SA08290697B1 - أجسام مضادة ضد gdf8 واستخداماتها - Google Patents
أجسام مضادة ضد gdf8 واستخداماتها Download PDFInfo
- Publication number
- SA08290697B1 SA08290697B1 SA8290697A SA08290697A SA08290697B1 SA 08290697 B1 SA08290697 B1 SA 08290697B1 SA 8290697 A SA8290697 A SA 8290697A SA 08290697 A SA08290697 A SA 08290697A SA 08290697 B1 SA08290697 B1 SA 08290697B1
- Authority
- SA
- Saudi Arabia
- Prior art keywords
- antibody
- gdf
- gdf8
- binding
- arrangement
- Prior art date
Links
- 101100228739 Danio rerio mstnb gene Proteins 0.000 title description 2
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 claims abstract description 88
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 claims abstract description 88
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 claims abstract description 88
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 claims abstract description 68
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 claims abstract description 21
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 20
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 15
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 claims abstract description 10
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 claims abstract description 10
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 claims abstract description 10
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims abstract description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 189
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 177
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 140
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 134
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 133
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 133
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 131
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims description 116
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims description 79
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 54
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 52
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 51
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 51
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 50
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 41
- 102100040898 Growth/differentiation factor 11 Human genes 0.000 claims description 25
- 201000006938 muscular dystrophy Diseases 0.000 claims description 24
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 22
- 101000893545 Homo sapiens Growth/differentiation factor 11 Proteins 0.000 claims description 21
- 108010056852 Myostatin Proteins 0.000 claims description 20
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 claims description 20
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 20
- 208000015380 nutritional deficiency disease Diseases 0.000 claims description 20
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 20
- 208000002720 Malnutrition Diseases 0.000 claims description 19
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims description 18
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims description 18
- 230000003387 muscular Effects 0.000 claims description 18
- 235000000824 malnutrition Nutrition 0.000 claims description 17
- 230000001071 malnutrition Effects 0.000 claims description 17
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 16
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 claims description 14
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 claims description 13
- 206010065687 Bone loss Diseases 0.000 claims description 12
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 claims description 11
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 claims description 9
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 claims description 9
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 claims description 9
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 claims description 9
- 208000029725 Metabolic bone disease Diseases 0.000 claims description 8
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 8
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 8
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 8
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims description 8
- 230000001629 suppression Effects 0.000 claims description 8
- 208000014674 injury Diseases 0.000 claims description 7
- 201000000585 muscular atrophy Diseases 0.000 claims description 7
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 claims description 7
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 6
- 208000026062 Tissue disease Diseases 0.000 claims description 6
- 230000008736 traumatic injury Effects 0.000 claims description 6
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 claims description 5
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims description 5
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 claims description 5
- 230000002028 premature Effects 0.000 claims description 5
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 claims description 5
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 claims description 4
- 208000001145 Metabolic Syndrome Diseases 0.000 claims description 4
- 206010049088 Osteopenia Diseases 0.000 claims description 4
- 208000005770 Secondary Hyperparathyroidism Diseases 0.000 claims description 4
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 4
- 201000010901 lateral sclerosis Diseases 0.000 claims description 4
- 208000005264 motor neuron disease Diseases 0.000 claims description 4
- 239000002243 precursor Substances 0.000 claims description 4
- 201000000690 abdominal obesity-metabolic syndrome Diseases 0.000 claims description 3
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 claims description 3
- 206010002261 Androgen deficiency Diseases 0.000 claims description 2
- 206010010356 Congenital anomaly Diseases 0.000 claims description 2
- 206010013801 Duchenne Muscular Dystrophy Diseases 0.000 claims description 2
- 208000022531 anorexia Diseases 0.000 claims description 2
- 206010061428 decreased appetite Diseases 0.000 claims description 2
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 claims description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 claims description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 claims description 2
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 claims description 2
- 102100039939 Growth/differentiation factor 8 Human genes 0.000 claims 2
- 201000006935 Becker muscular dystrophy Diseases 0.000 claims 1
- 208000036888 Laing early-onset distal myopathy Diseases 0.000 claims 1
- 208000012423 MYH7-related skeletal myopathy Diseases 0.000 claims 1
- 208000001164 Osteoporotic Fractures Diseases 0.000 claims 1
- 206010039710 Scleroderma Diseases 0.000 claims 1
- 208000026214 Skeletal muscle atrophy Diseases 0.000 claims 1
- 201000001088 distal myopathy 1 Diseases 0.000 claims 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 claims 1
- 208000030533 eye disease Diseases 0.000 claims 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 claims 1
- 239000003223 protective agent Substances 0.000 claims 1
- 230000025185 skeletal muscle atrophy Effects 0.000 claims 1
- 235000000112 undernutrition Nutrition 0.000 claims 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 abstract description 136
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 104
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 abstract description 73
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 abstract description 54
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 abstract description 47
- 102000025171 antigen binding proteins Human genes 0.000 abstract description 22
- 108091000831 antigen binding proteins Proteins 0.000 abstract description 22
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 abstract description 21
- 239000013598 vector Substances 0.000 abstract description 21
- 230000012010 growth Effects 0.000 abstract description 11
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 abstract description 9
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 abstract description 9
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 abstract description 7
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 abstract description 7
- 102000001690 Factor VIII Human genes 0.000 abstract description 5
- 108010054218 Factor VIII Proteins 0.000 abstract description 5
- 230000011664 signaling Effects 0.000 abstract description 5
- 230000002414 glycolytic effect Effects 0.000 abstract 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 204
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 166
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 154
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 151
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 147
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 126
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 126
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 113
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 107
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 73
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 64
- 102100024952 Protein CBFA2T1 Human genes 0.000 description 62
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 62
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 60
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 49
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 description 48
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 48
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 45
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 42
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 41
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 40
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 35
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 35
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 35
- 230000008859 change Effects 0.000 description 32
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 30
- 239000004055 small Interfering RNA Substances 0.000 description 30
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 29
- 206010010774 Constipation Diseases 0.000 description 29
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 29
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 29
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 29
- 229940121710 HMGCoA reductase inhibitor Drugs 0.000 description 27
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 27
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 27
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 27
- MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N Testosterone Natural products O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N 0.000 description 26
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 26
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 25
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 24
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 24
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 24
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 24
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 23
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 23
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 23
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 22
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 22
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 22
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 22
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 22
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 21
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 21
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 20
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 19
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 19
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 19
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 19
- 102000004472 Myostatin Human genes 0.000 description 18
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 18
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 18
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 18
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 17
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 17
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 17
- ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N Formamide Chemical compound NC=O ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 16
- 208000021642 Muscular disease Diseases 0.000 description 16
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 16
- 239000002585 base Substances 0.000 description 16
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 16
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 16
- -1 acridine esters Chemical class 0.000 description 15
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 15
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 14
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 14
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 14
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 14
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 14
- 239000000463 material Substances 0.000 description 14
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 14
- 230000004044 response Effects 0.000 description 14
- 210000002027 skeletal muscle Anatomy 0.000 description 14
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 13
- 239000000562 conjugate Substances 0.000 description 13
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 13
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 13
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 13
- 229960003604 testosterone Drugs 0.000 description 13
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 12
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 12
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 12
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 12
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 12
- 238000010791 quenching Methods 0.000 description 12
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 11
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 11
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 11
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 11
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 11
- 230000006870 function Effects 0.000 description 11
- 208000018360 neuromuscular disease Diseases 0.000 description 11
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 11
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 11
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 11
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 10
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 10
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 210000001789 adipocyte Anatomy 0.000 description 10
- 239000000729 antidote Substances 0.000 description 10
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 10
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 10
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 10
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 10
- 238000011161 development Methods 0.000 description 10
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 10
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 10
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 10
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 10
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 10
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 10
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 10
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 10
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 9
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 9
- 239000013583 drug formulation Substances 0.000 description 9
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 9
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 9
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 9
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 9
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 9
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 9
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 9
- 206010003694 Atrophy Diseases 0.000 description 8
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 8
- 230000037444 atrophy Effects 0.000 description 8
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 8
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 8
- 239000012035 limiting reagent Substances 0.000 description 8
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 8
- 230000008569 process Effects 0.000 description 8
- 230000000171 quenching effect Effects 0.000 description 8
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 8
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 8
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 8
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 8
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 8
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 7
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 7
- 208000017170 Lipid metabolism disease Diseases 0.000 description 7
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 7
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 7
- 241000252067 Megalops atlanticus Species 0.000 description 7
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N acetic acid Substances CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 230000037182 bone density Effects 0.000 description 7
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 7
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 7
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 7
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 7
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 7
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 7
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 7
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 7
- 230000000869 mutational effect Effects 0.000 description 7
- 239000000047 product Substances 0.000 description 7
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 7
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 7
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 7
- 101000869690 Homo sapiens Protein S100-A8 Proteins 0.000 description 6
- 206010028289 Muscle atrophy Diseases 0.000 description 6
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 6
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 6
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102100032442 Protein S100-A8 Human genes 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 6
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 6
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 6
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 6
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 6
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 6
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 6
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 6
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 6
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 6
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 6
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 6
- 238000003672 processing method Methods 0.000 description 6
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 6
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 6
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 6
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 6
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 101100297347 Caenorhabditis elegans pgl-3 gene Proteins 0.000 description 5
- 102000016970 Follistatin Human genes 0.000 description 5
- 108010014612 Follistatin Proteins 0.000 description 5
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 5
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 101710194452 Growth/differentiation factor 11 Proteins 0.000 description 5
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 5
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 5
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 5
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 5
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 5
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 5
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 5
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 5
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 5
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 5
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 5
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 5
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 5
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 5
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 5
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 5
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 5
- 239000000834 fixative Substances 0.000 description 5
- 101150004578 gdf-8 gene Proteins 0.000 description 5
- 230000004153 glucose metabolism Effects 0.000 description 5
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 5
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 5
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 5
- 210000000663 muscle cell Anatomy 0.000 description 5
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 5
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 5
- 241000894007 species Species 0.000 description 5
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 5
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 5
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 4
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 4
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 description 4
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 description 4
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 4
- 101000799189 Homo sapiens Activin receptor type-1B Proteins 0.000 description 4
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 4
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 4
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 4
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 4
- 206010022489 Insulin Resistance Diseases 0.000 description 4
- 102400000401 Latency-associated peptide Human genes 0.000 description 4
- 101800001155 Latency-associated peptide Proteins 0.000 description 4
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 4
- 208000029578 Muscle disease Diseases 0.000 description 4
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 4
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 4
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 4
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 4
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 4
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 4
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 4
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 4
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000007413 biotinylation Methods 0.000 description 4
- 230000006287 biotinylation Effects 0.000 description 4
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 4
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 4
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 4
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 4
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 4
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 4
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 4
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 4
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 4
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 4
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 4
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 4
- 235000013861 fat-free Nutrition 0.000 description 4
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 4
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 4
- 208000018914 glucose metabolism disease Diseases 0.000 description 4
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 4
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 4
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 description 4
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 description 4
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 4
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 4
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 4
- 238000013507 mapping Methods 0.000 description 4
- 230000000116 mitigating effect Effects 0.000 description 4
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 4
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 4
- 239000006174 pH buffer Substances 0.000 description 4
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 4
- 210000001539 phagocyte Anatomy 0.000 description 4
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 4
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 4
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 4
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 4
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 4
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 4
- 238000010200 validation analysis Methods 0.000 description 4
- OOIBFPKQHULHSQ-UHFFFAOYSA-N (3-hydroxy-1-adamantyl) 2-methylprop-2-enoate Chemical compound C1C(C2)CC3CC2(O)CC1(OC(=O)C(=C)C)C3 OOIBFPKQHULHSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 3
- 108010059616 Activins Proteins 0.000 description 3
- 102000005606 Activins Human genes 0.000 description 3
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 3
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 3
- 241001136792 Alle Species 0.000 description 3
- 208000000103 Anorexia Nervosa Diseases 0.000 description 3
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010006895 Cachexia Diseases 0.000 description 3
- 206010007559 Cardiac failure congestive Diseases 0.000 description 3
- 108090000994 Catalytic RNA Proteins 0.000 description 3
- 102000053642 Catalytic RNA Human genes 0.000 description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 102000004420 Creatine Kinase Human genes 0.000 description 3
- 108010042126 Creatine kinase Proteins 0.000 description 3
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000032928 Dyslipidaemia Diseases 0.000 description 3
- 206010017076 Fracture Diseases 0.000 description 3
- 102100036001 G-protein coupled receptor-associated sorting protein 1 Human genes 0.000 description 3
- 101710142641 G-protein coupled receptor-associated sorting protein 1 Proteins 0.000 description 3
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 3
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 3
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 3
- 206010020880 Hypertrophy Diseases 0.000 description 3
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 3
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 3
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 3
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 3
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 3
- 208000030136 Marchiafava-Bignami Disease Diseases 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 3
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 3
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 3
- PRXRUNOAOLTIEF-ADSICKODSA-N Sorbitan trioleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@@H](OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC PRXRUNOAOLTIEF-ADSICKODSA-N 0.000 description 3
- 206010047626 Vitamin D Deficiency Diseases 0.000 description 3
- 101710160038 WAP, Kazal, immunoglobulin, Kunitz and NTR domain-containing protein 2 Proteins 0.000 description 3
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- 239000000488 activin Substances 0.000 description 3
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 3
- 210000004381 amniotic fluid Anatomy 0.000 description 3
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 3
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 3
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 3
- 208000003295 carpal tunnel syndrome Diseases 0.000 description 3
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 3
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 3
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 3
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 description 3
- 230000009918 complex formation Effects 0.000 description 3
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 3
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- UQLDLKMNUJERMK-UHFFFAOYSA-L di(octadecanoyloxy)lead Chemical compound [Pb+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O UQLDLKMNUJERMK-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 3
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 3
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 3
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 3
- 235000019688 fish Nutrition 0.000 description 3
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 3
- 238000001641 gel filtration chromatography Methods 0.000 description 3
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 3
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 3
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 3
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 3
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 3
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 3
- 235000009424 haa Nutrition 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 230000013632 homeostatic process Effects 0.000 description 3
- 206010020718 hyperplasia Diseases 0.000 description 3
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 3
- 238000001114 immunoprecipitation Methods 0.000 description 3
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 3
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 3
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 3
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 3
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 3
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 3
- 230000001926 lymphatic effect Effects 0.000 description 3
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 3
- 210000005075 mammary gland Anatomy 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 3
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 3
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 3
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 3
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 3
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 3
- 230000000010 osteolytic effect Effects 0.000 description 3
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 description 3
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 3
- 239000008196 pharmacological composition Substances 0.000 description 3
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 3
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 3
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 3
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 3
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 3
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 3
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 3
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 3
- 108091092562 ribozyme Proteins 0.000 description 3
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 3
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 3
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 3
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 3
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 3
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 3
- 238000000954 titration curve Methods 0.000 description 3
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 3
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 3
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PVVTWNMXEHROIA-UHFFFAOYSA-N 2-(3-hydroxypropyl)-1h-quinazolin-4-one Chemical compound C1=CC=C2NC(CCCO)=NC(=O)C2=C1 PVVTWNMXEHROIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NMPVEAUIHMEAQP-UHFFFAOYSA-N 2-Bromoacetaldehyde Chemical compound BrCC=O NMPVEAUIHMEAQP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JMTMSDXUXJISAY-UHFFFAOYSA-N 2H-benzotriazol-4-ol Chemical compound OC1=CC=CC2=C1N=NN2 JMTMSDXUXJISAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YRNWIFYIFSBPAU-UHFFFAOYSA-N 4-[4-(dimethylamino)phenyl]-n,n-dimethylaniline Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC=C1C1=CC=C(N(C)C)C=C1 YRNWIFYIFSBPAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RGHHSNMVTDWUBI-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxybenzaldehyde Chemical compound OC1=CC=C(C=O)C=C1 RGHHSNMVTDWUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 2
- 102100034134 Activin receptor type-1B Human genes 0.000 description 2
- 206010002388 Angina unstable Diseases 0.000 description 2
- 244000105975 Antidesma platyphyllum Species 0.000 description 2
- 101100020619 Arabidopsis thaliana LATE gene Proteins 0.000 description 2
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 2
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 2
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 2
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 2
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101100234002 Drosophila melanogaster Shal gene Proteins 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- 229910052693 Europium Inorganic materials 0.000 description 2
- IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N Galacturonsaeure Natural products O=CC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000002705 Glucose Intolerance Diseases 0.000 description 2
- 239000004366 Glucose oxidase Substances 0.000 description 2
- 108010015776 Glucose oxidase Proteins 0.000 description 2
- 101000886562 Homo sapiens Growth/differentiation factor 8 Proteins 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000006496 Immunoglobulin Heavy Chains Human genes 0.000 description 2
- 108010019476 Immunoglobulin Heavy Chains Proteins 0.000 description 2
- 108010044467 Isoenzymes Proteins 0.000 description 2
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 208000023178 Musculoskeletal disease Diseases 0.000 description 2
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N Nickel Chemical compound [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 2
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 2
- 208000011623 Obstructive Lung disease Diseases 0.000 description 2
- 206010031240 Osteodystrophy Diseases 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 2
- 102000003982 Parathyroid hormone Human genes 0.000 description 2
- 108090000445 Parathyroid hormone Proteins 0.000 description 2
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 2
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 2
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 2
- 244000088415 Raphanus sativus Species 0.000 description 2
- 235000006140 Raphanus sativus var sativus Nutrition 0.000 description 2
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 2
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000166071 Shorea robusta Species 0.000 description 2
- 235000015076 Shorea robusta Nutrition 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010007945 Smad Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000007374 Smad Proteins Human genes 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000004147 Sorbitan trioleate Substances 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000006180 TBST buffer Substances 0.000 description 2
- 108010022394 Threonine synthase Proteins 0.000 description 2
- 208000007814 Unstable Angina Diseases 0.000 description 2
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 2
- 229930003316 Vitamin D Natural products 0.000 description 2
- QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N Vitamin D3 Natural products C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C/C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N 0.000 description 2
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 2
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 2
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 2
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 2
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 2
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 2
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 2
- 239000003098 androgen Substances 0.000 description 2
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 2
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 2
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 2
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 2
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 2
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 2
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 2
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 2
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AEMOLEFTQBMNLQ-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactopyranuronic acid Natural products OC1OC(C(O)=O)C(O)C(O)C1O AEMOLEFTQBMNLQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactosamine Natural products NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 2
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 2
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 2
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 2
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 2
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 2
- 150000001615 biotins Chemical class 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 229910021538 borax Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000012888 bovine serum Substances 0.000 description 2
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 244000309466 calf Species 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 2
- OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N chlorobutanol Chemical compound CC(C)(O)C(Cl)(Cl)Cl OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 2
- 239000003184 complementary RNA Substances 0.000 description 2
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 2
- 230000037029 cross reaction Effects 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 2
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 2
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 2
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 2
- 239000008355 dextrose injection Substances 0.000 description 2
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 102000004419 dihydrofolate reductase Human genes 0.000 description 2
- BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N diisopropylcarbodiimide Natural products CC(C)NC(=O)NC(C)C BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000006471 dimerization reaction Methods 0.000 description 2
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 2
- 230000013020 embryo development Effects 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 230000001815 facial effect Effects 0.000 description 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 2
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 2
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 2
- 230000003325 follicular Effects 0.000 description 2
- 230000009368 gene silencing by RNA Effects 0.000 description 2
- 229940116332 glucose oxidase Drugs 0.000 description 2
- 235000019420 glucose oxidase Nutrition 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 2
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 2
- 230000002710 gonadal effect Effects 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N hexadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000054677 human MSTN Human genes 0.000 description 2
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 2
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 2
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 2
- 238000003119 immunoblot Methods 0.000 description 2
- 229940127121 immunoconjugate Drugs 0.000 description 2
- 239000003547 immunosorbent Substances 0.000 description 2
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 2
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 2
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 2
- 201000004332 intermediate coronary syndrome Diseases 0.000 description 2
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 238000001294 liquid chromatography-tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 238000003670 luciferase enzyme activity assay Methods 0.000 description 2
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 2
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 2
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 2
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 2
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 2
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 2
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 2
- 230000001002 morphogenetic effect Effects 0.000 description 2
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 description 2
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 2
- 230000037257 muscle growth Effects 0.000 description 2
- 230000009756 muscle regeneration Effects 0.000 description 2
- 230000003274 myotonic effect Effects 0.000 description 2
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 2
- 235000018343 nutrient deficiency Nutrition 0.000 description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 2
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 2
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 2
- 239000000199 parathyroid hormone Substances 0.000 description 2
- 229960001319 parathyroid hormone Drugs 0.000 description 2
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 2
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 2
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 2
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 2
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 2
- 229920000233 poly(alkylene oxides) Polymers 0.000 description 2
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 2
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 2
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 2
- 150000004804 polysaccharides Chemical class 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 201000009104 prediabetes syndrome Diseases 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 2
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 2
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 2
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 2
- 201000009410 rhabdomyosarcoma Diseases 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 230000035807 sensation Effects 0.000 description 2
- 239000008354 sodium chloride injection Substances 0.000 description 2
- 235000010339 sodium tetraborate Nutrition 0.000 description 2
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 2
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 description 2
- 235000019337 sorbitan trioleate Nutrition 0.000 description 2
- 229960000391 sorbitan trioleate Drugs 0.000 description 2
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 2
- GOLXNESZZPUPJE-UHFFFAOYSA-N spiromesifen Chemical compound CC1=CC(C)=CC(C)=C1C(C(O1)=O)=C(OC(=O)CC(C)(C)C)C11CCCC1 GOLXNESZZPUPJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 2
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 description 2
- 210000001179 synovial fluid Anatomy 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 2
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 2
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 2
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 2
- BSVBQGMMJUBVOD-UHFFFAOYSA-N trisodium borate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]B([O-])[O-] BSVBQGMMJUBVOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000239635 ulla Species 0.000 description 2
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 2
- 208000019553 vascular disease Diseases 0.000 description 2
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 2
- 235000019166 vitamin D Nutrition 0.000 description 2
- 239000011710 vitamin D Substances 0.000 description 2
- 150000003710 vitamin D derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 229940046008 vitamin d Drugs 0.000 description 2
- YMXHPSHLTSZXKH-RVBZMBCESA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 5-[(3as,4s,6ar)-2-oxo-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl]pentanoate Chemical compound C([C@H]1[C@H]2NC(=O)N[C@H]2CS1)CCCC(=O)ON1C(=O)CCC1=O YMXHPSHLTSZXKH-RVBZMBCESA-N 0.000 description 1
- ZJIFDEVVTPEXDL-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) hydrogen carbonate Chemical compound OC(=O)ON1C(=O)CCC1=O ZJIFDEVVTPEXDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AASBXERNXVFUEJ-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) propanoate Chemical compound CCC(=O)ON1C(=O)CCC1=O AASBXERNXVFUEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 description 1
- SWMBOMMGMHMOHE-MHLULTLJSA-N (2r,3r,4r,5r)-hexane-1,2,3,4,5,6-hexol;(2r,3r,4r,5s)-hexane-1,2,3,4,5,6-hexol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO SWMBOMMGMHMOHE-MHLULTLJSA-N 0.000 description 1
