SA516380455B1 - أجسام مضادة موجهة لمضادة cd127 - Google Patents

أجسام مضادة موجهة لمضادة cd127 Download PDF

Info

Publication number
SA516380455B1
SA516380455B1 SA516380455A SA516380455A SA516380455B1 SA 516380455 B1 SA516380455 B1 SA 516380455B1 SA 516380455 A SA516380455 A SA 516380455A SA 516380455 A SA516380455 A SA 516380455A SA 516380455 B1 SA516380455 B1 SA 516380455B1
Authority
SA
Saudi Arabia
Prior art keywords
sequence
antibody
antigen
cells
antibodies
Prior art date
Application number
SA516380455A
Other languages
English (en)
Inventor
فانهوف برنارد
ماري كارولين
بويرير نيكولاس
Original Assignee
او اس إيه امينوثيرابيوتيكس
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=52434718&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=SA516380455(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by او اس إيه امينوثيرابيوتيكس filed Critical او اس إيه امينوثيرابيوتيكس
Publication of SA516380455B1 publication Critical patent/SA516380455B1/ar

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2866—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against receptors for cytokines, lymphokines, interferons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/14—Drugs for disorders of the endocrine system of the thyroid hormones, e.g. T3, T4
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
    • G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
    • G01N33/502—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics for testing non-proliferative effects
    • G01N33/5041—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics for testing non-proliferative effects involving analysis of members of signalling pathways
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6854—Immunoglobulins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C07K2317/732—Antibody-dependent cellular cytotoxicity [ADCC]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/77—Internalization into the cell
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/52—Assays involving cytokines
    • G01N2333/54—Interleukins [IL]
    • G01N2333/5418—IL-7
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • G01N2333/70546—Integrin superfamily, e.g. VLAs, leuCAM, GPIIb/GPIIIa, LPAM
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • G01N2333/715—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants for cytokines; for lymphokines; for interferons
    • G01N2333/7155—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants for cytokines; for lymphokines; for interferons for interleukins [IL]
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2500/00—Screening for compounds of potential therapeutic value

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)

Abstract

يتعلق الاختراع بأجسام مضادة antibodies موجهة لمضادة CD127 ،سلسلة ألفا alpha chain من إنترليوكين interleukin 7 (IL-7) لمستقبل IL-7R) والتي يكون لها خصائص مضادة لتفاعل IL-7-IL-7R والتي يمكن أن تعرض نشاطاً ساما للخلايا في مقابل خلايا موجبة لـ CD127 ولكنها لا تزيد من النضج الخاص بالخلايا التغضنية dendritic cells (DCs) التي تم حثها بواسطة TSLP والسيتوكين cytokine باستخدام CD127 في شكل جزء من المستقبل. وعلى نحو بديل، أو على نحو إضافي، فإن تلك الأجسام المضادة لا تحث المعالجة الداخلية لـ CD127 و/أو لا تثبط المعالجة الداخلية not induce the internalization المستحثة بـ IL7 من CD127. وطبقاً لسمة أخرى من الاختراع الحالي تقوم الأجسام المضادة التي تم توفيرها بالتعرف على القمة اللاصقة epitope البشرية لـ CD127 التي تشتمل على متواليات من موضع 2b CD127، وعلى نحو خاص فإن تشتمل القمة اللاصقة على متواليات CD127 بشرية من نطاق D1 ومن موضع 2b من CD127 وعلى نحو خاص تشتمل القمة اللاصقة على متوالية واحدة على الأقل من D1 بها المتوالية بهوية رقم 115 (على نحو خاص تشتمل على المتوالية بهوية رقم 110) و/أو المتوالية

