SA519401369B1 - بروتينات رابطة ناتجة عن عودة الارتباط الجيني واستخدامها - Google Patents
بروتينات رابطة ناتجة عن عودة الارتباط الجيني واستخدامها Download PDFInfo
- Publication number
- SA519401369B1 SA519401369B1 SA519401369A SA519401369A SA519401369B1 SA 519401369 B1 SA519401369 B1 SA 519401369B1 SA 519401369 A SA519401369 A SA 519401369A SA 519401369 A SA519401369 A SA 519401369A SA 519401369 B1 SA519401369 B1 SA 519401369B1
- Authority
- SA
- Saudi Arabia
- Prior art keywords
- ala
- leu
- gly
- asp
- protein
- Prior art date
Links
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 title claims abstract description 258
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 title abstract description 231
- 102000008102 Ankyrins Human genes 0.000 claims abstract description 260
- 108010049777 Ankyrins Proteins 0.000 claims abstract description 260
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims abstract description 173
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 claims abstract description 114
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 claims abstract description 113
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 41
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims abstract description 31
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims abstract description 31
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims abstract description 30
- 101001012157 Homo sapiens Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Proteins 0.000 claims abstract description 14
- 102100030086 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Human genes 0.000 claims abstract description 9
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 399
- 230000006798 recombination Effects 0.000 claims description 81
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 67
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 66
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 66
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 64
- 229960000575 trastuzumab Drugs 0.000 claims description 53
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 41
- 235000002020 sage Nutrition 0.000 claims description 24
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 claims description 23
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 claims description 20
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 claims description 20
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 claims description 20
- 238000005215 recombination Methods 0.000 claims description 19
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 claims description 16
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 claims description 16
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 claims description 16
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 claims description 14
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 claims description 14
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 claims description 14
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 claims description 11
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 claims description 11
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims description 10
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims description 10
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 6
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 5
- 102000051957 human ERBB2 Human genes 0.000 claims description 5
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 claims description 2
- 102000023732 binding proteins Human genes 0.000 claims 26
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 14
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 claims 5
- 108010055167 CD59 Antigens Proteins 0.000 claims 1
- 102100022002 CD59 glycoprotein Human genes 0.000 claims 1
- 241000511343 Chondrostoma nasus Species 0.000 claims 1
- 101100149256 Mus musculus Sema6b gene Proteins 0.000 claims 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 claims 1
- 239000011800 void material Substances 0.000 claims 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 36
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 30
- -1 are disclosed Proteins 0.000 abstract description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 374
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 371
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 142
- LXKNSJLSGPNHSK-KKUMJFAQSA-N Leu-Leu-Lys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N LXKNSJLSGPNHSK-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 126
- 108010041407 alanylaspartic acid Proteins 0.000 description 96
- PLOKOIJSGCISHE-BYULHYEWSA-N Asp-Val-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O PLOKOIJSGCISHE-BYULHYEWSA-N 0.000 description 95
- UEHRGZCNLSWGHK-DLOVCJGASA-N Val-Glu-Val Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O UEHRGZCNLSWGHK-DLOVCJGASA-N 0.000 description 95
- ZVFVBBGVOILKPO-WHFBIAKZSA-N Ala-Gly-Ala Chemical compound C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O ZVFVBBGVOILKPO-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 86
- GVMXJJAJLIEASL-ZJDVBMNYSA-N Thr-Pro-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O GVMXJJAJLIEASL-ZJDVBMNYSA-N 0.000 description 63
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 59
- OMMDTNGURYRDAC-NRPADANISA-N Ala-Glu-Val Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O OMMDTNGURYRDAC-NRPADANISA-N 0.000 description 58
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 54
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 54
- AIOWVDNPESPXRB-YTWAJWBKSA-N Pro-Thr-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@@H]2CCCN2)O AIOWVDNPESPXRB-YTWAJWBKSA-N 0.000 description 51
- FSPVILZGHUJOHS-QWRGUYRKSA-N Gly-His-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CC1=CNC=N1 FSPVILZGHUJOHS-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 50
- WCFCYFDBMNFSPA-ACZMJKKPSA-N Asp-Asp-Glu Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O WCFCYFDBMNFSPA-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 49
- SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-valine Natural products CC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 49
- 108010047495 alanylglycine Proteins 0.000 description 49
- SDZRIBWEVVRDQI-CIUDSAMLSA-N Ala-Lys-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O SDZRIBWEVVRDQI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 45
- 108010025153 lysyl-alanyl-alanine Proteins 0.000 description 42
- FZIJIFCXUCZHOL-CIUDSAMLSA-N Lys-Ala-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN FZIJIFCXUCZHOL-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 41
- 108010025306 histidylleucine Proteins 0.000 description 41
- FYPGHGXAOZTOBO-IHRRRGAJSA-N Pro-Leu-His Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)[C@@H]2CCCN2 FYPGHGXAOZTOBO-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 38
- DEGCBBCMYWNJNA-RHYQMDGZSA-N Thr-Pro-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)O DEGCBBCMYWNJNA-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 38
- 238000000034 method Methods 0.000 description 37
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 35
- 229960002087 pertuzumab Drugs 0.000 description 34
- AIRZWUMAHCDDHR-KKUMJFAQSA-N Lys-Leu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O AIRZWUMAHCDDHR-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 32
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 32
- OHUKZZYSJBKFRR-WHFBIAKZSA-N Gly-Ser-Asp Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O OHUKZZYSJBKFRR-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 30
- WTMPKZWHRCMMMT-KZVJFYERSA-N Thr-Pro-Ala Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O WTMPKZWHRCMMMT-KZVJFYERSA-N 0.000 description 29
- QPZMOUMNTGTEFR-ZKWXMUAHSA-N Val-Asn-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](C(C)C)N QPZMOUMNTGTEFR-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 29
- 108010090894 prolylleucine Proteins 0.000 description 29
- KWKQGHSSNHPGOW-BQBZGAKWSA-N Arg-Ala-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(O)=O KWKQGHSSNHPGOW-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 28
- 108010063718 gamma-glutamylaspartic acid Proteins 0.000 description 28
- VYUXYMRNGALHEA-DLOVCJGASA-N His-Leu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O VYUXYMRNGALHEA-DLOVCJGASA-N 0.000 description 26
- RLFSBAPJTYKSLG-WHFBIAKZSA-N Gly-Ala-Asp Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O RLFSBAPJTYKSLG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 25
- CSFVADKICPDRRF-KKUMJFAQSA-N Leu-His-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C([O-])=O)CC1=CN=CN1 CSFVADKICPDRRF-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 25
- YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-leucine Natural products CC(C)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 24
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 24
- ZESGVALRVJIVLZ-VFCFLDTKSA-N Thr-Thr-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N)O ZESGVALRVJIVLZ-VFCFLDTKSA-N 0.000 description 24
- KKHRWGYHBZORMQ-NHCYSSNCSA-N Val-Arg-Glu Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N KKHRWGYHBZORMQ-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 24
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 24
- BTBUEVAGZCKULD-XPUUQOCRSA-N Ala-Gly-His Chemical compound C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 BTBUEVAGZCKULD-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 23
- HBGFEEQFVBWYJQ-KBPBESRZSA-N Phe-Gly-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 HBGFEEQFVBWYJQ-KBPBESRZSA-N 0.000 description 23
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 23
- RUFHOVYUYSNDNY-ACZMJKKPSA-N Glu-Ala-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O RUFHOVYUYSNDNY-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 21
- SITWEMZOJNKJCH-UHFFFAOYSA-N L-alanine-L-arginine Natural products CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCCNC(N)=N SITWEMZOJNKJCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- APFJUBGRZGMQFF-QWRGUYRKSA-N Leu-Gly-Lys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN APFJUBGRZGMQFF-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 21
- 108010054155 lysyllysine Proteins 0.000 description 21
- HKZAAJSTFUZYTO-LURJTMIESA-N (2s)-2-[[2-[[2-[[2-[(2-aminoacetyl)amino]acetyl]amino]acetyl]amino]acetyl]amino]-3-hydroxypropanoic acid Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O HKZAAJSTFUZYTO-LURJTMIESA-N 0.000 description 20
- SJUXYGVRSGTPMC-IMJSIDKUSA-N Asn-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O SJUXYGVRSGTPMC-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 20
- CTQIOCMSIJATNX-WHFBIAKZSA-N Asn-Gly-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O CTQIOCMSIJATNX-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 20
- 108010003700 lysyl aspartic acid Proteins 0.000 description 20
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 20
- HHGYNJRJIINWAK-FXQIFTODSA-N Ala-Ala-Arg Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N HHGYNJRJIINWAK-FXQIFTODSA-N 0.000 description 19
- AAQGRPOPTAUUBM-ZLUOBGJFSA-N Ala-Ala-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O AAQGRPOPTAUUBM-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 19
- DVWVZSJAYIJZFI-FXQIFTODSA-N Ala-Arg-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O DVWVZSJAYIJZFI-FXQIFTODSA-N 0.000 description 19
- IKKVASZHTMKJIR-ZKWXMUAHSA-N Ala-Asp-Val Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O IKKVASZHTMKJIR-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 19
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 19
- SLKLLQWZQHXYSV-CIUDSAMLSA-N Asn-Ala-Lys Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O SLKLLQWZQHXYSV-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 18
- NTBFKPBULZGXQL-KKUMJFAQSA-N Lys-Asp-Tyr Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 NTBFKPBULZGXQL-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 18
- BDFHWFUAQLIMJO-KXNHARMFSA-N Lys-Thr-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N)O BDFHWFUAQLIMJO-KXNHARMFSA-N 0.000 description 18
- 239000002136 L01XE07 - Lapatinib Substances 0.000 description 17
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 17
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 description 17
- 229960004891 lapatinib Drugs 0.000 description 17
- BCFGMOOMADDAQU-UHFFFAOYSA-N lapatinib Chemical compound O1C(CNCCS(=O)(=O)C)=CC=C1C1=CC=C(N=CN=C2NC=3C=C(Cl)C(OCC=4C=C(F)C=CC=4)=CC=3)C2=C1 BCFGMOOMADDAQU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- AYFVRYXNDHBECD-YUMQZZPRSA-N Asp-Leu-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O AYFVRYXNDHBECD-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 16
- FXGRXIATVXUAHO-WEDXCCLWSA-N Gly-Lys-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CCCCN FXGRXIATVXUAHO-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 16
- FPTXMUIBLMGTQH-ONGXEEELSA-N Phe-Ala-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 FPTXMUIBLMGTQH-ONGXEEELSA-N 0.000 description 16
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 16
- VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N glycyl-DL-alpha-alanine Natural products OC(=O)C(C)NC(=O)CN VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 16
- 108010034529 leucyl-lysine Proteins 0.000 description 16
- YWLDTBBUHZJQHW-KKUMJFAQSA-N Asp-Lys-Phe Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N YWLDTBBUHZJQHW-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 15
- WNZOCXUOGVYYBJ-CDMKHQONSA-N Gly-Phe-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)NC(=O)CN)O WNZOCXUOGVYYBJ-CDMKHQONSA-N 0.000 description 15
- VTMLJMNQHKBPON-QWRGUYRKSA-N His-Gly-His Chemical compound C([C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(O)=O)C1=CN=CN1 VTMLJMNQHKBPON-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 15
- OQDLKDUVMTUPPG-AVGNSLFASA-N His-Leu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O OQDLKDUVMTUPPG-AVGNSLFASA-N 0.000 description 15
- CPONGMJGVIAWEH-DCAQKATOSA-N Leu-Met-Ala Chemical compound CSCC[C@H](NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O CPONGMJGVIAWEH-DCAQKATOSA-N 0.000 description 15
- ILGCZYGFYQLSDZ-KKUMJFAQSA-N Phe-Ser-His Chemical compound N[C@@H](Cc1ccccc1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](Cc1cnc[nH]1)C(O)=O ILGCZYGFYQLSDZ-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 15
- APKRGYLBSCWJJP-FXQIFTODSA-N Pro-Ala-Asp Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O APKRGYLBSCWJJP-FXQIFTODSA-N 0.000 description 15
- GZNYIXWOIUFLGO-ZJDVBMNYSA-N Pro-Thr-Thr Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O GZNYIXWOIUFLGO-ZJDVBMNYSA-N 0.000 description 15
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 15
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 15
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 15
- 108010073452 tryptophyl-glycyl-histidyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 15
- RNMNYMDTESKEAJ-KKUMJFAQSA-N His-Leu-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 RNMNYMDTESKEAJ-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 14
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 14
- XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N glycyl-glycyl-glycine Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)NCC(O)=O XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- ZRHDPZAAWLXXIR-SRVKXCTJSA-N Leu-Lys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O ZRHDPZAAWLXXIR-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 13
- XFIHDSBIPWEYJJ-YUMQZZPRSA-N Lys-Ala-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN XFIHDSBIPWEYJJ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 13
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 13
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 13
- SBGXWWCLHIOABR-UHFFFAOYSA-N Ala Ala Gly Ala Chemical compound CC(N)C(=O)NC(C)C(=O)NCC(=O)NC(C)C(O)=O SBGXWWCLHIOABR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 12
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 12
- VEPBEGNDJYANCF-QWRGUYRKSA-N Gly-Lys-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CCCCN VEPBEGNDJYANCF-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 12
- ABPRMMYHROQBLY-NKWVEPMBSA-N Gly-Ser-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CO)NC(=O)CN)C(=O)O ABPRMMYHROQBLY-NKWVEPMBSA-N 0.000 description 12
- YADRBUZBKHHDAO-XPUUQOCRSA-N His-Gly-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O YADRBUZBKHHDAO-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 12
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 12
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 12
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 12
- 108020001580 protein domains Proteins 0.000 description 12
- DZQMXBALGUHGJT-GUBZILKMSA-N Leu-Glu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O DZQMXBALGUHGJT-GUBZILKMSA-N 0.000 description 11
- BGOWRLSWJCVYAQ-CIUDSAMLSA-N Ser-Asp-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O BGOWRLSWJCVYAQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 11
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 11
- 229960003649 eribulin Drugs 0.000 description 11
- UFNVPOGXISZXJD-XJPMSQCNSA-N eribulin Chemical compound C([C@H]1CC[C@@H]2O[C@@H]3[C@H]4O[C@H]5C[C@](O[C@H]4[C@H]2O1)(O[C@@H]53)CC[C@@H]1O[C@H](C(C1)=C)CC1)C(=O)C[C@@H]2[C@@H](OC)[C@@H](C[C@H](O)CN)O[C@H]2C[C@@H]2C(=C)[C@H](C)C[C@H]1O2 UFNVPOGXISZXJD-XJPMSQCNSA-N 0.000 description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 11
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 11
- 108010035534 tyrosyl-leucyl-alanine Proteins 0.000 description 11
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- DJDSEDOKJTZBAR-ZDLURKLDSA-N Thr-Gly-Ser Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O DJDSEDOKJTZBAR-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 10
- 108010005233 alanylglutamic acid Proteins 0.000 description 10
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 10
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 10
- 108010061238 threonyl-glycine Proteins 0.000 description 10
- DKJPOZOEBONHFS-ZLUOBGJFSA-N Ala-Ala-Asp Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O DKJPOZOEBONHFS-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 9
- NFDVJAKFMXHJEQ-HERUPUMHSA-N Ala-Asp-Trp Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)O)N NFDVJAKFMXHJEQ-HERUPUMHSA-N 0.000 description 9
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 9
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 9
- AFMOTCMSEBITOE-YEPSODPASA-N Gly-Val-Thr Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O AFMOTCMSEBITOE-YEPSODPASA-N 0.000 description 9
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 9
- IXCHOHLPHNGFTJ-YUMQZZPRSA-N Ser-Gly-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CO)N IXCHOHLPHNGFTJ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 9
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 9
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 9
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 9
- RLMISHABBKUNFO-WHFBIAKZSA-N Ala-Ala-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(O)=O RLMISHABBKUNFO-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 8
- IJHUZMGJRGNXIW-CIUDSAMLSA-N Asp-Glu-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O IJHUZMGJRGNXIW-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 8
- NZAFOTBEULLEQB-WDSKDSINSA-N Gly-Asn-Glu Chemical compound C(CC(=O)O)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)CN NZAFOTBEULLEQB-WDSKDSINSA-N 0.000 description 8
- LHYJCVCQPWRMKZ-WEDXCCLWSA-N Gly-Leu-Thr Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O LHYJCVCQPWRMKZ-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 8
- UMBDRSMLCUYIRI-DVJZZOLTSA-N Gly-Trp-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)NC(=O)CN)O UMBDRSMLCUYIRI-DVJZZOLTSA-N 0.000 description 8
- QNBVTHNJGCOVFA-AVGNSLFASA-N Leu-Leu-Glu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O QNBVTHNJGCOVFA-AVGNSLFASA-N 0.000 description 8
- DCHQYSOGURGJST-FJXKBIBVSA-N Pro-Thr-Gly Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(O)=O DCHQYSOGURGJST-FJXKBIBVSA-N 0.000 description 8
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 8
- 108010013835 arginine glutamate Proteins 0.000 description 8
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 8
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 8
- 108010049041 glutamylalanine Proteins 0.000 description 8
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- SUHLZMHFRALVSY-YUMQZZPRSA-N Ala-Lys-Gly Chemical compound NCCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](N)C)C(=O)NCC(O)=O SUHLZMHFRALVSY-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 7
- BFMIRJBURUXDRG-DLOVCJGASA-N Ala-Phe-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)C)CC1=CC=CC=C1 BFMIRJBURUXDRG-DLOVCJGASA-N 0.000 description 7
- MLILEEIVMRUYBX-NHCYSSNCSA-N Glu-Val-Arg Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O MLILEEIVMRUYBX-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 7
- SOEGEPHNZOISMT-BYPYZUCNSA-N Gly-Ser-Gly Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O SOEGEPHNZOISMT-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 7
- KFKWRHQBZQICHA-STQMWFEESA-N L-leucyl-L-phenylalanine Natural products CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 KFKWRHQBZQICHA-STQMWFEESA-N 0.000 description 7
- JGKHAFUAPZCCDU-BZSNNMDCSA-N Leu-Tyr-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C([O-])=O)CC1=CC=C(O)C=C1 JGKHAFUAPZCCDU-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 7
- HVAUKHLDSDDROB-KKUMJFAQSA-N Lys-Lys-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O HVAUKHLDSDDROB-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 7
- BJEYSVHMGIJORT-NHCYSSNCSA-N Phe-Ala-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 BJEYSVHMGIJORT-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 7
- 235000015076 Shorea robusta Nutrition 0.000 description 7
- STGXWWBXWXZOER-MBLNEYKQSA-N Thr-Ala-His Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 STGXWWBXWXZOER-MBLNEYKQSA-N 0.000 description 7
- 229940000406 drug candidate Drugs 0.000 description 7
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 7
- 108010057083 glutamyl-aspartyl-leucine Proteins 0.000 description 7
- 108010067216 glycyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 7
- 244000144980 herd Species 0.000 description 7
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 7
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 7
- 108010044056 leucyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 7
- 239000007937 lozenge Substances 0.000 description 7
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 7
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 7
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 7
- YOVVNQKCSKSHKT-HNNXBMFYSA-N (2s)-1-[4-[[2-(2-aminopyrimidin-5-yl)-7-methyl-4-morpholin-4-ylthieno[3,2-d]pyrimidin-6-yl]methyl]piperazin-1-yl]-2-hydroxypropan-1-one Chemical compound C1CN(C(=O)[C@@H](O)C)CCN1CC1=C(C)C2=NC(C=3C=NC(N)=NC=3)=NC(N3CCOCC3)=C2S1 YOVVNQKCSKSHKT-HNNXBMFYSA-N 0.000 description 6
- WOVKYSAHUYNSMH-RRKCRQDMSA-N 5-bromodeoxyuridine Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(Br)=C1 WOVKYSAHUYNSMH-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 6
- BUANFPRKJKJSRR-ACZMJKKPSA-N Ala-Ala-Gln Chemical compound C[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C([O-])=O)CCC(N)=O BUANFPRKJKJSRR-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 6
- BVLPIIBTWIYOML-ZKWXMUAHSA-N Ala-Val-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O BVLPIIBTWIYOML-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 6
- GWNMUVANAWDZTI-YUMQZZPRSA-N Asn-Gly-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(=O)N)N GWNMUVANAWDZTI-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 6
- RRKCPMGSRIDLNC-AVGNSLFASA-N Asp-Glu-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O RRKCPMGSRIDLNC-AVGNSLFASA-N 0.000 description 6
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 6
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 6
- ULXXDWZMMSQBDC-ACZMJKKPSA-N Gln-Asp-Asp Chemical compound C(CC(=O)N)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N ULXXDWZMMSQBDC-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 6
- MWMJCGBSIORNCD-AVGNSLFASA-N Glu-Leu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O MWMJCGBSIORNCD-AVGNSLFASA-N 0.000 description 6
- BCCRXDTUTZHDEU-VKHMYHEASA-N Gly-Ser Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BCCRXDTUTZHDEU-VKHMYHEASA-N 0.000 description 6
- OVIVOCSURJYCTM-GUBZILKMSA-N Lys-Asp-Glu Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O OVIVOCSURJYCTM-GUBZILKMSA-N 0.000 description 6
- QIJVAFLRMVBHMU-KKUMJFAQSA-N Lys-Asp-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O QIJVAFLRMVBHMU-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 6
- FLONGDPORFIVQW-XGEHTFHBSA-N Ser-Pro-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)CO FLONGDPORFIVQW-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 6
- ISERLACIZUGCDX-ZKWXMUAHSA-N Val-Asp-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N ISERLACIZUGCDX-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 6
- YQYFYUSYEDNLSD-YEPSODPASA-N Val-Thr-Gly Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(O)=O YQYFYUSYEDNLSD-YEPSODPASA-N 0.000 description 6
- 108010024078 alanyl-glycyl-serine Proteins 0.000 description 6
- 229950004111 apitolisib Drugs 0.000 description 6
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 6
- 230000034994 death Effects 0.000 description 6
- 108010015792 glycyllysine Proteins 0.000 description 6
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 6
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 6
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 6
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 6
- STUWGJZDJHPWGZ-LBPRGKRZSA-N (2S)-N1-[4-methyl-5-[2-(1,1,1-trifluoro-2-methylpropan-2-yl)-4-pyridinyl]-2-thiazolyl]pyrrolidine-1,2-dicarboxamide Chemical compound S1C(C=2C=C(N=CC=2)C(C)(C)C(F)(F)F)=C(C)N=C1NC(=O)N1CCC[C@H]1C(N)=O STUWGJZDJHPWGZ-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 5
- NKBQZKVMKJJDLX-SRVKXCTJSA-N Arg-Glu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O NKBQZKVMKJJDLX-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 5
- PDIYGFYAMZZFCW-JIOCBJNQSA-N Asp-Thr-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N)O PDIYGFYAMZZFCW-JIOCBJNQSA-N 0.000 description 5
- 208000003174 Brain Neoplasms Diseases 0.000 description 5
- 101800003838 Epidermal growth factor Proteins 0.000 description 5
- 102400001368 Epidermal growth factor Human genes 0.000 description 5
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 5
- 101710100969 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-3 Proteins 0.000 description 5
- 102100029986 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-3 Human genes 0.000 description 5
- NVZVJIUDICCMHZ-BZSNNMDCSA-N Tyr-Phe-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O NVZVJIUDICCMHZ-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 5
- 229950010482 alpelisib Drugs 0.000 description 5
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 5
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 5
- 229940116977 epidermal growth factor Drugs 0.000 description 5
- 239000013613 expression plasmid Substances 0.000 description 5
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 5
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 5
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 5
- 230000001613 neoplastic effect Effects 0.000 description 5
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 5
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 5
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 5
- 229960004066 trametinib Drugs 0.000 description 5
- LIRYPHYGHXZJBZ-UHFFFAOYSA-N trametinib Chemical compound CC(=O)NC1=CC=CC(N2C(N(C3CC3)C(=O)C3=C(NC=4C(=CC(I)=CC=4)F)N(C)C(=O)C(C)=C32)=O)=C1 LIRYPHYGHXZJBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N uroanthelone Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)C(C)C)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CS)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O)C(C)C)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N 0.000 description 5
- ODWSTKXGQGYHSH-FXQIFTODSA-N Ala-Arg-Ala Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O ODWSTKXGQGYHSH-FXQIFTODSA-N 0.000 description 4
- JBGSZRYCXBPWGX-BQBZGAKWSA-N Ala-Arg-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)C)CCCN=C(N)N JBGSZRYCXBPWGX-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 4
- BLIMFWGRQKRCGT-YUMQZZPRSA-N Ala-Gly-Lys Chemical compound C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN BLIMFWGRQKRCGT-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 4
- OEVCHROQUIVQFZ-YTLHQDLWSA-N Ala-Thr-Ala Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O OEVCHROQUIVQFZ-YTLHQDLWSA-N 0.000 description 4
- PDQBXRSOSCTGKY-ACZMJKKPSA-N Asn-Ala-Gln Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N PDQBXRSOSCTGKY-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 4
- HCAUEJAQCXVQQM-ACZMJKKPSA-N Asn-Glu-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O HCAUEJAQCXVQQM-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 4
- DXVMJJNAOVECBA-WHFBIAKZSA-N Asn-Gly-Asn Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O DXVMJJNAOVECBA-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 4
- GYWQGGUCMDCUJE-DLOVCJGASA-N Asp-Phe-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O GYWQGGUCMDCUJE-DLOVCJGASA-N 0.000 description 4
- RKXVTTIQNKPCHU-KKHAAJSZSA-N Asp-Val-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O RKXVTTIQNKPCHU-KKHAAJSZSA-N 0.000 description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 4
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 4
- JVSBYEDSSRZQGV-GUBZILKMSA-N Glu-Asp-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O JVSBYEDSSRZQGV-GUBZILKMSA-N 0.000 description 4
- PMNHJLASAAWELO-FOHZUACHSA-N Gly-Asp-Thr Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O PMNHJLASAAWELO-FOHZUACHSA-N 0.000 description 4
- UPJODPVSKKWGDQ-KLHWPWHYSA-N His-Thr-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CN=CN2)N)O UPJODPVSKKWGDQ-KLHWPWHYSA-N 0.000 description 4
- LHSGPCFBGJHPCY-UHFFFAOYSA-N L-leucine-L-tyrosine Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 LHSGPCFBGJHPCY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- XBBKIIGCUMBKCO-JXUBOQSCSA-N Leu-Ala-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O XBBKIIGCUMBKCO-JXUBOQSCSA-N 0.000 description 4
- 241000282520 Papio Species 0.000 description 4
- CPRLKHJUFAXVTD-ULQDDVLXSA-N Pro-Leu-Tyr Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O CPRLKHJUFAXVTD-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 4
- JEHPKECJCALLRW-CUJWVEQBSA-N Ser-His-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O JEHPKECJCALLRW-CUJWVEQBSA-N 0.000 description 4
- KCPFDGNYAMKZQP-KBPBESRZSA-N Tyr-Gly-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O KCPFDGNYAMKZQP-KBPBESRZSA-N 0.000 description 4
- GULIUBBXCYPDJU-CQDKDKBSSA-N Tyr-Leu-Ala Chemical compound [O-]C(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H]([NH3+])CC1=CC=C(O)C=C1 GULIUBBXCYPDJU-CQDKDKBSSA-N 0.000 description 4
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 4
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 4
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 4
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 4
- 108010070944 alanylhistidine Proteins 0.000 description 4
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 229960002271 cobimetinib Drugs 0.000 description 4
- RESIMIUSNACMNW-BXRWSSRYSA-N cobimetinib fumarate Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O.C1C(O)([C@H]2NCCCC2)CN1C(=O)C1=CC=C(F)C(F)=C1NC1=CC=C(I)C=C1F.C1C(O)([C@H]2NCCCC2)CN1C(=O)C1=CC=C(F)C(F)=C1NC1=CC=C(I)C=C1F RESIMIUSNACMNW-BXRWSSRYSA-N 0.000 description 4
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 4
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 4
- 101150089730 gly-10 gene Proteins 0.000 description 4
- 108010001064 glycyl-glycyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 4
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 4
- 229940124302 mTOR inhibitor Drugs 0.000 description 4
- 239000003628 mammalian target of rapamycin inhibitor Substances 0.000 description 4
- 229960004390 palbociclib Drugs 0.000 description 4
- AHJRHEGDXFFMBM-UHFFFAOYSA-N palbociclib Chemical compound N1=C2N(C3CCCC3)C(=O)C(C(=O)C)=C(C)C2=CN=C1NC(N=C1)=CC=C1N1CCNCC1 AHJRHEGDXFFMBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 4
- WUILNKCFCLNXOK-CFBAGHHKSA-N salirasib Chemical compound CC(C)=CCC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CSC1=CC=CC=C1C(O)=O WUILNKCFCLNXOK-CFBAGHHKSA-N 0.000 description 4
- 229950008669 salirasib Drugs 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 4
- BEUQXVWXFDOSAQ-UHFFFAOYSA-N 2-methyl-2-[4-[2-(5-methyl-2-propan-2-yl-1,2,4-triazol-3-yl)-5,6-dihydroimidazo[1,2-d][1,4]benzoxazepin-9-yl]pyrazol-1-yl]propanamide Chemical compound CC(C)N1N=C(C)N=C1C1=CN(CCOC=2C3=CC=C(C=2)C2=CN(N=C2)C(C)(C)C(N)=O)C3=N1 BEUQXVWXFDOSAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- JBVSSSZFNTXJDX-YTLHQDLWSA-N Ala-Ala-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)N JBVSSSZFNTXJDX-YTLHQDLWSA-N 0.000 description 3
- PXKLCFFSVLKOJM-ACZMJKKPSA-N Ala-Asn-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O PXKLCFFSVLKOJM-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 3
- ZIWWTZWAKYBUOB-CIUDSAMLSA-N Ala-Asp-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O ZIWWTZWAKYBUOB-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- PMQXMXAASGFUDX-SRVKXCTJSA-N Ala-Lys-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)N)CCCCN PMQXMXAASGFUDX-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 3
- QEYJFBMTSMLPKZ-ZKWXMUAHSA-N Asn-Ala-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O QEYJFBMTSMLPKZ-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 3
- JNNVNVRBYUJYGS-CIUDSAMLSA-N Asp-Leu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O JNNVNVRBYUJYGS-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- LIVXPXUVXFRWNY-CIUDSAMLSA-N Asp-Lys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O LIVXPXUVXFRWNY-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- 101100285688 Caenorhabditis elegans hrg-7 gene Proteins 0.000 description 3
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 3
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 3
- 102000001301 EGF receptor Human genes 0.000 description 3
- HKVAMNSJSFKALM-GKUWKFKPSA-N Everolimus Chemical compound C1C[C@@H](OCCO)[C@H](OC)C[C@@H]1C[C@@H](C)[C@H]1OC(=O)[C@@H]2CCCCN2C(=O)C(=O)[C@](O)(O2)[C@H](C)CC[C@H]2C[C@H](OC)/C(C)=C/C=C/C=C/[C@@H](C)C[C@@H](C)C(=O)[C@H](OC)[C@H](O)/C(C)=C/[C@@H](C)C(=O)C1 HKVAMNSJSFKALM-GKUWKFKPSA-N 0.000 description 3
- NLKVNZUFDPWPNL-YUMQZZPRSA-N Glu-Arg-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O NLKVNZUFDPWPNL-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 3
- CAVMESABQIKFKT-IUCAKERBSA-N Glu-Gly-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N CAVMESABQIKFKT-IUCAKERBSA-N 0.000 description 3
- HAGKYCXGTRUUFI-RYUDHWBXSA-N Glu-Tyr-Gly Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)NCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N)O HAGKYCXGTRUUFI-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 3
- VIPDPMHGICREIS-GVXVVHGQSA-N Glu-Val-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O VIPDPMHGICREIS-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 3
- FNXSYBOHALPRHV-ONGXEEELSA-N Gly-Val-Lys Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN FNXSYBOHALPRHV-ONGXEEELSA-N 0.000 description 3
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 3
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 3
- CQQGCWPXDHTTNF-GUBZILKMSA-N Leu-Ala-Glu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O CQQGCWPXDHTTNF-GUBZILKMSA-N 0.000 description 3
- POZULHZYLPGXMR-ONGXEEELSA-N Leu-Gly-Val Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O POZULHZYLPGXMR-ONGXEEELSA-N 0.000 description 3
- FOBUGKUBUJOWAD-IHPCNDPISA-N Leu-Leu-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 FOBUGKUBUJOWAD-IHPCNDPISA-N 0.000 description 3
- IZPVWNSAVUQBGP-CIUDSAMLSA-N Leu-Ser-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O IZPVWNSAVUQBGP-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- KLSUAWUZBMAZCL-RHYQMDGZSA-N Leu-Thr-Pro Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O KLSUAWUZBMAZCL-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 3
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 3
- AJHCSUXXECOXOY-UHFFFAOYSA-N N-glycyl-L-tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)CN)C(O)=O)=CNC2=C1 AJHCSUXXECOXOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- BQVUABVGYYSDCJ-UHFFFAOYSA-N Nalpha-L-Leucyl-L-tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C(N)CC(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 BQVUABVGYYSDCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012828 PI3K inhibitor Substances 0.000 description 3
- UIGMAMGZOJVTDN-WHFBIAKZSA-N Ser-Gly-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UIGMAMGZOJVTDN-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 3
- 101000677856 Stenotrophomonas maltophilia (strain K279a) Actin-binding protein Smlt3054 Proteins 0.000 description 3
- NIEWSKWFURSECR-FOHZUACHSA-N Thr-Gly-Asp Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O NIEWSKWFURSECR-FOHZUACHSA-N 0.000 description 3
- AQAMPXBRJJWPNI-JHEQGTHGSA-N Thr-Gly-Glu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O AQAMPXBRJJWPNI-JHEQGTHGSA-N 0.000 description 3
- BRBCKMMXKONBAA-KWBADKCTSA-N Trp-Ala-Ala Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)=CNC2=C1 BRBCKMMXKONBAA-KWBADKCTSA-N 0.000 description 3
- ZZDFLJFVSNQINX-HWHUXHBOSA-N Trp-Thr-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CNC3=CC=CC=C32)N)O ZZDFLJFVSNQINX-HWHUXHBOSA-N 0.000 description 3
- UPJONISHZRADBH-XPUUQOCRSA-N Val-Glu Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O UPJONISHZRADBH-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 3
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 3
- 229960005167 everolimus Drugs 0.000 description 3
- 108010020688 glycylhistidine Proteins 0.000 description 3
- 108010084389 glycyltryptophan Proteins 0.000 description 3
- 108010028295 histidylhistidine Proteins 0.000 description 3
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 3
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 3
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 231100000782 microtubule inhibitor Toxicity 0.000 description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 3
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 3
- 229940043441 phosphoinositide 3-kinase inhibitor Drugs 0.000 description 3
- DCWXELXMIBXGTH-UHFFFAOYSA-N phosphotyrosine Chemical compound OC(=O)C(N)CC1=CC=C(OP(O)(O)=O)C=C1 DCWXELXMIBXGTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 3
- 208000016691 refractory malignant neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 3
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 3
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 3
- 229950001269 taselisib Drugs 0.000 description 3
- 230000005760 tumorsuppression Effects 0.000 description 3
- 108010073969 valyllysine Proteins 0.000 description 3
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 3
- FJVAQLJNTSUQPY-CIUDSAMLSA-N Ala-Ala-Lys Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN FJVAQLJNTSUQPY-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- KQFRUSHJPKXBMB-BHDSKKPTSA-N Ala-Ala-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)C)C(O)=O)=CNC2=C1 KQFRUSHJPKXBMB-BHDSKKPTSA-N 0.000 description 2
- BUDNAJYVCUHLSV-ZLUOBGJFSA-N Ala-Asp-Ser Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BUDNAJYVCUHLSV-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 2
- OKEWAFFWMHBGPT-XPUUQOCRSA-N Ala-His-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)C)CC1=CN=CN1 OKEWAFFWMHBGPT-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 2
- ZSVJVIOVABDTTL-YUMQZZPRSA-N Asp-Gly-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(=O)O)N ZSVJVIOVABDTTL-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- PGUYEUCYVNZGGV-QWRGUYRKSA-N Asp-Gly-Tyr Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 PGUYEUCYVNZGGV-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 2
- QJHOOKBAHRJPPX-QWRGUYRKSA-N Asp-Phe-Gly Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(O)=O)CC1=CC=CC=C1 QJHOOKBAHRJPPX-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 2
- 101100284231 Caenorhabditis elegans his-24 gene Proteins 0.000 description 2
- 208000034628 Celiac artery compression syndrome Diseases 0.000 description 2
- 230000006820 DNA synthesis Effects 0.000 description 2
- 108700022150 Designed Ankyrin Repeat Proteins Proteins 0.000 description 2
- 101100234002 Drosophila melanogaster Shal gene Proteins 0.000 description 2
- 108060006698 EGF receptor Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 208000022072 Gallbladder Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 206010017993 Gastrointestinal neoplasms Diseases 0.000 description 2
- IKDOHQHEFPPGJG-FXQIFTODSA-N Gln-Asp-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O IKDOHQHEFPPGJG-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- GGEJHJIXRBTJPD-BYPYZUCNSA-N Gly-Asn-Gly Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(O)=O GGEJHJIXRBTJPD-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- YWAQATDNEKZFFK-BYPYZUCNSA-N Gly-Gly-Ser Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YWAQATDNEKZFFK-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 2
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- XWOBNBRUDDUEEY-UWVGGRQHSA-N Leu-His Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CNC=N1 XWOBNBRUDDUEEY-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 2
- CNWDWAMPKVYJJB-NUTKFTJISA-N Leu-Trp-Ala Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)=CNC2=C1 CNWDWAMPKVYJJB-NUTKFTJISA-N 0.000 description 2
- VMTYLUGCXIEDMV-QWRGUYRKSA-N Lys-Leu-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN VMTYLUGCXIEDMV-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 2
- MSSJJDVQTFTLIF-KBPBESRZSA-N Lys-Phe-Gly Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](Cc1ccccc1)C(=O)NCC(O)=O MSSJJDVQTFTLIF-KBPBESRZSA-N 0.000 description 2
- DSWOTZCVCBEPOU-IUCAKERBSA-N Met-Arg-Gly Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(O)=O)CCCNC(N)=N DSWOTZCVCBEPOU-IUCAKERBSA-N 0.000 description 2
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 229940122255 Microtubule inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 102000038030 PI3Ks Human genes 0.000 description 2
- 108091007960 PI3Ks Proteins 0.000 description 2
