SK100197A3 - Use of beta-d-galactopyranosyl-d-xylose and enzymatic method for producing beta-galactopyranosyl-d-xylose - Google Patents
Use of beta-d-galactopyranosyl-d-xylose and enzymatic method for producing beta-galactopyranosyl-d-xylose Download PDFInfo
- Publication number
- SK100197A3 SK100197A3 SK1001-97A SK100197A SK100197A3 SK 100197 A3 SK100197 A3 SK 100197A3 SK 100197 A SK100197 A SK 100197A SK 100197 A3 SK100197 A3 SK 100197A3
- Authority
- SK
- Slovakia
- Prior art keywords
- xylose
- galactopyranosyl
- beta
- disaccharides
- galactopyranoside
- Prior art date
Links
- XGEJOTVKROWVLG-ITHKSCCZSA-N (2r,3s,4r)-2,3,4,5-tetrahydroxy-1-[(2r,3r,4s,5r,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]pentan-1-one Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(=O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O XGEJOTVKROWVLG-ITHKSCCZSA-N 0.000 title claims description 8
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 title description 2
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 claims abstract description 57
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 claims abstract description 45
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 claims abstract description 37
- 102100026189 Beta-galactosidase Human genes 0.000 claims abstract description 35
- 108010059881 Lactase Proteins 0.000 claims abstract description 34
- 229940116108 lactase Drugs 0.000 claims abstract description 34
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 33
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 25
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 claims abstract description 23
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 22
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims abstract description 9
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 claims abstract description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 8
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims abstract description 8
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims abstract description 5
- AXHPKHDTOXXPGU-IGXVCFLBSA-N (2r,3s,4r)-3,4,5-trihydroxy-2-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxypentanal Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](C=O)O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AXHPKHDTOXXPGU-IGXVCFLBSA-N 0.000 claims abstract description 4
- AXHPKHDTOXXPGU-UHFFFAOYSA-N 2-O-beta-D-galactopyranosyl-D-xylose Natural products OCC(O)C(O)C(C=O)OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O AXHPKHDTOXXPGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 4
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 claims abstract description 4
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 claims abstract 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 claims description 13
- 239000008101 lactose Substances 0.000 claims description 12
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 7
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical group CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 claims description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 5
- -1 flavorings Substances 0.000 claims description 5
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 4
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims description 4
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 claims description 3
- BYZQBCIYLALLPA-UHFFFAOYSA-N O4-beta-D-Galactopyranosyl-D-xylose Natural products O=CC(O)C(O)C(CO)OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O BYZQBCIYLALLPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims description 3
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000006184 cosolvent Substances 0.000 claims description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 3
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 claims description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 2
- VEXXNWQUANSCBT-UHFFFAOYSA-N 4-O-beta-D-Galactopyranosyl-D-xylose Natural products OC1C(O)C(CO)OC1OC1C(CO)OC(O)C(O)C1O VEXXNWQUANSCBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- VCTBNHVCBSUQPG-MRRNQDDQSA-N 4-o-β-d-galactopyranosyl-d-xylose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)OC1 VCTBNHVCBSUQPG-MRRNQDDQSA-N 0.000 claims 1
- 101000757615 Bifidobacterium longum Exo-alpha-(1->6)-L-arabinopyranosidase Proteins 0.000 claims 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 claims 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 claims 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 claims 1
- 238000012856 packing Methods 0.000 claims 1
- 239000004014 plasticizer Substances 0.000 claims 1
- ZTTRCZJSZGZSTB-GDIDZOIGSA-N (2r,3s,4r)-2,4,5-trihydroxy-3-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxypentanal Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H]([C@@H](O)C=O)O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O ZTTRCZJSZGZSTB-GDIDZOIGSA-N 0.000 abstract description 3
- ZTTRCZJSZGZSTB-UHFFFAOYSA-N O3-beta-D-Galactopyranosyl-L-arabinose Natural products OCC(O)C(C(O)C=O)OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O ZTTRCZJSZGZSTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 18
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 14
- 102000005936 beta-Galactosidase Human genes 0.000 description 7
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 5
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 5
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 3
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 3
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 3
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 3
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 230000000474 nursing effect Effects 0.000 description 3
- RMTFNDVZYPHUEF-XZBKPIIZSA-N 3-O-methyl-D-glucose Chemical compound O=C[C@H](O)[C@@H](OC)[C@H](O)[C@H](O)CO RMTFNDVZYPHUEF-XZBKPIIZSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZTTRCZJSZGZSTB-RUBORIGZSA-N OC[C@@H](O)[C@H](OC1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O)[C@@H](O)C=O Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H](OC1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O)[C@@H](O)C=O ZTTRCZJSZGZSTB-RUBORIGZSA-N 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000222068 Sporobolomyces <Sporidiobolaceae> Species 0.000 description 2
