EA000684B1 - ПРИМЕНЕНИЕ β-D-ГАЛАКТОПИРАНОЗИЛ-D-КСИЛОЗЫ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ КОМПОЗИЦИЙ И РАСТВОРОВ, ПРЕДНАЗНАЧЕННЫХ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЛАКТАЗЫ КИШЕЧНИКА - Google Patents

ПРИМЕНЕНИЕ β-D-ГАЛАКТОПИРАНОЗИЛ-D-КСИЛОЗЫ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ КОМПОЗИЦИЙ И РАСТВОРОВ, ПРЕДНАЗНАЧЕННЫХ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЛАКТАЗЫ КИШЕЧНИКА Download PDF

Info

Publication number
EA000684B1
EA000684B1 EA199700097A EA199700097A EA000684B1 EA 000684 B1 EA000684 B1 EA 000684B1 EA 199700097 A EA199700097 A EA 199700097A EA 199700097 A EA199700097 A EA 199700097A EA 000684 B1 EA000684 B1 EA 000684B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
galactopyranosyl
xylose
xyloses
evaluation
additive
Prior art date
Application number
EA199700097A
Other languages
English (en)
Other versions
EA199700097A1 (ru
Inventor
Хуан Хосе Арагон Рейес
Франсиско Хавьер Канада Висинай
Альфонсо Фернандес-Майоралас Альварес
Роза Лопес Альварес
Мануэль Мартин Ломас
Даниэль Виллануэва Торрегроса
Original Assignee
Консехо Супериор Инвестигасьонес Сьентификас
Универсидад Аутонома
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Консехо Супериор Инвестигасьонес Сьентификас, Универсидад Аутонома filed Critical Консехо Супериор Инвестигасьонес Сьентификас
Publication of EA199700097A1 publication Critical patent/EA199700097A1/ru
Publication of EA000684B1 publication Critical patent/EA000684B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/12—Disaccharides
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
    • G01N2333/914—Hydrolases (3)
    • G01N2333/924—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Description