- ASWBNKHCZGQVJV-UHFFFAOYSA-N (3-hexadecanoyloxy-2-hydroxypropyl) 2-(trimethylazaniumyl)ethyl phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C ASWBNKHCZGQVJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GEYOCULIXLDCMW-UHFFFAOYSA-N 1,2-phenylenediamine Chemical compound NC1=CC=CC=C1N GEYOCULIXLDCMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BGPJLYIFDLICMR-UHFFFAOYSA-N 1,4,2,3-dioxadithiolan-5-one Chemical compound O=C1OSSO1 BGPJLYIFDLICMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OBYNJKLOYWCXEP-UHFFFAOYSA-N 2-[3-(dimethylamino)-6-dimethylazaniumylidenexanthen-9-yl]-4-isothiocyanatobenzoate Chemical compound C=12C=CC(=[N+](C)C)C=C2OC2=CC(N(C)C)=CC=C2C=1C1=CC(N=C=S)=CC=C1C([O-])=O OBYNJKLOYWCXEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WWSJZGAPAVMETJ-UHFFFAOYSA-N 2-[4-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]-3-ethoxypyrazol-1-yl]-1-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)ethanone Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)C=1C(=NN(C=1)CC(=O)N1CC2=C(CC1)NN=N2)OCC WWSJZGAPAVMETJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WZFUQSJFWNHZHM-UHFFFAOYSA-N 2-[4-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]piperazin-1-yl]-1-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)ethanone Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)N1CCN(CC1)CC(=O)N1CC2=C(CC1)NN=N2 WZFUQSJFWNHZHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-GASJEMHNSA-N 2-amino-2-deoxy-D-galactopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 2-diethylaminoethanol Chemical compound CCN(CC)CCO BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GHCZTIFQWKKGSB-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid;phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O.OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O GHCZTIFQWKKGSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IITIZHOBOIBGBW-UHFFFAOYSA-N 3-ethyl-2h-1,3-benzothiazole Chemical compound C1=CC=C2N(CC)CSC2=C1 IITIZHOBOIBGBW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QXZGLTYKKZKGLN-UHFFFAOYSA-N 4-(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl)oxy-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC(=O)CCC(=O)ON1C(=O)CCC1=O QXZGLTYKKZKGLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010069754 Acquired gene mutation Diseases 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 101710201712 Amino acid binding protein Proteins 0.000 description 1
- 229920000945 Amylopectin Polymers 0.000 description 1
- 229920000856 Amylose Polymers 0.000 description 1
- 241000272525 Anas platyrhynchos Species 0.000 description 1
- 240000000662 Anethum graveolens Species 0.000 description 1
- 206010002383 Angina Pectoris Diseases 0.000 description 1
- 241000272814 Anser sp. Species 0.000 description 1
- 108010032595 Antibody Binding Sites Proteins 0.000 description 1
- 108020005544 Antisense RNA Proteins 0.000 description 1
- 241000269350 Anura Species 0.000 description 1
- 200000000007 Arterial disease Diseases 0.000 description 1
- 241000972773 Aulopiformes Species 0.000 description 1
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 1
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 1
- 208000006386 Bone Resorption Diseases 0.000 description 1
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- AFWTZXXDGQBIKW-UHFFFAOYSA-N C14 surfactin Natural products CCCCCCCCCCCC1CC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(C(C)C)C(=O)NC(CC(O)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)O1 AFWTZXXDGQBIKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VPIDXLJVGVBFOW-UHFFFAOYSA-N C=1C=[C-]PC=1 Chemical class C=1C=[C-]PC=1 VPIDXLJVGVBFOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GAWIXWVDTYZWAW-UHFFFAOYSA-N C[CH]O Chemical group C[CH]O GAWIXWVDTYZWAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000004429 Calibre Substances 0.000 description 1
- 241000189662 Calla Species 0.000 description 1
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 244000132059 Carica parviflora Species 0.000 description 1
- 235000014653 Carica parviflora Nutrition 0.000 description 1
- 101710098119 Chaperonin GroEL 2 Proteins 0.000 description 1
- 108010004103 Chylomicrons Proteins 0.000 description 1
- 235000008733 Citrus aurantifolia Nutrition 0.000 description 1
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 1
- 102000003712 Complement factor B Human genes 0.000 description 1
- 108090000056 Complement factor B Proteins 0.000 description 1
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 1
- 241000761389 Copa Species 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 1
- 241000700626 Cowpox virus Species 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 101710112752 Cytotoxin Proteins 0.000 description 1
- AEMOLEFTQBMNLQ-DTEWXJGMSA-N D-Galacturonic acid Natural products O[C@@H]1O[C@H](C(O)=O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-DTEWXJGMSA-N 0.000 description 1
- IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N D-Luciferin Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSC(C=2SC3=CC=C(O)C=C3N=2)=N1 IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 1
- 150000008574 D-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 1
- 101710177611 DNA polymerase II large subunit Proteins 0.000 description 1
- 101710184669 DNA polymerase II small subunit Proteins 0.000 description 1
- 102000005768 DNA-Activated Protein Kinase Human genes 0.000 description 1
- 108010006124 DNA-Activated Protein Kinase Proteins 0.000 description 1
- 230000004568 DNA-binding Effects 0.000 description 1
- 241000252212 Danio rerio Species 0.000 description 1
- CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N Dehydro-luciferin Natural products OC(=O)C1=CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 description 1
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 1
- YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N Epihygromycin Natural products OC1C(O)C(C(=O)C)OC1OC(C(=C1)O)=CC=C1C=C(C)C(=O)NC1C(O)C(O)C2OCOC2C1O YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282324 Felis Species 0.000 description 1
- BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N Fivefly Luciferin Natural products OC(=O)C1CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N Fucose Natural products C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 102000034615 Glial cell line-derived neurotrophic factor Human genes 0.000 description 1
- 108091010837 Glial cell line-derived neurotrophic factor Proteins 0.000 description 1
- 206010072079 Glucocorticoid deficiency Diseases 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000005720 Glutathione transferase Human genes 0.000 description 1
- 108010070675 Glutathione transferase Proteins 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 108010007979 Glycocholic Acid Proteins 0.000 description 1
- 229920002527 Glycogen Polymers 0.000 description 1
- 229920002683 Glycosaminoglycan Polymers 0.000 description 1
- NMJREATYWWNIKX-UHFFFAOYSA-N GnRH Chemical compound C1CCC(C(=O)NCC(N)=O)N1C(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)CNC(=O)C(NC(=O)C(CO)NC(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)C(CC=1NC=NC=1)NC(=O)C1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 NMJREATYWWNIKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000006771 Gonadotropins Human genes 0.000 description 1
- 108010086677 Gonadotropins Proteins 0.000 description 1
- 102400001066 Growth hormone-binding protein Human genes 0.000 description 1
- 101800000194 Growth hormone-binding protein Proteins 0.000 description 1
- HVLSXIKZNLPZJJ-TXZCQADKSA-N HA peptide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=C(O)C=C1 HVLSXIKZNLPZJJ-TXZCQADKSA-N 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000574648 Homo sapiens Retinoid-inducible serine carboxypeptidase Proteins 0.000 description 1
- 229920000869 Homopolysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 208000031226 Hyperlipidaemia Diseases 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 206010020850 Hyperthyroidism Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 108700005091 Immunoglobulin Genes Proteins 0.000 description 1
- 241000235649 Kluyveromyces Species 0.000 description 1
- 150000008575 L-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-HWQSCIPKSA-N L-arabinopyranose Chemical compound O[C@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-HWQSCIPKSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N L-fucopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-DHVFOXMCSA-N L-galactose Chemical compound OC[C@@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-DHVFOXMCSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 1
- 208000017257 LMNA-related cardiocutaneous progeria syndrome Diseases 0.000 description 1
- 102100022745 Laminin subunit alpha-2 Human genes 0.000 description 1
- 108010000817 Leuprolide Proteins 0.000 description 1
- 241000234435 Lilium Species 0.000 description 1
- 206010071289 Lower urinary tract symptoms Diseases 0.000 description 1
- DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N Luciferin Natural products CCc1c(C)c(CC2NC(=O)C(=C2C=C)C)[nH]c1Cc3[nH]c4C(=C5/NC(CC(=O)O)C(C)C5CC(=O)O)CC(=O)c4c3C DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000019693 Lung disease Diseases 0.000 description 1
- 101150060239 MOM1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150048453 MSTN gene Proteins 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019759 Maize starch Nutrition 0.000 description 1
- PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N Maleimide Chemical compound O=C1NC(=O)C=C1 PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 101710175625 Maltose/maltodextrin-binding periplasmic protein Proteins 0.000 description 1
- 244000246386 Mentha pulegium Species 0.000 description 1
- 235000016257 Mentha pulegium Nutrition 0.000 description 1
- 235000004357 Mentha x piperita Nutrition 0.000 description 1
- 108700011259 MicroRNAs Proteins 0.000 description 1
- 241001092142 Molina Species 0.000 description 1
- 101100504379 Mus musculus Gfral gene Proteins 0.000 description 1
- 101001075141 Mus musculus Growth/differentiation factor 8 Proteins 0.000 description 1
- 101100448224 Mus musculus Mstn gene Proteins 0.000 description 1
- 206010028311 Muscle hypertrophy Diseases 0.000 description 1
- 206010028347 Muscle twitching Diseases 0.000 description 1
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 102000035028 Nucleic proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091005461 Nucleic proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001024099 Olla Species 0.000 description 1
- 206010053159 Organ failure Diseases 0.000 description 1
- 208000003076 Osteolysis Diseases 0.000 description 1
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 1
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 1
- 235000021314 Palmitic acid Nutrition 0.000 description 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 1
- 241001504519 Papio ursinus Species 0.000 description 1
- 235000019483 Peanut oil Nutrition 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 108091093037 Peptide nucleic acid Proteins 0.000 description 1
- 208000018262 Peripheral vascular disease Diseases 0.000 description 1
- 241000577979 Peromyscus spicilegus Species 0.000 description 1
- 102000045595 Phosphoprotein Phosphatases Human genes 0.000 description 1
- 108700019535 Phosphoprotein Phosphatases Proteins 0.000 description 1
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 1
- 108010053210 Phycocyanin Proteins 0.000 description 1
- 108010004729 Phycoerythrin Proteins 0.000 description 1
- 108010022233 Plasminogen Activator Inhibitor 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100039418 Plasminogen activator inhibitor 1 Human genes 0.000 description 1
- 229920002732 Polyanhydride Polymers 0.000 description 1
- 229920000954 Polyglycolide Polymers 0.000 description 1
- 229920001710 Polyorthoester Polymers 0.000 description 1
- 208000020584 Polyploidy Diseases 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 241001415846 Procellariidae Species 0.000 description 1
- 206010036790 Productive cough Diseases 0.000 description 1
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N Propionic acid Substances CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 238000012228 RNA interference-mediated gene silencing Methods 0.000 description 1
- 108091030071 RNAI Proteins 0.000 description 1
- 108091007187 Reductases Proteins 0.000 description 1
- 230000010757 Reduction Activity Effects 0.000 description 1
- 206010038743 Restlessness Diseases 0.000 description 1
- 102100025483 Retinoid-inducible serine carboxypeptidase Human genes 0.000 description 1
- 102100039832 Ribonuclease pancreatic Human genes 0.000 description 1
- 101710123428 Ribonuclease pancreatic Proteins 0.000 description 1
- 102000006382 Ribonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010083644 Ribonucleases Proteins 0.000 description 1
- 239000008156 Ringer's lactate solution Substances 0.000 description 1
- 238000011579 SCID mouse model Methods 0.000 description 1
- 241000293869 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium Species 0.000 description 1
- 241000277331 Salmonidae Species 0.000 description 1
- 241000235347 Schizosaccharomyces pombe Species 0.000 description 1
- 208000034189 Sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N Silver Chemical compound [Ag] BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091027967 Small hairpin RNA Proteins 0.000 description 1
- DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M Sodium bisulfite Chemical compound [Na+].OS([O-])=O DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 description 1
- 238000002105 Southern blotting Methods 0.000 description 1
- 101000857870 Squalus acanthias Gonadoliberin Proteins 0.000 description 1
- 208000037065 Subacute sclerosing leukoencephalitis Diseases 0.000 description 1
- 206010042297 Subacute sclerosing panencephalitis Diseases 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 206010042778 Syndactyly Diseases 0.000 description 1
- 235000011941 Tilia x europaea Nutrition 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 1
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 1
- 208000026487 Triploidy Diseases 0.000 description 1
- XTXRWKRVRITETP-UHFFFAOYSA-N Vinyl acetate Chemical compound CC(=O)OC=C XTXRWKRVRITETP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700005077 Viral Genes Proteins 0.000 description 1
- 201000006793 Walker-Warburg syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 238000002441 X-ray diffraction Methods 0.000 description 1
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 1
- 239000003070 absorption delaying agent Substances 0.000 description 1
- 230000035508 accumulation Effects 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 238000003916 acid precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- 230000011759 adipose tissue development Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 229940124382 agent for constipation Drugs 0.000 description 1
- 238000005054 agglomeration Methods 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 244000245420 ail Species 0.000 description 1
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 1
- 125000003172 aldehyde group Chemical group 0.000 description 1
- IAJILQKETJEXLJ-RSJOWCBRSA-N aldehydo-D-galacturonic acid Chemical compound O=C[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-RSJOWCBRSA-N 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 150000004703 alkoxides Chemical class 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- AEMOLEFTQBMNLQ-WAXACMCWSA-N alpha-D-glucuronic acid Chemical compound O[C@H]1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-WAXACMCWSA-N 0.000 description 1
- VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N alprazolam Chemical compound C12=CC(Cl)=CC=C2N2C(C)=NN=C2CN=C1C1=CC=CC=C1 VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005576 amination reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 102000021052 amino acid binding proteins Human genes 0.000 description 1
- 239000003194 amino acid receptor blocking agent Substances 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 206010002026 amyotrophic lateral sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 229940030486 androgens Drugs 0.000 description 1
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000010775 animal oil Substances 0.000 description 1
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 1
- 230000003373 anti-fouling effect Effects 0.000 description 1
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 229940125681 anticonvulsant agent Drugs 0.000 description 1
- 239000001961 anticonvulsive agent Substances 0.000 description 1
- 229940075522 antidotes Drugs 0.000 description 1
- 230000007503 antigenic stimulation Effects 0.000 description 1
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 description 1
- 229940121357 antivirals Drugs 0.000 description 1
- 208000008784 apnea Diseases 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 238000010420 art technique Methods 0.000 description 1
- 208000028922 artery disease Diseases 0.000 description 1
- 229940009098 aspartate Drugs 0.000 description 1
- 238000012093 association test Methods 0.000 description 1
- 238000000889 atomisation Methods 0.000 description 1
- OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N azane;(2e)-3-ethyl-2-[(e)-(3-ethyl-6-sulfo-1,3-benzothiazol-2-ylidene)hydrazinylidene]-1,3-benzothiazole-6-sulfonic acid Chemical compound [NH4+].[NH4+].S/1C2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N(CC)C\1=N/N=C1/SC2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N1CC OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N 0.000 description 1
- 210000001142 back Anatomy 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- OGBUMNBNEWYMNJ-UHFFFAOYSA-N batilol Chemical class CCCCCCCCCCCCCCCCCCOCC(O)CO OGBUMNBNEWYMNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-N benzoquinolinylidene Natural products C1=CC=CC2=CC3=CC=CC=C3N=C21 DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-QZABAPFNSA-N beta-D-glucosamine Chemical compound N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-QZABAPFNSA-N 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N beta-N-Acetyl-D-neuraminic acid Natural products CC(=O)NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 1
- 239000003833 bile salt Substances 0.000 description 1
- 229940093761 bile salts Drugs 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 1
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 229960000106 biosimilars Drugs 0.000 description 1
- GRSTVVGJSKHCCS-UHFFFAOYSA-N bis(1h-imidazol-2-yl)methanone Chemical group N=1C=CNC=1C(=O)C1=NC=CN1 GRSTVVGJSKHCCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 239000001045 blue dye Substances 0.000 description 1
- 230000014461 bone development Effects 0.000 description 1
- 230000024279 bone resorption Effects 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- VPKDCDLSJZCGKE-UHFFFAOYSA-N carbodiimide group Chemical group N=C=N VPKDCDLSJZCGKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012876 carrier material Substances 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 241001233037 catfish Species 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000022131 cell cycle Effects 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 150000005829 chemical entities Chemical class 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 1
- 229960004926 chlorobutanol Drugs 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 208000037976 chronic inflammation Diseases 0.000 description 1
- 230000006020 chronic inflammation Effects 0.000 description 1
- 239000012459 cleaning agent Substances 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 210000003022 colostrum Anatomy 0.000 description 1
- 235000021277 colostrum Nutrition 0.000 description 1
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 230000024203 complement activation Effects 0.000 description 1
- 239000003636 conditioned culture medium Substances 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 239000000039 congener Substances 0.000 description 1
- 201000006815 congenital muscular dystrophy Diseases 0.000 description 1
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 230000001054 cortical effect Effects 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 1
- 238000009402 cross-breeding Methods 0.000 description 1
- 238000011461 current therapy Methods 0.000 description 1
- ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N cyanogen bromide Chemical compound BrC#N ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MGNCLNQXLYJVJD-UHFFFAOYSA-N cyanuric chloride Chemical compound ClC1=NC(Cl)=NC(Cl)=N1 MGNCLNQXLYJVJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 1
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 239000002619 cytotoxin Substances 0.000 description 1
- AEMOLEFTQBMNLQ-YBSDWZGDSA-N d-mannuronic acid Chemical compound O[C@@H]1O[C@@H](C(O)=O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-YBSDWZGDSA-N 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940075844 delatestryl Drugs 0.000 description 1
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 1
- 238000009795 derivation Methods 0.000 description 1
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- UGMCXQCYOVCMTB-UHFFFAOYSA-K dihydroxy(stearato)aluminium Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)O[Al](O)O UGMCXQCYOVCMTB-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- BIABMEZBCHDPBV-UHFFFAOYSA-N dipalmitoyl phosphatidylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCC(O)CO)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC BIABMEZBCHDPBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FRKBLBQTSTUKOV-UHFFFAOYSA-N diphosphatidyl glycerol Natural products OP(O)(=O)OCC(OP(O)(O)=O)COP(O)(O)=O FRKBLBQTSTUKOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 238000002845 discoloration Methods 0.000 description 1
- 208000016097 disease of metabolism Diseases 0.000 description 1
- 208000037765 diseases and disorders Diseases 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 239000002612 dispersion medium Substances 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- AFOSIXZFDONLBT-UHFFFAOYSA-N divinyl sulfone Chemical compound C=CS(=O)(=O)C=C AFOSIXZFDONLBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 229940112141 dry powder inhaler Drugs 0.000 description 1
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 1
- 230000008482 dysregulation Effects 0.000 description 1
- 208000024732 dysthymic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 1
- 208000026500 emaciation Diseases 0.000 description 1
- 238000004945 emulsification Methods 0.000 description 1
- 239000008393 encapsulating agent Substances 0.000 description 1
- 238000009585 enzyme analysis Methods 0.000 description 1
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 1
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 1
- OGPBJKLSAFTDLK-UHFFFAOYSA-N europium atom Chemical compound [Eu] OGPBJKLSAFTDLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 238000013265 extended release Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 238000013213 extrapolation Methods 0.000 description 1
- 238000005562 fading Methods 0.000 description 1
- 210000003195 fascia Anatomy 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 208000010706 fatty liver disease Diseases 0.000 description 1
- 230000014061 fear response Effects 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091006047 fluorescent proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000034287 fluorescent proteins Human genes 0.000 description 1
- 229940014144 folate Drugs 0.000 description 1
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 125000002485 formyl group Chemical group [H]C(*)=O 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000009432 framing Methods 0.000 description 1
- 229960004675 fusidic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000005021 gait Effects 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 238000007429 general method Methods 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 1
- 230000000762 glandular Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 201000003617 glucocorticoid-induced osteoporosis Diseases 0.000 description 1
- 230000004190 glucose uptake Effects 0.000 description 1
- 150000002327 glycerophospholipids Chemical class 0.000 description 1
- RFDAIACWWDREDC-FRVQLJSFSA-N glycocholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 RFDAIACWWDREDC-FRVQLJSFSA-N 0.000 description 1
- 229940096919 glycogen Drugs 0.000 description 1
- 150000002334 glycols Chemical class 0.000 description 1
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 1
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 description 1
- 108091005608 glycosylated proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000035122 glycosylated proteins Human genes 0.000 description 1
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 239000002622 gonadotropin Substances 0.000 description 1
- 239000003630 growth substance Substances 0.000 description 1
- 210000003128 head Anatomy 0.000 description 1
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- BXWNKGSJHAJOGX-UHFFFAOYSA-N hexadecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCO BXWNKGSJHAJOGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003395 histamine H3 receptor antagonist Substances 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000710 homodimer Substances 0.000 description 1
- 229920001519 homopolymer Polymers 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 235000001050 hortel pimenta Nutrition 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 description 1
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002706 hydrostatic effect Effects 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 1
- 125000001841 imino group Chemical group [H]N=* 0.000 description 1
- 210000001822 immobilized cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000000984 immunochemical effect Effects 0.000 description 1
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 1
- 230000002584 immunomodulator Effects 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 229910052738 indium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 239000003701 inert diluent Substances 0.000 description 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 108091006086 inhibitor proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000013101 initial test Methods 0.000 description 1
- 229940102223 injectable solution Drugs 0.000 description 1
- 239000013546 insoluble monolayer Substances 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YWXYYJSYQOXTPL-SLPGGIOYSA-N isosorbide mononitrate Chemical compound [O-][N+](=O)O[C@@H]1CO[C@@H]2[C@@H](O)CO[C@@H]21 YWXYYJSYQOXTPL-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002540 isothiocyanates Chemical class 0.000 description 1
- 239000000644 isotonic solution Substances 0.000 description 1
- 230000000155 isotopic effect Effects 0.000 description 1
- BQINXKOTJQCISL-GRCPKETISA-N keto-neuraminic acid Chemical compound OC(=O)C(=O)C[C@H](O)[C@@H](N)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO BQINXKOTJQCISL-GRCPKETISA-N 0.000 description 1
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 150000002605 large molecules Chemical class 0.000 description 1
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 1
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 1
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 231100000636 lethal dose Toxicity 0.000 description 1
- GFIJNRVAKGFPGQ-LIJARHBVSA-N leuprolide Chemical compound CCNC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 GFIJNRVAKGFPGQ-LIJARHBVSA-N 0.000 description 1
- 229960004338 leuprorelin Drugs 0.000 description 1
- 239000004571 lime Substances 0.000 description 1
- 230000006372 lipid accumulation Effects 0.000 description 1
- 230000004132 lipogenesis Effects 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000004973 liquid crystal related substance Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000007937 lozenge Substances 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- HWYHZTIRURJOHG-UHFFFAOYSA-N luminol Chemical compound O=C1NNC(=O)C2=C1C(N)=CC=C2 HWYHZTIRURJOHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004880 lymph fluid Anatomy 0.000 description 1
- 208000029791 lytic metastatic bone lesion Diseases 0.000 description 1
- 229920001427 mPEG Polymers 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 230000009245 menopause Effects 0.000 description 1
- 239000002923 metal particle Substances 0.000 description 1
- 229940071648 metered dose inhaler Drugs 0.000 description 1
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 1
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 1
- YACKEPLHDIMKIO-UHFFFAOYSA-N methylphosphonic acid Chemical compound CP(O)(O)=O YACKEPLHDIMKIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002679 microRNA Substances 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000011278 mitosis Effects 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 125000004573 morpholin-4-yl group Chemical group N1(CCOCC1)* 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000004220 muscle function Effects 0.000 description 1
- 230000015604 muscle hyperplasia Effects 0.000 description 1
- 230000012042 muscle hypertrophy Effects 0.000 description 1
- 208000017445 musculoskeletal system disease Diseases 0.000 description 1
- 210000003098 myoblast Anatomy 0.000 description 1
- 210000000107 myocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000001114 myogenic effect Effects 0.000 description 1
- WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N n-Pentadecanoic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)=O WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940097496 nasal spray Drugs 0.000 description 1
- 239000007922 nasal spray Substances 0.000 description 1
- 230000007830 nerve conduction Effects 0.000 description 1
- 210000000944 nerve tissue Anatomy 0.000 description 1
- 208000004296 neuralgia Diseases 0.000 description 1
- CERZMXAJYMMUDR-UHFFFAOYSA-N neuraminic acid Natural products NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO CERZMXAJYMMUDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004498 neuroglial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002232 neuromuscular Effects 0.000 description 1
- 208000021722 neuropathic pain Diseases 0.000 description 1
- 230000000324 neuroprotective effect Effects 0.000 description 1
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000956 nontoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000000346 nonvolatile oil Substances 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 238000007899 nucleic acid hybridization Methods 0.000 description 1
- 235000003170 nutritional factors Nutrition 0.000 description 1
- 229940054441 o-phthalaldehyde Drugs 0.000 description 1
- 230000000414 obstructive effect Effects 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QYSGYZVSCZSLHT-UHFFFAOYSA-N octafluoropropane Chemical compound FC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F QYSGYZVSCZSLHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 108010007425 oligomycin sensitivity conferring protein Proteins 0.000 description 1
- 238000002515 oligonucleotide synthesis Methods 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 230000011164 ossification Effects 0.000 description 1
- 230000001009 osteoporotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 1
- 239000003973 paint Substances 0.000 description 1
- 238000004091 panning Methods 0.000 description 1
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 1
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 230000032696 parturition Effects 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 239000000312 peanut oil Substances 0.000 description 1
- 230000006320 pegylation Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 108010091748 peptide A Proteins 0.000 description 1
- 239000000863 peptide conjugate Substances 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 208000030613 peripheral artery disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002688 persistence Effects 0.000 description 1
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-M phenolate Chemical compound [O-]C1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 150000008105 phosphatidylcholines Chemical class 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 1
- ZWLUXSQADUDCSB-UHFFFAOYSA-N phthalaldehyde Chemical compound O=CC1=CC=CC=C1C=O ZWLUXSQADUDCSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 239000004014 plasticizer Substances 0.000 description 1
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 1
- 229920001281 polyalkylene Polymers 0.000 description 1
- 229920013639 polyalphaolefin Polymers 0.000 description 1
- 239000004633 polyglycolic acid Substances 0.000 description 1
- 229920000193 polymethacrylate Polymers 0.000 description 1
- 150000008442 polyphenolic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 description 1
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 229950008882 polysorbate Drugs 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 1
- 235000019422 polyvinyl alcohol Nutrition 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 230000001323 posttranslational effect Effects 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 230000031877 prophase Effects 0.000 description 1
- 238000002331 protein detection Methods 0.000 description 1
- 108020001580 protein domains Proteins 0.000 description 1
- 239000003531 protein hydrolysate Substances 0.000 description 1
- 229940121649 protein inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000012268 protein inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 1
- 239000012460 protein solution Substances 0.000 description 1
- 230000012743 protein tagging Effects 0.000 description 1
- 210000004879 pulmonary tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000002510 pyrogen Substances 0.000 description 1
- 210000003314 quadriceps muscle Anatomy 0.000 description 1
- 238000012113 quantitative test Methods 0.000 description 1
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 238000000163 radioactive labelling Methods 0.000 description 1
- 235000008001 rakum palm Nutrition 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 239000002464 receptor antagonist Substances 0.000 description 1
- 229940044551 receptor antagonist Drugs 0.000 description 1
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 1
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 1
- 230000018406 regulation of metabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000002787 reinforcement Effects 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 238000005316 response function Methods 0.000 description 1
- 230000000284 resting effect Effects 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-M salicylate Chemical compound OC1=CC=CC=C1C([O-])=O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960001860 salicylate Drugs 0.000 description 1
- 235000019515 salmon Nutrition 0.000 description 1
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 1
- 239000012898 sample dilution Substances 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- 230000002784 sclerotic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002374 sebum Anatomy 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 210000004911 serous fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000008159 sesame oil Substances 0.000 description 1
- 235000011803 sesame oil Nutrition 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N sialic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)OC1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N 0.000 description 1
- 238000007873 sieving Methods 0.000 description 1
- 230000008054 signal transmission Effects 0.000 description 1
- 230000007781 signaling event Effects 0.000 description 1
- 150000004756 silanes Chemical class 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 235000012239 silicon dioxide Nutrition 0.000 description 1
- 210000001057 smooth muscle myoblast Anatomy 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 235000010267 sodium hydrogen sulphite Nutrition 0.000 description 1
- 229910001415 sodium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000037439 somatic mutation Effects 0.000 description 1
- 210000002023 somite Anatomy 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 1
- 230000007480 spreading Effects 0.000 description 1
- 238000003892 spreading Methods 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 210000003699 striated muscle Anatomy 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- BDHFUVZGWQCTTF-UHFFFAOYSA-M sulfonate Chemical compound [O-]S(=O)=O BDHFUVZGWQCTTF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- NJGWOFRZMQRKHT-UHFFFAOYSA-N surfactin Natural products CC(C)CCCCCCCCCC1CC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(C(C)C)C(=O)NC(CC(O)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)O1 NJGWOFRZMQRKHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NJGWOFRZMQRKHT-WGVNQGGSSA-N surfactin C Chemical compound CC(C)CCCCCCCCC[C@@H]1CC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)O1 NJGWOFRZMQRKHT-WGVNQGGSSA-N 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 210000004243 sweat Anatomy 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 230000001360 synchronised effect Effects 0.000 description 1
- 208000006379 syphilis Diseases 0.000 description 1
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 229960003484 testosterone enanthate Drugs 0.000 description 1
- VOCBWIIFXDYGNZ-IXKNJLPQSA-N testosterone enanthate Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](OC(=O)CCCCCC)[C@@]1(C)CC2 VOCBWIIFXDYGNZ-IXKNJLPQSA-N 0.000 description 1
- MPLHNVLQVRSVEE-UHFFFAOYSA-N texas red Chemical compound [O-]S(=O)(=O)C1=CC(S(Cl)(=O)=O)=CC=C1C(C1=CC=2CCCN3CCCC(C=23)=C1O1)=C2C1=C(CCC1)C3=[N+]1CCCC3=C2 MPLHNVLQVRSVEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 1
- 231100001274 therapeutic index Toxicity 0.000 description 1
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940033663 thimerosal Drugs 0.000 description 1
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 1
- CNHYKKNIIGEXAY-UHFFFAOYSA-N thiolan-2-imine Chemical compound N=C1CCCS1 CNHYKKNIIGEXAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K thiophosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=S RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229960002898 threonine Drugs 0.000 description 1
- 230000001732 thrombotic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- 238000012549 training Methods 0.000 description 1
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 1
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001228 trophic effect Effects 0.000 description 1
- 229920001664 tyloxapol Polymers 0.000 description 1
- MDYZKJNTKZIUSK-UHFFFAOYSA-N tyloxapol Chemical compound O=C.C1CO1.CC(C)(C)CC(C)(C)C1=CC=C(O)C=C1 MDYZKJNTKZIUSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004224 tyloxapol Drugs 0.000 description 1
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 125000000391 vinyl group Chemical group [H]C([*])=C([H])[H] 0.000 description 1
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 1
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 1
- 229920003169 water-soluble polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
- 230000002087 whitening effect Effects 0.000 description 1
- 238000002424 x-ray crystallography Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/22—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against growth factors ; against growth regulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
- A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
- A61P21/02—Muscle relaxants, e.g. for tetanus or cramps
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/06—Antihyperlipidemics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/18—Drugs for disorders of the endocrine system of the parathyroid hormones
-
- H—ELECTRICITY
- H05—ELECTRIC TECHNIQUES NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- H05K—PRINTED CIRCUITS; CASINGS OR CONSTRUCTIONAL DETAILS OF ELECTRIC APPARATUS; MANUFACTURE OF ASSEMBLAGES OF ELECTRICAL COMPONENTS
- H05K999/00—PRINTED CIRCUITS; CASINGS OR CONSTRUCTIONAL DETAILS OF ELECTRIC APPARATUS; MANUFACTURE OF ASSEMBLAGES OF ELECTRICAL COMPONENTS dummy group
-
- H—ELECTRICITY
- H05—ELECTRIC TECHNIQUES NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- H05K—PRINTED CIRCUITS; CASINGS OR CONSTRUCTIONAL DETAILS OF ELECTRIC APPARATUS; MANUFACTURE OF ASSEMBLAGES OF ELECTRICAL COMPONENTS
- H05K999/00—PRINTED CIRCUITS; CASINGS OR CONSTRUCTIONAL DETAILS OF ELECTRIC APPARATUS; MANUFACTURE OF ASSEMBLAGES OF ELECTRICAL COMPONENTS dummy group
- H05K999/99—PRINTED CIRCUITS; CASINGS OR CONSTRUCTIONAL DETAILS OF ELECTRIC APPARATUS; MANUFACTURE OF ASSEMBLAGES OF ELECTRICAL COMPONENTS dummy group dummy group
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance
Abstract
GDF8 واستخداماتها ANTIBODIES TO GDF8 AS USES THEREOF الملخص يتعلق الاختراع الحالي بتوفير جزيئات (molecules) جديدة متعلقة بعامل النمو والتباين 8 (growth and differentiation factor‑8) (GDF8)، بالتحديد epitopes يخص GDF8 ومضادات نوعية (specific antagonists) أخرى من GDF8 بالتحديد مضادات أجسام مضادة GDF8 (anti‑GDF8 antibodies) أو protein ارتباط مولد مضاد (antigen binding protein) أو أجزاء منهما، التي قد تثبط نشاط GDF8 والإشارة في المعمل و/أو في الجسم الحي. يتعلق الشرح أيضا بتوفير اختبار مناعي (immunoassay) يستخدم للكشف عن وتقدير كمية GDF8. يتعلق الشرح أيضا بتوفير طرق لتشخيص، منع، تخفيف، وعلاج اضطرابات تصاحب GDF8، مثلا، اضطرابات تحللية للعضلات، العظام، وأيض insulin. أخيرا، يتعلق الشرح بتوفير أدوية لمعالجة هذه الاضطرابات باستخدام مضادات الأجسام (antibodies)، polypeptides، polynucleotides، والنواقل (vectors) من الاختراع.
Description
¥ : مضادات أجسام ضد 0118 واستخداماتها ANTIBODIES TO 6158 AS USES THEREOF الوصف الكامل خلفية الاختراع إ يتعلق المجال التقني للاختراع ب epitope(s) خاصة بنمو وتباين العامل ١ A (GDF8) (growth and differentiation factor-8) ومضاداته (Mix) ممائلات «peptide مضادات أجسام مضادة 6018 (مثلاء مضادات أجسام فأرية؛ آدمية ومكتسبة السمة الآدمية؛ © أجزاء منهاء إلخ)؛ «dali. polynucleotides 8 تتثبيطية؛ إلخ) التي يمكن استخدامها لتثبيط نشاط GDF8 في المعمل و/أو في الجسم الحي. يتعلق المجال التقني إضافيا بطرق اختبار مناعي للكشف عن 078 في عينات بيولوجية بجانب طرق معالجة؛ تخفيف؛ منع؛ تشخيص؛ توقع حدوث؛ و/أو مراقبة اضطرابات تصاحب GDF (مثلاء اضطرابات عضلية؛ اضطرابات عصبية عضلية؛ اضطرابات تحلل عظمي؛ اضطرابات عظمية مستحثة ٠ أو أيضية؛ اضطرابات غير dias اضطرابات أيض glucose أو اضطرابات متعلقة ب (insulin ؛ بصفة خاصة في نساء لديهم القدرة على الإنجاب. إن نمو وتباين العامل ((GDF8) (growth and differentiation factor-8) A المعروف أيضا بأنه statin عضلي ؛ هو protein تم إفرازه وعضو عائلة فائقة Jalal النمو المحول beta (TGF-B) (transforming growth factor-beta) من عوامل نمو مرتبطة بنائيا. لأعضاء هذه ٠ العائلة الفائقة خواص مولدة morphene ومنظمة للنمو: (Kingsley et al. (1994) Genes Dev. 8:1 33-46; Hoodless et al. (1998) Curr.
Topics Microbiol.
Immunol. 228:235-72). يخلق GDF8 آدمي على أنه protein مصدر أولي 42 amino 375 الذي يشكل معقد .homodimer أثناء المعالجة؛ ينشق peptide | لأولي الطرفي-800100؛ المعروف بأنه peptide’ ٠ - مصاحب للكمون (LAP) '(latency-associated peptide) كما يظل مرتبطا بصورة غير تساهمية مع chomodimer مما يعمل على تشكيل معقد غير نشط مصمم 'معقد كامن صغير :"(small latent complex) (Miyazono et al. (1988) J.
Biol.
Chem. 263:6407-15; Wakefield et al. (1988) J.
Biol. Chem. 263:7646-54; Brown et al. (1999) Growth Factors 3 :35-43; Thies et al. Growth Factors 18:251-59; Gentry et al. (1990) Biochemistry 29: 6851-57; Yo )2001( عل .
ذ v Derynck et al. (1995) Nature 1 -05; Massague (1990) Ann.
Rev.
Cell Biol. .)12:597-641 إن statin Jie proteins جريبي 5 proteins متعلقة ب statin جريبي تتضمن :GASP-1 (Gamer et. al. (1999) Dev Biol. 208:222-232, US Patent Pub No. 2003-01 80306-Al; US Patent Pub No. 2003-0162714-A1) 8 كما تربط GDF8 homodimers ناضجة وتثبط النشاط البيولوجي لأجل .GDF8 يظهر اصطفاف ترتيب GDF8 amino acid المستنتج من أنوا 2 عديدة أن 8 تتم حمايته بدرجة كبيرة: (McPherron et al. (1997) Proc.
Natl.
Acad.
Sci.
U.S.A. 94:12457-61). ٠ تكون ترتيبات GDF8 آدمي؛ فأري؛ من حيوان قارض؛ من خنزير؛ ومن دجاج مماثلة بنسبة ٠ في منطقة الطرف-0؛ بينما يختلف 01018 من قرد ob ly وضأني بمقدار 3 Ladd amino acids عند الطرف-). إن المستوى الحالي من حماية GDF8 خلال | لأنواع يقترح أن 00178 له وظيفة فسيولوجية أساسية. لقد اتضح أن 0118 يلعب دورا رئيسيا في تنظيم التطور العضلي والاتزان البدني بتثبيط ٠ كل من انقسام وتباين الخلايا الأولية العضلية والخلايا التابعة: (Lee and McPherron (1999) Curr.
Opin.
Genet.
Dev. 9:604-7; McCroskery et al. J.
Cell.
Biol. 162:1135-47). )2003( يتم مبكرا إظهار ذلك في العضلات الهيكلية النامية؛ ويستمر الإظهار في العضلات الهيكلية calla يفضل في أنوا ع ارتجافات سريعة. لقد تدخل GDF8 أيضا في إنتاج enzymes معينة "٠ للعضلة (مثلاء (creatine kinase وانقسام خلية عضلية أولية (00/43781 (WO إن الإظهار الزائد لأجل 0018 في ob بالغة يؤدي إلى فقد عضلي كبير: (Zimmers et al. (2002) Science 296:1486-88). بصورة مشابهة؛ تشير دراسات عديدة إلى أن إظهار 00178 زائد يصاحبه فقدان عضلي بسبب ‘HIV (Gonzalez-Cadavid et al. (1998) Proc.