- 239000000370 acceptor Substances 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 2
- VCWMRQDBPZKXKG-UHFFFAOYSA-N (2S)-O1-alpha-D-Galactopyranosyl-myo-inosit Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O VCWMRQDBPZKXKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BYZQBCIYLALLPA-NOPGXMAYSA-N (2r,3r,4r)-2,3,5-trihydroxy-4-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxypentanal Chemical compound O=C[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O BYZQBCIYLALLPA-NOPGXMAYSA-N 0.000 description 1
- BYZQBCIYLALLPA-DCTBAANUSA-N (2r,3r,4r)-2,3,5-trihydroxy-4-[(3r,4s,5r,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxypentanal Chemical compound O=C[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)OC1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O BYZQBCIYLALLPA-DCTBAANUSA-N 0.000 description 1
- NTQWZXRSBBGWFC-YOUNRWHRSA-N (2r,3r,4s,5r,6s)-2-(hydroxymethyl)-6-[(2r,3r,4s,5r)-2,4,5-trihydroxyoxan-3-yl]oxyoxane-3,4,5-triol Chemical class O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)CO[C@H]1O NTQWZXRSBBGWFC-YOUNRWHRSA-N 0.000 description 1
- AXHPKHDTOXXPGU-DEOCBBGRSA-N (2r,3s,4r)-3,4,5-trihydroxy-2-[(3r,4s,5r,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxypentanal Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](C=O)OC1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AXHPKHDTOXXPGU-DEOCBBGRSA-N 0.000 description 1
- 206010010356 Congenital anomaly Diseases 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- 239000004097 EU approved flavor enhancer Substances 0.000 description 1
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- BPQQTUXANYXVAA-UHFFFAOYSA-N Orthosilicate Chemical compound [O-][Si]([O-])([O-])[O-] BPQQTUXANYXVAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 229910004298 SiO 2 Inorganic materials 0.000 description 1
- PHENPABYBHPABM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;octane Chemical compound CC(O)=O.CCCCCCCC PHENPABYBHPABM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- XSXQXHMPBBNYRD-YHLIKCGVSA-N beta-D-Galp-(1->3)-beta-D-Xylp Chemical class O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)OC[C@H]1O XSXQXHMPBBNYRD-YHLIKCGVSA-N 0.000 description 1
- 125000001488 beta-D-galactosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 1
- 235000010290 biphenyl Nutrition 0.000 description 1
- 239000004305 biphenyl Substances 0.000 description 1
- 125000006267 biphenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 1
- 230000006835 compression Effects 0.000 description 1
- 238000007906 compression Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 125000000118 dimethyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N ethanol;hydrate Chemical compound O.CCO IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N ethyl mercaptane Natural products CCS DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 239000012628 flowing agent Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 235000019264 food flavour enhancer Nutrition 0.000 description 1
- 125000002519 galactosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 1
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- KZSXJTYOPKQNLT-BCKMTSFNSA-N glucinol Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](OC)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O KZSXJTYOPKQNLT-BCKMTSFNSA-N 0.000 description 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- ZUOUZKKEUPVFJK-UHFFFAOYSA-N phenylbenzene Natural products C1=CC=CC=C1C1=CC=CC=C1 ZUOUZKKEUPVFJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001448 refractive index detection Methods 0.000 description 1
- 238000007790 scraping Methods 0.000 description 1
- 238000011894 semi-preparative HPLC Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- QRUBYZBWAOOHSV-UHFFFAOYSA-M silver trifluoromethanesulfonate Chemical compound [Ag+].[O-]S(=O)(=O)C(F)(F)F QRUBYZBWAOOHSV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 description 1
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/12—Disaccharides
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
- G01N2333/914—Hydrolases (3)
- G01N2333/924—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
(57) Anotácia:
Je opísané použitie Ο-β-D-galaktopyranozyl-D-xylóz, obzvlášť 2-O-P-D-galaktopyranozyl-D-xylózy a 3-Ο-β-D-galaktopyranozyl-D-xylózy na prípravu zlúčenín a roztokov určených na vyhodnotenie črevnej laktázy, ktoré prezentujú afinitu k výrazne zvýšenej laktáze. Je í tu taktiež vysvetlený proces produkcie Ο-β-D-galaktopyranozyl-D-xylóz zahŕňajúci reakciu D-xylózy a subi strátu β-D-galaktopyranozylu za prítomnosti enzýmu β4 -galaktozidázy vo vodnom médiu s regulovaným pH v rozmedzí 5,0 a 9,0 a pri teplote medzi 4 a 37 °C; deaktivovanie β-galaktozidázy zahrievaním na 100 °C pri dosiahnutí maximálnej tvorby disacharidov detegovaných cez tenkovrst-vovú chromatografíu a izolácia vytvorených disacharidov cez filtráciu v náplňovej kolóne s riedidlom nastaveným medzi vodou a vodou/alkoholom.
7> ι/ ffo 4 -71-1Použite β-D-galaktopyranozyl-D-xylózy a enzymatický spôsob výroby β-galaktopymozylD-xylózy
Oblasť techniky
Deficit alebo slabá aktivita v črevnej laktáze, ktorá spôsobuje nedostačujúcu, ba až nulovú kapacitu pre zažívanie laktózy je ojedinelá čo sa týka kongenitálnej metabolickej chyby, no je to bežný syndróm u dospelých ľudí. U väčšej časti cicavcov nastáva od momentu skončenia dojčenia prudký pokles aktivity laktázy. U ľudí s predkami, ktorí boli dlhý čas závislí na značnej konzumácii mlieka alebo laktázových produktov je tento pokles menej frekventovaný. Na druhej strane, deficit alebo slabá aktivita v črevnej laktáze je dosť frekventovaná u detí, ktoré sú dojčené.
Tento vynález zhrňuje bezkrvné vyhodnocovacie metódy aktivity črevnej laktázy.
Doterajší stav techniky
Determinácia aktivity črevnej laktózy je dôležitá v pediatrii a gastroenterológii a môže byť priamo vykonávaná, vychádzajúc zo vzorky membrány, alebo nepriamo, vychádzajúc z hladiny glukózy v krvi alebo z expirovaného vodíka po podaní dávky pacientovi.
Nevýhodou priamej determinácie je tvorba komplexnej a drahej metódy, keďže požaduje špecifické nástroje a veľmi špecializovaný personál pre techniku vytiahnutia vzorky, ktorá musí byť podrobená nasledovnej analýze, okrem toho je metóda nepríjemná a predstavuje určité nebezpečie.
