SI9820009A - Novi etilaminski derivati - Google Patents

Novi etilaminski derivati Download PDF

Info

Publication number
SI9820009A
SI9820009A SI9820009A SI9820009A SI9820009A SI 9820009 A SI9820009 A SI 9820009A SI 9820009 A SI9820009 A SI 9820009A SI 9820009 A SI9820009 A SI 9820009A SI 9820009 A SI9820009 A SI 9820009A
Authority
SI
Slovenia
Prior art keywords
compound
carbon atoms
compounds
propylaminopentane
ring
Prior art date
Application number
SI9820009A
Other languages
English (en)
Inventor
Fumio Yoneda
Joseph Knoll
Hironori Ode
Masatoshi Sakae
Masanori Katurada
Toshiaki Moto
Takashi Ando
Seiichiro Shimazu
Kazue Takahata
Michitaro Fujimoto
Original Assignee
Fujimoto Brothers Co., Ltd.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Fujimoto Brothers Co., Ltd. filed Critical Fujimoto Brothers Co., Ltd.
Publication of SI9820009A publication Critical patent/SI9820009A/sl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/77—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D307/78—Benzo [b] furans; Hydrogenated benzo [b] furans
    • C07D307/79—Benzo [b] furans; Hydrogenated benzo [b] furans with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D307/81—Radicals substituted by nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/24—Antidepressants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C211/00—Compounds containing amino groups bound to a carbon skeleton
    • C07C211/01—Compounds containing amino groups bound to a carbon skeleton having amino groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C211/26—Compounds containing amino groups bound to a carbon skeleton having amino groups bound to acyclic carbon atoms of an unsaturated carbon skeleton containing at least one six-membered aromatic ring
    • C07C211/30—Compounds containing amino groups bound to a carbon skeleton having amino groups bound to acyclic carbon atoms of an unsaturated carbon skeleton containing at least one six-membered aromatic ring the six-membered aromatic ring being part of a condensed ring system formed by two rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C217/00—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C217/54—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having etherified hydroxy groups bound to carbon atoms of at least one six-membered aromatic ring and amino groups bound to acyclic carbon atoms or to carbon atoms of rings other than six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton
    • C07C217/56—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having etherified hydroxy groups bound to carbon atoms of at least one six-membered aromatic ring and amino groups bound to acyclic carbon atoms or to carbon atoms of rings other than six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton with amino groups linked to the six-membered aromatic ring, or to the condensed ring system containing that ring, by carbon chains not further substituted by singly-bound oxygen atoms
    • C07C217/60—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having etherified hydroxy groups bound to carbon atoms of at least one six-membered aromatic ring and amino groups bound to acyclic carbon atoms or to carbon atoms of rings other than six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton with amino groups linked to the six-membered aromatic ring, or to the condensed ring system containing that ring, by carbon chains not further substituted by singly-bound oxygen atoms linked by carbon chains having two carbon atoms between the amino groups and the six-membered aromatic ring or the condensed ring system containing that ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C233/00—Carboxylic acid amides
    • C07C233/01—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C233/02—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having nitrogen atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to carbon atoms of unsubstituted hydrocarbon radicals
    • C07C233/04—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having nitrogen atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to carbon atoms of unsubstituted hydrocarbon radicals with carbon atoms of carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton
    • C07C233/05—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having nitrogen atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to carbon atoms of unsubstituted hydrocarbon radicals with carbon atoms of carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton having the nitrogen atoms of the carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/04—Indoles; Hydrogenated indoles
    • C07D209/08—Indoles; Hydrogenated indoles with only hydrogen atoms or radicals containing only hydrogen and carbon atoms, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/04—Indoles; Hydrogenated indoles
    • C07D209/10—Indoles; Hydrogenated indoles with substituted hydrocarbon radicals attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D209/14—Radicals substituted by nitrogen atoms, not forming part of a nitro radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D317/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D317/08—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3
    • C07D317/44—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D317/46—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems condensed with one six-membered ring
    • C07D317/48—Methylenedioxybenzenes or hydrogenated methylenedioxybenzenes, unsubstituted on the hetero ring
    • C07D317/50—Methylenedioxybenzenes or hydrogenated methylenedioxybenzenes, unsubstituted on the hetero ring with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to atoms of the carbocyclic ring
    • C07D317/58—Radicals substituted by nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D319/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D319/10—1,4-Dioxanes; Hydrogenated 1,4-dioxanes
    • C07D319/14—1,4-Dioxanes; Hydrogenated 1,4-dioxanes condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D319/16—1,4-Dioxanes; Hydrogenated 1,4-dioxanes condensed with carbocyclic rings or ring systems condensed with one six-membered ring
    • C07D319/18—Ethylenedioxybenzenes, not substituted on the hetero ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D333/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
    • C07D333/50—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D333/52—Benzo[b]thiophenes; Hydrogenated benzo[b]thiophenes
    • C07D333/54—Benzo[b]thiophenes; Hydrogenated benzo[b]thiophenes with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D333/58—Radicals substituted by nitrogen atoms

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Indole Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

Opisane so spojine s splošno formulo (I) kjer je R1 vodik, hidroksil, nižji alkoksi ali halogen; R2 je alkil z 2 do 5 atomi ogljika; R3 je vodik, alkil z 2 do 5 atomi ogljika, alkil karbonil z 2 do 5 atomi ogljika, aril s 6 do 10 atomi ogljika ali aril alkil s 7 do 11 atomi ogljika, obroč A je biciklična spojina, ki obstoji iz vsaj enega benzenovega obroča in lahko vsebuje nasičen ali nenasičen 5- ali 6-členski obroč, ki lahko ima heteroatome ali pa lahko nima heteroatomov, pod pogojem, da kadar je obroč A indol ali 1,3-benzodioksol, R2 in R3 istočasno ne predstavljata člena z dvema atomoma ogljika, kadar pa je R3 vodik, je obroč A biciklična spojina, različna od indola in benzo(b)tiofena, R2 pa je alkil s 3 do 5 atomi ogljika, in njihove farmacevtsko sprejemljive kislinske adicijske soli. Te spojine so obetajoče kot psihotropna zdravila, antidepresivi, zdravila za Parkinsonovo bolezen in/ali zdravila za Alzheimerjevo bolezen.ŕ