Description

أجسام مضادة موجهة لمضادة ‎CD127‏ ‎Antibodies Directed Against CD127‏ الوصف الكامل خلفية الاختراع يتعلق الاختراع الحالي بمجال الأجسام المضادة الموجهة ضد الوحدة الفرعية ألفا لمستقبل إنترلوكين
IL- ‏أو‎ IL-7Ralpha ‏أو‎ (p90 IL-TR ‏(7-اا)؛ المسمى 60127 أو‎ 7 interleukin ‎7RO -‏ وأحياناً ‎L-7RO - aud‏ وبصفة خاصة السلسلة ألفا من مستقبل 7-اا المعبر عنه ‏5 على الخلايا البشرية. وتتميز هذه الأجسام المضادة بخواص مضادة لتفاعل ‎L-T-IL-TR‏ وقد ‏تعطي نشاطاً ساماً للخلايا ضد الخلايا موجبة 60127 ولكنها لا تزيد نضج الخلايا التغضنية ‎CD127 ‏أيضاً يستخدم‎ cytokine ‏المستحثة ب ©151, السيتوكين‎ (DCs) dendritic cells ‏كجزه من مستقبله. على نحو بديل, أو بالإضافة إلى ذلك, هذه الأجسام المضادة لا تستحث ‏المعالجة الداخلية 0127© و/ أو تثبط المعالجة الداخلية المستحثة ل7ا1 ل 00127. وفقاً لسمة 0 أخرى للاختراع يتم توفير أجسام مضادة تتعرف على ‎dad‏ لاصقة ل00127 بشرية حيث تشتمل ‏على متواليات من الموضع 20 ل 010127, بشكل خاص تشتمل القمة اللاصقة على متواليات ‏7 بشري للنطاق 01 و الموضع 20 ل 00127, بشكل خاص تشتمل القمة اللاصقة على ‏متوالية واحدة على الأقل من ‎Cua D1‏ تشتمل على المتوالية برقم هوية: 115 (بشكل خاص ‏تشتمل على المتوالية برقم هوية: 110) و متوالية من الموضع 20 حيث تشتمل على المتوالية رقم: 116 و اختيارياً أيضاً تشتمل على المتوالية برقم هوية: 117 (بشكل خاص تشتمل على المتوالية ‏برقم هوية: 111). ‏بالتالي فإن الأجسام المضادة الخاصة بالاختراع مناسبة للاستخدام في علاج حالة تم تشخيصها في ‎(aise‏ بشري ناتجة عن إمراض متعلق بالليمفاويات؛ عندما توفر مسارات إشارات 7-اا مساهمة ‏للإمراض المذكور خاصة عندما لا تكون الزيادة في النتضج؛ وبشكل أدق زيادة جزيئات يتم حثها 0 بشكل مشترك من الخلايا التغضنية أمراً مرغوباً فيه. ‏الكيمياء الحيوية
يُعد 00127 شائعاً بالنسبة إلى مستقبل ‎(IL-7R‏ 7-اا) و بالنسبة لمستقبل ‎TSLP‏ ‎(TSLPR)‏ يتكون 4ا7-اا من دايمر غير متجانس ‎heterodimer‏ ل ‎CD127‏ وسلسلة جاما المشتركة ‎(yc) y common gamma chain‏ لمستقبلات إنترليوكين ‎interleukin‏ أحياناً يشار إلى سلسلة جاما المشتركة ‎ye‏ في الوثيقة الحالية وفي المراجع باسم ‎.CD132‏ يرتبط ‎IL=‏ ‏5 74 بواسطة إنترليوكين 7. يمثل مستقبل ‎TSLP‏ دايمر غير متجانس ل ‎CD127‏ وعامل ‎and‏ ‏بمستقبل سيتوكين 2 (04172). يرتبط مستقبل ‎TSLP‏ ب 1510. في المراجع, يستخدم ‎TSLPR‏ أحياناً لتسمية كل من سلسلة ‎CRLF2‏ للمستقبل, ومعقد ‎CD127/CRLF2‏ . من أجل تجنب الخلط, ‎Lad‏ يلي تحدد ‎sale TSLPR‏ المعقد. يمكن أن يوجد ‎(Swiss Prot accession number P16871) D127‏ في أربع صور 0 متساوية. تمثل الصورة المماثلة التقليدية, أيضاً يُطلق عليه ‎(Swiss Prot P16871.1) H20‏ بروتين عبر الغشاء مفرد التمرير و له 459 حمض أميني ‎amino acids‏ _يتكون, من الطرف ‎YN‏ الطرف ‎,C‏ لببتيد إشارة ‎signal peptide‏ به 20 حمض أميني, نطاق خارج الخلايا به 9 حمض أميني, ونطاق عبر الغشاء به 25 حمض أميني ونطاق داخل الخلايا به 195 حمض أميني. تتشارك الصور المماثلة الأخرى متوالية جميع (أو معظم) النطاق خارج الخلية ل ‎H20 5‏ وتظهر متواليات طرف ‎C‏ متباينة. يتم إفراز الصور المتماثلة 2 و4 ( ‎Swiss Prot‏ ‎P16871-4‏ و 016871-3), في حين تكون الصورة المتماظلة 3 (-016871 ‎Swiss Prot‏ 2) أيضاً بروتين عبر الغشاء. يتم توفير المتوالية ل 001727, بدون ببتيد الإشارة, في الوثيقة الحالية في صورة المتوالية برقم هوية: 57. عند الإشارة إلى الأحماض الأمينية المرقمة ل 7 في الطلب الحالي, تقوم المتوالية المذكورة بوظيفة مرجع للترقيم. ورد أن 00127 له 20 مقتوالية المتوالية رقم: 113, ونطاقه خارج الخلية, عند إزالة ببتيد الإشارة, ‎Log‏ المتوالية رقم: 114. ما لم يرد خلاف ذلك, يكون الترقيم المستخدم في الوثيقة الحالية للأحماض الأمينية ل ‎CD127‏ ‏هو ترقيم المتوالية برقم هوية: 114. يمثل ‎CD127‏ مستقبل فئة | لتجانس مستقبل السيتوكين ‎Cytokine Receptor Homology‏ ‎I) class |‏ 085001). وفقاً لما هو معروف جيداً في المجال؛ يتكون النطاق خارج الخلايا لهذه المستقبلات من اثنين من نطاقات 3 فيبرينوكتين؛ يطلق عليه ‎DI‏ 02. تم نشر بنية التصوير
البلوري الدقيقة ل 010127 وتمت مناقشتها على سبيل المثال» في :2009 ‎McElroy et al.,‏ ‎McElroy ©] al., 2012 and Walsh, 2012‏ وتم الكشف عنها على وجه الخصوص في صورة بيانات بنية البروتين في البحوث المعملية لقاعدة بيانات بنك بيانات بروتين المعلومات الحيوية البناثية ‎«(RCSB PDB) Structural Bioinformatics‏ برقم وصول ‎accession‏ ‎.3UPT number 5‏ ويعتبر ‎D1‏ بصفة ‎dale‏ مشترك في الارتباط مع 7-ااء في حين يكون ‎D2‏ ‏مشترك في الارتباط بسلسلة 1/6 (وكذلك مع 7-اا). على نحو هام؛ يُعد موضع 20 لنطاق ‎D2‏ ‏يتكون أساسا من الأحماض الأمينية ‎amino acids‏ 109 إلى 127 للمتوالية برقم هوية: 114 ‎(Walsh, 2012 kui)‏ هام لتفاعل ©00127-7؛ على وجه الخصوص ليسمح أو يزيد من ارتباط ‎CD127‏ مع 76 في وجود 7-اا. على ‎dag‏ الخصوص, التطفيرات عند 112 و115ا؛ 10 التي تم تمييزها في المرضى الذين يعانون من نقص مناعي مشترك ‎Severe combined ala‏ ‎«(SCID) immunodeficiency‏ ويعتقد أنهم يعيقوا استقرار التجويف غير الآلف للماء من نطاق 02 الذي يحتمل أن يترتب عليه سمة لديهم مسببة للمرض. طبقاً لما تم ذكره فيما سبق؛ يتكون موضع ‎2b‏ بصفة أساسية من الأحماض الأمينية 109 إلى 127؛ سيدرك الشخص المتمرس أن أطراف مثل هذا النطاق قد لا تكون بالضرورة معرفة بصورة مبهمة بدقة قاعدة مفردة وأنه يمكن أن ندرك أن الموضع 20 يتضمن؛ عند أحد أو كلا طرفي المتوالية المذكورة؛ من 1؛ 2,؛ أو 3 أكثر أو أقل من الأحماض الأمينية. لذلك؛ عند الرجوع إلى الموضع 25 من 00127؛ ينبغي فهم هذا على أنه يشير إلى متوالية 00127 تبدأ عن الموضع 106, 107, 108, 109, 0, 11 أو 2 وتنتهي عند الموضع 124, 125, 126 أو 127: بشكل خاص إلى مثل هذه المتوالية حيث تكون عبارة عن اعتقاد أو تبين أنها تشكل موضع ارتباط أساسي مع السلسلة 0 6لا 1 ‎IL7T-R‏ بشكل خاص في وجود ‎ALT‏ ‏إرسال إشارة 4ا7-اا. يعمل ارتباط ب 7-اا إلى ‎IL-TR‏ على إطلاق تنشيط العدديد من مسارات إرسال الإشارة؛ بما في ذلك إنزيمات كيناز ‎(JAK) Janus‏ -1 3-5 ومحول إشارة ومنشط انتساخ 5 ‎(STATS)‏ وأنزيم فوسفاتيديل إينوسوتول 3-كيناز -3 ‎phosphatidylinostol‏ ‎-(PI3-K) kinase‏ ورد عن مسارات 51/8711 5 ‎STAT3‏ أنه يتم تنشيطهماء على الرغم من أنه 5 لا يبدو أنها تمثل المسارات الرئيسية. يتطلب الأمر تنشيط مسار ‎STATS‏ لحث بروتين 801-2
المضاد لتلاشي الخلايا ومنع دخول بروتين ‎BaX‏ المضاد لتلاشي الخلايا في الحبيبات الخيطية وبالتالي لبقاء التطوير السعتري للمواد المنتجة لخلية 7. ويترتب على تنشيط مسار 13-1 الفسفرة والاحتجاز السيتويلازمي لبروتين 880 المساعد لتلاشي الخلايا. إرسال إشارة 4اا15. تمثل التوتة اللحمية السعترية ‎Thymic Stromal Lymphopoietin‏
‎(TSLP) 5‏ سيتوكين خلية ظهارية تكون نشطة في تكوين اللمفاويات ‎day deg‏ الخصوص تكون مشتركة في تنظيم تطوير خلايا النظام المناعي؛ ويؤثر التنظيم المذكور على ‎dng‏ الخصوص في إنضاج الخلايا المذكورة. يمثل ‎TSLP‏ البشري ‎(Genbank accession number‏ ‎AF338732)‏ عامل يحدث قطبية الخلايا التغضنية ويعزز تكاثر خلية آ و8 وتمايزها. كما يخمد ‎TSLP‏ توليد خلايا ‎etal., 2011) Treg‏ أعا).
‏0 تبين أن مسارات إرسال إشارة مستحثة ب ‎TSLP‏ تعد مختلفة؛ عند المستوى الجزيئي؛ عن المسارات المستحثة ب 7-اا. على ‎dag‏ الخصوص» في حين يؤدي ارتباط ‎TSLP‏ بمستقبله كذلك إلى تنشيط 1-»2ل, إلا أنه لا ينشط ‎Jak-3‏ ولكن ينشط 8/6-2ل. تتسق هذه الفروق مع ملاحظة أن ‎Jak-1‏ يرتبط ب 00127؛ المشارك بواسطة كلا المستقبلين في حين يرتبط 816-2ل ب ‎CRLF2‏ ‎Jak-3‏ مع )2010 ‎yc (Rochman et al.,‏ كما ورد ما يفيد تنشيط مسار ‎STATS‏ لإرسال
‏5 إشارة مستحث ب )2014 ‎(Zhong et al.,‏ ©ا15. من أحد التأثيرات الرئيسية ل ‎TSLP‏ أنه يؤدي إلى تنشيط الخلايا التغضنية؛ بما في ذلك التعبير المفرط عن جزيئات مشتركة التحفيز مثل ‎«CD80‏ وبالتالي يتم تعزيز استجابات الالتهاب التي يسببها ‎.(Reche et al., 2001) TH-2‏ الحيوية الخلوية ‎Cellular biology‏ التعبير "خلايا موجبة ل 10127" يعين ‎WA‏ تظهر 010127 عند سطح خليتها. في معظم
‏0 الحالات؛ ‎LIAN‏ الموجبة ل 010127 تظهر 010127 في معقد يشكل ‎IL-TR‏ (الخلايا الموجبة ل ‎(IL-TR‏ و/ أو في معقد يشكل ‎TSLPR‏ (الخلايا الموجبة ‎TSLPRI‏ ). يتم إظهار 000127 بواسطة ‎LIA‏ متنوعة؛ ‎Lay‏ في ذلك كل من الذاكرة وخلايا ‎T‏ المجردة. ‎aig‏ إظهار 010127 على وجه الخصوص بواسطة خلايا ‎T cells T‏ للمرسل العصبي ‎o(Teff) effector‏ بما في ذلك خلايا ‎T‏ المستقرة وللذاكرة» وبواسطة خلايا 8 غير الناضجة»؛ ولكن لا يتم إظهارها بصفة خاصة
بواسطة خلايا 1 التنظيمية الطبيعية المستقرة ‎Treg)‏ الطبيعية). تمثل ‎IL=TRO‏ أساس لتحسين تمايز الخلايا التوتية والتمدد النسيلى للخلايا اللمفاوية. يتم التأكيد على أهمية مسار ‎IL7-CD127‏ للاستباب الخلوي لخلية ‎T‏ المجردة بالعديد من الدراسات الحديثة التى تبين أن مستويات التعبير عن ‎IL-TRo‏ المرتبط بالغشاء على خلايا 1 +004 التقليدية ترتبط بتكرارات خاديا ‎(RTE)-CD4+ T recent thymic emigrant‏ المنتقلة السعترية الحديثة فى أفراد أصحاء ومرضى مصابين ب ‎HIV‏ فضلاً عنه فى مرضى مصابين ب ‎(Albuquerque et al., 2007)(Broux et al., 2010) MS‏ يمتل ‎IL-7Ra‏ ‏كذلك مكون لمستقبل ‎TSLP‏ تم إظهار أن إفراز ‎TSLP‏ بواسطة جسيمات ‎(Hassall‏ وبنياته تتألف من خلايا ظهارية فى الوسط السعتري؛ تكيف ‎WIA‏ تغضنية نخاعية ‎(MDCs) CD11c+‏ لحث ‎pla‏ الخلايا السعترية في ‎et al, 2005a) Treg‏ 3180856//). بناء عليه؛ يتطلب الأمر إشارات من مستقبل 7-اا لتطوير ‎Treg‏ وفقاً لما هو موضح في فتران معدلة وراثياً ب اا ‎.(Mazzucchelli et al., 2008) 7Ra‏ في )2011 ‎«(Haas et al.,‏ أظهر المؤلفون تعبير منخفض عن ‎IL=TRa‏ على خلايا ‎T‏ التقليدية ومستويات بلازما ‎IL-7‏ المزادة بدرجة متحكم فيها إلى جانب تخفيض تكرارات الخلايا السعترية المتنقلة ‎Treg‏ الحديثة ووظيفة 1169 في ‎«MS‏ بدون 5 تأثير جيني واضح )2011 ‎(Haas et al.,‏ يعد شرح الكيفية التي ينظم 7-اا بها انتقال غشاء مستقبله المتجانس حيوباً للفهم المتعمق لدور ‎IL=7/IL-TR‏ في وظيفة الخلية اللمفاوية. اقترحت الدراسات السابقة أن تحفيز 7-اا لخلايا 1 يؤدي إلى تخفيض متحكم فيه ل 00127 في غضون 30 دقيقة؛ من الممكن أن يكون ذلك راجع إلىالمعالجة الداخلية المستقبل. في نقاط زمنية تالية (6-2 ساعة)؛ تبين أن 7-اا يحث التخفيض 0 الانتساخي المتحكم فيه ل ‎.CD127‏ ومع ذلك؛ تظل الديناميكيات الفعلية لاستبطان 60127 وتنظيم آليات التمرير بواسطة 7-اا بحاجة إلى توضيح )2010 ‎et al.,‏ 1601190165). تم كذلك اقتراح أن إرسال الإشارة المستحث ب 7-اا معتمد علدالمعالجة الداخلية 00127 وأن انحلال المستقبل التالى يعتمد على نشاط ‎JAK3‏ وبتوسط فى حدوثه كل من الجسيمات البروتينية والجسيمات الحالة. 5 علم المرض ‎sail‏
تظهر الخلايا التغضنية مستويات عالية من جزيئات التحفيز المشترك بعد الإنضاج؛ مثل ‎«CD80‏ ‏مما يعزز من الاستجابات المناعية التي تسببها خلية 1. وهي تنتج كذلك للسيتوكين ‎TARC‏ ‏(60117)؛ مما يحث الانجذاب الكيميائي في خلايا 1. ‎sling‏ عليه؛ تساهم الخلايا التغضنية الناضجة في علم المرض النفسي للعديد من الأمراض التي تسببها المناعة حيث تكون استجابات خلية ‎AT‏ حالة تفعيل؛ كما هو على سبيل المثال؛ في حالة الريو؛ والتهاب المفاصل؛ والتهاب القولون؛ والتصلب المتعدد؛ والتهاب القزحية. كما تلعب الخلايا التغضنية الناضجة دوراً حيوياً في عملية رفض ‎(LIAN‏ أو الأنسجة أو العضو المزروع. لذلك؛ تهدف الكثير من الاستراتيجيات العلاجية إلى منع إنضاج الخلايا التغضنية. يؤثر وجود أو عدم وجود جزيئات مشتركة التحفيز على ‎WIA‏ تقدم ‎alge‏ الضد ‎((APCS)‏ مثل 0 الخلايا التغضنية على نحو هام الطبيعة الكيفية والكمية للاستجابة المناعية. يسبب التعبير المفرط عن 0080 بواسطة الخلايا التغضنية إنضاج ‎DC‏ ويزيد من تنشيط خلية ‎T‏ للذاكرة ‎(Bour—‏ ‎Jordan et al., 2011)‏ من الناحية الخاصة ‎«VL‏ يشغل تفاعل ‎CD28‏ مع ‎CD80‏ التجمع المركزي للمشبك المناعي ويتواجد مع ‎TOR‏ المشترك؛ بالتالي يؤدي إلى تثبيت المشبك المناعي ‎(Dustin and Shaw, 1999)(Grakoui et al., 1999)‏ يولد التفاعل بين 00028 و 5 0080 فعلياً التباعد المناسب ل ‎TOR‏ للتفاعل بفعالية مع جزيئات ‎(Shaw and Dustin, HLA‏ (1997. يمثل التصلب المتعدد ‎(MS)‏ مرض التهابي لنزع النخاع من الجهاز العصبي ‎(CNS) (Gall‏ ويرتبط ظهور لصقات نزع النخاع في الجهاز العصبي المركزي لدى مرضى مصابين بالتصلب المتعدد بالارتشاح الالتهابي الذي يتألف أساساً من الملتهمات الكبيرة والخلايا اللمفاوية 1. على 0 أساس الآلية؛ يعتبر مرض التصلب المتعدد مرض مناعة ذاتية. ويعتبر التصلب المتعدد نمطياً مرض تسببه في المقام الأول خلايا 7 + 004. تم تضمين مجموعات فرعية معينة من 004 ‎Th‏ :+ وفي الآونة الأخيرة جداً 1717 في الفيزيولوجيا المرضية للمرض. وفي الوقت الحاضر؛ لا يزال من الصعب تعيين أدوار محددة لكل مجموعة فرعية من 1171 5 ‎.Th17‏ علاوة على ما ‎«Ga‏ تم الآن توثيق تثبيط انتقال الخلايا البيضاء بتضاد (04) ‎—alphad‏ إنتيجرين كأسلوب 5 علاجي لعلاج الأمراض الالتهابية مثل ‎MS‏ ومرض التهاب الأمعاء ‎(IBD)‏ وكذلك لعلاج التصلب
العصيدي (2014 ‎et al,‏ أا2). وبتم إظهار 04]7 على مجموعة أكثر تقييداً للخلايا ‎sland)‏ ‏التي تتضمن الملتهمة الكبيرة المنشطة؛ والمجموعات الفرعية من الخلايا اللمفاوية؛ وخلايا القاتل الطبيعي؛ والخلايا البدينة وآلفات اليوزين. يحث 7-اا البشري إظهار قوي لإنتيجرينات 04 و 07 في المعمل على الخلايا اللمفاوية ‎T‏ ‏5 البشرية ويزيد بصورة هائلة من تكرار الخلايا اللمفاوية آ البشرية التي تظهر ‎B7 «0d liars)‏ و04/07 (الشكل 19( التي تكون مطلوية لإيواء الخلايا اللمفاوية 1 واحتجازها في الأنسجة غير الشبيهة باللمفاويات مثل الأمعاء » والمخ والجلد ‎(Denucci et al., 2009: Gorfu et al.,‏ (2009. تكون الخلايا 1 المجردة مسؤولة جزئياً عن الرفض الحاد للأعضاء والأنسجة المزروعة. ويمكن 0 التحكم في هذه الخلايا بالعقاقير الحالية المخمدة للمناعة (مثبطات الكالسينيورين) وبالأجسام المضادة وحيدة النسيلة التي تعوق التحفيز المشترك (مضاد للالتصاق؛ مثبطات 00080/86). وتعد خلايا الذاكرة ‎T‏ مسؤولة عن رفض العضو المزروع. وتتراكم خلايا الذاكرة ‎(AT‏ الإنسان نتيجة للتاريخ المناعي المطلوب؛ وفي الغالب التفاعلات السابقة ضد الفيروسات. وقد تبين أنه يمكن إعادة تنشيط ‎WIA‏ الذاكرة ‎T‏ بواسطة مولدات الضد الخيفية كنتيجة ل 'مناعة غير متجانسة"؛ 5 .مما يمثل تفاعل تبادلي لدفاعاتنا المضادة للفيروسات مع مولدات الضد الخيفية ]© ‎(Adams‏ ‏)2003 ,.81. تمثل المناعة غير المتجانسة حاجز قوي لحث الاحتمال نظراً لأن خلايا الذاكرة 7 على النقيض من خلايا آ المجردة؛ تتم برمجتها للتنشيط بسرعة؛ مع متطلب مختلف للإشارات التحفيز المشترك. ويمكن كذلك تضمين خلايا آ للذاكرة في الرفض المزمن. بجانب دورها في زرع العضو والنسيج؛ كما تشترك خلايا آ للذاكرة والمجردة في المسؤولية عن الكثير من الأمراض 0 المناعية. وهذه هي الحالة بالنسبة لمرض التهاب القولون التقرحي ‎(Shinohara et al.,‏ )2011 التهاب المفاصل الروماتويدي؛ والصدفية أو مرض الطعم ضد العائل. علاوة على ما سبق؛ تبين أن العديد من ‎WAY‏ المنتقلة تظهر ‎IL-TR‏ وهذه هي الحالة بالنسبة لورم ‎Sezary‏ اللمفاوي الجلدي (9660 منها)؛ أو لوكيميا أرومة لمفاوية حادة في مرحلة الطفولة تطور حوالي 9615 من الحالات فيها تطفير اكتساب الوظيفة في 00127؛ مما يحول هذه الأورام ‎Lita 5‏ إلى معتمدة على )2011 ‎IL-7 (Shochat et al.,‏
طالما كان استنفاذ الخلايا اللمفاوية ‎T‏ أسلوب واضح مخمد مناعي لتضاد رفض الطعم الخيفي أو مكافحة المناعة الذاتية. ومع ذلك؛ قد لا يكون إجمالي استنفاذ ‎Toads‏ محبذا لتخفيض الاحتمال المناعي. قد يشكل استهداف المجموعات الفرعية من ‎Tal‏ أو المنشطة على نحو انتقائي الخلايا 1, دون تعديل الخلايا ‎Treg‏ منهجاً مساعداً على ‎alg‏ التحمل ) ‎Haudebourg et‏ 2009 ,.61). يمكن النظر إلى 00127 بالتالي كهدف علاجي جذاب محتمل للأجسام المضادة
وحيدة النسيلة ‎(Mabs)‏ يهدف إلى تعديل الاستجابات المناعية يمكا أن الأجسام المضادة وحيدة النسيلة المذكورة قد تكون لها القدرة على استنفاذ المستجيب وليس الخلايا اللمفاوية المُنظمة. وقد تم افتراض أنها بالتالي قد تُظهر فاعلية في الزرع, المناعة الذاتية )2008 ‎(Michel et al.,‏ والأورام الخبيثة بواسطة تضاد وصول ‎I L-7‏ إلى ‎I L-7- R‏ ومن ثم تيد وظيفة ونمو الخلية ‎Bj T‏ .
0 .قد يفي العلاج باستخدام الجسم المضاد وحيد النسيلة ضد الخلايا +60127 والذي يتداخل مع مسار 7-اا بذلك الهدف وذلك بواسطة التخلص من / تعادل ‎WIA‏ غير معالجة وخلايا الذاكرة ‎T‏ ‏و/ أو تقليص عددها في حيم الحفاظ على الخلايا ‎Treg‏ أو بواسطة التخلص من أو خفض عدد الخلايا الخبيثة موجبة ‎.CD127‏ قد يقوم العلاج باستخدام الجسم المضاد وحيد النسيلة ضد الخلايا +60127 مع ذلك بدور سيف ذو حدين وذلك إذا أدى إلى تنشيط الخلايا التغضنية. بالفعل, يتم
5 التعبير عن 60127 ‎Lad‏ بواسطة ‎WAY‏ التغضنية بالاقتران مع 054172, وبشكل مستقبل ‎.TSLP‏ في وجود ©151, يتم تنشيط الخلايا التغضنية وتعزيز الاستجابات المناعية التي تتوسط فيها الخلية 1. تتمتع بعض الأجسام المضادة وحيدة النسيلة ضد ‎,CD127‏ محتمل بواسطة تعديل طريقة تفاعل ‎TSLP‏ مع مستقبل 1510, بخاصية زبادة نضج الخلايا التغضنية المستحثة ب ‎WS) TSLP‏ يتضح في الشكل 7 في الحالة المتوسطة). ونتيجة لذلك, يمثل العلاج بالجسم
0 المضاد وحيد النسيلة ضد 000127 والذي لا يعمل على زيادة نضج الخلايا التغضنية المستحثة ب ‎TSLP‏ ميزة علاجية. سوف يقدم العلاج المذكور فائدة إعاقة ‎I L7R‏ دون عيوب تنشيط الخلايا التغضنية فى بيئة التهابية تحتوي على ‎TSLP‏ ‏في أحد المنشورات )2009 ‎Ja (Racapé et al.,‏ المؤلفون أهمية ألفا مستقبل 7-اا ‎ILTROD)‏ كهدف علاجي محتمل في الزرع. بعد مراجعة التعبير عن عن ل[78-اا في الخلايا 1
5 المتنوعة والخلايا المستجيبة ‎IL-7, the‏ قرر المؤلفون ما إذا كان استهداف خلايا الذاكرة 1 التى
تعبر عن ‎IL=TRO‏ يمكنه إطالة أمد بقاء الطعم الخيفي في الفئران وانتهوا إلى أن استهداف 7-اا أو ل78-اا يعمل على نحو مفيد على توفير ‎Treg WAY‏ من بين وجهات النظر, وأشار المؤلفون إلى أن استهداف إما 7-اا أو ‎AIL-TRO‏ طريقة علاجية قد يكون له نتائج مختلفة على بقاء الخلايا التي تعبر عن 60127 على قيد الحياة وقد يثير نوع مختلف من قلة اللمفاويات. ظهرت مسألة آثار الأجسام المضادة التي يتم توجيهها ضد ‎IL-TRO‏ بناءً على ما إذا كانت تعوق أو تعادل أو الأجسام المضادة السامة للخلايا أيضاً من وجهة نظر مفاهيمية. لم يعرض المؤلفون مع ذلك الحصول على وإخضاع الأجسام المضادة المذكورة للتجرية وبدلاً من ذلك عبروا عن الحاجة لمزيد من الدراسة لتقييم جدوى الفرضية. في ضوءٍ عيوب المناهج العلاجية المتوفرة في الأمراض المرتبطة بالمناعة والأمراض الأخرى التي 0 تشتمل على ‎IL=7/IL-TRO‏ مثل أنواع مختلفة من السرطانات؛ بما في ذلك بعض أنواع سرطان الثدي؛ لا تزال هناك حاجة لمزيد من العقاقير المرشحة, بصفة خاصة عقاقير مرشحة نشطة فيما يتعلق بأهداف أكثر انتقائية بغرض السيطرة مثلاً تعديل التنشط المناعي في مرضى من البشر. في هذا السياق, تم الكشف عن الأجسام المضادة وحيدة النسيلة المضادة ل 710 والتي تتمتع بخصائص تضاد تجاه ‎IL=TRO‏ في البراءة الدولية 017468/2010 والنسخ المتوافقة مع البشر منها في البراءة الدولية 094259/2011 في ضوءٍ علاج أمراض المناعة الذاتية ‎Jie‏ التصلب المتعدد. تم عرض الأجسام المضادة الموصوفة كمضاد لارتباط ‎IL-7‏ بمستقبله, وكنشطة ضد توسع الخلايا 11117 و1141 والبقاء على قيد الحياة والذي يتطلب تفاعل 11-7 مع مستقبل 7 الخاص به. لم تتم دراسة تأثير هذه الأجسام المضادة على نضج الخلايا المناعية, وعلى نحو محدد الخلايا التغضنية. إضافة لذلك, لا تثبط هذه الأجسام المضادة المذكورة إنتاج محفز ل ‎ITSLP 0‏ 1886 (صفحة 107 من البراءة الدولية 094259/2011 ). على نحو مماثل, لم تجري مناقشة الأجسام المضادة ل 60127 المسجلة في البراءة الدولية 104687/2011 أو 1 ووالمتوقع استخدامها في علاج السكري, الذئبة, التهاب المفاصل الروماتويدي وأمراض المناعة الذاتية الأخرى, فيما يتعلق بتأثيرها المحتمل على نضج الخلايا التغضنية ولم يتم تسجيل تفاعلها مع إرسال الإشارة المحفز ب 1510. بالإضافة إلى ذلك, وكما نشر ‎Kern et al‏ ‎(Kern et al., 2013; Kern et al., 2015( 5‏ وكما يتضح في الوثيقة الحالية, الأجسام
— 1 1 — المضادة ل ‎CD127‏ من الفن السابق تحفز المعالجة الداخلية للمستقبل. بما أن الأجسام المضادة المضادة ل 60127 ‎ally‏ تحفز أيضاً المعالجة الداخلية ل 060127 تخفق فى التحكم في فرط الحساسية من النوع ا الجلدي (الشكل 10), في حين لا تخفق الأجسام المضادة المضادة ل 7 التي لا تستحث المعالجة الداخلية في ذلك, قد يبدو أن عملية المعالجة الداخلية تنشط مسار إرسال الإشارة, وتخفف من تأثير تضاد الأجسام المضادة. أخيراً, تتعرف الأجسام المضادة
من الفن السابق على ‎dad‏ لاصقة لا تشتمل على أية متوالية من الموضع 20 ل 60127 (أي بشكل خاص من الأحماض الأمينية 127-109 للمتوالية برقم هوية: 114): ولم يتضح أنها تعطل ارتباط 010127 بالسلسلة ‎R Jyc‏ 7اا. على الرغم من الاهتمام الحديث في ابتكار أجسام مضادة ل 00127؛ إلا أن المجهودات قد
0 ركزت على تثبيط إرسال الإشارة ‎IL-TR‏ المستحث ب 7اا. ومع ذلك؛ تم تضمين 1510 و ‎STSLPR‏ عدد من الأمراض. وقد تبين أن ‎TSLP‏ يلعب دوراً فى أمراض الجلد والرئة ‎(He‏ ‎and Geha, 2010)‏ ولربط الأمراض المتنوعة بما في ذلك مرض التهاب المسالك الهوائية والتهاب الجلد التأتبي في ‎Had‏ والفئران )2011 ‎et al., 2008)(Jariwala et al.,‏ 1109). بالإضافة إلى ما ‎3a‏ ¢ تبين أن ‎TSLP‏ يرتبط بتنظيم المناعية بالأمعاء والالتهاب ‎(Taylor et‏
5 (2009 ,.81. تتضمن الأمراض الأخرى التي تشمل ‎TSLP‏ و4ا1510_لوكيميا خلية 8 لدى الأطفال )2012 ‎«(van Bodegom et al.,‏ واضطرابات الحساسية المحددة بالرئة والجلد؛ والأمراض المتعلقة بالمناعة الذاتية )2012 ‎(Roan et al.,‏ والسرطان؛ بما في ذلك سرطان الثدي )1 201 ‎.(Olkhanud et al.,‏ ‎cl‏ في حين أنه من المقرر بوفرة في الفن السابق أن الأجسام المضادة ل 00127 تعد
0 مرشحات واعدة لعلاج الأمراض المتعلقة بالمناعة من خلال تضاد آليات مستحث ب 7-اا و/ أو تتوسط فيها 7-14-ااء وأن مثل هذه الأجسام المضادة تريط كذلك 00127 في سياق مستقبل ‎TSLP‏ وتتداخل مع آليات مستحثة ب ‎TSLP‏ و/ أو يتسبب في حدوثها مستقبل ‎aly (TSLP‏ يخضع إشراكها الممكن في إنضاج الخلايا التغضنية للبحث والتحسين يتكون من الحصول على الأجسام المضادة التي لا تظهر تأثير زيادة الإنضاج للخلايا التغضنية و/ أو لا تحثالمعالجة
5 الداخلية 0127© و/ أو التى تثبط الاستبطان المستحث ب 7ااء ولم يتم اقتراحها في الفن السابق.
— 2 1 — بعد الاكتشاف المذهل للزيادة غير المرغوب فيها المستحثة بالأجسام المضادة ل 60127 الموجودة في إنضاج الخلايا التغضنية المستحث ب ‎TSLP‏ (على الرغم من أن الأجسام المضادة تثبط إنتاج ‎TSLP‏ المستحث ب ‎((TARC‏ ابتكر المخترعون أجسام مضادة لا تظهر مثل هذه الزيادة ‎Allg‏ ‏تكون أكثر مناسبة لعلاج الأمراض»؛ على وجه الخصوص أمراض المناعة الذاتية. علاوة على ما سبق؛ اكتشف المخترعون أن الأجسام المضادة التي لا تحث الاستبطان و/ أو تثبط الاستبطان المستحث ب 7اا ل 60127 تتسم بفعالية عالية» خصوصاً في الكائن ‎al)‏ مقارنة بالأجسام المضادة من الفن السابق مثل ‎MD707-13‏ ‏يقدم الاختراع وسيلة مناسبة في هذا السياق؛ تتعلق بالأجسام المضادة وحيدة النسيلة المضادة ل 1-0 التي لا تتداخل فقط بصورة سلبية مع مسار ©151. ‎oly‏ عليه لا تزيد الأجسام المضادة 0 وحيدة النسيلة ‎(Mabs)‏ من الاختراع من إنضاج الخلية التغضنية المستحث ب ‎(TSLP‏ على العكس مما تمت ملاحظته من قبل المخترعين بالنسبة للأجسام المضادة التقليدية المضادة ل 7. بالإضافة إلى أو بصورة بديلة؛ لا تحث الأجسام المضادة ‎(ag‏ للاختراعالمعالجة الداخلية 0127© و/ أو تثبيطالمعالجة الداخلية 00127 المستحث ب 7اا. في نموذج ‎(ald‏ ‏تجمع الأجسام المضادة المقدمة في الاختراع هذه الخواص الخاصة بإنضاج 06 و/ أو المتعلقة 5 بالاستبطان ذات نشاط مضاد نحو إرسال إشارة -7/11-7-اا. في نماذج معينة؛ تثبيط الأجسام المضادة من الاختراع التعبير المستحث ب ‎LT‏ عن ‎cad luna)‏ 87 و 04/07 في خلايا 7 على وجه الخصوص في الكائن الحي. تشكل الأجسام ‎Mabs‏ هذه آليات جديدة من التأثير ‎Aly‏ ‎culating‏ جديدة لتقييم الفوائد العلاجية لاستهداف 010127. علاوة على ما سبق؛ يكشف المخترعون عن القمة اللاصقة المتعارف عليها بواسطة جسم مفضل 0 .من الاختراع؛ بالتالي يسمح ذلك بابتكار مستقيم للأجسام المضادة البديلة و/ أو شظايا أو نطاقات منها رابطة لمولد الضد أو نطاقات رابطة لمولد الضد متعلقة بنائياً من الأنواع الأخرى من البولي ببتيدات؛ ‎All‏ تريط القمة اللاصقة ذات الصلة وتحفظ السمات المطلوية. تم تمييز القمم اللاصقة من 60127 المتعارف عليه بواسطة ‎N13B2‏ بواسطة مسح قليل الببتيد المبني على المصفوفة (أحيانا يطلق عليه تحليل بمسح أو مسح ببتيد متداخل) وبشتمل على 5 - متواليات الحمض الأميني للجسم 00127 البشري الذي يتكون من متواليات 801 (متوالية برقم
هوية: 110)؛ ‎ep2‏ (متوالية برقم هوية: 111) و6803 (متوالية برقم هوية: 86). تستخدم هذه التقنية مجموعة من متواليات قليل الببتيد من الأقسام المتداخلة وغير المتداخلة للبروتين المستهدف وتختبر لقدرتها على الارتباط بالجسم المضاد محل الأهمية. بدمج متواليات الببتيد غير المتجاورة من أجزاء مختلفة من البروتين المستهدف وتطبيق الجسؤوة غير المتوافقة على هذا الببتيد المشترك (مثلاث باستخدام سلاسل ‎CLIPS‏ صاعدة) )2007 ‎(Timmerman et al,‏ يمكن تخطيط القمم اللاصقة المنقطعة باعتمادية ودقة عالية للغاية ‎(Cragg, 2011)(Gaseitsiwe et al.,‏ (2010. سمح التحديد الإضافي للقمة اللاصقة, باستخدام إجراءات الحماية لانحلال البروتين, بتحديد أن القمة اللاصقة التوافقية تشتمل على متواليات الحمض الأميني للجسم 00127 البشري الذي له متواليات لمتوالية برقم هوية: 115, متوالية برقم هوية: 116 ومتوالية برقم هوية: 117. 0 لذلك تشتمل القمة اللاصقة على متواليات من الموضع 52 للجسم 60127. علاوة على ما سبق, تشتمل القمة اللاصقة على متواليات في كل من النطاقين 01 و 02 للجسم 60127 ‎pars‏ من التحديد متواليات من نطاق 01 إلى جانب متواليات من الموضع 02 . يتم وصف القمم اللاصقة وفقاً للاختراع بمزيد من التفصيل ‎Lad‏ يلي. على ‎dng‏ الخصوص» تتكون القمم اللاصقة المذكورة من متوالية برقم هوية: 115 (أو متوالية برقم هوية: 110), متوالية برقم هوية: 116 (أو متوالية 5 برقم هوية: 86) ومتوالية برقم هوية: 117 (أو متوالية برقم هوية: 111) في ترتيبها التوافقي في الجسم 00127 الأصلي. في نموذج معين؛ تحدث الأجسام المضادة وحيدة النسيلة تأثير سام للخلايا ضد خلايا ‎CD127+‏ ‏المستهدفة التي تخفض ماديا كذلك من عددها (انكماش المجموع الفرعي). بالتالي يتعلق الاختراع بجزيء كبير؛ مثل جسم مضادء أو شظية رابطة لمولد الضد من الجسم 0 المضاد أو جزيء خيمري يشتمل على جسم مضاد أو شظية منه؛ (1) تربط على وجه التحديد سلسلة ألفا من المستقبل ب 7-اا (يسمى 60127) من خلال تفاعل جسم مضاد- مولد ‎(aa‏ ‏وخصوصاً لسلسلة ألفا من مستقبل 7-اا يتم إظهارها بواسطة خلايا موجبة ل 60127 بشري؛ و(2) لا تزيد إنضاج الخلايا التغضنية المستحث ب ‎TSLP‏ (يتميز على سبيل المثال؛ بتعبير متزايد عن مولدات ضد ‎CD80‏ و/ أو 0040 لسطح الخلية) و/ أو (3) لا يحثالمعالجة الداخلية 5 60127 و/ أو يثبطالمعالجة الداخلية 60127 المستحث ب ‎ALT‏
الوصف العام للاختراع يتعلق الاختراع الحالي بالأجسام المضادة ل 00127 التي تم تعريفها بأنها توليفة من نطاقات ‎.CDR‏ تكون الأجسام المضادة ل 60127 مفيدة في التطبيقات العلاجية والتشخيصية التي تستهدف 00127 وسلسلة ألفا من مستقبل 7اا وتوفر أجسام مضادة أحادية النسيلة معينة في مضادة 60127 وبصورة خاصة 60127 والاستخدامات العلاجية لها والتطبيقات التشخيصية. تشتمل الأجسام المضادة للاختراع على خصائص مضادة خاصة بتفاعلات 754-ا7-1-ااوالتي يمكن أن تعرض نشاطاً ساماً للخلايا في مقابل خلايا موجبة ل 60127 ولكن لا تزيد من النضج الخاص بالخلايا التغضنية ‎(DCs) cells incubated‏ المستحثة بواسطة ‎«TSLP‏ وسيتوكين والتي تستخدم أيضا 060127 كجزء من المستقبل الخاص بها. وبصورة بديلة أو بصورة إضافية؛ 0 فإن الأجسام المضادة المذكورة لا تحث المعالجة الداخلية ل 60127 و/أو تثبط المعالجة الداخلية المستحثة ب ‎ILT‏ وذلك ل 00127. وطبقاً لسمة أخرى من الاختراع فإن الأجسام المضادة قد تم تزويدها بقمة لاصقة ل 010127 ‎Jods‏ على متواليات من موضع 2ب من 000127. يقدم الاختراع وسيلة مناسبة في هذا السياق؛ تتعلق بالأجسام المضادة وحيدة النسيلة المضادة ل 1-0 التي لا تتداخل فقط بصورة سلبية مع مسار ©151. ‎oly‏ عليه لا تزيد الأجسام المضادة 5 وحيدة النسيلة ‎(Mabs)‏ من الاختراع من إنضاج ‎al)‏ التغضنية المستحث ب ‎(TSLP‏ على العكس مما تمت ملاحظته من قبل المخترعين بالنسبة للأجسام المضادة التقليدية المضادة ل 7. بالإضافة إلى أو بصورة بديلة؛ لا تحث الأجسام المضادة ‎(ag‏ للاختراعالمعالجة الداخلية 0127© و/ أو تثبيطالمعالجة الداخلية 60127 المستحث ب 7اا. في نموذج خاص؛ تجمع الأجسام المضادة المقدمة في الاختراع هذه الخواص الخاصة بإنضاج ‎DC‏ و/ أو المتعلقة 0 بالاستبطان ذات نشاط مضاد نحو إرسال إشارة -7/11-7-ا. في نماذج معينة؛ تثبيط الأجسام المضادة من الاختراع التعبير المستحث ب 7اا عن إنتيجرينات ‎cad‏ 87 و 04/87 في خلايا 1؛ على وجه الخصوص في الكائن الحي. تشكل الأجسام ‎Mabs‏ هذه آليات جديدة من التأثير ‎Aly‏ ‎culating‏ جديدة لتقييم الفوائد العلاجية لاستهداف 010127. علاوة على ما سبق؛ يكشف المخترعون عن القمة اللاصقة المتعارف عليها بواسطة جسم مفضل 5 .من الاختراع؛ بالتالي يسمح ذلك بابتكار مستقيم للأجسام المضادة البديلة و/ أو شظايا أو نطاقات
منها رابطة لمولد الضد أو نطاقات رابطة لمولد الضد متعلقة بنائياً من الأنواع الأخرى من البولي ببتيدات»؛ التي تريط القمة اللاصقة ذات الصلة وتحفظ السمات المطلوية. تم تمييز القمم اللاصقة من 00127 المتعارف عليه بواسطة ‎N13B2‏ بواسطة مسح قليل الببتيد المبني على المصفوفة (أحيانا يطلق عليه تحليل بمسح أو مسح ببتيد متداخل) ويشتمل على متواليات الحمض الأميني للجسم 60127 البشري الذي يتكون من متواليات 601 (متوالية برقم هوية: 110)؛ ‎ep2‏ (متوالية برقم هوية: 111) و6803 (متوالية برقم هوية: 86). تستخدم هذه التقنية مجموعة من متواليات قليل الببتيد من الأقسام المتداخلة وغير المتداخلة للبروتين المستهدف وتختبر لقدرتها على الارتباط بالجسم المضاد محل الأهمية. بدمج متواليات الببتيد غير المتجاورة من أجزاء مختلفة من البروتين المستهدف وتطبيق الجسؤوة غير المتوافقة على هذا الببتيد المشترك 0 (مثلاث باستخدام سلاسل ‎CLIPS‏ صاعدة) )2007 ‎(Timmerman et al,‏ يمكن تخطيط القمم اللاصقة المنقطعة باعتمادية ودقة عالية للغاية ‎(Cragg, 2011)(Gaseitsiwe et al.,‏ (2010. سمح التحديد الإضافي للقمة اللاصقة, باستخدام إجراءات الحماية لانحلال البروتين, بتحديد أن القمة اللاصقة التوافقية تشتمل على متواليات الحمض الأميني للجسم 00127 البشري الذي له متواليات لمتوالية برقم هوية: 115, متوالية برقم هوية: 116 ومتوالية برقم هوية: 117. 5 لذلك تشتمل القمة اللاصقة على متواليات من الموضع 52 للجسم 60127. علاوة على ما سبق, تشتمل القمة اللاصقة على متواليات في كل من النطاقين 01 و 02 للجسم 60127 ‎pars‏ من التحديد متواليات من نطاق 01 إلى جانب متواليات من الموضع 02 . يتم وصف القمم اللاصقة وفقاً للاختراع بمزيد من التفصيل ‎Lad‏ يلي. على وجه الخصوص» تتكون القمم اللاصقة المذكورة من متوالية برقم هوية: 115 (أو متوالية برقم هوية: 110), متوالية برقم هوية: 116 (أو متوالية 0 برقم هوية: 86) ومتوالية برقم هوية: 117 (أو متوالية برقم هوية: 111) في ترتيبها التوافقي في الجسم 00127 الأصلي. في نموذج معين؛ تحدث الأجسام المضادة وحيدة النسيلة تأثير سام للخلايا ضد خلايا ‎CD127+‏ ‏المستهدفة التي تخفض ماديا كذلك من عددها (انكماش المجموع الفرعي). بالتالي يتعلق الاختراع بجزيء كبير؛ مثل جسم مضادء أو شظية رابطة لمولد الضد من الجسم 5 المضاد أو جزيء خيمري يشتمل على جسم مضاد أو شظية منه؛ (1) تربط على ‎dag‏ التحديد
— 6 1 — سلسلة ‎Wl‏ من المستقبل ب ‎IL-7‏ (يسمى 60127) من خلال تفاعل جسم مضاد- مولد ضدء وخصوصاً لسلسلة ألما من مستقبل ‎I L-7‏ يتم إظهارها بواسطة خلايا موجبة 1 127 ‎CD‏ بشري و(2) لا تزيد إنضاج الخلايا التغضنية المستحث ب 1510 (يتميز على سبيل المثال؛ بتعبير متزايد عن مولدات ضد ‎CD80‏ و/ أو 0040 لسطح الخلية) و/ أو (3) لا يحثالمعالجة الداخلية 60127 و/ أو يثبطالمعالجة الداخلية 60127 المستحث ب ‎ALT‏ ‏في نموذج معين طبقاً للإختراع» يشتمل الجزيء الضخم المذكور على سلسلة ‎VH‏ تشتمل على واحدة على الأقل من متواليات الحمض الأمينى التالية: . 1 المتوالية برقم هوية: 10؛ ‎VHCDR2 .‏ المتوالية برقم هوية: 12( ‎VHCDR3 ١٠ 0‏ المتوالية برقم هوية: 14 أو المتوالية برقم هوية: 48( ‎VH‏ المتوالية برقم هوية: 22 و/ أو سلسلة ‎VL‏ حيث تشتمل على واحدة على الأقل من متواليات الحمض الأمينى التالية: 001 ا/المتوالية برقم هوية: 16 أو المتوالية برقم هوية: 50؛ 002 /المتوالية برقم هوية:18 أو المتوالية برقم هوية:52؛ 5 16083/المتوالية برقم هوية: 20؛ /االمتوالية برقم هوية:24. في نماذج خاصة؛ يتميز الجزيء الضخم بنشاط سام للخلايا ضد خلايا 1 البشرية المعبرة عن 7+ خلايا). في نماذج ‎«gal‏ لا يتميز الجزيء الضخم بنشاط سام للخلايا ضد خلايا 1 البشرية المعبرة عن 010127 ‎+CD127)‏ خلايا). 0 يتعلق الاختراع ‎Lad‏ بتركيبات تشتمل على الجزيء الضخم المذكور؛ طرق الحصول على الجزيئات الضخمة المذكورة و استخدامات الجزيئات الضخمة و التركيبات المذكورة.
— 7 1 — شرح مختصر للرسومات الشكل 1. تثبيط إشارات 74-اا. تثبيط خلية ليمفاوية 1 ‎pSTATS+‏ مستحثة ب7-اا_ في استجابة للجرعة لأجسام مضادة ل75-١‏ بشري وحيدة النسيلة. ‎N13B2‏ (المريع) 5 ‎NI3ES‏ ‏(الدائرة)» 5 ‎N13K12‏ (المثلث). ‎:pSTATS(%)‏ نسبة (96) الخلايا الموجبة لفوسفو- 051/815 كما تم قياسها ‎FACS,‏ . ويكون التثبيط المعتمد على الجرعة لفسفرة ‎PSTATS‏ ‏متشابهاً للثلاث نسائل» حيث ثبطت الثلاثة الفسفرة بكفاءة عند 50 نانو جم/ مل (تثبيط حوالي 0) وتماماً عند من 100 إلى 500 نانو جم/ مل (تثبيط > %95( الشكل 2. تثبيط إشارات ‎IL-TR‏ عن طريق ‎mAb‏ 201382. المحاور كما في الشكل 1. (أ) تثبيط خلية ليمفاوية ‎pSTATS+ T‏ مستحثة ب7-اا فى استجابة للجرعة ‎N13B2 mAb]‏ 0 (لمربعات) مقارنة ‎mAb.‏ 100707-3 (لدوائر)؛ كلاهما في صورة قوارض . (ب) نفس التجرية كما في (أ) مع 1961 بشري (مريع) و1964 بشري )5513( في صور خيمرية ل111382 في وجود 1 0 (رموز فارغة) أو 5 نانو جم/ مل (رموز مصمتة) من ‎I L-7‏ البشري الناتج عن عودة الارتباط. ‎N13B2y‏ أكثر كفاءة في تثبيط ‎STAT‏ من 100707-13 (تثبيط ‎Nga‏ 9650 عند 0 نانو جم/ مل ل801382 « مقابل 1000 نانو جم/ مل ل100707-13 )» رغم أن الأنواع 5 المختلفة من ‎N13B2IN13B2‏ تظهر كفاءة تثبيط مشابهة. الشكل 3. (أ) دراسات ارتباط الجسم المضاد ل0127© 01382 الجرذي. تم حقن جسم مضاد 2 أو ‎MD707-1‏ على مولد ضد ثابت 60127 عند تركيز مختلف. ‎:Resp. diff‏ اختلاف الاستجابة. الزمن: الزمن بالثانية (مدة إجمالية: 10 دقيقة). !ا8: فارغ (لا يوجد جسم ‎(alias‏ تم تحليل منحنيات الارتباط والاتفصال باستخدام نموذج 'ناتج تحلل ثنائي التكافؤ' على 0 . برنامج 4 818867/81. ‎aig‏ تمثيل النتائج في الجدول 1 التالي. الجدول 1. نتائج دراسات الارتباط
Kd Ka
KD (M) | KA (1/M) (1/5) (1/Ms)
— 8 1 — ‎E-4.56 E-1.21 2.66 | MD707-‏ ‎E+092.19 04 E+05 1‏ [ 10 ‎E-7.96 E-1.60‏ ‎|E+101.26 05 | E+052.01 | NI13B2‏ 11 الجدول 2 ‎NI3B21Kd‏ وخيمراته الموصوفة في )1( في تجرية منفصلة الجسم ‎Rmax Kd1‏ المضاد ‎(KD (M (KA (1/M (RU (1/s| (Kal (1/Ms‏ ‎E-4.93 E-4.75 N13B2‏ جرذي ‎10E+2.03 115 06 04E+9.63‏ 11 ‎E-3.77 E-5.62 N13B2-‏ ‎09E+2.65 109 05 05E+1.49 Gl‏ 10 ‎E-1.70 E-3.41 N13B2-‏ ‎E+095.89 94.9 06 04E+2.01 G4‏ 10 الشكل 4. تم قياس نشاط مضاد 60127 للجسم المضاد الجديد ‎NI3B2‏ باستخدام تجرية ‎ELISA‏ باستخدام ‎Age‏ ضد 7010127 ناتج عن عودة الارتباط. ‎OD‏ 460 نانو متر: كثافة ظاهرية عند 450 نانو متر. أ. تمت مقارنة نشاط ربط 60127 ‎N13B21‏ (الدائرة المصمتة) بتوليد جسم مضاد سابق ) 1 ‎MD707-‏ (شكل معين فارغ)؛ 3 (مثلث فارغ) و6 ‎=x)‏ مصمت)) . يظهر 111382 على أنه أكثر رابط كفاءة في التجرية. ب. تمت مقارنة نشاط 00127 بين مختلف تنسيقات 811382 (جرذي» ‎IgG]‏ (دائرة) أو ‎19G4‏ (مربع)). الجدول 3 . 050 للأجسام المضادة المنتقاة ‎EE EEE‏
— 1 9 —
St cMD707-3- 16,1 Gl 65,64 N13B2 cN13B2-G1 122,93 | MD707-1 cN13B2-G4 293,32 | MD707-3 2789,41 MD707-6 (CCL17 ‏(كيموكين منظم بالتوتة والتنشيط»‎ TSLP ‏مستحث‎ TARC ‏الشكل 5. إنتاج‎ ‏هناك استثارة. 65ا: الاستثارة بعديد سكريد دهني. ©151: الاستثارة ب 151. أ) قياس إنتاج‎ ‏وب) التعبير على سطح خلية 6080 بعد خلايا‎ ELISA ‏في المادة الطافية باستخدام‎ TARC 1 ‏من دم بشري تمت زراعتها لمدة 24 ساعة مع الوسط فقط»؛‎ CDICH ‏تغضنية‎ WAL ‏التدفق‎ 5 ميكرو جم/ مل ‎LPS‏ أو 15 نانو جم/ مل 1510. والبيانات هي متوسط الخطأً المعياري أو متوسط ‎(SEM)‏ التركيز من 3 تجارب مستقلة. الشكل 6. تثبيط إنتاج ‎TARC‏ المستحث ب©ا15 عن طريق أجسام مضادة 60127 بشرية. القياس باستخدام ‎ELISA‏ لإنتاج ‎TARC‏ في المادة الطافية لخلايا تغضنية +0016 من دم 0 بشري تمت زراعتها لمدة 24 ساعة مع 15 نانو جم/ مل ‎(TSLP‏ وتركيز مختلف من الأجسام المضادة ل0127© البشرية: الجسم المضاد 11382 (دائرة)؛ 1/10707-6 (مثلث) ومضاد ‎TSLP‏ كمقارنة ‎(X)‏ والبيانات تمثل 3 تجارب مستقلة من ثلاثة مانحين مختلفين للدم. وثبط 2 بدرجة خفيفة فقط حث إفراز ‎ss) TARC‏ %20 تثبيط عند 6 ميكرو جم/ مل)؛ بينما كان ‎TSLPR‏ ومضاد ‎TSLPR‏ مثبطين أكثر كفاسة (على الترتيب ‎Moa‏ 9650 وحوالي %70( الشكل 7. تأثير الأجسام المضادة ل0127© على 6080 المستحث ب©ا15 وواسم التعبير عن 0040 لنضج ‎WAY‏ التغضنية. تم تنشيط ‎TSLP, WAY‏ عند 15 نانو جم/ مل لمدة 24
ساعة. وتمت إضافة الأجسام المضادة ‎N13B2 J‏ « 1/0707-3 00707-6؛ إلى المادة الطافية بمعدل 6 ميكرو ‎fan‏ مل. تم تحليل التعبير عن 6080 (أ) ‎CD40‏ (ب) عند ‎zhu‏ ‏الخلية باستخدام 805. والبيانات تمثل 3 تجارب مستقل وبتم التعبير عنها بالنسبة المئوية للتعبير في خلايا المقارنة (متوسط- لا يوجد جسم مضاد؛ مع ا15). فقط 11382 من الأجسام المضادة التي تم اختبارهاء لم يزد من تعبير سطح الخلية عن ‎CD40‏ و0080 في
الخلايا المعالجة ب 151 الشكل 8. سمية الخلايا المعتمدة على الجسم المضاد ‎Antibody-Dependant Cellular‏ ‎(ADCC) Cytotoxicity‏ ل ‎N13B2‏ الخيمري ‎1I9G1)‏ أو ‎(igG4‏ 00127 المضاد للبشر. تم احتضان خلايا ‎NK‏ البشرية المستخدمة كمؤثر ‎(EB)‏ لمدة 4 ساعات مع سلالة خلايا ‎BAF/3‏
0 متقولة إليها العدوى ب00127© بشري كخلايا هدف (النسبة 10 مؤثرة إلى 1 خلية هدف) بتركيز مختلف ل1961 ‎N13B2‏ (مريع مصمت)» ‎N13B-1gG4‏ (مريع فارغ) أو ‎MDT07-3‏ خيمري (2). تم تحديد نسبة سمية الخلايا النوعية عن طريق إطلاق ‎S1Cr‏ ‏الشكل 9. كفاءة الأجسام المضادة وحيدة النسيلة 0127© ل1811382 الجرذي في تحسين التهاب القولون المستحث كيميائياً في فئران مصابة بنقص المناعة متوافقة مع البشر. تمت مراقبة
5 البقاء على قيد الحياة (أ) والتغير في الوزن (ب) يومياً من اليوم صفرء بدء العلاج الكيميائي بحمض تراي نيتروينزين سلفونيك ‎trinitrobenzenesulfonic acid‏ (18185)؛ الذي أثار التهاب قولون ‎ala‏ عند إعطاءه داخل المستقيم؛ بعد حقن ‎PBS‏ (خط مصمت؛ مثلث كامل) أو جسم مضاد ‎IL7Rad‏ 11382 (خط منقط؛ مثلث فارغ). في (ب)؛ تمثل كل نقطة متوسط بيانات الوزن ‎SEM)‏ -/+)؛ ‎Ny‏ (ع) = 6 لمجموعة ‎Ny HU-TNBS + PBS‏ = 6 لمجموعة
‎TNBS 0‏ + مضاد 40ا7-ا. وزاد البقاء على قيد الحياة وقل فقد الوزن في المجموعة ‎All‏ تمت الشكل 10. المتوالية النيوكليوتيدية ومتوالية الحمض الأميني لسلاسل ‎VLEs VH‏ لخميرية ‎.N13B2_GIM‏ تتم طباعة سلاسل ‎Fo‏ منخفضة»؛ ‎CDRs‏ الثلاثة في كل متوالية تحتها خط. وتشير النجمة (*) إلى كودون الأيقاف في متوالية الحمض الأميني.
— 1 2 — الشكل 11. المتوالية النيوكليوتيدية ومتوالية الحمض الأمينى لخيمرية ‎NI3B2_GAM‏ تتم طباعة سلاسل ‎Fe‏ منخفضة؛ و45ا10_الثلاثة في كل متوالية تحتها خط. وتشير النجمة (*) إلى كودون الأيقاف فى متوالية الحمض الأمينى. الشكل 12. متوالية الحمض الأميني لثلاث سلاسل ‎Fo‏ بشرية بديلة (961ا؛ و 962 ؛ و ‎(I9G4 5‏ ولسلسلة ‎Fe‏ لجسم مضاد ‎N13B2‏ جرذي (1961). الشكل 13. تجرية ربط ‎ELISA‏ لمضاد ‎:CD127‏ تغليف 0012750 البشري والكشف عنه بجسم مضاد للبشر كابا. تم قياس نشاط مضاد 00127 للجسم المضاد الجديد ‎N13B2‏ ‏باستخدام تجرية ‎ELISA‏ باستخدام مولد ضد 7010127 ناتج عن عودة الارتابط. تمت مقارنة نشاط ‎CD127‏ بين مختلف صور الجسم المضاد 811382 (الوزن ‎¢(X)‏ جسم مضاد ‎19G4‏ 10 متوافق مع البشر 1 ‎h‏ )= مصمت)؛ 02 (دائرة ‎(dele‏ أو 3 (مثلث مصمت)).نان: الكثافة الظاهرية. الجدول 4. ‎ED‏ للأجسام المضادة المختارة
ED 50 (Jo ‏(نانو جم/‎ الشكل 14: تثبيط ‎P-STATS‏ بأجسام مضادة ل00127 : تثبيط ‎P=STATS‏ المستحث ‎IL7‏ ‏عن طريق ‎mAbs‏ 111382 على خلايا ليمفاوية 7 ‎h1)‏ 811382 (مريع أسود)؛ 12 (دائرة مفتوحة) و13 (مثلث أسود) بطريقة معتمدة على الجرعة وبالمقارنة بالجسم المضاد ‎N13B2 Wt‏ الجرذي 20 في وجود 0.1 نانو ‎Je [o>‏ من ‎IL-7‏ البشري الناتج عن عودة ا لارتباط. تمت
— 2 2 — مقارنة أجسام مضادة ‎CD127d‏ مختلفة من عمليات سابقة لإنتاج مولد الضد لمعرفة قدرتها على تثبيط ‎P-STATS‏ المعتمد على 7اا: 3 100707 (دائرة) 4 100707 (مثلث) و 1010707 13 (مريع). الجدول 5. 50 ‎IC‏ للأجسام المضادة المختارة ‎IC 50‏ (نانو جم/ ‎(Jo‏
الشكل 15. ‎dja‏ ثبات الأجسام المضادة المتوافقة مع البشر مقابل المضادة ل0127© الجرذية. تم قياس تركيزات الأجسام المضادة ‎ELISA,‏ بعد 7 أيام عند 37 م )+( ‎NI3B2Wt‏ الجرذي أو ‎h3‏ 001382 المتوافق مع البشر ‎(gall)‏ وعند -80 م 1011382800 الجرذي ‎(X)‏ أو ‎N13B2 h3‏ المتوافق مع البشر (مثلث)) وبعد أريع أحداث من التجميد / إزالة التجميد (المعينات).
0 الجدول 6. نشاط ربط الأجسام المضادة بعد 7 أيام عند 37 م أو عند -80 م وبعد أربع أحداث من التجميد / إزالة التجميد ‎wt‏ 1382 ل8/التخزين عند -80 م 3,6
— 2 3 —
7 ‏تخزين‎ _ 11382 wt
أيام عند 37 م 3.5
1382-03 /التخزين
عند -80 م 13
7 ‏تخزين‎ _N13B2-h3
أيام عند 37 م 1,1 x4N13B2-h3_
تجميد وإزالة تجميع 1,7 الجدول 7. تجرية ثبات الأجسام المضادة المتوافقة مع البشر مقابل 601727 الجرذية: التحليل بترشيح الهلام لتكوين ‎ALS‏ بعد الاحتضان ب7 أيام عند 37 م وعند -80 م.
te Em]
اليوم 7 عند - اليوم 7 عند اليوم 7 عند - اليوم 7 عند 80م 7م 80م 7م
سنن نا ا ان لاا
الشكل 16. تجارب التنافس والمعالجة الداخلية بعد الخلايا. تم احتضان خلايا دم بشري محيطي أحادية النواة مع عدة أجسام مضادة ل00/8055 0127© « لمدة 30 دقيقة إما عند 4 م (العمود المظلل) أو 37 م (العمود الأسود) أو عند 37 م لمدة 30 دقيقة بدون 7-اا ثم لمدة 15 دقيقة مع 5 نانوجم/ مل من 7-اا البشري الناتج عن عودة الارتباط (العمود الرمادي): (أ) 10 ميكرو جم من نسائل ‎(MD707-5‏ أو 100707-12 أو 100707-13 أو 111382-64 الخيمري؛ (ب) 0 نانو جم من ‎(N13B2‏ نسيلة ‎HAL‏ أو ‎H3L4‏ أو 1811 أو وسط كمقارنة. تم تلطيخ الخلايا
عند 4م بأجسام مضادة ‎MADSI‏ 00127 بشربة متوفرة تجارباً لقياس التعبير عن سلسلة مستقبل 7-اا ألفا على مستوى غشاء الخلية. استحثت الأجسام المضادة ‎MD707-13 5 0707-12 (MDT707-5‏ المعالجة الداخلية للمستقبل عند 37 م مع أو بدون 7-ااء بينما لم يفطل ‎N13B2-G4‏ الخيمري ذلك. واستحث الجسم المضاد ‎HAL‏ نقص في التعبير على سطح الخلية عن 00127 في أي من الحالات. أثبتت النتائج عند 4 م أن الجسم المضاد 1811 يتنافس قليلاً مع الجسم المضاد المستخدم في الترقيم. بينما أظهر ‎HAL‏ تنافساً قوباً ‎N13B2,‏ لم يظهر تنافساً. وعند 37 م؛ لم يلاح تلطيخ على سطح الخلية في وجود ‎HAL‏ ؛ بينما أحدث 1811 بمفرده نقصاً ‎Ug‏ في التعبير عن 7 على سطح الخية عند دمجه مع 7-ااء وقد انخفض التعبير على سطح الخلية بحوالي 0 %90. وعلى العكس من ذلك لم يخفض 11382" التعبير على سطح الخلية عن 60127 عند ‎<p 4‏ ولم يحدث نقصاً في التعبير على سطح الخلية عن 00127 المستخدم بمفرده؛ وقد ثبط الانخفاض الملحوظ في وجود 7-اا. الشكل 17 (أ) دراسة الحركيات الدوائية والديناميكيات الدوائية لإعطاء ‎MD707-13 5 N13B2‏ في رئيسيات غير بشرية. تمت معالجة قرود البابون ‎(papioanubis)‏ داخل الوريد ب10 مجم/ 5 كجم من ‎NI3B2-IgG1‏ (ع- 3؛ مريع مصمت) أو ‎N13B2-1gG4‏ (ع- 3؛ دائرة مصمتة) أو ‎N13B2-1gG4‏ (ع- 3؛ دائرة مغلقة). تمت مراقبة تركيز المصل لمضاد ‎MAb‏ 00127 باستخدام ‎(ELISA‏ (ب) على التوازي؛ تمت مراقبة التعبير عن 00127 على سطح الخلايا اللميفاوية آ لدم محيطي بعد خلايا التدفق والمعايرة إلى المستوى المقاس قبل حقن ‎MAD‏ (الذي يمثله ‎ball‏ المنقط). 0>0.05 *. كانت مستويات البلازما الإجمالية متشابهة مع مرور الوقت 0 لجميع الأجسام المضادة الثلاث. انخفض التعبير على سطح الخلية عن 60127 بعد حوالي 8 أيام من المعالجة ب00707-13 ؛ بينما لم يلاحظ هذا الانخفاض مع أي من نسائل 811382 التي تم اختبارها. الشكل 18. تمت معالجة قرود البابون ‎papioanubis)‏ في الوريد ب10 مجم/ كجم من ‎N13B2-‏ ‏1 (ع- 3ائرة ‎«(dias‏ أو ‎N13B2-19G4‏ (ع- 3 دائرة مصمتة)؛ أو ‎MD707-13~‏ ‎IgG4 5‏ (ع- 3 دائرة فارغة). تمت مراقبة تكرار خلايا ‎T‏ الليمفاوية المنظمة +604 ‎(CD3+‏
‎CD25high Foxp3+)‏ في الدم والعقد اليمفاوية (معبراً عنها بالنسبة المئوية لخلايا 1 موجبة ‎(CD4‏ وكذلك العدد المطلق لخلايا ‎T‏ الليمفاوية المنظمة (معبراً عنها بعدد الخلايا/ مل) عند اليوم صفرء ‎das‏ إعطاء 0005 بأسبوعين. ‎p<0.001‏ *** ,0>0.01 **. جميع الأجسام المضادة زادت من إجمالي العدد في الدم والنسبة في كل من الدم والعقد الليمفاوية لعقد الخلايا ‎T‏ الليمفاوية. الشكل 19. التثبيط في المعمل للتعبير عن إنتجرين ‎BT cod‏ و4/07. أ. النسبة المئوية للخلايا الليمفاوية ‎T‏ البشرية موجبة 04 وموجبة 04/]87؛ بعد 9 أيام من الزراعة مع أو بدون 5 نانو جم/ مل من 7-اا البشري؛ باستخدام ‎FACS‏ ب. كما في الأعلى؛ حيث تمت إضافة التركيزات المذكورة ‎mAb‏ 111382 إلى المزرعة في اليوم صفر. دلت الخطوط المقطعة على المستوى الأساسي في ظروف مقارنة (بدون 7-اا 5 ‎MAD‏ 111382 ). وقد تم منع الزيادة المستحثة ب-اا 0 -7 في التعبير عن الإنتجرينات ‎BT cod‏ و4/]07 باستخدام ‎MAD‏ 811382 متوافق مع البشر في المعمل (فقد تم التثبيط الكامل عند تركيز حوالي 2 ميكرو جم/ مل من الجسم المضاد). الشكل 20. التثبيط في المعمل للتعبير عن إنتجرين ‎BT cod‏ و4/07. تم حقن ‎x4‏ 10 6 من خلايا دم بشري محيطي أحادية النواة داخل الغشاء البروتوني في ‎Gh‏ معرضة للإشعاع مصابة بنقص المناعة ‎NOD/SCID fi)‏ مثبطة الجينات بسلسلة مستقبل ‎IL-2‏ جاما). تم تقييم النسبة 5 المثوية لخلايا ‎T‏ الليمفاوية موجبة 07 (اليسار) وتطعيم خلايا آ البشرية موجبة ‎BT‏ (اليمين) بد أسبوعين من المعالجة بمحلول منظم (ع- 5) أو 8011382 )5 مجم/ كجم؛ ‎=p‏ 5)؛ باستخدام ‎.FACS‏ 0.01 >م. يقلل ‎N13B2‏ بشكل ملحوظ من نسبة ‎T WDA‏ موجبة ‎BT‏ وتطعيم خلايا ‎danse T‏ لالا. الشكل 21. تأثير الجسم المضاد ‎N13B2‏ على نموذج ‎DTH‏ نموذج صدفية داخل جسم الكائن 0 الحي. تم اختبار قرود البابون ملقحة ‎(Bacillus Calmette-Guerin) BCG‏ بحقن ‎Jala‏ ‏الأدمة ل2000 )7( أو 1000 (ب) وحدة من توبيركولين منقى لحث استجابة فائقة الحساسية من النوع المتأخر وتم تسجيل أقطار الحمامي كل يوم (النجمة؛ الخط المنقط). بعد شهر واحد؛ تم علاج الحيوانات عن طريق الوربد مع 10 مجم / كجم من ‎NI3B2-IgG1‏ (ع - 3 مريع كامل)» ‎N13B2-1gG4‏ (ع = 3دائرة كاملة) أو 964ا-100707-13 (ع = 3 دائرة فارغة) 5 . بعد أريع ساعات من إعطاء ‎(MABS‏ وقد تم اختبار الحيوانات مرة أخرى عن طريق الحقن
داخل الأدمة لعام 2000 )1( أو 1000 (ب) وحدة من التبركولين تنقيته لحث استجابة من نوع تأخر فرط الحساسية تم تسجيل أقطار حمامي كل يوم (خطوط الصلبة). ثبط الجسم المضاد 2 ولكن ليس 100707-13 استجابة الخلايا الليمفاوية ذاكرة ؛ إذا ما قيست بقطر الحمامي بعد الاختبار الثاني.
الشكل 22. البابون ‎(papioanubis)‏ تم علاجها عن طريق الوريد ب 10 مجم/ كجم من ‎N13B2-1gG1‏ )¢= 3 مريع كامل)» ‎N13B2-19G4‏ (ع<- 3 دائرة كاملة) أو -1010707 ‎=p) 13-4‏ 3( دائرة فارغة) أو محلول منظم للمقارنة ‎=p)‏ 3؛ خط منقط). بعد أربع ساعات؛ تلقت الحيوانات حقنة في الوريد من 1.5 مل من ‎WA‏ الدم الحمراء للأغنام ‎(SRBC)‏ ‏بنسبة 710. تم رصد ‎١96 ef‏ مضادة ل ‎SRBC‏ نوعية بأسبوع و أسبوعين ومعايرتها في اليوم
0 صفر. ‎p<0.05‏ *. 011382 وليس ‎(MDT07-13‏ هو الذي يثبط الاستجابة المناعية الخلطية؛ المقاسة بعيار 106 نوعي. الشكل 23. متوالية البروتين ل ‎N13B2 VH 1964 S228P_h3‏ المتوافق مع البشر: متوالية باللون الرمادي هي ‎CDRs‏ ؛ ‎wing‏ تطفير الأحماض الأمينية الداكنة والتي تحتها خط (ا42/؛ 5ه ل0820؛ ‎((M10OSL‏ والمتوالية التي تحتها خط هي متوالية 964ا المُطفّر (52280). 5 الشكل 24. متوالية البروتين ل ‎N13B2 VL Ckappa_h3‏ المتوافق مع البشر: متوالية في الرمادي هي ‎CDRs‏ ؛ والأحماض الأمينية الغامق والتي تحتها خط هي المطفرة ‎V541)‏ ‎((S59T (FO3Y + N31Q 6‏ والمتوالية التي تحتها خط هي متوالية 1964 ‎ALA‏ ‏(52280). ‏الشكل 25. 801382 يقي من الموت في نموذج الفئران الالتهابي: تمت إستثارة مرض رفض 0 العضو المنزرع في الفئران المتوافقة مع البشر (انظر المثال 13). النسبة المئوية الفئران ‎NSG‏ ‏التي بقيت على قيد الحياة التي تم حقنها ب 50 مليون ‎dys PBMC‏ في اليوم صفر والتي لم تتلقى أي علاج ‎paul my)‏ ع- 14) أو علاجها ثلاث مرات في الأسبوع عن طريق الحقن داخل الصفاق ب 5 مجم / كجم من 111382 خيمري (دائرة سوداء» ع- 19).
الشكل 26. 101382 يقي تحديدا من التهاب القولون في نموذج الفئران الالتهاباتي (انظر المثال 3). في وقت القتل الرحيم (أي فقدان الوزن بنسبة 725 أو 100 أيام بعد الحقن)؛ تم تحليل ناتج ارتشاح الخلايا الالتهابية في كل أنسجة الفتران 56ل التي تم حقنها ب 50 مليون ‎PBMC‏ بشرية في اليوم صفر والمعالجة (اللون الأسود) أو ليست معالجة (اللون الأبيض) ثلاث مرات في الأسبوع ب 5مجم/ كجم من 801382 بالأنسجة على شرائح 10 ميكرو ‎jie‏ ملطخة بهماتوكسيلين
ويوزين. يتم عرض النتائج على النحو التالي: أ القولون» ب. الأمعاء؛ ج. الكبد و د. الرئة. البيانات هي متوسط +/- ‎SEM‏ لعدد على الأقل = 8 في كل مجموعة. الشكل27. نطاقات القمة ‎aad)‏ على البروتين 010127 ‎(Uniprot P16871)‏ التي يتعرف عليها الجسم المضاد 801382. الأحماض الأمينية بالخط الغامق تتوافق مع المتواليات التي تشكل
0 القمة اللاصقة البنيوية التي يتعرف عليها 801382. الأحماض الأمينية على خلفية رمادية مهمة للتفاعل مع 7 اا؛ الأحماض الأمينية التي تشكل ببتيد الإشارة ل 00127. الشكل 28. دراسة الترسيب المناعي المشترك للمعقد 00132 / 17 / 060127 مع الأجسام المضادة ‎hCD127‏ (مثال 21). الحارات: 1- ‎PBL‏ وحدهاء 2- ‎PBL + -3 (PBL + IL7‏ ‎PBL + IL7 + MD707-13-4 «IL7 + 2‏ » 5-. 60132-56 (75 كيلو التون)
5 أو ‎80)CD-127-FC‏ كيلو دالتون). الترسيب المناعي المشترك للعينات على عمود مضاد ‎.(hCD127 (MD707-9‏ وقد تم تحليل نواتج التصفية التتابعية بلطخة ويسترن (أ) الجسم المضاد المأخوذ من الأرنب 00132 المضاد للبشر تم الكشف ‎die‏ بجسم مضاد للأرنب مأخوذ من الماعز مرقم بالبيروكسيديز أو (ب) جسم مضاد ل 00127 بشري مأخوذ من ‎Dall‏ تم الكشف عنه بجسم مضاد للجرذ مأخوذ من الحمار مرقم بالبيروكسيداز.
0 الوصف التفصيلي: كما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية؛ فإن الجزيء الضخم يشير إلى أي جزيء؛ خاصة جزيء من أصل حيوي أو جزيء يشتمل على شظايا حيوية ‎Land)‏ ذات وزن جزيئي يزيد عن 500 دالتون. تشمل الجزيئات الضخمة؛ على سبيل المثال لا الحصرء البولي ببتيدات ‎Polypeptides‏ وبولي ببتيدات معدلة مثل بولي ببتيدات معالجة بالجليكوزيل ومترافقاتها. وكما يتم استخدامه في الوثيقة
الحالية؛ فإن الجزيء الضخم الذي ‎Lay’‏ تحديداً ب0127© من خلال تفاعلات الجسم المضاد - ‎alge‏ الضد” يعني أن التفاعلات بين الجزيئات الضخمة المذكورة 5 ‎CD127‏ تتكون بشكل أساسي من نفس التفاعلات بين أي جسم مضاد خاص ب0127© و00127 . وبصفة خاصة؛ قد يشتمل الجزيء الضخم المذكور على الوحدات البنائية للجسم المضاد التي تدخل في التفاعل المذورء في شكل مكاني يسمح بتكوين نفس الروابط الكيميائية مع بروتين 00127. وفي نموذج
معين» يشتمل الجزيء الضخم على متوالية ‎CDR‏ واحدة على الأقل ذات سلسلة ‎VH‏ و/ أو سلسلة ‎VL‏ للجسم المضاد. في نموذج مفضل؛ يشتمل الجزيء الضخم على جمع متواليات ذات سلسلة ‎VH‏ و/ أو سلسلة ‎VL‏ للجسم المضاد. وفي نموذج مفضل؛ يشتمل الجزيء الضخم على كل السلسلة ‎VH‏ وكل السلسلة ‎VL‏ للجسم المضاد.
0 في نماذج خاصة, يتم إنتاج الجزيء الضخم, أو تصميمه أو اختياره للتعرف على قمة لاصقة تم تعريفها كما يلي (تحددها واحدة على الأقل من السمات التالية): (أ) تشتمل القمة اللاصقة على متواليات, بشكل خاص على الأقل 3, 4, 5, 6 أو 7 أحماض أمينية متتالية, مأخوذة من الموضع 206 ل 00127, بشكل خاص من الأحماض الأمينية 109- 7 لمتوالية برقم هوية: 114, بشكل أكثر تحديداً من الأحماض الأمينية 125-110, 110-
5 120, 120-112 للمتوالية برقم هوية: 114, بشكل أكثر تحديداً من الأحماض الأمينية 114- 9 لمتوالية برقم هوية: 114 (المناظرة للمتوالية برقم هوية: 116)؛ بشكل خاص, تشتمل القمة اللاصقة على المتوالية برقم هوية: 116, بشكل خاص تشتمل على المتوالية برقم هوية: ¢80 بشكل خاص, تشتمل القمة اللاصقة على 0112 أو 115 ل 060127؛ (ب) بالإضافة إلى سمات (أ) أعلاه؛ تشتمل القمة اللاصقة على متواليات, بشكل خاص على
0 الأقل 3, 4, 5, 6 أو 7 أحماض أمينية متتالية, مأخوذة من النطاق 01 ل 00127, بشكل خاص من الأحماض الأمينية 98-1 للمتوالية برقم هوية: 114؛ بشكل خاص, تشتمل القمة اللاصقة على متواليات الحمض الأميني للمتوالية برقم هوية: 115 (بشكل خاص تشتمل على متوالية الحمض الأميني ل 601 (المتوالية برقم هوية: 110(
(ج) بالإضافة إلى سمات (أ), و اختيارياً (ب) أعلاه؛ تشتمل القمة اللاصقة على متواليات, بشكل خاص 3, 4, 5, 6 أو 7 أحماض أمينية متتالية, مأخوذة من الأحماض الأمينية 220-180 للمتوالية برقم هوية: 114, بشكل خاص من الأحماض الأمينية 190 إلى 200؛ بشكل خاص تشتمل القمة اللاصقة على متوالية الحمض الأميني للمتوالية برقم هوية: 117؛ بشكل خاص تشتمل على متوالية الحمض الأميني ل 602 (المتوالية برقم هوية: 111)؛
(د) تشتمل القمة اللاصقة على متواليات المتوالية برقم هوية: 115 و المتوالية برقم هوية: 116, أو تشتمل القمة اللاصقة على المتوالية رقم: 117 و متواليات المتوالية برقم هوية: 116؛ بشكل خاص تشتمل القمة اللاصقة على متواليات المتوالية برقم هوية: 115, المتوالية برقم هوية: 116 و المتوالية برقم هوية: 117؛
0 (ه) تشتمل القمة اللاصقة على متواليات ل 00127 كما تم تعريفه في (أ),. (ب) (ج) و/ أو (د) أعلاه؛ وليس أية متواليات حمض أميني أخرى (لأكثر من 3, 4, أو 5 أحماض أمينية متتالية) ل 7عما ذكر صراحة, أي بشكل خاص, تشتمل القمة اللاصقة على المتواليات التالية فقط من ‎:CD127‏ ‏- متوالية واحدة مأخوذة من الموضع 20, تتكون بشكل خاص من الأحماض الأمينية 127-109
5 لمتوالية برقم هوية: 114, أو الأحماض الأمينية 125-110, 120-110, أو 120-112 للمتوالية برقم هوية: 114, أو الأحماض الأمينية 119-114 للمتوالية برقم هوية: 114 (المناظرة للمتوالية برقم هوية: 116), أو المتوالية المناظرة للمتوالية برقم هوية: 86, و/ أو تتكون من متوالية ل3 من الأحماض الأمينية أو أكثر من 3, 4, 5, 6, 7 أحماض أمينية و ل9 من الأحماض الأمينية أو أقل من 19, 18, 15, 11 حمضاً من الأحماض الأمينية مأخوذة من الموضع ‎2b‏
0 بشكل خاص تشتمل تلك المتوالية على 0112 أو 115 ل 060127؛ - اختيارياً, بالإضافة إلى متوالية الموضع 20, متوالية واحدة مأخوذة من النطاق 01 ل 00127, بشكل خاص من الأحماض الأمينية 98 للمتوالية برقم هوية: 114, بشكل خاص متوالية واحدة تتكون من المتوالية برقم هوية: 110 أو من المتوالية برقم هوية: 115, و/ أو تتكون من متوالية 3 أحماض أمينية أو أكثر من 3, 4, 5, 6, 7 أحماض أمينية و20 من الأحماض الأمينية أو أقل
من 20, 18, 16, 11 حمضاً الأحماض الأمينية حيث تشتمل على المتوالية برقم هوية: 115 أو مكونة من المتوالية رقم: 115؛ - اختيارياً, بالإضافة إلى متوالية الموضع 20 و إلى المتوالية الاختيارية من النطاق 01 إن وجدت, متوالية واحدة مأخوذة من الأحماض الأمينية 180 إلى 220 للمتوالية برقم هوية: 114؛ بشكل خاص متوالية واحدة تتكون من المتوالية برقم هوية: 111 أو للمتوالية برقم هوية: 117, و/ أو تتكون من متوالية 3 من الأحماض الأمينية أو أكثر من 3, 4, 5, 6, 7 من الأحماض الأمينية و 20 من الأحماض الأمينية أو أقل من 20, 18, 16, 11 حمضاً الأحماض الأمينية حيث تشتمل على المتوالية برقم هوية: 117 أو مكونة من المتوالية رقم: 117؛ حيث قد تشتمل القمة اللاصقة المذكورة على أحماض أمينية إضافية, ولا تكون هذه الأحماض 0 الأمينية الإضافية مأخوذة من المتوالية ل 0127© (أي أن القمة اللاصقة الموفرة لا تشتمل على أكثر من 3, 4 أو 5 من أحماض أمينية متتالية من المتوالية ل 60127 غير المتوالية من الموضع 20 و ريما المتواليات الاختيارية من النطاق 01 و من الأحماض الأمينية 220-180 للمتوالية برقم هوية: 114 السابق وصفها)؛ (و) القمة اللاصقة, بالإضافة إلى السمة الموصوفة في ‎of)‏ (ب), (ج) أو (د) أعلاه؛ لا تشتمل 5 على أكثر من 3, 4 أو 5 أحماض أمينية متتالية مأخوذة من المنطقة 108-99 للمتوالية برقم هوية: 114, و/ أو لا تشتمل على أكثر من 3, 4 أو 5 أحماض أمينية متتالية مأخوذة من المنطقة 179-128 للمتوالية برقم هوية: 114 و/ أو لا تشتمل على أكثر من 3, 4 أو 5 أحماض أمينية متتالية من المنطقة 239-220 للمتوالية برقم هوية: 114, بشكل خاص لا تشتمل على أكثر من 3, 4 أو 5 أحماض أمينية متتالية من المنطقة 108-99, 179-128 ولا 220- 0 239 للمتوالية برقم هوية: 114؛ (ز) تشتمل القمة اللاصقة على مجموعة متواليات 60127 كما تم تعريفها في (أ), (ب), )2( )9( (ه) و/ أو (و) أعلاه. حيث يكون قد تم تطفير بعض الأحماض الأمينية قد تم تطفيرها, بشكل خاص استبدالها و/ أو حذفها, بشكل خاص استبدالها بحمض أميني ذي خواص مشابهة (استبدالات محافظة)؛ بشكل خاص, تتكون القمة اللاصقة من أو تشتمل على متواليات التي بها
-3 1 —
على الأقل 9680, %85, %90, أو 9695 نسبة تشابه متوالية مع متواليات ‎CD127‏ كما تم
تعريفه في (أ), ‎oS)‏ (ج), (د), (ه) و/ أو (و) أعلاه؛ في توليفة كما تم تعريفه في (ب)؛ (ج) أو
(د) عند وجود ملاثمة؛
(ح) القمة اللاصقة هي قمة لاصقة بنيوية بها السمات المحددة في (أ), ‎(WD)‏ (ج)؛ (د)؛ )2( (و) و/ أو (ز) ‎del‏ أي تشتمل على أو تتكون من المتواليات كما تم تعريفه في (أ), )9( (ج): (د)؛
(ه), (و) و/ أو (ز) أعلاه تكون في بنية (شكل) تحاكي بنية المتواليات المذكورة داخل ‎CD127‏
الأصلي (إما كمونومر أو كدايمر مع 00 و/ أو مرتبط ب7 ‎(IL‏
(ط) تشتمل القمة اللاصقة على شظية 60127 (أي إطالة أحماض أمينية متتالية) ذات السمات
)0( (ب)؛ )2( (د), (ز) و/ أو (ح) أعلاه؛
0 (ي) القمة اللاصقة تتميز بالسمات المبينة في (ز) أعلاه ويتم الحصول عليها بتقنية ‎Jie‏ تقنية ‎CLIPS‏ التي تسمح بتخليق تجميعات ببتيدات ذات بنية يمكن ‎foil)‏ بها. وفي نماذج معينة للقمم اللاصقة ذات السمات (ب) و(ج)؛ تتضمن القمة اللاصقة متوالية الحمض الأميني ل00127© المتداخلة بين اثنين من المتواليات ‎epl‏ و8602 ؛ واختيارياً لا تمتد لتشمل أي منء أو لا تمتد لتشمل أكثر من حمض أميني واحد لمتوالية 601727 البشري قبل (أي طرف ‎N‏ للمتوالية ‎(epl‏
5 و/ أو بعد (أي الطرف ‎C‏ للمتوالية 602) هذه المتواليات. وفي نماذج معينة أخرى»؛ تكون القمة اللاصقة بحيث لا يتم مد أي من المتواليات 601 أو 802 لتشمل أي من أحماضها الأمينية المتجاورة في متوالية 00127 البشري؛ أو لتشمل أكثر من7؛ أو 5؛ أو 1 من الأحماض الأمينية المتعاقبة من أحماضها الأمينية المتجاورة فى متوالية 001727 البشري المتداخلية بين 601 و
2 ؛ وقد يمكون امتداد متواليات 601 و02 في هذه الحالة محدوداً قبل (801) أو بعد (602)
0 كما سبق. و في نماذج خاصة؛ لا يتم مد متواليات 010127 التي تشتمل على متواليات القمة اللاصقة لكى تشمل أحماضها الأمينية المتجاورة من متوالية 001727 البشري بأكثر من طرف ‎N‏ ‏لحمض أميني واحد أو بأكثر من طرف © ل7 أحماض أمينية بجوار 01©؛ أو بأكثر من طرف ‎N‏ ‏ل30 حمض أميني او طرف © ل30 حمض أميني مجاور ل802 .
في النماذج التي يتم فيها إنتاج جزيء ضخم؛ أو تصميمه؛ أواختياره للتعرف على قمة لاصقة تشتمل على عدة متواليات حمض أميني غير متجاورة ل10127© (أي متواليات ليست متجاورة في المتوالية الرئيسية ل60127 )؛ من الممكن إنتاج أو اختيار أجسام مضادة تتعرف على قمة لاصقة تشتمل على إحدى متواليات 00127 المذكورة؛ ثم اختيار من بينها تلك الأجسام المضادة لتك التي تتعرف على متوالية (متواليات) 60127 الأخرى ‎(Sa)‏ إجراء هذا الاختيار الأخير
باختيارات متتابعة إذا كان المطلوب هو التعرف على أكثر من متواليتين غير متجاورتين ل ‎.(CD127‏ ‏الاختراع الحالي أيضاً تشمل القمة اللاصقة البنيوية التي يتعرف عليها الأجسام المضادة المناهضة للاختراع. الاختراع الحالي أيضاً تشمل أجساما مضادة تربط هذه القمة اللاصقة البنيوية. تشمل
0 النماذج قمة لاصقة بنيوية 00127 9حيث تشتمل على (ط) حيث يحتوي النطاق على على الأقل 9680, 9685, 9690, أو 9695 نسبة تشابه متوالية مع المتوالية برقم هوية:115 و/ أو حيث يحتوي النطاق على على الأقل %80, %85, 9690, أو 9695 نسبة تشابه متوالية مع المتوالية برقم هوية: 117 و (2) حيث يحتوي النطاق على على الأقل 9680, 9685, 9690, أو 5 نسبة تشابه متوالية مع المتوالية برقم هوية: 116. بشكل أكثر تحديداً, القمة اللاصقة
5 البنيوية ‎CD127‏ حيث تشتمل على وحدات الحمض الأميني البناثية 79-73 و/ أو 119-114 و وحدات الحمض الأميني البنائية 196-193 للمتوالية برقم هوية: 114. الاختراع الحالي تشمل أجساما مضادة تربط هذه القمة اللاصقة البنيوية. في نماذج خاصة, الجزيء الضخم يتم إنتاج , تصميمه أو اختياره للتعرف على قمة لاصقة بنيوية حيث تشتمل على متواليات الحمض الأميني ل 7 البشري التي بها متواليات المتوالية برقم هوية: 115, المتوالية برقم هوية: 116 و
0 المتوالية برقم هوية: 117. بصفة خاصة؛ تتم إثارة الجسم المضاد ضد مولد مناعي يتكون من أو يشتمل على قمة لاصقة كما تم وصفه؛ أي؛ يتم إنتاجه بدئياً بتحصين حيوان غير الإنسان؛ وبخاصة كائن ثديي؛ بمولد ضد يشتمل على أو يتكون من القمة اللاصقة المذكورة. وبالتالي؛ فإن يتعلق الاختراع كذكل بمولد ضد ‎die‏ تكون القمة اللاصقة كما سبق وصفها؛ وبخاصة باستخدامه كمولد مناعي في إنتاج جسم
5 مضاد أو شظية رابطة لمولد ضد أو جزيء ضخم آخر. كما يتعلق الاختراع بالطرق المذكورة
لاستخدام مولد الضد المذكور. ونظراً لأن مولدات الضد قد تشتمل على مكونات غير ببتيدية إضافة إلى المكونات الببتيدية و/ أو قد تشتمل على مكونات ببتيدية لا تشكل جزءاً من القمة اللاصقة؛ فيجب الوضع في الاعتبار بأنه مالم يُذكر خلاف ذلك أو يتضح من السياق؛ فإنه عند الإشارة إلى متوالية مولد ذد و/ أو سمات المتوالية المذكورة؛ فإن المتوالية أو السامت المذكورة يجب اعتبار أنها تشير إلى المتوالية ‎of)‏ سماتها) الخاصة ‎gia‏ القمة اللاصقة لمولد الضد. فإذا كان مولد الضد يشتمل على أحماض أمينية لا تشكل جزءاً من القمة اللاصقة؛ فإن الأحماض الأمينية المذكورة يفضل ألا تشتمل على ‎iT‏ من 2؛ أو 4؛ أو 5 أحماض أمينية متتالية ل00127 . بالتالي وإن لم يظهر عدم الارتباط التقني؛ فإن التعريفات والسمات التي تم الكشف عنها في الوثيقة الحالية ‎dually‏ للأجسام المضادة أو شظاياها تنطبق كذلك على أي جزيء ضخم خاص بالاختراع. ‎Lis) 0‏ 60127 وفقا للاختراع, يشير "الارتباط” إلى البروتين ‎IL=TRO‏ إلى تفاعل من نوع مولد الضد-بالجسم المضاد ويشمل خصائص الارتباط النوعيللجسم المضاد أوالشظايا ‎ate‏ المرتبطة بمولد الضد والتي منها يعني الارتباط النوعي أن الشظايا المرتبطة بالجسم المضاد أو مولد الضد ترتبط ببروتين ‎IL=‏ ‎Law TRO‏ لا ترتبط أو ترتبط بألفة أضعف ‎HES‏ بالبروتينات الأخرى (مثل: السلسلة المشتركة 5 لمستقبل السيتوكين جاما). يتم تعريف أو تحديد الارتباط النوعي بأفضلية في الظروف الفسيولوجية, خاصة من حيث درجة الحموضة ومحتوى الملح في محلول الاختبار. يمكن أن يتم فحص الارتباط ونوعية الارتباط وفقا للاختبارات التي ادرجت في الأمثلة وبصفة خاصة يمكن أن يتم فحصها بواسطة تحليل ‎Western Blot si ELISA ,Biacore‏ في نموذج معين للاختراع, تستهدف الأجسام المضادة أو الشظايا منها المرتبطة بمولد الضد منها 0 وترتبط بالسلسلة ألفا من4ا-7-اا عندما يتم تركيبها في المستقبل ‎TSLP-R‏ (مع ‎CCRF2;‏ ‎Genbank accession Number AF338733;Reche et al., 2001‏ ). في نموذج معين, ترتبط الأجسام المضادة أو شظايا منها أو الجزيئات الخيمرية للاختراع ب 7 كبروتين منفصل بثابت تفكك ‎(Kd)‏ أقل من ‎M‏ 55-10. في نموذج مفضل , يكون ثابت التفكك ‎(Kd)‏ أقل من ‎M‏ 15-10 أو أقل من ‎OE=11M‏ أو أقل من ‎SE-11M‏