Nevýhoda nepriamej determinácie je, že sa jedná o techniku využívajúcu krv, požaduje teda extrakciu krvi špecializovanou osobou predtým, než môže byť vzorka analyzovaná, okrem toho je metóda komplexná a náchylná na chyby kvôli existencii glukózy pochádzajúcej zo zažívania iného jedla užitého indivíduom a endogénnej glukózy, ktorá mohla byť mobilizovaná.
Ostatné metódy determinácie črevnej laktázy sú založené na fakte, že špecifické disacharidy sú, založené na ich afinite k laktáze, náchylné chovať sa ako substrát laktázy a
-2transformovať sa pôsobením enzýmu na špecifické monosacharidy, ktoré sú ľahko absorbované črevom a eliminované cez moč.
Preto sú metódy vysvetlené v španielskych patentoch ES-P-478590 a ES-P-482073 založené na vyhodnotení „in vivo“ pomocou orálneho použitia 3-O-metyl laktázy a analýzy
3-O-metyl-D-glukózy v moči. Avšak zmienené metódy majú tú nevýhodu, že vyžadujú použitie chromatografickej procedúry na detekciu 3-O-metyl-D-glukózy v moči, ktorá zahrňuje komplexné a drahé prostriedky a výbavu pre analýzu.
Na druhej strane, v španielskom patente ES-P-9001680 je vysvetlená príprava disacharidu 4-O-p-galaktopyranozyl-D-xylózy vzorcu (I)
na vyhodnotenie aktivity črevnej laktázy. Zmienený disacharid sa užíva orálne, chová sa ako substrát črevnej laktázy a v črevnom trakte sa rozkladá na xylózu a galaktózu, absorbujúc xylózu a je eliminovaný cez moč, kde môže byť priamo vyhodnotený pomocou jednoduchej kolorimetrickej metódy. Disacharid španielského patentu ES-P-9001680 má tú nevýhodu, že prezentuje napriek dosť podobnej štruktúre laktázy zvýženú afinitu k laktóze. To znamená, že iba časť strávenej 4-O-P-galaktopyranozyl-D-xylózy je hydrolyzovaná vďaka enzymatickej aktivite laktázy, a tak nerozložená časť vxylóze a galaktóze je eliminovaná z fekálií. To znamená relatívne široký rozsah chýb vzhľadom na to, že nízke alebo dokonca žiadne hodnoty xýlózy v analyzovanom moči môžu pochádzať zároveň z nízkej alebo nulovej aktivity črevnej laktázy a z nízkej hydrolýzy disacharidu spôsobenej jeho nedostatočnou afinitou k laktáze. Za účelom obmedzenia uvedeného rozsahu chýb je nutné, aby jedinec strávil značné množstvo disacharidov, čo však môže viesť k črevným problémom ako je hnačka a zodpovedajúcim ťažkostiam.
Španielsky patent ES-P-9001680 tiež vysvetľuje metódu prípravy pre 4-Ο-βgalaktopyranozyl-D-xylózy, ktorá v podstate zahŕňa syntézu vychádzjúcu zbenzyl-P-Dxylopyranozidu a ktorá nasleduje operačné sekvencie implikujúce selektívne ochranné
-3reakcie a glykozyláciu. Počet reakčných etáp, použitie drahých reakčných agentov ako triflát strieborný v reakcii glykozylácie a použitie chromatografíckých stĺpcov pri čistení medziproduktov a finálneho produktu znamená výdavky a predstavuje ťažkosti pre uskutočnenie uvedenej procedúry v priemyselnom meradle.
Na druhej strane, Gorin et al. v „The Synthesis of β-Galacto- And β-GlucoPyranosyl disaccharides by Sporobolomvces Singilaris“, Can. J. Chem. 42(1964) 2307 až 2319 opisuje syntézu mnohých sacharidov, medzi inými aj 2-O-p-D-galaktopyranozyl-Dxylózy a 3-0-p-D-galaktopyranozyl-D-xylózy pomocou čisto experimentálnej procedúry.
V tejto publikácii je záver taký, že produkty vytvorené z transferu galaktozylu pri použití viacerých akceptorov pochádzajú zväčša zo substitúcie sekundárnych hydroxylových skupín než z primárnych hydroxylových skupín; minimálna štruktúrova požiadavka reakcie s akceptorom sa zdá byť hydroxylový adjacent k substituovanej hydroxylovej skupine.
V tejto publikácii však nie je opísané použitie rozličných syntetizovaných disacharidov.
Podstata vynálezu
Aby sa odstránili nevýhody vyššie opísaného postupu, cieľom tohto vynálezu je použitie β-D-galaktopyranozyl-D-xylózy, špeciálne 2-O^-D-galaktopyranozyl-D-xylózy všeobecného vzorca (II)
a 3-O-p-D-galaktopyranozyl-D-xylózy všeobecného vzorca (III)
na prípravu zlúčenín a roztokov použitých pri bezkrvnom a spoľahlivom vyhodnotení črevnej laktázy.
Na druhej strane, ďalším cieľom vynálezu je procedúra, ktorá povoľuje prípravu βD-galaktopyranozyl-D-xylózy, ktorej použitie je chránené, spolu s použitím inej β-Dgalaktopyranozyl-D-xylózy pomocou zjednodušenej metódy oproti konvenčným procedúram tohto typu sacharidov.
β-D-galaktopyranozyl-D-xylóza, čo je teda 2-O-^-D-galaktopyranozyl-D-xylóza a
3-O^-D-galaktopyranozyl-D-xylóza, ktorých použitie je chránené, vykazujú afinitu k laktáze, ktorá je značne zvýšená oproti konvenčné používaným disacharidom v tomto type vyhodnocovaní, ktoré sa zdajú byť prekvapivé vzhľadom na fakt, že obe zlúčeniny sú štrukturálne menej podobné laktáze než predtým použité zlúčeniny, ako 4-Ο-β-ϋgalaktopyranozyl-D-xylóza od ktorej sú štruktúrne diferencované rôznymi hydroxylovými skupinami respektívne adjacentnými ku glykozidickej väzbe v molekule.
