SE469132B - Polypeptider och farmaceutisk komposition innehaallande denna - Google Patents
Polypeptider och farmaceutisk komposition innehaallande dennaInfo
- Publication number
- SE469132B SE469132B SE8902186A SE8902186A SE469132B SE 469132 B SE469132 B SE 469132B SE 8902186 A SE8902186 A SE 8902186A SE 8902186 A SE8902186 A SE 8902186A SE 469132 B SE469132 B SE 469132B
- Authority
- SE
- Sweden
- Prior art keywords
- lys
- ala
- ile
- ser
- gly
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 31
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title claims abstract description 27
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 title claims abstract description 20
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims description 8
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims abstract 3
- 150000001408 amides Chemical group 0.000 claims description 6
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 claims description 6
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 5
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 5
- PRIVBYDFWSFUFP-RJLJEYQFSA-N cecropin p1 Chemical compound O=C([C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@@H](N)CO)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)CC)NCC(=O)NCC(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O PRIVBYDFWSFUFP-RJLJEYQFSA-N 0.000 claims description 4
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 3
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 claims description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 claims 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 claims 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 abstract description 4
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 abstract description 4
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 abstract 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 10
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 8
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 8
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 7
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 7
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 6
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 5
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 4
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 4
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 238000000967 suction filtration Methods 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VZTDIZULWFCMLS-UHFFFAOYSA-N ammonium formate Chemical compound [NH4+].[O-]C=O VZTDIZULWFCMLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 231100000636 lethal dose Toxicity 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 2
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 2
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 2
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 2
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 238000009738 saturating Methods 0.000 description 2
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 2
- 241000588624 Acinetobacter calcoaceticus Species 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 241000194107 Bacillus megaterium Species 0.000 description 1
- 108050004290 Cecropin Proteins 0.000 description 1
- 101800003223 Cecropin-A Proteins 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 229920002271 DEAE-Sepharose Polymers 0.000 description 1
- 241001646716 Escherichia coli K-12 Species 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 241000588767 Proteus vulgaris Species 0.000 description 1
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 1
- 241000293869 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium Species 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 241000193996 Streptococcus pyogenes Species 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- CJZGTCYPCWQAJB-UHFFFAOYSA-L calcium stearate Chemical compound [Ca+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O CJZGTCYPCWQAJB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000013539 calcium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000008116 calcium stearate Substances 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 108010046237 cecropin P1-LI Proteins 0.000 description 1
- HCQPHKMLKXOJSR-IRCPFGJUSA-N cecropin-a Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(N)=O)[C@@H](C)CC)C(C)C)[C@@H](C)CC)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN)C1=CC=CC=C1 HCQPHKMLKXOJSR-IRCPFGJUSA-N 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000008298 dragée Substances 0.000 description 1
- 239000006196 drop Substances 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- NPUKDXXFDDZOKR-LLVKDONJSA-N etomidate Chemical group CCOC(=O)C1=CN=CN1[C@H](C)C1=CC=CC=C1 NPUKDXXFDDZOKR-LLVKDONJSA-N 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 239000003629 gastrointestinal hormone Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Substances [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- -1 millopectin Polymers 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920001592 potato starch Polymers 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 229940007042 proteus vulgaris Drugs 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
- C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
- C07K14/4702—Regulators; Modulating activity
- C07K14/4703—Inhibitors; Suppressors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
15 25 30 35 2 Föreliggande uppfinning har till ändamål att åstad- komma nya baktericida polypeptider med förmåga att inhi- bera bakteriell tillväxt, i synnerhet tillväxten av gram- -negativa bakterier.
Ett annat ändamål med uppfinningen är att åstadkomma farmaceutiska kompositioner innehållande som aktiv be- ståndsdel sådana polypeptider. Ännu ett ändamål med uppfinningen är att åstadkomma polypeptider för terapeutisk användning, speciellt för behandling riktad på inhibering av bakteriell tillväxt hos djur, i synnerhet däggdjur innefattande människan.
