SK281970B6 - Peptidy s modifikáciami na n-konci, spôsob ich prípravy, ich použitie a farmaceutické kompozície s ich obsahom - Google Patents
Peptidy s modifikáciami na n-konci, spôsob ich prípravy, ich použitie a farmaceutické kompozície s ich obsahom Download PDFInfo
- Publication number
- SK281970B6 SK281970B6 SK289-93A SK28993A SK281970B6 SK 281970 B6 SK281970 B6 SK 281970B6 SK 28993 A SK28993 A SK 28993A SK 281970 B6 SK281970 B6 SK 281970B6
- Authority
- SK
- Slovakia
- Prior art keywords
- arg
- formula
- peptide
- fmoc
- gly
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/18—Kallidins; Bradykinins; Related peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
- Transceivers (AREA)
- Mobile Radio Communication Systems (AREA)
Abstract
Bradykinín-antagonizujúce peptidy všeobecného vzorca Z-B-C-E-F-K-(D) Q-G-M-F'-I, v ktorom Z znamená Fmoc, dibenzylacetylovú skupinu, cyklohexylkarbonylovú skupinu, N, N-dibenzylglycylovú skupinu, 2-(4-izobutylfenyl)propionylovú skupinu 2R-(terc-butylsulfonylmetyl)-3-(1-naftyl)-propionylovú skupinu, indol-3-yl-acetylovú skupinu, 4-benzoylbenzoylovú skupinu, 1,8-naftalimidoacetylovú skupinu, 7-teofylínacetylovú skupinu alebo N-benzoylovú skupinu; P znamená priamu väzbu, Aoc, epsilon-aminohexanoylovú skupinu, D-Aoc, Aeg (Fmoc), 4-aminocyklohexylkarbonylovú skupinu, 4-aminometylcyklohexylkarbonylovú skupinu alebo Oic, a A znamená (D)- alebo (L)-Arg, (D)- alebo (L)-Lys, alebo väzbu; B znamená Arg; C znamená Pro-Hyp-Gly; E znamená Thia; F znamená Ser; K znamená priamu väzbu; Q znamená Tic; M znamená priamu väzbu; G znamená cis-endo-, cis-exo-, trans-oktahydroindol-2-karboxylovú kyselinu; F' znamená Arg a I znamená OH alebo ich fyziologicky prijateľné soli, spôsob ich prípravy, farmaceutické kompozície s ich obsahom a ich terapeutické využitie.ŕ
Description
Vynález sa týka nových peptidov s bradykinín-antagonizujúcim účinkom, ako aj spôsobu ich prípravy.
Doterajší stav techniky
Bradykinín-antagonizujúce peptidy sú, okrem iného, opísané v patentových spisoch WO 86/07263 a WO 91/09055 v patentových prihláškach EP 370 453, EP 413 277, EP 455 133 a EP 472 220.
Podstata vynálezu
Predmetom vynálezu je nový bradykinín-antagonizujúci peptid všeobecného vzorca (I)
Z-P-A-B-C-E-F-K-(D)Q-G-M-F‘-I (I), v ktorom
Z znamená Fmoc, dibenzylacetylovú skupinu, cyklohexylkarbonylovú skupinu, /V,/V-dibenzyl-glycylovú skupinu, 2-(4-izobutylfenyl)propionylovú skupinu, (2-Ä-(tcrc-butylsulfonylmetyl)-3-(l-naftyl)-propionylovú skupinu, indol-3-yl-acetylovú skupinu, 4-benzoybenzoylovú skupinu, 1,8-naftalimidoacetylovú skupinu, 7-teofylínacetylovú skupinu alebo A-benzoylovú skupinu,
P znamená priamu väzbu, Aoc, -aminohexanoylovú skupinu, D-Aoc, Aeg(Fmoc), 4-aminocyklohexylkarbonylovú skupinu, 4-aminometylcyklohexylkarbonylovú skupinu alebo Oic,
A znamená (D)- alebo (L)-Arg, (D) alebo (L)-Lys, alebo väzbu,
B znamená Arg,
C znamená Pro-Hyp-Gly,
E znamená Thia,
F znamená Ser,
K znamená priamu väzbu,
Q znamená Tie,
M znamená priamu väzbu,
G znamená cís-endo-, cir-exo-, trans-oktahydroindol-2-karboxylovú kyselinu,
F znamená Arg a
I znamená OH alebo jeho fyziologicky prijateľné soli.
V prípade, že nie je výslovne uvedené inak, znamená skratka aminokyselinového zvyšku bez stereo-indexu zvyšok v konfigurácii L (pozri Schrôder, Lubke, Peptides, zv. 1, New York 1965, str. XXII-XXIII; Houben-Weyl, Methoden der Organischen Chemie, zv. XV/1 a 2, Stuttgart 1974), ako napríklad
Aad, Abu, yAbu, ABz, 2ABz, sAca, Ach, Acp, Adpd, Ahb, Aib, BAib, Ala, BAla, AAla, Alg, All, Ama, Amt, Ape, Apm, Apr, Arg, Asn, Asp, Asu, Aze, Azi, Bai, Bph, Can, Cit, Cys, Cyta, Daad, Dab, Dadd, Dap, Dapm, Dasu, Djen, Dpa, Dtc, Fel, Gin, Glu, Gly, Guv, hAla, hArg, hCys, hGln, hGlu, His, hlle, hLeu, hLys, hMet, hPhe, hPro, hSer, hThr, hTrp, hTyr, Hyl, Hyp, 3Hyp, íle, Ise, Iva, Kyn, Lant, Len, Leu, Lsg, Lys, BLys, ALys, Met, Mim, Min, hArg, Nie, Nva, Oly, Órn, Pan, Pec, Pen, Phe, Phg, Pic, Pro, APro, Pse, Pya, Pyr, Pza, Qin, Ros, Sar, Sec, Sem, Ser, Thi, BThi, Thr, Thy, Thx, Tia, Tie, Tly, Trp, Trta, Tyr, Val atď.
Pokiaľ ide o soli, do úvahy prichádzajú najmä soli alkalických kovov a kovov alkalických zemín, soli s fyziologicky prijateľnými amínmi a soli s anorganickými alebo organickými kyselinami, ako sú HC1, HBr, H2SO4, H3PO4 a kyselina maleínová, fumarová, citrónová, vínna a octová.
Vynález sa taktiež týka spôsobu prípravy peptidov všeobecného vzorca (I), ktorého podstata spočíva v tom, že sa
a) do reakcie uvedie fragment s C-koncovou voľnou karboxylovou skupinou alebo jeho aktivovaný derivát s príslušným fragmentom s N-koncovou voľnou aminoskupinou alebo sa
b) peptid postupne vytvorí, následne sa v zlúčenine získanej podľa a) alebo b) odštiepi jedna alebo niekoľko ochranných skupín, ktoré sa prípadne zaviedli na dočasnú ochranu ostatných íunkcií, a takto získané zlúčeniny všeobecného vzorca (I) sa prípadne prevedú na ich fyziologicky prijateľnú soľ.