Description

FUJIMOTO BROTHERS CO., LTD.
Novi etilaminski derivati
Področje izuma
Predloženi izum se nanaša na nove etilaminske derivate, ki obetajo kot psihotropna zdravila, antidepresivi, zdravila za Parkinsonovo bolezen in/ali zdravila za Alzheimerjevo bolezen.
Ozadje izuma
Številni etilaminski derivati so že bili opisani v mnogih publikacijah. Npr. 6-(2aminoetil)benzoksazolinonski derivati so opisani kot zdravila proti zaskrbljenosti in zdravila za odpoved srca v EP 110,781, aminoalkilbenzoksazinonski derivati pa so opisani kot koristna zdravila za poškodbe centralnega živčnega sistema v FR 2,035,749. Nadalje so alkilamini, ki so strukturno podobni spojinam v smislu predloženega izuma, opisani kot psihotropna zdravila v JP preizkušeni objavi 0699,420. Ker pa imajo sproščevalne učinke za premestitev kateholaminov z njihovega mesta skladiščenja na centralni živčni sistem, zlahka povzročijo sproščanje prebitnih kateholaminov z mesta skladiščenja, kot sinaptičnega mehurčka itd. Torej je indicirano, da imajo stranske učinke, kot nevrotoksičnost, podobno učinkom stimulantov, nenormalno obnašanje (vzburjenje, ki se pokaže v visoki dozi, in povečanje intersignalne reakcije na kondicionirano izognitveno nalogo) ipd. Kontinuimo dajanje zdravil, ki povečajo sproščanje prebitnih kateholaminov, povzroči zmanjšanje kateholaminergičnega receptorja. Torej se odziv pacientov na zdravila postopoma zmanjšuje in kot rezultat ne morejo doseči zadostnega terapevtskega učinka. Tako so neprimerni kot zdravila za Parkinsonovo bolezen in Alzheimerjevo bolezen, za kateri je potrebno dolgo kontinuimo zdravljenje.
Po drugi strani so opisani fenetilaminski derivati v WO 88/2254 kot psihotropna zdravila itd. Ti fenetilaminski derivati imajo učinek povečanja kateholaminergične aktivnosti (CAE učinek: učinek povečanja sproščanja kateholamina s pomnožitvijo od membranskega potenciala odvisne eksocitoze), ki bazira na novem mehanizmu, ki je različen od gornjega sproščevalnega učinka za premestitev kateholamina z njihovega skladiščenja [Life Sci., 58, 945-952 (1996)]. Vendar njihove spojine ne morejo razložiti učinka, ki poveča intersignalno reakcijo na kondicionirano izognitveno nalogo, ki je indikator nenormalnega obnašanja. Zato je bil potreben razvoj zdravil, ki imajo visoko selektivnost za CAE učinek.
Razvoj spojin, ki imajo malo stranskih učinkov in so obetavna zdravila kot psihotropna zdravila, antidepresivi, zdravila za Parkinsonovo bolezen, zdravila za Alzheimerjevo bolezen ipd., je bil težko pričakovan in namen predloženega izuma je, da izpolnimo to pričakovanje.
Kratek opis izuma
Mi kot avtorji ocenjujemo, da nevtrotoksičnost na centralnem živčnem sistemu in nenormalno obnašanje zaradi fenetilaminskih derivatov povzroči (ali je v zvezi) strukturna podobnost s tistimi izmed stimulantov, kot sta amfetamin in metamfetamin, in smo prizadevno raziskovali, da smo dosegli namen predloženega izuma. Kot rezultat smo ugotovili, da imajo določene vrste specifičnih novih etilaminskih derivatov, ki so različni od stimulantov v strukturi, in njihove kislinske adicijske soli visoko selektivnost za učinek povečanja kateholaminergične aktivnosti (CAE učinek) in dodelali predloženi izum, katerega namen je bil, da predložimo psihotropna zdravila, antidepresive, zdravila za Parkinsonovo bolezen in/ali zdravila za Alzheimerjevo bolezen, ki imajo malo stranskih učinkov, kot nevrotoksičnost na centralni živčni sistem, nenormalno obnašanje ipd.
Predloženi izum se nanaša na nove etilaminske derivate s formulo (I):
R
R3 (I) kjer je R1 vodik, hidroksil, nižji alkoksi ali halogen; R2 je alkil z 2 do 5 atomi ogljika; R3 je vodik, alkil z 2 do 5 atomi ogljika, alkilkarbonil z 2 do 5 atomi ogljika, aril s 6 do 10 atomi ogljika ali arilalkil s 7 do 11 atomi ogljika; obroč A je biciklična spojina, ki obstoji iz vsaj enega benzenovega obroča in lahko vsebuje nasičen ali nenasičen 5ali 6-členski obroč, ki lahko ima heteroatome ali pa nima heteroatomov, pod pogojem, da kadar je obroč A indol ali 1,3-benzodioksol, R2 in R3 istočasno ne tvorita člena z 2 atomoma ogljika, in kadar je R3 vodik, je obroč A biciklična spojina, različna od indola in benzo[b]tiofena, R2 pa je alkil s 3 do 5 atomi ogljika, in na njihove farmacevtsko sprejemljive kislinske adicijske soli. Predloženi izum se nanaša tudi na zdravila, kot psihotropna zdravila, antidepresive, zdravila za Parkinsonovo bolezen, zdravila za Alzheimerjevo bolezen ipd., kjer so aktivne komponente te spojine.
Kislinske adicijske soli naj bi bile prednostno farmacevtsko sprejemljive soli. Primeri so soli z anorganskimi kislinami, kot klorovodikovo kislino, žveplovo kislino, bromovodikovo kislino, dušikovo kislino, metansulfonsko kislino ipd., in soli z organskimi kislinami, kot glukonsko kislino, vinsko kislino, maleinsko kislino, filmarjevo kislino, jantarno kislino, jabolčno kislino, citronsko kislino, mandljevo kislino itd..
Nižji alkoksi v formuli (I) pomeni alkoksi z 1 do 4 atomi ogljika. Vključuje npr. metoksi, etoksi, n-propoksi, izopropoksi, n-butoksi, izobutoksi, terc.butoksi ipd.
Konkretni primeri obroča A so naftalen, indol, 1,3-benzodioksol, 1,4-benzodioksan, indan, inden, benzofuran, benzotiofen, 2,3-dihidrobenzofuran, dihidronaftalen, tetralin ipd. Substituenti so lahko prisotni v katerihkoli legah v obroču A.
Opis prednostnih izvedb
Posebno prednostne spojine s formulo (I) so l-(2-naftil)-2-propilaminopentan, 1(indol-3-il)-2-propilaminopentan, l-(benzofuran-2-il)-2-propilaminopentan, 1benzodioksol-5-il)-2-propilaminopentan ali l-(benzodioksol-4-il)-2propilaminopentan.
Nobena od spojin v smislu predloženega izuma ni opisana v katerikoli literaturi, lahko pa jih pripravimo po naslednjih postopkih.
[Pot 1]
Nitro spojine s formulo (II):
7 ,, kjer je R vodik, hidroksil, nižji alkoksi ali halogen; R je alkil z 2 do 5 atomi ogljika; obroč A je biciklična spojina, ki obstoji iz vsaj enega benzenovega obroča in lahko vsebuje nasičen ali nenasičen 5- ali 6-členski obroč, ki lahko ima heteroatome ali nima heteroatomov, in redukcijsko sredstvo, kot litijev aluminijev hidrid, presnavljamo v inertnem topilu, kot tetrahidrofuranu (THF), 1 do 200 ur pri temperaturi v območju od sobne temperature do temperature refluksa, da dobimo aminske spojine s formulo (III):
• i 9 kjer imajo R , R' in obroč A enak pomen, kot je definiran v gornji formuli (I).
Izmed aminskih spojin, dobljenih s predloženim postopkom, tvorijo spojine, kjer je obroč A biciklična spojina, različna od indola in benzo[b]tiofena, R2 pa je alkil s 3 do 5 atomi ogljika, del novih spojin v smislu predloženega izuma. Te aminske spojine kot tudi druge spojine s formulo (III) lahko uporabimo kot intermediate za pripravo drugih novih spojin v smislu predloženega izuma.
Pri predloženem izumu zgoraj omenjene spojine s formulo (III) po želji presnavljamo s kislinskimi halidi s formulo (IV):
O n
r4—c—x kjer je R4 alkil z 1 do 4 atomi ogljika ali aril s 6 do 10 atomi ogljika; X je halogen, v prisotnosti bazičnega kondenzacijskega sredstva, kot trietilamina ali piridina v inertnem topilu, kot THF, kloroformu, ogljikovem tetrakloridu ipd., 1 do 48 ur pri temperaturi v območju od sobne temperature do temperature refluksa, da dobimo spojine s formulo (V):
(V) kjer imajo R1, R, R4 in obroč A enak pomen, kot je definirano zgoraj.
Tako dobljene spojine, kjer je R4 alkil z 1 do 4 atomi ogljika, tvorijo del predloženih novih spojin v smislu izuma. Te spojine kot tudi druge spojine s formulo (V) lahko uporabimo kot intermediate za pripravo drugih novih spojin v smislu predloženega izuma. Vendar so izmed spojin s formulo (V), kjer je R4 alkil z 1 do 4 atomi ogljika, izpuščene spojine, kjer je obroč A indol ali 1,3-benzodioksol, R je alkil z 2 atomoma ogljika, t.j. etil, in R3 ne more imeti enega atoma ogljika, t.j. biti metil, ker presegajo obseg predloženega izuma.
Kot želimo pri predloženem izumu, presnavljamo te spojine z gornjo formulo (V) in redukcijska sredstva, kot litijev aluminijev hidrid ali aluminijev hidrid, v inertnem topilu, kot THF ali etru, 1 do 48 ur pri temperaturi v območju od sobne temperature do temperature refluksa, da dobimo nove etilaminske derivate s formulo (I).
(I)
Če želimo, nadalje te etilaminske spojine prevedemo v njihove farmacevtsko sprejemljive soli.
Zato je pri spojinah v smislu predloženega izuma s formulo (I), dobljenih po postopku poti 1, R vodik, hidroksil, nižji alkoksi alkil ali halogen; R je alkil z 2 do 5 atomi ogljika; R3, ki kaže konkretno vse vrste substituentov na amino dušikovem atomu produktov, dobljenih po vsakem od gornjih postopkov, vodik, alkil z 2 do 5 atomi ogljika, alkil karbonil z 2 do 5 atomi ogljika ali arilalkil s 7 do 11 atomi ogljika; obroč A je biciklična spojina, ki obstoji iz vsaj enega benzenovega obroča in lahko vsebuje nasičen ali nenasičen 5- ali 6-členski obroč, ki ima lahko heteroatome ali lahko nima heteroatomov, pod pogojem, da kadar je obroč A indol ali 1,3-benzodioksol, R' in R istočasno ne tvorita členov z 2 atomoma ogljika, kadar pa je R3 vodik, je obroč A biciklična spojina, različna od indola in benzo[b]tiofena, R' pa je alkil s 3 do 5 atomi ogljika.
Spojine s formulo (II), uporabljene kot izhodni materiali pri postopku poti 1, lahko sintetiziramo po postopku, opisanem v Journal of Medicinal Chemistry, 35, 280-285 (1992). T.j. spojino s formulo (VI):
II
O
kjer imata R1 in obroč A enak pomen, kot je definirano zgoraj pri formuli (I), kondenziramo z nitro alkanom, da dobimo spojine s splošno formulo (II).
[Pot 2]
Nadalje lahko spojine v smislu predloženega izuma s pridom pripravimo po naslednjem postopku poti 2. T.j. ketonsko spojino s formulo (VII):
kjer je R1 vodik, hidroksil, nižji alkoksi ali halogen; R2 je alkil z 2 do 5 atomi ogljika; obroč A je biciklična spojina, ki obstoji iz vsaj enega benzenovega obroča in lahko vsebuje nasičen ali nenasičen 5- ali 6-členski obroč, ki ima lahko heteroatome ali lahko nima heteroatomov, presnovimo z aminsko spojino s formulo (VIII):
NH, (VIII) kjer je R3 alkil z 2 do 5 atomi ogljika, aril s 6 do 10 atomi ogljika ali arilalkil s 7 do 11 atomi ogljika, v prisotnosti redukcijskega sredstva, kot natrijevega triacetoksiborohidrida, natrijevega borohidrida ali litijevega aluminijevega hidrida, v inertnem topilu, kot THF, diklorometanu ali 1,2-dikloroetanu, v času 1 do 200 ur pri temperaturi v območju od sobne temperature do temperature refluksa, da dobimo etilaminski derivat s formulo (I).
V skladu s tem postopkom je mogoče dobiti spojine s formulo (I), kjer je R1 vodik, hidroksil, nižji alkoksi ali halogen; R2 je alkil z 2 do 5 atomi ogljika; R3 je vodik, alkil z 2 do 5 atomi ogljika, aril s 6 do 10 atomi ogljika ali arilalkil s 7 do 11 atomi ogljika; obroč A je biciklična spojina, ki obstoji iz vsaj enega benzenovega obroča in lahko vsebuje nasičen ali nenasičen 5- ali 6-členski obroč, ki lahko ima heteroatome ali pa nima heteroatomov. Vendar pa izum izključuje spojine s formulo (I), kjer je obroč A indol ali 1,3-benzodioksol in predstavljata R in R istočasno člena z dvema atomoma ogljika.
Spojine s formulo (VII), ki so izhodni materiali, lahko sintetiziramo po postopku, opisanem v Journal of Medicinal Chemistry, 29, 2009-2015 (1986).
Spojine v smislu predloženega izuma in njihove kislinske adicijske soli imajo CAE učinek. Zato povečajo sproščanje kateholamina v modulaciji. Torej jih lahko uporabimo kot zdravila, ki so učinkovita kot zdravila za Parkinsonovo bolezen, antidepresivi, psihotropna zdravila, zdravila za Alzheimerjevo bolezen ipd. in imajo malo stranskih učinkov.
Spojine v smislu predloženega izuma nimajo učinkov, ki se običajno pojavijo pri običajnih zdravilih za Parkinsonovo bolezen, antidepresivih ipd. T.j. njihove spojine nimajo učinka inhibiranja monoamin oksidaze, učinka inhibiranja navzema kateholamina, sproščevalnega učinka za premestitev kateholaminov z njihovega prostora skladiščenja, afinitete za različne receptorje na živčni celici itd. Vendar so te spojine znatno izboljšale zmanjšano sposobnost učenja podgan, ki so dobile injekcijo kateholaminskega depletorskega tetrabenazina. Učinek spojin v smislu predloženega izuma temelji na CAE učinku, kije moduliran fiziološko povečujoči učinek sproščanja kateholamina s pomnožitvijo od membranskega potenciala odvisne eksocitoze (tj. povečanje navedenega stimulansa med potencialom učinka in sproščanjem transmiterja). S farmakološkimi poskusi, ki so specifično opisani v primerih 30-32, se je pokazalo, da imajo spojine v smislu predloženega izuma visoko selektivne CAE učinke. T.j. bilo je potrjeno, da spojine v smislu predloženega izuma nimajo sproščevalnega učinka za premestitev kateholaminov z njihovega prostora skladiščenja, učinka inhibiranja monoaminoksidaze in afinitete za različne receptorje na živčni celici. Nadalje so spojine v smislu predloženega izuma povzročile povečanje počasnih notranjih Ca2+ tokov v sinoavrikulamih vlaknih srca žabe. Ko smo merili količine kateholaminov, sproščenih iz možganskega debla podgan v mirujočem potencialu in v elektrostimulaciji, jih spojine v smislu predloženega izuma niso spremenile v mirujočem potencialu, ampak znatno povečale v elektrostimulaciji. Ti rezultati kažejo, da imajo spojine v smislu predloženega izuma CAE učinek.