Natl.
Acad.
Sci.
U.S.A. 95:14938-43). Yo على العكس من هذاء تتميز فئران طفرية ناقصة 8 بتضخم ملحوظ وتنسج مفرط في عضلة هيكلية وبناء عظمي لحائي متغير: نعل
. ¢ (McPherron et al. (1997) Nature 387:83-90; Hamrick et al. (2000) Bone 27:343-49). أيضاء لقد اتضح أن الطفرات الطبيعية التي تحول جين GDF8 غير نشط تتسبب في كل من تضخم مفرط وتنسج مفرط في الحيوانات والآدميين: (Lee and McPherron (1997), supra). 0 على سبيل JG تكون الزيادة في كتلة العضلة الهيكلية واضحة في طفرات 8 طبيعي في الماشية: (Ashmore et al. (1974) Growth 38:501-07; Swatland et al. (1994) J.
Anim.
Sci. McPherron et al., supra; Kambadur et al. (1 997) Genome Res. 7:910-15). ;38:752-57 إن عدد من الاضطرابات العظمية والعضلية في الآدميين والحيوانات يصاحبها خلل وظيفي ٠ لنسيج عضليء وبذلك؛ قد يصاحبها أيضا 8. على سبيل المثال؛ قد يدخل 0018 في ! السبب المرضي للتصلب الجانبي غير مغذي للعضلات (amyotrophic lateral sclerosis) «(“ALS”) سوء تغذية عضلية ¢“MD”) (muscular dystrophy) متضمنا سوء تغذية عضلة «Duchenne سوء تغذية عضلة في لفافة لوح الكتف؛ وسوء تغذية عضلي عضدي في لفافة من لوح (SH ضمور عضلي؛ عرض النفق الرسغي؛ ضمور عضو؛ هشاشة؛ مرض إعاقة ! Ye رثئوية احتقاني (COPD) (congestive obstructive pulmonary disease) فقدان قوة وكتلة العضلات» (dla أو أعراض فقدان عضلي تتسبب فيها أمراض وحالات أخرى. يعتقد أيضا أن 0018 يشارك في عمليات فسيولوجية أخرى واضطرابات متعلقة بذلك؛ : متضمنة الاتزان البدني بواسطة glucose أثناء تطور مرض السكر من النوع oY خلل تحمل ُ glucose أعراض أيضية (أي؛ أعراض edie) العرض (X مشتملة على Ulla متزامنة ٠ المجموعة شروط صحية (والتي قد تتضمن مقاومة cinsulin سمنة حول منطقة البطن» خلل إٍْ مستوى الدهن في الدم؛ ارتفاع الضغط» التهاب مزمن؛ حالة تخثرية أولية؛ إلخ) التي تعرض { شخص ما لخطورة كبيرة للإصابة بمرض السكر من النوع 7 و/أو مرض قلبي)؛ مقاومة ْ insulin (مثلاء مقاومة تسببها إصابة رضية مثل الحروق أو عدم توازن i (nitrogen واضطرابات نسيج غير دهني (Jia) السمنة؛ خلل مستوى الدهن في الدم؛ مرض كبدي دهني Ye غير «alcoholic إلخ): ُ (Kim et al. (2000) Biochem.
Biophys.
Res.
Comm. 281:902-06). YALE 4
° حاليا » هناك القليل من العلاجات الموثوق بها أو الفعالة لمعالجة تلك الأمراض. إن السبب المرضي لهذه العمليات يؤكد أن 8 يعمل كهدف محتمل في معالجة هذه الاضطرابات : المتعلقة بذلك. بالإضافة إلى اضطرابات عصبية عضلية في آدميين» هناك أيضا حالات متعلقة بعامل © نمو مع فقد في العظم؛ Jia هشاشة العظام والتهاب مفصلي عظميء الذي يؤثر بصورة سائدة في النساء كبيرات السن و/أو النساء ما بعد سن اليأس. إن هذه الأمراض والاضطرابات : العظمية الأيضية تتضمن انخفاض كتلة العظم بسبب علاج glucocorticoid مزمن؛ فشل ٍ تتاسلي قبل الأوان ؛ كبح candrogen نقص cvitamin D فرط ثانوي لنشاط الغدة الجاردرقية؛ ا أمراض نقص التغذية؛ وفقدان شهية عصابي. على الرغم من تفعيل علاجات حالية عديدة ؛ ٠ بتثبيط ارتشاف العظم فإن العلاج الذي يحث على تكوين العظام عبارة عن معالجة بديلة مفيدة. لأن 0118 يلعب دورا في تطور العظم بالإضافة إلى تطور عضلي؛ يكون أيضا 8 هو هدف فارماكولوجي ممتاز لمعالجة اضطرابات محللة للعظم. : بالمتل مع أعضا ء أخرى من عائلة عامل النمو المحول م (transforming growth factor-B) : «(TGF-p) يخلق 0088 على أنه protein مصدر أولي amino acid 376 محتوي على ترتيب : ٠ إشارة؛ مجال سيطرة peptide أولي طرفي-8» ومجال سيطرة طرفي-© عبارة عن جزيء نشط. يفرز GDF8 في شكل متأخر بالارتباط مع peptide أولي خاص به peptide) مصاحب : للتأخير ¢(LAP «(latency-associated peptide) إن معالجة محللة protein بين مجال سيطرة peptide أولي ومجال سيطرة طرفي-0 تنتج peptide أولي طرفي-11 وشكل ناضج من i .GDF8 إن كلا من dimers متصلة بواسطة disulfide لشكل 8 ناضج وغير معالج؛ و GDF8 dimer ٠٠ المعالج يمثل الشكل النشط فقط من protein في المصل؛ بجانب العضلة الهيكلية؛ إٍْ وجد أن 8 مرتبطا مع عدة proteins قادرة على تعديل نشاطه؛ إفرازه أو ارتباط مستقبله. ا يوضح 00178 تأثيراته خلال عائلة مستقيل serine/threonine kinase heterotetramer إ غشاء انتقالي؛ حيث يعزز نشاطه مستقبل ctransphosphorylation مما يؤدي إلى إشارة 1 نشاط .serine/threonin kinase لقد اتضح أن مسار GDF8 يشمل ارتباط dimer 01178 نشط إ YO مع مستقبل Je الانجذاب» ¢ACtIIRB الذي يقوم بتوظيف وتنشيط transphosphorylation ا Jit dl منخفض الانجذاب؛ ALKA/ALKS لقد تبين أيضا أن [ proteins Smad 2 و3 proteins Smad يتم تنشيطهما على التوالي حيث يشكلان معقدات مع 3 YAS 3
0 Smad 4 ثم تنقل إلى algal حيث يتم بعدئذ تنشيط نسخ الجين المستهدف. يوضح Lee (Proc Natl Acad Sci USA 2001, 98 :9306-9311) McPherron y أن مستقبل i ActRIIB قادر على إنتاج تأثير 0088 في الجسم الحي؛ كإظهار شكل سائد سالب من 8001805 في الفئران التي تحاكي نقصان جين .GDF8 هه لقد اتضح أنه تحت تأثير 8 . تتراكم الخلايا الأولية C2C12 في الطورين 60/01 و02 من دورة الخلية؛ بالتالي يقل عدد خلايا الطور 8. يحث 0118 Lind على فشل تباين ١ خلية عضلية dull مصاحب لانخفاض شديد في إظهار علامات التباين. إن إظهار 60:8 J أيضا من معدل الموت المبرمج للخلايا تحت شروط كل من الانقسام والتباين: (Thomas et al., J.
Biol Chem 2000, 275 :40235-40243). ٠١ يؤدي تثبيط إظهار statin عضلي (GDFS) إلى US من تضخم وفرط تنسج عضلي: ! (Lee and McPherron, supra; McPherron et al., supra). , إن statin عضلي ينظم بصورة سلبية تجديد العضلات بعد الإصابة؛ ويؤدي نقص statin عضلي في oly مزالة 01178 إلى سرعة تجدد العضلات: [١ (McCroskery et al., (2005) J.
Cell.
Sci. 118:3531-41). ١٠ لقد اتضح أن مضادات الأجسام المضادة 010178 آدمي (طلب منشور براءة اختراع الولايات المتحدة الأمريكية رقم )٠٠١١4/0147747 بأنه يربط 00178 ويثبط نشاط 01178 في المعمل ْ والجسم الحي؛ متضمنا نشاط GDF8 المصاحب لتنتظيم كتلة عضلة هيكلية وكثافة عظمية : بصورة سلبية. على سبيل المثال؛ إن مضادات ١ لأجسام التي تعادل statin عضلي تزيد وزن ِ: الجسم؛ كتلة عضلة هيكلية؛ وحجم العضلة وقوتها في العضلات الهيكلية لفئران من النوع ٠ البري: : (Whittemore et al. (2003) Biochem.
Biophys.
Res.
Commun. 300:965-71) : وفأر emdx نموذج للضمور العضلي: : (Bogdanovich et al. (2002) Nature 420:418-21; Wagner et al. (2002) Ann.
Neurol. : .)52:832-36 : Yo بالإضافة لذلك؛ إن مضادات أجسام statin عضلي في هذه الفئران تقلل من تلف الحجاب الحاجزء وهو أيضا عضلة مستهدفة أثناء البحث عن سبب مرض ALS لقد تم افتراض أن تاثير عوامل النمو؛ HGF Jie على العضلات قد يرجع سببه إلى تثبيط إظهار statin عضلي : م :
«(McCroskery et al. (2005), supra) وبذلك يساعد في انتقال التوازن بين التجديد والتحلل في اتجاه موجب. مع هذاء لم تكن مضادات الأجسام تلك من الفن السابق معينة لأجل (GDF8 أي أن مضادات الأجسام هذه لها انجذاب عال لأعضاء أخرى من العائلة الفائقة Jie (TGF-B .BMP11 ° حتى الآن؛ تقوم أيضا كل المثبطات المعروفة لنشاط peptide Nis) GDF أولي؛ مستقبل 8008118 قابل «lisa ll مضادات أجسام مضادة «GDF8 إلخ) بمعادلة الأنشطة البيولوجية لعوامل أخرى (مثلا؛ 84011؛ cactivin إلخ) التي لها وظائف بيولوجية هامة. على سبيل المثال؛ يلعب activin و330011 أدوار هامة Sl التخلق الجنيني. يعرف activin BA على أنه عامل نمو تناسلي حرج؛ ويكون 31011 مسئولا عن نقل مثيل للهيكل ٠ المحوري. إن فثران ناقصة 314011 متماثلة الجينات معرضة للوفاة أثناء التوالد؛ وتكون الفئران التي بها نسخة من النوع البري واحدة لجين 1 حية لكن بها عيوب في هياكلها. عندما يلعب activin و BMP11 أدوار هامة أثناء التخلق الجنيني؛ فإن مضاد يثبط GDF8 وعوامل أخرى؛ Mia 31011 يعرض مخاطر أمنية نظرية والتي تستطيع أن تقدم سواء كسمية في المرضى أو كسمية إنتاجية في؛ lia نساء لديهم القدرة على الإنجاب. لذلك؛ هناك حاجة ٠ لمركبات وطرق معالجة تساهم في زيادة كلية لكتلة العضلة و/أو قوتها و/أو كثافة العظم؛ diay خاصة في الآدميين؛ لكنها لا تتدخل cae مثلاء 81/011. بمعنى آخر؛ هناك Lala لتثبيط (pes لنشاط 01018 في معالجات اضطرابات مصاحبة GDF8 التي يفضل فيها أن تزيد كتلة العضلة؛ حجمهاء قوتهاء إلخ؛ بالتحديد في نساء لديهم القدرة على الإنجاب. بسبب تطور طرق استخدام عوامل تضبط «GDF-8 هناك حاجة لتطوير طرق مراقبة وجعل Te (عطاء هذه العوامل نموذجيا إلى الفردد. بصفة خاصة؛ لقابلية قياس مستويات GDF-8 protein في الموائع البيولوجية تطبيقات هامة لمحاولات إكلينيكية متقدمة. على سبيل المثال ؛ قد تكون مستويات GDF-8 للتدوير تشخيصية لحالات مرضية يمكنها الاستفادة من علاج مضاد 007-8؛ أو يمكنها توقع أي الأفراد أكثر استجابة لعلاج مضاد 0017-8. ٍ بالإضافة لذلك؛ إن التغيرات في مستويات GDF-8 في الدم الطرفي أثناء المعالجة المضادة Yo 0017-48 قد تكون مؤشرات مبكرة لاستجابة مقاسة لاحقة في AS و/أو وظيفة العضلة. لتحقيق هذه الأهداف التي تسعى للوصول للمستوى الأمثل؛ تتطلب طرق للكشف عن أو مراقبة مستويات GDF-8 protein في الموائع الحيوية؛ Jie المصل والبلازما. من المرغوب
A
لتحديد الأفراد GDF-8 ؛ وبعد المعالجة مع عامل يضبط Lil قبل؛ GDF-8 مراقبة مستويات الملاثئمين لتلك المعالجة؛ على سبيل المثال؛ مراقبة استجاباتهم للمعالجة؛ وتطورهم بعد المعالجة. بالتحديد؛ تتطلب طرق تسمح بتحديد و/أو تقدير كمية مستويات 0017-8 الداخلي ومضادات أجسام GDF-8 متضمنة مثبطات «GDF-8 كاستجابة لإعطاء عوامل تضبط .GDF-8 مضادة © طبقا لذلك يعتبر الغرض الرئيسي للاختراع الحالي هو توفير مركبات وطرق تثبط بالتحديد في GDF-8 نشاط 06018 بالإضافة إلى اختبارات مناعية للكشف عن وتقدير كمية مستويات في المصل والبلازما. Ola العينات الحيوية؛ الوصف العام للاختراع ارتباط مولد مضاد ترتّبط proteins يعتمد الاختراع على اكتشاف مضادات أجسام أو Ve (GDF8) (Growth and Differentiation Factor 8) A بصورة محددة مع عامل النمو والتباين ارتباط 01178 مع مستقبله أو Die) و/أو تعارض بالتحديد نشاط 60178 واحد على الأقل على تعريف Mal حالات أخرى لإرسال إشارات عن طريق 0018). يعتمد أيضا الاختراع proteins 5) GDF8 لأجسام المضادة ١ على 00178 المدركة بواسطة مضادات 05
GDF8 ارتباط مولد مضاد المحددة هذه؛ هذا بسبب أن مضادات الأجسام للاختراع الخاصة ب ٠
BMP11 ولا ترتبط بالتحديد مع مثلا يوفر الاختراع أيضا مضادات خاصة «GDF الخاصة ب epitope(s) علاوة على توفير (specific 0018 antagonists) خاصة GDF8 لأجل 8 (إيشار إليها هنا 'بمضادات
Nid) إلخ)؛ مثلاء مضادات تعارض بصفة خاصة ")06078 antagonist) 8 Alias’ حالات إرسال إشارة عن طريق (Bid) تثبطء تقلل؛ و/أو تعادل) نشاط 0018 واحد على الأقل ٠ ولا تعارض بصفة o((ALKA/ALKS (مثلا؛ ارتباط 01018 مع مستقبله (مثل؛ مستقبل 8
GDF-8 يوفر الاختراع الحالي أيضا طرق للكشف عن وتقدير كمية .BMP11 خاصة نشاط في العينات الحيوية. في تجسيدات معينة؛ تشتمل الطرق على اختبارات مناعية؛ وتكون العينة يوفر إضافيا الاختراع مجموعات لاستخدامها في طرق الاختراع. ٠ هي المصل و/أو البلازما الخاصة المعلنة في طرق معالجة (التي GDF الاختراع طرق استخدام مضادات Lad jig YO مثلاء (GDFS تتضمن تخفيف؛ منع؛ تشخيص؛ توقع حدوث)؛ أو مراقبة اضطرابات مصاحبة اضطرابات عضلية؛ اضطرابات عصبية عضلية؛ اضطرابات تحلل العظام» اضطرابات عظمية
YAET q اضطرابات متعلقة ب glucose اضطرابات غير دهنية؛ اضطرابات أيض dad مستحثة أو إلخ. cinsulin لذلك» في أحد الجوانب؛ يوفر الاختراع مضادات لأجل 0178 حيث تشتمل المضادات معزول nucleic acid $GDF8 مجال سيطرة ربط (A peptide على واحد على الأقل من ممائل تثبيطية polynucleotide لممائل 56 في مجال سيطرة ربط 06318؛ amino acid يشفر © ٍ مولد مضاد يرتبط بصفة Jali) proteins أو GDF8 ومضاد جسم مضاد ¢GDF8 خاصة ب .81/011 خاصة مع 0018 ولا يرتبط بالتحديد مع
Jian في أحد التجسيدات؛ يوفر الاختراع مضاد موصوف هنا حيث يكون المضاد هو مجال سيطرة ربط 0018 وينتقى من المجموعة المتكونة أساسيا من ترتيب (A peptide من تعريف الترثيب رقم: amino acid المنتقى من المجموعة المتكونة من ترتيب amino ونع ٠ من تعريف الترتيب amino acid من تعريف الترتيب رقم: 7؛ ترتيب amino acid AA ؛ ¢ من تعريف amino acid وترثيب 4٠١ من تعريف الترتيب رقم: amino acid ؛ ترتيب A رقم: الموصوف peptide في بعض التجسيدات؛ يوفر الاختراع مضاد وهو مماثل .١7 : الترتيب رقم peptide هنا والذي تم تدويره. في بعض التجسيدات؛ يوفر الاختراع مضاد وهو مماثل الموصوف هنا والذي تم تدويرهِ بواسطة رابطة ع0180150. في أي واحد أو أكثر من التجسيدات ١٠ يوفر الاختراع مضاد وهو مماقل 56م الموصوف هنا والذي به في بعض التجسيدات يوفر الاختراع مضاد وهو مماثل ٠ واحد على الأقل D-amino 41 الذي قد يستخدم كمولد مناعي. peptide في تجسيد آخر يوفر الاختراع مضاد موصوف هنا حيث يكون المضاد هو مضاد جسم
GDF8 ارتباط مولد مضاد أو جزء منه الذي يرتبط بصفة خاصة مع protein «GDF8 مضاد ٠ ارتباط مولد المضاد protein كما ينتقى مضاد الجسم أو (BMPIT لكنه لا يرتبط بالتحديد مع أحادي Ab (mAb) gill أحادي Ab عديد النسخ؛ Ab من المجموعة المتكونة من: ثلاثي Ab tetrameric Ab مكتسب السمة الأدمية؛ Ab عديد الخصوصية؛ Ab الخصوصية؛ وحيد Ab خاص بمجال سيطرة؛ Ab سلسلة وحيدة؛ Ab متعدد الخصوصية؛ Ab التكافؤ؛ Ab ¢ScFe اندماج protein اندماج؛ protein محذوف مجال السيطرة؛ Ab مجال السيطرة؛ Yo
Abs طفري؛ Ab مهجن؛ Ab مخلق؛ Ab مصنع؛ Ab هجين؛ Ab وحيد السلسلة؛ جزء (Fv جزء tFab' مطعمةة«0؛ جزء مضاد جسم الذي قد يتضمن ط178؛ 17)80(2؛ جزء
YA£T yo ارتباط مولد مضاد الذي قد يتضمن protein ¢dAb جزء ¢Fd جزء «(ScFv) وحيد السلسلة Fy مقيد؛ جسم مقاس بالنانو؛ جسم FR3-CDR3-FR4 peptide tCDR3 peptide أجسام ثنائية؛
IgNAR مجال سيطرة ¢(SMIPs) مقاس بالنانو ثنائي التكافؤ؛ أدوية مناعية نسقية صغيرة متغير فائق؛ وجسم صغير. في بعض التجسيدات يكون مضاد الاختراع هو مضاد جسم أحادي النسخ. في بعض التجسيدات؛ يكون مضاد الاختراع هو مضاد جسم مكتسب السمة 0 الآدمية. protein في بعض التجسيدات يوفر الاختراع مضاد عبارة عن مضاد جسم؛ ارتباط مولد مضاد أو جزء منه خاص لأجل 0318 متكون من منطقة تحديد تكملة cui واحدة على الأقل مشتملة على (CDR) (complementarity determining region) tad) من تعريف الترتيب amino acid منتقى من المجموعة المتكونة من: ترتيب 0 acid ٠ من تعريف الترتيب amino acid ترتيب ٠١ من تعريف الترتيب رقم: amino acid ترتيب ٠ ترتيب VY مسن تعريف الترتيب رقم: amino acid ترتيب ١ رقم: من تعريف الترتيب رقم: 64 7؛ amino acid ترتيب YY من تعريف الترتيب رقم: 0 acid من تعريف الترتيب رقم: amino acid ؛ ترتيب Yo من تعريف الترتيب رقم: amino acid ترتيب من تعريف الترتيب amino acid ترتيب «YY من تعريف الترتيب رقم: 0 acid ترتيب 17 ٠ من تعريف amino acid من تعريف الترتيب رقم: 79 ترتيب amino acid ترتيب (YA رقم: .3١ الترتيب رقم: «GDF8 في بعض التجسيدات يكون مضاد الاختراع عبارة عن مضاد جسم مضاد أولىء ثانية CDR منه مشتمل على سلسلة ثقيلة تشمل gh ارتباط مولد مضاد أو protein من تعريف amino acid منتقى من ترثيب amino acid الأولى على CDR وثالثة؛ حيث تشتمل ٠ الثانية CDR تشتمل (YO من تعريف الترتيب رقم: amino acid الترتيب رقم: $19 وترتيب من تعريف amino acid وترتيب ¢Y ٠ منتقى من تعريف الترتيب رقم: amino acid على i منتقى من ترتيب amino acid الثالقة على CDR وتشتمل YU الترتيب رقم:
XY من تعريف الترتيب رقم: amino acid من تعريف الترتيب رقم: ١؟ ¢ وترتيب amino acid ارتباط مولد مضاد للاختراع على protein في بعض التجسيدات يشتمل مضاد الجسم أو amino acid منتقى من المجموعة المتكونة من: ترتيب amino acid تشمل ترتيب ald سلسلة NA من تعريف الترتيب رقم: amino acid وترتيب VE من تعريف الترتيب رقم: تم
١١ في بعض التجسيدات » يكون مضاد الاختراع عبارة عن مضاد جسم مضاد 0078 أو أولى؛ ثانية وثالثة؛ CDR ارتباط مولد مضاد مشتمل على سلسلة خفيفة تشمل protein من تعريف amino acid BA منتقى من amino acid لأولى على ١ CDR Jain حيث الثانية CDR تشتمل «YA : من تعريف الترتيب رقم amino acid وترتيب ¢VY الترتيب رقم: amino وترتيب ¢YY من تعريف الترتيب رقم: amino acid منتقى من ترتيب amino acid على © منتقى من ترتيب amino acid الثالثة على CDR من تعريف الترتيب رقم: 79؛ تشتمل acid
Xo من تعريف الترتيب رقم: amino acid وترتيب ¢Y 4 من تعريف الترتيب رقم: amino acid ارتباط protein أو GDF8 في بعض التجسيدات يكون مضاد الاختراع هو مضاد جسم مضاد منتقى amino acid مولد مضاد مشتمل على سلسلة خفيفة تشمل ترتيب amino من تعريف الترتيب رقم: 11 وترتيب amino acid من المجموعة المتكونة من: ترتيب ٠
AY من تعريف الترتيب رقم: acid في بعض التجسيدات يكون مضاد الاختراع عبارة عن مضاد جسم مضاد 00178 أو من تعريف amino acid ارتباط مولد مضاد مشتمل على سلسلة خفيفة تشمل ترتيب protein من تعريف amino acid الترتيب رقم: ١٠؛ ومشتمل إضافيا على سلسلة ثقيلة تشمل ترتيب في بعض التجسيدات يكون مضاد الاختراع عبارة عن مضاد جسم مضاد .٠ الترتيب رقم: ٠ amino acid ارتباط مولد مضاد مشتمل على سلسلة خفيفة تشمل ترتيب protein أو 88 من amino acid ومشتمل إضافيا على سلسلة ثقيلة تشمل ترتيب VY من تعريف الترتيب رقم: يشفر أي polynucleotide بعض التجسيدات؛ يوفر الاختراع AVA تعريف الترتيب رقم: ia للاختراع» حسب الوصف GDF alias مشتمل على amino acids واحد أو أكثر من تثبيطي يرتبط polynucleotide في بعض التجسيدات يكون مضاد الاختراع عبارة عن Y. وجزيء مضاد SIRNA بصفة خاصة مع 60178 وينتقى من المجموعة المتكونة من: جزيء polynucleotides في بعض التجسيدات يوفر الاختراع أي واحد أو أكثر من ٠. للإحساس الموصوفة هنا التي تشفر مضادات الاختراع. في بعض التجسيدات يوفر الاختراع منتقى من المجموعة المتكونة من ترتيب amino acid يشفر ترتيب polynucleotide 1 من تعريف الترتيب رقم: amino acid من تعريف الترتيب رقم: ؛ ؛ ترتيب amino acid YO من تعريف الترتيب رقم: amino acid من تعريف الترتيب رقم: /؛ ترتيب amino acid ترتيب تجسيد آخر يوفر الاختراع BY من تعريف الترتيب رقم: 0 acid وترتيب ¢)
YAEL
VY
المعزول من ترتيسب polynucleotide bul] رحيث يتكون 06 من تعريف الترتيب رقم: nucleic acid منتقى من المجموعة المتكونة من: ترتيب 60 acid من تعريف الترثيب nucleic acid من تعريف الترتيب رقم : © ترثيب 6 acid ترتيب «VF من تعريف nucleic acid من تعريف الترتيب رقم: 9 ترتيب nucleic acid ترتيب oY : رقم لأجزاء من ذلك. nucleic acid وترتيبات VY الترتيب رقم: © في بعض التجسيدات يوفر الاختراع خلية عائلة تشمل أي واحد أو أكثر من ام الاختراع؛ حيث يكون polynucleotide متصل تشغيليا مع ترتيب تنظيمي. في تجسيد أخر يوفر الاختراع ناقل يشمل أيضا أي من polynucleotides | لاختراع. في تجسيد آخر يوفر الاختراع خلية عائلة تشمل ناقل مشتمل على أي واحد أو أكثر من Ve 55 سوام الاختراع. في بعض التجسيدات يوفر الاختراع طريقة لإنتاج مضاد 01078 من خلية Able مزروعة حسب الوصف هنا مشتملة على أي واحد أو أكثر من polynucleotides الاختراع ولعزل مضاد 60178 الظاهر بواسطة الخلية العائلة. في تجسيد آخر أيضا يوفر الاختراع مضاد 8 معزول ناتج من خلال طريقة لإنتاج مضاد 010178 حسب الوصف هنا. ب في جانب آخر للاختراع؛ يوفر الاختراع اختبار للكشف عن وجود 0118 في عينة من كائن ويشتمل على الخطوات التالية: اتحاد ( )١ العينة مع (7) عامل كاشف إمساك يربط 8 بصفة خاصة و(©) عامل كاشف للتحديد يربط GDFS بصفة خاصة ويكشف عن حدوث الارتباط النوعي أو عدمه بين عامل كاشف إمساك و0018 حيث يشير الكشف عن الارتباط النوعي إلى وجود GDF8 في العينة. 7 في أحد تجسيدات الاختراع يتفكك GDF8 الموجود في العينة من proteins ربط 01178 ومضاد 60178 الموجود في العينة. في أحد التجسيدات؛ يشتمل اختبار الاختراع إضافيا على اتحاد العينة مع مثبت للأس الهميدروجيني حامضي قبل اتحاد dal) مع عامل كاشف الإمساك؛ كما هو موصوف هنا. في تجسيد HAT يكون لمثبت الأس الهيدروجيني الحامضي في الاختبار للاختراع أس هيدروجيني بين ١ و١. في تجسيد آخر يكون الأس الهيدروجيني Xoo الهيدروجيني الحامضي حوالي oY لمثبت ve في أحد التجسيدات؛ يوفر الاختراع أي واحد أو أكثر من الاختبارات الموصوفة هنا حيث تنتقى العينة من المجموعة المتكونة من المصلء الدم الكامل؛ البلازماء العينة التشريحية؛ ا
VY
