2, 52,3, 52,3; CH:64,6, 126,3, 130,3,

130,6, 133,6, 138,6, 138,6; C:118,0, 133,9, 134,5, 139,8,

140,8,148,8 ppm.

Cieľová racemická zlúčenina kroku D (1 pg) bola rozdelené na Chiralpack AD HPLC kolóne (5cm x 50cm, veľkosť častíc 20 p), pri použití zmesi 2-propanol : hexán : dietylamín: 30 : 70 : 0,2 až 40 : 60 : 0,2; po prejdení 2 1, ako vymývacej zmesi, bol získaný R(+)-enantiomér ako prvá frakcia vymývania (0,486 g):FABMS m/z408 (MH⁺); 8_c(CDCl₃):CH₂: 30,1, 30,4, 46,3, 46,3, 52,5 52,5; CH: 64,7,

126.2, 130,4, 130,6, 133,6 138,5; C: 118,0, 133,9, 134,4,

139,8, 140,8, 148,9; [a]_D ²³°^c = +90,9 °(10,34 mg/2ml, MeOH) a tá bola nasledovaná S(-)-enantiomérom, ako druhou frakciou vymývania (0,460 g):FABMSm/z408,l(MH⁺); 6_c(CDCl₃):CH₂: 30,1, 30,4 46,2, 46,2, 52,4 52,4; CH: 64,6,

126.3, 130,4, 130,6, 133,6 138,5; C: 118,1, 133,9, 134,4,

139,8, 140,8, 148,8; [a]_D ^2!c = -85,9°(8,61 mg/2ml, MeOH).

Cieľová zlúčenina príkladu 33D (0,4 g) (0,979 mol), Nl-oxid kyseliny 4-pyridyloctovej (0,1948 g)(l,27 mol), hydrochlorid 1 -(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimidu (0,244)(1,27 mol), 1-hydroxybenzotriazol (0,172 g) (1,27 mol) a 4-metylmorfolín (0,14 ml) (1,27 mol) boli rozpustené v bezvodom DMF (15 ml) a táto zmes bola miešaná pri 25 °C počas 18 hodín. Tento roztok bol pridaný k dichlórmetánu (800 ml) a bol premytý 1 N NaOH. Vodná vrstva bola extrahovaná dichlórmetánom (2 x 200 ml) a spojené organické vrstvy boli odparené do sucha. Zvyšok bol chromatografovaný na silikagéli, pri vymývaní 3,5 % (10 % kone. NH₄OH v metanole) dichlórmetánom, na získanie cieľovej zlúčeniny (výťažok: 0,4806 g, 90 % ):LSIMS; m/z543(MH⁺); 8_c(CDCl₃):CH₂: 30,1, 30,5, 38,4, 42,1, 45,9

50.4, 50,6; CH: 63,8, 126,5, 126,8, 130,4, 130,5, 133,4

138.4, 139,0, 139,0; C:118,4, 133,4, 133,9, 134,8, 139,8, 141,0, 148,8, 167,0 ppm. PMR: ó_h (CDClj): 5,78 (s,lH,Hn); 7,14 (d,2H,Ar-H); 7,15 (s,2H,Ar-H); 7,20 (d,lH, Ar-H); 7,22 (d,lH,Ar-H); 8,16 (d,2H,Ar-H); 8,29 (s,lH,Ar-H).

Príklad 35

K roztoku produktu kroku C príkladu 21 (1,06 g, 1,65 mol) v dichlórmetáne (50 ml) bola pridaná kyselina metachlórperoxybenzoová (0,5 g, 57 - 86 % čistota). Po miešaní pri izbovej teplote počas 5 hodín bolo pridané ďalších 0,23 g metachlórperoxybenzoovej a výsledná zmes bola miešaná pri izbovej teplote počas noci. Reakčná zmes bola premytá nasýteným vodným roztokom uhličitanu sodného, vysušená pomocou bezvodého síranu horečnatého, prefiltrovaná a zahustená vo vákuu pri získaní bledožltej peny. Purifikáciou flash kolónovou chromatografíou (silikagél), pri použití 5 % metanoldichlórmetánu, nasýteného hydroxidom amónnym, bola získaná cieľová zlúčenina (0,60 g, výťažok 56 %’, m.p. 170,5 - 175 °C), [a]_D ^2l°^c = +116,2 °(c=0,113 metanol).

Príklad 36

Podľa postupu z príkladu 35, s tou výnimkou, že namiesto príkladu 19 bol použitý produkt kroku C príkladu 21, bol získaný produkt ako biela pevná látka, m.p. = 174,2 °C.

Príklad 37

Br

K produktu kroku C príkladu 23 (1,0 g, 1,48 mol) v metylénchloride (15 ml) bola pri 0 °C pridaná kyselina m-chlórbenzoová (50 % 1,5 g, 4,36 mol), potom bola táto zmes miešaná pri 0 °C počas 5 hodín a pri izbovej teplote počas 3 hodín. Bola pridaná voda (50 ml) hydroxid amónny (10 ml, kone.) a táto zmes bola extrahovaná metylénchloridom (2 x 200 ml). Organická vrstva bola oddelená, vysušená pomocou síranu horečnatého prefiltrovaná a rozpúšťadlo bolo odparené pri získaní pevnej látky, ktorá bola chromatografovaná na silikagéli, pri vymývaní zmesí 10 % v/v metanol: metylénchlorid, obsahujúci 2 % hydroxid amónny, pri získaní cieľového produktu ako bielej pevnej látky (700 mg, 70 %), [a]_D ^24C = -68,9 °(c=0,352, etanol).