CAE učinek je učinek povečanja sproščanja kateholamina s pomnožitvijo od membranskega potenciala odvisne eksocitoze, kot je omenjeno zgoraj, in sledi fiziološkemu mehanizmu, v katerem se pokaže učinkovitost v odzivu na potencial učinkovitosti. Tako je ta mehanizem popolnoma različen od običajnih monoamin oksidaznih inhibitorjev, inhibitorjev navzema kateholamina, amfetaminu podobnih stimulantov in fenetilaminu podobnih sproščevalnih snovi za premestitev kateholaminov z njihovega prostora skladiščenja. Spojine v smislu predloženega izuma imajo specifične spektre učinkov, ki ne sproščajo prebitnih kateholaminov, ne povzročijo nenadnega povečanja njihove visoke koncentracije in ne inducirajo deplecije kateholaminov na nevroterminalih. Torej spojine v smislu predloženega izuma težko povzročijo zmanjšanje in poškodbo kateholaminergičnega receptorja pri obstoječem prebitku kateholaminov. Zato spojine v smislu predloženega izuma le malo zmanjšajo odziv pacientov in imajo malo stranskih učinkov, kot so povečanje nenormalnega obnašanja (vzburjenje), nevrotoksičnost na centralnem živčevju ipd. Torej so spojine v smislu predloženega izuma zelo vame in so bolj učinkovite kot antidepresivi, psihotropna zdravila, zdravila za Parkinsovo bolezen, zdravila za Alzheimerjevo bolezen itd. Tako so spojine v smislu predloženega izuma koristne kot spojine, ki zadržijo svojo učinkovitost pri dolgotrajnem kontinuimem zdravljenju.
Kadar spojine v smislu predloženega izuma in njihove farmacevtsko sprejemljive kislinske adicijske soli uporabimo kot zdravila, te spojine običajno pomešamo z nosilcem, vehiklom, razredčilom, solubilizimim sredstvom ipd. Te spojine lahko dajemo oralno ali parenteralno kot tablete, praške, granule, kapsule, sirupe, injekcije ipd. Oralna doza teh spojin za odraslega je običajno med 0,1 in 100 mg/dan in jih dajemo enkrat ali večkrat dnevno. Te doze pa se lahko spremenijo s stanjem, starostjo, telesno težo ipd. pacientov.
Spojine v smislu predloženega izuma so bolj konkretno navedene spodaj. Seveda pa velja, da predloženi izum nanje ni omejen.
Primer 1
Sinteza l-(2-naftil)-2-aminopentan hidroklorida (spojina št. 1)
Raztopino 7,70 g (31,9 mmol) l-(2-naftil)-2-nitro-l-pentena v tetrahidrofuranu (THF) (30 ml) dodajamo 1 uro po kapljicah k suspenziji 2,42 g (63,8 mmol) litijevega aluminijevega hidrida (L1AIH4) v THF (40 ml) ob hlajenju z ledom in zmes mešamo preko noči pri sobni temperaturi. Po tem, ko se prebitni L1AIH4 razkroji z destilirano vodo ob hlajenju z ledom, zmes filtriramo in filtrat koncentriramo. Nato dodamo koncentratu eter (100 ml) in 3-krat ekstrahiramo z 0,5 N klorovodikovo kislino (50 ml). Dobljeno vodno fazo naalkalimo z 28% vodnim amoniakom in 3-krat ekstrahiramo z etrom (100 ml). Dobljeno organsko fazo posušimo nad brezvodnim natrijevim sulfatom, koncentriramo in čistimo s flash kolonsko kromatografijo. Za eluiranje topila uporabimo zmes kloroforma/metanola (10:1). Dobimo 5,36 g (79%) 1(2-naftil)-2-aminopentana kot svetlo rumeno olje.
Gomje olje raztopimo v brezvodnem etru in pretvorimo v hidroklorid z etrsko raztopino, nasičeno s klorovodikovo kislino, tal.: 175,0-177,0 °C
MS 214 [M+l]+ (m/z)
NMR(CDCb) 0,60-1,20 (3H, m), 1,30-2,10 (4H, m), 2,50-4,00 (3H, m),
7,20-8,10 (7H, m), 8,20-9,30 (3H, br)
IR 2950, 2910, 1585, 1500, 820, 760 (cm*1)
Elementna analiza: kot CuH^NeHCl
Izrač.: C:72,12, H:8,07, N:5,61 (%)
Ugot.: C:72,ll, H:8,06, N:5,45 (%).
Primer 2
Sinteza N-[2-l-(2-naftil)pentil]propionamida (spojina št. 2)
K brezvodni THF (40 ml) raztopini zmesi 5,36 g (25,1 mmol) l-(2-naftil)-2-aminopentana, dobljenega v primem 1, in 3,81 g (37,7 mmol) trietilamina dodamo po kapljicah raztopino 4,64 g (50,1 mmol) propionil klorida v brezvodnem THF (10 ml) pod 0 °C. Zmes mešamo preko noči pri sobni temperaturi in koncentriramo. Kondenzat izperemo s 5% klorovodikovo kislino, 5% natrijevim karbonatom in nasičeno raztopino natrijevega klorida. Surovi produkt sušimo nad brezvodnim natrijevim sulfatom, koncentriramo in čistimo s flash kolonsko kromatografijo. Za eluiranje topila uporabimo zmes kloroforma/heksana (5:2). N-[2-(l-(2-naftil))pentilpropionamid prekristaliziramo iz etra-heksana, da dobimo 5,48 g (81,0%) kot bele kristale.
tal.: 92,0 °C
MS 269 [M]+ (m/z)
NMR(CDCb) 0,70-1,27 (6H, m), 1,27-1,85 (4H, m), 2,10 (2H, q, J=7,8 Hz),
2,93 (2H, D, J=7,2 Hz), 3,90-4,75 (IH, br), 5,20-5,75 (IH, m),
7,20-8,10 (7H, m)
IR 3280, 2950, 1640, 1540 (cm'1)
Elementna analiza: kot CisH23NO Izrač.: C:80,26, H:8,61, N:5,20 (%)
Ugot.: C:80,09, H:8,57, N:5,15 (%).
IR
Primer 3
Sinteza l-(2-naftil)-2-propilaminopentan hidroklorida (spojina št. 3)
2,70 g (71,1 mmol) L1AIH4 suspendiramo v 30 ml brezvodnega etra in po kapljicah k temu dodamo raztopino 2,71 g (20,3 mmol) brezvodnega aluminijevega klorida v brezvodnem etru (20 ml) ob hlajenju z ledom, da pripravimo brezvodno etrsko raztopino aluminijevega hidrida. K temu po kapljicah ob hlajenju z ledom dodamo raztopino N-[2-(l-(2-naftil))pentil]propionamida (5,48 g, 20,3 mmol), dobljeno v primeru 2, v brezvodnem etru (40 ml), zmes nekaj časa mešamo pri 0 °C in nato mešamo preko noči pri sobni temperaturi. Po reakciji k zmesi po malem dodajamo destilirano vodo. Zmes naalkalimo s 5 N natrijevim hidroksidom, filtriramo in filtrat koncentriramo. Nato koncentratu dodamo eter (100 ml) in zmes ekstrahiramo 4-krat z 0,5 N klorovodikovo kislino (70 ml). Tako dobljeno vodno fazo naalkalimo z 28% vodnim amoniakom in 3-krat ekstrahiramo z etrom (100) ml. Dobljeno organsko fazo sušimo nad brezvodnim natrijevim sulfatom, koncentriramo in čistimo s flash kolonsko kromatografijo. Za eluimo topilo uporabimo zmes kloroforma/metanola (30:1). Dobimo 2,40 g l-(2-naftil)-2-propilaminopentana (dobitek 46%) kot svetlo rumeno olje.
Ob uporabi enakega postopka, kot je naveden v primeru 1, pretvorimo l-(2-naftil)-2propilaminopentan v hidroklorid. tal. : 181,5-182,5 °C
MS 256 [M+lf (m/z)
NMR(CDC13) 0,95 (6H, t, J=7,0 Hz), 1,15-2,40 (6H, m), 2,60-4,00 (5H, m),
7,25-8,10 (7H, m), 9,30-10,15 (2H, br)
2975, 2880, 2800, 2750, 1595, 1465, 765 (cm'1)
Elementna analiza: kot Ci8H25N«HC1 Izrač.: C:74,07, H:8,98, N:4,80 (%) Ugot.: C:73,98, H:8,94, N:4,87 (%).
Primer 4
Sinteza soli maleinske kisline l-(2-naftil)-2-propilaminopentana (spojina št. 4)
K 0,7 g (2,7 mmol) l-(2-naftil)-2-propilaminopentana, dobljenega v primeru 3, dodamo raztopino 0,15 g (1,3 mmol) maleinske kisline v etanolu (2 ml). Zmes pustimo stati pri okoli 5 °C. Oborjeni produkt filtriramo in dobimo sol maleinske kisline l-(2naftil)-2-propilaminopentana (0,33 g, dobitek 32%).
tal.: 84,0-85,5 °C
MS 256 [M+l]+ (m/z)
NMR(CDC13) 0,92 (6H, t, J=6,0 Hz), 1,15-2,20 (6H, m), 2,75-3,90 (5H, m),
6,24 (2H, s), 7,15-8,10 (7H, m)
IR 2980, 2890, 2820, 2770, 1600, 1520, 1405, 1380, 880 (cm'1)
Elementna analiza: kot Cig^N^H^
Izrač.: C:71,13, H:7,87, N:3,77 (%)
Ugot.: C:71,30, H:7,92, N:3,77 (%).
Primer 5
Spojino, dobljeno po primeru 1, ali njene derivate presnovimo s kislinskim kloridom. Ob uporabi enakih postopkov, kot je navedeno v primerih 2 in 3, dobimo ustrezne etil aminske derivate kot hidrokloride; spojine št. 5-17 so prikazane v tabeli 1, fizikokemični podatki gornjih spojin št. 5-17 pa so prikazani v tabelah 2 in 3.
Tabela l Spojine št. 5-17
Spojina št.
obroč A r2
Dobitek
(%)
Spojina št. 5 1-naftil H -ch2ch2ch3 -ch2ch2ch3 43
Spojina št. 6 2-naftil H -ch2ch2ch3 -ch2ch3 33
Spojina št. 7 2-naftil H -ch2ch2ch3 -ch2ch2ch2ch3 39
Spojina št. 8 2-naftil H -ch2ch2ch3 -CH2CH(CH3)2 28
Spojina št. 9 2-naftil H -ch2ch2ch3 -ch2ch2ch2ch2ch3 39
Spojina št. 10 2-naftil H -ch2ch3 -ch2ch2ch3 46
Spojina št. 11 2-naftil H -ch2ch2ch2ch3 -ch2ch2ch3 52
Spojina št. 12 2-naftil H -ch2ch2ch2ch2ch3 -ch2ch2ch3 30
Spojina št. 13 2-naftil H -ch2ch2ch3 -CH2CH2CH(CH3)2 26
Spojina št. 14 2-naftil H -ch2ch2ch3 -CH2C(CH3)3 38
Spojina št. 15 2-naftil 6-OCH3 -ch2ch2ch3 -ch2ch2ch3 32
Spojina št. 16 1-naftil 4-OCH3 -ch2ch2ch3 -ch2ch2ch3 37
Spojina št. 17 1-naftil 2-OCH3 -ch2ch2ch3 -ch2ch2ch3 14
Tabela 2. Fiziko-kemične lastnosti spojin Št. 5-11
Spojina št. 5 tal.: 107,5-109,0 °C
MS (m/z) 256 [M+l]+
NMR(CDC13: δ) 0,92 (6H, t, J=8,0 Hz), 1,10-2,45 (6H, m), 2,45-3,20 (2H, br),
3,20-4,50 (3H, m), 7,25-8,45 (7H, m), 9,20-10,15 (2H, br)
IR 2960,2870,2800,2750, 770 (cm'1)
Elementna analiza: kot Ci8H25N*HC1
Izrač.: C:74,07, H:8,98, N:4,80 (%)
Ugot: C:73,67, H:8,87, N:4,69 (%).
Spojina št. 6 tal.: 165,0-165,5 °C
MS (m/z)[M+l]+
NMR(CDC13:5) 0,65-1,10 (3H, m), 1,10-2,30 (7H, m), 2,65-4,10 (5H, m),
7,25-8,10 (7Η, m), 9,25-10,15 (2H, br)
IR 2960, 2830, 2800, 2740, 1565, 1455, 760 (cm'1)
Elementna analiza: kot CpH^N^HCl
Izrač.: C:73,49, H:8,71, N:5,04 (%)
Ugot.: C:73,26, H:8,55, N:4,96 (%).
Spojina št. 7 tal.: 141,5-142,5 °C
MS (m/z) 270 [M+l]+
NMR(CDC13:6) 0,65-1,15 (6H, m), 1,15-2,35 (8H, m), 2,50-4,00 (5H, m),
7.30- 8,10 (7H, m), 9,30-10,15 (2H, br)
IR 2960, 2870, 2770, 2730 (cm’1)
Elementna analiza: kot Ci9H27N«HCl
Izrač.: C:74,60, H:9,23, N:4,58 (%)
Ugot.: C:74,34, H:9,09, N:4,50 (%).
Spojina št. 8 tal.: 156,5-157,5 °C
MS (m/z) 270 [M+l]+
NMR(CDC13:6) 0,60-1,25 (9H, m), 1,25-2,10 (4H, m), 2,10-3,05 (3H, m),
3,05-4,00 (3H, m), 7,30-8,00 (7H, m), 9,20-10,00 (2H, br) IR 2960, 2860, 2790, 1585, 1470 (cm’1)
Elementna analiza: kot Ci9H27N»HCl
Izrač.: C:74,60, H:9,23, N:4,58 (%)
Ugot.: C:74,36, H:9,08, N:4,42 (%).
Spojina št. 9 tal.: 106,5-107,5 °C
MS (m/z) 284 [M+l]+
NMR(CDC13:5) 0,50-1,05 (6H, m), 1,05-2,35 (10H, m), 2,45-4,00 (5H, m),
7.30- 8,05 (7H, m), 9,15-10,15 (2H, br)
IR 2950, 2850, 2780, 1575, 1450, 810, 745, 475 (cm'1)
Elementna analiza: kot C2oH29N*HC1 Izrač.: C:75,09, H:9,45, N:4,38 (%)
Ugot.: C:74,78, H:9,23, N:4,22 (%).
Spojina št. 10 tal.: 180,5-182,0 °C
MS (m/z) 242 [M+lf
NMR(CDC13:5) 0,95 (3H, t, J=7,0Hz), 1,07 (3H, t, J=7,0Hz), 1,50-2,50 (4H, m), 2,60-4,00 (5H, m), 7,25-8,05 (7H, m), 9,20-10,15 (2H, br)
IR 2960, 2800, 2750, 1600, 1590, 1460, 820, 760 (cm'1)
Elementna analiza: kot Ci7H23N*HCl Izrač.: C:73,49, H:8,71, N:5,04 (%)
Ugot.: C:73,39, H:8,60, N:4,83 (%).
Spojina št. 11 tal.: 124,5-126,5 °C
MS (m/z) 70 [M+lf
NMR(CDC13:6) 0,65-2,45 (14H, m), 2,60-4,00 (5H, m),
7,30-8,10 (7H, m), 9,30-10,15 (2H, br)
IR 2950, 2860, 2790, 810 (cm'1)
Elementna analiza: kot Ci9H27N*HCl
Izrač.: C:74,60, H:9,23, N:4,58 (%)
Ugot.: C:74,40, H:9,08, N:4,43 (%).
Tabela 3. Fiziko-kemične lastnosti spojin št. 12-17
Spojina št. 12 tal.: 116,0-117,5 °C
MS (m/z) 284 [M+l]+
NMR(CDC13:0) 0,50-2,50 (16H, m), 2,50-4,00 (5H, m),
7,20-8,10 (7Η, m), 9,30-10,15 (2H, br)
IR 3420, 2950, 2850, 2790 (cm'1)
Elementna analiza: kot C2oH29N*HCl Izrač.: C:75,09, H:9,45, N:4,38 (%)
Ugot.: C:74,95, H:9,30, N:4,31 (%).
Spojina št. 13 tal.: 144,5-146,0 °C
MS (m/z) 284 [M+lf
NMR(CDC13:5) 0,50-1,15 (9H, m), 1,15-2,20 (7H, m), 2,40-4,10 (5H, m),
7,25-8,20 (7H, m), 9,25-10,15 (2H, br)
IR 2950, 2850, 2770, 1460 (cm'1)
Elementna analiza: kot C2oH29N«HCl Izrač.: C:75,09, H:9,45, N:4,38 (%)
Ugot.: C:74,87, H:9,28, N:4,03 (%).
Spojina št. 14 tal.: 159,0-161,0 °C
MS (m/z) 284 [M+lf
NMR(CDC13:6) 0,60-1,00 (3H, m), 1,25 (9H, s), 1,40-2,20 (4H, m), 2,40-3,30 (3H, m), 3,40-4,20 (2H, m), 7,25-8,00 (7H, m), 9,00-10,00 (2H, br)
IR 2940, 2850 (cm'1)
Elementna analiza: kot C2oH29N*HCl
Izrač.: C:75,09, H:9,45, N:4,38 (%)
Ugot.: C:74,66, H:9,27, N:4,18 (%).
Spojina št. 15 tal.: 186,0-186,5 °C
MS (m/z) 286 [M+l]*
NMR(CDC13:5) 0,95 (6H, t, >7,0 Hz), 1,20-2,45 (6H, m), 2,50-3,85 (5Η, m), 3,90 (3H, s), 6,95-7,95 (6H, m), 9,10-10,15 (2H, br) IR 2960, 2930, 2860, 2770, 1455, 1265, 1230, 1030 (cm'1)
Elementna analiza: kot C19H27NOHCI
Izrač.: C:70,90, H:8,77, N:4,35 (%)
Ugot: C:70,68, H:8,58, N:4,36 (%).
Spojina št. 16 tal.: 188,0-190,0 °C
MS (m/z) 286 [M+lf
NMR(CDC13:5) 0,92 (6H, t, J=7,0Hz), 1,15-2,45 (6H, m), 2,50-3,80 (5H, m),
3,97 (3H, s), 6,55-8,50 (6H, m), 9,25-10,15 (2H, br)
IR 2950, 2860, 2770, 1585, 1390, 1270, 1090 (cm'1)
Elementna analiza: kot C19H27NOHCI
Izrač.: C:70,90, H:8,77, N:4,35 (%)
Ugot.: C:70,53, H:8,60, N:4,38 (%).
Spojina št. 17 tal.: 133,5-135,0 °C
MS (m/z) 286 [M+l]+
NMR(CDC13:6) 0,50-1,20 (6H, m), 1,20-2,50 (6H, m), 2,60-3,30 (2H, m),
3,35-3,85 (3H, m), 3,94 (3H, s), 7,00-8,50 (6H, m)
9,15-10,10 (2H, br)
IR 2960, 2860, 2770, 1460, 1250 (cm'1)
Elementna analiza: kot C19H27NOHCI
Izrač.: C:70,90, H:8,77, N:4,35 (%)
Ugot.: C:70,55, H:8,56, N:4,22 (%).
Primer 6
Sinteza soli maleinske kisline l-(l-naftil)-2-propilaminopentana (spojina št. 18)
Ob uporabi enakega postopka, kot je naveden v primeru 4, iz 0,5 g (2,0 mmol) 1-(1naftil)-2-propilaminopentana, ki je prosta baza spojine št. 5, dobimo 0,40 g (1,1 mmol) soli maleinske kisline te spojine (55%).