Disacharidy so vzorcami (II) a (III) môžu byť zahrnuté v zmesiach a roztokoch, ktoré sú konvenčné v sebe, individuálne alebo spoločne, alebo dokonca zmiešané s kvantitou konvenčných disacharidov vzorcu (I) a/alebo s nižšou kvantitou laktózy. Takéto zmesi a roztoky môžu obsahovať kvantity ingrediencií o sebe známych, farmaceutický akceptovateľných, s aspoň jedným vybratým aditívom spomedzi stabilizátorov, chránidiel, chuťových zvýrazňovačov, laktózy, zahusťovadiel, stekucovadiel a konzervačných prísad. Roztoky môžu byť voda, vodné alebo slané roztoky, ktoré sú známe.
Zisitilo sa, že aj keď je použitá zmes troch disacharidov (I), (Π) a (III), vyhodnotenie aktivity črevnej laktázy cez xylózu prítomnú v eliminovanom moči je značne zvýšené oproti tomu, keď je použitý iba disacharid (I), čo jasne dokazuje prekvapivý efekt vlastný vynálezu.
-5Postup podľa vynálezu zahrňuje možnosť prípravy β-D-galaktopyranozyl-D-xylózy, ktorá zahrňuje vyššie indikované disacharidy I, II a III a pozostáva z nasledovných etáp : reakcia D-xylózy a substrátu β-D-galaktopyranozidu za prítomnosti enzýmu βgalaktozidáza podľa schémy reakcie
β-D-galaktopyranozid + β-galaktozidáza ->
D-xylóza I + II + III pričom koncentrácia D-xylózy je 2 až 20 krát väčšia než koncentrácia β-Dgalaktopyranozidu, vo vodnom médiu s regulovaným pH medzi 5,0 a 9,0 a v teplote medzi 4 a 37 °C; deaktivovanie β-galaktozidázy zahrievaním na 100 °C pri dosiahnutí maximálnej tvorby disacharidov detegovaných (normálne po 4 až 8 hodinách) cez tenkovrstvovú chromatografiu alebo s aktívnou uhlíkovou kolónou a izolácia vytvorených disacharidov cez filtráciu v náplňovej kolóne s riedidlom nastaveným medzi vodou a vodou/alkoholom, tak sa získa zmes disacharidov (I), (II) a (III) ktorá môže byť zahrnutá v zmesiach alebo roztokoch buď ako zmes troch disacharidov alebo ako zmes, po zodpovedajúcej izolácii jedného z disacharidov (II) alebo (III), s disacharidom (I) alebo individuálne.
V súbore procedúry je použitý β-D-galaktopyranozid O-nitrofenyl, pričom v inom súbore to je laktóza.
Na druhej strane, β-galaktozidáza môže byť napríklad Escherichia Coli, ako je komercializované španielskou spoločnosťou SIGMA-ALDRICH-QUÍMICA, S.A.
Procedúra sa môže vykonávať za prítomnosti spolurozpúštadiel miešateľných vo vode, ako je acetonitril, dimetyl formamid alebo dimetyl sulfoxid.
Filtračné kolóny použité pri izolácii disacharidov môžu byť plnené Sephadexom™ G-10 alebo Biogelom™ alebo ešte aktívnym uhlíkom.
-6Disacharidy II a III sa môžu taktiež získať pomocou iných konvenčných metód, ktoré sú napríklad uvedené Gorinom et al. v „The Synthesis of β-Galacto- And β-GlucoPyranosyl disaccharides by Sporobolomyces Singilaris“. Can. J. Chem. 42(1964) 2307 až 2319.
Prehľad obrázkov na výkrese
Jediný obrázok je grafická reprezentácia evolúcie a) hydrolýzy in vivo zmesi β-Dgalaktopyranozyl-D-xylózy (I), (II) a (III) ako percentá xylózy eliminovanej cez moč a b) aktivity črevnej laktázy (nm/min/mg proteínu) počas rastu potkanov ako je opísané v príkladoch.
Nasledujúce príklady ilustratívne opisujú relevantné aspekty vynálezu.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Príklad 1
Príprava zmesi 4-O^-D-galaktopyranozyl-D-xylózy (disacharid I), 2-Ο-β-ϋgalaktopyranozyl-D-xylózy (disacharid II) a 3-O^-D-galaktopyranozyl-D-xylózy (disacharid III).
Do tlmivého roztoku Ó-nitrofenyl β-galaktopyranozylu (4 g, 50 mM) a xylózy (20 g, 500 nM) vo vode (0,05 M KH2PO4, 1 mM MgCl2, 5 mM merkaptoetanolu, 265 ml, pH 7,0) sa pridala β-galaktozidáza E.Coli zo SIGMA (1.5 mg, 560 U) a zmes bola počas 5 hodín a 45 minút inkubovaná pri 25 °C. Po uplynutí tohto času sa zmes počas desiatich minút zahriala na 100 °C, skoncentrovala sa a výsledné rezíduum sa vložilo do kolóny aktívneho uhlíka používajúc gradient vody-etanolu 1:0 85:15. Najprv boli eluované monosacharidy xylóza a galaktóza a potom zmes disacharidov I, II a III, získajúc 2 g zmesi disacharidov (50% vzhľadom na ekvivalenty pôvodného Ó-nitrofenyl β-galaktopyranozylu) v pomere I: II: III = 8,6 : 1,4 : 1,0 respektívne.
Rozdielna funkčnosť disacharidov I, II a III umožňuje ich separáciu v čistom stave; disacharidy boli nasledovne charakterizované pomocou RMN.