Peptidy podľa vynálezu sa pripravili podľa postupov, ktoré sú v chémii peptidov všeobecne známe (pozri napríklad Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie, zv. 15/2, výhodne pomocou systézy v pevnej fáze, ktorú napríklad opísal B. Marrifield v J. Am. Chem. Soc. 85, 2149 alebo R. C. Sheppard v Int. J. Peptide Protein Res. 21, 118 (1983) alebo ekvivalentnými známymi postupmi. Ako dočasne zavedené ochranné skupiny sa používajú uretánové ochranné skupiny, ako sú napríklad íerc-butyloxykarbonylová skupina (Boe) alebo fluorenylmetyloxykarbonylová skupina (Fmoc).
V prípade, že je potrebné zabrániť vedľajším reakciám, alebo v prípade, keď sa má syntézou získať špecifický peptid, sú funkčné skupiny v bočnom reťazci aminokyselín chránené vhodnými ochrannými skupinami (pozri napríklad T. W. Greene, „Protective Groups in Organic Synthesis“), pričom sa predovšetkým používajú Arg(Tos), Arg(Mts), Arg(Mtr), Arg(Pmc), Asp(OBzl), Asp(OBut), Cys(4-MeBzl), Cys(Acm), Cys(SBut), Glu(OBzl), Glu(OBut), His(Tos),His(Fmoc), His(Dnp), His(Trt), Lys(Cl-Z), Lys (Boe), Met(O), Ser(Bzl), Ser(But), Thr(Bzl), Thr(But), Trp(Mts), Trp(CHO), Trp(Boc), Tyr(Br-Z), Tyr(Bzl) alebo Tyr(But).
Syntéza v pevnej fáze začína na C-terminálnom konci peptidu kopuláciou chránenej aminokyseliny s príslušnou živicou. Takéto východiskové materiály sa môžu získať viazaním chránenej aminokyseliny esterovou, prípadne amidovou väzbou s polystyrénovou alebo polyakrylamidovou živicou, modifikovanou chlórmetylovou, hydroxymetylovou, benzhydrylamínovou (BHA) alebo metylbenzhydrylamínovou (MBHA) skupinou. Živice použité ako nosičový materiál, sú komerčne dostupné. BHA- a MBHA-živice sa obvykle použijú v prípade, keď syntetizovaný peptid má obsahovať na C-konci voľnú karbamoylovú skupinu. V prípade, že peptid má na C-konci obsahovať sekundárnu amidovú skupinu, potom sa použijú chlórmetyl-, prípadne hydroxymetyl-živice a vykoná sa odštiepenie príslušnými amínmi. Ak sa má získať etylamid, môže sa peptid odštiepiť od živice etylaminom, pričom odštiepenie ochranných skupín bočného reťazca sa vykoná následne s použitím ďalších vhodných činidiel. Ak majú v peptide zostať zavedené /erc-butyl-ochranné skupiny aminokyselinového bočného reťazca, potom sa syntéza vykonáva s Pmoc-ochrannou skupinou na dočasné blokovanie aminoskupiny aminokyseliny použitej na predĺženie reťazca s použitím metodiky, ktorú opísal R. C. Sheppard v J. Chem. Soc., Chem. Comm. 1982, 587, pričom guanidínová funkcia arginínu je chránená protonáciou pyridíniumchloristanom, pričom ochrana ostatných aminokyselín fiinkcionalizovaných v bočnom reťazci sa vykoná pomocou katalytickej prenosovej hydrogenácie (A. Felix a kol., J. Org. Chem. 13,4194 (1978) alebo sodíkom v kvapalnom amoniaku (W. Roberts, J. Am.
SK 281970 Β6
Chem. Soc. 76, 6203 (1954) odštiepiteľných benzylových ochranných skupín.
Po odštiepení amino-ochrannej skupiny aminokyseliny kopulovanej so živicou vhodným činidlom, ako je napríklad kyselina trifluóroctová v metylénchloride v prípade Boc-ochrannej skupiny alebo 20 % roztok piperidínu v dimetylformamide v prípade F-moc-ochrannej skupiny, sa následne navážia, jedna za druhou v požadovanom poradí, nasledujúce ochranné aminokyseliny. Chránené peptidové živice, ktoré vznikli intermediáme na N-konci, sa pred kopuláciou nasledujúceho aminokyselinového derivátu odblokujú predpísanými činidlami.
Ako kopulačné činidlá sa môžu použiť všetky aktivačné činidlá používané pri syntézach peptidov (pozri napríklad Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie, zv. 15/2), najmä však karbodiimidy, ako sú napríklad N,N-dicyklohexylkarbodiimid, NúV-diizopropylkarbodiimid alebo N-etyl-7V-(3-dimetyl- aminopropyl)karbodiimid, alebo uróniové zlúčeniny (napríklad TBTU, TOTU), ktoré napríklad opísal R. Knorr a kol. v Tetrahedron Letters, zv. 30, č. 15, str. 1927-1930 alebo v európskej patentovej prihláške 460 446. Kopulácia sa môže pritom vykonať priamo pridaním aminokyselinového derivátu s aktivačným činidlom a prípadne s činidlom potláčajúcim racemizáciu, ako je napríklad 1-hydroxybenzotriazol (HOBt) (W. Kônig, R. Geiger, Chem. Ber. 103, 708 (1970) alebo 3-hydroxy-4-oxo-3,4-dihydrobenzotriazín (HOOBt) (W. Kônig, R. Geiger, Chem. Ber. 103, 2054 (1970)) k živici, alebo je možné vykonať predaktiváciu aminokyselinového derivátu ako symetrického anhydridu alebo HOBt-, prípadne HOOBt-esteru separátne a pridať roztok aktivovaného derivátu vo vhodnom rozpúšťadle k peptidovej živici schopnej kopulácie.
Kopulácia, prípadne aktivácia aminokyselinového derivátu jedným s už uvedených aktivačných činidiel sa môže vykonať v dimetylformamide, ΛΓ-metylpyrolidóne alebo metylénchloride, alebo v zmesi uvedených rozpúšťadiel. Aktivovaný derivát sa obvykle používa v 1,5 až 4-násobnom prebytku. V prípadoch, keď nedôjde k úplnej kopulácii, sa kopulačná reakcia opakuje bez toho, aby sa predtým vykonalo odblokovanie amínovej skupiny peptidovej živice, ktoré je nevyhnutné na kopuláciu nasledujúcich aminokyselín.
