SK279767B6

SK279767B6 - Farmaceutická kombinácia na použitie pri ošetrovan

Info

Publication number: SK279767B6
Application number: SK951-93A
Authority: SK
Inventors: George R. Painter Iii; Phillip A. Furman
Original assignee: The Wellcome Foundation Limited
Priority date: 1991-03-06
Filing date: 1992-03-05
Publication date: 1999-03-12
Also published as: HU219492B; TW199861B; CA2105487C; JP3442773B2; GB9104740D0; PT100199B; EP0574457B1; UA29429C2; CZ183693A3; CZ283185B6; ES2138969T3; AU668860B2; HK1004189A1; DE69230140T2; IE920702A1; DE69230140D1; IL101145A; US5234913A; KR100225986B1; SK95193A3

Description

Tento vynález sa týka farmaceutickej kombinácie protivírusovo účinných nukleozidových derivátov, farmaceutických prostriedkov obsahujúcich tieto kombinácie a ich použitia v liečebnej terapii, najmä pri ošetrovaní vírusových infekcií a predovšetkým infekcií spôsobených retrovírusmi.

Doterajší stav techniky

Syndróm získanej imunitnej nedostatočnosti (AIDS) je imunosupresívna alebo imunodeštruktívna choroba, ktorá spôsobuje, že pacienti sú náchylní na fatálne príležitostné infekcie. Príznačne je AIDS spojený s progresívnym vyčerpaním T buniek, najmä zo skupiny indukujúcej pomoc, ktorá nesie povrchový znak ΟΚΤί

Vírus ľudskej imunitnej nedostatočnosti (HIV) sa reprodukovateľné izoluje od pacientov, ktorí trpia AIDS alebo príznakmi, ktoré často predchádzajú AIDS. HIV je cytopatický a zdá sa, že prednostne infikuje a ničí T bunky obsahujúce znak OKTÁ Teraz sa všeobecne zistilo, že HIV je etiologickým prostriedkom AIDS.

Od zistenia, že HIV je etiologickým prostriedkom AIDS, bol navrhnutý rad chemoterapeutických prostriedkov pôsobiach proti HIV, ktoré môžu byť účinné pri ošetrovaní pacientov trpiacich na AIDS. Tak napríklad Európsky patentový spis č. 0 382 526 uvádza substituované 1,3-oxatiolány, ktoré sú účinné proti HIV. US patentový spis č. 4 724 232 a Európsky patentový spis č. 0 196 185 opisujú 3’-azido-3’-deoxytymidin, (ktorý má schválené označenie zidovudin) a jeho použitie pri ošetrovaní AIDS.

Podstata vynálezu

Pôvodcovia tohto vynálezu teraz zistili, že l-[2-(hydroxymetyl)-1,3-oxatiazolan-5-yl]-5-fluórcytozín v kombinácii s 3’-azido-3’-deoxytymidínom (zidovudinom) má za následok prekvapujúco vysoké zvýšenie účinku zlúčenín proti HIV. Použitie l-[2-(hydroxymetyl)-l,3-oxatiazolán-5-yl]-5-fluórcytozínu v kombinácii so zidovudinom spôsobuje synergické zvýšenie účinku proti HIV, v porovnaní s účinkami proti HIV pri jednotlivých zlúčeninách.

Preto prvý znak tohto vynálezu sa týka kombinácie: a) 1 -(2-(hydroxymetyl)-1,3-oxatiazolán-5-yI]-5-fluórcytozínu vzorca (I)

(I) alebo jeho fyziologicky funkčného derivátu, b) 3’-azido-3’-deoxytymidínu (zidovudinu) vzorca (II) alebo jeho fyziologicky funkčného derivátu, pričom zložky

a) a b) kombinácie sa používajú spolu tak, že sa dosiahne synergický protivírusový účinok. Výraz synergický protivírusový účinok sa tu používa na označenie protivírusového účinku, ktoiý je väčší, ako sú predpokladané čisto aditívne účinky jednotlivých zložiek a) a b) kompozície.

Je vhodné poznamenať, že zlúčenina vzorca (I) obsahuje dva chirálne stredy a preto môže byť vo forme dvoch párov optických izomérov, (to znamená enantiomérov), alebo ich zmesí vrátane racemickej zmesi. Tak zlúčenina vzorca (I) môže byť buď cis-izomérom alebo trans-izomérom alebo môže tvoriť ich zmesi. Každý cis-izomér alebo trans-izomér sa môže vyskytovať ako jeden z dvoch enantiomérov alebo ako ich zmes vrátane zmesi racemickej.

Všetky takéto izoméry alebo ich zmesi zahrnujúce tiež racemické zmesi, patria do rozsahu vynálezu, ktorý tiež zahrnuje tautomérne formy zlúčenín vzorca (I) a (II). cisIzoméry zlúčeniny vzorca (I) sú výhodné.

Výrazom fyziologicky funkčný derivát sa rozumie farmaceutický prijateľná soľ, ester alebo soľ esteru základnej zlúčeniny vzorca (I) alebo (II), farmaceutický prijateľný amid zlúčeniny vzorca (I) alebo akákoľvek iná zlúčenina, ktorá po podaní príjemcovi (pacientovi) je schopná poskytnúť (priamo alebo nepriamo) základnú zlúčeninu alebo jej aktívny metabolit alebo zvyšok odvodený od základnej zlúčeniny.