-Ί ’H-NMR spektrum (300 MHz, D2O) frakcií s disacharidom I, merané spektometrom Varian XL-300, bolo identické so spektrom predtým pripraveného produktu.
Za cieľom neekvivokálnej charakteristiky a determinácie boli frakcie bohaté na väzby disacharidov II a III acetylované a výsledné produkty boli izolované semiprípravným HPLC (normálna fázová kolóna SiO2, etylhexánacetát 1:1, detekcia refrakčným indexom). Nasledovne bolo zaznamenané ‘H NMR spektrum (300 MHz, CDL3) každého zo získaných derivátov:
- Acetylovaný derivát 2-O-P-D-galaktopyranozyl-Ó-D-xylopyranózy.
- Acetylovaný derivát 2-0-P-D-galaktopyranozyl-p-D-xylopyranózy.
- Acetylovaný derivát 3-O-p-D-galaktopyranozyl-Ó-D-xylopyranózy.
- Acetylovaný derivát 3-O-P-D-galaktopyranozyl-P-D-xylopyranózy.
Pomer disacharidov I, II a III získaný chromatografickou kolónou bol určený plynovou chromatografiou s chromatografom vybaveným plameňovým ionizačným detektorom a kapilárnou kolónou SE-54 (nehybná fáza : 5% difenyl a 95% dimetyl t
polysyloxán, 15 m dĺžka, 0,5 mm vnútorný priemer a pm hrúbka). V analýze sa použil dusíkový prietok 1 ml/min). Použité teplotné programy boli: počiatočná teplota 160 °C; počiatočný čas 2 min, teplotný nárast 5 °C/min; konečná teplota: 250 °C. Vzorky boli analyzované po trimetylovej silikácii pomocou nasledujúceho protokolu: alikvót (10 μΐ) bol počas 10 min zahrievaný na 100 °C a potom sa pridal pyridín (25 μΐ) obsahujúci ako internú referenciu benzyl β-xylopyranozid (10 mM) a N-trimetyl sylimidazol (25 μΐ) a pokračovalo sa zahrievaním na 60 °C počas 30 minút. Doby zdržania zón pridelí teľných rôznym disacharidom boli nasledujúce :
- Benzyl β-xylopyranozid (interná referencia): 12,04 min
- disacharidl: 20,35 a 20,50 min
- disacharid II: 18,46 a 19,50 min . - disacharid III: 18,30 min
J
-8Príklad 2
Kinetický test in vitro hydrolyza
Disacharidy I, II a III a laktóza boli hydrolyzované podľa metódy A.Rivera-Sagredo,
F.J.Caňada, O.Nieto, J.Jiméz-Barbero a M.Martín-Lomas, Eur. J.Biochem., 209 (1992) 415 až 422, s črevnou laktázou ovce o pH 6,0 s nasledujúcimi výsledkami vzhľadom na konštanty Michaelisa (K^ a maximálnych pomerov (Vmax):
| Disacharid | VmM) | v. |
| laktóza | 11,0 | 100 |
| disacharid I | 340,0 | 20 |
| disacharid II | 14,0 | 20 |
| disacharid III | 4,0 | 70 |
Možno spozorovať, že Michaelisove konštanty disacharidov II a ΙΠ sú značne nižšie než konštanta disacharidu IaK^ disacharidu III je ešte nižšie ako laktózy, čo evidentne ukazuje výnimočnú afinitu disacharidov Π a II k laktáze.
Príklad 3
Eliminácia xylózy v moči po orálnom užití zmesi disacharidov I, II a III
Zmes disacharidov I, II a III (v pomere 8,6 : 1,4 : 1,0 resperktívne) pripravená podľa spôsobu z príkladu 1 bola použitá pre vyhodnotenie aktivity črevnej laktázy. Na tento účel bola skupina 12 dňových 17 Spraque-Dawley dojčiacich potkanov rovnakého vrhu držaná počas.6 hodín bez jedenia oddelene od ich matky. Po vypršaní uvdeného času sa pomocou vezikálneho transabdominálneho tlaku zhromaždil bazálny moč každého zvieraťa a za použitia intragastrikálneho zariadenia im bolo okamžite dodaných 18,2 mg diluovanej disacharidovej zmesi v 0,3 ml destilovanej vody. Od tohto momentu sa naslededujúcich 5 hodín zhromažďoval moč a určovala sa z neho xylóza eliminovaná pomocou kolometrickej analýzy založenej na fluoroglucinólovej reakcii. Ihneď po zhromaždení moču sa obetovali
-9tri zvieratá, pri ktorých sa priamo zistila aktivita laktázy v črevnej membráne. Kvôli tomu sa vysušila a vymyla sekcia čreva a škrabaním sa zhromažnila homogenizovaná membrána, kde sa spektrofotometricky určila aktivita laktázy. Ostatné zvieratá boli vrátené matke a experiment sa s nimi zopakoval za podobných podmienok po 15, 18, 21, 24 a 30 dňoch, až vrh vyhynul. Výsledné priemerné hodnoty uvedeného experimentu sú obsiahnuté v obrázku, kde je zobrazená hydrolýza zmesi disacharidov I, II a III „in vivo“ a aktivita črevnej laktázy počas rastu potkanov. Na toto dosiahnutie je eliminovaná xylóza (%) [krivka a)] zobrazená spolu s aktivitou laktázy (nm/min/mg proteínu) [krivka b)] versus vek (v dňoch). Výsledky tohto experimentu indikujú : 1) že prítomnosť xylózy v moči je detegovaná zhydrolýzy disacharidov užitých akciou črevnej laktázy; a 2) že eliminácia xylózy v moči, pochádzajúca z orálneho užitia, prebieha paralelne so známou fyziologickou modifikáciou aktivity črevnej laktázy, ktorá klesá počas rozvoja jedinca. Uvedený experiment demonštruje, že metóda je užitočná pre vyhodnotenie „in vivo“ aktivity črevnej laktázy a že procedúra použitá pre vyhodnotenie uvedenej aktivity je bezkrvná a má diagnostické závery, ktoré sú obzvlášť aplikovateľné pri dojčiacich jedincoch s podozrením na deficit uvedeného enzýmu.