Úspešný priebeh kopulačnej reakcie sa môže potvrdiť pomocou ninhydrínovej reakcie, ktorú napríklad opísal E. Kaiser a kol. v Anál. Bíochem. 34, 595 (1970). Uvedená syntéza môže byť tiež automatizovaná a vykonaná napríklad pomocou peptidového syntetizátora Model 430A firmy Applied Biosystems, pričom sa môžu použiť tak syntézne programy odporúčané výrobcom, ako aj syntézne programy zostavené užívateľom. Programy zostavené užívateľom sa používajú najmä pri použití aminokyselinových derivátov chránených skupinou Fmoc.
Po vykonaní syntézy peptidov už opísaným spôsobom, sa môže takto syntetizovaný peptid odštiepiť od nosnej živice pomocou vhodných činidiel, ako sú napríklad kvapalný fluorovodík (výhodne pri peptidoch, pripravených Boc-metódou) alebo kyselina trifluóroctová (výhodne pri peptidoch syntetizovaných Fmoc-metódou). Tieto činidlá odštiepia nielen peptid od živice, ale aj ďalšie ochranné skupiny bočného reťazca aminokyselinového derivátu. Týmto spôsobom sa s výnimkou použitia BHA- a MBHA-živíc získa peptid vo forme voľnej kyseliny. Pri BHA-, prípadne MBHA-živíc pri štiepení fluorovodíkom alebo kyselinou trifluórmetánsulfónovou sa peptid získa vo forme amidu kyseliny. Ďalšie spôsoby prípravy peptidamidov sú opísané v EP-A 287 882 a EP-A 322 348. Tu sa odštiepenie pepti damidov od živíc vykonáva pôsobením stredne silných kyselín (napríklad kyseliny trifluóroctovej), zvyčajne používaných pri syntézach peptidov, pričom sa ako látky zachytávajúce katióny, pridávajú napríklad fenol, krezol, tiokrezol, anizol, tioanizol, etánditiol, dimetylsulfid, etylmetylsulfid alebo podobné katióny, zachytávajúce látky, ktoré sú obvyklé pri syntéze v pevnej fáze, a to buď jednotlivo, alebo ako zmes dvoch alebo viacerých takýchto pomocných látok. Kyselina trifluóroctová sa pritom môže použiť tiež zriedená vhodným rozpúšťadlom, ako je napríklad metylénchlorid. Uvedené štiepenie sa môže takisto vykonať zmesou kyseliny trifluóroctovej, trimetylsilylhalogenidu (ako je napríklad trimetylsilylbromid) a fenolu (napríklad n-krezolu). V prípade, že sa majú zachovať terc-butyl-, prípadne benzyl-ochranné skupiny bočných reťazcov peptidov, vykonáva sa odštiepenie peptidu z modifikovanej nosnej živice 1 % kyselinou trifluóroctovou v metylénchloride, ako to napríklad opísal R. C. Sheppard v J. Chem. Soc., Chem. Comm. 1982, 587. Ak sa majú zachovať jednotlivé terc-butyl-, prípadne benzyl-ochranné skupiny bočných reťazcov, potom sa použije vhodná kombinácia syntézneho a štiepiaceho postupu.
Na syntézu peptidov s C-koncovou karbamoylovou skupinou alebo ω-amino-, prípadne ω-guanidinoalkylovou skupinou sa používa modifikovaná nosná živica, ktorú taktiež opísal Sheppard. Po vykonanej syntéze sa od živice odštiepi peptid, ktorý je v bočnom reťazci úplne chránený a ktorý sa potom uvedie do reakcie v rámci klasickej rozpúšťadlovej syntézy s príslušným amínom, prípadne <o-aminoalkylamínom alebo ω-guanidinoalkylaminom, pričom sa prípadne ďalšie prítomné funkčné skupiny dočasne chránia známym spôsobom.
Ďalší spôsob prípravy peptidov s ω-aminoalkylskupinou je opísaný v EP-A 264 802.
Peptidy podľa vynálezu sa výhodne syntetizujú technikou v pevnej fáze s použitím dvoch všeobecných ochranných taktík ochrannými skupinami.
Syntéza sa vykonáva v automatickom peptidovom syntetizátore Modeli 430 A firmy Applied Biosystems s použitím Boe-, prípadne Fmoc-ochranných skupín na dočasné blokovanie amínovej skupiny.
Použitím Boc-ochrannej skupiny sa na syntézu používajú syntézne cykly, ktoré sú naprogramované samotným výrobcom prístroja.
Syntéza peptidov s voľnou karboxylovou skupinou na C-terminálnom konci sa vykonáva na 4-(hydroxymetyl)fenylacetamidometylpolystyrénovej živici fiinkcionalizovanej príslušnou Boc-aminokyselinou (R. B. Merrifield, J. Org. Chem. 43, 2845 (1978) firmy Applied Biosystems. Na prípravu peptidamidu sa použila MBHA-živica od tej istej firmy. Ako aktivačné činidlá slúžia NJI'-dicyklohexylkarbodiimid alebo A,.V-diizopropylkarbodiimid. Aktivácia sa vykonáva vo forme symetrického anhydridu, HObt-esteru alebo HOObt-esteru v CH2C12, v zmesi CH2-C12-DMF alebo v NMP. Na kopuláciu sa použijú 2 až 4 ekvivalenty aktivovaného aminokyselinového derivátu. V prípadoch, keď kopulácia prebehla neúplne, kopulačná reakcia sa opakuje.
Použitím Fmoc-ochrannej skupiny na dočasnú ochranu amínovej skupiny pri syntéze v automatickom peptidovom syntetizátore Modeli 430 A firmy Applied Biosystems sa do tohto syntetizátora vkladajú vlastné syntézne programy. Syntéza sa vykonáva na p-benzyloxybenzylalkoholovej živici (S. Wang, J. Am. Chem. Soc. 95, 1328 (1973) firmy Bachem, ktorá sa esterifikovala príslušnou aminokyselinou známym postupom (E. Atherton a kol., J. C. S. Chem. Comm. 1981, 336). Aktivácia aminokyselinového derivátu
SK 281970 Β6 ako HObt- alebo HOObt-ester sa vykonáva priamo v aminokyselinovej patróne pridaním roztoku diizopropylkarbodiimidu v DMF vo vopred odváženej zmesi aminokyselinového derivátu a HOBt alebo HOOBt. Takisto sa môžu použiť v pevnom stave pripravené Fmoc-aminokyselina-OObt-estery, ako je to opísané v EP-A 247 573. Odštiepenie Fmoc-ochrannej skupiny sa vykonáva 20 % roztokom piperidínu v DMF v reakčnej nádobe. Použitý prebytok reaktívneho aminokyselinového derivátu je 1,5 až 2,5 ekvivalentu. V prípade, že kopulácia prebehla neúplne, opakuje sa takisto ako v prípade Boc-metódy.