العينة النسيجية؛ معلق الخلية؛ اللعابء السائل الفمي؛ السائل المخي الشوكي؛ السائل السلوي؛ العرق؛ السائل الدمعي؛ السائل esl اللبأء إفراز من غدة الثدي؛ السائل الليمفاوي؛ all المعوي؛ السائل الزليلي والمخاط. في تجسيد آخرء يوفر الاختراع اختيار العينة من الدم الكامل؛ المصل أو البلازما. ° في أحد التجسيدات؛ يوفر الاختراع أي واحد أو أكثر من الاختبارات الموصوفة هنا حيث تشتمل خطوة الكشف على واحد على الأقل من اختبار ساندويتش واختبار الارتباط التنافسي. في بعض التجسيدات تشتمل خطوة الكشف عن اختبار ساندويتش. في بعض التجسيدات؛ تشتمل خطوة الكشف على واحد على الأقل من: الكشف عن التغير في معامل الانكسار عند السطح الضوئي الصلب المتلامس مع العينة؛ الكشف عن التغير ٠ في الإضاءة؛ قياس التغير في اللون؛ الكشضف عن التغيهر في النشاط الإشعاعي؛ القياس باستخدام مقياس تداخل ذي طبقة حيوية؛ القياس باستخدام الكشف بالكابول؛ القياس باستخدام التصوير الداخلي الخالي من العلامات؛ والقياس باستخدام الكشف الصوتي. في بعض التجسيدات؛ إن خطوة الكشف الخاصة بالاختراع تقيس التغير في اللون. في بعض التجسيدات؛ تشتمل خطوة الكشف عن اختبار منتقى من enzyme المجموعة المتكونة من: اختبار مادة ماصة مناعية متصلة مع ١ اختبار مادة كيميائية مشعة كهربية ¢(ELISA) (enzyme-linked immunosorbent assay) (radioimmunoassay) اختبار متاعي إشعاعي ¢(ECL) (electro-chemiluminescent assay) ¢(SPRIA) (solid-phase radioimmunoassay) اختبار مناعي إشعاعي طور صلب ¢(RIA) تصنيف خلية ¢(immunoprecipitation) ؛ ترسيب مناعي (immunoblotting) تبقع مناعي ٠ منشطة مشعة (FACS) (Fluorescent Activated Cell Sorting) في تجسيد آخر تشتمل خطوة الكشف على ELISA في أحد التجسيدات يتم الكشف عن وجود 00178 بواسطة الارتباط النوعي لمركب مع عامل الكشف الذي يربط 8 بصفة خاصة حيث يشتمل المركب إضافيا على Ade يمكن الكشف عنها. في تجسيد آخر تشتمل العلامة التي يمكن الكشف عنها على علامة واحدة على © الأقل منتقاة من المجموعة المتكونة من علامة enzyme علامة مشعة؛ ¢protein ile علامة ¢vitamin علامة لمادة سهلة الاصطباغ بالألوان ؛ علامة لنظير إشعاعي وعلامة جزيء
١ protein في تجسيد آخر تكون العلامة التي يمكن الكشف عنها هي علامة ASS electron والتي تشمل إضافيا صتامزط. في أحد التجسيدات؛ يوفر اختبار الاختراع عامل كاشف إمساك منتقى من المجموعة protein مضاد أو جزء منه؛ alge ارتباط protein المتكونة من مضاد جسم مضاد 8 ؛ ومجال سيطرة ربط 8. في تجسيد آخر؛ يوفر اختبار الاختراع أن يكون ¢GDF8 ربط © مضاد أو جزء منه alge ارتباط protein عامل كاشف إمساك هو مضاد جسم مضاد 0018؛
JA16.5 170-029 (MYO-028 RK22 81635 والذي ينتقى من المجموعة المتكونة من في بعض التجسيدات يكون عامل كاشف الإمساك هو 81635. في بعض التجسيدات يكون
RK22 عامل كاشف إمساك هو في أحد التجسيدات لاختبار الاختراع يتوافر عامل كاشف التحديد المنتقى من المجموعة Ve protein أو جزء منة؛ alias alge ارتباط protein «GDF8 المتكونة من: مضاد جسم مضاد في أحد التجسيدات؛ عامل الكاشف يكون مضاد جسم .GDF8 ربط 8 ومجال سيطرة ربط وينتقى من المجموعة المتكونة من: Ade مضاد أو جزءٍ alge ارتباط protein «GDF8 مضاد RK35 يوفر اختبار الاختراع بأن يكون عامل الكشف هو «AT و635ل0. في تجسيد 2
RK22 يوفر اختبار الاختراع بأن يكون عامل الكشف هو «AT في تجسيد 00 في أحد التجسيدات يوفر الاختراع اختبار يكون فيه عامل كاشف الإمساك عبارة عن يوفر الاختراع اختبار يكون OAT في تجسيد RK35 ويكون عامل الكشف عبارة عن RK22 ٍ RK22 وعامل الكشف عبارة عن RK35 عبارة عن lady) فيه عامل كاشف : للاختراع؛ يوفر الاختراع اختبار لتقدير كمية 0018 الموجودة في عينة من AT في جانب : عامل كاشف إمساك يربط (Y) كائن ويشتمل على الخطوات التالية: اتحاد )1( العينة مع Tr بصفة خاصة 5 )¥( عامل كشف يربط 01178 بصفة خاصة ويكشف عن حدوث 8 الارتباط النوعي أو عدمه بين عامل كاشف إمساك و6078 كما يتم تقدير كمية مستوى 1 في العيئة؛ حيث يشير الكشف عن الارتباط النوعي إلى وجود 0018 في العينة كما 8 i proteins يمكن تقدير كميته. في أحد التجسيدات للاختراع يتوافر 8 في العينة متفكك من 1 ومضاد 00178 الموجود في العينة. في أحد التجسيدات؛ يشتمل اختبار الاختراع GDF ربط 7 إضافيا على اتحاد العينة مع مثبت أس هيدروجيني حامضي قبل اتحاد العينة مع عامل كاشف ا ] الإمساك؛ كما هو موصوف هنا. في تجسيد آخر يكون لمثبت الأس الهيدروجيني الحامضي i YALE vo تجسيد آخر يكون الأس الهيدروجيني لمثبت الأس ET) أس هيدروجيني بين حوالي
Yoo الهيدروجيني الحامضي حوالي في جانب آخر للاختراع» يوفر الاختراع تركيبة دوائية لمعالجة (التي تتضمن تخفيف» و/أو منع) اضطراب مصاحب 8 في كائن تشتمل على مادة حاملة مقبولة دوائيا وينتقى مضاد في مجال سيطرة ربط peptide واحد على الأقل من المجموعة المتكونة من مماثل 60178 © في مجال سيطرةٍ ربط peptide Silos لأجل amino acid معزول يشفره nucleic acid ؛ protein «GDF ومضاد جسم مضاد GDF8 خاص ب hii polynucleotide ؛ 38 ارتباط مولد مضاد أو جزء منه مرتبط بصفة خاصة مع 6018 قد لا يرتبط بالتحديد مع .BMP11 peptide لاختراع على مماثل ١ في أحد التجسيدات تشتمل التركيبة الدوائية من Va منتقى من amino acid مكون أساسيا من ترتيب GDF8 لأجل pals لمجال سيطرة ربط amino acid من تعريف الترتيب رقم: 4 ؛ ترثتيب amino acid المجموعة المتكونة من ترتيب amino ترتيب ¢A ad) من تعريف الترتيب amino acid من تعريف الترتيب رقم: > ؛ ترتيب
AY من تعريف الترتيب رقم: amino acid ؛ وترتيب ٠١ تعريف الترتيب رقم: ge acid معزول يشفر nucleic acid في أحد التجسيدات تشتمل التركيبة الدوائية من الاختراع على Vo منتقى nucleic acid ويتكون أساسيا من ترتيب GDF8 خاص ب amino ا 4 nucleic من تعريف الترتيب رقم: ؟؛ ترتيب nucleic acid من المجموعة المتكونة من ترتيب ترتيب ¢V من تعريف الترتيب رقم: nucleic acid من تعريف الترتيب رقم : ©؛ ترتيب 120 ١١ من تعريف الترثيب رقم: nucleic acid من تعريف الترتيب رقم: ؟ ؛ ترتيب nucleic acid لأجزاء من ذلك. nucleic acid وترتيبات ٠ (GDF8 في أحد التجسيدات تشتمل التركيبة الدوائية من الاختراع على مضاد جسم مضاد ولا GDF8 مولد مضاد أو جزء منه مرتبط بصفة خاصة مع Jalil protein من تعريف amino acid يرتبط بالتحديد مع 314011 ويشتمل على سلسلة خفيفة تشمل ترتيب وحيث يشتمل مضاد الجسم إضافيا على سلسلة ثقيلة تشمل OV الترتيب رقم: توفر التركيبة الدوائية «HAT في تجسيد .٠ رقم: ill من تعريف amino acid ترتيب TO ارتباط مولد مضاد أو جزءٍ منه مرتبط بصفة protein «GDF للاختراع مضاد جسم مضاد خاصة مع 6018 ولا يرتبط بالتحديد مع 1314011 ويشتمل على سلسلة خفيفة تشمل ترتيب علض
له acid 00 من تعريف الترتيب رقم: VA وحيث يشتمل مضاد الجسم» protein ارتباط مولد مضاد أو جزء منه إضافيا على سلسلة ثقيلة تشمل ترتيب amino acid من تعريف الترتيب رقم AY في أحد التجسيدات تشتمل التركيبة الدوائية للاختراع على مضاد جسم مضاد 00178 أو
BMP11 مضاد مرتبط بصفة خاصة مع 61178 ولا يرتبط بالتحديد مع alge ارتباط protein © واحدة (CDR) (complementarity determining region) ويشتمل على منطقة تحديد تكملة amino acid من المجموعة المتكونة من ترتيب Hike amino acid على الأقل تشمل ترتيب amino ترتيب 7١ من تعريف الترتيب رقم: 0 acid ترتيب «V4 من تعريف الترتيب رقم: ترتيب YY من تعريف الترتيب رقم: amino acid ترتيب 7١ من تعريف الترتيب رقم: 40 (Yt من تعريف الترتيب رقم: amino acid ترتيب » YY من تعريف الترتيب رقم: amino acid ٠١ من تعريف الترتيب رقم: amino acid ترتيب ¢ Yo من تعريف الترتيب رقم: amino acid ترتيب من تعريف الترتيب amino acid من تعريف الترتيب رقم: 79 ترتيب amino acid 1؟؛ ترتيب من تعريف amino acid من تعريف الترتيب رقم: 79 ترتيب amino acid ترتيب «YA رقم: .٠١ الترتيب رقم: ٠ - في أحد التجسيدات تستخدم التركيبة الدوائية من الاختراع لمعالجة اضطراب مصاحب 8 منتقى من المجموعة المتكونة من اضطراب عضلي؛ اضطراب عصبي عضلي؛ اضطراب محلل للعظام؛ اضطراب عظمي مستحث أو أيضي؛ اضطراب غير دهني؛ اضطراب أيض glucose اضطراب متعلق ب insulin في مريض ثديي. في تجسيد آخرء تتوافر التركيبة الدوائية من الاختراع حيث ينتقى الاضطراب المصاحب GDF من المجموعة المتكونة من ve سوء تغذية عضلية؛ (ALS ضمور (lame ضمور عضو؛ عرض نفق رسغي؛ هشاشة مرض إعاقة رئوية احتقاني؛ فقدان قوة وكتلة العضلات» هزال» أعراض فقدان عضلي؛ سمنة؛ مرض السكر من النوع oY خلل تحمل glucose أعراض أيضية؛ مقاومة cinsulin اضطرابات A (ald فشل تناسلي قبل الولادة» كبح candrogen فرط ثانوي لنشاط الغدة الجاردرقية؛ هشاشة العظام» قلة العظم» التهاب مفصلي عظمي؛ انخفاض ALS العظم؛ نقص vitamin D Yo وفقدان شهية عصابي. إن جانب آخر من الاختراع هو توفير طريقة لمعالجة (التي تتضمن تخفيف و/أو منع) اضطراب مصاحب 60178 في مريض (at تشمل إعطاء المريض كمية مؤثرةٍ Ladle من تم
لاا مضاد خاص لأجل 8 به القليل من السمية أو ليس به سمية أساسيا. في تجسيد آخر توفر طريقة الاختراع أن ينتقى مضاد الاختراع من المجموعة المتكونة من مماثل 8601006 في مجال سيطرة ربط 8 ؛ nucleic acid معزول يشفر amino acid لأجل مماثل peptide في مجال سيطرة ربط polynucleotide «GDF8 تثبيطي خاص ب 01018 ومضاد جسم مضاد protein «GDF8 © ارتباط alge مضاد أو جزء منه مرتبط بصفة خاصة مع 0078 ولا يرتبط بالتحديد مع BMP11 في أحد التجسيدات يوفر الاختراع مضاد خاص به عبارة عن مماثل peptide في مجال سيطرة ربط GDF8 ومجال سيطرة ربط 01178 متكون أساسيا من ترتيب amino acid منتقى من المجموعة المتكونة من ترتيب acid 00 من تعريف الترتيب رقم: 4 ؛ amino if acid ٠ من تعريف ill رقم: 1 ترتيب amino acid من تعريف الترتيب رقم: eA ترتيب amino acid من تعريف الترتيب رقم: ٠١ ؛ وترتيب amino acid من تعريف الترتيب رقم: AY في أحد التجسيدات توفر طرق المعالجة من الاختراع طرق معالجة يكون فيها مضاد الاختراع عبارة عن nucleic acid معزول يشفر amino acid خاص ب 00178 متكون أساسيا من ترتيب acid 6 منتقى من المجموعة المتكونة من ترتيب nucleic acid Yo من تعريف الترتيب رقم: oF ترتيب nucleic acid من تعريف الترتيب رقم: 0« ترتيب nucleic Ge acid تعريف الترتيب رقم: 7؛ ترتيب nucleic acid من تعريف الترتيب رقم: 9؛ ترتيب nucleic acid من تعريف الترتيب رقم: ١١ وترتيبات nucleic acid لأجزاء من ذلك. في أحد تجسيدات الاختراع تتوافر طريقة معالجة حيث يكون فيها مضاد الاختراع عبارة عن مضاد جسم مضاد protein (GDF8 ارتباط مولد مضاد أو جزءٍ منه مرتبط بصفة خاصة ٠٠ 0 مع 6018 ولا يرتبط بالتحديد مع 3141011 ويشمل سلسلة خفيفة تشمل ترتيب acid 0 من تعريف الترتيب رقم: VT ويشمل إضافيا سلسلة Add تشمل ترتيب amino 40 من تعريف الترتيب (AVE aS) بعض التجسيدات توفر طريقة المعالجة الخاصة بالاختراع مضاد خاص به عبارة عن مضاد جسم مضاد protein «GDF8 ارتباط مولد مضاد أو جزء منه يرتبط بصفة خاصة مع 01018 ولا يرتبط بصفة خاصة مع 811011 YO حيث يشمل سلسلة خفيفة تشمل ترتيب amino acid من تعريف الترتيب رقم: VA ويشتمل مضاد الجسم protein ارتباط alge مضاد أو جزء منه إضافيا على سلسلة ثقيلة تشمل ترتيب amino 40 من تعريف الترتيب رقم: .١١ في بعض التجسيدات توفر طريقة المعالجة
YA
ارتباط protein «GDF8 عن مضاد جسم مضاد Hle الخاصة بالاختراع مضاد خاص به مولد مضاد أو جزء منه يرتبط بصفة خاصة مع 00178 ولا يرتبط بالتحديد واحدة على الأقل تشمل ترتيب (CDR) مع 1314011 حيث يشمل منطقة تحديد تكملة من تعريف الترتيب رقم: amino acid منتقى من المجموعة المتكونة من: ترتيب amino acid من تعريف الترتيب amino acid ترتيب Ve من تعريف الترتيب رقم: amino acid ترتيب 149 ترتيب YY مدص من تعريف الترتيب رقم: acid ترتيب (VY رقم: 7 4 من تعريف الترتيب رقم: amino acid ترتيب «YY من تعريف الترتيب رقم: amino acid tad) من تعريف الترتيب amino acid ترتيب YO من تعريف الترتيب رقم: amino acid ترتيب من تعريف الترتيب amino acid ترتيب VV من تعريف الترتيب رقم: amino acid ترتيب 1 من تعريف amino acid من تعريف الترتيب رقم: 79 ترتيب amino acid ترتيب «YA رقم: ٠ .٠١ الترتيب رقم: في أحد تجسيدات الاختراع توفر طريقة المعالجة الخاصة بالاختراع انتقاء الاضطراب المصاحب 017178 من المجموعة المتكونة من اضطراب عضلي؛ اضطراب عصبي عضليء اضطراب محلل للعظام؛ اضطراب عظمي مستحث أو أيضي؛ اضطراب غير دهني؛ اضطراب ٠ أيض 06]؛ واضطراب متعلق ب 1080110 في كائن. في بعض تجسيدات الاختراع توفر طريقة المعالجة الخاصة بالاختراع انتقاء الاضطراب المصاحب 61178 من المجموعة المتكونة من سوء تغذية عضلية؛ (ALS ضمور عضلي؛ ضمور عضو؛ عرض نفق رسغي» هشاشة؛ مرض إعاقة رئوية احتقاني؛ فقدان قوة وكتلة العضلات» (Jia أعراض فقدان عضلي؛ سمنة؛ مرض السكر من النوع oY خلل تحمل glucose أعراض أيضية؛ مقاومة dnsulin ٠ أمراض نقص التغذية؛ فشل تناسلي قبل Vel كبح androgen فرط ثانوي لنشاط الغدة الجاردرقية؛ هشاشة العظام؛ قلة العظم؛ التهاب مفصلي عظمي؛ انخفاض كتلة العظم؛ vitamin D all وفقدان شهية عصابي. يوفر جانب آخر للاختراع طريقة تشخيص؛ توقع حدوث أو الكشف عن إصابة كائن باضطراب مصاحب 00178 وتشتمل على خطوات: الحصول على عينة أولى من الكائن؛ Yo اتحاد عينة أولى مع مضاد الاختراع؛ الكشف عن وجود 0018 في العينة الأولى؛ تقدير كمية مستوى 0018 في العينة الأولى؛ الحصول على عينة ثانية من كائن غير مصاب باضطراب مصاحب ¢GDF8 اتحاد العينة الثانية مع المضاد؛ الكشف عن مستوى GDF8 في العينة YAER
الثانية؛ تقدير كمية مستوى 0018 في العينة الثانية ومقارنة مستويات GDF8 في العينتين الأولى والثانية؛ حيث إن الزيادة؛ النقصانء أو التماثل في مستوى 6178 في العينة الثانية مقارنة بالعينة الأولى يشير إلى حدوث تغير في شدة الاضطراب المصاحب .GDF8 يوفر جانب آخر للاختراع طريقة لمراقبة شدة اضطراب مصاحب GDF8 تشمل خطوات: )١( © الحصول على عينة أولى من الكائن؛ (7) اتحاد عينة أولى مع المضاد كما تحدد في أي واحد من عناصر الحماية ١-96؛ (©) الكشف عن وجود GDF8 في العينة الأولى؛ )£( تقدير كمية مستوى 0018 في العينة الأولى؛ )0( الحصول على عينة ثانية من كائن غير مصاب باضطراب مصاحب ¢GDF8 (1) اتحاد العينة الثانية مع alias الاختراع؛ (V) الكشف عن مستوى 0018 في العينة الثانية؛ (A) تقدير كمية مستوى 0018 في العينة الثانية و(4) ٠ مقارنة مستويات 0018 في العينتين الأولى والثانية؛ حيث إن الزيادة؛ النقصانء أو التماتل في مستوى 06078 في العينة الأولى مقارنة بالعينة الثانية يشير إلى حدوث تغير في شدة الاضطراب المصاحب .GDF8 يوفر جانب AT من الاختراع طريقة لتوقع احتمالية الإصابة باضطراب مصاحب GDF8 في كائن تشمل خطوات: )١( الحصول على عينة أولى من الكائن؛ (7) اتحاد عينة أولى مع ١٠ المضاد كما تحدد في أي واحد من عناصر الحماية ١-9176؛ (©) الكشف عن وجود GDF8 في العينة الأولى؛ )£( تقدير كمية مستوى 0018 في العينة الأولى؛ )0( الحصول على Le dl من كائن غير مصاب باضطراب مصاحب 00178؛ (1) اتحاد العينة الثانية مع مضاد الاختراع؛ (V) الكشف عن مستوى 0018 في العينة الثانية؛ (A) تقدير كمية مستوى 0118 في العينة الثانية )4( مقارنة مستويات 0118 في العينتين الأولى والثانية» حيث إن الزيادة؛ ٠ النقصان؛ أو التماثل في مستوى 60178 في العينة الثانية مقارنة بالعينة الأولى يشير إلى احتمالية الإصابة باضطراب مصاحب 00178 في الكائن. يوفر جانب آخر من الاختراع طريقة لتوقع احتمالية الإصابة باضطراب GDF8 alias في كائن تشمل خطوات: )١( الحصول على عينة أولى من الكائن؛ (7) اتحاد عينة أولى مع مضاد الاختراع كما تحدد في أي واحد من عناصر الحماية )1 (TF) الكشف عن وجود Yo 0078 في العينة الأولى؛ )£( تقدير كمية مستوى 0018 في العينة الأولى؛ )0( الحصول على عينة ثانية من كائن غير مصاب باضطراب مصاحب 0078؛ (1) اتحاد العينة الثانية مع المضاد؛ (7) الكشف عن مستوى GDF8 في العينة الثانية؛ (A) تقدير كمية مستوى م7
Ne في العينتين الأولى والثانية؛ حيث إن GDF8 في العينة الثانية 5 )1( مقارنة مستويات 8 الزيادة؛ النقصانء أو التماثل في مستوى 6018 في العينة الأولى مقارنة بالعينة الثانية يشير إلى احتمالية الإصابة باضطراب مصاحب 0078 في الكائن. يوفر جانب آخر من الاختراع استخدام تركيبة دوائية في تحضير دواء لمعالجة (التي تتضمن تخفيف؛ و/أو منع) اضطراب مصاحب 00178 في مريض ثديي حيث تشتمل التركيبة © واحد على الأقل من المجموعة GDF8 الدوائية على مادة حاملة مقبولة دوائيا وينتقى مضاد معزول يشفر nucleic acid في مجال سيطرة ربط 6018؛ peptide المتكونة من مماثل تثبيطي polynucleotide ¢GDF8 في مجال سيطرة ربط peptide لأجل مماثل amino acid مضاد أو جزءٍ منه يرتبط alse ارتباط protein «GDF§ ومضاد جسم مضاد GDF خاص ب
BMP11 بصفة خاصة مع 0078 ولا يرتبط بالتحديد مع ٠ (AS جانب آخر من الاختراع مجموعة للكشف عن وجود 061778 في عينة من Lis تشمل المجموعة عامل كاشف إمساك يربط بصفة خاصة 0178 وعامل كاشف للتحديد Cus مع عامل GDF8 يربط بصفة خاصة 010178 حيث إن الكشف عن الارتباط النوعي لأجل كاشف إمساك وعامل كاشف للتحديد يشير إلى وجود 6118 في العينة. في بعض التجسيدات تشتمل مجموعة الاختراع إضافيا على مثبت أس هيدروجيني حامضي. Vo يوفر جانب آخر من الاختراع مجموعة لتقدير كمية 6118 في عينة من كائن؛ حيث تشمل المجموعة عامل كاشف إمساك يربط بصفة خاصة 0118 وعامل كاشف للتحديد يربط بصفة خاصة 0610178 حيث إن الكشف عن الارتباط النوعي لأجل 0118 مع عامل كاشف في العينة. في بعض التجسيدات تشتمل GDF إمساك وعامل كاشف للتحديد يتيح تقدير كمية مجموعة الاختراع إضافيا على مثبت أس هيدروجيني حامضي. ٠ وصف مختصر للترتيبات .١ في قائمة الترتيب التي تعد جدول amino acid y DNA تندرج ترتيبات ١ جدول i | YALE
١
YAEL
YY
شرح مختصر. للرسومات (y شكلا ١(أ) و١(ب) يوضحان ارتباط (كثافة بصرية (0.0) £04 نانومتر؛ محور (مضاد جسم RK35 9 RK22 للمادة الطافية من (x لتركيزات عديدة (نانوجرام/ ملليلتر؛ محور أو GDF8 و81011) بإظهار الأورام الهجينة لأجل GDF8 مقارن يرتبط مع كل من .BMP11 © و6018 كما RK22 شكل ¥ يبين ثوابت معدل الحركية للتفاعل البيني بين مضاد جسم .BIAcore 2000 system Sensor Chip SA حددته كما تم pGL3 (CAGA)12- TGF-f شكل © يبين حث نشاط جين مخبر مادة محثة
A204 في خلايا سرقوم عضلة مخططة (y محور (LCPS) luciferase القياس بواسطة نشاط ملليلتر) أو غياب تركيزات fase ٠١( ibe نانوجرام/ ملليلتر من 00178 في ٠١ معالجة مع ٠ (00) أخرى RK ومضادات أجسام RK35 9 RK22 محور *) من مضاد جسم (IM Ig) عديدة BMP11 حتى (ه)) ترتبط سواء مع 60178 و/أو محور «) عضلات بطن الساق (©68800)» عضلة رباعية faa) شكل ؛ يبين وزن 4 بعد SCID المنزوعة من فئران (Tibialis anterior) والظنبوب الأمامي (Quad) الرؤوس أو 50 مجم/ ٠١ ١١ أسابيع من المعالجة مع وسط ناقل في غياب (وسط ناقل)؛ أو وجود ٠
My0-29 أو RK22 كجم/ أسبوعيا من بواسطة 0118 بمفرده أو (y شكل 0 يبين الارتباط مع 8008113 (010450؛ محور مضاد (RK22 من (x محضن مسبقا مع تركيزات عديدة ([جزيئي جرامي]؛ محور 8 أخرى ((د) و(ه))؛ مضاد جسم مقارن يعوق ارتباط RK جسم غير نوعي؛ مضادات أجسام قابل للذوبان. ACtRIIB مقارن» أو IgG مضاد جسم «(RK35) ACtRIIB مع 00378 ٠
YAER
YY
نانوجرام/ ملليلتر من مضاد جسم ٠١ ببقع منقطة من epitope يبين نتيجة تخطيط ١ شكل متخلف متراكب يمثلون peptides ١١و محضنين مع 4/8 فرد RK22 مقارن» مضاد جسم مع GDF8 ناضج كامل. يقع تحت كل بقعة منقطة ترتيب 84 peptide هو مشار إليه في البقع LS) لأجسام الموضوع تحتها خط ١ لأجل مضادات 0107178 epitopes المنقطة الخاصة). ٠ مع ترتيبات (RK22_VH) RK22 شكل 7 يبين اصطفاف مجال سيطرة سلسلة ثقيلة متغير وإن ¢(DP-5_germl_VH) DP-5 5 (DP-7_germl_VH) DP-7 إطار خط جرثومة آدمي فأري والذي تغير إلى مجال سيطرة RK22 من مجال سيطرة سلسلة ثقيلة متغير amino acids
CDRs مكتسب السمة الآدمية تتخذ شكل علامة نجمية كما توضع RK22 سلسلة ثقيلة متغير
Jad من 181222 في صناديق ويوضع تحتها ٠ مع ترتيب إطار خط RK22 يبين اصطفاف مجال سيطرة سلسلة خفيفة متغير A شكل من مجال سيطرةٍ سلسلة خفيفة متغير amino acids وإن ¢DPK 24 VL جرثومة آدمي من مكتسب السمة الآدمية RK22 فأري والذي تغير إلى مجال سيطرة سلسلة خفيفة متغير RK22 في صناديق ويوضع تحتها خط. RK22 من CDRs تتخذ شكل علامة نجمية كما توضع عامل كاشف الإمساك (RK35 4ل) يبين مقارنة لهيئات الاختبار المناعي: Ja مع JL SE RK22 كعامل كاشف للتحديد. شكل 4(ب) يبين biotinyloted و1222 كمضاد الجسم للكشف. biotinylated RK35 الموصوفة سابقا تظهر الخلفية؛ وأن هذه الخلفية ELISA يوضح أن اختبارات ٠١ شكل يرجع سبب وجود خلفية (HAMA) يحتمل أن يكون تأثير مضاد جسم مضاد فأري من آدمي مضاد جسم أحادي النسخ المستخدم كمضاد RK22 الاختبار إلى تفاعل متقاطع للمصل مع ٠ كمضاد جسم إمساك RK35 يلاحظ نفس التأثير عند استخدام (ELISA جسم إمساك في (بيانات غير مبينة). يغطي الطبق؛ RK35 حيث إن مضاد الجسم GDF-8 ELISA يبين نتائج ١١ شكل بامستخدام العامل الكاشضف 114 المتقاح تجاريا ELISA وتقل خلفية يفضل مقارنة النتائج التي (Immunoglobulin Inhibiting Reagent-Bioreclamation, NY) ٠ تستخدم 118 مع الخلفية بواسطة مثبت أس هيدروجيني فقط. م7