MS (FAB,MH,653) HRMS Vypočítané (C27H32N4O3BrCl(81)Br) 655,0509 Merané 655,0518.

’H NMR (CDCl,, δ 8,31 (s,lH); 7,28 (s,lH); 7,19 (d,lH); 7,11 (d,lH); 5,37 (m,lH); 4,60 (d,lH); 4,42 (s,2H); 3,86 (m,3H); 3,41 (m,3H); 2,89 (m,4H); 2,42 (m,lH), 2,20 (m,3H); 2,04 (m,lH); 1,78 (m,2H); 1,66 (m,lH); 1,48 (m,2H); 1,16 (m,3H).

Príklad 38

Podľa rovnakého postupu ako v príklade 37, s tou výnimkou, že namiesto produktu kroku C príkladu 23 bolo použité ekvivalentné množstvo produktu príkladu 26A, bol získaný cieľový produkt ako biela pevná látka (výťažok 73 %).

[a]_D ²⁴°^c = -76,6 °(c=0,197, etanol).

MS (FAB.MH620) HRMS Vypočítané MHC26H25N3O3BrCl(81)Br)621,9931 Merané 621,9942.

'H NMR (CDC1₃₎ δ 8,32 (s,lH); 8,22 (d,2H); 7,29 (s,lH); 7,19 (d, 1H); 7,18 (d,2H); 7,10 (d,lH); 5,37 (m,lH); 4,58 (d,lH); 3,78 (d, 1H); 3,66 (d,2H); 3,41 (s,2H); 3,38 (m,lH); 2,95 (m,3H); 2,50 (m, 1H), 2,28 (m,lH); 1,63 (m,lH); 1,45 (m,2H).

Príklad 39

racemická racemická

Podľa postupu príkladu 12, s tou výnimkou, že namiesto zlúčeniny príkladu 3 je použitý produkt kroku D príkladu 3, bol získaný východiskový reaktant. Podľa postupu príkladu 12, s tou výnimkou, že namiesto produktu kroku C príkladu 23 bol použitý uvedený reaktant, bola získaná cieľová zlúčenina ako biela pevná látka (100 %). MS (FAB,MH540) HRMS Vypočítané MII C261I24N303BrCl (540,0690), Merané (540,0691).

'H NMR (CDClj) δ 8,45 (s,lH); 8,14 (d,2H); 7,26-7,34 (m,3H); 7,11 (d,2H); 7,03 (d,lH); 6,73 (d,lH); 5,55 (d,lH), 4,40 (m,III); 3,70 (m,2H); 3,59 (d,2H); 2,85 (m,lH); 2,45 (m,lH),2,15 (m,lH); 1,35 (m,lH);15 (m,3H).

Príklad 40

Cieľová zlúčenina kroku E príkladu 33, R(+)-enantiomér (360,4 mg, 0,882 mol), Nl-oxid kyseliny 4-pyridyloctovej (175,5 mg, 1,146 mol), hydrochlorid l-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbidiimidu (220 mg, 1,146 mol), 1-hydroxybenzotriazol (155 mg, 1,146 mol) a 4-metylmorfolín (0,126 ml, 1,146 mol) boli rozpustené v bezvodom DMF (11 ml) a táto zmes bola miešaná pri 25 °C počas 18 hodín. Reakcia bola spracovaná tak, ako je opísané v príklade 34 a produkt bol chrómatografovaný na silikagéli, pri vymývaní 4 % (10 % kone. NH₄OH v metanole) dichlórmetánom, na získanie cieľovej zlúčeniny (výťažok: 441,1 mg, 92 %): LCMS: m/z543,l (MH⁺);

ô_c(CDC1j):CH₂:30,1, 30,6, 38,5, 42,1, 46,0, 50,5, 50,9; CH:63,9, 126,5, 126,9, 126,9, 130,5, 130,6, 133,5, 138,5, 139,0, 139,0; C: 118,4, 134,0, 134,0, 134,9, 139,9, 141,0,

147,8, 167,1;

δ_Η (CDClj): 5,74 (s,lH,Hn); 7,12 (d,2H,Ar-H); 7,13 (s,2H,Ar-H); 7,19 (d,lH,Ar-H); 7,21 (d,lH,Ar-H); 8,14 (d,2H,Ar-H); 8,27 (s,lH, Ar-H), [a]_D ²³°^c = +69,2 ° (10 mg/2ml,MeOH).