Peptidy podľa vynálezu majú jednotlivo alebo v kombinácii bradykinín-antagonizujúcu účinnosť, ktorá sa môže preukázať na rôznych modeloch testov (pozri Handbook of Exp. Pharmacol. zv. 25, Springer Verlag, 1970, str. 53-55), napríklad na izolovanej maternici krysy, bedrovníku morčaťa alebo na pulmonálnej tepne morčaťa.
S cieľom testovať peptidy podľa vynálezu na izolovanej pulmonálnej tepne sa morčatá (Dunkin Hartley) s telesnou hmotnosťou od 400 do 450 g usmrtia zlomením väzu. Pokusným zvieratám sa otvorí hrudná dutina, potom sa opatme vypreparuje pulmonálna tepna. Okolité tkanivo sa starostlivo oddelí a pulmonálna tepna sa špirálovito nareže v 45° uhle. Prúžok tepny s dĺžkou 2,5 cm a šírkou 3 až 4 mm sa potom fixuje v 10 ml orgánovej nádobe, ktorá je naplnená Ringerovým roztokom.
Zloženie roztoku v mmol/1
NaCl154
KC15,6
CaClj1,9
NaHCOj2,4 glukóza5,0
Tento roztok sa prebubláva plynnou zmesou, ktorá obsahuje 95 % O2, 5 % CO2 a zohrieva sa na teplotu 37 °. Roztok má hodnotu pH 7,4 a predpätie na prúžku tepny je 1,0 g.
Izometrické zmeny kontrakcie sa snímajú prostredníctvom pákovej predsádky a dráhového meradla (HF-Modem) firmy Hugo Sachs a zaznamenávajú na kompenzačnom registračnom prístroji (BEC, Goerz Metrawatt SE460).
Po jednohodinovej ekvilibračnej perióde sa pokus začne. Potom, ako prúžky tepny dosiahnu maximálnu citlivosť na 2xl0'7mol/l bradykinínu (bradykinín spôsobuje kontrakciu prúžkov tepny), nechajú sa vždy počas 10 minút pôsobiť peptidy podľa vynálezu v dávkach od 5 x 10” do 1 x x 10'5mol/l, potom sa po opätovnom pridaní bradykinínu vyhodnotí inhibičný účinok peptidov na bradykinín porovnaním s výsledkami dosiahnutými z kontrolných pokusných zvierat.
S cieľom stanoviť parciálny agonizujúci účinok sa peptidy použijú v dávkach od 1 x 10” do 1 x 10’3 mol/1.
Hodnoty IC50, získané z kriviek dávka-odozva, sú pre testované peptidy uvedené v nasledujúcej tabuľke 1.
Tabuľka 1
| Pr. č. | Sekvencia | Hodnota IC5o (pulmonálna tepna) |
| 1 | Fmoc-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH | 9,9 x 10” |
| 2 | Fmoc-Aoc-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH | 8,5 x 10” |
| 3 | Dibenzylacetyl-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH | 1,7x10” |
| 4 | Cyklohexylkarbonyl-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH | 9,1 x 10” |
| 5 | Fmoc-e-Aminokaproyl-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH | 4,1 x 10” |
| 6 | ΛζΛ-Dibenzyl-Gly-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH | 2,2 x 10” |
| 7 | Fmoc-D-Aoc-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH | 2,2 x 10” |
| 8 | 2-(4-Izobutylfenyl)propionyl-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH | 2,5 x ÍO” |
| 9 | (2-Ä-(/erc-butylsulfonylmetyl)-3 -(1 -naftylj-propionyl-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH | 1,2x10” |
| 10 | Indol-3-yl-acetyl-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH | 8,8 x 10” |
| 11 | 2-(4-izobutylfenyl)propionyl-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH | 1,8x10” |
| 12 | 2-(4-izobutylfenyl)propionyl-6-aminohexanoyl-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH | 7,8x10” |
| 13 | 6-(4-Benzoyl-benzoylamino)hexanoyl-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH | 2,7 x 10” |
| 14 | Fmoc-Aeg(Fmoc)-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH | 1,5 x 10” |
| 15 | Fmoc-(4-aminocyklohexylkarbonyl)-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH | 2,5 x 10” |
| 16 | 1,8-Naftalimidoacetyl-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH | 7,8x10” |
| 17 | (2-Ä-(íerc-butylsulfonylmetyl)-3-( 1 -naftyl)-propionyl-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH | 8,3 x 10” |
| 18 | Indol-3 -yl-acetyl-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH | 6,2x10” |
| 19 | Fmoc-4-Aminocyklohexylkarbonyl-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH | 2,2 x 10” |
SK 281970 Β6
| Pr. č. | Sekvencia | Hodnota IC50 (pulmonálna tepna) |
| 20 | 7-teofylínacetyl-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH | 1,4x10“ |
| 21 | W-benzoyl-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH | 8,1 x 109 |
| 22 | Fmoc-Aeg(Fmoc)-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH | 6,6x10'8 |
| 23 | Fmoc-D-Lys-Arg-Pro-Hyp-GlyThi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH | 1,4 x 10’8 |
| 24 | Fmoc-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH | 2,6x10'8 |
| 25 | Fmoc-Oic-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Árg-OH | 2,5 x 10 8 |
| 26 | Fmoc-írans-4-aminometylcyklohexylkarbonyl-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH | 3,5 x 10’7 |
Pri vybraných zlúčeninách sa v už opísanom pokusnom usporiadaní stanovil aj čas, za ktorý prúžky tepny znova získali, po výmene pufra s obsahom testovaného peptidu za pufor, ktorý tento peptid neobsahoval, polovicu ich maximálnej citlivosti na 2 x 10'7 mol/1 bradykinínu. Tento čas je označený ako T50 a je meradlom času účinku testovaného peptidu. Číselne vyjadrené hodnoty T50 sú uvedené v nasledujúcej tabuľke 2.
Tabuľka 2
| Pr. č. | Sekvencia | Hodnota Tso (pulmonálna tepna) |
| 1 | Fmoc-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH | 143,3 min. |
| 2 | Fmoc-Aoc-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH | 253,3 min. |
| 3 | Dibenzylacetyl-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH | 67,3 min. |
| 4 | Cyklohexylkarbonyl-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH | 76,7 min. |
| 5 | Fmoc-c-Aminokaproyl-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH | 314,4 min. |
Vybrané zlúčeniny podľa vynálezu sa tiež vyhodnotili ďalej opísaným testom.