- 102000007982 Phosphoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108010089430 Phosphoproteins Proteins 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- GVUVRRPYYDHHGK-VQVTYTSYSA-N Pro-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 GVUVRRPYYDHHGK-VQVTYTSYSA-N 0.000 description 2
- 206010038923 Retinopathy Diseases 0.000 description 2
- IOVBCLGAJJXOHK-SRVKXCTJSA-N Ser-His-His Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CO)N)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(O)=O)C1=CN=CN1 IOVBCLGAJJXOHK-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- 244000166071 Shorea robusta Species 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 2
- 239000012505 Superdex™ Substances 0.000 description 2
- 208000002495 Uterine Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 2
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 108010069926 arginyl-glycyl-serine Proteins 0.000 description 2
- 238000000149 argon plasma sintering Methods 0.000 description 2
- 108010047857 aspartylglycine Proteins 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 229960003852 atezolizumab Drugs 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 description 2
- BBWBEZAMXFGUGK-UHFFFAOYSA-N bis(dodecylsulfanyl)-methylarsane Chemical compound CCCCCCCCCCCCS[As](C)SCCCCCCCCCCCC BBWBEZAMXFGUGK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 2
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 2
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 2
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 201000010175 gallbladder cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000010749 gastric carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 108010019832 glycyl-asparaginyl-glycine Proteins 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 238000005734 heterodimerization reaction Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 230000006882 induction of apoptosis Effects 0.000 description 2
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 2
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 2
- 108010073093 leucyl-glycyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 2
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 2
- 238000000569 multi-angle light scattering Methods 0.000 description 2
- 230000035407 negative regulation of cell proliferation Effects 0.000 description 2
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 2
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- MXHCPCSDRGLRER-UHFFFAOYSA-N pentaglycine Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)NCC(=O)NCC(=O)NCC(O)=O MXHCPCSDRGLRER-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 2
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 2
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 201000000498 stomach carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 206010046766 uterine cancer Diseases 0.000 description 2
- FBOUIAKEJMZPQG-AWNIVKPZSA-N (1E)-1-(2,4-dichlorophenyl)-4,4-dimethyl-2-(1,2,4-triazol-1-yl)pent-1-en-3-ol Chemical compound C1=NC=NN1/C(C(O)C(C)(C)C)=C/C1=CC=C(Cl)C=C1Cl FBOUIAKEJMZPQG-AWNIVKPZSA-N 0.000 description 1
- 101150084750 1 gene Proteins 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RNAMYOYQYRYFQY-UHFFFAOYSA-N 2-(4,4-difluoropiperidin-1-yl)-6-methoxy-n-(1-propan-2-ylpiperidin-4-yl)-7-(3-pyrrolidin-1-ylpropoxy)quinazolin-4-amine Chemical compound N1=C(N2CCC(F)(F)CC2)N=C2C=C(OCCCN3CCCC3)C(OC)=CC2=C1NC1CCN(C(C)C)CC1 RNAMYOYQYRYFQY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VUKQWNTVHBAURS-UHFFFAOYSA-N 9,10-dimethyloctacosanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCC(C)C(C)CCCCCCCC(O)=O VUKQWNTVHBAURS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SVBXIUDNTRTKHE-CIUDSAMLSA-N Ala-Arg-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O SVBXIUDNTRTKHE-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- GFBLJMHGHAXGNY-ZLUOBGJFSA-N Ala-Asn-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O GFBLJMHGHAXGNY-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- NHCPCLJZRSIDHS-ZLUOBGJFSA-N Ala-Asp-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O NHCPCLJZRSIDHS-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- NKJBKNVQHBZUIX-ACZMJKKPSA-N Ala-Gln-Asp Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O NKJBKNVQHBZUIX-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- VWEWCZSUWOEEFM-WDSKDSINSA-N Ala-Gly-Ala-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(O)=O VWEWCZSUWOEEFM-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- NHLAEBFGWPXFGI-WHFBIAKZSA-N Ala-Gly-Asn Chemical compound C[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N NHLAEBFGWPXFGI-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- KLALXKYLOMZDQT-ZLUOBGJFSA-N Ala-Ser-Asn Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(N)=O KLALXKYLOMZDQT-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- RMAWDDRDTRSZIR-ZLUOBGJFSA-N Ala-Ser-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O RMAWDDRDTRSZIR-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- XQNRANMFRPCFFW-GCJQMDKQSA-N Ala-Thr-Asn Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C)N)O XQNRANMFRPCFFW-GCJQMDKQSA-N 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 101710201712 Amino acid binding protein Proteins 0.000 description 1
- 102100036819 Ankyrin repeat and EF-hand domain-containing protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100034614 Ankyrin repeat domain-containing protein 11 Human genes 0.000 description 1
- 101710188804 Ankyrin repeat domain-containing protein 11 Proteins 0.000 description 1
- 101100067974 Arabidopsis thaliana POP2 gene Proteins 0.000 description 1
- VRZDJJWOFXMFRO-ZFWWWQNUSA-N Arg-Gly-Trp Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O VRZDJJWOFXMFRO-ZFWWWQNUSA-N 0.000 description 1
- IJYZHIOOBGIINM-WDSKDSINSA-N Arg-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N IJYZHIOOBGIINM-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- ADPACBMPYWJJCE-FXQIFTODSA-N Arg-Ser-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O ADPACBMPYWJJCE-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- AKEBUSZTMQLNIX-UWJYBYFXSA-N Asn-Ala-Tyr Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N AKEBUSZTMQLNIX-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 1
- XSGBIBGAMKTHMY-WHFBIAKZSA-N Asn-Asp-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O XSGBIBGAMKTHMY-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- QRULNKJGYQQZMW-ZLUOBGJFSA-N Asp-Asn-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O QRULNKJGYQQZMW-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- GWTLRDMPMJCNMH-WHFBIAKZSA-N Asp-Asn-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(O)=O GWTLRDMPMJCNMH-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- FRYULLIZUDQONW-IMJSIDKUSA-N Asp-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O FRYULLIZUDQONW-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- KGHLGJAXYSVNJP-WHFBIAKZSA-N Asp-Ser-Gly Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O KGHLGJAXYSVNJP-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- SQIARYGNVQWOSB-BZSNNMDCSA-N Asp-Tyr-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O SQIARYGNVQWOSB-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- 244000075850 Avena orientalis Species 0.000 description 1
- 235000007319 Avena orientalis Nutrition 0.000 description 1
- 101710189812 Bilin-binding protein Proteins 0.000 description 1
- 101100228200 Caenorhabditis elegans gly-5 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100505161 Caenorhabditis elegans mel-32 gene Proteins 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 108090000397 Caspase 3 Proteins 0.000 description 1
- 108090000567 Caspase 7 Proteins 0.000 description 1
- 102100029855 Caspase-3 Human genes 0.000 description 1
- 102000047934 Caspase-3/7 Human genes 0.000 description 1
- 108700037887 Caspase-3/7 Proteins 0.000 description 1
- 102100038902 Caspase-7 Human genes 0.000 description 1
- 102000011727 Caspases Human genes 0.000 description 1
- 108010076667 Caspases Proteins 0.000 description 1
- 229940126062 Compound A Drugs 0.000 description 1
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 208000000461 Esophageal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108010014172 Factor V Proteins 0.000 description 1
- IHSGESFHTMFHRB-GUBZILKMSA-N Gln-Lys-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O IHSGESFHTMFHRB-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- JBRBACJPBZNFMF-YUMQZZPRSA-N Gly-Ala-Lys Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN JBRBACJPBZNFMF-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- ORXZVPZCPMKHNR-IUCAKERBSA-N Gly-His-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CC1=CNC=N1 ORXZVPZCPMKHNR-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- QSVMIMFAAZPCAQ-PMVVWTBXSA-N Gly-His-Thr Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O QSVMIMFAAZPCAQ-PMVVWTBXSA-N 0.000 description 1
- LBDXVCBAJJNJNN-WHFBIAKZSA-N Gly-Ser-Cys Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O LBDXVCBAJJNJNN-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- 229940125497 HER2 kinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000012981 Hank's balanced salt solution Substances 0.000 description 1
- NLDMNSXOCDLTTB-UHFFFAOYSA-N Heterophylliin A Natural products O1C2COC(=O)C3=CC(O)=C(O)C(O)=C3C3=C(O)C(O)=C(O)C=C3C(=O)OC2C(OC(=O)C=2C=C(O)C(O)=C(O)C=2)C(O)C1OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 NLDMNSXOCDLTTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BIAKMWKJMQLZOJ-ZKWXMUAHSA-N His-Ala-Ala Chemical compound C[C@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)Cc1cnc[nH]1)C(O)=O BIAKMWKJMQLZOJ-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- SDTPKSOWFXBACN-GUBZILKMSA-N His-Glu-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O SDTPKSOWFXBACN-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- KWBISLAEQZUYIC-UWJYBYFXSA-N His-His-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)NC(=O)[C@H](CC2=CN=CN2)N KWBISLAEQZUYIC-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 1
- JIUYRPFQJJRSJB-QWRGUYRKSA-N His-His-Gly Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)NCC(O)=O)C1=CN=CN1 JIUYRPFQJJRSJB-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- 108010093488 His-His-His-His-His-His Proteins 0.000 description 1
- 101000928347 Homo sapiens Ankyrin repeat and EF-hand domain-containing protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 101100118549 Homo sapiens EGFR gene Proteins 0.000 description 1
- 101000851181 Homo sapiens Epidermal growth factor receptor Proteins 0.000 description 1
- 101001027128 Homo sapiens Fibronectin Proteins 0.000 description 1
- 101001051706 Homo sapiens Ribosomal protein S6 kinase beta-1 Proteins 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- NFNVDJGXRFEYTK-YUMQZZPRSA-N Leu-Glu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O NFNVDJGXRFEYTK-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- RXGLHDWAZQECBI-SRVKXCTJSA-N Leu-Leu-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O RXGLHDWAZQECBI-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- ZDBMWELMUCLUPL-QEJZJMRPSA-N Leu-Phe-Ala Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 ZDBMWELMUCLUPL-QEJZJMRPSA-N 0.000 description 1
- VDIARPPNADFEAV-WEDXCCLWSA-N Leu-Thr-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(O)=O VDIARPPNADFEAV-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 1
- 102000003960 Ligases Human genes 0.000 description 1
- 108090000364 Ligases Proteins 0.000 description 1
- 102000010954 Link domains Human genes 0.000 description 1
- 108050001157 Link domains Proteins 0.000 description 1
- 102000019298 Lipocalin Human genes 0.000 description 1
- 108050006654 Lipocalin Proteins 0.000 description 1
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 1
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 1
- AAORVPFVUIHEAB-YUMQZZPRSA-N Lys-Asp-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O AAORVPFVUIHEAB-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- LMVOVCYVZBBWQB-SRVKXCTJSA-N Lys-Asp-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN LMVOVCYVZBBWQB-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- GKFNXYMAMKJSKD-NHCYSSNCSA-N Lys-Asp-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O GKFNXYMAMKJSKD-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- ATIPDCIQTUXABX-UWVGGRQHSA-N Lys-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN ATIPDCIQTUXABX-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- NJNRBRKHOWSGMN-SRVKXCTJSA-N Lys-Leu-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O NJNRBRKHOWSGMN-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- 102000043136 MAP kinase family Human genes 0.000 description 1
- 108091054455 MAP kinase family Proteins 0.000 description 1
- 241000282553 Macaca Species 0.000 description 1
- PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N Maleimide Chemical compound O=C1NC(=O)C=C1 PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001417902 Mallotus villosus Species 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 101710175625 Maltose/maltodextrin-binding periplasmic protein Proteins 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 1
- 101100205189 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) leu-5 gene Proteins 0.000 description 1
- 206010030155 Oesophageal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 108700020796 Oncogene Proteins 0.000 description 1
- 102000043276 Oncogene Human genes 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 241001662443 Phemeranthus parviflorus Species 0.000 description 1
- 241000233805 Phoenix Species 0.000 description 1
- 108090000430 Phosphatidylinositol 3-kinases Proteins 0.000 description 1
- 108010001441 Phosphopeptides Proteins 0.000 description 1
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 1
- 241000255969 Pieris brassicae Species 0.000 description 1
- 235000008331 Pinus X rigitaeda Nutrition 0.000 description 1
- 235000011613 Pinus brutia Nutrition 0.000 description 1
- 241000018646 Pinus brutia Species 0.000 description 1
- 241000500437 Plutella xylostella Species 0.000 description 1
- 229920000954 Polyglycolide Polymers 0.000 description 1
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 1
- 102000004022 Protein-Tyrosine Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108090000412 Protein-Tyrosine Kinases Proteins 0.000 description 1
- 102000044126 RNA-Binding Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108700020471 RNA-Binding Proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 108091005682 Receptor kinases Proteins 0.000 description 1
- 102100029981 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-4 Human genes 0.000 description 1
- 101710100963 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-4 Proteins 0.000 description 1
- 206010038934 Retinopathy proliferative Diseases 0.000 description 1
- 102100024908 Ribosomal protein S6 kinase beta-1 Human genes 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 101100123851 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) HER1 gene Proteins 0.000 description 1
- QVOGDCQNGLBNCR-FXQIFTODSA-N Ser-Arg-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O QVOGDCQNGLBNCR-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- WOUIMBGNEUWXQG-VKHMYHEASA-N Ser-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O WOUIMBGNEUWXQG-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- MFEBUIFJVPNZLO-OLHMAJIHSA-N Thr-Asp-Asn Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O MFEBUIFJVPNZLO-OLHMAJIHSA-N 0.000 description 1
- QOLYAJSZHIJCTO-VQVTYTSYSA-N Thr-Pro Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O QOLYAJSZHIJCTO-VQVTYTSYSA-N 0.000 description 1
- 241000656145 Thyrsites atun Species 0.000 description 1
- IJUTXXAXQODRMW-KBPBESRZSA-N Tyr-Gly-His Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC2=CN=CN2)C(=O)O)N)O IJUTXXAXQODRMW-KBPBESRZSA-N 0.000 description 1
- AOIZTZRWMSPPAY-KAOXEZKKSA-N Tyr-Thr-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CC=C(C=C2)O)N)O AOIZTZRWMSPPAY-KAOXEZKKSA-N 0.000 description 1
- ZRSZTKTVPNSUNA-IHRRRGAJSA-N Val-Lys-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)C(C)C)C(O)=O ZRSZTKTVPNSUNA-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- DVLWZWNAQUBZBC-ZNSHCXBVSA-N Val-Thr-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O DVLWZWNAQUBZBC-ZNSHCXBVSA-N 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 108010076324 alanyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010044940 alanylglutamine Proteins 0.000 description 1
- 102000021052 amino acid binding proteins Human genes 0.000 description 1
- 238000003277 amino acid sequence analysis Methods 0.000 description 1
- 239000004037 angiogenesis inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 1
- 229940045799 anthracyclines and related substance Drugs 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000001028 anti-proliverative effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 150000001508 asparagines Chemical class 0.000 description 1
- 229940009098 aspartate Drugs 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-L aspartate group Chemical group N[C@@H](CC(=O)[O-])C(=O)[O-] CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-L 0.000 description 1
- 108010040443 aspartyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010038633 aspartylglutamate Proteins 0.000 description 1
- 230000035578 autophosphorylation Effects 0.000 description 1
- 101150014207 bag gene Proteins 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- ZOMSMJKLGFBRBS-UHFFFAOYSA-N bentazone Chemical compound C1=CC=C2NS(=O)(=O)N(C(C)C)C(=O)C2=C1 ZOMSMJKLGFBRBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000397 bevacizumab Drugs 0.000 description 1
- 230000008512 biological response Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 description 1
- 230000009702 cancer cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 239000003560 cancer drug Substances 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 230000022131 cell cycle Effects 0.000 description 1
- 238000001516 cell proliferation assay Methods 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 229960005395 cetuximab Drugs 0.000 description 1
- 229940044683 chemotherapy drug Drugs 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 150000001841 cholesterols Chemical class 0.000 description 1
- 238000002983 circular dichroism Methods 0.000 description 1
- 229940121657 clinical drug Drugs 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 229940000425 combination drug Drugs 0.000 description 1
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001945 cysteines Chemical class 0.000 description 1
- 230000001120 cytoprotective effect Effects 0.000 description 1
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 description 1
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 239000000645 desinfectant Substances 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 238000006471 dimerization reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 230000002900 effect on cell Effects 0.000 description 1
- 229940121647 egfr inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 201000004101 esophageal cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000012173 estrus Effects 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 210000003414 extremity Anatomy 0.000 description 1
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 1
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- XBGGUPMXALFZOT-UHFFFAOYSA-N glycyl-L-tyrosine hemihydrate Natural products NCC(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 XBGGUPMXALFZOT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010033706 glycylserine Proteins 0.000 description 1
- 108010087823 glycyltyrosine Proteins 0.000 description 1
- 108010037850 glycylvaline Proteins 0.000 description 1
- 238000009499 grossing Methods 0.000 description 1
- 239000000833 heterodimer Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 210000003917 human chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 230000004068 intracellular signaling Effects 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 229960005386 ipilimumab Drugs 0.000 description 1
- 238000000111 isothermal titration calorimetry Methods 0.000 description 1
- 229940043355 kinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 210000004901 leucine-rich repeat Anatomy 0.000 description 1
- 235000011475 lollipops Nutrition 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 108010064235 lysylglycine Proteins 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 1
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 1
- 229950010203 nimotuzumab Drugs 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960003301 nivolumab Drugs 0.000 description 1
- 238000011580 nude mouse model Methods 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 229960001972 panitumumab Drugs 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000006320 pegylation Effects 0.000 description 1
- 229960002621 pembrolizumab Drugs 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 1
- 108010051242 phenylalanylserine Proteins 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 1
- 239000003757 phosphotransferase inhibitor Substances 0.000 description 1
- LHNIIDJUOCFXAP-UHFFFAOYSA-N pictrelisib Chemical compound C1CN(S(=O)(=O)C)CCN1CC1=CC2=NC(C=3C=4C=NNC=4C=CC=3)=NC(N3CCOCC3)=C2S1 LHNIIDJUOCFXAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 1
- 238000011518 platinum-based chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 231100000572 poisoning Toxicity 0.000 description 1
- 230000000607 poisoning effect Effects 0.000 description 1
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 1
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 1
- 239000012460 protein solution Substances 0.000 description 1
- 230000018883 protein targeting Effects 0.000 description 1
- 230000004850 protein–protein interaction Effects 0.000 description 1
- 229960003876 ranibizumab Drugs 0.000 description 1
- 102000027426 receptor tyrosine kinases Human genes 0.000 description 1
- 108091008598 receptor tyrosine kinases Proteins 0.000 description 1
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000002702 ribosome display Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000003118 sandwich ELISA Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 239000010421 standard material Substances 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 238000011146 sterile filtration Methods 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 230000001360 synchronised effect Effects 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002626 targeted therapy Methods 0.000 description 1
- 230000028016 temperature homeostasis Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 102000027257 transmembrane receptors Human genes 0.000 description 1
- 108091008578 transmembrane receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- JREYOWJEWZVAOR-UHFFFAOYSA-N triazanium;[3-methylbut-3-enoxy(oxido)phosphoryl] phosphate Chemical compound [NH4+].[NH4+].[NH4+].CC(=C)CCOP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O JREYOWJEWZVAOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010038745 tryptophylglycine Proteins 0.000 description 1
- 230000004565 tumor cell growth Effects 0.000 description 1
- 238000013414 tumor xenograft model Methods 0.000 description 1
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 1
- 230000003827 upregulation Effects 0.000 description 1
- 229950005972 urelumab Drugs 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
يتعلق الاختراع ببروتينات رابطة binding proteins جديدة ناتجة عن عودة الارتباط الجيني recombinant ، مشتملة على مجالات تكرار أنكيرين ankyrin repeat مصممة بنوعية ارتباط تجاه HER2، ومشتملة على مجالات تكرار أنكيرين ankyrin repeat مصممة بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل serum albumin ، وكذلك بأحماض نووية ترمِّز nucleic acids encoding هذه البروتينات الرابطة الناتجة عن عودة الارتباط الجيني recombinant ، تركيبات صيدلانية مشتملة على هذه البروتينات الرابطة الناتجة عن عودة الارتباط الجيني أو أحماض نووية nucleic acids وباستخدام هذه البروتينات الرابطة الناتجة عن عودة الارتباط الجيني، أحماض نووية أو تركيبات صيدلانية في علاج أمراض treatment of diseases. شكل 1.
Description
بروتينات رابطة ناتجة عن عودة الارتباط الجيني واستخدامها Recombinant Binding Proteins and Their Use الوصف الكامل
خلفية الاختراع
تم توفير بروتينات رابطة binding proteins جديدة ناتجة عن عودة الارتباط الجيني
recombinant تشتمل البروتينات على مجالي تكرار أنكيرين ankyrin repeat مصممين
بنوعية ارتباط تجاه HER ومجالي تكرار أنكيرين مصممين بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل
serum albumin 5 ؛ متصلين بوصلات بولي ببتيد. تعد البروتينات الرابطة الناتجة عن عودة
الارتباط الجيني Bake لعلاج مرض ما. على نحو محدد؛ تشتمل البروتينات الرابطة الناتجة عن
عودة الارتباط الجيني على مجالات تكرار أنكيرين مصممة بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل
serum albumin تظهر ثبات يتم عنده التخزين لفترة طويلة. Ble على ذلك؛ تم توفير
أحماض نووية ترمّز البروتينات المذكورة الرابطة والناتجة عن عودة الارتباط الجيني؛ أو التركيبات 0 الصيدلانية التي تشتمل على البروتينات المذكورة الرابطة والناتجة عن عودة الارتباط الجيني أو
الأحماض النووية nucleic acids ؛ واستخدام البروتينات الأحماض النووية؛ أو التركيبات
الصيدلانية المذكورة الرابطة والناتجة عن عودة الارتباط الجيني recombinant في علاج
treatment of diseases الأمراض
يمكن استخدام مجموعات بروتين تكرار أنكيرين ankyrin repeat protein مصممة (الطلب الدولي رقم 020565/2002؛ Binz, H.K., Amstutz, P., Kohl, A., Stumpp, M.T.,
Briand, C., Forrer, P., Grutter, M.G., and Pllickthun, A., Nat.
Biotechnol.
22, 575-582, 2004; Stumpp, M.T., Binz, H.K and Amstutz, P., Drug
(Discov.
Today 13, 695-701, 2008 لاختيار مجالات تكرار أنكيرين نوعية مستهدفة
ومصممة. يمكن استخدام مجالات تكرار الأنكيرين النوعية المستهدفة والمصممة هذه؛ بدورهاء 0 كمكونات قيّمة لبروتينات رابطة ناتجة عن sae الارتباط الجيني لعلاج أمراض. ورد وصف
اختيار مجالات تكرار أنكيرين مصممة مختلفة بنوعية ارتباط تجاه مستقبل عامل نمو بشرة بشري
UniProt ¢<ErbB2 i HER2) human epidermal growth factor receptor 2 2 alll) (PO4626 الدولي رقم 083208/2014). في الاختراع الحالي تم الكشف عن بروتينات رابطة ناتجة عن عودة الارتباط الجيني تشتمل على مجالات تكرار أنكيرين مصممة بنوعية ارتباط
HER2 تجاه
5 على عكس الأجسام المضادة antibodies ل IgG على سبيل المثال؛ التي تظهر أعمارًا نصفية جهازية طويلة تتوسطها إعادة تدوير FERN فإن البروتينات المشتملة على مجالات تكرار أنكيرين مصممة Bale ما تظهر تصفية حركية دوائية سريعة وأعمار نصفية نهائية قصيرة؛ ما لم يشتمل البروتين على عناصر من شأنها تحسين خواص حركية دوائية؛ على سبيل المثال؛ على سبيل المثال مجال تكرار أنكيرين مصمم بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل موصوف في الطلب الدولي
0 069654/2012. يعد استخدام ألبومين مصل serum albumin ربط لتحسين الخواص
الحركية الدوائية للبروتينات عملي معروفة جيدًا في المجال (انظر على سبيل المثال الطلب الدولي
“Therapeutic (.JFrejd F.Y., 2012 (in Kontermann, R (E «001743/1991
modulate their plasma half-lives”, Wiley-VCH إلى proteins: strategies والطلب الدولي ¢(Verlag GmbH, 2012, ISBN 978-3-527-32849-9
5 069654/2012). لاستخدام مجالات تكرار أنكيرين ankyrin repeat domains مصممة بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل في مرشحي عقار إكلينيكيين؛ Bag تحسين ثبات مجالات تكرار أنكيرين معروفة ومصممة بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل أثناء التخزين. كما تم الكشف في هذه
الوثيقة عن بروتينات رابطة ناتجة عن عودة الارتباط الجيني مشتملة على مجالات تكرار أنكيرين مصممة بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل؛ حيث تظهر مجالات تكرار الأنكيرين المعروفة
0 والمصممة بنوعية ارتباط تجاه ألبومين المصل خواص ثبات محسّنة أثناء التخزين. على عكس
التقارير السابقة ) Hopp, J., Horning, N., Zettlitz, K.A., Schwarz, A., Fuss, N., D., Kontermann, R.E.
Protein Eng.
Des.
Sel. 23, 827-834, وععالناا 0) لاحظنا أنه بالحصول على مجالي تكرار أنكيرين مصممين بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل Yay من مجال واحد في البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني؛ يمكن تحسين
الخواص الحركية الدوائية للبروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني recombinant .binding protein يلعب HERZ دورًا مهمًا في الإصابة بالأمراض وتفاقم أنواع معينة من السرطان. يُعرف HER2 ashy كيناز تيروسين مستقبل عابر للأغشية (RTK) receptor tyrosine kinase ينتمي لعائلة أوسع من مستقبلات Bublil, E.M. and Yarden, Y.
Curr.
Opin.) ErbB receptors خلية 2007 ,124-34 ,)19(2 (Biol. يتم الحفاظ على مستقبل عائلة 108 في جميع الفقاريات كما يتضمن 50081 أو عامل نمو بشرة مستقبل epidermal growth factor (EGFR) receptor أو (UniProt PO0533) HERI ومستقبلات ¢tErbB3) HER3 (UniProt Q15303 ¢ErbB4) HER4 4 (UniProt P21860 تشترك جميع مستقبلات 0 08 في المتوالية الطويلة وتجانسات المجالات؛ وتكوّن دايمرات وظيفية متجانسة functional Ae) homodimers سبيل المثال 081-081 1142-1142 (HER4-HER4 ودايمرات غير متجانسة heterodimers في جميع التوليفات. تحدث للمستقبل دايمرة متجانسة وغير متجانسة Receptor 10000- and heterodimerization فور ربط المركب الترابطي أو زيادة التعبير الوراثي للمستقبل؛ مما يؤدي إلى تنشيط مجالات كيناز kinase domains 5 المستقبل داخل WAN بالفسفرة الذاتية autophosphorylation . ومن ثم فإن ذلك يؤدي إلى حث الإشارات البعدية داخل intracellular signaling Wa والاستجابات البيولوجية biological responses . من بين مضادات مسارات إشارات 5008 المعروفة جيدًا الأجسام المضادة أحادية النسيلة التراستوزوماب Trastuzumab التي ترتبط بمجال IV لمجال HER2 خارج الخلايا وتثبط الدايمرة المتجانسة ل inhibiting HER2 homodimerization HER2 0 والبيرتوزوماب All) Pertuzumab ترتبط بمجال || لمجال HER2 خارج الخلايا وتثبط الدايمرة غير المتجانسة ل (HER2/HER3 والأهم فإن التراستوزوماب له على نحو أساسي تأثير مضاد للتكاثر وقد تتفوق الأورام على هذا العلاج في المراحل المتقدمة المرض. قد يكون البيرتوزوماب 000 الذي يتمتع بفاعلية Ladle منخفضة على نحو غير متوقع كعامل فردي pI لنشاط التراستوزوماب Trastuzumab .من خلال التداخل مع الدايمرة غير المتجانسة ل HER2/HER3 5 وعليه؛ فإن توليفة التراستوزوماب Trastuzumab مع البيرتوزوماب
Pertuzumab تعد مناسبة لعلاج السرطان cancer الذي يكون Gage تجاه HER?2 .(Capelan M., et al., Ann.
Oncol., 24, 273-82, 2013) قد أدى الجمع بين توليفة التراستوزوماب Trastuzumab و البيرتوزوماب Pertuzumab إلى مفهوم ضرورة الاستهداف المزدوج للمجالين في HERD للحصول على فاعلية فائقة مضادة للورم superior anti-tumor efficacy . تم تسجيل خلائط الأجسام المضادة التي تستهدف
مجالات IV 5 Il ل 182 أو الاستهداف المتزامن لمجال | ومجال آخر ل sell) HER2 الأمريكية 2011/0033460؛ على سبيل المثال أيضًا المجال (IV أو المجال | والمجال IV (الطلب الدولي رقم 060365/2014؛ 2013 ,1-13 ,21 ¢Jost, Ch., et al., Structure ((Tamaskovic, R., et al., Nat Commun 7, 11672, 2016 أو المجال II والمجال IV
0 (الطلب الدولي رقم 083208/2014(( أو الاستهداف المتزامن لقمة التراستوزوماب اللاصقة على المجال /١ا ل HER2 وقمة البيرتوزوماب اللاصقة على المجال اا ل HER2 (الطلب الدولي رقم 9 ),. ومن بين الأساليب البروتينات الرابطة ثنائية الموقع. على نحو مدهش؛ يكون لبعض البروتينات الرابطة ثنائية الموقع المختبرة في الطلب الدولي 068625/2009 تأثيرات مساعدة ومضادة أخرى. تشير تقارير الطلب الدولي 083208/2014 ; Jost, Ch., et al
doc. cit.) 5 الطلب الدولي 060365/2014) إلى أن توليد البروتينات المضادة الرابطة ثنائية الموقع لا تكون في مسارها الصحيح. Vay من ذلك؛ يتحتم تحسين اختيار المجالات الفردية (القمة اللاصقة؛ الخواص الرابطة) وكذلك الترتيبة البنائية (الاتجاه؛ المسافة؛ طول الوصلة؛ تركيبة الوصلة) على نحو حذر للحصول على المقاومة الفعالة. إضافة إلى ذلك؛ ينبغي تحسين اختيار شق الهندسة الحركية الدوائية وترتيبتها البنائية أيضًا. جنبًا إلى cin فإن ذلك يمثل اختيارًا من
0 250000 صورة متغيرة مختلفة على الأقل. ورد الكشف هنا عن بروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني يشتمل على (1) بروتين رابط ثنائي الموقع يقاوم إشارات 5008 والذي يشتمل على مجالي تكرار أنكيرين مصممين بنوعية ارتباط تجاه HER و(2) مجالي تكرار أنكيرين مصممين بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل ويتسمان بثبات محسن أثناء التخزين. وقد ثبت أن هذا البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني؛
وهو يعد مرشح عقار (DARPING® مرشح عقار فعال لعلاج عدة أمراض. و ide DARPIN® تجارية مسجلة ل Molecular Partners AG سوسرا. الوصف العام للاختراع يتعلق الاختراع ببروتينات رابطة ناتجة عن عودة الارتباط الجيني recombinant binding proteins 5 مشتملة على أربعة مجالات تكرار أنكيرين ankyrin repeat domains مصممة؛
حيث يكون اثنان من الأربعة مجالات تكرار الأنكيرين المصممة المذكورة Ble عن مجالي تكرار أنكيرين مصممين بنوعية ارتباط تجاه (HERD وحيث يكون اثنان من الأربعة مجالات تكرار الأنكيرين المصممة المذكورة Ble عن مجالي تكرار أنكيرين مصممين بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل. يتعلق الاختراع على نحو محدد ببروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني
recombinant 0 يشتمل على متوالية حمض أميني amino acid sequence بها على JN 0 من تطابق متوالية الحمض الأميني مع المتوالية رقم: 21. كما يتعلق الاختراع ببروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني؛ حيث يشتمل كل من مجالي تكرار الأنكيرين المذكورين المصممين desi ارتباط تجاه ألبومين مصل على متوالية الحمض الأميني للمتوالية رقم: 14. يتعلق الاختراع على نحو محدد ببروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني بها على الأقل 9695 متوالية من
5 التطابق مع البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني والذي يشتمل على المتوالية رقم: 21. في أحد النماذج» تظهر كل مجالات تكرار الأنكيرين المعروفة والمصممة بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل والمشتملة على المتوالية رقم: 14 Lune GL أثناء التخزين في محلول الفوسفات المائي المخزن lke ( PBS ( phosphate buffered water solution بمجال تكرار الأنكيرين المصمم بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل والمشتمل على متوالية الحمض الأميني
0 للمتوالية رقم: 13. في أحد النماذج؛ يتعلق الاختراع ببروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني يشتمل على متوالية الحمض الأميني للمتوالية رقم: 21. في أحد النماذج؛ يتعلق الاختراع ببروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني وبشتمل على متوالية الحمض الأميني للمتوالية رقم: 21. في أحد النماذج؛ يظهر البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني والمشتمل على متوالية الحمض الأميني للمتوالية رقم: 21 BLE أعلى أثناء التخزين من البروتين الرابط الناتج عن عودة
5 الارتباط الجيني والمشتمل على متوالية الحمض الأميني للمتوالية رقم: 22. في أحد النماذج؛ يعمل
البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني والوارد بالاختراع على تثبيط تكاثر خلية 87474 بثابت تثبيط يقل عن 7-10 مولار. في أحد النماذج؛ يظهر البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني والوارد بالاختراع عند تركيز 100 نانو مولار انخفاضًا adie أقوى لفسفرة AKT= 3 في خلايا 81474 من التراستوزوماب Trastuzumab عند تركيز 100 نانو مولار. يتعلق الاختراع كذلك بأحماض نووية ترمّز البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني والوارد بالاختراع. يتعلق الاختراع GUIS بتركيبات صيدلانية مشتملة على البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني و/أو الحمض النووي الوارد بالاختراع» sales حاملة carrier و/أو diluent diss مقبولة صيدلانيًا. يتعلق الاختراع أيضًا بالتركيببة الصيدلانية الواردة بالاختراع لاستخدامها في علاج مرض (ke مرض ورمي neoplastic disease ؛ السرطان cancer ؛ سرطان الثدي breast 10 08066 ؛ سرطان المبيض ovarian cancer ؛ السرطان المّعدي gastric cancer أو سرطان المّعدة stomach cancer ؛ سرطان الرحم uterine cancer ؛ سرطان القولون والمستقيم bladder cancer ؛ سرطان المثانة bladder cancer ؛ السرطان الذي يؤدي إلى فرط تعبير (HERZ السرطان الذي يؤدي إلى تعبير (HERZ expressing cancer السرطان المدمن addicted cancer ل ¢(HER2 السرطان المدمن partially addicted cancer Wa ¢(HER2 32 5 السرطان المضخّم amplified cancer ب (HER2 السرطان المقاوم للتراستوزوماب Trastuzumab-resistant cancer ؛ السرطان الحساس للتراستوزوماب Trastuzumab— sensitive cancer ؛ السرطان المّعدي المعوي gastro—intestinal cancer » أو سرطان الدماغ cancer 038(0. يتعلق الاختراع كذلك بطقم يشتمل على البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني والوارد بالاختراع أو الحمض النووي الوارد بالاختراع أو التركيببة الصيدلانية الواردة 0 بالاختراع. يتعلق الاختراع كذلك بطريقة لإنتاج البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني والوارد بالاختراع» حيث تشتمل الطريقة على خطوات (1) التعبير عن البروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني في بكتيريا bacteria ؛ و(2) تنقية البروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني بالاستشراب .chromatography شرح مختصر للرسومات
الشكل 1. رسمة بروتينات رابطة ناتجة عن عودة الارتباط الجيني recombinant بنوعية ارتباط تجاه HER مشتمل على مجالات تكرار أنكيرين مصممة بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل. )1( رسمة مجال تكرار أنكيرين مصمم بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل. تتضمن أمثلة مجالات تكرار الأنكيرين هذه مجالات تكرار أنكيرين مصممة مشتملة على متوالية حمض أميني amino acid sequence 5 مختارة من المجموعة التي تشتمل على المتواليات أرقام: 12 إلى 15؛ على
نحو محدد مجال تكرار الأنكيرين المصمم والمشتمل على متوالية حمض أميني المتوالية رقم: 14. (ب) رسمة مجال تكرار أنكيرين مصمم بنوعية ارتباط تجاه HERZ تتضمن أمثلة مجالات تكرار الأنكيرين هذه مجالات تكرار أنكيرين مصممة مشتملة على متوالية حمض أميني مختارة من المجموعة التي تشتمل على المتواليات أرقام: 16 إلى 20؛ على نحو محدد مجالات تكرار
0 الأنكيرين المصممة التي تشتمل على متواليات حمض أميني المتواليات أرقام: 16 و17. (ج) رسمة وصلة بولي ببتيد (على سبيل المثال بولي ببتيد يشتمل على متوالية حمض أميني مناظرة لأي من المتواليات أرقام: 2 إلى 9؛ على نحو محدد وصلة البولي ببتيد polypeptide linker الذي يشتمل على متوالية الحمض الأميني للمتوالية رقم: 9). (د) رسمة متوالية حمض أميني عند الطرف .لا تتضمن أمثلة متواليات الحمض الأميني هذه التي تكون عند الطرف لا على سبيل
المثال المتواليات MGS أو GS (مثل تلك التي توجد عند الطرف لا لأي من المتواليات أرقام: 1 إلى 30 و32 و33)؛ أو بطاقات بولي ببتيد polypeptide التي توضحها متوالية الحمض الأميني المناظرة للمتوالية رقم: 1. (ه) رسمة بروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني حسبما ورد بهذه الوثيقة والذي يشتمل على مجالي تكرار أنكيرين مصممين بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل؛ ومجالي تكرار أنكيرين مصممين حيث يكون لكل منهما نوعية ارتباط تجاه HER
0 متصلين بوصلات بولي ببتيد ولهما متوالية حمض أميني عند الطرف .لا يكون مجالا تكرار الأنكيرين المصممان بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل على جانب مجالي تكرار الأنكيرين المصممين الآخرين. يعد البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني والمشتمل على الأحماض الأمينية للمتوالية رقم: 21 موضحًا في هذه الرسمة. الشكل 2. ثبات محسن أثناء التخزين للبروتين المشتمل على المتوالية رقم: 14.
SDS %15 تحليل PAGE لبروتين رقم 115-13 ( رقم 13( وبروتين رقم 1115-14 ( رقم 14؛ انظر المثال 1) المخزّن عند 10 مجم/مل في محلول الفوسفات المائي المخزن phosphate buffered water solution ( 085 )_لمدة أسبوع واحد عند 4 درجة مئوية (1)» 25 درجة مئوية (2)» 40 درجة مئوية )3(¢ و60 درجة مئوية (4). يظهر بروتين رقم 1115-14 ثباثًا أعلى أثناء التخزين من بروتين رقم 415-13 4/ا: المرقّم (النطاق الأدنى: 6.5 كيلو دالتون؛ النطاق
عند بروتين رقم 14-مستوى :1115 14.4 كيلو دالتون؛ النطاق الأعلى في حالة البروتين رقم His PAGE:-14 21.5 كيلو دالتون). الشكل 3. تثبيط تكاثر خلية 81474 بواسطة بروتينات Ala) ناتجة عن عودة الارتباط الجيني بنوعية ارتباط تجاه HER2
0 تتم إجراء تجربة تثبيط تكاثر خلية سرطان الثدي 81474 على النحو الموصوف في المثال 6. يظهر البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني والمشتمل على المتوالية رقم: 21 IC50 أقل من البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني والمشتمل على المتوالية رقم: 23؛ مما يشير إلى أن وجود المتواليات أرقام: 16 و17 في بروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني recombinant محبذ على نحو أكبر من وجود المتواليات أرقام: 18 و17. الدوائر المظللة
5 والخط المصمت: بروتين رقم 115-21؛ المريعات المظللة والخط المتقطع: بروتين رقم 115-23 ؛ المثلث: بلا متبّط. :C «OD: OD405-0D620 التركيز بالنانو مولار. الشكل 4. تجارب الطعوم الخارجية لفئران مصابة بأورام. أ.) نموذج فأر به طعم خارجي لورم سرطان الثدي 81474. تم إجراء النموذج على النحو الموصوف في المثال 7. المتلثات: محلول الفوسفات المائي المخزن phosphate buffered
(PBS) water solution 0 ؛ المريعات المفتوحة: تراستوزوماب؛ المعينات التي بها خط متقطع: تراستوزوماب 8 بيرتوزوماب؛ الدوائر المظللة: بروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني بنوعية ارتباط تجاه HERZ (بروتين رقم ¢(His=21 /ا: الحجم [مم3]؛ st الزمن [0]. ب.) نموذج فأر به طعم خارجي لورم سرطان الثدي 81474 مقارنةٌ ببروتين رقم His=21 (21)؛ بروتين رقم 23- His )23( بروتين رقم 1115-24 (24)؛ أو بروتين رقم 1115-25 (25) في اليوم 18 من
العلاج. تم إجراء التجرية على النحو الموصوف في المثال 7. يعد بروتين رقم 1115-21 أكثر فاعلية على نحو دال إحصائيًا في تثبيط نمو الورم من بروتين رقم «(0.0003p=) His=24 بروتين رقم 415-23 أو بروتين رقم 25. /ا: الحجم [مم3]؛ it الزمن [0]. ج.) ود.) نموذج فأر مزودم بطعم ورم خارجي مشتق من مريض بالسرطان المّعدي .67083039 تم إجراء التجرية مرتين على النحو الموصوف في المثال 7. تم استخدام محلول الفوسفات المائي المخزن
PBS ( phosphate buffered water solution ) (المثلثات)؛ بيرتوزوماب (المتلثات العكسية المفتوحة)؛ تراستوزوماب (المريعات المفتوحة )؛ خليط من التراستوزوماب والبيرتوزوماب ب(المعينات التي بها خط متقطع) وكذلك بروتين رقم 21 في هذه التجارب. ج.) يظهر بروتين رقم 21 تثبيطًا قويًا call sal على نحو يشبه توليفة التراستوزوماب والبيرتوزوماب؛
0 حيث يكون التراستوزوماب بمفرده أقل فاعلية. د.) يظهر بروتين رقم 21 تثبيطًا Ugh لنمو الورم؛ على نحو يشبه توليفة التراستوزوماب والبيرتوزوماب. يكون التراستوزوماب بمفرده والبيرتوزوماب بمفرده أقل فاعليةً على نحو دال إحصائيًا. /471ا: حجم الورم النسبي المرجعي لحجم الورم عند بدء العلاج [96]؛ ot الزمن [0]. ه.) نموذج JB مزود بطعم ورم خارجي مشتق من مريض بالسرطان المّعدي GXF281. تم إجراء التجرية على النحو الموصوف في المثال 7. PBS
5 «(المثلثات)؛ لاباتينيب 18081010 (المريعات المفتوحة )؛ وكذلك بروتين رقم 21 (الدوائر المظللة). يظهر بروتين رقم 21 تثبيطًا gail Us الورم مقارنة بلاباتينيب Lapatinib في هذا النموذج. /411): حجم الورم النسبي المرجعي لحجم الورم عند بدء العلاج [16]؛ it الزمن 1d] الشكل 5. تحليلات الحركيات الدوائية في الفأر. أ.) تحليل الخواص الحركية الدوائية في فأرء مقارنةٌ ببروتين رقم 115-21 (الدوائر المظللة) مع
0 بروتين رقم 115-23 (المريعات ) Gy للمثال 8. تشير هذه Aad) إلى ميزة حركية دوائية لللمتوالية رقم: 16 الموجودة في البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني؛ Vay من المتوالية رقم: 18. ب.) تحليل الخواص الحركية الدوائية في فر مقارنة ببروتين رقم 115-30 (الدوائر المظللة؛ يشتمل على مجالي تكرار أنكيرين مصممين بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل ) مع بروتين رقم His=29 (المريعات المظللة؛ يشتمل على مجال تكرار أنكيرين مصمم واحد بنوعية
5 ارتباط تجاه ألبومين مصل ) Wy للمثالين 8 و11. يؤدي وجود مجالي تكرار أنكيرين مصممين
بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل إلى تحسين الخصائص الحركية الدوائية على نحو أفضل من
تلك التي تم تحقيقها مع مجال تكرار أنكيرين مصمم واحد بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل. ج.)
مقارنة الحركية الدوائية لبروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني يشتمل على GlySer
وصلات بولي ببتيد (بروتين رقم ¢HIS=26 المريعات المظللة ) مقابل بروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني يشتمل على وصلات بولي ببتيد ProThr (بروتين رقم ¢HiS=27 الدوائر المظللة)
على النحو الموصوف في المثالين 8 و10. يكون لوجود وصلات بولي ببتيد ProThr تأثير مفيد
على الخواص الحركية الدوائية في فأر. 1096: النسبة المئوية للجرعة التي تم الحقن بها والمعايرة
بقيمة المقياس لمدة 1 ساعة [96]؛ ot الزمن [ساعة].
الشكل 6. تحليلات الحركيات الدوائية في قرد الرياح.