شكل VY يبين عدم ارتباط مضاد الجسم RK35 مع GDF-8 في وجود 1470-029. إن مضاد الجسم 1470-029 يغطي أطباق اختبار HBX ويضاف GDF-8 عند + + VY بيكوجرام/ ملليلتر مع تركيزات متزايدة من مضادات ١ لأجسام للكشف .(RK35 0 RK22) biotinylated لا تنتج إشارات مع biotinylated RK35 تشير النتائج إلى التفاعل المتقاطع بين RK35 © و1/70-029 للارتباط مع .GDF-8 شكل (N YF و"١٠(ب) يبينان إمكانية استخدام MY0-029 كمثبط GDF-8 في اختبار ه8115. إن التركيزات المتزايدة من MYO-029 مع تركيز ثابت من YO) GDF-8 بيكوجرام/ ملليلتر) خامد النشاط في مثبت أس هيدروجيني الاختبار أو في 7٠١ مصل آدمي يتم اختبارها لأجل GDF-8 عن طريق (ELISA يبين شكل 7( أن هناك 77٠ تقريبا من تثبيط الإشارة ٠ عند استخدام RK22 كمضاد جسم إمساك. يبين شكل (QF تقدير التثبيط بنسبة تقريبا ٠ (من # إلى ٠١ ميكروجرام/ ملليلتر في (MYO-029 عند استخدام RK35 كمضاد جسم إمساك. يتضح أيضا انخفاض إشارة الخلفية (المصل) بواسطة استخدام 218 (المعروف أيضا بأنه ”118"). تظهر الإشارة الإجمالية في كلا الرسمين التخطيطيين لكن بدون تحويلها إلى نسبة مئوية للتثبيط. Vo الشكلان ؛١(أ) و؛١(ب) يبينان نتائج “تجربة استرجاع ثابت”؛ حيث يضاف GDF-8 إلى مصل 7٠٠0 في ¥ عينات مصل منفصلة (الأمصال رقم )6 رقم ١ ورقم ؟). تحلل كل عينة ١-/+ ؟ ميكروجرام/ ملليلتر من 1470-029. إن إضافة ٠١ ميكروجرام/ ملليلتر من MYO- 9 تعوق إشارة الاختبار عند كل تركيزات 0017-8 المختبر (شكل ؟١لأ)). شكل (VY يبين نتائج اختبار استرجاع مثبت تضاف فيه الأمصال؛ وليس 1470-029. تظهر النتائج ٠ زيادة خطية في الإشارة مع إضافة -GDF-8 شكل Vo يبين مقارنة منحنيات قياسية ناتجة في مصل آدمي وفأري ناقص مناعيا (KO) فأري طبيعي. إن انحدار المنحنى مع مثبت أس هيدروجيني THST بمفرده HASH شدة من المنحنيات الناتجة في المصل ولا يمكن استخدامه لتقدير القيم في المصل. شكل ١6 يظهر قيم 60178 الملحوظة مقابل المتوقعة الناتجة في مثبت أس هيدروجيني Yo 11181. شكل ١7 يقدم نتائج التجربة التي تبين إمكانية إخماد/ تفكك MYO0-029 عند تسخينه إلى ٠ تقريبا. تكون عينات المصل خامدة التشاط مع GDF-8 أو GDF-8 متأخر +/-ه
Yo وتسخن إلى 80"مئوية. تبين النتائج أن تسخين عينات MYO0-029 ميكروجرام/ ملليلتر من مشيرا إلى أن 170-029 يتفكك عن «GDF-8 يعيد القدرة على الكشف عن MYO-029 170-029 وينشط عند التسخين إلى 0٠8"مئوية. تبين أيضا النتائج أنه عند إضافة «GDF-8
GDF-8 مرة أخرى إلى العينة المسخنة؛ تقل ثانية إشارة 017-8. تتضح أيضا زيادة في إشارة
GDF-8 الداخلي عند التسخين والذي يعد ملحوظا بدرجة أكبر في العينات خامدة النشاط مع © ناضج. GDF-8 متأخرة مقارنة بعينات من GDF-8 قبل وبعد استنزاف GDF-8 لأجل ELISA يبين نتائج اختبار VA شكل لأجل MYO0-029 المصل الآدمي. يحلل مصل آدمي طبيعي +/-» 7 ميكروجرام/ ملليلتر من عند درجة حرارة الغرفة (1877)؛ وبعد التسخين إلى ٠8”مئوية. تقارن هذه القيم بنفس GDF-8 دقائق؛ وإمرارها ٠١ العينات المستنزفة أولا من 0017-8 بالتسخين المسبق إلى 16"مئوية لمدة ٠
GDF-8 مجم من عمود انجذاب 2470-029. تشير النتائج إلى أن استنزاف ١ مرات فوق © هذا. توضح النتائج ELISA في GDF-8 من المصل الآدمي مؤثرا عند انخفاض مستوى خلفية أيضا أن تسخين المصل المستنزف لا يظهر زيادة أصلية في الإشارة الملحوظة مع المصل لإتتاج (HD) المسخن [GDF-8 الطبيعي عند تسخينه. يمكن استخدام هذا المص المستنزف قياسية. GDF-8 منحنيات Vo (GDF-8 يبين رسما تخطيطيا لمنحنيات قياسية ناتجة في المصل المستنزف ١9 شكل المسخن؛ ثم يبرز مع تركيزات متزايدة من 0017-8 ناضج أو 0017-8 متأخر. تختبر أو مع التسخين إلى 0٠8”مئوية. إن عينات (RT) المنحنيات القياسية عند درجة حرارة الغرفة متأخر توضح زيادة كبيرة في الإشارة بعد التسخين وهذا لم GDF-8 المصل خامدة النشاط مع ناضج. GDF-8 يلاحظ في العينات خامدة النشاط مع ٠ يبين تحليل منحنيين قياسيين يطبقان على أطباق مختلفة لمدة يومين متعاقبين. ٠١ شكل ناضج لإنتاج GDF-8 المسخن مع تركيزات معروفة من [GDF-8 يستخدم المصل المستنزف ناضج. إن تطابق GDF-8 لكل منحنى مقابل تركيز OD منحنيات قياسية. ترسم بيانيا قيم منحنى الانحسار غير الخطي هو علاقة تبادلية أكثر دقة لقيم 0017-8 الناتجة في المصل المسخن. لدى تطابق المنحنى علاقة تبادلية أفضل فعالة بصورة تعاونية /GDF-8 المستنزف Yo
Prism Graph كما له نطاق دقة أكبر من منحنيات الانحسار الخطي. يستخدم برنامج من .GDF-8 ELISA الناتجة في اختبار OD من قيم GDF-8 لحساب تركيز
YALE
Yi يبين نتائج اختبار يقيس 0017-8 الحر والإجمالي في 4 عينات للمصل YY شكل الطبيعي. تعرض النتائج على أنها +/- 2470-029. تقاس القيم بالبيكوجرام/ ملليلتر من .7٠٠0 في مصل GDF-8 وتقابل المستوى الداخلي من GDF-8 عينات للمصل A يبين نتائج اختبار يقيس 0017-8 الحر والإجمالي في YY شكل الرسم التخطيطي تجربتين منفصلتين منفذتين لمدة يومين منفصلين. في اليوم Jig الطبيعي. © دقائق (بالمقارنة مع ٠١ بتسخين العينات لمدة GDF-8 الثاني من التجربة؛ يحلل إجمالي ١74١ إلى 77١ التسخين لمدة © دقائق المجرى في اليوم الأول من التجربة). تتراوح القيم من بيكوجرام/ ملليلتر لأجل 6017-8 الحر ومن )0 إلى 749؛ لأجل 0017-8 الإجمالي. بعد تغير صفاته الطبيعية ELISA عن طريق GDF-8 يبين نتائج اختبار يقيس YY شكل بالتسخين. تحضن قواسم تامة من المصل الآدمي عند درجة حرارة الغرفة لمدة ساعة واحدة ميكروجرام/ ملليلتر من 14770-029. تزول بعدئذ الصفات الطبيعية للعينة بالتسخين ٠١-/+ يجرى التقدير لمستويات ELISA في دوارة حرارية مدرجة عند درجات حرارة متعددة قبل تحليل في عينات الاختبار عن طريق الاستيفاء من نتائج لمنحنى قياسي مكون من سلسلة GDF-8 مخلق منقى له تركيز معروف خامد النشاط في مصل آدمي 0017-8 dimer تخفيفات من مجمع مستنزف من 6017-8 بواسطة تحليل كروماتوجرافي للانجذاب. يحدث أقصى كشف عن 0 "مئوية. إن وجبود ٠١ عند تقريبا MYO-029 في غياب 48 يخفي الكشف عن 6017-8 في المصل عند درجة حرارة منخفضة؛ لكن عند MYO-029 ja GDF-8 من *>"مئوية؛ يعود الكشف عن lef درجات حرارة في وجود 170-029 عند أس GDF-8 شكلا 4 ؟(أ) و؛ (ب) يبينان إمكانية الكشف عن المخفف في أس هيدروجيني GDF-8 dimer هيدروجيني منخفض. في شكل ؛ ؟لأ)؛ إن ٠ يخفف © أضعاف سواء في مثبت أس MY0-029 ميكروجرام/ ملليلتر من ٠١-/+ 7 le ٠٠١ sodium acetate «(THST) هيدروجيني الاختبار عند أس هيدروجيني متعادل ٠٠١ phosphate-citrate مثبت أس هيدروجيني «(NaOAc) © جزيئي جرامي أس هيدروجيني مللي جزيئي ٠٠١ glycine-HCI أو «(PO4CH) ١ مللي جزيئي جرامي أس هيدروجيني © إلى
ELISA في عيون 1:١ تخفف بعدئذ العينات بنسبة .)01(( Y.0 جرامي أس هيدروجيني YO غير Tris أو THST هيدروجيني oof (مغطاة بمضاد جسم 81635) محتوية إما على مثبت مع محاليل أس هيدروجيني مختلفة وقدرات GDF-8 ثابت الأس الهيدروجيني. إن تخفيف ادن
فل
تثبيت أس هيدروجيني وتخفيف لاحق في THST أو Tris غير ثابت الأس الهيدروجيني يسمحون بقياس فعالية خطوة إمساك مادة التحليل عند نطاق أس هيدروجيني من حوالي © إلى LA تحت شروط الاختبار التي تقترب من الأس الهيدروجيني المتعادل» إن 170-029 يقلل ii عن .(THST/THST) GDF-8 إن GDF-8 الحامفضسي مع © !©06-11ن»واع والمخفف لاحقا في مثبت أس هيدروجيني 11157 يظل Wl هيدروجينيا منخفضا لدرجة تكفي لمنع ربط 14770-029 وتسمح بالكشف الكامل عن GDF-8 في وجود أو غياب (Gly / THST) MYO-029 على أيه حال» إن تخفيف GDF-8 الحامضي مع glycine Tris غير ثابت الأس الهيدروجيني ينتج شروط إمساك مادة التحليل عند أس هيدروجيني أكبر من 7 ويقلل من الكشف عن GDF-8 في وجود Tris [Gly) MYO-029 غير ثابت الأس ٠ الهيدروجيني). شكل (OYE يبين رسما تخطيطيا لاختبار ELISA عند أس هيدروجيني ؟
(القطاع الأيسر) وأس هيدروجيني 7 (القطاع الأيمن). شكل Yo يوفر نتائج تجربة تظهر أن مضاد الجسم الفأري RK35 يرتبط مع GDF-8 تحت Jag pi حامضية؛ بينما 170-029 لا يفعل ذلك. يحضن مسبقا المصل الأدمي +/- تركيزات متعددة من RK35 أو (MY0-029 ويخفف 0 أضعاف مع مثبت أس هيدروجيني THST (أس ١ هيدروجيني متعادل) أو 817006-11©1 لأس هيدروجيني حامضي). يضاف المصل إلى عيون ELISA المحتوية على 81635 المرتبط بالطبق Cutie Ly أس هيدروجيني glycine- sl THST HCI في غياب RK35 أو (MYO0-029 يتم الكششسف عن GDF-8 الداخلي في شروط حامضية بدرجة أكبر من الشروط المتعادلة بسبب تفكك المعقد وإطلاق GDF-8 proteins الحر (انظر أول عمودين). Juss الأعمدة الستة الأخيرة البيانات الناتجة عند ٠ أس هيدروجيني حامضي. إن الكميات المتزايدة من RK35 في المحلول قادرة على الارتباط والتنافس لارتباط GDF-8 مع RK35 المرتبط مع الطبق؛ مما يؤدي إلى كشف قليل لأجل 74 تحت شروط حامضية. إن MYO0-029 غير قادر على ربط GDF-8 في المحلول الذي يقترب أسه الهيدروجيني إلى 9 تاركا 6017-8 في المحلول حرا في الارتباط مع مضاد
الجسم RK35 الذي يغطي ELISA Gib Yo شكل 7١ يبين أن زيادة تركيز MYO0-029 إلى ٠٠١ ميكروجرام/ ملليلتر لا يقلل الكشف عن GDF-8 المستخدم لبروتوكول ELISA لتفكك الحمض. يختبر المصل الآدمي +/-0٠؛ ٠ أو ٠٠١ ميكروجرام/ ملليلتر من 1470-029 ثم يجرى التسخين أو تفكك الحمض. يقدر YAS
YA
تركيز GDF-8 بالاستيفاء من منحنى قياسي GDF-8 dimer Ja¥ ناضج مخلق خامد النشاط في مصل آدمي مجمع مستنزف من .GDF-8 في غياب 2/70-029؛ يتحدد تركيز GDF-8 في المصل بأن يكون حوالي ١ نانوجرام/ ملليلتر عند إتمام إمساك مادة التحليل بالقرب من الأس الهيدروجيني المتعادل (015. إن الكشف عن GDF-8 بإتباع إطلاق proteins ربط © مصل عبر التفكك بالتسخين يكون حوالي ¥ نانوجرام/ ملليلتر في غياب +HS) MYO-029 Myo 717"مثوية؛ بدون (Ab في غياب 470-029 حتى عند أدنى تركيز مختبرء يفشل التفكك بالتسخين في أن يسمح بإجراء نفس مستوى الكشف كما في غياب +HS) MY0-029 (MYO “لا"مئوية). إن المعالجة الحمضية لعينات المصل تكشف عن كميات مماثلة من GDF-8 دون الاعتماد على كمية MYO-029 الموجودة MYO (HS) حمضي). ٠١ شكل YY يظهر أن الشروط الحامضية أثناء إمساك مادة التحليل لا تقلل خصوصية الاختبار. تؤدي المعالجة الحمضية للمصل إلى كشف أكبر عن الإشارة (الأعمدة البيضاء مقابل الأعمدة السوداء) في كل الحيوانات من النوع البري (WT) المختبرة» قرد سينومولجس «(NHP-31) فأر WT Mm) وبقرةٍ حلوب (بقرة (WT إن المصل المقاس عند أس هيدروجيني متعادل أو حامضي سواء من فأر ناقص (KO Mm) GDF-8 معدلة وراثيا أو بقرة GDF-8 KO Belgian Blue ٠ (بقرة (KO يفشل في إنتاج إشارة خلال خلفية الطبق. أشكال 8؟(ا)-(ج) تقارن بين ؟ طرق مختلفة لمطابقة منحنى معايرة لأجل 0 أطباق GDF-8 ELISA بالنسبة إلى أخطائها النسبية من التركيزات المحسوبة عكسيا للمقاييس المعايرة. ترسم بيانيا النتائج من © أطباق .GDF-8 ELISA يعرف الخطأ النسبي على أنه Gua Vo XN /)8 —N) 3 هو التركيز المحسوب عكسيا للمقياس باستخدام منحنى المعايرة؛ ٠ وا هو التركيز التقريبي للمقياس. إن ؟ طرق لمطابقة منحنى هي: )١ شكل 6؟(ا): نموذج منطقي رباعي الحدود على كثافة بصرية بأقل المربعات (1.8)؛ (Y شكل (TT نموذج منطقي رباعي الحدود على جذر التربيعي للكثافة البصرية بواسطة 18؛ و ؟) شكل 76؟(ج): نموذج منطقي خماسي الحدود على الجذر التربيعي للكثافة البصرية بواسطة 1.8. الخطوط المرجعية عند Yom و١٠. Yo شكل 4؟(أ) هو مستويات statin عضلي للمصل في حيوانات منزوعة statin عضلي أو طبيعية. إن المصل من ماشية Belgian Blue ماشية عادية (بقرةٍ (wt فئران منزوعة statin عضلي (mstn KO Bit) والحيوانات متعددة الصغار في الولادة الواحدة من النوع البري (فأر YALE
(wt يقاس تحت شروط تفككية حامضية (أس هيدروجيني ©١7)؛ وتستنتج القيم من منحنى قياسي لأجل statin عضلي آدمي مخلق في نسيج بيني لمصل ناقص statin عضلي. تمثل الأعمدة متوسط +/- SD للعينات المستنسخة =n) ؟). إن تركيزات statin عضلي في حيوانات منزوعة statin عضلي تقع أدنى تركيز أقل عينة لأداة المعايرة £V) 1 بيكوجرام/ (Ae ٠ عضلي في مصل قرد سينومولجس مقاس statin شكلا 9؟(ب) و ؟(ج) هي مستويات القطاع (ب)) أو A عضلي تحت شروط غير تفككية لأس هيدروجيني statin EIISA في تفككية (أس هيدروجيني ©١9؛ القطاع (ج)) بإتباع إضافة تركيزات متزايدة من مضاد جسم تمثل . ACtRIIB-Fe عضلي قابل للذوبان statin أو مستقبل 170-029 Lac statin alias
LLQ يشير الخط المتقطع إلى .)7 =n) للعينات المستنسخة SD -/+ الأعمدة متوسط ٠ عضلي للمصل statin عبارة عن رسوم بيانية من صندوق وعلامة لمستويات (yr ٠ شكل قيم متوسطة وأولى وثالثة رباعية) في رجال صغار السن ورجال كبار السن. (SD (متوسط؛ يمثل الخط الأفقي في الخانة متوسط؛ الحدود الأدنى والأعلى من ذلك في الصندوق تمثل (ب) هو رسم To شكل ....3 =P SDs الأرباع الأولى والثالثة؛ والأعمدة الرأسية تمثل عضلي لخط القاعدة مع كتلة الجسم statin بياني للانحسار يوضح العلاقة التبادلية لمستويات Ve
ABD بدون دهن في رجال صغار السن. شكل ١٠(ج) هو رسم بياني للانحسار يوضح
OLS عضلي لخط القاعدة مع كتلة الجسم بدون دهن في رجال statin التبادلية لمستويات السن. عضلي في رجال صغار السن كاستجابة statin هو التغيرات في مستويات TY شكل (مخطط أعمدة يوضح متوسط +/- مستويات testosterone ا لإعطاء جرعات متدرجة من ٠ عضلي عند statin شكل ١؟ل() يبين مستويات (V0 501 عند خط القاعدة؛ والأيام 4 خط القاعدة؛ يوم المعالجة 007 و460١ في رجال صغار السن (القطاع الأيسر) ورجال كبار بالمقارنة مع مستويات P قيمة "SEM -/+ السن (القطاع الأيمن). تعد البيانات هي متوسط عن مستويات خط ٠4٠0 عضلي في اليوم statin خط القاعدة. لا تختلف بدرجة كبيرة مستويات statin يبين التغير بالنسبة المئوية من خط القاعدة من مستويات (VY القاعدة. شكل Yo ce =P في رجال صغار وكبار السن. 0T عضلي للمصل من خط القاعدة إلى اليوم عم
Ye statin هو رسوم بيانية للانحسار توضح العلاقة التبادلية للتغير في مستويات TY شكل الإجمالية والحرة testosterone عضلي من خط القاعدة إلى اليوم 07 والتغيرات في تركيزات يبين رسما تخطيطيا (NYY الجسم بدون دهن في رجال صغار وكبار السن. شكل AS, عضلي من خط القاعدة إلى statin في مستويات Agia) للانحسار الخطي للتغيير بالنسبة في المصل في الرجال testosterone اليوم 07 والتغير بالنسبة المئوية في إجمالي تركيزات © myostatin صغار السن. يبين شكل 77(ب) رسم بياني تراجع خطي للتغير7 في مستويات الكلية في المصل في testosterone من خط القاعدة حتى اليوم 071 والتغير7 في تركيزات من خط myostatin رجال أكبر سنا. يبين شكل 7”(ج) التراجع الخطي للتغير7 في مستويات في الرجال صغار plasma الحر في testosterone إلى اليوم 0 والتغير7 في تركيزات sac al) من خط القاعدة myostatin التراجع الخطي للتغير7 في مستويات (PTY السن. يبين شكل ٠ في الرجال الأكبر سنا. plasma الحر في testosterone إلى اليوم 071 والتغير7 في تركيزات من خط القاعدة حتى myostatin يبين شكل 77(ه) التراجع الخطي للتغير7 في مستويات في ٠6٠8 اليوم 07 والتغير” في كتلة الجسم الخالية من الدهن من خط القاعدة إلى اليوم من myostatin التراجع الخطي للتغير7 في مستويات (YY شكل Gay الرجال صغار السن. خط القاعدة حتى اليوم 07 والتغير” في كتلة الجسم الخالية من الدهن في المصل من خط Vo في الرجال الأكبر سنا. ١6٠8 القاعدة إلى اليوم (قيم المتوسط myostatin لمستويات whisker 5 Box رسومات بيانية YY الشكل الحسابي؛ 580؛ الوسطية والربع الأول والثالث) في سيدة حائضة صغيرة السن؛ في سن اليأس المتوسط الحسابي ويمثل الحد السفلي Box جراحيا؛ والأكبر سنا. يمثل الخط الأفققي في إن مستويات SDs أول وثالث ربع؛ وتمثل القطع المستطيلة الرأسية Box والعمودي في ٠ في المجموعات الثلاثة غير هامة إحصائيا. myostatin لتعريفات "an" "a" حسب الاستخدام في المواصفة وعناصر الحماية الملحقة؛ فإن أشكال المفرد تتضمن إشارة إلى الجمع إذا لم يفرض السياق خلاف ذلك بوضوح. thes »* مناعي globulin إلى «Lia حسب الاستخدام (antibody) يشير المصطلح "مضاد جسم
Ab عديد النسخ؛ Ab أو جزء منه؛ ويتضمن؛ لكن بدون تحديد: (Ig) (immunoglobulin)
أنه أحادي النسخ Ab (mAb) أحادي الخصوصية؛ Ab عديد الخصوصية؛ Ab مكتسب السمة الآدمية؛ Ab tetrameric Ab ثلاثي التكافوق؛ Ab متعدد الخصوصية؛ Ab سلسلة وحيدة Ab خاص بمجال سيطرة؛ Ab وحيد مجال السيطرة؛ Ab محذوف مجال السيطرة» protein اندماج؛ protein اندماج ع801؛ Ab وحيد السلسلة؛ Ab هجين؛ Ab مصنع؛ Ab مخلق؛ Ab مهجن؛ © طم طفري»؛ Abs مطعمة-001؛ وأجزاء مضاد جسم تتضمن: (Fab 1)8072 جزء Fab' جزء Py جزء Fv وحيد السلسلة «(ScFv) جزء (Fd وجزء dAD أو أي من أجزائها ALE المعالجة كيميائيا أو جينياء مما سبق التي تحتفظ بوظيفة ارتباط مولد مضاد. يوفر الاختراع أيضا protein ارتباط مولد (alias الذي يختلف عن مضادات الأجسام حسب الوصف هناء ويتضمن أجسام قنائية FR3-CDR3-FR4 peptide 00173 peptide ٠ مقيدء جسم مقاس بالنانو (طلب براءة الاختراع الأمريكية 2008/0107601)؛ جسم مقاس بالنانو ثنائي التكافؤء أدوية مناعية نسقية صغيرة «(SMIPS) مجال سيطرة IgNAR متغير فائق (WO )03/014161< جسم صغير وأي جزء أو أجزائها المقابلة المعالجة كيميائيا أو جينيا التي تحتفظ بوظيفة ارتباط مولد مضاد. نموذجياء سوف تشمل تلك الأجزاء مجال سيطرة ربط مولد مضاد. كما سيدرك المهرة في الفن؛ فإن أيا من تلك الجزيئات؛ Ab lie "مكتسب السمة الآدمية" أو protein ٠ ارتباط مولد مضاد؛ Say تصميمه هندسيا (على سبيل المثال؛ 'تكوين خط جرثومة') لتقليل توليده للمناعة؛ زيادة انجذابه؛ تغيير خصوصيته؛ أو لأغراض أخرى. يمكن تحضير Abs الاختراع» مثلاء بتقنيات ورم هجين تقليدية «(Kohler etal, Nature 256:495-499 | )1975( طرق DNA مخلق (براءة الاختراع الأمريكية رقم 48178591)؛ أو تقنيات إظهار بلعم باستخدام مكتبات Ab (Clackson et al., Nature 352:624-628 (1991); Marks et al., J.
Mol.
Biol. 222:581-597 ٠ .)1991( بالنسبة لتقنيات إنتاج Ab عديدة أخرى؛ انظر Antibodies: A Laboratory Manual, eds.
Harlow et al., Cold Spring Harbor Laboratory, 1988. Yo يشير المصطلح "مولد مضاد "(antigen) إلى مركب؛ تركيبة؛ أو مادة مولدة للمناعة يمكن أن يثير إنتاج Abs أو استجابة خلية-7؛ أو كل منهماء في حيوان؛ يتضمن تركيبات يتم حقنها في أو امتصاصها في حيوان. يمكن أن تتولد استجابة مناعية للجزء الكامل؛ أو لقسم من ك7
YY
استخدام المصطلح للإشارة إلى جزيء كبير منفرد (Say (hapten أو epitope الجزيء (مثلاء أو إلى مجموعة متماثلة أو مغايرة من جزيئات كبيرة مولدة لمضاد. يتفاعل مولد المضاد مع مضاد (0©عن01ة)" على alse’ منتجات مناعية تكييفية و/أو خلوية خاصة. يشمل المصطلح nucleic مولدة لمضادء protein أجزاء «polypeptides نطاق كبير أجزاء تتضمن وصنعام«م مواد كيميائية أو تركيبات عضوية أو غير cpolysaccharides «oligosaccharides cacids ٠ المولدة لمضاد epitopes كل (antigen) مضاد sa’ عضوية؛ وإلخ. يتضمن المصطلح مضاد محدد باستخدام أي عدد من تقنيات تخطيط alge epitopes الخاصة بذلك. يمكن تحديد
Sia المعروفة جيدا في الفن. انظر؛ cepitope
Epitope Mapping Protocols in Methods in Molecular Biology, Vol. 66 (Glenn E.
Morris, Ed., 1996) Humana Press, Totowa, N. J. Ye تصنيع متلازم لأعداد كبيرة Nie خطية بواسطة؛ epitopes على سبيل المثال؛ يمكن تحديد وتفاعل protein المقابلة لأقسام من جزيء peptides على دعامات صلبة؛ peptides من مرتبطة مع الدعامات. إن تلك التقنيات معروفة في peptides بينما لا تزال Abs aw peptides الفن وموصوفة في» lia براءة الاختراع الأمريكية رقم 4976/1١ ؛ Geysen et al. (1984) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81:3998-4002; Geysen et al. (1986) Vo Molec. Immunol. 23:709-715, كل المندمج هنا كمرجع بالكامل. بصورة مشابهة؛ تتحدد تماما epitopes بنائية بتحديد البناء المكاني من amino acids مثلا بواسطة؛ تصوير بلوري بأشعة X ورنين مغناطيسي نووي ثنائي الأبعاد. انظرء Epitope Mapping Protocols, supra «Nia إضافة لذلك» لأغراض الاختراع vs الحالي؛ يمكن أيضا أن يتضمن alge’ مضاد (antigen) تعديلات؛ مثل إزالات؛ إضافات واستبدالات (حامية عامة في طبيعتها؛ لكنها قد تكون غير حامية)؛ للترتيب La) طالما أن protein يستبقي القدرة على إحداث استجابة مناعية. قد تكون تلك التعديلات متعمدة؛ Nie من خلال تكوين طفري موجه لمكان؛ أو من خلال إجراءات تصنيع خاصة؛ أو من خلال طريقة الهندسة الوراثية؛ أو قد تتم بالمصادفة؛ Wie من خلال طفرات لعوائل؛ تنتج مولدات المضاد. Yo إضافة لذلك؛ يمكن أن يشتق مولد المضاد أو نحصل عليه من أي فيروس» (Lis طفيل؛ برزوي؛ أو فطر؛ ويمكن أن يكون عبارة عن كائن حي كامل. بصورة مشابهة؛ يتضمن التعريف أيضا oligonucleotide أو 0017000160008 يظهر مولد مضاد؛ مثل استخدامات
YAER
YY
«polypeptides «Nia إن مولدات المضاد المصنعة متضمنة أيضا -nucleic acid تحصين تفرع جانبي؛ ومولدات مضاد أخرى مشتقة تخليقيا أو تصنيعيا 05 (Bergmann et al. (1993) Eur. J. Immunol. 23:2777 2781; Bergmann et al. (1996) J.