Medzi výhodné estery podľa tohto vynálezu sa zahrnujú estery karboxylových kyselín, v ktorých nekarbonylová časť esterového zoskupenia je zvolená z priamych alebo rozvetvených alkylových reťazcov, napríklad n-propylu, tere.-butylu alebo n-butylu, alkoxyalkylovej skupiny (napríklad metoxymetylu), aralkylovej skupiny (napríklad benzylu), aryloxyalkylovej skupiny (napríklad fenoxymetylu) a arylovej skupiny (napríklad fenylu), sulfonátových esterov ako alkylsulfonylu alebo aralkylsulfonylu (napríklad metänsulfonylu), esterov aminokyselín (napríklad L-valylu alebo L-izoleucínu), esterov dikarboxylových kyselín (napríklad hemisukcinátu) a mono-, di- alebo trifosfátových esterov. Fosfátové estery môžu byť ďalej esterifikované, napríklad alkoholom s 1 až 20 atómami uhlíka alebo jeho reaktívnym derivátom, alebo 2,3-diacylglycerolom s 6 až 24 atómami uhlíka v acylovej časti.

Ľubovoľná alkylová časť prítomná v takýchto esteroch výhodne obsahuje 1 až 18 atómov uhlíka, predovšetkým 1 až 4 atómy uhlíka. Akákoľvek arylová časť prítomná v takýchto esteroch výhodne obsahuje fenylovú skupinu, ktorá je prípadne substituovaná, napríklad atómom halogénu, alkylovou skupinou s 1 až 4 atómami uhlíka, alkoxyskupinou s 1 až 4 atómami uhlíka alebo nitroskupinou.

Uvedené farmaceutický prijateľné amidy zlúčeniny vzorca (I) zahrnujú deriváty, v ktorých aminoskupina cytozínu je prítomná vo forme arnidu, napríklad ako skupina vzorca NHCOR, kde R predstavuje alkylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka alebo arylovú skupinu (napríklad fenylovú skupinu, ktorá je prípadne substituovaná atómom halo génu, alkylovou skupinou s 1 až 4 atómami uhlíka, alkoxyskupinou s 1 až 4 atómami uhlíka, nitroskupinou alebo hydroxyskupinou).

Príklady farmaceutický prijateľných solí zahrnujú základné soli, napríklad odvodené od príslušnej bázy ako soli alkalických kovov (napríklad sodné), kovov alkalických zemín (napríklad horečnaté), soli amónne alebo obsahujúce NX4⁺ (kde X znamená alkylovú skupinu a 1 až 4 atómami uhlíka). Farmaceutický prijateľné adičné soli s kyselinami zahrnujú soli organických karboxylových kyselín, ako je kyselina octová, kyselina mliečna, kyselina vínna, kyselina jablčná, kyselina izetionová (2-hydroxy-etánsulfónová), kyselina laktobionová a kyselina jantárová, organických sulfónových kyselín, ako je kyselina metánsulfónová, kyselina etánsulfónová, kyselina benzénsulfónová a kyselina p-toluénsulfónová a anorganických kyselín, ako je kyselina chlorovodíková, kyselina sírová, kyselina fosforečná a kyselina sulfamová.

Príklady vírusových infekcií a súvisiacich klinických stavov, ktoré sa môžu ošetrovať alebo ktorým sa dá zabrániť podľa tohto vynálezu, zahrnujú infekcie človeka spôsobené retrovírusmi ako vírusom imunitnej nedostatočnosti (HIV), napríklad HIV-1 alebo HIV-2 a lymfotropným vírusom T-buniek človeka (HTLV), napríklad infekcií spôsobených HTLV-I alebo HTLV-II. Kombinácie podľa tohto vynálezu sú predovšetkým vhodné na ošetrovanie AIDS a príbuzných klinických stavov, ako je komplex súvisiaci s AIDS (ARC), progresívne generalizovaná lymfadenopatia (PGL), neurologické stavy príbuzné AIDS, ako je roztrúsená skleróza alebo lokálna paraparéza, anti-HIV stavy pozitívne na protilátku a stavy pozitívne na HIV, ako je trombocytopenická purpura. Kombinácie podľa tohto vynálezu sa môžu tiež používať na ošetrovanie lupienky. Bolo zistené, že kombinácie podľa tohto vynálezu sú predovšetkým použiteľné na ošetrovanie asymptomatických infekcii alebo chorôb, ktorých príčinou sú retrovírusy človeka alebo s týmito retrovírusmi súvisia.

Preto druhý znak tohto vynálezu sa týka tu opísaných kombinácií na použitie v lekárskej terapii, najmä na ošetrovanie alebo profylaxiu niektorej z uvedených vírových infekcií, predovšetkým infekcií vyvolaných HIV vrátane AIDS.

Tento vynález sa ďalej týka spôsobu výroby tu opísaných kombinácií, ktorý zahrnuje uvedenie zložiek a) a b) kombinácie do styku v liečive, na dosiahnutie synergického protivírusového účinku.

Ďalší znak tohto vynálezu sa týka použitia kombinácie podľa tohto vynálezu na výrobu liečiva na ošetrovanie niektorej z uvedených vírusových infekcií alebo stavov. Konečne ďalším znakom tohto vynálezu je farmaceutický prostriedok, ktorý obsahuje vymedzenú farmaceutickú kombináciu.

Tento vynález sa ďalej týka spôsobu ošetrovania alebo profylaxie vírusových infekcií, (najmä infekcií spôsobených HIV) u cicavcov (vrátane človeka), ktorý zahrnuje podávanie účinného množstva opísanej kombinácie cicavcom. Vysoko sa hodnotí, že sa podľa tohto vynálezu zložky

a) a b) kombinácie môžu podávať súčasne alebo postupne. V prípade postupného podávania sa však zlúčeniny podávajú v dostatočne krátkom intervale, aby sa zaistilo, že sa dosiahne synergický protivírusový účinok.