في نموذج معين, ترتبط الأجسام المضادة أو شظايا منها أو الجزيئات الخيمرية أو الجزيئات الكبرى الأخرى للاختراع بمولد الضد ل 60127 البشري مشتملا على متوالية 1م68( ‎SEQ ID‏ ‎(No: 110‏ و/ أو ‎(SEQ ID No: 111)ep2‏ . في نماذج معينة, يشتمل مولد الضد على شظية من 00127 البشري مشتملة على كل من 801 و 802 (أي يشتمل مولد الضد على
المتواليات 601 و02 والمتواليات المقحمة ل 00127 البشري). في نماذج أخرى, يشتمل مولد الضد فقط على المتواليات 801 و 802 من 60127 البشري, وريما بالإضافة إلى متواليات أخرى من مصدر آخر , والتي تختلف عن متواليات 00127 البشري. في نماذج أخربتالية؛ تمتد المتواليات 601 و/ أو 602 لتشمل عدد قليل من الأحماض الأمينية الإضافية من 60127 البشري, خاصة ما يصل إلى حمض أميني واحد ذات طرف لاا ل801, أو ما يصل إلى 7
0 أحماض ذات طرف © ل 801, أو حتى 1,10,20أو 30 حمض أميني ذات طرف ‎N‏ ل802, أو حتى 517,10,20 30 حمض أميني ذات طرف © ل 2م60. تتضمن مولدات الضد المعينة : مولد ضد كما بالأعلى, يشتمل بأفضيلة على كلا من 801 و 802, حيث لا تمتد متوالية 7 المشتملة على 6801 لتشتمل على الأحماض الأمينية المجاورة للمتوالية المذكورة في متوالية 00127 البشري, أو لا تمتد لتشتمل على أكثر من 30 حمض أميني ذات طرف لا أو
5 أكثر من 30 حمض أميني ذات طرف © ل 602 في متوالية 00127 البشري, أو مولدات ضد لها كل هذه الخصائص. في نماذج معينة, ترتبط الأجسام المضادة أو ‎Wad‏ منها أو الجزيئات الخيمرية أو الجزيئات الكبرى الأخرى للاختراع بمولد ضد ل 60127 البشري مشتمل على المتوالية بهوية رقم 115, ومتوالية بهوية رقم 116 ومتوالية بهوية رقم 117. في بعض النماذج , يلا يتداخل مولد الضد مع أو لا يشتمل على قمة لاصقة7-اا والتي يتم
0 اتعرف عليه بواسطة جسم مضاد أحادي النسيلة مختار من مجموعة تتألف من ‎CIGM,‏ ‎HAL403b 5 C2M3, P3A9, 0483, 0202, 02511, HAL403a‏ (الموصوف في ‎((HAL403b‏ . في بعض النماذج, يتم إثارة الجسم المضاد ضد ‎alge‏ ضد أو يرتبط بقمة لاصقة والتي لا تشتمل على أي من , أو لا تشتمل على بعض بقايا 82ا, ‎,K84‏ 100»ا, 1105 و 2 لمستقبل إنترليوكين 7 ‎Wl‏ خصوصا لا تشتمل على ‎KI00‏ و/ أو لا ‎dam‏ على
5 1105. في بعض النماذج, لا يشتمل مولد الضد أو القمة اللاصقة على 194> , أو لا يشتمل
على أي من أو لا يشتمل على كل البقايا المختارة من المجموعة المتألفة من بقايا 0190, ‎H191‏ ‎K194 4‏ ل ‎IL-TR‏ البشري. في نموذج معين, لا يشتمل مولد الضد أو القمة اللاصقة على 182 ولا 84>ا, أو لا تشتمل على ‎K100‏ ولا 1105, أو لا تشتمل على 2192, أو لا تشتمل على ‎Y192, 1191 , 0‏ ولا ‎K194‏ ‏5 في حين أن 00127 شائع لكل من 75-اا و ‎TSLPR‏ لابد من الإشارة إلى أنه ليس من الضروري أن يتعرف الجسم المضاد ل 00127 (أي يرتبط به في ظروف مناسبة) على 7 في كلا السياقين . علاوة على ذلك, حتى لو كان الجسم المضاد يرتبط ب 60127 في كل من سياق]7-اا و ‎,TSLPR‏ فإنه لن يكون بالضرورة له نفس التأثير على تفاعل ‎IL-7-‏ ‎IL-7R‏ وتفاعل 1510-15105. إنه يستطيع , على سبيل المثال , أن يمنع ارتباط ‎١-7‏ ب 0 7اا وليس ارتباط ‎TSLP‏ ب ‎J TSLPR‏ بالإضافة إلى ذلك, فإن ارتباط الجسم المضاد لأي مستقبل يمكن أن يكون له تأثيرات مختلفة, غير التأثيرات المختلفة على تفاعل مستقبل جزيء الريط. في الواقع, يمكن أن يعدل ارتباط الجسم المضاد من هيئة المستقبل, بشكل مستقل عن جزيء الربط أو بالاشتراك مع جزيء الربط, وبالتالي ينشط أو يعطل المستقبل. يمكن أن يكون التأثير مختلف لأي مستقبل وأنه قد يكون في الواقع مقلويا (معكوسا) : جسم مضاد الذي يعطل 78-اا يمكن أن ينشط ‎(Sally, TSLPR‏ بالعكس. كما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية, فإن تنشيط المستقبل يعني إثارة على الأقل بعض التغيرات الكيميائية التي تحدث فور ارتباط جزيء الريط مع مستقبله . يمكن أن تتضمن هذه التغيرات تعديل بنية المستقبل ( مثل: الديمرة) , فسفرة المستقبل و توظيف و/ أو فسفرة البروتينات المرتبطة بالمستقبل ( مثل: ‎Janus kinases‏ , عامل النسخ ‎STAT‏ إلخ ) و/ أو تغيرات في التوطين 0 الخلوي للمستقبل (مثل: المعالجة الداخلية للمستقبل). وكما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية, فإن تثبيط المستقبل يعني منع , أو إرجاع , على الأقل بعض التعديلات الكيميائية المرتبطة بارتباط جزيء ربطها بالمستقبل. فعلى سبيل المثال, قد يتم تنشيط المستقبل بشكل جوهري (أي ينشط حتى في غياب جزيء الريط) وتثبيطه في وجود عامل كالجسم المضاد للاختراع. بدلا من ذلك, أو بالإضافة إلى ذلك, قد يتم تثبيط التنشيط المستحث بجزيء الريط ‎LIS‏ , أو جزئيا, بواسطة تثبيط 5 المستقبل. وبالتالي يمكن أن يحدث التثبيط , من بين الآليات الأخرى, عن طريق منع ارتباط
جزيء ‎ball‏ (وأحداث "التنشيط " التابعة له), و/ أو منع التغيرات الهيكلية المرتبطة بارتباط جزيء الريط (مثل: الديمرة) و/ أو تعديل الموقع الخلوي للمستقبل (مثل: يمكن أن يحفز عامل التثبيط المعالجة الداخلية للمستقبل و/ أو التحللل وبالتالي يمنع التنشيط بجزيء الريط). غياب زيادة نضج الخلايا التغضنية المستحث ب 15120 يمكن أن ترتبط الأجسام المضادة الخاصة بالاختراع ب 00127 في المستقبل ‎TSLP‏ (أي يمكن
أن يرتبط ب 00127 عندما يكون في معقد مع ‎,CRLF2‏ مكونا مستقبل ©151). وبالتالي, يمكن أن يتداخل مع الإشارات المستحثة ب 1510 و/ أو التي يتوسطها مستقبل ‎TSLP‏ . ومن المدهش أنه قد وجد المخترعون أن الأجسام المضادة الموجودة موجهة ضد (أو التي تتعرف عليه) 60127 في مستقبل 1150 والتي تُظهر بعض التعارض لتفاعل ‎TSLP-TSLPR‏ ومع
0 ذلك تزيد نضجالخلايا التغضنية المستحث ب ©151: يكون النضج المذكور أعلى في الخلايا المعالجة ب ‎TSLP‏ والأجسام المضادة أكثر من الخلايا المعالجة ب ‎TSLP‏ فقط. تزيد هذه الأجسام المضادة التقليدية من نضجالخلايا التغضنية المعتمد على 0.ا15. في نماذج مفضلة, لا تتضافر الأجسام المضادة أو الشظايا في الاختراع مع ‎TSLP‏ لنضج الخلايا المناعية, وخصوصا الخلايا التغضنية. وبعبارة أخرى, لا تزيد الأجسام المضادة الخاصة بالاختراع من نضج الخلايا
5 المناعية المستحث ب ©151. هذا التأثير خاصة هو المطلوب في نضج الخلايا التغضنية. ينبغي التأكيد على أن قدرة الأجسام المضادة ل 00127 على تثبيط إنتاج ‎TARC‏ المستحث ب ‎YTSLP‏ يمكن اعتبارها مؤشر صحيح لتأثير سلبي (أو على الأقل ليس إيجابي) للأجسام المضادة على الإشارات المستحثة ب ‎TSLP‏ ونتائجها النهائية (إخصوصا نضج الخلايا التغضنية). في الواقع, وكما اكتشف المخترعون, حتى الأجسام المضادة التي تثبط بكفاءة إنتاج ‎TARC‏ المستحث
0 اب ‎TSLP‏ يمكن أن تزيد من نضج الخلايا التغضنية المعتمد على 1510 كما تم قياسه بواسطة التعبير عن ‎CD40‏ أو ‎CD80‏ مع ‎.TSLPR‏ ‏يمكن أن يتم قياس نضج الخلايا التغضنية المستحث ب ‎TSLP‏ بواسطة التعبير عنواسم الخلية ‎CD40‏ و/ أو 0 ‎(Inaba et al., 1995; Watanabe et al., 2005b)‏ كعلامة التي تحدد نضج بعض الخلايا المناعية, خاصة ما يسمى بتمايز 7171-2 الملاحظ في بعض أمراض
— 7 3 — المناعة الذاتية, الريو وعمليات الزرع. في بعض النماذج, يتم تقييم الزيادة في نضجالخلايا التغضنية المستحث ب ‎TSLP‏ بواسطة تحديد التعبير المرتفع عن علامات سطح الخلية ‎CD40‏ ‏و/ أو 6080 في الخلاياالموجبة ‎TSLPR‏ المعالجة ب 1510 وبالجزيئات الضخمة للاختراع مقارنة بالخلايا الموجبة ‎TSLPR‏ المعالجة ب ‎TSLP‏ فقط.
في نموذج معين, فإن الجزيئات الضخمة, خصوصا الأجسام المضادة أو شظايا منها, التي لا تزيد من نضجالخلايا التغضنية المستحث ب ‎TSLP‏ لا تزيد من تعبير 6080 بأكثر من 9625 عند مقارنتها بالإثارة ب ‎TSLP‏ فقط (بدون جزبئات ضخمة). وبفضل , أن لا يزيد التعبير عن ‎CD80‏ ‏بأكثر من %20 , ويفضل ليس بأكثر من 9610 ويفضل أكثر ليس بأكثر من 965. في نموذج معين مفضل, لا يزيد التعبير عن ‎CD80‏ أو يقل فى ‎LAY‏ المثارة ب ‎TSLP‏ وبالجزيئات
0 الضخمة عند مقارنتها بالخلايا مثارة ب ‎TSLP‏ فقط. في نموذج معين, فإن الجزيئات الضخمة التي لا تزيد من نضجالخلايا التغضنية المستحث ب ‎TSLP‏ لا تزيد من التعبير عن 6040 بأكثر من 9650 عند مقارنتها بالإثارة ب ‎TSLP‏ فقط ( بدون ‎cline‏ ضخمة). ويفضل, أن لايزيد التعبير عن 0040 ‎SL‏ من 1625 , ويفضل ليس بأكثر من 9610 وبفضل أكثر ليس بأكثر من 965. في نموذج معين مفضل, لا يزيد التعبير عن 5 6040 أو يقل فى الخلايا المثارة ب ‎TSLP‏ وبالجزيئات الضخمة عند مقارنتها بالخلايا المثارة ب ‎.TSLP‏ ‏يتضح قياس نضجالخلايا التغضنية أيضا في الأمثلة ) انظر خاصة المثال 9 ) ويمكن تنفيذه وفقا للأساليب القياسية المعروفة من الشخص صاحب المهارة, خصوصا أي اسلوب مناسب لتحديد تعبير 6080 و/ أو ‎CD40‏ على الخلايا التغضنية, كعلامة على نضجالخلايا التغضنية. 0 .من أجل فحص خصائص الأجسام المضادة ل 00127 بالنسبة إلى غياب التقوية الغير مرغوب ‎led‏ لإشارات ‎TSLP‏ يمكن استخدام الخلايا المعبرة عن ‎TSLPR‏ , مثل الخلايا الثديية 8 ‎pro‏ ( مثل ‎BA/F3 LA‏ الموضحة هنا). تثبيط التعبير عن إنتجرينات 04, 87 و 04/87 المستحث ب ‎IL7‏
فينموذج معين,فإن الأجسام المضادة (أو الجزيئات الضخمة) الخاصة بالاختراع تثبط التعبير عن
إنتجرينات 04, 7] و 4/]7»#المستحث ب 7اا في المعمل. يدلالتعبيرعن إنتجرينات ‎od,‏
7 لمستحثب7اا ‎WS,‏ يتم استخدامه في الوثيقة الحالية, على أحد أو كلا من زيادة
مستوى التعبيرعن إنتجرينات 04 و ‎BT‏ و الزيادة في عدد أو نسبة الخلايا الليمفاوية آ المعبرة عن إتتجرينات ‎fd, BT‏ أو 04/07. يمكن أن يكون التثبيط جزثيا, أي أن مستوى التعبير عن
إنتجرينات7م ,04و/ أو 04/07 في وجود ‎ILT‏ يزداد فوق مستوى خط الأساس (أي المستوي
بدون جسم مضاد ولا 7اا ) في وجود الأجسام المضادة, لكن أقل مما كانت عليه في غياب
الأجسام المضادة, أو يمكن أن يكون التثبيط كليا, أي أن مستوى التعبير عن ‎BTsites)‏ ,04و/
أو 04/07 في وجود ‎IL7‏ والجسم المضاد ليس ‎SST‏ من مستوى خط الأساس.
0 في نموذج معين, تثبط الأجسام المضادة الخاصة بالاختراع التعبير عن إنتجربنات07 ,04و/ أو 7 في المعمل, أي أن مستوى التعبير عن إنتجرينات07 ‎0d,‏ و/ أو 04/07 يكون أقل في الخلايا المعالجة بالأجسام المضادة ( و مع و/ أو بدون 7اا) أكثر من الخلايا الغير معالجة (أي بدون جسم مضاد أو 7ا). قد يكون مدى التثبيط مرتبطا بالجرعة. يمكن قياس التعبير عن التثبيط على ‎pill‏ المبين في باب الأمثلة, والذي يمكن أن يتكيف معه الشخص صاحب المهارة على
5 سيل المثال مع أجسام مضادة محددة , شظايا جسم مضاد أو النطاقات المرتبطة بمولد الضد أو الجزيئات الضخمة الأخرى المبينة في هذه الوثيقة و/ أو مع نماذج أمراض محددة حسب الحاجة. في نماذج مفضلة, فإن الأجسام المضادة (أوالجزيئات الضخمة) الخاصةبالاختراع تثبط التعبيرعن إنتجرينات07 ,04و04/]7 داخل الجسم. كما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية , هذا التعبير يعني أن (1) التعبيرعن إنتجرينات7م] ,504 ‎,04/B7‏ (2) عدد أو نسبة ‎WAY‏ الليمفاوية آ الموجبة
0 04. 07 5[ أو 04/87 و/ أو (3) يقل تطعيم ‎WAN‏ الليمفاوية الموجبة ‎BT‏ ,04 و/ أو 04/87 في عينات تم الحصول عليها من حيوانات معالجة بأجسام مضادة بالنسبة للحيوانات الغير المعالجة. كما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية , يدل التطعيم على إدماج النسيج المطعم أو الخلايا في الجسم المضيف , العملية التي تحدث عادة على مدى فترة زمنية من بضع ساعات إلى بضعة أيام. في نماذج معينة, الحيوان هو نوع من الثدييات, خاصة الثدييات غير البشرية, خاصة
5 فأر. في نماذج معينة,الحيوان يكون بشري.في نماذج معينة, لوحظ التأثير على الخلايا الليمفاوية
البشرية المحقونة في حيوان متلقي, يفضل أن يكون فأر ذو مناعة منخفضة. في نماذج معينة, بعد أسبوعين من حقن ‎PBMC‏ البشرية في فئران منخفضة المناعة, يتم تقليل متوسط النسبة المئوية للخلايا 7 الموجبة إنتجرين ‎BT‏ بنسبة 9625 على الأقل, وبفضل بنسبة 9650 على الأقل, في الفئران المعالجة بالأجسام المضادة بالنسبة للفئران الغيرمعالجة. في نماذج معينة, بعدأسبوعين من حقن ‎PBMC‏ البشرية في فئران منخفضة المناعة, يتم تقليل متوسط النسبة المئوية للخلايا 1 المطعمة الموجبة لإنتجرين07 بنسية 25 96 على الأقل, ويفضل بنسبة 9650 على الأقل بل ويفضل أكثر بنسبة 9670 على الأقل في الفئران المعالجة بالأجسام المضادة بالنسبة للفئران الغير معالجة. يمكن تحديد تأثير الجسم المضاد أو الجزيء الضخم الخاص بالاختراع باستخدام الأساليب المطروحة في باب الأمثلة, خاصة مثال 16 للتعبير عن إنتجرين 04/]07 و التطعيم, والذي يمكن 0 أن يتكيف معه الشخص صاحب المهارة حسب الحاجة على سبيل المثال مع الجسم المضاد المحدد, الشظية أو النطاق المرتبط بمولد الضد منه أو الجزيئات الضخمة الأخرى و/ أو مع نموذج مرض محدد. متبطات المعالجة الداخلية ‎CD127J‏ ‏المعالجة الداخلية هي العملية الخلوية التي يتم من خلالها نقل مستقبل سطح خلية ‎CD127 die‏ 5 داخل الفراغ السيتوبلازمي للخلية ‎Lay)‏ فياعلى سطح الأجزاء أو الأغشية داخل الخلية) ويالتالي لم يعد يمكن الوصول إليها من الفراغ خارج الخلية, أي أن المستقبل المعالج داخليا قد لا يكون اتصل مباشرة بجزيء ربط في الفراخ خارج الخلية. قد يكون جزيئ الريط, سواء كان جزيئ ربط طبيعي أو أي جزيء ربط صناعي أو جزيء آخر مرتبط بالمستقبل , معالج داخليا مع المستقبل. تخضع معظم المستقبلات إلى معالجة داخلية ثابتة وبتم الإبقاء علي تعبير سطحها الخلوي ثابتا سواء من خلال استبدال المستقبلات المعالجة داخليا أو المتحللة بمستقبلات مصنعة حديثا اناضجة أو من خلال إعادة تدوير مباشر, أي نقل المستقبل المعالج داخليا ثانية إلى سطح الخلية. قد تؤدي بعض المثيرات إلى زبادة معدل المعالجة الداخلية و/ أو نقص معدل الاستبدال١إعادة‏ التدوير, وبالتالي تؤدي إلى انخفاض صافي في تعبير سطح الخلية عن المستقبل. كما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية, تدل المعالجة الداخلية المستحثة ب7اا ل 00127على نقص تعبير 5 سطح الخلية عن 00127 المستحث بوجود ‎ILT‏ (أو لوحظت في وجود ‎(IL7‏ في الوسط خارج
الخلية , كما لوحظ في المعمل بعد فترة محدودة من الحضانة من أجل استبعاد الآثار على المدى الطويل مثل ‎alll‏ النسخي. وتكون الفترة المذكورة عادة في حدود عشرات الدقائق, يفصل أقل من ساعتين, يفضل أكثر أقل من ساعة ‎Jiang‏ أكثر من ذلك أن تكون 45 دقيقة أو أقل, 30 دقيقة أو أقل أو 15 دقيقة أو أقل.
في نموذج مفضل, يثبط الجسم المضاد الخاص بالاختراع المعالجة الداخلية ل 00127 المستحثة ب 7اا. وبالتالي , عند حضانتها مع الجسم المضاد الخاص بالاختراع , لا يحث وجود ‎IL7‏ ‏انخفاض تعبير سطح الخلية عن 00127, أو يحث انخفاض أقل قوة في تعبير سطح الخلية عن 7 من الخلايا التي تم حضانتها بدون أجسام مضادة. في نموذج معين, عند حضانتها مع أجسامد مضادة خاصة بالاختراع, فإن مستوي تعبير سطح الخلية عن 00127 عند حضانة
0 الخلايا في 37 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة مع 5 نانوجم/ مل من 7اا يكون بنسبة 9680 على الأقل, ويفضل بنسبة 9690 على الأقل لمستوى تعبير سطح الخلية في الخلايا التي تم حضانتها بدون 7ا. في المعمل, يفضل أن يتم قياس تعبير سطح الخلية بعد فترة محدودة كما هو ‎Cre‏ ‏أعلاه. إلى جانب ذلك, حيث أن معظم عمليات المعالجة الداخلية الخلوية يتم تثبيطها في درجة حرارة منخفضة, عادة ما يتم ملاحظة التأثير بشكل أفضل في درجة حرارة فسيولوجية, خاصة 37 5 درجة منوية. ومع ذلك, يتم التفكير ‎Lad‏ في حضانة الخلايا في درجات حرارة منخفضة, خاصة 4 درجات مثوية. من المعروف أن الأجسام المضادة لمستقبل يمكن أن تحفز المعالجة الداخلية للمستقبل, وهذا يعني أن تعبير سطح الخلية عن المستقبل يقل في وجود الجسم المضاد. قد ‎Lay‏ هذا خاصة من خلال ‎Call‏ على تغييير هيئة المستقبل التي تشبه تلك التي تستحث بجزيء الريط الطبيعي الذي يحفز 0 المعالجة الداخلية, وقد يعتمد هذا التأثير على القمة اللاصقة المتعرف عليها بواسطة الأجسام المضادة. كما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية, 'يحفز جسم مضاد المعالجة الداخلية ل 60127 ' يعني أن الخلايا التي تم حضانتها في وجود جسم مضاد تُظهر انخفاض تعبير سطح الخلية عن 7 مقارنة بالخلايا التي تم احتضانها في غياب الجسم المضاد. يفضل قياس تعبير سطح الخلية في المعمل بعد فترة حضانة محدودة وفي ظروف درجة حرارة كالمذكورة أعلاه. في نموذج 5 مفضل, لا يحفز الجسم المضاد الخاص بالاختراع المعالجة الداخلية ل00127. وبالتالي, لا يقل
تعبير سطح الخلية عن 60127 في الخلايا التي تم احتضانها في وجود الجسم المضاد, أو لا يقل بشكل كبير, مقارنة بتعبير سطح الخلية في الخلايا التي تم احتضانها في ظروف مماثلة على خلاف ذلك, لكن في غياب الجسم المضاد. في نماذج معينة, عنداحتضانهافيدرجةحرارة 37 مئويةلمدة 30 إلى 45 دقيقة في وجود 50 نانوجم/ مل من الأجسام المضادة, فإن مستوى تعبير سطح الخلية عن00127 يكون بنسبة 9680 علدالأقل , وبفضل بنسبة 9690 على الأقلم نمستواهافي الخلايا التي تم احتضانهافي غيابالجسم المضاد. يمكن ملاحظة هذاالتأثير في غياب7اا ( فى كل من الخلايا المعالجة ‎pally‏ معالجةبالأجسام المضادة) , وفي وجود 7اا , و/ أو كلاهما. يمكن أن تساهم أي من الخاصيتين المرتبطتين بالمعالجة الداخلية ل 601727 الموضحين بالأعلى 0 ( أي تثبيط المعالجة الداخلية المستحثة ب 7اا أو عدم حث المعالجة الداخلية) في زيادة كفاءة الأجسام المضادة, بينما الجمع بين الخاصيتين ريما يكون أكثر كفاءة. المذكور في هذه الوثيقة هو جسم مضاد يمثل نموذج مفضل, حيث أنه في وجود كلا من ‎ILT‏ والجسم المضاد المذكور, لا يقل تعبير سطح الخلية عن 000127 بشكل كبير. في هذه النماذج المفضلة, ‎dag‏ 45 دقيقة من الحضانة في وجود 50 نانوجم/ مل من الأجسام المضادة, متضمنة 15 دقيقة في وجود 5 نانو جم 5 امل من ‎ILT‏ , في 37 درجة مئوية , وبكون مستوى تعبير سطح الخلية عن 000127 بنسبة 0 على الأقل, ويفضل بنسبة 9690 على الأقل من مستواها في خلايا التحكم,و يتم احتضانها في وسط لا يحتوي على جسم مضاد أو ‎ALT‏ ‏تعطل تفاعل سلسلة ‎yc‏ - 060127 وفقا لنموذج معين, يمكن للجزيء الضخم, خاصة جسم مضاد أو شظايا منه مرتبطة بمولد الضد 0 الخاصة بالاختراع, أن يعطل ارتباط 0600127 مع سلسلة ‎ye‏ ل ‎7-٠4‏ . وهذا يعني أن, تحت ظروف (خاصة ظروف كيميائية وفيزيائية) حيث يكون 000127 وسلسلة 76 مرتبطين معا في غياب الجسم المضاد , وخاصة في وجود ‎IL‏ يقلل وجود الجسم المضاد هذه الرابطة بشكل كبير. في نماذج معينة, في وجود الأجسام المضادة و 7 ‎IL‏ , لا يرتبط 0600127 مع ‎YC‏ على ‎day‏ ‏الخصوص, عند وجود الأجسام المضادة و 7 -ا, فإن كمية سلسلة ‎YC‏ التي وجدت متصلة ب (أو 5 مرتبطة مع) 00127 تكون أقل من 9680, يفضل أن تكون أقل من 9650, ويفضل أكثر أن
تكون أقل من 9625 أو 9610 من الكمية المرتبطة عند غياب الجسم المضاد ( أو في وجود جسم مضاد ل 60-127 آخر مثل ‎(MD707-13‏ في ظروف مماثلة خلاف ذلك, خاصة في وجود ‎IL 7‏ يمكن تقييم تلك الخاصية للجسم المضاد خاصة بواسطة أساليب الترسيب المناعي المشترك , المعروفة لدى الشخص صاحب المهارة لاختبار تفاعل البروتين والموضحة في هذه الوثيقة في المثال 21. بصفة خاصة, يمكن حضانة الخلايا في وجود أو غياب الأجسام المضادة المعملة, ثم
إذابتها في ظروف تسمح بالحفاظ على مركبات البروتين, ويمكن تعريض ناتج التحلل إلى ترسيب مناعي مضاد ل 00127 وبتم تقييم وجود ‎YC‏ في مركب المشاركة المناعية المحتوي على 7 بواسطة لطخة ويسترن باستخدام أجسام مضادة ل 70 (على العكس من ذلك, قد يتم تنفيذ الترسيب المناعي باستخدام أجسام مضادة ل ©لإووجود 00127 المقيم باستخدام أجسام
0 مضادة ل 00127). هناك أسلوب واحد للحصول على مثل هذه الأجسام المضادة وهو إثارة الأجسام المضادة المذكورة ضد ‎dad‏ لاصقة تشتمل على متواليات من الموضع20 ل ‎,CD127‏ أو اختيار الاجسام المضادة التي تتعرف على هذه القمة اللاصقة. في الواقع, فإن ارتباط الجسم المضاد لهذا الموضع, البالغ الأهمية للتفاعل مع ‎YC‏ من المرجح أن يعطل, على سبيل المثال بواسطة المنافسة أو الإعاقة
5 الفراغية, تفاعل ‎ye‏ مع ‎.CD127‏ ‏من الممكن أيضا, بوجه خاص, اختيار أجسام مضادة لها هذه الخاصية المرغوية, من الأجسام المضادة ل 00127, على سبيل المثال:من مكتبة الأجسام المضادة (بما في ذلك عند عدم الحصول على هذه المكتبة باستخدام مستمنع (مولد ضد) مشتملا على متواليات الموضع20 ), من خلال أساليب الفحص التقليدية المعروفة لدى الشخص صاحب المهارة والقابلة للتكيف بسهولة لهذا
0 الغرض. بصفة خاصة, على سبيل المثال, يمكن أن يكون 60127 مرتبطا بأطباق ذات 96 ‎Sle‏ ركائز صلبة مماثلة تستخدم عادة لمثل هذا الفحص. يمكن إضافة الأجسام المضادة التي تشكل مكتبة على حدة, كل في عين واحدة, وبتم إضافة السلسلة ©7 لكل عين. بعد غسل الأطباق, ‎Ka‏ اختبار وجود ©/ في كل عين, على سبيل المثال: بواسطة أساليب قائمة على التألق الفلوري. في العيون المحتوية على جسم مضاد ذو الخاصية المرغوية, لن يتم اكتشاف أي ‎ye‏ (أو كميات
5 صغيرة منها). من الواضح أنه من الممكن تعديل هذا الأسلوب . على سبيل المثال: بدلا من وضع
— 3 4 — الأجسام المضادة على ركيزة صلبة في مواقع بعنيها, يسمح ‎J‏ 60127 أن يرتبط بالأجسام المضادة الموضوعة, ‎mans‏ لسلسلة 76 أن ترتبط بسلاسل 60127 المثبتة بالتالي. مناهض لتفاعل ‎IL-7-IL-7R‏ ‏وفقا لنموذ ‎d‏ معين , فإن الجزيء الضخم , خاصةجسممضادأوشظايامنهمرتبطةبمولدالضدالخاصةبالاختراع , له أيضا خصائص مضادة تجاه إنترليوكين 7 (7-اا) وبالتالى اتصالمناهض, أي أرتباط 7-اا ب 60127 على الخلايا الموجبة ‎CD127‏ . ‎ia‏ "الخصائص المناهضة ‎IL=7-IL-TR Je lal‏ أن الأجسام المضادة أو الشظايا منها المرتبطة بمولد الضد الخاصة بالاختراع, ‎alls‏ تستهدف ‎IL-TR‏ ألفا, لها تأثير منع الوصول إلى 0 المستقبل 7-اا المعبر على الخلايا ‎,CD127‏ خصوصا ‎WIA‏ آ المُستفعلة البشرية , وبصفة خاصة ‎WDA‏ آالذاكرة البشرية , لشريكها في الارتباط 7-اا, خصوصا 7-اا البشري. ونتيجة لمناهضة ارتباط 7-ا, تؤدي الأجسام المضادة الخاصة بالاختراع أو شظاياها الوظيفية إلى نقص الخلايا الليمفاوية بواسطة منع تولد خلايا ‎T‏ التوتية المعتمدة على 7-اا . يمكن أن تكون الخصائص المناهضة بصفة خاصة مناهضة باتجاه إشارات ‎IL-TR‏ المستحثة ب 5 7-اا. يمكن التعرف على المناهض لإشارات ‎IL-TR‏ المستحثة ب 7-اا بواسطة قياس تثبيط فسفرة51/875 كما هو موضح في الأمثلة. إن فسفرة51/815 المستحثة ب 7اا هي علامة على تنشيط ‎ILTR‏ وتوقع أن الجسم المضاد المناهض لتفاعل 117-1174 أن يقلل فسفرة ‎STATS‏ ‏المستحثة ب ‎JLT‏ ‏في نماذج معينة, فإن الجزيء الضخم الخاص بالاختراع هو مناهض لإشارات ‎IL-TR‏ المستحثة 0 ب 7-اا. في نماذج معينة, يثبط الجزيء الضخم الخاص بالاختراع فسفرة ‎STATS‏ المستحثة ب 7 . في نماذج مفضلة, يكون تثبيط فسفرة51/875 أكبر بنسبة 9650 عند تركيزات للجسم المضاد منخفضة تصل إلى 50 نانوجم/ مل و/ أو يكون تثبيط فسفرة 1/815 5أكبر بنسبة 9680 عند تركيزات للجسم المضاد منخفضة تصل إلى 100 نانوجم/ مل. يمكن تقييم تثبيط
فسفرة51/815 بواسطة أساليب معروفة لدى الشخص صاحب المهارة وخاصة بواسطة أساليب على النحو المبين في باب الأمثلة (خاصة المثال 3). 'مضاد لارتباط ‎TSLP‏ " ‎Tks‏ لأن الأجسام المضادة الخاصة بالاختراع تريط 60127 في ‎1-7٠4‏ ؛ فقد تريط أيضاً 60127 في ‎diay TSLPR‏ خاصة عن طريق الإعاقة الفراغية و/ أو التنافس على مواقع ‎Jal‏ المشتركة؛ قد تثبط ارتباط ‎TSLPR, TSLP‏ . وبعبارة أخرى؛ قد توفر الأجسام المضادة الخاصة بالاختراع نشاطاً مضاداً لربط ‎TSLP‏ ‏"'مثبط إنتاج ‎TARC‏ المستحث ب ‎TSLP‏ " في نموذج خاص؛ قد تثبط الأجسام المضادة الخاصة بالاختراع إنتاج ‎TARC‏ المستحث ب©ا15 0 للخلايا موجبة ©151. وكما سبق الإشارة ‎cad)‏ فإن الخلايا التغضنية المستحثة ب©.ا175 تنتج مستويات مرتفعة من 1/8146. وقد ينتج ذلك عن ارتباطها ب ‎TSLPR‏ وتأثيرها المحتمل كمضادات لارتباط ‎TSLP‏ ‏في نموذج ‎(pals‏ تم اختيار الأجسام المضادة الخاصة بالاختراع؛ وشظاياها الرابطة لمولد الضد حسب قدرتها ليس على زيادة تطفيرها (حيث يتحدد التطفير» على سبيل المثال؛ كتعبير زائد عن 5 واسم سطح الخلية 6040 و/ أو 6040). قد يكون مستوى إنتاج ‎TARC‏ المستحث ب0ا75 في الخلايا المعالجة ‎TSLP,‏ مع أجسام مضادة ل0127© أو شظاياها أو جزيئاتها الخيمرية كما تم وصفه في الوثيقة الحالية أقل منه في الخلايا المعالجة ب©ا15 بمفرده. بعبارة ‎(gal‏ قد تكون الجزيئات الضخنة الخاصة بالاختراع هي مثبطات إنتاج ‎TARC‏ المستحث ب©ا15 . في أحد نماذج الاختراع؛ يقوم الجسم المضاد أو شظيته ‎(Adie‏ أو جزيء خيمري كما تم وصف في الوثيقة الحالية بخفض مستويات ‎.TARC z wl‏ وفي نموذج معين للاختراع؛ يتم خفض مستوى إنتاج ‎TARC‏ في الخلايا المعالجة ‎TSLP‏ ‏والجسم المضاد؛ أو شظيه أو جزيء خيمري بنسبة تزيد عن 9610؛ ويفضل أكثر من 9620؛ مقارنة بالمستوى في الخلايا المعالجة ب0ا15 ‎chad‏ عند تركيز جسم مضاد منخفض يصل إلى 1 ميكرو جم/ مل. ‎ang‏ توضيح قياس إنتاج ‎TARC‏ في الأمثلة (خاصة المثال 9) ويمكن إجراءه
على خلايا مناعية موجبة 00127؛ وبخاصة ‎LIA‏ تغضنية؛ من ‎die‏ دم باستخدام أية طريقة
معروفة للشخص صاحب المهارة.
"WAY ‏سمية‎ hala
في نموذج معين للاختراع؛ تتميز الأجسام المضادة الخاصة بالاختراع أو شظاياها الرابطة لمولد الضد الموجهة ضد جزيء 60127 الموجود في مستقبل 7-اا كذلك بخاصة أنها سامة للخلايا
ضد الخلايا البشرية؛ وبخاصة خلايا ‎T‏ البشرية التي تعبر عن المستقبل المذكور. وتكون الخلايا
البشرية المعبرة عن 00127 كسلسلة لمستقبل 7-ااء وهي هدف الأجسام ‎salad)‏ الخاص
بالاختراع وشظاياه؛ بصفة أساسية هي ‎T WIS‏ الليمفاوية وبشكل أدق المجموعات الفرعية من
خلايا ‎T‏ الليمفاوية المؤثرة بما في ذلك خلايا آ غير المعالجة والذاكرة ولكن ليست خلايا 1
0 المنظمة ‎(Treg)‏ وبخاصة ليست خلايا ‎Treg‏ الطبيعية الباقية. وتتولد خلايا ‎T‏ الذاكرة نتيجة لبدء مولد ضد وتتحددها بشكل اساسي خصائصها الوظيفية؛ مثل القدرة على الخضوع لتكاثر استذكاري عند ‎sale)‏ تنشيط والتمايز إلى خلايا مؤثرة وذاكرة ثانوية. بالمثل» ويقوم مستقبل ‎TSLP‏ المستهدف (كمعقد يشمل سلسلة ‎(WIL-7-R‏ بتنظيم تمايز الخلايا الليمفاوية ‎T‏ المساعدة؛ والخلايا 8 والخلايا المتغضنة.
5 طبقاً لأحد نماذج الاختراع؛ تزيد الأجسام المضادة وشظاياهاء التي تتميز ب "نشاط سام للخلايا ضد الخلايا ‎T‏ " أو خواص سامة للخلايا (أجسام مضادة سامة للخلايا) من النتضوب في مجموعة ‎T LDA‏ المؤثرة عن طريق ‎JB‏ هذه الخلايا ومن ثم خفض عددها عند إعطاءها. وعلى العكس؛ فإن تلك الأجسام المضادة لا تغير من المجموعة الفرعية لخلايا 1 المنظمة ولا تغيرها إلى حد كبير» مما يسمح للخلايا ‎Treg‏ بالقيام بوظيفتها. وفي هذا السياق؛ في نموذج معين؛ لوحظ أن
‎T dus 0‏ المنظمة ‎(Treg)‏ مقابل ‎T‏ المؤثرة ‎(Teff)‏ تزيد بعد إعطاء أجسام مضادة وفقاً للاختراع. ‎Ag‏ نموذج معين؛ تتيح الأجسام المضادة الخاصة بالاختراع زيادة النسبة المذكورة لحوالي 9610 أو أكثر. ‎Ag‏ نموذج معين؛ تكون الزيادة في نسبة ‎Treg‏ مقابل ‎Teff‏ حوالي 9620. طبقاً لنموذج معين للاختراع؛ تتميز الأجسام المضاد الخاصة بالاختراع؛ الأجسام المضادة السامة للخلايا تتميز بسمية خلوية تعتمد على جسم مضاد (806©0). بالنسبة لنموذج آخرء الأجسام
— 6 4 — المضادة الخاصة للاختراع ليس له خواص ‎.ADCC‏ تم اعتبار قدرة ‎ADCC‏ الجسم المضاد مجبة عندما زادت سمية الخلايا النوعية عن 9610. ويمكن تقييم ‎ADCC‏ في تجرية ‎Jie ADCC‏ الاختبار الموصوفة في الأمثلة (في مثال معين 10). وعندما يكون الجسم المضاد هو جسم مضاد جرذي تكون الخلايا المستخدمة فى تجرية ‎ADCC‏ هي خلايا ‎LAK‏ (قاتلة منشطة بالليمفوكين) من الجرذ. وعند جعل الأجسام المضادة متوافقة مع البشر يمكن إجراء تجرية ‎ADCC‏ على خلايا ‎NK‏ بشرية. تتميز الأجسام المضادة الخاصة بالاختراع بخواص سمية الخلية والتضاد لخلايا موجبة 60127 حيث تتيح تأثيرات تراكمية لتلك الخواص بالنسبة لنضوب ‎TWA‏ المؤثرة» خاصة خلايا 1 الذاكرة ومن ثم توفير نضوب أقوى (استهلاك مجموعة من خلايا +27 1 ‎(CD‏ وتناظر ‎f‏ لانخفاض 0 فى عدد خلايا 1 المستهدفة. تتناول الفقرات السابقة وكذلك الأمثلة كيفية اختبار تلك الخصائص الوظيفية. وتتناول الأجزاء ‎dul‏ مختلف الخصائص البنيوية والتعديلات الممكنة للأجسام المضادة أو شظاياها أو الجزيئات الخيمرية . وفى ضوء هذه التوجيهات 3 سيكون بمقدور الشخص صاحب المهارة فى المجال الحصول على أجسام مضادة أو شظايا ذات الخصائص البنيوية التالية مع الخصائص الوظيفية 5 المطلوية؛ خاصة بدءاً بجسم مضاد به الخصائص الوظيفية المطلوية؛ ‎(NI3B2 (ic‏ لأنه في بعض الحالات يمكن ‎Ob sal‏ تبني بعض السمات البنيوية لنيعدل من السمات الوظيفية و/ أو باختبار فقد الخصائص الوظيفية بعد إدخال خاصية بنيوية جديدة. علاوة على ذلك؛ مع الكشف فيالوثيقة الحالية عن ‎dad‏ لاصقة يتعرف عليها الجسم المضاد؛ يعد تطوير أجسام مضادة أخرى تشترك في نفس السمات الوظيفية إجراءاً روتينياً؛ لأنه من الممكن اختيار الأجسام المضادة المثارة ضد ئفس القمة اللاصقة أو قمة مشابهة لها. مرة أخرى؛ من الممكن بخطوات الاختبار المباشر ‎al‏ تم الكشف عنها في الوثيقة الحالية؛ أن يستخدم الشخص صاحب المهارة تلك الاختبار في اختيار الأجسام المضادة المناسبة. في نموذج مفضل للاختراع, يكون الجزيء الضخم هو 01382 أو جسم مضاد به واحدة على الأقل من ‎CDRs‏ ل 8011382, أو الشظايا هي شظايا 811382. بالتالي, يتعلق الاختراع بجسم
مضاد أو شظية منه حيث ‎VH‏ تشتمل على واحدة على الأقل من متواليات الحمض الأمينى التالية, أو إحدى صورها المفضلة المتوافقة مع البشر ‎J‏ وصفها: ‎VHCDR1 .‏ المتوالية برقم هوية: 10؛ ‎VHCDR2 .‏ المتوالية برقم هوية: 12( ‎VHCDR3 . 5‏ المتوالية برقم هوية: 14(
و/ أو حيث ‎VL‏ تشتمل على واحدة على الأقل من متواليات الحمض الأمينى التالية, أو إحدى صورها المفضلة المتوافقة مع البشر ‎Jl‏ وصفها: ‎VLCDRI .‏ المتوالية برقم هوية: 16؛ ‎VLCDR2 .‏ المتوالية برقم هوية: 18(
‎VLCDR3 ١٠ 0‏ المتوالية برقم هوية: 20 في نموذج معين, الجزيء الضخم تشتمل على 2, 3, 4 أو 5 على الأقل من متواليات ‎CDR‏ ‏2 أي ‎VHCDRI‏ المتوالية برقم هوية: 10, ‎VHCDR2‏ المتوالية برقم هوية: 12, ‎VHCDR3‏ المتوالية برقم هوية: 14, ‎VLCDR1‏ المتوالية برقم هوية: 16, ‎VLCDR2‏ المتوالية برقم هوية: 18 و ‎VLCDR3‏ المتوالية برقم هوية: 20, أي عدد منها يمكن استبداله بإحدى
‏5 صورها المفضلة المتوافقة مع البشر التالي وصفها. في نموذج معين, يشتمل الجزيء الضخم على كل الست متواليات ‎CDR‏ ل 801382, أي عدد منها يمكن استبداله بإحدى صورها المفضلة المتوافقة مع البشر ‎JU‏ وصفها.في نماذج خاصة, يشتمل الجزيء الضخم على السلسلة ‎VH‏ ‏التي بها متوالية الحمض الأميني للمتوالية برقم هوية: 22 و / أو السلسة ‎VL‏ التي بها متوالية الحمض الأميني للمتوالية برقم هوية: 24. في نماذج خاصة, الجزيء الضخم يشتمل على السلسلة
‏0 الثقيلة التي بها متوالية الحمض الأميني للمتوالية برقم هوية: 2 و / أو للمتوالية برقم هوية: 6 و / أو السلسلة الخفيفة التي بها متوالية الحمض الأميني للمتوالية برقم هوية: 4. تتعلق نماذج معينة ‎(gal‏ بسلاسل ‎VH‏ و ‎VL‏ وهي صورها المتوافقة مع البشر الذي تم الكشف عنها أدناه. في نموذج
معين, تحتوي السلسة الثابتة على سلسلة ‎Fe‏ ل متوالية ‎IgG]‏ الجرذي المبينة في الشكل 12
.34 ‏و / أو المتوالية رقم:‎ (Uniprot P20759)
الشظايا
تعد "الشظية الرابطة لمولد ‎"aca‏ من الجسم المضادة ‎Ble‏ عن ‎gia‏ من الجسم المضاد؛ أي جزيء
يناظر جزءٍ من بنية الجسم المضاد الخاص بالاختراع حيث يتميز بقدرة على ربط مولد الضد
لسلسلة ألا من مستقبل 7-اا ل7-اا_البشري؛ وربما في صورته الأصلية؛ وتتميز هذه الشظية
بشكل خاص بنفس أو إلى حد كبير نفس نوعية ربط مولد الضد المذكور للجسم المضاد المناظر
‎el)‏ السلسلة. وعلى نحو مميز؛ تتميز الشظايا الرابطة لمولد الضد بنفس ألفة ارتباط الأجسام
‏المضادة المناظرة رباعية السلاسل. مع ذلكن فإن الشظية رابطة لمولد الضد منخفضة الألفة لمولد 0 الضد مقارنة بالأجسام المضادة المناظرة رباعية السلاسل تدخل في نطاق الاختراع أيضاً. ويمكن
‏تحديد قدرة ربط مولد الضد بقياس ألفة الجسم المضاد والشظية المعنية. كما ‎(Sa‏ تخصيص هذه
‏الشظايا الرابطة لمولد الضد كشظايا وظيفية للأجسام المضادة.
‏شظايا الأجسام المضادة الرابطة لمولد الضد هي شظايا تشتمل على نطاقات فائقة التغير ل
‎CDRs‏ (مناطقة تحديد تمامية) مخصصة أو جزءٍ (أجزاء) منها تتضمن موقع التعرف على مولد 5 الضدء أي 1-7848 ل7-ا١‏ بشري؛ وبالتالي تحديد نوعية التعرف على مولد الضد. وكل سلسلة
‏خفيفة وثقيلة ‎VH 5 VL)‏ على الترتيب) من جلوبيولين مناعي رياعي السلسلة تشتمل على ثلاث
‎VH- VH-CDR1 ,VL-CDR3 VL-CDR2 ¢ VL-CDRI ‏مخصصة في‎ «CDRs
‎VH-CDR3, «CDR2‏ على الترتيب. ‎«ll‏ يتعلق الاختراع ‎Mall‏ بصفةخاصة بشظايا أجسام
‏مضادة طبقاً للاختراع؛ تشتمل على أو تتكون من جميع أو مجموعة من ‎CDRS‏ من بين حالا 0 600581 (برقم هوية: 16), ‎VL-CDR2‏ (المتوالية برقم هوية: 18), ‎VL-CDR3‏ (المتوالية برقم
‏هوية: 20) و ‎VH-CDRI1‏ (المتوالية برقم هوية: 10), ‎VH-CDR2‏ (المتوالية برقم هوية: 12(
‏و ‎VH-CDR3‏ (المتوالية برقم هوية: 14), وصورها المتوافقة مع البشرء كما تم الكشف عنها
‏لاحقاً» أو أجزاء وظيفية منها؛ أي أجزاء تتميز بنوعية الارتباط المطلوية وبفضل بألفة عالية ‎IL-1‏
‏8 ل7-ا البشري.
هناك شظايا رابطة لمولد الضد معينة خاصة بالاختراع الحالي عبارة عن شظايا ذات سلسلة ‎VH‏ ‏لجسم مضاد طبقاً للاختراع تربط نطاقاتها ‎CDR‏ ؛ و 6052 ؛ و ‎CDR3‏ ؛ وبخاصة تلك التي تحتوي على متوالية الحمض الأميني التي تم الكشف عنها في الوثيقة الحالية؛ بما في ذلك صورها المتوافقة مع البشر التي تم الكشف عنها أدناه. وهناك شظايا أخرى خاصة بالاختراع الحالي هي شظايا ذات السلسلة ‎VL‏ لجسم مضاد طبقاً للاختراع تدمج نطاقات ‎(CDR‏ و 0082 ؛ و 3 لهاء وبخاصة تلك المحتوية على متوالية الحمض الأميني التي تم الكشف عنها في الوثيقة ‎lla‏ مثل صورها المتوافقة مع البشر التي تم الكشف عنها لاحقاً. وتتم الإشارة بشكل خاص إلى الشظايا التي تشتمل على أو تتكون من ‎VH-CDR3‏ و/ أو ‎WVL=CDR3‏ وبخاصة تلك المحتوي على متوالية الحمض الأميني التي تم الكشف عنها في الوثيقة الحالية؛ مثل صورها المتوافقة مع 0 البشر التي تم الكشف عنها لاحقاً؛ أو أجزاء وظيفيةمنها عندما تبدو مناطق 00143 أساسية في نوعية التعرف على مولد الضد. سيتمكن الشخص صاحب المهارة في المجال منتحديد موضع مختلف مناطق/ نطاقات الأجسام المضادة بالرجوع إلى التعريفات القياسية في هذا الصدد؛ مثل نظام الترقيم المرجعي ‎(Martin,‏ ‏)2001< أو بالرجوع إلى نظام ترقيم كابات )1992 ‎(Kabat et al.,‏ أو بتطبيق ‎IMGT‏ نظام ‎“collier de perle” 5‏ الحسابي ‎(http: //www.imgt.org/IMGTindex/Colliers.html,‏ ‎Lefranc et al., 1999)‏ وفي هذا الصدد؛ لتعريف متواليات ‎play)‏ تجدر الإشارة إلى تعريف المناطق/ النطاقات قد يختلف من نظام مرجعي إلى آخر. وبالتالي؛ فإن المناطق/ النطاقات المعرفة في الاختراع الحالي تشمل متواليات توضح تباينات في طول أو موضع المتواليات المعنية داخل المتوالية تامة الطول لنطاقات الأجسام امضادة المتغيرة؛ بنسبة حوالي +/ 0 -%10 بالإضافة إلى ذلك؛ قد توجد الوحدات البنائية مزالة التحصين في نطاقات ‎CDR‏ متغيرة للأجسام المضادة أو شظاياها الرابطة لمولد الضد. وفي نموذج معين؛ تتم إزالة تحصين الجسم المضاد أو حسب بنية الجلوبيولينات المناعية رباعية السلسلة؛ يمكن تحديد الشظايا الرابطة لمولدات الضد عن 5 طريق المقارنة مع متواليات الأجسام المضادة في قاعدة البيانات المتاحة والفن السابق ‎(Martin,‏
(2001؛ وخاصة بمقارنة موضع النطاقات الوظيفية في تلك المتواليات؛ مع ملاحظة أن مواضع الإطار والنطاقات الثابتة معروفة جيداً لمختلف فئات الأجسام المضادة؛ خاصة ل0965ا ¢ وبخاصة ‎IgGs‏ الثديية. كما تشمل تلك المقارنة بياناتتتعلق ببنيات الأجسام المضادة ثلاثية الأبعاد. لتوضيح نماذج معينة للاختراع؛ فإن شظايات الجسم المضادة الرابطة لمولد ضد والتي تحتوي على نطاقات متغيرة ‎(aids‏ على ‎CDRs‏ من الجسم المضاد المذكور تضم ‎«Fab scFv «dsFv (FV‏
‎F(ab')2 Fab’‏ والمعرفة بالإشارة إلى )1992 ‎(Martin, 2001) «(Kabatet al.,‏ وكذلك ‎.(Martin, 2001)‏ تتكون شظايا ‎Fy‏ من نطاقات ‎VH 5 VL‏ من جسم مضاد مرتبطة ببعضها بتفاعلات غير آلفة للماء؛ في ‎dsFy Lad‏ يتم تثبيت دايمر ‎VHVL‏ غير المتجانس برابطة ثاني كبريتيد؛ وفي شظايا ‎scFv‏ تتصل نطاقات ‎VH VL‏ ببعضهما عن طريق رابط ‎Ox gain‏
‏0 والتالي يكونان بروتيناً أحادي السلسلة. وتكون شظايا ‎Fab‏ عبارة عن شظايا مونومرية يمكنالحصول عليها باهتضام باباين لجسم مضاد؛ وتشتمل على كامل السلسلة الخفيفة؛ وشظية ‎VH-CHI‏ للسلسلة الثقيلة؛ مرتبطتين معاً من خلال رابطة ثاني كبربتيد. ويمكن إنتاج شظية 2) باهتضام ببسين لجسم مضاد تحت مفصل ثاني الكبريتيد؛ وتشمل شظيتين ‎Fab’‏ ‏بالإضافة إلى ‎gia‏ من منطقة مفصل جزيء الجلوبيولين المناعي. ويمكن الحصول على شظايا
‎Fab” 5‏ من شظايا ‎F(ab')2‏ بقطع رابطة ثاني كبريتيد في المنطقة المفصلية. وتكون شظايا 2 ثنائية ‎«ES‏ أي تشتمل على موقعي ربط مولد ‎Jie cam‏ جزيء الجلوبيولين المناعي الأصلي؛ من ناحية ‎cal‏ تكون ‎FV Lad‏ (دايمر ‎VH-VL‏ يشكل ‎gal)‏ المتغير من ‎«(Fab‏ ‎Fab «scFv «dsFv‏ و86 أحادية التكافؤ. أي؛ تشتمل على موقع ربط مولد ضد واحد. الأجسام المضادة الخيمرية
‏0 وققاً لنموذج آخر للاختراع, يتم تعديل الأجسام المضادة وتكون بالتالي, عبارة عن أجسام مضادة خيمرية, حيث تشتمل على نطاقات أو جديلة (جدائل) وحدات الحمض الأميني البنائية لأجسام مضادة مختلفة, بشكل خاص أجسام مضادة يتم الحصول عليها من أنواع حيوانية مختلفة, حيث يتم دمجها معاً في جسم مضاد وظيفي. في نموذج معين, يكون الجزيء الضخم للاختراع عبارة عن جسم مضاد خيمري مكون من تجميعة شظايا جسم مضاد من نوعين مختلفين على الأقل. في
‏5 نموذج معين, يشتمل الجسم المضاد الخيمري على منطقة ثابتة لجسم ‎alias‏ بشري. تظهر تلك
المناطق الثابتة في الأمثلة عن طريق شظايا 61 ‎Fo‏ (المتوالية برقم هوية: 26( أو شظايا ‎Fo‏ ‏4 (المتوالية برقم هوية: 28( أو شظية ‎CL kappa‏ (المتوالية برقم هوية: 30). على نحو بديل, يمكن استخدام شظايا ‎Fe‏ بشرية الموضحة في الشكل 12 ) ‎Uniprot 501857, Uniprot‏ ‎Uniprot PO1861‏ ,001859) و / أو مع متواليات المتوالية برقم هوية: 31, المتوالية برقم هوية: 32, المتوالية برقم هوية: 33 أو المتوالية برقم هوية: 112. في نموذج معين, يشتمل جسم
مضاد خيمري على منطقة المتغيرة لجسم مضاد جرذي والمنطقة الثابتة لجسم مضاد بشري. في نموذج معين, يشتمل جسم مضاد خيمري على السلسلة ‎VH‏ ذات المتوالية رقم: 2 ‎N13B2-)‏ ‎(G1m-VH-FcG1m(E333A‏ أو المتوالية رقم: 6 ‎N13B2-G4m-VH-)‏ ‎(FCGAm(S228P‏ و السلسة ‎VL‏ ذات المتوالية رقم: 4 ‎.(N13B2-G1m-VL-CLkappa)‏
0 الأفتينات؛ و الأنتيكالينات وغيرها من محاكيات الجسم المضاد كما تشتمل الجزيئات الضخمة الخاصة بالاختراع على بروتينات صناعية ذات قدرة على ربط مولدات ضد تحاكي تلك الخاصة بالأجسام المضادة؛ وتُسمى في الوثيقة الحالية محاكي جسم مضاد رابط لمولد الضد. تشتمل تلك البروتينات على الأفتينات و الأنتيكالينات. وتعتبر الأفتينات بروتينات تخليقية ذات قدرة على الارتباط الانتقائي بمولدات الضد. وهي مستمدة بنيوياً من بروتين
5 ربط ‎DNA‏ 58670 ؛ الموجود في ‎Sulfolobusacidocaldarius‏ ؛ وهو كائن ينتمي إلى النطاق العتائقي؛ وبالتوزيع العشوائي للأحماض الأمينية على السطح الرابط ‎SacTdl‏ ؛ ‎Sie‏ ‏بتوليد صور مغايرة تناظر الاستبدالات العشوائية ل11 وحدة بنائية للسطح الرابط ‎SacTdl‏ «¢ يمكن توليد مجموعة أفتين وتعريض مجموعة البروتين الناتج إلى عرض رببوسوم» ويمكن توجيه الألفة إلى أهداف مختلف؛ مثل الببتيدات؛ والبروتينات؛ والفيروسات؛ والبكتريا. وتعد الأفتينات
0 محاكيات أجسام مضادة يتم تطويرها كأدوات في الكيمياء الحيوية. ولقد تم استخدامها أيضاً كمثبطات نوعية لمختلف الإنزيمات )2008 ‎.(Krehenbrink et al.,‏ ومن السهل على الشخص صاحب المهارة في المجال تطوير الأفتينات ذات خصائص ريطمطلوية باستخدام طرق معروفة في المجال» وبخاصة كما تم الكشف ‎die‏ في طلب البراءة الدولية 068637/2008 والطلب السابق ذكره؛ خاصة توليد عرض الملتهمات و/ أو مجموعات عرض الريبوسمات وفحصها باستخدام مولد
5 ضد كما تم الكشف عنه في الوثقة الحالية. وتعد الأنتيكالينات بروتينات تخليقية قادرة على الارتباط
بمولدات ضدء إما بالبروتينات أو بجزيئات صغيرة. وهي عبارة عن محاكيات مولدات ضد مستمدة من ‎lipocalins‏ (بروتينات دهنية) بشرية وهي عائلة من بروتينات الربط الطبيعية. كما أن أنتيكالين أصغر ثمان مرات بحجم يصل إلى حوالي 180 حمض أميني وكتلة حوالي 20 كيلو دالتون .)2008 ‎a2. (Skerra,‏ تم إنتاج مجموعات عرض ملتهمة أنتيكالين مما سمح بخفض واختيار» وبخاصة أنتيكالين ذات خواص ‎Tall‏ النوعية. ومن السهل على الشخص صاحب المهارة في المجال أن يطور ظ بخواص الريط المطلوية باستخدام طرق معروفة في المجال وبخاصة تلكالتي تمالكشف عنها في براءة الاختراع الأوربية1270725 « والأمريكية 288536307 ‎(Schlehuber and Skerra, 2002)‏ والمنشور السابق ذكره؛ وبخاصة إنتاج عرض متلهمات و/ أو مجموعات عرض الرببوسومات وفحصها باستخدام مولد ضد كما تم الكشف عنه في الوثيقة 0 الحالية. وقد يتم إنتاج الأنتيكالينات الأفتينات كلاهما في نظام تعبير بشتمل على أنظمة تعبير بكتيرية. ولذلك؛ يوفر الاختراع الأفتينات؛ و الأنتيكالينات؛ وغيرها من محاكيات الأجسام المضاة ذات خصائص الأجسام المضادة الواردة في الوثيقة الحالية؛ وبخاصة فيما يتعلق بالارتباط ب ‎«CD127‏ وعدم حث و/ أو تثبيط المعالجة الداخلية ل60127 ؛ وتطفير الخلايا التغضنية؛ ‎Cua‏ ‏تعتبر جميعها جزبئات ضخمة طبقاً للاختراع الحالي. 5 اتتوافق مع البشر في نموذج معين؛ تكون الجزيئات الضخمة الخاصة بالاختراع عبارة عن أجسام مضادة متوافقة مع البشر أو شظايا منها. بالتالي فقد تم الحصول عليها أساساً من الحيوانات» وخاصة في القوارض وبخاصة الجرذان؛ بعد تحصين الحيوانات وإنتاج أجسام مضادة وحيدة النسيلة من الأورام الهجين؛ يتم تعديل الأجسام المضادة الخاصة بالاختراع في متوالياتها ‎VH‏ و/ أو ‎VL‏ باستبدال الوحدات 0 البنائية للحمض الأميني؛ في إطار واختيارياً بالإضافة غلى متواليات ‎(CDR‏ يمكن إجراء التوافق مع البشر باستخدام تجديد السطح أو بتطعيم ‎CDR‏ طبقاً للأساليب المعروفة. ويتحقق تجديد السطح بصفة خاصة عن طريق استبدال الوحدات البنائية للقوارض بوحدات بنائية لأحماض أمينية بشرية. ويتم الاستبدال بحيث تتم المحافظة على البنية الإطارية للجسم المضاد الأصلي وتقديم ‎«CDRs‏ ومن ثم إتاحة أن تحافظ تفاعلات ‎CDRs‏ في الجسم المضاد المجدد سطحها على
الشكل الأصلي للسطح الملامس لمولد الضد بحيث يحتفظ السطح الملامس لمولد الضد بألفة ريط مولد الضد. يتم تمثيل النماذج المفضلة للجسم المضاد الخاص بالاختراع عن طريق نسخ متوافقة مع البشر من الجسم المضاد ‎NI3B2‏ (الجرذي) المشتمل على السلاسل الخفيفة والثقيلة التالية:
السلسلة الثقيلة ل801382-01 ؛ ذات المتوالية برقم هوية: 36؛ حيث قد تم الحفاظ على متواليات ‎N13B21 CDR‏ الجرذي؛ وكذلك أحماض أمينية أخرى قليلة خارج متواليات ‎«CDR‏ وحيث جميع الأحماض الأمينية الأخرى تتوافع مع متوالية الجسم المضاد البشري. وتحتوي هذه السلسلة الثقيلة على نسبةتشابه 9687.8 مع سلسلة الجسم المضاد البشري الثقيلة. ولقد تم الحفاظ على الوحدات البنائية التالية خارج متوالية ‎١/ : CDR‏ عند موضع كابات ‎H24‏ (الموضع 24 في
0 الشكل 23؛ و في المتوالية البشرية)؛ و/١‏ عند موضع كابات 137 (الموضع 37 في الشكل 3؛ ا في المتوالية البشرية)؛ ‎Ag‏ عند موضع كابات 149 (الموضع 49 في الشكل 23؛ و5 في المتوالية البشرية) ولا عند موضع كابات 173 (الموضع 74 في الشكل ‎N23‏ في المتوالية البشرية)؛ السلسلة الثقيلة ‎(N13B2-h2‏ ذات المتوالية برقم هوية: 38( ‎Cua‏ مقارنة بالسلسلة الثقيلة
‎(N13B2-h1 5‏ فإن الأحماض الأمينية عند مواضع كابات 1137 149 و1173 « خارج متواليات ‎(CDR‏ قد تم تعديلات لملائمة متوالية سلسلة ‎ALE‏ لجسم مضاد بشري؛ السلسلة الثقيلة ‎N13B2-h31‏ ؛ ذات المتوالية برقم هوية: 40؛ ‎Cua‏ مقارنة بالسلسلة الثقيلة ل ‎(N13B2-h2‏ فإن ا عند الموضع كابات ‎HOG‏ (الموضع 100 في الشكل 23)؛ داخل متوالية
‎«CDR3‏ 38 تم تطفيرها إلى خفيفة لملائمة متوالية سلسلة ثقيلة للجسم المضاد البشري و/ أو
‏0 تجنب التعديل بعد الترجمة. هناك وحدات بنائية أخرى ممكنة لهذا الموضع تشمل بصفة خاصة ‎A‏ ‎Fy‏ ؛ وا والأفضل ‎F‏ أو ا. بالتالي؛ تتضمن إحدى الصور الممكنة المتوافقة مع البشر لمتوالية ‎N13B2 VHICDR3‏ المتوالية برقم هوية: 38. السلسلة الخفيفة ل211382-01 « ذات المتوالية برقم هوية: 42؛ ‎Cua‏ تم الحفاظ على متواليات ‎N13B21 CDR‏ الجرذي؛ وكذلك بضع أحماض أمينية أخرى خارج متواليات ‎«CDR‏ وحيث
— 4 5 — تلاءم جميع الأحماض الأمينية الأخرى متوالية جسم مضاد بشري. وتحتوي تلك السلسلة الخفيفة على 9680 تشابه مع سلسلة خفيفة لجسم مضاد بشري. ولقد تم الحفاظ على الوحدات البنائية التالية خارج متواليات ‎١/ :CDR‏ عند موضع كابات 48 (الموضع 48 في الشكل 24؛ و1 في المتوالية البشرية)؛ و7١‏ عند موضع كابات 71 (الموضع 71 في الشكل 24؛ ‎BF‏ المتوالية البشرية)؛ و عند موضع كابات 87 (الموضع 87 في الشكل 24؛ وا في المتوالية البشرية)؛
السلسلة الخفيفة ‎N1I3B2-h21‏ « ذات متوالية برقم هوية: 44,حيث؛ مقارنة بالسلسلة الخفيفة ل ‎(N13B2-h1‏ فإن الأحماض الأمينية الثلاثة عند مواضع كابات 48ا ‎«L875 LT]‏ خارج متواليات ‎«CDR‏ قد تم تعديلها لملائمة متوالية سلسلة خفيفة لجسم مضاد بشري؛ ‎ol‏ تم تطفير السلسلة الخفيفة ل1382-03ل8 « ذات المتوالية برقم هوية: 46( حيث مقارنة
0 بالسلسلة الخفيفة ل801382-12 ؛ مواضع كابات للأحماض الأمينية 31 (الموضع 31 في الشكل 24) و/ أو ‎L52‏ (الموضع 53 في الشكل 24)؛ داخل متواليات 06041 و0042 على الترتيب؛ من لا إلى ‎N‏ ومن 5 إلى آ على الترتيب؛ لملائمة متوالية سلسلة خفيفة لجسم مضاد بشري و/ أو تجنب التعديل بعد الترجمة. ومن الأحماض الأمينية الممكنة لمواضع 31 تشمل ‎H‏ ‎Rg‏ . والطفرات الممكنة الأخرى لمتوالية 0043 تتضمن المحافظة على 5 في الموضع ‎L52‏
5 وتطفير لا في الموضع 51 (الموضع 52 في الشكل 24) إلى © ؛ ‎RK cH‏ بالتالي؛ تحتوي صورة ممكنة متوافقة مع البشر لمتوالية ‎N 1 3B2 VL CDR1‏ على المتوالية برقم هوية: 50« وصورة ممكنة متوافقة مع البشر لمتوالية ‎N 1 3B2 VL] CDR2‏ تحتوي على المتوالية برقم هوية: 52 أجسام مضادة أو شظايا متعددة الوظائف
0 يمكن دمج هذه الشظايا الأساسية الرابطة لمولد الضد الخاصة بالاختراع معاً للحصول على شظايات رابطة لمولد الضد عديدة التكافؤ. مثل أجسام مضادة ثنائية؛ أو أجسام ثلاثية؛ أو أجسام رباعية. كما تعد هذه الشظايا الرابطة لمولد الضد عديدة التكافؤ جزءاً من الاختراع الحالي.
يمكن دمج التعديلات سالفة الذكر حيثما كان ذلك مناسباً. وفي نماذج معينة؛ يكون الجزيء الضخم هو جسم مضاد عبارة عن جسم مضاد خيمري أو متوافق مع البشر وم أو منزوع التحصين. طرق الحصول على الأجسام المضادة الخاصة بالاختراع 5 .تتم إثارة جسم مضاد أو شظية منه رابطة لمولد الضد طبقاً للاختراع بصفة خاصة على نحو مميز
ضد جزيء هو 000127 الذي تعبر ‎WIA die‏ آ بشرية؛ ‎lag‏ من تحصين تحت صورة بتيد أصلي أو جزيء ناتج عن عودة الارتباط. يمكن إجراء التحصين طبقاً للبروتوكول الذي تم الكشف عنه في جزء الأمثلة التالي: تم استخدام خيمري ‎ib 000127 Fe‏ عن عودة الارتباط الجيني ‎(10975-HO3H Sino Biological,‏
‎Beijing, China) 0‏ في تحصين جرذان ‎die‏ جرذان سلالة ‎LOU/C Igkla‏ المتوفرة في ‎(University of Louvain, Belgium‏ على نحو بديل»؛ يمكن استخدام مولد ضد يشتمل على متواليات الحمض الأميني للمتوالية برقم هوية: 115 (خاصة المشتمل على المتوالية برقم هوية: 0) 5/ أو المتوالية برقم هوية: 117 (بخاصة المشتملة على المتوالية برقم هوية 111) و/ أو المتوالية برقم هوية: 116؛ حيث يشتمل مولد الضد المذكور بالإضافة إلى ذلك على متواليات
‏5 أخرى؛ بخاصة متواليات أخرى ل0127© البشري؛ أو ليست منهاء كما سبق الكشف عنه؛ وذلك كمولد مناعي. تم الحصول على أوارم هجينية بدمج خلايا طحال أحادية النواة مع ورم مناعي لجرذ ‎LOU‏ ]18983 « وسلالة خلايا غير مفرزة ومقاومة للأزاجوانيني» طبقاً للإجراء الذي سبق الكشف عنه )1988 ‎.(Chassoux et al.,‏ تم أولاً فحص الأورام الهجينية حسب قدرة الأجسام المضادة وحيدة النسيلة التي تم إفرازها على الارتباط بجزيء 000127 ناتج عن ‎sage‏ الارتباط
‏0 الجيني (خيمرية ‎Fc‏ 00127؛ ‎10975-HO3H, Sino Biological, « 10975-HO3H‏ ‎(Beijing, China‏ ثم تم فحص الأورام الهجين لمعرفة قدرة أجسامها المضادة وحيدة النسيلة على الارتباط ب0127© الذي تعبر ‎die‏ خلايا ‎T‏ البشري والقدرة على تثبيط حث فسفرة 5181-5 الناتجة عن 7-اا على ‎WA‏ بيضاء بشرية؛ كما هو موضح في الشكل 1؛ وقدرتتها على عدم ‎sal)‏ تطفير الخلايا التغضنية المستحثة ب ‎TSLP‏
— 6 5 — طبقاً لنموذج معين للاختراع» يكون الجسم المضاد الخاص بالاختراع» يكون الجسم المضاد المتوافق مع البشر الخاص بالاختراع مستمدا من الجسم المضاد المسمى ‎NI3B2‏ بتطفير واحدة أو أكثر من منطقة (مناطق) ‎CDR‏ للسلسلة الثقيلة المتغيرة ‎(VH)‏ و/ أو السلسلة الخفيفة المتغيرة ‎(VL)‏ ‏وبخاصة جسم مضاد يحافظ على واحدة أو اثنين على الأقل من مناطق 6014 الأصلية بين المناطق ‎CDR1,CDR2 (CDR3‏ إما في ‎VH‏ و/ أو ‎VL‏ ؛ حيث يحتوي الجسم المضاد
المعدل المذكور على أقل من 9610 من الوحدات البناية للحمض الأمينى المطفرة؛ ويفضل واحدة أو لا يحتوي على أية ‎sang‏ بنائية للحمض الأمينى؛ فى مناطق ‎CDR‏ المعتبرة كلا على حده بالنسبة لمناطق 6081 ؛ أو ‎CDR2‏ أو ‎CDR3‏ الأصلية؛ حيث تكون مناطق ‎CDR‏ الأصلية المذكورة هي
‎VHCDR1 .1 0‏ التي بها متوالية الحمض الأميني المتوالية برقم هوية 10 ؛ ‎Al VHCDR2 0 .2‏ بها متوالية الحمض الأميني المتوالية برقم هوية 12 ؛ ‎VHCDR3 3‏ التى بها متوالية الحمض الأميني المتوالية برقم هوية 14 ؛ ‎VLCDRL 4‏ التى بها متوالية الحمض الأميني المتوالية برقم هوية: 16 ؛ ‎VLCDR2 .5‏ التى بها متوالية الحمض الأميني المتوالية برقم هوية: 18 ؛
‎VLCDR3 .6 5‏ التي بها متوالية الحمض الأميني المتوالية برقم هوية: 20؛ بالتالى, قد تحتوي ‎VHCDR3‏ على متوالية الحمض الأمينى للمتوالية برقم هوية: 48؛ قد تحتوي ‎VLCDRI‏ على متوالية الحمض الأميني للمتوالية برقم هوية: 50؛ قد ‎١/1002 (sini‏ على متوالية الحمض الأميني للمتوالية برقم هوية: 52. في نموذج معين, تكون الشظية الرابطة لمولد ضد من الاختراع هي شظية رابطة لمولد ضد من
‏0 الجسم المضاد 1382ل7احيث يكون يتم تعديلها كما تم وصفه الفقرات السابقة, الشظية الرابطة لمولد ضد المعدلة المذكورة يكون بها أقل من 9610 من وحدات الحمض الأمينى البنائية المطفرة بالنسبة إلى الشظية الرابطة لمولد ضد الأصلية.
في ضوء التعليمات التي يقدمها الاختراع الحالي؛ للتعبير عن الأجسام المضادة للاختراع» سيتمكن المهرة في المجال من تحضير ورم هجين أو استخدام تقنيات بديلة مثل مجموعات التعبير الوراثي وأنظمة التعبير الوراثي؛ متبوعًا بانتقاء الأجسام المضادة التي لها البنية التي تُفرز بالأورام الهجين ولها خصائصهاء؛ وبشكل محدد خواص ارتباطها وتعادلها. يمكن تحضير مجموعات ‎CDNA‏ بشكل كاف من ‎RNA‏ الذي تم التعبير عنه في الورم الهجين وفقا للاختراع والمتواليات الملائمة المنتقاة والتي تم التعبير عنها في الورم الهجين للاختراع والمتواليات الملائمة المنتقاة والتي تم التعبير عنها. كبديل لذلك؛ يتم تحضير ‎CDNA‏ المشفرة للأجسام المضادة للاختراع أو شظيات منها بالتخليق. إن "خلايا الورم الهجين" وفقا للاختراع هي ‎LIA‏ يتم توليدها من اندماج خلايا منتجة للجسم المضاد (الخلايا الليمفاوية البائية) من حيوان تم تصحينه مناعيا مسبقا باستخدام محصن مناعي 0 منتقى وشربك اندماج وهما خلايا نقوية تمكّن من توفير بقاء لخلية الاندماج الناتجة. يمكن أن تكون خلايا الورم النقوي والخلايا المنتجة للجسم المضاد (الخلايا البائية كخلايا طحالية) من نفس المنشاًء وهي خلايا حقيقية النواة في خلايا ثديية معينة من نفس ‎GSN‏ الحيواني. كبديل لذلك؛ ‎(Sa‏ أن تكون من ‎Line‏ مختلف, وبالتالي الحصول على ورم هجين مغاير. إن خلايا الورم النقوي؛ مثل ورم خلوي مناعي 49831 من جرذان ‎(LOU‏ وهي سلالة خلوي مقاومة لمادة أزاجوانين 5 وغير مفرزة؛ يتم اختيارها من ضمن ‎LIA‏ لا تنجح في إنتاج جلوبيولينات مناعية لتمكين الورم الهجين الذي تم تحضيره من إفراز أجسام مضادة أحادية النسيلة فحسب ذات نوعية مرغوية. يمكن استخدام خلايا ‎(gal‏ مناسبة لتعزيز ‎ADCC‏ مثل تلك الموصوفة في الصفحات التالية لتحضير الأجسام المضادة خلال التعبير الوراثي في خلايا ناتجة عن عودة الاتحاد الجيني بدلا من الورم الخلوي المناعي للجرذان. إن مثل تلك الخلايا هي خلايا مفيدة لها قدرة ارتباط بالفوكوز منخفضة 0 أو منعدمة. يتم تحضير الورم الهجين المناسب لتنفيذ الاختراع وفقا للتقنيات التقليدية. يتم وصف نماذج بالتفصيل في الأمثلة بالطلب الحالي حيث يمكن تهيئة خصائصها المبينة المحددة لتناسب خلايا أخرى مثل شركاء اندماج. يمكن الحصول على شظيات ربط مولد ضد من الجسم المضاد بالبدء من الجسم المضاد؛ 5 وبخاصة استخدام الاهتضام الإنزيمي وفقا للتقنيات المعروفة جيدا ‎La‏ في ذلك اهتضام الباباين أو
البيبسين؛ أو استخدام أي تقنية انشطار ملائمة. يمكن التعبير عنها بشكل بديل في خلايا عائلة معدلة بالاندماج مع متواليات حمض نووي تشفر متوالية الحمض الأميني للشظيات المذكورة؛ أو ‎(Ka‏ تخليقها؛ بوجه خاص تخليقها كيميائيا. بناء على ذلك؛ يمكن أيضا تحضير الأجسام المضادة وفقا للاختراع؛ بما في ذلك الأجسام المضادة المعدلة والشظيات الرابطة لمولد الضد من الأجسام المضادة بواسطة تقنيات الهندسة العامة النمطية؛ مثل تلك الموصوفة في ‎Sambrook et al.‏ ‎(Deininger, 1990)‏ والإصدارات الحديثة. يتعلق الاختراع بناء على ذلك بنسخ من بولي ببتيدات ‎VL VH‏ تتضمن ببتيد إشارة أو عدمه. يمكن أن يكون ببتيد الإشارة ضروريا خلال تحضير البولي ببتيدات في الخلايا. وبنظرة لاستخدام الجسم المضاد وفقا للاختراع الحالي أو شظيات وظيفية منه لإعطائه إلى مريض 0 بشري؛ يمكن أن يكون مفيدا الحصول على أجسام مضادة أحادية النسيلة متوافقة مع البشر أو أجسام مضادة أحادية النسيلة خيمرية و/أو أجسام مضادة غير محصنة؛ من أجسام مضادة وفقا للاختراع حيث تكون أجسام مضادة من غير الرئيسيات ‎fie‏ تلك الموصوفة في ‎Ale)‏ وبخاصة لتقليل التفاعل المناعي لاستقبال العائل أو المريض إزاء الأجسام المضادة المذكورة. يمكن الحصول على شظيات وظيفية من تلك الأجسام المضادة المتغيرة أيضا كمتغيرات متوافقة مع 5 البشر أو خيمرية أو منزوعة التحصين المناعي. يمكن أيضا الحصول على جسم مضاد أو شظية ربط بمولد ضد منه؛ حيث تكون عبارة عن جسم مضاد متوافق مع البشرء باستبدال وحدة بنائية (وحدات بنائية) للحمض الأميني الموجودة في منطقة (مناطق) ثابتة للسلاسل المتغيرة ‎VH)‏ و/أو ‎(VL‏ لجسم مضاد غير بشري وفقا للاختراع؛ لوحدة (وحدات) بنائية لحمض أميني بشري بها موقع مناظر في الأجسام المضادة وفقا لتعريف 0 وترقيم قياسيين» حيث يتراوح مستوى الاستبدال من 701 إلى 9620؛ بشكل محدد من 1 76 إلى 8 من الوحدات البنائية في مناطق الإطار المذكورة. تشتمل المناطق الثابتة المذكورة على تلك التي بها مناطق إطار ‎(FWRS)‏ محددة في أجسام مضادة ‎Lely)‏ السلاسل محددة بشكل محدد بالإشارة إلى ترقيم كابات. تتضمن أمثلة معينة للأجسام المضادة المعدلة وفقا للاختراع أجسام مضادة خيمرية؛ أجسام مضادة 5 متوافقة مع البشر و/أو أجسام مضادة منزوعة التحصين.
يتضمن جسم مضاد معدل معين وحدات بنائية معدلة لجسم مضاد في مناطق ‎«CDRs‏ يؤدي التعديل المذكور إلى نزع تحصين بفقد قمم الخلايا التائية في النطاق المتغير للجسم المضاد غير البشري. يمكن ‎shal‏ نزع التحصين بعد تحديد قمم الخلايا التائية في النطاق المتغير للجسم المضاد؛ وبخاصة بالتنبؤ الحاسوبي؛ متبوعًا بالتطفير النقطي في متوالية السلاسل المتغيرة للجسم المضاد الذي يؤدي إلى التخلص من القمم اللاصقة الوظيفية للخلايا التائية. في نموذج مفضل للاختراع» فإن تعديل مناطق (005)5؛ وبخاصة مناطق ‎«CDR3‏ مقيد بالمدى الضروري لنزع التحصين بالنظر إلى إعطاء الجسم المضاد البشري؛ على سبيل المثال تقليل ألفة ربط مستقبلات خلايا ‎T‏ لمعقدات ١ا8-01855ا1/الببتيد.‏ في نموذج محدد؛ لا يتم تعديل المنطقة (المناطق) ‎VH 1CDR3‏ و/أو ا/ا. في نموذج آخرء يتم أيضا تعديل مناطق ‎FR‏ و/أو مناطق ‎(CH‏ ‏0 وبخاصة المتوافقة مع البشر. تشتمل الأجسام المضادة في إطار الاختراع بناء على ذلك على جسم مضاد يرتكز على الخصائص المحددة المبينة أعلاه. حيث يكون عبارة عن جسم مضاد متوافق مع البشر بوجه خاص جسم مضاد تم الحصول عليه باستبدال الوحدة (الوحدات)البنائية للحمض الأميني الموجودة في منطقة (مناطق) الإطار لجسم مضاد وفقا للاختراع؛ لوحدة (وحدات بنائية) للحمض الأميني 5 البشري مناظرة لموقع في الأجسام المضادة البشرية وفقا للتعريف والترقيم القياسي. يتراوح مستوى الاستبدال لوحدات الحمض الأميني البنائية في مناطق الإطار و/أو في ‎CDRs‏ للتوافق مع البشرء بما في ذلك نزع التحصين المناعي؛ من 961 إلى 9620 بشكل محدد من 1 إلى 9618 من الوحدات البنائية في مناطق الإطار المذكورة و/أو مناطق ‎.CDRs‏ وكما هو مبين أعلاه؛ فإن التوافق مع البشر يستهدف بشكل رئيسي مناطق الإطار للأجسام المضادة الأصلية. في بعض 0 الحالات؛ يمكن أن يكون التوافق مع البشر بشكل بديل أو إضافي متعلق بمنطقة (مناطق) ‎CDR‏ ‏بخاصة منطقة (مناطق) 00141 و/أو 00142 وبتم تعيينه بشكل محدد كنزع للتحصين المناعي. في نماذج معينة؛ لا يتم تعديل أكثر من حمض أميني واحد في منطقة ‎(CDR‏ يتم في هذه الوثيقة الكشف عن أمثلة لأجسام مضادة متوافقة مع البشر و/أو غير محصنة مناعيا من الجسم المضاد الجرذي ‎N13B2‏
بالتالي يمكن تحقيق التوافق المناعي بالنظر إلى إطارات سلسلة خفيفة أو ثقيلة لسلالة جرثومية بشرية تبين أعلى تطابق في المتواليات مع متوالية الجسم المضاد غير البشري أو شظية منه؛ وانتقاء وحدات الحمض الأميني المناعية؛ بخاصة الوحدات البنائية المكشوفة عند السطح في الجسم المضاد؛ ليتم استبدالها في الجسم المضاد غير البشري أو شظية منه؛ للتوافق مع الوحدة (الوحدات) البنائية البشرية. في نموذج معين؛ تكون بعض أو كل من ‎FRL‏ و/أو بعض أو كل من مناطق ‎FRH‏ بشرية بالكامل؛ بمعنى تتسم بمتواليات إطار بشري. في نموذج ‎AT‏ يتم استبدال وحدات بنائية منتقاة في بعض أو كل من مناطق ‎FR‏ ‏إن طرق جعل الأجسام المضادة متوافقة مع البشر معروفة جيدا أيضا في المجال ويتم وصفها على سبيل المثال بواسطة )1993 ‎(Sas .Routledege et al. (Edward ©. Routledge,‏ أن تنطبق هذه الطرق أيضا على شظيات ربط ‎alge‏ ضد؛ مثل 50775 . على سبيل ‎Ji)‏ تكمن الطريقة المعروفة باسم "إعادة ظهور على السطح” في استبدال مجموعة من وحدات البناء السطحية في الإطارات لمنطقة متغيرة لجسم مضاد غير بشري بمجموعة بشرية من وحدات بناء سطحية؛ بينما تتكون الطريقة المعروفة باسم تطعيم ‎CDR‏ من نقل ‎CDRS‏ من جسم مضاد غير بشري إلى مناطق الإطار لجسم مضاد بشري. يتم إكمال تطعيم ‎CDRS‏ بصفة ‎dale‏ عن طريق تحسين 5 الإطارء وتكمن في استبدال بعض الوحدات البنائية للإطار البشري لتحسين ‎All‏ الريط. لقد تم مؤخرا تبسيط تحسين الإطار عبر استخدام مجموعات من التوليفات ‎(Rosok et al.,‏ ‎.1996)(Baca et al., 1997)‏ يتعلق الاختراع بوجه خاص بأجسام مضادة متوافقة مع البشر مشتقة بواسطة تطعيم ‎CDR‏ من الجسم المضاد الجرذي ‎N13B2‏ . تم انتقاء متواليات ‎VH‏ وا/ا بشرية لها متواليات ذات تجانس 0 قوي بمتواليات ‎VL VH‏ بالترتيب» من 811382 الجرذي في قاعدة بيانات. تم تطعيم متواليات ‎CDR‏ ل ‎N13B2‏ على هذه المتواليات البشرية. من الممكن لبعض الوحدات البنائية خارج متواليات ‎CDR‏ أن تكون ذات تأثير ذي دلالة على التعرف على مولد الضد أو ألفته؛ بشكل معين الوحدات البنائية المحددة على مقرية وثيقة من ‎CDRs‏ والوحدات البنائية المعروفة كوحدات بنائية ‎Vernier‏ طبقا لما هو مبين بالتفصيل أعلاه وفي قسم الأمثلة؛ بشكل محدد في المثال 12؛ تم 5 اختبار عدة نسخ من الأجسام المضادة المتوافقة مع البشر: تم انتقاء ‎hall‏ الأكثر محافظة حيث
— 6 1 —
يتم الحفاظ على كل متواليات الجرذ ل ‎CDR‏ والوحدات البنائية الهامة بنائيا المذكورة ‎«hed‏ وهي
نسخة حيث تم انتقاء المتواليات البشرية للوحدات البنائية الهامة بنائيا والنسخة الأقرب إلى
المتواليات البشرية؛ حيث؛ بالإضافة إلى الوحدات البنائية الهامة بنائيا خارج ‎«CDR‏ تم تعديل
وحدات بنائية داخل ‎CDR‏ من متوالية الجرذ الأولية لمنع تعديلات ما بعد الترجمة الوراثية ‎Jie‏ ‏5 ا لأكسدة أو نزع ‎f‏ لأميد على ‎dag‏ الخصوص .
هناك استراتيجية أخرى حديثة متوفرة للتوافق البشري للجسم المضاد تحافظ فقط على متواليات
2 غير البشرية الأصلية ذات السلاسل الخفيفة والثقيلة بينما يتم انتقاء المتوالية المتبقية من
مجموعات الجين ‎V‏ البشرية المحصنة مناعيا )1998 ‎.(Rader et al.,‏
يمكن أن تنتمي الأجسام المضادة الخيمربة؛ المتوافقة مع البشر و/أو منزوعة التحصين المناعي
0 إلى أي فئة من الجلوبيولينات المناعية؛ مثل الأجسام المضادة غير المعدلة. يُفضل أن تنتمي إلى فئة فرعية من فئة ‎(IgG2 (IgG1 ic IgG‏ 063 أو ‎1gG4‏ ‏إن طرق تحضير شظيات ربط مولد الضد الناتجة عن عودة الاتحادي الجيني؛ أو الأجسام المضادة الخيمرية عن طريق دمج المناطق المتغيرة لجسم مضاد ذي روابط ملائمة؛ أو مع مناطق ثابتة لجسم مضاد ‎AT‏ معروفة جيد ‎J‏ فى المجال .
الأجسام المضادة المذكورة وفقا للاختراع هي أجسام مضادة أحادية النسيلة؛ بما يعني أن تركيبة هذه الأجسام المضادة متجانسة؛ وبوجه خاص متطابقة؛ من حيث نوعية ربط مولد الضد وبناء على ذلك من حيث تركيبة المنطقة المتغيرة. وبالتالي؛ يمكن لهذه الأجسام المضادة أن تعمل كأحادية النسيلة حتى لو يتم الحصول عليها بتقنيات بديلة لتقنية الورم الهجين. وفقا لنموذج ‎AT‏ يتعلق الاختراع أيضا بجزيء خيمري يشتمل على جسم مضاد وفقا لأي من
0 التعريفات المتوفرة في هذه الوثيقة أو شظية ربط مولد ضد ‎die‏ حيث يرتبط الجسم المضاد المذكور أو شظية وظيفية منه بجزيء مختلف وظيفيا. يمكن أن يكون جزيء خيمري وفقا للاختراع ‎Ble‏ عن بروتين خيمري اندماج أو مترافق ينتج عن أي صورة مناسبة للارتباط بما في ذلك ارتباط تساهمي» تطعيم بطعوم» ربط كيميائي بمجموعة كيميائية أو حيوية أو بجزيء ‎Jie‏ بوليمر ‎PEG‏ ‏أو مجموعة حماية أخرى أو جزيء مناسب للحماية ضد شطر ببروتياز في جسم الكائن الحي؛
لتحسين الثبات و/أو ‎jee‏ النصف لجسم مضاد أو شظية وظيفية. باستخدام تقنيات مشابهة؛ بخاصة إقران كيميائي أو تطعيم بطعوم؛ ‎(Ka‏ تحضير جزيء خيمري ذي جزيء فعال حيوياء ‎Cua‏ يتم اختيار الجزيء الفعال المذكور على سبيل المثال من ضمن توكسينات؛ بشكل محدد توكسين خارجي )2011 ‎(Pseudomonas A (Risberg et al.,‏ سلسلة ‎A‏ لتوكسين نباتي لاربسين ))2011 ‎(Pseudomonas A (Risberg et al.,‏ أو سابورنتوكسين ) ‎Flavell et‏
‎(al, 2000‏ بوجه خاص مكون فعال علاجياء ناقل ‎Lay)‏ في ذلك ناقل بروتين بوجه خاص) مناسب لاستهداف الجسم المضاد أو شظية وظيفية لخلايا نوعية أو أنسجة للجسم المضاد البشري؛ أو يمكن ربطه بعلامة أو ‎daly‏ بخاصة ‎Laie‏ يتم استخدام شظيات الجسم المضاد. إن معالجة ببولي إيثيلين جليكول ‎PEG‏ لجسم مضاد أو شظيات وظيفية منه هي نموذج مثير
‏0 للاهتمام محدد ‎Cua‏ يحسن من ظروف توصيل ‎sald)‏ الفعالة إلى العائل» ‎dealing‏ لتطبيق علاجي. يمكن أن تكون المعالجة ب ‎PEG‏ خاصة بموقع معين لمنع تداخل مواقع التعرف للجسم المضاد أو شظيات وظيفية منه؛ ويمكن إجراؤها ب ‎PEG‏ ذي وزن جزيئي مرتفع. يمكن ‎shal‏ ‏المعالجة ب ‎PEG‏ من خلال وحدات سيستيين حرة بنائية موجودة في متوالية الجسم المضاد أو شظية وظيفية أو من خلال وحدات سيستيين حرة بنائية مضافة في متوالية الأمينو للجسم المضاد
‏5 أو شظية وظيفية. يتعلق الاختراع الحالي بتركيبة تشتمل على أجسام مضادة أو شظيات وظيفية منه طبقا لما هو محدد ‎(lia‏ حيث تكون ‎١‏ لأجسام المضادة أو شظيات وظيفية منه هي مجموعة متجانسة من الأجسام المضادة أو شظيات وظيفية منها أو أجسام مضادة أحادية النسيلة أو شظيات وظيفية منها.
‏0 في بعض الحالات؛ من الممكن استخدام تركيبة من المنتجات للحصول على التأثير المرغوب؛ حيث أن كل من المنتجات في التركيبة تولد تأثير مرغوب واحد على الأقل. في الحالة الحالية؛ على سبيل المثال؛ من الممكن دمج الأجسام المضادة التي لها تأثير تثبيطي على تفاعل ‎IL-7-‏ ‏1-7 وجزيئات لها تأثير سام للخلايا ضد خلايا موجبة 00127. يتم تضمين ‎Jie‏ هذه التوليفات في الاختراع. من المهم في هذا الاختراع أن لا تعمل تركيبة المنتجات على التآزر مع