Immunol. 157:3242 3249; Suhrbier, A. (1997) Immunol. and Cell Biol. 75:402 408;
Gardner et al. (1998) 12th World AIDS Conference, Geneva, Switzerland, Jun. 28 °
Jul. 3, 1998). 'أجزاء ‘(antigen-binding domain) يشير المصطلح "مجال سيطرة يربط مولد مضاد مضاد alge ارتباط protein أو ¢'(active fragments of an antibody) Ab نشطة من ارتباط مولد مضاد يشمل المنطقة التي protein أو Ab أو ما شابه إلى جزء من جزيء ha ترتبط بصفة خاصة مع أو تكمل جزء من أو كل مولد مضاد. عندما يكون مولد المضاد ٠ aan ofp a1 epitope” فقط مع جزءٍ من مولد المضاد. إن Ab فقد يرتبط : أو 'منطقة محددة مولدة لمضاد "(active fragments of an epitope) epitope من مضاد مسئول عن تفاعلات Age أو ما شابه هو قسم من جزيء "(antigenic determinant) خاصة مع مجال سيطرةٍ ربط مولد مضاد من مضاد الجسم. قد يتوافر مجال سيطرة ربط مولد ما يسمى جزء lik) Ab مضاد بواسطة واحد أو أكثر من مجالات سيطرة متغيرة Vo مضاد مجال سيطرة alge يتكون من مجال سيطرة 111). قد يشمل مجال سيطرة ربط Fd Ab مضاد (VH) ومضاد جسم أو مجال سيطرة متغير سلسلة تقيلة (VL) متغير سلسلة خفيفة .)55760777 جسم (براءة الاختراع الأمريكية رقم هي مادة حيوية مجمعة من خلاياء أنسجة؛ أعضاء,؛ أو كائنات حية؛ (sample) إن "عينة عينة تشويحية؛ plasma (ad مثلاء؛ لتحديد مادة تحلل. تتضمن عينات حيوية تمثيلية مصل؛ Yo عينة نسيج؛ معلق خلية؛ لعاب؛ مادة مائعة فمية؛ مادة مائعة مخية شوكية؛ مادة مائعة أمينوسية؛ لبن لبن السرسوبء إفراز غدة ثديية؛ سائل ليمفاوي؛ بول؛ عرق؛ مادة مائعة دمعية؛ مادة مائعة معدية؛ مادة مائعة من السائل المصلي؛ مخاط؛ ونماذج وعينات إكلينيكية أخرى. أو Ab إلى عامل كاشف مثلا "(capture reagent) يشير المصطلح "عامل كاشف إمساك مضاد قادر على ربط جزيء مستهدف أو مادة تحلل مراد تحديده alge ارتباط protein Yo على JU حيوية. نموذجياء يكون عامل كاشف الإمساك ساكناء على سبيل die في YAER
نين سطح اختيار؛ sale Die تحتية صلبة أو وعاء تفاعل. إن "عامل كاشف إمساك GDF-8 "(GDF-8 capture reagent) يرتبط بصفة خاصة مع -GDF-8 إن "عامل كاشف تحديد "(detection reagent) هو عامل كاشف؛ مثلا Ab أو protein ارتباط alias alge يستخدم في الاختبارات المناعية للاختراع الحالي ليرتبط بصفة خاصة مع protein © مستهدف»؛ «Sis 0117-8. قد يشمل عامل كاشف تحديد اختياريا علامة يمكن تحديدها. إن عامل كاشف تحديد يدرك ويربط نموذجيا protein المستهدف عند مكان ارتباط أو epitope مميز عن عامل كاشف الإمساك. قد يقترن عامل كاشف التحديد مع علامة يمكن تحديدها. إن "عامل كاشف تحديد "(GDF-8 detection reagent) GDF-8 يرتبط بصفة خاصة مع .GDF-8 ٠١ يشير المصطلح "منطقة تحديد التكملة "(complimentary determining region) أو "CDR" إلى المناطق مفرطة التغير من جزيء Ab أو protein ارتباط alge مضاد؛ التي تتكون من 7 لوالب من السلسلة الثقيلة و3 من السلسلة الخفيفة والتي تشكل مع دعمها مجال سيطرة ربط مولد المضاد. إن المصطلح "تحديد "(detecting) مستخدم بمعناه واسع النطاق ليتضمن كلا من القياسات ٠ النوعية والكمية لمادة تحلل مستهدفة؛ وهي هنا قياسات جزيء مستهدف خاص مثل GDF-8 أو .BMP-11 يمكن استخدام طرق الاختبارات الموصوفة هنا لتحديد وجود 6017-8 أو BMP- il عينة حيوية؛ أو (Say استخدامها لتحديد كمي لكمية GDF-8 أو 310-11 في عينة. يمكن استخدام "عامل تحديد "(detection agent) أو "عامل كاشف تحديد "(detection reagent) في طرق الاختراع الحالي لتحديد الإشارة المتولدة من Ab أو protein ٠ ارتباط alge مضاد تحديد الذي يشمل علامة غير مباشرة. إن عامل أو عامل كاشف تحديد هو protein أو جزيء صغير يسمح بتحديد عامل يضبط GDF-8 أو مركب. في تطبيق مفضل؛ يرتبط عامل التحديد بصفة خاصة مع عامل ضبط .GDF-8 قد يشمل عامل التحديد اختياريا علامة يمكن تحديدها. إن عامل التحديد يمكن أيضا تحديده بذاته بواسطة مادة تشمل علامة يمكن تحديدها. إن عوامل ضبط 0017-8 المحددة بالطرق المتوافرة هناء يمكن استخدامها أيضا Yo في الطرق لتحديد عوامل أخرى ضابطة (ODF-8 على سبيل المثال. إن "اضطراب ملازم لنشاط 0178 «'(disorder associated with 00178 activity) 'اضطراب ملازم 63 "(disorder associated with GDF8) "اضطراب مصاحب GDF8 vo
"(GDF8-associated disorder) أو ما شابه يشير إلى اضطراب يمكن أن يسببه؛ كليا أو جزئياء خلل تتظيم 6018 (مثلاء إظهار و/أو نشاط 0018 زائد أو ناقص) l/s اضطراب يمكن علاجه؛ تحسينه؛ منعه؛ تحسين مصيره؛ و/أو مراقبته بتنظيم و/أو مراقبته بتنظيم و/أو مراقبة protein و/أو نشاط .GDF8 تتضمن اضطرابات مصاحبة 0118 اضطرابات عضلية؛ © اضطرابات عصبية عضلية؛ اضطرابات تحلل (abe اضطرابات أيضية أو عظمية محثة؛
اضطرابات النسيج الدهنيء اضطرابات أيض (glucose أو اضطرابات متعلقة insulin يشير المصطلح "جرعة مؤثرة (effective dose) "جرعة مؤثرةٍ (therapeutically Ladle "effective dose) أو 'كمية مؤثرةٍ "(effective amount) إلى جرعة أو مستوى كافية لتحسين الأعراض الإكلينيكية؛ أو تحقيق نتيجة حيوية مطلوبة lie) زيادة كتلة عضلة؛ شدة عضلة ٠ و/أو كثافة عظمية) في كائئات؛ متضمنة كائنات التي لديها اضطراب مصاحب .GDF-8 سوف تكون تلك الكمية كافية لتقليل نشاط 0017-8 المصحوب بتنظيم سلبي لكتلة عضلة هيكلية وكثافة عظمية؛ على سبيل المثال. قد تتضمن النتائج العلاجية والأعراض الإكلينيكية زيادة في كتلة عضلة؛ تحسين مؤشرات القلب والأوعية الدموية أو تحسين تنظيم أيض ©110ع. إن مشبط 0117-8 يمكن أن يزيد كتلة عضلة؛ قوة عضلة؛ يضبط مستويات enzymes Vo خاصة بعضلة و/أو يثير أقسام خلية عضلية Al على سبيل المثال. في تطبيق مفضل؛ يقلل مثبط 6007-8 الظواهر الإكلينيكية لاضطراب مصاحب .GDF-8 يمكن لعامل ضبط GDF-8 أن يضبط تباين خلايا دهنية أولية إلى خلايا دهنية؛ يقلل تراكم الدهن؛ يقلل مستويات triglyceride المصل؛ يقلل مستويات cholesterol المصلء يضبط أيض «glucose يضبط الكثافة العظمية ويقلل ارتفاع glucose الدم. يمكن أيضا إعطاء مثبط GDF-8 لكائن Yo وذلك لزيادة كتلة عضلة؛ لزيادة أو تعجيل النمو؛ متضمنا نمو عضلة. تشير كمية مؤثرة علاجيا من متبط GDF-8 إلى كمية مؤثرة؛ عند إعطاء جرعة واحدة أو متعددة لكائن عند علاج؛ منع؛ شفاء؛ تأخير» تقليل شدة؛ أو تحسين عرض واحد على الأقل لاضطراب متكرر؛
أو إطالة إبقاء حياة الكائن أكثر من المتوقع في غياب تلك المعالجة. إن كائن مع اضطراب ملازم 06117-8» كائن معرض للإصابة باضطراب ملازم Yo 0074؛ كائن خاضع لعلاج مع عامل يضبط (GDF-8 وكائن مرشح لإعطاء عامل يضبط «GDF-8 قد يكون مرشحا للطرق المتوافرة هنا. إن طرق الاختراع قد تحدد أو تمنع استجابة
مناعية ضارة؛ و/أو تحدد الفعالية؛ الثبات الحيوي أو ملائمة استخدام العامل الضابط .GDF-8 إن كائن مصاب؛ أو معرض للإصابة مع اضطراب ملازم Jie GDF-8 اضطراب خاص بعضلة أو اضطراب عصبي عضلي مرشح للطرق المتوافرة هنا. إن تثبيط نشاط GDF-8 يزيد © نسيج عضلة في كائنات؛ متضمنة تلك التي تعاني من اضطرابات خاصة بعضلة. يوجد هناك عدد من الاضطرابات مصاحبة لعضل أو نسيج عصب معتلة وظيفياء على سبيل المثال بدون تحديد سوء التغذية العضلية؛ تصلب جانبي غير مغذي للعضلات (ALS) نقص الخلايا العضلية الأولية؛ الهزال؛ الهزال العضلي؛ الضمور العضلي؛ أو الهشاشة. تتضمن أمراض سوء التغذية العضلية؛ مثلاء سوء التغذية مع تضخم كاذب؛ الوجهي اللوحي العضدي؛ زناد ٠ (قوس عظمي لتثبيت الطرف)- طرف. تتضمن سوء التغذية العضلية التمثيلية سوء تغذية عضلية ¢(Leyden-Mobius) Duchennes سوء تغذية عضلية Becker سوء تغذية عضلية «Emery Dreifuss سوء تغذية عضلية زناد-- طرف؛ متلازمة العمود الفقري المتصلب؛ متلازمة 111 مسو تغنيسسسة عضيلية مسدول متلازمسسسة «Walker Warberg مرض مخ- عضلة- (pe سوء تغذية وجهي لوحي عضدي (Landouzy-Dejerine) ٠ سوء تغذية عضلية خلقي؛ سوء تغذية وتيري عضلي (مرض ٠ (Steinart ومرض خلل 5,840 العضلية Jal و:0086. يتضمن أيضا اضطراب عضلة ملازم GDF-8 اضطراب مختار من تحلل عضلة ملازم لمرض قلبي وعائي دموي؛ أو نتيجة لمرض أو Ala أخرى Jie ضمور عضو؛ فشل (some سرطانء الإيدز؛ الراحة بالسرير؛ عدم الحركة؛ قلة الاستخدام طويل الأمد؛ أو مرض أو Ula ٠ آخر متضمن أيضا في المصطلح. إن كائن مصاب مع أو معرض للإصابة مع اضطرابات نسيج دهني؛ مثلا السمنة؛ اضطرابات القلب والأوعية الدموية (عندما يصاحبه فقد عضلة أو هزال عضلة) واضطرابات أيض insulin مرشح أيضا. بصورة مشابهة؛ فإن الكائئنات المصابة مع أو المعرضة للإصابة مع؛ اضطراب يلازمه فقد عظمي؛ متضمنا هشاشة عظام؛ خاصة في السيدات كبار السن Yo و/أو بعد سن اليأس؛ هشاشة العظام التي يحثها glucocorticoid نقص LAY العظمية؛ التهاب عظمي مفصلي؛ وكسور متعلقة بهشاشة العظام مرشحة لطرق المعالجة المتوافرة هنا. تتضمن حالات أخرى ملازمة GDF-8 مرض أيضي عظمي؛ واضطرابات تتميز بكتلة عظمية ال vv فشل الغدد التناسلية السابق لأوانه؛ تثبيط <a glucocorticoid تلك بسبب علاج Jie قليلة نقص فيتامين (د)؛ ارتفاع الهرمون الجاردرقي الثانوي؛ النقص الغذائي؛ وفقدان candrogen الشهية العصابي. تتضمن أمثلة لاضطرابات القلب والأوعية الدموية مرض شريان تاجي (تصلب عصيدي)؛ (تتضمن ذبحة حادة وغير مستقرة)؛ نوبة قلبية؛ سكتة ( متضمنة سكتة فقر دم موصفي)؛ dad © فشل قلب محتقن؛ Ql ارتفاع الضغط المصاحب لأمراض القلب والأوعية الدموية؛ فشل مرض شريان طرفي» ومرض وعائي pall مرض شريان تاجي؛ ارتفاع الضغط؛ ارتفاع دهن حالات مصاحبة لاتزان بدني شاذ insulin دموي طرفي. تتضمن أمثلة لاضطرابات أيض insulin ومقاومة ¢(X خلل دهن الدم؛ المتلازمة الأيضية (مثلا المتلازمة cglucose لأجل nitrogen تحثها إصابة رضية مثل حروق أو عدم توازن ٠ يشير المصطلح "0017-8" إلى عامل نمو وتباين-/ خاص؛ وقد يسمى أيضا يشير المصطلح إلى شكل المصدر الأولي غير المعالج كامل الطول من "myostatin' الأولي peptide 5 بالإضافة إلى الأشكال الناضجة (كاملة الطول والوظيفة) 48 فإن ¢'(inactive) الناتجة من فصل بعد الترجمة. إذا لم يحدد خلاف ذلك أنه "غير نشط يحتفظ بواحد أو أكثر من أنشطة 6001-8 الحيوية. يشير المصطلح أيضا "GDF-8 protein” ٠ محتفظة بنشاط حيوي واحد على الأقل مصاحب GDF-8 أو أشكال متباينة من 03a إلى أي (amino acid ناضج؛ كما هو موضح هناء متضمنة ترتيبات تم تعديلها. إن ترتيب GDF-8
GDF-8 آدمي ناضج متوافر في تعريف الترتيب رقم:٠. يتعلق الاختراع الحالي GDF-8 أجل حيوان قارض؛ Ol من كل الأنواع الفقارية؛ المتضمنة؛ بدون تحديد؛ آدمي؛ بقرة؛ دجاجة؛
Sie قرد البابون» وسمكة (من أجل معلومات الترتيب؛ انظر؛ (egy خنزير؛ طائرء ديك ٠ -(McPherron et al., Proc. Nat. Acad. Sci. U.S.A. 94:12457-12461 (1997) إلى واحد أو أكثر من الأنشطة "(GDF-8 activity) GDF-8 يشير المصطلح "نشاط نشط. على سبيل GDF-8 protein التنتظيمية للنمو فسيولوجيا أو الجينية الشكلية المصاحبة نشط هو منظم سلبي لكتلة عضلة هيكلية. إن 0117-8 نشط يمكنه أيضا GDF-8 المثال؛ فإن إثارة انقسام خلية عضلية ¢(creatine kinase خاصة بعضلة (مثلاء enzymes ضبط إنتاج Yo وضبط تباين خلية دهنية أولية إلى خلايا دهنية. يتضمن "نشاط 0117-8" 'نشاط ربط cdf peptide على سبيل المثال؛ فإن 6017-8 الناضج يرتبط بصفة خاصة مع منطقة ."0074
YAS
YA
مع cfollistatin مع cactivin مع «GDF-8 مع مستقبل ¢ACtRIIB مع «GDF-8 الأولي من أخرى. إن مثبط proteins ومع «GASP-1 مع «follistatin تحتوي على مجال سيطرة proteins مضاد أو قسم مته؛ قد يقلل واحدة أو أكثر من alge ارتباط protein أو Ab مثل «<GDF-8 طلب lia انظر؛ (yall أنشطة الارتباط هذه. إن أنشطة 0017-8 الحيوية معروفة للمهرة في .١7-8و 1-0٠ براءة الاختراع الأمريكية رقم 2004/0223966 عند الأمثلة © إن 'اضطراب مصاحب 0017-8" هو اضطراب أو حالة سوف يستفيد فيه الكائن من
GDF-8 يتضمن اضطراب مصاحب .GDF-8 مثل مثبط «GDF-8 إعطاء مادة ضابطة
Jia خاصة بعضلة أو عضلي عصبي؛ على سبيل Alla اضطراب طبي مثل اضطراب أو نقص الخلايا العضلية (ALS) سوء التغذية العضلية؛ تصلب جانبي غير مغذي للعضلات ضمور؛ أو clip الهزال العضلي؛ الضمور العضلي؛ أو تحلل عضلة متضمنا cell الأولية؛ ٠ الوجهي «lS سوء التغذية مع تضخم lia هشاشة. تتضمن أمراض سوء التغذية العضلية؛ اللوحي العضدي؛ زناد (قوس عظمي لتثبيت الطرف)- طرف. تتضمن سوء التغذية العضلية «Beker سوء تغذية عضلية ¢(Leyden-Mobius) Duchennes التمثيلية سوء تغذية عضلية سوء تغذية عضلية زناد-- طرف؛ متلازمة العمود الفقري «Emery Dreifuss سوء تغذية عضلية متلازمة Fukuyama سوء تغذية عضلية Ullrich المتصسلب؛ متلازمة ٠ (Landouzy- مرض مخ- عضلة عين؛ سوء تغذية وجهي لوحي عضدي «Walker Warberg مرض «(Steinart ©0©©0؛ سوء تغذية عضلية خلقي؛ سوء تغذية وتيري عضلي (مرض .Gower 5 خلل الوتيرة العضلية آخر يتضمن المصطلح أيضا تحلل عضلة ملازم لمرض قلبي وعائي دموي؛ أو نتيجة لمرض الراحة بالسرير؛ عدم الحركة؛ Gal ضمور عضوء فشل عضو؛ سرطان؛ Jia أو حالة آخر ٠ أو مرض أو حالة آخر متضمن أيضا في المصطلح. cad) قلة الاستخدام طويل السمنة؛ Mia اضطرابات نسيج دهني؛ GDF-8 تتضمن أيضا اضطرابات ملازمة اضطرابات القلب والأوعية الدموية (عندما يصاحبه فقد عضلة أو هزال عضلة) واضطرابات اضطراب يلازمه فقد عظمي؛ GDF-8 أيض (09011:. تتضمن أيضا اضطرابات ملازمة السن و/أو بعد سن اليأس؛ هشاشة العظام HLS متضمنا هشاشة عظام؛ خاصة في السيدات Yo نقص الخلايا العظمية؛ التهاب عظمي مفصلي؛ وكسور متعلقة cglucocorticoid التي يحثها واضطرابات تتميز بكتلة عظمية (adie بهشاشة العظام. تتضمن حالات أخرى مرض أيضي
قليلة متل تلك بسبب علاج glucocorticoid مزمن؛ فشل الغدد التناسلية السابق لأوانه؛ تثبيط 00 نقص فيتامين (د)»؛ ارتفاع الهرمون الجاردرقي الثانوي؛ النقص الغذائي؛ وفقدان الشهية العصابي. تتضمن أمثلة لاضطرابات القلب والأوعية الدموية مرض شريان تاجي (تصلب عصيدي)؛ © ذبحة (تتضمن ذبحة حادة وغير مستقرة)؛ نوبة قلبية؛ سكتة ( متضمنة سكتة فقر دم موصفي)؛ ارتفاع الضغط المصاحب لأمراض القلب والأوعية الدموية؛ فشل القلب؛ فشل قلب محتقن؛ مرض شريان تاجي؛ ارتفاع الضغط؛ ارتفاع دهن all مرض شريان sb ومرض وعائي دموي طرفي. تتضمن أمثلة لاضطرابات أيض insulin حالات مصاحبة لاتزان بدني شاذ لأجل glucose خلل دهن الدم؛ المتلازمة الأيضية (مثلا المتلازمة o(X ومقاومة insulin التي ٠ تحثها إصابة رضية Jie حروق أو عدم توازن nitrogen تشير المصطلحات "مركب كامن "GDF-8 إلى مركب proteins المتكون بين dimer المتمائل GDF-8 الناضج 5 peptide الأولي .GDF-8 يعتقد أن peptides الأوليين 0717-8 الاثنين يتلازمان مع جزيئي GDF-8 الناضجين في dimer المتماثل لتكوين مركب tetrameric غير نشط. قد يتضمن المركب الكامن مثبطات GDF أخرى بدلا من أو بالإضافة إلى واحدة ١٠ أو أكثر من peptides الأولية .GDF-8 يشير المصطلح GDF-8" ناضج إلى protein ينفصل من مجال السيطرة الطرفي carboxy لأجل protein المصدر الأولي .GDF-8 قد يتواجد 6017-8 الناضج Jie dimer 100006 متماشل؛ أو في مركب كامن .GDF-8 اعتمادا على الشروط» فإن GDF-8 الناضج قد يرشح اتزان بين أي من أو كل من هذه الأشكال المختلفة. في شكله النشط ٠ حيوياء يشار أيضا إلى 0017-8 الناضج بأنه GDF-8" نشط". إن 0017-8 النشط حيويا ليس في مركب كامن .GDF-8 يشير المصطلح أيضا إلى أي أجزاء وأشكال متباينة من GDF-8 تستبقى نشاط حيوي واحد على الأقل ملازم 6017-8 الناضج؛ حسب الشرح هناء متضمنة ترتيبات تم تعديلها. يشير المصطلح peptide” أولي '(GDF-8 propeptide) GDF-8 إلى polypeptide Yo المنفصل من مجال السيطرة الطرفي-0100ة من protein المصدر الأولي -GDF-8 إن peptide الأولي GDF-8 قادر على الارتباط مع مجال سيطرة ربط peptide الأولي على GDF-8 الناضج. يشكل ١ peptide لأولي GDF-8 مركبا مع dimer المتماثل GDF-8 الناضج.
$e الناضج في GDF-8 الاثنين يتلازمان مع جزيئين من GDF-8 الأوليين peptide يعتقد أن غير نشط؛ يسمى "مركب كامن". قد يتضمن tetrameric المتماثل لتكوين مركب dimer peptides أخرى بدلا من أو بالإضافة إلى واحدة أو أكثر من GDF المركب الكامن مثبطات .GDF-8 الأولية أي عامل قادر "(GDF-8 modulating agent) GDF-8 يتضمن المصطلح "عامل يضبط ° أو مشتق مقبول دوائيا منه. إن العوامل «GDF-8 على ضبط نشاط؛ إظهار؛ تصنيع؛ أو إفراز sale يمكن استخدام .GDF-8 سوف تزيد أو تقلل واحدة أو أكثر من أنشطة GDF-8 الضابطة متضمنة 'مثبط 0101-8" لعلاج اضطرابات خلية دهنية؛ اضطرابات متعلقة «GDF-§ ضابطة أو اضطرابات عظمية؛ على سبيل المثال. يشتمل المصطلح مشتقات حيوية cglucose بأيض GDF-8 في تطبيقات خاصة؛ سوف يؤثر عامل ضابط أو متبط .GDF-8 من عامل ضابط ٠ على ارتباط 0017-8 مع واحد أو أكثر من قرناء الارتباط الفسيولوجي له؛ متضمنة بدون تحديد «follistatin (مثلا follistatin يحتوي على مجال سيطرة protein «(ActRIB مستقبل (مثلا طفرات GDF-8 أولي peptide مقثل GDF-8 protein i «(GASP-2 «GASP-1 مشت ترتبط بصفة خاصة مع Abs «Sa «GDF-8 ومشتقات من ذلك. تتضمن العوامل الضابطة وأجزاء ومشتقات من JA-16 170-022 (MYO-028 (MYO-029 (متضمنة GDF-8 ١٠ براءة الاختراع الأمريكية Nia ترتبط بصفة خاصة مع مستقبل 6017-8 (انظر؛ Abs «(ld رقم 11074970 منشور براءة الاختراع الأمريكية رقم 2004/0077053-81)؛ مستقبلات معدلة ¢(ActRIIB-Fc اندماج protein اندماج مستقبل؛ مثل proteins قابلة للذوبان (متضمنة أو GDF-8 أولي peptide Jie) BMP-11 أو GDF-8 أخرى ترتبط بصفة خاصة مع proteins تحتوي proteins «follistatin «GDF-8 لأولي | peptide 81/0-11؛ مواد طفرية ومشتقات من | ٠ ترتبط مع proteins «(proteins من هذه Fe واندماجات follistatin على مجال سيطرة ومواد مماثلة. هناك مثبطات غير proteins من هذه Fo واندماجات GDF-8 المستقبل مشتملة أيضا في المصطلح مثبط 61017-8. تتضمن (nucleic acids J) proteinaceous «ribozymes «peptide مماتاات ¢peptides «Abs «proteins GDF-8 مببطسات أو siRNA مؤدوج الشريط (متضمنا RNA مضادة للإحساس؛» oligonucleotides Yo .011-8 التي تثبط بصفة خاصة ga] وجزيئات صغيرة «(microRNA
YAEL
ف يشير المصطلح "كائن (individual) إلى أي كائن فقاري؛ متضمنا كائن ثديي؛ طائرء lial حيوان برمائي؛ أو سمكة. يتضمن المصطلح "كائن ثديي (mammal) أي كائن مصنف مثل؛ ذكر أو أنثى؛ متضمنا الآدميين» الحيوانات الرئيسية؛ القردة؛ الكلاب؛ الخيولء القطط؛ الخراف؛ الخنازير؛ الماعز؛ الماشية؛ إلخ. تتضمن أمثلة حيوانات غير ثديية دجاجة؛ © ديك رومي؛ بطة؛ أوزة؛ سمكة (مثل؛ سالمون؛ سمك السلورء coup la سمك الزرد؛ والسلمون المرقط)؛ والضفادع. يمكن اختيار الكائن من الآدميين؛ أو الحيوانات الأليفة؛ الحيوانات المستخدمة في الغذاء؛ الدواب» حيوانات حديقة الحيوان» حيوانات الرياضة؛ حيوانات السباق؛ أو الحيوانات المدللة» على سبيل JE تشير المصطلحات (inhibit) Jad’ و"تثبيطي (inhibitory) إلى تقليل واحد أو أكثر من ٠ أنشطة GDF-8 بواسطة مثبط «GDF-8 مقارنة بنشاط GDF-8 في غياب نفس المثبط. يفضل أن يكون التقليل في النشاط على الأقل JX JY Nga يال قال كال JN ٠ 0 أو أكبر. في تطبيقات خاصة؛ يقل نشاط 0017-8 عند ols بواحد أو أكثر من المثبطات المعلنة حالياء على الأقل 75٠ يفضل على الأقل حوالي 60 JAE SAY TNA TNT TNE TINY TN TRA JA للك SAN TAN TNE TAY نكل JAY ٠ حك ححا ZA أو 799 ويفضل أكثر أيضا على الأقل 7905 إلى .7٠٠١ يشير المصطلح 'يعادل "(neutralize) و'معادلة "(neutralizing) إلى تقليل واحد أو أكثر من أنشطة 0074 بمقدار على الأقل A 7/85 290 أو 715. (Say قياس تثبيط نشاط GDF-8 على سبيل المثال؛ في اختبارات جين مخبر 0013)0804(12 حسب الوصف في Thies et al.
Growth Factors 18:251-259 (2001) أو في اختبارات مستقبل ACtRIIB حسب ٠ التوضيح في الأمثلة أدناه. يشير المصطلح "معزول (058018:0)" إلى جزيء منفصل جوهريا عن بيئته الطبيعية. على سبيل المثال» فإن protein معزول هو protein منفصل جوهريا من الخلية أو مصدر النسيج المشتق منها. قد تكون العلامة أيضا هي enzyme مثلاء enzyme يحول مادة خاضعة؛ مثل peroxidase Yo (مثلاء peroxidase فجل phosphatase «(ls قلوي؛ «glucose oxidase .B-galactosidase إن peroxidase عند إجراء حضانة له مع مواد خاضعة ALE للذوبان (مثلاء «(OPD) o-phenylenediamine «(TMB) 3,3°,5,5’ tetramethylbenzidine YAEL ty
«polyphenols ¢luminol (ABTS) 2,27 -azino-di [3-ethyl-benzthiazoline] sulfonate يؤدي إلى تغير مولد لصبغ أو مضيء في المادة الخاضعة ¢(luciferin «acridine esters يمكن تحديده بقياس مجهري طيفي. نموذجيا؛ بعد فترة حضانة ثابتة مع المادة الخاضعة؛ يخمد بالتحميض)؛ وتقدر النتيجة كميا بقياس الكثافة البصرية (الامتصاص) أو Nik) التفاعل في النطاق الخطي لتفاعلات مولدة OD الإضاءة. يمكن مقارنة نتائج الامتصاص مع قيم ©
الصبغ؛ وتقاس اختبارات مناعية مضيئة بوحدات ضوء نسبية (نا/ل8. قد تكون العلامة أيضا هي <hapten «biotin أو جزء ملحق مع epitope (مثلا؛ «(hemagglutinin peptide) HA «histidine صاعامتم يربط «AviTag® ¢maltose أو ¢(glutathione-S-transferase يمكن تحديدها بإضافة عامل تحديد معلم يتفاعل مع العلامة ٠ المصاحبة لعامل ضبط أو عامل تحديد 8 .GDF يمكن تحديد عامل تحديد معلم biotin (“biotinylated”) من خلال تفاعله مع اتحاد peroxidase—avidin «Mis cavidin-enzyme Jad حار؛ بعد حضانة متعاقبة مع اتحاد avidin-enzyme ومادة خاضعة مناسبة مولدة لصبغ
أو مضيئة. إن Europium هو علامة أيضا. يشير المصطلح " مثيل (peptide mimetic) peptide حسب الاستخدام هناء إلى peptide Vo يماثل حيويا مواد محددة نشطة على هرمونات» cytokines مواد خاضعة enzyme فيروسات أو جزيئات حيوية opal وقد يعارض» يثيرء أو بطريقة أخرى يضبط النشاط الفسيولوجي لمركب ترابطي طبيعي. يحدد مثيل peptide بصورة مفضلة Jie مركبات لها بناء ثانوي يشبه 6 وسمات بنائية إضافية اختياريا؛ إن طريقة تأثيرها مشابهة بدرجة كبيرة أو مماثلة لطريقة تأثير peptide الأصلي وعلى أية حال يمكن تعديل نشاطها (مثلا كمضاد أو كمثبط) ٠ -_ مقارنة مع peptide الأصلي بصفة خاصة مستقبلات أو enzymes على أية حال؛ يمكن أن تقلد تأثير peptide الأصلي (معضدة). على مدار هذه المواصفة يشير المصطلح Joie’ "(peptide mimetic) peptide جزيء نظرا لخواصه البنائية يكون قادرا على محاكاة الوظائف الحيوية من أجل 00178 إما الوظيفي أو غير الوظيفي. في الاختراع الحالي؛ يفترض أن جزء من GDF8 يشمل مجال سيطرة ربط/ dimerization من GDF8 يقوم بوظيفة مادة Yo سائدة سلبية من أجل .GDF8 إن مثيل cpeptide بذاته؛ من مجال سيطرةٍ ربط/ dimerization 8 يمكن أن يتواجد في زيادة جزيئية جرامية متعددة ويمكن أن 'يتنافس بصورة فائقة” مع 8 نوع بري ويشكل dimers مغايرة مع جزيئات النوع البري وبالتالي يؤثر كمادة سائدة YAER
¢y سلبية لوظيفة 6018 الحيوية. في هذا الجانب؛ ستتم إعاقة وظيفة 6018 وبالتالي تخف حدة تثبيط نمو العضلة. إن مثالا لاختبار حيوي في الجسم لذلك النشاط المحاكي 01178 المحث بإعطاء كمية مؤثرة AT هو زيادة كتلة عضلة هيكلية في فئران طبيعية أو حيوان اختبار al من مثيل محث للنمو واحد على الأقل من الاختراع الحالي. ° يشير المصطلح "نقي (purified) إلى جزيء خالي جوهريا من مادة أخرى مصاحبة للجزيء في بيئته الطبيعية. على سبيل المثال» يكون protein النقي خاليا جوهريا من المادة الخلوية أو proteins أخرى من الخلية أو النسيج المشتق منها. يشير المصطلح إلى مستحضرات يكون protein les المعزول نقيا جوهريا للإعطاء كتركيبة علاجية؛ أو نقي بنسبة 7٠ إلى 780 على الأقل (وزن/ وزن)؛ يفضل أكثر؛ نقي بنسبة 740-7850 على الأقل 795 نقي بنسبة SH (وزن/ وزن؛ يفضل أكثر أيضاء نقي بنسبة 6790-90« يفضل ٠ (cos على الأقل (وزن/ ٠٠١ أو 44 JAA ay تر يشير المصطلح SIRNA” حسب الاستخدام هناء إلى جزيئات RNA متفاعلة صغيرة يمكن استخدامها لإخماد نشاط leds) جينات مستهدفة. يمكن أن يكون dsRNA sa siRNA به 79-19 nucleotides يمكن إنتاج هلله داخليا بتحلل جزيئات dsRNA أطول بواسطة
Layla في خلية siRNAs يمكن أيضا إدخال Dicer يسمى RNase 1 متعلق مع nuclease ٠ أو بنسخ بنية إظهار. بمجرد تكوينها؛ تتجمع SIRNAS مع مكونات 0016105 في مركبات تحتوي على ribonuclease داخلي تسمى مركبات إخماد نشاط يحثه-م101 (081505. إن منع التفاف SIRNA الذي يولده ATP ينشط RISCs والتي تستهدف في المقابل نسخة MRNA المكمل بازدواج قاعدة «Watson-Crick وبذلك ينفصل ويتحلل mRNA يحدث فصل mRNA Ye قرب وسط المنطقة المحددة بشريط siRNA إن تحلل mRNA هذا الخاص بالترتيب يؤدي إلى إخماد نشاط الجين. يمكن استعمال طريقتين على الأقل لتحقيق إخماد نشاط جين من خلال SIRNA الأولى؛ يمكن تصنيع siRNAs في المعمل وإدخاله في خلايا لإخماد إظهار الجين مؤقتا. إن siRNAs عبارة عن أزوا ج من oligonucleotides قصيرة مختلطة يمكن أن تتضمن؛ مثلاء RNAs ٠9 nucleotides Yo مع أجزاء متدلية متماثلة '3 dinucleotide باستخدام أزوا siRNA z مصنعة من ١؟ زوج قاعدة (مثلاء ٠9 قاعدة RNA يليها UU أو جزء متدلي '3 (TAT يمكن تحقيق إخماد نشاط جين خاص بترتيب في خلايا ثديية. إن SIRNAS هذه يمكنها إخماد ترجمة جين
مستهدف في خلايا ثديية بدون تنشيط protein kinase معتمد على (PKR) DNA بواسطة RNAS أطول مزدوجة الشريط (dsRNA) وذلك قد يؤدي إلى كبح غير خاص لترجمة proteins كثيرة. الثانية؛ يمكن إظهار SIRNAS في الجسم من نواقل. يمكن استخدام هذه الطريقة لإظهار siRNAs © بدرجة ثابتة في خلايا أو حيوانات طفرية. تصميم هندسيا نواقل SIRNA leds] للقيام بنسخ SIRNA من وحدات نسخ «(pol III) polymerase II إن وحدات نسخ pol TIT مناسبة لإظهار siRNA دبوس شعر لأنها تضاعف مكان نهاية نسخ غني مع AT قصير ذلك ما يسبب إضافة أجزاء متدلية من ¥ زوج قاعدة (UU Die) إلى SIRNAS دبوس شعر- وهذه سمة مساعدة لوظيفة siRNA يمكن أيضا استخدام نواقل إظهار ]11 pol لتوليد فئران طفرية ٠ تظهر SIRNA يمكن Lad إظهار SIRNA بطريقة خاصة بنسيج. تحت هذه الطريقة؛ تظهر أولاً dsRNAs طويلة من محث (مثل (pol II) CMV في أنوية خطوط خلية أو حيوانات طفرية منتقاة. تصنع dSRNAS الطويلة في شكل siRNAs في الأنوية (مثلاء بواسطة «(Dicer تخرج SIRNA من الأنوية وتسبب إخماد نشاط خاص بجين. يمكن استخدام طريقة مشابهة في اتحاد مع Vo محثات خاصة بنسيج (pol IT) لتوليد فئران ناقصة خاصة بنسيج. يشير المصطلح ”جزيء صغير (small molecule) إلى مركبات ليست جزيئات كبيرة. ia «hail Karp, (2000) Bioinformatics Ontology 16:269-85; Verkman, (2004) AJP-Cell Physiol. 286:465-74. coll ¥. فإن الجزيئات الصغيرة تعتبر غالبا هي تلك المركبات الأقل من ٠٠٠١ دالتون» مثلاء Voet and Voet, Biochemistry, 2nd ed., ed.
N.
Rose, Wiley and Sons, New York, 14 .)1995( على سبيل المثال؛ استخدام Davis et al. ((2005) Proc.
