SE442011B - N-(4-alkanoyloxifenyl)-all-trans-retinamid och komposition for forhindrande av framkallning av kancer i epitelial vevnad - Google Patents

Description

7906365-7 2 10 15 20 25 30 35 UU som har förekommit.

Följakligen har det föreslagits, att ett alternativt närman- de till problemet av epitelial kancer är att betrakta sjukdomen som en process, som tar många år att nå sitt slutliga inkräktande steg hos människan och som kan kontrolleras genom fysiologiska eller farmakologiska mekanismer under dess tidiga steg, med må- let att förhindra slutstegets inkräktande, ändsjukdom.

Retinoider spelar en väsentlig roll i att kontrollera den normala différentieringen av epiteliala vävnader och är därför viktiga för att kontrollera förmalign epitelial celldifferenti- ering. Det har även visat sig, att retinoider kan orsaka cell: läkning av hyperplastiska och anaplastiska skador orsakade av kemiska kancerframkallare. Dessutom har retinoid brist visat i experimentdjur att öka mottagligheten för kemisk framkallning av kancer. I själva verket är retinoider väsentliga för den nor- mala celldifferentieringen av epitelier, som svarar för mer än hälften av den totala primära kancern hos både män och kvinnor» Dessa epitelier omfattar de hos bronkerna och luftröret, magen, tarmen, livmodern, njuren och urinblåsan, tistekeln, prostata, bukspottkörtelgångarna och huden. I frånvaro av retinoider i di- eten uppträder normal celldifferentiering inte i dessa epitelier.

Emellertid har naturliga retinylestrar, såsom retinylacetat och retinylplamitat, såväl som retinsyra, visat sig vara för tox- iska vid höga doseringsnivåer för att vara av praktiskt värde. vid kancerförhindring hos högre däggdjur. Framsteg har nyligen gjorts i att identifiera syntetiska retinoider, t ex l3-cis-re- tinsyra, som är åtskilligt mindre toxiska än retinsyra eller de naturliga retinylestrarna och även är mera starka i att förhind- ra kemisk framkallníng av kancer. Se_"l3-cis-Retinoic Acid: In- hibitor of Bladder Carcinogenesis in the Hat", Science, Ä febru- ari 1977, volym 195, sid. 487-H89 så väl som "l3-cis-Retinoic Acid: Inhibition of Bladder Carcinogenesis Induceo in Bats by N-Butyl- N-(4-hydroxy-butyl)nitrosamine", Science, l8 november 1977, volym 198, sid. 743-74H. 13-cis-retinsyra har emellertid inte visat sig vara särskilt verksam mot bröstkancer i råttmodellen, som disku- teras härefter. med titeln "Prevention of Chemical CarCïfl0šen@SiS by Vitamin A and its Synthetic Analogs (Retinoids)", Federation Proceedings, 35 (1 maj 1976) 1332-1353, i vilken det 3 7906565-7 noteras att det fortfarande återstår att finna ett mal för prak- tisk tillämpning på människa och andra däggdjur av höggradígt verk- samma syntetiska retinoider, som även har låg toxicitet och en hög grad av vävnadsspecificitet mot kancer, vid vilket särskilt 5 organställe som helst. Se även artiklarna i Fall, 1977, utgiven av The Southern Research Institute Bulletin (volym 50, nummer 2), sid 3-9 ("CHEMOPREVENTION OF CANCER - Steps Leading to Some Malig- nancies May Be Reversible“ and "How Do Hetinoids work? Studies on Retinoic Acid-Binding Protein“). Andra nyliga publikationer av lo intresse inom detta område omfattar "Biological Activity and Meta- bolism of the Retinoid Axerophthene (Vitamin A Hydrocarbon)", Cancer Research 38, l75ü-1738, juni 1978; och "Eetinoids and Can- cer Prevention: The importance of the Terminal Group of the Reti- noid Molecule in Modifying Activity and Toxicity“ i Carcinogens: is Identification and Mechanism of Action, A.C. Griffin & C.R. Shaw, utgivare, N.Y. Raven Press, 1978 (under tryckning).