För dessa och andra ändamål som kommer att framgå av följande framställning åstadkommas genom uppfinningen en polypeptid med aminosyrasekvensen: H-Ser-Trp-Leu-Ser-Lys-Thr-Ala-Lys-Lys-Leu-Glu-Asn-Ser-Ala- -Lys-Lys-Arg-Ile-Ser-Glu-Gly-Ile-Ala-Ile-Ala-Ile-Gln-Gly- -Gly-Pro-Arg-OH eller dess C-terminalamid, Amidatformen är det bättre antibiotikumet (Exempel 3).
Polypeptiden enligt föreliggande uppfinning och dess C-terminalamid är terapeutiskt användbar, speciellt som antibakteriellt ämne. Den har sålunda förmåga att inhibera tillväxten av bakterier, i synnerhet gram-negativa bakte- rier, vilket gör den användbar för olika terapeutiska ändamål. Detta kommer att ytterligare illustreras genom konkreta exempel som redovisas nedan.
Den aktiva polypeptiden enligt föreliggande uppfin- ning kan formuleras för användning inom human- eller vete- rinärmedicinen för terapeutisk eller profylaktiskt använd- ning. De aktiva beredningarna administreras normalt oralt, ' rektalt eller genom injektion i form av en farmaceutisk beredning eller komposition innehållande de aktiva be- ståndsdelarna i kombination med en farmaceutiskt accep- 10 15 20 25 30 35 $> Qx \O ...à 04 ha 3 tabel bärare, som kan vara fast, halvfast eller flytande, eller innehållas i en kapsel, såsom vid oral administra- tion. Som exempel på farmaceutiska beredningar kan nämnas tabletter, droppar, lösningar och suppositorier. Den akti- va beståndsdelen utgör vanligen den mindre delen av bered- ningen, såsom från cirka 0,1 till cirka 50% därav baserat på vikten.
För framställning av farmaceutiska kompositioner i form av dosenheter för oral applikation kan polypeptiden enligt uppfinningen blandas med en fast, pulverformig eller annan bärare, exempelvis laktos, sackaros, sorbitol, mannitol, stärkelse, såsom potatisstärkelse, majsstärkel- se, millopektin, cellulosaderivat eller gelatin, och kan även innefatta smörjmedel, såsom magnesium- eller kalcium- stearat, eller polyetylenglykolvaxer komprimerade till bildning av tabletter eller kroppar för dragéer.
Genom användning av flera skikt av bäraren eller di- luenten kan tabletter fungerande med långsam frigöring framställas.
Flytande beredningar för oral applikation eller för injektion kan utföras i form av elixir, sirup elles sus- pensioner, exempelvis lösningar innehållande från 0,1 till 20 viktprocent aktiv substans, socker och en blandning av etanol, vatten, glycerol, propylenglykol och eventuellt andra tillsatser av konventionellt slag.
Den dos med vilken den aktiva beståndsdelen admini- streras kan variera inom vida gränser och beror på olika faktorer, såsom störningens allvarlighetsgrad, åldern och vikten hos patienten och kan regleras individuellt.
Uppfinningen avser även polypeptiderna för terapeu- tisk behandling av djur, såsom däggdjur innefattande män- niskan, varivd den administreras i en mängd med förmåga att inhibera bakteriell tillväxt hos nämnda djur.
Föreliggande uppfinning kommer nu att ytterligare exemplifieras genom konkreta exempel, vilka emellertid ej får anses begränsa uppfinningens omfattning i annat av- seende än i enlighet med bilagda patentkrav. ö.
\Q ...x CN FD 10 15 20 25 30 35 EXEMPEL l Framställning av ett peptidkoncentrat Ett koncentrat av värmestabila intestinala peptider framställdes av tunntarm fràn gris i huvudsak såsom be- skrives pà annat ställe (Mutt, V. Arkiv Kemi lå, 69-74 (1959): Mutt, V. i Gut Hormones (ed. Bloom, S.R.), sid 21- 27, (Churchill Livingstone, Edinburg, 1978).
I korthet nedsänktes tunntarmens översta meterlånga del under 8 1 1 min. i kokande vatten och kyldes sedan på is och frystes. Det frysta materialet sönderdelades och extraherades vid 0-15°C med 0,5 M ättiksyra i 12 timmar, och blandningen filtrerades under sugning (med hjälp av "Hyflo Super-Cel", 30 g per liter suspension). Peptiderna absorberades från filtratet till alginsyra, och alginsyran bärande peptiderna tvättades i sin tur med 0,005 M HCl, 95% etanol (för avlägsnande av fetter) och åter 0,005 M HCl. Peptiderna eluerades med 0,2 M iskyld HCl, och eluatets pH bringades till 3,5 i 0,1 med natriumacetat.