tiomér (374,8 mg, 0,917 mol), Nl-oxid kyseliny 4-pyridyloctovej (182,6 mg, 1,192 mol), hydrochlorid l-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbiimidu (229 mg, 1,192 mol), 1-hydroxybenzotriazol (161 mg, 1,192 mol) a 4-metylmorfolín (0,131 ml, 1,192 mol) boli rozpustené v bezvodom DMF (11 ml) a táto zmes bola miešaná pri 25 °C počas 18 hodín. Reakcia bola spracovaná tak, ako je opísané v príklade 34 a produkt bol chrómatografovaný na silikagéli, vymývanom 4 % (10 % kone. NH₄OH v metanole) dichlórmetánom, pri získaní cieľovej zlúčeniny (výťažok: 467,3 mg, 94 % ): LCMS:m/z543,l(MH⁺); g_c(CDCl₃):CH₂:30,0, 30,5, 38,4, 42,0, 45,9, 50,4, 50,8; CH:63,8, 126,5, 126,8, 126,8, 130,4,

130,6, 133,4, 138,4, 138,9, 138,9; C: 118,4, 134,0, 134,0,

134,8, 139,8, 140,9, 147,7, 167,0, δ_Η (CDC1,): 5,76 (s,lH,H_n); 7,13 (d,2H,Ar-H); 7,15 (s,2H,Ar-H); 7,21 (d, 1 H,Ar-H); 7,23 (d, 1 H,Ar-H); 8,16 (d,2H,Ar-H); 8,29 (s,lH, Ar-H), [a]_D ²³°^c = -65,5 ⁰ (10,4 mg/2ml, MeOH).

Príklad 42

Cieľová zlúčenina kroku D príkladu 33, (±) (789,1 mg, 1,93 mol), kyselina l-terc.-butoxykarbonyl-4-piperidinyloctová (610 mg, 2,51 mol), hydrochlorid l-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbidiimidu (481,2 mg, 2,51 mol), 1hydroxybenzotriazol (339,2 mg, 2,51 mol) a 4-metylmorfolín (0,276 ml, 2,51 mol) boli rozpustené v bezvodom DMF (30 ml) a táto zmes bola miešaná pri 25“C počas 21 hodín. Reakcia bola spracovaná tak, ako je opísané v príklade 34 a produkt bol chrómatografovaný na silikagéli, vymývanom 0,5 % -1 % (10 % kone. NH₄OH v metanole) dichlórmetánom, pri získaní cieľovej zlúčeniny (výťažok: 1,22 g, 100 % ): FABMS: m/z633,3(MH⁺); ó_c(CDCl₃): CH₃: 28,5, 28,5, 28,5; CH₂ 30,2, 30,5, 32,2, 32,2, 39,5, 41,7, 43,8, 43,8, 45,8, 50,8, 51,2; CH:33,3, 64,0, 126,5,

130,6, 130,6, 133,5, 138,5; C:79,3, 118,3, 133,6,134,8,

139,9,140,9,148,1,154,8, 170,0;

Ó_H(CDC1₃): 1,46(s,9H,-Cme),5,75(s, 1 H,H, J; 7,13(d,lH,ArH); 7,16(s, lH,Ar-H); 7,19(s,lH,Ar-H); 7,23(d,lH,Ar-H); 8,29(s,lH,Ar-H).

Cieľová zlúčenina kroku A (1,21 g, 1,91 mol) bola rozpustená v metanole (10,6 ml) a 10 % (v/v)konc.H₂S0₄ v dioxáne (26 ml) a táto zmes bola miešaná pod argónom pri 25°C počas 1,5 hodiny. Táto zmes bola zahustená a rozriedená CH₂C1₂ a alkalizovaná IN vodným NaOH. CH₂C1₂ extrakt, obsahujúci len časť produktu, pre jeho rozpustnosť vo vode, bol vysušený (MgSO₄), prefiltrovaný a odparený do sucha. Produkt bol chrómatografovaný na silikagéli, pri vymývaní 10 % (10 % kone. NH₄OH v metanole)dichlór22 metánom, pri získaní cieľovej zlúčeniny (výťažok: 87,7 mg, 10 % ):FABMS:m/z533,l(MH⁺); ó_c(CDCl₃):CH₂:30,2,

30,4, 32,4; 32,4, 39,6, 41,6, 45,7, 45,9, 45,9, 50,7, 51,2; CH:32,7, 64,0, 126,5, 130,6, 130,6, 133,5, 138,5; C:118,3, 133,5, 134,7, 139,9, 140,9, 148,1, 169,8,169,8; ô_h(CDC1₃): 5,73(s,lH, Hu); 7,12(d,lH,Ar-H); 7,15(s,lH,Ar-H);

7,18(s,lH,Ar-H); 7,21(d,lH, Ar-H); 8,28(s,lH,Ar-H).