Antiflogistický účinok v systematickom podaní: carrageenanom indukovaný opuch krysej labky
Metodika testu
Ako test na vyhodnotenie akútneho systemického antiflogistického účinku sa zvolil carrageen vyvolaný opuchom krysej labky, ktorý opísal C. A. Winter a kol. v Proc-Soc. Exp. Biol. (N.Y.), 111, 544 (1962). Samčekom krýs Sprague-Dawley s telesnou hmotnosťou asi 170 g, zoskupeným do skupín po 5 pokusných zvierat, sa subkutánne podajú testované látky rozpustené v destilovanej vode (1 ml/kg telesnej hmotnosti). Po 15 minútach sa po zmeraní východiskového objemu labky injikuje pokusným zvieratám pod éterovou narkózou do zadnej labky 0,1 ml 0,5 % roztoku carrageenu. Po 3 až 6 hodinách sa volumetricky zmeria zväčšenie opuchu. Kontrolná skupina pokusných zvierat dostane iba vehikulum. Objemy labky sa udávajú v ml (stredná hodnota a štandardná odchýlka). Získané výsledky sú uvedené v nasledujúcej tabuľke 3.
Tabuľka 3
| Príklad č. | Dávka fmgkgl | Objem tlapky | Zväčšenie objemu tlapky | |
| skôr Hl | po3h Hl | po6h Hl | ||
| Kontrola 1 | 0,1 1,0 | 128+0/)6 135+0,11 136±0j03 | 0,67 ±0,16 0,13 ±0/» 0,11 ±0,05 | 0,42±0,10 0,14±0,05 0/ı0j01 |
| Kontrola 2 | 0,1 1/) | 133±0/32 132±0/)6 129±0j03 | 030±0,10 0,13+0/)4 0,19±0,06 | 0,44 ±0,03 029+0,08 027 ±0/06 |
| Kontrola 3 | 0,1 | 124+0/)4 123±0/)5 | 0,62 ±0,11 0,19±0,07 | 054±0,ll 022±0,14 |
| Kontrola 4 | 0,1 | 124±0j04 121±0/)5 | 0,62 ±0,11 0,17±0j08 | 034±0,ll 031 ±0,10 |
| Kontrola 5 | 0,1 1,0 | l,33±0j02 138±0,08 133±0,09 | 030±0,10 0,18±0/)4 0,13 ±0,03 | 0,44 ±0,03 020±0/)6 0,17±0,06 |
| Kontrola 6 | 0,1 | l,24±0j04 125±0/)2 | OjS2±O,ll 031 ±0j06 | 034±0,ll 0,40+0,11 |
Terapeutické využitie peptidov podľa vynálezu zahŕňa všetky patologické stavy, ktoré sú sprostredkované, vyvolané a podporované bradykinínom a peptidmi podobnými bradykinínu. Takéto stavy zahŕňajú, okrem iného, traumy, napríklad rany a popáleniny, vyrážky, erytémy, edémy, tonzilitídu, artritídu, astmu, alergiu, rinitídu, šokové stavy, zápaly, pankreatídu, nízky krvný tlak, bolesti, svrbenie a zmenenú mobilitu spermií.
Vynález sa preto taktiež týka použitia peptidov všeobecného vzorca (I) ako liečiv a farmaceutických prípravkov, ktoré takéto peptidy obsahujú ako účinnú látku.
Farmaceutické prípravky obsahujú účinné množstvo účinnej látky všeobecného vzorca (I) jednotlivo alebo v kombinácii s anorganickým alebo organickým farmaceutický použiteľným nosičom.
Tieto farmaceutické prípravky sa môžu podať enterálne, parenterálne, napríklad subkutánne, intramuskuláme alebo intravenózne, sublingválne, epikutánne, nazálne, rektálne, intravaginálne, intrabukálne alebo inhalačné. Dávkovanie účinnej látky závisí od druhu teplokrvného pacienta, jeho telesnej hmotnosti, veku a spôsobu podania.
Farmaceutické prípravky podľa vynálezu sa pripravujú známymi rozpúšťacími, zmiešavacími, granulačnými alebo dražovacími postupmi.
S cieľom získať galenické formy na perorálne podanie alebo na aplikáciu na sliznice sa účinné zlúčeniny zmiešajú s obvyklými farmaceutickými prísadami, ako sú nosiče, stabilizátory alebo inertné riedidlá a obvyklými postupmi sa prevedú na vhodné aplikačné formy, ako sú tablety, dražé, kapsuly, vodné, alkoholické alebo olejové suspenzie alebo vodné, alkoholické alebo olejové roztoky. Ako inertné nosiče sa môžu použiť napríklad arabská guma, magnézium, uhličitan horečnatý, fosforečnan draselný, maltóza, glukóza, stearylfumarát horečnatý alebo škroby, hlavne kukuričný škrob. Farmaceutické prípravky môžu mať taktiež formu suchých a vlhkých granulátov. Ako olejové nosiče alebo rozpúšťadlá prichádzajú do úvahy napríklad rastlinné alebo živočíšne oleje, napríklad slnečnicový olej alebo rybí tuk.
Prípravok na topické použitie môže mať formu vodného alebo olejového roztoku, lotionu, emulzie alebo želé, alebo masti alebo prípadne spreja, pričom adhézia sa môže zlepšiť prípadne prídavkom polyméru.
SK 281970 Β6
S cieľom získať intranazálne aplikačné formy sa účinné zlúčeniny zmiešajú s obvyklými prísadami, ako sú stabilizátory alebo inertné riedidlá, a obvyklými postupmi sa prevedú na vhodné aplikačné formy, ako sú vodné, alkoholické alebo olejové suspenzie alebo vodné, alkoholické alebo olejové roztoky. K vodným intranazálnym prípravkom sa môžu pridať chelatotvomé látky, ako kyselina etyléndiamín-jV^V,A,V-tetraoctová, kyselina citrónová, kyselina vínna alebo ich soli. Nazálne roztoky sa môžu aplikovať dávkovacími rozprašovačmi alebo ako nosné kvapky s podielom zvyšujúcim viskozitu, prípadne ako nosné gély alebo nosné krémy.
Na inhalačné podanie sa môžu použiť rozprašovače alebo balenie s tlakovým plynom, využívajúce inertné nosné plyny.
S cieľom získať prípravky na intravenóznu, subkutánnu, epikutánnu alebo intradermálnu aplikáciu, sa účinné zlúčeniny alebo ich fyziologicky prijateľné soli, prípadne spolu s obvyklými farmaceutickými pomocnými látkami, napríklad látkami na izotonizáciu alebo nastavenie pH, ako aj solubilizačnými činidlami, emulgátormi alebo ostatnými pomocnými látkami, prevedú do formy roztoku, suspenzie alebo emulzie.
Vzhľadom na krátke polčasy rozpadu niektorých z opísaných účinných látok v telových tekutinách, je účelné použiť injikovateľné prípravky s retardovaným uvoľňovaním účinnej látky. Ako liečivové formy sa môžu napríklad použiť olejové kryštalické suspenzie, mikrokapsuly, prípadne implantáty, pričom na poslednom mieste uvedené implantáty sa môžu vytvoriť z tkanivovo prijateľných polymérov, predovšetkým biologicky odbúrateľných polymérov, napríklad na báze kopolymérov kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej alebo ľudského albumínu.