Natl.
Acad.
Sci.
USA 102:5981-86) Yo عبارةٍ الجزيء الصغير للإشارة إلى peptides 5 «methotrexate «folates عصبية؛ بينما استخدام )2:1022-30 Halpin and Harbury ((2004) PLos Biology العبارة للإشارة إلى منتجات جين جزيء صغيرة؛ peptides s RNAs (DNAs «Mis تتضمن أمثلة جزيئات صغيرة
م طبيعية 58 مواد توصيل عصبي؛ 3 (SIRNAS تتضمن جزيئات صغيرة مصنعة مواد كيميائية عديدة مذكورة في قواعد بيانات جزيء صغير كثيرة متوافرة تجارياء مثلاء (Fine FCD ChEBI «(Small Molecule Interaction Database) SMID «Chemicals Database) CSD 5 «(Chemical Entities of Biological Interest) «(Cambridge Structural Database) © انظرء Mia JAlfarano et al. (2005) Nuc.
Acids Res.
Database Issue 33:D416-24 إن المصطلحات "ارتباط خاص (specific binding) 'يربط بصفة خاصة (specifically binds) إلخ؛ تعني تشكيل اثنين أو أكثر من الجزيئات لمركب يمكن قياسه تحت شروط فسيولوجية أو اختبار ويكون انتقائيا. يقال أن Ab أو protein ارتباط alge مضاد ٠ أو مثبط آخر 'يرتبط بصفة خاصة "(specifically bind) مع protein إذا كان تحت شروط منتقاة بدرجة ملائمة؛ لا يتم تثبيط ذلك الارتباط جوهرياء بينما في نفس الوقت يتم تثبيط الارتباط غير الخاص. يتميز الارتباط الخاص بانجذاب كبير ويكون انتقائيا لمركب أو protein إن الارتباط غير الخاص له عادة انجذاب قليل. يتميز عامة الارتباط في IgG Abs على سبيل المثال بانجذاب على الأقل حوالي 7-٠١ جزيئي جرامي أو أكبر؛ مثل على الأقل ٠ حوالي 8-٠١ جزيئي جرامي أو أكبرء أو على الأقل حوالي 9-٠١ جزيئي جرامي أو أكبرء أو على الأقل حوالي ٠١-٠١ جزيئي جرامي أو ul أو على الأقل حوالي ١١-٠١ جزيئي جرامي أو أكبر؛ أو على الأقل حوالي ١-٠١ جزيئي جرامي أو أكبر. إن المصطلح يمكن أيضا استخدامه عندما يكون؛ Sia مجال سيطرة ربط مولد مضاد خاصا epitope معين لا تحمله مولدات مضاد كثيرة؛ وفي تلك الحالة فإن Ab أو protein ارتباط مولد مضاد الحامل ٠ لمجال سيطرة ربط مولد المضاد سوف لا يربط dale مولدات مضاد أخرى. تحتاج طرق خاصة انجذابا كبيرا للربط الخاص؛ بينما توجد طرق أخرى؛ مثل اختبار رنين plasmon سطح؛ قد تحدد مركبات أقل ثباتا وتفاعلات أقل انجذابا. عند الضرورة؛ يمكن تقليل Lala) غير الخاص بدون التأثير جوهريا على الارتباط الخاص بتغيير شروط الارتباط. إن تلك الشروط معروفة في الفن؛ ويمكن للصانع الماهر بانتقاء تقنيات روتينية أن ينتقى شروط YO ملائمة. تحدد الشروط sale بالنسبة لتركيز أقران الارتباط؛» الشدة الأيونية للمحلول» Lag الحرارة؛ الزمن المسموح به bli تركيز الجزيئات غير الخاصة (مثلاء albumin مصلء «(sd casein إلخ. هناك شروط ارتباط تمثيلية مذكورة في الأمثلة أدناه. YAER
يتضمن المصطلح 'مضاد GDF8 خاص "(specific 0018 antagonist) أو his 01178 خاص GDF8 inhibitor) عقك»مه)" أي عامل قادر على تثبيط» تقليل و/أو معادلة نشاط؛ إظهار؛ تصنيع؛ أو إفراز 0018 لكنه لا يشبط بدرجة ملحوظة؛ يقلل و/أو يعادل نشاط؛ إظهار» تصنيع؛ أو إفراز proteins أخرى؛ Nia من عائلة 2067-8 الفائق» BMP11 ie © تتضمن تلك المثبطات Glia كبيرة وجزيئات صغيرق «proteins Nia وطف «peptides مماثلات oligonucleotides «ribozymes «siRNA «peptide مضادة للإحساس؛ RNA مزدوج الشريط» وجزيئات صغيرة أخرى؛ تثبط بصفة خاصة نشاط .GDF-8 يقال أن تلك المثبطات 'تعارض (antagonize) بصفة خاصة Mie) "تثبط (0أطانطد)"؛ 'تنقص "(decrease) أو 'تقلل "(reduce) أو doled’ (©2نلة0600)") نشاط GDF-8 الحيوي. إن مثبط GDF-8 سوف ٠ يثبط أو يعادل أو يقلل نشاط حيوي واحد على الأقل يخص 0017-8؛ Jia نشاط فسيولوجي؛ منظم للنمو؛ أو مولد للشكل مصاحب GDF-8 protein نشط. على سبيل المثال؛ فإن GDF-8 هو منظم سلبي gail عضلة هيكلية. يمكن لمثبط GDF-8 أن يزيد كتلة عضلة؛ يزيد قوة عضلة؛ يضبط مستويات enzymes خاصة بعضلة؛ يثير انقسام خلية عضلية أولية؛ يضبط WA cls دهن أولية إلى خلايا دهنية؛ يقلل تراكم الدهن؛ يقلل مستويات triglyceride ١ المصل؛ يقلل مستويات cholesterol المصل»؛ يضبط أيض glucose و/أو يقلل ارتفاع ضغط الدم. يستخدم مصطلح 'معالجة (treatment) هنا تبادليًا مع المصطلح "طريقة علاجية "(therapeutic method) ويشير إلى كل من معالجة وإجراءات وقائية/ حامية. يعرف المصطلح معالجة Lad بأنه القدرة على تحسين؛ علاج أو منع اضطراب. قد يتضمن الأفراد المحتاجين ٠ للمعالجة أشخاص لديهم بالفعل اضطراب طبي معين بالإضافة إلى الأشخاص المعرضين للإصابة بالاضطراب في النهاية (أي؛ هؤلاء المحتاجين إجراءات واقية). إن ممارسة الاختراع الحالي تستعمل؛ ما لم يشر خلاف هذاء تقنيات تقليدية للعلم الحيوي الخاص بالجزيئات؛ المعلم الحيوي الخاص بالجراثيم؛ DNA مخلق؛ وعلم المناعة؛ Ally تدخل ضمن المهارة الفنية. يتم بالكامل شرح هذه التقنيات في الأدبيات. انظر مثلاء Sambrook, et al., Molecular Cloning; A Laboratory Manual, Second Edition (1 989); Yo DNA Cloning, Volumes I And II (D.
N Glover ed. 1985); Oligonucleotide Synthesis (M.
J.
Gait ed., 1984); Nucleic Acid Hybridization (B.
D.
Hames & S.
J.
Higgins
و eds. 1984); Transcription And Translation (B.
D.
Hames & S.
J.
Higgins eds. 1984); Animal Cell Culture (R.
I.
Freshney ed. 1986); Immobilized Cells And Enzymes (IRL Press, 1986); B.
Perbal, A Practical Guide To Molecular Cloning (1984); the series, Methods In Enzymology (Academic Press, Inc.); Gene Transfer Vectors For Mammalian Cells (J.
H.
Miller and M.
P.
Calos eds. 1987, Cold Spring Harbor ° Laboratory), Methods in Enzymology Vol. 154 and Vol. 155 (Wu and Grossman, and Wu, eds., respectively), Mayer and Walker, eds. (1 987), Immunochemical Methods In Cell And Molecular Biology (Academic Press, London), Scopes, (1987), Protein Purification: Principles And Practice, Second Edition (Springer-Verlag, N.Y.), and Handbook Of Experimental Immunology, Volumes I IV (D.
M.
Weirand ٠ C.
C.
Blackwell eds. (1986). GDF8 add epitopes ومضاداته تخطيط 06م باستخدام مضادات أجسام 8 خاصة و amino acid peptides ١١ متراكبة من GDF8 آدمي يظهر 5 مختارة تخص 60178 التي قد تستهدف المعارضة GDF Ve خاصة (مثال ؛-7). على أساس هذا البحث؛ تعرف © epitope(s) مستقلة تخص 8. يوفر الاختراع الحالي هذه 5 (متضمنة مماثلات peptide منها)؛ polynucleotides «epitopes iS polynucleotides تثبيطية لهاء ومضادات أجسام متعلقة بها كمضادات خاصة بنشاط .GDF8 8 تخص GDF8 ومماثلات Peptide منها Ye يوفر الاختراع الحالي 58 جديدة معزولة ومنتقاة مماثلة إلى cepitopes والتي قد تتميز بيولوجيا بأنها تخص (GDF8 وبذلك؛ يشار Lea) هنا بأنها epitope(s) يخص (تخص) 8. يعد جزء من الاختراع أن مماثلات peptide لهذه epitopes خاصة 8 قد تستخدم كمضادات «GDF8 أي المعارضة نشاط 0018؛ Mia ارتباط GDF مع مستقبله. على سبيل المثتال ¢ يوفر الاختراع polynucleotides منتقاة ومعزولة تشفر 0 مجالات YO سيطرة ربط تخص 60178 (التي قد تتضمن مواقع ارتباط مستقبل ALK4 [ALK4 من 8 ) والتي قد تعمل كمضادات مستقبل [GDF8 مماثلات cpeptide يشار إليها هنا «“GE4” «“GE3” «“GE2” «“GE1” و062557». قد يشتمل nucleic acid طبقا للاختراع علض
م الحالي على DNA أو RNA وقد يخلق WS أو جزئيا. تشتمل الإشارة إلى ترتيب nucleotide كما هو مذكور هنا على جزيئات DNA مع الترتيبات المخصصة أو مكافئات جينومية ie) ترتيبات تكميلية)؛ بالإضافة إلى جزيئات RNA مع الترتيبات المخصصة التي تستبدل فيها T مع لآ؛ ما لم يحدد السياق غير ذلك. إن ترتيبات DNA مفضلة للاختراع تتضمن ترتيبات ٠ جينومية cDNA g وترتيبات DNA مخلقة كيميائيا. تذكر لاحقا ترتيبات nucleotide من GE5 5 «GE4 «GE3 «GE2 «GE1 iii cDNAs آدمية؛ المعروفة بأنها cDNA آدميء كتعريفات الترتيب أرقام: Yo oF 4 و11 على الترتيب. إن polynucleotides من | لاختراع الحالي تتضمن أيضا polynucleotides تتهجن تحت شروط صارمة إلى polynucleotides لها و/أو متكون أساسيا من ترتيبات nucleotide ٠ المذكورة كتعريفات الترتيب أرقام نك قف اك ARNE أو تكملاتهاء و/أو تشفر polypeptides التي تحتفظ بالنشاط الحيوي الجوهري من 0121» «GE3 (GE2 084؛ «GES sl على الترتيب. إن 085 من الاختراع الحالي تتضمن أيضا أقسام مستمرة من ترتيبات nucleotide المذكورة لاحقا كتعريفات afi ll أرقام YoY 9 و١١ مشتملة على الأقل على nucleotides VY متعاقبة. Vo تذكر لاحقا ترتيبات amino acid من GES «GE4 083 «GE2 «GEl آدمية A Biles polypeptides كتعريفات الترتيب أرقام: ٠١ A ef و17 على الترتيب. إن (a polypeptides الاختراع الحالي تتضمن أيضا aw polypeptides ترتيب amino acid له و/أو متكون أساسيا من أقسام مستمرة من أي من الترتّيبات المذكورة لاحقا كتعريفات الترتيب أرقام :4 1 6 ٠١ و17 مشتملة على الأقل على § amino acids متعاقبة. إن polypeptides ٠ للاختراع تتضمن أيضا أي من الترتيبات المذكورة لاحقا كتعريفات الترتيب أرقام (VY 9 ٠١ cA Tet: متضمنة أقسام مستمرةٍ منهاء حيث يحل واحد أو أكثر من L-amino acids محل D-amino acids المقابلة الخاصة بها. إن polypeptides للاختراع الحالي تتضمن أيضا أجزاء نشطة من تعريفات الترتيب أرقام: 64 2 8» ٠١ و17 أي؛ Gh قسم مستمر من أي من الترتيبات المذكورة لاحقا كتعريفات الترتيب أرقام: ٠١ eA oot و7١ Ye التي تحتفظ بالنشاط الحيوي الجوهري من «GE4 «GE3 (GE2 (GEl أو GES آدمية كاملة الطول» أي؛ Gh جزء من تعريفات الترتيب أرقام: 4 7 ٠١ A و١١ والذي يعد مجال سيطرة ربط خاص لأجل 00178 و/أو التي يكون لها peptide مماثل syle عن مضاد خاص لنشاط YAY
8. بالإضافة لهذاء قد يكون polypeptide الاختراع هو amide lf 5 acetylated تمت إعاقته باستخدام طرق معروفة جيدا. إن 8 الاختراع الحالي تتضمن أيضاء بالإضافة لهذه polynucleotides الموصوفة أعلاه؛ polynucleotides تشفر أي من ترتيبات amino acid المذكورة لاحقا كتعريفات الترتيب أرقام ٠١ A Tet و١١ وأقسام مستمرة منهاء © وتختلف عن polynucleotides المصدر الآدمي الموصوفة أعلاه فقط بسبب تحلل الشفرة الوراثية المعروفة جيدا. يوفر الاختراع أيضا Ei polynucleotides ومعزولة تشفر peptides مماثلة تم تدويرها إلى epitope(s) تخص «GDF مثلا «GE4 «GE3 «GE2 «GE1 و GES إن ترتيبات DNA مفضلة للاختراع تتضمن ترتيبات جينومية 5 cDNA وترتيبات DNA مخلقة كيميائيا. إن أحدى ٠ المهارات الفنية هي إدراك أن الاختراع الحالي يتضمن أيضا جزيئات أخرى تم تدويرهاء Jie Alles peptides تم تدويرها معتمدة على مجالات سيطرة ربط أخرى تخص 0078. بالإضافة لما سبق؛ قد يصبح peptide مماثل تم تدويره من الاختراع acetylated و/أو amide تمت إعاقته باستخدام طرق معروفة جيدا. مضادات أجسام تخص 011:8 Vo يوفر الشرح الحالي مضادات أجسام جديدة ie) أجزاء مضاد جسم أو protein ارتباط مولد مضاد) Jeli بينيا بصفة خاصة مع 00178. إن تجسيدات توضيحية غير مقيدة لمضادات الأجسام هذه تسمى 81622. لدى مضادات الأجسام للاختراع سمات مميزة فريدة ومفيدة. Yl تكون مضادات الأجسام هذه قادرة على ربط 6118 ناضج بانجذاب كبير (مثال "). ثانياء تتفاعل بينيا مضادات الأجسام المعلنة مع GDF8 بصفة dala أي؛ لا ترتبط ٠ مضادات الأجسام للاختراع بانجذاب كبير مع أعضاء أخرى من العائلة الفائقة (TGF-B مثلاء 71 (مثال L(Y ثالثاء إن مضادات الأجسام للاختراع تثبط نشاط 6018 في المعمل وفي الجسم الحي كما هو موضح (مثال (YF رابعاء إن مضادات الأجسام المعلنة قد تثبط نشاط 8 المصاحب للتنظيم السالب لكتلة عضلة هيكلية وكثافة العظم (مثال 3). في asl التجسيدات؛ إن مضادات الأجسام المعلنة هنا قادرة بصفة خاصة على التفاعل YO بينيا مع «sl ¢GDF8 يتم تصور أن مضادات الأجسام لن تتفاعل بصورة شديدة مع proteins أخرى؛ على سبيل المثال؛ تلك المضادات المنتمية إلى العائلة الفائقة TGF-B مثل BMP11 cactivin مادة تثبط cmullerian عامل مغذي عصبي مشتق من خلية دبقية؛ أو عوامل النمو YALE
والتباين بخلاف .GDF8 في أحد التجسيدات غير المقيدة للاختراع؛ إن مضاد جسم GDF8 أو 0 ارتباط alias alge خاص للاختراع يربط 6018 بأفضلية تصل لأكثر من ه-١٠ أضعاف عن ربطه لأجل 1. في أحد التجسيدات غير المقيدة للاختراع؛ إن مضاد جسم مضاد 0018 أو protein ارتباط مولد مضاد خاص للاختراع يربط 0018 بأفضلية تصل © لأكثر من ٠00١-٠١ ضعف عن ربطه لأجل 1. في تجسيد غير مقيد للاختراع إن مضاد جسم مضاد GDF أو protein ارتباط مولد مضاد خاص ذا أهمية يربط 01:78 بأفضلية تصل لأكثر من ٠٠٠١-٠١٠١ عن ربطه لأجل 814011. في تجسيد AT إن مضاد جسم مضاد GDF8 أو protein ارتباط مولد مضاد خاص للاختراع يرتبط مع epitope(s) مع «GDF8 متضمنة تلك الموصوفة هنا (مثلاء epitope(s) تخص 0118 و/أو مكونة أساسيا من ٠ ترتيب amino acid المذكور لاحقا كتعريفات الترتيب أرقام: 4» 1 8» ٠١ و١ أو أجزاء نشطة منها). في أحد تجسيدات op HAY) تتفاعل بينيا مضادات الأجسام المتصورة بصفة خاصة مع موقع ارتباط JALKS 4 متوقع من GDF8 ناضج epitopes «Jia 017178 مع ترتيب amino acid مذكور لاحقا كتعريفات الترتيب أرقام: ct 1 أو 8. سوف يدرك صاحب المهارة العادية في الفن أن مضادات الأجسام للاختراع V0 قد تستخدم الكشف عن؛ قياس؛ وتثبيط proteins 0018 المشتقة من أنوا ع عديدة؛ مثلاء تلك الموصوفة في المواصفة الحالية. يتحدد التعريف بالنسبة المئوية بواسطة حسابات اصطفاف قياسية Basic Local Alignment Tool (BLAST) Mis الموصوف في )215:403-10 «Altschul et al. ((1990) J.
Mol Biol. أو حساب )48:444-53 lus of Needleman et al. ((1970) J.
Mol.
Biol. Meyers et al. ((1988) Comput.
Appl.
Biosci. 4:11-17) ٠ بصفة (dale يمكن استخدام أجزاء مضادات الأجسام أو protein ارتباط مولد مضاد من الاختراع مع أي protein يحتفظ بالنشاط الحيوي الجوهري من 06118 ويشمل ترتيب amino acid مماثل على الأقل بنسبة تقريبا (Ae 860 Ve 7495 أو أكثر مع أي ترتيب 00 بف (Te نكف amino ٠١ of ٠١ diana acids على الأقل لشكل ناضج من 00178 المذكور لاحقا كتعريف الترتيب رقم: .١ Yo تكون مضادات الأجسام السليمة؛ المعروفة أيضا بأنها globulins مناعية؛ عبارة عن tetrameric glycosylated proteins نموذجيا مكونة من سلسلتين خفيفتين (1) لكل منهما Yo كيلودالتون تقريباء وسلسلتين ثقيلتين (H) لكل منهما ٠٠ كيلودالتون تقريبا. هناك نوعان سلسلة 5م17 amino acid في مضادات الأجسام . بالاعتماد على ترتيب kappa y lambda يسميان (Adis
D (A المناعية إلى © فئات رئيسية: globulins تصنف Aldi لمجال سيطرة ثابت السلاسل 1:01 Nie وقد يقسم العديد منها إضافيا إلى فئات فرعية (أنواع مماثلة)؛ My © <E (V) تتكون كل سلسلة خفيفة من مجال سيطرة متغير IgA2 5 IgA1 1804 1603 IgG2
V تتكون كل سلسلة ثقيلة من مجال سيطرةٍ .)©1( (C) طرفي-17 ومجال سيطرة ثابت (VI) ©
CH ومنطقة مفصلة. إن مجال سيطرة «(CHs) © أو ؛ مجالات سيطرة ¥ ((VH) طرفي-11 من ؛ مناطق من ترتيبات VL VH سيطرة Mae يسمى 0111. يتكون VH الأكثر قربا إلى التي تشكل الدعامة لثلاثة ((FR4 «FR3 12؛ «FR1) محمية نسبيا تسمى مناطق الإطار على CDRs تحتوي (CDRs مناطق من ترتيبات متغيرة بدرجة مفرطة (مناطق تحديد تكملة؛ ارتباط protein sl معظم المتخلفات المسئولة عن التفاعلات البينية الخاصة لمضاد الجسم ٠ طبقا لذلك؛ .CDR3 5 «<CDR2 بأنها 00181؛ CDRs مولد مضاد مع مولد المضاد. يشار إلى و113؛ بينما يشار إلى مكونات (H2 HI على السلسلة الثقيلة بأنها CDR يشار إلى مكونات أكبر مصدر للتنوع الجزيئي CDR3 على السلسلة الخفيفة بأنها 1 12 و13. تعتبر CDR
Nie (H3 مضاد. يمكن أن تكون Alga ارتباط protein موقع ارتباط مضاد الجسم أو Jah تعرف جيدا في الفن أبنية amino acid 7١ أو أكثر من amino acid قصيرة مثلا كمتخلفي ٠ مناعية. لنظرة عامة على globulins الوحدة الفرعية وهيئات ثلاثية الأبعاد من فئات مختلفة من بناء مضاد الجسم؛ انظر
Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, Eds. Harlow et al., 1988. «CDR VL «CL «VH «CH Mia سوف يدرك الماهر في الفن أن كل بناء وحدة فرعية؛ ٠ يشتمل على أجزاء نشطة. على سبيل المثال؛ قد تتكون الأجزاء النشطة من FR و/أو بناء المضادء أيء الجزء الذي يربط مولد alga تربط CDR أو وحدة فرعية «VL «VH قسم من المضاد؛ أو قسم من وحدة فرعية CH يرتبط مع و/أو ينشط مستقبل و/أو تكملة Fe إن أمثلة غير مقيدة لأجزاء ارتباط داخلة ضمن المصطلح gia” مضاد جسم | protein Yo ارتباط "alias alge مستخدم هنا تتضمن: )١( جزء (Fab جزء أحادي التكافؤ مكون من مجالات سيطرة (Y) (CHI CL ¢VH «VL جزء F(ab’)2 جزء ثنائي التكافؤ يشمل جزأي Fab متصل بواسطة جسر disulfide عند منطقة المفصلة؛ )1( جزء Fd مكون من مجالي م7 oY لطرف مفرد من مضاد VH 3 VL مكون من مجالي سيطرة Fv و0111؛ )£( جزء VH سيطرة معزولة. علاوة على هذاء CDR (1) 5 مكون من مجال سيطرة 1711؛ «dAD جسم؛ )©( جزءٍ بجينات منفصلة؛ فإنها قد تتصل «VH 5 VL Fv على الرغم من تشفير مجالي سيطرة الجزء و1711 VL مفرد يكون فيها زوج مجالات سيطرة protein تخليقيا بوصلة تخليقية؛ لتخليق سلسلة إن الوصلة الأكثر (scFv) مفردة Fy لتشكيل جزيئات أحادية التكافؤ (المعروفة كسلسلة eo لكن تكون الوصلات الأخرى ؛1٠١-فلختم (GlydSer)3 peptide استخداما وشيوعا هي معروفة أيضا في الفن. يقصد بمضادات أجسام سلسلة مفردة بدخولها أيضا ضمن ارتباط مولد مضاد"؛ أو "جزء يربط مولد مضاد protein المصطلحين "مضاد جسم أو من مضاد الجسم. “(antigen-binding fragment) ٠١ يتم الحصول على مضادات الأجسام هذه باستخدام تقنيات تقليدية معروفة للمهرة في الفن؛ وتفحص الأجزاء لاستعمالها بنفس الطريقة كمضادات أجسام سليمة. ينتج تنوع في مضاد الجسم بواسطة جينات خط جرثومة عديدة تشفر مجالات سيطرة متغيرة وتشكيلة من حوادث جسدية. إن الحوادث الجسدية تتضمن تخليق ahd جين متغير به قطع جين للتنوع (D) والاتصال ([) لصنع مجال سيطرة VH كامل؛ وتخليق جينات متغيرة واتصالية لصنع مجال amino كامل. تكون عملية التخليق ذاتها غير دقيقة؛ مما يؤدي إلى فقد أو إضافة VL سيطرة ٠ الوصلات [(700. تحدث هذه الآليات الخاصة بالتنوع في خلية 3 نامية قبل aie acids التعرض لمولد المضاد. بعد التحفيز المولد للمضاد؛ تخضع جينات مضاد الجسم الظاهر في خلايا 5 إلى عملية طفرية جسدية. بالاعتماد على العدد المقدر من قطع جين خط جرثومة؛ عشوائية؛ لما يصل إلى VH-VL يمكن تحقيق التخليق العشوائي لهذه القطع؛ ومزاوجة ٠١771.10 ٠ مضاد جسم مختلفا (Fundamental Immunology, 3rd ed. (1993), ed. Paul, Raven Press, New York, NY). عند الأخذ في الاعتبار عمليات أخرى تشارك في تنوع مضاد الجسم (مثلا عملية طفرية أو أكثر من مضادات أجسام مختلفة ٠١٠١7١ جسدية)؛ فمن المعتقد تولد (Immunoglobulin Genes, 2nd ed. (1995), eds. Jonio et al., Academic Press, San
Diego, CA). Yo oy بسبب تدخل العديد من العمليات في إنتاج تنوع لمضاد الجسم؛ فمن غير المحتمل أن مضادات الأجسام أحادية النسخ المشتقة بصورة مستقلة لها نفس خصوصية مولد مضاد سوف يكون لها متماثلة. amino acid ترتيبات (GDF8 مضادات أجسام جديدة تتفاعل بينيا بصفة خاصة مع Mall لذلك؛ يوفر الاختراع protein أي؛ مضادات أجسام 0178 خاصة. سوف تكون عموما قطع مضاد الجسم أو 0 عبارة عن تريب سلسلة ثقيلة «CDR أبنية محتوية على lia مضاد من الاختراع؛ alse ارتباط CDR مضاد؛ أو جزء نشط منه؛ حيث توضع alse ارتباط protein أو خفيفة لمضاد جسم أو طبيعية الوجود. قد تتحدد أبنية وأماكن مجالات VL 5 VH من CDR عند مكان مقابل إلى باستخدام أنظمة ترقيم معروفة جيدا؛ مثل؛ نظام ترقيم «CDRs Mie (gels globulin سيطرة «Mia إلخ انظر؛ «(AbM) Chothia y Kabat اتحاد «Chothia نظام ترقيم Kabat ٠
Sequences of Proteins of Immunological Interest, U.S. Department of Health and
Human Services (1991), eds. Kabat et al.; Al-Lazikani et al. (1997) J. Mol. Bio. 273:927-948. جديدة. سوف يكون عموما البناء CDRs لذلك؛ يوفر الاختراع الحالي إضافيا مثل؛ ترتيب سلسلة ثقيلة أو polypeptide للاختراع عبارة عن CDR الذي يحمل 0 ارتباط مولد مضاد أو قسم جوهري منه؛ يكون فيه protein خفيفة لمضاد جسم أو طبيعية الوجود. قد VL 5 VH من مجالات سيطرة CDR عند موضع مقابل إلى CDR موضع مناعي كما هو موصوف في؛ مثلا globulin تتحدد أبنية وأماكن مجالات سيطرة متغيرة
Kabat et al., supra and Al-Lazikani et al., supra بصفة Liy ارتباط مولد مضاد 3506 على التفاعل protein قد تنتج جزيئات مضاد جسم أو Ye للاختراع الحالي بطرق معروفة جيدا لهؤلاء المهرة في الفن. على polypeptides خاصة مع سبيل المثال؛ يمكن إنتاج مضادات أجسام أحادية النسخ بتوليد أورام هجيئة طبقا للطرق sala الأورام الهجينة بهذه الطريقة باستخدام طرق قياسية؛ مثل اختبار Baie المعروفة. تفحص لتحديد واحد أو أكثر من (Biacore وتحليل (ELISA) enzyme ماصة مناعية متصلة مع يربط Nic) GDF8 الأورام الهجينة التي تنتج مضاد جسم يتفاعل بينيا بصفة خاصة مع Yo يثبط» يقلل؛ و/أو يعادل) نشاط 0018 واحد على الأقل (مثل؛ Sia) و/أو يعارض )8 ارتباط 061088 مع مستقبله أو أحداث إرسال إشارة 06018 لاحقة).