Cieľová zlúčenina kroku B (99,1 mg, 0,189 mol) a trimetylsilylizokyanát (0,384 ml, 2,83 mol) boli rozpustené v bezvodom dichlórmetáne (3 ml) a táto zmes bola miešaná pri 25 °C pod argónom počas 20 hodín. K reakcii bol pridaný ďalší a trimetylsilylizokyanát (0,0768 ml, 0,567 mol) a bežala ďalších 5 hodín. Zmes bola rozriedená dichlórmetánom a premytá nasýteným vodným NaHCO₃, vysušená (MgSO₄), prefiltrovaná a odparená do sucha. Produkt bol chromatografovaný na silikagéli, pri vymývaní 3,5 % (10 % kone. NH.₍OH v metanole) dichlórmetánom, pri získaní cieľovej zlúčeniny (výťažok: 80,4 mg, 81 %); FABMS:m/z 576,1 (MH⁺); 6_c(CDCl₃):CH₂:30,l; 30,4; 32,0; 32,0; 39,2; 41,6; 44,4; 44,3; 45,7; 50,7; 51,1; CH:32,9; 63,9; 126,4; 130,5; 130,6; 133,4; 138,4; C:118,4; 133,5; 134,7; 139,8; 140,9; 148,0; 169,7; Ó_H(CDC1₃): 5,74 (β,ΙΗ,Η,,), 7,12 (d,lH,Ar-H), 7,15 (s, lH,Ar-H), 7,19 (s,lH,Ar-H), 7,22 (d, 1 H,Ar-H), 8,28 (s, 1 H,Ar-H).

Príklad 43

Cieľová zlúčenina kroku E príkladu 33, R(+)-enantiomér (1 g, 2,45 mol), kyselina l-terc.-butoxykarbonyl-4-piperidinyloctová (487 mg, 3,181 mol), hydrochlorid l-(3dimetylaminopropyl)-3-etylkarboimidu (610 mg, 3,181 mol), 1-hydroxybenzotriazol (430 mg, 3,181 mol) a 4-metylmorfolín (0,35 ml, 3,181 mol) boli rozpustené v bezvodom DMF (30,5 ml) a táto zmes bola miešaná pri 25 °C počas 66 hodín. Reakcia bola spracovaná tak, ako je napísané v príklade 34 a produkt bol chromatografovaný na silikagéli, pri vymývaní 1 % (10 % kone. NH₄OH v metanole) dichlórmetánom, pri získaní cieľovej zlúčeniny (výťažok: 1,25 g, 81 %): LCMS:m/z 633,1 (MH⁺); ó_c(CDCl₃)CH₃:28,5; 28,5; 28,5; CH₂:30,2; 30,5; 32,2; 32,2; 39,4; 41,7; 43,6; 43,6; 45,8; 50,7; 51,2; CH:33,3; 64,0; 126,5; 130,6; 133,5; 138,5; C:79,3; 118,3; 133,6; 134,8; 139,9; 140,9; 148,1; 154,9; 170,0; Ô_H(CDC1₃): 1,46 (s,9H, -CMe₃), 5,74 (s,lH,H_n), 7,12 (d,lH,Ar-H), 7,16 (s,lH,ArH), 7,19 (s,lH,Ar-H), 7,23 (d,lH,Ar-H), 8,29 (s,lH, Ar-H); [a]_D ^23,4°^c = +56,4 °(9,05 mg/2ml MeOH).

rozpustená v metanole (9,5 ml) a 10 % (v/v)konc. H₂SO₄ v dioxáne (24,7 ml) a táto zmes bola miešaná pod argónom pri 25 °C počas 1 hodiny. Táto zmes prešla cez vrstvu ionexovej živice BioRad AG1-X8(OH' forma) a táto živica bola premytá metanolom, Spojené eluáty boli odparené do sucha a produkt bol chromatografovaný na silikagéli, pri vymývaní 10 % (10 % kone. NH₄OH v metanole) dichlórmetánom, pri získaní cieľovej zlúčeniny (výťažok; 762,9 mg, 79 %): LSIMS: m/z 533 (MH⁺); 8_c(CDCl₃):CH₂:30,2; 30,5; 32,2; 32,2; 40,1; 41,7; 45,9; 46,4; 46,4; 50,8; 51,2; CH:33,4; 64,0; 126,5; 130,6; 133,6; 138,6; C: 118,4; 133,6; 134,8; 139,9; 140,9; 148,2; 170,2;

ô_h(CDC1₃):5,73(s,1H,H₁₁), 7,1 l(d,lH,Ar-H), 7,14(s,lH,ArH), 7,19(s,lH,Ar-H), 7,22(d,lH,Ar-H), 8,28(s,lH, Ar-H); [a]_D ^{23,4 C}=+66,4°(10,90 mg/2ml MeOH).

Cieľová zlúčenina kroku B (550 mg, 1,03 mol) a trimetylsilylizokyanát (2,092 ml, 15,45 mol) boli rozpustené v bezvodom dichlórmetáne (16,4 ml) a táto zmes bola miešaná pri 25 °C pod argónom počas 18 hodín. Zmes bola rozriedená dichlórmetánom a premytá nasýteným vodným NaHCO₃, vysušená (MgSO₄), prefiltrovaná a odparená do sucha. Produkt bol chromatografovaný na silikagéli, pri vymývaní 3,5 % (10 % kone. NH₄OH v metanole/dichlórmetánom, pri získaní cieľovej zlúčeniny výťažok:570,3 mg, 99 % ):FABMS:m/z 576,3 (MH⁺); 5_c(CDCl₃):CH₂:30,2; 30,5; 32,1; 32,1; 39,3; 41,7; 44,4; 44,5; 45,8; 50,8; 51,2; CH:33,0; 64,0; 126,5; 130,6; 130,6; 133,5; 138,6; C:118,4; 133,5; 134,8; 139,9; 141,0; 148,1; 157,9; 169,8; 8_H(CDC1₃): 5,73(s,1H,Hh), 7,12(d,lH,Ar-H), 7,14(s,lH,Ar-H), 7,19(s,lH,Ar-H), 7,21(d,lH, Ar-H), 8,28(s,lH,Ar-H);

[a]_D ^23,4°^c=+60,2 °(10,28 mg/2ml MeOH).