‎TSLP‏ لتطفير الخلايا التغضنية. وعادة ما يتضمن هذا دمج منتجات لا يتأزر أي منها فرديا مع ‎TSLP‏ لتطفير الخلايا التغضنية. في نموذج معين» يتعلق الاختراع بتركيبة أو تجميعة مركبات حيث تشتمل على أجسام مضادة؛ شظايا أو جزيئات خيمرية كما تم وصفه في الوثيقة الحالية؛. حيث تشتمل التركبة المذكورة على (1) مجموعة من الأجسام المضادة أو شظايا رابطة لمولد الضد منها أو جزيئات خيمرية بها نشاط سام للخلايا ضد خلايا ‎Linge‏ 00127؛ بصفة خاصة ‎WAN‏ 7 + 60127 و )2( مجموعة من الأجسام المضادة او شظاياها الوظيفية أو جزيئات خيمرية ذات خصائص مضادة تجاه 7-اا البشري؛ ‎Cua‏ تندمج هذه المجموعة من الأجسام المضادة إما في خليط أو ‎Jain‏ و» في هذا الخيار الأخير؛ تتم صياغتها للإطاء المدمج أو المتعاقب. الأجسام المضادة و / أو شظايا وظيفية 0 و / أو جزيئات خيمرية لا تتآزر مع ‎TSLP‏ لنضج الخلايا التغضنية. تنطبق التعريفات الواردة في الوثيقة الحالية بصفة خاصة بالرجوع إلى الأجسام المضادة الخاصة بالاختراع؛ بشكل مشابه على الشظايا الرابطة لمولد الضد منها إلا عندما يكون واضحا من الناحية الفنية عدم وجود علاقة. كما تنطبق هذه التعريفات أيضا على الجزيئات الضخمة (بشكل خاص الأجسام المضادة الخيمرية أو الجزيئات الخيمري) أو التركيبات التي تشتمل على هذه الأجسام 5 المضادة أو شظاياها الرابطة لمولد الضد أو المشتقة من هذه الأجسام المضادة؛ كما هو مبين في الطلب الحالي. يتم تحديد كذلك أن الشظايا الرابطة لمولد الضد من الأجسام المضادة الخاصة بالاختراع مستمدة من الأجسام المضادة من وجهة نظر نظرية أو نتصميمية ولكن قد يتم تحضيرها باستخدام تقنيات مختلفة؛ وليس بالضرورة وجود موارد للاجسام المضادة كمنتجات. يتعلق الاختراع أيضاً بجزيء حمض نووي يشفر جزيء ضخم وفقاً لأي من التعريفات الواردة في 0 الوثيقة الحالية. في نماذج خاصة, يشفر الحمض النووي للاختراع حمضا أمينيا يتم اختياره من المجموعة تتكون من المتوالية برقم هوية: 2؛ المتوالية برقم هوية: 4؛ المتوالية برقم هوية: 6؛ المتوالية برقم هوية: 6؛ المتوالية برقم هوية: 10؛ المتوالية برقم هوية: 12؛ المتوالية برقم هوية: 4؛ المتوالية برقم هوية: 16؛ المتوالية برقم هوية: 18؛ المتوالية برقم هوية: 20؛ المتوالية برقم هوية: 22, المتوالية برقم هوية: 24, المتوالية برقم هوية: 36, المتوالية برقم هوية: 38, المتوالية 5 برقم هوية: 40, المتوالية برقم هوية: 42, المتوالية برقم هوية: 44, المتوالية برقم هوية: 46,
-4 6 — المتوالية برقم هوية: 48, المتوالية برقم هوية: 50, المتوالية برقم هوية: 52, المتوالية برقم هوية: 4, المتوالية برقم هوية: 56, المتوالية برقم هوية: 110, المتوالية برقم هوية: 111, المتوالية برقم هوية: 66,المتوالية برقم هوية: 115, المتوالية برقم هوية: 116 و المتوالية برقم هوية: 117. في نماذج خاصة, يشتمل الحمض النووي للاختراع على أو يتكون من المتوالية رقم: 1, 3, 5, 7, 9, 17.,15,13.,11, 19, 21, 23, 35, 37, 39, 41, 43, 45, 47, 49, 51, 53 أو 55.
هذا الحمض النووي المناسب لتحضير الجزيئات الضخمة الخاصة بالاختراع يتم اختياره بشكل خاص في المجموعة من؛ 1. بولي نيوكليوتيد يشفر منطقة ‎VH‏ وبه المتوالية برقم هوية 1 أو المتوالية برقم هوية: 5 أو المتوالية برقم هوية: 54 أو المنطقة المتغيرة من منطقة ‎VH‏ وبه المتوالية برقم هوية: 21 أو
0 المتوالية برقم هوية: 35 أو المتوالية برقم هوية: 37 أو المتوالية برقم هوية: 39؛ 2. بولي نيوكليوتيد يشفر منطقة ‎VL‏ به المتوالية برقم هوية 3 أو المتوالية برقم هوية: 7 أو المتوالية برقم هوية: 56 أو المنطقة المتغيرة ‎VL‏ ويه المتوالية للمتوالية برقم هوية: 23 أو المتوالية برقم هوية: 41 أو المتوالية برقم هوية : 43 أو المتوالية برقم هوية: 45؛ 3 بولى نيوكليوتيد يشفر منطقة ‎VHCDR1‏ يه المتوالية برقم هوية: 9
4 بولي نيوكليوتيد يشفر منطقة ‎VHCDR2‏ يه المتوالية برقم هوية: 11« 5. بولي نيوكليوتيد يشفر منطقة ‎VHODR3‏ به المتوالية برقم هوية: 13 أو للمتوالية برقم هوية: 47 6. بولي نيوكليوتيد يشفر منطقة ‎VLCDRI‏ به المتوالية برقم هوية 15 أو للمتوالية برقم هوية: 9
0 7. بولي نيوكليوتيد يشفر منطقة ‎VLCDR2‏ به المتوالية برقم هوية 17 أو للمتوالية برقم هوية: 51 8. بولي نيوكليوتيد يشفر منطقة ‎VLCDR3‏ به المتوالية برقم هوية 19.
— 5 6 — يتعلق الاختراع أيضا ببولي نيوكليوتيد به النيوكليوتيدات المعدلة فيما يتعلق بالمتوالية برقم هوية 1؛ 3 5 قلق 1ل 503ل 17« 19ل 21 23 35 37 39 1ك 43 45 47 49 1 53 أو 55 و حيث: (أ) يشفر بولي ببتيد به متوالية الحمض الأميني للمتواليات برقم هوية 2( 4؛ 6« 8 10؛ 12( 14 16« 18 20 22 24 36 38 40 42 44 46 48 50 52 54 أو 56 على
التوالي و / أو (ب) به على الأقل 785؛ ويفضل على الأقل 290؛ أكثر وبفضل على الأقل 795؛ و والأكثر تفضيلاً على الأقل 798 نسبة تشابه أو على الأقل 799 على كامل طوله مع واحد من عديدات البولي نيوكليوتيد الذي به على الترتيب المتوالية برقم هوية 1« 3 5 97 11 ¢13 15 17
0 19 21 23 35 37 39 41 43 45 47 49 51» 53 أو 55 و / ‎«sl‏ ‎(z)‏ عبارة عن شظية عديد نيوكليوتيد به المتوالية برقم هوية: 1<« 3 5 7 21 23 35 37 39 41 43« 45« 53 أو 5 و يشفر بولي ببتيد يتشتمل على أو يتكون من شظية ‎day‏ ‎algal‏ ضد. يمكن أيضاً أن يكون عديد البيوكليوتيد الخاص بالاختراع متواليات تمت أمثلتها؛ بصفة خاصة
5 للتعبير فى خلايا العائلة. تعد تقنيات الأمثلة فى هذا المجال تقنيات تقليدية. شظايا البولي نيوكليوتيد الخاصة بالاختراع تحتوي على نحو مميز على متوالية بها على الأقل 9 نيوكلويتيدات» وبخاصة على الأقل 18 نيوكليوتيد وتكون أقصر من متواليتها الأصلية؛ خاصة أقصر من المتواليات ‎VH‏ أو ‎VL‏ الموضحة كاملة الطول 0على الترتيب. طبقاً لنموذج معين؛ قد تشتمل البولي نيوكليوتيدات الخاصة بالاختراع على نحو ‎rae‏ إضافة
0 لمتوالية تشفر جزيء ضخم طبقاً للاختراع» على تيار علوي من المتوالية ‎Badal‏ لسلاسل الجسم المضاد؛ وتوالية تشفر ببتيد إشاري مما يسمح بإفراز البروتين المذكورة عند التعبير عنه في خلية إنتاج. وقد تشمل على واحدة أو أكثر من المتواليات التي تشفر واحد أو أكثر من ببتيدات واسمة لرصد و/ أو تسهيل تنقية؛ البروتين المذكور.
— 6 6 — يتعلق الاختراع أيضاً بناقل لانتساخ و/ أو للتعبير عن بولي نيوكليوتيد الموصوف في الوثيقة الحالية .في نموذج معين» يكون الناقل للاختراع عبارة عن بلازميدة مناسبة للانتساخ و/ أو التعبير فى ‎LIA‏ الثدييات؛ حيث يشتمل على تنظيم متواليات ‎z Ladd‏ والتعبير. كما يتعلق الاختراع كذلك بخلايا أو سلالات خلايا معاد دمجها مع بولي نيوكليوتيد طبقاً للاختراع؛ وبخاصة خلية أو سلالة خلايا ثديية أو من طائر. على سبيل المثال؛ خلايا مبيض هامستر
صيني؛ معدلة وراثياً لخفض إدخال الفوكوز العام. إن الأجسام المضادة التي ينقصها إدخال الفوكوز المركز تتميز بسمية خلايا محسنة تتوسطها الخلية وتعتمد على الجسم المضاد ‎(ADCC)‏ ‏(©00م). وهناك مثال آخر هو سلالة ‎WIA‏ 5866 التي تتميز بشكل طبيعي بانخفاض خواص إدخال الفوكوز .)2010 ‎(Olivier et al.,‏ .
لذلك يتعلق الاختراع أيضاً بطريقة تحضير جسم مضاد أو ئظية ‎die‏ رابطة لمولد ‎can‏ حيث تشتمل على: (أ) الحصول على ورم هجين بعد تحصين حيوان» وبخاصة كائن تديي بسلسلة ألفا بشرية لمستقبل 7-اا البشري؛ ويُفضل مولد ضد ‎die‏ يشتمل على متواليات 60127 البشري مع المتواليات بأرقام هوية: 115 (و/ أو المتوالية برقم هوية: 110) و/ أو المتوالية برقم هوية: 117 (و/ أو المتوالية
5 برقم هوية: 111) و/ أو المتوالية برقم هوية: 116 (و/ أو المتوالية رقم هوية: 86)؛ حيث يشتمل ‎alge‏ الضد المذكور على متواليات أخرى ل 00127 البشري أو لا يشتمل؛ كما سبق الكش عنه؛ و؛ عند الضرورة؛ تعزيز الحيوان المذكور بنفس المولد المناعي؛ واسترداد ‎WA‏ الطحال أو العقد الليمفاوية من الحيوان المستجيب للتحصين ودمج الخلايا المذكورة مع خلايا الورم الهجين لعزل أجسام مضادة وحيدة النسيلة و/ أو
0 (ب) التعبير عن بولي نيوكليوتيدات تشفر تلك الأجسام المضادة ‎Jie‏ البولي نيوكليوتيدات التي تم الكشف عنها في الوثيقة الحالية بمتالية النيوكليوتيد في صورة ناتج عودة الارتباط في الخلايا في ظروف تتيح استرداد الأجسام المضادة؛ و (ج) استرداد أجسام مضادة تتعرف على قمة لاصقة كما تم تعريفهاء وبخاصة المشتملة على متواليات من الموضع ‎2b‏ ل0127© وبخاصة المشتملة على تلك المتواليات بالإضافة إلى
— 6 7 —
متواليات من النطاق ‎D1‏ ل60127 ؛ وبخاصة الأجسام المضادة ذات ألفة الارتباط المطلوية ضد سلسلة ألفا لمستقبل ‎IL‏ البشري. في نموذج معين للاختراع؛ يتم تحضير الأجسام المضادة أو شظاياها في خلايا تعطي خصائص إدخال الفوكوز ¢ مثل ‎WA‏ طائر ‎EB66‏
يتعلق الاختراع ‎Lad‏ بطريقة اختيار جسم مضاد تشتمل على خطوات الحصول؛ ريما من خلال إحدى الطرق الموصوفة في الوثيقة ‎Alla)‏ على جسم مضاد أو شظية رابطة لمولد ضد ‎die‏ يرتبط تحديداً ب60127 ؛ وبخاصة مولد ضد منه كما سبق الكشف عنه؛ واختيار منبين هذه الأجسام المضادة تلك التي لا تزبد من نضج الخلايا المناعية المستحث ب 1510 ؛ وبخاصة الخلايا التغضنية؛ التى لا تستحث المعالجة الداخلية ‎CD127J‏ و/ أو التيتثبط المعالجة الداخلية ل
0 00127 المستحثة ب7-اا_و/ أو تثبط معملياً و/ أو داخل جسم الكائن ‎all‏ التعبير عن الإنتجرينات ‎O00‏ 0< و/ أو 00000 ‎Sag‏ إجراء الاختيار باستخدام أي من الطرق الموصوفة في جزءٍ الأمثلة لاختبار ‎sally‏ أونقص التعبير عن التعبير المستحث ب©ا15 _لواسمات سطح الخلية ‎CD40‏ و/ أو 6080 أو لاختبار التأثيرات على المعالجة الداخلية 0127© أو لاختبار التأثيرات على التعبير عن الإنتجرينات 0.00 و أو 00000 ومن المناسب إجراء تلك
5 الاختبارات على سبيل المثال في أطباق ذات 96 ‎Tue‏ للسماح بسرعة وكفاءة فحص عدد كبير من الأجسام المضادة المرشحة وأداء القراءات عن طريق التلطيخ المناعي التقليدي وتحليل عد خلايا التدفق. لذلك» فإن الاختراع يتعلق بطريقة لاختيار الأجسام المضادة؛ أو شظاياها الرابطة لمولد الضد أو جزيء ضخم آخر حيث تشتمل على أو تتكون من واحدة على الأقل من الخطوات التالية: ا. اختبار (مثلا كما تم وصفه المثال 1؛ 2 المثال؛ المثال 6 و / أو المثال 7) جزيء ضخم مع
0 قدرة الجزيء الضخم على الارتباط ب 00127؛ بشكل خاص بمولد ضد له كما تم وصفه في الوثيقة الحالية.
ب. اختبار (مثلا كما تم وصفه الشكل 16 و / أو المثال 5) المعالجة الداخلية ل 60127 في ‎LIA‏ المعبرة عن 010127 المستحثة بوجود الجزيء الضخم .
— 8 6 — ج. اختبار (مثلا كما تم وصفه الشكل 16 و / أو المثال 5( التثبيط عن طريق الجزيء الضخم للمعالجة الداخلية المستحثة ل 7اا ل 00127 فى ‎WAN‏ المعبرة عن ‎.CD127‏ ‏د. اختبار ‎Dag)‏ كما في الشكل 5؛ الشكل 6 و / أو المثال 9) زيادة نضج الخلايا المتغضنة المستحثة ب ‎TSLP‏ في وجود الجزيء الضخم. واختياريا تشتمل على واحدة على الأقل من الخطوات التالية:
ه. اختبار (مثلا كما في الشكل 1؛ الشكل 2 و / أو المثال 3) التثبيط عن طريق الجزيء الضخم لإرسال الإشارات المستحث ب 7-ااء بشكل خاص فسفرة ‎STATS‏ ‏و. اختبار (مثلا كما في المثال 9؛ الشكل 5 و / أو الشكل 6) التثبيط عن طريق الجزيء الضخم لإنتاج ‎TARC‏ المستحث ب ‎TSLP‏
ز. اختبار (مثلا كما في المثال 16؛ الشكل 19 و / أو الشكل 20( التثبيط عن طريق الجزيء الضخم للتعبير عن الإنتجرينات 00 0 و/ أو ‎DOOR‏ بشكل خاص تعبير سطح الخلية على الخلايا ‎T‏ الليمفاوية. ‎z‏ اختبار (مثلا كما في المثال 21 الشكل 28( التعطل بسبب جسم مضاد ارتباط 0680017 إلى السلسلة البطاقة الصفراء» بشكل خاص فى وجود 7 ‎AL‏
5 حيث يلى كل من هذه الخطوات للاختبار اختيار واحد أو أكثر الجزيئات الضخمة التى بها الميزات الوظيفية المطلوب؛ كما تم وصفه فى الوثيقة الحالية. كما سبق ذكره؛ فإنه عندما يكون المطلوب أن يتعرف الجسم المضاد على قمة لاصقة تشتملعلى متواليات ليست متجاورة فى متوالية 00127؛ فمن الممكن اختبار على التوالى التعرف على (أوالارتبط ب) شظايا القمة اللاصقة التي تتكون (أو تتكون بشكل رئيسي) من متوالية متجاورة واحدة
‎CD 1273 20‏ . على سبيل المثال ؛ من المطلوب الحصول على جسم مضاد يتعرف على قمة لاصقة تشتمل على المتواليات بأرقام هوية: 115 116( 1175« فمن الممكن ‎Yl‏ اختيار الأجسام المضادة التي تتعرف على قمة لاصقة تتكون بشكل رئيسي من المتوالية برقم هوية : 5 1 ثم اختيار» من بين هذه الأجسام المضادة المختارة ‎(Lol‏ الأجسام المضادة التى تتعرف على قمة
— 9 6 — لاصقة تتكون بشكل رئيسي من المتوالية برقم هوية: 117. ومن الواضح. أن ترتيب الاختيار قد يتغير عن هذا الترتيبء الذي تم إعطاءه فقط كمثال. هناك هدف آخر للاختراع هو تركيبة صيدلانية تشتمل على جزيء ضخم طبقاً للاختراع» مع ناقل صيدلاني؛ حيث تشتمل التركيبة الصيدلانية اختيارياً على مكون فعال مختلف.
كما يتعلق الاختراع بتركيبة تشتمل على مكون فعال» أو جزيء ضخم طبقاً للاختراع؛ أو تركيبة صيد لانية كما سبق تعريفها فى صيغة مناسبة لمقاومة بقاء أو تمدد الخلايا موجبة ‎CD127‏ ‏البشري؛ وبخاصة الخلايا موجبة 60127 البشري المؤثرة؛ وبخاصة بقاء أوتمدد ‎LA‏ 1 الذاكرة
+00127؛ وبخاصة ‎LA‏ 1 الذاكرة ‎CD127+ La ll‏ و+608 أو التى هى كل من
‎CD4+ CD 127+‏ ¢ عند إعطاء ها إلى ‎Uae‏ بشري . وفي نموذج معين» تكون التركيبة
‏0 الصيدلانية المشتملة على جزيء ضخم طبقاً للاختراع كمكون فعالة في صيغة مناسبة لمقاومة تمايز و/ أو نضج الخلايا المتغضنة عند إعطاء ها لمريض . قد تشمل تركيبة الاختراع كذلك على مركب إضافي ذي تأثير ‎ade‏ معدل للمناعة» وبخاصة على الخلايا التي تدخل في التحساسية أو المناعة الذاتية. وللتوضيح؛ فمن أمثلة المعدلات المناعية المعنية أجسام مضادة أخرى وحيدة النسيلة تستهدف الخلايا 1 ؛ ‎die‏ الجسم مضاد
‎«CD3 1 5‏ أو مضاد ‎ICOS‏ ¢ أو مضاد ‎CD28‏ أو بروتينات ناتجة عن عودة الارتباط أو أجسام مضادة تستهدف خلايا ملحقة مثل ‎CTLAZIG‏ أو الأجسام المضادة ‎CD40J‏ . كما يتعلق الاختراع بجسم مضاد أو شظية منه رابطة لمولد ضد أو جزيء خيمري كما تم تعريفه أو توضيحه في الوثيقة الحالية؛ لاستخدامه كمكون فعال في توليفة؛ أو نظام علاجي إضافي لمريض بحاجة إليه. كما يتضمن ذلك استخدام جزيء ضخم؛ أو حمض نووي؛ أو خلية؛ أو سلالة خلايا
‏0 طبقاً للاختراع كمكون فعال علاجياً في توليفة في توليفة؛ أو نظام علاجي إضافي لمريض بحاجة إليه. يتم اقتراح جزيء ضخم طبقاً للاختراع» اوحمض نووي» أو خلية؛ أو سلالة ‎(WDA‏ أوتركيبة صيدلانية؛ أو تركيبة كما تم تعريفها في الوثيقة الحالية؛ بصفة خاصة لاستخدامها في مربيض بشري لعلاج حالات مرضية تتأثر بالاستجابات المناعية؛ وبخاصة استجابات الخلايا 1 الذاكرة.
— 0 7 — وبالتالي؛ فقد اقترح المخترعون إمكانية استخدام الجسم المضاد؛ أو شظية منه رابطة لمولد ضد؛ أو جزيء خيمري طبقاً للاختراع» أو تركيبة أو تركيبات صيدلانية كما تم تعريفها في الوثيقة الالية في علاج أمراض مناعة ذاتية أو تحساسية وبخاصة اضطرابات حساسية الجلد؛ أو اضطرابات الأمعاء» أو حقن غرسة أو لعلاج اللوكيميا مثل لوكيميا الأرومات الليمفاوية الحادة ‎(T-ALL (ie)‏ أو الأورام الليمفاوية مثل لمفومة هودجكين؛ أو علاج مرض سرطاني مثل سرطان الثدي المرتبط بخلايا +00127؛ أو سرطان الكلى؛ أو سرطان المثانة؛ أو سرطان الرئة؛ أو سرطان البنكرياس؛ أو لعلاج الأورام الليمفاوية الجلدية للخلية آ ؛ ‎Jie‏ لمفومة ‎(Sezary‏ أو لعلاج لوكيميا شبه الأرومات الليمفاوية الحادة بطفرة اكتساب الوظيفة لمسار ‎AL=T-R/TSLP‏ ‏في نماذج مختلفة؛ يتعلق الاختراع باستخدام جزيئات ضخمة كما تم تعريفها في الوثيقة الحالية 0 الاستتفاد الخلايا موجبة -20127مع الحفاظ عى خلايا سالبة ‎.CD127-‏ ‏في نماذج ‎(dain‏ يتعلق الاختراع باستخدام جزيئات ضخمة كما تم تعريفه في الوثيقة الحالية لمنع تمايز و/ أو تمدد و/ أو نضج الخلايا موجبة 127 ‎«CD‏ وبخاصة تمايز أو تمدد أو نضج يحثه 7-اا و/ أو ‎TSLP‏ ؛ مع عدم وجود تأثير كبير أو أي تأثير على ‎Wal‏ سالبة ‎.CD127‏ ‏في نموذج معين؛ يتعلق الاختراع باستخدام جزيئات ضخمة تم تعريفها في الوثيقة الحالية في إزالة / 5 معادلة خلايا ‎T‏ السليمة والذاكرة بالتداخل مع إشارات مستحثة ب-7-اا ؛ مع الحفاظ على خلايا 1©9. في نموذج معين؛ يتعلق الاختراع باستخدام جزيئات ضخمة تم تعريفها في الوثيقة الحالية من أجل استنفاد مجموعات فرعية من الخلايا الليمفاوية؛ أو غيرها من مجموعات الخلايا المعبرة عن 7 (مثل الخلايا الليمفاوية ‎T‏ و8 الطبيعية أو المرضية؛ وخلايا ‎(NK‏ والخلايا المتغضنة؛ 0 وغيرها من انواع الخلايا ‎Jie‏ الخلايا الظهارية) نتيجة لتأثير سام للخلية خاص بالأجسام المضادة؛ وريما من خلال ولكن ليس قاصراً على ‎ADCC‏ (سمية خلايا تعتمد على الجسم المضاد) واختيارياً من خلال ‎CDC‏ (سمية ‎WA WIA‏ تعتمد على مكمل). في النماذج السابقة؛ يمكن تطبيق الاستخدام السابق على الأحماض النووية»؛ والنواقل» والخلايا؛ وسلالات ‎(LDA‏ وتركيبات الاختراع.
المقصود بمصطلح 'علاج” أو 'معالجة علاجية"؛ أن خطوات الإعطاء التي تمت تؤدي إلى تحسن في الحالة الإكلينكية لمريض حيواني أو بشري بحاجة ‎Cus cad)‏ يعاني من اضطراب(ات) تتعلق بمسار 7-اا؛ أي؛ تتضمن تنشيط أو تكاثر ‎WAN‏ موجبة 00127. يهدف هذا العلاج إلى تحسين الحالة الإكلينيكية للمريض الحيواني أو البشري» عن طريق إزالة أو تخفيف الأعراض المصاحبة للاضطراب(ات) المتعلقة بمسار 7-اا؛ أي يتضمن تنشيط أو تكاثر الخلايا موجبة
7. وفي نموذج مفضل؛ يتيح العلاج طبقاً للاختراع استعادة الصحة. وفي نموذ ‏ ج مفضل؛ لا يكون للعلاج المذكور ‎A‏ تأثيرات سلبية غير مرغوية بسبب زيادة نضج الخلايا ‎cde lial)‏ وبخاصة الخلايا التغضنية. يشمل الاختراع استخدام الجزيئات الضخمة في علاج حالات مرضية يشمل تعديل الاستجابة
0 المناعية لدى مريض بشري مما يؤدي إلى ‎Alla‏ سائدة مولدة للتحمل؛ أو على العكس؛ نقص التحمل حيث يمكن وجود حاجة التحكم في مستوى الاستجابة المناعية وكذلك تدمير الخلايا الخبيثة موجبة 00127. يوفر الاختراع وسيلة مناسبة لاستخدامها في أمراض كتلك التي يستحثها حقن غرسة؛ أو أمراض المناعة الذاتية؛ أو أمراض الحساسية؛ أو أمراض الجهاز التنفسي؛ أو العدوى الفيروسية الحادة؛ أو
5 الأورام الليمفاوية؛ أو اللوكيميا أوغيرها من الأمراض السرطانية كتلك الناجمة عن الأورام الصلبة (مثل سرطان الثدي) حيث ترتبط تلك الأمراض بالخلايا موجبة 7-اا وكذلك مسار إرسال إشارات 7-اا حيث يكون لابد من تجنب الزيادة في نضج الخلايا التغضنية. في نموذج معين, يتعلق الاختراع باستخدام جزيء ضخم, حمض نووي, خلية؛ سلالة خلايا أو تركيبة الاختراع في مريض بشري لعلاج مرض مناعة ذاتية أو مرض تحساسي أو لعلاج لوكيميا
0 مثل لوكيميا الأرومات الليفية الحادة أو لعلاج ورم ليمفاوي, أو لعلاج مرض سرطاني, أو لعلاج عدوى فيروسية مزمنة, أو لعلاج أمراض التهابية, أو لعلاج أمراض الجهاز التنفسي, أو لعلاج أعراض تتعلق بعملية زرع. في نموذج معين, يتعلق الاختراع بطريقة علاج حيث تشتمل على إعطاء جزيء ضخم, حمض نووي, خلية؛ سلالة خلايا أو تركيبة الاختراع في ‎ane‏ بشري لعلاج مرض مناعة ذاتية أو مرض
— 2 7 — تحساسي أو لعلاج لوكيميا مثل لوكيميا الأرومات الليفية الحادة أو لعلاج ورم ليمفاوي, أو لعلاج مرض سرطاني, أو لعلاج عدوى فيروسية مزمنة, أو لعلاج أمراض التهابية, أو لعلاج أمراض الجهاز التنفسي, أو لعلاج أعراض تتعلق بعملية زرع. ستضح سمات وخواص إضافية للاختراع من خلال الأمثلة والأشكال التالية. الأمثلة المثال 1. تحضير واختيار أجسام مضادة ‎Mabs‏ 00127 بشربة جديدة تم تحصين جرذان ‎hCD127-1g‏ ناتج عن عودة الارتباط ‎hCD127)‏ مدمج مع شظية ثابتة من جلوبيولين مناعى- -10975 ‎Sino Biologicals, Beijing, China; reference‏ ‎(HO3H‏ وكانت الأجسام المضادة وحيدة النسيلة مستمدة باستخدام الطرق التقليدية. وكان 0 بروتوكول التحصين المستخدم كما يلي: تم استخدام خيمرية ‎Fe‏ 010127 ناتج عن ‎sage‏ الارتباط ‎(10975-HO3H Sino Biological, Beijing, China)‏ في تحصين جذران من سلالة 38 0/لا0ا. تم تعليق خمسين ميكرو جرام من البروتينات في مادة مساعدة ‎Complete‏ ‎Freund Adjuvant‏ وإعطاءها تحت الجلد. وبعد 20 ‎lags‏ تم إجراء حقن استذكاري للبروتين المعلق في ‎.Complete Freund Adjuvant‏ تم إجراء حقن استذكاري ‎AT‏ مشابه في اليوم 60 5 وإجراء حقن تعزيزي في اليوم 90 ب100 ميكرو جرام من البروتين» قبل جمع خلايا الطحال بأربعة أيام . تم الحصول على الأورام الهجينية بدمج ‎WA‏ طحال أحادية النواة مع ورم خلوي مناعي ‎IROS3F‏ ‏؛ وسلالة ‎WIA‏ غير مفرزة ومقاومة لأزاجوانين» طبقاً للإجراء السابق وصفه ‎(Chassoux et‏ ‎al, 1988)‏ تم أولاً فحص الأورام الهجينية طبقاً لقدرة الأجسام المضادة المفرزة أحادية النسيلة 0 للارتباط بجزيء 00127 ناتج عن عودة الارتباط -10975 ‎(CD127 Fc Chimera;‏ ‎Sino Biological, Beijing, China)‏ ,1ا103. بعد الاختيار» تمت زراعة الأورام الهجين في وسط ‎DMEM‏ كامل. وتم تركيز المادة الطافية بالترشيح الفائق ‎(Centramate, Pall)‏ والتنقية بكروماتوجراف الألفة على البروتين © ‎(HiTrap, GeHealthcare)‏ .5 التخفيف باستخدام محلول منظم للتصفية التتابعية جليسين 0.1
— 7 3 — مولار برقم هيدروجيني 2.8. تم تقييم الجلوبيولينات المناعية المنقاة الناتجة في تجرية ‎ELISA‏ للنشاط ضد 010127 البشري. بين النسائل المفرزة الأولى المختارة حسب التعرف عن طريق الأجسام المضادة المفرزة ‎CD1271‏ الناتج عن ‎sage‏ الارتباط؛ تم اختيار اثنين عن طريق عد خلايا التدفق على تعرف 010127 الذي تعبر ‎die‏ خلايا 1 بشرية وعلى خواصها المضادة بالنسبة ‎TSLPJ‏ . تم إنتاج أجسام مضادة وتصنيف نمطها الأسوي وكذلك ألفتها باستخدام قياس الرنين البلازموني السطحي باستخدام تقنية 51806018. المثال 2. تعرف الجسم المضاد ‎h—-CD127‏ وحيد النسيلة على 010127 المقاس ‎ELISA,‏ تم تثبيت 7010127 الناتج عن عودة الارتباط ‎(Sino Biologicals, Beijing, China;‏ ‎reference 10975-HO8H) 0‏ على لدينة ‎dilly‏ جرعات متزايدة من ‎(Sino Biologicals,‏ ‎Beijing, China; reference 10975-HO8H)‏ لقياس الارتباط. ويعد الاحتضان والغسل؛ تمت إضافة سلسلة ‎LIS‏ مأخوذة من الفأر مضادة للجرذ مرقمةببيروكسيداز ‎(AbdSerotec)‏ ‏والكشف عنها بالطرق التقليدية. وتأكد ارتباط لكل جسم مضاد. المثال 3. تثبيط إشارات اا ‎(PSTATS)‏ ‏5 تتم احتضان خلايا دم محيطي بشرية ‎(PBMC)‏ تم جمعها من تدرج الفيكول ( ‎(ficoll‏ من متطوعين أصحاء في وسط خالي من المصل بتركيز مختلف من الجسم المضاد المعني لمدة 15 دقيقة عند درجة حرارة الغرفة؛ وقبل الاحتضان مع 0.1 أو 5 نانو جم/ مل من 7-اا بشري ناتج عن عودة الارتباط (0110046 ‎AbDSerotec ref‏ :7-اا7) لمدة 15 دقيقة عند 37 م. تم تحليل ‎PBMC‏ غير المعالجة ‎rhIL-75‏ كإشارة خلفية؛ بينما تم ضبط ‎LIA‏ معالجة ب7-ا١‏ ‏20 بدون الجسم المضاد كمقارنة سالبة. ثم تم تبريد ‎PBMC‏ بسرعة وغسلها بمحلول منظم ‎FACS‏ ‏لإيقاف التفاعل. ثم تم احتضان الخلايا لمدة 15 دقيقة بمحلول سيتويك/ وسيتوبيرم بارد ‎(BD‏ ‎«Bioscience, ref 554722)‏ وغسلها مرتين بمحلول منظم ‎(Bd Perm/Wash‏ ‎(Bd Bioscience ref ‏مضاد للبشر‎ CD3 FITC ‏والتلطيخ بجسم مضاد‎ Bioscience)
Perm/Wash ‏مرتين بمحلول منظم‎ PBMC ‏لمدة 30 4385 على الثلج. تم غسل‎ 557694)
— 4 7 — وإنفاذها في محلول منظم )558050 ‎BD Perm Buffer Il (Bd Bioscience, ref‏ لمدة 30 دقيقة. ثم تم غسل الخلايا مرتين في محلول منظم ‎FACS‏ (و/ أو ‎PBS‏ مع 961 ‎BSA‏ و 960.1 أزيد) والاحتضان لمدة 30 دقيقة عند درجة حرارة الغرفة مع جسم مضاد 647 ‎PSTATS Alexa‏ مضاد للبشر )612599 ‎Bioscience, ref‏ (ا8). تم تحليل العينات على جهاز ‎BD‏ ‎LS; CANTO Il FACS 5‏ يظهر في الشكل 1 و2؛ كان 811382 والأجسام المضادة الخيمرية المستمدة منها ‎N13B2-G1)‏ و 011382-64 ) مثبطات قوية لفسفرة ‏ 51/75؛ بتثبيط يزيد عن 9650 بتركيزات منخفضة تصل إلى 50 نانو جم / مل ولا تزيد عن نسبة تثبيط 9680 (ل0.1 ‎fan si‏ مل 7-اا) أو أكثر من 9690 (ل5 نانو جم/ مل من 7-اا) عند تركيزات جسم مضاد منخفضة تصل إلى 100 نانو جم/ مل. 0 المثال 4. تركيز نصف التثبيط ‎(IC50)‏ لمختلف الأجسام المضادة وحيدة النسيلة ‎IL-7RO‏ ‏البشرية تظهر في الجدول 1 0 الجدول 5. ‎IC50‏ لمختلف الأجسام المضادة ل60127© على 0-51/875 المستحث ب 100 بيكو ‎[o>‏ مل من ‎rhiL7‏ ‎N13B2-| N13B2-| MD707-| 11341 N13E| N13B‏ ‎G4 G1 3 2 5 2 IC50‏ بيكو جم/ مل 43 50 62 1090 28 37 المثال 5: اختبار المعالجة الداخلية ل ‎ILTR‏ بواسطة قياس تدفق الدم يمكن إجراء اختبار المعالجة الداخلة باستخدام ميكروسكوب مشترك البؤرة كما هو موضح بالتفصيل في جزء المواد والطرق ل )2011( ‎et al (2010) and Luo et al.‏ 16010065. لكي تتم ملاحظة المعالجة الداخلية ل ‎CD127‏ في غياب ‎IL-7‏ فإن الأجسام المضادة ل ‎H3L4 « HAL 5 ,hN13B2‏ (البراءة الأمريكية رقم 8,637,27) أو1/811 (طلب البراءة الدولي رقم 2011094259) عند تركيز نهائي من 50 نانو جرام/مل (أو الأجسام المضادة ل ‎MD707-12,MD707-5 0‏ و 100707-13 41 ‎N13B2-G4‏ عند تركيز نهائي من 10
— 5 7 — ميكرو جرام/ل ‎Ally‏ تمت حضانتها في ‎PBMC‏ )100000 خلية/ العين) في وسط خالي من المصل ‎sad (TeXMACS, MiltenyiBiotec)‏ 30 دقيقة عن 4 م أو 37 م لأجل ملاحظة المعالجة الداخلية ل 00127. قد تم استخدام الملاحظة المعالجة الداخلية ل 001727 في غياب 7-اا فإن الظروف الخاصة بالحضانة المسبقة يتم استخدامها عند 37 م مع الأجسام المضادة والخلايا التي يتم بعد ذلك حثها باستخدام ‎(AbDSerotec, ref PHP0O46) IL7‏ وعند 0.1 نانو
جرام/مل لمدة 15 دقيقة عند 37 م. تم إيقاف التفاعل عند 4 م وتم غسل الخلايا عند 3 مرات باستخدام ‎BSA 961 PBS‏ 960.1 من الأزيد قبل التبقيع باستخدام مضاد 00127 مرقم ب ‎PE‏ ( المستنسخ 017-1421 العلوم الحيوية ‎(ref 557938 BD‏ تم التخفيف عند 1 / 10 في ‎BSA, 961 PBS‏ 960.1 من الأزيد وتمت الحضانة عند 15 دقيقة عند 4 م. وبعد الغسل
0 فإن الخلايا تم تحليلها عن طريق قياس التدفق الخلوي باستخدام وسيلة قياس خلوي من نوع ‎Biosciences) Cantoll‏ (ا8). تم عرض النتائج في الشكل رقم 16 والتي تكون تمثيلية من التجارب المستقلة الثلاثة. تتم تهيئة الطريقة بسهولة في أطباق بها 96 عيناً لكي يتم إجراء الفحص والانتقاء للأجسام المضادة والتي تعيق 7اا بشكل تابع أو مستقل عن المعالجة الداخلية ل 00127.
5 المثال 6 دراسة ألفة الجسم المضاد ‎J‏ 0127© تم قياس ألفة الجسم المضاد ل 700127 بواسطة رنين البلازمون السطحي على ‎Biacore3000‏ ‎(GE Healthcare)‏ تم تنشيط شريحة ‎(GE healthcare) CMS‏ عن طريق حقن خليط من ‎53d NHS / EDC‏ 4 دقائق. تم تخفيف ‎CD-127Fc‏ (500 ميكرو جرام/مل ) في 5 مل مولار من المحلول المنظم
20 .من مالليات برقم هيدروجيني 6.2 والذي يتم حقنه مع الوحدات البنائية لإستر سكسيميديل حتى الوصول إلى الاشتباك الكامل لإشارة ‎300RU‏ . يتم وقف نشاط الوحدات البنائية الخاملة بواسطة حقن 1 مولار من إيثانول أمين برقم هيدروجيني 8.5. تم حقن الأجسام المضادة على 127 ‎CD‏ ‏في مدى تركيز خاص بجزء النتائج. تم ضبط معدل الحقن عند 40 ميكرو لتر/ الدقيقة؛ وتم قياس
— 6 7 — الارتباط لمدة 3 دقائق وتم الفصل لمدة 10 دقائق. وبين كل دورة من التحليل تم إعادة تجديد الشرحة بواسطة حفن محلول من 5 مولار من 2 لمدة 60 ثانية. تم تحليل مخططات المستشعر التي تم الحصول عليها باستخدام نموذج 'ناتج التحليل ثنائي التكافؤ' على برنامج 4 ‎BlAeval‏ ‏5 وكما هو موضح في الشكل رقم 3 والجدول رقم 2 به فإن 111382 من الجرذ والشامبنزي تعرض
‎al‏ ل 00127 مع00010_ في معدل من ‎4.9E‏ 11 مولارء --8.5 11 مولار ‎NI3B2)‏ من ‎.(N13B2-G4) 1.70.E-105 (N13B2-G1) 3.77.E-10 «(3a‏ يعرض ‎MD707-1‏ ‏من الجرذ ألفة منخفضة ل ‎CD127‏ بالمقارنة مع ‎N13B2‏ من الجرذ. المثال 7: نشاط ربط الجسم المضاد ل ‎CD127‏
‏0 بالنسبة لاختبار انشطار ‎ELISA‏ تم تغليف جسم مضاد مأخوذ من الحمير مضاد ل ‎19G‏ (خاص ب ‎(Fe‏ عند 1.2 ميكرو جرام/مل على أطباق 096 وتمت إضافة الأجسام المضادة النقية لكي يتم قياس التركيز فى الوظيفة والمدى القياسى. وبعد الحضانة والغسل فإن السلسلة الخفيفة المضادة للبشر والفثئران والسلالة الخاصة بكابا ‎Abcam)‏ المرجع 8679115 أو ‎Effimune‏ النسيلة ‎(NaM76-5F3‏ بالإضافة إلى أجسام مضادة من الحمير مرقمة ببيوكسيداز مضادة للفئران
‎«Jackson Immunoresearch) 5‏ المرجع 036-715 -151) من الأجسام المضادة التي تمت إضافتها وتم الكشف عنها بواسطة طرق قياسية. المرتبط بالإنزيم). بالنسبة لاختبار ‎ELISA‏ فإن ‎hCD127‏ ناتج ‎sage‏ الارتباط ( ‎Sino‏ ‎Biologicals, Beijing, China‏ ؛ المرجع ‎Allg (10975-HO8H‏ تم تثبيتها على ‎gall‏
‏20 البلاستيكي عند 1 ميكرو جرام/ل وتمت الإضافة للجسم المضاد المتبقي لقياس الربط. وبعد الحضانة والغسل فإن سلسلة كابات من مضاد الجرذان والفئران المرقم ببيروكسيداز من السلسلة ‎(Abd Serotec)‏ التي تمت إضافتها وتم الكشف عنها بواسطة الطرق التقليدية. وكما هو موضح في الشكل رقم 4 والجدول رقم 3 فإن نشاط الارتباط يتم قياسه بواسطة ‎ELISA‏ ‏من الجسم المضاد 801382 والذي يكون عالياً مع 5050 = 65.6 نانو جرام/مل ‎ED50)‏ >
نانو جرام/مل و 0050 > 100 نانو جرام/مل) بالنسبة ل ‎N13B2‏ من الجسم المضاد ل 7 و ‎EDSO‏ من 12.0 نانو جرام/مل و 12.6 نانو جرام/مل ‎EDS0)‏ > 15 نانو جرام/مل) لاثنين من الأجسام المضادة الخيمرية التي تم اشتقاقها من ‎cN13B2-G1) N13B2‏ و ‎.(cN13B2-G4‏ ‏5 المثال 8: اختبار الثبات
تمت حضانة الجسم المضاد المنقى الخيمري ‎J‏ 801382-61 المتوافق مع البشر عند 37 م أو - 0م لمدة 7 أيام. تم استخدام اثنين من الاختبارات لكي يتم قياس الثبات الخاص بالجسم المضاد: ربط المضاد 000127 بواسطة اختبار ‎ELISA‏ وتشكيل التكتل بواسطة ترشيح الهلام. ‎dually‏ لاختبار ‎ELISA‏ الخاص بالنشاط فإن ‎hCD127‏ ناتج ‎sage‏ الارتباط ( ‎Sino‏
‎Biologicals, Beijing, China 0‏ « تتم الإشارة إليه ‎(10975-HO8H (fie‏ وبتم تثبيته على البلاستيك عند 1 ميكرو جرام/مل ويكون هناك تخفيفات ‎Led‏ يتعلق بالمادة الطافية والتي تمت إضافتها لقياس الارتباط. وبعد الحضانة والغسل فإن السلسلة الخفيفة المضادة للبشر (الخاصة بكابا) بالإضافة إلى مضاد من الحمير مرقم ببيروكسيداز مضاد للفئران تتم إضافته ويتم الكشف عنه بواسطة طرق تخليقية. بالنسبة لتحليل تشكيل التكتل» فإن العينة يتم تحليلها على عود الفصل
‏5 الكروماتوجرافي الخاص بالترشيح ‎(Superdex 200, 10/300GL, GeHealthcare)‏ لكي يتم فصل وتقييم ناتج التكتل والمونومر من العينات. المثال 9: إنتاج مستحث ب ‎TSLP‏ من ‎TARC‏ والتعبير عن مرقمات خلية تغضنية ناضجة من ‎CD40, CD80‏ تم غزل الخلايا التغضنية النشوانية ‎(DC)‏ باستخدام ©0016 ‎+(BDCA-1)‏ طقم ‎Jie‏ خلية
‏0 تغضنية ‎(MiltenyiBiotec, BergischGladbach ,Germany)‏ من دم متطوعين أصحاء ‎.(EtablissementFrancais du Sang, Nantes, France)‏ تمت زراعة الخلايا التغضنية النشوانية في ‎RPMI‏ مشتمل على 9610 مصل بقري جنيني؛ و9061 من بيروفات؛ 961 من ‎(Hepes‏ و01 من ‎L‏ - جلوتامين و01 من بنسيلين -ستريبتوميسين. تمت زراعة الخلايا عند 4 خلية /العين في أطباق بها 96 ‎lie‏ وجود ‎TSLP‏ (15 نانو جرام/مل) أو نسيلة متوسطة
من المزرعة والإضافة لللجرذ عند الأجسام المضادة ل 60127 عند تركيزات مختلفة. وعند 24 من الزراعة؛ تم تحليل الخلايا عن طريق القياس الخلوي لمرقم سطح الخلية 010080 من النضج (مضاد ‎(BD#560442)‏ 6080-1450 ) وتم تجميع المواد الطافية لإنتاج ‎TARC‏ بواسطة اختبار ‎.(R&D sytems, Minneapolis , USA) ELISA‏ تم اختبار تثبيط إنتاج مستحث ب ‎(TSLP‏ من ‎TARC‏ بواسطة قياس الإنتاج المذكور كما تم وصفه أعلاه في وجود الجسم المضاد أو في وجود ‎N13B2‏ أو ‎MDT07-6‏ أو بشكل تجاري بالنسبة للجسم المضاد ل ‎(R&Dsystems ref.
AF981) TSLPR‏ عند 1 ميكرو جرام/مل أو 6 ميكرو جرام/مل. وكما هو موضح في الشكل رقم 6؛ فإن ‎NI3B2‏ تقوم بتثبيط إنتاج ‎TARC‏ ‏مستحث ب ‎TSLP‏ بواسطة أكثر م %25 عند تركيزات تكون أقل من 1 ميكرو جرام/مل أي؛ 0 بشكل فعال ‎Jie‏ 1/10707-6 عند التركيز المذكور. تم اختبار التثبيط من التعبير المستحث ب ‎TSLP‏ من 6040 5 ‎CD80‏ لمرقمات سطح الخلية بواسطة التعبير المذكور الخاص بالقياس كما تم وصفه أعلاه (بالنسبة ل 0040؛ الجسم المضاد (مضاد ‎CD40-FITC‏ من 555588 ‎BecktonDickinson ref.‏ ) والذي تم استخدام في ظروف مشابهة ‎Jie‏ تلك الموصوفة أعلاه ل ‎(CD80‏ في غياب الجسم المضاد (التعبير الطبيعي 5 عند 96100 بالنسبة للحالة المذكورة) أو في وجود الأجسام المضادة ل 801382 ‎MD707-3 or‏ ‎MD707-6‏ عند 6 ميكرو جرام/المل. وكما هو موضح في الشكل رقم 7. فإن كل من الزيادة المستحثة ب ‎MDT707-65 MDT07-3‏ للتعبير عن ‎CD40‏ و0080 وعلى الرغم من وجود ‎MD707-3‏ الذي يكون عبارة عن مثبط جيد لتنشيط ‎STATS‏ ورابط جيد ل 001727 (الشكل رقم 2 والشكل رقم 4) و100707-6 فإنه يكون عبارة عن مثبط قوي لإنتاج مستحث ب 1510 0 من7186 (الشكل رقم 6). تكون الزيادة عند 9620 ‎Ld‏ يتعلق ب 6080© و 1650 ‎Lad‏ يتعلق ب ‎.CD40‏ على العكس من ذلك؛ فإن الجسم المضاد من الاختراع 5 ‎N13B2‏ لا يزيد التعبير المستحث ب ‎TSLP‏ من 6040 أو 0080 . وبدلاً من ذلك فإن التعبير المذكور يكون أقل في وجود ‎TSLP‏ والجسم المضاد من الاختراع في وجود ‎TSLP‏ بمفرده. المثال 10: السمية الخلوية المعتمدة على الجسم المضاد ‎(ADCC)‏ من ‎Mabs‏ 00127 مضاد 5 للبشر
تشير ‎ADCC‏ إلى ريط الجسم المضاد مع ‎dad‏ لاصقة تم التعبير عنها على ‎LIAN‏ المستهدفة وبعد ذلك تحديد يعتمد ‎Fe le‏ تالي من ‎WIA‏ مناعية لمرسل عصبي معبرة عن مستقبلات ‎Fo‏ ‏(بشكل أساسي خلايا ‎NK‏ والخلايا اللمفاوية المنشطة) التي ينتج عنها قتل الخلايا الخلايا المستهدفة بصورة أساسية بواسطة آليات تعتمد على جرانزيم/ خلايا تعتمد على بيرفورين.
تكون خلايا المرسل العصبي عبارة عن ‎NK DIA‏ بشرية أولية جديدة وتم ‎hie‏ من خلايا أحادية النواة من الدم الطرفي بواسطة الانتقاء السلبي باستخدام خرزات مغناطيسية (طقم ‎(NK Jie‏ ‎(MiltenyiBiotec, BergischGladbach,Germany‏ وجهاز تصنيف خلية ذاتي من نوع 85 . تمت حضانة خلايا ‎NK‏ طوال الليل عند 37 م؛ 965 من 002 في وسط ‎(Life Technologies, Carlsbad, California) RPMI 1640‏ المتمم مع 0 من ‎FBS‏
‎«(Life Technologies) 0‏ 5 100 8355 دولية/ مل من البنسيلين ‎«(Life Technologies)‏ 0.15 مجم/مل من الستريتوميسين ‎«(Life Technologies)‏ 2 مل مولار من 1 — جلوتامين ( ‎Life‏ ‎(Technologies‏ و 150 وحدة دولية /مل من2-اا بشري ( ‎Roche, Basel,‏ ‎(Switzerland‏ تم ترقيم الخلايا المستهدفة سلالة خلية 8/7/3 تم نقل العدوى لها من 010127 بشرية في )2000 ‎Ally (Park et al.,‏ تم ترقيمها باستخدام 100 ميكرو كيوري (3.7 ميجا
‏5 بايت مكافئ) من +510 ‎(PerkinElmer)‏ لمدة ساعة واحدة عند 37 م وبتم الغسل خمسة مرات باستخدام وسط المزرعة. تمت حضانة الخلايا المستهدفة مع أجسام مضادة مخففة أو مع سواغ (وسط المزرعة) لمدة 15 دقيقة عند درجة حرارة الغرفة و10000 خلية تم وضعها في طبق له قاع على شكل حرف لا سعة 96 عيناً. تمت إضافة خلايا 1 للمرسل العصبي عند 10: 1 من نسبة الخلية (بحجم إجمالي : 200 ميكرو لتر) لمدة ساعات من فترة الحضانة عند 37 م. كان هناك
‏0 كمية إجمالية من المادة الطافية 25 ميكرو لتر وتم التجميع بعد ذلك وتم الحساب في عداد جاما ‎.(Packard Instrument)‏ لا تقوم كل من ‎MDT07-3‏ من أصل الجرذ و ‎N13B2-G1‏ الخيمري (والتي لها نطاق ‎Fe‏ من نوع 1061 ‎Mabs(‏ بعرض 0000ا/. لا يعرض 011382-54 الخيمري (والذي يشتمل على نطاق ‎Fo‏ من النوع 964 ) أي نشاط خاص ب ‎ADCC‏ وتم استخدامه في شكل عينة تحكم
سالبة. وعلى نحو مفيد فإنه لا يوجد أي ارتباط مباشر بين الألفة ‎Jas lls‏ وخصائص ©8060 والتي توضح خصائص 80060 التي لا يمكن ‎sal‏ بها من تحليلات ‎day‏ ‏المثال 11: متواليات النيوكليوتيدات والأحماض الأمينية من ‎Mabs‏ 00127 مضاد بشري تم عمل متواليات مناطق ‎VH‏ وا/ا من منتسخات ‎NI3B2‏ باستخدام تقنية ‎[RACE PCR‏ وعلى نحو مختصرء فإن إجمالي ‎RNA‏ يتم استخلاصه ويتم عكسه وانتساخه ويكون ‎cDNA‏ الناتج عبارة عن طرف 3 معالج بولي أدينيل من الجزيئات باستخدام ‎dATP‏ وإنزيم ترانسفيراز طرفي. تم إجراء تفاعل ‎PCR‏ للدورة 35 باستخدام بادئي أساسي من 019001 وإنزيم هيركيولاز ‎(Stratagene)‏ تم إجراء ‎PCR‏ من الدورة الثانية 35 باستخدام بادئات أساسية من ‎PCR‏ . يكون منتج ‎PCR‏ النتاج بعد ذلك في 1/8 تم استنساخه في إيشريشيا كولاي وبعد الانتقاء على 0 الأمبيسيلين والذي ينتج عنه مستعمرات يتم فصحها بواسطة تخطيط إنزيم تقييد ويدلاً من ذلك عمل متواليات ‎CDNA‏ مدرج. ‎Jal‏ 12: المعالجة البشرية تم تحقيق المعالجة البشرية الخاصة بالجسم المضاد أحادي النسيلة من 811382 الجرذي باستخدام تقنية تطعيم ‎CDR‏ قياسية. يكون ‎fase‏ تلك العملية هو ‎sale)‏ تشكيل الجسم المضاد بحيث يشتمل 5 فقط على مناطق تحديد متممة ‎(CDRS)‏ من الجسم المضاد أحادي النسيلة من الجرذ الذي يهدف ليس فقط لتقليل توليد المناعة للجسم المضاد في البشر ولكن أيضاً لتحسين الخصائص الفيزيائية الحيوة من الجزيء المطعم ب ‎.CDR‏ ‏تتطلب المعالجة البشرية بواسطة تطعيم ‎CDR‏ وجود وحدات بنائية لريط مولد الضد من جس مضاد جرذي اساسي يتم الاحتفاظ به في النسخة المعالجة البشرية. يطلق على الوحدات البنائية 0 المجاورة ل ‎CDRs‏ بأنها وحدات بنائية ل ‎"and‏ والتي جد أنها تؤثر على التوافقات الخاصة ب ‎CDR‏ والتي يمكن أن توجد للتعرف على الجسم المضاد التوليفي. قام ‎Chothia and Lesk,‏ )1987( بفصل الصور المتوافقة من ‎CDR‏ طبقاً للوحدات البنائية المخروطية؛ وبعضها يكون موجوداً بداخل ‎CDRS‏ نفسها والأخرون في المناطق الإطارية. إن تحديد تلك الصور من وحدات بنائية ل 'فيرينية' والوحدات البنائية 'المخروطية" منها يكون بمثابة خطوة هامة. يكون البروتوكول
المستخدم معتمداً على الطريقة التي بدأ بها ‎Greg Winter and colleagues(Paus and‏ ‎(Winter, 2006081 the Medical Research Council, Cambridge, UK‏ واستخدامات الوحدات البنائية ل ‎CDR‏ طبقاً لتعريف كابات. تم تحقيق انتقاء مناطق المستقبل من الإطار البشري الذي عليه مناطق ‎NI3B2 CDR‏ الجرذية بواسطة البحث عن جرذ ‎IMGT‏ وقاعدة بيانات الجينات ‎١/‏ من الجرذان ومن البشر باستخدام
‎IgBLAST‏ تم توير أداة عند ‎NCBI‏ لتسهيل التحليل الخاص بمتواليات المنطقة المتغيرة للجلويولين المناعي )2013 ‎(http://www .ncbi.nim.nih.gov/igblast ; Ye et al.,‏ مع متواليات من الجرذ ‎VH‏ 01382 و ‎AVL‏ شكل مدخل. بالإضافة إلى ذلك فإن الاستراتيجية في هذه الوثيقة يتم تطبيقها واستخدامها فيما يتعلق بمتواليات سلالة جرثومية ‎ally‏ تكون ‎Ble‏ عن
‏0 متواليات بشرية طبيعية والتي لا تشتمل على التطفيرات المفرطة الجسدية الموجودة في البروتين والمتواليات المشتقة من ‎CDNA‏ . تكون معظم الجينات من لسلالة الجرثومية مشابهة لمتواليات ‎VL‏ الجرذية 5 ‎all VH‏ تم اختيارها بشكل طبيعي. تم تحديد مستقبل إطار العمل من مناطق السلالة الجرثومية البشرية ‎VH‏ و ‎VL‏ بواسطة الجسم المضاد ل ‎VH‏ 1382لاو الاالأساسي من محاذيات الجسم المضاد المعتمدة على الخصائص التالية: 1 تحديد المتوالة عبر إطار العمل
‎CDRs 5‏ كما تم تحديدها بواسطة ‎(lS‏ 2- تحديد الوحدات البنائية المتداخلة من السلسلة الداخلية المتوافقة والنمطية» 3 دعم الحلقات مع توافقات مخروطية ل ‎CDR‏ أساسية ووحدات بنائية لفيرينيه. تم اختبار متواليات مختلفة قليلة من الصور المتوافقة مع البشر فيما يتعلق ب 801382 لاختيار أفضل واحد والذي تتم المحافظة عليه بواسطة الارتباط مع النشاط البيولوجي. بالنسبة للصور
‏0 المتغيرة المعالجة بشكل بشري من 811382 ؛ هناك متوالية متغرة من السلسلة الثقيلة المتوافقة مع البشر ‎(VH)‏ من الجسم المضاد ل 801382 والتي تم انتساخها بواسطة ‎ECORV‏ في بلازميد تعبير ‎Invivogen, Toulouse) pFuseCHIg-hGle4‏ ) التي تشتمل على نطاقات ‎CH1-‏ ‎CH2-CH3‏ من 710961 وتم ‎jalaill‏ عند ‎E333A‏ لزيادة ‎LADCC‏ تم انتساخ المتوالية المتغيرة من السلسلة الخفيفة المتوافقة مع البشر ‎(VL)‏ من الجسم المضاد 1382ل وتم الانتساخ بواسطة
-2ع8- ‎8511/١‏ في بلازميد تعبير ‎(Invivogen, Toulouse) pFuse2CLIg-hk‏ المشتمل على ‎CL‏ ‏كايا بشري. في خلايا ‎(COS‏ فقد قمنا بنقل العدوى المشترك بواسطة طريقة معالجة ليبوفيكتامين مع بلازميد يشتمل على 11-07061/ مع بلازمي يشتمل على ‎VL-CLK‏ وبعد الحضانة للمادة الطافية من 72-48 ساعة فإن المادة الطافية قد تم استخلاصها وتمت تنقيتها بواسطة الألفة على الفصسل
الكروماتوجراف لبروتين ‎(HiTrap, GeHealthcare) G‏ مع الجلايسين 0.1 مولار من 2.8 من المحلول المنظم للتصفية التتابعية. تمت ديلزة الجسم المضاد النقي في ‎PBS‏ وتم التركيز. تم الحساب الكمي باستخدام ‎sandwich ELISA‏ وتم الاختبار في اختبار النشاط في مقابل مولد الضد ‎.CD127‏
0 المثال 13: دراسة الأجسام المضادة ل 7840| على 7-اا على الصور المختلفة من نماذج المرض الالتهابي في الكائن الحي ويهدف فحص تأثير الجسم المضاد في حث التهاب القولون في فثئران ‎NSG‏ معالجة بشكل بشري؛ فقد توصلنا إلى مجموعات من التجارب في نموذج ‎TNBS‏ التي أوضحت أن لها تأثير يمكن قياسه. يكون استخدام مركبات هابتين مثل ‎TNBS‏ ( حمض 2؛ 4؛ 6 من تراي نيترو نبزين
5 مولفونيك) الذي يسمح بحث التشابه النموذج المناعي )2008 ‎et al.,‏ لا818008). تم حث التهاب القولون في الفئان بواسطة الإعطاء بداخل المستقيم من ‎Sigma Chemical, ) TNBS‏ ‎(LIsled’AbeauChesne, France‏ الذي تم تحلله في إيثانول عند اليوم صفر في ‎das)‏ ‏جرذان. وف البداية فإن الفئران يتم تخديرها عن طريق استنشاق غاز الخليط. في اليوم 7 ‎OB‏ ‏الحيوانات يتم ذبحها تحت التخدير بواسطة التسميم من خلال 002 وذلك لعدة دراسات. ‎al)‏ يتم
0 توضيح البيانات) يتم ذبح بعض الحيوانات قبل اليوم 7 بسبب أن لها درجة إكلينيكية سيئة. وبالتالي فإن هناك اثنين من مجموعات الفئران تمت معالجتها باستخدام أي من ‎PBS‏ أو مع الحقن ل 210 ميكرو لتر عند 0.7 مجم/مل من 111382 ومضاد 11740 كل يومين بدايةً من اليوم قبل معالجة ‎TNBS‏ تم إجراء معالجات مشابهة لتلك التي تم تقديمها في النموذج.
وقد قمنا بعد ذلك باختبار الجسم المضاد ل 811382 ‎Lad‏ يتعلق بالفعالية في المرض العائل في مقابل الطعم من نموذج فتران ‎(GVHD)‏ يقوم هذا النموذج بمحاكاة المرض الالتهابي. وبعض الفئران التي عمرها من 7 إلى 12 أسبوع من نوع ‎NOD/scid/IL-2Ry—/- (NSG)‏ ‎(Charles River, L’arbresle, France)‏ تمت معالجتها بالإشعاع ‎(3GY)‏ وتم التسربب فيها عن طريق ‎(i.p) sill‏ باستخدام 50 مليون من ‎PBMC‏ بشري من مانحين أصحاء وكما تم وصفه ‎Lad‏ سبق بواسطة 2012 ‎Poirier et al.,‏ تم الحفاظ على الحيوانات بعد ذلك في حالات معقمة وتمت مراقبتها ثلاثة مرات في كل أسبوع فيما يتعلق بزيادة الوزن والتقييم الإكلينيكي. يتم ترك مجموعة عينة المقارنة غير معالجة بعد تسريب الخلايا ويتم استقبال مجموعة المعالجة من اليوم صفر وثلاثة مرات في كل أسبوع؛ عن طريق الحقن في ‎sill‏ من 5 مجم/كجم من ‎mAb 0‏ 801382 الخيمري. تم التشخيص ‎Hl GVHD‏ معين عند فقط يصل إلى 9620 بالوزن. تم الوصول إلى الحيوانات بحيث يكون بها أكثر من 9625 بالوزن من الفقد وتكون الحيوانات باقية على قيد الحياة بعد 100 يوم من الوم صفر تم ذبح الحيوانات. وبعد التخدير فإن أنسجة القولون ‎ally‏ والرئة يتم تجميدها في نيتروجين سائل وبتم أخذ نسيج ‎tek‏ للتحلل النسيجي. تم التجفيف لأجزاء مجمدة (10 ميكرو مولار) من تلك الأنسجة عند درجة حرارة الغرفة لمدة 1 ساعة قبل 5 ثثبيت الأسيتون لمدة 10 دقائق عند درجة الحرارة ‎Sug‏ التبقيع بعد ذلك باستخدام هيماتوكسيلين ومحلول أيوزين. تم عرض النتائج في الشكل رقم 25 والشكل رقم 26. المثال 14: تحليل متغيرات إكلينيكية متنوعة البقاء على قيد الحياة (الشكل رقم 9أ): تم اختبار معدل البقاء على قيد الحياة طبقاً للمعالجة الإكلينيكية واستخدام الجسم المضاد ل 117540 . إن النسبة المئوية للبقاء على قيد الحياة تنحو ‎ob‏ ‏0 تكون أكثر أهمية لمجموعة ‎HU=TNBS + ١1170‏ بالمقارنة مع مجموعة ‎Hu-TNBS + PBS‏ (الشكل رقم 9أ). بالفعل فقد تمت ملاحظة أن هناك 96100 من الفئران من المجموعة ‎HU=‏ ‏5 + البقاء على قيد الحياة 17840 بما يصل لحوالي 5 أيام بينما تكون في مجموعة ‎Hu—‏ ‎oli TNBS + PBS‏ هناك ثلاثة من الحيوانات يتم تخديرها قبل 5ل. يكون الوزن (الشكل رقم 9ب): في مجموعة ‎TNBS‏ تمت معالجتها من ‎asd)‏ 0 يتم الحقن عن 5 طريق المستقيم ل 965 من ‎[TNBS‏ إيثانول 9650 وقد تمت ملاحظة نقص في الوزن يصل إلى
حوالي 9620 لكل من المجموعات. وعلى الرغم من ذلك» وفي مجموعة ‎Hu-TNBS + ١70‏ » فإن الحيوانات التي اكتسبت وزناً من 3ل تكون في المجموعة ‎HU=TNBS + PBS‏ وتم الاستمرار في فقط الوزن (الشكل رقم 8ب). من المهم ملاحظة أن الفئران التي تم ذبحها لتجميع بيانات بيولوجية ويكون بها برتوكول في مدى أطول لكي يتم التثبت من استعادة الوزن.
البقاء على قيد الحياة (الشكل رقم 25): تم اختبار معدل البقاء على قيد الحياة طبقاً لحقن ‎PBMC‏ ‏بشري (تطور ‎(GVHD‏ واستخدام الجسم المضاد ل ‎١780‏ من 8011382. يكون معدل البقاء على قيد الحياة للحيوانات هو 9630 أفضل عندما يكون هناك حيوانات قد تمت معالجتها باستخدام الجسم المضاد بالمقارنة بعينة المقارنة من الحيوانات )%100 من معدل الوفيات من الحيوانات الخاصة بالتحكم بعد 60 يوماً). أوضحت النتائج أن اجسم المضاد ل ‎NI3B2‏ تمت حمايته في
0 مقابل ‎GVHD‏ والوفاة. ترشيحات الأنسجة (الشكل رقم 26): تمت معالجة القولون والأمعاء الداخلية والكبد والرئة من الموت وتمت معالجة الحيوانات القابلة للبقاء على قيد الحياة (ولكن تم تعريضها للقتل الرحيم) أو لم يتم تحللها بشكل نسيجي فيما يتعلق معدل ارتشاح الخلايا الالتهابية (الدرجة النسيجية التي تم تحديدها). تمت ملاحظة أن القولون من الحيوانات التي تمت معالجتها باستخدام ‎NI3B2‏ يتم
5 تضمينها في ارتشاح أقل بالمقارنة بعينات المقارنة. لم تتم ملاحظة أي اختلاف في الأمعاء الدقيقة والكبد والرئة وبين تلك الظروف. تمت معالجة الحيوانات باستخدام 11382 التي توضيح 30 96 من معدل البقاء على قيد الحياة بالمقارنة مع عينة المقارنة. لم تُعدل سمات الترشيح الخاصة بالالتهاب بواسطة المعالجة بداخل الأمعاء الدقيقة والكبد والأنسجة الخاصة بالرئة التي توضح أنه في هذا النموذج من الالتهاب لم تتم
0 حماية 811382 في مقابل الالتهاب الرئوي في الأنسجة المذكورة. وعلى الرغم من ذلك فإن 2 تحث النقص بمقدار 9650 فيما يتعلق بارتشاح القولون. يمكن أن يرتبط هذا التأثير مع نشاط الجسم المضاد ل ‎NI3B2‏ على تعبير انتجرين 04]7 كما هو موضح في الشكل رقم 19 و20. وبالفعل» فإن إنتجرين 04]07 يكون ‎Wg me‏ بأنه يلعق دوراً ‎Lala‏ في إيواء الخلايا اللمفاوية من الأمعاء. وبالتالي فإن النقص الخاص بالتعبير لإنتجرن يتم حثه بواسطة الجسم المضاد ل
5 11382 والتي يمكن أن تكون مسئولة عن النقص في الارتشاح الذي تمت ملاحظته في القولون
— 5 8 — (الشكل رقم 26( يجب أن يتم تأكيد أن الغياب الواضح للحماية في أنسجة أخرى يمكن أن تكون محددة للنموذج المستخدم ويجب أن لا تؤدي إلى خاتمة خاصة بتأثير الحماية من الجسم المضاد الذي يكو محدوداً بالقولون. وعلى نحو خاص فإن يكون هناك بقاء أعلى على قيد الحياة للحيوانات التي تمت معالجتها وأوضح أن التأثير الخاص بالحماية من الجسم المضاد له تأثيراً موجباً ‎List‏ ‏5 على الحالة الكلية الخاصة بالحيوانات.
000127 Aah ‏يتعلق بالجسم المضاد غير المعالج بشكل‎ Lad ‏الفعالة في الكائن الحي‎ 15 JG ‏الحيوانات‎ ‎CNRS Primatology Center, ‏كانت حيوانات البأابون ( من نوع 10801015م08 من‎ ‏تشتمل على اختبار الغمس في‎ Allg ‏سلبية لكل اختبارات التويركولي‎ (Rousset, France
0 اتويركولين. تم وضع الحيوانات في منشأة حيوانات كبيرة فيما ويعد ذلك تم السماح لها في المعمل بالتأقلم طبقاً لتوصيات ‎Institutional Ethical Guidelines of the Institut National de‏ ‎la Santé Et de la RechercheMédicale, France‏ . تم إجراء كل التجارب تحت التخديرز العام باستخدام زوليتيل ‎(Virbac, Carron, France)‏ .2 إجراء دراسات الحركيات الصيدلانية والحركيات الدوائية أثناء تجارب ‎DTH‏ على خمسة حيوانات من البابون التى تستقبل
عن طريق الوريد جرعة كبيرة من أي من 10 مجم /كجم من ‎N1 3B2-1gG1‏ أو-382 ‎N1‏ ‎.MD707-13-1gG4 4 IgG4‏ لقاح ‎BCG‏ واختبار ‎DTH‏ ‏طبقاً ل )2011 ‎Poirier et al, (Poirier et al.,‏ . تم تحصين حيوان البابون تحت الجلد ‎(id)‏ ‏مرتين باستخدام لقاح من نوع ‎Calmette-Guerin (BCG)‏ عصوي (0» مل؛ 8-2 105
‎UFS; Sanofi Pasteur MSD, Lyon, France 20‏ ( في المنطقة العليا من الرجل لفئران عمرها من 4 و2 أسابيع قبل اختبار الجلدا071 . لكي يتم فحص المناعة للخلية ‎T‏ الخاصة بمولد الضد قبل اختبار الجلد ل ‎DTH‏ وقد تم التثبت من التحصين الناجح بواسطة الإنترفيرون ‎(IFN)‏ من اختبار تبقيع مناعي مرتبط بالإنزيم - 9 ‎(ELISPOT)‏ ( الرئيسيات غير البشرية؛ من طقم ‎IFN=‏ ‎ELISPOT‏ ور ‎Systems, Minneapolis, MN, USA‏ لا8 ) على ‎PBMC‏ معزول بشكل
‎cana‏ وذلك طبقاً لتعليمات المُصنع. تم إجراء التفاعلات داخل الجلد ‎(IDR)‏ باستخدام مرات حقن بداخل الجلد بصورة مزدوجة من اثنين من الجرعات (1000 ودة دولية أو 2000 وحدة دولية) من مشتق بروتين منقى -توبيركيولين ( ‎PPD; Symbiotics Corporation, San Diego, CA,‏ ‎(USA‏ في 0.1 مل في الجلد على ‎gall‏ الأعلى من الظهر الأيمن من الحيوانات. تم استخدام المحلول الملحي (0.1 مل) في شكل عينة مقارنة سالبة. تم قياس الاستجابات في الجلد عند
مواضع الحقن باستخدام مريع وسيلة قياس الشمك. يكون قطر كل من الجلد الملتهب قد تم قياسه عن طريق اثني من الملاحظين من الأيام 8-3 وبتم أخذه في الاعتبار بأه موجباً عندما يكون > 4مم في الشمك. تم تسجيل متوسط القراءة. تم تنفيذ العينات لكبيرة من موضع الجلد من ‎DTH‏ أو من عينة المقارنة (المحلول الملحي) عند اليوم 4 على واحدة أو أكثر من مركب درجة حرارة القطع
0 التمثيلي ل ‎DTH‏ عند اليوم 4 على واحدة من الصورة المزدوجة ‎Sakura Finetek, ) (OCT)‏ ‎(Villeneuve d’Ascq, France‏ فيما يتعلق بالتحليل المناعي النسيجي الكيميائي. تم ‎shal‏ ‎IDR‏ عند الأسبوع 3- وعند فترة الغسل وتستقبل الحيوانات الحقن مرة واحدة ‎Las‏ يتعلق بأي من مجم/كجم الأجسام المضادة الخيمرية ‎N13B2-1gG1) ©0127 J‏ أو ‎N13B2-1gG4‏ أو 100707-13-4 ) لمدة 1 يوم قبل الاختبار الثاني المذكور باستخدام ‎PPD‏ تم إجراء ‎IDR‏
5 الثالث بعد فترة غسل إضافية من 6-3 أسابيع وتم ترك الحيوانات غير معالجة. في بعض الحالات؛ تم إجراء ‎IDR‏ الرابعة بعد حوالي 3 أشهر من الغسل تم ترك الحيوانات غير معالجة. المثال 16: تعبير 04]7 عند سطح الخلية آ في المعمل وفي الكائن الحي للنموذج الفأري: لقياس التعبير عن 0407 المستحث ب 7اا عند سطح الخلية ‎T‏ ؛ تم حث الخلايا اللمفاوية آ لمدة 9 أيام عند 37 م باستخدام ‎(AbDSerotec, ref 0110046( IL7‏ عند 5 نانو جرام/مل. تم
0 إيقاف التفاعل عند 4 ‎cp‏ وتم الغسل قبل التبقيع باستخدام ‎slime‏ مرقم 0600/0/5 من مضاد 4ه ‎(BD Bioscience 563644 clone 9F10)‏ ومضاد 07 مرقم ل ‎BD ( PE‏ ‎(Bioscience, clone FIB504‏ .25 قياس الخلايا الموجبة لإنتجرين 04 وخلايا موجبة ل ‎BT‏ تم قياسها بواسطة قياس التدفق الخلوي. تمت إضافة الجسم المضاد ل 801382 البشري عند اليوم 0 إلى مزرعة الخلية عند تركيز مختلف من 0.01 إلى 20 ميكرو جرام/مل.
تم حقن خلايا نووية أحادية من الدم الطرفي البشري في الكائن الحي 40 ‎x‏ 10 6 بداخل البربتون في فئران بها نقص مناعي معالجة بالإشعاع ( من فتئران معالجة بسلسلة جاما مستقبل ل ‎.(NOD/SCID/ IL-2‏ ويعد اسبوعين من المعالجة باستخدام محلول منظم من ‎die‏ المقارنة ‎n)‏ ‏= 5) أو ‎N13B2 mAb‏ (5 مجم/كجم؛ ‎N‏ = 5)؛ تكون النسبة المئوية من الخلية اللمفاوية ل ‎T‏ ‏5 من الصورة الموجبة اللمفاوية الموجبة ل 07 في الدم بواسطة قياس التدفق الخلوي والتطعيم الخاص بخلايا لمفاوية ل ‎T‏ بشرية موجبة ل ‎BT‏ بواسطة قياس التدفق الخلوي. تم قياس التطعيم بواسطة قياس التدفق الخلوي عن طريق خلية موجبة من 00045 بشري مميز من خلايا موجبة من ‎CD45‏ ‏الخاصة بالفأر التي تستخدم الأجسام المضادة ‎PECYT)‏ من مضاد ‎CD45‏ بشري من ‎BD‏ ‏المرجعي و 57748 ‎PerCPCy5.55‏ ومضاد ‎CD45‏ الفأري ومن ‎BD‏ المرجعي و550994 0 ) وبعد ذلك فإن الخلايا الموجبة ل ‎B7‏ البشرية يتم تحليلها ( ‎BD Bioscience, clone‏ ‎.(FIB504‏ ‏المثال 17. تخطيط الجسم المضاد باستخدام مصفوفة ببتيد دقيقة تشتمل المصفوفات الدقيقة لببتيد ‎Technologies’ PepStarTM‏ على ببتيدات تخليقية ‎slate‏ ‏مستمدة من مولدات ضد أو غيرها من المصادر المثبتة تساهمياً وبالكيمياء الانتقائية على سطح زجاجي. وبيتم إدخال شق رابط غير آلف للماء تمت امثلته بين السطح الزجاجي ومتوالية الببتيد المستمدة من مولد الضد بين سطح الزجاج ومتوالية الببتيد المستمدة من مولد الضد لتجنب السلبيات الخاطئة الناجمة عن الإعاقة الفراغية. ولأسباب فنية تحتوي جميع الببتيدات على جليسين بطرف ©. تم ‎sha)‏ تجارب التخطيط للعينات على مجموعة ببتيدات مكونة من 52 ببتيداً. وفيما يلي القائمة الكاملة للبتيدات: 0 الجدول 9: قائمة الببتيدات المستخدمة في تجارب المصفوفة الدقيقة للبتيدات الم الم الم توال توا توال ية لية ية رقم | المتوالية رقم | المتوالية رقم | المتوالية
HDVAYRQEK ١ 94 76 | ESGYAQNGDL | 58
DENKWT FIETKKFLLIGKSNI EDAEL
YRQEKDENK | 95| KKFLLIGKSNICVK | 77 | AQNGDLEDAE | 59
WTHVNL ‏ل‎ LDDYS
KDENKWTHV LIGKSNICVKVGEK | 78 | DLEDAELDDY
NLSSTK S SFSCY
KWTHVNLSS | 97 | SNICVKVGEKSLT | 79| AELDDYSFSC | 61
TKLTLL CK YSQLE
VNLSSTKLTL VKVGEKSLTCKKI DYSFSCYSQL | 62
LQRKL DL EVNGS
STKLTLLQRK EKSLTCKKIDLTTI | 81 SCYSQLEVNG | 63
LQPAA ‏ل‎ SQHSL
TLLQRKLQPA | 10 TCKKIDLTTIVKPE | 82 | QLEVNGSQHS | 64
AMYEI| 0 A LTCAF
RKLQPAAMY | 10 | IDLTTIVKPEAPFD | 83 | NGSQHSLTCA | 65
EIKVRS | 1 L FEDPD
PAAMYEIKVR | 10| TIVKPEAPFDLSVI| 84 | HSLTCAFEDP
SIPDH| 2 Y DVNTT
YEIKVRSIPDH | 10| PEAPFDLSVIYRE | 85| CAFEDPDVNT | 67
YFKG| 3 GA TNLEF
— 9 8 — ‎VRSIPDHYFK | 10 | FDLSVIYREGAND | 86 | DPDVNTTNLEF | 68‏ ‎GFWSE | 4 FV EICG‏ ‎PDHYFKGFW | 10 | VIYREGANDFVVT | 87 ١ NTTNLEFEICG‏ ‎SEWSPS| 5 FN ALVE‏ ‎FKGFWSEWS | 10 | EGANDFVVTENTS | 88 | LEFEICGALVE | 70‏ ‎PSYYFR| 6 HL VKCL‏ ‎WSEWSPSYY ١ 10 | DFVVTENTSHLQK ICGALVEVKCL | 71‏ ‎FRTPEI| 7 KY NFRK‏ ‎SPSYYFRTPE 10 TENTSHLQKKYVK LVEVKCLNFRK | 72‏ اغا ‎INNSS | 8 VL‏ ‎YFRTPEINNS | 10 | SHLQKKYVKVLMH | 91١ KCLNFRKLQEI | 3‏ ‎SGEMD| 9 DV YFIE‏ ‎KKYVKVLMHDVAY | 92 | FRKLQEIYFIET | 74‏ ‎RQ KKF‏ ‎KVLMHDVAYRQE | 93 | QEIYFIETKKFL | 75‏ ‎KDE LIG‏ تم احتضان ‎Jha)‏ 9 عينات على شرائح مصفوفة دقيقة باستخدام تنسيق ‎\Multiwell‏ وللجسم المضاد ‎N13B2‏ والعينات الأخرى؛ تم وضع 4 تركيزات مختلفة (10؛ 1؛ 0.1؛ و0.01 ميكرو جم/ مل). تم إجراء احتضان مقارنة سالب آخر (جسم مضاد ثانوي فقط) على التوازي. تم التثبيت المشترك لبروتينات ‎IgG‏ بشرية وفأرية على امتداد كل مجموعة ببتيدات لتعمل كمقارنات للتجرية. 5 .تم إجراء جميع عمليات الاحتضان على التوازي باستخدام شريحتين. تم استخدام مصفوفتين صغيرتين للبتيدات على كل شريحة كاحتضان مقارنة عن طريق استخدام الجسم المضاد الخاص بالرصد المرقم بالتألق الفلوري فقط لتقييم الارتباط المجب الكاذب بالببتيدات. بعد غسل وتجفيف
الشرائح تم مسحها بماسح ليزر عالي الوضوحية عند 635 نانو متر للحصو على صور شدة التألق الفلوري. تم قياس الصور لإنتاج متوسط قيمة البكسيل لكل ببتيد. تم ترقيم الجسم المضاد الثانويي ‎IgG‏ الجرذي )212-175-082 ‎(JIR‏ ب5لا عند 1 ميكرو ‎[as‏ مل ‎Buffers and‏ كان المحلول المنظم المستخدم هو محلول منظم ‎TBS‏ يحتوي على 960.05 توين ‎(JPT) 20 5‏ ومحلول منظم للتجرية 120 )#37536 ,120 ‎.(Pierce, SuperBlock TBS‏ تم
JPT Peptide Technologies ) ‏إجراء الاكتساب والتحليل باستخدام مصفوفات ببتيد دقيقة‎
GmbH, Berlin, Germany; batch #2668, Multi-Well incubation chamber,
Axon Genepix Scanner 4200AL, Spot-recognition software GenePixand . (Microsoft Excel, R المثال 18. تخطيط القمة اللاصقة بتحليل مطياف الكتلة. تم استخدام مطياف الكتلة لتحديد القمة اللاصقة الشكلية. تم عمل متواليات القمة اللاصقة باستخدام مطياف كتلة ا10ا8//ا. يسمح هذا الجهاز بمتوالية ببتيد بين 800 و4000 كيلو دالتون. وسمح اهتضام البروتين المعني بتقطيع البروتين إلى شظايا صغيرة (قمم لاصقة محتملة). وعلى نحو مثالي؛ يجب قطع إنزيمات الهضم كنسيلة أقرب ما تكون إلى حدود القمة اللاصقة. وبتم ‎1S‏ اختيار الإنزيم الهاضم حسب تكرار قطفة الإنزيم في متوالية البروتين الناتج عن عودة الارتباط. ويعتبر الاهتضام الثاني يقلل من حجم القمم اللاصقة التي يتم الحصول عليها في نهاية الاهتضام الأول. وحسب الإنزيم المختار؛ قد تختلف القطاعات اختلافاً كبيراً. والإنزيم الذي له أفضل توزيه للهضم على المتوالية هو كيموتريبسين. الإنزيم الثاني ذي تكرار القطفة المناسب وجيد التوزيع على المتوالية المعنية هو ‎Glu C‏ ‏0 نظرً لأن القمة اللاصقة شكلية؛ يفضل اهتضام المعقد أثناء كروماتوجراف الألفة. ويعتمد تحديد المتوالية المعنية على حماية الببتيد من الاهتضام الإنزيمي عن طريق تكوين معقد مولد ضد- جسم مصاد. وبعد المرور من خلال كروماتوجراف الألفة والاهتضام؛ تتم التصفية التتابعية للقمة اللاصقة وعمل متواليات لها عن طريق مطياف الكتلة ‎.(MALDI-TOF-TOF Bruker)‏ وتتوفر البنية ثلاثية الأبعاد للبروتين المطلوب وتتم مقارتها بالنتائج التي تم الحصول عليها.
‎Uniprot 1‏ (المتوالية برقم هوية: 114) : يناظر نطاق تحليل الطبقة للوحدة الفرعية لمستقبل إنترلوكين- 7 ‎Sapiens‏ المتجانس: ‎ESGYAQNGDLEDAELDDYSFSCYSQLEVNGSQHSLTCAFEDPDVNTTNL‏ ‎EFEICGALVEVKCLNFRKLQEIYFIETKKFLLIGKSNICVKVGEKSLTCKKIDL‏ ‎TTIVKPEAPFDLSVIYREGANDFVVTFNTSHLQKKYVKVLMHDVAYRQEKD 5‏
ENKWTHVNLSSTKLTLLQRKLQPAAMYEIKVRSIPDHYFKGFWSEWSPSY
YFRTPEINNSSGEMD
‏الأحماض الأمينية التي تحتها خط أعلاه في‎ gal) 00127 ‏في السيليكو؛ يختار إنزيم هضم‎ ‏المتوالية المناظرة للمتوالية رقم: 114): تم اختيار كيموتريسين كإنزيم اهتضام. وتعد مواقع القطع‎ 0 (الخطوط الغليظة)؛ وعدد الببتيدات» وتكرار القطع مناسبة. تم اختيار إنزيم ‎GIU-C‏ كإنزيم هضم ثاني. ويعد عدد الببتيدات التي تم الحصول عليها ذات وزن ما بين 800 و400 دالتون مناسباً. وعدد مرات قطع ‎GIU—C‏ ومواضع القط (الخطوط الرفيعة) أيضاً مناسبة. والإجراء المستخدم هو إجراء تقليدي ومعروف للشخص صاحب المهارة وقد تم وصفه في 1990 ‎Suckau et al,‏ ‎.and Papac et al, 1994‏
Hi-trap NHS ‏أعمدة‎ ¢ MALDI-TOF /TOF ١١ de Bruker ‏المواد والعوامل: مطياف الكتلة‎ 5 (Ref: 11418467001 — ‏كيموترسين‎ ¢(Ref: 17-0716-01 ~GE healthcare)
Glu C (Ref:11420399001 —Roche); Zip/TIP C18 ¢Roche) ‏جليسين‎ (Ref: 09830 —Sigma) ‏بيكربونات أمونيوم‎ ¢(Ref:ZTC18S096-Millipore) .(Ref : 27800.360 —~VWR) NaCl ¢(Ref:G7126 Sigma) 0 المرحلة الأولى: هضم البروتين الحر والجسم المضاد في المحلول. تم الاهتضام في محلول من مولد ضد حر وجسم مضاد باستخدام كيموترببسين أو © ‎GlU‏ لمدة ساعة؛ ساعتين» 3 ساعات؛ 4 ‎celebs‏ 5 ساعات؛ وطوال الليل عند درجة حرارة الغرفة أو 37 م. تم ‎shal‏ تحليل الببتيدات المهضومة بمطياف الكتلة ‎(MS)‏ للبتيدات المهيضومة. سمحت تلك التجارب بإنشاء الظروف المناسبة لعمليات الهضم الإنزيمية (الزمن ودرجة الحرارة). وكان الهدف هو الحصول على هضم
كاف لمولد الضد؛ مع التأثير على بنية الجسم المضاد أصغر ما تكون. تم تحديد الظروف المثالية وهي: هضم كيموتريبسين: ساعة عند درجة حرارة الغرفة؛ هضم ©-ناا6: طوال الليل عند 37 م. يتم ‎(las‏ كل ناتج هضم لمولد ضد وجسم مضاد بمطياف الكتلة ‎MALDI-TOF / TOF‏ المرحلة 2. ربط الهضم الإجمالي لكل المعقد ‎AC‏ + كل مولد الضد. تم إجراء اقتران الجسم
المضاد 60127 ‎amy‏ النسيلة ‎N13B2‏ (دفعة 210415( على كل عمود ‎NHS‏ م138-ريا باتباع الطريقة القياسية. تم إجراء الاحتجاز المناعي لمولد الضد على العمود أثناء ساعة؛ والسماح بتكوين معقد مولد ضد- جسم مضاد. كانت كفاءة اقتران الجسم المضاد 811382-61 على الأريع أعمدة ‎Hi-Trap NHS‏ كما يلي: 9684, %84, 9683 و9683. تم الحصول على نواتج ‎١‏ ‏قتران متناغمة ومتشابهة.
0 "تم هضم المعقد بنسبة 1/ 50؛ أو 1 مجم من الإنزيم ل50 مجم من الجسم المضاد؛ عند درجة حرارة ومدة تم تحديدهما بعينات المقارنة السابق ذكرها. ثم تم غسل العمود بمحلول منظم للغسيل (بيكربونات أمونيوم 25 ملي مولار لإزالة واستعادة ببتيدات مولد الضد غير المريوطة. كما تم إجراء خطوة غسيل في محلول ملحي منظم ‎(PBS-2M NaCl)‏ لإزالة الببتيدات غير النوعية. ‎das‏ الغسيل؛ تمت التصفية التتابعية بمذيب تصفية تتابعية )50 ميكرو مولار جليسين رقم
5 هيدروجين 2) لاستخراج واستعادة الببتيدات المربوطة نوعياً (التي يتم التنبؤ بها لتنظار القمة اللاصقة). تحليل ‎:MALDI‏ يتم تركيز أجزاء الغسل والتصفية التتابعية بالكروماتجراف غير الآلف للماء على قالب 018. ثميتم تحليلها بمطياف الكتلة ‎\MALDI-TOF / TOF‏ ويمكن لتحليل ‎MS‏ قياس بدقة كتلة الببتيدات ومقارنة الكتل التجريبية بالكتل النظرية للبتيدات المستمدة من الهضم في
0 السيليكو ‎algal‏ الضد ‎all‏ مما يسمح بتحدتد الببتيدات؛ ‎(Sars‏ إجراء تحليل ‎MS / MS‏ لتأكيد متوالية الببتيد إذا استلزم الأمر. يكشف طيف ناتج التصفية التتابعية بعد هضم الكيموتريبسين عن وجود ببتيدات ذات كتلة: 912.49; 1086.47; 1843.03; 2104.16; 1944.97; 1564.73: 1835.97:
‎(gills 285842 5 2424,22 5‏ مما قد يناظر ببتيدات مولد الضد في الجدول 10 لتالي . الجدول 10. الببتيدات التي تم الحصول عليها بعد هضم الكيموتريبسين (المتواليات محمية من التحلل البروتيني) الكتلة المتوالية رقم ا يكشف طيف ناتج التصفية التتابعية بعد هضم ‎GlU-C‏ عن وجود ببتيدات ذات كتلة: و 326470 دالتون والتي قد تناظر ببتيدات مولد الضد في الجدول 11 التالي. الجدول 11. الببتيدات التي تم الحصول عليها بعد هضم ‎GIU-C‏ (المتواليات محمية من التحلل البروتيني)
— 4 9 — ‎ak‏ المتوال | رقم المتوالية الكتلة (دالتون) ‎Lo‏ (دالتون) ‎IYFIETKKFLLIGKSNICVKVGE 1699.43‏ ‎KSLTCKKIDLTTIVKPEAPFDLSVIYRE 3264.70‏ ‎LTTIVKPEAPFDLSVIYRE 2191.04‏ ‎APFDLSVIYRE 1309,68‏ ‎NKWTHVNLSSTKLTLLQRKLQPAAMYE 3170.68‏ ‎IKVRSIPDHYFKGFWSE 2108.97‏ سمحت عمليتي الهضم لنا بتحديد ثلاث مواقع (الجدول 12 التالي) تدخل في التفاعل بين 2 ومولد الضد 000127. تم استبعاد الببتيدات المستمدة من غسلات المحلول الملحي المنظم لتقييد المتواليات المعنية. الجدول 12. متواليات ببتيدات 00127 البشري المحمية ب111382 من التحلل البروتيني (المتوالية برقم هوية: 115( ‎FIETKKF‏ ‏ب (المتوالية برقم هوية: 116( ‎DLSVIY‏ ‎z‏ (المتوالية برقم هوية: 17 1( ‎FKGF‏ ‏5 أظهر تخطيط القمم اللاصقة للجسم المضاد ‎N13B2‏ على مولد الضد ‎CD127‏ 3 متواليات مختلفة مهمة لنشاط الجسم المضاد على مسار 1!7/00127 (الشكل 27). ومع تحليل التصوير البلوري ثلاثي الأبعاد لتفاعل ‎McElroy et al, Structure 2009, ( IL7/CD127‏ ‎(PDB:3DI2‏ فإن اثنين من المتواليات (المتوالية بهوية رقم 115 وهوية رقم 117( يكونا مغلقين هيكليا ويقعا في المنطقة المتضمنة في ارتباط 7اا مع 00127. وتقع المتوالية الثالثة المتعرف
عليها (المتوالية بهوية رقم 116) في الموضع ‎2b‏ لنطاق 02 للمستقبل, النطاق المتوقّع أن يتفاعل مع 00132, السلسلة جاما للمستقبل (2012 ‎(Walsh et al,‏ . يتعرف ‎N13B2‏ على قمة لاصقة بنيوية على 00127 الواقع في جزئين من البروتين الذي يمنع تفاعل ‎IL7-CD127‏ ‏وتكوين ديمر ‎CD127-CD132‏ الغيرمتجانس. يجب أن يزيل ارتباط ‎N13B2‏ استقرار تكوين "مركب سلسلة ‎ILTRA[ILT/g‏ الثلاثي" كما هو متوقع بواسطة ‎Walsh ST‏ , والذي يمنع المعالجة الداخلية للمركب. المثال 19. النتائج كما هو موضح سابقا )2010 ‎(Henriques et al.,‏ , يحث 7-اا بمفرده المعالجة الداخلية السريعة (9640-30) لسلسلة مستقبل 7-اا ألفا ‎(CD127)‏ على سطح الخلايا الليمفاوية 1, وهو 0 المطلوب للإشارات التي يتوسطها 7-اا . نحن نوضح في هذه الوثيقة أن ‎N13B2 mAb‏ يمنع المعالجة الداخلية ل 60127 المستحثة ب 7-اا ولا يحث هذه المعالجة الداخلية بنفسه (الشكل 6). وفي المقابل, وضحنا أن نسيلة مضاد 1/11 00127 البشري من ‎GSK‏ (تطبيق براءة الاختراع الدولي 2011094259) يقلل بشكل كبير التعبير عن 00127 على سطح الخلايا الليمفاوية ‎T‏ عند استعماله بمفرده أو بالاشتراك مع 7-اا في درجة حرارة 37 مئوية (الشكل16). 5 تتم ملاحظة هذا التأثير باستخدام صبغات مختلفة مع العديد من الأجسام المضادة ل ‎ILTR‏ ‏التجارية ‎,eBioRDRS5 and MB15-18C9)‏ لاتظهر البيانات). بعد إعطاء ‎N13B2 MAD‏ الخيمري داخل الوريد (مكون مع نطاق 1961 أو ‎19G4 Fe‏ بشري) ب10مجماكجمفي الرئيسيات الغير بشرية, نحن لم نقيس انخفاض تعبير 0127© على سطح الخلايا الليمفاوية ‎T‏ على مدى أسبوعين من المتابعة (الشكل 17ب). في المقابل, في الرئيسيات الغير بشرية الأخرى المعالجة 0 على التوازي داخل الوريدب 10 مجمامجم من نسيلة مضاد ‎MD707-13‏ 60127 البشري (مكون مع نطاق ‎Fe‏ 064| البشري , البراءة الدولية 056984/2013), لاحظنا انخفاضا كبيرا (9660) في 00127 على سطح ‎WAN‏ الليمفاوية ‎T‏ (الشكل 17ب). هذه المعالجة الداخلية ل 7 بعد ارتباط مضاد ‎MAb‏ 60127 البشري على الخلايا الليمفاوية 1, قد نشرت أيضا سابقا بواسطة مجموعة ‎Cus Pfizer‏ وصفو أن مضاد ‎MAb‏ 00127 البشري الخاص بها ‎clone HAL-H3L4,) 5‏ البراءة الأمريكية 8637273) يحث بشكل كبير على المعالجة الداخلية