Область техники, к которой относится изобретение
Дефицит или низкая активность кишечной лактазы, которые приводят к недостаточной способности или даже к полному отсутствию способности разлагать лактозу, редко являются следствием врожденного нарушения метаболизма, хотя они и представляют собой общий синдром для взрослых людей. У большей части млекопитающих резкое снижение активности лактазы происходит с момента отнятия от груди. У людей, предки которых в течение длительного времени в значительной степени зависели от потребления молока или продуктов лактации, это снижение активности встречается менее часто. С другой стороны, дефицит или низкая активность кишечной лактазы весьма часто встречается у детей, которых кормят грудью.
Настоящее изобретение относится к бескровным методам определения активности кишечной лактазы.
Предпосылки создания изобретения
Определение активности кишечной лактазы имеет важное значение для педиатрии и гастроэнтерологии и может быть осуществлено прямым путем, в частности из образца слизи, или косвенным путем, в частности на основе данных об уровне глюкозы в крови или данных о выдыхаемом водороде после введения некоторой дозы человеку.
Недостатком метода прямого определения является его сложность и высокая стоимость, поскольку для него необходимы специальные инструменты и прошедший достаточно сложную профессиональную подготовку персонал для проведения экстракции образца, который должен подвергаться дальнейшему анализу, кроме того, сам процесс определения сопряжен с неприятными ощущениями для пациента и не лишен опасности для него.
Недостатком косвенного метода определения является то, что этот метод основан на анализе крови, что требует специально подготовленных специалистов для взятия крови перед проведением такого анализа, и, кроме того, он является сложным и может приводить к ошибкам вследствие наличия глюкозы, образовавшейся при переваривании другой пищи, принятой пациентом, и эндогенной глюкозы, которая могла быть мобилизована.
Другие методы определения кишечной лактазы основаны на том факте, что определенные дисахариды в зависимости от их сродства с лактазой могут использоваться в качестве субстрата для лактазы и превращаются под действием фермента в определенные моносахариды, которые легко абсорбируются кишечником и выводятся с мочой.
Так, способы, описанные в патентах Испании ES-P-478590 и ES-P-482073, базируются на оценке in vivo и основаны на анализе в моче 3О-метил-D- глюкозы после орального введения 3-О-метиллактозы. Однако недостатком этих методов является то, что для определения 3-Ометила-глюкозы в моче необходимо использование хроматографического анализа, для которого требуется сложное и дорогостоящее оборудование и оснащение.
С другой стороны, в патенте Испании ESP-9001680 описано получение дисахарида 4-OЗ-галактопиранозил^-ксилозы формулы (I) но он
для определения уровня кишечной лактазы. Этот дисахарид вводят орально, и он действует в качестве субстрата для кишечной лактазы и разлагается в кишечном тракте на ксилозу и галактозу, при этом ксилоза абсорбируется и выводится с мочой, где она может быть легко определена прямым путем с помощью простого колориметрического метода. Недостатком дисахарида, описанного в патенте Испании ES-P9001680, является то, что в результате его весьма сходного строения с лактозой он обладает повышенным сродством к лактазе. Это приводит к тому, что только часть переваренной 4-OЗ-галактопиранозил^-ксилозы гидролизуется с участием ферментативной активности лактазы, и, следовательно, частично неразложенная на ксилозу и галактозу часть дисахарида выводится с экскрементами. Следствием этого является высокий уровень появления ошибки, т.к. низкое содержание или даже отсутствие ксилозы в анализируемой моче может рассматриваться и как дефицит или нулевая активность кишечной лактазы, так и как дефицит гидролиза дисахарида вследствие отсутствия у него сродства к лактазе. С целью избежать таких предельных ошибок, необходимо, чтобы пациент переваривал достаточное количество дисахаридов, что в свою очередь может привести к проблемам с кишечником у пациента, таким, как понос и соответствующий дискомфорт.