Vhodný dávkový rozsah pre topické a inhalačné aplikačné formy zahŕňajú roztoky v množstve 0,001 až 5 mg/kg; pri systematických aplikačných formách sú vhodné dávky 0,001 až 10 mg/kg.
Zoznam skratiek
Skratky použité pre aminokyseliny zodpovedajú trojpísmenovému kódu, ktorý je obvyklý v peptidovej chémii a ktorý je opísaný v Európ. J. Biochem. 139, 9 (1984). Ďalšie použité skratky sú vysvetlené v nasledujúcom zozname skratiek:
Acm acetamidometyl Aeg A/-(2-aminoefyl)glycín ε-Ahx c-aminohexanoyl Aoc cis, ení/o-2-azabicyklo(3.3.0)oktán-3-S-karbonyl
Boe íerc-butyloxykarbonyl
But íerc-butyl
Bzl benzyl
Cbz benzyloxykarbonyl CDF chlór-(D)-fenylalanyl Cha cyklohexylalanyl Chg cyklohexylglycyl Cl-Z 4-chlórbenzyloxykarbonyl Dic dihydroindolkarbonyl DMF dimetylformamid DOMT O-metyl-(D)-treonyl Dnp 2,4-dinitrofenyl Fmoc 9-fluorenylmetyloxykarbonyl MDY O-metyl-(D)-tyrozyl Me metyl 4-Mebzl 4-metylbenzyl Mtr 4-metoxy-2,3,6-trimetylfenylsulfonyl Mts mezitylén-2-sulfonyl
Nal 2-naftylalanyl
NMP /V-metylpyrolidín
Npg neopentylglycyl
Oic c/í-e«í/o-oktahydroindol-2-karbonyl
Opr izoxazolid(n-3-ylkarbonyl
Pal pyridylalanyl
Pmc 2,2,5,7,8-pentametylchróman-6-sulfonyl
Tbg íerc-butylglycyl
TBTU 2-( 1 ŕŕ-benzotriazol-1 -yl) 1,1,3,3-tetrametylurónium-tetrafluórborát tBu (ere-butyl
Tcs 4-metylfenylsulfonyl
TFA kyselina trifluóroctová
Thia 2-tienylalanyl
Tie 1,2,3,4-tetrahydroizochinolin-3 -ylkarbonyl
TOTU 0-[(kyano-(etoxykarbonyl)metylidén)amino]-1,1,3,3-tetrametyluróniumtetrafluórborát
Trt trityl
Nasledujúce príklady majú ozrejmiť výhodné postupy syntézy v pevnej fáze peptidov podľa vynálezu, pričom rozsah vynálezu nie je týmito príkladmi, ktoré majú iba ilustračný charakter, nijako obmedzený.
Medzi inými sú použité nasledujúce aminokyselinové deriváty:
Fmoc-Arg(Mtr)-OH, Fmoc-D-Arg(Mtr)-OH, Fmoc-D-Arg(Pmc)-OH, Boc-(D)-Arg-OH, Fmoc-Arg(Pmc)-OH, Fmoc-Hyp-OH, Fmoc-Pro-OObt, Fmoc-Gly-OObt, Fmoc-Phe-OObt, Fmoc-Ser(tBu)-OObt, Fmoc-(D)-Tic-OH, Fmoc-Gin-OH, Fmoc-Aoc-OH, Fmoc-Thia-OH, Fmoc-Oic-OH, Fmoc-Leu-OH, Fmoc-Lys(Boc)-OH, Fmoc-ε-Ahx-OH.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Príklad 1 Fmoc-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH
Tento peptid sa postupne vytvoril v peptidovom syntetizátore Modeli 430 A firmy Applied Biosystems použitím Fmoc-postupu na p-benzyloxybenzylalkoholovej živici esterifikovanej Fmoc-Arg(Mtr)-OH a dostupnej vo firme Novabiochem (asi 0,5 mmol/g živice). Použije sa 1 g živice a syntéza sa vykonáva pomocou syntézneho programu modifikovaného pre Fmoc-metódu.
Do kyviet syntetizátora sa vždy odváži 1 mmol aminokyselinového derivátu s voľnou karboxylovou skupinou spolu s 0,95 mmol HOObt. Predaktivácia tejto aminokyseliny sa uskutočňuje priamo v kyvetách, rozpustením v 4 ml DMF a pridaním 2 ml 0,55 mol/1 roztoku diizopropylkarbodiimidu v DMF.
HOObt-estery ďalších aminokyselín sa rozpustili v 6 ml NMP, a potom takisto ako in situ predaktivované kyseliny nakopulované na živicu, ktorá sa predtým odblokovala 20 % piperidínom v DMF. Ako posledný aminokyselinový derivát sa nakopuloval Fmoc-D-Arg(Pmc)-OH bez následnej deprotekcie piperidínom. Po ukončenej syntéze sa peptid odštiepil od živice so súčasným odstránením ochranných skupín bočného reťazca kyselinou trifluóroctovou s použitím tioanizolu a etándiolu ako príjemcu katiónov. Zvyšok, získaný po odtiahnutí kyseliny trifluóroctovej sa viackrát digeroval etylacetátom a odstredil. Získaný zvyšok sa chromatografoval na Sephadexe LH 20 s použitím elučného činidla 10 % kyseliny octovej. Frakcie eluátu, ktorý obsahoval čistý peptid sa zahustili a lyofílizovali.
Hmotnostné spektrum (ionizácia rýchlymi atómami):
1526,9.
Príklad 2 Fmoc-Aoc-D-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH
Uvedená zlúčenina sa získala tak, že sa z peptidovej živice, získanej analogicky ako v príklade 1, so sekvenciou Fmoc-D-Arg(Pmc)-Arg(Mtr)-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser(But)-D-Tic-Oic-Arg(Mtr)-živice, najskôr odštiepi N-koncová Fmoc-ochranná skupina zmesou piperidínu a dimetylformaldehydu, potom sa premyje DMF a kopuluje s Fmoc-Aoc-OH s použitím uróniového kopulačného činidla TOTU. Potom sa vykonalo štiepenie peptidu od živice pôsobením zmesi tvorenej kyselinou trifluóroctovou, trimetylsilylbromidom a m-krezolom. Čistenie sa robilo analogicky ako v príklade 1.
Hmotnostné spektrum (ionizácia rýchlymi atómami):
1663,8.
Nasledujúce príklady sa vykonali podľa postupu v príklade 2.
Príklad 3 Dibenzylacetyl-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH
Hmotnostné spektrum (ionizácia rýchlymi atómami):
1526.7.
Príklad 4 Cyklohexylkarbonyl-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH
Hmotnostné spektrum (ionizácia rýchlymi atómami):
1414.7.
Príklad 5 Fmoc-e-ammohexanoyl-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH
Hmotnostné spektrum (ionizácia rýchlymi atómami): 1639,6.