ب 00127 خارج الجسم على ‎WIA‏ دم الرئيسيات البشرية والغير بشرية, وكذلك داخل الجسم بعد الإعطاء داخل الوريد في الرئيسيات الغير بشرية )2013 ‎(Kern et al.,‏ . في منشور صدر مؤخرا بواسطة ‎(Kern et al., 2015) Kern et al‏ تم دراسة إشغال 7 وتم تنفيذ فحوصات المنافسة. وأظهرت النسيلة المضادة ل ‎HIL-TR-M21‏ 060127 من ‎BD‏ العلوم الحيوية أنها تتنافس مع الجسم المضاد ‎HALJAD]‏ (من مجموعة ‎(Pfizer‏ من أجل الارتباط ب00127. كما هو موضح في الشكل 16 للاختراع الحالي, تم مقارنة الجسم المضاد ‎H3L4, ( HAL‏ ©100البراءة الأمريكية 8637273( ب ‎N13B2‏ و 1811 من ‎Cua‏ ‏التعبير عن 00127 والمعالجة الداخلية. أظهرت هذه النتائج تنافس ظاهر بين الجسم المضاد ‎HAL‏ و ‎,HIL-7TR-M21‏ مؤكدة بيانات 2015 ‎Kern et al,‏ ومع ذلك , لايتنافس ‎N13B2‏ ‏0 مع ‎\HIL-TR-M21‏ أظهر ‎Kern et al‏ أيضا أن ‎HALJADL‏ بنفسه حث على نقص التعبير عن 60127 على سطح الخلية داخل الجسم من 4 إلى 8 أيام بعد الحقن. هذه النتائج قابلة للمقارنة مع النتائج المعروضة في الشكل 17ب للاختراع الحالي مع النسيلة ‎MD707-13‏ يظهر الشكل 17ب نقص في التعبيرعن 000127 على سطح الخلية من 4 إلى 10 أيام بعد حقن الجسم المضاد. يمكن لهذا التأثير داخل الجسم أن يكون مرتبطا بالمعالجة الداخلية ل 00127 ‎Jala‏ ‏5 الخلية المعتمدة على 1000707-13 في المعمل الملاحظة أيضا. أشارت دراسة القمم اللاصقة بواسطة مصفوفة بيبتيدات دقيقة وقياس الطيف الكتلي إلى قمة لاصقة بنيوية متعرف عليها ب11382 على ‎.CD127‏ تقع هذه القمة اللاصقة في النطاق 001 و 02, على العكس من الأجسام المضادة في التقنية السابقة ‎Ally‏ تتعرف على قمة لاصقة تقع في ‎D1‏ ‏فقط (المثال17). علاوة على ذلك, يظهر الشكل 16 أن الأجسام المضادة للتقنية السابقة تحث 0 على المعالجة الداخلية ل ‎,CD127‏ بينما ‎N13B2‏ لا يفعل ذلك. لذلك نستنتج أن خاصية عدم حث 801382 على المعالجة الداخلية ل 00127 مرتبطة بخاصيتها في التعرف على القمة اللاصقة الواقعة في كلا من النطاق 01 و ‎D2‏ ‏إجمالا, فإن هذه النتائج والمذكورة سابقا أظهرت أن ‎MADS‏ المضاد ل 60127 البشري (نسيلة 1, نسيلات ‎ HAL/ADL‏ و4ا13 اونسيلة ‎(MDT707-13‏ وصفت بمنع ارتباط 7-اا على 5 مستقبل 7-ا, ‎Lads‏ تحث المعالجة الداخلية لسلسلة مستقبل 7-اا ألفا ‎Ally‏ كانت متصلة
ومطلوية لإشارات مستقبل 7-اا. وعلى العكس من ذلك وبطريقة مفاجئة, فإن ‎MAD‏ 11382 له الخاصية الفريدة في عدم حت المعالجة الداخلية ل 00127 ويمنع هذه المعالجة الداخلية المستحثة ب 7-اا. يجب أن تكون هذه النتائج مرتبطة بملاحظة أن /1"المحفزة للمعالجة الداخلية ل 000127 (على سبيل المثال: نسيلة ‎,(MDT07-13‏ والتي تكون فعالة في المعمل لمنع إشارات مستقبل 7-اا (على سبيل المثال: فسفرة ‎STATS‏ الشكل 14ب), غير قادرة داخل الجسم على منع الاستجابات المناعية الخلوية (الشكل21) أو الخلطية (الشكل22) الذاكرية. وفي المقابل, وضحنا أن ‎N13B2 MAb‏ والذي يمنع إشارات مستقبيل 7-اا بكفاءة ( فسفرة ‎(STATS‏ لكن لا يحث المعالجة الداخلية ل 060127 خارج الجسم على خلايا ليمفاوية آ بشرية وداخل الجسم في الرئيسيات الغير بشرية, يمنع الاستجابة الخلوية الذاكرية ذات فرط حساسية من النوع المتأخر 0 (الشكل 21) إلى جانب التطعيم ضد خلايا الدم الحمراء لسلالة الأغنام (الشكل22). بينما لم يلاحظ أي فرق بين أنماط 801382 في التحكم في لاستجابة الخلطية الذاكرية, لاحظنا أن 2 المكون من 1964 كان أكثر فاعلية في منع الاستجابات الخلوية الذاكرية مقارنة ب 1. ولم يلاحظ أي اختلاف من حيث تعرض ‎MAD‏ وتركيزات المصل بين الحيوانات التي تمت معالجتها ب1/00707-13 5 ‎N13B2‏ . بالمثل» لاحظنا زيادة كبيرة في ‎T WDA‏ الليمفاوية 5 المنظمة في الحيوانات التي تمت معالجتها إما ب01382" . أو 100707-13 (الشكل 22). لقد ‎of‏ التعبير القوي المستحث ب7-ا! البشري عن الإنتجرينات 04 و07 ‎Wee‏ على الخلايا ‎T‏ ‏الليمفاوية البشرية بشكل هائل من تكرار الخلايا آ الليمفاوية البشرية المعبرة عن الإنتجربنات 04؛ و 87 ؛ و04/07 (الشكل 119(« المطلوية لإيواء الخلايا الليمفاوية ‎T‏ واحتجازها في الأنسجة غير الليمفاوية كالأمعاء؛ و ‎.(Gorfu et al., 2009, DeNucci et al., 2009) ally all‏ 0 ولالتالي» فقد لاحظنا أن ‎NI3B2 MAD‏ يثبط بشكل يعتمد على الجرعة معملياً كلاً من التعبير عن 04 5 ‎BT‏ وكذلك يقلل من تكرار الخلايا الليمفاوية آ البشرية موجبة 04 وموجبة 04/07 (الشكل 19ب). بالمثل؛ بعد النقل من خلايا دم محيطي أحادية النواة إلى فئران مصابة بنقص المناعة؛ لاحظنا أن الجسم المضاد ‎N13B2‏ يقلل بسرعة وبدرجة ملحوظة من نسبة الخلايا الليمفاوية ‎T‏ موجبة ‎BT‏ وكذلك عدد (تطعيم) تلك الخلايا بعد أسبوع (البيانات غير موضحة) 5 وأسبوعين من المعالجة (الشكل 20). وتدل النتائج التي تم الحصول عليها في نموذجين مختلفين
للالتهاب على أن الجسم المضاد 11382 قد يكون علاجاً فعالاً ضد الأمراض الالتهابية وبخاصة التهاب القولون. المتال 20 توليد ‎dad‏ لاصقة بنيوية من الممكن استخدام ‎CLIPS clay‏ في محاكاة البنية الثانوية والرباعية الاصلية لمولد الضد بكفاءة بهدف ترجمة هذه الببتيدات إلى مولدات مناعية قوية وفعالة تستحث الأجسام المضادة
المطلوية )2014 ‎.(Boshuizen et al,‏ تشمل تقنية ‎CLIPS‏ التحليق (المتعدد) للبتيدات المستقمية عن طريق التفاعل مع كيان صلب صغير (منصة كيميائية) تحمل 2؛ أو 3؛ أو 4 نقاط تثبيت. تتفاعل نقاط التثبيط فقط مع نوع واحد من وظائف الببتيد (أي الثيولات) وتتصل بالببتيد عن طريق روابط تساهمية عديدة. ينطوي الببتيد حول المنصة ويفقد المرونة أثناء اتخاذه ببطء بنية
0 محددة ثلاثية الأبعاء حيث تكون المنصة في المركز ‎Jie‏ "العنكبوت ‎Jah‏ شبكته". تستخدم التقنية منصات مفصلة تخليقية تماماً. وقد تختلف منصات ‎CLIPS‏ بشكل رئيسي في ‎canal)‏ والقطبية؛ والصلابة؛ وقابلية الذويان؛ والوظائف؛ ومسافة ‎"SS ae ly‏ وبتم استخدام هذه المنصات في تثبيث الأطراف السائبة للبتيد. وعند وضعها بشكل متناسب داخل متوالية ‎xi)‏ من المتوقع أن يشبه ببتيد 61105 الناتج كثيراً البنية ثلاثية الأبعاد للمنطقة المناظرة على البروتين
5 السلين مقارنة بالمتوالية الخطية. ‎(Sang‏ إجراء عمليات تحليق ‎CLIPS‏ على وحدات ‎L‏ سيستين أصلية؛ ولكن ليس على 00 وا سيستين (المتجانسة) والمدخلة بشكل صناعي افتراضياً عند أي موضع مطلوب في المتوالية. ومن هناء يمكن أن تختلف بنية وأبعاد ببتيدات 0110560 كذلك. ولا يتسغرق تفاعل التحليق أكثر من 30 دقيقة؛ ويعمل عند درجة حرارة الغرفة ولا يستلزم اي نوع من التحفيز. علاوة على ذلك؛ يمكن استتخدامه تحت ظروف مائية تماماً ورقم هيدروجيني طبيعي
0 (7.5- 8) وبالتالي يتوافق مع الأجهزة الحيوية عالية الحساسية؛ ‎Jie‏ الملتهمات البكتيرية. و ‎cll‏ يمكن تشغيل التفاعل عند ظروف تخفيف مرتفع (10- 100 ميكرو مولار)؛ ممايعزز نواتج مرتفعة من المنتجاتالحلقة ويتجنب البلمرة. هذه التقنية عالية التطاير؛ وفريدة بسبب سهولة استخدامها.
في محاولة لإعادة تكوين ‎AS‏ من القمم اللاصقة الخطية وغير المتصلة للجسم المضاد للمستقبل؛ يتم تخليق ببتيدات متداخلة عديدة الوحدات خطية بشكل مباشر على أطباق من البولي بروبيلين بحجم بطاقة الائتمان مع اقتران الطرف © تساهمياً بقاع كل عين سعة 3 ميكرو لتر (455 عين لكل طبق)؛ حيث احتوت كل عين على ببتيد مختف. وداخل كل ببتيد وحيد النطاق؛ تكونت قنطرة ثنائية السيستين محلقة لإدخال حلقة مقيدة في الببتيدات المتصلة بالطبق. وبشرح ‎Teeling et‏ ‎al, 2006‏ 40 إنتاج الببتيدات الحلقة حيث أنهذه الببتيدات المعنية هو إعادة تكوين ‎dad‏ لاصقة غير متصلة يتعرف عليها الجسم المضاد المعني. وباختصار» يتم أولاً تخليق ببتيدات تحتوي على سيستين ‎SU‏ مرتبط باطبق مع سيستينات متباعدة حوالي 4 و13 88 بطول الببتيد؛ ‎lie‏ ‎CXXXXC‏ -طبق ؛ أو ‎XXXCXXXXCXXXXXX‏ طبق؛ أو 00046-طبق» الخ. ثم ‎(See 0‏ تحليق الببتيدات بالمعالجة ب8 ؛ 8 - داي بروموكسيلين في محلول مائي لتوفير حلقات السيستين المحتوية على أعداد مختلفة من الأحماض الأمينية. يوفر هذا التعديل الكيميائي حلقات أكثر ثباتاً من قناطر ثاني الكبريتيد )2011 ‎.(Niederfellner et al,‏ المثال 21 الترسيب المناعي المشترك ل0127© و76 لاختبار تأثير ‎N13B2‏ والأجسام المضادة للفن السابق على ربط 60127 بسلسلة 76 تم إجراء 5 تجرية الترسيب المناعي المشترك في خلايا محفزة ب7-ا1 وتم احتضانها في غياب الأجسام المضادة أو في وجود الجسم المضاد ‎MD707-13‏ أو 811382. في غياب الأجسام المضادة؛ ثبت أن 60127 و ‎ye‏ يترسبان ‎Lelie‏ ترسيباً مشتركاً. ‎aly‏ يمنع احتضان الخلايا مع ‎MD707~‏ ‏3 هذا الترسيب المناعي المشترك؛ ولكن الاحتضان مع 801382 أدى إلى غياب ذلك الترسب المناعي المشترك. لذلك فإن الجسم المضاد المعني قادر على تعطيل ارتباط 00127 بالسلسلة © بينما الأجسام المضادة الخاصة بالفن السابق لم تحتوي على هذه الخاصية. من أجل الترسيب المناعي المشترك للمعقد ‎CD127-CD132-IL7‏ في وجود ‎alias‏ 00127؛ تم احتضان ‎PBL‏ بشرية مع جسم مضاد ل60127 جرذي ‎N13B2)‏ أو ‎MD707-‏ ‏3الجرذي بتركيز 10 ميكرو ‎fon‏ مل) لمدة 30 دقيقة عند 37 ‎ca‏ قبل التحفيز ب7اا ‎(ADD‏ ‎Serotec, ref PHPO46)‏ بتركيز 5 نانو جم/ مل لمدة 15 دقيقة عند 27 م. تم إيقاف التفاعل
عند 4 ‎cp‏ وغسله مرتين ‎PBS‏ بارد قبل غضافية محلول منظم للتحلل من طاقم الترسيب
.(Pierce Direct IP kit, ref 26148) ‏المناعي المشترك‎
تم تحضير مضاد ‎CD127‏ البشري في عمود تنقية باستخد ام طاقم ترسيب مناعي مشترك
‎(Pierce Direct IP kit, ref 26148)‏ وتم اقتران العمود ب75 ميكرو جم من مضاد ‎CD127‏ ‏5 البشري غير المتنافس المأخوذ من الجرذ (100707-9 ‎(Effimune,‏ باتباع الإجراء الذي يوصي
‏به المصنع. وتمت تنقية ناتج التحليل على عمود غير مقترن من أجل إزالة الرابط غير النوعي.
‏ثم؛ تمت إضافة ناتج التحليل على عمود مضاد 00127 والاحتضان ساعتين عند 4 م؛ مع
‏التقليب. تم غسل العمود مرتين بمحلول منظم للغسيل؛ ثم التصفية التتابعية محلول منظم للتصفية
‏التتابعية. تم تحليل العينات المستردة بلطخة ويسترن.
‏10 للطخة ويسترء؛ تم تحضير هلام ‎SDS-Page‏ )10 % للإذابة؛ %4 لتراص الهلام؛ بسمك 5مم) وتمت إضافة 50 ميكرو لتر من ناتج تصفية تتابعية تم تغيير خواصه الطبيعية (لتغيير الخواص الطبيعية: ‎DTT‏ 0.1 مولار و10 دقائق عند 95 م) في كل عين. تمت إضافة ‎(Sino Biologicals, Beijing, China; reference 10975-H08H) CD127Fc‏ ويروتين ناتج عن عودة الارتباط )5 ميكروجم/ عين) كعينة مقارنة لرصد لطخة ويسترن. وبعد الارتحال
‏5 المدة ساعة عند 200 ‎cle‏ والانتقال على غشاء نيتروسيلولوز ‎sad‏ 35 دقيقة عند 20 فولط؛ تم إجراء التشبع لمدة ساعتين عند درجة حرارة الغرفة في 965 لبن. لبدء ‎call‏ تتم إضافة جسم مضاد 60132 للبشر مأخوذ من الأرنب ‎(anticorps—en—‏ ‎ligne, France, reference ABIN741840)‏ عند 1/ 50 طوال الليل عند 4م ثم الكشف ‎die‏ باستخدام مضاد للارنب مأخوذ من الماعز مرقم ببيروكسيداز ‎(Jackson‏
‎Immunoresearch, reference 111-035-144) 0‏ عند 1/ 2000 لمدة ساعة عند درجة حرارة الغرفة. بعد إزالة التهجن؛ تم احتضان الغشاء مع جسم مضاد للبشر 60127 مأخوذ من الجرذ (100707-9 ‎(Effimune,‏ عند 1/ 200 طوال الليل عند 4 م؛ والكشف ‎die‏ بجسم مضاد للجرذ مأخوذ من الحمار مرقم ببيروكسيداز ‎(Jackson Immunoresearch, reference‏ (712-035-153 عند 1[ 1000 لمدة ساعة عند درجة حرارة الغرفة. ولكل عملية كشف؛ تم
استخدام ‎(Thermo Scientific, reference 34080) ECL‏ لرصد البيروكسيداز عنطريق التألق الكيميائي وتمت قراءة النتائج على كاميرا )34080 ‎.(Thermo Scientific, reference‏ يوضح الشكل 28 نتائج الترسيب المناعي المشترك للمعقد ‎.CD127/IL7/CD132‏ وقد لاحظنا أن سلسلة 0132© )60 كيلودالتون) تترسب ‎belie‏ ترسيباً مشتركاً مع 60127 في أية حالة باستثناء عند احتضان الخلايا مع الجسم المضاد 811382 (28). ومع ذلك؛ في كل حالة يتم
ترسب 0127© (70 كيلو دالتون) ترسيباً ‎Lelie‏ جيداً عن طريق الجسم المضاد -1/0707 ‎de‏ ‏9 كما يظهر في الشكل 28 ب مما يدل على أن 111382 و100707-13_لم يتنافسا مع ‎MD707-9‏ على التعرف على ‎.CD127‏ ويثبط الجسم المضاد 811382 تكوين المعقد ‎N 1 3 B2‏ فى وجود ‎I L-7‏ . وهذه النتائج متوافقة مع تخطيط القمة ‎daa‏ للجسم المضاد
‎N13B2 0‏ على 060127؛ مما يثبت أن 11382 يربط متوالية الحمض الأميني داخل الموقع ‎2b‏ ‏فى النطاق 02 لسلسلة ‎IL7R‏ ألفا )2012 ‎.(Walsh et al, Immunol rev.‏ إجمالاً فقد أثبتت هذه النتائج أن الجسم المضاد 111382 هو مضاد لتفاعل ‎١7/060127‏ وكذلك مضاد لتفاعل ‎CD127/CD132‏ عند الموضع 20 في وجود 7-ااء مما قد يفسر النشاط المثبط للجسم المضاد ضد المعالجة الداخلية ل0127© الملاحظ مع 7-اا و/ أو الأجسام المضادة
‏5 60127 من الفن السابق. تشكل النماذج التالية نماذج الاختراع المفضلة. 1 جسم مضاد أو شظية رابطة لمولد ضد من جسم مضاد أو محاكي جسم مضاد رابط لمولد ‎aca‏ يرتبط تحديداً ب 001727 ولايستحث المعالجة الداخلية ل00127. 2 جسم مضاد أو شظية رابطة لمولد ضد أو محاكي منه, بشكل خاص وفقاً للنموذج 1,
‏0 حيث يثبط المعالجة الداخلية ل 60127 المستحثة ‎ALT,‏ ‏3 جسم مضاد أو شظية رابطة لمولد ضد أو محاكي منه وفقاً للنموذج 1 أو 2 حيث تعبير سطح الخلية عن 60127 في الخلايا المعالجة ب7-ا| في وجود جسم مضاد أو شظية يكون على الأقل 80 96, ويفضل على الأقل 90 96 من مستواه في الخلايا المحتضنة في غياب الجسم المضاد.
4 جسم مضاد أو شظية ‎die‏ رابطة لمولد ضد يرتبط تحديداً ب 601727 ومن ثم يعطل ارتباط 60127 بالسلسلة ‎ye‏ المشتركة لمستقبلات السيتوكين. جسم مضاد أو شظية منه رابطة لمولد ضد وفقاً لأي من النماذ ‎z‏ 1 إلى 3 حيث يعطل ارتباط 60127 بالسلسلة ‎ye‏ المشتركة لمستقبلات السيتوكين عند الارتباط ب 00127. ‎ .6 5‏ جسم مضاد أو شظية منه رابطة لمولد ضد وفقاً لأي من النماذج 4 أو 5, في وجوده كمية © المرتبطة ب 60127 تكون أقل من 80 96, ‎Jiang‏ أقل من 50 96, بل والأفضل أقل من 5 % أو 10 96 من الكمية المذكورة المقاسة في غياب أجسام مضادة في طروف مشابهة, بشكل خاص عند إجراء القياس المذكور على نواتج تحلل الخلايا التي تشتمل على معقدات جزيئية تحتوي على 60127 من الخلايا السليمة معبرة عن مستقبل 7اا على سطح الخلية, التي تم احتضانها 0 في وجود أو غياب الأجسام المضادة المذكورة. 7 جسم مضاد أو شظية رابطة لمولد ضد أو محاكي منه وفقاً لأي من النماذج السابقة حيث يكون عاملاً مضاداً لإشارات ‎IL-TR‏ المستحثة ب 7-اا. ‎ .8‏ جسم مضاد أو شظية رابطة لمولد ضد أو محاكي منه, بشكل خاص وفقاً لأي من النماذج السابقة, حيث يرتبط تحديداً و/ أو تمت إثارته ضد مولد ضد وفقاً لأي من النماذج 53 إلى 67 أو 5 القمة اللاصقة لمولد الضد المذكور. ‎ .9‏ جسم مضاد أو شظية رابطة لمولد ضد أو محاكي ‎aie‏ يرتبط تحديداً ب 00127, بشكل خاص وفقاً لأي من النماذج السابقة, حيث لا يزيد من نضج الخلايا التغضنية المستحثة ب ‎.TSLP‏ ‏0 جسم مضاد أو شظية رابطة لمولد ضد أو محاكي منه وفقاً لأي من النماذج السابقة حيث 0 يثبط التعبير عن الإنتجربناتت ‎BT‏ ,04 و/ أو 04/07 . 1. جسم مضاد أو شظية رابطة لمولد ضد أو محاكي منه وفقاً للنموذج 10حيث يثبط للتعبير عن الإنتجريناتت ‎BT‏ ,04 و/ أو 04/07 في جسم الكائن الحي, بشكل خاص في خلايا 1 البشرية المحقونة فى فأر مصاب بنقص المناعة.
2. جسم مضاد أو شظية رابطة لمولد ضد أو محاكي منه,يرتبط تحديداً ب ‎,CD127‏ بشكل خاص وفقاً لأي من النماذج السابقة, حيث يشتمل على سلسلة ‎VH‏ تشتمل على واحدة على الأقل من متواليات الحمض الأمينى التالية: 1 المتوالية برقم هوية: 10؛ ‎VHCDR2 . 5‏ المتوالية برقم هوية: 12؛
‎VHCDR3 .‏ المتوالية برقم هوية: 14 أو المتوالية برقم هوية: 48؛ أو ‎VH‏ المتوالية برقم هوية: 22 و/ أو سلسلة ‎VL‏ حيث تشتمل على واحدة على الأقل من متواليات الحمض الأمينى التالية: ‎VLCDRI .‏ المتوالية برقم هوية: 16 أو المتوالية برقم هوية: 50؛
‎VLCDR2 ١٠ 0‏ المتوالية برقم هوية: 18 أو المتوالية برقم هوية: 52( ‎VLCDR3 ٠‏ المتوالية برقم هوية: 20؛ أو ‎VL‏ المتوالية برقم هوية: 24. 3 جسم مضاد أو شظية أو محاكي منه وفقاً للنموذج 12حيث يشتمل على اثنين؛ أو ثلاثة؛ أو أربعةءأو خمسة متواليات ‎CDR‏ على الأقل يتم اختيارها من المجموعة المكونة من ‎VHCDRI1‏
‏5 المتوالية برقم هوية: 10, ‎VHCDR2‏ المتوالية برقم هوية: 12, ‎VHCDR3‏ المتوالية برقم هوية: 14 أو المتوالية برقم هوية: 48, ‎VLCDRI‏ المتوالية برقم هوية: 16 أو المتوالية برقم هوية: 50, ‎VLCDR2‏ المتوالية برقم هوية: 18 أو المتوالية برقم هوية: 552 ‎VLCDR3‏ المتوالية برقم هوية: 20. 4 1 . جسم مضاد أو شظية أو محاكي منه وفقاً للنموذ ‎d‏ 3 1 حيث يشتمل على كل الست
‏20 متواليات ‎CDR VHCDRI‏ المتوالية برقم هوية: 10, ‎VHCDR2‏ المتوالية برقم هوية: 12 ‎VHCDR3‏ المتوالية برقم هوية: 14 أو المتوالية برقم هوية: 48, ‎VLCDR1‏ المتوالية برقم هوية:
6 أو المتوالية برقم هوية: 50, ‎VLCDR2‏ المتوالية برقم هوية: 18 أو المتوالية برقم هوية: 52 و ‎VLCDR3‏ المتوالية برقم هوية: 20. جسم مضاد وفقاً للنموذج 14 حيث — السلسلة ‎VH‏ تتكون من السلسلة ‎VH‏ ذات المتوالية رقم: 2 أو للمتوالية برقم هوية: 6 أو 5 للمتوالية برقم هوية: 54 أ, تشتمل على متوالية المتوالية رقم: 22 أو للمتوالية برقم هوية: 36 أو
للمتوالية برقم هوية: 38 أو للمتوالية برقم هوية: 40؛ و — السلسة ‎VE‏ تتكون من السلسة ‎VL‏ ذات المتوالية رقم: 4 أو للمتوالية برقم هوية: 56 أو تشتمل على متوالية المتوالية رقم: 24 أو للمتوالية برقم هوية: 42 أو للمتوالية برقم هوية: 44 أو للمتوالية برقم هوية: 46
0 1 6 1 . جسم مضاد وفقاً لأي من للنماذ ‎z‏ السايقة حيث يكون عبارة عن جسم مضاد خيمري أو جسم مضاد متوافق مع البشر أو جسم مضاد تمت إزالة مناعته. 7 جسم مضاد وفقاً للنموذج 13 ‎Cun‏ يكون عبارة عن جسم مضاد متوافق مع البشر أو مزال عنه التحصين, حيث السلسلة الثقيلة بها المتوالية رقم: 52 و السلسلة الخفيفة بها المتوالية رقم: 54
5 18. جزيء ضخم حيث يكون ‎Ble‏ عن جزيء خيمري حيث تشتمل على جسم مضاد أو شظية رابطة لمولد ضد أو محاكي منه وفقاً لأي من النماذج السابقة, حيث الجسم المضاد المذكور يرتبط بجزيء مختلف وظيفياً. حيث يكون الجزيء الخيمري المذكور إما بروتين اندماج خيمري أو مترافق ناتج من اتصال تساهمي لمجموعة كيميائية أو جزيء, ‎Jin‏ بوليمر ‎PEG‏ أو جسم مضاد مرقم.
0 19. جزيء ضخم وفقاً لأي من النماذج السابقة, حيث يكون عبارة عن أفتين أو أنتيكالين. 0. جزيء ضخم, بشكل خاص جسم مضاد أو شظية ‎day‏ لمولد ضد أو محاكي منه, وفقاً لأي من النماذج السابقة حيث يربط 60127 بثابت انفصال أقل من ‎E-10MS‏ بصفة خاصة أقل من ‎E-10M1‏ بصفة خاصة أقل من ‎M5‏ 5-11.
1. جزيء ضخم, بشكل ‎ald‏ جسم مضاد أو شظية رابطة لمولد ضد أو محاكي منه, ‎Udy‏
لأي من النماذج السابقة حيث يتميز بنشاط سام للخلايا تجاه الخلايا موجبة 00127.
2. جزيء ضخم, بشكل خاص جسم مضاد أو شظية رابطة لمولد ضد أو محاكي منه, وفقاً
لأي من النماذج السابقة حيث لا يزيد من نضج الخلايا التغضنية المستحثة ب 1510, حيث يتم تقييم الزيادة في نضج الخلية التغضنية المستحثة ب 1510 بقياس التعبير المرتفع عن مرقم سطح
الخلية040© و / أو 6080 فى خلايا موجبة مستقبل ‎TSLP‏ معالجة ب ‎TSLP‏ وبالجزيء
الضخم المذكور مقارنة بالخلايا المعالجة ب 1510 مفرده.
3. جزيء ضخم, بشكل خاص جسم مضاد أو شظية رابطة لمولد ضد أو محاكي منه, وفقاً
للنموذج 22 حيث التعبير عن 01080 يرتفع بما لا يزيد عن 25 96, ويفضل لا يزيد عن 10 70,
0 في الخلايا موجبة مستقبل ‎TSLP‏ المعالجة ب 1510 و بالجزيء الضخم المذكور, مقارنة بالخلايا المعالجة ب ‎TSLP‏ بمفرده.
4. جزيء ضخم, بشكل خاص جسم مضاد أو شظية رابطة لمولد ضد أو محاكي منه, ‎Udy‏ ‏للنموذج 23 ‎Cua‏ التعبير عن 6080 لا يرتفع أو ينخفض في الخلايا موجبة مستقبل ‎TSLP‏ ‏المعالجة ب ‎TSLP‏ و بالجزيء الضخم المذكور, مقارنة بالخلايا المعالجة ب 1510 بمفرده.
5 25. جزيء ضخم, بشكل خاص جسم مضاد أو شظية رابطة لمولد ضد أو محاكي منه وفقاً للنموذج 22 حيث التعبير عن ‎CD40‏ يرتفع بما لا يزيد عن 50 96, ويفضل لا يزيد عن 25 70, في الخلايا موجبة مستقبل ‎TSLP‏ المعالجة ب ‎TSLP‏ و بالجزيء الضخم المذكور مقارنة بالخلايا المعالجة ب ‎TSLP‏ بمفرده.
6. جزيء ضخم, بشكل ‎(ald‏ جسم مضاد أو شظية رابطة لمولد ضد أو محاكي منه, ‎Udy‏
0 للنموذج 25 حيث التعبير عن ‎CD40‏ لا يرتفع أو ينخفض في الخلايا موجبة مستقبل ‎TSLP‏ ‏المعالجة ب ‎TSLP‏ و بالجزيء الضخم المذكور, مقارنة بالخلايا المعالجة ب 1510 بمفرده.
27 جزيء حمض نووي يشفر جسم مضاد أو شظية منه رابطة لمولد ضد, أو جزيء ضخم وفقاً لأي من النماذج السابقة.
8. جزيء حمض نووي وفقاً للنموذج 27حيث يشفر حمض أميني يتم اختياره من المجموعة تتكون من المتوالية برقم هوية: 2؛ المتوالية برقم هوية: 4؛ المتوالية برقم هوية: 6؛ المتوالية برقم هوية: 8؛ المتوالية برقم هوية: 10؛ المتوالية برقم هوية: 12؛ المتوالية برقم هوية: 14؛ المتوالية برقم هوية: 16؛ المتوالية برقم هوية: 18؛ المتوالية برقم هوية: 20؛ المتوالية برقم هوية: 22؛
المتوالية برقم هوية: 24؛ المتوالية برقم هوية: 36؛ المتوالية برقم هوية: 38؛ المتوالية برقم هوية: 0 المتوالية برقم هوية: 42؛ المتوالية برقم هوية: 44؛ المتوالية برقم هوية: 46؛ المتوالية برقم هوية: 48؛ المتوالية برقم هوية: 50؛ المتوالية برقم هوية: 52؛ المتوالية برقم هوية: 54 و المتوالية برقم هوية: 56.
9. جزيء حمض نووي ‎lig‏ للنموذج 28 حيث يتم اختياره من المجموعة تتكون من المتوالية 0 برقم هوية: 1؛ المتوالية برقم هوية: 3؛ المتوالية برقم هوية: 5؛ المتوالية برقم هوية: 7؛ المتوالية برقم هوية: 9؛ المتوالية برقم هوية: 11؛ المتوالية برقم هوية: 13؛ المتوالية برقم هوية: 15؛ المتوالية برقم هوية: 17؛ المتوالية برقم هوية: 19؛ المتوالية برقم هوية: 21؛ المتوالية برقم هوية: 3؛ ؛ المتوالية برقم هوية: 35؛ المتوالية برقم هوية: 37؛ المتوالية برقم هوية: 39؛ المتوالية برقم هوية: 41؛ المتوالية برقم هوية: 43؛ المتوالية برقم هوية: 45؛ المتوالية برقم هوية: 47؛ المتوالية 5 برقم هوية: 49؛ المتوالية برقم هوية: 51؛ المتوالية برقم هوية: 53 و المتوالية برقم هوية: 55. ‎Jib .0‏ لانتساخ و/ أو للتعبير عن بولي نيوكليوتيد وفقاً لأي من النماذج 27 إلى 29, بصفة خاصة بلازميدة, مناسبة للانتساخ و/ أو التعبير في خلايا الثدييات. 1- خلية أو سلالة خلية معاد دمجها مع بولي تيوكليوتيد وفقاً لأي من النماذج 27 إلى 30, بصفة خاصة خلية أو سلالة خلايا كائن ثدي. 0 32. تركيبة صيدلانية حيث تشتمل على جزيء ضخم, بشكل خاص جسم مضاد أو شظية رابطة لمولد ضد أو محاكي منه, وفقاً لأي من النماذج 1 إلى 26, مع ناقل صيدلاني, حيث تشتمل التركيبة الصيدلانية المذكورة اختيارياً على مكون فعال ‎HAT‏ مختلف. 3. تركيبة صيدلانية حيث تشتمل على كمكون فعال ‎Ladle‏ جزيء ضخم, بشكل خاص جسم مضاد أو شظية رابطة لمولد ضد أو محاكي منه, وفقاً لأي من النماذج 1 إلى 26 أو تركيبة
صيدلانية وفقاً للنموذج 32 في صيغة مناسبة للتحكم في تمايز/ نضج الخلية التغضنية عند إعطاءها إلى مريض بشري. 4. تركيبة صيدلانية وفقاً لنماذج 32 أو 33, حيث تشتمل كذلك على مركب إضافي ذي تأثير علاجي معدل للمناعة الذاتية بشكل خاص على الخلايا التي تدخل في مرض مناعة ذاتية أو مرض تحساسي, لوكيميا مثل لوكيميا الأرومات الليفية الحادة, ورم ليمفاوي, مرض سرطاني, عدوى فيروسية مزمنة, أمراض التهابية, زرع, أمراض الجهاز التنفسي أو المناعة الذاتية. 5. جزيء ضخم, بشكل خاص جسم مضاد أو شظية رابطة لمولد ضد أو محاكي ‎die‏ وفقاً لأي من النماذج 1 إلى 26 أو حمض نووي وفقاً لأي من النماذج 27 إلى 30 أو خلية أو سلالة خلايا وفقاً للنموذج 31 لاستخدامه كمكون فعال علاجياً في توليفة أو في نظام علاجي إضافي 0 الدى مريض بحاجة ‎Ad)‏ ‏6. جزيء ضخم, بشكل خاص جسم مضاد أو شظية رابطة لمولد ضد أو محاكي ‎die‏ وفقاً لأي من النماذج 1 إلى 26 أو ‎aan‏ نووي وفقاً لأي من النماذج 27 إلى 30 أو خلية أو سلالة علاج مربض, بشكل خاص ‎pane‏ بشري, مصاب بمرض. 5 37. جزيء ضخم, بشكل خاص جسم مضاد أو شظية رابطة لمولد ضد أو محاكي منه وفقاً لأي من النماذج 1 إلى 26 أو حمض نووي وفقاً لأي من النماذج 27 إلى 30 أو خلية أو سلالة علاج مريض, بشكل خاص مريض بشري, معرض لخطر الإصابة بمرض. 8. جزيء ضخم, حمض نووي» خلية؛ سلالات خلايا أو تركيبة صيدلانية لاستخدامه وفقاً 0 للنموذج 36 و / أو النموذج 37, حيث يكون المرض هو مرض مناعة ذاتية, بشكل خاص التهاب المفاصل الروماتويدي, التصلب المتعدد, مرض السكر من النوع 1, التهاب الغدة الدرقية المتعلق بالمناعة الذاتية و الذئبة.
9. جزيء ضخم, حمض نووي؛ خلية؛ سلالات خلايا أو تركيبة صيدلانية لاستخدامه وفقاً للنموذج 36 و / أو النموذج 37, حيث يكون المرض هو أحد الأمراض الالتهابية, بشكل خاص ‎IBD‏ 4 التهاب الدماغ والنخاع. 0. جزيء ضخم, حمض نووي؛ خلية؛ سلالات خلايا أو تركيبة صيدلانية لاستخدامه وفقاً للنموذج 36 و / أو النموذج 37, حيث يكون المرض هو مرض تحساسي. 1. جزيء ضخم, حمض ‎(Gosh‏ خلية؛ سلالات خلايا أو تركيبة صيدلانية لاستخدامه وفقاً للنموذج 36 و / أو النموذج 37, حيث يكون المرض هو مرض سرطاني. 2. جزيء ضخم, حمض ‎(Gosh‏ خلية؛ سلالات خلايا أو تركيبة صيدلانية لاستخدامه وفقاً للنموذج 36 و / أو النموذج 37, حيث يكون المرض هو أحد أمراض الجهاز التنفسي. 0 43. جزيء ضخم, حمض نووي» خلية؛ سلالات خلايا أو تركيبة صيدلانية لاستخدامه وفقاً للنموذج 36 و / أو النموذج 37, حيث يكون المرض مرتبطاً ب, بشكل خاص نتيجة ل, زرع. 44 . طريقة علاج حيث تشتمل على إعطاء جزيء ضخم , ‎Jeu‏ خاص جسم مضاد أو شظية رابطة ‎Ala Al gal‏ أو محاكي منه وفقاً لأي من النماذ ‎z‏ 1 إلى 26 أو حمض نووي وفقاً لأي من النماذ ‎d‏ 27 إلى 30 أو خلية أو سلالة خلايا وفقاً للنموذ ‎d‏ 31 أو تركيبة صيد لانية وفقاً أنماذ ‎z‏ ‏5 32 إلى 34 في مريض مصاب أو معرض للإصابة بمرض. 5. طريقة علاج وفقاً للنموذج 44, حيث يكون المرض هو مرض مناعة ذاتية, بشكل خاص التهاب المفاصل الروماتوبدي, التصلب المتعدد, مرض السكر من النوع 1, التهاب الغدة الدرقية المتعلق بالمناعة الذاتية و الذئبة. 6. طريقة علاج وفقاً للنموذج 44, حيث يكون المرض هو أحد الأمراض الالتهابية, بشكل 0 خاص ‎IBD‏ التهاب الدماغ والنخاع. 7. طريقة علاج وفقاً للنموذج 44, حيث يكون المرض هو مرض تحساسي. 8. طريقة علاج وفقاً للنموذج 44, حيث يكون المرض هو مرض سرطاني.
9. طريقة علاج وفقاً للنموذج 44, حيث يكون المرض هو أحد أمراض الجهاز التنفسي. 0. طريقة علاج وفقاً للنموذج 44, حيث يكون المرض مرتبطاً ب, بشكل خاص نتيجة ل, زرع. 1 5 . جزيء ضخم , بشكل خاص جسم مضاد أو شظية رابطة لمولد ضد أو محاكي منه وفقاً لأي من النماذج 1 إلى 26 أو ‎aan‏ نووي وفقاً لأي من النماذج 27 إلى 30 أو خلية أو سلالة علاج مريض, بشكل خاص مربض بشري, بحاجة إلى زرع و / أو على وشك الزرع و/ أو لمريض قد قام بالزرع. 52 . طريقة علاج حيث تشتمل على إعطاء جزيء ضخم , ‎Jeu‏ خاص جسم مضاد أو شظية رابطة ‎Ala Al gal‏ أو محاكي منه وفقاً لأي من النماذ ‎z‏ 1 إلى 26 أو حمض نووي وفقاً لأي من
0 1 النماذ ‎d‏ 27 إلى 30 أو خلية أو سلالة خلايا وفقاً للنموذ ‎d‏ 31 أو تركيبة صيد لانية وفقاً أنماذ ‎z‏ ‏2 إلى 34 لدى مريض بحاجة إلى زرع و / أو على وشك الزرع و/ أو لمريض قد قام بالزرع. ‎Age .3‏ ضد حيث القمة اللاصقة تشتمل على أو تتكون من متواليات من الموضع 02 ل 7, بشكل خاص حيث تشتمل على على الأقل 3, 4, 5, 6 أو 7 أحماض أمينية ‎lise‏ ‏من الموضع 02ل 00127.
‎Age .54 5‏ ضد وفقاً للنموذج 53, حيث القمة اللاصقة تشتمل على أو تتكون من متواليات من الموضع تتكون من الأحماض الأمينية 109 إلى 127 للمتوالية برقم هوية: 114, بشكل خاص من الموضع تتكون من الأحماض الأمينية 110 إلى 125, 112 إلى 125, 112 إلى 120, بشكل خاص حيث تشتمل على على الأقل 3, 4, 5, 6 أو 7 أحماض أمينية متتالية من الموضع المذكور.
‎alge .55 0‏ ضد وفقاً لأي من النماذج 53 أو 54, حيث القمة اللاصقة تشتمل على على الأقل 3 , ,, أو 7 أحماض أمينية متتالية ل ‎,CD127‏ المذكور أحماض أمينية متتالية ‎Gua‏ ‏تشتمل على 0112 و/ أو ‎L115‏
‎Ase .6‏ ضد وفقاً لأي من النماذج53 إلى 55, حيث القمة اللاصقة تتكون من أو تشتمل
‏على متوالية المتوالية رقم: 116, بشكل خاص تشتمل على متوالية المتوالية رقم: 86.
‎Age .7‏ ضد وفقاً لأي من النماذج 53 إلى 56, حيث القمة اللاصقة أيضاً تشتمل على
‏متواليات, بشكل خاص على الأقل 3, 4, 5, 6 أو 7 أحماض أمينية متتالية, من النطاق 01 ل
‏5 00127, بشكل خاص من الأحماض الأمينية 98-1 للمتوالية برقم هوية: 114.
‎alse .8‏ ضد وفقاً للنموذج 57, حيث القمة اللاصقة تشتمل على متوالية 60127 البشري
‏حيث تشتمل على أو تتكون من متوالية المتوالية رقم: 115, بشكل خاص حيث تشتمل على أو
‏تتكون من المتوالية برقم هوية: 110
‏9. . مولد ضد وفقاً لأي من النماذج 53 إلى 58, حيث القمة اللاصقة أيضاً تشتمل على 10 متواليات, بشكل خاص على الأقل 3, 4, 5, 6 أو 7 أحماض أمينية متتالية, من الأحماض
‏الأمينية 220-180 للمتوالية برقم هوية: 114, بشكل خاص حيث المتواليات المذكورة من
‏الأحماض الأمينية 220-180 للمتوالية برقم هوية: 114 تتكون من أو تشتمل على متوالية
‏المتوالية رقم: 117, بشكل خاص تشتمل على أو تتكون من المتوالية برقم هوية: 111.
‎Ase .60‏ ضد وفقاً لأي من النماذج53 إلى 59, حيث القمة اللاصقة تتكون من أو تشتمل على المتواليات ل 010127 البشري تتكون من:
‏متوالية المتوالية رقم: 110 أو متوالية المتوالية رقم: 115؛
‏متوالية للمتوالية برقم هوية: 111 أو متوالية المتوالية رقم: 117؛ و
‏متوالية المتوالية رقم: 86 أو متوالية المتوالية رقم: 116.
‎Ase .1‏ ضد وفقاً لأي من النماذج 53 إلى 60, حيث لا تشتمل القمة اللاصقة على أكثر من 0 3, 4 أو 5 أحماض أمينية متتالية من متوالية الأحماض الأمينية 108-99 للمتوالية برقم هوية:
‏4 ور/ أو لا تشتمل على أكثر من 3, 4 أو 5 أحماض أمينية متتالية من متوالية الأحماض
‏الأمينية 179-128 للمتوالية برقم هوية: 114, و/ أو لا تشتمل على أكثر من 3, 4 أو 5
‏أحماض أمينية متتالية من متوالية الأحماض الأمينية 239-220 للمتوالية برقم هوية: 114,
بشكل خاص لا تشتمل على أكثر من 3, 4 أو 5 أحماض أمينية متتالية من أي من المذكور متواليات الحمض الأميني للمتوالية برقم هوية: 114. 2. مولد ضد وفقاً لأي من النماذج 53 أو 60, حيث متوالية القمة اللاصقة ل 60127 البشري تشتمل على المتوالية برقم هوية: 110 لا تمتد لتشمل الاحماض الأمينية المجاورة للمتوالية
المذكورة في متوالية 00127 البشري بأكثر من حمض أميني طرفي لا أو بأكثر من 7 أحماض
أمينية طرفية ©. ‎ .3‏ مولد ضد وفقاً للنموذج 61, حيث متوالية القمة اللاصقة ل 00127 البشري تشتمل على المتوالية برقم هوية: 110 لا تمتد لتشمل أي من طرفية لا و/ أو أحماض أمينية طرفية © المجاورة للمتوالية المذكورة فى متوالية 601727 البشري.
‎alse .64 0‏ ضد ‎Wy‏ لأي من النماذج 53 إلى 63, حيث متوالية القمة اللاصقة ل 00127 البشري تشتمل على المتوالية برقم هوية: 111 لا تمتد لتشمل الاحماض الأمينية المجاورة للمتوالية المذكورة في متوالية 00127 البشري بأكثر من 30 حمض أميني طرفي لا أو بأكثر من 30 حمضاً من أحماض أمينية طرفية ©.
‏5. مولد ضد وفقاً للنموذج 64, حيث متوالية القمة اللاصقة ل 00127 البشري تشتمل على
‏5 المتوالية برقم هوية: 111 لا تمتد لتشمل أي من طرفية لا و/ أو أحماض أمينية طرفية © المجاورة للمتوالية المذكورة فى متوالية 001727 البشري.
‏66. مولد ضد وفقاً لأي من النماذج 53 إلى 65, حيث تتكون القمة اللاصقة هي قمة لاصقة بنيوية, حيث بشكل خاص تكون ببتيدات 010127 من القمة اللاصقة المذكورة في بنية (شكل) تحاكي بنية الببتيدات المناظرة في 00127 الأصلي أو نطاقه خارج الخلية, بشكل خاص في
‏0 00127 في صورته المونومرية دون جزيء ربط, و/ أو في صورتها المرتبطة ب ©7 و/ أو في صورتها المرتبطة = ‎٠ IL7‏ 7. ._ مولد ضد وفقاً للنموذج 66, حيث تكون القمة اللاصقة هي قمة لاصقة بنيوية, حيث الببتيدات من 60127 ترتبط بسلسلة جزيئية رئيسية صلبة تحافظ عليها فى الشكل المطلوب,
8. قمة لاصقة كما تم تعريفه في أي من النماذج 53 إلى 67. 9. حمض نووي يشفر ‎alge‏ ضد كما تم تعريفه في أي من النماذج 53 إلى 67. كما تم تعريفه في أي من النماذج 53 إلى 67.
71. طريقة لاختيار جسم مضاد, شظية جسم مضاد أو محاكي جسم مضاد, بشكل خاص جسم مضاد يتم الحصول عليه كما في النموذج 70 أو شظية محاكي منه, حيث تشتمل على خطوة اختبار قدرة ارتباط الجسم المضاد المذكور بمولد ضد واحد على الأقل كما تم تعريفه في أي من النماذج 53 إلى 67, بشكل خاص حيث تشتمل الطريقة المذكورة على العديد من الخطوات المتتالية؛ حيث تختبر كل خطوة قدرة الارتابط بقمة لاصقة منفصلة تتكون من متوالية واحدة
0 متجاورة ل ‎.CD127‏ ‏12 طريقة لاختيار جزيء ضخم , بشكل خاص جسم مضاد , بشكل خاص جسم مضاد يتم الحصول عليه كما في النموذج 70, أو شظية رابطة لمولد ضد أو محاكي من ذلك الجسم المضاد, حيث تشتمل على أو تتكون من خطوة اختبار قدرة الجزيء الضخم على الارتباط ب 7م, بشكل خاص بمولد ضد له كما تم تعريفه في أي من النماذج 53 إلى 67 و اختيارياً
5 اختيار الجزيئات الضخمة وفقاً للنموذج 20. ‎dah 3‏ لاختيار جزيء ضخم وفقاً لأي من النماذج71 أو 72, حيث يشتمل مولد الضد على العديد من الببتيدات غير المتجاورة ل 60127 و حيث تشتمل الطريقة على عدة خطوات؛ وتتتون كل ‎shad‏ من اختبار قدرة الجزيء الضخم على الارتباط ب إحدى الببتيدات المذكورة ل ‎.CD127‏
74. طريقة, بشكل خاص وفقاً لأي من النماذج71 إلى 73, لاختيار جزيء ضخم, بشكل خاص جسم مضاد , يبشكل خاص جسم مضاد يتم الحصول عليه كما في النموذ ‎z‏ 70 , أو شظية رابطة لمولد ضد أو محاكي من ذلك الجسم المضاد, حيث تشتمل على أو تتكون من خطوة اختبار المعالجة الداخلية ل60127 في الخلايا المعبرة عن 00127 المستحثة بوجود الجزيء الضخم.
5. طريقة, بشكل خاص وفقاً لأي من النماذج 71 إلى 14, لاختيار جزيء ضخم, بشكل خاص جسم مضاد , يبشكل خاص جسم مضاد يتم الحصول عليه كما في النموذ ‎z‏ 70 , أو شظية رابطة لمولد ضد أو محاكي من ذلك الجسم المضاد, حيث تشتمل على أو تتكون من خطوة اختبار التثبيط عن طريق الجزيء الضخم للمعالجة الداخلية ل 00127 المستحثة ب7اا في الخلايا المعبرة عن 00127 و اختيارياً اختيار الجزيئات الضخمة وفقاً للنموذج 3.
6. طريقة, بشكل خاص وفقاً لأي من النماذج 71 إلى 75, لاختيار جزيء ضخم, بشكل خاص جسم مضاد , يبشكل خاص جسم مضاد يتم الحصول عليه كما في النموذ ‎z‏ 70 , أو شظية رابطة لمولد ضد أو محاكي من ذلك الجسم المضاد, حيث تشتمل على أو تتكون من خطوة قياس قدرة الجزيء الضخم المذكور لتعطيل, عن طريق ارتباطه ب ‎,CD127‏ ارتباط 00127 إلى
0 السلسلة علا. 7. طريقة, بشكل خاص وفقاً لأي من النماذج 71 إلى 76, لاختيار جزيء ضخم, بشكل خاص جسم مضاد , يبشكل خاص جسم مضاد يتم الحصول عليه كما في النموذ ‎z‏ 70 , أو شظية رابطة لمولد ضد أو محاكي من ذلك الجسم المضاد, حيث تشتمل على أو تتكون من خطوة اختبار زيادة نضج ‎DCs‏ المستحثة ب ‎TSLP‏ في وجود الجزيء الضخم و اختيارياً اختيار الجزيئات
5 الضخمة وفقاً لأي من النماذج 22 إلى 26. 8 طريقة وفقاً لأي من النماذج 71إلى 77, تشتمل كذلك على واحدة أو أكثر من الخطوات التالية: 0 اختبار التثبيط عن طريق الجزيء الضخم لإرسال الإشارات المستحث ب 7-ا, بشكل خاص فسفرة ‎(STATS‏
‎oo 0‏ اختبار التثبيط عن طريق الجزيء الضخم لإنتاج ‎TARC‏ المستحث ب ا15؛ ج. - اختبار التثبيط عن طريق الجزيء الضخم للتعبير عن ‎BT‏ ,04 و/ أو 04/07 التعبير عن ‎f‏ لإنتجرين , ‎Ie‏ خاص تعبير سطح الخلية على الخلايا ‎T‏ الليمفاوية . المراجع
Adams, A.B., Pearson, T.C., and Larsen, C.P. (2003). Heterologous immunity: an overlooked barrier to tolerance. Immunol. Rev. 196, 147- 160.
Albuquerque, A.S., 60116580, C.S., Foxall, R.B., Soares, R.S., Victorino,
R.M.M., and Sousa, A.E. (2007). Rate of increase in circulating IL-7 and 5 loss of IL-7Ralpha expression differ in HIV-1 and HIV-2 infections: two lymphopenic diseases with similar hyperimmune activation but distinct outcomes. J. Immunol. Baltim. Md 1950 178, 3252-3259.
Baca, M., Presta, L.G., O’Connor, S.J., and Wells, J.A. (1997). Antibody humanization using monovalent phage display. J. Biol. Chem. 272, 10 10678-10684.
Van Bodegom, D., Zhong, J., Kopp, N., Dutta, C., Kim, M.-S., Bird, L.,
Weigert, O., Tyner, J., Pandey, A., Yoda, A., et al. (2012). Differences in signaling through the B-cell leukemia oncoprotein CRLF2 in response to
TSLP and through mutant JAK2. Blood 120, 2853-2863. 15
Boshuizen, R.S., Marsden, C., Turkstra, J., Rossant, C.J., Slootstra, J.,
Copley, C., and Schwamborn, K. (2014). A combination of in vitro techniques for efficient discovery of functional monoclonal antibodies against human CXC chemokine receptor-2 (CXCR2). mAbs 6, 1415- 1424. 0
Bour-Jordan, H., Esensten, J.H., Martinez-Llordella, M., Penaranda, C.,
Stumpf, M., and Bluestone, J.A. (201 1). Intrinsic and extrinsic control of peripheral T—cell tolerance by costimulatory molecules of the CD28/B7 family. Immunol. Rev. 241, 180-205.
Broux, B., Hellings, N., Venken, K., Rummens, J.-L., Hensen, K., Van
Wijmeersch, B., and Stinissen, P. (2010). Haplotype 4 of the multiple sclerosis—associated interleukin—7 receptor alpha gene influences the frequency of recent thymic emigrants. Genes Immun. 11, 326-333.
Chassoux, D.M., Linares—Cruz, ‏...ا‎ Bazin, H., and Stanislawski, M. 5 (1988). K-cell-mediated cytotoxicity induced with rat monoclonal antibodies. ٠١ Antibodies of various isotypes differ in their ability to induce cytotoxicity mediated by rat and human effectors. Immunology 65, 623— 628.
Chothia, C., and Lesk, A.M. (1987). Canonical structures for the 10 hypervariable regions of immunoglobulins. J. Mol. Biol. 196, 901-917.
Deininger, P. (1990). Molecular cloning: A laboratory manual: 2nd ed.
Edited by J. Sambrook, E. F. Fritsch, and T. Maniatis. Cold Spring
Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, 1989 (in 3 volumes).
Anal. Biochem. 186, 182-183. 15
Delves, P.J., Martin, S.J., Burton, D.R., and Roitt, ٠.١٠ (201 1). Roitt’s
Essential Immunology (John Wiley & Sons).
Denucci, C.C., Mitchell, J.S., and Shimizu, Y. (2009). Integrin function in
T-cell homing to lymphoid and nonlymphoid sites: getting there and staying there. Crit. Rev. Immunol. 29, 87-109. 20
Dustin, M.L., and Shaw, A.S. (1999). Costimulation: building an immunological synapse. Science 283, 649-650.
Edward G. Routledge, 5.0.5. (1993). Reshaping antibodies for therapy. 13-44.
Flavell, D.J., Warnes, S.L., Bryson, C.J., Field, S.A., Noss, A.L.,
Packham, G., and Flavell, S.U. (2006). The 300-0601020 antibody rituximab augments the immunospecific therapeutic effectiveness of an anti-CD19 5 immunotoxin directed against human B-cell lymphoma. Br. J. Haematol. 134, 157-170.
Gaseitsiwe, S., Valentini, D., Mahdavifar, S., Reilly, M., Ehrnst, A., and
Maeurer, M. (2010). Peptide microarray-based identification of
Mycobacterium tuberculosis epitope binding to HLA-DRB1*0101, 10
DRB1#*1501, and DRB1#*0401. Clin. Vaccine Immunol. CVI 17, 168-175.
Gorfu, G., Rivera—Nieves, J., and Ley, ‏ا‎ (2009). Role of beta7 integrins in intestinal lymphocyte homing and retention. Curr. Mol. Med. 9, 836— 850.
Grakoui, A., Bromley, S.K., Sumen, C., Davis, M.M., Shaw, A.S., Allen, 15
P.M., and Dustin, M.L. (1999). The immunological synapse: a molecular machine controlling T cell activation. Science 285, 221-227.
Haas, J., Korporal, M., Schwarz, A., Balint, B., and Wildemann, B. (2011). The interleukin—7 receptor ‏نه‎ chain contributes to altered homeostasis of regulatory 1 cells in multiple sclerosis. Eur. J. Immunol. 20 41, 845-853.
Haudebourg, T., Poirier, N., and Vanhove, B. (2009). Depleting T-cell subpopulations in organ transplantation. Transpl. Int. Off. J. Eur. Soc.
Organ Transplant. 22, 509-518.
He, R., and Geha, R.S. (2010). Thymic stromal lymphopoietin. Ann. N.
Y. Acad. Sci. 1183, 13-24.
Henriques, C.M., Rino, J., Nibbs, R.J., Graham, G.J., and Barata, J.T. (2010). IL=7 induces rapid clathrin-mediated internalization and JAK3- dependent degradation of IL-7Ralpha in T cells. Blood 115, 3269-3277. 5
Von Horsten, H.H., Ogorek, C., Blanchard, V., Demmler, C., Giese, C.,
Winkler, K., Kaup, M., Berger, M., Jordan, I., and Sandig, V. (2010).
Production of non—fucosylated antibodies by co-expression of heterologous GDP-6-deoxy—-D-lyxo—4-hexulose reductase. Glycobiology 20, 1607-1618. 10
Inaba, K., Inaba, M., Witmer—Pack, M., Hatchcock, K., Hodes, R., and
Steinman, R.M. (1995). Expression of B7 costimulator molecules on mouse dendritic cells. Adv. Exp. Med. Biol. 378, 65-70.
Jariwala, S.P., Abrams, E., Benson, A., Fodeman, J., and Zheng, T. (2011). The role of thymic stromal lymphopoietin in the 5 immunopathogenesis of atopic dermatitis. Clin. Exp. Allergy J. Br. Soc.
Allergy Clin. Immunol. 41, 1515-1520.
Kabat, E.A., Wu, T.T., Reid-Miller, M., Perry, H.M. and Gottesman, K.S. (1992) Sequences of Proteins of Immunological Interest (DIANE publishing, 1992). 0
Kern, B., Kraynov, E., Lee, L.-F., Ray, R. (2013). Receptor occupancy and internalization of an anti—IL-7 receptor antibody. Cytokine 63, 276- 2717.
Kern, B., Li, W., Bono, C., Lee, L.-F., and Kraynov, E. (2015). Receptor occupancy and blocking of STATS signaling by an anti—-IL-7 receptor o antibody in cynomolgus monkeys. Cytometry B Clin. Cytom.
Krehenbrink, M., Chami, M., Guilvout, ٠٠, Alzari, P.M.,Pécorari F., Pugsley
A.P. (2008). Artificial binding proteins (Affitins) as probes for 5 conformational changes in secretin PulD. J Mol Biol. 2008 Nov 28.
Lefranc, M.-P., Giudicelli, V., Ginestoux, C., Bodmer, J., Muller, W.,
Bontrop, R., Lemaitre, M., Malik, A., Barbié, V., and Chaume, D. (1999).
IMGT, the international InMMunoGeneTics database. Nucleic Acids Res. 27, 209-212. 10
Lei, L., Zhang, Y., Yao, W., Kaplan, M.H., and Zhou, B. (201 1). Thymic
Stromal Lymphopoietin Interferes with Airway Tolerance by Suppressing the Generation of Antigen—Specific Regulatory T Cells. J. Immunol. 186, 2254-2261.
Luo, H., Wu, Z., Qi, S., Jin, W., Han, B., Wu, J. (2011). Ephrinb]l and 5
Ephrinb2 are associated with interleukin—7 receptor ‏ين‎ and retard its internalization from the cell surface. J Biol Chem. 2011 Dec 30;286(52):44976-817.
Martin, A.C.R. (2001). Protein Sequence and Structure Analysis of
Antibody Variable Domains. In Antibody Engineering, D.R. Kontermann, 20 and D.S. Diibel, eds. (Springer Berlin Heidelberg), pp. 422-439.
Mazzucchelli, R., Hixon, J.A., Spolski, R., Chen, X., Li, W.Q., Hall, V.L.,
Willette—Brown, J., Hurwitz, A.A., Leonard, W.J., and Durum, S.K.
(2008). Development of regulatory 1 cells requires IL-7Ralpha stimulation by IL-7 or TSLP. Blood 112, 3283-3292.
McElroy, C.A., Dohm, J.A., and Walsh, S.T.R. (2009). Structural and biophysical studies of the human IL-7/IL-7Ralpha complex. Struct. Lond.
Engl. 1993 17, 54-65. 5
McElroy, C.A., Holland, P.J., Zhao, P., Lim, J.-M., Wells, ‏,ما‎ Eisenstein,
E., and Walsh, S.T.R. (2012). Structural reorganization of the interleukin— 7 signaling complex. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 109, 2503-2508
Michel, L., Berthelot, L., Pettré, S., Wiertlewski, S., Lefrére, F., Braudeau,
C., Brouard, S., Saulillou, J.-P., and Laplaud, D.-A. (2008). Patients 10 with relapsing-remitting multiple sclerosis have normal Treg function when cells expressing IL-7 receptor alpha—chain are excluded from the analysis. J. Clin. Invest. 118, 3411-3419.
Nancey, S., Hamzaoui, N., Moussata, D., Graber, ٠٠, Bienvenu, J., and
Flourie, B. (2008). Serum interleukin—6, soluble interleukin—-6 receptor 15 and Crohn’s disease activity. Dig. Dis. Sci. 53, 242-247.
Niederfellner, G., Lammens, A., Mundigl, O., Georges, G.J., Schaefer,
W., Schwaiger, M., Franke, A., Wiechmann, K., Jenewein, S., Slootstra,
J.W., et al. (2011). Epitope characterization and crystal structure of
GA101 provide insights into the molecular basis for type I/II distinction of 0
CD20 antibodies. Blood 118, 358-367.
Olivier, S., Jacoby, M., Brillon, C., Bouletreau, S., Mollet, T., Nerriere, O.,
Angel, A., Danet, S., Souttou, B., Guehenneux, F., et al. (2010). EB66 cell line, a duck embryonic stem cell-derived substrate for the industrial production of therapeutic monoclonal antibodies with enhanced ADCC activity. mAbs 2, 405-415.
Olkhanud, P.B., Rochman, Y., Bodogai, M., Malchinkhuu, E., Wejksza,
K., Xu, M., Gress, R.E., Hesdorffer, C., Leonard, W.J., and Biragyn, A. (2011). Thymic stromal lymphopoietin is a key mediator of breast cancer 5 progression. J. Immunol. Baltim. Md 1950 186, 5656-5662.
Van Oosterhout, Y.V., van Emst, J.L., Bakker, H.H., Preijers, F.W.,
Schattenberg, A.V., Ruiter, D.J., Evers, S., Koopman, J.P., and de Witte,
T. (2001). Production of anti-CD3 and anti-CD7 ricin A-immunotoxins for a clinical pilot study. Int. J. Pharm. 221, 175-186. 10
Papac, D.l., Hoyes, J., and Tomer, K.B. (1994). Epitope mapping of the gastrin—releasing peptide/anti-bombesin monoclonal antibody complex by proteolysis followed by matrix-assisted laser desorption ionization mass spectrometry. Protein Sci. 3, 1485-1492.
Park, L.S., Martin, U., Garka, K., Gliniak, B., Di Santo, J.P., Muller, W., 15
Largaespada, D.A., Copeland, N.G., Jenkins, N.A., Farr, A.G., et al. (2000). Cloning of the murine thymic stromal lymphopoietin (TSLP) receptor: Formation of a functional heteromeric complex requires interleukin 7 receptor. J. Exp. Med. 192, 659-670.
Paus, D., and Winter, G. (2006). Mapping epitopes and antigenicity ‏لاط‎ 20 site-directed masking. Proc. Natl. Acad. Sci. ‏.نا‎ S. A. 103, 9172-9177.
Poirier, N., Haudebourg, T., Brignone, C., Dilek, N., Hervouet, J., Minault,
D., Coulon, F., de Silly, R.V., Triebel, F., Blancho, G., et al. (201 1).
Antibody-mediated depletion of lymphocyte-activation gene-3 (LAG-3(+)
(-30017/8160 T lymphocytes prevents delayed-type hypersensitivity in 000- human primates. Clin. Exp. Immunol. 164, 265-274.
Racapé, M., Vanhove, B., Soulillou, J.-P., and Brouard, S. (2009).
Interleukin 7 receptor alpha as a potential therapeutic target in transplantation. Arch. Immunol. Ther. Exp. (Warsz.) 57, 253-261. 5
Rader, C., Cheresh, ‏...نا‎ and Barbas, C.F. (1998). A phage display approach for rapid antibody humanization: designed combinatorial V gene libraries. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 95, 8910-8915.
Reche, P.A., Soumelis, V., Gorman, D.M., Clifford, T., Liu Mr, null,
Travis, M., Zurawski, S.M., Johnston, J., Liu, Y.J., Spits, H., etal. 10 (2001). Human thymic stromal lymphopoietin preferentially stimulates myeloid cells. J. Immunol. Baltim. Md 1950 167, 336-343.
Risberg, K., Fodstad, &., and Andersson, Y. (2011). Synergistic anticancer effects of the 9.2.27PE immunotoxin and ABT-737 in melanoma. PloS One 6, 24012. 15
Roan, F., Bell, B.D., Stoklasek, T.A., Kitajima, M., Han, H., and Ziegler,
S.F. (2012). The multiple facets of thymic stromal lymphopoietin (TSLP) during allergic inflammation and beyond. J. Leukoc. Biol. 91, 877-886.
Rochman, Y., Kashyap, M., Robinson, G.W., Sakamoto, K., Gomez-
Rodriguez, J., Wagner, K.-U., and Leonard, W.J. (2010). Thymic stromal 20 lymphopoietin—-mediated STATS phosphorylation via kinases JAK] and
JAK? reveals a key difference from IL-7-induced signaling. Proc. Natl.
Acad. Sci. ‏.لا‎ 5. A. 107, 19455-19460.
Rosok, M.J., Yelton, D.E., Harris, L.J., Bajorath, J., Hellstrom, K.E.,
Hellstrom, I., Cruz, G.A., Kristensson, ‏كا‎ Lin, H., Huse, W.D., et al. (1996). A combinatorial library strategy for the rapid humanization of anticarcinoma BR96 Fab. J. Biol. Chem. 271, 22611-22618.
Schlehuber, S., Skerra, A. (2002). Tuning ligand affinity, specificity, and 5 folding stability of an engineered lipocalin variant —— a so-called 'anticalin’ -- using a molecular random approach. Biophys Chem. 2002 May 2;96(2-3):213-28
Shaw, A.S., and Dustin, M.L. (1997). Making the T cell receptor go the distance: a topological view of T cell activation. Immunity 6, 361-369. 10
Shinohara, T., Nemoto, Y., Kanai, T., Kameyama, K., Okamoto, R.,
Tsuchiya, K., Nakamura, T., Totsuka, T., Ikuta, K., and Watanabe, M. (2011). Upregulated IL-7 receptor ‏نه‎ expression on colitogenic memory
CD4+ T cells may participate in the development and persistence of chronic colitis. J. Immunol. Baltim. Md 1950 186, 2623-2632. 15
Shochat, C., Tal, N., Bandapalli, O.R., Palmi, C., Ganmore, ٠٠, te Kronnie,
G., Cario, G., Cazzaniga, G., Kulozik, A.E., Stanulla, M., et al. (201 1).
Gain—-of-function mutations in interleukin—7 receptor-a (IL7R) in childhood acute lymphoblastic leukemias. J. Exp. Med. 208, 901-908.
Skerra, A. (2008). Alternative binding proteins: anticalins - harnessing the 0 structural plasticity of the lipocalin ligand pocket to engineer novel binding activities. FEBS J. 2008 Jun;275(11):2677-83. doi: 10.1111/j.1742~ 4658.2008.06439.x. Epub 2008 Apr 24.
Suckau, D., Kohl, J., Karwath, G., Schneider, K., Casaretto, M., Bitter—
Suermann, D., and Przybylski, M. (1990). Molecular epitope identification by limited proteolysis of an immobilized antigen-antibody complex and mass spectrometric peptide mapping. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 87, 9848-9852 5
Taylor, B.C., Zaph, C., Troy, A.E., Du, Y., Guild, K.J., Comeau, M.R., and Artis, D. (2009). TSLP regulates intestinal immunity and inflammation in mouse models of helminth infection and colitis. J. Exp. Med. 206, 655— 667.
Teeling, J.L., Mackus, W.J.M., Wiegman, L.J.J.M., van den Brakel, 10
J.H.N., Beers, S.A., French, R.R., van Meerten, T., Ebeling, S., Vink, T.,
Slootstra, J.W., et al. (2006). The biological activity of human CD20 monoclonal antibodies is linked to unique epitopes on CD20. J. Immunol.
Baltim. Md 1950 177, 362-371.
Timmerman, P., Puijk, W.C., and Meloen, R.H. (2007). Functional 5 reconstruction and synthetic mimicry of a conformational epitope using
CLIPS technology. J. Mol. Recognit. JMR 20, 283-299.
Walsh, S.T.R. (2012). Structural insights into the common y—chain family of cytokines and receptors from the interleukin—7 pathway. Immunol. Rev. 250, 303-316. 20
Watanabe, N., Wang, Y.-H., Lee, H.K., Ito, T., Wang, Y.-H., Cao, W., and Liu, Y.-J. (20054). Hassall’s corpuscles instruct dendritic cells to induce CD4+CD25+ regulatory 1 cells in human thymus. Nature 436, 1181-1185.
Watanabe, N., Hanabuchi, S., Marloie-Provost, M.—A., Antonenko, S.,
Liu, Y.-J., and Soumelis, V. (2005b). Human TSLP promotes CD40 ligand-induced IL-12 production by myeloid dendritic cells but maintains their Th2 priming potential. Blood 105, 4749-4751.
Ye, J., Ma, N., Madden, T.L., and Ostell, J.M. (2013). IgBLAST: an 5 immunoglobulin variable domain sequence analysis tool. Nucleic Acids
Res. 41, W34-W40.
Ying, S., O’Connor, B., Ratoff, J., Meng, Q., Fang, C., Cousins, D.,
Zhang, G., Gu, S., Gao, Z., Shamiji, B., et al. (2008). Expression and cellular provenance of thymic stromal lymphopoietin and chemokines 10 10 patients with severe asthma and chronic obstructive pulmonary disease.
J. Immunol. Baltim. Md 1950 181, 2790-2798.
Zhi, K., Li, M., Zhang, X., Gao, Z., Bai, J., Wu, Y., Zhou, S., Li, M., and
Qu, ‏.ا‎ (2014). 047 Integrin (LPAM-1) is upregulated at atherosclerotic lesions and is involved in atherosclerosis progression. Cell. Physiol. 15
Biochem. Int. J. Exp. Cell. Physiol. Biochem. Pharmacol. 33, 1876— 1887.
Zhong, J., Sharma, J., Raju, R., Palapetta, S.M., Prasad, T.S.K., Huang,
T.-C., Yoda, A., Tyner, J.W., van Bodegom, D., Weinstock, D.M., et al. (2014). TSLP signaling pathway map: a platform for analysis of TSLP- 0 mediated signaling. Database J. Biol. Databases Curation 2014, bauQ07. ‏قائمة المتواليات‎
Effimune <110>
Antibodies directed against 60127 <120>
B10744B <130>
US 62/010117 <150> 10-06-2014 <151>
EP 15305078.6 <150> 23-01-2015 <151> 10 132 <160>
Patentln version 3.5 <170> 1 <210> 1359 <211>
DNA <212>
Artificial Sequence <213>
<220>
Synthetic sequence <223> 1 <400> 5 gcggtgcagce tggtggagtc tgggggaggce ctagtgcagce ctggagggtc cctgaaactc 60 tcctgtgcag tctcaggatt cactctcagt gactattaca tggcctgggt ccgeccaggct 120 ccaaagaagg gtctggaatg ggtcgcaacc attagtgcca gtgggctcag aacttactat 180 ccagactccg tgaagggcecg cttcactatc tccagagatg atgcaaaaag gagcctcttc 240 15 ctgcaaatga ccagtctgaa gtctgaggac acggccactt attactgtgc aagaccgatg 300 tctgcacact atggttttaa ctactttgat tactggggcc aaggagtcat ggtcacagtc 360 20 tcctcagcta gcaccaaggg cccatcggte ttcccectgg caccctecctc 8808003-26 420 tctgggggca cagcggcecct gggcetgectg gtcaaggact acttccccga accggtgacg 5
480 gtgtcgtgga actcaggcgce cctgaccage ggcgtgcaca ccttccecgge tgtcctacag 540 tcctcaggac tctactccct cagcagcegtg gtgaccgtge cctccagecag cttgggcacc 600 cagacctaca tctgcaacgt gaatcacaag cccagcaaca ccaaggtgga caagaaagtt
660 15 gagcccaaat cttgtgacaa aactcacaca tgcccaccgt gcccagcacc tgaactcctg 720 gggggaccgt cagtcttcct cttcccccca aaacccaagg acaccctcat gatctccegg 0 780 acccctgagg tcacatgcgt ggtggtggac gtgagccacg aagaccctga ggtcaagttc 840 aactggtacg tggacggcgt ggaggtgcat aatgccaaga caaagccgcg ggaggagcag 5
900 tacaacagca cgtaccgtgt ggtcagcgtc ctcaccgtcc tgcaccagga ctggctgaat 960 ggcaaggagt acaagtgcaa ggtctccaac aaagccctcc cagcccccat cgcgaaaacc 1020 atctccaaag ccaaagggca gccccgagaa ccacaggtgt acaccctgec 0812609
1080 15 gaggagatga ccaagaacca ggtcagcctg acctgcctgg tcaaaggctt ctatcccagce 1140 gacatcgccg tggagtggga gagcaatggg cagccggaga acaactacaa gaccacgcect 0 1200 cccgtgetgg actccgacgg 10012616 ctctacagca agctcaccgt 00808808306 1260 aggtggcagc aggggaacgt cttctcatge tccgtgatge atgaggcetct gcacaaccac 5 1320 tacacgcaga agagcctctc cctgtctccg ggtaaatga 1359 2 <210> 452 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 2 <400>
Ala Val 60 Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 5 1
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Thr Leu Ser Asp Tyr 25 20
Tyr Met Ala Trp Val Arg Gin Ala Pro Lys Lys Gly Leu Glu Trp Val 10 40 35
Ala Thr lle Ser Ala Ser Gly Leu Arg Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val 60 55 50 15
Lys Gly Arg Phe Thr lle Ser Arg Asp Asp Ala Lys Arg Ser Leu Phe 80 75 70 65
Leu GIn Met Thr Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys 95 90 85
Ala Arg Pro Met Ser Ala His Tyr Gly Phe Asn Tyr Phe Asp Tyr Trp 110 105 100
Gly GIn Gly Val Met Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro 125 120 115
Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr 5 140 135 130
Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr
160 155 150 145
Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro 175 170 165 5
Ala Val Leu GIn Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr 190 185 180
Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr GIn Thr Tyr lle Cys Asn Val Asn 205 200 195
His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser 220 215 210
Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu 240 235 230 225
Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu 5 255 250 245
Met lle Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser 270 265 260 10
His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu 285 280 275
Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu GIn Tyr Asn Ser Thr 300 295 290
Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His GIn Asp Trp Leu Asn 320 315 310 305
Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro 335 330 325 lle Ala Lys Thr lle Ser Lys Ala Lys Gly GIn Pro Arg Glu Pro Gin 0 350 345 340
Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gin Val 365 360 355 15
Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lle Ala Val 380 375 370
Glu Trp Glu Ser Asn Gly GIn Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro 400 395 390 385
Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr 415 410 405
Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin GIn Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val 430 425 420
Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu 5 445 440 435
Ser Pro Gly Lys
3 <210> 645 <211> 5
DNA <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 10 3 <400> gacatccaga tgacacagtc tccagcttcc ctgtctgcat ctctgggaga aactgtcacc 60 atcgaatgtc gaacaagtga ggacatttac aatggtttag catggtatca gcagaagcca 120 gggaaatctc ctcagctcct ggtctatagt gcaaatagct tacatattgg ggtcccatca 180 cggttcagtg gcagtggatc tggtacacag tattctctca agataaacag cctgcaatit 240 gaagatgtcg caagttattt ctgtcaacag tattacgatt atccgctcge gttcggttct 300 gggaccaagc tggagatcaa acggacggtg gctgcaccat ctgtcttcat cttcccgeca 360 tctgatgagc agttgaaatc tggaactgcc tctgttgtgt gectgctgaa taacttctat 420 cccagagagg ccaaagtaca gtggaaggtg gataacgccc tccaatcggg taactcccag 480 gagagtgtca cagagcagga cagcaaggac agcacctaca gcctcagcag caccctgacg 540 15 ctgagcaaag cagactacga gaaacacaaa gtctacgcct gcgaagtcac ccatcagggce 600 ctgagctcgc ccgtcacaaa gagcttcaac aggggagagt gttag 645 20
4 <210> 214 >211<
PRT <212> 5
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 4 <400>
Asp lle GIn Met Thr GIn Ser Pro Ala Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly 10 5 1 15
Glu Thr Val Thr lle Glu Cys Arg Thr Ser Glu Asp lle Tyr Asn Gly 25 20
Leu Ala Trp Tyr GIn Gin Lys Pro Gly Lys Ser Pro Gin Leu Leu Val 45 40 35
Tyr Ser Ala Asn Ser Leu His lle Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 60 55 50
Ser Gly Ser Gly Thr GIn Tyr Ser Leu Lys lle Asn Ser Leu 60 Phe 0 80 75 70 65
Glu Asp Val Ala Ser Tyr Phe Cys Gin GIn Tyr Tyr Asp Tyr Pro Leu 95 90 85 15
Ala Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu lle Lys Arg Thr Val Ala Ala 110 105 100
Pro Ser Val Phe lle Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gin Leu Lys Ser Gly 125 120 115
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 140 135 130
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu 60 Ser Gly Asn Ser 07 160 155 150 145
Glu Ser Val Thr Glu GIn Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 5 175 170 165
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
190 185 180
Ala Cys Glu Val Thr His GIn Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 205 200 195 5
Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 10 <210> 1350 <211>
DNA <212>
Artificial Sequence <213> 15 <220>
Synthetic sequence <223>
<400> gcggtgcagce 1191993916 tgggggaggce ctagtgcagce ctggagggtc cctgaaactc 60 tcctgtgcag tctcaggatt cactctcagt gactattaca tggcctgggt ccgecaggcet 120 5 ccaaagaagg gtctggaatg ggtcgcaacc attagtgcca gtgggctcag aacttactat 180 ccagactccg tgaagggccg cttcactatc tccagagatg atgcaaaaag gagcectcttc 10 240 ctgcaaatga ccagtctgaa gtctgaggac acggccactt attactgtgc aagaccgatg 300 tctgcacact atggttttaa ctactttgat tactggggcc aaggagtcat ggtcacagtc 360 tcctcagcta gcaccaaggg cccatcggte ttcccectgg cgecctgetc caggagcacc 420 tccgagagca cagccgcecct gggcetgectg gtcaaggact acttccccga accggtgacg 480 gtgtcgtgga actcaggcgce cctgaccage ggcgtgcaca ccttcecggce tgtcctacag 540 5 tcctcaggac tctactccct cagcagegtg gtgaccgtge cctccagecag cttgggcacg 600 aagacctaca cctgcaacgt agatcacaag cccagcaaca ccaaggtgga caagagagtt 10 660 gagtccaaat atggtccccce atgcccacca tgcccagcac ctgagttcct ggggggacca 720 tcagtcttcc tgttcccceec aaaacccaag gacactctca tgatctcccg gaccectgag 780 gtcacgtgcg tggtggtgga cgtgagccag gaagaccccg aggtccagtt caactggtac 840 20 gtggatggcg tggaggtgca taatgccaag acaaagccgc gggaggagca 0116880806 900 acgtaccgtg tggtcagcgt cctcaccgtc ctgcaccagg actggctgaa cggcaaggag 960 5 tacaagtgca aggtctccaa caaaggcctc ccgtcctcca tcgagaaaac catctccaaa 1020 gccaaagggc agccccgaga gccacaggtg tacaccctge ccccatccca ggaggagatg 10 1080 accaagaacc aggtcagcct gacctgcctg gtcaaaggct tctaccccag cgacatcgec 1140 gtggagtggg agagcaatgg gcagccggag aacaactaca agaccacgcc tccecgtgctg 1200 gactccgacg gctecttctt cctctacagc aggctaaccg tggacaagag caggtggcag 1260 20 gaggggaatg tcttctcatg ctccgtgatg catgaggctc tgcacaacca ctacacacag 1320 aagagcctct ccctgtctcc gggtaaatga 1350 6 <210> 449 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> 10 <220>
Synthetic sequence <223> 6 <400> 15
Ala Val 60 Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val 60 Pro Gly Gly 10 5 1
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Thr Leu Ser Asp Tyr 30 25 20
Tyr Met Ala Trp Val Arg Gin Ala Pro Lys Lys Gly Leu Glu Trp Val 40 35
Ala Thr lle Ser Ala Ser Gly Leu Arg Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val 10 60 55 50
Lys Gly Arg Phe Thr lle Ser Arg Asp Asp Ala Lys Arg Ser Leu Phe 80 75 70 65 5
Leu GIn Met Thr Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys 95 90 85
Ala Arg Pro Met Ser Ala His Tyr Gly Phe Asn Tyr Phe Asp Tyr Trp 110 105 100
Gly GIn Gly Val Met Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro 125 120 115
Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr 140 135 130
Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr 5 160 155 150 145
Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro
175 170 165
Ala Val Leu GIn Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr 190 185 180 5
Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp 205 200 195
His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr 220 215 210
Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro 240 235 230 225
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lle Ser 255 250 245
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser GIn Glu Asp 5 270 265 260
Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn 285 280 275 10
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu GIn Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val 300 295 290
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu 320 315 310 305
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser lle Glu Lys 335 330 325
Thr lle Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr 350 345 340
Leu Pro Pro Ser Gin Glu Glu Met Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr 0 365 360 355
Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lle Ala Val Glu Trp Glu 380 375 370 15
Ser Asn Gly GIn Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu 400 395 390 385
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys 415 410 405
Ser Arg Trp GIn Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu 430 425 420
Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 445 440 435
Lys 15 7 <210>
645 <211>
DNA <212>
Artificial Sequence <213> <220> 5
Synthetic sequence <223> 7 <400> gacatccaga tgacacagtc tccagcttcc ctgtctgcat ctctgggaga aactgtcacc 60 10 atcgaatgtc gaacaagtga ggacatttac aatggtttag catggtatca gcagaagcca 120 gggaaatctc ctcagctcct ggtctatagt gcaaatagcet tacatattgg ggtcccatca 180 15 cggttcagtg gcagtggatc tggtacacag tattctctca agataaacag cctgcaattt 240 gaagatgtcg caagttattt ctgtcaacag tattacgatt atccgctcge gttcggttct 300 gggaccaagc tggagatcaa acggacggtg gctgcaccat ctgtcttcat cttcccgeca 360 tctgatgagc agttgaaatc tggaactgcc tctgttgtgt gectgctgaa taacttctat 420 5 cccagagagg ccaaagtaca gtggaaggtg gataacgccc tccaatcggg taactcccag 480 gagagtgtca cagagcagga cagcaaggac agcacctaca gcctcagcag caccctgacg 10 540 ctgagcaaag cagactacga gaaacacaaa gtctacgcct gcgaagtcac ccatcagggce 600 ctgagctcge ccgtcacaaa gagcttcaac aggggagagt gttag 645 8 <210>
214 <211> 20
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 5 8 <400>
Asp lle GIn Met Thr GIn Ser Pro Ala Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly 10 5 1 10
Glu Thr Val Thr lle Glu Cys Arg Thr Ser Glu Asp lle Tyr Asn Gly 25 20 15
Leu Ala Trp Tyr GIn Gin Lys Pro Gly Lys Ser Pro GIn Leu Leu Val 40 35
Tyr Ser Ala Asn Ser Leu His lle Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 60 55 50
Ser Gly Ser Gly Thr Gln Tyr Ser Leu Lys lle Asn Ser Leu 60 Phe 80 75 70 65
Glu Asp Val Ala Ser Tyr Phe Cys Gin ‏ماه‎ Tyr Tyr Asp Tyr Pro Leu 10 95 90 85
Ala Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu lle Lys Arg Thr Val Ala Ala 110 105 100 15
Pro Ser Val Phe lle Phe Pro Pro Ser Asp Glu GIn Leu Lys Ser Gly 125 120 115
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 140 135 130
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu GIn Ser Gly Asn Ser 07 160 155 150 145
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 175 170 165
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 5 190 185 180
Ala Cys Glu Val Thr His GIn Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
205 200 195
Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 5 9 <210> 27 <211>
DNA <212> 10
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 9 <400> ttcactctca gtgactatta catggcc 27
10 <210> 9 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> <400> 10
Phe Thr Leu Ser Asp Tyr Tyr Met Ala 5 1 11 <210> 15 51 <211>
DNA <212>
Artificial Sequence <213>
<220>
Synthetic sequence <223> 11 <400> accattagtg ccagtgggct cagaacttac tatccagact ccgtgaaggg c 51 5 12 <210> 17 <211>
PRT <212> 10
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 12 <400>
Thr lle Ser Ala Ser Gly Leu Arg Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val Lys 15 10 5 1
Gly 13 <210> 39 <211>
DNA <212>
Artificial Sequence <213> 10 <220>
Synthetic sequence <223> 13 <400> 15 ccgatgtctg cacactatgg ttttaactac tttgattac 39 14 <210>
13 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220> 5
Synthetic sequence <223> 14 <400>
Pro Met Ser Ala His Tyr Gly Phe Asn Tyr Phe Asp Tyr 0 5 1 <210> 33 <211> 15
DNA <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 15 <400> cgaacaagtg aggacattta caatggttta gca 33 16 <210> 11 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> 10 <220>
Synthetic sequence <223> 16 <400> 15
Arg Thr Ser Glu Asp lle Tyr Asn Gly Leu Ala 5 1
17 <210> 21 <211>
DNA <212>
Artificial Sequence <213> 5 <220>
Synthetic sequence <223> 17 <400> 10 agtgcaaata gcttacatat t 21 18 <210> 7 <211> 5
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 18 <400>
Ser Ala Asn Ser Leu His lle 5 1 19 <210> 27 <211> 10
DNA <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 15 19 <400> caacagtatt acgattatcc gctcgceg 27
20 <210> 9 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> 5 <220>
Synthetic sequence <223> 20 <400> 10
Gln GIn Tyr Tyr Asp Tyr Pro Leu Ala 1 21 <210> 366 <211>
DNA <212>
Artificial Sequence <213>
<220>
Synthetic sequence <223> 21 <400> 5 gcggtgcagce tggtggagtc tgggggaggce ctagtgcagce ctggagggtc cctgaaactc 60 tcctgtgcag tctcaggatt cactctcagt gactattaca tggectgggt ccgecaggct 120 ccaaagaagg gtctggaatg ggtcgcaacc attagtgcca gtgggctcag aacttactat 180 ccagactccg tgaagggcecg cttcactatc tccagagatg atgcaaaaag gagcctcttc 240 15 ctgcaaatga ccagtctgaa gtctgaggac acggccactt attactgtgc aagaccgatg 300 tctgcacact atggttttaa ctactttgat tactggggcc aaggagtcat ggtcacagtc 360 20 tcctca 366 22 <210> 5 122 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220> 10
Synthetic sequence <223> 22 <400>
Ala Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 5 10 5 1
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Thr Leu Ser Asp Tyr
30 25 20
Tyr Met Ala Trp Val Arg ‏ماى‎ Ala Pro Lys Lys Gly Leu Glu Trp Val 45 40 35 5
Ala Thr lle Ser Ala Ser Gly Leu Arg Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val 60 55 50
Lys Gly Arg Phe Thr lle Ser Arg Asp Asp Ala Lys Arg Ser Leu Phe 80 75 70 65
Leu GIn Met Thr Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys 95 90 85
Ala Arg Pro Met Ser Ala His Tyr Gly Phe Asn Tyr Phe Asp Tyr Trp 110 105 100
Gly GIn Gly Val Met Val Thr Val Ser Ser 5 120 115 23 <210> 324 <211> 10
DNA <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 15 23 <400> gacatccaga tgacacagtc tccagcttcc ctgtctgcat ctctgggaga aactgtcacc 60 atcgaatgtc gaacaagtga ggacatttac aatggtttag catggtatca gcagaagcca 120 gggaaatctc ctcagctcct ggtctatagt gcaaatagct tacatattgg ggtcccatca 180 5 cggttcagtg gcagtggatc tggtacacag tattctctca agataaacag cctgcaatit 240 gaagatgtcg caagttattt ctgtcaacag tattacgatt atccgctcge gttcggttct 300 gggaccaagc tggagatcaa acgg 324 24 <210> 108 <211> 15
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 24 <400>
Asp lle Gln Met Thr GIn Ser Pro Ala Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly 5 10 5 1
Glu Thr Val Thr lle Glu Cys Arg Thr Ser Glu Asp lle Tyr Asn Gly 25 20 10
Leu Ala Trp Tyr GIn Gin Lys Pro Gly Lys Ser Pro GIn Leu Leu Val 40 35 15
Tyr Ser Ala Asn Ser Leu His lle Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 60 55 50
Ser Gly Ser Gly Thr Gln Tyr Ser Leu Lys lle Asn Ser Leu 60 Phe 80 75 70 65
Glu Asp Val Ala Ser Tyr Phe Cys Gin GIn Tyr Tyr Asp Tyr Pro Leu 95 90 85
Ala Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu lle Lys Arg 0 105 100 <210> 993 <211> 15
DNA <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 25 <400> gctagcacca agggcccatc ggtcttccee ctggcaccct cctccaagag cacctetggg 60 5 ggcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 120 tggaactcag gcgccctgac cagcggegtg cacaccttcc cggcetgtect acagtectca 0 180 ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcettggg cacccagacc 240 tacatctgca acgtgaatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagaa agttgagccc 300 aaatcttgtg acaaaactca cacatgccca ccgtgcccag cacctgaact cctgggggga 360 20 ccgtcagtct 01-11-66 0083888066 aaggacaccce tcatgatctc ccggacccect 420 gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg 480 5 tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cgcgggagga gcagtacaac 540 agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc aggactggcet gaatggcaag 10 600 gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc ccatcgcgaa aaccatctce 660 aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtacaccc tgccecccatc ccgggaggag 720 atgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc 780 20 gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acaagaccac 60126619 840 ctggactccg acggctcctt cttectctac agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg 900 5 cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg 960 cagaagagcc tctccctgtc tccgggtaaa tga 993 0 26 <210> 330 <211>
PRT <212> 15
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223>
26 <400>
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys 15 10 5 1
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 30 25 20
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 40 35
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu 60 Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 5 60 55 50
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
80 75 70 65
Tyr lle Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 95 90 85 5
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys 110 105 100
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 125 120 115
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lle Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 140 135 130
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp 160 155 150 145
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 5 175 170 165
Glu GIn Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 190 185 180 10
His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 205 200 195
Lys Ala Leu Pro Ala Pro lle Ala Lys Thr lle Ser Lys Ala Lys Gly 220 215 210
‏داك‎ Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu 240 235 230 225
Met Thr Lys Asn GIn Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 255 250 245
Pro Ser Asp lle Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly GIn Pro Glu Asn 0 270 265 260
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 285 280 275 15
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp 60 Gin Gly Asn 300 295 290
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 320 315 310 305
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 330 325 27 <210> 984 <211>
DNA <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 27 <400> gctagcacca agggcccatc 0910116666 ctggegecct gectccaggag cacctccgag 60 agcacagccg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 120 5 tggaactcag gcgccctgac cagcggegtg cacaccttcc cggcetgtect acagtectca 180 ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcettggg cacgaagacc 0 240 tacacctgca acgtagatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagag agttgagtcc 300 aaatatggtc ccccatgccc accatgccca gcacctgagt tcctgggggg accatcagte 360 ttcctgttcc ccccaaaacc caaggacact ctcatgatct cccggaccee tgaggtcacg 420 20 tgcgtggtgg tggacgtgag ccaggaagac 0603900166 agttcaactg gtacgtggat 480 ggcgtggagg tgcataatgc caagacaaag ccgcgggagg agcagttcaa cagcacgtac 540 5 cgtgtggtca gcgtcctcac cgtectgcac caggactgge tgaacggcaa ggagtacaag 600 tgcaaggtct ccaacaaagg cctccecgtee tccatcgaga aaaccatctc caaagccaaa 10 660 gggcagcccc gagagccaca ggtgtacacc ctgcccccat cccaggagga gatgaccaag 720 aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa ggcttctacc ccagcgacat cgccgtggag 780 tgggagagca atgggcagcc ggagaacaac tacaagacca cgcctccegt getggactce 840 20 gacggctcct tcttcctcta 8008399-18 accgtggaca agagcaggtg gcaggagggg 900 aatgtcttct catgctccgt gatgcatgag gctctgcaca accactacac acagaagagc 960 5 ctcteeetgt cteccgggtaa atga 984 28 <210> 10 327 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220> 15
Synthetic sequence <223> 28 <400>
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 10 5 1
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 5 25 20
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 40 35 10
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu GIn Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 60 55 50 15
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr 80 75 70 65
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 95 90 85
Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 110 105 100
Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 10 125 120 115
Asp Thr Leu Met lle Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 140 135 130 15
Asp Val Ser GIn Glu Asp Pro Glu Val Gin Phe Asn Trp Tyr Val Asp 160 155 150 145
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe 175 170 165
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His GIn Asp 190 185 180
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 205 200 195
Pro Ser Ser lle Glu Lys Thr lle Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg 5 220 215 210
Glu Pro GIn Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser GIn Glu Glu Met Thr Lys
240 235 230 225
Asn ‏صاى‎ Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 255 250 245 5 lle Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 270 265 260
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 285 280 275
Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Glu Gly Asn Val Phe Ser 300 295 290
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser 320 315 310 305
Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 5 325 29 <210> 321 <211> 10
DNA <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 15 29 <400> acggtggctg caccatctgt cttcatcttc ccgccatctg atgagcagtt gaaatctgga 60 actgcctctg ttgtgtgcct gctgaataac ttctatccca gagaggccaa agtacagtgg 120 aaggtggata acgccctcca atcgggtaac tcccaggaga gtgtcacaga gcaggacagc 180 aaggacagca cctacagcct cagcagcacc ctgacgctga gcaaagcaga ctacgagaaa 240 cacaaagtct acgcctgcga agtcacccat cagggcctga gctcgccecgt cacaaagagce 300 10 ttcaacaggg gagagtgtta g 321 <210> 15 106 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220> 20
Synthetic sequence <223> 30 <400>
Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe lle Phe Pro Pro Ser Asp Glu GIn 5 10 5 1
Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr 25 20 10
Pro Arg Glu Ala Lys Val Gin Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu GIn Ser 40 35 15
Gly Asn Ser GIn Glu Ser Val Thr Glu ‏ماه‎ Asp Ser Lys Asp Ser Thr 60 55 50
Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys 80 75 70 65
His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro 95 90 85
Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 0 105 100 31 <210> 330 <211> 15
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 31 <400>
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys 5 10 5 1
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 25 20 10
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 40 35 15
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu GIn Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 60 55 50
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr 80 75 70 65
Tyr lle Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 95 90 85
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys 10 110 105 100
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 125 120 115 15
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lle Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 140 135 130
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp 160 155 150 145
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 175 170 165
Glu GIn Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 190 185 180
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 5 205 200 195
Lys Ala Leu Pro Ala Pro lle Glu Lys Thr lle Ser Lys Ala Lys Gly
220 215 210 ‏وا‎ Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu 240 235 230 225 5
Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 255 250 245
Pro Ser Asp lle Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn 270 265 260
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 285 280 275
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp 60 Gin Gly Asn 300 295 290
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 5 320 315 310 305
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 330 325 10 32 <210> 326 <211>
PRT <212> 15
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223>
32 <400>
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 15 10 5 1 5
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 30 25 20
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 45 40 35
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu GIn Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 60 55 50
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr 80 75 70 65
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 5 95 90 85
Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 110 105 100 10
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp 125 120 115
Thr Leu Met lle Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp 140 135 130
Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val GIn Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly 160 155 150 145
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn 175 170 165
Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gin Asp Trp 0 190 185 180
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro 205 200 195 15
Ala Pro lle Glu Lys Thr lle Ser Lys Thr Lys Gly Gin Pro Arg Glu 220 215 210
Pro GIn Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn 240 235 230 225
Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lle 255 250 245
Ser Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr 270 265 260
Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys 5 285 280 275
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln GIn Gly Asn Val Phe Ser Cys
300 295 290
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr ‏0ا6‎ Lys Ser Leu 320 315 310 305 5
Ser Leu Ser Pro Gly Lys 325 33 <210> 327 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> 15 <220>
Synthetic sequence <223>
33 <400>
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 15 10 5 1
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 30 25 20
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 40 35
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu 60 Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 5 60 55 50
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr
80 75 70 65
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 95 90 85 5
Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Ser Cys Pro Ala Pro 110 105 100
Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 125 120 115
Asp Thr Leu Met lle Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 140 135 130
Asp Val Ser GIn Glu Asp Pro Glu Val Gin Phe Asn Trp Tyr Val Asp 160 155 150 145
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu GIn Phe 5 175 170 165
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 190 185 180 10
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 205 200 195
Pro Ser Ser lle Glu Lys Thr lle Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg 220 215 210
Glu Pro GIn Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys 240 235 230 225
Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 255 250 245 lle Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 60 Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 0 270 265 260
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 285 280 275 15
Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Glu Gly Asn Val Phe Ser 300 295 290
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser 320 315 310 305
Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 325 34 <210> 326 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 34 <400>
Ala Glu Thr Thr Ala Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro Gly Thr Ala 15 10 5 1
Leu Lys Ser Asn Ser Met Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr 25 20
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Thr Trp Asn Ser Gly Ala Leu Ser Ser 10 40 35
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu GIn Ser Gly Leu Tyr Thr Leu 60 55 50 15
Thr Ser Ser Val Thr Val Pro Ser Ser Thr Trp Pro Ser Gin Thr Val 80 75 70 65
Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys 95 90 85 lle Val Pro Arg Asn Cys Gly Gly Asp Cys Lys Pro Cys lle Cys Thr 110 105 100
Gly Ser Glu Val Ser Ser Val Phe lle Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp 125 120 115
Val Leu Thr lle Thr Leu Thr Pro Lys Val Thr Cys Val Val Val Asp 15 140 135 130 lle Ser GIn Asp Asp Pro Glu Val His Phe Ser Trp Phe Val Asp Asp
160 155 150 145
Val Glu Val His Thr Ala GIn Thr Arg Pro Pro Glu Glu Glin Phe Asn 175 170 165 5
Ser Thr Phe Arg Ser Val Ser Glu Leu Pro lle Leu His Gin Asp Trp 190 185 180
Leu Asn Gly Arg Thr Phe Arg Cys Lys Val Thr Ser Ala Ala Phe Pro 205 200 195
Ser Pro lle Glu Lys Thr lle Ser Lys Pro Glu Gly Arg Thr Gln Val 220 215 210
Pro His Val Tyr Thr Met Ser Pro Thr Lys Glu Glu Met Thr Gln Asn 240 235 230 225
Glu Val Ser lle Thr Cys Met Val Lys Gly Phe Tyr Pro Pro Asp lle 5 255 250 245
Tyr Val Glu Trp GIn Met Asn Gly 60 Pro Gin Glu Asn Tyr Lys Asn 270 265 260 10
Thr Pro Pro Thr Met Asp Thr Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys 285 280 275
Leu Asn Val Lys Lys Glu Lys Trp GIn Gin Gly Asn Thr Phe Thr Cys 300 295 290
Ser Val Leu His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Glu Lys Ser Leu 320 315 310 305
Ser His Ser Pro Gly Lys 325 <210> 10 366 <211>
DNA <212>
Artificial Sequence <213> <220> 15
Synthetic sequence <223> 35 <400> caggtgcagc tggtcgaatc tggagggggt ctggtcaagc ccggagggtc actgcgtctg 60 tcatgcgcecg tctcagggtt cacactgtct gactactata tggcttgggt gcgacaggca 120 ccaggcaagg gactggagtg ggtcgccact atctctgcta gtggcctgag gacctactat 180 cctgatagtg tgaagggaag gttcacaatt tcacgggacg atgcaaaaaa ctccctgtac 240 10 ctgcagatga atagcctgag agcagaagac accgccgtct actattgcgc ccgceccaatg 300 agcgctcact atggcttcaa ctactttgat tattgggggc agggtaccct ggtgacagtc 360 15 tccagc 366 36 <210> 20
122 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220> 5
Synthetic sequence <223> 36 <400>
GIn Val GIn Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 0 10 5 1
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Thr Leu Ser Asp Tyr 25 20 15
Tyr Met Ala Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 40 35
Ala Thr lle Ser Ala Ser Gly Leu Arg Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val 60 55 50
Lys Gly Arg Phe Thr lle Ser Arg Asp Asp Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 80 75 70 65
Leu GIn Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 95 90 85
Ala Arg Pro Met Ser Ala His Tyr Gly Phe Asn Tyr Phe Asp Tyr Trp 5 110 105 100
Gly GIn Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
120 115 37 <210> 366 <211> 5
DNA <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 10 37 <400> caggtgcagc tggtcgaatc tgggggggga ctggtcaaac ccggaggctc actgcgtctg 60 tcatgtgccg tctcaggctt tacactgage gactactata tggcatggat ccgacaggca 120 ccaggcaagg gactggagtg ggtgtctact atttctgcca gtggcctgag gacctactat 180 20 cctgacagtg tcaagggaag gttcacaatc tcacgggata acgctaaaaa ttccctgtac 240 ctgcagatga acagcctgag agccgaagac accgctgtgt actattgcge tcgeccaatg 5 300 tccgcacact atggcttcaa ttactttgat tattgggggc agggtaccct ggtgacagtc 360 tccagc 366 10 38 <210> 122 <211>
PRT <212> 15
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223>
38 <400>
Gln Val GIn Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 5 1 5
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Thr Leu Ser Asp Tyr 30 25 20
Tyr Met Ala Trp lle Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 45 40 35
Ser Thr lle Ser Ala Ser Gly Leu Arg Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val 60 55 50
Lys Gly Arg Phe Thr lle Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 80 75 70 65
Leu GIn Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 5 95 90 85
Ala Arg Pro Met Ser Ala His Tyr Gly Phe Asn Tyr Phe Asp Tyr Trp 110 105 100 10
Gly GIn Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 120 115 39 <210> 366 <211>
DNA <212>
Artificial Sequence >213< <220>
Synthetic sequence <223> 39 <400> caggtgcagc tggtcgaatc agggggggga ctggtcaaac ccgggggctc actgcgtctg 60 tcatgtgccg tctcaggcett cacactgagec gactactata tggcatggat ccgacaggca 10 120 ccaggcaagg gactggagtg ggtgtctact atttctgcca gtggcctgag gacctactat 180 cctgacagtg tcaagggaag gttcacaatc tcacgggata acgctaaaaa ttccctgtac 240 ctgcagatga acagcctgag agccgaagac accgctgtgt actattgcge tcgcccactg 300 20 tccgcacact atggcttcaa ttactttgat tattgggggc agggtaccct ggtgacagtc 360 tccagc 366 40 <210> 122 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> 10 <220>
Synthetic sequence <223> 40 <400> 15
Gln Val GIn Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 10 5 1
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Thr Leu Ser Asp Tyr 30 25 20
Tyr Met Ala Trp lle Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 40 35
Ser Thr lle Ser Ala Ser Gly Leu Arg Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val 10 60 55 50
Lys Gly Arg Phe Thr lle Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 80 75 70 65 5
Leu GIn Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 95 90 85
Ala Arg Pro Leu Ser Ala His Tyr Gly Phe Asn Tyr Phe Asp Tyr Trp 110 105 100
Gly GIn Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 120 115 41 <210> 321 <211>
DNA <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 41 <400> gaaattgtga tgactcagtc tcccgctacc ctgtcagtct ctcccggega 3600-1326 60 ctgtcctgec gaacctcaga agatatctac aacgggcetgg cttggtatca gcagaagcecc 120 ggacaggccc ctaggcetgct ggtgtactcc gctaattctc tgcacatcgg cattccagca 180 cggttctctg gtagtggctc aggaactgag tataccctga caatctccag cctgcagagce 240 10 gaagacttcg cagtgtactt ttgccagcag tactatgatt atcccctgge ctttggegga 300 gggaccaagg tcgagatcaa g 321 42 <210> 107 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> 20
<220>
Synthetic sequence <223> 42 <400> 5
Glu lle Val Met Thr GIn Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly 15 10 5 1
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Thr Ser Glu Asp lle Tyr Asn Gly 25 20
Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu Val 15 40 35
Tyr Ser Ala Asn Ser Leu His lle Gly lle Pro Ala Arg Phe Ser Gly
60 55 50
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr lle Ser Ser Leu Gln Ser 80 75 70 65 5
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys GIn Gin Tyr Tyr Asp Tyr Pro Leu 95 90 85
Ala Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu lle Lys 105 100 43 <210> 321 <211>
DNA <212>
Artificial Sequence <213>
<220>
Synthetic sequence <223> 43 <400> 5 gaaatcgtga tgactcagtc tcctgctact ctgtcegtgt cccectggtga acgtgcetact 60 ctgtcctgtc gtacctccga agatatttac aacgggcetgg cttggtatca gcagaagcecc 120 ggacaggccc ctaggcetgct gatctactcc gctaattctc tgcacatcgg cattccagcea 180 cggttctctg gtagtggctc aggaactgag tttaccctga caatttccag cctgcagage 240 gaagacttcg cagtgtacta ttgccagcag tactatgatt atcccctgge ctttggcgga 300 gggaccaagg tcgagatcaa a 321
44 <210> 107 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> 5 <220>
Synthetic sequence <223> 44 <400> 10
Glu lle Val Met Thr GIn Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly 10 5 1 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Thr Ser Glu Asp lle Tyr Asn Gly 25 20
Leu Ala Trp Tyr GIn ‏دا‎ Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu lle 45 40 35
Tyr Ser Ala Asn Ser Leu His lle Gly lle Pro Ala Arg Phe Ser Gly 5 60 55 50
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr lle Ser Ser Leu GIn Ser 80 75 70 65 10
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys 60 GIn Tyr Tyr Asp Tyr Pro Leu 95 90 85
Ala Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu lle Lys 105 100
45 <210> 321 <211>
DNA <212>
Artificial Sequence <213> 5 <220>
Synthetic sequence <223> 45 <400> 10 gaaattgtga tgactcagag ccctgctaca ctgtccgtca gccctggaga acgtgctaca 60 ctgtcctgtc gcacctcaga agatatttac caggggcetgg cttggtatca gcagaagccc 120 5 ggacaggccc ctaggctgct gatctactcc gctaacactc tgcacatcgg cattccagcea 180 cggttctctg gtagtggctc aggaaccgag tttaccctga caatttccag cctgcagtet 240 0 gaagacttcg cagtgtacta ttgccagcag tactatgatt atcccctgge 38 300 gggacaaagg tcgagatcaa a 321 46 <210> 107 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> 10 <220>
Synthetic sequence <223> 46 <400> 15
Glu lle Val Met Thr GIn Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly 10 5 1
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Thr Ser Glu Asp lle Tyr Gin Gly 30 25 20
Leu Ala Trp Tyr GIn Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu lle 40 35
Tyr Ser Ala Asn Thr Leu His lle Gly lle Pro Ala Arg Phe Ser Gly 10 60 55 50
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr lle Ser Ser Leu GIn Ser 80 75 70 65 5
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys 60 GIn Tyr Tyr Asp Tyr Pro Leu 95 90 85
Ala Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu lle Lys 105 100 47 <210> 39 <211>
DNA <212>
Artificial Sequence <213> 10 <220>
Synthetic sequence <223> 47 <400> 15 ccactgtccg cacactatgg cttcaattac tttgattat 39 48 <210>
13 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220> 5
Synthetic sequence <223> 48 <400>
Pro Leu Ser Ala His Tyr Gly Phe Asn Tyr Phe Asp Tyr 0 5 1 49 <210> 36 <211> 15
DNA <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 49 <400> tgtcgcacct cagaagatat ttaccagggg ctggct 36 50 <210> 12 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> 10 <220>
Synthetic sequence <223> 50 <400> 15
Cys Arg Thr Ser Glu Asp lle Tyr Gin Gly Leu Ala 5 1
51 <210> 21 <211>
DNA <212>
Artificial Sequence <213> 5 <220>
Synthetic sequence <223> 51 <400> 10 tccgctaaca ctetgcacat c 21 52 <210> 7 <211> 5
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 52 <400>
Ser Ala Asn Thr Leu His lle 5 1 53 <210> 1350 <211> 10
DNA <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 15 53 <400> caggtgcagc tggtcgaatc agggggggga ctggtcaaac ccgggggctc actgcgtctg 60 tcatgtgccg tctcaggctt cacactgagc gactactata tggcatggat ccgacaggca 120 ccaggcaagg gactggagtg ggtgtctact atttctgcca gtggcctgag gacctactat 5
180 cctgacagtg tcaagggaag gttcacaatc tcacgggata acgctaaaaa ttccctgtac
240 ctgcagatga acagcctgag agccgaagac accgctgtgt actattgcge tcgeccactg
300 tccgcacact atggcttcaa ttactttgat tattgggggc agggtaccct ggtgacagtc 360 tccagcgcta gcaccaaggg cccatcggte ttcccectgg cgecctgetc 800800826
420 tccgagagca cagccgcecct gggcetgectg gtcaaggact acttccccga accggtgacg 480 20 gtgtcgtgga actcaggcgce cctgaccage 09090106808 ccttccecgge ‏16189و‎ ‎540 ‎tcctcaggac tctactccct cagcagegtg gtgaccgtge cctccagecag cttgggcacg 600 5 aagacctaca cctgcaacgt agatcacaag cccagcaaca ccaaggtgga caagagagtt 660 gagtccaaat atggtccccc atgcccacca tgcccagcac ctgagttcct ggggggacca 0 720 tcagtcttcc tgttcccceec aaaacccaag gacactctca tgatctcccg gaccectgag 780 gtcacgtgcg tggtggtgga cgtgagccag gaagaccccg aggtccagtt caactggtac 840 gtggatggcg tggaggtgca taatgccaag acaaagccgc gggaggagca 0116880806 900 20 acgtaccgtg tggtcagcgt cctcaccgtc ctgcaccagg actggctgaa cggcaaggag 960 tacaagtgca aggtctccaa caaaggcctc ccgtcctcca tcgagaaaac catctccaaa 1020 5 gccaaagggc agccccgaga gccacaggtg tacaccctge ccccatccca ggaggagatg 1080 accaagaacc aggtcagcct gacctgcctg gtcaaaggct tctaccccag cgacatcgec 10 1140 gtggagtggg agagcaatgg gcagccggag aacaactaca agaccacgcc tccecgtgctg 1200 gactccgacg gctecttctt cctctacage aggctaaccg tggacaagag caggtggcag 1260 gaggggaatg tcttctcatg ctccgtgatg catgaggctc tgcacaacca ctacacacag 1320 0 aagagcctct ccctgtctcc gggtaaatga 1350 54 <210> 449 <211> 5
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 10 54 <400>
Gln Val GIn Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 10 5 1 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Thr Leu Ser Asp Tyr 25 20
Tyr Met Ala Trp lle Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 45 40 35
Ser Thr lle Ser Ala Ser Gly Leu Arg Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val 60 55 50
Lys Gly Arg Phe Thr lle Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 80 75 70 65
Leu GIn Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 5 95 90 85
Ala Arg Pro Leu Ser Ala His Tyr Gly Phe Asn Tyr Phe Asp Tyr Trp
110 105 100
Gly GIn Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro 125 120 115 5
Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr 140 135 130
Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr 160 155 150 145
Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro 175 170 165
Ala Val Leu GIn Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr 190 185 180
Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp 5 205 200 195
His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr 220 215 210 10
Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro 240 235 230 225
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lle Ser 255 250 245
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp 270 265 260
Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn 285 280 275
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val 0 300 295 290
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu 320 315 310 305 15
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser lle Glu Lys 335 330 325
Thr lle Ser Lys Ala Lys Gly ‏ماي‎ Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr 350 345 340
Leu Pro Pro Ser GIn Glu Glu Met Thr Lys Asn GIn Val Ser Leu Thr 365 360 355
Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lle Ala Val Glu Trp Glu 380 375 370
Ser Asn Gly GIn Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu 5 400 395 390 385
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys
415 410 405
Ser Arg Trp GIn Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu 430 425 420 5
Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 445 440 435
Lys <210> 642 <211>
DNA <212>
Artificial Sequence <213>
<220>
Synthetic sequence <223> <400> 5 gaaattgtga tgactcagag ccctgctaca ctgtccgtca gccctggaga acgtgctaca 60 ctgtcctgtc gcacctcaga agatatttac caggggcetgg cttggtatca gcagaagccc 120 10 ggacaggccc ctaggctgct gatctactcc gctaacactc tgcacatcgg cattccagcea 180 cggttctctg gtagtggctc aggaaccgag tttaccctga caatttccag cctgcagtet 240 15 gaagacttcg cagtgtacta ttgccagcag tactatgatt atcccctgge ctttggcgga 300 gggacaaagg tcgagatcaa aacggtggct gcaccatctg tcttcatctt cccgecatct 360 20 gatgagcagt tgaaatctgg aactgcctct gttgtgtgcc tgctgaataa cttctatcce 420 agagaggcca aagtacagtg gaaggtggat aacgccctcc aatcgggtaa ctcccaggag 480 5 agtgtcacag agcaggacag caaggacagc acctacagcc tcagcagcac cctgacgctg 540 agcaaagcag actacgagaa acacaaagtc tacgcctgcg aagtcaccca tcagggectg 10 600 agctcgcccg tcacaaagag cttcaacagg ggagagtgtt ag 642 56 <210> 213 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213>
<220>
Synthetic sequence <223> 56 <400>
Glu lle Val Met Thr GIn Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly 10 5 1
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Thr Ser Glu Asp lle Tyr GIn Gly 0 25 20
Leu Ala Trp Tyr GIn Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu lle 40 35 15
Tyr Ser Ala Asn Thr Leu His lle Gly lle Pro Ala Arg Phe Ser Gly 60 55 50
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr lle Ser Ser Leu 60 Ser 80 75 70 65
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys 60 GIn Tyr Tyr Asp Tyr Pro Leu 95 90 85
Ala Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu lle Lys Thr Val Ala Ala Pro 110 105 100
Ser Val Phe lle Phe Pro Pro Ser Asp Glu GIn Leu Lys Ser Gly Thr 15 125 120 115
Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys
140 135 130
Val GIn Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu 60 Ser Gly Asn Ser Gln Glu 160 155 150 145 5
Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser 175 170 165
Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala 190 185 180
Cys Glu Val Thr His GIn Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe 205 200 195
Asn Arg Gly Glu Cys 210 57 <210> 5 439 <211>
PRT <212>
Homo Sapiens <213> 57 <400> 10
Glu Ser Gly Tyr Ala Gin Asn Gly Asp Leu Glu Asp Ala Glu Leu Asp 10 5 1 15
Asp Tyr Ser Phe Ser Cys Tyr Ser GIn Leu Glu Val Asn Gly Ser GIn 25 20
His Ser Leu Thr Cys Ala Phe Glu Asp Pro Asp Val Asn Thr Thr Asn 45 40 35
Leu Glu Phe Glu lle Cys Gly Ala Leu Val Glu Val Lys Cys Leu Asn 5 60 55 50
Phe Arg Lys Leu GIn Glu lle Tyr Phe lle Glu Thr Lys Lys Phe Leu 80 75 70 65 10
Leu lle Gly Lys Ser Asn lle Cys Val Lys Val Gly Glu Lys Ser Leu 95 90 85
Thr Cys Lys Lys lle Asp Leu Thr Thr lle Val Lys Pro Glu Ala Pro 110 105 100
Phe Asp Leu Ser Val lle Tyr Arg Glu Gly Ala Asn Asp Phe Val Val 125 120 115
Thr Phe Asn Thr Ser His Leu GIn Lys Lys Tyr Val Lys Val Leu Met 140 135 130
His Asp Val Ala Tyr Arg GIn Glu Lys Asp Glu Asn Lys Trp Thr His 0 160 155 150 145
Val Asn Leu Ser Ser Thr Lys Leu Thr Leu Leu GIn Arg Lys Leu Gin 175 170 165 15
Pro Ala Ala Met Tyr Glu lle Lys Val Arg Ser lle Pro Asp His Tyr 190 185 180
Phe Lys Gly Phe Trp Ser Glu Trp Ser Pro Ser Tyr Tyr Phe Arg Thr 205 200 195
Pro Glu lle Asn Asn Ser Ser Gly Glu Met Asp Pro lle Leu Leu Thr 220 215 210 lle Ser lle Leu Ser Phe Phe Ser Val Ala Leu Leu Val lle Leu Ala 240 235 230 225
Cys Val Leu Trp Lys Lys Arg lle Lys Pro lle Val Trp Pro Ser Leu 15 255 250 245
Pro Asp His Lys Lys Thr Leu Glu His Leu Cys Lys Lys Pro Arg Lys
270 265 260
Asn Leu Asn Val Ser Phe Asn Pro Glu Ser Phe Leu Asp Cys Gin lle 285 280 275 5
His Arg Val Asp Asp lle Gin Ala Arg Asp Glu Val Glu Gly Phe Leu 300 295 290
Gln Asp Thr Phe Pro Gin Gin Leu Glu Glu Ser Glu Lys Gln Arg Leu 320 315 310 305
Gly Gly Asp Val Gin Ser Pro Asn Cys Pro Ser Glu Asp Val Val lle 335 330 325
Thr Pro Glu Ser Phe Gly Arg Asp Ser Ser Leu Thr Cys Leu Ala Gly 350 345 340
Asn Val Ser Ala Cys Asp Ala Pro lle Leu Ser Ser Ser Arg Ser Leu 5 365 360 355
Asp Cys Arg Glu Ser Gly Lys Asn Gly Pro His Val Tyr Glin Asp Leu 380 375 370 10
Leu Leu Ser Leu Gly Thr Thr Asn Ser Thr Leu Pro Pro Pro Phe Ser 400 395 390 385
Leu GIn Ser Gly lle Leu Thr Leu Asn Pro Val Ala 60 Gly Gin Pro 415 410 405 lle Leu Thr Ser Leu Gly Ser Asn GIn Glu Glu Ala Tyr Val Thr Met 430 425 420
Ser Ser Phe Tyr Gln Asn Gin 435 58 <210> 10 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220> 15
Synthetic sequence <223> 58 <400>
Glu Ser Gly Tyr Ala Gin Asn Gly Asp Leu Glu Asp Ala Glu Leu 10 5 1 59 <210> 5 15 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220> 10
Synthetic sequence <223> 59 <400>
Ala ‏داك‎ Asn Gly Asp Leu Glu Asp Ala Glu Leu Asp Asp Tyr Ser 5 15 10 5 1 60 <210>
<211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220> 5
Synthetic sequence <223> 60 <400>
Asp Leu Glu Asp Ala Glu Leu Asp Asp Tyr Ser Phe Ser Cys Tyr 0 15 10 5 1 61 <210> 15 <211> 15
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 61 <400>
Ala Glu Leu Asp Asp Tyr Ser Phe Ser Cys Tyr Ser Gln Leu Glu 5 10 5 1 62 <210> 15 <211> 10
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 15 62 <400>
Asp Tyr Ser Phe Ser Cys Tyr Ser 60 Leu Glu Val Asn Gly Ser
10 5 1 63 <210> 15 <211> 5
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 10 63 <400>
Ser Cys Tyr Ser GIn Leu Glu Val Asn Gly Ser GIn His Ser Leu 15 10 5 1 15 64 <210> 15 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 5 64 <400>
Gln Leu Glu Val Asn Gly Ser GIn His Ser Leu Thr Cys Ala Phe 10 5 1 10 65 <210> 15 <211>
PRT <212> 15
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223>
65 <400>
Asn Gly Ser GIn His Ser Leu Thr Cys Ala Phe Glu Asp Pro Asp 10 5 1 5 66 <210> 15 <211>
PRT <212> 10
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 15 66 <400>
His Ser Leu Thr Cys Ala Phe Glu Asp Pro Asp Val Asn Thr Thr 15 10 5 1
67 <210> 15 <211>
PRT <212> 5
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 67 <400>
Cys Ala Phe Glu Asp Pro Asp Val Asn Thr Thr Asn Leu Glu Phe 10 5 1 15 68 <210> 15 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence >213< <220>
Synthetic sequence <223> 68 <400>
Asp Pro Asp Val Asn Thr Thr Asn Leu Glu Phe Glu lle Cys Gly 15 10 5 1 69 <210> <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> 15 <220>
Synthetic sequence <223>
69 <400>
Asn Thr Thr Asn Leu Glu Phe Glu lle Cys Gly Ala Leu Val Glu 15 10 5 1 70 <210> <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> 10 <220>
Synthetic sequence <223> 70 <400> 15
Leu Glu Phe Glu lle Cys Gly Ala Leu Val Glu Val Lys Cys Leu 15 10 5 1
71 <210> <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> 5 <220>
Synthetic sequence <223> 71 <400> 10 lle Cys Gly Ala Leu Val Glu Val Lys Cys Leu Asn Phe Arg Lys 15 10 5 1 15 72 <210> 15 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213>
<220>
Synthetic sequence <223> 72 <400> 5
Leu Val Glu Val Lys Cys Leu Asn Phe Arg Lys Leu GIn Glu lle 15 10 5 1 73 <210> <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> 15 <220>
Synthetic sequence <223> 73 <400>
Lys Cys Leu Asn Phe Arg Lys Leu 60 Glu lle Tyr Phe lle Glu 15 10 5 1 74 <210> 15 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 74 <400>
Phe Arg Lys Leu GIn Glu lle Tyr Phe lle Glu Thr Lys Lys Phe 15 10 5 1
75 <210> 15 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 75 <400>
Gln Glu lle Tyr Phe lle Glu Thr Lys Lys Phe Leu Leu lle Gly 10 5 1 76 <210> 15 15 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213>
<220>
Synthetic sequence <223> 76 <400>
Phe lle Glu Thr Lys Lys Phe Leu Leu lle Gly Lys Ser Asn lle 10 5 1 77 <210> 0 15 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220> 15
Synthetic sequence <223> 77 <400>
Lys Lys Phe Leu Leu lle Gly Lys Ser Asn lle Cys Val Lys Val 10 5 1 78 <210> 5 15 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220> 10
Synthetic sequence <223> 78 <400>
Leu lle Gly Lys Ser Asn lle Cys Val Lys Val Gly Glu Lys Ser 15 15 10 5 1 79 <210>
<211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220> 5
Synthetic sequence <223> 79 <400>
Ser Asn lle Cys Val Lys Val Gly Glu Lys Ser Leu Thr Cys Lys 0 15 10 5 1 80 <210> 15 <211> 15
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 80 <400>
Val Lys Val Gly Glu Lys Ser Leu Thr Cys Lys Lys lle Asp Leu 5 10 5 1 81 <210> 15 <211> 10
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 15 81 <400>
Glu Lys Ser Leu Thr Cys Lys Lys lle Asp Leu Thr Thr lle Val
10 5 1 82 <210> 15 <211> 5
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 10 82 <400>
Thr Cys Lys Lys lle Asp Leu Thr Thr lle Val Lys Pro Glu Ala 15 10 5 1 15 83 <210> 15 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 5 83 <400> lle Asp Leu Thr Thr lle Val Lys Pro Glu Ala Pro Phe Asp Leu 10 5 1 10 84 <210> 15 <211>
PRT <212> 15
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223>
84 >400<
Thr lle Val Lys Pro Glu Ala Pro Phe Asp Leu Ser Val lle Tyr 10 5 1 5 85 <210> 15 <211>
PRT <212> 10
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 15 85 <400>
Pro Glu Ala Pro Phe Asp Leu Ser Val lle Tyr Arg Glu Gly Ala 15 10 5 1
86 <210> 15 <211>
PRT <212> 5
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 86 <400>
Phe Asp Leu Ser Val lle Tyr Arg Glu Gly Ala Asn Asp Phe Val 10 5 1 15 87 <210> 15 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence >213< <220>
Synthetic sequence <223> 87 <400>
Val lle Tyr Arg Glu Gly Ala Asn Asp Phe Val Val Thr Phe Asn 15 10 5 1 88 <210> <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> 15 <220>
Synthetic sequence <223>
88 <400>
Glu Gly Ala Asn Asp Phe Val Val Thr Phe Asn Thr Ser His Leu 15 10 5 1 89 <210> <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> 10 <220>
Synthetic sequence <223> 89 <400> 15
Asp Phe Val Val Thr Phe Asn Thr Ser His Leu GIn Lys Lys Tyr 15 10 5 1
90 <210> <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> 5 <220>
Synthetic sequence <223> 90 <400> 10
Thr Phe Asn Thr Ser His Leu GIn Lys Lys Tyr Val Lys Val Leu 15 10 5 1 15 91 <210> 15 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213>
<220>
Synthetic sequence <223> 91 <400> 5
Ser His Leu GIn Lys Lys Tyr Val Lys Val Leu Met His Asp Val 15 10 5 1 92 <210> <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> 15 <220>
Synthetic sequence <223> 92 <400>
Lys Lys Tyr Val Lys Val Leu Met His Asp Val Ala Tyr Arg 0 15 10 5 1 93 <210> 15 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 93 <400>
Lys Val Leu Met His Asp Val Ala Tyr Arg Gin Glu Lys Asp Glu 15 10 5 1
94 <210> 15 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 94 <400>
His Asp Val Ala Tyr Arg Gin Glu Lys Asp Glu Asn Lys Trp Thr 10 5 1 95 <210> 15 15 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213>
<220>
Synthetic sequence <223> 95 <400>
Tyr Arg Gin Glu Lys Asp Glu Asn Lys Trp Thr His Val Asn Leu 10 5 1 96 <210> 10 15 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220> 15
Synthetic sequence <223> 96 <400>
Lys Asp Glu Asn Lys Trp Thr His Val Asn Leu Ser Ser Thr Lys 10 5 1 97 <210> 5 15 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220> 10
Synthetic sequence <223> 97 <400>
Lys Trp Thr His Val Asn Leu Ser Ser Thr Lys Leu Thr Leu Leu 15 15 10 5 1 98 <210>
<211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220> 5
Synthetic sequence <223> 98 <400>
Val Asn Leu Ser Ser Thr Lys Leu Thr Leu Leu GIn Arg Lys Leu 10 15 10 5 1 99 <210> 15 <211> 15
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 99 <400>
Ser Thr Lys Leu Thr Leu Leu GIn Arg Lys Leu Gln Pro Ala Ala 5 10 5 1 100 <210> 15 <211> 10
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 15 100 <400>
Thr Leu Leu GIn Arg Lys Leu GIn Pro Ala Ala Met Tyr Glu lle
10 5 1 101 <210> 15 <211> 5
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 10 101 <400>
Arg Lys Leu GIn Pro Ala Ala Met Tyr Glu lle Lys Val Arg Ser 15 10 5 1 15 102 <210> 15 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 5 102 <400>
Pro Ala Ala Met Tyr Glu lle Lys Val Arg Ser lle Pro Asp His 10 5 1 10 103 <210> 15 <211>
PRT <212> 15
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223>
103 <400>
Tyr Glu lle Lys Val Arg Ser lle Pro Asp His Tyr Phe Lys Gly 10 5 1 5 104 <210> 15 <211>
PRT <212> 10
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 15 104 <400>
Val Arg Ser lle Pro Asp His Tyr Phe Lys Gly Phe Trp Ser Glu 15 10 5 1
105 <210> 15 <211>
PRT <212> 5
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 105 <400>
Pro Asp His Tyr Phe Lys Gly Phe Trp Ser Glu Trp Ser Pro Ser 10 5 1 15 106 <210> 15 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence >213< <220>
Synthetic sequence <223> 106 <400>
Phe Lys Gly Phe Trp Ser Glu Trp Ser Pro Ser Tyr Tyr Phe Arg 15 10 5 1 107 <210> <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> 15 <220>
Synthetic sequence <223>
107 <400>
Trp Ser Glu Trp Ser Pro Ser Tyr Tyr Phe Arg Thr Pro Glu lle 15 10 5 1 108 <210> <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> 10 <220>
Synthetic sequence <223> 108 <400> 15
Ser Pro Ser Tyr Tyr Phe Arg Thr Pro Glu lle Asn Asn Ser Ser 15 10 5 1
109 <210> <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> 5 <220>
Synthetic sequence <223> 109 <400> 10
Tyr Phe Arg Thr Pro Glu lle Asn Asn Ser Ser Gly Glu Met Asp 15 10 5 1 15 110 <210> 31 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213>
<220>
Synthetic sequence <223> 110 <400> 5
Lys Cys Leu Asn Phe Arg Lys Leu 60 Glu lle Tyr Phe lle Glu Thr 15 10 5 1
Lys Lys Phe Leu Leu lle Gly Lys Ser Asn lle Cys Val Lys Val 25 20 111 <210> 15 31 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213>
<220>
Synthetic sequence <223> 111 <400>
Tyr Glu lle Lys Val Arg Ser lle Pro Asp His Tyr Phe Lys Gly Phe 10 5 1
Trp Ser Glu Trp Ser Pro Ser Tyr Tyr Phe Arg Thr Pro Glu lle 10 25 20 112 <210> 327 <211> 5
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 112 <400>
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 5 10 5 1
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 25 20 10
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 40 35 15
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu GIn Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 60 55 50
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr 80 75 70 65
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 95 90 85
Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 10 110 105 100
Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 125 120 115 15
Asp Thr Leu Met lle Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 140 135 130
Asp Val Ser GIn Glu Asp Pro Glu Val Gin Phe Asn Trp Tyr Val Asp 160 155 150 145
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe 175 170 165
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His GIn Asp 190 185 180
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 15 205 200 195
Pro Ser Ser lle Glu Lys Thr lle Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg
220 215 210
Glu Pro GIn Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys 240 235 230 225 5
Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 255 250 245 lle Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 270 265 260
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 285 280 275
Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Glu Gly Asn Val Phe Ser 300 295 290
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser 5 320 315 310 305
Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 325 10 113 <210> 459 <211>
PRT <212> 15
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223>
113 <400>
Met Thr lle Leu Gly Thr Thr Phe Gly Met Val Phe Ser Leu Leu 0 15 10 5 1 5
Val Val Ser Gly Glu Ser Gly Tyr Ala Gin Asn Gly Asp Leu Glu Asp 30 25 20
Ala Glu Leu Asp Asp Tyr Ser Phe Ser Cys Tyr Ser GIn Leu Glu Val 45 40 35
Asn Gly Ser Gin His Ser Leu Thr Cys Ala Phe Glu Asp Pro Asp Val 60 55 50
Asn Thr Thr Asn Leu Glu Phe Glu lle Cys Gly Ala Leu Val Glu Val 80 75 70 65
Lys Cys Leu Asn Phe Arg Lys Leu GIn Glu lle Tyr Phe lle Glu Thr 5 95 90 85
Lys Lys Phe Leu Leu lle Gly Lys Ser Asn lle Cys Val Lys Val Gly 110 105 100 10
Glu Lys Ser Leu Thr Cys Lys Lys lle Asp Leu Thr Thr lle Val Lys 125 120 115
Pro Glu Ala Pro Phe Asp Leu Ser Val lle Tyr Arg Glu Gly Ala Asn 140 135 130
Asp Phe Val Val Thr Phe Asn Thr Ser His Leu GIn Lys Lys Tyr Val 160 155 150 145
Lys Val Leu Met His Asp Val Ala Tyr Arg GIn Glu Lys Asp Glu Asn 175 170 165
Lys Trp Thr His Val Asn Leu Ser Ser Thr Lys Leu Thr Leu Leu GIn 0 190 185 180
Arg Lys Leu GIn Pro Ala Ala Met Tyr Glu lle Lys Val Arg Ser lle 205 200 195 15
Pro Asp His Tyr Phe Lys Gly Phe Trp Ser Glu Trp Ser Pro Ser Tyr 220 215 210
Tyr Phe Arg Thr Pro Glu lle Asn Asn Ser Ser Gly Glu Met Asp Pro 240 235 230 225 lle Leu Leu Thr lle Ser lle Leu Ser Phe Phe Ser Val Ala Leu Leu 255 250 245
Val lle Leu Ala Cys Val Leu Trp Lys Lys Arg lle Lys Pro lle Val 270 265 260
Trp Pro Ser Leu Pro Asp His Lys Lys Thr Leu Glu His Leu Cys Lys 5 285 280 275
Lys Pro Arg Lys Asn Leu Asn Val Ser Phe Asn Pro Glu Ser Phe Leu
300 295 290
Asp Cys Gin lle His Arg Val Asp Asp lle Gin Ala Arg Asp Glu Val 320 315 310 305 5
Glu Gly Phe Leu GIn Asp Thr Phe Pro Gln Gin Leu Glu Glu Ser Glu 335 330 325
Lys Gin Arg Leu Gly Gly Asp Val GIn Ser Pro Asn Cys Pro Ser Glu 350 345 340
Asp Val Val lle Thr Pro Glu Ser Phe Gly Arg Asp Ser Ser Leu Thr 365 360 355
Cys Leu Ala Gly Asn Val Ser Ala Cys Asp Ala Pro lle Leu Ser Ser 380 375 370
Ser Arg Ser Leu Asp Cys Arg Glu Ser Gly Lys Asn Gly Pro His Val 5 400 395 390 385
Tyr Gln Asp Leu Leu Leu Ser Leu Gly Thr Thr Asn Ser Thr Leu Pro 415 410 405 10
Pro Pro Phe Ser Leu GIn Ser Gly lle Leu Thr Leu Asn Pro Val Ala 430 425 420
Gln Gly 60 Pro lle Leu Thr Ser Leu Gly Ser Asn GIn Glu Glu Ala 445 440 435
Tyr Val Thr Met Ser Ser Phe Tyr Gln Asn Gin 455 450 114 <210> 219 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 114 <400>
Glu Ser Gly Tyr Ala Gin Asn Gly Asp Leu Glu Asp Ala Glu Leu Asp 15 10 5 1
Asp Tyr Ser Phe Ser Cys Tyr Ser Gin Leu Glu Val Asn Gly Ser 0 30 25 20
His Ser Leu Thr Cys Ala Phe Glu Asp Pro Asp Val Asn Thr Thr Asn 5 45 40 35
Leu Glu Phe Glu lle Cys Gly Ala Leu Val Glu Val Lys Cys Leu Asn 60 55 50 10
Phe Arg Lys Leu GIn Glu lle Tyr Phe lle Glu Thr Lys Lys Phe Leu 80 75 70 65
Leu lle Gly Lys Ser Asn lle Cys Val Lys Val Gly Glu Lys Ser Leu 95 90 85
Thr Cys Lys Lys lle Asp Leu Thr Thr lle Val Lys Pro Glu Ala Pro 110 105 100
Phe Asp Leu Ser Val lle Tyr Arg Glu Gly Ala Asn Asp Phe Val Val 125 120 115
Thr Phe Asn Thr Ser His Leu GIn Lys Lys Tyr Val Lys Val Leu Met 10 140 135 130
His Asp Val Ala Tyr Arg Gln Glu Lys Asp Glu Asn Lys Trp Thr His 160 155 150 145 15
Val Asn Leu Ser Ser Thr Lys Leu Thr Leu Leu GIn Arg Lys Leu Gin 175 170 165
Pro Ala Ala Met Tyr Glu lle Lys Val Arg Ser lle Pro Asp His Tyr 190 185 180
Phe Lys Gly Phe Trp Ser Glu Trp Ser Pro Ser Tyr Tyr Phe Arg Thr 205 200 195
Pro Glu lle Asn Asn Ser Ser Gly Glu Met Asp 215 210 115 <210> 15 7 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213>
<220>
Synthetic sequence <223> 115 <400>
Phe lle Glu Thr Lys Lys Phe 5 1 116 <210> 10 6 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220> 15
Synthetic sequence <223> 116 <400>
Asp Leu Ser Val lle Tyr 1 117 <210> 5 4 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220> 10
Synthetic sequence <223> 117 <400>
Phe Lys Gly Phe 15 1 118 <210>
14 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220> 5
Synthetic sequence <223> 118 <400>
Arg Lys Leu GIn Glu lle Tyr Phe lle Glu Thr Lys Lys Phe 10 5 1 119 <210> 16 <211> 15
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 119 <400>
Asn Phe Arg Lys Leu 60 Glu lle Tyr Phe lle Glu Thr Lys Lys Phe 5 10 5 1 120 <210> 17 <211> 10
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 15 120 <400>
Asp Leu Ser Val lle Tyr Arg Glu Gly Ala Asn Asp Phe Val Val Thr
15 10 5 1
Phe 121 <210> 13 <211>
PRT <212> 10
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 15 121 <400>
Val Val Thr Phe Asn Thr Ser His Leu 0 Lys Lys Tyr 5 1
122 <210> 15 <211>
PRT <212> 5
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 122 <400>
Glu lle Lys Val Arg Ser lle Pro Asp His Tyr Phe Lys Gly Phe 10 5 1 15 123 <210> 16 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence >213< <220>
Synthetic sequence <223> 123 <400>
Glu lle Lys Val Arg Ser lle Pro Asp His Tyr Phe Lys Gly Phe Trp 15 10 5 1 124 <210> 19 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> 15 <220>
Synthetic sequence <223>
124 <400>
Glu lle Lys Val Arg Ser lle Pro Asp His Tyr Phe Lys Gly Phe Trp 15 10 5 1
Ser Glu Trp 125 <210> 23 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 125 <400>
Glu lle Lys Val Arg Ser lle Pro Asp His Tyr Phe Lys Gly Phe Trp 15 10 5 1
Ser Glu Trp Ser Pro Ser Tyr 126 <210> 10 8 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220> 15
Synthetic sequence <223> 126 <400>
Phe Lys Gly Phe Trp Ser Glu Trp 1 127 <210> 5 23 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220> 10
Synthetic sequence <223> 127 <400> lle Tyr Phe lle Glu Thr Lys Lys Phe Leu Leu lle Gly Lys Ser Asn 5 10 5 1 lle Cys Val Lys Val Gly Glu
128 <210> 28 <211> 5
PRT <212>
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 10 128 <400>
Lys Ser Leu Thr Cys Lys Lys lle Asp Leu Thr Thr lle Val Lys Pro 10 5 1 15
Glu Ala Pro Phe Asp Leu Ser Val lle Tyr Arg Glu 20
129 <210> 19 <211>
PRT <212> 5
Artificial Sequence <213> <220>
Synthetic sequence <223> 129 <400>
Leu Thr Thr lle Val Lys Pro Glu Ala Pro Phe Asp Leu Ser Val lle 10 5 1 15
Tyr Arg Glu
130 <210> 11 >211<
PRT <212>
Artificial Sequence <213> 5 <220>
Synthetic sequence <223> 130 <400> 10
Ala Pro Phe Asp Leu Ser Val lle Tyr Arg Glu 5 1 131 <210> 27 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213>
<220>
Synthetic sequence <223> 131 <400> 5
Asn Lys Trp Thr His Val Asn Leu Ser Ser Thr Lys Leu Thr Leu Leu 15 10 5 1
Gln Arg Lys Leu GIn Pro Ala Ala Met Tyr Glu 20 132 <210> 15 17 <211>
PRT <212>
Artificial Sequence <213>
<220>
Synthetic sequence <223> 132 <400> lle Lys Val Arg Ser lle Pro Asp His Tyr Phe Lys Gly Phe Trp Ser 10 5 1
Glu