0 أ) تحليل الخواص الحركية الدوائية لبروتين رقم 115-21" (الدوائر المظللة) وبروتين رقم 115-23 (المريعات المظللة ) عند 1 مجم/كجم في قر الرياح ly للمثال 9. Lad عمر نصفي طرفي أطول لبروتين رقم (His=21 مما يشير إلى أن وجود المتوالية رقم: 16 الموجودة في البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني محبذ على نحو أكبر من وجود المتوالية رقم: 18 الموجودة. ب) تحليل الخواص الحركية الدوائية لبروتين رقم His=21 عند 1 مجم/كجم (الدوائر
5 المظلة)» 5 مجم/كجم (المريعات المظللة )؛ و10 مجم/كجم (المثلثات المظللة) في قرد الرياح ig للمثال 9. يظهر بروتين رقم 115-21 زيادة معتمدة على الجرعة للعمر النصفي الطرفي من 7 ساعة عند 1 مجم/كجم إلى 100 ساعة عند 5 مجم/كجم إلى حوالي 180 ساعة عند 10 مجم/كجم. ©: التركيز [نانو مولار]؛ st الزمن [ساعة]. الشكل 7. حث الموت المبرمج في خلايا .87474
0 قياس الموت المبرمج لخلايا 817474 تستحثها تركيزات متباينة من بروتين رقم 21 (الدوائر المظللة)؛ التراستوزوماب 118501201085 (المريعات المفتوحة )؛ البيرتوزوماب 6011201180 (المثلثات العكسية المفتوحة)؛ أو خليط من 100 نانو مولار تراستوزوماب وتركيزات متباينة من البيرتوزوماب (المعينات المفتوحة؛ الخط المتقطع) وفقًا للمثال 6. تم عمل مخطط للنتائج به متحنيات توافق تراجع غير خطية. تم إيضاح قياسات محلول الفوسفات المائي المخزن phosphate buffered water
) (المثلث المظلل) و100 نانو مولار تراستوزوماب (المثلث العكسي المظلل (PBS ( solution
كمراجع عند 50 بيكو مولار. ©: التركيز في [نانو مولار]؛ (RLU وحدات الضوء النسبي.
الوصف التفصيلي:
يتعلق الاختراع ببروتينات رابطة ناتجة عن عودة الارتباط الجيني مشتملة على أربعة مجالات تكرار أنكيرين مصممة؛ حيث يكون اثنان من الأربعة مجالات تكرار الأنكيرين المصممة المذكورة Ble
عن Mae تكرار أنكيرين مصممين بنوعية ارتباط تجاه (HERD وحيث يكون اثنان من الأربعة
مجالات تكرار الأنكيرين المصممة المذكورة Ble عن مجالي تكرار أنكيرين مصممين بنوعية
ارتباط تجاه ألبومين مصل. تعد المتوالية رقم: 21 مثالا لهذا البروتين الرابط الناتج عن عودة
الارتباط الجيني.
0 في أحد النماذج؛ يكون لكل مجال من مجالات تكرار الأنكيرين المعروفة والمصممة بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل على الأقل 9690 9691 9692 9693 9694 9695 9696 9697 8 9699؛ أو 96100 من تطابق متوالية الحمض الأميني مع المتوالية رقم: 14. في أحد النماذج» يتألف كل مجال من مجالات تكرار الأنكيرين المعروفة والمصممة بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل من متوالية حمض أميني amino acid sequence مختارة من المجموعة التي
5 تشتمل على (1) المتوالية رقم: 14؛ و/أو (2) متواليات حيث يتم استبدال ما يصل إلى 10 9؛ 8 5 4 3 2 1 أو 0 أحماض أمينية للمتوالية رقم: 14 بأي حمض أميني. في أحد النماذج» يتألف كل مجال من مجالات تكرار الأنكيرين المعروفة والمصممة بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل من متوالية حمض أميني مختارة من المجموعة التي تشتمل على (1) المتوالية رقم: 4 و/أو (2) متواليات حيث يتم استبدال ما يصل إلى ١10 9» 8؛ 7. 6؛ 5 4 3 2 1 أو
0 0 أحماض أمينية للمتوالية رقم: 14 بأي حمض أميني؛ ولا يكون كل مجال من مجالات تكرار الأنكيرين المعروفة والمصممة بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل متماثلًا مع متوالية لمجال تكرار أنكيرين مصمم بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل يتم اختياره من المجموعة التي تشتمل على المتواليات أرقام: 12 13( أو 15 الواردة بالطلب؛ وكذلك المتواليات أرقام: 17 إلى 25 و43 إلى 8 الواردة بالطلب الدولي 069654/2012.
في أحد النماذج يكون حمض البينولتيمات الأميني لأي من المتواليات أرقام: 10 إلى 20 يكون Bile عن Ala أو Leu على نحو مفضل Ala في أحد النماذج يكون الحمض الأميني عند الطرف © لأي من المتواليات أرقام: 10 إلى 20 Ble عن Ala أو Asn على نحو مفضل (Ala أو يكون غير موجود اختياريًا. على سبيل المثال؛ تشتمل المتوالية رقم: 29 على سبيل المثال المتوالية رقم: 15 والتي فيها يكون حمض البينولتيمات الأميني Ble عن Leu ويكون
الحمض الأميني عند الطرف © غير موجود. على نحو مفضل؛ يكون كل من حمض البينولتيمات الأميني والحمض الأميني عند الطرف © لأي من مجال تكرار الأنكيرين المصمم (أي أي من المتواليات أرقام: 10 إلى 20) والموجود في بروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني Gy للاختراع الحالي Ble عن Ala
0 في أحد النماذج تكون الأحماض الأمينية Gly Ser عند الطرف لا لأي من المتواليات أرقام: 10 إلى 30 و32 إلى 33 غير موجودة اختياربًا. في أحد النماذج؛ يكون بمجالي تكرار الأنكيرين المذكورين والمصممين بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل على الأقل 670 3671 9672 %T4 %T3 9715 76ت HTT 9678 9679 0+ %81 %82 %83 %84« %85« %86 987 9688 9689 9690 9691
5 9692؛ 9693 %94 9695؛ 9696؛ 9697 9698 9699؛ أو 96100 من التطابق في متوالية حمض أميني. في أحد النماذج؛ يكون مجالا تكرار الأنكيرين المذكوران والمصممان بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل للروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني متطابقين في متوالية حمض أميني. في أحد النماذج» يشتمل كل من dae تكرار الأنكيرين المذكورين والمصممين بنوعية ارتباط تجاه
0 ألبومين مصل للبروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني والوارد بالاختراع على متوالية الحمض الأميني للمتوالية رقم: 14. في أحد النماذج؛ يشتمل كل من مجالي Mae تكرار الأنكيرين المذكورين والمصممين بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل للبروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني والوارد بالاختراع على للمتوالية رقم: 14.
في أحد النماذج؛ يمكن لمجالي تكرار الأنكيرين المصممين بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل للروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني ربط جزيئ ألبومين مصل لكل منهما على نحو متزامن. في أحد النماذج؛ يتعلق الاختراع ببروتينات رابطة ناتجة عن عودة الارتباط الجيني مشتملة على
أربعة مجالات تكرار أنكيرين مصممة؛ حيث يكون اثنان من الأريعة مجالات تكرار الأنكيرين المصممة المذكورة Ble عن مجالي تكرار أنكيرين مصممين بنوعية ارتباط تجاه (HERZ وحيث يكون OU من الأربعة مجالات تكرار الأنكيرين المصممة المذكورة Ble عن مجالي تكرار أنكيرين مصممين بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل؛ وحيث يشتكل كل من مجالي تكرار الأنكيرين المذكورين والمصممين بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل على المتوالية رقم: 14.
0 في أحد النماذج» يظهر مجال تكرار الأنكيرين المذكور والمصمم والمشتمل على المتوالية رقم: 14 Gna GLA أثناء التخزين في محلول الفوسفات المائي المخزن phosphate buffered water PBS) solution ( مقارنة بمجال تكرار الأنكيرين المصمم والمشتمل على المتوالية رقم: 13. في أحد النماذج» يظهر مجال تكرار الأنكيرين المذكور والمصمم والمشتمل على المتوالية رقم: 14 Gl lua أثناء التخزين في 085 مقارنة بمجال تكرار الأنكيرين المصمم والمشتمل على المتوالية
5 رقم: 15. في أحد النماذج؛ يظهر مجال تكرار الأنكيرين المذكور والمصمم الذي يشتمل على المتوالية رقم: 14 Goss BLS أثناء التخزين في PBS مقارنةٌ بمجال تكرار الأنكيرين المصمم الذي يشتمل على المتوالية رقم: 13. في أحد النماذج؛ يظهر مجال تكرار الأنكيرين المذكور والمصمم الذي يشتمل على المتوالية رقم: 14 lune BLE أثناء التخزين في PBS مقارنةً بمجال تكرار الأنكيرين المصمم الذي يشتمل على المتوالية رقم: 15. تعد مجالات تكرار الأنكيرين المصممة
0 التي تشتمل على المتواليات أرقام: 12 إلى 15 أمثلة لمجالات تكرار أنكيرين مصممة بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل. في أحد النماذج؛ يشتمل البروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني على مجالي تكرار أنكيرين مصممين بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل؛ حيث يشتمل كل من مجالي تكرار الأنكيرين المذكورين المصممين بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل على متوالية حمض أميني
5 المتوالية رقم: 14؛ وحيث يظهر كل من مجالي تكرار الأنكيرين المعروفين والمصممين بنوعية
ارتباط تجاه ألبومين المصل GLE محسدنًا أثناء التخزين في (PBS على نحو مفضل كميات منخفضة من منتجات التحلل بعد التخزين عند 40 درجة Adagio لمدة 1 شهر عند 10 مجم/مل في مقارنة بمجال تكرار أنكيرين مصمم مشتمل على متوالية حمض أميني المتوالية رقم: 13. في أحد النماذج؛ يظهر البروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني والذي يشتمل 5 على مجالي تكرار أنكيرين مصممين بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل؛ حيث يشتمل كل من مجالي تكرار الأنكيرين المذكورين المصممين بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل على متوالية الحمض الأميني للمتوالية رقم: 14 Guna BUS أثناء التخزين» على نحو مفضل كميات منخفضة من منتجات التحلل بعد التخزين عند 40 درجة مئوية لمدة 1 شهر عند 10 مجم/مل في PBS مقارنةً ببروتين مناظر رابط ناتج عن sage الارتباط الجيني؛ حيث يشتمل كل من Mae تكرار 0 الأنكيرين المذكورين المصممين بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل على متوالية الحمض الأميني للمتوالية رقم: 13. تعد المتواليات أرقام: 21 و22 Alia لهذه البروتينات الرابطة الناتجة عن عودة الارتباط الجيني والتي تشتمل على المتوالية رقم: 14 و13؛ على الترتيب. في أحد النماذج؛ يظهر البروتين الرابط المذكور والناتج عن sage الارتباط الجيني؛ والذي يشتمل على مجالي تكرار أنكيرين مصممين بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل» خواصًا حركية دوائية 5 محمّنة مقارنة ببروتين مناظر رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني يشتمل فقط على مجال تكرار أنكيرين مصمم واحد بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل. في أحد النماذج؛ يظهر البروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني؛ والذي يشتمل على مجالي تكرار أنكيرين مصممين بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل» عمرًا نصفيًا طرفيًا أطول في 38 الرياح مقارنة ببروتين مناظر رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني يشتمل فقط على مجال تكرار أنكيرين مصمم واحد بنوعية 0 ارتباط تجاه ألبومين مصل. يكشف المثال 11 (انظر الشكل 5@( عن بروتينات رابطة ناتجة عن عودة الارتباط الجيني لها خواص حركية دوائية محسنة. في أحد النماذج؛ يكون أحد مجالي تكرار الأنكيرين المذكورين والمصممين بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل عند الطرف لا ويكون الآخر عند الطرف © لمجالي تكرار الأنكيرين المذكورين والمصممين بنوعية ارتباط تجاه HER?
في أحد النماذج؛ يكون لأحد مجالي تكرار الأنكيرين المعروفين والمصممين بنوعية ارتباط تجاه HER2 على الأقل 9690 9691 9692 9693 9694 9695 9696 9697 9698 9 أو 96100 من تطابق متوالية الحمض الأميني مع المتوالية رقم: 16. في أحد النماذج؛ يشتمل أحد مجالي تكرار الأنكيرين المعروفين والمصممين بنوعية ارتباط تجاه HERZ على متوالية حمض أميني مختارة من المجموعة التي تشتمل على (1) المتوالية رقم: 16 و/أو )2( متواليات حيث يتم استبدال ما يصل إلى T8910 6 5؛ 4؛ 3 2؛ 1 أو 0 أحماض أمينية للمتوالية رقم: 16 بأي حمض أميني. في أحد النماذج؛ يشتمل أحد مجالي تكرار الأنكيرين المعروفين والمصممين بنوعية ارتباط تجاه HERZ على المتوالية رقم: 16. في أحد النماذج؛ cally أحد مجالي تكرار الأنكيرين المعروفين والمصممين بنوعية ارتباط تجاه HERZ من المتوالية 0 رقم: 16. في أحد النماذج؛ يكون لأحد مجالي تكرار الأنكيرين المعروفين والمصممين بنوعية ارتباط تجاه HER2 على الأقل 9690 9691 9692 9693 9694 9695 9696 9697 9698 9 أو 96100 من تطابق متوالية الحمض الأميني مع المتوالية رقم: 17. في أحد النماذج؛ يشتمل أحد مجالي تكرار الأنكيرين المعروفين والمصممين بنوعية ارتباط تجاه HERZ على متوالية 5 حمض أميني مختارة من المجموعة التي تشتمل على )1( المتوالية رقم: 17 و/أو )2( متواليات حيث يتم استبدال ما يصل إلى T8910 6 5؛ 4؛ 3 2؛ 1 أو 0 أحماض أمينية للمتوالية رقم: 17 بأي حمض أميني. في أحد النماذج؛ يشتمل أحد مجالي تكرار الأنكيرين المعروفين والمصممين بنوعية ارتباط تجاه HERZ على المتوالية رقم: 17. في أحد النماذج؛ cally أحد مجالي تكرار الأنكيرين المعروفين والمصممين بنوعية ارتباط تجاه HERZ من المتوالية 0 رقم: 17. في أحد النماذج؛ يكون لأحد مجالي تكرار الأنكيرين المعروفين والمصممين بنوعية ارتباط تجاه HER2 على الأقل 9690 9691 9692 9693 9694 9695 9696 9697 9698 9. أو 96100 من تطابق متوالية الحمض الأميني مع المتوالية رقم: 16؛ ويكون لأحد مجالي تكرار الأنكيرين المعروفين والمصممين بنوعية ارتباط تجاه HER? على الأقل 9690 9691؛ 5 %92 9693 9694 9695 9696» 9697 9698 9699 أو 96100 من تطابق متوالية
الحمض الأميني مع المتوالية رقم: 17. في أحد النماذج؛ يشتمل أحد مجالي تكرار الأنكيرين المعروفين والمصممين بنوعية ارتباط تجاه HERZ على متوالية حمض أميني مختارة من المجموعة التي تشتمل على (1) المتوالية رقم: 16؛ و/أو (2) متواليات حيث يتم استبدال ما يصل إلى ١10 9؛ 8؛ 7 6؛ 5؛ 4 3؛ 2؛ 1 أو 0 أحماض أمينية للمتوالية رقم: 16 بأي حمض
أميني؛ ويشتمل أحد مجالي تكرار الأنكيرين المعروفين والمصممين بنوعية ارتباط تجاه HERZ على متوالية حمض أميني مختارة من المجموعة التي تشتمل على (1) المتوالية رقم: 17؛ و/أو (2) متواليات حيث يتم استبدال ما يصل إلى T8910 6؛ 5؛ 4؛ 3؛ 2؛ 1 أو 0 أحماض أمينية للمتوالية رقم: 17 بأي حمض أميني. في أحد النماذج؛ يشتمل أحد مجالي تكرار الأنكيرين المعروفين والمصممين بنوعية ارتباط تجاه HERZ على المتوالية رقم: 16 ويشتمل أحد مجالي
0 تكرار الأنكيرين المعروفين والمصممين بنوعية ارتباط تجاه HERD على المتوالية رقم: 17. في aa النماذج؛ يتألف أحد Mae تكرار الأنكيرين المعروفين والمصممين بنوعية ارتباط تجاه HER? من المتوالية رقم: 16 Calling أحد مجالي تكرار الأنكيرين المعروفين والمصممين بنوعية ارتباط تجاه HERZ من المتوالية رقم: 17. في أحد النماذج؛ يشتمل البروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني على المتوالية رقم: 16 عند الطرف N للمتوالية رقم: 17.
5 في أحد النماذج» يشتمل البروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني على متوالية حمض أميني بها 9690 9691 9692 9693 9694 9695 9696 9697 9698 9699 أو 96100 من تطابق متوالية الحمض الأميني مع المتوالية رقم: 32. في أحد النماذج؛ يشتمل البروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني على متوالية حمض أميني مختارة من المجموعة التي تشتمل على (1) المتوالية رقم: 32 و/أو (2) متواليات حيث يتم استبدال ما يصل
0 لى 20 19< 18< 5617ل 4ل ¢13 2ل لل T8910 123456 أو 0 أحماض أمينية للمتوالية رقم: 32 بأي حمض أميني. في أحد النماذج؛ يتعلق الاختراع ببروتين رابط ناتج عن sage الارتباط الجيني يشتمل على أربعة مجالات تكرار أنكيرين مصممة؛ حيث يكون اثنان من الأريعة مجالات تكرار الأنكيرين المصممة المذكورة Ble عن مجالي تكرار أنكيرين مصممين بنوعية ارتباط تجاه HERZ الذي يشتمل على
5 المتواليات أرقام: 16 175( وحيث يكون اثنان من الأربعة مجالات تكرار الأنكيرين المصممة
— 8 1 — المذكورة Ble عن مجالي تكرار أنكيرين مصممين بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل؛ وحيث يشتمل كل من مجالي تكرار الأنكيرين المذكورين والمصممين بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل على المتوالية رقم: 14. في أحد النماذج؛ يتعلق الاختراع ببروتين daly ناتج عن عودة الارتباط الجيني يشتمل على isd) 5 رقم :32 ومرتين المتوالية رقم : 14. في أحد النماذج؛ يتعلق J لاختراع ببروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني يشتمل على المتوالية رقم: 32 ومرتين المتوالية رقم: 14( حيث تقع المتوالية رقم: 2 بجانب المتوالية رقم: 14 عند الطرف N وتقع المتوالية رقم: 14 عند الطرف .C في أحد النماذج؛ تشتمل وصلات البولي ببتيد lly polypeptide linkers تريط مجالات تكرار الأنكيرين المصممة والموجودة في البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني والوارد بالاختراع 0 الحالي على متواليات حمض أميني مختارة من المجموعة التي تشتمل على متواليات حمض أميني المتواليات أرقام: 2 إلى 9 على نحو أكثر تفضيلًا المتواليات أرقام: 3 إلى 9 على نحو أكثر Sass المتواليات أرقام: 4 إلى 9 على نحو أكثر Sumi المتواليات أرقام: 6 أو 9 على نحو أكثر تفضيلا المتوالية رقم: 9؛ والتي فيها يتم استبدال ما يصل إلى 4 3 2 01 أحماض أمينية من المتواليات المذكورة أرقام: 2 إلى 9 على نحو أكثر تفضيلًا المتواليات أرقام: 3 إلى 9؛ على نحو أكثر Suns المتواليات أرقام: 4 إلى 9( على نحو أكثر Sai المتواليات أرقام: 6 أو 9 على نحو أكثر تفضيلًا المتوالية رقم: 9 بأي حمض أميني. في أحد النماذج؛ تكون Gly Ser المجانحة عند الطرف لا لأي من المتواليات أرقام: 7 إلى 9 و/أو Gly Ser المجانحة عند الطرف © لأي من المتواليات أرقام: 2 إلى 6 غير موجودة اختياريًا. في أحد النماذج؛ تشتمل أي من المتواليات أرقام: 2 إلى 9 اختياريًا إضافةً إلى ذلك على Arg Ser عند الطرف لاا © ( مثل الموجودة في المتوالية رقم: 29). في أحد النماذج؛ تشتمل وصلات البولي ببتيد polypeptide linkers المذكورة على متوالية حمض أميني مختارة من أي من متواليات حمض أميني المتواليات أرقام: 2 إلى 9؛ على نحو أكثر تفضيلًا المتواليات أرقام: 3 إلى 9 على نحو أكثر تفضيلًا المتواليات أرقام: 4 إلى 9 على نحو أكثر تفضيلًا المتواليات أرقام: 6 أو 9 على نحو أكثر تفضيلًا المتوالية رقم: 9. في أحد النماذج؛ تتألف وصلات البولي ببتيد والتي تريط 5 مجالات تكرار الأنكيرين المصممة والموجودة في بروتين رابط ناتج عن sage الارتباط الجيني Gy
للاختراع الحالي تتألف من متوالية حمض أميني مختارة من لأي من متواليات حمض أميني المتواليات أرقام: 2 إلى 9؛ على نحو أكثر تفضيلًا المتواليات أرقام: 3 إلى 9 على نحو أكثر تفضيلًا المتواليات أرقام: 4 إلى 9؛ على نحو أكثر تفضيلًا المتواليات أرقام: 6 أو 9؛ على نحو أكثر تفضيلًا المتوالية رقم: 9. في أحد النماذج؛ تشتمل كل من وصلات البولي ببتيد والتي Lusi 5 مجالات تكرار الأنكيرين المصممة والموجودة في بروتين رابط ناتج عن sage الارتباط الجيني Gy
للاختراع الحالي على المتوالية رقم: 9. في أحد النماذج؛ تكون وصلات البولي ببتيد المذكورة الموجودة في بروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني Gy للاختراع الحالي متطابقة بنسبة %T4 %T3 1712 4711 +0 75ت 676 %TT 78 79 9680 9681 2+ %83 %84 %85 %86 9487 9688 9689 9690 9691 9692 9693
0 9694؛ 9695 9696؛ 9697 9698 9699, أو 96100؛ على نحو مفضل. في أحد النماذج؛ يتألف كل من مجالي تكرار الأنكيرين المذكورين والمصممين بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل من متوالية الحمض الأميني للمتوالية رقم: 14» وتكون الأربيعة مجالات تكرار الأنكيرين المذكورة والمصممة متصلةً بوصلات بولي ببتيد تشتمل كل منها على متوالية الحمض الأميني للمتوالية رقم: 9.
في أحد النماذج؛ يتعلق الاختراع ببروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني يشتمل؛ من الطرف :C AN على المتوالية رقم: 14 - المتوالية رقم: 16 - المتوالية رقم: 17 - المتوالية رقم: 14؛ والمتصلة بوصلات بولي ببتيد. في أحد cz dla يتعلق الاختراع ببروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني يشتمل على من الطرف لا إلى :C المتوالية رقم: 14 - المتوالية رقم: 9 - المتوالية رقم: 16 - المتوالية رقم: 9 - المتوالية رقم: 17 - المتوالية رقم: 9 - المتوالية رقم:
0 14. في أحد النماذج» يتعلق الاختراع ببروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني يشتمل على متوالية حمض أميني amino acid sequence بها على الأقل 9688 9689 9690 9691 9692
HE 9695 %94 83 9697 9698 9699؛ أو 16100 تطابق متوالية حمض أميني مع البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني والذي يشتمل على المتوالية رقم: 21. في أحد
5 النماذج؛ يتعلق الاختراع ببروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني يشتمل على متوالية حمض
أميني مختارة من المجموعة التي تشتمل على (1) المتوالية رقم: 21 و/أو (2) متواليات حمض أميني Ally يتم فيها استبدال ما يصل إلى 72» 71 70 69« 68 67 66 65« 64« 63؛ 62 61 60 وي 58 57 56 55 54 53 52 آي 50 49 48 47 46 45 44 43 42 41 40 39 38 37 36 35 34 33« 32 31 30 29« 28 27« 2526( 24 23 22 21 20 19« 18 17« 16 15 14« ¢13 12 10.11 9< 8 56 4 23 1 أو 0 أحماض أمينية للمتوالية رقم: 21 بأحماض أمينية أخرى. في أحد ez Sail) يتعلق الاختراع ببروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني ويشتمل على متوالية حمض أميني بها على الأقل 9688 9689 9690 9691 9692 9693 9694 9695 6 9697 9698 9699 أو 916100 تطابق متوالية حمض أميني مع البروتين الرابط الناتج
0 عن sae الارتباط الجيني والذي يشتمل على المتوالية رقم: 21. في أحد النماذج؛ يتعلق الاختراع ببروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني ويشتمل على متوالية الحمض الأميني مختارة من المجموعة التي تشتمل على (1) المتوالية رقم: 21 و(2) متواليات حمض أميني والتي يتم فيها استبدال ما يصل إلى 2 1 0 69 68 67 66 65 64 63 62 61 60 59 8 56 55 54 53 52 51 50 وك 48 47 46 45 44 43 42 41
5 40 39 38 37 36 35 34 33 32 31 30 029 28 27 26 25 24 23 22( 21( 20 قل قل 17« 16 15 14 ¢13 12 11 T8910 3456 2 1 أو 0 أحماض أمينية للمتوالية رقم: 21 بأحماض أمينية أخرى. على نحو مفضل؛ يتم وضع استبدالات الأحماض الأمينية المذكورة في المتوالية رقم: 21 في المواضع 127 إلى 444 للمتوالية رقم: 21.
0 في أحد النماذج» يتعلق الاختراع ببروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني يشتمل على متوالية حمض أميني بها على الأقل 9688 9689 9690 9691 9692 9693 9694 9695 6 9697 9698 9699 أو 916100 تطابق متوالية حمض أميني مع البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني والذي يشتمل على المتوالية رقم: 21( حيث يشتمل البروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني على مجالي تكرار أنكيرين مصممين بنوعية ارتباط تجاه
5 ألبومين مصل؛ وحيث يشتمل كل من مجالي تكرار الأنكيرين المذكورين المصممين بنوعية ارتباط
تجاه ألبومين مصل على متوالية حمض أميني المتوالية رقم: 14. في أحد qr ila) يتعلق الاختراع ببروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني يشتمل على متوالية حمض أميني بها على الأقل 8 9689 9690 9691 9692 9693 9694 9695 9696 9697 9698 9699 أو 96100 تطابق متوالية حمض أميني مع البروتين الرابط الناتج عن sage الارتباط الجيني والذي يشتمل على المتوالية رقم: 21( حيث يشتمل البروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني على مجالي تكرار أنكيرين مصممين بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل؛ وحيث يتألف كل من مجالي تكرار الأنكيرين المذكورين والمصممين بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل من متوالية حمض أميني المتوالية رقم: 14. في أحد النماذج؛ يتعلق الاختراع ببروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني يشتمل على متوالية حمض أميني مختارة من المجموعة التي تشتمل على (1) 0 المتوالية رقم: 21 و/أو (2) متواليات حمض أميني والتي فيها ما يصل إلى 72 71؛ 70 69؛ 68 67 66 65 64 63« 62 61 60 59« قي 57 56 55 4يى ¢53 52 آى وي 49 48 7ك 46 45 44 43 42 لك 40 39 38 37 36 35 34 33 32( 31 30 29 28 27« 26 25 24 33 22« 21« 20 قد 18« 17 16 15( T8910 «11 «12 + 4 56 4 3 2< 1< أو 0 أحماض أمينية للمتوالية رقم: 21 يتم استبدالها بأحماض أمينية أخرى؛ حيث يشتمل البروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني على مجالي تكرار أنكيرين مصممين بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل؛ وحيث يشتمل كل من مجالي تكرار الأنكيرين المذكورين المصممين بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل على متوالية حمض أميني المتوالية رقم: 14. في أحد النماذج» يتعلق الاختراع ببروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني يشتمل على متوالية حمض أميني مختارة من المجموعة التي تشتمل 0 على (1) المتوالية رقم: 21 و/أو (2) متواليات حمض أميني والتي فيها استبدال ما يصل إلى 23 71 0 69 68 67 66 65 64 63« 62« 61 60 وي 58« 7ى 56 5ى 54 53« 52 51 50 49 48 7ك 46 45 44 43 42 41 40 و3 38 37 36 35 34 33 32( 31 30 29 28 27 26 25 24 23 22 21« 20 19( 18« 17« 16< ¢15 14 13« 12« 1011 89 7 56 4 3 2 1 أو 0 أحماض أمينية للمتوالية رقم: 21 بأحماض أمينية أخرى؛ حيث يشتمل البروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني على مجالي تكرار أنكيرين مصممين بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل؛
ا
وحيث كل من مجالي تكرار الأنكيرين المذكورين والمصممين بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل يتألف من متوالية حمض أميني المتوالية رقم: 14.
في أحد النماذج» يتعلق الاختراع ببروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني يشتمل على متوالية الحمض الأميني الذي يشتمل على المتوالية رقم: 21. في أحد النماذج؛ يتعلق الاختراع ببروتين
رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني يشتمل على متوالية الحمض الأميني للمتوالية رقم: 21.
يفضّل بروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني يشتمل على متوالية الحمض الأميني للمتوالية رقم: 21. يفضّل المتوالية رقم: 21. يفضّل بروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني؛ حيث تكون متوالية الحمض الأميني Ble عن المتوالية رقم: 21. يفضّل بروتين» حيث تكون متوالية الحمض الأميني Ble عن المتوالية رقم: 21. يفضّل بروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني
0 يشتمل على المتوالية رقم: 21. يفضّل بروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني ويشتمل على متوالية الحمض الأميني للمتوالية رقم: 21. هناك عدة ميزات تجعل البروتين Bape بالمتوالية رقم: 21 البروتين المضل الرابط والناتج عن sage الارتباط الجيني Uy للاختراع. يشتمل على مجالي تكرار أنكيرين مصممين بنوعية ارتباط تجاه 2 ومجالي تكرار أنكيرين مصممين بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل؛ حيث يتألف كل من
5 مجالي تكرار الأنكيرين المذكورين والمصممين بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل من المتوالية رقم: 4. يقوم مجالا تكرار الأنكيرين المصممان بنوعية ارتباط تجاه HER? بربط HERZ عند قمتين لاصقتين مختلفتين. تكون الأولى Ble عن البروتين الأول الرابط والناتج عن عودة الارتباط الجيني والذي يدمج ألبومين مصل - ربط وربط HER? ثنائي الموقع. يظهر مجال تكرار الأنكيرين المصمم للمتوالية رقم: 14 خواص ثبات محسّنة أثناء التخزين (انظر المثال 2 و3؛ الشكل 2)
0 مقارنة بمجالات تكرار أنكيرين معروفة ومصممة بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل. يؤدي مجالا تكرار الأنكيرين المذكوران والمصممان بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل على نحو مدهش إلى خواص حركية دوائية محسنة للبروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني مقارنة ببروتين مناظر رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني به فقط مجال تكرار أنكيرين مصمم واحد بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل ( المثال 11؛ الأشكال 5). حينما يقع مجالا تكرار الأنكيرين المصممان
5 بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل على جانب مجالات تكرار الأنكيرين المصممة الأخرى بنوعية
ارتباط تجاه (HER? يتم ملاحظة أفضل خواص حركية دوائية ( المثال 11). يؤدي اختيار مجالات تكرار الأنكيرين المصممة بنوعية ارتباط تجاه HER? وكذلك ترتيبتها البنائية إلى أقصى نشاط للمركب (الأمثلة 5؛ 6؛ و7). يتم توصيل مجالات تكرار الأنكيرين المصممة بوصلة غنية ب PT الأمر الذي يؤدي على نحو مدهش إلى خواص حركية دوائية محسنة (الأمثلة 10 و11).
تؤدي الجزيئات إلى الجمع بين وظائف عقارين على الأقل (على سبيل المثال تراستوزوماب وبيرتوزوماب ) في جزيئ واحد؛ وإضافة إلى ذلك يمكنها حث الموت المبرمج في الخلايا التي تعبر عن HER2 ( المثال 6؛ الشكل 7( في أحد النماذج؛ يظهر البروتين الرابط المذكور الناتج عن عودة الارتباط الجيني والذي يشتمل على المتوالية رقم: 21 use GLE أثناء التخزين مقارنةً ببروتين مناظر daly ناتج عن عودة
0 الارتباط الجيني يشتمل على المتوالية رقم: 22. في أحد النماذج؛ يظهر البروتين الرابط المذكور الناتج عن عودة الارتباط الجيني والذي يشتمل على المتوالية رقم: 21 كميات منخفضة من منتجات التحلل بعد التخزين عند 40 درجة مئوية لمدة 1 شهر عند 10 مجم/مل في محلول الفوسفات المائي المخزن PBS) phosphate buffered water solution ( مقارنة ببروتين مناظر رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني يشتمل على المتوالية رقم: 22
5 في أحد النماذج؛ يظهر البروتين الرابط المذكور الناتج عن عودة الارتباط الجيني والذي يشتمل على المتوالية رقم: 21 خواصًا حركية دوائية محسّنة مقارنة بالبروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني والذي يشتمل على المتوالية رقم: 21؛ حيث تم إزالة مجال تكرار الأنكيرين المصمم عند الطرف © بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل. في أحد er Sail) يظهر البروتين الرابط المذكور الناتج عن عودة الارتباط الجيني والذي يشتمل على المتوالية رقم: 21 خواصًا حركية
0 دوائية محسّنة مقارنة بالبروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني والذي يتألف من أحماض أمينية 1 إلى 422 للمتوالية رقم: 21. في أحد النماذج؛ يظهر البروتين الرابط المذكور الناتج عن عودة الارتباط الجيني والذي يشتمل على المتوالية رقم: 21 خواصًا حركية دوائية محسّنة مقارنة بالبروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني والذي يشتمل على المتوالية رقم: 33. في أحد ez all يقوم كل مجال من مجالات تكرار الأنكيرين المعروفة والمصممة بنوعية ارتباط
5 تجاه ألبومين مصل بربط ألبومين مصل مصدره فأرء capa كلب؛ قردٍ rly أو إنسان» على نحو
أكثر تفضيلًا ألبومين مصل مصدره فأرء قرد رياح أو إنسان؛ على نحو أكثر تفضيلًا ألبومين مصل مصدره 38 رياح أو إنسان؛ على نحو أكثر تفضيلًا ألبومين مصل مصدره إنسان؛ في PBS له ثابت انفصال (Kd) dissociation constant دون 5-10 مولار؛ على نحو مفضل دون 6-10 مولار؛ أو على نحو أكثر تفضيلًا دون 7-10 مولار. في أحد النماذج؛ يتألف كل
مجال من مجالات تكرار الأنكيرين المعروفة والمصممة بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل من المتوالية رقم: 14 وبقوم بربط ألبومين مصل بشري في 085 له ثابت انفصال (Kd) دون 5-10 مولار؛ على نحو مفضل دون 6-10 مولار؛ أو على نحو أكثر تفضيلًا دون 7-10 مولار. تم عرض أمثلة تحديد ثابت الانفصال باستخدام رنين البلازمون السطحي في المثال 5 وفي الطلب الدولي 083208/2014.
0 في أحد النماذج» يقوم كل مجال من مجالات تكرار الأنكيرين المعروفة والمصممة بنوعية ارتباط تجاه HER بريط HER2 من أصل بشري في 085 له ثابت انفصال dissociation (Kd) constant دون 6-10 مولار؛ على نحو مفضل دون 7-10 مولار؛ على نحو أكثر تفضيلًا دون 8-10 Nga ¢ أو على نحو أكثر تفضيلًا دون 9-10 مولار. في أحد النماذج؛ يقوم مجال تكرار الأنكيرين المذكور والمصمم بنوعية ارتباط تجاه HERZ الذي يشتمل على المتوالية
5 رقم: 16 بريط HER2 بشري في PBS له ثابت انفصال (Kd) دون 6-10 مولار؛ على نحو مفضل دون 7-10 مولار؛ على نحو أكثر تفضيلًا دون 8-10 مولار؛ على نحو أكثر تفضيلًا دون 9-10 مولار؛ على نحو أكثر تفضيلًا دون 10-10 مولار؛ أو على نحو أكثر تفضيلًا دون 11-0 مولار. في أحد النماذج؛ يقوم مجال تكرار الأنكيرين المذكور والمصمم بنوعية ارتباط تجاه HER2 الذي يشتمل على المتوالية رقم: 17 بربط HER2 بشري في 085 له ثابت انفصال
(Kd) 0 دون 6-10 مولار؛ على نحو مفضل دون 7-10 مولار؛ على نحو أكثر تفضيلًا دون 8-0 مولار؛ أو على نحو أكثر تفضيلًا دون 9-10 مولار. في أحد النماذج؛ يقوم البروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني بربط HERZ من أصل بشري في PBS له ثابت انفصال (Kd) دون 7-10 مولار؛ على نحو مفضل دون 8-10 مولار؛ على نحو أكثر تفضيلًا دون 9-10 مولار؛ أو على نحو أكثر تفضيلًا دون 10-10
25 ميولار. في أحد النماذج؛ يقوم البروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني بنوعية
ارتباط تجاه 11542 مشتمل على المتوالية رقم: 32 بربط ألبومين مصل بشري في PBS له ثابت انفصال (Kd) دون 8-10 مولار؛ على نحو مفضل دون 9-10 مولار؛ أو على نحو أكثر تفضيلًا دون 10-10 مولار. في أحد النماذج؛ يقوم البروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني بنوعية ارتباط تجاه HERZ مشتمل على المتوالية رقم: 21 HERZ Lays من أصل بشري في PBS له ثابت انفصال (Kd) دون 7-10 مولار؛ على نحو مفضل دون 8-10
مولار؛ على نحو أكثر تفضيلًا دون 9-10 مولار؛ أو على نحو أكثر تفضيلًا دون 10-10 مولار. في أحد النماذج؛ يقوم البروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني بنوعية ارتباط تجاه HERZ الذي يشتمل على المتوالية رقم: 21 بريط ١1542 من أصل بشري في PBS له ثابت انفصال (Kd)dissociation constant دون 7-10 مولار؛ على نحو مفضل دون
0 8-10 مولار؛ على نحو أكثر تفضيلًا دون 9-10 مولارء أو على نحو أكثر Saati دون 10- 0 مولار. في أحد النماذج؛ يقوم البروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني Ly ألبومين مصل بشري له ثابت انفصال (Kd) دون 5-10 مولار؛ على نحو مفضل دون 6-10 مولار؛ أو على نحو أكثر تفضيلًا دون 7-10 مولار. في أحد النماذج؛ يقوم البروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني بنوعية ارتباط تجاه HERZ مشتمل على المتوالية رقم:
5 21 بربط ألبومين مصل بشري في PBS له ثابت انفصال (Kd) دون 5-10 مولار؛ على نحو مفضل دون 6-10 مولار؛ أو على نحو أكثر تفضيلًا دون 7-10 مولار. في أحد النماذج؛ asi البروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني بنوعية ارتباط تجاه HERZ الذي يشتمل على المتوالية رقم: 21 بربط ألبومين مصل بشري في PBS له ثابت انفصال (Kd) دون 5-10 مولار؛ على نحو مفضل دون 6-10 مولارء أو على نحو أكثر تفضيلًا دون 7-10 مولار.