Týmto vynálezom sa dosahuje zosilnenia protivírusového účinku zložiek a) a b) kombinácie pre cicavce (vráta ne človeka) trpiacich vírusovou infekciou, ktorý spočíva v tom, že sa cicavcovi podáva synergicky účinné množstvo a) súčasne s podaním zložky b) alebo pred podaním tejto druhej zložky alebo po jej podaní.

Výhoda kombinácie podľa tohto vynálezu spočíva v tom, že umožňuje dosiahnuť zlepšenú protivírusovú účinnosť pri jednotlivej dávke jednej z protivírusovo účinných zložiek (v porovnaní s použitím samotnej zložky), pričom sa zlepšuje terapeutický index zložky. Tak napríklad sa kombinácia môže používať na ošetrovanie stavov, ktoré by inak vyžadovali relatívne vysoké dávky protivírusovo účinnej zložky a ktoré by mohli spôsobiť problémy s toxicitou. Menšie dávky kombinácie môžu zabezpečovať zvýšenú výhodnosť pre pacienta a zvýšené harmonické doplnenie.

Priemyselná využiteľnosť

Kombinácie podľa tohto vynálezu sa môžu podávať cicavcom obvyklým spôsobom. Ako je uvedené, zložky a) a

b) sa môžu podávať súčasne, (napríklad v komplexnom farmaceutickom prostriedku) alebo oddelene, (napríklad v oddelených farmaceutických prostriedkoch). Všeobecne sa kombinácie môžu podávať lokálne, orálne, rektálne alebo parenterálne, (napríklad intravenóznou, subkutánnou alebo intramuskulámou) cestou. Je zrejmé, žc cesta podania sa môže meniť, napríklad podľa závažnosti stavu a identity príjemcu.

Je potrebné vziať do úvahy, že i keď sa obvykle použije optimálny pomer zložiek na dosiahnutie maximálneho zvýšeného účinku, jednak malé zmeny jednej zložky môžu postačovať na zvýšenie účinku druhej zložky do rovnakého stupňa a tak akýkoľvek pomer oboch zložiek spôsobujúcich zosilnenie účinku bude stále mať požadovaný synergický účinok. No najväčšia synergia sa obvykle pozoruje, pokým sú obidve zložky prítomné vo zvláštnych pomeroch.

Optimálne moláme pomery zidovudinu k l-[2-(hydroxymetyl)-1,3 -oxatiazolán-5-yl]-5-fluórcytozínu alebo ich príslušných fyziologicky funkčných derivátov, na použitie podľa tohto vynálezu sú od 1 : 1 do 1 : 600, výhodne od 1 : 10 do 1 : 250 a predovšetkým výhodne 1 : 25.

Ďalej tu zložky kombinácie môžu byť tiež označované výrazom účinné zložky.

Dávka kombinácie bude závisieť od stavu určeného na ošetrovanie a od iných okolností, ako je hmotnosť a stav pacienta a spôsob podania zložiek kombinácie. Príklady rozmedzia dávok a pomerov zložiek sú tieto:

Všeobecne vhodná dávka kombinácie podľa tohto vynálezu vo vzťahu k celkovej hmotnosti zložiek a) a b) bude v rozmedzí od 3 do 120 mg na kilogram telesnej hmotnosti príjemcu za deň, výhodne v rozmedzí od 6 do 90 mg na kilogram telesnej hmotnosti príjemcu za deň, predovšetkým výhodne v rozmedzí od 15 do 60 mg na kilogram telesnej hmotnosti príjemcu za deň. Požadovaná dávka sa výhodne predkladá ako dve, tri, štyri, päť alebo šesť čiastkových dávok podávaných vo vhodných intervaloch v priebehu dňa. Tieto čiastkové dávky sa môžu podávať vo forme dávkovej jednotky, napríklad obsahujúcej od 10 do 1500 mg, výhodne od 20 do 1000 mg a najvýhodnejšie od 50 do 700 mg účinných zložiek na formu dávkovej jednotky.

keď je možné účinné zložky podávať samotné, je vý

SK 279767 Β6 hodné predkladať ich vo forme farmaceutických prostriedkov. Farmaceutické prostriedky podľa tohto vynálezu obsahujú kombináciu podľa vynálezu spolu s jednou alebo s väčším počtom farmaceutický prijateľných nosných alebo pomocných látok a prípadne iných terapeuticky účinných prostriedkov. Ak sa jednotlivé zložky kombinácie podávajú oddelene, každá z nich je obyčajne prítomná ako farmaceutický prostriedok. V súvislosti s ďalej uvedenými údajmi sa prostriedky vzťahujú, pokiaľ nie je uvedené inak, na prostriedky obsahujúce buď kombináciu alebo jej zložky. Prostriedky zahrnujú také prostriedky, ktoré sú vhodné na perorálne, rektálne, nasálne, lokálne (vrátane transdermálneho, bukálneho a sublinguálneho), vaginálne alebo parenterálne (vrátane subkutánneho, intramuskulámeho, intravenózneho a intradermálneho) podania. Prostriedky môžu byť obyčajne prítomné vo forme komplexnej dávky a môžu sa vyrábať ľubovoľnými spôsobmi, ktoré sú dobre známe v odbore farmácie. Takéto spôsoby zahrnujú stupeň uvedenia účinných látok s nosnými látkami, ktoré pozostávajú z jedného alebo väčšieho počtu vedľajších zložiek.

Zo všeobecného hľadiska sa prostriedky môžu vyrábať rovnomerným a dôkladným uvedením účinných látok do styku s kvapalnými nosnými látkami alebo jemne rozomletými pevnými nosnými látkami, prípadne s obidvoma týmito typmi nosných látok a potom, ak je to potrebné, tvarovaním produktu.