Peptiderna utfälldes sedan genom mättning av eluatet med NaCl, och fällningen uppsamlades genom sugningsfiltrering.
Viktmängden av fällningen (vàtvikt) är cirka en tusendel av den för den kokade tarmvävnaden.
Koncentratet upplöstes vid rumstemperatur till en 10% vikt/vol lösning i vatten. Tvà volymer 95-procentig etanol sattes till lösningen, och (skenbart) pH (mätt med en glaselektrod) hos lösningen bringades till 7,5 i 0,1 med NaOH (1M Na0H:Et0H 1:2). En fällning bildades och avlägs- nades genom filtrering. Till den klara lösningen sattes en volym 95-procentig etanol förkyld till -20°C, och suspen- sionen hölls vid denna temperatur i 24 timmar varpå den filtrerades. Peptiderna tillvaratogs fràn filtratet i vattenlösning och utfälldes vid pH 3,5 i 0,1 genom mättnad av lösningen med NaCl. Fällningen, uppsamlad genom sug- filtrering, vägde cirka 10% av vikten av det koncentrat som togs för dess framställning. Den upplöstes i 0,2 M ACOH och kromatograferades i detta lösningsmedel på Sephadex G-25 fine. Den andra halva volymen av det peptid- Ik 10 15 20 25 30 35 is Ch vb ...à 04 BJ 5 haltiga eluatet från denna kromatografi mättades med NaCl, och fällningen uppsamlades genom sugfiltrering. Dess vikt var cirka 40% av den för peptidfällningen som togs för denna kromatografering. Den upplöstes i vatten, lösningens pH justerades till 4 1 0,1, varpå peptiderna återutfälldes med NaCl och fällningen uppsamlades genom sugning (det förelåg ingen väsentlig skillnad i vikt av materialet före och efter den förnyade utfällningen). Det återutfällda ma- terialet extraherades med metanol (50 ml/g), och den Me0H- -olösliga fraktionen uppsamlades genom sugfiltrering och tvättades på filtret med eter. Etern avdrevs i vakuum.
Vikten av det torra materialet var cirka 15% av den för den peptidfällning som tagits för extraktion med Me0H.
EXEMPEL 2 Rening av koncentrat Som utgångsmaterial för reningen användes koncentra- tet erhållet från Exempel 1, Koncentratet (1,5 g) upplös- tes i 80 ml ammoniumformiat, pH 6,4 och behandlades med 30 ml DEAE Sepharose, satsvis.
Steg 1: Kromatografi på CM-Sepharose CL-6B (56 ml kolonn, bringad i jämvikt med 0,1 M ammoniumformiat, pH 6,4). l Eluering utfördes först med 0,1 M ammoniumformiat (cirka 2100 ml) eluering 5,2 (300 topp med till låg extinktion och sedan utfördes gradient- under användning av 0,1-0,85 M ammoniumacetat, pH + 300 ml). Aktiviteten lämnar som en integral ett maximum vid 0,38 M, specifik aktivitet 30-40 enheter/pg (1 enhet definieras som aktiviteten av 1 ng cekropin A).
Steg 2: Kromatografi på en S Sepharose Fast Flow (26 ml kolonn, bringad i jämvikt med 0,30 M ammoniumacetat, pH 5,2). Toppen från Steg 1 utspädes 1,3 gånger till cirka 0,3 M och appliceras på kolonnen. Eluering utföres först under användning av 0,3 M ammoniumacetat (cirka 230 ml), sedan utföres gradienteluering med 0,30-0,50 M ammonium- acetat, pH 5,2 (300 + 300 ml). Aktiviteten lämnar efter 10 15 20 25 30 35 6 UV-materialet och toppen elueras med 0,40 M.
Toppmaterialet frystorkas, specifik aktivitet 200-400 enheter/pg.