tal.: 137,0-139,0 °C
MS 256 [M+l]+ (m/z)
NMR(CDC13) 0,90 (6H, t, >8,0 Hz), 1,10-2,20 (6H, m), 2,70-4,00 (5H, m), 6,34 (2H, s), 7,20-8,20 (7H, m), 8,30-10,00 (IH, br)
IR 2950, 1570, 1510, 1380, 1360 (cm'1)
Elementna analiza: kot Cig^N^H^
Izrač.: C:71,13, H:7,87, N:3,77 (%)
Ugot.: C:71,10, H:7,83, N:3,63 (%).
Primer 7
Sinteza l-(indol-2-il)-2-propilaminopentan hidroklorida (spojina št. 19)
Ob uporabi enakega postopka, kot je naveden v primerih 1-3, iz 4,94 g (21,5 mmol) 1(indoI-2-il))-2-nitro-l-pentena dobimo 1,43 g (5,1 mmol) naslovne spojine (24%). tal.: 61,0-62,0 °C
MS 244 [M]+ (m/z)
NMR(CDC13) 0,60-1,15 (6H, m), 1,15-1,90 (6H, m), 2,30-3,20 (5H, m),
6,20 (IH, s), 6,80-7,75 (4H, m)
IR 3278, 2948, 2918, 2850, 1449 (cm'1)
Elementna analiza: kot Ci6H24N2*HCl
Izrač.: C:68,43, H:8,61, N:9,97 (%)
Ugot.: C:68,00, H:8,83, N:9,77 (%).
Primer 8
Sinteza l-(indol-3-il)-2-propilaminopentan hidroklorida (spojina št. 20)
Ob uporabi enakega postopka, kot je naveden v primerih 1-3, iz 4,73 g (20,5 mmol) 1(indol-3-il))-2-nitro-l-pentena dobimo 0,46 g (1,6 mmol) naslovne spojine (8%).
tal.: 149,5-151,0 °C
MS 245 [M+lf (m/z)
NMR(CDC13) 0,50-1,15 (6H, m), 1,15-2,20 (6H, m), 2,30-4,40 (5H, m), 6,70-7,90 (5H, m), 8,50-9,90 (3H, m)
IR 3225, 2950, 2775, 1450, 740 (cm'1)
Elementna analiza: kot Χ,ΙΧΧ’ΗΟ
Izrač.: 0:68,43, H:8,97, N:9,97 (%)
Ugot.: 0:68,07, H:8,83, N:9,71 (%).
Primer 9
Sinteza l-(indol-4-il)-2-propilaminopentan hidroklorida (spojina št. 21)
Ob uporabi enakega postopka, kot je naveden v primerih 1-3, iz 5,47 g (23,8 mmol) 1 (indol-4-il))-2-nitro-l-pentena dobimo 0,23 g (0,8 mmol) naslovne spojine (3%). tal.: 151,0-152,0 °C
MS 244 [M]+ (m/z)
NMR(CDC13) 0,60-1,20 (6H, m), 1,20-2,10 (6H, m), 2,65-3,95 (5H, m),
6,60 (IH, d, >3,0 Hz), 6,80-7,60 (4H, m)
IR 3280, 2974, 2802, 1587, 1469, 1334, 1128, 1100, 778, 768 (cm'1)
Elementna analiza: kot ΟΐόΗ24Ν2·ΗΟ1 Izrač.: C:68,43, H:8,97, N:9,97 (%)
Ugot.: 0:67,95, H:8,74, N:9,90 (%).
Primer 10
Sinteza l-(indol-6-il)-2-propilaminopentan hidroklorida (spojina št. 22)
Ob uporabi enakega postopka, kot je naveden v primerih 1-3, iz 1,74 g (7,7 mmol) 1(indol-6-il))-2-nitro-l-pentena dobimo 0,054 g (0,2 mmol) naslovne spojine (3%). tal.: 172,0-173,0 °C
MS 244 [Mf (m/z)
NMR(CDCb) 0,68-1,12 (6H, m), 1,12-2,10 (6H, m), 2,65-3,80 (5H, m), 6,42 (IH, d, J=3,4 Hz), 6,92 (IH, d, J=8,0 Hz),
7,21 (IH, d, J=3,4 Hz), 7,36 (IH, s), 7,53 (IH, d, J=8,0 Hz)
IR 3250, 2967, 2824, 1574, 1458, 1353, 735 (cm'1)
Elementna analiza: kot Ci6H24N2*HCl Izrač.: C:68,43, H:8,97, N:9,97 (%)
Ugot.: C:68,22, H:8,82, N:9,92 (%).
IR
Primer 11
Sinteza l-(indol-7-il)-2-propilaminopentana (spojina št. 23)
Ob uporabi enakega postopka, kot je naveden v primerih 1-3, iz 7,43 g (32,3 mmol) 1(indol-7-il))-2-nitro-l-pentena dobimo 0,84 g (3,0 mmol) naslovne spojine (9%).
MS 244 [M]+ (m/z)
NMR(CDC13) 0,60-1,15 (6H, m), 1,15-2,00 (6H, m), 2,50-3,40 (5H, m),
6,48 (IH, d, J=3,0 Hz), 6,70-7,30 (3H, m)
7,21 (IH, dd, J=2,0, 6,0 Hz)
IR 2960, 2934, 2876, 1460, 1432, 1342, 794, 750 (cm'1)
Primer 12
Sinteza l-(5-kloroindol-3-il)-2-propilaminopentan hidroklorida (spojina št. 24)
Ob uporabi enakega postopka, kot je naveden v primerih 1-3, iz 6,91 g (26,1 mmol) 1(5-kloroindol-3-il))-2-nitro-l-pentena dobimo 1,30 g (4,1 mmol) naslovne spojine (16 %).
tal.: 66,0-67,0 °C
MS 279 [M+lf (m/z)
NMR(CDCb) 0,73-1,20 (6H, m), 1,20-2,20 (6H, m), 2,75-3,70 (5H, m), 6,95-7,95 (4H, m)
3226, 2962, 2870, 2795, 1579, 1458, 1099, 885, 800 (cm'1)
Elementna analiza: kot Ci6H23N2Cl«HCl Izrač.: C:60,95, H:7,67, N:8,89 (%) Ugot: C:60,l 1, H:7,48, N:8,77 (%).
Primer 13
Sinteza l-(benzofuran-2-il)-2-propilaminopentan hidroklorida (spojina št. 25)
Ob uporabi enakega postopka, kot je naveden v primeru 1-3, iz 7,54 g (98,6 mmol) 1(benzofuran-2-il)-2-nitro-l-pentena dobimo 1,51 g (5,4 mmol) naslovne spojine (5%). tal.: 135,0-136,0 °C
MS 264 [M+l]+ (m/z)
NMR(CDC13) 0,70-1,20 (6H, m), 0,70-2,40 (6H, m), 2,60-3,90 (5H, m),
6,67 (IH, s), 7,00-7,70 (4H, m), 9,10-10,20 (2H, br)
IR 2954, 2868, 2790, 2736, 2692, 1600, 1587, 1454, 771, 759 (cm'1)
Elementna analiza: kot Ci6H23NO«HCl Izrač.: C:68,19, H:8,58, N:4,97 (%)
Ugot.: C:67,94, H:8,48, N:5,16 (%).
Primer 14
Sinteza l-(l,3-benzodioksol-5-il)-2-aminopentan hidroklorida (spojina št. 26)
Ob uporabi enakega postopka, kot je naveden v primeru 1, iz 10,56 g (44,9 mmol) 1(l,3-benzodioksol-5-il))-2-nitro-l-pentena dobimo 7,12 g (34,4 mmol) naslovne spojine (77%).
tal.: 199,0-201,0 °C
MS 207 [M]+ (m/z)
NMR(CDC13) 0,60-1,95 (6H, m), 2,70-3,65 (5H, m), 5,93 (2H, s), 6,77 (3H, s), IR 3410, 2960, 2925, 2760, 1595, 1495, 1485, 1440, 1248, 1195,
1040, 928 (cm'1)
Elementna analiza: kot C12Hi7NO2«HCl
Izrač.: C:59,13, H:7,03, N:5,75 (%)
Ugot.: C:59,28, H:7,32, N:5,80 (%).
Primer 15
Sinteza l-(l,3-benzodioksol-5-il)-2-propilaminopentan hidroklorida (spojina št. 27)
Ob uporabi enakega postopka, kot je naveden v primerih 2 in 3, iz 7,12 g (34,4 mmol) l-(l,3-benzodioksol-5-il)-2-aminopentana, dobljenega v primeru 14, dobimo 4,41 g (15,4 mmol) naslovne spojine (45%).
tal.: 139,5-141,5 °C
MS 250 [M+l]+ (m/z)
NMR(CDC13) 0,97 (6H, t, J=7,0 Hz), 1,20-2,50 (6H, m), 2,55-3,75 (5H, m),
5,93 (2H, s), 6,75 (3H, m), 9,05-10,05 (2H, br)
IR 2950, 2860, 2760, 1485, 1440, 1240, 1030 (cm'1)
Elementna analiza: kot Ci s^NCL^HCl
Izrač.: C:63,04, H:8,46, N:4,90 (%)
Ugot.: C:62,96, H:8,26, N:4,88 (%).
Primer 16
Sinteza l-(l,3-benzodioksol-4-il)-2-propilaminopentan hidroklorida (spojina št. 28)
Ob uporabi enakega postopka, kot je naveden v primerih 1-3, iz 10,84 g (46,3 mmol) l-(l,3-benzodioksol-4-il)-2-nitro-l-pentena dobimo 1,43 g (5,0 mmol) naslovne spojine (11%).
tal.: 103,5-105,0 °C
MS 250 [M+l]+ (m/z)
NMR(CDC13) 0,97 (6H, t, J=7,0 Hz), 1,20-2,40 (6H, m), 2,60-3,70 (5H, m),
5,95 (2H, s), 6,78 (3H, s), 9,00-10,00 (2H, br)
IR 2986, 2882, 2820, 2800, 2748, 1453, 1246, 1054 (cm'1)
Elementna analiza: kot Ci5H23NO2«HCl Izrač.: C:63,04, H:8,46, N:4,90 (%)
Ugot.: C:62,73, H:8,24, N:4,80 (%).
Primer 17
Sinteza l-(l,3-benzodioksol-5-il)-2-butilaminopentan hidroklorida (spojina št. 29)
Zmes 2,0 g (9,7 mmol) l-(l,3-benzodioksol-5-il)-pentan-2-ona, 0,71 g (9,7 mmol) nbutilamina, 2,88 g (13,6 mmol) natrijevega triacetoksiborohidrida in 0,58 g (9,7 mmol) ocetne kisline mešamo v 1,2-dikloroetanu (34 ml) pod plinskim argonom 4 dni pri sobni temperaturi. Nato zmes naalkalimo z 1 N natrijevim hidroksidom. Zmesi dodamo vodo (50 ml) in jo trikrat ekstrahiramo z etrom (70 ml). Dobljeno organsko fazo izperemo z nasičeno raztopino natrijevega klorida in sušimo nad brezvodnim natrijevim sulfatom, koncentriramo in čistimo s kolonsko kromatografijo. Kloroform uporabimo kot eluimo topilo. l-(l,3-benzodioksol-5-il)-2-butilaminopentan dobimo kot svetlo rumeno olje.
Ob uporabi enakega postopka, kot je naveden v primeru 1, l-(l,3-benzodioksol-5-il)2-butilaminopentan pretvorimo v hidroklorid in dobimo 1,42 g (4,7 mmol) naslovne spojine (48%).
tal.: 113,5-115,0 °C
MS 264 [M+l]+ (m/z)
NMR(CDC13) 0,69-1,14 (6H, m), 1,15-2,29 (8H, m), 2,61-3,65 (5H, m)
5,94 (2H, s), 6,77 (3H, s), 9,10-10,10 (2H, br)
IR 2952, 2932, 2866, 2790, 2744, 1488, 1449, 1249, 1039 (cm'1)
Elementna analiza: kot Ci6H25NO2*HCl Izrač.: C:64,09, H:8,74, N:4,67 (%)
Ugot.: C:64,01, H:8,56, N:4,64 (%).
Primer 18
Ob uporabi enakega postopka, kot je naveden v primeru 17, l-(l,3-benzodioksol-5il)pentan-2-on presnovimo z alkilaminom. Dobimo hidroklorid ustreznih etilaminskih derivatov; spojine št. 30-32 so prikazane v tabeli 4, fiziko-kemični podatki gornjih spojin št. 30-32 pa so prikazani v tabeli 5.
Tabela 4. Spojine št. 30-32
Spojina št. obroč A R1 R2 R3 Do- bitek (%)
30 1,3 -benzodioksol-5-il H -CH2CH2CH3 -CH(CH3)CH2CH3 72
31 1,3 -benzodioksol-5-il H -ch2ch2ch3 -CH(CH2CH3)2 71
32 l,3-benzodioksol-5-il H -ch2ch2ch3 -ch2ch2ch2ch2ch3 51
Tabela 5. Fiziko-kemične lastnosti spojin št. 30-32 spojina št. 30 tal.: 166,0-167,0 °C
MS 264 [M+1]+ (m/z)
NMR(CDC13:6) 0,60-1,20 (6H, m), 1,20-2,40 (9H, m), 2,50-3,70 (4H, m)
5,95 (2H, s), 6,79 (3H, s), 8,70-9,90 (2H, br)
IR 2950, 2872, 2810, 2772, 2688, 1500, 1450, 1255, 1039,
927 (cm'1)
Elementna analiza: kot Ci6H25NO2«HCl
Izrač.: C:64,09, H:8,74, N:4,67 (%)
Ugot.: C:64,25, H:8,54, N:4,46 (%).
Spojina št. 31 tal.: 176,0-177,0 °C
MS 278 [M+l]+(m/z)
NMR(CDC13:0) 1,03 (9H, t, J=8,0 Hz), 1,20-2,20 (8H, m), 2,40-3,30 (4H, m),
5,96 (2H, s), 6,79 (3H, s), 8,60-9,80 (2H, br)
2972, 2860, 2748, 2676, 1582, 1496, 1445, 1252, 1136, 922
IR (cm'1)
Elementna analiza: kot CnE^NC^HCl
Izrač.: C:65,05, H:8,99, N:4,46 (%)
Ugot.: C:64,60, H:8,83, N:4,56 (%).
Spojina št. 32 tal.: 87,0-88,0 °C
MS 278 [M+l]+(m/z)
NMR(CDC13:5) 0,70-1,10 (6H, m), 1,15-2,30 (10H, m), 2,60-3,70 (5H, m),
5,97 (2H, s), 6,79 (3H, s), 9,20-9,90 (2H, br)
IR 2964, 2935, 2870, 2772, 2720, 1504, 1470, 1449, 1255, 1043,
937 (cm'1)
Elementna analiza: kot Cni^NC^HCl
Izrač.: C:65,05, H:8,99, N:4,46 (%)
Ugot.: C:64,66, H:8,80, N:4,52 (%).
Primer 19
Sinteza l-(l,3-benzodioksol-5-il)-2-p-toluidinopentan hidroklorida (spojina št. 33)
Ob uporabi enakega postopka, kot je naveden v primeru 17, iz 2,0 g (9,7 mmol) 1(l,3-benzodioksol-5-il)pentan-2-ona dobimo 2,49 g (7,5 mmol) naslovne spojine (77%).
tal.: 134,5-136,0 °C
MS 297 [M]+ (m/z)
NMR(CDC13) 0,50-0,96 (3H, m), 0,98-1,92 (4H, m), 2,33 (3H, s),
2,55-3,80 (3H, m), 5,91 (2H, s), 6,35-6,88 (3H, m),
7,17 (2H, d, J=8,0 Hz), 7,59 (2H, d, J=8,0 Hz)
IR 2964, 2928, 2740, 2664, 2468, 1506, 1489, 1446, 1250,
1042 (cm*1)
Elementna analiza: kot Ci9H23NO2»HCl
Izrač.: C:68,35, H:7,25, N:4,20 (%)
Ugot.: C:68,37, H:7,28, N:4,16 (%).
Primer 20
Sinteza l-(l,3-benzodioksoI-5-il)-2-benzilaminopentan hidroklorida (spojina št. 34)
Ob uporabi enakega postopka, kot je naveden v primeru 17, iz 2,0 g (9,7 mmol) 1(l,3-benzodioksol-5-il)pentan-2-ona dobimo 1,58 g (4,7 mmol) naslovne spojine (48 %).
tal.: 136,0-137,0 °C
MS 298 [M+l]+ (m/z)
NMR(CDC13) 0,60-1,05 (3H, m), 1,15-2,00 (4H, m), 2,65-3,60 (3H, m), 3,80-4,40 (2H, br), 5,93 (2H, s), 6,50-6,90 (3H, m),
7,25-7,80 (5H, m), 9,40-10,20 (2H, br)
IR 3442, 2958, 2816, 2720, 1554, 1486, 1455, 1260, 1032,
735 (cm-1)
Elementna analiza: kot CigH^NC^HCl
Izrač.: C:68,35, H:7,25, N:4,20 (%)
Ugot.: C:68,37, H:7,ll, N:4,15 (%).
Primer 21
Sinteza l-(l,4-benzodioksan-6-il)-2-propilaminopentan hidroklorida (spojina št. 35)
IR
Ob uporabi enakega postopka, kot je naveden v primerih 1-3, iz 6,02 g (24,2 mmol) 1(l,4-benzodioksan-6-il)-2-nitro-l-pentena dobimo 1,25 g (4,2 mmol) naslovne spojine (17%).
tal.: 146,0-147,5 °C
MS 264 [M+lf (m/z)
NMR(CDC13) 0,97 (6H, t, J=7,0 Hz), 1,30-2,30 (6H, m), 2,50-3,60 (5H, m), 4,24 (4H, s), 6,79 (3H, s), 8,80-10,20 (2H, br),
2948, 2930, 2858, 2774, 2736, 1578, 1497, 1294, 1281,
1253, 1060 (cm1)
Elementna analiza: kot C^E^NC^HCl Izrač.: C:64,09, H:8,74, N:4,67 (%) Ugot.: C:63,94, H:8,54, N:4,52 (%).
Primer 22
Sinteza l-(2,3-dihidrobenzofuran-5-il)-2-propilaminopentan hidroklorida (spojina št. 36)
Ob uporabi enakega postopka, kot je naveden v primerih 1-3, iz 6,95 g (29,8 mmol) 1(2,3-dihidrobenzofuran-5-il)-2-nitro-l-pentena dobimo 0,83 g (2,9 mmol) naslovne spojine (10 %).
tal.: 138,5-140,0 °C
MS 248 [M+l]+ (m/z)
NMR(CDC13) 0,96 (6H, t, J=7,0 Hz), 1,20-2,40 (6H, m), 2,50-3,65 (7H, m),
4,53 (2H, t, J=9,0 Hz), 6,55-7,35 (3H, m), 8,95-10,00 (2H, br),
IR 3410, 2960, 2865, 2780, 2740, 2520, 2420, 1580, 1485, 1460,
1240, 975, 945 (cm'1)
Elementna analiza: kot C16H25NOHCI
Izrač.: C:67,71, H:9,23, N:4,93 (%)
Ugot.: C:67,72, H:9,06, N:4,92 (%).
Primer 23
Sinteza l-(indan-5-il)-2-propilaminopentan hidroklorida (spojina št. 37)
Ob uporabi enakega postopka, kot je naveden v primerih 1-3, iz 2,96 g (12,8 mmol) 1(indan-5-il)-2-nitro-l-pentena dobimo 0,28 g (1,0 mmol) naslovne spojine (8 %). tal.: 135,5-155,0 °C
MS 246 [M+l]+ (m/z)
NMR(CDC13) 0,65-1,20 (6H, m), 1,35-2,50 (8H, m), 2,50-3,85 (9H, m), 6,80-7,40 (3H, m), 9,00-10,00 (2H, br).
IR 3420, 2970, 2865, 2825, 2730, 2510, 2415, 1575, 1492, 1452,
810 (cm'1)
Elementna analiza: kot Cpi^N^HCl
Izrač.: C:72,44, H: 10,01, N:4,97 (%)
Ugot.: C:71,88 H:9,68, N:5,07 (%).
Primer 24
Sinteza l-(2-benzotienil)-2-propilaminopentan hidroklorida (spojina št. 38)
Ob uporabi enakega postopka, kot je naveden v primerih 1-3, iz 11,24 g (45,5 mmol) l-(2-benzotienil)-2-nitro-l-pentena dobimo 2,68 g (9,0 mmol) naslovne spojine (20 %).
tal.: 157,0-159,0 °C
MS 262 [M+lf (m/z)
NMR(CDC13) 0,65-1,20 (6H, m), 1,20-2,40 (6H, m), 2,50-4,00 (5H, m), 6,95-7,50 (3H, m), 7,50-8,00 (2H, m), 9,20-1’, 1’ (2H, br)
IR 3472, 2960, 2866, 2794, 2740, 2678, 2508, 2418, 1603, 1591,
1455, 1435, 1120, 839, 773, 762, 732 (cm'1)
Elementna analiza: kot Ci6H23NS»HCl
Izrač.: C:64,51, H:8,12, N:4,70 (%)
Ugot.: C:64,03 H:7,99, N:4,61 (%).
Primer 25
Sinteza l-(3-benzotienil)-2-propilaminopentan hidroklorida (spojina Št. 39)