0 في أحد النماذج؛ يقوم البروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني بتثبيط تكاثر خلية معبرة عن 142 بثابت تثبيط يبلغ (IC50) أقل من 6-10 مولار؛ على نحو مفضل دون 10- 7 مولار؛ أو على نحو أكثر تفضيلًا دون 8-10 مولار. من بين أمثلة هذه الخلايا خلايا MDA- 4i (HCC1419 20-75-30 «(NCI-N87 SKOV-3 (SKBR-3 (BT474 5. في أحد النماذج؛ يقوم البروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني بتثبيط
5 تكاثر خلية 81474 بثابت تثبيط يبلغ (IC50) أقل من 6-10 مولار؛ على نحو مفضل دون
7-0 مولار؛ أو على نحو أكثر تفضيلًا دون 8-10 مولار. في أحد النماذج؛ يقوم البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني والمشتمل على المتوالية رقم: 32 بتثبيط تكاثر خلية 4 بثابت تثبيط يبلغ (IC50) أقل من 6-10 مولار؛ على نحو مفضل دون 7-10 مولار» أو على نحو أكثر تفضيلًا دون 8-10 مولار. في أحد النماذج؛ يقوم البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني والمشتمل على المتوالية رقم: 21 بتثبيط تكاثر خلية 81474 بثابت تثبيط
يبلغ (IC50) أقل من 6-10 مولار؛ على نحو مفضل دون 7-10 مولار؛ أو على نحو أكثر تفضيلًا دون 8-10 مولار. في أحد oz dail يقوم البروتين الرابط الناتج عن sage الارتباط الجيني والذي يشتمل على المتوالية رقم: 21 بتثبيط تكاثر خلية 87474 بثابت تثبيط يبلغ Jil (IC50) من 6-10 مولار؛ على نحو مفضل دون 7-10 مولارء أو على نحو أكثر تفضيلًا دون 8-10
0 -_ملولار. تعد تجارب تثبيط الخلايا معروفة جيدًا في المجال. في أحد cz dail يقوم البروتين الرابط المذكور الناتج عن عودة الارتباط الجيني والذي يشتمل على المتوالية رقم: 21 بتثبيط تكاثر خلية 4 على نحو أكثر فاعلية من البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني والذي يتضمن فقط مجال تكرار أنكيرين مصمم واحد بنوعية ارتباط تجاه HERZ في أحد النماذج؛ يقوم البروتين الرابط المذكور الناتج عن عودة الارتباط الجيني والذي يشتمل على المتوالية رقم: 21
5 بتثبيط تكاثر خلية 81474 دون مساعدة السيّية التي تتوسطها الخلايا والمعتمدة على الجسم المضاد ADCC) antibody—dependent cell-mediated cytotoxicity ( ؛ المعروفة جيدًا للممارس في المجال . في أحد النماذج؛ يقوم البروتين الرابط المذكور الناتج عن عودة الارتباط الجيني والذي يشتمل على المتوالية رقم: 21 بتثبيط تكاثر خلية 81474 دون مساعدة شظية lgG1-Fc fragment
في أحد النماذج» يؤدي البروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني والذي يشتمل على؛ على نحو مفضل والذي يتألف منء المتوالية رقم: 21 إلى حث الموت المبرمج في خلايا 4. في أحد النماذج» يؤدي البروتين الرابط المذكور والناتج عن sage الارتباط الجيني والذي يشتمل على؛ على نحو مفضل والذي يتألف منء المتوالية رقم: 21 إلى حث الموت المبرمج في خلايا 81474 مع قيمة تركيز لها نصف القيمة القصوى half maximal effective
(EC50) concentration 5 أقل من 100 نانو مولار. على نحو مفضل؛ يؤدي البروتين الرابط
المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني إلى حث الموت المبرمج في WDA 81474 بقيمة EC50 أقل من 90» 80» 70 60« 50؛ 40؛ 30« 20 أو 10 نانو مولار. على نحو مفضلء يؤدي البروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني عند 100 نانو مولار إلى حث الموت المبرمج في 81474 إلى مدى أكبر من 100 نانو مولار تراستوزوماب؛ 100 نانو مولار بيرتوزوماب؛ أو خليط من 100 نانو مولار تراستوزوماب و100 نانو مولار بيرتوزوماب. في أحد النماذج؛ يؤدي البروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني والذي يشتمل على؛ على نحو مفضل والذي يتألف منء المتوالية رقم: 21 إلى حث الموت المبرمج في الخلايا التي تعبر عن HER2 في أحد النماذج؛ يقوم البروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني والذي يشتمل 0 على المتوالية رقم: 21 بتثبيط مسار RAS في أحد النماذج؛ يتم فسفرة HER2 في 81474 بدرجة أقل عند معالجته بالبروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني والذي يشتمل على المتوالية رقم: 21 منه عند معالجته بتراستوزوماب treated with Trastuzumab في أحد النماذج؛ يمكن للبروتين الرابط المذكور والناتج عن sage الارتباط الجيني ربط HER2 وألبومين مصل بشري على نحو متزامن. في أحد النماذج» يمكن للبروتين الرابط المذكور والناتج 5 عن sae الارتباط الجيني ربط جزبئي ألبومين مصل بشري على نحو متزامن. يمكن إظهار الريط المتزامن باستخدام رنين بلازمون سطحي تجارب ( المثال 5) أو الاستشراب باستبعاد الحجم مقروتًا بتشتيت الضوء الثابت ( المثال 14)؛ وهو من بين التقنيات المعروفة جيدًا للشخص المتمرس في المجال. في أحد or Sail) يقوم البروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني HERZ Lay في 0 نمط ثنائي الموقع. في أحد النماذج؛ يقوم البروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني بربط HERZ عند قمتين لاصقتين مختلفتين two different epitopes في أحد النماذج؛ يتعلق الاختراع الحالي ببروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني يشتمل على مجال تكرار أنكيرين مصمم أول» ثان؛ ثالث؛ cag حيث يكون لكلا مجالي تكرار الأنكيرين المصممين المذكورين الأول والثاني نوعية ارتباط تجاه (HER وحيث يكون لكلا مجالي تكرار
الأنكيرين المصممين المذكورين الثالث والرابع نوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل. على نحو مفضل؛ يتألف البروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني من سلسلة بولي ببتيد مفردة. على نحو أكثر Slain يتم توصيل مجالات تكرار الأنكيرين المصممة المذكورة الأولى. الثانية؛ الثالثة والرابعة بوصلات بولي ببتيد polypeptide linkers تعد المتوالية رقم: 1 مثالا لهذا البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني .recombinant binding protein في أحد النماذج؛ يكون مجال تكرار الأنكيرين المصمم الأول المذكور بنوعية ارتباط تجاه HER? Ble عن ربط المجال ١! ل HERZ في أحد النماذج؛ يكون مجال تكرار الأنكيرين المصمم الثاني المذكور بنوعية ارتباط تجاه Ble HERZ عن ربط المجال ا ل HER2 في أحد النماذج؛ يكون مجال تكرار الأنكيرين المصمم الأول المذكور بنوعية ارتباط تجاه HERZ عبارةً عن ربط المجال (HER2 2١١ 0 ويكون Jae تكرار الأنكيرين المصمم الثاني المذكور بنوعية ارتباط تجاه HER? Bile عن ربط المجال ا ل HER2 في أحد النماذج؛ يشتمل مجال تكرار الأنكيرين المصمم الأول المذكور بنوعية ارتباط تجاه HERD على المتوالية رقم: 16. في أحد النماذج؛ يشتمل مجال تكرار الأنكيرين المصمم الثاني المذكور بنوعية ارتباط تجاه HERZ على المتوالية رقم: 17. في أحد النماذج؛ يشتمل مجال تكرار الأنكيرين المصمم الأول المذكور بنوعية ارتباط تجاه HER?2 5 على المتوالية رقم: 16 وبشتمل مجال تكرار الأنكيرين المصمم الثاني المذكور بنوعية ارتباط تجاه HER2 على المتوالية رقم: 17. في أحد النماذج؛ يقوم مجال تكرار الأنكيرين المصمم الأول المذكور بنوعية ارتباط تجاه HERZ مشتمل على المتوالية رقم: 16 بربط HER2 بشري في PBS له ثابت انفصال polypeptide (Kd) linkers دون 6-10 مولار؛ على نحو مفضل دون 7-10 مولار؛ على نحو أكثر تفضيلًا 0 دون 8-10 مولار؛ على نحو أكثر تفضيلًا دون 9-10 مولار؛ على نحو أكثر تفضيلًا دون 10- 0 مولارء أو على نحو أكثر تفضيلًا دون 11-10 مولار. في أحد النماذج؛ يقوم مجال تكرار الأنكيرين المصمم الثاني المذكور بنوعية ارتباط تجاه HERD مشتمل على المتوالية رقم: 17 Jay 12 بشري في PBS له ثابت انفصال (Kd) دون 6-10 مولار؛ على نحو مفضل دون 10- 7 مولار؛ على نحو أكثر تفضيلًا دون 8-10 مولار؛ أو على نحو أكثر تفضيلًا دون 9-10 5 ملولار.
في أحد النماذج؛ يقوم كل من مجالي تكرار الأنكيرين المصممين الثالث والرابع المذكورين بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل بربط ألبومين مصل بشري في 585 له ثابت انفصال (Kd) دون 10- مولار؛ على نحو مفضل دون 6-10 مولار؛ أو على نحو أكثر تفضيلًا دون 7-10 مولار. في أحد النماذج؛ يقوم كل من Jae تكرار الأنكيرين المصممين الثالث والرابع المذكورين بنوعية 5 ارتباط تجاه ألبومين مصل؛ حيث يشتمل كل منهما على المتوالية رقم: 14؛ بريط ألبومين مصل
بشري في 085 له ثابت انفصال (Kd) دون 5-10 مولار؛ على نحو مفضل دون 6-10 مولار؛ أو على نحو أكثر تفضيلًا دون 7-10 مولار. لا تشير أو لا تنطوي المصطلحات CGE Cl "ثالث" واختياريًا 'رابع”؛ والتي تم استخدامها في Jia تكرار أنكيرين مصمم أول"؛ 'مجال تكرار أنكيرين مصمم ثاني"؛ 'مجال تكرار أنكيرين
0 مصمم ثالث" و'مجال تكرار أنكيرين مصمم رابع”» على أي ترتيبة في موضع مجالات تكرار الأنكيرين المعروفة والمصممة داخل البروتين الرابط الناتج عن sae الارتباط الجيني. في أحد النماذج» يتم وضع الأربعة مجالات تكرار الأنكيرين المذكورة والمصممة من الطرف لا إلى iC ثالث - Jf - ثانٍ - رابع. في أحد النماذج؛ يقوم البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني بتثبيط تكاثر da 87474
5 في نموذج ورم طعم خارجي في قتران. في أحد النماذج, يقوم البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني بتثبيط نمو الورم في نموذج طعم سرطان خارجي يعبر عن HERZ مشتق من مريض في فتران. في أحد النماذج؛ يقوم البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني بتثبيط نمو الورم في نموذج طعم سرطان مَعدي خارجي يعبر عن HERZ مشتق من مريض في فثران. يكون للمصطلح 'طعم خارجي يعبر عن HER2 مشتق من مريض" معنى نسيج طعم سرطان
0 خارجي مشتق من مربض»؛ حيث تعبر في النسيج المذكور خلية واحدة على الأقل عن HER2 أعلى من القيمة الأساسية. في أي من نماذج الاختراع الحالي ذات الصلة بمجال تكرار أنكيرين مصمم أو بروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني يشتمل على متوالية حمض أميني بها على الأقل 9688 9689؛ %90 9691» 9692 9693 9694 9695 %96 9697 9698 %99< أو 96100
5 تطابق متوالية حمض أميني مع متوالية حمض أميني معينة؛ يمكن وضع الأحماض الأمينية غير
المتطابقة عند أي من موضع مجال تكرار الأنكيرين المصمم أو البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني. cially في أي من نماذج الاختراع Mal ذي الصلة بمجال تكرار أنكيرين مصمم أو بروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني والذي فيه يتم استبدال ما يصل إلى 72 71» 70 69؛ 68؛ 67 66 65 64 63« 62 آي 60« 59 58« لي 56 ذى 54 53 ¢52 51 وى
9 48 لك 46 45 44 43 42 1ك 0ك 39 38 37 36 35 34 33 32« 31 30 29 28 27« 26 25 24 23 22 21« 0ك 19< 18 01617 15 14 T8910 «11 1213 566 4 123( أو 0 أحماض أمينية بأي حمض أميني؛ يمكن وضع الأحماض الأمينية المستبدلة عند أي موضع بمجال تكرار الأنكيرين المصمم. تعد
0 تقنيات تعديل» على سبيل المثال بالطفرة النقطية ؛ البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني Gy للاختراع الحالي معروفة جيدًا لذي المهارة في المجال. بدءًا من المتوالية رقم: 21؛ يعرف الشخص المتمرس في المجال كيفية ومكان استبدال الأحماض الأمينية (على سبيل المثال باستخدام معلومات الطلب الدولي 020565/2002( لتكوين متوالية صور متغيرة للمتوالية رقم: 1 مع وجود احتمالية مرتفعة لنشاط وظيفي غير معدل.
5 في أحد النماذج؛ يظهر البروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني زيادةً في عمر نصفي طرفي؛ على نحو مفضل زيادة في jee نصفي طرفي يبلغ على الأقل %5 9610؛ 5 %20 9625 9630 9635 9640 أو 9645 مقارنةٌ ببروتين مناظر day ناتج عن عودة الارتباط الجيني يفتقد إلى مجال تكرار الأنكيرين المصمم الرابع المذكور بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل. في أحد النماذج؛ يظهر البروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني
0 ززيادة في عمر نصفي طرفي؛ على نحو مفضل زيادة في jee نصفي طرفي يبلغ على الأقل 965؛ 60 9615 9620؛ 9625 9630 %35 9640 أو %45< مقارنة ببروتين مناظر رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني يشتمل فقط على مجال تكرار أنكيرين مصمم واحد بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل. تم إيضاح أمثلة لهذه الزيادة في العمر النصفي الطرفي في المثال 11. في أحد النماذج؛ يظهر البروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني والذي يشتمل
5 على؛ على نحو مفضل والذي يتألف من المتوالية رقم: 21 عمرًا نصفيًا طرفيًا يبلغ حوالي 47
ساعة عند 1 مجم/كجم في قرد الرياح. في أحد النماذج؛ يظهر البروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني والذي يشتمل cle على نحو مفضل والذي cally منء المتوالية رقم: 1 عمرًا نصفيًا طرفيًا يبلغ حوالي 100 ساعة عند 5 مجم/كجم في قرد الرياح. في أحد النماذج؛ يظهر البروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني والذي يشتمل على؛ على نحو مفضل والذي Cally من» المتوالية رقم: 21 عمرًا نصفيًا طرفيًا يزيد عن 100 ساعة عند 10 مجم/كجم في قرد الرياح. في أحد النماذج؛ يظهر البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني والمشتمل على؛ على نحو مفضل والذي يتألف منء المتوالية رقم: 21 عمرًا نصفيًا طرفيًا يزيد عن 0 ساعة عند 100 مجم/كجم في قرد الرياح. في أحد النماذج, يتعلق الاختراع بحمض نووي Say متوالية الحمض الأميني لمجال تكرار أنكيرين 0 مصمم أو بروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني وفقًا للاختراع الحالي؛ على نحو مفضل بروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني Bag للاختراع الحالي. في أحد النماذج؛ يتعلق الاختراع بحمض نووي San متوالية الحمض الأميني لبروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني Gy للاختراع الحالي. في أحد النماذج؛ يتعلق الاختراع بحمض نووي يرمّز متوالية الحمض الأميني الذي يشتمل على المتوالية رقم: 21. في أحد النماذج؛ يتعلق الاختراع بحمض نووي an البروتين 5 الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني. في أحد النماذج؛ يتعلق الاختراع بحمض نووي يريّز البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني والذي يشتمل على المتوالية رقم: 21. علاوة على ذلك»؛ يتعلق الاختراع بنواقل مشتملة على أي حمض نووي وارد بالاختراع. تعد الأحماض النووية معروفة لذي المهارة. في الأمثلة؛ تم استخدام أحماض نووية لإنتاج مجالات تكرار أنكيرين مصممة أو بروتينات رابطة ناتجة عن عودة الارتباط الجيني والوارد بالاختراع في إيشيرشيا كولاي E.coli 20 في أحد النماذج؛ يتعلق الاختراع بتركيببة صيدلانية مشتملة على بروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني و/أو مجال تكرار أنكيرين مصمم وارد بالاختراع الحالي؛ و/أو حمض نووي Jax بروتيئًا Ua ناتجًا عن عودة الارتباط الجيني و/أو مجال تكرار أنكيرين مصمم وارد بالاختراع الحالي؛ واختياريًا مادة حاملة و/أو مخفّفة مقبولة صيدلانيًا.
في أحد النماذج؛ يتعلق الاختراع بتركيببة صيدلانية مشتملة على بروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني أو حمض نووي Som بروتيئًا رابضًا ناتجًا عن sage الارتباط الجيني؛ واختياريًا مادة حاملة و/أو مخففة مقبولة صيدلانيًا. تعد المواد الحاملة و/أو المخففة المقبولة صيدلانيًا معروفة للمتمرسين في المجال وتم إيضاحها أدناه بمزيد من التفصيل. Ble على ذلك؛ تعد التركيبة التشخيصية مشتملةً على واحد أو أكثر من
البروتينات الرابطة الناتجة عن عودة الارتباط الجيني و/أو مجالات تكرار الأنكيرين المصممة؛ و/أو الأحماض النووية؛ على نحو محدد البروتينات الرابطة الناتجة عن عودة الارتباط الجيني و/أو الأحماض النووية التي ورد ذكرها أعلاه. تشتمل التركيببة الصيدلانية على بروتين رابط ناتج عن sage الارتباط الجيني؛ و/أو مجال تكرار
0 أنكيرين مصمم؛ و/أو حمض نووي» على نحو مفضل بروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني و/أو حمض نووي؛ على النحو الموصوف بهذه الوثيقة ومادة حاملة أو سواغ أو مثبتة مقبولة صيدلانيًا؛ على سبيل المثال على النحو الموصوف في Remington's Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A.
Ed., 1980 تعد المواد الحاملة؛ السواغات أو المثبتات المناسبة dale مثل محلول ay محلول 3g ua ¢ محلول هانك؛ الزيوت المثبتة؛ أوليات
5 الإيثيل؛ 965 ديكستروز في محلول ملحيء المواد التي تحسن تساوي التوتر والثبات الكيميائي» المحاليل المنظمة والمواد الحافظة. من بين المواد الحاملة المناسبة الأخرى أي مادة حاملة لا تؤدي بذاتها إلى حث إنتاج الأجسام المضادة الضارة للفرد الذي يتلقى التركيبة؛ على سبيل المثال» بروتينات؛ مركبات بولي سكاريد polysaccharides ؛ أحماض بولي لاكتيك polylactic 5 ؛ أحماض بولي جليكوليك polyglycolic acids ؛ أحماض بوليمرية أمينية
polymeric amino acids 0 ومونومرات أحماض أمينية مشتركة .amino acid copolymers كما تعد التركيببة الصيدلانية صيغة مشتركة؛ مشتملة على عامل فعال إضافي؛ على سبيل المثال؛ عامل مضاد للسرطان anti-cancer agent أو عامل مضاد لتكون الأوعية anti— angiogenic agent ؛ أو مركب إضافي فعال بيولوجيًا. يتعلق أحد نماذج الاختراع الحالي باستخدام بروتين daly ناتج عن عودة الارتباط الجيني Gay
5 للاختراع الحالي مشتمل على مجالي تكرار أنكيرين مصممين بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل
لتصنيع تركيببة صيدلانية» حيث يظهر البروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني Sal) في العمر النصفي الطرفي؛ على نحو مفضل زيادة في العمر النصفي الطرفي تبلغ على الأقل 965؛ على نحو مفضل 9610 9615 9620 9625 9630 9635 9640 9645 0 9660» 9670 9680 9690 96100 96150 96200؛ أو 96250؛ مقارنةً ببروتين مناظر رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني يشتمل فقط على مجال تكرار أنكيرين مصمم واحد بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل. في أحد النماذج» تشتمل تركيببة صيدلانية بروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني واحد على (BY) على النحو الموصوف بهذه الوثيقة ومطهر؛ على سبيل المثال» مطهر غير أيوني detergent 700010016 ؛ محلول ملحي مركز؛ على das المثال؛ فوسفات phosphate « 0 وسكرء؛ على سبيل المثال؛ سكروز sucrose في أحد النماذج؛ تشتمل هذه التركيبة على بروتينات رابطة ناتجة عن عودة الارتباط الجيني على النحو الموصوف أعلاه و محلول الفوسفات المائي المخزن PBS) phosphate buffered water solution (. في أحد or Sal) يتعلق الاختراع باستخدام تركيببة صيدلانية؛ أو بروتين رابط ناتج عن عودة 5 الارتباط الجيني وفقًا للاختراع الحالي لعلاج مرض ما. لذلك الغرض؛ يمكن إعطاء التركيببة الصيدلانية؛ أو البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني By للاختراع الحالي؛ لمريض بحاجة إليهاء بكمية فعالة علاجيًا. قد يتضمن الإعطاء الإعطاء الموضعي؛ وعبر call وبالحقن غير المعوي. Bole ما يتم الإعطاء بالحقن غير المعوي. في الإعطاء بالحقن غير المعوي؛ سيتم صياغة التركيببة الصيدلانية الواردة بهذا الاختراع في deja واحدة قابلة للحقن؛ على سبيل (Jill 0 محلول؛ معلق أو مستحلب؛ مرتبط بسواغات مقبولة صيدلانيًا على النحو المحدد أعلاه. سوف تعتمد الجرعة ومسار الإعطاء على الفرد الذي سيتم علاجه والمرض المحدد. علاوةً على ذلك» يمكن اعتبار أي تركيببة صيدلانية أو بروتين رابط ناتج عن sage الارتباط الجيني ورد وصفه أعلاه لعلاج اضطراب.
— 4 3 — في أحد النماذج» يمكن وضع البروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني أو تركيببة صيدلانية أخرى ورد وصفها بهذه الوثيقة داخل الوريد . للإعطاء بالحقن غير المعوي 6 يمكن الحقن بالبروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني أو هذه التركيببة الصيدلانية كحقنة بلعة أو بالتسريب البطيئ بكمية فعالة علاجيًا. في أحد النماذج» يتعلق الاختراع بطريقة لعلاج حالة طبية؛ حيث تشتمل الطريقة على خطوة إعطاء ؛ مريض بحاجة إلى هذا العلاج؛ كمية فعالة علاجيًا من بروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني Gag للاختراع . في أحد النماذ z يتعلق ١ لاختراع بطريقة لعلاج dls طبية؛ حيث تشتمل الطريقة على خطوة إعطاء» مريض بحاجة إلى هذا العلاج؛ كمية فعالة علاجيًا من التركيببة الصيدلانية الواردة بالاختراع. يوضح المثال 7 (الشكل 4) استخدام بروتين رابط ناتج عن عودة ا لارتباط الجيني يشتمل على المتوالية رقم : 21 لعلاج سرطان . في أحد oz ail يتعلق الاختراع باستخدام التركيببة الصيدلانية الواردة بالاختراع الحالي لعلاج مرض ما. في أحد النماذج؛ يتعلق الاختراع بتركيببة صيدلانية لاستخدامها في علاج مرض ما. في أحد النماذج؛ يتعلق في أحد النماذج؛ يتعلق الاختراع بالبروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني والذي يشتمل 5 على المتوالية رقم: 21 لاستخدامه كدواء. في أحد oz dail) يتعلق الاختراع بالبروتين الرابط الناتج عن عودة ١ لارتباط الجيني والذي يشتمل على المتوالية رقم : 21 لاستخدامه في علاج مرض ما. في أحد النماذج» يمكن وصف هذه التركيببة الصيدلانية؛ أو البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني؛ أو جزيئ الحمض النووي لاستخدامه في علاج مرض ما. في أحد النماذج؛ يتعلق الاختراع بدواء مشتمل على هذه التركيببة الصيدلانية؛ أو البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط 0 الجيني؛ أو جزيئ الحمض النووي. في أحد النماذج؛ يتعلق الاختراع باستخدام البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني والذي يشتمل على المتوالية رقم: 21 في تركيببة صيدلانية لعلاج مرض ما. في أحد التماذج؛ يتعلق الاختراع بهذه التركيببة الصيدلانية لاستخدامها في علاج مرض ما. في أحد النماذج؛ يتعلق الاختراع بالبروتين الرابط المذكور والناتج عن عودة الارتباط الجيني لاستخدامه في علاج مرض ما. في أحد النماذج؛ يتعلق الاختراع بالحمض النووي المذكور 5 الاستخدامه في علاج مرض ما. في أحد النماذج» يتعلق الاختراع باستخدام هذه التركيببة
الصيدلانية؛ أو البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني؛ أو جزيئ الحمض النووي؛ كدواء لعلاج مرض ما. في أحد النماذج؛ يتعلق الاختراع باستخدام هذه التركيببة الصيدلانية؛ أو البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني؛ أو جزيئ الحمض النووي؛ لعلاج مرض ما. في أحد النماذج» يتعلق الاختراع باستخدام هذه التركيببة الصيدلانية؛ أو البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني؛ أو جزيئ الحمض النووي؛ لتصنيع دواء. في أحد النماذج؛ يتعلق الاختراع باستخدام هذه التركيببة الصيدلانية؛ أو البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني؛ أو جزيئ الحمض النووي؛ لتصنيع دواء لعلاج مرض ما. في أحد النماذج؛ يتعلق الاختراع بعملية لتصنيع دواء لعلاج مرض ماء حيث تكون هذه التركيببة الصيدلانية؛ أو البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني؛ أو جزيئ الحمض النووي Ble عن عامل فعال للدواء. في أحد النماذج؛ يتعلق 0 الاختراع بعملية لعلاج مرض ما باستخدام هذه التركيببة الصيدلانية؛ أو البروتين الرابط الناتج عن sage الارتباط الجيني recombinant binding protein « أو جزيئ الحمض النووي nucleic acid molecule . يشتمل مصطلح "الحالة الطبية medical condition " أو الاضطراب disorder أو المرض 6 على اضطرابات المناعة الذاتي autoimmune disorders » الاضطرابات الالتهابية inflammatory disorders 5 ؛ اعتلال الشبكية retinopathies وخاصة اعتلال الشبكية التكائري «proliferative retinopathies اضطرابات التنكس العصبي 06006060618176 الالتهابات «infections الأمراض الاستقلابية metabolic diseases « والأمراض الورمية .neoplastic diseases يمكن استخدام أي من البروتينات الرابطة الناتجة عن عودة الارتباط الجيني الموصوفة هنا لتحضير دواء لعلاج مثل هذا 0 الاضطراب»؛ خاصةٌ الاضطراب الذي تم اختياره من المجموعة التي تشتمل على: اضطرابات المناعة الذاتي autoimmune disorders ¢ الاضطرابات الالتهابية inflammatory disorders ¢ اعتلال الشبكية retinopathies « ومرض ورمي .neoplastic disease قد تكون "الحالة الطبية' Ble عن حالة تتميز بتكاثر خلية غير مناسبة. قد تكون الحالة الطبية Ble عن حالة فرط تكاتر. يتعلق الاختراع على نحو خاص بطريقة لعلاج dlls طبية؛ الطريقة التي 5 تشتمل على خطوة إعطاء؛ إلى المريض الذي يحتاج إلى مثل هذا العلاج» كمية فعالة علاجيًا من
بروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني أو التركيبة الصيدلانية المذكورة للاختراع. في نموذج مفضل؛ تكون الحالة الطبية المذكورة عبارة عن مرض ورمي. يشير المصطلح "مرض ورمي"؛ كما هو مستخدم هناء إلى حالة غير طبيعية أو حالة من الخلايا أو الأنسجة التي تتميز بنمو الخلايا أو الأورام المنتشرة بسرعة. في أحد النماذج المذكورة؛ تعتبر الحالة الطبية عبارة عن مرض ورمي خبيث. في أحد النماذج المذكورة؛ تشير الحالة الطبية المذكورة إلى السرطان. في أحد النماذج المذكورة؛ تتعلق الحالة الطبية ب HER2 الذي يعبر عن السرطان؛ سرطان المدمن addicted cancer ل (HERZ السرطان المدمن جزثيًا ل 11842 1142 التي تعبر على نحو مفرط عن السرطان» سرطان مضخم بواسطة HER2 وسرطان مقاوم للتراستوزوماب Trastuzumab— resistant cancer « و/أو سرطان حساس للتراستوزوماب Trastuzumab-sensitive cancer 10 . في أحد النماذج؛ تتعلق الحالة الطبية المذكورة بسرطان الثدي breast cancer و/أو سرطان المعدة والأمعاء gastrointestinal cancer و/أو سرطان الدماغ brain cancer . في أحد النماذج؛ تتعلق الحالة الطبية المذكورة بسرطان الثدي breast cancer ؛ سرطان المبيض ovarian cancer ؛ السرطان المّعدي gastric cancer أو سرطان المّعدة stomach cancer ؛ سرطان الرحم uterine cancer ؛ سرطان القولون والمستقيم bladder cancer 5 ؛ سرطان المثانة bladder cancer و/أو السرطان الذي يعبر عن .HER2 قد يرتبط مصطلح (la ju’ الدماغ brain cancer " بنقيلة دماغ HER2 brain metastasis التي تعبر عن السرطان overexpressing cancer ¢ نقيلة دماغ السرطان المضخم brain 5 بواسطة (HERZ سرطان الدماغ المعبر على نحو مفرط عن (HERZ أو سرطان الدماغ المضخم amplified brain cancer ب 42ا1. قد يرتبط مصطلح سرطان "المعدة 0 والأمعاء ' بسرطان المعدة gastric cancer ؛ سرطان المريء esophageal cancer « سرطان القولون والمستقيم colorectal cancer ؛ سرطان الغدة الصفراوية biliary gland cancer » سرطان المرارة gallbladder cancer أو سرطان البنكرياس 080016816. يشير مصطلح 'كمية فعالة therapeutically effective amount Ladle ' إلى كمية تكفي لإحداث تأثير مرغوب فيه على المريض. في أحد النماذج؛ تتعلق الحالة الطبية المذكورة بالسرطان؛ حيث 5 تُظهر خلايا السرطان المذكورة مستويات التعبير عن HER2 أعلى الخلفية كما هو محدد بواسطة IHC في أحد النماذج؛ تتعلق الحالة الطبية المذكورة بالسرطان؛ حيث تظهر WA السرطان
المذكورة مستويات التعبير عن HER2 فوق الخلايا السليمة في المناطق المجاورة لها على النحو الذي تحدده IHC تكون مستويات التعبير عن HERZ الموجودة فوق الخلفية معروفة للممارس في المجال؛ على سبيل المثال؛ من اختبارات مثل (Dako) HercepTest® . على نحو (nde ترتبط مستويات التعبير عن HER2 فوق الخلفية بنتيجة HercepTest® التي تبلغ +1 +2؛ أو +3) وعلى نحو أكثر تفضيلًا +2 أو +3. يكون التعبير المفرط عن Her? معروف جيدًا إلى ¢(Ruschoff et al., 2012. Modern Pathology 25, 637-650 ممارس المجال
Wolff et al., 2013. J. Clin. Oncol. 31 (31), 3997-4014) على نحو ame يتعلق الاختراع بمعالجة dlls طبية باستخدام تركيبة صيدلانية للاختراع الحالي؛ حيث تكون الحالة الطبية المذكورة عبارة عن سرطان. 0 يمكن Wad استخدام استخدام بروتين رابط ناتج عن sage الارتباط الجيني Gy للاختراع الحالي أو التركيبات الصيدلانية المذكورة لعلاج أمراض السرطان في توليفة مع واحد أو أكثر من العلاجات المعروفة في المجال. يشير مصطلح "استخدام في توليفة Cae كما هو مستخدم هناء إلى إعطاء مشترك؛ يتم تنفيذه بموجب نظام معين. يتضمن ذلك الإعطاء المتزامنة للمركبات المختلفة وكذلك الإعطاء في أوقات مختلفة للمركبات المختلفة (على سبيل Jl) يتم إعطاء المركب A مرة واحدة 5 وبتم إعطاء المركب 8 عدة مرات بعد ذلك؛ أو العكس؛ أو يتم إعطاء كلا المركبين على نحو متزامن ويتم إعطاء مركب واحد من المركبين لاحقًا). هناك أمثلة للمركبات التي يمكن إعطاؤها على نحو مشترك تتضمن على سبيل المثال تانيسين taxanes « أنثراسايكلين anthracyclines » أو أدوية كيميائية أساسها البلاتينيوم platinum ؛ مثبطات 5-FU أو PI3K مثل على سبيل المثال أبيتوليسيب Apitolisib ؛ تاسيليب Taselisib ¢ ألبيليسيب Alpelisib أو مثبطات (Jia MEK 0 على سبيل المثال» تراميتينيب Trametinib ؛ كوبيميتينيب Cobimetinib « مثبطات (Jie على سبيل (JE ساليراسيب Salirasib ؛ متبطات (RAF متبطات MTOR بما في ذلك؛ على سبيل المثال؛ أبيتوليسيب Apitolisib ؛ إيفي رولوميس Everolimus « مثبطات (Pan-EGFR مثبطات ميكروتيويول microtubule inhibitors بما في ذلك إيرببيولين eribulin ¢ العلاجات المستهدفة التي تتضمن مثبطات الكيناز لدورة الخلية cell cycle Jie kinase inhibitors 25 على سبيل المثال بالبوسيسليب Palbociclib ؛ مثبطات (HER2
تراسوزوماب Trastuzumab ؛ تراسوزوماب «DMI - Trastuzumab برتوزوماب Pertuzumab ¢ سيتوكسيماب Cetuximab ¢ بانيتوموماب Panitumumab « نيموتوزوماب Nimotuzumab ¢ بيفاسيزوماب Bevacizumab « رانيبيزوماب Ranibizumab « 100250 إيبيليموماب Ipilimumab ؛ بيمبروليزوماب Pembrolizumab 5 « نيفولوماب Nivolumab ؛ يوربلوماب Urelumab ؛ أتوليموماب
Atezolizumab ؛ أو أتيزوليزوماب Utolimumab . يفضل استخدام هذه المركبات بالجرعات الموصى بها. في أحد النماذج؛ يعزز البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني الذي يشتمل على المتوالية رقم: 21 تأثير مثبطات (PI3K مثبطات «MTOR إيرببيولين Eribulin « تراستوزوماب Trastuzumab ؛ أو لابتينيب Lapatinib . في أحد النماذج المذكورة؛ يُمكن
0 استخدام الجرعة الأقل من مثبطات PI3K أو مثبطات «MTOR إيرببيولين Eribulin ¢ تراستوزوماب Trastuzumab ؛ أو لابتينيب Lapatinib لعلاج المرض. وترد أمثلة على هذه المجموعات في المثال 17. في أحد النماذج الإضافية؛ يتعلق الاختراع باستخدام بروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني وارد بالاختراع في تصنيع دواء يستخدم لعلاج حالة طبية؛ ويفضل أن يكون مرض ورمي؛ وعلى
5 نحو أكثر Sain مرض السرطان cancer . في أحد النماذج» يتعلق الاختراع باستخدام تركيبة صيدلانية واردة بالاختراع لتصنيع دواء يستخدم لعلاج dlls طبية؛ والتي قد تكون مرضًا ورميًّا؛ على نحو محدد السرطان. يجب أن تكون المستحضرات المستخدمة للإعطاء في جسم الكائن الحي مطهرة أو معقمة. يتم ذلك بسهولة عن طريق الترشيح filtration من خلال أغشية الترشيح المعقمة sterile filtration
membranes 0 . في أحد النماذج؛ يتعلق الاختراع ببروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني يشتمل على أي من مجالات التكرار المذكورة أعلاه. في أحد النماذج؛ يتعلق الاختراع بطقم علاجي يشتمل على البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني المذكور. في أحد نماذج؛ يتعلق الاختراع بطقم علاجي يشتمل على حمض نووي
يقوم بتشفير البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني المذكور. في أحد النماذج؛ يتعلق الاختراع بطقم علاجي يشتمل على التركيبة الصيدلانية المذكورة. في أحد النماذج؛ يتعلق الاختراع بطقم علاجي يشتمل على البروتين الرابط الناتج عن sage الارتباط الجيني المذكور؛ و/أو حمض نووي يقوم بتشفير البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني المذكور و/أو التركيبة الصيدلانية المذكورة. في أحد النماذج؛ يتعلق الاختراع بطقم علاجي يشتمل على البروتين الرابط
الناتج عن sage الارتباط الجيني الذي يشتمل؛ يتكون على نحو مفضل من؛ على المتوالية رقم: 1 و/أو حمض نووي يشفر البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني الذي يشتمل؛ ويفضل أن يتكون من» على المتوالية رقم: 21 و/أو تركيبة صيدلانية تشتمل على البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني الذي يشتمل؛ يفضل أن يتكون من؛ على المتوالية رقم: 21 و/أو
0 حمض نودوي يُشفُر البروتين الرابط الناتج عن sage الارتباط الجيني الذي يشتمل؛ يفضل أن يتكون من؛ على المتوالية رقم: 21. في أحد النماذج» يتعلق الاختراع بطريقة لإنتاج بروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني وارد بالاختراع الحالي. في أحد النماذج؛ يتعلق الاختراع بطريقة لإنتاج البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني الذي يشتمل» ويفضل أن يتكون من» على المتوالية رقم: 21( حيث تشتمل الطريقة
5 على خطوات () التعبير عن البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني في البكتيرياء و(ب) تنقية البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني المذكور باستخدام الكروماتوجراف. قد تشتمل الطريقة المذكورة على خطوات إضافية. يتم توضيح هذه الطريقة لإنتاج بروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني وارد بالاختراع الحالي في المثال 1. لا يقتصر الاختراع على النماذج المعينة الموضحة في الأمثلة. يمكن استخدام مصادر أخرى
0 ومعالجتها Gg للمخطط العام الموضح أدناه. تم سرد عدد من الوثائق في LIS هذه المواصفة. تم تضمين محتوى هذه الوثائق ضمن المراجع. تشير هذه المواصفة إلى عدد من متواليات الحمض الأميني لمتوالية الحمض الأميني المدرجة في هذه المواصفة باسم "PO15_Sequence Listing. txt’ وبتم تضمين متواليات الحمض الأميني لبروتوكول المتوالية هنا كمرجع.
التعريفات في سياق الاختراع الحالي؛ يشير المصطلح "بروتين" إلى بولي cain حيث يحتوي cn من البولي any على الأقل؛ أو يكون قادر على الحصول على ترتيبة ثلاثية الأبعاد محددة عن طريق تكوين بنيات ثانوية؛ ثلاثية؛ أو رباعية داخل سلسلة بولي ببتيد واحدة و/أو بين سلاسل البولي ببتيد
المتعددة. إذا كان البروتين يشتمل على اثنين أو أكثر من سلاسل البولي ببتيد؛ يمكن ربط سلاسل البولي ببتيد بطريقة غير تساهمية أو تساهمية؛ على سبيل المثال بواسطة رابطة ثانية الكبربتيد بين اثنين من البولي ببتيدات. يُسمى جزءٍ من البروتين؛ الذي يتضمن على نحو مفرد؛ أويكون قادر على الحصول علىء ترتيبة ثلاثية الأبعاد محددة عن طريق تكوين بنية ثانوية أو ثلاثية؛ Jad البروتين". تكون مجالات البروتين هذه معروفة جيدًا للممارس الماهر في المجال.
0 يعني المصطلح 'ناتج عن عودة الارتباط الجيني" كما هو مستخدم في البروتين الناتج عن عودة الارتباط الجيني؛ مجال البروتين الناتج عن عودة الارتباط الجينيء البروتينال رابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني وما شابه ذلك؛ أن البولي ببتيدات المذكورة يتم إنتاجها باستخدام تقنيات الحمض النووي (DNA) nucleic acid الناتجة عن عودة الارتباط الجيني المعروفة من قبل الممارس ذي المهارة في المجال ذي الصلة. على سبيل المثال» يمكن استنساخ جزيء DNA ناتج عن
5 عودة الارتباط الجيني (على سبيل (JU الناتج بواسطة تخليق الجين) يشفر بولي ببتيد إلى بلازميد تعبير بكتيري (مثل (QIAgen (pQE30 بلازميد تعبير الخميرة؛ بلازميد تعبير الثدييات؛ بلازميد تعبير النبات؛ أو DNA الذي (Kad التعبير في المختبر. على سبيل المثال؛ إذا تم إدخال بلازميد تعبير بكتيري ناتج عن عودة الارتباط الجيني في بكتيريا bacteria مناسبة Jie الإيشيرشيا كولاي Escherichia coli ؛ يمكن لهذه البكتيريا إنتاج البولي ببتيد المشفر بواسطة
0 هذا DNA الناتج عن عودة الارتباط الجيني. ply على ذلك؛ يطلق على البولي ببتيد 06 المنتج بولي ببتيد ناتج عن عودة الارتباط الجيني أو بروتين ناتج عن عودة الارتباط الجيني. في سياق الاختراع الحالي؛ يشير المصطلح 'بروتين binding protein Lay " إلى بروتين يشتمل على اثنين أو أكثر. ويفضل أن يكون ثلاثة أو أكثر. ويفضل على نحو أكثر أربعة أو أكثر
من مجالات الريط. على نحو مفضل»؛ يكون بروتين الريط المذكور عبارة عن بروتين رابط ناتج
عن عودة الارتباط الجيني. على نحو مفضل» يشتمل بروتين الريط المذكور على dal مجالات مكررة. على نحو أكثر Saas يتضمن اثنان من مجالات الريط المذكورة أريعة مجالات تكرار أنكرين مصممة. على نحو مفضل» يتضمن اثنان من مجالات الربط المذكورة لبروتين الريط المذكور خصوصية مستهدفة لألبومين المصل. ويفضل أيضًا أن تتضمن كل من مجالات الريط المذكورة لبروتين الريط المذكور نوعية مستهدفة تجاه HERZ
علاوة على ذلك؛ يمكن أن يشتمل أي بروتين ربط كهذا على بولي ببتيدات إضافية (مثل علامات البولي ببتيد؛ روابط البولي ببتيد» أو الاندماج في مجالات بروتينية أخرى مازمة؛ السيتوكينات cytokines ؛ الهرمونات hormones « أو مضادات antagonists أو تعديلات كيميائية Jie الاقتران بالبولي إيثيلين جليكول polyethylene—glycol ¢ التوكسينات 10*1705على سبيل
0 المثال؛ DMI من المولد المناعي Immunogen ؛ جزيئات صغيرة small molecules « المضادات الحيوية antibiotics وما شابه معروفة لذي المهارة في هذا المجال. da) بمصطلح "andl Jad’ مجال بروتين يوضح نفس "الطي" أي البنية الثانوية secondary ADEN « و/أو Le bli باعتباره سلاسل بروتين مجاورة وله خاصية محددة مسبقًا؛ على النحو المحدد أدناه. يمكن الحصول على Jae ربط كهذا من خلال تقنيات هندسة البروتين التوافقية؛ أو
5 الأكثر شيوعًاء والمهارات المعروفة في المجال ,0100161000 (Binz, H.K., Amstutz, P., Nat.
Biotech. 23, 1257-1268) .2005 ,./. على سبيل JB يمكن الحصول على مجال ربط له خاصية محددة مسبقًا بواسطة طريقة تشتمل على الخطوات التالية: (أ) توفير مجموعة متنوعة من مجالات البروتين التي تظهر نفس الطية كسلاسل بروتين مجاورة كما هو محدد أدناه؛ و(ب) فحص المجموعة المتنوعة المذكورة و/أو الاختيار من المجموعة المتنوعة
0 المذكورة للحصول على مجال بروتين واحد على الأقل بعد الخاصية المحددة مسبقًا المذكورة. يمكن توفير مجموعة متنوعة من مجالات البروتين بعدة طرق وفقًا لنظام الفحص و/أو الاختيار المستخدم؛ وقد يشتمل على استخدام الطرق المعروفة جيدًا لذي المهارة في المجال؛ die عرض فاج أو عرض الرببوسوم. يفضل أن يكون مجال الريط المذكور عبارة عن مجال رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني.