Príklad 4
Skupina 15-dňových Spraque-Dawley dojčiacich potkanov rovnakého vrhu bola počas 4 hodín bez jedenia držaná v metabolických boxov v teplote 30 °C. Každý z nich užil 18,2 g disacharidu I v 0,5 ml destilovanej vody. Transabdominálnym stláčaním mechúra zvierat počas 5 hodín sa zhromaždil moč. Xylóza eliminovaná cez moč počas tohto obdobia sa spektroskopicky vyhodnotila. Výsledok eliminácie xylózy bol 21%, čo je menej než polovica výsledku zmesi produktov I, II a II po 15 dňoch.
Pri porovnávaní údajov z tohto príkladu s údajmi z príkladu 3 je evidentné, že „in vivo“ afinity disacharidov II a III sú tak vysoké, že dokonca kompenzujú najhoršiu afinitu disacharidu I, keď sú všetky tri disacharidy užité v zmesi, kde prevláda disacharid I.
7>ι/
Claims (15)
1. Použite β-D-galaktopyranozyl-D-xylózy na prípravu zlúčenín a roztokov určených na vyhodnotenie črevnej laktázy, kde
- β-D-galaktopyranozyl-D-xylózy vykazujú viaceré hydroxylové skupiny respektívne adjacentné ku glykosidickej väzbe v molekule.
2. Použitie podľa nároku 1,vyznačujúce satým, že β-D-galaktopyranozylD-xylózy sú vybrané spomedzi 2-0-P-D-galaktopyranozyl-D-xylóz, 3-Ο-β-ϋgalaktopyranozyl-D-xylóz a ich zmesí
3. Použitie podľa nárokov la 2, vyznačujúce sa tým, že zmesi zahŕňajú farmaceutický akceptovateľné množstvo aspoň jedného aditíva vybraného spomedzi stabilizátorov, chránidiel, dochucovadiel, laktózy, gélov, zmäkčovadiel a konzervačných prísad.
4. Použitie podľa ktoréhokoľvek z nárokov la 2, vyznačujúce sa tým, že roztoky sú vodné.
5. Použitie podľa nároku 4, vyznačujúce sa tým, že roztoky sú slané.
6. Použitie podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1,2,4 alebo 5, vyznačujúce sa t ý m, že roztoky zahŕňajú farmaceutický akceptovateľné množstvo aspoň jedného aditíva vybratého spomedzi stabilizátorov, chránidiel, dochucovadiel, laktózy a konzervačných prísad.
7. Enzymatický spôsob výroby β-D-galaktopyranozyl-D-xylóz, obsahujúcich aspoň jednu β-D-galaktopyranozyl-D-xylózu vykazujúcu viaceré hydroxylové skupiny respektívne adjacentné ku glykosidickej väzbe v jej molekule, vyznačujúci sa t ý m , že zahrnuje :
-11a) reakciu D-xylózy a substrátu β-D-galaktopyranozidu za prítomnosti enzýmu βgalaktosidázy, pričom koncentrácia D-xylóza / substrát β-D-galaktopyranozidu je 2 až 20 : 1, vo vodnom médiu s regulovaným pH medzi 5,0 a 9,0 pri teplote medzi 4 a 37 °C;
b) deaktivovanie enzýmu β-galaktosidázy zahrievaním na 100 °C pri dosiahnutí maximálnej tvorby disacharidov detegovaných cez tenkovrstvovú chromatografiu;
c) izolovanie disacharidov vytvorených cez filtráciu v náplňovej kolóne s riedidlom nastaveným medzi vodou a zmesami vody a alkoholu
8. Spôsob podľa nároku 7, vyznačujúci sa tým, že substrát β-Dgalaktopyranozidu je Ó-nitrofenyl β-D-galaktopyranozidu.
9. Spôsob podľa nároku 7, vyznačujúci sa tým, že β-D-galaktopyranozid je substrát laktózy.
10. Spôsob podľa nároku 7, vyznačujúci sa tým, že enzým βgalaktopyranosidáza je β-D-galaktopyranosidáza E.Coli.
11. Spôsob podľa nároku 7, vyznačujúci sa tým, že je uskutočňovaný za prítomnosti aspoň jedného korozpúšťadla miešateľného vo vode.
12. Spôsob podľa nároku 11, v y z n a č u j ú c i sa tým, že korozpúšťadlo je vybrané spomedzi acetonitrilu, dimetylformamidu, dimetylsulfoxidu alebo ich zmesí.
13. Spôsob podľa nároku 7, vyznačujúci sa tým, že náplňové kolóny sú plnené náplňami Sphadex G-10 alebo Biogel P-2.
14. Spôsob podľa nároku 7, vyznačujúci sa tým, že náplňové kolóny sú plnené aktívnym uhlíkom.
-1215. Spôsob podľa nároku 7 alebo 10, vyznačujúci sa tým, že vytvorené disacharidy sú zmesou 2-O-P-D-galaktopyranozyl-D-xylózy, 3-Ο-β-ϋgalaktopyranozyl-D-xylózy a 4-O-P-D-galaktopyranozyl-D-xylózy.