Príklad 6 Aľ,N-Dibenzylglycyl-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH
Hmotnostné spektrum (ionizácia rýchlymi atómami): 1542,2.
Príklad 7 Fmoc-D-Aoc-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH
Hmotnostné spektrum (ionizácia rýchlymi atómami):
1663.8.
Príklad 8 2-(4-Izobutylfenyl)propionyl-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH
Hmotnostné spektrum (ionizácia rýchlymi atómami): 1493.
Príklad 9 [2-R-(rerc-Butylsulfonylmetyl)-3-( 1 -naftyl)propionyl]-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH Hmotnostné spektrum (ionizácia rýchlymi atómami): 1621.
Príklad 10 Indol-3-yl-acetyl-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH
Hmotnostné spektrum (ionizácia rýchlymi atómami): 1462.
Príklad 11 2-(4-Izobutylfenyl)propionyl-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH
Hmotnostné spektrum (ionizácia rýchlymi atómami): 1493.
Príklad 12 2-(4-Izobutylfenyl)propionyl-6-aminohexanoyl-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH Hmotnostné spektrum (ionizácia rýchlymi atómami): 1603.
Príklad 13
6- (4-Benzoylbenzoylamino)hexanoyl-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH
Hmotnostné spektrum (ionizácia rýchlymi atómami):
1625.8.
Príklad 14
Fmoc-Aeg(Fmoc)-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH
Hmotnostné spektrum (ionizácia rýchlymi atómami):
1849.8.
Príklad 15
Fmoc-(4-aminocyklohexylkarbonyl)-D-Aig-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH
Hmotnostné spektrum (ionizácia rýchlymi atómami): 1652
Príklad 16 1,8-Naftalimidoacetyl-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH
Hmotnostné spektrum (ionizácia rýchlymi atómami): 1542,3
Príklad 17 [2-R-(zerc-Butylsulfonylmetyl)-3-(l-naftyl)propionyl]-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH Hmotnostné spektrum (ionizácia rýchlymi atómami):
1621.9.
Príklad 18
Indol-3-yl-acetyl-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH
Hmotnostné spektrum (ionizácia rýchlymi atómami): 1462.
Príklad 19
Fmoc-(4-aminocyklohexylkarbonyl)-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH
Hmotnostné spektrum (ionizácia rýchlymi atómami): 1496.
Príklad 20
7- Teofylínacetyl-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH
Hmotnostné spektrum (ionizácia rýchlymi atómami): 1369.
Príklad 21
N-Benzoyl-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH
Hmotnostné spektrum (ionizácia rýchlymi atómami): 1410.
Príklad 22
Fmoc-Arg(Fmoc)-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH
Hmotnostné spektrum (ionizácia rýchlymi atómami): 1694.
Príklad 23
Fmoc-D-Lys-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH
SK 281970 Β6
Hmotnostné spektrum (ionizácia rýchlymi atómami): 1500.
Príklad 24
Fmoc-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH Hmotnostné spektrum (ionizácia rýchlymi atómami): 1523.
Príklad 25 Fmoc-Oic-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH Hmotnostné spektrum (ionizácia rýchlymi atómami): 1523.
Príklad 26
Fmoc-ŕrans-4-aminometylcyklohexylkarbonyl-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH
Hmotnostné spektrum (ionizácia rýchlymi atómami): 1511.
PATENTOVÉ NÁROKY
Claims (5)
1. Peptid všeobecného vzorca (I)
Z-P-A-B-C-E-F-K-(D)Q-G-M-F’-I (I), v ktorom
Z znamená Fmoc, dibenzylacetylovú skupinu, cyklohexylkarbonylovú skupinu, A,ú/-dibenzyl-glycylovú skupinu, 2-(4-izobutylfenyl)propionylovú skupinu, (2-R-(terc-butylsulfonylmetyl)-3-(l-naftyl)-propionylovú skupinu, indol-3-yl-acetylovú skupinu, 4-benzoylbenzoylovú skupinu, 1,8-naftalimidoacetylovú skupinu, 7-teofylínacetylovú skupinu alebo Λ-benzoylovú skupinu;
P znamená priamu väzbu, Aoc, ε-aminohexanoylovú skupinu, D-Aoc, Aeg(Fmoc), 4-aminocyklohexylkarbonylovú skupinu, 4-aminometylcyklohexylkarbonylovú skupinu alebo Oic, a
A znamená (D)- alebo (L)-Arg, (D)- alebo (L)-Lys, alebo väzbu;
B znamená Arg;
C znamená Pro-Hyp-Gly;
E znamená Thia;
F znamená Ser;
K znamená priamu väzbu;
Q znamená Tie;
M znamená priamu väzbu;
G znamená cis-endo-, cis-exo-, írans-oktahydroindol-2-karboxylovú kyselinu;
F’ znamená Arg a
I znamená OH alebo jeho fyziologicky prijateľné soli.
2. Spôsob prípravy peptidu všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1, v y z n a í u j ú c i sa t ý m , že zahrnuje
a) reakciu fragmentu s voľnou karboxylovou skupinou na C konci alebo jeho aktivovaného derivátu so zodpovedajúcim fragmentom s voľnou aminoskupinou na N-konci, alebo
b) postupné vytvorenie uvedeného peptidu, a v prípade potreby odštiepenie jednej alebo viacerých dočasne zavedených ochranných skupín v zlúčenine získanej spôsobom a) alebo b) a prevedenie takto získaných zlúčenín všeobecného vzorca (I) na ich fyziologicky prijateľnú soľ.
3. Použitie peptidu všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1 na prípravu liečiva.
4. Použitie peptidu všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1 na prípravu liečiva na liečenie patologických stavov, ktoré sú sprostredkované, vyvolané alebo podporované bradykinínom a peptidmi podobnými s bradykinínom.