Steg 3: FPLC på PepRPC (C2/C18-kolonn). Toppen från Steg 2 upplöses i 0,l% TFA i vatten. Materialet överföres på ko- lonnen bringad i jämvikt med 0,l% TFA. Eluering utföres först med 0,l% TFA till dess att A214 minskat till bas- linjen, varefter komplexgradienteluering utföres: 0-5 min 0-29% CH3CN, 5-45 min. 29-48% CH3CN, 45-50 min. 48-100% CH3CN. Många UV-toppar observeras men aktiviteten uppsam- las i 2 till 3 rör under eluering med 33% CH3CN. Den spe- cifika aktiviteten bedömes vara minst 700 enheter/pg.
Steg 4: Återkromatografi i FPLC på PepRPC. Toppen från Steg 3 utspädes två gånger med vatten och appliceras på samma kolonn. Eluering utföres först med 0,1% TFA till dess att A214 plexgradienteluering utföres: 0-5 min. 0-29% CH3CN, 5-65 29-38% CH3CN, 65-70 min. 38-100% CH3CN. I allmänhet elueras en UV-topp med aktivitet vid 33% CH3CN. Specifik aktivitet cirka 700-1200 enheter/pg. minskat ned till baslinjen, varefter kom- min.
Den från Steg 4 erhållna renade peptiden underkasta- des sekvensanalys och masspektroskopi. Den ovan angivna aminosyrasekvensen bekräftades.
EXEMPEL 3 Den i Exempel 2 erhållna polypeptiden testades med avseende på antibakteriell aktivitet gentemot olika bak- terier, varvid aktiviteten återges som letala koncentra- tioner i mikromoler per liter (uM). Resultaten från för- söken återges i Tabell 1 nedan. 10 15 20 25 30 35 7 TABELL 1 Antibakteriella aktiviteter som letala koncentrationer Ü\ \D ...s OJ (pM) för två syntetiska former av cekropin P1.
NJ Organism och stam P1-NH2 Pl-OH Escherichia coli K12, D21 0,3 0,4 853/67, 0149, K88 0,9 0,6 Bd222l/75, 08, K88 0,6 0,7 Bd4462/84, 0101, K99 0,7 0,8 Bd4466/84, 064, K99 0,3 0,6 Salmonella typhimurium, LT2 0,9 1,7 Acinetobacter calcoaceticus, Ac11 0,2 0,5 Proteus vulgaris, Pvll 5,7 12 Pseudomonas aeruginosa, OT97 5,9 13 Bacillus megaterium, Bmll 1,8 5,3 Streptococcus pyogenes 19 44 Staphylococcus aureus, Cowan 1 >490 >520 De fyra sista stammarna av E.co1i erhölls från Olof Söderlind, SVA, Uppsala och de är kliniska isolat som är patogena för smàgrisar. Typning av 0- och K-antigener an- ges efter stamnumret. Letal koncentration är den lägsta koncentrationen av cekropin som inhiberar tillväxt av respektive bakterier i tunna agarosplattor (se Hultmark, D. et al. EMBO J. 2, 571-576 (1983)).
Claims (9)
1. l. Polypeptid med aminosyrasekvensen: H-Ser-Trp-Leu-Ser-Lys-Thr-Ala-Lys-Lys-Leu-Glu-Asn-Ser-Ala- -Lys-Lys-Arg-Ile-Ser-Glu-Gly-Ile-Ala-Ile-Ala-Ile-Gln-Gly- -Gly-Pro-Arg-OH eller dess C-terminalamid.
2. Polypeptid enligt patentkravet 1 i en oderivati- serad form.
3. Polypeptid enligt patentkravet 1 i form av dess C-terminalamid.
4. Polypeptid enligt något av de föregående patent- kraven för terapeutiskt användning.
5. Polypeptid enligt patentkravet 4 för användning som antibakteriellt ämne.
6. Farmaceutisk komposition innehållande som aktiv beståndsdel en polypeptid med aminosyrasekvensen: H-Ser-Trp-Leu-Ser-Lys-Thr-Ala-Lys-Lys-Leu-Glu-Asn-Ser-Ala- -Lys-Lys-Arg-Ile-Ser-Glu-Gly-Ile-Ala-Ile-Ala-Ile-Gln-Gly- -Gly-Pro-Arg-OH eller dess C-terminalamid i en antibakte- riellt effektiv mängd tillsammans med en farmaceutiskt acceptabel bärare eller diluent.