В патенте Испании ES-P-9001680, кроме того, описан способ получения 4-Э-З-галактопиранозил^-ксилозы, включающий в целом синтез из бензил-З^-ксилопиранозида с последующими стадиями избирательной защиты, гликозилирования и удаления защитных групп. Наряду с большим количеством реакционных стадий использование для реакции гликозилирования дорогостоящих реактивов, таких, как трифталат серебра, и необходимость в хроматографических колонках для очистки промежуточных продуктов и конечного продукта делает этот способ дорогостоящим и обусловливает сложности для использования этой методики в промышленных масштабах.
С другой стороны у Gorin и др. в статье The Synthesis of З-Galacto- and З-GlucoPyranosyl disaccharides by Sporobolomyces Sin3 gularis, Can. J. Chem. 42 (1964) 2307-2319 описан синтез ряда дисахаридов, в том числе 2-Ο-βD-галактопиранозил-D-ксилозы и 3-Θ-β-ϋгалактопиранозил-О-ксилозы, чисто экспериментальным методом. В этой публикации делается заключение, что продукты, представляющие собой форму переноса галактозила, при использовании различных акцепторов образуются скорее при замещении вторичных, а не первичных гидроксильных групп, при этом минимальным структурным требованием для реакции с акцептором является соседство гидроксила с замещенной гидроксильной группой. Однако в этой публикации не описано применение различных синтезированных дисахаридов.
Описание изобретения Предметом настоящего изобретения, предназначенного для устранения указанных выше недостатков, присущих известным из уровня техники решениям, является применение β-Dгалактопиранозил-О-ксилоз, в частности 2-Ο-βD-галактопиранозил-D-ксилозы общей формулы (II)
и 3-О-в-О-галактопиранозил^-ксилозы общей
для получения композиций и растворов, применяемых для бескровной и надежной оценки кишечной лактазы.
β-О-галактопиранозил-О-ксилозы, а именно, 2-O-β-D-галактопиранозил-D-ксилоза и 3-Ов-О-галактопиранозил-О-ксилоза, применение которых заявлено в формуле изобретения, обладают сродством к лактазе, существенно более высоким по сравнению с дисахаридами, обычно применяемыми для этого типа анализов, что является неожиданным с точки зрения того факта, что оба соединения структурно менее похожи на лактозу, чем ранее применяемые соединения, такие, как 4-О-в-галактопиранозил-Оксилоза, от которой они структурно отличаются различными положениями гидроксильных групп относительно соседней гликозидной связи в молекуле.
Дисахариды формул (II) и (III) могут быть включены в обычные композиции и растворы, которые используются индивидуально либо совместно или даже при смешении с некоторым количеством обычных дисахаридов формулы (I) и/или с меньшими количествами лактозы. Такие композиции и растворы могут содержать некоторое количество обычных фармацевтически приемлемых ингредиентов, из которых, по крайней мере, один выбран из группы, включающей стабилизаторы, защитные вещества, корригенты, лактозу, гелеобразователи, разжижающие вещества и консерванты. Растворы могут представлять собой обычные водные или физиологические растворы.
Было установлено, что даже при использовании смеси трех дисахаридов (I), (II) и (III) определение активности кишечной лактазы через ксилозу, присутствующую в выделяемой моче, дает существенно улучшенные результаты по сравнению с соответствующим определением, когда вводят только дисахарид (I), что очевидно указывает на неожиданное действие, соответствующее изобретению.
Получение β-О-галактопиранозил-О-ксилоз, к которым относятся ранее описанные дисахариды (I), (II) и (III), включает следующие стадии:
взаимодействие О-ксилозы и субстрата βО-галактопиранозида в присутствии фермента β-галактозидазы в соответствии с изображенной
причем концентрация D-ксилозы в 2-20 раз превышает концентрацию β-О-галактопиранозида в водной среде, забуференной до значения рН 5,09,0, и при температуре от 4 до 37°С; дезактивацию β-галактозидазы путем выдержки при 1 00°С по достижении максимального выхода образовавшихся дисахаридов (обычно через 4-8 ч), определяемого тонкослойной хроматографией или с помощью колонки с активированным углем, и выделение образовавшихся дисахаридов фильтрацией в насадочной колонке с растворителем, выбранным из воды или воды/спирта, с получением смеси дисахаридов (I), (II) и (III), которые могут быть включены в композиции или растворы как в виде смеси из трех дисахаридов, так и в виде смеси одного из дисахаридов (II) или (III) после их соответствующего выделения с дисахаридом (I), а также по отдельности.