Prostriedky podľa tohto vynálezu, vhodné na perorálne podanie, môžu byť prítomné ako oddelené jednotky, ako napríklad kapsuly, tobolky alebo tablety, z ktorých každá obsahuje vopred stanovené množstvo účinných látok, ako prášky alebo granuly, ako roztoky alebo suspenzie vo vodnej alebo nevodnej kvapaline alebo ako kvapalné emulzie typu olej vo vode alebo voda v oleji. Účinná zložka môže byť tiež prítomná vo forme bolusu (veľká pilulka), lieku so sirupom alebo pasty.

Tablety' sa môžu zhotovovať lisovaním alebo odlievaním, pripadne s jednou alebo s väčším počtom vedľajších zložiek. Lisované tablety sa môžu vyrábať vo vhodnom prístroji lisovaním účinných látok vo voľne tečúcej forme, ako prášku alebo granúl, ktoré sú prípadne zmiešané so spojivom, (napríklad povidonom, želatínou, hydroxypropylmetylcelulózou), mazivom, inertným riedidlom, konzervačnou látkou, látkou napomáhajúcou štiepenie, (napríklad natriumglykolátom škrobu, zosieťovaným povidonom alebo zosieťovanou natriumkarboxymetylcclulózou), povrchovo aktívnou látkou alebo činidlom napomáhajúcim dispergovanie. Odlievané tablety sa môžu vyrábať na vhodnom stroji zo zmesi práškových účinných látok zvlhčených inertným kvapalným riedidlom. Tablety sa môžu prípadne poťahovať alebo opatriť zárezom a môžu sa pripravovať tak, aby sa dosiahlo pomalé alebo regulované uvoľňovanie účinných látok pri ich použití, napríklad zavedením hydroxypropylmetylcelulózy v meniacich sa pomeroch na získanie požadovaného profilu uvoľňovania. Tablety sa môžu prípadne opatriť enterickým poťahom, aby sa dosiahlo uvoľňovanie v inej časti črevného traktu ako žalúdok.

Prostriedky vhodné na lokálne podanie do úst zahrnujú pastilky, obsahujúce účinné zložky vo vhodnej báze, obyčajne v sacharóze a akáciu alebo kozinec, pastilky, ktoré obsahujú účinnú látku a inertnú bázu, ako je želatína alebo glycerín, alebo sacharóza a akácia a ústne vody, ktoré obsahujú účinnú látku vo vhodnej kvapalnej nosnej látke. Prostriedky na rektálne podávanie môžu byť prítomné ako čapíky, ktoré napríklad obsahujú kakaové maslo alebo salicylát.

Lokálne podávanie sa môže tiež uskutočňovať pomocou transdermálneho iontoforézneho zariadenia.

Prostriedky vhodné na vaginálne podávanie môžu byť prítomné ako pesary, tampóny, krémy, želé, pasty, peny alebo sprejové formulácie, ktoré obsahujú okrem účinných látok látky nosné, o ktorých je v odbore známe, že sú vhodné na tento účel.

Prostriedky vhodné na parenterálne podávanie zahrnujú vodné a nevodné izotonické sterilné injekčné roztoky, ktoré môžu napríklad obsahovať antioxidačné činidlá, pufry, bakteriostatické prípravky a rozpustené látky, pomocou ktorých sa dosahuje izotonický stav krvi zamýšľaného príjemcu a vodné a nevodné sterilné suspenzie, ktoré môžu obsahovať napríklad suspendačné činidlá a zahusťovadlá a lipozómy alebo iné mikropartikuláme systémy, ktoré sú navrhnuté na dosiahnutie toho, že sa zlúčenina stane zložkou krvi alebo sa dostane k jednému alebo väčšiemu počtu orgánov. Prostriedky môžu byť prítomné v zásobníkoch na jedinú dávku alebo na väčší počet dávok, napríklad v uzatvorených ampulkách alebo fľaštičkách a môžu sa skladovať za lyofilných podmienok vyžadujúcich iba prídavok sterilnej kvapalnej nosnej látky, napríklad vody na injekcie, bezprostredne pred použitím. Extemporálne injekčné roztoky a suspenzie sa môžu vyrábať zo sterilných práškov, granúl a tabliet opísaných druhov.

Výhodné prostriedky tvorené dávkovou jednotkou sú prostriedky, ktoré obsahujú dennú dávku alebo dennú čiastkovú dávku účinných zložiek, ako je opísané, alebo jej príslušnú časť.

Je treba rozumieť, že okrem uvedených zložiek, prostriedky podľa tohto vynálezu môžu zahrňovať tiež iné látky bežné, obvyklé v odbore, s ohľadom na typ príslušného prostriedku, napríklad prostriedky vhodné na perorálne podávanie môžu zahrňovať ďalšie látky, ako sú sladidlá, zahusťovadlá a aromatické činidlá (esencie).