Ob uporabi enakega postopka, kot je naveden v primerih 1-3, iz 8,86 g (35,8 mmol) 1(3-benzotienil)-2-nitro-l-pentena dobimo 0,90 g (3,0 mmol) naslovne spojine (8 %). tal.: 117,0-119,0 °C
MS 262 [M+lf (m/z)
NMR(CDC13) 0,35-1,10 (6H, m), 1,10-2,40 (6H, m), 2,40-4,30 (5H, m), 6,70-7,60 (3H, m), 7,60-8,15 (2H, m), 9,10-10,15 (2H, br)
IR 3440, 2964, 2930, 2860, 2784, 2738, 1588, 1579, 1452,
1424, 577, 561, 530 (cm'1)
Elementna analiza: kot Ci6H23NS«HCl
Izrač.: C:64,51, H:8,12, N:4,70 (%)
Ugot.: C:64,73 H:8,01, N:4,80 (%).
Rezultati farmakoloških poskusov so prikazani, kot sledi.
Primer 26
Merjenje biogenskih aminov, sproščenih iz možganskega debla podgane z elektrostimulacijo:
Uporabimo metodo, opisano v Life Sci., 58, 2101-2114 (1996). Samce podgan s težo 280-350 g smo omamili z udarcem na tilnik, ekscizirali možgansko deblo (povprečna teža okoli 800 mg) ter namakali v oksigenirani (95% O2 in 5% CO2) Krebsovi raztopini 30 min pri 37 °C, nato dali k preparaciji 20 μΐ enega od 3H-noradrenalinov (l-[7,8-3H]-noradrenalin; specifična aktivnost: 30-50 Ci/mmol; Amersham) in za navzem dodelili 45 minut. Sestava Krebsove raztopine je bila v mmol, kot sledi: Na+ 137,4; K+ 5,9; Ca2+ 2,5; Mg2+ 1,2; CI' 120,2; H2PO4' 1,2; HCOf 25,0; SO4 2' 1,2 in glukoza 11,5; 0,3 askorbinska kislina in 0,03 EDTA-2Na. Med časom navzema markiranega transmiterja je bil v Krebsovi raztopini prisoten pargilin (12 mmol) za rt blokiranje MAO aktivnosti. Po navzemu H-noradrenalina smo možgansko deblo fiksirali v organski kopeli, kije vsebovala 5 ml Krebsove raztopine (37 °C). Možgane smo nato spirali s hitrostjo 8 ml/min s Krebsovo raztopino, nasičeno s kisikom, ki je vsebovala 0,03 mmol/l kokaina. Na koncu 100 minut smo perfuzijo zmanjšali na 4 ml/min in modificirali Krebsovo raztopino, da je vsebovala tudi 0,05 mmol/l kortikosterona. Poskus smo izvedli v prisotnosti kokaina in kortikosterona. Pri teh pogojih se 86% 3H-noradrenalina ni metaboliziralo in se ni navzel niti nevronalno niti ekstranevronalno. Frakcionacija perfuzata seje izvajala vsake 3 minute. Količino 3Hnoradrenalina, sproščeno med vsakim 3 minutnim obdobjem, smo določili z 1 ml perfuzata, raztopljenega v 5 ml Aquasafe 300 PLUS (Zinsser) in s scintilacijskim štetjem (Beckman LS-9000). Ob uporabi enakega postopka, kot je navedeno v tem poskusu, je bila določena količina H-serotonina. Možgansko deblo smo stimulirali s pravokotnimi pulzi (3 Hz, 1 ms, 60 V) 3 minute. Na začetku poskusa so bila pred prvo stimulacijo 3 mirujoča obdobja frakcije. Nato smo med stimulacijami dodelili 7 mirujočih obdobij frakcij. Spojine v smislu predloženega izuma smo raztopili v perfuzatu in pripravili raztopine 0,5, 1, 2,5 in 5 pg/ml. Perfuzate, ki so vključevali spojine v smislu predloženega izuma, smo perfimdirali 3 minute pred stimulanti.
Rezultati so prikazani na sl. 1 in sl. 2. Kot je tam prikazano, smo potrdili, da spojine v smislu predloženega izuma povečajo sproščanje noradrenalina in serotonina in povečajo eksocitozo, kadar damo živčnim celicam elektrostimulacijo.
Primer 27
Učinki na kondicionirano izognitveno nalogo v nihalni škatli (shuttle box).
Uporabili smo metodo, opisano v Life Sci., 58, 817-827 (1996). Učinke na kondicioniran izognitveni refleks (CAR) smo analizirali v nihalni škatli ob uporabi samcev in samic podgan (s težo 200-220 g), katerih sposobnosti za učenje smo zmanjšali z obdelavo s tetrabenazinom. Instrument smo skonstruirali v skladu z napravo, opisano v Psychopharmacologia 10, 1-5 (1966), Research Institute for Electrical Industry (Budimpešta, Madžarska). Samce in samice podgan (s težo 200220 g) smo trenirali za prečkanje ovire pod vplivom kondicioniranega stimulusa (CS) (blisk svetlobe in brneči glasovi). Če tega niso storili, so bili kaznovani z nožnim šokom (1 mA), t.j. nekondicioniranim stimulusom (US). Če se podgane niso odzvale v 5 sekund na US, smo to označili kot odpoved pobega (EF). Obnašanje, ki pa ni bilo v zvezi s tem stanjem, pa smo označili kot intersignalno reakcijo (IR). Podgane smo trenirali 5 dni s 100 poskusi dnevno. En poskus je obstajal iz 15 sekund medposkusnega intervala. Raztopino tetrabenazina v fiziološki raztopini kuhinjske soli smo dali pri dozi 1 mg/kg subkutano eno uro pred testom, nato pa smo raztopino spojin v smislu predloženega izuma dali pri dozah 1, 2, 2,5 in 5 mg/kg subkutano z istočasnim dajanjem tetrabenazina. Število CAR, EF in IR smo avtomatsko šteli in ocenili z večstransko analizo variance (ANOVA).
Statistične signifikantne diference v rezultatih so prikazane na tabeli 6 in karakteristični rezultati na sl. 3-6. Tako smo ugotovili, da spojine v smislu predloženega izuma znatno izboljšajo zmanjšano funkcijo učenja podgan, inducirano z dajanjem tetrabenazina, in izboljšajo njihovo depresijo in spoznavanje. Ker so se EF znatno zmanjšale, smatramo, da lahko te spojine izboljšajo otrplost, ki jo inducira depresija ali Parkinsonova bolezen. Nadalje za razliko od l-fenil-2-propilaminopentana (PPAP) ipd., ki so reprezentativne spojine, opisane v WO 88/2254, te spojine niso znatno povečale števila IR, ki se kaže v nenormalnem obnašanju (vzburjenje).
Tabela 6
Učinki zmanjšane sposobnosti učenja pri podganah pri kondicionirani izognitveni nalogi (Primer 25)
Spojina št. Doza (mg/kg) Pogojni izognitveni refleks (CAR) Intersignalne Odpovedi
reakcije (IR) pobega (EF)
PPAP 5 **** f fcfcfcfc t *γ*γ·ι·ι· i a—I ++++ j
št. 3 1 tttt t NS I
2 tfrtt t *Γ*Ρ*Γ*Ρ j NS I.1.I.L I **** i
2.5 *fcfck t *P*PT*P | * 1 *** j
5 •P*p*r*P | NS tttt I ·Ι,Ι·Ι“Ι· 'Jr
1 *** t NS fcfcpfc 4
št. 6 1 *P*P*F*i* J NS * 1
5 **** 4 T*FTT J NS * 1
št. 15 5 * i NS NS
št. 20 1 * i NS NS
2.5 fttt j NS
5 tttt 4 * 1 * 1
1 4 *p*r*r*p | NS **** 4
št. 21 0.5 ** t NS NS
1 tttt 4 NS NS
št. 22 0.5 * t NS NS
1 m t NS NS
5 tfff j NS * 1
(nadaljevanje)
št. 25 1 NS * 1
5 tttt t * t . * 1
št. 27 1 t NS *** |
št. 28 1 * t NS NS
1 2.5 NS *i*P*P*P γ
5 tttt j NS w 1 TTT ψ
št. 29 2.5 * ί NS NS
5 m t m j NS
št. 30 5 jfcfcfck t *P*PT*P 1 * j NS
št. 33 5 * t * 1 NS
št. 37 5 * t NS NS
št. 33 1 NS NS ttt* 1 *Ρ*Τ**Γ·*Ρ <jr
2.5 t *P*P*P*I* i * t jfcfcfck |
št. 39 1 NS NS j-Mr 1 TTT ψ
2.5 j NS 1 *Γ*Γ*Ρ*Ρ y
*: P<0.05, **:P<0.02, ***:P<0.01, ****:P<0.001, NS: ni signifikance i:povečanje, 1: zmanjšanje
Primer 28
Merjenje transmembranskih ionskih tokov v sinoavrikulamih vlaknih srca žabe
Uporabili smo modificirano verzijo metode voltažnih sponk na dvojni saharozni vrzelni ureditvi, ki je bila opisana v Life Sci., 58, 2101-2114 (1996). Pod binokulamim mikroskopom smo preparirali vlakno s premerom okoli 100 pm in dolžino 3 do 4 mm iz sino-avrikulame regije srca žab Rana esculent. Vlakno smo namestili v specialno organsko posodo v ohlajenem okolju (18 ± 0,5 °C) in tvorili 5 predelkov s tem, da smo namestili 4 vazelinske ovire s širino 0,1 mm vzdolž dolžine vlakna. Centralni predelek smo perfundirali s testno raztopino, ki je raztopina spojin v smislu predloženega izuma, raztopljenih pri koncentracijah 0,5, 1, 2, 4 in 8 pg/ml v Ringerjevi raztopini brez Na+ (holin kloridni Ringer), in dva stranska predelka depolarizirali z izotonično raztopino KC1. Preostala 2 predelka, ki sta sosednja centralnemu, smo perfundirali z izotonično raztopino saharoze, da smo izolirali centralni predelek električno od stranskega predelka. Komandni potencial smo pritisnili na membrano preko nepolarizirajočih elektord Hg/Hg2Cl2 v centralni in v oba stranska predelka. Pomnoževalnik za povratno informacijo integratorskega tipa je vzdrževal membranski potencial konstanten in je meril kompenzacijski tok do ekvivalenta membranskega toka. Počasni notranji kalcijev tok smo merili s perfuzijo testnega predelka z Ringerjevo raztopino brez Na+ (holin kloridni Ringer).
Rezultati so prikazani na sl. 7. Potrdili smo, da so spojine v smislu predloženega izuma povečale počasen notranji kalcijev tok in imele pomnoževalni učinek od membranskega potenciala odvisne eksocitoze. Tako smo ugotovili, da imajo spojine v smislu predloženega izuma CAE učinek.
Primer 29
Merjenje biogenskih aminov, sproščenih iz možganskega tkiva
Uporabili smo metodo, opisano v Life Sci., 56, 611-620 (1995). Po obglavljenju podgan Wistar smo hitro odstranili primerne možganske vzorce, ki so bili striatum, substantia nigra, tuberculum olfactorium, locus coeruleus in raphe, in namočili v oksigenirani (95% O2 in 5% CO2) Krebsovi raztopini pri 37 °C. Sestava Krebsove raztopine v mol/1 je bila kot sledi: NaCl 111, KC1 4,7, CaCl2 2,5, MgSO4 1,64, NaHCCL 25, KH2PO4 1,2, glukoza 11, 50 mg/1 askorbinske kisline in 20 mg/1 EDTA2Na. Preparati, namočeni v eni organski kopeli, so bili, kot sledi: 1) štirje koščki striatuma (vsak razpolovljen), 2) štirje koščki substantia nigra, 3) štirje koščki tuberculum olfactorium; 4) osem koščkov locus coeruleus; 5) osem koščkov raphe. Po inkubaciji primernega tkiva 20 minut smo Krebsovo raztopino nadomestili, tkivo namakali 20 minut v Krebsovi raztopini, pri čemer smo raztopili spojine v smislu predloženega izuma, in določili količino biogenskega amina, sproščenega med tem Časom. Spojine v smislu predloženega izuma in PPAP, kontrolno spojino, smo raztopili v fiziološki raztopini kuhinjske soli in dajali subkutano 30 minut pred odstranitvijo možganskega vzorca. Za merjenje noradrenalina in dopamina smo vzorce čistili na 60 mg glinice, ki je vsebovala mikro kolone (BDH Chemicals Ltd.) po metodi, opisani v J. Pharmacol. Exp. Ther., 138, 360-372 (1962).
Za merjenje serotonina smo vzorce čistili na 15 mg Sephadex G-10 mikrokolonah (Pharmacia). Dopamin, noradrenalin in serotonin smo določili z visoko zmogljivostim tekočinsko kromatografijo (Waters 746 podatkovni modul) z elektrokemično detekcijo (Waters 460 elektrokemični detektor). Uporabili smo Waters Resolve 5 μ Spherical Cis 3,9 x 150 mm kolono kot ločilno kolono in kot mobilno fazo uporabili trietilaminfosfatni pufer (pH 5,2), ki vsebuje 200 mg/1 oktan sulfonat natrija in 18 mg/1 EDTA2Na s 6% acetonitrila. Sproščeno količino primernega amina smo označili kot nmol/g tkiva, sproščenega v 20 minutah. Odmik od povprečij, testirano s Študentovim ttestom, in signifikantni nivo sta bila postavljena pri P<0,05.
Rezultati so prikazani na tabeli 7. Spojine v smislu predloženega izuma so znatno povečale dopaminsko sproščanje na striatumu, substantia nigra in tuberculum olfactorimu. Spojine v smislu predloženega izuma so tudi znatno povečale sproščanje noradrenalina na locus coeruleus in serotonina na raphe.
Thhpia 7 Sproščanje bkgsnskih aminov iz ražgpnldh regij (rmoi/g tkiva, 20 miiut)
Obdelava Doza. (mg/kg) Dopamine
striatum Substantia nigra Tubcrculum olfactorium
(+)-PPAP 0 2.9 ±0.12 3.4 ± 0.08 2.8 ± 0.07
0.25 3.5 ±0.19* 4.0 ± 0.24** 3.7 + 0.10****
1.00 3.6 + 0.19** 4.0 ± 0.21** 3.2 + 0.21
St. 3 0 2.9 + 0.20 3.4 ± 0.08 2.8 ± 0.07
1.00 3.9 + 0.12**** 4.5 ±0.07**** 5.2 ±0.12****
0 3.4 + 0.06 3.8 ± 0.08 3.5 ± 0.09
0.25 3.4 ± 0.03 4.9 + 0.07**** 4.3 ± 0.09****
1.00 3.2 ± 0.06 8.2 ±0.46**** 5.0 ±0.16****
5.00 3.8 ±0.04**** 9.0 ±0.50**** 5.1 + 0.39****
Št. 5 0 3.0 + 0.03 3.1 ±0.06 3.8 ± 0.06
0.25 4.3 + 0.14**** 5.6 + 0.18**** 6.0 ±0.16****
1.00 3.2 ± 0.14 4.4 ±0.16**** 4.6 ±0.13***
5tTe 0 3.2 ±0.11 4.5 + 0.08 3.5 + 0.10
1.00 3.6 ± 0.12* 6.7 + 0.26**** 5.3 + 0.19****
Št. 10 0 3.2 ±0.11 4.5 ± 0.08 3.5 ± 0.10
1.00 3.3 ± 0.22 6.2 ±0.31*** 5.6 ±0.35***
Št. 20 0 3.8 ±0.15 6.7 + 0.31 4.6 ± 0.15
0.005 5.8 ±0.11**** 8.7 ±0.13** 7.0 + 0.25****
0.01 6.5 ±0.12**** 10.3 ±0.23**** 8.0 ±0.17****
0 3.2 ±0.11 4.5 ± 0.08 3.5 ± 0.01
0.25 3.2 ± 0.05 5.2 + 0.26* 3.5 + 0.21
1.00 4.2 ± 0.15*** 6.7 ±0.19**** 4.3 + 0.07****
5.00 4.7 ±0.13**** 5.7 ±0.18’*** 4.8 ±0.09****
0 3.2 ± 0.04 5.6 ± 0.27 3.7 ±0.16
0.01 5.8 ±0.18**** 10.0 ±0.14**** 5.5+0.20****
0.05 5.6 ±0.13**** 7.7 ±0.15**** 5.8 ±0.19****
St. 21 0 4.2 ± 0.17 5.3 + 0.22 5.2 ± 0.25
0.01 5.4 ±0.17*** 10.0 ±0.30**** 7.4 + 0.15****
Št. 22 0 4.2 + 0.17 5.3 ± 0.22 5.2 ± 0.25
0.01 6.5 ±0.06**** 11.9+0.39**** 9.7 ±0.17****
St. 25 0 4.2 ±0.17 5.3 ± 0.22 5.2 ± 0.25
0.01 5.3 ±0.14*** 6.6 ±0.04*** 6.5 ± 0.20***
Št. 27 0 3.2 ±0.11 4.5 * 0.08 3.5 + 0.10
0.10 3.4 + 0.10 7.8 ±0.44**** 4.7 ±0.13****
0.25 4.1 ±0.24** 9.5 ± 0.32**** 5.2 ± 0.23****
Št. 28 0 3.2 ±0.11 4.5 ± 0.08 3.5 ±0.10
0.25 3.4 ±0.16 6.1 ±0.35*** 3.8 + 0.22
1.00 4.0 ±0.18*** 5.4 ±0.27** 4.6 ± 0.22***
5.00 3.1 ±0.13 4.9 ±0.17 3.1 ±0.14
St. 38 0 4.2 ±0.17 5.3 ± 0.22 5.2 + 0.25
0.01 7.9 ± 0.19**** 14.0 + 0.23**** 11.5 ±0.14****
Št. 39 0 4.2 ± 0.17 5.3 + 0.22 5.2 ± 0.25
0.01 7.1 ±0.15**** 12.0 ± 0.34*** 10.9 ±0.25***
(nadaljevanje)
Obdelava Doza (mg/kg) Noradrenaliil· Serotonin
Locus cocrulcus Raphe
(±)-PPAP 0 3.5 i 0.18 0.425 i 0.02
0.25 3.8 ± 0.30 0.416 ± 0.03
1.00 4.6 ±0.15· 0.741 ± 0.01***
St. 3 0 3.5 ±0.18 0.425 ± 0.02
1.00 2.6 ± 0.10* 0.312 ±0.01*
0 3.6 ±0.10 0.434 * 0.01
0.25 4.4 ± 0.10* 0.958 ± 0.03****
1.00 3.2 ±0.15 0.976 ± 0.06****
5.00 2.2 ±0.11 1.215 ±0.14****
St. 5 0 3.2*0.15 0.406 i 0.02
0.25 3.9 ± 0.25 0.425 ± 0.02
1.00 4.4 * 0.50 0.571 ±0.01*
St. 6 0 3.5 * 0.10 0.473 ± 0.02
1.00 3.1 ±0.05 0.708 ± 0.07*