7. vari nämnda bärare eller diluent är acceptabel för oral, Farmaceutisk komposition enligt-patentkravet 6, intramuskulär, intravenös eller subkutan administration.
8. Farmaceutisk komposition enligt patentkravet 6 eller 7, vari polypeptiden föreligger i en oderivatiserad form.
9. Farmaceutisk komposition enligt patentkravet 6 eller 7, vari polypeptiden föreligger i form av dess C-terminalamid.
Priority Applications (8)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SE8902186A SE469132B (sv) | 1989-06-16 | 1989-06-16 | Polypeptider och farmaceutisk komposition innehaallande denna |
| US07/531,110 US5096886A (en) | 1989-06-16 | 1990-05-31 | Antibacterial polypeptides |
| DE90850228T DE69002881T2 (de) | 1989-06-16 | 1990-06-06 | Peptide und deren Benutzung. |
| DK90850228.9T DK0403458T3 (da) | 1989-06-16 | 1990-06-06 | Hidtil ukendte polypeptider og anvendelse deraf |
| AT90850228T ATE93527T1 (de) | 1989-06-16 | 1990-06-06 | Peptide und deren benutzung. |
| EP90850228A EP0403458B1 (en) | 1989-06-16 | 1990-06-06 | Novel polypeptides and their use |
| CA002018461A CA2018461C (en) | 1989-06-16 | 1990-06-07 | Novel polypeptides and their use |
| JP2157378A JP2856850B2 (ja) | 1989-06-16 | 1990-06-15 | 新規ポリペプチドおよびそれらの使用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SE8902186A SE469132B (sv) | 1989-06-16 | 1989-06-16 | Polypeptider och farmaceutisk komposition innehaallande denna |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SE8902186L SE8902186L (sv) | 1990-12-17 |
| SE469132B true SE469132B (sv) | 1993-05-17 |
Family
ID=20376306
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SE8902186A SE469132B (sv) | 1989-06-16 | 1989-06-16 | Polypeptider och farmaceutisk komposition innehaallande denna |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5096886A (sv) |
| EP (1) | EP0403458B1 (sv) |
| JP (1) | JP2856850B2 (sv) |
| AT (1) | ATE93527T1 (sv) |
| CA (1) | CA2018461C (sv) |
| DE (1) | DE69002881T2 (sv) |
| DK (1) | DK0403458T3 (sv) |
| SE (1) | SE469132B (sv) |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SE468516B (sv) * | 1991-06-14 | 1993-02-01 | Kabigen Ab | Nya polypeptider vilka kan utvinnas fraan tunntarmen och deras anvaendning |
| US5847047A (en) * | 1993-06-22 | 1998-12-08 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Antimicrobial composition of a polymer and a peptide forming amphiphilic helices of the magainin-type |
| US5856178A (en) * | 1993-08-30 | 1999-01-05 | Utah State University | DNA cassettes for expression of lytic peptides in mammalian cells and transgenic organisms containing same |
| DK0831877T3 (da) * | 1995-06-07 | 2005-02-14 | Telik Inc | Metabolske virkninger af visse glutathionanaloge |
| US6040293A (en) * | 1996-11-06 | 2000-03-21 | The Regents Of The University Of California | Clavanins |
| US6010876A (en) * | 1996-11-06 | 2000-01-04 | The Regents Of The University Of California | Clavanins |
| US20020065397A1 (en) | 2000-10-12 | 2002-05-30 | Joseph Roberts | Protecting therapeutic compositions from host-mediated inactivation |
| WO2010141135A2 (en) * | 2009-03-05 | 2010-12-09 | Trustees Of Boston University | Bacteriophages expressing antimicrobial peptides and uses thereof |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4705777A (en) * | 1985-02-25 | 1987-11-10 | The Regents Of The University Of California | Cationic oligopeptides having microbicidal activity |