Zlúčeniny z kombinácie podľa tohto vynálezu sa môžu vyrábať obvyklým spôsobom. Zidovudin sa môže vyrábať napríklad spôsobom opísaným v US patente č. 4 724 232, ktorý sa uvádza ako súčasť známeho stavu techniky. Zidovudin sa môže tiež získať od firmy Aldrich Chemical Co., Milwaukee, Wisconsin 53233, USA.

l-[2-(hydroxymetyl)-l,3-oxatiazolan-5-yl]-5-fluórcytozín sa môže vyrobiť napríklad tým, že

a) prípadne chránený 5-fluócytozín sa nechá reagovať s 1,3-oxatiolánom všeobecného vzorca (IIIA)

v ktorom

R| znamená atóm vodíka alebo skupinu chrániacu hydroxyskupinu a

L predstavuje odštiepiteľnú skupinu, alebo

b) zlúčenina všeobecného vzorca (IIIB),

v ktorom

R] má uvedený význam a

R ]^a predstavuje skupinu chrániacu aminoskupinu, sa nechá reagovať s fluoračným činidlom slúžiacim na zavedenie atómu fluóru do polohy 5 cytozínového kruhu alebo

c) zlúčenina všeobecného vzorca (IIIC)

v ktorom

R] má uvedený význam, sa nechá reagovať s činidlom slúžiacim na prevedenie oxoskupiny v polohe 4 uracilového kruhu na aminoskupinu a ľubovoľné chrániace skupiny sa odstránia za vzniku požadovanej zlúčeniny.

S ohľadom na spôsob a), skupina chrániaca hydroxyskupinu zahrnuje chrániace skupiny, ako je acyl (napríklad acetyl), arylacyl (napríklad benzoyl alebo substituovaný benzoyl), trityl alebo monometoxytrityl, benzyl alebo substituovaný benzyl, trialkylsilyl (napríklad dimetyl-terc.butylsilyl) alebo difenylmetylsilyl. 5-Fluórcytozínová zlúčenina môže byť prípadne chránená silylom, napríklad trimetylsilylovými skupinami. Takéto skupiny sa môžu odstrániť zvyčajným spôsobom. Odštiepiteľná skupina L je odštiepujúca sa skupina typu známeho v odbore chémie nukleozidov, napríklad halogén, ako atóm chlóru alebo atóm fluóru, alkoxyskupina, ako metoxyskupina alebo etoxyskupina alebo acyl, ako je acetyl alebo benzoyl.

Reakcia pri spôsobe b) sa môže uskutočňovať v organickom rozpúšťadle (napríklad 1,2-dichlóretáne alebo acetonitrile) v prítomnosti Lewisovej kyseliny, ako je chlorid ciničitý alebo trimetylsilyltriflát.

Zlúčeniny všeobecného vzorca (IIIA) sa môžu získať z vhodne chráneného 2-hydroxyacetaldehydu všeobecného vzorca (IV)

R1OCH2CHO (IV), v ktorom

R] má uvedený význam, ako je opísané v Can. J. Research, 8, 129 (1933) a v Európskom patentovom spise č. 0 382 526. Reakcia zlúčenín všeobecného vzorca IV s merkaptoacetálom všeobecného vzorca

HSCH2CH(OR)₂, v ktorom

R znamená alkoxyskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka, ako so zlúčeninou vzorca

HSCH₂CH(OC2H5)2, známa v odbore (Chem. Ber. 85, 924-932 (1952)), poskytne zlúčeniny všeobecného vzorca (ΙΠΑ), v ktorom L predstavuje skupinu vzorca OR (alkoxyskupinu), napríklad metoxyskupinu alebo etoxyskupinu. Podľa iného uskutočnenia sa zlúčeniny všeobecného vzorca (IIIA), v ktorom L znamená alkoxyskupinu, môžu previesť na zlúčeniny všeobecného vzorca (IIIA), v ktorom L znamená atóm halogénu alebo acylovú skupinu, spôsobmi známymi v odbore chémie cukrov.

Zlúčeniny všeobecného vzorca (IV) sa môžu vyrobiť z 1,2-O-izopropylidénglycerolu zavedením substituentu R] (napríklad trisubstituovaného silylu, benzylu alebo tritylu) a odstránením izopropylidénovej skupiny pôsobením miernej kyseliny (napríklad kyseliny mravčej alebo kyseliny octovej) alebo bromidu zinočnatého v acetonitrile a následnou oxidáciou alkoholového zvyšku s vodným roztokom jodistanu.

Podľa spôsobu b) sa fluór ako substituent polohy 5 môže zaviesť spôsobmi známymi v odbore (M. J. Robin a kol. v Nucleic Acid Chemistry, časť 2, L. B. Towsend a R.

S. Tipson, vyd. J. Wiley and Sons, New York, str. 895 až 900 (1978) a odkazy tam uvedené, R. Duschinsky v Nucleic Acid Chemistry, časť 1, L. B. Townsend a R. S: Tipson, vyd. J. Wiley a Sons, New York, str. 43 až 46 (1978) a odkazy tam uvedené). Fluoračným činidlom môže byť napríklad trimetylhypofluorit v fluórtrichlórmetáne.

S ohľadom na spôsob c) sa uvádza, že sa zlúčenina všeobecného vzorca (IIIC) výhodne spracuje s 1,2,4-triazolom, výhodne spolu s 4-chlórfenyldichlórfosfátom, za vzniku zodpovedajúcej 4-(l,2,4-triazolylovej) zlúčeniny, ktorá sa potom prevedie na požadovanú 4-amino(cytidínovú) zlúčeninu reakciou napríklad s metanolom.

Východiskové zlúčeniny všeobecného vzorca (IIIB) a (IIIC) sa môžu vyrobiť napríklad reakciou vhodnej (prípadne chránenej) bázy so zlúčeninou všeobecného vzorca (IIIA) analogickým spôsobom, ako je opísaný pod spôsobom a). 5-Fluóruracyl a 5-fluórcytozín sú obchodne dostupné zlúčeniny firmy Aldrich Chemical Co., Milwaukee, Wisconsin 53233, USA.