Št. 10 0 3.5 ± 0.10 0.473 ± 0.02
1.00 2.9 ±0.15 0.603 ± 0.10*
St. 20 0 3.9 ± 0.30 0.400 ± 0.01
0.005 5.3 ± 0.30 0.492 ± 0.02
0.01 4.3 ±0.10 0.961 ± 0.02**
0 3.0 ± 0.02 0.473 ± 0.02
0.25 4.3 ±0.15**** 0.481 ± 0.05
1.00 4.4 ± 0.25* 0.355 ± 0.05
5.00 3.5 ± 0.20 0.565 ± 0.01
0 3.3 ± 0.05 0.541 ± 0.01
0.01 2.2 ±0.15* 0.938 * 0.01****
0.05 3.2 ± 0.15 1.203 ± 0.08**
Št. 21 0 4.5 * 0.25 0.428 ± 0.01
0.01 4.6 ± 0.40 0.354 * 0.00**
Št. 22 0 4.5 ± 0.25 0.428 ± 0.01
0.01 4.8 * 0.05 0.322 ±0.01**
St. 25 0 4.5 ± 0.25 0.428 ± 0.01
0.01 4.3 ± 0.20 0.457 ±0.04**
Št. 27 0 3.5 ± 0.10 0.473 ± 0.02
0.10 3.8 ± 0.15 0.399 * 0.00
0.25 3.5 * 0.20 0.414 ± 0.01
Št. 28 0 3.0 ± 0.01 0.473 ± 0.02
0.25 3.6 ± 0.35 1.031 ± 0.03***
1.00 3.7 ±0.10** 1.017 ± 0.06**
5.00 3.9 ±0.10** 1.436 ±0.01****
St. 38 0 4.5 ± 0.25 0.428 ± 0.01
0.01 3.6 * 0.05 0.375 * 0.02*
St. 39 0 4.5 * 0.25 0.428 ± 0.01
0.01 4.1 ±0.15 0.256 ±0.01***
*:P<0.05, **:P<0.02, ***:P<0.01, ****:P<0.001, proti kontroli (0 «g/kg)
Primer 30
Učinek sproščanja monoaminov v sinaptosomih možganov podgan
Sinaptosome smo pripravili, kot sledi. Svež striatum (za določitev dopamina) in sveže sprednje možgane (za določitev noradrenalina in serotonina) smo odstranili Wistar podganam, starim 8 tednov (NIPPON S.L.C.). Dodali smo 10-kratni volumen ledeno mrzle 0,35 M saharoze (pH 7,4) v možgansko tkivo in homogenizirali ob uporabi steklenega homogenizatorja s teflonskim batom, ki so ga vrteli motorji. Nato smo homogenat centrifugirali pri 900 x g 10 minut pri 4 °C in supematant recentrifugirali pri 11500 x g 20 minut. Pelet smo resuspendirali v ledeno hladnem pufru. Pripravili smo končno koncentracijo sinaptosomov 0,6 mg proteina/ml. Proteinsko koncentracijo smo določili po metodi, opisani v Journal of Biological Chemistry, 193, 265-275 (1951), kot avtentični standard pa smo uporabili goveji serumski albumin. Sproščanje monoamina iz sinaptosomov smo določili z naslednjim postopkom na osnovi metode, opisane v Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics, 241, 27-33 (1987). Raztopino 0,6 mg/ml sinaptosomov smo predhodno inkubirali 5 minut pri 35 °C v oksigeniranih (95% O2 in 5% CO2) pogojih. Nato smo dodali 25 nM 3Hmonoaminov v sinaptosomsko raztopino in raztopine inkubirali 5 minut pri 35 °C. Sinaptosomske raztopine smo nato pipetirali v komoro in perfundirali s kontinuimimi 0,7 ml/min superfuzijskega pufra 25 minut pri 35 °C, da smo odstranili prebitek markiranih spojin. Nato smo 3H-monoamine, ki so se sprostili iz sinaptosomov, zbirali kontinuirno po 0,25 ml pri 2-minutnih intervalih 20 minut. Spojine v smislu predloženega izuma smo kontinuirno dodajali v superfuzijski pufer iz frakcije 5 (10 min), tako da so bili sinaptosomi vedno izpostavljeni spojinam v smislu predloženega izuma, njihovo končno koncentracijo pa smo držali pri 1O'? M. V zbrani superfuzijski pufer smo dodali 3,5 ml scintilacijskih koktejlov (EMULSIFIER SCINTILLATOR PLUS8 [Packard]) in določili 3H, sproščen iz sinaptosomov, s scintilacijskim števcem.
Sestava uporabljenega sinaptosomskega pufra je bila v mol/1, kot sledi; NaCl 115,
CaCl2 2, MgSO4 1,5, KH2PO4 1,5, NaHCO3 25, D-glukoza 10, etilen glikol bis(aminoetil-N,N-tetra ocetna kislina (EGTA) 0,5 in L-askorbinska kislina 0,1 (pH
7,4).
Rezultati so prikazani na sl. 8 in 9. Spojine v smislu predloženega izuma ne samo da niso pokazale tiraminu podobnega učinka v sinaptosomih, ampak so tudi pokazale antagonizem proti učinku tiramina, kadar smo ga istočasno dodali. Ti učinki preprosto kažejo, da spojine v smislu predloženega izuma nimajo tiraminu podobnega sproščujočega učinka za premestitev kateholaminov z njihovega mesta skladiščenja in/ali inhibirajo te učinke. Zato imajo spojine v smislu predloženega izuma visoko selektivnost za CAE učinek.
Primer 31
Učinek na monoamin oksidazo (MAO)
Humano kri, ki smo ji dodali 3,8% citronske kisline, smo centrifugirali pri 950 obr/min 10 minut in dobili s ploščicami bogato plazmo (PRP). Preostale krvne celice smo centrifugirali pri 3000 obr/min 10 minut in dobili s ploščicami revno plazmo (PPP). Po merjenju krvnih ploščic iz dela od PRP smo PRP in PPP zmrznili pri -20 °C. Odtajali smo jih in sonificirali za dispergiranje in suspendiranje, kadar smo merili MAO aktivnost. Suspenzijo smo uporabili kot encim za MAO aktivnostih test pri krvnih ploščicah. Poleg tega seje za skoraj vse od MAO v krvnih ploščicah vedelo, da so tipa B.
MAO-B aktivnost smo določili po metodi, opisani v Biochem. Pharmacol., 14, 16841685 (1965). K 62,5 mM fosfatne pufrske raztopine (880 pl) smo dodali 120 pl raztopin selegilina (referenca) ali spojine v smislu predloženega izuma, pripravljene za vsako koncentracijo v fosfatnem pufru. Zmes smo inkubirali 5 minut pri 37 °C. Po tem, ko smo ji dodali 80 pl PRP ali PPP, smo zmes inkubirali 20 minut pri 37 °C. Nato smo k temu dodali 120 pl substrata (0,33 mg/ml kinuramin dihidrobromida). Po inkubaciji 30 minut pri 37 °C smo dodali 800 pl 10% trikloroocetne kisline, da smo ustavili reakcijo, in raztopino smo centrifugirali pri 3000 obr/min 10 minut. K 1 ml supematanta smo dodali 2 ml 1 N NaOH ter merili fluorescenco raztopine pri Ex 312 nm in Em 380 nm. PRP smo pripravili z 250000 celicami/pl kot količine krvnih ploščic z 62,5 nM fosfatno pufrsko raztopino in 4-hidroksikinolin smo uporabili kot standard za merjenje.
Rezultati so prikazani na tabeli 8. MAO-B inhibicijska stopnja selegilina kot reference je bila 98,1% pri IO'7 M. Vendar so bile inhibicijske stopnje spojin v smislu predloženega izuma manj kot 50% pri 10'5M. To kaže, da spojine v smislu predloženega izuma nimajo MAO-B inhibicijskega učinka. Zato je dokazano, da imajo spojine v smislu predloženega izuma visoko selektivnost za CAE učinke.
Tabela 8
Inhibicijski učinki spojin na MAO-B humanih ploščic
Spojine Koncentracija Inhibicijska stopnja BflO-B (%) (%)
Selegilin 107 v 98.1 %
Spojina št. 5 10s M 17.3 %
Spojina št. 6 10“5 M 24.5 %
Spojina št. 10 IO-5 M 37.2 %
Spojina št. 20 IO-5 V 6.4 %
Spojina št. 27 105 M 34.0 %
Spojina št. 28 IO-6 H 22.2 %
Primer 32
Afiniteta na receptorje od aj, a2, Di, D2, 5-HTi in 5-HT2.
Raztopino receptorja smo pripravili, kot sledi. Takoj po obglavljenju podgan smo odstranili možgane in izmerili njihovo težo. Njihove možgane smo homogenizirali v
10-kratnih volumnih ledeno mrzle 0,35 M saharoze (pH 7,4) s steklenim homogenizatorjem s teflonskim batom, ki so ga vrteli motorji. Nato smo homogenat centrifugirali pri 4 °C pri 900xg 10 minut in supematant smo nadalje recentrifugirali pri 4 °C pri 22000xg 20 minut. Oborino smo suspendirali z dodatkom 5 mM fosfatne pufrske raztopine (pH 7,4). Po inkubiranju suspenzije pri 37 °C 30 minut smo suspenzijo recentrifugirali pri 4 °C pri 22000xg 20 minut. Oborino smo resuspendirali z dodatkom 10 ml 5 mM fosfatne pufrske raztopine (pH 8,0). Oborino smo uporabili kot raztopino receptorja.
3H-prazocin smo uporabili kot ligand. 0,25 nM 3H-prazocinav 5 mM fosfatnem pufru (pH 8,0), spojine v smislu predloženega izuma in raztopino receptorja smo dodali v cevko in zmes inkubirali pri 25 °C 90 minut. Poleg tega se je pokazala nehlapna o t vezava z vezavno vrednostjo H-prazocina ob koeksistenci z 0,1 μΜ prazocma. Vezavno reakcijo smo izvedli, kot sledi. Po ločenju 3H-prazocina (vezavni tip: B), vezanega na receptor ob uporabi filtra iz steklenih vlaken (velikost por: 0,5 μιη, Whatman GF/C), in prostega tipa prazocina (prost tip: F) z B/F separatorjem (Brandel, ZDA) smo zbrali le vezavni tip H-prazocina. Vezavni tip H-prazocina, absorbiran na filter iz steklenih vlaken, smo izprali z ledeno mrzlo fiziološko raztopino kuhinjske soli in odstranili v fiolo. Po dodatku 10 ml scintilacijskega koktejla smo določili radioaktivnost. Iz vezavne inhibicijske stopnje cti receptorja in liganda smo merili afiniteto spojin v smislu predloženega izuma do oti receptorja.
Ob uporabi iste metode smo določili afinitete spojin v smislu predloženega izuma do receptorja od a2, Dj, D2, 5-HTj oz. 5-HT2 ob uporabi 0,7 nM H-rauvolscina, 1,4 nM 3H-SCH-23390, 2,0 nM spiperona, 2 nM 3H-5-HT oz. 0,5 nM 3H-ketanserina kot njihovih zadevnih ligandov in ob uporabi 1 μΜ johimbina, 10 μΜ (+)-butaklamola, 10 μΜ haloperidola, 10 μΜ 5-HT in 1 μΜ ketanserina kot njihovih sredstev za premeščanje.
Če je afiniteta določene spojine do receptorja visoka, sta vezavni ligand in receptor inhibirana. Na splošno, če molska koncentracija za 50% inhibiranje vezave vsakega liganda in receptorja ni manj kot 10'6 M, se smatra, da spojina nima zadostne aktivnosti, da pokaže fiziološko aktivnost. Spojine v smislu predloženega izuma ne potrebujejo več kot 10'6 M ali 10'5 M za inhibiranje vezave na vsak receptor, kot je prikazano v tabeli 9. Zato se je pokazalo, da spojine v smislu predloženega izuma nimajo afinitete do receptorja, potrebne za fiziološko aktivnost.
Tabela 9
Afiniteta spojin do receptorjev *
Spojine «1 di D, d2 5-ffTi 5-ΉΤ2
Selegilin >10’ 2X10-’ >10’5 >10“5 >10’’ >10“’
Brotookriptin 108 10“7 IO'5 10-’ 107 10-’
Spojina št.20 8Χ10’5 9Χ10’7 >10’5 >10’5 7x10-’ >10-’
Spojina št.21 >10'5 7Χ107 >105 >10-’ 105 >10“’
Spojina št.25 >105 106 >10 ’ >10s 105 2X10-’
♦ mCso
Rezultati varnostnih testov so prikazani, kot sledi.
Primer 33
Skrining toksičnosti ob uporabi primarnih gojenih hepatocitov
Hepatocite smo pripravili iz podganjih jeter s kolagenazno perfuzijsko metodo in pripravili suspenzijo, ki vsebuje 5x105 celic/ml. Po gojenju 24 ur smo suspenzijo izmenjali z William's Medium E (GIBCO BRL), kije vseboval 10 ali 100 μΜ spojin v smislu predloženega izuma. Po gojenju 24 ur smo merili aktivnost laktat dehidrogenaze (LDH), sproščene v medij.
Rezultati LDH sproščanja so bili prikazani v odstotkih kontrole (0,5% fiziološka raztopina kuhinjske soli ali 0,5% DMSO) v tabeli 10. Pri obdelavi s 100 μΜ koncentracijo je bila količina LDH, ki so jo sprostile spojine v smislu predloženega izuma, enaka ali manjša kot količina, ki jo je sprostil l-fenil-2-propilaminopentan (PPAP), kije bil opisan v WO 88/2254 kot obetajoče psihotropno zdravilo. Vendar je v prisotnosti 10 μΜ koncentracije le PPAP znatno sprostil LDH.
Tabela 10
Odstotna kontrola LDH sproščanja iz primarnih gojenih hepatocitov v prisotnosti spojin
Koncentracija obdelave 100 μϊ 10 μΐί
PPAP 151.83 ±11.08 *** 126.80+5.45 *
Spojina št. 5 195.47 ±9.16 » 110.63+4.02
Spojina št. 14 130.81 ±7.08 ## 107.84 ±4.18
Spojina št. 19 179.88±5.54 # 82.38 ±8.34
Spojina št. 20 185.30±3.45 ## 92.72±5.31
Spojina št. 21 129.98 ±9.68 # 109.71+4.42
Spojina št. 25 112.10±36.98 90.28 ±2.85
Spojina št. 27 113.97±11.19 115.35+10.76
Spojina št. 28 147.58±6.55 ### 92.98 ±6.92
Spojina št. 29 101.47 ±2.94 103.19 ±6.02
Spojina št. 30 138.36 ±4.57 » 99.46+5.44
Spojina št. 31 152.88±4.35 » 102.47 ±0.84
Spojina št. 33 151.81 ±5.71 m 94.00 ±4.16
Spojina št. 35 147.28±5.07 » 103.28±10.57
Spojina št. 36 110.66 ±6.58 101.43 ±2.24
Spojina št. 37 193.03±8.51 ### 83.80 ±5.65
Ρ<0.05, Ρ<0.01, 4**: Ρ<0.0001 proti 0,5% fiziološki raztopini j kuhinjske soli #: P<0.05, ##: P<0.01, »: P<0.0001 proti 0,5%-DMSO
Kolona 10 jan spojine št. 23 kaže podatke, dobljene z obdelavo z 20 jan.
Primer 34
Test toksičnosti pri miših pri enem dajanju
Po subkutanem dajanju spojin primerov 3, 25, 27 in 28 mišim smo vsak dan dva tedna opazovali splošne simptome pri miših. Preživele so vse miši, katerim smo te spojine dali v vsakem primeru v dozi 50 mg/kg.
Kratka razlaga risb
Sl. 1: učinki sproščanja noradrenalina spojin št. 3, 20, 25 in 27 iz elektrostimuliranega izoliranega možganskega debla podgan.
Sl. 2: učinek sproščanja serotonina spojin št. 20 in 25 iz elektrostimuliranega izoliranega možganskega debla podgan.
• : stimulirane točke in U: dodane točke spojin pri sl. 1 in sl. 2.
Sl. 3: učinek spojine št. 3 za kondicioniran izognitveni refleks (CAR), odpovedi pobegov (EF) ter intersignalne reakcije (IR) podgan s sposobnostjo učenja, zmanjšano s tetrabenazinom.
Sl. 4: učinek spojine št. 20 na kondicioniran izognitveni refleks (CAR), odpovedi pobegov (EF) in intersignalne reakcije (IR) podgan s sposobnostjo učenja, zmanjšano s tetrabenazinom.
Sl. 5: učinek spojine št. 25 na kondicioniran izognitveni refleks (CAR), odpovedi pobegov (EF) in intersignalne reakcije (IR) podgan s sposobnostjo učenja, zmanjšano s tetrabenazinom.
Sl. 6: učinek spojine št. 27 na kondicioniran izognitveni refleks (CAR), odpovedi pobegov (EF) in intersignalne reakcije (IR) podgan s sposobnostjo učenja, zmanjšano s tetrabenazinom.
Sl. 7: učinek spojin št. 3, 20 in 27 na počasen notranji Ca2+ tok v sinoavrikulamih vlaknih src žab.
Sl. 8: učinek spojin št. 3 in 27 na monoaminsko sproščanje iz sinaptosoma.
Sl. 9: tiraminska antagonistična lastnost spojine št. 27. A: tiramin(10'6M) smo dodali iz frakcij št. 8 do 12, B: spojino št. 27(5xl0’5M) smo dodali iz frakcij št. 4 do 12 in tiramin (106M) smo dodali iz frakcij št. 8 do 12.
Za
FUJIMOTO BROTHERS CO., LTD.
PATENTNA PISARNA, te*
LJUBLJANA, ČOPOVA 14