| US4810777A (en) * | 1987-03-04 | 1989-03-07 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Antimicrobial compounds |
| US4962277A (en) * | 1988-12-09 | 1990-10-09 | Scripps Clinic And Research Foundation | Deletion analogues of magainin peptides |
-
1989
- 1989-06-16 SE SE8902186A patent/SE469132B/sv not_active IP Right Cessation
-
1990
- 1990-05-31 US US07/531,110 patent/US5096886A/en not_active Expired - Fee Related
- 1990-06-06 AT AT90850228T patent/ATE93527T1/de not_active IP Right Cessation
- 1990-06-06 DE DE90850228T patent/DE69002881T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1990-06-06 EP EP90850228A patent/EP0403458B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1990-06-06 DK DK90850228.9T patent/DK0403458T3/da active
- 1990-06-07 CA CA002018461A patent/CA2018461C/en not_active Expired - Fee Related
- 1990-06-15 JP JP2157378A patent/JP2856850B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US5096886A (en) | 1992-03-17 |
| EP0403458A1 (en) | 1990-12-19 |
| DE69002881D1 (de) | 1993-09-30 |
| CA2018461A1 (en) | 1990-12-16 |
| CA2018461C (en) | 2000-09-26 |
| JPH03101698A (ja) | 1991-04-26 |
| DE69002881T2 (de) | 1994-02-24 |
| ATE93527T1 (de) | 1993-09-15 |
| JP2856850B2 (ja) | 1999-02-10 |
| EP0403458B1 (en) | 1993-08-25 |
| DK0403458T3 (da) | 1994-01-10 |
| SE8902186L (sv) | 1990-12-17 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Tarver et al. | Enteric β-defensin: molecular cloning and characterization of a gene with inducible intestinal epithelial cell expression associated with Cryptosporidium parvum infection | |
| US6696559B1 (en) | Antimicrobial peptides and methods of use | |
| EP0625354B1 (de) | Arzneimittel enthaltend die Untereinheit p40 von Interleukin-12 | |
| AU667472B2 (en) | Novel polypeptides and their use | |
| Darveau et al. | Peptides related to the carboxyl terminus of human platelet factor IV with antibacterial activity. | |
| WO2020256387A1 (ko) | Romo1 유래 항균 펩타이드 및 그 변이체 | |
| US5432270A (en) | DNA encoding tracheal antimicrobial peptides | |
| KR101341210B1 (ko) | 신규한 항균 펩타이드 및 이의 용도 | |
| SE469132B (sv) | Polypeptider och farmaceutisk komposition innehaallande denna | |
| KR102368983B1 (ko) | 항균활성을 갖는 폴리펩타이드, 이를 포함하는 패혈증 예방 또는 치료용 조성물, 및 항균용 조성물 | |
| DE68917837T2 (de) | Peptid-Verbindungen. | |
| JPH0272869A (ja) | 細胞増殖抑制因子 | |
| WO2024053836A1 (ko) | 항생제 내성균에 대한 항균 활성을 가지는 항균 펩타이드 h103b 및 이의 용도 | |
| JP2001186887A (ja) | サソリ毒由来の抗菌ペプチド | |
| KR102146935B1 (ko) | 광대노린재로부터 유래된 포에실로코리신-1 펩타이드, 이를 유효성분으로 포함하는 항균, 항진균 또는 항염증용 조성물 | |
| KR102026769B1 (ko) | 장수풍뎅이 유충에서 유래한 알로미리나신-1 펩타이드, 이를 유효성분으로 포함하는 항균, 항진균 또는 항염증용 조성물 | |
| KR102146937B1 (ko) | 왕사마귀로부터 유래된 테노데라신-1 펩타이드, 이를 유효성분으로 포함하는 항균, 항진균 또는 항염증용 조성물 | |
| SE502670C2 (sv) | En ny 78-resters polypeptid (NK-lysin) och dess användning | |
| CN113698460A (zh) | 一种大肠杆菌lipid A结合基元PCK及其制备方法与应用 | |
| CN115873092A (zh) | 一种来源于束带蛇的抗菌多肽及其制备方法和用途 | |
| CN116102635A (zh) | 一种来源于水生哺乳动物的Cathelicidin家族多肽及其制备方法和用途 | |
| WO2002070551A2 (en) | Neuritogenic compound and uses thereof | |
| JPH0680695A (ja) | ペプチド | |
| JPH069427A (ja) | 敗血症の予防・治療薬 | |
| JPH0482840A (ja) | 細菌性ショック治療剤 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| NAL | Patent in force |
Ref document number: 8902186-9 Format of ref document f/p: F |
|
| NUG | Patent has lapsed |
Ref document number: 8902186-9 Format of ref document f/p: F |