Oddelenie (+/-)-cis-izoméru a (+/-)-trans-izoméru zlúčeniny vzorca (I), napríklad v chránenej forme, sa môže uskutočňovať chromatograficky na silikagéli s použitím zmesi organických rozpúšťadiel ako zmesi etylacetátu a metanolu, etylacetátu a hexánu alebo dichlórmetánu a metanolu. Akákoľvek chrániaca skupina sa môže potom odstrániť s použitím príslušného reakčného činidla pre každú skupinu.

Estery zlúčenín vzorca (I) a (II), ktoré tvoria zložku, sa môžu vyrobiť obvyklým spôsobom, reakciou s príslušným esterifikačným činidlom, ako je halogenid alebo anhydrid kyseliny. Zlúčeniny vzorca (I) alebo (II) alebo ich estery sa môžu previesť na svoje farmaceutický prijateľné soli spracovaním s vhodnou bázou. Ester alebo soľ zlúčeniny, tvoriace zložku, sa môžu previesť na pôvodnú zlúčeninu hydrolýzou.

Farmaceutický prijateľné amidy zlúčenín vzorca (I) sa môžu vyrobiť napríklad reakciou s príslušným acylačným činidlom, napríklad halogenidom alebo anhydridom kyseliny, slúžiacim na acyláciu hydroxyskupiny v polohe 5’ a aminokyseliny v polohe 4. Acylová skupina sa môže potom selektívne odstrániť z hydroxyskupiny v polohe 5 alebo z aminoskupiny v polohe 4 alebo z obidvoch týchto skupín. Napríklad spracovaním diacylovanej zlúčeniny za kyslých podmienok, napríklad pôsobením Lewisovej kyseliny, ako bromidu zinočnatého v metanole, sa odstráni 4N-acylová skupina za vzniku zodpovedajúceho 5’-OH esteru, zatiaľ čo spracovaním diacylovanej zlúčeniny za alkalických podmienok, napríklad pôsobením metoxidu sodného, sa odstráni 5’-OH acylová skupina za vzniku zodpovedajúceho 4N amidu. Acylové skupiny sa tiež môžu odstrániť selektívne spracovaním s komerčne dostupnými esterázovými alebo lipázovými enzýmami, napríklad esterázou z pečene ošípaných alebo lipázou z podžalúdkovej žľazy, alebo spracovaním podľa spôsobov, ktoré sú opísané v U S patentovom spise č. 5 071 983. Zlúčenina vzorca I sa môže previesť na svoju farmaceutický prijateľnú soľ obvyklým spôsobom, napríklad spracovaním s vhodnou bázou.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Ďalej uvedené príklady sú určené len na ilustráciu a žiadnym spôsobom nie sú mienené ako obmedzenie rozsahu vynálezu. Účinná zložka označuje zmes zlúčenín zidovudínu a cis-l-[2-(hydroxymetyl)-I,3-oxatiazolán-5-yl]-5-fluórcytozínu v molámom pomere 1 : 25.

Príklad 1

Prostriedky vo forme tabliet

Ďalej uvedené prostriedky A, B a C sa vyrábajú granuláciou zložiek za vlhka s roztokom povidonu, potom pridaním stearátu horečnatého a zlisovaním.

Prostriedok A
	mg/tableta
účinná zložka	250
laktóza B. P.	210
povidon B. P.	15
natri umglykolát škrobu	20
stearát horečnatý	5
celkom	500
Prostriedok B
	mg/tableta
účinná zložka	250
laktóza B. P.	150
Avicel PH 101	60
povidon B. P.	15
natriumglykolát škrobu	20
stearát horečnatý	5
celkom	500
Prostriedok C
	mg/tableta
účinná zložka	250
laktóza B. P.	200
škrob	50
povidon	5
stearát horečnatý	4
celkom	359

Ďalej uvedené prostriedky D a E sa vyrábajú priamym zlisovaním premiešaných zložiek. Laktóza v prostriedku E je typu určeného na priame zlisovanie (Zeparox - Dairy

Crest).

Prostriedok D mg/tableta účinná zložka250 predželatinizovaný škrob NF15150 celkom400

Prostriedok E mg/tableta účinná zložka250 laktóza B.P.150

Avicel 100 celkom500

Prostriedok F (Prostriedok s regulovaným uvoľňovaním) **

Prostriedok sa vyrobí granuláciou zložiek za vlhka s roztokom povidonu, potom pridaním stearátu horečnatého a zlisovaním.

mg/tableta

účinná zložka	500
hydroxypropalmetylcelulóza	112
(Methocel K4M Premium)
laktóza B.P.	53
povidom B. P.	28
stearát horečnatý	7
celkom	700

Uvoľňovanie účinnej látky nastáva v priebehu 6 až 8 hodín a je ukončené po 12 hodinách.

Príklad 2

Prostriedok vo forme kapsúl

Prostriedok A

Prostriedok vo forme kapsúl sa vyrobí zmiešaním zložiek z prostriedku D uvedeného v príklade 1 a naplnením zmesi do dvojdielnych tvrdých želatínových kapsúl. Prostriedok B (opísaný ďalej) sa vyrobí podobným spôsobom.

Prostriedok B	mg/kapsula
účinná zložka	250
laktóza B. P.	143
natriumglykolát škrobu	25
stearát horečnatý	2
celkom	420
Prostriedok C
	mg/kapsula
účinná zložka	250
Macrogel 4000 B. P.	350
celkom	600

Kapsuly z prostriedku C sa vyrobia roztavením Macrogélu 4000 B. P., dispergovaním účinnej zložky v tavenine a plnením taveniny do dvojdielnych tvrdých želatínových kapsúl.

Prostriedok D účinná zložka lecitín arašidový olej celkom mg/kapsula

250

100

450 zatvorí sa do sterilných sklenených fľaštičiek jantárového sfarbenia s objemom 3 ml (typu 1).