Vissa nya N-(U-acyloxifenyl)-all-trans-retinamider, i all synnerhet de föreningar med strukturen: \ Û. 30: \\ \\-/¿§\/”Lev/fL\\g-- vari n är 1-18, har den önskvärda kombinationen av egenskaperna (1) låg systemisk toxicitet, (2) god verkan i att förhindra epi- lš telial kancer hos däggdjur vid rimliga doseringsnivâer och (3) " adekvat.måkpecifícitet i att koncentreras vid en eller flera all- männa ställen för epitelial kancer hos däggdjur, såsom bröstet, urinblåsan, grovtarmen, lungorna och bukspottkörteln.

Vid användning för förhindrandet av framkallning av kancer 10 administreras N-(H-acyloxifenyl)-all-trans-retinamidföreningarna enligt föreliggande uppfinning systemiskt, lämpligt oralt, i en farmaceutiskt godtagbar vehikel förenlig därmed vid en doseringe- nivå verksam för att förhindra eller fördröja framkallning av kan- cer men under den, som skulle vara toxisk. Läkemedlet administre- 35 ras vid regelbundna intervall, lämpligen vid måltider eller en gång dagligen. Doser av storleksordningen 50 mg/kg/dag eller mind- re är verksamma i att förhindra epitelial kancer. ÄO U 7906365-7 10 15 20 25 _Anal. ber. för CZBH Exempel 1 N-(4-acetoxifenyl)-all-trans-retinamid 3 OCCH :I en folietäckt trehalsad kolv placerades en lösning av 5,00 g (0,0129 mol) N-(U-hydroxifenyl)-all-trans-retínamid i 10 ml pyridin. (Framställningen av N-(U-hydroxifenyl)-a1l-trans-retina- mid beskrives i amerikanska patentskriften U10 880. Till detta (0, 0162 mol) ättiksyraanhydrid i 5 ml pyridin. Kolven nedsänktes sedan i ett oljebad vid 9500 i 1 sattes en lösning av 1,65 g timme, varunder innehållen sväptes med kväve och omrördes med en magnetisk omrörare. Reaktionsblandningen kyldes sedan till rums- temtperatur i is och hälldes i 150 ml kallt destillerat vatten.

Det gula fasta ämnet, som frånskildes, och den vattenhaltiga fasen överfördes till en separertratt och skakades med 300 ml etyleter, tills det fasta ämnet upplöstes. Den vattnehaltiga fasen bortkastades och eterfasen tvättades med fyra 50 ml portioner kallt destillerat vatten. Etern torkades över natriumsulfat, filtrerades och induns- tades i vakuum. Den gula fasta återstoden omkristallisérades från metanol (H0 ml per gram). Produkten smält vid 179-18100. Dess pro- tonmagnetiska resonansspektrum var överensstämmande med struktu- ren med inte några främmande resonanser.

C, 77,6 H, 8,läíN,,3;23f _ C, 77,3 H, 8,05 N, 3,09 Exempel 2 N'(4"PT0Pi0flyl0XífenYl)-all-trans-retinamid :sms _* Funnet Man löste 5,00 g (0,0l28 mol) N-(4-hydroxifenyl)-all-trans_retin_ amid i 10 ml pyridin. Till detta sattes en lösning av 2,08 g ”(0,0l60 mol) propionsyraanhydrid i 5 ml pyridin. Kolven nedsänk- tes sedan i ett oljebad vid 9500 i l timma, varunder innehållen sväptes med kväve och omrördes med en magnetisk omrörare. Reak- tionsblandningen kyldes sedan till rumstemperatur i is och häll- des i 150 ml kallt destillerat vatten. Det gula fasta ämnet, som frånskildes, och den vattenhaltiga fasen överfördes till en sepa- -o 5 7906365-7 rertratt och skakades med 200 ml etyleter, tills det fasta ämnet löstes. Den vattenhaltiga fasen bortkastades och eterfasen tvät- tades med fyra 40-ml portioner kallt destillerat vatten. Etern torkades över natriumsulfat, filtrerades och índunstades i vakuum.