В одном из вариантов осуществления этого способа используемый β-О-галактопиранозид представляет собой Θ-нитрофенил-β-D-галактопиранозид, а в другом варианте лактозу.
С другой стороны, β-галактозидаза может происходить, например, из Escherichia coli, и она поставляется на рынок фирмой Spanish Company SIGMA-ALDRICH QUIMICA, S.A.
Способ можно проводить в присутствии смешивающихся с водой сорастворителей, таких как ацетонитрил, диметилформамид или диметилсульфоксид.
Фильтрующие колонки, применяемые для выделения дисахаридов, могут быть заполнены Sephadex™ G-10 либо Biogel™ P2 или же активированным углем.
Дисахариды (II) и (III) могут быть получены также другими обычными способами, такими, как описанные у Gorin и др. в статье The Synthesis of β-Galacto- and β-Gluco-PyranosyI disaccharides by Sporobolomyces Singularis, Can. J. Chem. 42 (1964) 2307-2319.
Краткое описание чертежей
На фиг. 1 представлено графическое изображение динамики а) гидролиза in vivo смеси в^-галактопиранозил^-ксилозы (I), (II) и (III) в виде процентной доли ксилозы, выделившейся с мочой, и б) активности кишечной лактазы (нм/мин/мг протеина) во время роста крыс, как это описано ниже в примерах.
Варианты осуществления изобретения
Ниже изобретение проиллюстрировано на примерах, не ограничивающих его изобретения.
Пример 1. Получение смеси, состоящей из 4-O-β-D-галактопиранозил-D-ксилозы (дисахарид I), 2-O-β-D-галактопиранозил-D-ксилозы (дисахарид II) и 3-О-в^-галактопиранозил^ксилозы (дисахарид III).
К раствору O-нитрофенил-β-галактопиранозида (4 г, 50 мМ) и ксилозы (20 г, 500 нМ) в забуференной воде (0,05М КН2РO4, 1мМ MgCl2, 5мМ меркаптоэтанол, 265 мл, рН 7,0) добавляли β-галактозидазу из E.coli фирмы SIGMA (1,5 мг, 560 ед.) и смесь инкубировали при 25° С в течение 5 ч 45 мин. По истечении этого промежутка времени смесь выдерживали при 1 00° С в течение 10 мин, концентрировали и образовавшийся остаток вносили в колонку с активированным углем, используя градиент воды-этанола от 1 :0 до 85:15. Первыми элюировались моносахариды ксилоза и галактоза, а затем смесь дисахаридов (I), (II) и (III), при этом получали 2 г смеси дисахаридов (50% по отношению к эквивалентам исходного O-нитрофенил-β-галактопиранозида), а отношение I:II:III составляло 8,6:1,4:1,0 соответственно.
Для исследования различных функций дисахаридов (I), (II) и (III) их разделяли, каждый из них очищали и анализировали с использованием ЯМР. 'Н-ЯМР-спектр (300 МГц, D2O) фракций с дисахаридом (I), определенный с помощью спектрофотометра типа Varian XL-300, оказался идентичным с таковым ранее полученного продукта.
Для получения характеристик и точного определения региохимии (химии области) связи, образованной в дисахаридах (II) и (III), фракции с высоким содержанием этих соединений ацетилировали и образовавшиеся продукты выделяли с помощью полупрепаративной ЖХВР (нормальная фаза колонки SiO2, этилгексанацетат 1:1, определение по индексу рефракции). Далее определяли 'Н-ЯМР-спектр (300 МГц, CDL3) каждого из следующих полученных производных:
ацетилированное производное Σ-Ο-β-Dгалактопиранозил-О^-ксилопираноза, ацетилированное производное Σ-Ο-β-Dгалактопиранозил-β-D-ксилопираноза, ацетилированное производное 3Ό-β^галактопиранозил-О^-ксилопираноза, ацетилированное производное 3Ό-β^галактопиранозил-β-D-ксилопираноза.
Соотношение дисахаридов (I), (II) и (III), полученных на хроматографической колонке, определяли с помощью газовой хроматографии на хроматографе, оснащенном пламенноионизационным детектором и капиллярной колонкой типа SE-54 (стационарная фаза: 5% дифенила и 95% диметилполисилоксана, длина 15 м, внутренний диаметр 0,15 мм и толщина мкм). При анализе использовали поток азота со скоростью 1 мл/мин. Использовали следующую температурную программу: начальная температура 160°С; начальное время 2 мин; возрастание температуры 5°С/мин; конечная температура 250°С. Образцы анализировали после триметилсиликатирования с помощью следующего протокола: аликвотное количество (10 мкл) выдерживали при 1 00°С в течение 1 0 мин, после чего добавляли пиридин (25 мкл), содержащий в качестве внутреннего стандарта бензил-β-ксилопиранозид (10мМ) и N-триметилсил-имидазол (25 мкл), и продолжали выдерживать при температуре 60°С в течение 30 мин. Время удерживания пиков, соответствующих различным дисахаридам, было следующим:
- бензил-β-ксилопиранозид (внутренний стандарт): 12,04 мин,
- дисахарид (I): 20,35 и 20,50 мин,