Príklad 44

Krok A

Cieľová zlúčenina kroku E príkladu 33, S(-)-enantiomér (1 g, 2,45 mol) kyselina l-terc.-butoxykarbonyl-4-piperidinyloctová (487 mg, 3,181 mol), hydrochlorid l-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarboimidu (610 mg, 3,18 mol), 1-hydroxybenzotriazol (430 mg, 3,181 mol) a 4-metylmorfolín (0,35 ml, 3,181 mol) boli rozpustené v bczvodom DMF (30,5 ml) a táto zmes bola miešaná pri 25 °C počas 66 hodín. Reakcia bola spracovaná tak, ako je opísané v príklade 34 a produkt bol chromatografovaný na silikagéli, pri vymývaní 1 % (10 % kone. MH₄OH v metanole) dichlórmetánom, pri získaní cieľovej zlúčeniny (výťažok; 1,204 g, 78 % ): LS1MS :m/z 633,5 (MH¹); ô_c(CDCl₃)CH₃: 28,5; 28,5; 28,5; CH₂: 30,2; 30,5; 32,2; 32,2; 39,4; 41,7; 43,6; 43,6; 45,8; 50,7; 51,2; CH:33,3; 64,0; 126,5; 130,5; 130,5; 133,6; 138,5; C:79,3; 118,3; 133,6; 134,8; 139,9; 140,9; 148,1; 154,8; 170,0; Ô_H(CDC1₃): 1,46 (s,9H,-CMe₃), 5,74 (s,lH,Hn), 7,12 (d,lH, Ar-H), 7,15 (s,lH,Ar-H), 7,19 (s, 1 H, Ar-H), 7,22 (d, 1 H,Ar-H), 8,28 (s, 1 H,Ar-H); [a]_D ²³’⁴°^c = - -57,2 ° (9,09 mg/2ml MeOH).

rozpustená v metanole (9,13 ml) a 10 % (v/v) kone. H₂SO₄ v dioxáne (23,75 ml) a táto zmes bola miešaná pod argónom pri 25 °C počas 1 hodiny. Táto zmes prešla cez vrstvu ionexovej živice BioRad AGI-x8(OH'forma) a táto živica bola premytá metanolom. Spojené eluáty bolu odparené do sucha a produkt bol chromatografovaný na silikagéli, pri vymývaní 10 % (10 % kone. NH₄OH v metanole) dichlórmetánom, pri získaní cieľovej zlúčeniny (výťažok: 771,1 mg, 83 % ): LSIMS:m/z 533 (MH⁺); 5_c(CDCl₃): CH₂:30,3; 30,5; 33,0; 33,0; 40,0; 41,7; 45,8; 46,2; 46,2; 50,8; 51,2; CH:33,3; 64,0; 126,5; 130,6; 130,6; 133,6; 138,6; C:118,4; 133,6; 134,8; 139,9; 140,9; 148,2; 170,1; S_H(CDC1₃): 5,73 (s,lH,H_n), 7,12 (d, lH,Ar-H), 7,14 (s,lH,Ar-H), 7,19 (s, 1 H,Ar-H), 7,22 (d, 1 H,Ar-H), 8,28 (s, 1 H,Ar-H);

[a]_D ^23,4°^C= -66,9°( 10,29 mg/2ml MeOH).

Cieľová zlúčenina kroku B (550 mg, 1,03 mol) a trimetylsilylizokyanát (2,092 ml, 15,45 mol) boli rozpustené v bezvodom dichlórmetáne (16,4 ml) a táto zmes bola miešaná pri 25 °C pod argónom počas 18 hodín. Zmes bola rozriedená dichlórmetánom a premytá nasýteným vodným NaHCO₃, vysušená (MgSO₄), prefiltrovaná a odparená do sucha. Produkt bol chromatografovaný na silikagéli, pri vymývaní 3,5 % (10 % kone. NH₄OH v metanole) dichlórmetánom, pri získaní cieľovej zlúčeniny (výťažok: 571,5 mg, 99 % ): FABMS:m/z 576,3 (MH⁺); 5_c(CDC1₃):C1I₂:30,2; 30,5; 32,0; 32,0; 39,3; 41,7; 44,4; 44,5; 45,7; 50,7; 51,2; CH:33,0; 64,0; 126,5; 130,6; 130,6; 133,5; 138,6; C:l 18,4; 133,6; 134,8; 139,9; 141,0; 148,1; 157,9; 169,8; 8_H(CDC1₃): 5,73 (β,ΙΗ,Η,,), 7,12 (d,lH,ArH), 7,15 (s,lH,Ar-H), 7,20 (s,lH,Ar-H), 7,22 (d,lH, Ar-H), 8,28 (s,lH,Ar-H); [<x]_D ²³'^4=c= -62,5° (9,54 mg/2ml MeOH).