يُقصد بمصطلح Ald البروتين المتجاورة" البروتين الذي يحتوي على مناطق سطحية مكشوفة التي يكون فيها عمليات إدخال الأحماض الأمينية؛ بدائلهاء أو عمليات الحذف مقبولة للغاية. تكون هناك أمثلة لسلاسل البروتين المتجاورة التي يمكن استخدامها لإنشاء مجالات ريط للاختراع الحالي تكون عبارة عن أجسام مضادة أو شظايا منها مثل شظايا Fv أو Fab أحادية السلسلة -5:0916 chain Fv or Fab fragments 5 « بروتين A من المكورات العنقودية الذهبية؛ Staphylococcus aureus بروتين ربط بيلين bilin binding protein من فراشة الكرنب Pieris brassicae أو مواد ليبوكالين lipocalins ؛ أو بروتينات تكرار أنكرين ankyrin repeat proteins الأخرىء والفبرونيكتين البشري fibronectin 110180. تكون سلاسل البروتين المتجاورة معروفة لذوي المهارة في المجال (Binz et al., 2005, loc. cit.; Binz et .al., 2004, loc. cit.) 0 يشير المصطلح "هدف target ' إلى جزيء مفرد مثل جزيء الحمض النووي؛ البولي ببتيد؛ أو البروتين» الكربوهيدرات» أو أي جزيء آخر يحدث على نحو طبيعي؛ بما في ذلك أي ein من هذا الجزيء الفردي؛ أو مجمعات من اثنين أو أكثر من هذه الجزيئات. قد يكون الهدف عبارة عن خلية كاملة أو عينة نسيجية؛ أو قد يكون Ble عن أي مركب غير طبيعي. على نحو مفضل؛ يكون الهدف عبارة عن بولي ببتيد طبيعي أو غير طبيعي أو بولي ببتيد يحتوي على تعديلات كيميائية؛ على سبيل المثال تم تعديلها بواسطة فسفرة طبيعية أو غير طبيعية أو أستلة أو ميثلة. في التطبيق الخاص للاختراع الحالي؛ تكون الأهداف عبارة عن ألبومين مصل serum albumin و1542ا. يشير المصطلح "خاصية محددة مسبقًا" إلى خاصية Jie الربط بالهدف؛ إعاقة الهدف»؛ تنشيط التفاعل بوساطة الهدف؛ النشاط الأنزيمي؛ والخصائص الإضافية ذات الصلة. Gy لنوع الخاصية 0 المطلوية؛ سيكون الشخص ذي المهارة العادية قادرة على تحديد التنسيق والخطوات الضرورية لأداء الفحص و/أو اختيار مجال الربط مع الخاصية المطلوية. على نحو مفضل؛ يتم ربط الخاصية المذكورة الحمددة مسبقًا بالهدف على نحو محدد. في سياق الاختراع الحالي؛ يتعلق مصطلح of ببتيد Polypeptide " بجزيء يتكون من سلسلة من عدة أحماض أمينية؛ سلسلتين أو AST ¢ مرتبطة بروابط ببتيد. على نحو مفضل؛ يتكون البولي 5 بببتيد من أكثر من ثمانية أحماض أمينية مرتبطة عبر روابط الببتيد. daily مصطلح "بولي "ai
أيضًا على سلإسل متعددة من الأحماض الأمينية؛ مرتبطة ببعضها البعض بواسطة جسور 5-5 للسيستين bridges of cysteines 5-5 . تكون البولي ببتيدات معروفة لذي المهارة في المجال. يشير مصطلح Ake’ بولي ببتيد" إلى متوالية حمض أميني مرتبطة ببولي ببتيد/بروتين» حيث تكون متوالية الحمض الأميني المذكورة مفيدة لتنقية؛ اكتشاف؛ أو "استهداف" (gf) تحديد موقع موقع الهدف) البولي ببتيد/البروتين» أو حيث تقوم متوالية الأحماض الأمينية المذكورة بتحسين السلوك المادي الكيميائي للبولي ببتيد/البروتين؛ أو حيث تتضمن متوالية الحمض الأميني المذكورة وظيفة المؤثر. قد يتم توصيل علامات البولي ببتيد الفردية لبروتين الريط بأجزاء أخرى من بروتين الريط مباشرةٌ أو عبر روابط بولي ببتيد. تكون جميع علامات البولي ببتيد معروفة جيدًا في المجال 0 ومتاحة تمامًا لذي المهارة في المجال. هناك أمثلة لعلامات البولي ببتيد تكون عبارة عن متواليات بولي ببتيد صغيرة؛ على سبيل المثال» علامات His (مثل 115-189 المتوالية رقم: 1)؛ «myc (FLAG أو Strep أو بولي ببتيدات Jie الإنزيمات على سبيل المثال الفوسفاتيز القلوية alkaline phosphatase ؛ والتي تسمح باكتشاف البولي ببتيد/البروتين المذكورء أو البولي ببتيدات التي يمكن استخدامها في الاستهداف Jie الجلوبيولين المناعي immunoglobulins أو 5 شظاي 789016015 منه و/أو جزبئات المؤثر. يشير مصطلح 'رابط بولي ببتيد polypeptide linker " إلى متوالية حمض أميني؛ والذي يمكنه؛ على سبيل المثال؛ ريط مجالي بروتين؛ علامة بولي ببتيد ومجال بروتين؛ مجال بروتين ومركب غير بروتيني أو بوليمر مثل بولي إيثيلين جليكول polyethylene glycol ؛ أو اثنين من علامات المتوالية. تكون Jie هذه المجالات؛ العلامات؛ المكونات غير البروتينية؛ أو البوليمرات 0 والروابط الإضافية معروفة جيدًا لذي المهارة للمجال الصلة. يتم توفير قائمة من الأمثلة في وصف طلب البراءة الدولي 2002/020565. هناك أمثلة خاصة على هذه الروابط تكون عبارة عن روابط جليكاين- سيرين glycine—serine—linkers وروابط برولين- proline— (igi 1600106-65 بأطوال مختلفة. هناك أمثلة لروابط جليكاين - سيرين تكون عبارة عن GS ومتواليات أحماض أمينية موفرة في المتواليات رقم: من 2 إلى 6؛ ويتم توفير أمثلة لروابط برولين- 5 ثيورين في المتواليات رقم: من 7 إلى 9 من متواليات الحمض الأميني.
تحتوي براءات الاختراع الدولي 2002/020565 and Forrer et al., 2003 (Forrer, P., «Stumpp, M.T., Binz, H.K., Pliickthun, A., 2003. FEBS Letters 539, 2-6) على وصف عام لمزايا البروتين المتكرر ومزايا؛ تقنيات وتطبيقات مجال متكرر. يشير مصطلح "البروتين المتكرر' إلى بروتين يشتمل على واحد أو أكثر من مجالات التكرار. على نحو مفضل؛ يشتمل بروتين التكرار على ما يصل إلى ستة مجالات تكرار. على نحو أكثر تفضيلًا؛ يشتمل بروتين التكرار على ما يصل إلى خمسة مجالات تكرار. og نحو أكثر Sluis يشتمل بروتين التكرار على أريعة مجالات تكرار. علاوةً على ذلك؛ قد يشتمل بروتين التكرار المذكور على مجالات بروتين إضافية غير متكررة؛ علامات ببتيد و/أو روابط ببتيد. يمكن أن تكون مجالات التكرار عبارة عن مجالات الريط كما هو موضح مسبقًا.
0 يشير مصطلح Jad’ التكرار" إلى مجال البروتين الذي يشتمل على وحدتين أو أكثر من وحدات التكرار المتتالية كوحدات uly حيث تكون الوحدات البنائية المذكورة لها نفس الطية؛ وتتكدس بإحكام لتكوين بنية فوقية لها نواة وصلة غير آلفة للماء. بجانب التناسق Sl) تحتوي وحدات التكرار هذه على تجانس متوالية. على نحو مفضل؛ يشتمل مجال التكرار Wad على تكرار تغطية الطرف © و/أو الطرف لا. من أجل الوضوح, (Sa أن يكون تكرار التغطية عبارة عن وحدة
5 تكرار. تكون مجالات التكرار هذه؛ وحدات ISN وتكرارات الغطاء؛ دوافع المتوالية؛ وكذلك التجانس البنائي وتجانس المتوالية معروفة جيدًا للممارس في المجال من أمثلة مجالات تكرار أنكرين طلب البراءة الدولي 2002/020565؛ مجالات تكرار غنية بالليوسين طلب البراءة الدولي 5 مجالات تكرار تترا تراي كوببتيد (Main, E.R., tetratricopeptide Xiong, Y., Cocco, M.J., D'Andrea, L., Regan, L., Structure 11(5), 497-
0 )2003 ,508 ومجالات تكرار أرماديلو lkarmadillo repeat domains البراءة الدولي 8 .من المعروف جيدًا للممارس في المجال أن مجالات التكرار هذه تختلف عن البروتينات التي تحتوي على متواليات الحمض الأميني المتكررة؛ حيث تكون كل من متواليات الحمض الأميني المتكرر قادرة على تكوين مجال فردي le) سبيل المثال؛ مجال FNS للفيبرونيستين)؛ أو حيث لا تكون متواليات الحمض الأميني المتكررة ليست وحدات بنائية؛ بمعنى
5 أن متواليات الحمض الأميني المذكورة لا تتكدس بإحكام لتكوين بنية فوقية لها نواة مفصلية غير
آلفة للماء. يتم إنشاء طرق تعريف وتحديد وحدات التكرار أو التتابعات التنظيمية لمتوالية التكرار أو تحديد فصاتئل البروتينات ذات الصلة التي تتضمن التتابعات التنظيمية أو وحدات التكرارء مثل عمليات البحث المتجانسة BLAST®) إلخ)؛ على نحو جيد في مجال المعلوماتية الحيوية؛ وتكون معروفة جيدًا للممارس في المجال.
يشير المصطلح "بروتين التكرار المصمم” Jad’ التكرار المصمم” إلى بروتين تكرار أو مجال تكرار؛ على التوالي؛ تم الحصول عليه نتيجة لإجراء مبتكرء على سبيل (Jha كما هو موضح في طلب البراءة الدولي 2002/020565. يشير المصطلح 'مصمم” إلى الخاصية بحيث تكون بروتينات التكرار ومجالات التكرار هذه؛ على التوالي؛ من صنع الإنسان؛ وليس الطبيعة. تشتمل بروتينات التكرار المصممة أو مجالات التكرار المصممة في طلب البراءة الدولي
0 2002/020565 على بروتينات تكرار أنكرين المصممة أو مجالات تكرار أنكرين المصممة؛ على التوالي. بناءً على ذلك» يتوافق بروتين تكرار أنكرين المصمم هنا مع بروتين الاختراع المشتمل على مجال تكرار أنكرين مصمم واحد على الأقل. علاوةً على ذلك؛ يشير مصطلح "ليس من الطبيعة" إلى أن متوالية بروتين الربط المذكورة أو مجال Tall المذكور غير موجود كمدخل متوالية غير اصطناعي في قاعدة بيانات متوالية؛ على سبيل المثال في EMBL-Bank (GenBank أو
Swiss—Prot 5 .05 قواعد البيانات والمتواليات المماثلة الأخرى معروفة جيدًا لذي المهارة في المجال. لا تحدث البروتينات الرابطة الناتجة عن عودة الارتباط الجيني أو مجالات تكرار أنكرين المصممة للاختراع على نحو طبيعي. تم تعريف المصطلحات sang’ التكرار النمطية"؛ 'وحدة التكرار" 'تكرار الغطاء"؛ sang’ الغطاء"؛ والمصطلحات الأخرى المتعلقة ببروتينات التكرار ومجالات التكرار» في طلب البراءة الدولي
0 2002/020565؛ وبتم إدراج التعريفات هنا كمرجع. تشير المصطلحات al نوعية ريط تجاه الهدف"؛ 'ريط محدد بالهدف"؛ 'ريط بهدف ذي نوعية عالية”؛ "نوعي تجاه الهدف" أو "نوعية الهدف"” وما شابه ذلك يعني أن بروتين Tall أو مجال الريط يرتبط في 085 بمستهدف به ثابت تحلل أقل (أي أنه يرتبط بألفة ارتباط أعلى) مما يرتبط ببروتين ليس له علاقة Jie بروتين الريط مالتوز إي كولاي E. coli maltose binding protein
5 (1080). على نحو مفضل؛ يكون ثابت التحلل (Kd) في PBS للمستهدف هو على الأقل؛
على نحو أكثر Sas 310 على الأقل؛ على نحو أكثر Sas 410 على الأقل؛ أو على نحو أكثر Sass 510 مرة أقل من ثابت التحلل المناظر ل MBP إن طرق تحديد ثوابت تحلل تفاعلات البروتين- البروتين؛ Jie التقنيات المعتمدة على الرنين البلازمي السطحي surface Jie (SPR) plasmon resonance تحليل توازن (SPR) equilibrium analysis أو قياس التسوية بالمعايرة الحرارية (ITC) isothermal titration calorimetry معروفة جيدًا لذي
المهارة في المجال. يمكن أن تختلف قيم Kd المقاسة لتفاعل بروتين- بروتين محدد إذا تم قياسها في ظل ظروف مختلفة (مثل تركيز الملح؛ الرقم الهيدروجيني). وبالتالي» من الأفضل shal قياسات قيم Kd باستخدام محاليل موحدة للبروتين ومحاليل منظمة موحدة؛ مثل PBS يشير مصطلح "PBS" إلى محلول مائي منظم للفوسفات phosphate buffered water
solution 0 يحتوي على 137 مل مولار من كلوريد الصوديوم Sodium chloride « 10 مل مولار من الفوسفات phosphate و2.7 مل مولا كلوريد البوتاسيوم Potassium chloride (KCI) ورقم هيدروجيني pH 7.4. يشير المصطلح "تثبيط تكاثر خلية" وعلى حد سواء في سياق الاختراع الحالي إلى قدرة بروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني المذكور على تثبيط تكاثر الخلية. تقاس قوة التثبيط Bole عن
5 طريق تقييم تركيز تثبيط نصف القدرة القصوى half-maximal inhibition (1050). يتم تثبيت مصطلح التثبيط وتقييم قيم 1050 في هذا المجال. يشير المصطلح 'ألبومين المصل الفأري" إلى رقم الوصول إلى 607724 UniProt ويشير المصطلح "مصل ألبومين لقرد الرياح" (أي 28 المكاك) إلى رقم الوصول إلى UniProt 4ه وشير المصطلح 'ألبومين المصل البشري إلى رقم الوصول إلى UniProt
P0O2768 0 يتعلق (HER2 كما هو مستخدم هناء بمستقبل عامل نمو البشرة البشري 2؛ والمعروف أيضًا باسم (Neu 5008-2 أو 0340© (مجموعة التمايز 340( أو 0185. يكون. HER2 عبارة عن عضو من فصيلة مستقبل عامل نمو البشرة (6114/2008). يتم تشفير HER2 في البشرء بواسطة 4882ا؛ وهو بروتين جين ورمي معروف يقع في الذراع الطويلة للكروموسوم البشري
7 (17012). تحتوي HER2 على رقم 04626 UniProtKB | Swiss—Prot يتكون 2 البشري من 1255 حمض أميني به 21 متوالية إشارة حمض أميني» 631 منطقة للأحماض الأمينية خارج الخلية (على سبيل المثال؛ الإكتودومين الذي يشتمل على المجالات من الأول إلى الرابع)؛ ومنطقة الأغشية الحمضية الأمينية البالغ عددها 23 منطقة؛ و580 مجال للأحماض الأمينية الخلوية.
يشير مصطلح HET المحسن للتخزين" في سياق الاختراع الحالي إلى تقليل كميات من نطاق «Jail ويفضل تقليل كمية منتجات التحلل؛ كما تم الكشف عنها بواسطة SDS-PAGE الملون بواسطة كوماسي الذي يحدث بعد التخزين عند 40 درجة مئوية لمدة شهر واحد عند 10 مل جرام/مل لتر في PBS بنسبة لا تقل عن 5 % 9610 9615 9620 9625 9630 9635
0 9640 9645؛ 9650؛ أو 50 96. تكون طرق تقييم استقرار التخزين بواسطة SDS-PAGE معروفة جيدًا لذي المهارة في المجال. يتم عرض أمثلة مجالات تكرار أنكرين المصممة وبروتينات رابطة ناتجة عن عودة الارتباط الجيني بخصائص استقرار تخزين محسنة في المثالين 2 و3. يشير مصطلح "بروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني يشتمل على مجال تكرار أنيكرين مصمم واحد مع نوعية الربط تجاه ألبومين المصل" يعني أنه يتم تقليل رابط ناتج عن عودة
5 الارتباط الجيني يحتوي على تركيبة بروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني وفقًا للاختراع الحالي الذي يتم فيه تقليل عدد مجالات تكرار أنكرين التي يكون بها نوعية ربط تجاه ألبومين المصل إلى واحد؛ عن طريق إزالة جميع مجالات تكرار أنكرين المصممة بنوعية الربط تجاه ألبومين المصل باستثناء واحد؛ ورابطات البولي ببتيد المناظرة. يشير مصطلح 'بروتين ربط ثنائي المظلة' إلى بروتين ربط موجه ضد اثنين من القمم اللاصقة
0 المختلفة الموجودة على نفس البروتين المستهدف. على سبيل المثال؛ يشتمل بروتين الريط ثنائي المظلة الذي يستهدف HER2 على مجال ربط أول على الأقل يستهدف قمة لاصقة أولى على HER2 ومجال ربط ثاني يستهدف قمة لاصقة ثانية مختلفة على HERZ يكون البروتين الذي يتكون من المتوالية رقم: 32 عبارة عن بروتين ربط ثنائي المظلة يشتمل على اثنين من مجالات تكرار الأنكرين المصممة بنوعة ربط تجاه HERZ التي تستهدف القمم اللاصقة المختلفة على
.HER2 يشتمل البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني الذي يتكون من المتوالية رقم: 1 على المتوالية رقم: 32. يشير التعبير jell خصائص حرائك دوائية محسّنة"» "خواص حرائك دوائية محسّنة' أو 'تحسين خواص حرائك دوائية" في هذا الاختراع إلى أنه يتم تحسين متغير الحركة الدوائية لبروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني مقارنةٌ بمتغير الحركة الدوائية المناظرة للبروتين المقترن بها. يتم توضيح الأمثلة المناظرة في الأمثلة 8 و9 و10 و11 (انظر الشكلين 5 و6). على نحو مفضل؛ تكون خاصية الحركية الدوائية المحسّنة عبارة عن نقاء منخفض» و/أو تعرض edly و/أو زيادة في نصف عمر الوحدة. على نحو أكثر Sanit تكون خاصية الحركة الدوائية المحسّنة عبارة عن فترة نصف عمر وحدة متزايد. في أحد النماذج؛ يعرض بروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني Gy 0 للاختراع الحالي؛ والذي يشتمل على اثنين على الأقل؛ وبفضل أن يشتمل على اثنين من مجالات تكرار أنكيرين بنوعية ربط تجاه ألبومين المصل» فترة عمر وحدة متزايد؛ و/أو نقاء منخفض؛ و/أو sal) تعرض ما لا يقل عن 5 % 10 % 15 % 20 96 25 96 9630 5 % 40 % 45 % %45 %50 %60 %70« %80« 9490 96100 96150 %200 %250< أو %250 مقارنة ببروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني مناظر يشتمل 5 على مجال تكرار أنكيرين واحد مصمم بنوعية ارتباط تجاه ألبومين المصل. في أحد النماذج؛ يعرض بروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني وفقًا للاختراع الحالي؛ والذي يشتمل على اثنين على الأقل؛ ويفضل أن يشتمل على اثنين من مجالات تكرار أنكيرين بنوعية ربط تجاه ألبومين المصل؛ فترة عمر وحدة clic ويفضل فترة Chad عمر وحدة متزايدة لا تقل عن 5 96 10 % % 20 % 25 % %30 35 فى 40 فك 45 % %45 %50 %60 9670 0 %80 %90« %100« %150 %200« %250« أو %250 مقارنة ببروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني مناظر يشتمل على مجال تكرار أنكيرين واحد مصمم بنوعية ارتباط تجاه ألبومين المصل على نحو مفضل» يتم تقييم النقاء و/أو التعرض و/أو نصف عمر الوحدة في ثديي؛ وبفضل أن يكون فر و/أو قرد الرياح» وعلى نحو أكثر تفضيلًا قرد الرياح. على نحو مفضل؛ عند قياس 5 التصفية و/أو التعرض و/أو نصف عمر الوحدة في Ql يتم التقييم مع مراعاة البيانات التي
تصل إلى 48 ساعة بعد الحقن. وعلى نحو أكثر Slain يتم حساب تقييم نصف العمر الطرفي للفأر من 24 ساعة إلى 48 ساعة. على نحو مفضل؛ عند قياس الإزالة؛ و/أو التعرض» و/أو نصف عمر الطرف في قرد الرياح؛ يتم التقييم مع مراعاة البيانات حتى اليوم السابع بعد الحقن. وعلى نحو أكثر Saas يتم حساب تقييم عمر النصف الطرفي لقرد الرباح من اليوم الأول إلى اليوم 5. يكون الشخص الماهر أكثر قدرة على تحديد الآثار مثل الإزالة بوساطة المستهدف واخذها بعين الاعتبار عند حساب chal عمر الوحدة. يشير مصطلح "عمر النصف للوحدة” لعقار مثل بروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني وفقًا للاختراع إلى الوقت اللازم للوصول إلى نصف تركيز البلازما للعقار المطبق على الثدييات بعد بلوغ التوازن الزائف (على سبيل المثال؛ تحسب من 24 ساعة إلى 48 ساعة في الفأر أو تحسب من يوم 1 إلى 5 أيام في قرد الرياح). لم يتم تعريف 0 نصف العمر للوحدة على أنه الوقت اللازم للتخلص من نصف جرعة الدواء الذي يتم إعطاؤه للثديي. يكون مصطلح نصف العمر للوحدة معروف جيدًا لذي المهارة في المجال. على نحو مفضل» يتم إجراء مقارنة الحرائك الدوائية بأي جرعة؛ وعلى نحو أكثر تفضيلًا في جرعة معادلة (أي نفس الجرعة بالمل جرام/كيلو جرام) أو جرعات متساوية المولار (أي نفس الجرعة بالمول/كيلو جرام)؛ وعلى نحو أكثر تفضيلًا في جرعة متساوية المولار (أي نفس الجرعة بالمول/كيلو جرام). 5 .من المفهوم من قبل الشخص الماهر في المجال أن الجرعات المكافئة و/أو متساوية المولار في الحيوانات تخضع لتغيرات جرعة تجريبية لا تقل عن 9620؛ وعلى نحو أكثر تفضيلًا 9630؛ %40 9650 9660 9670 9680؛ 90 96؛ أو 100 96. على نحو مفضل؛ يتم اختيار الجرعة المستخدمة لقياس الحرائك الدوائية من 0.001 إلى 1000 مل جرام/كيلو aba وعلى نحو أكثر تفضيلًا من 0.01 إلى 100 مل جرام/كيلو cabin وعلى نحو أكثر تفضيلًا من 0.1 إلى 50 0 مل جرام/كيلو og cabs نحو أكثر تفضيلًا من 0.5 إلى 10 مل جرام/كيلو جرام. الأمثلة المواد والطرق العامة: جميع المواد القياسية والكواشف التي تم الكشف عنها هنا معروفة لذوي المهارة في المجال؛ ومتاحة تجاريًا أو يمكن تحضيرها باستخدام تقنيات معروفة. تم شراء سلالات الخلايا من LGC / ATCC (فرنسا/الولايات المتحدة الأمريكية). كان وسط استنبات الخلايا من Invitrogen / Lubio 5 (سوسرا). ما لم يُذكر خلاف ذلك؛ يتم تنفيذ الطرق hg للبروتوكولات
(e.g.
Sambrook J., Fritsch E.F. and Maniatis T., Jia) 43 gin gall المحددة Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory المعروفة لدى الممارس في المجال. تم مسبقًا توضيح بعض النماذج (1989, New York) المستخدمة في طلبات براءات الأختراع الدولية 2012/069654 و2014/083208.
مجالات تكرار أنكيرين المصممة: قد تم توضيح طرق إنشاء مجالات تكرار أنكيرين المصممة بنوعة ربط تجاه ألبومين المصل في طلب البراءة الدولية 2012/069654. تم وصف طرق إنشاء مجالات تكرار أنكيرين المصممة بنوعية Lal تجاه (HERZ وقد تم وصف أمثلة على مجالات تكرار أنكيرين المصممة وطرق لتوليد بروتينات ربط ثنائية المظلة لطلب البراءة الدولية 8.ر. يتم وصف مجالات تكرار أنكيرين المصممة على نحو عام بالتفصيل في طلب
0 البراءة الدولية 2002/020565. مثال 1: DNA ناتج عن sage الارتباط الجيني؛ تعبير البروتين وتنقية البروتين تم إنشاء مجالات تكرار أنكيرين مصممة لتشفير DNA أو بروتينات رابطة ناتجة عن عودة الارتباط الجيني بواسطة وسيلة وراثية معروفة لذي المهارة في المجال. يتم التعبير عن البروتينات الرابطة الناتجة عن عودة الارتباط الجيني المختارة من المتواليات رقم: 21 إلى 33 لمتواليات
5 الأحماض الأمينية؛ اختياريا بالإضافة إلى المتوالية رقم: 1 في الطرف oN أو مجالات تكرار أنكيرين المصممة المختارة من المتواليات رقم: 10 إلى 20 لمجموعة متواليات الأحماض الأمينية؛ بالإضافة إلى المتوالية رقم: 1 اختياريًا على نحو إضافي عند الطرف N في السيتويلازم لإيشيرشيا كولاي باستخدام التقنيات القياسية التي تستخدم؛ على سبيل المثال؛ نظام التعبير عن pQE من 218960 (ألمانيا). في حالة وجود الأحماض الأمينية GS عند الطرف لاء فإن الوحدة
0 البنائية ل Met المشفرة على نحو إضافي بواسطة متجه التعبير تم تشذيبها بكفاءة في السيتوبلازم ل E.coli من البولي ببتيد المعبر عنه نظرًا لأن بداية Met تُتبَع بالوحدة البنائية ل Gly صغيرة (أي الحمض الأميني في الموضع 1 eed سبيل (Jaa) المتوالية رقم: 21). تم إفساد الخلايا باستخدام الضغط الفرنسي؛ وتم تنقية البروتينات لتقترب من تجانس الخلايا الخام المستخلصة عن طريق استخدام تقنيات كروماتوجرافيا قياسية معروفة للشخص في المجال.
تعرف القائمة التالية البروتينات على النحو المستخدم في الاختراع الحالي: البروتين رقم 10- :His المتوالية رقم: 10 بعلامة His (المتوالية رقم: 1) المدمجة بالطرف ل8ا. البروتين رقم 11- tHis المتوالية رقم: 11 بعلامة His (المتوالية رقم: 1) المدمجة بالطرف ل8ا. البروتين رقم 12- tHis المتوالية رقم: 12 بعلامة His (المتوالية رقم: 1) المدمجة بالطرف ل8ا. البروتين رقم 13- 5رلا: المتوالية رقم: 13 بعلامة His (المتوالية رقم: 1) المدمجة بالطرف لا. البروتين رقم 14- :His المتوالية رقم: 14 بعلامة His (المتوالية رقم: 1) المدمجة بالطرف ل8ا. البروتين رقم 15- tHis المتوالية رقم: 15 بعلامة His (المتوالية رقم: 1) المدمجة بالطرف ل8ا. البروتين رقم 16- :His المتوالية رقم: 16 بعلامة His (المتوالية رقم: 1) المدمجة بالطرف ل8ا. البروتين رقم 17- tHis المتوالية رقم: 17 بعلامة His (المتوالية رقم: 1) المدمجة بالطرف ل8ا. 0 البروتين رقم 18- :His المتوالية رقم: 18 بعلامة His (المتوالية رقم: 1) المدمجة بالطرف لا. البروتين رقم 19- :His المتوالية رقم: 19 بعلامة His (المتوالية رقم: 1) المدمجة بالطرف ل8ا. البروتين رقم 20- 18لا: المتوالية رقم: 20 بعلامة His (المتوالية رقم: 1) المدمجة بالطرف ل8ا. البروتين رقم21: المتوالية رقم: 21 البروتين رقم 21- tHis المتوالية رقم: 21 بعلامة His (المتوالية رقم: 1) المدمجة بالطرف ل8ا. 5 البروتين رقم22: المتوالية رقم: 22 البروتين رقم 22- tHis المتوالية رقم: 22 بعلامة His (المتوالية رقم: 1) المدمجة بالطرف ل8ا. البروتين رقم23: المتوالية رقم: 23 البروتين رقم 23- :His المتوالية رقم: 23 بعلامة His (المتوالية رقم: 1) المدمجة بالطرف ل8ا. البروتين رقم24: المتوالية رقم: 42
البروتين رقم 24- His المتوالية رقم: 24 بعلامة His (المتوالية رقم: 1( المدمجة بالطرف N البروتين رقم25: المتوالية رقم: 25 البروتين رقم 25- His المتوالية رقم: 25 بعلامة His (المتوالية رقم: 1) المدمجة بالطرف لا. البروتين رقم26: المتوالية رقم: 26 البروتين رقم 26- His المتوالية رقم: 26 بعلامة His (المتوالية رقم: 1) المدمجة بالطرف لا. البروتين رقم27: المتوالية رقم: 27 البروتين رقم 27- His المتوالية رقم: 27 بعلامة His (المتوالية رقم: 1) المدمجة بالطرف لا. البروتين رقم28: المتوالية رقم: 28 البروتين رقم 28- His المتوالية رقم: 28 بعلامة His (المتوالية رقم: 1) المدمجة بالطرف لا. 0 البروتين رقم29: المتوالية رقم: 29 البروتين رقم 29- His المتوالية رقم: 29 بعلامة His (المتوالية رقم: 1) المدمجة بالطرف لا. البروتين رقم30: المتوالية رقم: 30 البروتين رقم 30- His المتوالية رقم: 30 بعلامة His (المتوالية رقم: 1) المدمجة بالطرف لا. البروتين رقم 31- His المتوالية رقم: 31 (تتضمن علامة His عن الطرف ل8ا). 5 البروتين رقم32: المتوالية رقم: 32 البروتين رقم 32- His المتوالية رقم: 32 بعلامة His (المتوالية رقم: 1) المدمجة بالطرف لا. البروتين رقم33: المتوالية رقم: 33 البروتين رقم 33- His المتوالية رقم: 33 بعلامة His (المتوالية رقم: 1) المدمجة بالطرف لا.
مثال 2. إنشاء مجال تكرار أنكرين مصمم لتحسين الاستقرار بنوعة الريط تجاه ألبومين المصل (المتوالية رقم: 14). على iil) من معرفة تكرار أنكرين المصمم على نحو عام» وجدنا أن البروتين رقم 115-12 والبروتين رقم 415-13 والبروتين رقم 15- His (طلب البراءة Asal 2012/069654؛ انظر المثال 1( يتحلل عند الحضانة المطولة في PBS عند 10 مل جرام/كيلو جرام في 40 درجة مئوية؛ ويالتالي ليست مثالية للاستخدام كمكونات في مرشحات العقار. يكشف تحليل متوالية الحمض الأميني للمتوالية رقم: 13 عن وجود عدد كبير من مواقع التحلل المحتملة. قد يحدث التحلل على سبيل المثال في محيط أي من خمسة أسباراجينات (بما في ذلك؛ داي ببتيدات أسباراجين-الجليكاين) 13 من الأسبارتات؛ أو 10 جليسينات للمتوالية رقم: 13؛ بين مواقع 0 التدهور المحتملة الإضافية. تشتمل المتوالية رقم: 13 أيضًا على عددًا من مواقع الأكسدة المحتملة. يجب تحلل عدد كبير من الطفرات وبالتالي يتم تحلل طفرات التوليفة لعزل صورة متطرفة تعرض خصائص استقرار تخزين محسّنة. من المثير للدهشة؛ أننا يمكن أن نولد متغيرًا وظيفيً يُظهر Hal كبيرًا على استقرار التخزين من خلال إحداث طفرة للموضع 80 فقط للمتوالية رقم: 3. عند إحداث طفرة للأسبارتات في الموضع 80 للمتوالية رقم: 13 إلى الجلوتامات؛ يتم إنشاء 5 مجال تكرار أنكيرين مصمم وظيفيًا مع نوعية Jal) تجاه ألبومين المصل المناظر للمتوالية رقم: 4 مما يدل على تحسن ملحوظ في استقرار التخزين (المثال 3؛ الشكل 2). أوضح البروتين رقم Jie His -4 البروتين رقم 13 - (His أظهر ألفة ارتباط منخفضة بحجم النانو مولار (ثابت التحلل (Kd) dissociation constant أقل من 100 نانو مولار) لألبومين مصل فأر وقرد الرياح عند الرقم الهيدروجيني 7.4 في PBS (قياس الرنين البلازمي السطحى ProteOn وففًا للمُصنع (بيو راد)). من المثير للدهشة أن البروتين رقم 14- (His أظهر أيضًا نقطة وسط محسنة للتسخين الحراري مقارنةٌ بالبروتين رقم 115-13 كما هو محدد بواسطة كشف حراري باستخدام تقنيات معروفة (Niesen, F.H., Berglund, H., Vedadi, M., Nature Protein ¢Protocols 2, 2212-2221, 2007 رقم Protein ¢]13-His: Tm = 86°C رقم .pH 6.0) ¢14-His, Tm = 89.5°C المثال 3. تحسين استقرار تخزين البروتين عند استخدام المتوالية رقم: 14.
تم تحضير البروتين رقم 115-13 والبروتين رقم 115-14 والبروتين رقم 115-15 كما هو موضح في المثال 1؛ وتركزت العينات على 10 مل جرام/مل لتر في PBS تم اتباع البروتين رقم 115-14 والبروتين رقم 1115-15 حيث تم Legian لمدة شهر واحد عند -80 درجة مئوية أو عند 40 درجة متوية في قوارير زجاجية؛ | بالتحليل على SDS بنسبة 9615 من PAGE بينما أظهر البروتين رقم 14- His والبروتين رقم 15- GSS.
Bl His عند التخزين عند -80 درجة
مثوية» أظهر البروتين رقم 14- His انخفاضًا كبيرًا في منتجات التحلل بنسبة أكبر من 9650 jae بالبروتين رقم 15- His على SDS بنسبة 9615 من PAGE بعد تخزين شهر daly عند 0 درجة digi وبالمثل؛ عند تخزينه في 4 درجات highs 25 درجة مئوية؛ 40 درجة مئوية؛ و60 درجة مئوية لمدة أسبوع واحد عند 10 مل جرام/مل لتر في (PBS أظهر البروتين رقم 14-
His 0 كميات مخفضة على نحو كبير من منتجات التحلل مقارنة بالبروتين رقم 115-13!. على نحو محدد؛ أظهر البروتين رقم 115-14 انخفاض منتجات التحلل بأكثر من 9650 مقارنة بالبروتين رقم 13- His على SDS بنسة 9615 من PAGE على حد سواء عند تخزينه عند 40 درجة مئوية أو 60 درجة مئوية؛ على التوالي (الشكل 2). توضح هذه النتائج أن البروتين رقم 14- His قد حسن من استقرار التخزين مقارنة بالبروتين رقم 13- His والبروتين رقم 15- His وبالمثل؛
5 عند مقارنة استقرار التخزين للبروتين رقم 14- His والبروتين رقم 119-13 ؛ والبروتين رقم 14- (His والبروتين رقم 115-15 (انظر مثال 1)؛ عن طريق تحضين البروتينات عند 10 مل جرام/مل لتر في 085 في قارورة زجاجية لمدة شهر واحد عند 40 درجة مثوية؛ ينخفض البروتين رقم 15- (His والبروتين رقم 13- (His والبروتين رقم 14- His بنسبة أكبر من 9630 في منتجات التحلل مقارنةٌ بالبروتين رقم 14- His
0 يتم كذلك ملاحظة تحسن في استقرار التخزين؛ عند اختبار استقرار التخزين في البروتين رقم 21 والبروتين رقم 22 (البروتينات الرابطة الناتجة عن عودة الارتباط الجيني التي تتكون من متوالية الأحماض الأمينية المناظرة للمتواليات رقم: 21 و22 على التوالي). يتم تحضير البروتين رقم 21 والبروتين رقم 22 كما هو موضح في المثال 1؛ ويتم جعل العينات 10 مل جرام/مل لتر في 5 وتخزينها لمدة شهر واحد عند -80 درجة مئوية في أو عند 40 درجة مئوية في قوارير
5 زجاجية؛ تليها تحليل على كروماتوجراف استبعاد الحجم القياسي. بينما يوضح البروتين رقم 21
والبروتين رقم 22 ملفات تعريف شطف مكافئة عند التخزين عند -80 درجة cia يوضح البروتين رقم 21 أنواعًا أحادية أكثر بكثير مقارنةٌ بالبروتين رقم 22 عند التخزين عند 40 درجة مثوية. يدل ذلك على أن تضمن المتوالية رقم: 21 الموجودة في البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني تكون أكثر ملاءمة فيما يتعلق باستقرار التخزين أفضل من تضمن المتوالية رقم: 22. وبالمثل» يعرض البروتين رقم 21 كميات أقل من منتجات التحلل مقارنة بالبروتين رقم 22 عند التحلل بواسطة SDS-PAGE بعد التخزين لمدة شهر واحد عند 40 درجة مئوية في قوارير زجاجية في PBS عند 10 مل جرام/مل لتر مما يؤكد على استقرار تخزين على نحو Sel لبروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني يشتمل على المتوالية رقم: 21 بالمقارنة مع بروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني يشتمل على المتوالية رقم: 22. بدوره؛ يشير هذا إلى أن 0 تضمن مجالات تكرار أنكيرين مصممة بنوعية ربط تجاه ألبومين المصل المكون من المتوالية رقم: 4 الموجود في البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني يكون أكثر ملاءمة فيما يتعلق باستقرار التخزين من تضمن مجالات تكرار أنكيرين مصممة بنوعية الربط تجاه ألبومين المصل الذي يتكون من المتوالية رقم: 13 الحالية. المثال 4: توليد مرشح عقار 5 .تم الكشف عن أمثلة لمجالات تكرار أنكيرين المصممة باستخدام نوعية الريط تجاه HERZ في وقت سابق طلب البراءة الدولية 2014/083208)؛ طلب البراءة الدولي 2014/060365؛ Steiner, D., Forrer, P. and Pliickthun, A., J.
Mol.
Biol. 382, 1211-1227, Zahnd, C., Pecorari, F., Straumann, N., Wyler, E. and Plickthun, ¢2008 8A.
J.
Biol.
Chem. 281(46), 35167-35175, 2006) طلبي البراءة الدوليين أرقام 0 2014/083208 5 ¢2014/060365 تم الجمع بين مجالات تكرار أنكيرين المصممة لنوعية ربط HER2 تجاه المجالات المختلفة؛ مما أدى إلى بروتينات ربط ثنائية نظيرة تظهر تثبيط نمو خلايا الورم. يكون البروتين الرابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني الذي يتكون من المتوالية رقم: 21 عبارة عن مرشح عقار يشتمل على اثنين من مجالات تكرار أنكيرين المصممة بنوعية ارتباط تجاه HERZ 5 (لمتواليات رقم: 16 و17؛ على التوالي) وكذلك اثنين من مجالات تكرار أنكيرين مصممة
باستخدام نوعية ارتباط تجاه ألبومين المصل (كل متوالية رقم: 14)؛ مرتبطة بروابط الببتيد (كل متوالية رقم: 9) (انظر الشكل 1). تم تحديد هذا البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني بواسطة إجراء معقد يتضمن هندسة البروتين وخطوات التحسين من بين أمور أخرى. في الخطوة الأولى» تم إنشاء المئات من توليفات من مجالات تكرار أنكيرين مصممة باستخدام نوعية ارتباط تجاه HER2 كبروتين ربط ثنائي المظلة عن طريق الاستنساخ؛ التعبير والتنقية (انظر المثال 1).
تم بعد ذلك فحص بروتينات الريط ثنائية المظلة لألفة ارتباط HERZ وكذلك الفاعلية الخلوية وتثبيط تكاثر الخلية كما هو موصوف في طلب البراءة الدولي 2014/083208 وكما هو موضح أدناه. يتم توفير النتائج التوضيحية لبروتينات الريط ثنائية المظلة الناتجة عن هذا الجهد في المثالين 5 و6. الأهم من ذلك يجب أن يكون الجزيء ثنائي المظلة؛ لأن وجود مجال تكرار
0 أنكرين واحد مصمم باستخدام نوعية الارتباط تجاه HERZ يؤدي إلى جزيئات بدون احتمالية تثبيط خلوي. يتم أيضًا التحويل الوراثي للبروتينات الرابطة الناتجة عن عودة الارتباط الجيني. تضمنت هذه الخطوة (من بين أمور أخرى) الهندسة الدوائية عن طريق إضافة مجالات تكرار أنكيرين مصممة باستخدام نوعية الربط تجاه ألبومين المصل في أشكال مختلفة (أي؛ إضافة أرقام مختلفة من مجالات تكرار أنكيرين مصممة بواسطة ألفة Jal) تجاه ألبومين المصل في المواقع المختلفة
5 في الجزيء) لبروتينات الريط ثنائية المظلة؛ وعن طريق اختبار روابط متعددة الببتيد. تم اختبار هذه البروتينات بفعالية في جسم الكائن الحي (المثال التوضيحي 7)» الحرائك الدوائية في الفأر (مثال توضيحي 8)» والحرائك الدوائية في قرد الرياح (مثال توضيحي 9) وكذلك من أجل الفعالية الخلوية. تضمن تحسين Jay البولي ببتيد polypeptide linker خطوة لاختبار تأثير الرابط على ملف تعريف الحركية الدوائية (المثال التوضيحي 10). تم تقييم تحسين التحويل الوراثي
0 الدوائي عن طريق القياسات الدوائية (المثال التوضيحي 11) وقياسات الفاعلية (المثال التوضيحي Ele (12 على ذلك؛ تم اختبار مرشحات العقار المختلفة لمستويات التعبير الناتجة عن عودة الارتباط الجيني لها في coli .5 (المثال 13). يكون البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني الذي يتكون من المتوالية رقم: 21 عبارة عن بروتين ناتج عن هذا الجهدء وهو Ble عن مرشح عقار للاستخدام في الرجل.