16. Spôsob podľa nároku 10, vyznačujúci sa tým, že z vytvorených disacharidov, aspoň jeden z 2-O-3-D-galaktopyranozyl-D-xylózy alebo 3-Ο-β-ϋgalaktopyranozyl-D-xylózy, sú izolované.
c.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| ES09502185A ES2100131B1 (es) | 1995-11-08 | 1995-11-08 | Procedimiento enzimatico de obtencion de beta-d-galactopiranosil-d-xilosas utilizables para la evaluacion diagnostica de la lactasa intestinal. |
| PCT/ES1996/000208 WO1997017464A1 (es) | 1995-11-08 | 1996-11-08 | USO DE β-D-GALACTOPIRANOSIL-D-XILOSAS PARA LA PREPARACION DE COMPOSICIONES Y DISOLUCIONES DESTINADAS A LA EVALUACION DE LA LACTASA INTESTINAL, Y PROCEDIMIENTO PARA SU OBTENCION |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SK100197A3 true SK100197A3 (en) | 1998-02-04 |
Family
ID=8292102
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SK1001-97A SK100197A3 (en) | 1995-11-08 | 1996-11-08 | Use of beta-d-galactopyranosyl-d-xylose and enzymatic method for producing beta-galactopyranosyl-d-xylose |
Country Status (20)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5994092A (sk) |
| EP (1) | EP0819764B1 (sk) |
| JP (2) | JP3036848B2 (sk) |
| KR (1) | KR19980701287A (sk) |
| CN (1) | CN1220779C (sk) |
| AT (1) | ATE214740T1 (sk) |
| AU (1) | AU702329B2 (sk) |
| BR (1) | BR9607092A (sk) |
| CA (1) | CA2209927C (sk) |
| CZ (1) | CZ252797A3 (sk) |
| DE (1) | DE69619973T2 (sk) |
| EA (1) | EA000684B1 (sk) |
| ES (2) | ES2100131B1 (sk) |
| HU (1) | HUP9801439A3 (sk) |
| NO (1) | NO973159L (sk) |
| NZ (1) | NZ321607A (sk) |
| PL (1) | PL321257A1 (sk) |
| PT (1) | PT819764E (sk) |
| SK (1) | SK100197A3 (sk) |
| WO (1) | WO1997017464A1 (sk) |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ES2130073B1 (es) * | 1997-05-28 | 2000-04-01 | Consejo Superior Investigacion | Mejoras en el procedimiento de obtencion de beta-d-galactopiranosil-xilosas utilizables para la evaluacion diagnostica de la lactasa intestinal. |
| ES2182703B1 (es) * | 2001-06-18 | 2004-06-01 | Consejo Superior De Investigaciones Cientificas | Un procedimiento enzimatico para obtener 4-0-b-d-galactopiranosil-d-xilosa, 4-o-b-d-galactopiranosil-d-xilosa obtenida de acuerdo con el pr cedimiento, composiciones que la contienen y su uso en la evaluacion de la lactasa intestinal. |
| ES2208099B1 (es) * | 2002-10-16 | 2005-09-01 | Consejo Sup. De Invest. Cientificas | Empleo de 4-galactosil-xilosa en humanos para la evaluacion in vivo de lactasa intestinal como prueba diagnostica no invasiva de la deficiencia de este enzima. |
| JP2006223268A (ja) * | 2005-02-21 | 2006-08-31 | Yakult Honsha Co Ltd | ガラクトシル２糖類の製造法 |
| US20110196219A1 (en) * | 2010-02-08 | 2011-08-11 | Edmunds Kathleen | Fetal Scalp Blood Analyzer |
| US20110196214A1 (en) * | 2010-02-08 | 2011-08-11 | Edmunds Kathleen | Fetal Scalp Blood Analyzer |
| US9128100B2 (en) | 2011-01-14 | 2015-09-08 | Venter Pharma, S.L. | Non-invasive diagnostic method for the evaluation of intestinal lactase deficiency (hypolactasia) |
| WO2018100120A1 (en) | 2016-11-30 | 2018-06-07 | Elaphe Pogonske Tehnologije D.O.O. | Electric machine with a cooling system and a method for cooling an electric machine |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ES2023556A6 (es) * | 1990-06-18 | 1992-01-16 | Consejo Superior Investigacion | Procedimiento de obtencion de 4-o-beta-d-galactopiranosil-d-xilosa utilizable para la evaluacion diagnostica de la lactasa intestinal. |
| JP2834871B2 (ja) * | 1990-08-07 | 1998-12-14 | 塩水港精糖株式会社 | フラクトース含有オリゴ糖の製造法 |
-
1995
- 1995-11-08 ES ES09502185A patent/ES2100131B1/es not_active Expired - Fee Related
-
1996
- 1996-11-08 CA CA002209927A patent/CA2209927C/en not_active Expired - Fee Related
- 1996-11-08 SK SK1001-97A patent/SK100197A3/sk unknown
- 1996-11-08 PT PT96937342T patent/PT819764E/pt unknown
- 1996-11-08 HU HU9801439A patent/HUP9801439A3/hu unknown
- 1996-11-08 NZ NZ321607A patent/NZ321607A/xx unknown
- 1996-11-08 CZ CZ972527A patent/CZ252797A3/cs unknown
- 1996-11-08 EA EA199700097A patent/EA000684B1/ru not_active IP Right Cessation
- 1996-11-08 DE DE69619973T patent/DE69619973T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1996-11-08 ES ES96937342T patent/ES2176505T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1996-11-08 EP EP96937342A patent/EP0819764B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-11-08 AU AU74977/96A patent/AU702329B2/en not_active Ceased
- 1996-11-08 KR KR1019970704676A patent/KR19980701287A/ko not_active Application Discontinuation
- 1996-11-08 JP JP09517877A patent/JP3036848B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1996-11-08 BR BR9607092A patent/BR9607092A/pt not_active Application Discontinuation