- дисахарид (II): 18,46 и 19,50 мин,
- дисахарид (III): 18,30 мин.
Пример 2. Кинетический анализ гидролиза in vitro.
Дисахариды (I), (II) и (III) и лактозу подвергали гидролизу в соответствии с методом, описанным у A. Rivera-Sagredo, F. J. Canada, О. Nieto, J. Jimenez-Barbero и М. Martin-Lomas в Eur. J. Biochem., 209 (1992) 415-422, с использованием кишечной лактазы овцы при рН 6,0, при этом были получены следующие результаты для констант Михаэлиса (К^ и максимальных скоростей (Vmax):
Дисахарид КДмМ) Vmax(%)
Лактоза 11,0 100
Дисахарид (I) 340,0 20
Дисахарид (II) 14,0 20
Дисахарид (III) 4,0 70
Эти данные показывают, что константы Михаэлиса дисахаридов (II) и (III) существенно ниже по сравнению с дисахаридом (I), а значение Кт дисахарида (III) оказалось даже ниже, чем у лактозы, что свидетельствует о необычно высоком сродстве дисахаридов (II) и (III) к лактазе.
Пример 3: Определение ксилозы в моче после орального введения смеси дисахаридов (I), (II) и (III).
Смесь, содержащую дисахариды (I), (II) и (III) (в соотношении 8,6:1,4:1,0 соответственно) и полученную по описанной в примере 1 методике, применяли для определения активности кишечной лактазы. Для этого группу из 17 питающихся грудным молоком крыс 12-дневного возраста линии Sprague-Dawley из одного помета выдерживали без еды в течение 6 ч после отнятия от матери. По истечении этого промежутка времени собирали основную мочу каждого животного с помощью трансабдоминального давления на пузырь и сразу после этого каждой особи вводили 18,2 мг смеси дисахаридов, разбавленной в 0,3 мл дистиллированной воды, используя внутрижелудочный тонкий зонд. Начиная с этого момента, мочу собирали в течение последующих 5 ч, определяя в ней выделившуюся ксилозу с помощью колориметрического анализа, основанного на фторглюциноловой реакции, и используя основную мочу в качестве контроля. Сразу же после сбора мочи умерщвляли трех животных, у которых прямым методом определяли активность лактазы в слизи кишечника. Для этого срез тонкой кишки сушили и промывали, слизь собирали с помощью соскоба стеклом и гомогенизировали, измеряя спектрофотометрическим методом активность лактазы в гомогенизированном продукте. Остальных животных возвращали к матери и повторяли с ними эксперимент в таких же условиях через 15, 18, 21, 24 и 30 дней, после чего помет уничтожали. На фиг. 1 приведены полученные средние значения этого эксперимента, представляющие собой данные для гидролиза in vivo смеси дисахаридов (I), (II) и (III) и для активности кишечной лактазы при росте крыс. Для этого данные о выделившейся ксилозе (%) [кривая а)] представлены вместе с данными об активности лактазы (нм/мин/мг протеина) [кривая б)] по отношению к возрасту (в днях). Результаты этого эксперимента показывают, что 1 ) присутствие ксилозы в моче определяется на основе гидролиза введенных дисахаридов благодаря активности кишечной лактазы и 2) процесс выделения в мочу ксилозы, поступившей при оральном введении, происходит параллельно с известным физиологическим изменением активности кишечной лактазы, которая понижается в процессе развития особи. Этот эксперимент показывает, что данная методика пригодна для определения in vivo активности кишечной лактазы и может применяться для оценки этой активности бескровным методом в диагностических целях, прежде всего на кормящихся грудью индивидуумах, у которых подозревается дефицит этого фермента.
Пример 4.
Группу кормящихся грудным молоком крыс 15-дневного возраста линии SpragueDawley из одного помета выдерживали без еды в течение четырех часов в метаболических боксах при 30°С. Каждой из них вводили 18,2 г дисахарида (I) в 0,5 мл дистиллированной воды. Мочу у животных собирали в течение 5 ч с помощью трансабдоминального давления на мочевой пузырь. Количество ксилозы, выделившейся с мочой в течение этого промежутка времени, оценивали спектроскопическим методом. Выделение ксилозы составило 21%, что, как следует особо отметить, составляет меньше половины по сравнению с результатом, полученным при использовании смеси продуктов (I), (II) и (III) через 1 5 дней.
При сравнении данных этого примера с таковыми, полученными в примере 3, очевидно, что сродство дисахаридов (II) и (III) является столь высоким, что даже компенсирует in vivo низкое сродство дисахарида (I), когда три дисахарида вводят в виде смеси, в которой превалирует дисахарид (I).