Príklad 5

Sirup

Kapsuly z prostriedku D sa vyrobia dispergovaním účinnej zložky v lecitíne a arašidovom oleji a plnením disperzie do mäkkých elastických želatínových kapsúl.

Prostriedok E (Kapsuly s regulovaným uvoľňovaním)

Ďalej uvedený prostriedok tvorený kapsulami s regulovaným uvoľňovaním sa vyrobí vytlačovaním zložiek a), b) a c) s použitím extrudéra, potom feronizáciou extrudátu a vysušením. Vysušené granuly sa potom potiahnu membránou d) regulujúcou uvoľňovanie a plnia sa do dvojdielnych tvrdých želatínových kapsúl.

a) účinná zložka

b) mikrokryštalická celulóza

c) laktóza B. P.

d) etylcelulóza celkom mg/kapsula

250

125

513

Príklad 3

Prostriedok na zavedenie injekcie

Prostriedok A mg účinná zložka 250

0,1 M roztok kyseliny chlorovodíkovej alebo

0,1 M roztok hydroxidu sodného podľa potreby na úpravu hodnoty pH na 4,0 až 7,0 sterilná voda podľa potreby do 10 ml

Účinná látka sa rozpustí ako je najviac možne vo vode (s teplotou 35 až 40 °C) a hodnota pH sa upraví na 4,0 až 7,0 podľa potreby pridaním kyseliny chlorovodíkovej alebo hydroxidu sodného. Násada sa potom doplní na potrebný objem vodou, filtruje cez sterilný mikroporézny filter do sterilných sklenených fľaštičiek jantárového sfarbenia s objemom 10 ml (typu 1), uzatvorí strerilným uzáverom a opatrí záklopkou na fľaštičky.

Prostriedok B účinná látka 125 mg sterilný fosfátový tlmivý roztok, neobsahujúci pyrogénne látky.

s hodnotou pH 7 podľa potreby do 25 ml

Príklad 4

Intramuskuláma injekcia účinná látka 200 m benzylalkohol 0,10 g

Glycofurol 75 1,45 g voda na injekcie podľa potreby do 3,00 ml

Účinná zložka sa rozpustí v glukofurole. Potom sa pridá benzylalkohol a rozpustí sa a ďalej sa pridá voda do 3 ml. Zmes sa potom filtruje cez sterilný porézny filter a uúčinná látka 250 mg roztok sorbitolu 1,50 g glycerol 2,00 g benzoát sodný 0,005 g príchuť, Peach 17.42.3169 0.0125 ml čistená voda podľa potreby do 5,00 ml

Účinná zložka sa rozpustí v zmesi glycerolu a väčšej časti čistenej vody. Potom sa k roztoku pridá vodný roztok benzoátu sodného, ďalej roztok sorbitolu a napokon príchuť. Objem sa upraví čistenou vodou a všetko sa dobre premieša.

Príklad 6

Čapík mg/čapíková kapsula účinná látka250 tvrdý tuk, B. P. (Witepsol H15 -1770

-Dynamit Nobel) ____________________ celkom2020

Jedna pätina Witepsolu Hl5 sa roztaví v panvici opatrenej parným plášťom pri maximálnej teplote 45 °C. Účinná zložka sa preoseje cez sito s veľkosťou otvorov 200 gm a pridá sa k roztavenej báze za miešania, pri použití Silversonovho miešadla s reznou hlavou, pričom miešanie pokračuje pokiaľ sa nezíska hladká disperzia. Zmes sa udržiava

pri teplote 45 °C, k suspenzii sa pridá zvyšný Witepsol Hl5 a všetko sa mieša, aby sa získala homogénna zmes. Celá suspenzia sa nechá prejsť cez sito z nehrdzavejúcej ocele s veľkosťou otvorov 250 gm a za nepretržitého miešania sa nechá ochladiť na teplotu 40 °C. Pri teplote 38 °C až 40 °C sa 2,02 g zmesi plní do vhodných foriem s objemom 2 ml z plastickej hmoty. Capíky sa nechajú vychladnúť na teplotu miestnosti.
Príklad 7
Pesar
	mg/pesar
účinná látka	250
bezvodá dextróza	380
zemiakový škrob	363
stearát horečnatý	7
celkom	1000

Opísané zložky sa priamo zmiešajú a pesary sa pripravia priamym zlisovaním výslednej zmesi.

Príklad 8

Spôsob výroby l-[2-(hydroxymetyl)-l,3-oxatiazolan-5-yl]-5-fluórcytozínu

Spôsob A

Vyrobí sa zmes (+/-)-cis- a (+/-)trans-2-benzoyloxymetyl-5- (N4-acetylcytozín-l-yl)-l,3-oxatiolánu a rozdelí sa na (+/-)-cis-a(+/-)-trans-izomér, ako je opísané v Európ skom patentovom spise č. 0 382 526. (+/-)-cis-Izomér sa fluóruje pôsobením trifluórmetylhypofluoritu v fluórtrichlórmetáne a chloroforme pri teplote -78 °C podľa spôsobu, ktorý opísal Robins a kol. v Nucleic Acid Chemistry, časť 2, str. 895 až 900 (1978). N4-Acetylová a 2-benzoylová skupina sa odstráni pôsobením dimetylamínu v etanole a izoluje sa výsledná zlúčenina, (+/-)-cis-l-[2-(hydroxymetyl)-1,3-oxatiazolán-5-yl]-5-fluórcytozin.