Claims (1)

  1. عناصر الحماية 1- جسم مضاد معزول ‎isolated antibody‏ أو شظية ‎fragment‏ رابطة لمولد الضد والتي ترتبط بشكل خاص مع 00127 بشري؛ حيث أن الجسم المضاد ‎antibody‏ المذكور أو الشظية ‎fragment‏ الرابطة لمولد الضد ‎die‏ تشتمل على سلسلة ‎VH‏ تشتمل على متواليات الحمض الأميني ‎amino acid sequences‏ التالية: ‎٠ 5‏ 110041/ متوالية بهوية رقم: 10: ‎VHCDR2 ٠‏ متوالية بهوية رقم: 12؛ ‎VHCDR3 ٠‏ متوالية بهوية رقم: 14 أو متوالية بهوية رقم 48؛ وسلسلة ‎VE‏ تشتمل على متواليات الحمض الأميني ‎amino acid sequences‏ التالية: ‎٠‏ 0041ا/ متوالية بهوية رقم: 16 أو متوالية بهوية رقم 50؛ ‎1/002٠ 0‏ متوالية ‎digg‏ رقم: 18 أو متوالية بهوية رقم 52؛ ‎٠‏ 010143 ا/ متوالية بهوية رقم: 20. 2- الجسم المضاد المعزول ‎isolated antibody‏ أو الشظية ‎fragment‏ الرابطة لمولد الضد منه طبقاً لعنصر الحماية 1 والذي يكون عبارة عن جسم مضاد خيمري أو جسم مضاد متوافق مع البشر أو جسم مضاد مزال منه ‎.deimmunized antibody deli)‏ 3- الجسم المضاد ‎antibody‏ المعزل أو الشظية ‎fragment‏ الرابطة لمولد الضد منه طبقاً لعنصر الحماية 1 والتي تشتمل على 6 متواليات ‎CDR‏ التي تتكون من: ‎VHCDRI‏ متوالية بهوية رقم: 10, ‎VHCDR2‏ متوالية بهوية رقم: 12, ‎VHCDR3‏ متوالية بهوية رقم: 48 ‎VLCDR1 0‏ متوالية بهوية رقم: 50, ‎VLCDR2‏ متوالية بهوية رقم: 52 و ‎VLCDR3‏ متوالية بهوية رقم: 20. 4- الجسم المضاد ‎antibody‏ المعزل أو الشظية ‎fragment‏ الرابطة لمولد الضد ‎die‏ طبقاً لعنصر الحماية 1؛ ‎Cus‏ أن الجسم المضاد ‎antibody‏ أو الشظية ‎fragment‏ الرابطة لمولد 5 الضد منه تكون عبارة عن مضاد لإشارة ‎IL-TR‏ المستحثة بواسطة 7-اا.
    5- الجسم المضاد المعزول ‎isolated antibody‏ أو الشظية ‎fragment‏ الرابطة لمولد الضد منه طبقاً لعنصر الحماية 1 والتي لا تزيد من النضج الخاص بالخلايا التغضنية ‎cells‏ ‏0 بواسطة الليمفويويتين السدوي الصعتري ‎Thymic Stromal Lymphopoietin‏
    ‎.(TSLP)‏ ‏5 ‏6- الجسم المضاد المعزول ‎isolated antibody‏ أو الشظية ‎fragment‏ الرابطة ‎Algal‏ الضد طبقاً لعنصر الحماية 1؛ التي تحث المعالجة الداخلية ل 60127 في الخلايا التي تمت حضانتها مع الجسم المضاد ‎antibody‏ أو الشظية ‎fragment‏ الرابطة لمولد الضد ‎die‏ بالمقارنة مع الخلايا التي تمت حضانئتها في غياب الجسم المضاد ‎antibody‏ المذكور أو الشظية 0 800©01/لرابطة لمولد الضد منها. 7- الجسم المضاد ‎antibody‏ أو الشظية ‎fragment‏ الرابطة لمولد الضد ‎die‏ طبقاً لعنصر الحماية 1؛ حيث أن وجود ‎IL7‏ والجسم المضاد ‎antibody‏ أو الشظية ‎fragment‏ الرابطة لمولد الضد منه على تعبير سطح الخلية من 60127 لا يقلل بشكل كبير من و/أو المعالجة الداخلية ل 00127 التي يتم تثبيطها بالمقارنة مع الخلايا التي تمت حضانتها مع إنتروليوكين ‎(IL-7) Tinterleukin‏ وفي غياب الجسم المضاد ‎antibody‏ المذكور أو الشظية ‎fragment‏ ‏الرابطة لمولد الضد منها. 8- الجسم المضاد المعزول ‎isolated antibody‏ أو الشظية ‎fragment‏ الرابطة لمولد الضد ‎aie 20‏ طبقاً لعنصر الحماية 1؛ والذي يشتمل على ‎(i)‏ سلسلة ثقيلة تشتمل على المتوالية بهوية رقم 22» والمتوالية بهوية رقم 36( والمتوالية بهوية رقم 8 أو المتوالية بهوية رقم 40؛ و ‎(i i)‏ سلسلة خفيفة تشتمل على المتوالية بهوية رقم 24( والمتوالية بهوية رقم 42 والمتوالية بهوية رقم 44 أو المتوالية بهوية رقم 46.
    9- الجسم المضاد المعزول ‎isolated antibody‏ أو الشظية ‎fragment‏ الرابطة لمولد الضد منه طبقاً لعنصر الحماية 1؛ والذي يشتمل على ‎(i)‏ سلسلة ثقيلة تشتمل على المتوالية بهوية رقم 22؛ والمتوالية بهوية رقم 2 والمتوالية بهوية رقم 6 أو المتوالية بهوية رقم 54؛ و ‎(i) 5‏ سلسلة خفيفة تشتمل على المتوالية بهوية رقم 4( أو المتوالية بهوية رقم 56. 10— جزيء حمض نووي ‎nucleic acid molecule‏ ناتج عودة الارتباط معزول يشتمل على جزيء حمض نووي ‎nucleic acid molecule‏ يشفر سلسلة ‎VH‏ و/أو سلسلة ‎VL‏ من الجسم المضاد ‎antibody‏ أو الشظية ‎fragment‏ الرابطة لمولد الضد طبقاً لعنصر الحماية 1. ‏10 ‏1- تركيبة صيدلانية تشتمل على جسم مضاد معزول ‎antibody‏ 15018160 أو شظية 21 رابطة لمولد الضد منه طبقاً لأي من عنصر الحماية 1 أو جزيء حمض نووي ‎acid molecule‏ 1001616 0معزول ناتج عودة الارتباط طبقاً لعنصر الحماية 10. ‏5 12- التركيبة الصيدلانية طبقاً لعنصر الحماية 11والتي تشتمل ‎Load‏ على مادة ناقلة ومكون اختياري فعال ومختلف وبصفة خاصة مرب إضافي يشتمل على تأثير تعديل مناعي بصفة خاصة في الخلايا التي تتضمن مرض مناعة ذاتية ‎autoimmune disease‏ أو مرض حساسية ‎acute ‏مثل اللوكيميا اللمفاوية الحادة‎ leukemia ‏أو لوكيميا‎ allergic disease cancer disease ‏ومرض سرطاني‎ lymphoma ‏أو اللمفوما‎ lymphoblastic leukemia ‏20 أو عدوي فيروسية حادة ‎chronic viral infection‏ أو أمراض التهابية ‎inflammatory‏ ‏5 أو مرض خاص بنقل الأعضاء ‎transplantation‏ أو مرض تنفسي ‎respiratory‏
    ‎.diseases‏ ‏3- دواء أو تركيبة صيدلانية تشتمل على الجسم المضاد ‎antibody‏ المعزول أو الشظية ‎dba lifragment 5‏ لمولد الضد منه طبقاً لعنصر الحماية 1؛ والتي تشتمل على جزيء طبقا لعنصر الحماية 10 لمعالجة مريض وبصفة خاصة مريض بشري في حاجة للزراعة و/أو, حول
    عملية الزراعة و/أو بداخل عملية الزراعة في مربض» و/أو ‎ane‏ يتعرض لخطورة مرض وبصفة خاصة مرض مناعة ذاتية ‎autoimmune disease‏ مثل التهاب المفاصل الروماتويدي ‎rheumatoid arthritis‏ ؛ التصلب المتعدد ‎Sully multiple sclerosis‏ 01806185 من النوع الأول والتهاب الغدة الدرقية المتعلق بمرض السكر ‎autoimmune thyroiditis‏ والذئبة ‎lupus‏ أو ‎inflammatory disease gill (aye 5‏ مثل مرض الأمعاء الالتهابية ‎inflammatory‏
    ‎(IBD) bowel disease‏ والتهاب الدماغ والنخاع ‎encephalomyelitis‏ ومرض حساسية ‎allergic disease‏ أو مرض سرطان ‎cancer disease‏ أو مرض تنفسى ‎respiratory‏ ‎disease‏ أو مرض مرتبط بالزراعة ‎.disease related to transplantation‏
    ‏0 14- دواء أو تركيبة صيدلانية تشتمل على الجسم المضاد ‎antibody‏ أو الشظية ‎fragment‏ ‏الرابطة لمولد الضد ‎aie‏ أو محاكي الجسم المضاد ‎antibody‏ الرابط لمولد الضد طبقاً لعنصر الحماية 1 أو جزيء الحمض النووي ‎nucleic acid molecule‏ طبقاً لعنصر الحماية 10 فى شكل مكون صيدلاني فعال خاص لعلاج مرض في توليفة علاج أو نظام علاجي إضافي في مريض فى حاجة لذلك.
    Vo RY Hor 0
    : ‏.سم" م لاسر‎ 3 EN LET ٍ \ ‏ض‎ ‎: ‏حا‎ ‎- 3 Be Now [OE We : Wa ‏ال إٍ امير‎ 8 : ‏ل‎ ‏دي‎ AA dl Ree 1 11) ‏خلا ٍْ م‎ ll 0 1 2 PL ‏مز‎ : 11 ‏الل‎ RA WL Wy Torn EH WL PAY Yo od We \ 1 : ‏نا‎ X : YN 3 x ‏ل‎ ‏مود لجل متسيس صقن‎ pa ae \ 2 + ¥en Yana oe wan ‏ا 7 ام‎ IS Ta ٍ ‏(نانوجم/مل)‎ TR ‏متك‎
    Yrs fe he, ges ~~ a FY a ‏احج‎ : 3 eg hd : 1 ¥ Pe] 1 1 DU 1 \ > | 1 \ + | : \ 7° |, ١ TS ‏ا‎ | 3 5 sll ‏أ‎ \ ‏صقرن‎ 4 RP ‏اد‎ 8 ox SME ‏لع‎ ‎A Yu You Yana ‏وديم‎ wy ‏(نانوجم/مل)‎ 478 Slane 3 PEE 8 A 8 : A at Er Roos TR he ‏ال‎ ‎io 8 X ‏لا‎ ‎=f % % 5 3 0, 3 ٍ 8 > . 32 ‏صقر‎ I oon tu SE ‏حو‎ Yew You ee ‏.و‎ os {ofan £03 (4378 ‏مضا‎ ‏الشكل. ؟‎
    = je ~ jo x 23 * > = 6 3 30000 ® « ‏ان‎ g . + * ‏نم © انم‎ & $ Boon * wy ® ed TPE ee Fe ‏ا ب‎ H ‏اسل‎ ‎} ‏ل‎ i a XR OW © 3% 8 1 : 5 ‏خخ ي؟‎ ¥ § ] ¥ 8 : ‏#؟* : #5 ا‎ 3 i : E ¥ OR 8 5 RS * ke BS 3 ‏تي‎ “8 “8 3X ha 5 es 2 FOR 5 8 3 ¥ A EH 2 Fy 8 3 3 3 i i 3 RE SE + “8 3 = 58 ES ‏؟ 5 _؟‎ * § i i 5 ‏5ج ؟‎ 8 i 3 8 i i 3 3 “8 8 x a 3 3 ¥ OX “8 3 ¥ 3 3 8 3 5 > x + xX 3 RY, w ‏ب‎ ‎§ 8 3 : 3 + ‏؟‎ OX 5 § By 5 8 3 2 © By 3 3 N be 8 : fd bY ¥ + ¥ 2 : IT 3 N “8 8 8 = 3 + ‏بن‎ ‎FY § ¥ N ¥ 8 : 1 ‏ا‎ ; 0 1 3 0% 3 3 1 i 3 H ‏؟‎ XN ¥ ¥ 3X : 5 8 >
    4 x. > “8 ¥ 3 2 pS 3 : 3 : 3 by E 3 £03 ® 8 + ¥ 8 8 3 FY 0 3 i : 3 & ‏؟‎ ¥ 3 y ¥ + By H * ¥ ¥ ¥ ¥ BS 2 } * ‏خخ‎ 8 + 3 N 8 3 5 < BS ¥ 3 3 2 3 3 ¥ 0% ¥ 3 3 3 gS 5 + iy ‏؟‎ 31 RN § i i y * EINE ‏ا 0 : ¥ © ؟‎ © 8 & ¥ X 3 8 3 ES x on 2 2 I ¥ “8 8 3 + b FI EE 3 ; 0 ‏ما‎ ‎ed 8 x 8 » 3 5 x 3 TR ¥ § ¥ ¥ bo 3 3 rR : 8 X : 8 ky EES 8 ¥ 3 ¥ 8 i 3 ES & 3 ¥ ¥ 2 2 5 RI ¥ 3 3 3 3 H + ‏مب م‎ ¥ w «8 RS 2 ‏لج‎ 5 8 + 8 2 2 * 03F Ry & + 3 ES i 3 FR “8 8 ¥ 3 Ww ES 3 FF & 3 3 3 ES 8 } >“ 8 BS 5 83 3 ES 3 ete) J x 3X ¥ 3 8 gs BS by : * © 8 8 3 § : te es pe § 3 8 RN R N : i 3 ed a 23 3 8 a x 3 i fd 2? ~ + SR 5 8 5 : + 8 8 8 8 ¥ 3 3 i 2 J TT 3% 8 “8 ¥ “8 = : + BE 8 8 “8 8 8 3 8 8 * = 3 3 ‏ا‎ BS 3 8 i 8 3 8 ©“ ‏ب‎ ¥ ¥ ¥ i BS > 3 3 & 3 3} ph : 5 J res Tx 5 ¥ 3 1 8 : k ® 03 ¥ 3 3} : By £3 3 oa N ¥ 3 ¥ ¥ Xx § + 3 >“ ‏ا‎ © N ¥ 8 : ks : N + x 5 RY xX ¥ x 3 “8 ‏؟‎ by BS 3 3 w BS 3 ‏د‎ © ¥ 3 3 ¥ 2 8 3 3 ¥ 3 } N 5 ‏سح‎ ‎3 3 § ¥ 3 ¥ 5 3 . rf 3 Ny N 3 3g 3 } © | - 3 N ¥ 3 3 N YOR § ¥ ¥ 3 > 8 3 3 3 5 ¥ + 8 BS 3 8 8 5 “8 3 3 = 3 i 8 EY ¥ ¥ x 3 A 5 ocd 8 2 1 3 3 ki ‏احا‎ A A Se ‏و‎ Re 5 3 3 - ‏0خ ؟‎ >“ NX ES 2 BS ‏؟‎ = 1 5 5 1 ‏3خ‎ 3 5 ٍ i ‏؟ ؟‎ 5 0X 3 3 5 E § we ES NX 8 x RX 3 BS pS 5 ‏ل‎ bY x EY 4 3 gS 3 LE ‏5خ‎ : 8 i 3 EX xX : : 1 5 : 3 4 ‏ا 5خ 5خ‎ % % 3 % 8 <8 8 EY Sc 8 5
    0. EY 3 Xe We Ne, th 3 ¥ ‏ال“‎ 4 >“ > 8: 3 3 ES 8 : Xe 3 1 By 3 LN ‏الاي كي‎ ‏ا‎ SN Ne. RN Xe Nee 1 bs 3 ET ‏إن الب لخي اليا اليا‎ i 3 ‏الل‎ Ne ‏ب‎ . Mg . Mig 0 Sg, CT B + ‏يك ا ب ا الي‎ SE bd + ‏اا‎ Micon NN ‏الما امم‎ BK +) EY ed ‏ام‎ NA Ea ‏ال‎ ‎a ‏ا ل‎ R SBOE EERE A TR 3 ‏م‎ ‎8 ‎8 ‎3 ‎3 ‎x ‎§ ‎3 ‎} ‎by ‎3 ‎> ‎i ‏م نا لدت لت ال لا لا ات ال ا لمي ات ال ا ل ل‎ Ra x #8 ‏مو ا ا‎ I. 2 = Ce a © Oy ‏د‎ ‎7 * - WE = ha: H { 0 " 8 Say & ®
    ‎i‏ ‎Y,8‏ ‏توا 8 = بد لا ‎of‏ مرك ل { 4 § تي * ‎ou 8 0 :‏ ‎Tov if a‏ & ‎j‏ م م ‎pur‏ ‏1 4 مي م ‎al‏ ‎a # fF ; :‏ 5 ا ب ‎rd‏ 3 ّ| 3 ااا تسو لتر ‎ES RY‏ ب 34 ‎١ Yo Yee Yeas‏ صقر التركيز (نانوجم/مل) ب ف ا 2 ادا ِ
    7 .3 دا تا ا ل # # | 15 4 / ]2 ‎LY ّْ 3 1‏ = ‎RTL V4‏ ‎wp 00 Ad‏ ‎glx |‏ ’ )4 ا اا امس 1 * وااو كح ‎Yaad‏ جوع م رقا هيل و التركيز (نانوجم/مل) الشكل ؟
    ‏وا‎ ‏يا بج خلا‎ ge i 8 £5 : 3 SAAR ‏وو‎ ‎= = : Ait
    : . YEE ‏ع‎ ‎% | Sn $v ‏ل‎ ‎3 RE ‏ا‎ ‎Yau a ‏سستسيس الس لات الح 4 كر‎ a - : ERR | ‏تريخ‎ ‎JEN ¥ 4 LL THLR 3 1 ‏اا‎ *y EERE : i Kh : RRR
    3. ْ: ‏ا‎ ‎Tq 3 1 ; q URES : FE : ‏ا‎ FR. 3 : Fa i . + Sama 1 ‏ديل ل‎ : a ENG (١ ‏د ماح يل‎ LE saa 2H | BB = 3 ْ:ٍ ‏ا ال‎ Boaters RR : - ~~ | BB ‏ا فرك‎ ‏اانا‎ a pone LPS TELE & WAN ‏الشكل‎ ae : Se, - And | <> = | 8 Pps #8 - ‏ب“‎ | X od ‏ا‎ . ‏ا‎ : EY ; ‏رع ل‎ \ i | 1 1 i! | 3 x fron Lo ' ‏ذا‎ ‏صقر‎ 3 1 ‏الجسم المضاد(ميكر وجم/مل)‎ SOS A)
    & ‏ا‎ Yeu 0 Si 1 0 0 ‏ا‎ ‎0 ‏ا‎ ‎0 i EEE iN \ ‏د‎ ‏د وه‎ ‏ا‎ i a py ‏م ا‎ 3 1 oo 2 § i = = ARES pena a : KX 5 5K NE Rea CERES EERE ° NE Rea CERES EERE ha NE Rea CERES EERE . ‏ا‎ Rene a EE fe EEE EE GE at: BB BB BB hla 0 BR BB Ld iE Ba ‏لخت‎ Boa : NK KE BK NE Rea CERES EERE ‏ا‎ a uss Snes THERES WW Ww = = k ; od & B Gd ‏م ا اي‎ 7 ‏#ى اي‎ 4 © A * X LR 8 | _ REE ee ‏ا‎ ‎7 yg 4 1] 1 ٍ 3 ® EY cam a ‏ا‎ ‎4 Be BB ==! 1 § § an! BE ‏ع‎ B he 2 BB 8B : 3 Sy RRR Ss Rees on ٍ ‏جا‎ A 4, oF & 8 a ey ‏ف‎ 8 : 0 + WF ‏ا‎ 4 x) ‏أ‎ 8 I< aad 1
    ‏ال‎ ‎= Te pea pve 1 NL S&F we ‏اا‎ ‎x § ; <> ‏ا‎ iF ‏بذ‎ ‎4 ‏رام‎ ‎a ‏ف‎ ‎ya 3 3 A hy § wf alg SF 3 > A 3 ‏اا‎ ‎SI : ٍ ‏سخ‎ : id es ‏ووويسوسو سوسا‎ La ‏وي يسيس‎ ‏ا‎ ‎0 LES 3 0 ‏«طقهده (نانوجم/بمل)‎ 3 HE A ‏الا ع‎ 11 i % £8 SE EEE oq Ard a. : ‏وس‎ 3 + ': 1 1 ‏ب‎ ِ : : i Fann : ‏ا أ 1 ايسا‎ : = : i 8 als 3 3 3 2 4 ' Sy 3 0 5 : ‏بك ل‎ ' i CI ْ, : 3 Ent 1 i Ya ٍ ‏ا‎ ‏سل‎ 5 ‏صفر‎ ١ YY OE 2 +١ 0# ‏الزمن (بالأيام)‎ -
    Yi. 3 CL . edd | : : eed ٠٠١سم‎ ‏ا‎ COR T 8 “ 1 ; AY : ; ; EY EE EEE #0 = BE CHIEY. + ‏خا للحا 0 دعم‎ 4 ‏ا ان‎ Fg | 1 : : SHE CN wl & 2 g : . ERT Ngee <3 Rv ‏ص“‎ § 8 : i : ‏يي‎ * : : 0 ٍ 0 “٠ 8 ١ 8 ٍ ٍ
    = . IRIN, SS SU WEA RSV ‏م ؟‎ fe +! ٠ ‏الزمن (بالأيام)‎ REE ‏دا ميا‎ ‏الشكل ؟‎
    ا 3 ار بدي 56 ‎ERR Ga FAR CATaGC‏ ‎rege GTGOAS > CTATTAC ae‏ ا ‎ESCO TARGTE GTGRAD ALI‏ ‎AGTGAG] ACCATTAQT‏ اسم يوق ا ‎AGT‏ ا ‎DNA EE FRR nid TY SL CAGT ore‏ ل ‎nA SEAT la GOTTOADT‏ 0 ض 1 6 = ‎at T&S 4 sven pup ATO‏ با تح ا من ا 8ن 8 ب" ‎A & La TON SAR SIRS a pn‏ 14 تاج يح وحم ‎ey i = YE‏ 0 ‎TOT 5‏ تفاط لايم 3031 ‎GOAGTOT‏ اي ا ماك 1-37 ‎GAG‏ ا قفتا اياي : 3 باجا اا ومومفوموت قا 7 ا الاي اناق اضيا ‎SAAT SALTRGET‏ ال لا ا ‎SOBETEG‏ ‎EAA AY CCAGTCT 1‏ نم باق الخ جم ‎AA‏ 0 ا ل ا اباي ‎A ie 5‏ اش 8 1 ‎AA‏ ب ‎i ASE Tod A a EL ER SEAT‏ ب ‎Su 1‏ سا ال 0 15 : ‎TRAE A PPE COTE‏ ‎TGCARATS its‏ ل ‎ATT SLATE‏ ا ا نان م ٍ لماجي ال ‎Ri‏ ما مي ريدت ويا ‎La ETON SAAD‏ ا 0 ‎ae haa SGHAG 1 CAKBAD Goa SHE‏ كيت ري ‎REE AY PES CREE SREY pe fon Lea‏ اا £59 جر ‎A ly A‏ 0 ا ‎Ee‏ ‎a‏ لم ام ا ني م ‎AE ١‏ ¥ " ا لح ا 3" واج جو وو ‎pm 8 TE‏ ‎LE HR HIE :‏ 8 تفقوا لخر ‎SGV‏ —_ ا ‎EYRE EIA RACH]‏ ا ان 00 ‎SGEA‏ لحي ام ‎oN,‏ ا حي ا حم ‎PR £3 SEEN pes‏ ‎RECA‏ ا مجح جو عمف ا ا مك ‎PRE SS SEO‏ ‎antag‏ لا ا ب } ‎OTOGAS, DEROEEN Ee FRIAR Eppa AGE‏ ‎(ERE SADAOEG 4 30 . cea‏ ‎ARLE RT EDR } 010 isl‏ اي اما ا ل ,15 ما ‎Saga‏ معت ا جيه وت ض اتيك م ات د ‎STOAGIRAD TEATTAL‏ ‎on‏ ا وودم اوها يي خا عونا خا ا تلات ‎RAR SRAGII/G HY EN Sen‏ 5 ا ‎TR a‏ م ىس ‎fe fo Lia TTY‏ ‎TAADTAL 0 ul 066 0 1 AA‏ ‎SR i GIGS Rua :‏ 500 5307 مع ‎TITAAL OSIONa‏ ‎en coonco‏ = 7 يج جنم ‎3d STRAIN MBE pA LHQSRNOY ss‏ مو ‎ps HARE STR‏ ا 3 ‎bo‏ امجح ‎DOERR‏ ‎FA : acc >‏ ب 5 ‎BURGER RAR Le: ranged‏ ‎REGOCERY secioaigesy DI fotos COTO‏ 1000 لمجو د ‎ERE‏ ‎"rs IEA Ea Na JOANIE 1 1 9 0 RENE EE 4 on GROG Eo]‏ ‎Sena 0‏ : ومتوموتمعي ‎SURGING‏ = 3 5 لماعت واوا ‎At ac sag:‏ 8 1 ا ا ع 5 ‎HINGE Neils‏ ‎Le‏ و0530 £2 31330 ان 00 ‎BREE‏ 0 ا ض مو : ‎bey SOIGHSR me io.‏ ا 3 ا ‎cae : caRaIey HERS Tes in‏ ‎ks SAY Pe 60‏ 2 1 ل 1 ‎Frey‏ ماما الال ا اا ام يا ا ل 8 > ‎iat‏ 1 ووو و1100 تعس 0 ‎gt PERN TI 3 :‏ لح ‎RAN euch ae‏ ستعتج 7035 30-1 ‎a‏ ‎ng Aral SIRO GOH Stoning : CEODRAY Was iid‏ يي دا و 001 بوتاو عضت ونمو ومعدتا 500000 مخ حت ‎glgacaa‏ ‎gl‏ ماوع م0 0 ومموغادماوة موا ليم 00 موتوااماة ‎CRORE Con SRE ak SATE JAR - tg : atc = —‏ ‎se acc on 8 a SPIO N DRC YEE Tare EI ISIE ENE -‏ 5 ‎re‏ 0 3 و1008 ع0 ‎ve‏ ا ا ‎LEER ETE TES REE 6808‏ يعممتوه ذال ‎Eoin‏ ‎IRE 7‏ 2 ل 3 اممو ‎PRS TENE (DH‏ ل ‎sie EA HORSES Keer ates tbe: 5 coi‏ ‎REO ERS] HIGIAGE bd 0 aa‏ 10 مم حاتي 5 ‎IEA SCORN TALON + Son cae‏ ا د 3 3 0 ا 08 ‎ft Ano‏ وحمت ‎os‏ ‏ا وم عات ل مما 3303 ‎WY‏ ‎a 8 0‏ > سات لوو ‎١‏ 0 ا ب ل مامت ‎ES‏ أ ‎JRE IES‏ ال ‎A‏ مفو 00325 يجا ‎IEEE EI L‏ ‎Sil Paton AE 0" &‏ متمساو قي ‎soclges 1 ًٍْ 8 i on‏ لفقت يا 7000 1 ‎cost ui‏ ا و1030 000 0 ‎BY x SCHR nat CHOIR 1] | B 1‏ شعي ‎Wi SIHEOHNT 3 SATEEN‏ ا م ‎gos Re { ha BREE‏ = لاد اح مستا مسو حي حر ا 1 ‎EIT‏ 8% وخر لوح اح 7 0 ‎os‏ ل ‎CARATS aria SAA TAREE‏ 8م 7 مواممماوق 08 1 ‎Wik A‏ ‎TES LARS z‏ نيا لض ا لمجت ب ب يح ‎eg‏ لج اي الا ‎fed EEN‏ ل 3 ‎pes‏ ‏ال بلقا ل لحا واي ا 5 ‎CLKAPH‏ ‏ا ملسا ‎PR soon a id CET Lali eR ge AGATE CSTOTAY‏ ل نا ا ا 8 1 ‎oN CARCATTS‏ - ا ‎i» Y OT STCAAS‏ & الا لان ب ؟ ام ‎ERT SLA wn SE TN 3 AEE ETN‏ 4 ص لقي ‎AAR‏ ااي ارقا ا حا 7 قربا اياي ‎ENR‏ 5 ٍ : = م 5 ‎NANT HEE: EE AG NE C‏ خضي تي اج ا ‎AEE ALY‏ ‎A 0 ,‏ بوتوي اق ‎Sal‏ ايا ‎fe‏ ا ا وي ا ل اي ‎CAS Sema 3 I Ca ! PN SEE DOTEEAG 0 cotta‏ خا مت ‎ian LER‏ ماقا ‎SASL‏ يج القت لد ‎ToC: A a ex‏ 5 2 ‎NER SRAGTLE SUATRAL TT TOA GEHACCAA pamcigucict is‏ ‎ri SARS wpataact‏ راجا ألم ‎nd Asoc Phy‏ 2 7 — : و8 ‎Soni A‏ تب ‎SEEN ACY‏ 0 حر وحم ا 1 ‎OA‏ ‎ih Acc os‏ يا اا ‎TOA GEGGTOL‏ ‎aoc‏ مااع و1035 ‎i TATTRES AGONY STTOOG‏ ‎ym sagan‏ وه ما ‎LATATTG AAG aT‏ ‎is‏ 013 وممماجموا ‎TCTs : i : TEOGOTO RE CRCERigng‏ = ض مسد ‎a,‏ ا 0 ات 0 ‎Jal‏ ‎ne‏ عومد مج و1030 ‎CTOTCARD 111.051 chino‏ ‎os‏ : : مح 5 85 1 1-3 متتس يه للا ‎CTT,‏ ‏ممتمومو ‎os SAG Hf SERRE SERN‏ مانا لضا لكا 4 يا ا ‎ios Ei DOOR Ka Seat IRR TRES he‏ : ٍ ‎Coca RA STATE ISCAS Sean‏ ‎Ld GEER ™ FERENTIAL JIRGLECEY 4‏ م 8 مم01 و ‎LAIR sacHatat SRG 9 —‏ - يي ‎LA Afsacth CRGURANE‏ ل وموتمجوعمان1 ‎BERRehel acts SGRFLAgY‏ ض ب" و0161 موه ‎See fas‏ 0 0 ل 3 ا 5م ل ل ا 3 ‎en‏ ‎LRG GEY tangas afta WPREGLEWRATE hasten 0 5‏ ‎=X FMDAREES AER REANR hi oF‏ لماو 0 .0 ‎i‏ ‏م 1 ‎TAR REST WS Se‏ بالق : يج ا مجمجمعوة > و مي نري بالف بن لاخر ل 2 ‎Bp‏ ولصو لص 0 اللاي بز لانيل ‎BRAS ASEH AG‏ ‎esgyasly‏ لاح ‎Sagotioaansy I3ZAY ue WERE TLR TIA GRIST ONY Givin‏ ‎Sa‏ ممعي الح جاب فاع أ لابين ل حي دا با اجا ‎ALFRQO MERI)‏ ل جح أب ا رج لقح تيا ا مايا ‎SEAT Fae‏ ‎IVE PIE RW Re ery 8‏ اد ‎Typed‏ : ا سس ‎es‏ ض ‎SRY TAT GA IES on eds wait 0‏ 8“ ‎WH 5 hd 1751550 hifpauissghes hone ing 8 A‏ ‎rei |‏ | ا ا خا خبطي 1 ‎LES‏ 0 0 ااي ‎Es ed Het 8 4‏ ا ‎a a ¥ FOATISEMESE FINO Pyle‏ 0 ‎hedhdidodantpe io rir -‏ اليتون ينا يحض ‎pe a 0‏ وخ وا ‎Fy i He HIRING‏ يأ ماي 5 يحاض مس تج ‎Cor‏ ائجال مرج 1 مرجع المتر8 5 ‎Sis Li EYE ERENT ) 1 a‏ دي ‎NCR LRSRCHESR‏ ‎EAMES HE Hinting‏ “نان و رصاح ‎See‏ ‎go‏ 0 صر جاتو بايا ‎kh‏ ‏وا باتع 705 : ‎itt‏ ادبا لل ‎witvbtlegh‏ ‏ل ل ‎ve 8 - : g FRC SANE FLL fr SERTRES‏ ; 5 ‎enim‏ 1 روني ست تس ‎os 5 ro GIGTELE RR id REIT‏ ‎ate‏ 8 ا ا 3 8 ‎bm SASLGETVY‏ ‎heyy‏ ل 7 > 37 " ‎A‏ ‎HEREIN FEDWASYRC Sets] ssitiska‏ ‎a ow NF Labi ody 19st 3‏ ان ‎oF‏ ‎as 5‏ 0 ماقا 5 2 ض ‎YEU SEARLE‏ 0 تاد قنينا
    ‎DNA .‏ - )32289( اشام اا ‎GOGOTAUAGCTOOTORASTLTGEEGRAGGCUTASTHUASLUTGRAGRAY‏ ‎CLCTEASROTOTONTETRCAGTOTCASRAT TOACTO TAR TRALTATTACAY‏ ‎GEOOUTEEETOOUEOUARGO TOUS AAGAAGHETOTERAATERETOECAALG‏ اتات اتات فضي ‎ATTRACT RLARTRGGL TALAAL TIAL TAT CEA AT ERR‏ ‎TTCACTATCTOCAGAGATSATGUAAARAGRAGLUTCT TOUT OOARKTGATLA‏ ‎ETOTOAAMTOTOAGBACALOACOAD TTS TTACTE TUOSAGALLGSTETOIS‏ فضي نت فضت خا مقا ‎CACACTATGE TTT IRACTAUTTTCAT TACT‏ 0ب امموعوومه 0130001610 وو عد قات وا مانا اما قاض وججامعمووايع واو ومعواوو ع عع م0 290300709101001 امم موعععي العغعاه اوتاه ووه عامعاع لمعهعاعا جاع ومعه عق واو ولغوا تي3 ‎ACE REINCCAR DRED‏ وا عمق وات لمع تع فو معو ووتنع تو متهم ‎GEAR‏ ‏وا و ع عم را بعت طعت لوطتو وله امومع وف 22520910030001 مموومجو مم10 :785035301000650 وموفاجعو ونع 993091039519101 9و واي ماعو عاو وا وعم و وو اوم وعووعؤووة ومع ومع لو ممع والسشالحواق متوعع مفو عمق خف عو وعهه 073001330901500 3ع وثفغاة متقعم ممم و مضع مهار رو جاع عع 2 ومع هعم بعل وو مقع رم هماع تف تومه وجاتمعم ومومع ممما العجوه 335333073732073 وممتعموو7 3990501300 330913171 ات ‎uaa intone ty‏ وووودة وواووت وود وول نع 889001010013085 تمهفو واوا لاجو هو ومع وها عع جع عه وماك ورت وتمعواد وتوععاة ‎VL-OLEAPRA - DMA‏ ‎DASATCCAQATOASASARTOTOCAGETTCOOTETOTOOATITOTGEGAGRAS‏ ‎ACTOTCADCATCGAATOTOSAACSADTOAGGACAT TYAS AT GE TTTARUAT‏ فقوي ‎TATAG‏ اانا اب اماما غنات لفقم بات ماق تاها اها عا محتقت جوج ‎CANGG TTCAG TOGOAR‏ جم عمج موتح ‎ATT ACA‏ اوج ‎ACAGTATT CTUTOAAGATAAACAG CUT ROAST TTRAABATE‏ ‎TOTO TAA AGTAT TACOATTATECACTOREETTCORT TOT BAALCARGCY‏ تناع عع وا عات لمعم ومع لعا مستت اوا اميه ود ووان ‎SIGAGATOAMACO Gacy‏ ممتموجاعع 0 001910010500001 نمو عع بعمعود2ه0 500109133039393 لطع وعم موا وما وت ودع لمعمو 730001000790001 2003 وهتواود ومو وجوه لات موه مصعم وعم ومامود ولعوووة بروتين .)52289( 1654ب جيك ع ‎TY‏ ري يق لخم لتم خم ‎IAW‏ او لطت اعت لا ‎GER‏ جو ‎AVOIVE GSO‏ بجاح ليجع ا ‎GO EVAN TVS Sst‏ خخ ‎CAR AIS HY EP DYE‏ 7 الا ع5 065517 050 بالمماة هخ ل ع1 بتاع اج عب يعوا ليوج بانج در ل يعوا جه بجي بم موا تايا واج تع ممما م أ مج أعريا عو و ورا إلتك الفا ع بعوا يها رح أو و جروأ بجه ريا معصرمم لترتي لوخت معاي أ ا يتا كم عي ا اع وضع بجعا تناك ناه لجاع ل اعبة طاو اماج ليوطاي امن اهلع ا وراد أ مه يوام وت زعي أ جعي لاجرل ااي موا الموج 05 بروتين - ‎VL-CLKARPA‏ ‏التق بن أت عجار ‎NGEAWY‏ 715675 تج اققارت تق 7 ارثا ‎EMR‏ أ م ع وعم ولربع جوع ا فيه عم لفرت 5707 تا بتاعا اع عا و جوع فكوا أ أو جاع لوقعم ا بمبخهاوتن اوه ضعت بات يقتا ل ا ل ا اف الشكل ١؟‏
    ‏متو اليات هخ‎ ‏رجو الخرى‎ Uniprot POISST): ‏بجع عع صانق افخائ 5155 5ت اطع عق الاكمخ‎ TVS WNSGALTSGYNTER ‏لطع امع بنط بج القعنا نط0 05551510171 05551751557117 الث‎ THTE ‏ايخ ارلا )بر مع برك ابا ركنت ع 07131157 فاط لطع ل لوعي و باق ممم‎ ‏كي بنج مك عل لل ابت نوات‎ TYRVVSVITVLHODWLNGREYROR VS ‏نف ع ل‎ PAM 559005017550 51171001/570115 FYPSDIAVEWESNGO ‏و جني افق اضوع بيعم 509175013701551 راطم لايم يرط‎ KSLSLSPGE ‏الشرى‎ pens (Uniprot PO18ES) AS TH GRE ‏غات‎ SRS TEES TAALG CL VE DYE PE PYTVS WINS GALTSGUHTERA LOSS GLY SLES TY RSE NEG TOTY TONY DHK PSN TRVOKTVERKCOVECPR ‏اا ا ا ل ا‎ DPEVOFNWYVDGVE YHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVITYVHODWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTIS ‏كع ا مضع فوا‎ REE M TKN OVS TE LV G EY PS ‏اق جيه‎ ES NG OPE NN VR TE PIAL ‏5ط‎ DSS RRLY SKLTV DKS RW OO GN VES SYMHEALHNHYTOKSLS LSPGK ‏واو صم الشرى‎ 01 511100571557555 011777117571567 5074 PUSS GLY ELAS TV PS SSLG TE TY TON VD HE PSN TRV DNR VESKYGRECRSCR APEFLGGPS VFL PPD TLMISRTPEV TOW DVS QE DFE VIF NWYVDGVE VHN AK TEPREEOF NS TYRVVSVITVLRGDWLNGREVKORVS NEGEPSSIER TIS KARGOPREPOVY TURES OE EMT ENO VSLTC LYK GRY PSDIAVEWESNG OPEN 107177101715055 EY SRT DRS R WOE GNVESCEVMMNEALHNNYTOXSLS LSLGY 0 Co Felipe (Uniprot P0750) NI3BI ‏المستخدم فى‎ AETTAPSYY PLARG TALKS NSM TLE EVIE YE PERV TV TWHNS GALSSGVHTER AVLOSGLY TLTS SY TRIS TWRS QTV TONVAHPASS TKVER IG VPRNCGGDOKR CH TGS EVE SVR PR PR VL TTL PRY TODS ‏بياج يوج ايح جوع ب باع عط م0‎ HAO REPEC ENS TRROVEEL PI HOD WL NGRTERCKVTRAASPS PIER TIS KP EGR TOV PHY TMS PTE EE MT 01157570 GRY ‏بعصي رت بع ل نومع‎ NYE TPFTRAD TOCSY FLY SKLNVEK EW OOBNTETOSVE HEGLHNHHTEKSL SHEPGK 0 ‏الشكل‎
    13 a ©“ 5 - #8 ‏ثَّ‎ 3 F ¥ ry 5 7 ‏اما‎ 7 - i ‏وجي‎ a SR 2 rid ١ : ‏مر‎ 0 AEE BF ‏ل‎ ‎5 + 4 » g / 8 ‏ا م‎ 7 & 7 0 1 ‏با‎ ¥ va A ٍ &F 3 a = all § wp = : hE ‏ول أ‎ EJ 3 gw % LIE % EE ‏التركيز(ناتوجم)‎ ‎vo i 3 ‏يك‎ > i) ERS Be SR ‏نا‎ ‎2 ‏لا لخت‎ ‏ا‎ EL RR ‏و‎ ‎& ¥ A ‏ا‎ = 8 it KY : ky 3 ‏ا‎ ‎8 i ek AY ‏ص‎ i AY 0 0 oo, Eon A 3 ‏ف‎ 4 at ‏ل‎ 2 : 8 i 5% Te 3 2 ٌْ 8 ‏د ا‎ > ! ha 0 LA SE ‏التركيز (نانوجمبمل)‎ ‏ب‎ ‎Va ‎fe “hy 1 0 A 0 1 #8 ,' ‏وبا‎ ‎8 3 % ; 8 ‏مج‎ 1 ‏ا‎ 1 0 & A ‏ب‎ i 1 73 \ 1 ‏أ‎ ‏بزاع‎ 1 \ 7 ‏إ‎ 1 EK i} eg i 1 es 8 3 Ya Ya Yor Yow an ‏مضاد 438 (نانوجم/مل)‎ YE 5 ‏الي‎
    ‏ل‎ ٍ
    I. ‏كسب‎ 4 3 | ‏“تبن‎ ١ 2 a i ew A , ‏7غ‎ 7 7 ٍ 7 / 4 BN "4 y att 7 / 4 rT. 1 va 1 : ‏حم‎ ;
    ٠. ‏الول‎ mY or wo, LI Vay Yai, Yee, ‏التركيز (ناتوجم/مل)‎ 3 & : jo Ral i A EN 5 4, 1 E SRR In ‏ة‎ y | ‏ل‎ ‎Er FEE aE =F OE = pes I : FO}
    CU. ١] 1 ١ ‏ا‎ ‎= i 1 BR § 3B 8 i 1 BR § 8 J ER 3 3 Fe: fF % & OF J ‏ب‎ Me N ‏ل ال‎ Re {M&S 4 § & ‏ب‎
    ‎3. | EN dv] B = ‏ب‎ ‎1 ‏ا‎ 8 3 Ln ‏ا‎
    ‎3... | [RTP 2 ‏و3‎ |B CR 0 . oy EE Poy EE SoA 3 11181] 7 in \ oy 0 ‏ا‎ 0 = ‏بن‎ | 11m iim ‏ال‎ 0 _F .
    1 . =i 0 SF P1181] 8 ‏ا 1 صف‎ LN 8 ‏سس ب‎ 2 1 8 ‏متو مط‎ Hid 8 HAL ‏3م28‎ ‎YUEN
    % we E
    : . CTE She I hid ‏ا‎ — E 3 ‏أ‎ Sy Po Rh. 4 ; ‏ا[ سبح‎ a Goa, > a] 2 ‏صقر‎ * £ 3 A Ye ‏الزمن (بالآيام) ف‎ ‏ا‎ Yeon - Ar wo 1 4 3 8 8 ‏ال سر‎ ‏ل‎ 5 : ‏اا اجا لل‎ : 2 2 id 3 1 Me pe 3 ‏اا‎ i ‏يح‎ AN, - , og Yaw ‏لاا ا ل‎ = ‏ل ل ا‎ = LAN I E \ od Sy od : : ‏ملا‎ ‎Re ‎= ‏ا | 31 :0( ب صقر‎ 1# # {alas} ‏الزمن‎ ‏الخ‎ < SH all ‏الدم‎ ‎WE ow & + ‏يج‎ ‏"ينأ 5 ب‎ 03 ‏ب‎ A I f J & FF 3 ‏ا م 1 وا‎ ‏م‎ A BE J aN = & Fi Se ne & ‏ا ل ا 5 شر‎ Pa] = A Cl 8 FA = 3 ‏م مساو‎ : IE ‏ا اوتا‎ *ِ £ k Hy 3 ‏.مايا‎ ‎EN wi fm Vax ey a = of a. vg xv 4 34 1 SEE, 1 8 ‏ال‎ ‏اسيو ين ٍ نيزم كز‎ ea at ‏عبن‎ 3 i 0 ‏العقد اللمفاوية‎ Tk Ys a ١ ‏م‎ ‎J = oo 0 01 1 ‏ا برع‎ Si ei Ft | ‏ل‎ ‏م‎ 2 2 ‏أ‎ ‏ا صف‎ | - - ‏عيبن انيرم سكل‎ Fra = a ; ٠ ‏الشكل‎ i ad+ 0457+ 3 EE H +8 % 3 A rrr) i =) vor A Ee Lo TE & fond : a 7 : = ‏ا إٍْ‎ = | La H A wo a non 1 ‏ف ف‎ 4 Ta a ‏ا اله‎ BB ‏و ال‎ ‏ا ا‎ | EEE SE 88 ‏ان‎ 0 > ae ‏ا د" ا‎ Ere: | ‏ا 1 5 - عا‎ ١ 3 wl EEE EE ١ 3 i CERES EEE EEA a ‏ص ال ل‎ i Ca ‏لأف ل‎ BB 3 y igi a ١ ‏ا ا‎ Foe Sse I CE EEE 1 0 0 ‏د‎ | EEE SE 4: i EE CIEE ‏تيت‎ AE I Hy ROE Ec at 2 : 0 1 ‏اس ا‎ pe} 1 ‏سنك‎ ay £03 ‘i Fi} 8.7 T 7 ‏ال‎ . 1 {ike if a, BE 3 {nf ‏لما [نانوجم‎ Lo bd ‏د لل‎ Ta 3 8 ‏ا زم اا‎ i 1 ‏حب‎ ‏ف‎ Ad] wm A ‏أل‎ ‎85 ‏ف‎ i 3 -" eh eo BS 2 0 § 4 a | ‏ام 1 لا يوجد ما‎ A Yu i 10 i 1 EY op 4 ad ed Es EA 1 > 3 5 3, A. ¥ * 3 3 1 ‏اا ل‎ Sa
    * . ‏5ك‎ FERRE REE ‘ + ‏حي‎ : 8 lo ‏ل‎ 1: 5 i wa ‏م 3 4 ملا جيذ وك +3 3 5> وك‎ Yan FN SN ‏ا وجم/رمل)‎ iy CN ‏جم زه‎ Ee of ‏تت 3 سنك ولب جم‎ ٠3 ‏الشكل‎
    ‏اسبوعين‎ ‏مق‎ wa 3 £ : ‏ل حم‎ - 2 y EN vy | F wd 8 3 | ‏نو‎ ~ = by % - ْ 8 | + ad 888 ‏ا 1 ب ا‎ B® ‏ل‎ ْ q #8 - of A+ 4 000 ‏سم‎ 0" 5 0| 0 4 ْ 0 Yl © ‏الى‎ 0 i | ; O ‏المقارنة‎ N13B2 ‏المقاانة‎ W13B2 Ye AKAN
    I Oh EE ‏د الل«‎ ‏مشا‎ ‎i bi J ‏ض‎ Pp 5 4 : i 2 hk 0 AY 01 ‏ا ام 1 رُ * ل‎ XL fg. ‏ل‎ - ٠ 1 2 §/ ‏سي ذا لل‎ od 1 oh | Aon] 1 | IESE # 18 0 ‏كد م‎ ‏اح اذ‎ We ‏أ‎ 0" A Haass bd LT Ne El LEE ‏هت‎ ١ ‏له ا‎ 3 ‏الزمن (بالأيام)‎ ‏ب‎ AR vod 5 EEL CE 0 | 8 1 Ri @ “Tad 4 TT Lv ٍْ : Ly = | § - 1 ‏ىل‎ ‎i A + 4 ‏موا ل صر‎ ةزمم‎ yoy YY fos 0# #4 ٠ ‏الزمن (بالأيام»‎ ؟١ ‏الشكل‎
    د كج ؟ ‎YYA > _ 1!‏ 3 ‎cH 0‏ ‎BSS,‏ | م لل م 2 م نب 3 ‎SE‏ . م 4 0 بي الي 7؟ يا 8 لض 7 7 4 ‎A *‏ 5 0 4 ‎N & a‏ 3 اوددر ‎IE‏ ما 1 ‎ea 2 _ ‘a‏ الزمن (بالأيام) الشكل ‎yy‏
    ‎QVOLVESGGGLVKPGGSLRISCAVSGETLSDY YMAWIRQAPG‏ ‎(GLEWVSTISASGLRTHPDSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNS‏ ‎LRAEDTAVYYCARBESAHYGENYEDVWGQGTIVTVSSASTKGP‏ ‎SYEPLAPCSRSTSESTAALGCIVKDYEPEPYTVSWNSGALTSGY‏ ‎HIFPAVIOSSEIYSIOOVV IVES LG TKIYTONVRHEPONTRY‏ ‎DKRVESKYGRPCPPCPAREELGGPSYELEPPKPKDTLMISRIPE‏ ‏احج برع مع ع ع يرق ل وا نيع باج اا يبع و باع مو عو اا لاجلا ‎YRVVSVITVEHODWINGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQ‏ ‎PREPQVYTLPPSQEEMTENQVSITCLVKGFYPSDIAVEWESNG‏ ‎OPENNYKTTPPYLDSDGSFRLYSRETVDKSRWQEGNVESCSY‏ ‎MHEALHNHYTQRSLELSPGRY‏
    YY ‏الشكل‎
    EIVMTQSPATLSVSPGERATLSCRI - OLLAWYQOKPEOA PRLLIYSANTLHIGIPARFSGSGSGTEFTLTISSLASEDFAVY YC QYYDYRLAFGGGTKVEIKTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVC LLNNEYPREAKVOWKVDNALQSGNSQESVIEQDSKDSTYSLS STETLSKADYEKHKVYACEVTHOGLSSPYTKSFNRGEC? veo
    ‏اموس ا‎ ‏ا‎ ‎: 3 i Hos 3 2 ‏سبق‎ ‎3 5 . 1 5 "3 ‏ض‎ ‎1 rc RT 1 pee ‏تح‎ ‎Ey : : 5 ‏سك‎ ‎: Los § RA =» Lt hall Fp, 8 ~ 00 ‏الحا‎ 3 Yo 8 0% ‏ض‎ 3 ‏صقر‎ Tor ‏فج‎ Toa RY Yas ‏الزمن(بالأيام)‎ ‎ve ‏الشكل‎
    = 1 0 3 3 ابا ‎Fed +‏ سلسم ‎ARE‏ ‏ل ححيييب "0 ‎J‏ ‏ب ‎Boi‏ اال ا 3 الي اد § } ‎sop‏ 1 ب ‎TE‏ 4 ال تسلاسيساا. ضش ‎aa‏ س-_- ل ‎pa‏ ‎a EN th Rete] ae Sh‏ قي ّ| مقارنة ‎Nias MYR‏ 43 د ج ‎ba ™‏ ‎x | i pe soon NA.‏ مس ا ل ا سل يا ‎se .‏ 0 : ل ‎EERE‏ ا زج اا ‎hl‏ 1 11 ‎SE‏ ‏ب ‎ES‏ ملي د ا مسلية . حش
    ‎a. 2‏ 4% 2 مقارنة ‎Coat py‏ ‎YI KAN‏
    نواد لود ليوات اا ارات ‎TR‏ أ ري الح بسي ‎I‏ الاين دوا ‎RT‏ ار لاد زج لل سيان عدر ارا اانا نوز كدان الوا يان .لباه كزان لاا ا الجا" ا ا اا ال ا لابخ حا لان لج ةما ‎EER HIRO EEE SE LE SA Nt NEN SN I SI PER Bh SE‏ ااا ‎a‏ ل ‎A LSE‏ اد ‎TE EINE cE ORES da‏ يد يع ‎oa‏ باعي عدي رض ‎A AR‏ لوا كو ‎MRS FAR‏ ع ا ا ال ‎CRN ey ET ER EY REE A YS A AI A EE EY ET YR ry ne na ny‏ خم ‎pep tn‏ ا ‎he SS‏ ل ‎AR BROMINE Ne JR SE Wek‏ احا ‎A Ee SO SE Rr Ce SRE WE‏ ا ‎A‏ ل ابد اباد ال ‎IE FS‏ ل ‎I‏ كرات لاا ل ا لكر اليا ‎RE‏ اا ا ‎Foren ENE Um ny‏
    ل أ ل نم ل ا ‎OE J UR SE‏ ل ل ‎PRI A A FE SA RENEE JAR‏ الت رم ا لد ا ال ا اجات ال ات اح ا ا ا
    ا د ا ا ا لد الماع ارجا أ دان الما لكي ‎NN YN‏ ال الا ا ا ال تسو يا اج ع ‎EA NR‏ إلا اح اا ال د عي ل ا الي الا ال ا ‎OTR F 1 BE * TE SERRE Ce PT‏ را لاي اا ‎ERG DANN RE Me BA‏ لحت ‎LR SUES dn Rae LEA LR AN RE AN RA‏ ا ا ا ‎a RL Ha Sa‏ ا ‎SER hE‏ أي ل ‎an Sn oR MR Se‏ الاب ‎I Ae aging ann WN RR NEV‏ ار نيا ‎at Ar‏ ونه ‎ran‏ ‎ES YIN CC ET OY REESE AEST as‏ اا زع د ان مد ‎RHE AR Sede EPO I ie 8 & Fy‏ لا ا ب ل اليا اك ‎YN‏ الخ ا ااا ل حر ا ا را ا ‎TT‏ لنت رز ‎AUN‏ ايا 5 ‎٠‏ اميم ‎FUT EAS PERT‏ تل ‎XW‏ انك كانه ليا قل م تاقد الل كل الم اما ‎AW FE‏ للك كان ‎We ARIE‏ انك ا لاقي ل ا الح ل ‎TT ANY Y‏ جا ات ‎RN‏ حيس الاج ‎TY‏ بي نر ادي الاي او و ‎FREY‏ ست وجا المج اا اجا لجراي ا ل د احا را ادحا احاح ا ‎IE AL‏ ا لا الال ‎ME JI‏ او ا 75 ‎ER EE‏ امد الخ عاد لد ا ار ايا أ
    ان ا ل كد ا ‎RR‏ ال ‎A‏ اه ا ا ا ا ‎LENE‏ ان ات ال ل د ا ال اع كا ا ‎IRSA‏ ا ا ا ال ا ‎a‏ ‎Ts ao]‏ ا ا اجن ل تر جد لان اال حر ايه ال ا ال اد ا ار حا ري أن لض و ا ند ا ا اد ال ‎Sn‏ 1 د ل ا ا ‎SOAS SR TH‏ و ان ال لاي ا لاا حك ‎REE‏ سا ل ارا ندا له المج ‎ARAMA ERASING NT Asad bo gd‏ ل ‎Ce‏ ياد ‎SUN‏ ا رحا ‎ANd, I LEER AUR ANE RE FREER]‏ ا ‎I I ay‏ لات ‎EN TAY I YY TEAL ON TN EE‏ ا ان ‎ANY SSSR IN RA EN NTI TRAN ET‏
    FA ETE ‏بك نكا‎ CIS ‏؟ !د مك أن ال‎ RU FEE st SO CE SUR UE RNY SN RR | ‏م‎ ‎ACESS DW SAE ON LEN WG BEER BET WEE Qs I LANE ‏كت‎ dade TE aN TNE ETT RLY TT EY ‏رد‎ FE TITY IN ‏اد اعت‎ TT TE ET ST A TY INET © ETS a TEE a TE ny ‏الا‎ Ck ST TET ‏ا » لل عام ار‎ LEE ‏اج‎ I ‏اا‎ RL ‏اا‎ ER ‏للد دل‎ A REA
    لغ ة ‎EE‏ لد مايا > بدت لتحي ل مات تح كئة ل لماه ابد اله لله الم اح لكا د“ لايك تتح لمتكا دن الاي له انب نات اليس ات لم اكت ترايت ل ل نت اا اع لاي ا لت ئلع انما ات اسن ‎ye‏ لاا ريج ارا اح ا ا
    ل ا اا ان لمات ا اا اد اله ل ا لا ا ا ا ‎BE‏ 1 ا اج اح ا ا ل ا ‎NG‏ ل د الا ا ل ل ا ‎EUG‏ ا ‎EQ HT OV‏ شاك اد رن ‎TR AREAL WAG‏ ا ارات ا ل ‎ad‏ ا ا ان حي ‎SR‏ ابا ‎WER I‏ اديه لاحي احص الى لح ‎NG IR SO‏ انح حدر نل لحي اتا ‎UE Se a Se‏ اسار ‎SRW‏ عل اح جا ا الحا جح الج ال اد لابخ !اد لح جد رتب ليميا اك ماد دبك اعد مد آي يد اي تدا اسه ‎WL‏ ةا الي لب تك يج ‎LE ARQ ad Kad lai‏ لاجد ‎RAINED UAE RAR ed SERA TNE wd JF DRA RAY‏ بحل داب ا الكشم تتام ‎vn ev Apes‏ جرت ‎SAY TR vey‏ لهب ‎a pe‏ اع ‎NN ANN‏ الل ا لحا جع لطع ايحم ‎Ney ve‏ احج ‎PCE Se SR‏ ا لت ا الا ل ا ا ا ا ل ل ا ا لل ل ع ا ا ل 5 ‎FUNTRYTT‏
    ا اا الاح ال ا اج ‎SERN SHURE J‏ ان ‎NH: SUI SIREN SS JSR‏ كد ااا ا و اي اي اش ا وي ال ‎SE‏ ا ل ‎RS EJ‏ ا الدج جار اح ‎EN‏
    خا“ 8 > ‎CR)‏ اح ل ‎SRN NE‏ الا ال ‎A WW 3p SX‏ ‎ES KS FREE]‏ i 1 3 ¥ bul % Ro : Fs : 1 1 : : ١ ‏اا ا ا كبلودالتون‎ 0 ‏ا ا‎ ‏ا ا | "© ل‎ ag 0 TL A
    ‏ل.ل‎ - -- hCDAR2 وأ ا ا ا ل ا 4 - ب ‎RODA2Y‏ ا ‎Ae we‏ Shama Rae TH. veer BL ‏اد‎ ا FY § I< i 5 i {
    لاله الهيلة السعودية الملضية الفكرية ا ‎Sued Authority for intallentual Property‏ ‎RE‏ .¥ + \ ا 0 § 8 ‎Ss o‏ + < م ‎SNE‏ اج > عي كي الج ‎TE I UN BE Ca‏ ‎a‏ ةا ‎ww‏ جيثة > ‎Ld Ed H Ed - 2 Ld‏ وذلك بشرط تسديد المقابل المالي السنوي للبراءة وعدم بطلانها ‎of‏ سقوطها لمخالفتها ع لأي من أحكام نظام براءات الاختراع والتصميمات التخطيطية للدارات المتكاملة والأصناف ع النباتية والنماذج الصناعية أو لائحته التنفيذية. ‎Ad‏ ‏صادرة عن + ب ب ‎٠.‏ ب الهيئة السعودية للملكية الفكرية > > > فهذا ص ب ‎101١‏ .| لريا ‎1*١ v=‏ ؛ المملكة | لعربية | لسعودية ‎SAIP@SAIP.GOV.SA‏
SA516380455A 2014-06-10 2016-12-08 أجسام مضادة موجهة لمضادة cd127 SA516380455B1 (ar)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201462010117P 2014-06-10 2014-06-10
EP15305078.6A EP2955196A1 (en) 2014-06-10 2015-01-23 Antibodies directed against CD127
PCT/EP2015/062993 WO2015189302A1 (en) 2014-06-10 2015-06-10 Antibodies directed against cd127