Claims (8)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Применение Р-Э-галактопиранозил-Эксилозы, имеющей две гидроксильные группы, каждая из которых соответственно является соседней по отношению к гликозидной связи в ее молекуле и выбранной из группы, включающей 2-O-β-D-галактопиранозил-D-ксилозу, 3-O-P-Dгалактопиранозил-Э-ксилозу и их смесь, для приготовления композиции для оценки кишечной лактазы.
  2. 2. Применение Р-О-галактопиранозил-Оксилозы, имеющей две гидроксильные группы, каждая из которых соответственно является соседней по отношению к гликозидной связи в ее молекуле и выбранной из группы, включающей 2-O-P-D-галактопиранозил-D-ксилозу, 3-O-P-Dгалактопиранозил-Э-ксилозу и их смесь, для приготовления композиции, содержащей 4-O-Pгалактопиранозил-Э-ксилозу, для оценки кишечной лактазы.
  3. 3. Композиция для оценки кишечной лактазы, содержащая в качестве активного начала P -галактопиранозил-D -ксилозу, отличающаяся тем, что в качестве Р-галактопиранозил-Э-ксилозы содержит Р-Э-галактопиранозил-Э-ксилозу, имеющую две гидроксильные группы, каждая из которых соответственно является соседней по отношению к гликозидной связи в ее молекуле и выбранную из группы, включающей 2-OР-Э-галактопиранозил-Э-ксилозу, 3 -О-P-Dгалактопиранозил-Э-ксилозу и их смесь, а также фармацевтически приемлемые количества, по крайней мере, одной добавки.
  4. 4. Композиция для оценки кишечной лактазы, содержащая 4-О-р-галактопиранозил-Оксилозу, отличающаяся тем, что дополнительно включает 2-О-в-О-галактопиранозил-О-ксилозу, З-О-в-О-галактопиранозил-О-ксилозу и их смесь, а также фармацевтически приемлемые количества, по крайней мере, одной добавки.
  5. 5. Композиция по п.З или 4, отличающаяся тем, что в качестве добавки она содержит добавку, выбранную из группы, включающей стабилизаторы, защитные вещества, добавки, улучшающие вкус, лактозу, гелеобразователи, разжижающие вещества и консерванты.
  6. 6. Композиция по п.З или 4, отличающаяся тем, что представляет собой водный раствор.
  7. 7. Композиция по п.З или 4, отличающаяся тем, что представляет собой физиологический раствор.
  8. 8. Композиция по п.З или 4, отличающаяся тем, что в качестве добавки она содержит добавку, выбранную из группы, включающей стабилизаторы, защитные вещества, добавки, улучшающие вкус, лактозу и консерванты.
EA199700097A 1995-11-08 1996-11-08 ПРИМЕНЕНИЕ β-D-ГАЛАКТОПИРАНОЗИЛ-D-КСИЛОЗЫ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ КОМПОЗИЦИЙ И РАСТВОРОВ, ПРЕДНАЗНАЧЕННЫХ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЛАКТАЗЫ КИШЕЧНИКА EA000684B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
ES09502185A ES2100131B1 (es) 1995-11-08 1995-11-08 Procedimiento enzimatico de obtencion de beta-d-galactopiranosil-d-xilosas utilizables para la evaluacion diagnostica de la lactasa intestinal.
PCT/ES1996/000208 WO1997017464A1 (es) 1995-11-08 1996-11-08 USO DE β-D-GALACTOPIRANOSIL-D-XILOSAS PARA LA PREPARACION DE COMPOSICIONES Y DISOLUCIONES DESTINADAS A LA EVALUACION DE LA LACTASA INTESTINAL, Y PROCEDIMIENTO PARA SU OBTENCION