Claims (9)

  1. Patentni zahtevki kjer je R1 vodik, hidroksil, nižji alkoksi ali halogen; R2 je alkil z 2 do 5 atomi ogljika; R3 je vodik, alkil z 2 do 5 atomi ogljika, alkilkarbonil z 2 do 5 atomi ogljika, aril s 6 do 10 atomi ogljika ali arilalkil s 7 do 11 atomi ogljika; obroč A je biciklična spojina, ki obstoji iz vsaj enega benzenovega obroča in lahko vsebuje nasičen ali nenasičen 5ali 6-členski obroč, ki lahko ima heteroatome ali pa nima heteroatomov, pod pogojem,
    Λ O da kadar je obroč A indol ali 1,3-benzodioksol, R in R istočasno ne tvorita člena z 2 atomoma ogljika, in kadar je R vodik, je obroč A biciklična spojina, različna od indola in benzo[b]tiofena, R pa je alkil s 3 do 5 atomi ogljika, in njihove farmacevtsko sprejemljive kislinske adicijske soli.
  2. 2. Novi etilaminski derivati in njihove farmacevtsko sprejemljive kislinske adicijske soli po zahtevku 1, označeni s tem, daje R3 alkil z 2 do 5 atomi ogljika, aril s 6 do 10 atomi ogljika ali arilalkil s 7 do 11 atomi ogljika.
  3. 3. Novi etilaminski derivati in njihove farmacevtsko sprejemljive kislinske adicijske soli po zahtevku 1, označeni s tem, daje R vodik, R in R pa sta propil.
  4. 4. Novi etilaminski derivati in njihove farmacevtsko sprejemljive kislinske adicijske soli po kateremkoli od zahtevkov 1 do 3, označeni s tem, daje obroč A naftalen, indol, benzofuran ali 1,3-benzodioksol.
  5. 5. Novi etilaminski derivati in njihove farmacevtsko sprejemljive kislinske adicijske soli po zahtevku 1, označeni s tem, da je spojina s formulo (I) katerakoli izmed naslednjih, kot so: l-(2-naftil)-2-propilaminopentan, l-(6-metoksi-2-naftil)-2propilaminopentan, 1 -(indol-3 -il)-2-propilaminopentan, 1 -(indol-4-il)-2propilaminopentan, 1 -(indol-6-il)-2-propilaminopentan, 1 -(benzofuran-2-il)-2propilaminopentan, l-(benzodioksol-4-il) -2-propilaminopentan ali l-(benzodioksol-5il) -2-propilaminopentan.
  6. 6. Psihotropna zdravila, označena s tem, da vsebujejo kot aktivno komponento spojino, opisano v kateremkoli zahtevkov 1 do 5.
  7. 7. Antidepresivi, označeni s tem, da vsebujejo kot aktivno komponento spojino, opisano v kateremkoli od zahtevkov 1 do 5.
  8. 8. Zdravila za Parkinsonovo bolezen, označena s tem, da vsebujejo kot aktivno komponento spojino, opisano v kateremkoli od zahtevkov 1 do 5.
  9. 9. Zdravila za Alzheimerjevo bolezen, označena s tem, da vsebujejo kot aktivno komponento spojino, opisano v kateremkoli od zahtevkov 1 do 5.
SI9820009A 1997-08-07 1998-08-03 Novi etilaminski derivati SI9820009A (sl)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP24744597 1997-08-07
PCT/JP1998/003468 WO1999007667A1 (fr) 1997-08-07 1998-08-03 Nouveaux derives d'ethylamine