— 7 5 — البروتين رقم 31؛ بروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني يتكون من المتوالية رقم: 31 يتوافق مع البروتين الذي يتكون من البروتين رقم 21 والأحماض الأمينية للمتوالية رقم: 1 عند الطرف N مثال 5: ألفة الارتباط العالية ل HER2 بواسطة البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني الذي يشتمل على المتوالية رقم: 21.
تم التعبير عن البروتين رقم 21 وتنقيته كما هو موضح في المثال 1. تم ألفة ارتباطه ب 152 بواسطة صدى البلازمون السطحي كما هو موضح في طلب البراءة الدولي 2014/083208. تم تحديد ثابت تحلل قدره 27 بيكو مولار من خلال الملائمة العالمية لقيم وحدة الرنين التي تم الحصول عليها بتركيزات مختلفة؛ حيث تكون عبارة عن طريقة معروفة جيدًا للممارس في المجال.
0 في المقارنة؛ فإن البروتين رقم 1115-23 (انظر المثال 1)؛ الذي يتضمن توليفة أخرى من مجالات تكرار أنكيرين المصممة ذات نوعية الربط تجاه HERZ الذي أظهر ثابت تحلل قدره 64 بيكو مولار. وبالمثل» أظهر توليفة من مجالات تكرار أنكيرين المصممة المناظرة للمتوالية رقم: 16 و17 ثابت تحلل أفضل من غالبية التوليفات التي تم إنشاؤها بناءًة على مجالات تكرار أنكيرين المصممة بنوعية الريط تجاه HER? المعروفة من طلب البراءة الدولي 2014/083208.
5 أظهرت قياسات الرنين البلازموني السطحي كذلك أن البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني الذي يتكون من المتوالية رقم: 21 لا يتفاعل مع المجالات خارج الخلية ل HER3 أو .EGFR أظهرت قياسات رئين البلازمون السطحى كذلك أن مجالات تكرار أنكيرين المصممة A تتكون من المتواليات رقم 16 أو 17 (يشتمل كل منها على نحو إضافي على المتوالية رقم: 1 في
0 الطرف (N تظهر ثابت تحلل قدره 9 بيكو مولار و152 بيكو مولارء على التوالي؛ لريط HERZ أظهرت تجارب رنين البلازمون البلازمون السطحي كذلك أن البروتين رقم 21 يمكن أن يريط HER2 البشري وألبومين المصل البشري في وقت واحد. وأظهرت تجارب رنين البلازمون السطحي كذلك أن البروتين رقم 21 عند 100 نانو متر يمكنه ربط ألبومين المصل البشري بثابت التحلل (Kd) dissociation constant قدره 21 نانو متر.
JU 6: الفاعلية الخلوية العالية وحث موت الخلايا المبرمج للبروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني الذي يشتمل على المتوالية رقم: 21. تم التعبير عن البروتين رقم 115-21 والبروتين رقم His=23 وتنقيتهما كما هو موضح في المثال 1. تم تحديد آثار البروتينات الرابطة الناتجة عن عودة الارتباط الجيني على تكاثر الخلية 87474
عن طريق قياس تخليق DNA باستخدام تعليم BrdU (BrdU, Cell proliferating ELISA, .Roche) باختصار؛ تم استنبات 10000 خلية 81474 لكل بئر في طبق به 96 عين في وسط كامل مقداره 100ميكرو لتر واحتضانها لمدة 24 ساعة. تمت إضافة البروتينات الرابطة
الناتجة عن عودة الارتباط الجيني أو عناصر التحكم لمدة 72 ساعة إضافية. تمت إضافة BrdU
لوضع العلامات على الخلايا لمدة 24 ساعة الماضية. تم الكشف عن الخلايا المُعلّمَة (المتكاثرة)
Ey 0 لبروتوكول الصناعات. تم تحليل البيانات باستخدام برنامج المنشور «GraphPad وضع علامة ]€[ على المحور السيني مقابل 010450-602 نانو متر على المحور الصادي. تم تركيب البيانات باستخدام ملاءمة الانحدار غير الخطي -- (log(antagonist) vs. response Variable slope (four parameters) الذي يشتق قيم 1050. يتم توضيح النتائج في الشكل 3. يقوم البروتين رقم 21- His بتثبيط تكاثر خلايا 81474 بقيمة ١050 واضحة تبلغ 1.5 نانو
5 مولار. لوحظ وجود IC50 أعلى بنسبة 9660 (أي أسوأ) من 2.4 نانو مولار بالنسبة للبروتين رقم (His=23 مما يشير إلى أن وجود المتواليات رقم 16 و17 في البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني يكون أكثر ملاءمة من وجود المتواليات رقم 17 و18. وبالمثل؛ قامت مجموعة مجالات تكرار أنكيرين المصممة المناظرة للمتواليات رقم: 16 و17 بتثبيط خلايا 871474 ذات قيمة 1050 ظاهرة أقل من تلك التي لوحظت في غالبية التوليفات التي تم إنشاؤها بناءً على
0 مجالات تكرار أنكيرين المصممة مع نوعية الريط تجاه HERZ المعروفة من طلب البراءة الدولي
2014/083208. قام البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني المكون من المتوالية رقم: 21 (البروتين رقم 21( بعرض مزيدًا من تثبيط التكاثر القوي على مجموعة من السلالات الخلوية السرطانية التي تتضمن السلالات الخلوية (NCI-N87 (SKOV-3 (SKBR-3 75-30- كل 1661419 5 أو .MDA-MB175
— 9 5 — 7 باستخدام أنظمة .Caspase 3/7-Glo (Promega, Switzerland) لفترة وجيزة؛ تم استنبات 10000 من خلايا 81474 لكل عين في الطبق ذي 96 عين في وسط كامل مقداره 100 ميكرو لتر واحتضاتها لمدة 24 ساعة. تم إضافة البروتين رقم 21 والمعايير لمدة 24 ساعة إضافية. تمت Caspase Glo (ails dil) وفقًا لبروتوكول عمليات التصنيع لمدة ساعة واحدة. تم مراقبة التنشيط 3/7 Caspase عن طريق قياس نشاط لوسيفيراز. بدلا من ذلك تم تحديد الحث على موت الخلايا المبرمج باستخدام نظام Cell Death Detection (Roche, Switzerland) 5لا اط5اا. تم إجراء الاختبار وفقا لبروتوكول عمليات التصنيع. كان عدد الخلايا وأوقات التحضين مشابهة لقراءات Glo ©085085. قد تم تحليل البيانات 0 باستخدام برنامج المنشور «GraphPad وتم تعيين التركيز على المحور السيني مقابل 90 نانومتر أو وحدات الضوء النسبية (لاا؛ تقاس على قارئ (Tecan ١11-1000 على المحور الصادي. تم تركيب البيانات باستخدام ملاءمة الانحدار غير الخطي Ju. (log(agonist) vs. response - Variable slope (four parameters)) توضيح النتائج في الشكل 7. بالنسبة للبروتين رقم 21 تم ملاحظة وجود ECS0 مقداره 2.4 نانو مولار. 5 .موت الخلايا المبرمج يظهر بالمثل فعالية عالية في إحداث موت الخلايا المبرمج لسلالات الخلايا (NCI-N87 SKOV-3 (SKBR-3 24-75-30 1061419 أو -MDA-MB175 فى المقابل» لا تحث الأجسام المضادة تراستوزوماب؛ برتوزوماب؛ أو خليط منهما على موت الخلايا المبرمج في خلايا 81474 (الشكل 7). الأهم من ذلك؛ توضح هذه الاختبارات» أن البروتين رقم 21؛ حيث تجاور المتوالية رقم: 32 المتوالية رقم : 14 » يعرض قوة خلوية عالية؛ مماثلة عند استخدام المتوالية رقم: 32 وحدها . المثال 7: فعالية عالية من البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني الذي يتضمن المتوالية رقم: 21 في نماذج طعم ورم فأر. تم التعبير عن البروتين رقم His-21 البروتين رقم «His-23 البروتين رقم His-24 البروتين رقم 15-5 وتنقيته كما هو موضح في المثال 1 في إحدى الدراسات ثم مقارنة البروتين رقم 5 115-21 بالتراستوزوماب و085. يتم توضيح النتائج في الشكل 14 تم إجراء نماذج فأر منزوع
الشعر مصاب بسرطان الثدي من نوع 871474 على نحو أساسي على النحو التالي باستخدام إجراءات معروفة لذي المهارة في المجال: تم استنبات WA سرطان الثدي البشري 87474 sale] تعليقها؛ وتم حقن LIA 710*2 من الخلايا في 200 ميكرو لتر من وسط 1640 RPMI الذي يحتوي على مادة هلامية بنسبة 50:50 Biosciences) 800) لكل فأر في الجهة اليمنى من الفتران العارية © / 0ل88. في أحجام الورم التي تقد بحوالي 300-200 مل متر3؛ تم اختيار الفتئرات على نحو عشوائي في مجموعات من 8 حيوانات؛ Tug علاج الورم عن طريق إعطاء 5 تراستوزوماب )10 مل جرام/كيلو جرام)»؛ تراستوزوماب (10 مل جرام/كيلو جرام) وبرتوزوماب )10 مل جرام/كيلو «(aha أو البروتين رقم 21- His (35 مل جرام/كيلو (pha لمدة 7 جرعات مع فاصل زمني لمدة 3 أيام (23077 ). تم قياس أحجام الورم لمدة 32 يومًا. يعتبر 0 البروتين رقم 115-21 JST فاعلية في تثبيط نمو الورم من ترانسوزوماب. في دراسة مماثلة باستخدام خلايا 81474 (الإعداد والإجراء المطابق؛ كل جرعات 35 مل جرام/كيلو (pl تم مقارنة البروتين رقم 115-21 بالبروتين رقم 1115-23 والبروتين رقم 24- (His والبروتين رقم (HiS—25 تظهر النتائج في اليوم 18 بعد العلاج في الشكل لجب. الأهم من ذلك؛ أن البروتين رقم 1119-21 يكون أكثر فاعلية في كبح الأورام من البروتين رقم 23-البروتين؛ 5 البروتين رقم 24-البروتين؛ أو البروتين رقم 25-البروتين. Ble على ذلك؛ تم التعبير عن البروتين رقم 21 وتنقيته كما هو موضح في المثال 1. تم استخدام (PBS البروتين رقم 21 )60 مل جرام/كيلو جرام)» تراستوزوماب )10 مل جرام/كيلو «(ala بيرتوزوماب (10 مل جرام/كيلو جرام) بالإضافة إلى توليفة من تراستوزوماب وبيرتوزوماب (10 مل جرام/كيلو جرام لكل منهما) في نموذج فأر بدون شعر مصاب بورم سرطاني معدي 0 مشتق من anal حيث يكون ذلك Bg jee لذي المهارة في المجال. تم حقن جميع المجموعات كل ثلاثة أيام لمدة 6 مرات. لفترة وجيزة؛ تم الحصول على شظايا الورم الفئران بدون شعر في المرور التسلسلي في الفتران العارية. بعد الإزالة من الفئران المانحة؛ تم قطع الأورام إلى شظايا (قطرها 5-4 مل متر) للزرع تحت الجلد. تم تقسيم OH عشوائيًا إلى مجموعات Lovie وصلت الأورام حجم ما يقرب من 100 = 120 مل متر3. تم تحديد يوم التقسيم العشوائي ويدء العلاج 5 باعتباره اليوم صفر في كل تجرية. تمت مراقبة نمو الورم عن طريق القياس ثنائي الأبعاد باستخدام
الفرجار في يوم التقسيم العشوائي ثم مرتين أسبوعيًا. تم حساب الكميات النسبية للأورام الفردية RTVS) الفردية) لليوم X من خلال قسمة حجم الورم الفردي على اليوم X (TX) على الحجم الفردي للورم نفسه في اليوم صفر (TO) مضروبًا في 76100. تم حساب تثبيط الورم ليوم معين T/C) بالنسبة المثوية) من نسبة قيم RTV المتوسطة للاختبار مقابل مجموعات التحكم dig pine بنسبة 96100. يوضح الشكل 4 ج فعالية البروتين رقم 21 في PDX model GXA3039 لسرطان المعدة مقارنة بترانسوزوماب وتوليفة من ترانسوزومبا ويرتوزوماب. يُظهر البروتين رقم 21 Unni قويًّا cash) sal على غرار تركيبة تراستوزوماب وبرتوزوماب؛ في حين أن التراستوزوماب وحده أقل فعالية. يوضح الشكل جد تجربة ثانية في نفس النموذج لمقارنة البروتين رقم 21 بالتراستوزوماب؛ بيرتوزوماب؛ وتوليفة من التراستوزوماب والبرتوزوماب. يُظهر البروتين رقم 21 0 تثبيطًا sal Gd الورم» على غرار توليفة من تراستوزوماب وبرتوزوماب. يكون الترنسوزوماب وحده والبرتوزوماب وحده أقل فعالية بكثير. هذا يشير إلى أن نموذج الورم قد اكتسب مقاومة ضد الترانسوزوماب مع مرور الوقت. يوحي ذلك بدوره أن البروتين رقم 21 فعال حتى في السرطان المقاوم للتراستوزوماب. في تجرية مماثلة؛ تم اختبار البروتين رقم 21 Load في نموذج فأر PDX المصاب بسرطان 5 المعدة «(GXA28] المعروف جيدًا لذي المهارة في المجال؛ مقارنة بمستوى الرعاية لاباتينيب (الشكل 4ه). باختصار» تم shal عملية زرع ورم ومراقبة نمو ورم كما هو موضح أعلاه. تم حقن جرتومة لاباتنيب بمعدل 100 مل faba كيلو جرام/ يوم لمدة 21 يومًا يوميّا؛ والبروتين رقم 21 بمعدل 40 مل جرام/ كيلو جرام/ يوم لمدة 6 مرات على سبيل المثال. توضح هذه التجارب في هذا المثال فائدة البروتينات المشتملة على المتوالية رقم: 21 لاستخدامها 0 كدواء في علاج المرض. المثال 8: الخواص الدوائية المواتية لبروتين رابط ناتج عن sage الارتباط الجيني يشتمل على المتوالية رقم: 21 في الفأر تكون القياسات الموضحة في هذا المثال هي نتيجة جهد هندسي لنصف العمر كما هو موضح في المثال 11. تم التعبير عن البروتين رقم 21- His والبروتين رقم 23- His وتنقيته كما هو
موضح في المثال 1. تم تقييم خصائص الحرائك الدوائية في الفأر كما هو موضح في مكان آخر (Zahnd, C., Kawe, M., Stumpp, M.T., de Pasquale, C., Tamaskovic, R., ب Nagy-Davidescu, G., Dreier, B., Schibli, R., Binz, H.K., Waibel, Pliickthun, A., Cancer Res. 70, 1595-1605, 2010) يتم توضيح النتائج في الشكل 5. يعرض البروتين رقم 21- 115 اأن نصف عمر طرفي 30.4 ساعة مع بقاء 9019.5 من المعرف بعد 48 ساعة. بالمقارنة مع البروتين رقم 23- (His فإنه يعرض نصف عمر طرفي 7 ساعة مع بقاء 9066.5 معرف بعد 48 ساعة. عند وجود المتوالية رقم: 16 في البروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني؛ فإن ذلك يبدو أنه أكثر ملاءمة من وجود المتوالية رقم: 8 حاضر. 0 المثال 9: الخواص الحركية الدوائية المفضلة للبروتين الرابط الناتج عن عودة الارتباط الجيني الذي يشتمل على المتوالية رقم: 21 في قردٍ الرياح. إن القياسات الموضحة في هذا المثال هي نتيجة جهد هندسة نصف العمر كما هو موضح في المثال 11. تم التعبير عن البروتين رقم (HiS=21 والبروتين رقم cHiS=23 والبروتين رقم 24- His وتنقيته كما هو موضح في المثال 1. تم تقييم الخصائص الحركية الدوائية للبروتينات في قرد 5 الرباح. تم إعطاء البروتينات عن طريق الحقن في الوريد لمدة 30 دقيقة بجرعة مستهدفة مقدارها 1 مل جرام/كيل جرام إلى قرد الرباح. تم جمع عينات الدم قبل الجرعة ومرة أخرى في نقاط زمنية محددة؛ على سبيل المثال 5 دقائتق؛ 10 دقائق» 0.5 ساعة؛ 1 ساعة؛ ساعتانء 4 ساعات؛ 8 ساعات» 12 ساعة»ء 24 ساعة؛ء 48 ساعة؛ 72 ساعة؛ 96 ساعات و120 ساعة و144 ساعة و168 ساعة و192 ساعة و216 ساعة و240 ساعة بعد التسربب (أي بعد الحقن). تم السماح 0 لعينات الدم بالوقوف عند درجة حرارة الغرفة وتم طردها مركزيًا لتوليد مصل pall يليها التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مثوية في انتظار التحليلات. تم تحديد المتغيرات الحركية الدوائية باستخدام الإجراءات المعروفة لذي المهارة في المجال. تم تحديد تركيزات المصل البروتينات بواسطة ELISA باستخدام الجسم المضاد لمجال تكرار أنكيرين الأرنبي أحادي النسيلة المصمم كإمساك بالكاشف والجسم المضاد لمجال تكرار أنكيرين الفأري أحادي النسيلة المصمم كإمساك 5 بالكاشف»؛ واستخدام منحنى قياسي. تم تحديد المتغيرات الحركية الدوائية باستخدام برنامج قياسي
مثل Phoenix WinNonLin (Certara, Princeton, USA) or GraphPadPrism (GraphPad Software, La Jolla, USA) والتحليلات القياسية Jie التحليلات غير المقسمة. يتم عرض نتائج البروتين رقم 21- His والبروتين رقم 23- His في الشكل 6. يعرض البروتين رقم 21- His نصف jee طرفي 47 ساعة؛ في حين يوضح البروتين رقم 23- His نصف عمر طرفي قدره 35 ساعة؛ ويعرض البروتين رقم 24- His نصف عمر طرفي 45 ساعة.
تظهر البروتينات أيضًا تطهيرًا [aS بوساطة الهدف بمجرد انخفاض التركيز إلى أقل من 100 نانو مولار. تكون التصفية بوساطة المستهدف معروفة للشخص الماهر في المجال ومعروفة على سبيل المثال من الأجسام المضادة التي تستهدف HERZ وبالمثل؛ تم التعبير عن البروتين رقم 21- His وتنقيته كما هو موضح في المثال 1. تم تقييم
0 الخواص الحركية الدوائية في قرد الرياح كما هو موصوف أعلاه عند 1 مل جرام/كيلو جرام و5 مل جرام/كيلو جرام و10 مل جرام/كيلو جرام. تم تقييم المتغيرات الحركية الدوائية على النحو الموصوف أعلاه؛ وتظهر النتائج في الشكل 6. تم ملاحظة زيادة تعتمد على الجرعة في نصف العمر الطرفي من 47 ساعة عند 1 مل جرام/كيلو aha إلى 100 ساعة بمعدل 5 مل جرام/كيلو جرام إلى أكثر من 100 ساعة عند 10 مل جرام/كيلو جرام. تم ملاحظة الإزالة بوساطة
5 المستهدف بمجرد انخفاض_التركيز إلى أقل من 100 نانو مولار. تم ملاحظة نتائج مماثلة عند اختبار البروتين رقم 21 (المعبر عنه والمطهر كما هو موضح في المثال 1). يتم تقييم الخواص الحركية الدوائية للبروتينات في قرد الرياح كما هو موصوف أعلاه عند 1 مل جرام/كيلو جرام و10 مل جرام/كيلو جرام و100 مل جرام/كيلو جرام. يتم تقييم المتغيرات الحركية الدوائية كما هو موضح أعلاه. تم ملاحظة زيادة تعتمد على الجرعة لنصف
0 العمر الطرفي. بالنسبة للبروتين رقم 21؛ تم ملاحظة نصف jee طرفي قدره 109.5 ساعة أو 6 ساعة بجرعة 100 مل جرام/كيلو جرام في قرد الرياح. المثال 10: تحسين خصائص الدواء عن طريق اختيار روابط بولي ببتيد. تكون روابط البولي ببتيد polypeptide linkers التي تربط مجالات البروتين معروفة لذي المهارة في المجال. تكون روابط Gly—Ser—rich معروفة من شظايا الجسم المضاد ل FV أحادي
السلسلة؛ حيث أثبتوا أنها الأنسب لريط سلسلتي بولي ببتيد (FV من المثير للدهشة؛ أننا نجد أن Gly-Ser—rich Lu, لها تأثير إيجابي على الخواص الحركية الدوائية لبروتين رابط ناتج عن sage الارتباط الجيني يشتمل على اثنين من مجالات تكرار أنكيرين مصممة بنوعية الريط تجاه HER2 واثنين من مجالات تكرار أنكيرين المصممة باستخدام نوعية dal تجاه مصل الألبومين مقارنة برابط 7-5803-00ا6. تم التعبير عن البروتين رقم 115-26 والبروتين رقم 27- له وتنقيته كما هو موضح في المثال 1. تم إجراء التحليلات الدوائية في الفأر كما هو موضح في المثال 8. كان البروتين رقم 115-27" لديه 967 من الجرعة المحقونة المتبقية بعد 48 ساعة من الحقن في الوريد؛ بينما يتضمن البروتين رقم 26- His جرعة حقن 965.3 متبقية. وبالمثل؛ عرض البروتين رقم 27- His نصف عمر طرفي أطول من بروتين رقم 26- His 0 المثال 11: الخصائص الحركية الدوائية الهندسية هناك العديد من الخيارات المعروفة في الهندسة الحركية الدوائية التي تشتمل على «PEGylation امتداد البولي ببتيد؛ اندماج (FC اندماج مصل الألبومين؛ والارتباط بألبومين المصل؛ من بين أشياء أخرى (Kontermann, R (Ed.) “Therapeutic proteins: strategies to modulate their plasma half-lives”, Wiley-VCH Verlag GmbH, 2012, ISBN 5 (978-3-527-32849-9. عند البدء من؛ على سبيل المثال؛ توليفة من مجالات تكرار أنكيرين المصممة بواسطة نوعية ربط تجاه HERZ التي تتضمن المتوالية رقم 16 و17؛ يوجد هناك المئات من المتغيرات المحتملة لمرشح الدواء (اختيار هندسة تعديل الحركة الدوائية؛ واختيار رابط بولي ببتيد (مثل المتوالية رقم: 2 إلى 9 من بين أشياء أخرى كثيرة )» من بين جوانب أخرى). لقد وجدنا أن استخدام اثنين من مجالات تكرار الأنكيرين المصممة باستخدام نوعية الريط تجاه 0 ألبومين المصل تتكون من المتوالية رقم: 14 (انظر المثالين 2 و3)؛ وباستخدام روابط بولي ببتيد 000-10-0 (المتوالية رقم: 9)؛ مما ينتج عنه المتوالية رقم : 21؛ يتم تحقيق خصائص الحركية الدوائية Ball ويكون لها مزايا واضحة على الأشكال الأخرى التي تم اختبارها. يتم عرض تتائج تأثير اختيار رابط بولي ببتيد على سبيل المثال في مثال 10. تكشف المقارنة بين ملفات تعريف الحركية الدوائية ll في البروتين رقم 29- (His والبروتين رقم 30- His على 5 نحو مدهش عن وجود امتلاك اثنين من مجالات تكرار أنكيرين المصممة باستخدام نوعية ارتباط
تجاه ألبومين المصل مقارنة ببروتين تكرار أنكيرين المصمم فقط باستخدام نوعية الريط بألبومين المصل (انظر الشكل o5 حيث يشير المرجع في مجال ربط الألبومين إلى أن وجود اثنين من مجالات ربط الألبومين الموجودة في الجزيء لا تؤدي إلى أي فائدة على الخصائص الحركية الدوائية بالمقارنة مع وجود مجال ربط ألبومين واحد فقط (Hopp et al., loc. cit.) وبالمثل؛
عند مقارنة البروتين رقم 21 (بروتينات رابطة ناتجة عن عودة الارتباط الجيني مكونة من المتواليات رقم 21) بمتغير بروتين رقم 21؛ حيث يكون مجال تكرار الأنكيرين ankyrin المصمم للطرف © بنوعية ربط تجاه ألبومين المصل مفقودًا (الأحماض الأمينية 1 إلى 422 من المتوالية رقم: 21؛ مما نتج عنه البروتين رقم 33)؛ يعرض البروتين رقم 21 خصائص دوائية محسّنة على نحو ملحوظ» على نحو محدد عمر نصفي طرفي أطول. تدل مقارنة ملف الحركية الدوائية لقرد
0 الرباح للبروتين رقم 21 بالبروتين رقم 28 PEGylated (الذي يشتمل على نفس مجالات تكرار الأنكيرين المصممة بنوعية ربط تجاه HERZ (المتواليات رقم 16 و17)؛ لكن البروتين رقم 28 يشتمل على 40 كيلو دالتون من بالبولي إيثيلين جليكول Ya polyethylene—glycol من اثنين من مجالات تكرار الأنكيرين المصممة بنوعية ربط تجاه ألبومين المصل) بجرعات 5 مل جرام/كيلو جرام؛ على أن البروتين الذي يشتمل على اثنين من مجالات تكرار أنكيرين المصممة
5 بنوعية ربط تجاه ألبومين المصل يعرض خصائص حركية دوائية محسنة على نحو ملحوظ. كما هو موضح في المثال 9 تكشف مقارنة الملفات الحركية الدوائية للبروتين رقم 21- His والبروتين رقم 24- His أنها أكثر ملاءمة لوجود اثنين من مجالات تكرار أنكيرين المصممة بنوعية ربط تجاه ألبومين المصل المرافق للمتواليات رقم 16 و17 بدلاً من جعلهم على حد سواء على الطرف لا(انظر الشكل 6).
0 بالنسبة للدراسات في هذا المثال» تم تحضير البروتين رقم (HiS=21 والبروتين رقم (His=24 والبروتين رقم 115-28 والبروتين رقم 115-29 والبروتين رقم 115-30 وفقًا للمثال 1. يكون البروتين رقم 115-28 عبارة على نحو إضافي عن PEGylated حيث تستخد شطر بالبولي إيثيلين جليكول polyethylene—glycol مقداره 40 كيلو دالتون NOF Sunbright GL2-) (400MA عن طريق اقتران ماليميد لشق بالبولي إيثيلين جليكول polyethylene—glycol على
5 سيستين الطرف الحر C للبروتين رقم 28- (His يتبعه تنقية التجانس باستخدام طرق تنقية قياسية
وإجراءات معروفة جيدًا لذي المهارة في المجال. تم إجراء تحاليل الحركية الدوائية في al أو 28 الرياح كما هو موضح في المثالين 8 و9. المثال 12: بروتين رابط ناتج عن عودة الارتباط الجيني يشتمل على المتوالية رقم: 21 يوضح إمكانية أفضل الجسم الحي Elie برقم بروتين رابط ناتج عن sage الارتباط الجيني يشتمل على المتوالية رقم: 24 تم التعبير عن البروتين رقم 115-21 والبروتين رقم 115-24 وتنقيتهما كما هو موضح في المثال 1. تم إجراء تجارب على الفثران منزوعة الشعر كم هو موضح في المثال 7. وتظهر النتائج في الشكل 4 ب. بعد 32 Lag من العلاج؛ يعرض بروتين رقم 21- His تثبيط ورم أفضل بكثير من بروتين رقم 24- (His يشير هذا إلى أن امتلاك مجالات تكرار أنكيرين مصممة باستخدام نوعية 0 ربط تجاه ألبومين المصل؛ حيث تكون مجالات تكرار أنكيرين المصممة باستخدام نوعية الريط تجاه WS) HERD هو موجود في المتوالية رقم:21) ST ملاءمة من وجود مجالات تكرار أنكيرين المصممة بنوعية الربط تجاه ألبومين المصل serum albumin للطرف لا لمجالات تكرار أنكيرين المصممة بنوعية ارتباط تجاه LS) HERZ هو موجود في المتوالية رقم: 24). Jl 13: ارتفاع ناتج عن عودة الارتباط الجيني التعبير في E.coli 5 تتم استنساخ المتواليات المشفرة للبروتين رقم 21؛ والبروتين رقم 23؛ والبروتين رقم 25 في ناقل ناقل 17 قياسي وتم التعبير عن البروتينات في 174 coli HMS .03(]5). فيما يتعلق بالبروتين رقم 21؛ تم تحقيق عيار 4.4 جرام/لتر» بينما أظهر البروتين رقم 23 عيار 1.9 جرام/لترء وأظهر البروتين رقم 25 عيار 2.1 جرام/لتر؛ مما يشير إلى أفضل تعبير عن البروتين رقم 21. من المثير للدهشة أن ترتيب مجالات تكرار الأنيكرين المصممة المستخدمة في البروتين 0 رقم 21 يؤدي بالتالي إلى تعبير ناتج عن عودة الارتباط الجيني أعلى مما هو موضح على سبيل المثال لترتيب HAT يستخدم في البروتين رقم 25؛ على الرغم من استخدام المكونات نفسها (مجالات تكرار أنكيرين المصممة وروابط البولي ببتيد). ومن المثير للاهتمام أن توليفة من مجالات تكرار أنيكرين المصممة المناظرة للمتوالية رقم: 16 و17 أظهرت تعبيرًا أفضل لبروتين ناتج عن عودة الارتباط الجيني من غالبية التوليفات التي تم إنشاؤها بناءء على مجالات تكرار
الأنيكرين المصممة بنوعية ربط تجاه HERZ المعروفة من طلب البراءة الدولي 2014/083208. المثال 14: الريط المتزامن لجزيئين مصل ألبومين بواسطة البروتين رقم 21 تم التعبير عن البروتين رقم 21 وتنقيته كما هو موضح في المثال 1. تم إجراء كروماتوجرافيا استبعاد الحجم المقترنة بتشتت الضوءٍ (Superdex 200 10/300GL (GE «will
Healthcare), Agilent 1200 (Life Technologies), Wyatt Optilab Trex (RI) and باستخدام 30 ميكرو مولار من البروتين رقم 21 60 ميكرو MiniDawnTreos (MALS) لتطهير الجزء CSL Behring 20 مولار من ألبومين المصل البشري (تم استخدام محلول الأحادي من ألبومين المصل البشري بواسطة كروماتوجرافيا الإقصاء بالحجم على عمود (Superdex 200 26/60 (GE Healthcare) 0 أو خليط بنسبة 1: 2 من الاثنين» في PBS تم إزالة البروتين رقم 21 على أنه ذروة أحادية الوزن وتم تحديد وزن جزيئي قدره 65.2 كيلو دالتون بواسطة (MALS والذي يقع ضمن 1.2 كيلو دالتون من وزنه الجزيئي النظري )66437 دالتون). تم إزالة مصل الألبومين serum albumin أنه ذروة أحادية تبلغ 55.1 كيلو دالتون (الوزن الجزيئي النظري 58917 دالتوم). يؤدي خليط بنسبة 1: 2 (النسبة المولية) للجزيئين إلى 5 ذروة رئيسية بوزن جزيئي متوسط يبلغ 169.8 كيلو دالتون (المجال: 186.2 كيلو دالتون إلى 6 كيلو دالتون)؛ بما في ذلك أنواع الوزن الجزيئي المناظرة لمركب 1: 2 (وزن جزيئي نظري: 191.8 كيلو دالتون) وكذلك مركب 1: 1 (132.8 كيلو دالتون). بالإضافة إلى ذلك؛ تم الكشف عن ذروة صغيرة من ألبومين المصل الحر تناظر 6.5 من ألبومين المصل المستخدم في التجرية. لم يتم اكتشاف ذروة تشتمل على كتلة جزيئية مناظرة للبروتين الحر رقم 21. تشير هذه 0 النتائج إلى أن البروتين رقم 21 يمكنه ربط جزيئين مصل ألبومين albumin 5610007 في وقت واحد. المتال 15: الثبات الحراري العالي للبروتين رقم 21. تم التعبير عن البروتين رقم 21 وتنقيته كما هو موضح في المثال 1. تم تقييم الثبات الحراري باستخدام ازدواج لون دائري باستخدام مطياف J-815 CD spectrometer 8500ل في جو
من النيتروجين (3 لتر/دقيقة). تم قياس البروتين رقم 21 عند 0.4 ميكرو مولار في 085 في F-QS cuvettes (Hellma, d = 1 cm)117.100 باستخدام seal استشعار للتحكم في درجة الحرارة في المحلول؛ التسخين من 20 درجة مئوية إلى 95 درجة مئوية (أقل من 45 درجة مئوية: + 3 درجة مئوية/دقيقة؛ فوق 45 درجة مئوية: + 1 درجة مئوية/ دقيقة تسجل الإشارة عند 222 نانو jie تأخير 1 دقيقة عند 95 درجة مئوية ومرحلة تبريد لاحقة (برنامج مقلوب مقارنة بمرحلة التسخين). تم معايرة إشارة CD signal إلى الإهليليجية المتبقية المتوسطة mean (MRE) residual ellipticity بالإضافة إلى ذلك؛ تم تسجيل طيف spectrum was CD UV recorded البعيد. يعرض البروتين رقم 21 طيف 60 نموذجي لبروتينات ألفا الحلزونية ذات الحد الأدنى المميز عند 0 208 نانو jie و222 نانو متر. يُظهر البروتين رقم 21 GLE حراريًا عاليًا بعد وجود خط أساس ثابت (لا يوجد تغيير في المنحدر)؛ يتم اكتشاف فقد الإشارة عند 222 نانو متر فوق 78 درجة Augie المثال 16: تأثير البروتين رقم 21 على بروتين الفسف. تم التعبير عن البروتين رقم 21 وتنقيته كما هو موضح في المثال 1. تم علاج خلايا 81474 أو NCI-N87 5 لمدة 18 ساعة باستخدام إما البروتين رقم 21 )100 نانو مولار)» ترانسوزوماب )100 نانو مولار)؛ برتوزوماب (100 نانو مولار)؛ أو خليط منهماء أو PBS ثم خضعت الخلايا لتحليل الطيف الكتلي البروتيني للفوسفو بعد ذلك كما هو موصوف في Britton, D., et al. (Britton, D., Zen, Y., Quaglia, A., Selzer, S., Mitra, VI., Lossner, C., Jung, S., Bohm, G., Schmid, P., Prefot, P., Hoehle, C., Koncarevic, S., Gee, J., Nicholson, R., Ward, M., Castellano, L., Stebbing, J., Zucht, H.D., Sarker, 20 .D., Heaton, N., and Pike, ٠., 2014. PLOS One 9 (3), €90948) يكشف التحليل أن علاج WAN بالبروتين رقم 21 ينظم على نحو مختلف الببتيدات الفسفورية مقارنة بالتراستوزوماب؛ البيرتوزوماب 6110201080 وتوليفة من الاثنين. يتم عرض النتائج في الجدول 1. والأهم من ذلك؛ أن البروتين رقم 21 يعرض بعض الاختلافات الملحوظة في 5 تراستوزوماب» بيرتوزوماب» ومزيج تراستوزوماب وبرتوزوماب» حيث يمنع تثبيط الفسفرة HERZ
في المواقع 1083/1078/1073؛ 1151/1139 و1174/1172 و1174 و1240. في مواقع الفسفرة الأخرى؛ يتم زيادة الفسفرة (772). تم العثور على أعضاء محددين في سلسلة إشارة 010 في اتجاه مجرى الدم من (HERZ ويتم تنظيمهم على نحو مختلف عند العلاج باستخدام البروتين رقم 21؛ على سبيل المثال تم تخفيض الفوسفو ببتيد لذ SoKinase 5 (5441/1444/5447) بنسبة 0.63 ضعفًا إلى 085 مقارنة بالمجموعات الأخرى حيث كان التنظيم في مجال 0.88 مرة فقط. علاوةً على ذلك؛ تم تنظيم الببتيدات الفسفورية التي تعين إلى MAPK3 s MAPK على نحو كبير. أظهر تحليل العينات نفسها بواسطة ELISA نوعية تجاه موقع فسفو خاص ب 1-5473كام (BioConcept: PathScan® Phospho-Aktl (Ser473) Sandwich ELISA Kit رقم 10 (7160 انخفاض التنظيم بواسطة البروتين رقم 21 إلى 0.16 أضعاف PBS مقارنة بالمجموعات الأخرى حيث تم إلغاء التنظيم في حدود 0.3 إلى 0.7 أضعاف فقط. يتم عرض تتائج ELISA في الجدول 2. تشير هذه النتائج إلى أن البروتين رقم 21 ينظم على نحو متبادل إشارات HERD البعدية؛ مقارنة بالتراستوزوماب Trastuzumab « بيرتوزوماب وتوليفة من الاثنين معًا. شوهدت أكبر الفروق في مسار 61-00104ل8»؛ وهو المسار الحرج لبقاء الخلية؛ والذي بدوره يفسر سبب تحفيز البروتين رقم 21 لموت الخلايا المبرمج. يعتبر مسار الفسفوبنوسيتيد 3-كيناز (PI3K / Akt) أحد المسارات الحرجة التي تحافظ على بقاء الخلية عن طريق منع موت الخلايا المبرمج. قد يؤدي التنشيط المرضي منه؛ على سبيل المثال» عن طريق «HER2/HER3-heterodimerization قد يؤدي بالتالي إلى تكاثر خبيث. 0 في هذه التجرية؛ لوحظ كذلك أن تعرض WA 81474 و NCI-N8T للبروتين رقم 21 زاد المستويات الخلوية لبروتين 707038 بمقدار 1.88 و2.8 مرة على التوالي؛ مقارنة بالتعرض ل 5 فقط. كانت الزيادة المقابلة لمستويات بروتين Foxo3a في خلايا 81474 4 NCI-N87 عن طريق التعرض للترانسوزوماب 1.14و 1.32 ضعف؛ على التوالي؛ والتعرض لبرتوزوماب 1 و1.25ضعف؛ على التوالي؛ وعن طريق التعرض للترانسوزوماب والبرتوزوماب 1.28و 5 1.19 ضعف؛ على التوالي. وبالتالي؛ فإن البروتين رقم 21 يؤدي إلى زيادة أعلى بكثير في
— 0 7 — مستويات بروتين Foxo3a الخلوي مقارنة بالتراستوزوماب أو بيرتوزوماب أو توليفة من الاثنين معًا. ومن المعروف للممارس في هذا المجال»؛ أن 28681 الفسفوريات (Foxo3a تؤدي إلى تدهور 8 وتعزيز بقاء الخلية. يؤدي تثبيط الفسفرة MA استقرار Foxo3a وبالتالي زيادة في مستويات 0«038. في المستويات esx يمكن ل Foxo3a أن ينتقل إلى النواة وبحث على موت الخلايا المبرمج . موقع إضافة فسفور البروتين | ترانسوزوما | برتوزوماب | ترانسوزوماب/ رقم 21 اب برتوزوماب 2+ 3 0.357 0.68 0.1 0.1 Es تت RPS6KB1/S6Kinase | 0.92 0.97 1.04 0.94 T444/5447
— 1 7 — RPS6KB1/S6Kinase | 0.63 0.88 1.02 0.85 7 5441/1 RAF 0.48 0.77 1.01 0.62 T631/T638/T640/T6 41/5642 الجدول 2. تأثير البروتينات المختلفة على حالة الفسفرة مختلف بروتينات خلية AKT) BT474 (HER1 / EGFR (HER3 (HER2 المقيمة بواسطة ELISA (تغيير أضعاف إلى (PBS موقع إضافة فسفور البروتين ١ ترانسوزوما | برتوزوماب | ترانسوزوماب/ Phosphorylation رقم 21 اب برتوزوماب s2ugi—HER2 Pan — 0.04 0.02 1.12 0.03 تيروسين Phospho— Tyrosine s2ugi—HER3 Pan — 0.45 0.52 0.78 0.31 تيروسين Phospho— Tyrosine -HER1/EGFR Pan 0.40 0.53 0.68 0.53 فوسفو-تيروسين Phospho-Tyrosine مثال 117 دواء مشترك يستخدم بروتينات رابطة ناتجة عن عودة الارتباط الجيني تتضمن المتوالية رقم: 21 لتحسين العلاج.
تم التعبير عن البروتين رقم 21 والبروتين رقم 21- His وتنقيته كما هو موضح في المثال 1. تم إجراء فحوصات تكاثر خلية BrdU القياسية؛ المعروفة جيدًا لذي المهارة في المجال. باختصار؛ تم تحديد التأثيرات على تكاثر خلية البروتين رقم 115-21)؛ أو المركبات الأخرى» أو البروتين رقم His -1 في توليفة مع مركبات أخرى» عن طريق قياس تخليق الحمض النووي باستخدام علامة BrdU (BrdU, Cell 5 تكاثر (ELISA, Roche) لفترة وجيزة؛ تم استنبات 10000 خلية لكل J في طبق به 96 عين في وسط كامل مقداره 100 ميكرو لتر واحتضانها لمدة 24 ساعة. تم إضافة البروتين رقم 21- His و/أو المركبات لمدة 72 ساعة إضافية. تمت إضافة BrdU لوضع العلامات على الخلايا sad 24 ساعة الماضية. تم الكشف عن الخلايا المعلمة (المتكاثرة) Gy لبروتوكول عمليات التصنيع. تم تحليل البيانات باستخدام برنامج GraphPad prism (log [C] vs.