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA199700097A1 EA199700097A1 (ru) 1997-12-30
EA000684B1 true EA000684B1 (ru) 2000-02-28

Family

ID=8292102

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA199700097A EA000684B1 (ru) 1995-11-08 1996-11-08 ПРИМЕНЕНИЕ β-D-ГАЛАКТОПИРАНОЗИЛ-D-КСИЛОЗЫ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ КОМПОЗИЦИЙ И РАСТВОРОВ, ПРЕДНАЗНАЧЕННЫХ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЛАКТАЗЫ КИШЕЧНИКА

Country Status (20)

Country Link
US (1) US5994092A (ru)
EP (1) EP0819764B1 (ru)
JP (2) JP3036848B2 (ru)
KR (1) KR19980701287A (ru)
CN (1) CN1220779C (ru)
AT (1) ATE214740T1 (ru)
AU (1) AU702329B2 (ru)
BR (1) BR9607092A (ru)
CA (1) CA2209927C (ru)
CZ (1) CZ252797A3 (ru)
DE (1) DE69619973T2 (ru)
EA (1) EA000684B1 (ru)
ES (2) ES2100131B1 (ru)
HU (1) HUP9801439A3 (ru)
NO (1) NO973159L (ru)
NZ (1) NZ321607A (ru)
PL (1) PL321257A1 (ru)
PT (1) PT819764E (ru)
SK (1) SK100197A3 (ru)
WO (1) WO1997017464A1 (ru)

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2130073B1 (es) * 1997-05-28 2000-04-01 Consejo Superior Investigacion Mejoras en el procedimiento de obtencion de beta-d-galactopiranosil-xilosas utilizables para la evaluacion diagnostica de la lactasa intestinal.
ES2182703B1 (es) * 2001-06-18 2004-06-01 Consejo Superior De Investigaciones Cientificas Un procedimiento enzimatico para obtener 4-0-b-d-galactopiranosil-d-xilosa, 4-o-b-d-galactopiranosil-d-xilosa obtenida de acuerdo con el pr cedimiento, composiciones que la contienen y su uso en la evaluacion de la lactasa intestinal.
ES2208099B1 (es) * 2002-10-16 2005-09-01 Consejo Sup. De Invest. Cientificas Empleo de 4-galactosil-xilosa en humanos para la evaluacion in vivo de lactasa intestinal como prueba diagnostica no invasiva de la deficiencia de este enzima.
JP2006223268A (ja) * 2005-02-21 2006-08-31 Yakult Honsha Co Ltd ガラクトシル２糖類の製造法
US20110196219A1 (en) * 2010-02-08 2011-08-11 Edmunds Kathleen Fetal Scalp Blood Analyzer
US20110196214A1 (en) * 2010-02-08 2011-08-11 Edmunds Kathleen Fetal Scalp Blood Analyzer
US9128100B2 (en) 2011-01-14 2015-09-08 Venter Pharma, S.L. Non-invasive diagnostic method for the evaluation of intestinal lactase deficiency (hypolactasia)
WO2018100120A1 (en) 2016-11-30 2018-06-07 Elaphe Pogonske Tehnologije D.O.O. Electric machine with a cooling system and a method for cooling an electric machine

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2023556A6 (es) * 1990-06-18 1992-01-16 Consejo Superior Investigacion Procedimiento de obtencion de 4-o-beta-d-galactopiranosil-d-xilosa utilizable para la evaluacion diagnostica de la lactasa intestinal.
JP2834871B2 (ja) * 1990-08-07 1998-12-14 塩水港精糖株式会社 フラクトース含有オリゴ糖の製造法