Východiskový reaktant (0,1 g, 0,18 mol) bol rozpustený v CH₂Cl₂ (5 ml) a potom bol ochladený na -18 °C. Potom bola pridaná kyselina m-chlórperoxybenzoová (0,18 g, 1,07 mol) a reakčná zmes bola počas noci miešaná pri izbovej teplote. Reakčná zmes bola rozdelená medzi CH₂C1₂ a nasýtený NaHCO₃ (vodný). Vodná fáza bola ďalej extrahovaná CH₂C1₂. Spojené CH₂C1₂ frakcie boli vysušené pomocou MgSO₄ a zahustené vo vákuu, pri získaní zvyšku, ktorý bol chromatografovaný na silikagélovej doske, pri vymývaní 10 % MeOH (nasýtený MI,)-CH₂CI₂. pri získaní cieľovej zlúčeniny ako bielej pevnej látky (0,013 g, výťažok 13 %, m.p. = 146,8 - 147,4 °C, MH⁺=577).

Východiskový reaktant bol získaný pri použití postupu príkladu 14 a opísaných postupov separácie chirálnej chromatografie.

Cieľová zlúčenina bola pripravená podľa v podstate rovnakého postupu, ako je opísaný v príklade 45 (m.p. = 120 -121 °C,MH⁺=577).

Východiskový reaktant bol oxidovaný kyselinou m-chlórperoxybenzoovou podľa v podstate rovnakého oxidačného postupu ako v príklade 45, pri získaní cieľovej zlúčeniny (m.p. = 109 - 110 °C, MH⁺=542).

Východiskový reaktant bol získaný reakciou S(-) izoméru cieľovej zlúčeniny príkladu 3 s cieľovou zlúčeninou príkladu 12. S(-) izomér racemátu príkladu 3 bol získaný pri použití opísaných postupov separácie chirálnej chromatografie.

Príklad 48

Cieľová zlúčenina bola pripravená podľa v podstate rovnakého postupu, ako je opísaný v príklade 47 (m.p.=125,5 - 126,3 °C, MH⁺=542).

Príklad 49

FTP IC₅₀ (inhibícia famezyl-proteíntransferázy, enzymatický pokus in vitro) bola stanovená podľa postupov, o písaných vo WO 95/10516, publikovanom 20. apríla 1995. GGPT IC₅₀ (inhibícia geranylgeranylproteíntransferázy, enzymatický pokus in vitro), COS Celí IC_S0 (na bunkách založený pokus), Celí Mat Assay a protinádorová aktivita (nádorové štúdie in vivo) mohli byť stanovené podľa postupov, opísaných vo WO 95/10516. Opis WO 95/10516 je tu zahrnutý odkazom.

Ďalšie pokusy mohli byť uskutočnené podľa v podstate rovnakého postupu, ako je opísaný, ale pri nahradení buniek T24-BAG inými indikátorovými nádorovými bunkovými líniami. Tieto pokusy mohli byť uskutočnené pri použití alebo buniek ľudského karcinómu hrubého čreva DLD-1-BAG, exprimujúcich aktivovaný gén K-Ras, alebo buniek ľudského karcinómu hrubého čreva SW620-BAG, exprimujúcich aktivovaný gén K-Ras. Pri použití iných nádorových bunkových línií, známych v odbore, mohla byť ukázaná aktivita zlúčenín tohto vynálezu proti iným typom rakoviny.

Soft Agar Assay

Od podkladu nezávislý rast je vlastnosťou tumorogénnych bunkových línií. Ľudské nádorové bunky môžu byť suspendované v rastovom médiu, obsahujúcom 0,3 % agarózu a uvedenú koncentráciu inhibítora farnezylproteíntransferázy. Týmito roztokom môže byť prevrstvené rastové médium, spevnené 0,6 % agarózou, obsahujúcou rovnakou koncentráciu inhibítora farnezylproteíntransferázy. Po stuhnutí hornej vrstvy môžu byť misky inkubované počas 10 - 16 dní pri 37 °C, pri 5 % CO₂, čo umožní rast kolónií. Po inkubácii môžu byť kolónie farbené prevrstvením agaru roztokom MTT (3-[4,5-dimctyltiazol-2-yl]-2,5-difenyltetrazoliumbromid, Thyazolil blue) (1 mg/ml v PBS). Kolónie môžu byť počítané a hodnoty IC₅₀ môžu byť stanovené.

FTP pM IC₅₀ assay

Enzymatická reakcia prebiehala v 50 mM Tris, 5 μΜ ZnCl₂, 5 mM MgCl₂, 0,01 % Tritónu X-100, 5 mM ditiotreitolu (DTT), pH 7,7 (pufor R) pri 37 °C počas 1 hodiny. Purifikované ľudské FPT (>95 % čistota) boli odvodené z expresného systému Baculovi-rus/Sf-9 expression systém. Použitím peptidovaný substrátom bol biotín-CVLS (SynPep Corp., Dublin, CA) a (1-³H)-FPP (21,5 Ci/mol) kúpený od New England Nuclear Life Science Products (Boston, MA). Zlúčeniny boli najskôr rozpustené na konečnú koncentráciu 4 mg/ml v 100 % DMSO a potom na 0,25 pg/ml v 100 % DMSO. Nasledovné rozriedenie týchto zlúčenín bolo vykonané v pufri R.