5. Farmaceutická kompozícia obsahujúca peptid všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE4211406 | 1992-04-04 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SK28993A3 SK28993A3 (en) | 1993-11-10 |
| SK281970B6 true SK281970B6 (sk) | 2001-09-11 |
Family
ID=6456125
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SK289-93A SK281970B6 (sk) | 1992-04-04 | 1993-04-02 | Peptidy s modifikáciami na n-konci, spôsob ich prípravy, ich použitie a farmaceutické kompozície s ich obsahom |
Country Status (25)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5597803A (sk) |
| EP (1) | EP0564972B1 (sk) |
| JP (1) | JP3426639B2 (sk) |
| KR (1) | KR100273825B1 (sk) |
| CN (1) | CN1040330C (sk) |
| AT (1) | ATE183197T1 (sk) |
| AU (1) | AU667707B2 (sk) |
| BR (1) | BR9301436A (sk) |
| CA (1) | CA2093305A1 (sk) |
| CZ (1) | CZ285698B6 (sk) |
| DE (1) | DE59309726D1 (sk) |
| DK (1) | DK0564972T3 (sk) |
| ES (1) | ES2136626T3 (sk) |
| FI (1) | FI931474A (sk) |
| GR (1) | GR3031543T3 (sk) |
| HU (1) | HU217613B (sk) |
| IL (1) | IL105287A (sk) |
| MX (1) | MX9301926A (sk) |
| NO (1) | NO311941B1 (sk) |
| NZ (1) | NZ247317A (sk) |
| PL (1) | PL175901B1 (sk) |
| RU (1) | RU2109747C1 (sk) |
| SK (1) | SK281970B6 (sk) |
| TW (1) | TW258739B (sk) |
| ZA (1) | ZA932399B (sk) |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ATE280777T1 (de) * | 1994-03-09 | 2004-11-15 | Cortech Inc | Bradykinin-antagonist peptide mit n- substituierten glycinen |
| FR2739553B1 (fr) * | 1995-10-06 | 1998-01-02 | Oreal | Utilisation d'antagonistes de la bradykinine pour stimuler ou induire la pousse des cheveux et/ou stopper leur chute |
| DE19612067A1 (de) * | 1996-03-27 | 1997-10-02 | Hoechst Ag | Verwendung von Bradykinin-Antagonisten zur Herstellung von Arzneimitteln zur Behandlung von chronisch fibrogenetischen Lebererkrankungen und akuten Lebererkrankungen |
| FR2790260B1 (fr) | 1999-02-26 | 2001-05-04 | Fournier Ind & Sante | Nouveaux composes de n-(benzenesulfonamide), procede de preparation et utilisation en therapeutique |
| US6699486B1 (en) | 1999-11-18 | 2004-03-02 | Bolla Corporation | Treatment or prevention of photoaging and skin cancer |
| US7105172B1 (en) | 1999-11-18 | 2006-09-12 | Bolla John D | Treatment of rosacea |
| US20040248809A1 (en) * | 2003-02-07 | 2004-12-09 | Aventis Pharma Deutschland Gmbh | Use of antagonists of the bradykinin B2 receptor for the treatment of osteoarthrosis |
| EP3781586B1 (en) | 2018-04-20 | 2024-04-17 | Fresenius Kabi iPSUM S.r.l. | A method for production of high purity icatibant |
Family Cites Families (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4210584A (en) * | 1979-01-15 | 1980-07-01 | Eli Lilly And Company | Vindesine synthesis |
| US4350704A (en) * | 1980-10-06 | 1982-09-21 | Warner-Lambert Company | Substituted acyl derivatives of octahydro-1H-indole-2-carboxylic acids |
| US4344949A (en) * | 1980-10-03 | 1982-08-17 | Warner-Lambert Company | Substituted acyl derivatives of 1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline-3-carboxylic acids |
| US4374847A (en) * | 1980-10-27 | 1983-02-22 | Ciba-Geigy Corporation | 1-Carboxyalkanoylindoline-2-carboxylic acids |
| US4693993A (en) * | 1985-06-13 | 1987-09-15 | Stewart John M | Bradykinin antagonist peptides |
| US4923963A (en) * | 1987-09-02 | 1990-05-08 | Nova Technology Limited Partnership | Bradykinin antagonist peptides |
| IE63490B1 (en) * | 1988-11-24 | 1995-05-03 | Hoechst Ag | Peptides having bradykinin antagonist action |
| DE3926822A1 (de) * | 1989-08-14 | 1991-02-21 | Hoechst Ag | Peptide mit bradykinin-antagonistischer wirkung |
| DE4013270A1 (de) * | 1990-04-26 | 1991-10-31 | Hoechst Ag | Peptide mit bradykinin-antagonistischer wirkung |
| DE69012142D1 (de) * | 1989-12-08 | 1994-10-06 | Univ Boston | Acylierte bradykininantagonisten und deren verwendung. |
| MX9100717A (es) * | 1990-08-24 | 1992-04-01 | Syntex Inc | Antagonistas de la bradiquinina |
-
1993
- 1993-03-30 TW TW082102340A patent/TW258739B/zh active
- 1993-03-31 DE DE59309726T patent/DE59309726D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1993-03-31 DK DK93105336T patent/DK0564972T3/da active
- 1993-03-31 ES ES93105336T patent/ES2136626T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1993-03-31 AT AT93105336T patent/ATE183197T1/de not_active IP Right Cessation
- 1993-03-31 EP EP93105336A patent/EP0564972B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1993-04-01 NZ NZ247317A patent/NZ247317A/en not_active IP Right Cessation
- 1993-04-01 FI FI931474A patent/FI931474A/fi unknown
- 1993-04-02 RU RU93004822A patent/RU2109747C1/ru not_active IP Right Cessation
- 1993-04-02 HU HU9300972A patent/HU217613B/hu not_active IP Right Cessation
- 1993-04-02 MX MX9301926A patent/MX9301926A/es not_active IP Right Cessation
- 1993-04-02 SK SK289-93A patent/SK281970B6/sk unknown
- 1993-04-02 IL IL10528793A patent/IL105287A/en not_active IP Right Cessation
- 1993-04-02 CA CA002093305A patent/CA2093305A1/en not_active Abandoned
- 1993-04-02 ZA ZA932399A patent/ZA932399B/xx unknown
- 1993-04-02 AU AU35651/93A patent/AU667707B2/en not_active Ceased
- 1993-04-02 JP JP07687793A patent/JP3426639B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1993-04-02 CN CN93103564A patent/CN1040330C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1993-04-02 CZ CZ93572A patent/CZ285698B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1993-04-02 PL PL93298362A patent/PL175901B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1993-04-02 NO NO19931287A patent/NO311941B1/no unknown
- 1993-04-03 KR KR1019930005632A patent/KR100273825B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1993-04-05 BR BR9301436A patent/BR9301436A/pt not_active Application Discontinuation
-
1995
- 1995-01-17 US US08/373,464 patent/US5597803A/en not_active Expired - Lifetime
-
1999
- 1999-10-15 GR GR990402630T patent/GR3031543T3/el unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA1340667C (en) | Peptides having bradykinin antagonist action | |
| US20060281685A1 (en) | Methods of treatment using novel lhrh antagonists having improved solubility properties | |
| CA2023194C (en) | Peptides having bradykinin antagonist action | |
| SK281970B6 (sk) | Peptidy s modifikáciami na n-konci, spôsob ich prípravy, ich použitie a farmaceutické kompozície s ich obsahom | |
| US5648333A (en) | Peptides having bradykinin antagonist action | |
| RU2056432C1 (ru) | Производные пептидов или их физиологически приемлемые соли | |
| HU229220B1 (hu) | Humán növekedési hormont felszabadító hormon-analógok | |
| LT3872B (en) | Novel peptides and pharmaceutical compositions containing them |