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SA516380455B1 true SA516380455B1 (ar) 2020-12-22

Family

ID=52434718

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SA516380455A SA516380455B1 (ar) 2014-06-10 2016-12-08 أجسام مضادة موجهة لمضادة cd127

Country Status (26)

Country Link
US (3) US10428152B2 (ar)
EP (2) EP2955196A1 (ar)
JP (2) JP7324565B2 (ar)
KR (1) KR102612930B1 (ar)
CN (1) CN106715471B (ar)
AP (1) AP2016009599A0 (ar)
AU (1) AU2015273532C1 (ar)
BR (1) BR112016028755B1 (ar)
CA (1) CA2950823A1 (ar)
CL (1) CL2016003172A1 (ar)
CR (1) CR20160576A (ar)
EA (1) EA039303B1 (ar)
HK (1) HK1231487A1 (ar)
IL (1) IL249449B (ar)
MA (1) MA40202A (ar)
MX (1) MX2016016236A (ar)
MY (1) MY190889A (ar)
NZ (1) NZ726932A (ar)
PE (1) PE20170324A1 (ar)
PH (1) PH12016502445A1 (ar)
RU (1) RU2734076C2 (ar)
SA (1) SA516380455B1 (ar)
SG (1) SG11201610036PA (ar)
TN (1) TN2016000528A1 (ar)
UA (1) UA125366C2 (ar)
WO (1) WO2015189302A1 (ar)

Families Citing this family (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MA45488A (fr) 2015-10-22 2018-08-29 Juno Therapeutics Gmbh Procédés, kits et appareil de culture de cellules
JP7053479B2 (ja) * 2016-02-29 2022-04-12 オセ イムノセラピューティクス ＩＬ７受容体細胞外ドメインα鎖に対する非拮抗性抗体及び癌治療におけるそれらの使用
CN110392695B (zh) * 2016-12-09 2021-02-02 Ose免疫疗法 针对cd127的抗体和多肽
EP3676292A1 (en) * 2017-08-29 2020-07-08 OSE Immunotherapeutics Method and preparation for sorting out t effector cells using anti-cd127 antibodies for applications in cell therapy
CN110117325B (zh) * 2018-03-09 2023-06-20 重庆市畜牧科学院 一种猪cd127多肽及其编码基因和应用
KR20230128134A (ko) 2019-01-22 2023-09-01 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 Il-7r 알파 서브유닛에 대한 항체 및 이의 용도
WO2020232247A1 (en) 2019-05-14 2020-11-19 Provention Bio, Inc. Methods and compositions for preventing type 1 diabetes
CA3144566A1 (en) 2019-06-21 2020-12-24 Sorriso Pharmaceuticals, Inc. Polypeptides
AU2020295767A1 (en) 2019-06-21 2022-02-17 Sorriso Pharmaceuticals, Inc. Compositions
WO2020254827A1 (en) * 2019-06-21 2020-12-24 Vhsquared Limited Polypeptides
CN110894237B (zh) * 2019-12-05 2021-08-03 山东省分析测试中心 抗cd127的抗体、分泌该抗体的细胞株及其制备方法和应用
WO2021222227A1 (en) * 2020-04-27 2021-11-04 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Chimeric antigen receptors targeting cd127 and use thereof
BR112022025381A2 (pt) 2020-06-11 2023-01-24 Provention Bio Inc Métodos e composições para prevenir diabetes tipo 1
US20220389104A1 (en) 2021-05-28 2022-12-08 Ose Immunotherapeutics Method for Treating CD127-Positive Cancers by Administering an Anti-CD127 Agent
WO2023232826A1 (en) 2022-05-30 2023-12-07 Ose Immunotherapeutics Biomarkers of il7r modulator activity
WO2024146955A1 (en) 2023-01-06 2024-07-11 Twain Therapeutics Pte. Ltd. Antigen-binding molecules

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE19742706B4 (de) 1997-09-26 2013-07-25 Pieris Proteolab Ag Lipocalinmuteine
AU2007266450A1 (en) 2006-05-31 2007-12-06 The Regents Of The University Of California CD127 expression inversely correlates with FoxP3 and suppressive function of CD4+ Tregs
EP1930342B1 (en) 2006-12-04 2012-01-25 Institut Pasteur OB-fold used as scaffold for engineering new specific binders
UY32038A (es) 2008-08-08 2010-03-26 Glaxo Wellcome Mfg Pte Ltd Inmunoblobulinas anti-cd127 y sus usos
WO2010085643A1 (en) 2009-01-22 2010-07-29 University Of Miami Targeting il-7 signaling as a therapy for multiple sclerosis and other il-7 signaling dependent disorders
EA023700B1 (ru) 2010-01-28 2016-07-29 Глаксо Груп Лимитед Cd127-связывающие белки
SA114360064B1 (ar) * 2010-02-24 2016-01-05 رينات نيوروساينس كوربوريشن طرق وأجسام مضادة معارضة ضد مستقبل il-7
EP2583980A1 (en) 2011-10-19 2013-04-24 Effimune Antibodies directed against the alpha chain of IL7 receptor - their use for the preparation of drug candidates
JP7053479B2 (ja) 2016-02-29 2022-04-12 オセ イムノセラピューティクス ＩＬ７受容体細胞外ドメインα鎖に対する非拮抗性抗体及び癌治療におけるそれらの使用

Also Published As

Publication number Publication date
RU2016151265A (ru) 2018-07-18
RU2016151265A3 (ar) 2019-02-08
MX2016016236A (es) 2017-07-05
EA201692460A1 (ru) 2017-04-28
BR112016028755B1 (pt) 2024-01-16
US20170129959A1 (en) 2017-05-11
AU2015273532C1 (en) 2021-07-15
RU2734076C2 (ru) 2020-10-12
EP3155014A1 (en) 2017-04-19
JP7324565B2 (ja) 2023-08-10
MY190889A (en) 2022-05-17
WO2015189302A1 (en) 2015-12-17
TN2016000528A1 (en) 2018-04-04
MA40202A (fr) 2017-04-19
US20230340133A1 (en) 2023-10-26
NZ726932A (en) 2022-02-25
CN106715471A (zh) 2017-05-24
UA125366C2 (uk) 2022-03-02
CN106715471B (zh) 2021-04-09
HK1231487A1 (zh) 2017-12-22
JP2017522903A (ja) 2017-08-17
PE20170324A1 (es) 2017-04-01
BR112016028755A2 (pt) 2017-11-14
AU2015273532B2 (en) 2021-03-04
CA2950823A1 (en) 2015-12-17
AU2015273532A1 (en) 2016-12-22
SG11201610036PA (en) 2016-12-29
US11440964B2 (en) 2022-09-13
KR20170019417A (ko) 2017-02-21
KR102612930B1 (ko) 2023-12-13
CR20160576A (es) 2017-05-08
US10428152B2 (en) 2019-10-01
JP2021184731A (ja) 2021-12-09
IL249449B (en) 2020-06-30
PH12016502445A1 (en) 2017-03-06
AP2016009599A0 (en) 2016-11-30
EP2955196A1 (en) 2015-12-16
IL249449A0 (en) 2017-02-28
US20190382497A1 (en) 2019-12-19
EA039303B1 (ru) 2022-01-11
CL2016003172A1 (es) 2017-07-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SA516380455B1 (ar) أجسام مضادة موجهة لمضادة cd127
AU2020200981B2 (en) Multispecific antibodies, multispecific activatable antibodies and methods of using the same
AU2021203876A1 (en) Anti-CD3 antibodies, activatable anti-CD3 antibodies, multispecific anti-CD3 antibodies, multispecific activatable anti-CD3 antibodies, and methods of using the same
KR102444717B1 (ko) 인간화 항-pacap 항체 및 그의 용도
CN107922496B (zh) IL2Rβ/通用γ链抗体
KR102255099B1 (ko) 2 이상의 인플루엔자 ａ 바이러스 중화 결합 분자를 포함하는 조성물
CN111954680B (zh) IL2Rβ/共同γ链抗体
CN103608040B (zh) 结合b7‑h1和pd‑1的抗体和其他分子
KR101527297B1 (ko) 4-1ｂｂ 결합 분자
KR101919170B1 (ko) 중화 항-ccl20 항체
CN110914299A (zh) 抗icos促效剂抗体和其用途
CN110062766A (zh) 抗lag-3抗体及组合物
CN107206072A (zh) T细胞活化性双特异性抗原结合分子CD3 ABD叶酸受体1(FolR1)和PD‑1轴结合拮抗剂的组合疗法
CN108137677A (zh) 抗pacap抗体及其用途
CN108025066A (zh) 人源化亲和力成熟的抗FcRn抗体
AU2016283344B2 (en) Fusion protein containing BDNF
SA516370515B1 (ar) أجسام مضادة ضد cxcr4 ومتقارنات جسم مضاد- عقار
SA519401906B1 (ar) أجسام مضادة ومتعددات ببتيد موجهة ضد cd127
CN109641037A (zh) 抗psma抗体及其用途
KR20210084426A (ko) 항-btn3a 항체 및 암 또는 감염성 질환의 치료에서 이들의 용도
US20240010721A1 (en) Ror1-targeting antibody or antigen-binding fragment thereof, preparation method therefor, and application thereof
CN110869392A (zh) 用抗gitr激动性抗体治疗癌症
KR20210005007A (ko) 항-il-27 항체 및 이의 용도
KR20210018807A (ko) 인간-유래 항-(폴리-ga) 디펩타이드 반복 (dpr) 항체
KR20210104064A (ko) 항-il-27 항체 및 그의 용도