Spôsob B

Zmes (+/-) cis- a (+/-)-trans-2-benzoyloxymetyl-5-(uracil-l-yl)-l,3-oxatiolánu sa vyrobí, ako je opísané v Európskom patentovom spise č. 0 382 526. Po odstránení 2-hydroxyskupiny nasýteným metanolickým roztokom amoniaku sa izoméry oddelia na silikagéli s použitím zmesi etylacetátu a metanolu ako elučného činidla (Európsky patentový spis č. 0 382 526). (+/-)-cis-Izomér sa nechá reagovať s anhydridom kyseliny octovej v pyridíne za laboratórnej teploty na 2-acetát. Rozpúšťadlo sa odtráni za zníženého tlaku pri teplote nižšej ako 30 °C. 2-Acetát sa potom rozpustí v chloroforme a premyje vodným roztokom hydrogénuhličitanu. Oddelená organická vrstva sa vysuší a chloroform sa odparí za zníženého tlaku. (+/-)-cis-2-Acetyloxymetyl-5-(uracil-l-yl)-l,3-oxatiolán sa fluóruje ako jc opísané (spôsob A) spôsobom, ktorý opísal Robins a kol. Konverzia 5-fluóruracilovej bázy na 5-fluórcytozínovú bázu sa uskutoční tým, že sa pripraví 4-(1,2,4-triazol-l-ylový) derivát podľa spôsobu, ktorý uviedol C. B. Reese v J. Chem. Soc., Perkins I, 1171 (1984) a W. L. Sung v Nucleic Acids Res., 9, 6139 (1981) s použitím 1,2,4-triazolu a 2 ekvivalentov 4-chlórfenyldichlórfosfátu v suchom pyridíne pri laboratórnej teplote. Po tejto konverzii sa uskutoční reakcia s metanolom vopred nasýteným amoniakom pri teplote 0 °C a 2-acetát sa hydrolyzuje, čim sa získa (+/-)-cis-l-[2-(hydroxymetyl)-l,3-oxatiazolán-5-yl]-5-fluórcytozín.

Protivírusový účinok

Kombinácie podľa tohto vynálezu sa testujú na účinok proti H1V pri teste na MT4 bunkách infikovaných H1V, ako opísal D. R. Averett v J. Virol. Methods 23, 263-276 (1989). Bunky sa vystavia pôsobeniu HIV počas jednej hodiny pred pridaním protivirusovo účinnej zložky alebo zložiek. Zložky sa testujú pri 2,5-násobnom sériovom riedení. Po piatich dňoch inkubácie pri teplote 37 °C sa stanoví počet buniek. Vypočíta sa inhibícia HIV indukovaná cytopatickým účinkom a synergizmus sa stanoví tým, že sa do grafu vynesú frakčné koncentrácie inhibítora (F1C), ako opísal Elion, Singer a Hitchings v J. Biol. Chem. 208, 477 (1954).

Frakčné koncentrácie inhibítora (FIC) zidovudinu a cis-1 -[2-(hydroxymetyl)-1,3-oxatiazolán-5-yl]-5fluórcytozínu sa vypočítajú podľa metódy Eliona a kol., citované (pozri tabuľka 1).

Tieto hodnoty sa môžu vyniesť do grafu, z ktorého sa dá zistiť, že kombinácie cis-l-[2-(hydroxymetyl)-l,3-oxatiazolán-5-yl]-5-fluórcytozínu a zidovudinu pôsobia silne synergicky.

Tabuľka 1

Výpočet frakčnej koncentrácie inhibítora (FIC) % inhibície

Zidovudin (μΜ)	Zlúčenina 1* (μΜ)	FIC zidovudinu	FIC zlúčeniny 1
0,004	2,5	0,018	0,48
0,01	2,0	0,045	0,38
0,0256	1,6	0,12	0,31
0,06	1,4	0,27	0,26
0,22	-
-	5,2

* Zlúčeninou 1 je cis-l-[2-(hydroxymetyl)-l,3-oxatiazolán-5 -yl]-5-fluórcytozín

PATENTOVÉ NÁROKY

Claims

1. Farmaceutická kombinácia na použitie pri ošetrovaní vírusových infekcií, vyznačujúca sa tým, že obsahuje zložky

a) l-[2-(hydroxymetyl)-l,3-oxatiazolán-5-yl]-5-fluórcytozín alebo jeho fyziologicky funkčný derivát a

b) 3’-azido-3’-deoxytymidín alebo jeho fyziologický funkčný derivát, pričom zložky a) a b) kombinácie sa používajú v molámom pomere 600 : 1 až 1 : 1 zložky a) ku zložke b).

2. Farmaceutická kombinácia podľa nároku 1, vyznač u j ú ca sa tým, že zložkou a) je l-[2-(hydroxymetyl)-l ,3-oxatiazolán-5-yl]-5-fluórcytozín a zložkou b) je 3’-azido-3’-deoxytymidín.

3. Farmaceutická kombinácia podľa nároku 1, vyzná é u j ú c a sa tým, že zložky sa používajú v molámom pomere v rozmedzí od 250 : 1 do 10: 1 zložky a) ku zložke b).

4. Farmaceutická kombinácia podľa niektorého z predchádzajúcich nárokov na použitie v humánnej terapií.

5. Farmaceutická kombinácia podľa nároku 4 na použitie pri ošetrovaní alebo profylaxii infekcií spôsobených vírusom ľudskej imunitnej nedostatočnosti.

6. Farmaceutický prostriedok na liečenie vírusových infekcií, vyznačujúci sa tým, že obsahuje farmaceutickú kombináciu podľa niektorého z nárokov 1 až 3 spolu s aspoň jednou farmaceutický prijateľnou alebo pomocnou látkou, alebo farmaceutickým nosičom.