Enzymatická reakcia prebiehala v konečnom objeme 100 μΐ. Reakcie sú vykonávané na 96-jamkových doštičkách. Konečné koncentrácie ľudskej FPT, FPP a biotínCVLS boli jednotlivo 30 pM, 176 nM a 100 nM, v objeme 100 μΐ. Typická reakcia zahrnuje miešanie FPT a FPP v 40 μΐ pri izbovej teplote počas 15 minút, potom nasleduje pridanie 40 μΐ roztoku obsahujúceho testovanú zlúčeninu. Roztok sa potom mieša počas 15 minút pri izbovej teplote. Enzymatická reakcia je naštartovaná pridaním 20 μΐ biotínCVLS peptidového substrátu a prebieha pri 37 °C počas 1 hodiny. Reakcia je ukončená použitím 150 μ roztoku Stop Solution, ktorý obsahuje 1,3 mg/ml scintilačných guľôčok (straptavidinom obalené guľôčky od Amersham (Arlington Heights, IL), 250 mM EDTA, pH 8,0 a 0,5 % BSA. Rádioaktivita je meraná po 20 minútach pri izbovej teplote.

Pri zlúčeninách je stanovená ich schopnosť inhibovať túto reakciu, meraním od koncentrácie závislé percento inhibície reakcie. Zásoby roztokov týchto zlúčenín 25 μΐ/ml (DMSO) boli rozriedené v pufri R a potom v reakčnej zmesi, ako je napísané, pri získaní konečnej koncentrácie 0,01,

0,003, 0,001, 0,0003, 0,0001 a 0,00003 μΐ/ml reakčnej zmesi. Enzymatická aktivita bola zistená meraním CPM/jamku, pri použití scintilačného počítača Wallac 1204 Betaplate BS liquid scintilation computer. Kontrolné pokusy boli vykonané bez inhibítorov, s cieľom získať hodnoty CPM na neinhibovanú reakciu. Ďalej boli vykonané reakcie bez biotín-CVLS, na získanie signálu pre CPM hodnoty pozadia. Po korekcii signálov na pozadí môže byť vypočítané percento inhibície pre každú koncentráciu inhibítora a môže byť interpolovaná hodnota IC₅₀ metódou najmenších štvorcov z údajov v rámci lineárneho úseku inhibície.

Zlúčeniny príkladov 34 - 49 a zlúčenina 54,0 mali FTP IC50 v rozmedzí od 0,7 nM do >174 nM. Zlúčenina príkladu 40 mala FTP pM IC₅₀ 0,44 nM a zlúčenina príkladu 43 mala FTP pM IC₅₀ 0,41 nM.

Zlúčeniny príkladov 35, 36 a 40 mali COS Celí IC₅₀ v rozmedzí od 0,9 nM do 85 nM a Soft Agar IC₅₀ v rozmedzí od 25 nM do 183 nM.

Príklad 51

Na prípravu farmaceutických prípravkov zo zlúčenín opísaných týmto vynálezom môžu byť inertné, farmaceutický prijateľné nosiče pevné alebo tekuté. Prípravky v pevnej forme zahrnujú prášky, tabletky, dispergovateľné granuly, kapsuly a čipky. Prášky a tabletky môžu obsahovať od asi 5 do asi 70 % aktívnej látky. Vhodné pevné nosiče sú známe v odbore, napr. uhličitan horečnatý, stearan horečnatý, mastenec, cukor a laktóza. Tablety, prášky, tobolky a ka-psuly môžu byť použité ako pevné dávkové formy, vhodné na orálne podávanie.

Na prípravu čapíkov sa najskôr rozpustí vosk s nízkou teplotou topenia, ako je zmes gliceridov mastných kyselín alebo kakaové maslo a aktívna látka je v ňom potom homogénne dispergovaná, napr. miešaním. Rozpustená homogénna zmes je potom naliata do foriem vhodnej veľkosti, nechá sa vychladnúť a tak stuhnúť.

Prípravky v tekutej forme zahrnujú roztoky, suspenzie a emulzie. Ako príklad môžu byť uvedené vodné alebo vodopropylénglykolové roztoky pre parenterálnu injekciu.

Prípravky v tekutej forme môžu tiež zahrnovať roztoky na intranazálne podávanie.

Aerosólové prípravky, vhodné na inhaláciu, môžu zahrnovať roztoky a pevné látky vo forme prášku, ktoré môžu byť v spojení s farmaceutický prijateľným nosičom, ako je inertný stlačený plyn.

Zahrnuté môžu byť tiež prípravky v pevnej forme, ktoré môžu byť krátko pred použitím premenené na prípravky v tekutej forme na orálne alebo parenterálne podávanie. Takéto tekuté formy zahrnujú roztoky, suspenzie a emulzie.