OD450-602 nm plot) 0 تم تركيب البيانات باستخدام ملاءمة الانحدار غير الخطي .(log(antagonist) vs. response variable slope (four parameters)) توليفة من البروتين رقم 115-21 مع إيربيولين Eribulin « مثبط الأنبوب الصغير microtubule inhibitor : تم اختبار بروتين رقم 119-21 إيربيولين؛ أو توليفة من البروتين رقم 21- His وإيربيولين لقدرته على تثبيط تكاثر 81474 وخلايا 8175/-1/10. تم معايرة إيربيولين بدءًا من 1000 نانومتر على قمة التركيز الأمثل للبروتين رقم 21- His (2 نانو مولار في 81474 و4 نانو مولار في 8175/-1/10). كان هناك توليفة من كل من الجزيئات متفوقة على إيربيولين في حد ذاته في كلا السلالات الخلوية. لم يكن إيربيولين this على خلايا 4 كعامل منفرد ولكنه أظهر تثبيضًا Us مع البروتين رقم 1115-21. أظهر إيربيولين قوة منخفضة للغاية من تلقاء نفسه على خلايا MDA-MBITS ولكن تم تحسين هذا في تركيبة مع 0 البروتين رقم 21- His تم إعطاء قيم 1050 في الجدول 3. توضح هذه البيانات أن البروتين رقم (Sa 1115-1 دمجه مع إيربيولين ويعزز نشاطه. توليفة من البروتين رقم His—21 و6000-0941؛ مثبط 6ا013: يتم اختبار البروتين رقم 21- (His 606-0941؛ أو توليفة من البروتين رقم His=21 و 6006-0941 لقدرتها على تثبيط jis خلايا 81474 5 .MDA-MBI175 تم معايرة 6000-0941 بدءًا من 20.000 نانو Ve 5 على قمة التركيز الأمثل للبروتين رقم 21- His نانومتر في 87474 و4 نانومتر في
.(MDA-MB175 كانت هناك توليفة من كلا الجزيئين متفوقة على 600-0941 في حد ذاته في كلا من السلالات الخلوية. أظهر 606-0941 نشاط في حد ذاته ولكن تمت زيادة الفاعلية باستخدام البروتين رقم 1115-21. تم زيادة فعالية 100-0941 في 81474 بقوة؛ مما يشير إلى وجود تأثير تأزري. وبالمثل؛ زاد البروتين رقم 21 من فاعلية 600-0941 في MDA- Wa 08175 حيث بدا أن التأثير مضاف. ترد af 1050 في الجدول 3. توضح هذه البيانات أن البروتين رقم 1115-21 يمكن دمجه مع 6000-0941 ويعزز نشاطه. توليفة من البروتين رقم 115-21 ؛ إيفرميلوس0715ا7/610 ..؛ مثبط MTOR يتم اختبار بروتين رقم 115-21 إيفرميلو» أو توليفة من البروتين رقم 115-21 وإيفرميلوس لقدرتهما على تثبيط تكاثر 81474 Wis; 1/8175-/1/00. تم معايرة إيفرميلوس بدءًا من 1 مل مولار على رأس 0 التركيز الأمثل من البروتين رقم 21- His (2نانو مولار في 87474 و4 نانو مولار في MDA- 5 كان هناك توليفة من كلا الجزبئين متفوقة على إيفرميلوس من تلقاء نفسه في كلا السلالات الخلوية. أظهر إيفرميلوس النشاط من تلقاء نفسه ولكن تمت زيادة الفاعلية باستخدام البروتين رقم 119-21). تم زيادة قوة إيفرميلوس في خلايا 81474 بقوة؛ مما يشير إلى وجود تأثير تآزري. وبالمثل؛ زاد البروتين رقم 21- His فاعلية إيفرميلوس في (MDA-MB175 Wa حيث 5 بدا أن التأثير مضاف. تم إعطاء قيم 10650 في الجدول 3. توضح هذه البيانات أن البروتين رقم (Say 1115-1 دمجه مع إيفروميلوس (gong نشاطه. توليفة من البروتين رقم 115-21 لاباتينيب Lapatinib ؛ Lis 4ا1ا-080: يتم اختبار بروتين رقم 115-21 لاباتينيب» أو توليفة من البروتين رقم 115-21 ولاباتينيب لقدرتهما على تثبيط تكاثر 81474 وخلايا .MDA-MB175 تم معايرة لاباتينيب بدءًا من 1000 نانو مولار 0 على رأس التركيز الأمثل من البروتين رقم 21- His (2نانو مولار في 81474 و4 نانو مولار في 1/8175-/100). كان هناك توليفة من كلا الجزبئين متفوقة على لاباتينيب من تلقاء نفسه في كلتا السلالتين الخلويتين. أظهر لاباتينيب النشاط من تلقاء نفسه ولكن تمت زيادة الفاعلية باستخدام البروتين رقم 1115-21. تم زيادة قوة لاباتينيب في خلايا 81474 بقوة؛ مما يشير إلى وجود تأثير تآزري. وبالمثل» زاد البروتين رقم 21- His فاعلية لاباتينيب في خلايا MDA-
Cun (MB175 بدا أن التأثير مضاف. تم إعطاء قيم 1050 في الجدول 3. توضح هذه البيانات أن البروتين رقم 1115-21 يمكن دمجه مع لاباتينيب وبقوي نشاطه. توليفة من البروتين رقم 21 مع ترانسوزوماب Trastuzumab : يتم اختبار بروتين رقم 21؛ ترانسوزوماب؛ أو توليفة من البروتين رقم 21 ترانسوزوماب لقدرتهما على تثبيط تكاثر 81474
وخلايا .MDA-MB175 تم معايرة ترانسوزوماب بدءًا من 100 نانو مولار على رأس التركيز الأمثل من البروتين رقم 21 (1 نانو مولار في 871474 و10 نانو مولار في (MDA-MBI175 كان هناك توليفة من كلا الجزيئين متفوقة على ترانسوزوماب من تلقاء نفسه في كلتا السلالتين الخلويتين . أظهر ترانسوزوماب النشاط من تلقاء نفسه ولكن تمت sal) الفاعلية باستخدام البروتين رقم 21. أدت توليفة من تركيز دون المستوى الأمثل من البروتين رقم 21 مع تراستوزوماب إلى
0 _تثبيط التكاثر. يدل ذلك على أنه يمكن دمج كل من الجزيئات وأن البروتين رقم 21 يعزز نشاط تراستوزوماب. يمكن أيضًا تأكيد تأثير التركيبة عن طريق معايرة البروتين رقم 21 أعلى تركيز ثابت من تراستوزوماب Trastuzumab (50 نانومتر). وبالمثل؛ كان دمج البروتين رقم 21 بأبيتوليسيب Apitolisib أو تسيليسيب Taselisib أو ألبيليسيب Alpelisib أو بالوسكليب Palbociclib أو تراميتينيب Trametinib أو كويميتينيب
Cobimetinib 5 أو cu dla 58185105 أكثر فعالية في تثبيط تكاثر خلايا efficient in inhibiting the proliferation 81474 من البروتين رقم 21 sang أو البروتين رقم 21 sang أو أبيتوليسيب Apitolisib أو ألبيليسيبب Taselisib أو بالسيبسيب Alpelisib أو ساليرسيب
Salirasib وحدها (انظر الجدول 3). بالنسبة للتجارب مع أبيتوليسيب؛ تاسيليسيب؛ ألبيليسيب؛ بالوسكليب؛ تم استخدام البروتين رقم 21 عند 2 نانو مولار وتم ضبط تركيز أبيتوليسيب؛
0 تاسيليسيب؛ ألبيليسيب؛ بالوسكليب لتحديد قيم 1050. للتجارب مع تراميتينيب (5-10 مولار)؛ كوبيميتينيب؛ أو ساليرسيب (5-10*3 مولار)؛ تم معايرة البروتين رقم 21 لتحديد قيم 1050. باختصار؛ يمكن دمج البروتين رقم 21 أو البروتين رقم 21- His مع عدة فئات من الأدوية المعيارية الخاصة بسرطان الثدي لتعزيز آثارها المتبطة للنمو على خلايا الإفراط في التعبير عن 12. يشير هذا إلى الإمكانات الإكلينيكية لتعزيز الفعالية و/أو تقليل جرعة الرعاية القياسية
5 -_لتقليل التسمم.
— 5 7 — جدول 3. أمثلة على ثوابت تثبيط تكائر الخلية cell proliferation inhibition constants 1C50) [نانو مولار]) لمركبات مختلفة وتوليفة من البروتين رقم 115-21 أو البروتين رقم 21 مع المركبات على WA 81474 أو MDA-MB175 لاتينينيب Lapatinib 2814 لاتينينيب + بروتين Lapatinib | 132 784 Protein + رقم 21- His *GDC-0941 بروتين رقم 38 33 His -1 إيفروليموس+ بروتين 148441 Everolimus + Protein رقم His -1 إيريبيولين+ بروتين + Eribulin 27 Protein رقم 21- His أبيتوليسيب+ بروتين 105 Apitolisib + Protein رقم 21
— 7 6 —
تاسيليب+ بروتين Taselisib | 14 Protein + رقم 21 ألبيسيب+ بروتين + Alpelisib | 350 007 رقم 21 بالبوسيليسيب+ بروتين 144 Palbociclib + Protein رقم
21 تراميتينيب+ بروتين 0.45 Trametinib+ Protein رقم
21 كوبيميتينيب+ بروتين 0.51 Cobimetinib+ Protein رقم
21 ساليراسيب+ بروتين 0.43 Salirasib+ Protein رقم 21
قائمة المتواليات
— 7 7- Molecular Partners AG >110< <120 >بروتينات رابطة ناتجة عن عودة الارتباط الجيني recombinant 5 6015© >130< 33 >160< BiSSAP 1.3 >170<
1 >210< 10 >211< PRT >212< <213 >متوالية صناعية
>220< His—tag >223< 1 >400<
Met Arg Gly Ser His His His His His His 1 5 10 <210> 2 <211>5 5 <212> PRT >متوالية صناعية 213< <220>
GlySerila,<223> 0 <400> 2
Gly Gly Gly Gly Ser 1 5 <210> 3 <211>7 <212> PRT >متوالية صناعية 213<
-7 9 — <220>
GlySerila<223> <400>3 5
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Ser 1 5 <210> 4 <211> 10 10 <212> PRT >متوالية صناعية 213< <220>
GlySerilay<223> 15 <400> 4
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 1 5 10
— 8 0 — <210> 5 <211> 15 <212> PRT <213متوالية صناعية 5 <220>
GlySerila<223> <400>5 10
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 1 5 10 15 <210> 6 <211> 20 15 <212> PRT >متوالية صناعية 213< <220>
— 8 1 —
GlySerila<223> <400> 6
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 1 5 10 15 5
Gly Gly Gly Ser <210>7 <211>8 0 <212> PRT <213 >متوالية صناعية <220> <223> ProThr linker 5 <400> 7
Gly Ser Pro Thr Pro Thr Pro Thr 1 5
— 8 2- <210> 8 <211> 15 <212> PRT <213متوالية صناعية 5 <220> <223> ProThr linker <400> 8 10
Gly Ser Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro Thr Pro Thr Pro Thr 1 5 10 15 <210>9 <211>22 5 <212> PRT >متوالية صناعية 213< <220>
— 8 3 —
ProThrilay<223> <400> 9
Gly Ser Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr 1 5 10 15 5
Pro Thr Pro Thr Pro Thr <210> 10 <211> 159 10 <212> PRT >متوالية صناعية 213< <220> كمجال تكرار أنكيرين مصمم 223< 1 5 <400> 10
Gly Ser Asp Leu Gly Lys Lys Leu Leu Glu Ala Ala Arg Ala Gly 07 1 5 10 15
Asp Asp Glu Val Arg lle Leu Met Ala Asn Gly Ala Asp Val Asn Ala
Thr Asp Asn Asp Gly Tyr Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Ser Asn Gly
His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Asn Gly Ala Asp Val Asn 5 60
Ala Ser Asp Leu Thr Gly lle Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Ala Thr 65 70 75 80
Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys His Gly Ala Asp Val 85 90 95 10
Asn Ala Tyr Asp Asn Asp Gly His Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Lys 100 105 110
Tyr Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys His Gly Ala Asp 115 120 125
Val Asn Ala Gin Asp Lys Phe Gly Lys Thr Ala Phe Asp lle Ser lle 15 130 135 140
Asp Asn Gly Asn Glu Asp Leu Ala Glu lle Leu Gin Lys Ala Ala 145 150 155
11 >210< 126 >211< PRT >212< <213 >متوالية صناعية >220< <223>مجال تكرار أنكيرين مصمم 11 >400<
Gly Ser Asp Leu Gly Lys Lys Leu Leu Glu Ala Ala Arg Ala Gly Gin 10 1 5 10 15
Asp Asp Glu Val Arg lle Leu Met Ala Asn Gly Ala Asp Val Asn Ala
Lys Asp Lys Asp Gly Tyr Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Arg Glu Gly 15
His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn 60
Ala Lys Asp Lys Asp Gly Tyr Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Arg Glu 65 70 75 80
Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val 85 90 95
Asn Ala GIn Asp Lys Phe Gly Lys Thr Ala Phe Asp lle Ser lle Asp 100 105 110
Asn Gly Asn Glu Asp Leu Ala Glu lle Leu Gin Lys Ala Ala 5 115 120 125 <210> 12 <211> 126 <212> PRT 10 >متوالية صناعية 213< <220> <223>مجال تكرار أنكيرين مصمم >400< 2
Gly Ser Asp Leu Gly Lys Lys Leu Leu Glu Ala Ala Arg Ala Gly 07 1 5 10 15
Asp Asp Glu Val Arg lle Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala
Lys Asp Tyr Phe Ser His Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Arg Asn Gly
His Leu Lys lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn 60 5
Ala Lys Asp Phe Ala Gly Lys Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Asn Asp 65 70 75 80
Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val 85 90 95
Asn Ala 60 Asp lle Phe Gly Lys Thr Pro Ala Asp lle Ala Ala Asp 10 100 105 110
Ala Gly His Glu Asp lle Ala Glu Val Leu Gin Lys Ala Ala 115 120 125 <210> 13 15 <211> 126 <212> PRT >متوالية صناعية 213<
<220> <223>مجال تكرار أنكيرين مصمم >400< 3
Gly Ser Asp Leu Gly Lys Lys Leu Leu Glu Ala Ala Arg Ala Gly Gin 5 1 5 10 15
Asp Asp Glu Val Arg Glu Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala
Lys Asp Tyr Phe Ser His Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Arg Asn Gly 10
His Leu Lys lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn 60
Ala Lys Asp Phe Ala Gly Lys Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Asn Asp 65 70 75 80
Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val 15 85 90 95
Asn Ala GIn Asp lle Phe Gly Lys Thr Pro Ala Asp lle Ala Ala Asp 100 105 110
Ala Gly His Glu Asp lle Ala Glu Val Leu Gin Lys Ala Ala
115 120 125 <210> 14 <211> 126 <212> PRT 5 >متوالية صناعية 213< <220> <223>مجال تكرار أنكيرين مصمم >400< 4
Gly Ser Asp Leu Gly Lys Lys Leu Leu Glu Ala Ala Arg Ala Gly 07 1 5 10 15
Asp Asp Glu Val Arg Glu Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala 15
Lys Asp Tyr Phe Ser His Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Arg Asn Gly
His Leu Lys lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn 60
Ala Lys Asp Phe Ala Gly Lys Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Asn Glu 65 70 75 80
Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val 85 90 95
Asn Ala 60 Asp lle Phe Gly Lys Thr Pro Ala Asp lle Ala Ala Asp 5 100 105 110
Ala Gly His Glu Asp lle Ala Glu Val Leu Gin Lys Ala Ala 115 120 125 <210>15 10 <211> 126 <212> PRT >متوالية صناعية 213< <220> 5 <223>مجال تكرار أنكيرين مصمم >400< 5
Gly Ser Asp Leu Gly Lys Lys Leu Leu Glu Ala Ala Arg Ala Gly 07
1 5 10 15
Asp Asp Glu Val Arg lle Leu Met Ala Asn Gly Ala Asp Val Asn Ala
Lys Asp Tyr Phe Ser His Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Arg Asn Gly 5
His Leu Lys lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn 60
Ala Lys Asp Phe Ala Gly Lys Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Asn Asp 65 70 75 80
Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys His Gly Ala Asp Val 10 85 90 95
Asn Ala GIn Asp lle Phe Gly Lys Thr Pro Ala Asp lle Ala Ala Asp 100 105 110
Ala Gly His Glu Asp lle Ala Glu Val Leu Gin Lys Ala Ala 115 120 125 15 <210> 16 <211> 126 <212> PRT
<213>متوالية صناعية <220> <223>مجال تكرار أنكيرين مصمم >400< 6
Gly Ser Asp Leu Gly lle Lys Leu Leu Phe Ala Ala Ala Lys Gly 07 1 5 10 15
Asp Asp Glu Val Arg Glu Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala 10
Lys Asp Phe GIn Gly Val Thr Pro Leu His lle Ala Ala Gln Ser Gly
His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn 60
Ala Lys Asp Val Thr Gly Asp Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Gin His 15 65 70 75 80
Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val 85 90 95
Asn Ala Gln Asp Glu Arg Gly Trp Thr Pro Ala Asp Leu Ala Ala Asp
100 105 110
Trp Gly His Glu Asp lle Ala Glu Val Leu Gin Lys Ala Ala 115 120 125 <210>17 5 <211> 126 <212> PRT >متوالية صناعية 213< <220> 0 <223>مجال تكرار أنكيرين مصمم >400< 7
Gly Ser Asp Leu Gly Lys Lys Leu Leu Glu Ala Ala Arg Ala Gly 07 1 5 10 15 15
Asp Asp Glu Val Arg Glu Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala
Lys Asp Glu Tyr Gly Leu Thr Pro Leu Tyr Leu Ala Thr Ala His Gly
His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn 60
Ala Val Asp Ala lle Gly Phe Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Phe lle 65 70 75 80
Gly His Leu Glu lle Ala Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val 5 85 90 95
Asn Ala GIn Asp Lys Phe Gly Lys Thr Pro Ala Asp lle Ala Ala Gly 100 105 110
Ala Gly Asn Glu Asp lle Ala Glu Val Leu GIn Lys Ala Ala 115 120 125 10 <210> 18 <211> 126 <212> PRT <213متوالية صناعية 5 <220> <223>مجال تكرار أنكيرين مصمم
>400< 86
Gly Ser Asp Leu Gly Val Lys Leu Leu Trp Ala Ala Ala Arg Gly 0 1 5 10 15
Asp Asp Glu Val Arg Glu Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala 5
Lys Asp Phe GIn Gly lle Thr Pro Leu His lle Ala Ala Thr Asn Gly
His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn 60
Ala Lys Asp lle Thr Gly Glu Thr Pro Leu His His Ala Ala Asp Ser 10 65 70 75 80
Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val 85 90 95
Asn Ala GIn Asp Lys Ala Gly Val Thr Pro Ala Asp Leu Ala Ala Ala 100 105 110 15
Trp Gly His Glu Asp lle Ala Glu Val Leu Gin Lys Ala Ala 115 120 125 <210> 19
<211> 126 <212> PRT <213>متوالية صناعية <220> 5 <223>مجال تكرار أنكيرين مصمم >400< 9
Gly Ser Asp Leu Gly Val Lys Leu Leu Trp Ala Ala Ala Arg Gly 0 1 5 10 15 10
Asp Asp Glu Val Arg lle Leu Leu Ala Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala
Lys Asp Phe GIn Gly lle Thr Pro Leu His lle Ala Ala 60 Ser Gly
His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn 15 60
Ala Lys Asp Val Thr Gly Asp Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Gin His 65 70 75 80
Gly His Leu Val lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val
85 90 95
Asn Ala Gln Asp Glu Arg Gly Trp Thr Pro Ala Asp Leu Ala Ala Asp 100 105 110
Trp Gly His Glu Asp lle Ala Glu Val Leu Gin Lys Ala Ala 115 120 125 5 <210> 20 <211> 126 <212> PRT <213>متوالية صناعية 0 <220> <223>مجال تكرار أنكيرين مصمم <400> 20 15
Gly Ser Asp Leu Gly Lys Lys Leu Leu Glu Ala Ala Arg Ala Gly 07 1 5 10 15
Asp Asp Glu Val Arg lle Leu Met Ala Asn Gly Ala Asp Val Asn Ala
Lys Asp Glu Tyr Gly Leu Thr Pro Leu Tyr Leu Ala Thr Ala His Gly
His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Asn Gly Ala Asp Val Asn 60
Ala Val Asp Ala lle Gly Phe Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Phe lle 5 65 70 75 80
Gly His Leu Glu lle Ala Glu Val Leu Leu Lys His Gly Ala Asp Val 85 90 95
Asn Ala GIn Asp Lys Phe Gly Lys Thr Ala Phe Asp lle Ser lle Gly 100 105 110 10
Asn Gly Asn Glu Asp Leu Ala Glu lle Leu GIn Lys Ala Ala 115 120 125 <210> 21 <211> 570 15 <212> PRT >متوالية صناعية 213< <220>
<223>برتين يشتمل على أربعة مجالات تكرار أنكيرين مصممة >400< 1
Gly Ser Asp Leu Gly Lys Lys Leu Leu Glu Ala Ala Arg Ala Gly 07 1 5 10 15 5
Asp Asp Glu Val Arg Glu Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala
Lys Asp Tyr Phe Ser His Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Arg Asn Gly
His Leu Lys lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn 10 60
Ala Lys Asp Phe Ala Gly Lys Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Asn Glu 65 70 75 80
Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val 85 90 95 15
Asn Ala GIn Asp lle Phe Gly Lys Thr Pro Ala Asp lle Ala Ala Asp 100 105 110
Ala Gly His Glu Asp lle Ala Glu Val Leu Gin Lys Ala Ala Gly Ser 115 120 125
Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro Thr 130 135 140
Pro Thr Pro Thr Gly Ser Asp Leu Gly lle Lys Leu Leu Phe Ala Ala 145 150 155 160
Ala Lys Gly GIn Asp Asp Glu Val Arg Glu Leu Leu Lys Ala Gly Ala 5 165 170 175
Asp Val Asn Ala Lys Asp Phe GIn Gly Val Thr Pro Leu His lle Ala 180 185 190
Ala GIn Ser Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly 195 200 205 10
Ala Asp Val Asn Ala Lys Asp Val Thr Gly Asp Thr Pro Leu His Leu 210 215 220
Ala Ala GIn His Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala 225 230 235 240
Gly Ala Asp Val Asn Ala Gin Asp Glu Arg Gly Trp Thr Pro Ala Asp 15 245 250 255
Leu Ala Ala Asp Trp Gly His Glu Asp lle Ala Glu Val Leu Gin Lys 260 265 270
Ala Ala Gly Ser Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro Thr Pro Thr Pro
275 280 285
Thr Thr Pro Thr Pro Thr Pro Thr Gly Ser Asp Leu Gly Lys Lys Leu 290 295 300
Leu Glu Ala Ala Arg Ala Gly GIn Asp Asp Glu Val Arg Glu Leu Leu 305 310 315 320 5
Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala Lys Asp Glu Tyr Gly Leu Thr Pro 325 330 335
Leu Tyr Leu Ala Thr Ala His Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu 340 345 350
Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala Val Asp Ala lle Gly Phe Thr 10 355 360 365
Pro Leu His Leu Ala Ala Phe lle Gly His Leu Glu lle Ala Glu Val 370 375 380
Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala GIn Asp Lys Phe Gly Lys 385 390 395 400 15
Thr Pro Ala Asp lle Ala Ala Gly Ala Gly Asn Glu Asp lle Ala Glu 405 410 415
Val Leu GIn Lys Ala Ala Gly Ser Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro 420 425 430
Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro Thr Pro Thr Pro Thr Gly Ser Asp Leu 435 440 445
Gly Lys Lys Leu Leu Glu Ala Ala Arg Ala Gly GIn Asp Asp Glu Val 450 455 460
Arg Glu Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala Lys Asp Tyr Phe 5 465 470 475 480
Ser His Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Arg Asn Gly His Leu Lys lle 485 490 495
Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala Lys Asp Phe 500 505 510 10
Ala Gly Lys Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Asn Glu Gly His Leu Glu 515 520 525 lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala GIn Asp 530 535 540 lle Phe Gly Lys Thr Pro Ala Asp lle Ala Ala Asp Ala Gly His Glu 15 545 550 555 560
Asp lle Ala Glu Val Leu GIn Lys Ala Ala 565 570
22 >210< 570 >211< PRT >212< <213 >متوالية صناعية >220< <223>برتين يشتمل على أربعة مجالات تكرار أنكيرين مصممة 22 >400<
Gly Ser Asp Leu Gly Lys Lys Leu Leu Glu Ala Ala Arg Ala Gly Gin 10 1 5 10 15
Asp Asp Glu Val Arg Glu Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala
Lys Asp Tyr Phe Ser His Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Arg Asn Gly 15
His Leu Lys lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn 60
Ala Lys Asp Phe Ala Gly Lys Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Asn Asp 65 70 75 80
Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val 85 90 95
Asn Ala GIn Asp lle Phe Gly Lys Thr Pro Ala Asp lle Ala Ala Asp 100 105 110
Ala Gly His Glu Asp lle Ala Glu Val Leu Gin Lys Ala Ala Gly Ser 5 115 120 125
Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro Thr 130 135 140
Pro Thr Pro Thr Gly Ser Asp Leu Gly lle Lys Leu Leu Phe Ala Ala 145 150 155 160 10
Ala Lys Gly Gln Asp Asp Glu Val Arg Glu Leu Leu Lys Ala Gly Ala 165 170 175
Asp Val Asn Ala Lys Asp Phe GIn Gly Val Thr Pro Leu His lle Ala 180 185 190
Ala 60 Ser Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly 15 195 200 205
Ala Asp Val Asn Ala Lys Asp Val Thr Gly Asp Thr Pro Leu His Leu 210 215 220
Ala Ala GIn His Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala
225 230 235 240
Gly Ala Asp Val Asn Ala Gin Asp Glu Arg Gly Trp Thr Pro Ala Asp 245 250 255
Leu Ala Ala Asp Trp Gly His Glu Asp lle Ala Glu Val Leu Gin Lys 260 265 270 5
Ala Ala Gly Ser Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro Thr Pro Thr Pro 275 280 285
Thr Thr Pro Thr Pro Thr Pro Thr Gly Ser Asp Leu Gly Lys Lys Leu 290 295 300
Leu Glu Ala Ala Arg Ala Gly Gin Asp Asp Glu Val Arg Glu Leu Leu 10 305 310 315 320
Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala Lys Asp Glu Tyr Gly Leu Thr Pro 325 330 335
Leu Tyr Leu Ala Thr Ala His Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu 340 345 350 15
Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala Val Asp Ala lle Gly Phe Thr 355 360 365
Pro Leu His Leu Ala Ala Phe lle Gly His Leu Glu lle Ala Glu Val 370 375 380
Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala GIn Asp Lys Phe Gly Lys 385 390 395 400
Thr Pro Ala Asp lle Ala Ala Gly Ala Gly Asn Glu Asp lle Ala Glu 405 410 415
Val Leu GIn Lys Ala Ala Gly Ser Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro 5 420 425 430
Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro Thr Pro Thr Pro Thr Gly Ser Asp Leu 435 440 445
Gly Lys Lys Leu Leu Glu Ala Ala Arg Ala Gly GIn Asp Asp Glu Val 450 455 460 10
Arg Glu Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala Lys Asp Tyr Phe 465 470 475 480
Ser His Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Arg Asn Gly His Leu Lys lle 485 490 495
Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala Lys Asp Phe 15 500 505 510
Ala Gly Lys Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Asn Asp Gly His Leu Glu 515 520 525 lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala GIn Asp
530 535 540 lle Phe Gly Lys Thr Pro Ala Asp lle Ala Ala Asp Ala Gly His Glu 545 550 555 560
Asp lle Ala Glu Val Leu GIn Lys Ala Ala 565 570 5 <210> 23 <211> 570 <212> PRT <213>متوالية صناعية 0 <220> <223>برتين يشتمل على أربعة مجالات تكرار أنكيرين مصممة <400> 23 5
Gly Ser Asp Leu Gly Lys Lys Leu Leu Glu Ala Ala Arg Ala Gly 07 1 5 10 15
Asp Asp Glu Val Arg Glu Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala
Lys Asp Tyr Phe Ser His Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Arg Asn Gly
His Leu Lys lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn 60
Ala Lys Asp Phe Ala Gly Lys Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Asn Glu 5 65 70 75 80
Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val 85 90 95
Asn Ala GIn Asp lle Phe Gly Lys Thr Pro Ala Asp lle Ala Ala Asp 100 105 110 10
Ala Gly His Glu Asp lle Ala Glu Val Leu Gin Lys Ala Ala Gly Ser 115 120 125
Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro Thr 130 135 140
Pro Thr Pro Thr Gly Ser Asp Leu Gly Val Lys Leu Leu Trp Ala Ala 15 145 150 155 160
Ala Arg Gly Gin Asp Asp Glu Val Arg Glu Leu Leu Lys Ala Gly Ala 165 170 175
Asp Val Asn Ala Lys Asp Phe GIn Gly lle Thr Pro Leu His lle Ala
180 185 190
Ala Thr Asn Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly 195 200 205
Ala Asp Val Asn Ala Lys Asp lle Thr Gly Glu Thr Pro Leu His His 210 215 220 5
Ala Ala Asp Ser Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala 225 230 235 240
Gly Ala Asp Val Asn Ala GIn Asp Lys Ala Gly Val Thr Pro Ala Asp 245 250 255
Leu Ala Ala Ala Trp Gly His Glu Asp lle Ala Glu Val Leu Gin Lys 10 260 265 270
Ala Ala Gly Ser Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro Thr Pro Thr Pro 275 280 285
Thr Thr Pro Thr Pro Thr Pro Thr Gly Ser Asp Leu Gly Lys Lys Leu 290 295 300 15
Leu Glu Ala Ala Arg Ala Gly Gin Asp Asp Glu Val Arg Glu Leu Leu 305 310 315 320
Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala Lys Asp Glu Tyr Gly Leu Thr Pro 325 330 335
Leu Tyr Leu Ala Thr Ala His Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu 340 345 350
Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala Val Asp Ala lle Gly Phe Thr 355 360 365
Pro Leu His Leu Ala Ala Phe lle Gly His Leu Glu lle Ala Glu Val 5 370 375 380
Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala GIn Asp Lys Phe Gly Lys 385 390 395 400
Thr Pro Ala Asp lle Ala Ala Gly Ala Gly Asn Glu Asp lle Ala Glu 405 410 415 10
Val Leu GIn Lys Ala Ala Gly Ser Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro 420 425 430
Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro Thr Pro Thr Pro Thr Gly Ser Asp Leu 435 440 445
Gly Lys Lys Leu Leu Glu Ala Ala Arg Ala Gly Gin Asp Asp Glu Val 15 450 455 460
Arg Glu Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala Lys Asp Tyr Phe 465 470 475 480
Ser His Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Arg Asn Gly His Leu Lys lle
485 490 495
Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala Lys Asp Phe 500 505 510
Ala Gly Lys Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Asn Glu Gly His Leu Glu 515 520 525 5 lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala GIn Asp 530 535 540 lle Phe Gly Lys Thr Pro Ala Asp lle Ala Ala Asp Ala Gly His Glu 545 550 555 560
Asp lle Ala Glu Val Leu Gin Lys Ala Ala 10 565 570 <210> 24 <211> 570 <212> PRT 15 >متوالية صناعية 213< <220> <223>برتين يشتمل على أربعة مجالات تكرار أنكيرين مصممة
>400< 4
Gly Ser Asp Leu Gly Lys Lys Leu Leu Glu Ala Ala Arg Ala Gly 07 1 5 10 15
Asp Asp Glu Val Arg Glu Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala 5
Lys Asp Tyr Phe Ser His Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Arg Asn Gly
His Leu Lys lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn 60 10
Ala Lys Asp Phe Ala Gly Lys Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Asn Glu 65 70 75 80
Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val 85 90 95
Asn Ala 60 Asp lle Phe Gly Lys Thr Pro Ala Asp lle Ala Ala Asp 15 100 105 110
Ala Gly His Glu Asp lle Ala Glu Val Leu Gin Lys Ala Ala Gly Ser 115 120 125
Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro Thr
130 135 140
Pro Thr Pro Thr Gly Ser Asp Leu Gly Lys Lys Leu Leu Glu Ala Ala 145 150 155 160
Arg Ala Gly Gln Asp Asp Glu Val Arg Glu Leu Leu Lys Ala Gly Ala 165 170 175 5
Asp Val Asn Ala Lys Asp Tyr Phe Ser His Thr Pro Leu His Leu Ala 180 185 190
Ala Arg Asn Gly His Leu Lys lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly 195 200 205
Ala Asp Val Asn Ala Lys Asp Phe Ala Gly Lys Thr Pro Leu His Leu 10 210 215 220
Ala Ala Asn Glu Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala 225 230 235 240
Gly Ala Asp Val Asn Ala Gin Asp lle Phe Gly Lys Thr Pro Ala Asp 245 250 255 15 lle Ala Ala Asp Ala Gly His Glu Asp lle Ala Glu Val Leu GIn Lys 260 265 270
Ala Ala Gly Ser Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro Thr Pro Thr Pro 275 280 285
Thr Thr Pro Thr Pro Thr Pro Thr Gly Ser Asp Leu Gly lle Lys Leu 290 295 300
Leu Phe Ala Ala Ala Lys Gly Gin Asp Asp Glu Val Arg Glu Leu Leu 305 310 315 320
Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala Lys Asp Phe Gin Gly Val Thr Pro 5 325 330 335
Leu His lle Ala Ala 60 Ser Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu 340 345 350
Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala Lys Asp Val Thr Gly Asp Thr 355 360 365 10
Pro Leu His Leu Ala Ala Gin His Gly His Leu Glu lle Val Glu Val 370 375 380
Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala Gln Asp Glu Arg Gly Trp 385 390 395 400
Thr Pro Ala Asp Leu Ala Ala Asp Trp Gly His Glu Asp lle Ala Glu 15 405 410 415
Val Leu GIn Lys Ala Ala Gly Ser Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro 420 425 430
Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro Thr Pro Thr Pro Thr Gly Ser Asp Leu
435 440 445
Gly Lys Lys Leu Leu Glu Ala Ala Arg Ala Gly GIn Asp Asp Glu Val 450 455 460
Arg Glu Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala Lys Asp Glu Tyr 465 470 475 480 5
Gly Leu Thr Pro Leu Tyr Leu Ala Thr Ala His Gly His Leu Glu lle 485 490 495
Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala Val Asp Ala 500 505 510 lle Gly Phe Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Phe lle Gly His Leu Glu 10 515 520 525 lle Ala Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala GIn Asp 530 535 540
Lys Phe Gly Lys Thr Pro Ala Asp lle Ala Ala Gly Ala Gly Asn Glu 545 550 555 560 15
Asp lle Ala Glu Val Leu GIn Lys Ala Ala 565 570 <210> 25
<211> 570 <212> PRT <213>متوالية صناعية <220> 5 <223>برتين يشتمل على أربعة مجالات تكرار أنكيرين مصممة >400< 5
Gly Ser Asp Leu Gly Lys Lys Leu Leu Glu Ala Ala Arg Ala Gly 07 1 5 10 15 10
Asp Asp Glu Val Arg Glu Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala
Lys Asp Tyr Phe Ser His Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Arg Asn Gly
His Leu Lys lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn 15 60
Ala Lys Asp Phe Ala Gly Lys Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Asn Glu 65 70 75 80
Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val
85 90 95
Asn Ala GIn Asp lle Phe Gly Lys Thr Pro Ala Asp lle Ala Ala Asp 100 105 110
Ala Gly His Glu Asp lle Ala Glu Val Leu Gin Lys Ala Ala Gly Ser 115 120 125 5
Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro Thr 130 135 140
Pro Thr Pro Thr Gly Ser Asp Leu Gly Lys Lys Leu Leu Glu Ala Ala 145 150 155 160
Arg Ala Gly GIn Asp Asp Glu Val Arg Glu Leu Leu Lys Ala Gly Ala 10 165 170 175
Asp Val Asn Ala Lys Asp Tyr Phe Ser His Thr Pro Leu His Leu Ala 180 185 190
Ala Arg Asn Gly His Leu Lys lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly 195 200 205 15
Ala Asp Val Asn Ala Lys Asp Phe Ala Gly Lys Thr Pro Leu His Leu 210 215 220
Ala Ala Asn Glu Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala 225 230 235 240
Gly Ala Asp Val Asn Ala Gin Asp lle Phe Gly Lys Thr Pro Ala Asp 245 250 255 lle Ala Ala Asp Ala Gly His Glu Asp lle Ala Glu Val Leu GIn Lys 260 265 270
Ala Ala Gly Ser Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro Thr Pro Thr Pro 5 275 280 285
Thr Thr Pro Thr Pro Thr Pro Thr Gly Ser Asp Leu Gly Val Lys Leu 290 295 300
Leu Trp Ala Ala Ala Arg Gly Gin Asp Asp Glu Val Arg Glu Leu Leu 305 310 315 320 10
Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala Lys Asp Phe Gin Gly lle Thr Pro 325 330 335
Leu His lle Ala Ala Thr Asn Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu 340 345 350
Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala Lys Asp lle Thr Gly Glu Thr 15 355 360 365
Pro Leu His His Ala Ala Asp Ser Gly His Leu Glu lle Val Glu Val 370 375 380
Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala GIn Asp Lys Ala Gly Val
385 390 395 400
Thr Pro Ala Asp Leu Ala Ala Ala Trp Gly His Glu Asp lle Ala Glu 405 410 415
Val Leu GIn Lys Ala Ala Gly Ser Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro 420 425 430 5
Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro Thr Pro Thr Pro Thr Gly Ser Asp Leu 435 440 445
Gly Lys Lys Leu Leu Glu Ala Ala Arg Ala Gly GIn Asp Asp Glu Val 450 455 460
Arg Glu Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala Lys Asp Glu Tyr 10 465 470 475 480
Gly Leu Thr Pro Leu Tyr Leu Ala Thr Ala His Gly His Leu Glu lle 485 490 495
Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala Val Asp Ala 500 505 510 15 lle Gly Phe Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Phe lle Gly His Leu Glu 515 520 525 lle Ala Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala GIn Asp 530 535 540
Lys Phe Gly Lys Thr Pro Ala Asp lle Ala Ala Gly Ala Gly Asn Glu 545 550 555 560
Asp lle Ala Glu Val Leu GIn Lys Ala Ala 565 570 26 >210< 562 >211< PRT >212< <213 >متوالية صناعية >220< <223>برتين يشتمل على أربعة مجالات تكرار أنكيرين مصممة 6 <400>
Gly Ser Asp Leu Gly Lys Lys Leu Leu Glu Ala Ala Arg Ala Gly Gin 15 1 5 10 15
Asp Asp Glu Val Arg lle Leu Met Ala Asn Gly Ala Asp Val Asn Ala
Lys Asp Tyr Phe Ser His Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Arg Asn Gly
His Leu Lys lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn 60
Ala Lys Asp Phe Ala Gly Lys Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Asn Asp 65 70 75 80 5
Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys His Gly Ala Asp Val 85 90 95
Asn Ala GIn Asp lle Phe Gly Lys Thr Pro Ala Asp lle Ala Ala Asp 100 105 110
Ala Gly His Glu Asp lle Ala Glu Val Leu Gin Lys Ala Ala Gly Gly 10 115 120 125
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 130 135 140
Gly Ser Gly Ser Asp Leu Gly Ala Lys Leu Leu Ser Asp Leu Gly Val 145 150 155 160 15
Lys Leu Leu Trp Ala Ala Ala Arg Gly Gin Asp Asp Glu Val Arg lle 165 170 175
Leu Leu Ala Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala Lys Asp Phe Gin Gly lle 180 185 190
Thr Pro Leu His lle Ala Ala 60 Ser Gly His Leu Glu lle Val Glu 195 200 205
Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala Lys Asp Val Thr Gly 210 215 220
Asp Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Gln His Gly His Leu Val lle Val 5 225 230 235 240
Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala Gln Asp Glu Arg 245 250 255
Gly Trp Thr Pro Ala Asp Leu Ala Ala Asp Trp Gly His Glu Asp lle 260 265 270 10
Ala Glu Val Leu Gin Lys Ala Ala Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 275 280 285
Gly Ser Gly Ser Asp Leu Gly Lys Lys Leu Leu Glu Ala Ala Arg Ala 290 295 300
Gly GIn Asp Asp Glu Val Arg lle Leu Met Ala Asn Gly Ala Asp Val 15 305 310 315 320
Asn Ala Lys Asp Glu Tyr Gly Leu Thr Pro Leu Tyr Leu Ala Thr Ala 325 330 335
His Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Asn Gly Ala Asp
340 345 350
Val Asn Ala Val Asp Ala lle Gly Phe Thr Pro Leu His Leu Ala Ala 355 360 365