Den gula fasta återstoden omkristalliserades från metanol (BH ml per gram). Produkten smälte vid 170-l7l°C. Dess protonmagnetiska resonansspektrum var överensstämmande med strukturen med inte någ- ra främmande resonanser, Anal. ber. för C H NO '29 s? 3* Funnet ' C, 77,8 H, 8,33 N, 3,13 C, 77,7 H, 8,16 N, 3,01 Exempel 3 N-(Ä-n-buturyloxifenyl)-all-trans-retinamid E' sk/SÄ: -E-occrgcfi en / 2 3 I en folietäckt trehalsad kolv placerades en lösning av 5,00 g . (0,0l28 mol) N-(4-hydroxífenyl)-all-trans-retinamid i 10 ml pyri- din. Till detta sattes en lösning av 2,53 g (0,0l60 mol) n-smör- :H- syraanhydrid i 5 ml pyridin. Kolven nedsänktes sedan i ett oljebad vid 9590 i en timma, varunder innehållen sväptes med kväve och omrördes med en magnetisk omrörare. Reaktionsblandningen kyldes sedan till-ršmstemperatur i is och hälldes i 150 ml kallt des- tillerat vatten. Fällningen, som separerade, fíltrerades, tvätta- .des med vatten och torkades i vakuum. Det torra fasta ämnet om- kristalliserades från l:l kloroform-hexan (10 ml per gram). Dess protonmagnetiska resonansspektrum var överensstämmande med struk- turen med inte några främmande resonanser. Det smälte vid 175-l76°C.

Anal. ber. för CBOHBQNOB : Funnet : C, 78,0 H, 8,52 N, 3,03 C, 78,0 H, 8,45 N, 3,03 Exempel Ä N-(ü~acetoxifenyl)-all-trans-retinamid och N-(U~propionyloxifenyl)- all-trans-retinamid jämfördes med retinsyra i en in vitro sållande modell för att identifiera retinoider, som har verkan att förhind- ra framkallning av kancer i epitelial vävnad. Den experimentella metoden, som är beskriven Experimental Lung Cancer: Intern'l Symp, 575-82, l97ü, omfattar upphävande av keratinisering i odling av trakealt organ.

I kort sammandrag undergår i frånvaro av retinsyra eller en 7906365-7 ' 6 10 15 20 25 syntetisk retinoid med liknande verkan försöksorganodlingen av trakealt epitel oregelbunden differentiering. Tillsats av små kon- centrationer retinsyra (så långt som l0_9M) kommer orsaka åter- gång till normalt trakealt epitel. Försöksföreningarna jämföres i verkan med retinsyra eller en annan aktiv standard både vad avser skvamös metaplasi och keratinalstring, av vilka båda är mått på abnorm utveckling av epitelialodlingen.

I försöken, som rapporteras i tabell I nedan, odlades alla trakea för de första 3 dagarna i medium utan retinoid. Vid den- na tidpunkt uppsamlades några trakea, under det att resten odla- des i ytterligare en vecka i medium, som innehåller antingen in- gen.retinoid eller retinoid som tillsats=vid de visade koncen- trationerna. Dessa trakea uppsamlades på den 10:e odlingsdagen.

Odlingarna graderades vad beträffar procenten av deras totala epitel, som visar skvamös metaplasi på åtta tvärsektioner från mitten av varje trakea. Om mer än 40 % av den totala epitelläng- den var-skvamös, graderades den såsom att ha allvarlig skvamös metaplasi; mellan 10-HO % graderades såsom markerad; mellan 2-10 % graderades såsom mild; och mindre än 2 % graderades såsom mini- mal.