Zlúčeniny tohto vynálezu môžu byť tiež dopravené transdermálne. Transdermálne prostriedky môžu byť vo forme krémov, pleťových vôd, aerosólov a/alebo emulzii a môžu byť obsiahnuté v transdermálnych náplastiach matrixového alebo porózneho typu, ako je v odbore na tieto účely bežné.

Prednostne sú zlúčeniny podávané orálne.

Prednostne je tento farmaceutický prostriedok v jednotkovej dávkovacej forme. V takejto forme je tento prípravok rozdelený do jednotkových dávok, obsahujúcich príslušné množstvo aktívnej zložky, napr. množstvo, ktoré je účinné na dosiahnutie požadovaného cieľa.

Množstvo aktívnej látky v jednotkovej dávkovacej forme prípravku môže byť menené alebo upravené od asi 0,1 mg do 1000 mg, lepšie od asi 1 mg do 300 mg, podľa konkrétneho použitia.

Skutočné použité dávkovanie sa môže meniť v závislosti od potrieb pacienta a závažnosti liečeného stavu. Ur25 čenie správneho dávkovania na konkrétnu situáciu je v možnostiach odborníka. Všeobecne, liečenie je začaté menšími dávkami, ktoré sú menšie, ako je optimálna dávka tejto zlúčeniny. Potom je dávkovanie zvyšované po menších častiach, pokiaľ nie je dosiahnutý optimálny účinok za daných okolností. Ak je požadované, môže byť celková denná dávka rozdelená a podávaná po častiach v priebehu dňa.

Množstvo a frekvencia podávania zlúčenín tohto vynálezu a ich farmaceutický prijateľných solí môže byť regulovaná podľa posúdenia navštíveného lekára, ktorý zváži všetky faktory, ako je vek, stav a výška pacienta, rovnako ako závažnosť liečených príznakov. Bežným doporučeným režimom dávkovania na zastavenie rastu nádoru je orálne podávanie od 10 mg do 200 mg/deň, prednostne 10 až 1000 mg/deň, vo dvoch oddelených dávkach. Keď sú podávané v tomto dávkovom rozmedzí, sú tieto zlúčeniny netoxické.

Príklady farmaceutických dávkovacích foriem

Claims (6)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   I. Tricyklická amidová zlúčenina, vybraná zo skupiny obsahujúcej n

   (53.0),

   Číslo Zložka Mg-'tablctka Mg'tablctka 1. Aktívna látka 100 500 2. Laktóza USP 122 113 3. Kukuričný škrob, Food Gráde, ako 10% zmes v čistej vode 30 40 4. Kukuričný škrob, Food Gráde 45 40 5. Stearan horečnatý 3 7 Celkom 300 700

   Spôsob výroby

   Miešajte zložky č. 1 a
2. 2 počas 10-15 minút. Zmes granulujte zložkou č. 3. Ak je to nutné, rozdrvte vlhké granuly cez hrubé sito (napr. 1/4, 0,63 cm). Vysušte vlhké granuly. Prezrite suché granuly, ak je to nutné, a zmiešajte ich so zložkou č. 4 a miešajte počas 10-15 minút. Pridajte zložku č.5 a miešajte 1 - 3 minúty. Zmes stlačte na príslušnú veľkosť a zviažte na vhodnom tabletkovacom stroji.

   Kapsule

   Br

   Br (42.0)_/

   Číslo Zložka Mgtapsula Mgkapsula 1. Aktívna látka 100 500 2. Laktóza USP 106 123 3. Kukuričný škrob, Food Gráde 40 70 4. Stearan horečnatý· NF 7 7 Celkom 300 700

   (40.0)_/ (4.0),

   Spôsob výroby

   Miešajte zložky č. 1, 2 a 3 počas 10-15 minút. Pridajte zložku č. 4 a miešajte 1 - 3 minúty. Zmesou naplňte dvojdielne želatínové kapsuly na vhodnom stroji.

   Predkladaný vynález bol opísaný v spojení s konkrétnym uskutočnením, uvedeným skôr. Odborníkovi v odbore budú zrejmé jeho viaceré alternatívy, modifikácie a variácie. Všetky takéto alternatívy, modifikácie a variácie patria do rozsahu a myšlienky predkladaného vynálezu.

   Br (25.0)_; (26.0), («·«), (27.0)_z
3. 3. Farmaceutický prostriedok, vyznačujúci sa tým, že obsahuje účinné množstvo tricyklickej amidovej zlúčeniny podľa nároku 1 spolu s farmaceutický prijateľným nosičom.
4. 4. Použitie tricyklickej amidovej zlúčeniny podľa nároku 1 na výrobu liečiva na liečenie rakoviny a na inhibiciu rastu nenormálnych buniek a inhibiciu famezylproteíntransferázy
5. 5. Použitie podľa nároku 4, kde inhibovanými bunkami sú nádorové bunky exprimujúce aktivovaný Ras-onkogén.
6. 6. Použitie podľa nárokov 4 a 5, kde rakovinou je rakovina slinivky brušnej, rakovina pľúc, leukémia miechy, rakovina folikulov, štítnej žľazy, myelodisplastický syndróm, epidermálny karcinóm, karcinóm žlčníka, rakovina hrubého čreva, rakovina pŕs a rakovina prostaty.