Phe lle Gly His Leu Glu lle Ala Glu Val Leu Leu Lys His Gly Ala 370 375 380 5
Asp Val Asn Ala GIn Asp Lys Phe Gly Lys Thr Ala Phe Asp lle Ser 385 390 395 400 lle Gly Asn Gly Asn Glu Asp Leu Ala Glu lle Leu GIn Lys Ala Ala 405 410 415
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 10 420 425 430
Gly Gly Gly Ser Gly Ser Asp Leu Gly Lys Lys Leu Leu Glu Ala Ala 435 440 445
Arg Ala Gly Gin Asp Asp Glu Val Arg lle Leu Met Ala Asn Gly Ala 450 455 460 15
Asp Val Asn Ala Lys Asp Tyr Phe Ser His Thr Pro Leu His Leu Ala 465 470 475 480
Ala Arg Asn Gly His Leu Lys lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly 485 490 495
Ala Asp Val Asn Ala Lys Asp Phe Ala Gly Lys Thr Pro Leu His Leu 500 505 510
Ala Ala Asn Asp Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys His 515 520 525
Gly Ala Asp Val Asn Ala GIn Asp lle Phe Gly Lys Thr Pro Ala Asp 5 530 535 540 lle Ala Ala Asp Ala Gly His Glu Asp lle Ala Glu Val Leu GIn Lys 545 550 555 560
Ala Ala 10 <210> 27 <211> 578 <212> PRT <213متوالية صناعية >220< <223>برتين يشتمل على أربعة مجالات تكرار أنكيرين مصممة
<400> 7
Gly Ser Asp Leu Gly Lys Lys Leu Leu Glu Ala Ala Arg Ala Gly Gin 1 5 10 15
Asp Asp Glu Val Arg lle Leu Met Ala Asn Gly Ala Asp Val Asn Ala 5
Lys Asp Tyr Phe Ser His Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Arg Asn Gly
His Leu Lys lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn 60
Ala Lys Asp Phe Ala Gly Lys Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Asn Asp 10 65 70 75 80
Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys His Gly Ala Asp Val 85 90 95
Asn Ala GIn Asp lle Phe Gly Lys Thr Pro Ala Asp lle Ala Ala Asp 100 105 110 15
Ala Gly His Glu Asp lle Ala Glu Val Leu Gin Lys Ala Ala Gly Ser 115 120 125
Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro Thr 130 135 140
Pro Thr Pro Thr Gly Ser Asp Leu Gly Ala Lys Leu Leu Ser Asp Leu 145 150 155 160
Gly Val Lys Leu Leu Trp Ala Ala Ala Arg Gly 60 Asp Asp Glu Val 165 170 175
Arg lle Leu Leu Ala Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala Lys Asp Phe 60 5 180 185 190
Gly lle Thr Pro Leu His lle Ala Ala Gln Ser Gly His Leu Glu lle 195 200 205
Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala Lys Asp Val 210 215 220 10
Thr Gly Asp Thr Pro Leu His Leu Ala Ala 60 His Gly His Leu Val 225 230 235 240 lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala GIn Asp 245 250 255
Glu Arg Gly Trp Thr Pro Ala Asp Leu Ala Ala Asp Trp Gly His Glu 15 260 265 270
Asp lle Ala Glu Val Leu GIn Lys Ala Ala Gly Ser Pro Thr Pro Thr 275 280 285
Pro Thr Thr Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro Thr Pro Thr Pro Thr
290 295 300
Gly Ser Asp Leu Gly Lys Lys Leu Leu Glu Ala Ala Arg Ala Gly 07 305 310 315 320
Asp Asp Glu Val Arg lle Leu Met Ala Asn Gly Ala Asp Val Asn Ala 325 330 335 5
Lys Asp Glu Tyr Gly Leu Thr Pro Leu Tyr Leu Ala Thr Ala His Gly 340 345 350
His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Asn Gly Ala Asp Val Asn 355 360 365
Ala Val Asp Ala lle Gly Phe Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Phe lle 10 370 375 380
Gly His Leu Glu lle Ala Glu Val Leu Leu Lys His Gly Ala Asp Val 385 390 395 400
Asn Ala 60 Asp Lys Phe Gly Lys Thr Ala Phe Asp lle Ser lle Gly 405 410 415 15
Asn Gly Asn Glu Asp Leu Ala Glu lle Leu Gin Lys Ala Ala Gly Ser 420 425 430
Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro Thr 435 440 445
Pro Thr Pro Thr Gly Ser Asp Leu Gly Lys Lys Leu Leu Glu Ala Ala 450 455 460
Arg Ala Gly Gin Asp Asp Glu Val Arg lle Leu Met Ala Asn Gly Ala 465 470 475 480
Asp Val Asn Ala Lys Asp Tyr Phe Ser His Thr Pro Leu His Leu Ala 5 485 490 495
Ala Arg Asn Gly His Leu Lys lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly 500 505 510
Ala Asp Val Asn Ala Lys Asp Phe Ala Gly Lys Thr Pro Leu His Leu 515 520 525 10
Ala Ala Asn Asp Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys His 530 535 540
Gly Ala Asp Val Asn Ala Gin Asp lle Phe Gly Lys Thr Pro Ala Asp 545 550 555 560 lle Ala Ala Asp Ala Gly His Glu Asp lle Ala Glu Val Leu GIn Lys 15 565 570 575
Ala Ala
28 >210< 283 >211< PRT >212< <213 >متوالية صناعية >220< Protein comprising two <223>مجال تكرار أنكيرين مصمم5 28 >400<
Gly Ser Asp Leu Gly lle Lys Leu Leu Phe Ala Ala Ala Lys Gly Gin 10 1 5 10 15
Asp Asp Glu Val Arg Glu Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala
Lys Asp Phe GIn Gly Val Thr Pro Leu His lle Ala Ala Gln Ser Gly 15
His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn 60
Ala Lys Asp Val Thr Gly Asp Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Gin His 65 70 75 80
Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val 85 90 95
Asn Ala Gln Asp Glu Arg Gly Trp Thr Pro Ala Asp Leu Ala Ala Asp 100 105 110
Trp Gly His Glu Asp lle Ala Glu Val Leu GIn Lys Ala Ala Gly Ser 5 115 120 125
Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro Thr 130 135 140
Pro Thr Pro Thr Gly Ser Asp Leu Gly Lys Lys Leu Leu Glu Ala Ala 145 150 155 160 10
Arg Ala Gly Gln Asp Asp Glu Val Arg Glu Leu Leu Lys Ala Gly Ala 165 170 175
Asp Val Asn Ala Lys Asp Glu Tyr Gly Leu Thr Pro Leu Tyr Leu Ala 180 185 190
Thr Ala His Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly 15 195 200 205
Ala Asp Val Asn Ala Val Asp Ala lle Gly Phe Thr Pro Leu His Leu 210 215 220
Ala Ala Phe lle Gly His Leu Glu lle Ala Glu Val Leu Leu Lys Ala
225 230 235 240
Gly Ala Asp Val Asn Ala Gin Asp Lys Phe Gly Lys Thr Pro Ala Asp 245 250 255 lle Ala Ala Gly Ala Gly Asn Glu Asp lle Ala Glu Val Leu Gin Lys 260 265 270 5
Ala Ala Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Cys 275 280 <210> 29 <211> 414 10 <212> PRT >متوالية صناعية 213< <220> <223برتين يشتمل على ثلاثة مجالات تكرار أنكيرين مصممة 5 >400< 9
Gly Ser Asp Leu Gly Lys Lys Leu Leu Glu Ala Ala Arg Ala Gly 07 1 5 10 15
Asp Asp Glu Val Arg lle Leu Met Ala Asn Gly Ala Asp Val Asn Ala
Lys Asp Tyr Phe Ser His Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Arg Asn Gly
His Leu Lys lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn 5 60
Ala Lys Asp Phe Ala Gly Lys Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Asn Asp 65 70 75 80
Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys His Gly Ala Asp Val 85 90 95 10
Asn Ala Gin Asp lle Phe Gly Lys Thr Pro Ala Asp lle Ala Ala Asp 100 105 110
Ala Gly His Glu Asp lle Ala Glu Val Leu Gin Lys Leu Gly Gly Gly 115 120 125
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 15 130 135 140
Ser Arg Ser Asp Leu Gly Ala Lys Leu Leu Ser Asp Leu Gly Val Lys 145 150 155 160
Leu Leu Trp Ala Ala Ala Arg Gly Gin Asp Asp Glu Val Arg lle Leu
165 170 175
Leu Ala Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala Lys Asp Phe GIn Gly lle Thr 180 185 190
Pro Leu His lle Ala Ala Gin Ser Gly His Leu Glu lle Val Glu Val 195 200 205 5
Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala Lys Asp Val Thr Gly Asp 210 215 220
Thr Pro Leu His Leu Ala Ala GIn His Gly His Leu Val lle Val Glu 225 230 235 240
Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala 60 Asp Glu Arg Gly 10 245 250 255
Trp Thr Pro Ala Asp Leu Ala Ala Asp Trp Gly His Glu Asp lle Ala 260 265 270
Glu Val Leu 60 Lys Leu Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 275 280 285 15
Arg Ser Asp Leu Gly Lys Lys Leu Leu Glu Ala Ala Arg Ala Gly 07 290 295 300
Asp Asp Glu Val Arg lle Leu Met Ala Asn Gly Ala Asp Val Asn Ala 305 310 315 320
Lys Asp Glu Tyr Gly Leu Thr Pro Leu Tyr Leu Ala Thr Ala His Gly 325 330 335
His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Asn Gly Ala Asp Val Asn 340 345 350
Ala Val Asp Ala lle Gly Phe Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Phe lle 5 355 360 365
Gly His Leu Glu lle Ala Glu Val Leu Leu Lys His Gly Ala Asp Val 370 375 380
Asn Ala GIn Asp Lys Phe Gly Lys Thr Ala Phe Asp lle Ser lle Gly 385 390 395 400 10
Asn Gly Asn Glu Asp Leu Ala Glu lle Leu Gin Lys Leu Asn 405 410 <210> 30 <211> 562 15 <212> PRT >متوالية صناعية 213< <220>
<223>برتين يشتمل على أربعة مجالات تكرار أنكيرين مصممة >400< 0
Gly Ser Asp Leu Gly Lys Lys Leu Leu Glu Ala Ala Arg Ala Gly 07 1 5 10 15 5
Asp Asp Glu Val Arg lle Leu Met Ala Asn Gly Ala Asp Val Asn Ala
Lys Asp Tyr Phe Ser His Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Arg Asn Gly
His Leu Lys lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn 10 60
Ala Lys Asp Phe Ala Gly Lys Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Asn Asp 65 70 75 80
Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys His Gly Ala Asp Val 85 90 95 15
Asn Ala Gin Asp lle Phe Gly Lys Thr Pro Ala Asp lle Ala Ala Asp 100 105 110
Ala Gly His Glu Asp lle Ala Glu Val Leu Gin Lys Ala Ala Gly Gly 115 120 125
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 130 135 140
Gly Ser Gly Ser Asp Leu Gly Lys Lys Leu Leu Glu Ala Ala Arg Ala 145 150 155 160
Gly GIn Asp Asp Glu Val Arg lle Leu Met Ala Asn Gly Ala Asp Val 5 165 170 175
Asn Ala Lys Asp Tyr Phe Ser His Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Arg 180 185 190
Asn Gly His Leu Lys lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp 195 200 205 10
Val Asn Ala Lys Asp Phe Ala Gly Lys Thr Pro Leu His Leu Ala Ala 210 215 220
Asn Asp Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys His Gly Ala 225 230 235 240
Asp Val Asn Ala GIn Asp lle Phe Gly Lys Thr Pro Ala Asp lle Ala 15 245 250 255
Ala Asp Ala Gly His Glu Asp lle Ala Glu Val Leu GIn Lys Ala Ala 260 265 270
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
275 280 285
Gly Gly Gly Ser Gly Ser Asp Leu Gly Ala Lys Leu Leu Ser Asp Leu 290 295 300
Gly Val Lys Leu Leu Trp Ala Ala Ala Arg Gly 60 Asp Asp Glu Val 305 310 315 320 5
Arg lle Leu Leu Ala Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala Lys Asp Phe 07 325 330 335
Gly lle Thr Pro Leu His lle Ala Ala Gln Ser Gly His Leu Glu lle 340 345 350
Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala Lys Asp Val 10 355 360 365
Thr Gly Asp Thr Pro Leu His Leu Ala Ala 60 His Gly His Leu Val 370 375 380 lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala GIn Asp 385 390 395 400 15
Glu Arg Gly Trp Thr Pro Ala Asp Leu Ala Ala Asp Trp Gly His Glu 405 410 415
Asp lle Ala Glu Val Leu Gin Lys Ala Ala Gly Gly Gly Gly Ser Gly 420 425 430
Gly Gly Gly Ser Gly Ser Asp Leu Gly Lys Lys Leu Leu Glu Ala Ala 435 440 445
Arg Ala Gly Gin Asp Asp Glu Val Arg lle Leu Met Ala Asn Gly Ala 450 455 460
Asp Val Asn Ala Lys Asp Glu Tyr Gly Leu Thr Pro Leu Tyr Leu Ala 5 465 470 475 480
Thr Ala His Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Asn Gly 485 490 495
Ala Asp Val Asn Ala Val Asp Ala lle Gly Phe Thr Pro Leu His Leu 500 505 510 10
Ala Ala Phe lle Gly His Leu Glu lle Ala Glu Val Leu Leu Lys His 515 520 525
Gly Ala Asp Val Asn Ala Gin Asp Lys Phe Gly Lys Thr Ala Phe Asp 530 535 540 lle Ser lle Gly Asn Gly Asn Glu Asp Leu Ala Glu lle Leu GIn Lys 15 545 550 555 560
Ala Ala
<210> 31 <211> 580 <212> PRT >متوالية صناعية 213< <220> <223>برتين يشتمل على أربعة مجالات تكرار أنكيرين مصممة <400> 1
Met Arg Gly Ser His His His His His His Gly Ser Asp Leu Gly Lys 10 1 5 10 15
Lys Leu Leu Glu Ala Ala Arg Ala Gly Gln Asp Asp Glu Val Arg Glu
Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala Lys Asp Tyr Phe Ser His 15
Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Arg Asn Gly His Leu Lys lle Val Glu 60
Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala Lys Asp Phe Ala Gly 65 70 75 80
Lys Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Asn Glu Gly His Leu Glu lle Val 85 90 95
Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala GIn Asp lle Phe 100 105 110
Gly Lys Thr Pro Ala Asp lle Ala Ala Asp Ala Gly His Glu Asp lle 5 115 120 125
Ala Glu Val Leu Gin Lys Ala Ala Gly Ser Pro Thr Pro Thr Pro Thr 130 135 140
Thr Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro Thr Pro Thr Pro Thr Gly Ser 145 150 155 160 10
Asp Leu Gly lle Lys Leu Leu Phe Ala Ala Ala Lys Gly Gin Asp Asp 165 170 175
Glu Val Arg Glu Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala Lys Asp 180 185 190
Phe Gin Gly Val Thr Pro Leu His lle Ala Ala GIn Ser Gly His Leu 15 195 200 205
Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala Lys 210 215 220
Asp Val Thr Gly Asp Thr Pro Leu His Leu Ala Ala GIn His Gly His
225 230 235 240
Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala 245 250 255
Gln Asp Glu Arg Gly Trp Thr Pro Ala Asp Leu Ala Ala Asp Trp Gly 260 265 270 5
His Glu Asp lle Ala Glu Val Leu Gin Lys Ala Ala Gly Ser Pro Thr 275 280 285
Pro Thr Pro Thr Thr Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro Thr Pro Thr 290 295 300
Pro Thr Gly Ser Asp Leu Gly Lys Lys Leu Leu Glu Ala Ala Arg Ala 10 305 310 315 320
Gly GIn Asp Asp Glu Val Arg Glu Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val 325 330 335
Asn Ala Lys Asp Glu Tyr Gly Leu Thr Pro Leu Tyr Leu Ala Thr Ala 340 345 350 15
His Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp 355 360 365
Val Asn Ala Val Asp Ala lle Gly Phe Thr Pro Leu His Leu Ala Ala 370 375 380
Phe lle Gly His Leu Glu lle Ala Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala 385 390 395 400
Asp Val Asn Ala GIn Asp Lys Phe Gly Lys Thr Pro Ala Asp lle Ala 405 410 415
Ala Gly Ala Gly Asn Glu Asp lle Ala Glu Val Leu ماك Lys Ala Ala 5 420 425 430
Gly Ser Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr 435 440 445
Pro Thr Pro Thr Pro Thr Gly Ser Asp Leu Gly Lys Lys Leu Leu Glu 450 455 460 10
Ala Ala Arg Ala Gly GIn Asp Asp Glu Val Arg Glu Leu Leu Lys Ala 465 470 475 480
Gly Ala Asp Val Asn Ala Lys Asp Tyr Phe Ser His Thr Pro Leu His 485 490 495
Leu Ala Ala Arg Asn Gly His Leu Lys lle Val Glu Val Leu Leu Lys 15 500 505 510
Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala Lys Asp Phe Ala Gly Lys Thr Pro Leu 515 520 525
His Leu Ala Ala Asn Glu Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu
530 535 540
Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala GIn Asp lle Phe Gly Lys Thr Pro 545 550 555 560
Ala Asp lle Ala Ala Asp Ala Gly His Glu Asp lle Ala Glu Val Leu 565 570 575 5
Gln Lys Ala Ala 580 <210> 32 <211> 274 10 <212> PRT >متوالية صناعية 213< <220> <223>برتين يشتمل على مجالي تكرار أنكيرين مصممين 5 >400< 2
Gly Ser Asp Leu Gly lle Lys Leu Leu Phe Ala Ala Ala Lys Gly 07 1 5 10 15
Asp Asp Glu Val Arg Glu Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala
Lys Asp Phe GIn Gly Val Thr Pro Leu His lle Ala Ala Gln Ser Gly
His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn 5 60
Ala Lys Asp Val Thr Gly Asp Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Gin His 65 70 75 80
Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val 85 90 95 10
Asn Ala Gln Asp Glu Arg Gly Trp Thr Pro Ala Asp Leu Ala Ala Asp 100 105 110
Trp Gly His Glu Asp lle Ala Glu Val Leu GIn Lys Ala Ala Gly Ser 115 120 125
Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro Thr 15 130 135 140
Pro Thr Pro Thr Gly Ser Asp Leu Gly Lys Lys Leu Leu Glu Ala Ala 145 150 155 160
Arg Ala Gly Gln Asp Asp Glu Val Arg Glu Leu Leu Lys Ala Gly Ala
165 170 175
Asp Val Asn Ala Lys Asp Glu Tyr Gly Leu Thr Pro Leu Tyr Leu Ala 180 185 190
Thr Ala His Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly 195 200 205 5
Ala Asp Val Asn Ala Val Asp Ala lle Gly Phe Thr Pro Leu His Leu 210 215 220
Ala Ala Phe lle Gly His Leu Glu lle Ala Glu Val Leu Leu Lys Ala 225 230 235 240
Gly Ala Asp Val Asn Ala 60 Asp Lys Phe Gly Lys Thr Pro Ala Asp 10 245 250 255 lle Ala Ala Gly Ala Gly Asn Glu Asp lle Ala Glu Val Leu GIn Lys 260 265 270
Ala Ala <210> 33 <211> 422 <212> PRT
<213>متوالية صناعية <220> >برتين يشتمل على ثلاثة مجالات تكرار أنكيرين مصممة 223< <400> 3
Gly Ser Asp Leu Gly Lys Lys Leu Leu Glu Ala Ala Arg Ala Gly Gin 1 5 10 15
Asp Asp Glu Val Arg Glu Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala 10
Lys Asp Tyr Phe Ser His Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Arg Asn Gly
His Leu Lys lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn 60
Ala Lys Asp Phe Ala Gly Lys Thr Pro Leu His Leu Ala Ala Asn Glu 15 65 70 75 80
Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val 85 90 95
Asn Ala GIn Asp lle Phe Gly Lys Thr Pro Ala Asp lle Ala Ala Asp
100 105 110
Ala Gly His Glu Asp lle Ala Glu Val Leu Gin Lys Ala Ala Gly Ser 115 120 125
Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro Thr 130 135 140 5
Pro Thr Pro Thr Gly Ser Asp Leu Gly lle Lys Leu Leu Phe Ala Ala 145 150 155 160
Ala Lys Gly Gln Asp Asp Glu Val Arg Glu Leu Leu Lys Ala Gly Ala 165 170 175
Asp Val Asn Ala Lys Asp Phe (ا6 Gly Val Thr Pro Leu His lle Ala 10 180 185 190
Ala GIn Ser Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala Gly 195 200 205
Ala Asp Val Asn Ala Lys Asp Val Thr Gly Asp Thr Pro Leu His Leu 210 215 220 15
Ala Ala GIn His Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu Leu Lys Ala 225 230 235 240
Gly Ala Asp Val Asn Ala 60 Asp Glu Arg Gly Trp Thr Pro Ala Asp 245 250 255
Leu Ala Ala Asp Trp Gly His Glu Asp lle Ala Glu Val Leu Gin Lys 260 265 270
Ala Ala Gly Ser Pro Thr Pro Thr Pro Thr Thr Pro Thr Pro Thr Pro 275 280 285
Thr Thr Pro Thr Pro Thr Pro Thr Gly Ser Asp Leu Gly Lys Lys Leu 5 290 295 300
Leu Glu Ala Ala Arg Ala Gly GIn Asp Asp Glu Val Arg Glu Leu Leu 305 310 315 320
Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala Lys Asp Glu Tyr Gly Leu Thr Pro 325 330 335 10
Leu Tyr Leu Ala Thr Ala His Gly His Leu Glu lle Val Glu Val Leu 340 345 350
Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala Val Asp Ala lle Gly Phe Thr 355 360 365
Pro Leu His Leu Ala Ala Phe lle Gly His Leu Glu lle Ala Glu Val 15 370 375 380
Leu Leu Lys Ala Gly Ala Asp Val Asn Ala GIn Asp Lys Phe Gly Lys 385 390 395 400
Thr Pro Ala Asp lle Ala Ala Gly Ala Gly Asn Glu Asp lle Ala Glu
405 410 415
Val Leu GIn Lys Ala Ala 420
Claims (10)
1. بروتين رابط binding protein ناتج عن عودة الارتباط الجيني recombinant يشتمل على متوالية حمض أميني amino acid sequence بها تطابق لمتوالية الحمض الأميني amino acid sequence مع المتوالية رقم: 21( حيث يشتمل البروتين الرابط المذكور على نطاقي تكرار أنكيرين 8010/00 مصممين بنوعية ارتباط تجاه مستقبل عامل sail البشروي البشري 2 HER2 Human Epidermal Growth Factor Receptor 2 5 ونطاقي تكرار أنكيرين 07 مصممين بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل serum albumin ¢ حيث يحيط نطاقي تكرار الأنكيرين Ankyrin المذكورين المصممين بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل serum albumin بنطاقي تكرار الأنكيرين ankyrin المذكورين المصممين بنوعية ارتباط تجاه 1142 0 حيث يكون البروتين الرابط binding protein الناتج عن sage الارتباط الجيني recombinant المذكور قادرًا على الارتباط ب HERZ وألبومين مصل serum albumin في وقت واحد؛ و Cus يشتمل كل من نطاقي تكرار الأنكيرين 8016710 المذكورين المصممين بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل serum albumin على متوالية الحمض الأميني amino acid sequence رقم: 14.
2. البروتين الرابط binding protein الناتج عن عودة الارتباط الجيني Ls, recombinant لعنصر الحماية 1؛ حيث يشتمل البروتين الرابط المذكور على متوالية حمض أميني amino acid sequence بها تطابق لمتوالية حمض أميني amino acid sequence مع المتوالية رقم: 21.
3. البروتين الرابط binding protein الناتج عن عودة الارتباط الجيني Ls, recombinant لعنصر الحماية 1؛ حيث يشتمل البروتين الرابط المذكور على متوالية حمض أميني amino acid sequence بها تطابق لمتوالية حمض أميني amino acid sequence مع المتوالية رقم: 21.
4. البروتين الرابط binding protein الناتج عن sae الارتباط الجينى Ly recombinant لعنصر الحماية 1 حيث يشتمل البروتين الرابط المذكور على متوالية الحمض الأمينى amino acid sequence رقم: 21.
5. البروتين الرابط binding protein الناتج عن عودة الارتباط الجينى Li, recombinant لعنصر الحماية 1 حيث يتألف البروتين الرابط المذكور من متوالية الحمض الأمينى amino acid sequence رقم: 21.
6. البروتين الرابط binding protein الناتج عن عودة الارتباط الجينى Li, recombinant 0 لعنصر الحماية 1؛ حيث يقوم البروتين الرابط المذكور بتثبيط تكاثر خلية 81474 بثابت تثبيط يقل عن 7-10 مولار.
7. البروتين الرابط binding protein الناتج عن عودة الارتباط الجينى Li, recombinant لعنصر الحماية 1؛ حيث البروتين الرابط المذكور عند تركيز 100 نانو مولار يظهر انخفاضًا bie 5 أقوى لفسفرة phosphorylation AKT-S473 فى Wa 87474 من التراستوزوماب عند تركيز 100 نانو مولار.
8. البروتين الرابط binding protein الناتج عن عودة الارتباط الجينى Li, recombinant لعنصر الحماية 1 Cus يرتبط البروتين الرايبط المذكور ب HER2 البشري فى PBS بثابت تفكك (Kd) dissociation constant 0 يقل عن 7-10 مولارء وحيث يرتبط البروتين الرابط بألبومين مصل serum albumin بشري في PBS بثابت تفكك (Kd) dissociation constant يقل عن 7-10 مولار.
9. بروتين binding protein Lay ناتج عن sage الارتباط الجيني recombinant يشتمل على نطاق رابط مصمم بنوعية ارتباط تجاه H ER? ونطاق تكرار أنكيرين ankyrin مصمم بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل serum albumin ؛ حيث يشتمل النطاق الرابط المذكور المصمم
بنوعية ارتباط تجاه HERZ على متوالية الحمض الأميني amino acid sequence رقم: 16؛ وحيث يشتمل نطاق تكرار الأنكيرين ankyrin المصمم بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل serum albumin على متوالية الحمض الأمينى amino acid sequence رقم: 14.
10. البروتين الرابط binding protein الناتج عن عودة الارتباط الجينى Li, recombinant لعنصر الحماية 9 حيث يتم ربط النطاق الرايبط المذكور المصمم بنوعية ارتباط تجاه ER2 ونطاق تكرار الأنكيرين 80167010 المصمم بنوعية ارتباط تجاه ألبومين مصل serum albumin بواسطة رابط بولى polypeptide linker ain . 0 11. البروتين الرابط binding protein الناتج عن sae الارتباط الجينى Ly recombinant لعنصر الحماية 9 أو 10( حيث يشتمل البروتين الرابط المذكور على متوالية حمض أميني amino acid sequence بها تطابق لمتوالية حمض أمينى amino acid sequence مع المتوالية رقم : 21 5 12. بروتين رابط binding protein ناتج عن sage الارتباط recombinant all يشتمل على متوالية الحمض الأمينى amino acid sequence رقم: 21.
3. حمض نووي يرمّز nucleic acid encoding البروتين الرابط binding protein الناتج عن sage الارتباط الجينى recombinant وففقًا لعنصر الحماية 1 أو 9.
4. حمض نووي يرمّز nucleic acid encoding البروتين الرابط binding protein الناتج عن sage الارتباط الجينى Gag recombinant لعنصر الحماية 12.
5. تركيببة صيدلانية مشتملة على البروتين الرابط binding protein الناتج عن عودة الارتباط 5 الجيني Gy recombinant لعنصر الحماية 1 أو 9 أو 12 ومادة حاملة carrier و/أو مخففة diluent مقبولة صيدلانيًا.
6. التركيببة الصيدلانية وفقًا لعنصر الحماية 15؛ لعلاج HERZ الذي يعبر تعبيرًا hs عن
.cancer سرطان
7. التركيببة الصيدلانية وفقًا لعنصر الحماية 16؛ حيث يكون السرطان cancer هو سرطان الثدي breast cancer ؛ سرطان المبيض ovarian cancer ؛ السرطان المّعدي gastric
.stomach cancer أو سرطان المّعدة cancer
8. التركيببة الصيدلانية وفقًا لعنصر الحماية 16؛ حيث يكون HER2 الذي يعبر mad وراثى عن السرطان cancer هو HER2 الذي يعبر تعبيرًا وراثيًا Unie عن السرطان cancer ؛ أو 0 السرطان المدمن addicted cancer على (HER2 أو السرطان المدمن addicted cancer
.HER2 amplified cancer أو السرطان المتضخم «Ga HER2 على
١ شكل bu rr Lo] Lo] و ع
0 4 ب rE Vif 1 ع #خجيعم؟ YY Fo خخ saa اا الت لد مض ا بال La ال ا ال oe a RAR 0 : a 2 ْ' ا “ شكل ® A AZNB و3 © 1 يج Ed با 8 لب Be اج + vo, ¥ x x SEE ty x TV th, ty * Ty % 5 *
شكل ا م4 3 xg oe ' . اجاج + ٍ 1 ٍ <i i from : ُ: ٍ 3 Hoek ٍ 3 a ¢ ١
+ . 3 a jo +4 ¥ با ا * ل يه Re حهينا 8 concord i {| = TIT gee Rg . 0 ti Ta TA va i : 0 س# 8 et شكل * تت Noe جد Boa x ٍْ v ا v » Pos ٍ كيه ض Aa و ا + ف "يه ال اس v : : لد dh عاك | » ET mn : & & $y TE x rE
* de > 0 *« فشجيز حخ Few ١ * 0 J لين الو i > | اا ox § م ل ٍ fone Ck heer] 0" i - اي conn : xs, eg seman مم “eg Cy ؟؛0 0+) A 3s AY rE ١ ١ .؟# t شكل ؛د 83 ho 3 ص بين ام teed = ~ 4 i Sl i » 0 = ٍ y va Be To | SA ١ a rr n Va ¥ won ed ير يلا 8 3 أي Benn Lx - Col j ين ; ' EER مد اح جد با Be ew ae 3 IN 4 مجع ° EE EE VE TIES ST 4 لح 3 i
At شكل م 0+ ل ا“ + wv Jd A
ِ . Lat م ; احا * تحب by Sg 3 boi S AL] ¥ م fh" = CoA RN ع ol اا ا ep - سلا 4 | eeu. بصب ١ اع oil 5 ار i i - — َ & ولا Ya ب Eos 4 1 fo شكل Yaw ال 1 ١ on, 8 مهنا : 3 8 ل ١ wm لج ># 7 ا ا ay ذا 9 1 : * % * + > + ١ £ » 5 * $ *
no شكل Br , x x « 3 3 3 wow 5 inane 3 1
3. ~~" a 2 3 % & ¥ » ¥ ب * + a Cl & شكل تت Vem i Tr se di oe لا ٠ TS = ] جا م Ys ¥ a ye © £ % oa he t in شكل ول واج أ Yas i a NY * 2 a Yoga Ya aw § u ah شكل "ب Yoav ag Vues ! gy : 3 * 3 لساك fe 0-0 . ع “ 8 . Ved “o ض *ٍِ أ ٍ + Ya Tas Pao t
V I< : > A + عع اج خ ا | A 0 ف fers A I’ 0 - اب" 4 ص = 3 L, ug: TE د 8 ا بج عو - LE ty » "4a YY * ا ® 5 * oo
الحاضهة الهيلة السعودية الملضية الفكرية Swed Authority for intallentual Property pW RE .¥ + \ ا 0 § ام 5 + < Ne ge ”بن اج > عي كي الج دا لي ايام TEE ببح ةا Nase eg + Ed - 2 - 3 .++ .* وذلك بشرط تسديد المقابل المالي السنوي للبراءة وعدم بطلانها of سقوطها لمخالفتها ع لأي من أحكام نظام براءات الاختراع والتصميمات التخطيطية للدارات المتكاملة والأصناف ع النباتية والنماذج الصناعية أو لائحته التنفيذية. »> صادرة عن + ب ب ٠. ب الهيئة السعودية للملكية الفكرية > > > ”+ ص ب 101١ .| لريا 1*١ uo ؛ المملكة | لعربية | لسعودية SAIP@SAIP.GOV.SA
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP16190221 | 2016-09-22 | ||
| PCT/EP2017/073768 WO2018054971A1 (en) | 2016-09-22 | 2017-09-20 | Recombinant binding proteins and their use |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SA519401369B1 true SA519401369B1 (ar) | 2022-12-22 |
Family
ID=57046984
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SA519401369A SA519401369B1 (ar) | 2016-09-22 | 2019-03-20 | بروتينات رابطة ناتجة عن عودة الارتباط الجيني واستخدامها |
Country Status (20)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US10717772B2 (ar) |
| EP (1) | EP3515933B9 (ar) |
| JP (1) | JP6976335B2 (ar) |
| KR (1) | KR102270315B1 (ar) |
| CN (1) | CN109790206A (ar) |
| AR (1) | AR109680A1 (ar) |
| AU (1) | AU2017331329B2 (ar) |
| BR (1) | BR112019005587A2 (ar) |
| CA (1) | CA3036301C (ar) |
| CL (1) | CL2019000729A1 (ar) |
| CO (1) | CO2019002609A2 (ar) |
| ES (1) | ES2953516T3 (ar) |
| IL (1) | IL265489B (ar) |
| MX (1) | MX2019003298A (ar) |
| MY (1) | MY196882A (ar) |
| NZ (1) | NZ751689A (ar) |
| PH (1) | PH12019500596A1 (ar) |
| SA (1) | SA519401369B1 (ar) |
| WO (1) | WO2018054971A1 (ar) |
| ZA (1) | ZA201901592B (ar) |
Families Citing this family (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| MX2021014601A (es) * | 2019-06-04 | 2022-02-11 | Molecular Partners Ag | Proteinas recombinantes de union a fap y su uso. |
| TW202112804A (zh) | 2019-06-04 | 2021-04-01 | 瑞士商分子夥伴股份有限公司 | 多特異性蛋白質 |
| KR20220016944A (ko) | 2019-06-04 | 2022-02-10 | 몰리큘라 파트너스 아게 | 개선된 안정성을 갖는 설계된 안키린 반복 도메인 |
| MX2022007122A (es) | 2019-12-11 | 2022-09-09 | Molecular Partners Ag | Dominios de repetición de anquirina diseñados con residuos de superficie alterados. |
| CA3176845A1 (en) | 2020-05-06 | 2021-11-11 | Patrick AMSTUTZ | Novel ankyrin repeat binding proteins and their uses |
| IL298168A (en) | 2020-05-14 | 2023-01-01 | Molecular Partners Ag | Multispecific proteins |
| CN115996945A (zh) * | 2020-05-14 | 2023-04-21 | 分子合作伙伴股份公司 | 重组cd40结合蛋白及其用途 |
| WO2022130300A1 (en) | 2020-12-16 | 2022-06-23 | Molecular Partners Ag | Novel slow-release prodrugs |
| EP4304729A1 (en) | 2021-03-09 | 2024-01-17 | Molecular Partners AG | Novel darpin based cd123 engagers |
| WO2022190016A1 (en) | 2021-03-09 | 2022-09-15 | Molecular Partners Ag | Novel darpin based multi-specific t-cell engagers |
| CA3211248A1 (en) | 2021-03-09 | 2022-09-15 | Nina RESCHKE | Novel darpin based cd33 engagers |
| JP2024509890A (ja) | 2021-03-09 | 2024-03-05 | モレキュラー パートナーズ アクチェンゲゼルシャフト | プロテアーゼ切断可能なプロドラッグ |
| WO2023110983A1 (en) | 2021-12-14 | 2023-06-22 | Molecular Partners Ag | Designed repeat domains with dual binding specificity and their use |
| WO2024028278A1 (en) | 2022-08-01 | 2024-02-08 | Molecular Partners Ag | Charge modified designed repeat domains and their use |
| WO2024038307A1 (en) | 2022-08-19 | 2024-02-22 | Novartis Ag | Dosing regimens for sars-cov-2 binding molecules |
Family Cites Families (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SE509359C2 (sv) | 1989-08-01 | 1999-01-18 | Cemu Bioteknik Ab | Användning av stabiliserade protein- eller peptidkonjugat för framställning av ett läkemedel |
| US7371376B1 (en) | 1996-10-18 | 2008-05-13 | Genentech, Inc. | Anti-ErbB2 antibodies |
| ATE448301T1 (de) | 2000-09-08 | 2009-11-15 | Univ Zuerich | Sammlung von proteinen mit sich wiederholenden sequenzen (repeat proteins), die repetitive sequenzmodule enthalten |
| EP2518142B1 (en) * | 2001-08-24 | 2015-07-15 | UVic Industry Partnerships Inc. | Proaerolysin containing protease activation sequences and methods of use for treatment of prostate cancer |
| NZ585895A (en) | 2004-11-12 | 2011-05-27 | Bayer Schering Pharma Ag | Recombinant newcastle disease virus comprising a transgene encoding a fusion protein comprising a binding domain and a heterologous domain comprising a toxin |
| CA2614512C (en) | 2005-07-08 | 2014-01-07 | University Of Zuerich | Phage display using cotranslational translocation of fusion polypeptides |
| WO2009040338A1 (en) | 2007-09-24 | 2009-04-02 | University Of Zürich | Designed armadillo repeat proteins |
| WO2009068630A1 (en) | 2007-11-27 | 2009-06-04 | Ablynx N.V. | Immunoglobulin constructs |
| WO2010060748A1 (en) | 2008-11-03 | 2010-06-03 | Molecular Partners Ag | Binding proteins inhibiting the vegf-a receptor interaction |
| AR081361A1 (es) | 2010-04-30 | 2012-08-29 | Molecular Partners Ag | Proteinas de union modificadas que inhiben la interaccion de receptor del factor de crecimiento endotelial vascular de glicoproteina a vegf-a |
| ES2758352T3 (es) | 2010-11-26 | 2020-05-05 | Molecular Partners Ag | Proteínas de repetición diseñadas que se une a la seroalbúmina |
| AU2012249359A1 (en) | 2011-04-29 | 2013-11-14 | Janssen Biotech, Inc. | IL4/IL13 binding repeat proteins and uses |
| AU2013283296A1 (en) | 2012-06-28 | 2015-02-05 | Molecular Partners Ag | Designed ankyrin repeat proteins binding to platelet-derived growth factor |
| US10093740B2 (en) | 2012-10-15 | 2018-10-09 | Universitat Zurich | Bispecific HER2 ligands for cancer therapy |
| EP2738180A1 (en) | 2012-11-30 | 2014-06-04 | Molecular Partners AG | Binding proteins comprising at least two binding domains against HER2. |
| EP3004152B1 (en) | 2013-05-31 | 2020-09-30 | Molecular Partners AG | Designed ankyrin repeat proteins binding to hepatocyte growth factor |
| BR112017020986A2 (pt) | 2015-04-02 | 2018-08-14 | Molecular Partners Ag. | proteínas de ligação recombinantes e seu uso |
-
2017
- 2017-09-20 US US15/710,001 patent/US10717772B2/en active Active
- 2017-09-20 CA CA3036301A patent/CA3036301C/en active Active
- 2017-09-20 WO PCT/EP2017/073768 patent/WO2018054971A1/en unknown
- 2017-09-20 AU AU2017331329A patent/AU2017331329B2/en active Active
- 2017-09-20 EP EP17778226.5A patent/EP3515933B9/en active Active
- 2017-09-20 BR BR112019005587A patent/BR112019005587A2/pt unknown
- 2017-09-20 AR ARP170102593A patent/AR109680A1/es unknown
- 2017-09-20 MX MX2019003298A patent/MX2019003298A/es active IP Right Grant
- 2017-09-20 CN CN201780058511.0A patent/CN109790206A/zh active Pending
- 2017-09-20 MY MYPI2019001523A patent/MY196882A/en unknown
- 2017-09-20 NZ NZ751689A patent/NZ751689A/en unknown
- 2017-09-20 KR KR1020197009396A patent/KR102270315B1/ko active IP Right Grant
- 2017-09-20 ES ES17778226T patent/ES2953516T3/es active Active
- 2017-09-20 JP JP2019536693A patent/JP6976335B2/ja active Active
-
2019
- 2019-03-14 ZA ZA2019/01592A patent/ZA201901592B/en unknown
- 2019-03-19 PH PH12019500596A patent/PH12019500596A1/en unknown
- 2019-03-19 IL IL265489A patent/IL265489B/en unknown
- 2019-03-20 SA SA519401369A patent/SA519401369B1/ar unknown
- 2019-03-21 CL CL2019000729A patent/CL2019000729A1/es unknown
- 2019-03-21 CO CONC2019/0002609A patent/CO2019002609A2/es unknown
-
2020
- 2020-06-22 US US16/907,415 patent/US20210130420A1/en not_active Abandoned
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| MX2019003298A (es) | 2019-09-26 |
| ZA201901592B (en) | 2021-04-28 |
| KR20190050802A (ko) | 2019-05-13 |
| US20180155402A1 (en) | 2018-06-07 |
| JP6976335B2 (ja) | 2021-12-08 |
| NZ751689A (en) | 2021-07-30 |
| CL2019000729A1 (es) | 2019-06-14 |
| US20210130420A1 (en) | 2021-05-06 |
| RU2019111628A3 (ar) | 2020-10-30 |
| CO2019002609A2 (es) | 2019-05-31 |
| EP3515933A1 (en) | 2019-07-31 |
| US10717772B2 (en) | 2020-07-21 |
| RU2019111628A (ru) | 2020-10-19 |
| MY196882A (en) | 2023-05-08 |
| AU2017331329B2 (en) | 2020-10-29 |
| EP3515933B1 (en) | 2023-06-07 |
| WO2018054971A1 (en) | 2018-03-29 |
| KR102270315B1 (ko) | 2021-06-29 |
| CA3036301A1 (en) | 2018-03-29 |
| PH12019500596A1 (en) | 2019-07-29 |
| ES2953516T3 (es) | 2023-11-14 |
| IL265489B (en) | 2021-07-29 |
| BR112019005587A2 (pt) | 2019-06-11 |
| EP3515933C0 (en) | 2023-06-07 |
| JP2019531093A (ja) | 2019-10-31 |
| IL265489A (en) | 2019-05-30 |
| AR109680A1 (es) | 2019-01-09 |
| AU2017331329A1 (en) | 2019-04-04 |
| CN109790206A (zh) | 2019-05-21 |
| EP3515933B9 (en) | 2023-08-16 |
| CA3036301C (en) | 2021-04-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| SA519401369B1 (ar) | بروتينات رابطة ناتجة عن عودة الارتباط الجيني واستخدامها | |
| RU2664464C2 (ru) | Связывающие белки, содержащие по меньшей мере две повторяющиеся области-антагонисты HER2 | |
| KR102427117B1 (ko) | 혈청 알부민에 대한 결합 특이성을 갖는 설계된 안키린 반복 도메인 | |
| RU2627185C1 (ru) | Новые связывающие молекулы с противоопухолевой активностью | |
| JP2021517472A (ja) | 抗ｐｄ−ｌ１ワクチン組成物 | |
| Calce et al. | HER2-mediated anticancer drug delivery: strategies to prepare targeting ligands highly specific for the receptor | |
| US20210395396A1 (en) | Her2-binding tetrameric polypeptides | |
| RU2778346C2 (ru) | Рекомбинантные связывающие белки и их применение | |
| KR20210075080A (ko) | Her2-결합 사량체 폴리펩티드 |