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SI9820009A true SI9820009A (sl) 1999-10-31

Family

ID=17163558

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SI9820009A SI9820009A (sl) 1997-08-07 1998-08-03 Novi etilaminski derivati

Country Status (17)

Country Link
US (1) US6214859B1 (sl)
EP (1) EP0957080B1 (sl)
JP (1) JP4569980B2 (sl)
KR (1) KR100572900B1 (sl)
CN (1) CN1182103C (sl)
AT (1) ATE330930T1 (sl)
AU (1) AU747737B2 (sl)
CA (1) CA2267315C (sl)
DE (1) DE69835004T2 (sl)
DK (1) DK0957080T3 (sl)
ES (1) ES2267190T3 (sl)
HK (1) HK1022682A1 (sl)
HU (1) HU228759B1 (sl)
IL (1) IL129322A (sl)
PT (1) PT957080E (sl)
SI (1) SI9820009A (sl)
WO (1) WO1999007667A1 (sl)

Families Citing this family (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP4499208B2 (ja) * 1998-10-29 2010-07-07 株式会社フジモト・コーポレーション 新規な光学活性アミノペンタン誘導体
FR2792313A1 (fr) * 1999-04-13 2000-10-20 Synthelabo Derives de 2-aminoethyl-indole, leur preparation et leur application en therapeutique
EP1196380A2 (en) * 1999-07-15 2002-04-17 NPS Allelix Corp. Indoles and indazoles for the treatment of migraine
JP4691230B2 (ja) * 2000-04-11 2011-06-01 株式会社フジモト・コーポレーション 光学活性１−（ベンゾフラン−２−イル）−２−プロピルアミノペンタンの製造方法
SE0001438D0 (sv) * 2000-04-18 2000-04-18 Axon Chemicals Bv New chemical compounds and their use in therapy
JP4888751B2 (ja) * 2001-09-14 2012-02-29 株式会社フジモト・コーポレーション トリフルオロプロピルアミノペンタン誘導体及びその製造方法
JP4953041B2 (ja) * 2001-09-19 2012-06-13 株式会社フジモト・コーポレーション アポトーシス抑制剤
US20050130243A1 (en) * 2003-12-15 2005-06-16 Zheng Yi F. Assay for entactogens
US6991911B2 (en) * 2003-12-15 2006-01-31 Dade Behring Inc. Assay for entactogens
US7022492B2 (en) * 2003-12-15 2006-04-04 Dade Behring Inc. Ecstasy haptens and immunogens
US7115383B2 (en) * 2004-03-22 2006-10-03 Dade Behring Inc. Assays for amphetamine and methamphetamine
US7037669B2 (en) * 2004-03-22 2006-05-02 Dade Behring Inc. Assays for amphetamine and methamphetamine using stereospecific reagents
EP2028936A4 (en) 2006-02-13 2014-02-26 Univ Boston COMPOSITIONS AND METHODS FOR POTENTIATING ANTIBIOTICS AND DISCOVERING DRUGS
CN101677988A (zh) * 2007-06-21 2010-03-24 藤本株式会社 经皮或经粘膜给药用组合物
KR20150013476A (ko) * 2012-04-04 2015-02-05 아이백스 인터내셔널 게엠베하 조합요법용 약학적 조성물
JP6518397B2 (ja) * 2013-12-25 2019-05-22 株式会社フジモト・コーポレーション 注意欠如・多動性障害の予防および治療剤
CA2968793C (en) 2014-12-05 2022-02-08 Semmelweis University Compounds for use in the prevention or treatment of cancer
CN114028616A (zh) * 2021-09-28 2022-02-11 遵义医科大学 一种用于牙槽骨缺损修复的组织工程化材料制备方法
WO2024064825A1 (en) * 2022-09-21 2024-03-28 Axsome Therapeutics, Inc. Compounds and combinations thereof for treating neurological and psychiatric conditions

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB855115A (en) * 1958-07-11 1960-11-30 Smith Kline French Lab Improvements in or relating to ª‰-aminoalkylthianaphthene and ª‰-aminoalkylbenzofuran derivatives
GB901919A (en) * 1959-02-12 1962-07-25 Upjohn Co Therapeutic compositions comprising alpha-alkyl-tryptamines
GB893707A (en) * 1960-03-01 1962-04-11 Roche Products Ltd Novel tryptamine derivatives and a process for the manufacture thereof
FR1344579A (fr) * 1961-11-23 1963-11-29 Sandoz Sa Nouveaux dérivés de l'indole et leur préparation
US3296072A (en) * 1962-06-11 1967-01-03 Upjohn Co Method of treating mental depression
US3472870A (en) 1966-08-29 1969-10-14 Mead Johnson & Co Sulfonamidotryptamines
US3883560A (en) 1973-07-05 1975-05-13 Colgate Palmolive Co Salicylamidophenethanolamines
FR2536749A1 (fr) * 1982-11-25 1984-06-01 Cerm Cent Europ Rech Mauvernay (amino-2 ethyl)-6 benzoxazolinones substituees, leur preparation et leurs applications en therapeutique
HU207280B (en) * 1986-09-25 1993-03-29 Chinoin Gyogyszer Es Vegyeszet Process for producing new phenyl-alkyl-amines and pharmaceutical compositions containing them
US5220068A (en) * 1986-09-25 1993-06-15 Chinoin Gyogyszer - Es Vegyeszeti Termekek Gyara Rt. Psychostimulant agent
TW270114B (sl) * 1993-10-22 1996-02-11 Hoffmann La Roche
US5627200A (en) * 1994-09-26 1997-05-06 Pfizer Inc β3 -Adrenoceptor agonists and antagonists for the treatment of intestinal motility disorders, depression, prostate disease and dyslipidemia
FR2729147A1 (fr) * 1995-01-11 1996-07-12 Adir Nouveaux composes (hetero) cycliques alkyles, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
FR2734816B1 (fr) * 1995-05-31 1997-07-04 Adir Nouveaux aryl (alkyl) propylamides, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
FR2734814B1 (fr) * 1995-05-31 1997-07-04 Adir Nouveaux composes alkoxy-aryles, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
GB9702310D0 (en) 1997-02-05 1997-03-26 Univ Hertfordshire Invention

Also Published As

Publication number Publication date
DK0957080T3 (da) 2006-10-23
IL129322A0 (en) 2000-02-17
AU8463598A (en) 1999-03-01
IL129322A (en) 2004-02-19
CN1236356A (zh) 1999-11-24
EP0957080A4 (en) 2004-10-20
HUP0001466A2 (hu) 2001-05-28
PT957080E (pt) 2006-10-31
JP4569980B2 (ja) 2010-10-27
HUP0001466A3 (en) 2001-09-28
WO1999007667A1 (fr) 1999-02-18
CA2267315C (en) 2008-01-08
ATE330930T1 (de) 2006-07-15
EP0957080A1 (en) 1999-11-17
EP0957080B1 (en) 2006-06-21
DE69835004T2 (de) 2007-03-01
CA2267315A1 (en) 1999-02-18
HU228759B1 (en) 2013-05-28
CN1182103C (zh) 2004-12-29
HK1022682A1 (en) 2000-08-18
KR100572900B1 (ko) 2006-04-24
DE69835004D1 (de) 2006-08-03
ES2267190T3 (es) 2007-03-01
US6214859B1 (en) 2001-04-10
AU747737B2 (en) 2002-05-23
KR20000068728A (ko) 2000-11-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SI9820009A (sl) Novi etilaminski derivati
AU710984B2 (en) (1S,2S)-1-(4-hydroxyphenyl)-2-(4-hydroxy-4-phenylpiperidin -1-yl)-1-propanolmethanesulfonate trihydrate
US20070203120A1 (en) Sulfonyl Substituted 1H-Indoles as Ligands for the 5-Hydroxytryptamine Receptors
HU185475B (en) Process for preparing /-/-n-methyl-3-/2-methyil-phenoxy/-3-phenyl-propyl-amine and salts thereof
JP2020502184A (ja) 疼痛および疼痛に関連する状態を処置するための新規なキノリンおよびイソキノリン誘導体
SK282944B6 (sk) Tavené tropánové deriváty, spôsob ich výroby, farmaceutický prostriedok s ich obsahom a ich použitie
JPH06179681A (ja) 置換されたアミノチエノピリジン、それらの製法および医薬としてのそれらの使用
US20200207759A1 (en) New propanamine derivatives for treating pain and pain related conditions
US20030008880A1 (en) 4-(2-Pyridyl) piperizines having 5HT7 receptor agonist activity
US8637551B2 (en) 2-(1,2-benzisoxazol-3-yl)benzylamine derivatives
US8168646B2 (en) 3,4-dihydroquinazoline derivatives
Romero et al. Inhibitors of Phenylethanolamine N-Methyltransferase That Are Predicted To Penetrate the Blood− Brain Barrier: Design, Synthesis, and Evaluation of 3-Fluoromethyl-7-(N-substituted aminosulfonyl)-1, 2, 3, 4-tetrahydroisoquinolines That Possess Low Affinity toward the α2-Adrenoceptor
AU762995B2 (en) Novel optically active aminopentane derivative
CA2327360A1 (en) Indol-3-yl-cyclohexyl amine derivatives for the treatment of depression (5-ht1 receptor antagonists)
CA2222573A1 (en) The use of alpha-1c-selective adrenoceptor agonists for the treatment of urinary incontinence
US20020103198A1 (en) Acylamino cyclopropane derivatives
KR20070061846A (ko) 신규한 크로멘-2-온 유도체 및 모노아민 신경전달물질재흡수 억제제로서의 이의 용도
KR100276994B1 (ko) 아릴알콕시페녹시-이미다졸린화합물
TW317565B (sl)
EP0940386A1 (fr) Nouveaux composés du benzocyclobutane, leur procédé de préparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
CN115960032A (zh) 具有β-arrestin偏向性激动活性的芳氧丙醇胺类β-肾上腺素受体配基及其用途
CA2327513A1 (en) N-aryloxyethyl-indoly-alkylamines for the treatment of depression
US20030191314A1 (en) Tetrahydroisoquinoline derivatives as modulators of dopamine D3 receptors
Tucker Studies toward the Synthesis of Analogues of the Marine Neurotoxins, Tetrodotoxin and Saxitoxin
MXPA00012609A (en) 4,5,6 and 7-indole and indoline derivatives, their preparation and use

Legal Events

Date Code Title Description
IF Valid on the event date
OU01 Decison according to article 73(1) ipa 1992, publication of decision on fulfilment of conditions on patentability

Effective date: 20061122

SP73 Change of data on owner

Owner name: FUJIMOTO CO., LTD.; JP

Effective date: 20101020

KO00 Lapse of patent

Effective date: 20150317