Also Published As

Publication number Publication date
ES2176505T3 (es) 2002-12-01
EP0819764A1 (en) 1998-01-21
KR19980701287A (ko) 1998-05-15
CA2209927A1 (en) 1997-05-15
NZ321607A (en) 2000-12-22
DE69619973D1 (de) 2002-04-25
PL321257A1 (en) 1997-11-24
DE69619973T2 (de) 2002-11-07
ES2100131A1 (es) 1997-06-01
NO973159D0 (no) 1997-07-08
SK100197A3 (en) 1998-02-04
CN1177984A (zh) 1998-04-01
ATE214740T1 (de) 2002-04-15
JP3036848B2 (ja) 2000-04-24
EP0819764B1 (en) 2002-03-20
HUP9801439A2 (hu) 1998-10-28
PT819764E (pt) 2002-09-30
WO1997017464A1 (es) 1997-05-15
JPH10512457A (ja) 1998-12-02
EA199700097A1 (ru) 1997-12-30
CA2209927C (en) 2002-08-13
JP2000106898A (ja) 2000-04-18
CZ252797A3 (cs) 1998-03-18
AU7497796A (en) 1997-05-29
US5994092A (en) 1999-11-30
AU702329B2 (en) 1999-02-18
CN1220779C (zh) 2005-09-28
HUP9801439A3 (en) 2002-01-28
MX9705109A (es) 1998-06-30
NO973159L (no) 1997-09-08
ES2100131B1 (es) 1998-02-16
BR9607092A (pt) 1997-11-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Marsh Metabolism of d-glucuronolactone in mammalian systems. Identification of d-glucaric acid as a normal constituent of urine
Roovers et al. An improved method for measuring human blood bile acids
Antenucci et al. Enzymic degradation of. alpha.-and. beta.-cyclodextrins by Bacteroides of the human colon
Hove et al. Faecal DL-lactate concentration in 100 gastrointestinal patients
Fernandes et al. Branching enzyme-deficiency glycogenosis: studies in therapy.
Grupp et al. Metabolism of hydrogenated palatinose, an equimolar mixture of α-D-glucopyranosido-1, 6-sorbitol and α-D-glucopyranosido-1, 6-mannitol
Guerri et al. Alcohol and acetaldehyde in rat's milk following ethanol administration
Zilliken et al. The Nonulosaminic Acids: Neuraminic Acids and Related Compounds (Sialic Acids)
JP2002528063A (ja) 甘味料
EA000684B1 (ru) ПРИМЕНЕНИЕ β-D-ГАЛАКТОПИРАНОЗИЛ-D-КСИЛОЗЫ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ КОМПОЗИЦИЙ И РАСТВОРОВ, ПРЕДНАЗНАЧЕННЫХ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЛАКТАЗЫ КИШЕЧНИКА
Lennartson et al. Quantitation of a urinary tetrasaccharide by gas chromatography and mass spectrometry
Rastrelli et al. Studies on the constituents of Amaranthus caudatus (Kiwicha) seeds. Isolation and characterization of seven new triterpene saponins
DuBois et al. Diterpenoid sweeteners. Synthesis and sensory evaluation of biologically stable analogs of stevioside
Chang Acid glycohydrolase in Chinese hamster with spontaneous diabetes. I. Depressed levels of renal α-galactosidase and β-galactosidase
Saatov et al. Distribution of phytoecdysteroids in plants of Uzbekistan and the possibility of using drugs based on them in neurological practice
Percheron et al. Mammalian β-d-mannosidase and β-mannosidosis
Rana et al. Structures of the sialylated oligosaccharide chains in swine tracheal mucin glycoproteins.
MXPA97005109A (en) USE DEß-D-GALACTOPIRANOSIL-D-XYLOSES FOR THE PREPARATION OF COMPOSITIONS AND DISSOLUTIONS INTENDED FOR THE EVALUATION OF INTESTINAL LACTASE, AND PROCEDURE FOR YOUR OBTENC
Kienzler et al. Pharmacokinetics of mono-3′-and mono-4′-0-(β-hydroxyethyl)-rutoside derivatives, after single doses of Venoruton powder in healthy volunteers
Sieben et al. Studies on isomaltitol
Sugawara et al. Thyroid hormone formation catalyzed by human thyroid peroxidase: a new and physiological measurement of thyroid peroxidase
Currie Determination of purines in the presence of proteins: steady-state levels of xanthine plus hypoxanthine in rat liver
Higham et al. Effects of lactate dehydrogenase on fissure caries in rats
US20030087841A1 (en) Disaccharide derivatives for treating hyperglycaemia
Miguel Fatty acid and sterol synthesis by rat small intestine in vitro

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): RU