Resultaten, som summerats i tabell I nedan, visar, att både 4-acetoxifenyl-retinamid och U-propionyloxifenyl-retinamid upp- visar samma storleksordníng på verkan som retinsyra vid en kon- centration av lO-8M. Vid lO_9M är propionyloxifenylretinamid i- gen väsentligen så verksam som retinsyra, under det att ace- _ toxifenyl-retinamid är något mindre verksam i att upphäva keratí~ nisering. amuwww H cnu:m cwwwn w oawwswww w< wwwwmwww owmws Uosmsawwam ämm wwwwzowamw 7906365-7 wmämsawwsm m4 oswwzmmw w oawwsmmw Emm wmmflmwww Ambnmw onwwsmmwv w< wx Hamas ßwswšww šwwm Ewwxmwmm >HH Hzmmz wmwwzowm Awmmv cvwmmšwma mmw w Hm w :N mm Nm av Hswms wmnwnowa. cnvmmšwwa nwm wo Awcov H w ww mo wc mm mmwwsmmwm ~o|m 2 ^~@V wfl tm NM Q O O H@|@ 2 Awwzv Hm ufl ww HN w w ~@-H@z ^= cnwomwoxwwmswwlwmnwsmäwa wolw 2 .flwv =c mo O Q 0 Q ~O-@ 2 ñmv Q HN uu mo O uu zlflwouwoßwwoxwwmnwvnwmnwsmšwa wofw 2 Amv mo :O wo wo 0 Q ~@|@ z ^mv Q cc =@ wo Q Q 7906365-7s 8 Exempel 5 N-(U-propionyloxyfenyl)-all-trans-retínamid jämfördes med retinylacetat i det experimentella försöket för verkan mot bröst- kancer hos råttor, beskrivet i Nature, volym 267, sid. 620-621 som mäter förmåga att hämma fråmkåïlåfldëï av bröstkancer orsa- kad av N-metyl-N-nitrosorea (MNU). Försöksförïållandena och re- sultaten efter 8 veckors försök framställs i tabell 2" Ä*PP0Pí0flYl' oxifenyl-retinamid är inte endast väsentligen så verksam som re- ' tinylacetat, den är även mindre toxisk, såsom visas i medelvikt- data. 7906365-7 Hwdmww HH Ašzcv | wwmšxmwwmm cwmmfiwwsømw Am mflamflncšmflu eodwwa wßwmw zmmmpu mmwowsomms wmæwsowm wwmx mmwwwumswsm wHwsmwdo< o\m ^o av o Mum = mmflwdwwumomwww o\m ^o mv o www = =|momwoxwwm:zw:ww«w:w5wß o\m Ao mv o www = wnwwøwwozwwoxwwmzwwnwmnwswawm o\m Åo NV Q mwfl 2zG“ :mm Qom mHwsQwwo< w:\w: Aww wv mr wwfl zzc. |=| :|wm«»:<~|mO@«m« m\Hw Awo §V HH wwa zzmv |=| =|womfloxwwmSæH|wmnwsm5w@ m\Hm ^mo fiv HH www 320. 1:1 cnuwouwoswwoxwwmzmw|wm«w:w§w@ w\Hm Åmw wv z www Uucwn wwHmm:m|Uw2Hm@.3o:flmflwow mßäwwwbm www: >wm mmuwmzmnømzwww Wwwnwzommzu wwwmfimwwws Ezc. mmflnofi mwïmww m H.<. wzumwnwosmw wmwwzowmmwn mmdwbowumfi wmmwmw H Hmmöwömmšmnmw ons Uwmsmmmmm w Qwmfimwöm. wwnaowbw wHmom| Hmaom vw Qwmfi w mmw wwflww mwmnm šzclwsumwdwos. >HHm mowmd Qwmd. mmw»5owmHmm5w5mm4; Emmmwn mo m flwwownmbowfi mnmßow ^u"Hv» o.om Ew =em3øN mo=. o~om EH Ufi|Q|aorowmflnw\Wm :masa Hmcowmdowwmšww. mmnw:owauHw3Qudo<" mo m wmnwöowaipmm:w5mmBwmmH\xm\nwmn 790636547* 10 variationer kan naturligtvis göras utan att man» avviker-_ från andan och ramen för föreliggande uppfinning.

Claims (5)

11 7906365-7 Patentkrav <9

1. Förening, k ä n n e t e c k n a d därav, att den ut- ' göres av en N-(4-acyloxifenyl)~all-trans-retinamid med struktu- f H kšßc-ßnfann vari n betecknar ett heltal från l till 18.

2. N-(U-acyloxífenyl)-all-trans-retínamid enligt krav l, k ä n n e t e c k n a d därav, att den utgöres av 4-(Ä-acetoxi# fenyl)-all~trans-retinamid, N-(U-propionyloxifenyl)-all-trans- Pen retinanid eller N-(Ä-butyryloxi-fenyl)-all-trans-retinamid.

3. Komposition för förhindrande av framkallning av kancer i epitelial vävnad, k ä n n e t e c k,n a d därav, att den om- fattar en verksam mängd för behandling av kancer av en retínamíd enligt krav 1 i en faxmaceutiskt godtagbar vehikel förenlig därmed. H.

4. Komposítion enligt krav 3, k ä n n e t e c k n a d där- av, att retinamiden är N-(H-acetoxifenyl)-all-trans-retinamid, N-(Ä-propionyloxifenyl)-all-trans-retínamid eller N-(ü-butyry1- oxifenyl)-all~trans-retinamid. i

5. Kompositíon enligt krav 3, k ä n n e t e c k n a d där- av, att den föreligger i oral doseringsform.