- 1996-11-08 WO PCT/ES1996/000208 patent/WO1997017464A1/es active IP Right Grant
- 1996-11-08 CN CNB961923989A patent/CN1220779C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1996-11-08 AT AT96937342T patent/ATE214740T1/de not_active IP Right Cessation
- 1996-11-08 PL PL96321257A patent/PL321257A1/xx unknown
- 1996-11-08 US US08/875,043 patent/US5994092A/en not_active Expired - Lifetime
-
1997
- 1997-07-08 NO NO973159A patent/NO973159L/no not_active Application Discontinuation
-
1999
- 1999-10-12 JP JP11289464A patent/JP2000106898A/ja active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ES2176505T3 (es) | 2002-12-01 |
| EP0819764A1 (en) | 1998-01-21 |
| KR19980701287A (ko) | 1998-05-15 |
| CA2209927A1 (en) | 1997-05-15 |
| EA000684B1 (ru) | 2000-02-28 |
| NZ321607A (en) | 2000-12-22 |
| DE69619973D1 (de) | 2002-04-25 |
| PL321257A1 (en) | 1997-11-24 |
| DE69619973T2 (de) | 2002-11-07 |
| ES2100131A1 (es) | 1997-06-01 |
| NO973159D0 (no) | 1997-07-08 |
| CN1177984A (zh) | 1998-04-01 |
| ATE214740T1 (de) | 2002-04-15 |
| JP3036848B2 (ja) | 2000-04-24 |
| EP0819764B1 (en) | 2002-03-20 |
| HUP9801439A2 (hu) | 1998-10-28 |
| PT819764E (pt) | 2002-09-30 |
| WO1997017464A1 (es) | 1997-05-15 |
| JPH10512457A (ja) | 1998-12-02 |
| EA199700097A1 (ru) | 1997-12-30 |
| CA2209927C (en) | 2002-08-13 |
| JP2000106898A (ja) | 2000-04-18 |
| CZ252797A3 (cs) | 1998-03-18 |
| AU7497796A (en) | 1997-05-29 |
| US5994092A (en) | 1999-11-30 |
| AU702329B2 (en) | 1999-02-18 |
| CN1220779C (zh) | 2005-09-28 |
| HUP9801439A3 (en) | 2002-01-28 |
| MX9705109A (es) | 1998-06-30 |
| NO973159L (no) | 1997-09-08 |
| ES2100131B1 (es) | 1998-02-16 |
| BR9607092A (pt) | 1997-11-11 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Albrecht et al. | Occurrence of oligosaccharides in feces of breast-fed babies in their first six months of life and the corresponding breast milk | |
| Wahjudi et al. | Measurement of glucose and fructose in clinical samples using gas chromatography/mass spectrometry | |
| AlDeeb et al. | Sucralose | |
| SK100197A3 (en) | Use of beta-d-galactopyranosyl-d-xylose and enzymatic method for producing beta-galactopyranosyl-d-xylose | |
| Honour | Biochemical aspects of congenital adrenal hyperplasia | |
| McKennis Jr et al. | Mammalian Degradation of (-)-Nicotine to 3-Pyridylacetic Acid and Other Compounds. | |
| Côté et al. | Glucosylation of raffinose via alternansucrase acceptor reactions | |
| Hermida et al. | Optimizing the enzymatic synthesis of β-d-galactopyranosyl-d-xyloses for their use in the evaluation of lactase activity in vivo | |
| US7537909B2 (en) | Enzymatic method of producing 4-O-β-D-galactopyranosyl-D-xylose, 4-O-β-D-galactopyranosyl-D-xylose obtained using said method, compositions contain same and the use thereof in evaluating intestinal lactase | |
| Pignatelli et al. | Synthesis, structure-activity relationships and a reaction mechanism for mutagenic N-nitroso derivatives of glycosylamines and Amadori compounds—model substances for N-nitrosated early Maillard reaction products | |
| MXPA97005109A (en) | USE DEß-D-GALACTOPIRANOSIL-D-XYLOSES FOR THE PREPARATION OF COMPOSITIONS AND DISSOLUTIONS INTENDED FOR THE EVALUATION OF INTESTINAL LACTASE, AND PROCEDURE FOR YOUR OBTENC | |
| OKUDA et al. | Metabolic and functional differences among the α, β anomers and the aldehyde form of D-glucose | |
| US7056899B2 (en) | Disaccharide derivatives for treating hyperglycaemia | |
| Aragón et al. | A direct enzymatic synthesis of β-d-galactopyranosyl-d-xylopyranosides and their use to evaluate rat intestinal lactase activity in vivo | |
| Nakano et al. | Steric course of the hydrolysis of α, α-trehalose and α-D-glucosyl fluoride catalyzed by pig kidney trehalase | |
| WO2021260966A1 (ja) | アデノシン産生酵素を標的とする組成物 | |
| Thompson et al. | Determination of disaccharides in feces by permethylation and gas chromatography: rapid screening for carbohydrate intolerance in children | |
| JP5044717B1 (ja) | 新規異性体蔗糖、その製造方法及び用途 | |
| Truscott et al. | Abnormal deoxyribose metabolites in the urine of a child with a possible new inborn error of metabolism | |
| OHNISHI et al. | Effect of Isomaltose on the Cycloamylose Glucanotransferase-Catalysed Reaction for a Maltose Substrate: An Attempt to Produce a Trisaccharide, Isopanose | |
| SCHÖCH et al. | OVER OF tRNA, rRNA AND mRNA-CAP-FUTURE PROSPECTS | |
| Okuda et al. | Determination of pseudo-α-and pseudo-β-dl-glucose by gas-liquid chromatography, high-performance liquid chromatography, and enzymatic colorimetry with glucose 2-oxidase |