YAER of
قد يستخدم GDF8 مخلق؛ 06018 طبيعي الوجود»؛ وأجزاء peptide مولدة لمضاد من : 8 كمولد مناعي. يشمل جزء alge peptide لمضاد على 1 amino acids مستمرة على JY ويشمل epitope بحيث إن مضاد جسم alias له يشكل معقد مناعة pala مع 00178. بطريقة مفضلة؛ يشتمل peptide مولد لمضاد على 4 متخلفات amino acids على الأقل. © بالإضافة لما سبق؛ يفضل أن يشتمل جزء peptide مولد لمضاد من GDF8 على epitope يخص peptide ic) GDF8 له و/أو مكون أساسيا من ترتيب amino acid مذكور لاحقا
كتعريفات الترتيب أرقام: OY ٠١ »8 Ct أو نقل أجزاء نشطة). في أحد تجسيدات الاختراع؛ قد تستخدم polypeptide 06118 كامل الطول كمولد مناعي؛ أو ¢ بصورة بديلة؛ قد تستخدم أجزاء 6 مولدة لمضاد من polypeptide على سبيل ٠ المثال ؛ قد يكون المولد المناعي عبارة عن epitope خاص GDF8 (مثلاء epitope يخص «GDF8 و/أو 6 به مضادات أجسام مضادة GDF8 خاصة و/أو peptides محاكية موجهة له هي مضادات خاصة لإرسال إشارة 601:8 Oia) واحد أو أكثر من ترتيبات amino acid لتعريفات الترتيب أرقام: VY (Ve A Vet وأجزاء نشطة (Lee و/أو peptide ذي صلة أو peptide تم تدويره. يشتمل peptide مولد لمضاد من polypeptide للاختراع الحالي ١ على ؛ متخلفات amino acid مستمرة على الأقل ويشمل epitope بحيث إن مضاد جسم مضاد peptide يشكل معقد مناعة خاص مع ع00170©000. بصورة مفضلة؛ يشتمل peptide alge لمضاد مع ؛ متخلفات amino acid على «JY يفضل أكثر 6 متخلفات amino acid
على الأقل؛ ويفضل أكثر أيضا 4 متخلفات amino acid على الأقل. كطريقة بديلة لتحضير abs! هجينة تفرز مضاد جسم أحادي النسخ؛ قد يتحدد مضاد جسم ٠ أحادي النسخ تجاه polypeptide للاختراع الحالي كما يعزل بفحص مكتبة globulin مناعي اتحادي مخلق lie) مكتبة عرض خلية بلعمة لمضاد جسم) مع polypeptide الاختراع الحالي لتنفصل بذلك أعضاء مكتبة globulin مناعي مرتبطة مع polypeptide يعرف جيدا الماهرون في الفن التقنيات والمجموعات المتاحة تجاريا لتوليد وفحص مكتبات عرض خلية بلعمة. علاوة على ذلك؛ هناك في الأدبيات أمثلة لطرق وعوامل كاشفة قادرة بصفة خاصة
Yo للاستخدام في توليد وفحص مكتبات عرض مضاد جسم أو protein ارتباط مولد مضاد. قد تنتج مضادات أجسام وأمصال عديدة النسخ بتحصين كائن مناسب مع (GDF8 أشكاله المتباينة؛ و/أو 0 منه؛ «ia مع epitope 610178 خاص من الاختراع الحالي. قد ily انغلا
00 عيار مضاد الجسم في الكائن المحصن خلال فترة زمنية عن طريق تقنيات قياسية؛ مثلا مع «ELISA أو باستخدام 0118 محصن أو protein علامة أخرى (مثل؛ (FLAG عند الرغبة؛ قد تعزل جزيئات مضاد الجسم المضادة polypeptide الاختراع الحالي من الكائن أو أوساط المزرعة وتنقى إضافيا بتقنيات معروفة جيداء مثل تحليل كروماتوجرافي cprotein A للحصول © على جزء IgG بصورة إضافية؛ إن مضادات أجسام مختلطة؛ مكتسبة السمة الآدمية؛ ووحيدة السلسلة مضادة polypeptides الاختراع الحالي؛ مشتملة على أقسام آدمية وغير آدمية؛ قد يتم إنتاجها باستخدام تقنيات DNA مخلق قياسية. قد تنتج أيضا مضادات أجسام مكتسبة السمة الآدمية باستخدام فئران طفرية غير قادرة على إظهار جينات سلسلة تقيلة وخفيفة globulin مناعي ٠ داخلي Land) لكن يمكنها إظهار جينات سلسلة ALE وخفيفة آدمية. إن جزيئات مضاد الجسم أو protein ارتباط مولد مضاد (التي تتضمن (hal من الاختراع الحالي lia) جزيئات مضاد الجسم أو protein ارتباط مولد مضاد التي تتفاعل بينيا بصفة خاصة مع 60178) تتضمن؛ بدون تحديد؛ مضاد جسم RK22 أحادي النسخ؛ أشكاله المتباينة (مثلا أشكال متباينة مكتسبة السمة الآدمية) وأجزاء من ذلك. إن جزيئات مضاد الجسم أو protein ٠ ارتباط مولد مضاد للاختراع التي تتفاعل بينيا بصفة خاصة مع 0118 خاصة؛ وبذلك؛ قد تكون هذه الجزيئات من مضاد الجسم أو protein ارتباط مولد مضاد مفيدة في منع أو معالجة اضطراب مصاحبة Nis (GDF8 أمراض متعلقة بأيض الجلوكوز؛ غير دهنية؛ عضلية وعظمية. olla) يوفر أيضا الاختراع polynucleotides منتقاة ومعزولة تشفر مناطق مضادات ٠ أجسام 00178 الخاصة التي قد تعارض نشاط 00178 واحد على الأقل مثلاء 81622 وأشكاله المتباينة. تتضمن ترتيبات DNA منفصلة ترتيبات جينومية؛ DNA 5 «cDNA مخلق كيميائيا . كما هو موصوف أعلاه؛ تشتمل polynucleotides تشفر مناطق مضاد الجسم أى protein ارتباط مولد alias للاختراع على DNA أو RNA وتكون مخلقة كليا أو جزئيا. إن الإشارة إلى ترتيب nucleotide المذكور هنا تشمل جزيئات DNA بالترتيبات الخاصة أو مكافئاتها ٠ الجينومية (مثلا؛ ترتيبات تكميلية)؛ بالإضافة إلى ترتيبات RNA بالترتيب الخاص حيث يستبدل T مع LU لم يحدد السياق خلاف ذلك.
إن ترتيبات nucleotide من الاختراع تتضمن تلك الترتيبات التي تشفر مجال سيطرة متغير سلسلة خفيفة من RK22 فأري «Ha ٠ ترتيب nucleotide المذكور لاحقا كتعريف الترتيب رقم: VO تتضمن أيضا ترتيبات nucleotide للاختراع تلك الترتيبات التي تشفر مجال سيطرة متغير سلسلة ALS من 81622 فأري؛ «Sie ترتيب nucleotide المذكور لاحقا كتعريف الترتيب رقم: ١ © . تتضمن أيضا polynucleotides الاختراع الحالي polynucleotides تتهجن تحت شروط صارمة إلى polynucleotides لها و/أو مكونة أساسيا من ترتيب (ترتيبات) nucleic acid مذكورة لاحقا جوهريا كتعريفات الترتيب أرقام: ١١ و5١ وتكملاتهاء و/أو التي تشفر 5 التي تحتفظ بنشاط حيوي جوهري (أي ¢ أجزاء نشطة) من مجالات سيطرة متغيرة من .RK22 تتضمن أيضا haa) polynucleotides الحالي أقسام مستمرة من الترتيب ٠ المذكور لاحقا كتعريفات الترتيب أرقام: VF و5٠؛ مشتملة على nucleotides ١١ متعاقبة على الأقل. يذكر لاحقا ترتيب amino acid لمجالات سيطرة متغيرة سلسلة خفيفة من RK22 فأري كتعريف الترتيب رقم: 16. تذكر لاحقا ترتيبات amino acid لمجالات سيطرة متغيرة سلسلة ثقيلة من RK22 فأري كتعريف الترتيب رقم: .٠4 يذكر لاحقا ترتيب amino acid من مجالات ١ سيطرة سلسلة ثقيلة وخفيفة متغيرة مكتسبة السمة الآدمية كتعريفات الترتيب أرقام: OAS 1١ على الترتيب. تذكر لاحقا ترتيبات amino acid من CDRs الموجودة ضمن السلاسل الثقيلة من 81222 فأري كتعريفات الترتيب أرقام: 11-14 و77-78. تذكر لاحقا ترتيبات amino acid من CDRS الموجودة ضمن السلاسل الخفيفة من RK22 فاري كتعريفات الترتيب أرقام: 1-77 1 و8 .7١-” تتضمن أيضا polypeptides الاختراع الحالي أقسام مستمرة من أي من ٠ ترتيبات مذكورة لاحقا جوهريا كتعريفات الترتيب أرقام: Foo OA OY 15 ٠6 مشتملة على © amino acids متعاقبة على الأقل . يتضمن polypeptide مفضل للاختراع الحالي أجزاء نشطة كتعريفات الترتيب أرقام: 0164 FeV AA AY AT أي؛ أيّ قسم مستمد من أي ترتيب مذكور لاحقا كتعريفات الترتيب أرقام: STV A AY OTE تحتفظ بالنشاط الحيوي الجوهري لمضاد الجسم أو protein ارتباط مولد مضاد من الاختراع. Yo بالإضافة لتلك polynucleotides الموصوفة أعلاه؛ يتضمن أيضا الاختراع الحالي 565 ام تشفر ترتيب amino acid مذكور لاحقا جوهريا كتعريفات الترتيب أرقام : Fema 5 VA OY 16 NE أو قسم مستمر من ذلك؛ وتختلف عن polynucleotides
YAER
لات لمضاد الجسم أو protein ارتباط مولد مضاد الموصوفة أعلاه فقط بسبب تحلل الشفرةٍ الوراثية المعروف جيدا.
كما هو موصوف أعلاه؛ تحتوي CDRs على معظم المتخلفات المسئولة عن التفاعلات البينية الخاصة مع alse المضاد؛ والموجودة ضمن مجالات السيطرة (VL 5 VH أي؛ مجال © سيطرة متغير سلسلة ثقيلة ومجال سيطرة متغير سلسلة خفيفة؛ على الترتيب. بالتالي؛ يتوافر مضاد جسم مشتمل على CDR واحدة على الأقل من مضاد جسم أو protein ارتباط مولد مضاد الاختراع» CDR Sie مشتملة على ترتيب amino acid منتقى من ترتيبات amino 40 المذكورة لاحقا كتعريفات الترتيب أرقام: 0-١9 32؛ أو أجزاء مضاد جسم أو Jali) protein مولد مضاد نشطة من ذلك؛ والتي تعد مضاد الجسم من الاختراع؛ أي؛ مضاد ٠ يتفاعل بينيا بصفة خاصة مع 60178 (مثلاء يرتبط مع (GDF8 و/أو يعارض بصفة خاصة نشاط 0118. «lA يتضمن تجسيد الاختراع مضادات أجسام محتوية على واحدة أو أكثر من CDRs تشمل ترتيب amino acid منتقى من ترتيب amino acid مذكور لاحقا كتعريفات aii ill أرقام 0-٠: أو ترتيب amino acid من الأجزاء النشطة منه. بعد ذلك سوف يدرك الماهر في الفن أن مضادات الأجسام للاختراع تتضمن مضاد جسم أو protein ارتباط alge V0 مضاد تكون فيه CDRs من سلسلة VL هي واحدة أو أكثر من CDRs لسلاسل مذكورة لاحقا كتعريفات الترتيب أرقام: 74-77 «Fo =YA5 و/أو تكون CDRs من سلسلة VH هي واحدة أو أكثر من CDRs لسلاسل مذكورة لاحقا كتعريفات الترتيب أرقام: 71-146 5 V=Y0 قد يكون جزء يربط alge مضاد عبارة عن FV eda متكون من مجالات سيطرة VL VH lll] جزء Fv من RK22 قد يشكل مضاد جسم الاختراع؛ بشرط أن يتفاعل بينيا الجزء بصفة ٠ خاصة مع .GDF8 سوف يدرك الماهر في الفن أن أي ha لمضاد جسم أو protein ارتباط مولد مضاد محتوي على جزءٍ Fv من 81222 قد يكون أيضا عبارة عن مضاد جسم الاختراع. بالإضافة كما سبق أن أي جزء Fv جزء «scFv جزء Fab أو جزء F@b’)2 محتوي على واحدة أو أكثر من CDRs لها ترتيب amino acid منتقى من المجموعة المتكونة من ترتيبات amino acid المذكورة لاحقا كتعريفات الترتيب أرقام: "0-١9 قد يكون أيضا مضاد جسم أو
protein Yo ارتباط alge مضاد الاختراع. تشتمل تجسيدات خاصة للاختراع على مجال سيطرة VH و/أو VL من جزء FV من 2. إن أجزاء مضادات الأجسام من الاختراع الحالي؛ مثلا؛ أجزاء (Fd «F(ab’)2 «Fab
اد oA طبقا لطرق معروفة جيدا في الفن. RK22 ie وطاهل؛ قد تنتج بانشقاق مضادات الأجسام و7)802 بمعالجة مضادات الأجسام مع Fab على سبيل المثال؛ قد تنتج أجزاء نشطة مناعيا وصزومعم على الترثيب. papain Mis cenzyme
CDRs واحدة أو أكثر من Nic) CDRs تشتمل تجسيدات إضافية على واحدة أو أكثر من من أي مجالات سيطرة 1711 من (YY=Y0 5 71-19 المذكورة لاحقا كتعريفات الترتيب أرقام: ٠ (المذكورة لاحقا كتعريفات RK22 من VH مجالات سيطرة Oli) مضاد الجسم المعلن هنا من مضاد الجسم المعلن هنا (مثلاء مجالات VL ومجالات سيطرة )١١7و VE الترتيب أرقام: يشتمل أحد .)١8و ١١6 (المذكورة لاحقا كتعريفات الترتيب أرقام: RK22 من VL سيطرة (المذكورة لاحقا كتعريف الترتيب RK22 من VH التجسيدات على جزء 113 من مجال سيطرة .)١١ رقم: ٠
VH ضمن مجالات سيطرةٍ CDR في جدول ¥ المواضع القريبة لكل mati للملاءمة؛ VL جدول ؟ (حروف مائلة) ABM (بحروف غير مائلة) أو Kabat لتعريفات Lia القريبة CDR موضع فأري RK22 ضمن مجالات سيطرة متغيرة من مضادات أجسام مكتسبة السمة الآدمية Vo
Wb ern | pester قد تشتمل إضافيا مضادات أجسام معلنة حاليا على مجالات سيطرة ثابتة مضاد جسم أو
VL قد يرتبط مجال سيطرة (JU ارتباط مولد مضاد أو أجزاء منها. على سبيل protein protein sl مع مجال سيطرة ثابت سلسلة خفيفة لمضاد جسم C30 hall للاختراع عند نهايته بصورة مماثلة؛ قد «CA أو »0 آدمية؛ يفضل سلسلة CA ارتباط مولد مضاد؛ مثلاء سلسلة
يرتبط جزء يربط alge مضاد خاص معتمد على مجال سيطرة VH عند نهايته الطرفية-© مع كل أو جزء من سلسلة ثقيلة globulin مناعي مشتقة من أي نوع مماثل لمضاد الجسم؛ Sia IgM 5 (IGE «IgA «IgG وأي من الفئات الفرعية للنوع المماتل. بصفة خاصة 1801 و1804. في تجسيدات تمثيلية؛ تشتمل مضادات الأجسام على أجزاء طرفية-© لسلاسل ALE وخفيفة من ٠ 18011 آدمي. من المفهوم cdl بسبب تحلل الشفرة الوراثية؛ تعتبر ترتيبات DNA المندرجة في الوصف المختصر للترتيبات ١ تمثيلية فقط لأجل nucleic acids تشفر ترتيبات camino acid
56م ومضادات أجسام ذات أهمية؛ كما لا تعتبر أمثلة مقيدة. تشتمل تجسيدات خاصة للاختراع على مجال سيطرة VH و/أو VL من جزء Fv من 2. تشتمل تجسيدات إضافية على واحدة أو أكثر من مناطق تحديد تكملة (CDRs) من ٠ أي من مجالات سيطرة VL VH هذه. يشتمل أحد التجسيدات على جزءٍ 113 من مجال سيطرة 1711 من RK22 تصبح مجالات سيطرة VH وآ من الاختراع؛ في تجسيدات خاصة؛ عبارة عن خط جرثومة؛ أي؛ تتغير مناطق الإطار (FRs) لمجالات السيطرة هذه باستخدام تقنيات العلم الحيوي للجزيئات تقليدية لتطابق ترتيبات amino acid المتوافقة من منحنيات جين خط جرثومة آدمي. يعرف هذا أيضا بمضاد جسم خط جرثومة أو مكتسب ١ السمة الآدمية. في تجسيدات gal تظل ترتيبات الإطار متشعبة من خط الجرثومة. قد تنتج مضادات الأجسام مكتسبة السمة الآدمية باستخدام فئران طفرية قادرة على إظهار جينات سلسلة ثقيلة وخفيفة globulin مناعي داخلي المنشاًء لكنها قادرة على إظهار جينات سلسلة
تقيلة وخفيفة آدمية. يوفر جانب آخر للاختراع طرق للحصول على مجال سيطرةٍ يربط مولد مضاد لمضاد Ye جسم يخص .GDF8 سوف يدرك الفني الماهر أن مضادات الأجسام من الاختراع غير مقيدة للترتيبات الخاصة من مجالات سيطرة VL 5 VH كما هو موضح في جدول ؟؛ لكنها تتضمن أيضا أشكال متباينة من هذه الترتيبات التي تحتفظ 5508 ربط alge المضاد. قد تشتق الأشكال المتباينة هذه من الترتيبات المتوافرة باستخدام تقنيات معروفة في الفن. قد تجرى استبدالات camino acid محذوفات؛ أو إضافات سواء في FRs أو .CDRs بينما تجهز مناطق الإطار Yo عادة لتحسين الثبات وتقليل التولد المناعي لمضاد الجسم؛ تجرى تغيرات في CDRs عادة لزيادة انجذاب مضاد الجسم نحو هدفه. تتحدد نموذجيا وتجريبيا تلك التغييرات التي تزيد YA£R
Te واختبار مضاد الجسم. قد تجرى تلك التعديلات طبقا لطرق موصوفة CDR الانجذاب بتعديل
Ma في؛ Antibody Engineering, 2nd ed., ed. Borrebaeck, Oxford University Press, 1995. مضاد (أو أجزاء منها) من alse ارتباط protein of تتضمن أيضا مضادات الجسم cli] الاختراع تلك المضادات التي تتفاعل بينيا بصفة خاصة مع 0018؛ ولها طفرات في مجالات © وخفيفة. من المرغوب في بعض الأحيان أن تجرى عملية طفرية ALE سيطرة ثابتة من سلاسل لأجزاء معينة من مجال السيطرة الثابت ويتم تنشيطها. على سبيل المثال؛ إن الطفرات في مجال السيطرة الثقيل مرغوبة في بعض الأحيان لإنتاج مضادات أجسام لها ارتباط منخفض و/أو تكملته؛ تعرف جيدا في الفن هذه الطفرات. سوف يدرك الماهر (FER) Fo مع مستقبل و11© ضرورية CL في الفن أيضا أن تحديد أي من الأجزاء النشطة من الوحدات الفرعية ٠ سوف JU يجرى على أساس تطبيقها على مضاد جسم الاختراع المستخدم. على سبيل و011 الداخلة في وصلتها تساهمية التكافؤ مع CL تكون الأجزاء النشطة في الوحدات الفرعية بعضها البعض مهمة في توليد مضاد جسم سليم. من مجال سيطرة amino acid وهو شكل متباين لترتيب VH مجال سيطرة gina إن طريقة المذكور هنا تشتمل على خطوة إضافة؛ حذف؛ استبدال أو إقحام واحد أو أكثر من 1711 ١٠ المعلنة حالياء اتحاد اختياريا VH من مجال سيطرةٍ amino acid في ترتيب amino acids واختبار مجال سيطرة (VL وبذلك تزود بواحد أو أكثر من مجالات سيطرة VH لمجال سيطرةٍ و(يفضل) اختبار قدرة «GDF8 أو اتحاد أو اتحادات ,711/71 للتفاعل البيني النوعي مع VL مجال السيطرةٍ الذي يربط مولد المضاد هذا لتضبط واحدة أو أكثر من أنشطة مصاحبة مذكور هنا جوهريا. قد تستخدم طريقة amino acid ترتيب VL قد يكون لمجال سيطرة .00178 | ٠٠ المعلنة هنا VL مماثلة يتحد فيها واحد أو أكثر من الأشكال المتباينة للترتيب من مجال سيطرة
VH مع واحد أو أكثر من مجالات سيطرة جانب آخر من الاختراع طريقة لتحضير جزء يربط مولد مضاد يتفاعل بينيا بصفة ig تشفر مجال nucleic acids تشتمل الطريقة: توفير مخزون بادئ من .GDF8 خاصة مع
VH مثلاء 0013؛ المراد استبدالها أو مجال سيطرة «CDR التي تتضمن سواء VH سيطرة Yo مانح nucleic acid التي تشفر المنطقة؛ اتحاد المخزون مع «CDR3 «Mis «CDR تتقصها مشتملة على جزء CDR مانح يشفر nucleic acid مانحة من الاختراع (مثلاً؛ CDR يشفر
١
نشط من تعريف الترتيب رقم: YA AY AT ٠4 بحيث يقحم nucleic acid المانح في «CDR3 «Mie «CDR منطقة في المخزون لتوفير مخزون منتج من nucleic acids تشفر مجال سيطرة 711؛ إظهار nucleic acids من مخزون منتج؛ انتقاء جزء يربط مولد مضاد خاص لأجل 38 واسترجاع جزءٍ يربط alge مضاد خاص أو nucleic acid يشفره. مرة ٠ أخرى؛ قد تستخدم طريقة مماثلة تتحد فيها «VL CDR (مثلاء (L3 من الاختراع مع مخزون من nucleic acids تشفر مجال سيطرة VL التي تتضمن سواء CDR المراد استيدالها أو
تتقصها CDR تشفر المنطقة. قد يتم إدخال ترتيب شفري من CDR من الاختراع (مثلاء (CDR3 على مخزون مجالات سيطرة متغيرة تنقصها ((CDR3 Mia) CDR باستخدام تقنية DNA مخلق. على سبيل المثال؛
٠ يصف Marks وآخرين (10:779-83 Bio/Technology (1992)) طرق لإنتاج مخزونات لمجالات سيطرة متغيرة لمضاد جسم أو protein ارتباط مولد مضاد تستخدم primers Led التوافق موجهة إلى أو بالقرب من النهاية 0 من مساحة مجال السيطرة المتغير في اتحاد مع التوافق مع منطقة الإطار الثالثة من جينات VH آدمي لتوفير مخزون من مجالات سيطرة متغيرة VH تنقصها .CDR3 قد يتحد المخزون مع CDR3 من مضاد جسم معين.
Ve باستخدام تقنيات مماثلة؛ قد تخلط الترتيبات المشتقة من CDR3 للاختراع الحالي مع مخزونات من مجالات سيطرة VH أو VL تتقصها 00173؛ وتتحد مجالات سيطرة VH أو VL كاملة مخلطة مع مجال سيطرة VL أو VH قريب لتوفير أجزاء تربط alge مضاد خاصة من الاختراع. قد يتم بعدئذ عرض المخزون في نظام عائل مناسب؛ Jie نظام عرض خلية بلعمة من 92/01047 WO بحيث يمكن انتقاء أجزاء مناسبة تربط alge المضاد.
Stemmer تعلن أيضا تقنيات اتحادية أو خاصة بالخلط المتمافل في ٠ لكنه B-lactamase (1994))؛ والذي يصف تقنية فيما يتعلق بجين Nature 370:389-91) يلاحظ أن الطريقة قد تستخدم لتوليد مضادات الأجسام. تكمن هذه الطريقة البديلة الإضافية في للاختراع باستخدام CDR جديدة تحمل ترتيب مشتق من VL أو VH توليد مجالات سيطرة منتقاة لتوليد طفرات ضمن VL و/أو VH التوليد الطفري العشوائي لواحد أو أكثر من جينات
))1992( Proc.
Natl. وآخرين Gram مجال السيطرة المتغير الكامل. توصف تلك التقنية في Yo عرضة للخطاً. PCR باستخدام Acad Sci.
U.S.A. 89:3576-80) قد تستخدم لتوليد مضادات أجسام جديدة أو أجزاء منها في توجيه gyal تكمن طريقة
+4
Barbas تعلن هذه التقنيات في LVL أو VH من جينات CDRs التوليد الطفري إلى وآخرين Schier s (1994) Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 91:3809-1 3) وآخرين .)1996( J. Mol. Biol. 263:551-67) بصورة مماثلة؛ قد ترقع واحدة؛ اثنتين؛ أو كل CDRs الثلاثة في مخزون من مجالات ٠ سيطرة 711 أو VL التي تم فحصها بعدئذ لأجل شريك الارتباط النوعي أو أجزاء الارتباط التي تخص .GDF8 سوف يشتمل قسم جوهري من مجال سيطرة متغير globulin مناعي على CDRs على الأقل 5« اختيارياء مناطق الإطار المتدخلة الخاصة بها من أجزاء مضاد الجسم المذكورة Lin سوف يتضمن أيضا القسم حوالي ٠ 725 على الأقل سواء من FRI أو FRA أو كليهما؛ حيث تكون نسبة 75٠ هي ٠ 75 طرفية-© من FRI و7590 طرفية-11 من .FR4 قد ٠ تكون المتخلفات الإضافية عند النهاية الطرفية-© أو الطرفية-17 من shall الجوهري لمجال السيطرة المتغير هي تلك المتخلفات غير المصاحبة بصورة طبيعية لمجالات سيطرة متغيرة طبيعية الوجود. على سبيل المثال؛ إن تشييد أجزاء مضاد الجسم أو protein ارتباط مولد مضاد الخاصة للاختراع الحالي المصنعة بواسطة تقنيات DNA مخلق قد يؤدي إلى إدخال متخلفات طرفية-11 أو طرفية-0 المشفرة بواسطة وصلات داخلة لتسهيل خطوات النسخ أو ٠ التطبيق الأخرى. تتضمن خطوات التطبيق الأخرى إدخال وصلات لتوصيل مجالات سيطرة متغيرة من الاختراع مع ترتيبات protein إضافية متضمنة سلاسل ثقيلة globulin مناعي؛ مجالات سيطرة متغيرة أخرى (على سبيل المثال؛ في إنتاج أجسام ثنائية) أو علامات protein كما هو مناقش بمزيد من التفصيل أدناه. على الرغم من أن التجسيدات الموضحة في الأمثلة تشتمل على زوج 'تطابق "(matching) ٠ من مجالات سيطرة VH أو VL يشتمل أيضا الاختراع على أجزاء ارتباط محتوية على مجال سيطرة متغير واحد؛ مثلاء جزءٍ «dADb مشتق من ترتيبات مجال سيطرةٍ سواء VH أو VL بصفة خاصة مجالات سيطرةٍ 1711. في حالة أي من مجالات سيطرة ربط نوعي سلسلة وحيدة؛ قد تستخدم مجالات السيطرة هذه لتفحص مجالات السيطرة التكميلية القادرة على تشكيل مجال سيطرة يربط مولد مضاد خاص مزدوج مجال السيطرةٍ قادر على ربط .GDF8 قد يتحقق ذلك YO بطرق فحص عرض خلية بلعمة باستخدام ما يسمى بطريقة اتحادية ثنائية متدرجة كالمعلنة في؛ WO 92/01047 Nia في هذه gill تستخدم مستعمرةٍ واحدة محتوية على نسخة سلسلة سواء Lol H لتلويث مكتسبة كاملة من النسخ المشفرة لسلسلة أخرى (1 أو (H وينتقى مجال
YAS iy مضاد خاص مزدوج مجال السيطرة طبقا لتقنيات عرض خلية بلعمة؛ alga سيطرة ناتج يربط وآخرين» أعلاه. Marks في Lad الموصوف في ذلك المرجع. يعلن عن هذه التقنية Jie إشعاعية؛ عقاقير؛ جزيئات nuclides قد تقترن مضادات الأجسام بطرق كيميائية مع
CDRs التحام مشتملة على واحدة أو أكثر من proteins عيانية؛ أو عوامل أخرىء وقد تصبح من الاختراع. ©
VH-VL ارتباط مولد مضاد على زوج protein التحام لمضاد جسم أو protein يحتوي وحيدة. polypeptide آخر كسلسلة proteins (VH sale) تخلق فيه واحدة من هذه السلاسل تختلف هذه الأنواع من المنتجات عن مضادات الأجسام في أن لها عموما عنصر وظيفي إضافي؛ (مثلا؛ الجزء النشط من جزيء صغير أو سمة بنائية جزيئية رئيسية من جزيء عياني مقترن أو ملتحم). ٠ الموضح أعلاه؛ قد amino acid بالإضافة إلى التغييرات المجارة على ترتيب أو albumin أو متصلة مع «pegylated «glycosylated لأجسام هي ١ تكون مضادات لأجسام المعلنة حاليا ١ على سبيل المثال؛ قد تتصل مضادات .nonproteinaceous polymer «polyethylene glycol «ix ¢non-proteinaceous polymers مع واحد من تشكيلة لأجسام؛ مثلاء ١ قد تعدل كيميائيا مضادات .polyoxyalkylenes أو cpolypropylene glycol ٠ تعرف في الفن polymer لزيادة عمر نصف التدوير الخاص بها بالاقتران التساهمي مع .peptides تمثيلية؛ وطرق اتصالها مع 358 مضاد بأن يكون له alge ارتباط protein قد يعدل مضاد الجسم أو (gral في تجسيدات لأصلي 0 البدائي). كما | glycosylation معدل (أي؛ بالنسبة إلى نمط glycosylation نمط carbohydrate يعني "معدل (166:60)" وجود واحد أو أكثر من أجزاء (Lia هو مستخدم ٠ مضاف إلى مضاد الجسم glycosylation محذوف؛ و/أو وجود واحد أو أكثر من مواقع بطرق Lilla إلى مضادات الأجسام المعلنة glycosylation الأصلي. تتحقق إضافة مواقع حتى يحتوي على ترتيبات التوافق لموقع amino acid معروفة جيدا لتعديل ترتيب على مضادات carbohydrate «ادا057»راع. تكمن وسيلة أخرى لزيادة عدد من أجزاء في مضاد الجسم. amino acid كيميائيا أو إنزيميا مع متخلفات glycosides لأجسام في اقتران ١ Yo أو إنزيميا Lila الموجودة على مضادات الأجسام carbohydrate قد تتجز إزالة أية أجزاء كما هو معروف في الفن. 1م
1¢ قد يلحق جزء بمضادات الأجسام من الاختراع أيضا مع علامة قابلة للكشف أو علامة وظيفية مثل 1311 أو ©991؛ والتي قد تتصل بمضادات الأجسام من الاختراع باستخدام الكيمياء التقليدية المعروفة في الفن. تتضمن العلامات أيضا علامات Jie enzyme Jad peroxidase حار أو phosphatase عدصناع:لله. تتضمن العلامات إضافيا أجزاء كيميائية © مثل biotin والتي يمكن الكشف عنها خلال الارتباط مع gia قابل للكشف عنه قريب خاص؛ مثلا avidin معلم. يشتمل مجال الاختراع الحالي على مضادات أجسام تختلف فيها ترتيبات CDR غير جوهريا عن ترتيبات CDR مضادات الأجسام التي تم Gal Lee هنا. تشتمل ١ لاختلافات غير الجوهرية على التغيرات الصغيرة في camino acid ٠ مثلء استبدالات واحد أو Bl من أي خمسة amino acid ترتيب «00. بصورة نموذجية؛ يستبدل amino acid محل amino acid مناسب له شحنة (ables رهاب ela خواص كيميائية فراغية ye SLA Blea هذه الاستبدالات ضمن مهارات أي من العاملين في الفن. يمكن تحسين مناطق الإطار البنائي (FRs) بصورة أكثر فاعلية من CDRs دون التأثير المعارض على خواص ارتباط أي V0 مضاد جسم. تشتمل التغيرات إلى (FRs دون تحديد؛ على إكساب السمة الآدمية إطار غير آدمي المنشاً أو التعديل الهندسي لمتخلفات إطار معين والتي تعد مهمة لتوصيل المولد المضاد أو لتثبيت موضع الارتباط؛ مثلاء تغير الصنف أو الصنف الفرعي لمجال سيطرة ثابت؛ تغيير متخلفات acid #قاصتة محدد والذي قد يؤدي إلى تعديل وظيفة الاستجابة مثل ارتباط مستقبل Fo (مثلاء Lund et al. J. Immunol. 147:2657-62; Morgan et al. (1995) Immunology 86:319-24( ٠ )1991(« أو تغيير الأنواع التي يتم منها اشتقاق مجال السيطرة الثابت. قد تتضمن مضادات الأجسام طفرات في مجال سيطرة 0112 لسلسلة ثقيلة مما يخفض أو يعدل من وظيفة الاستجابة؛ مثل؛ ارتباط مستقبل Fo والتنشيط المكمل. على سبيل (JU) قد تشتمل مضادات الأجسام على طفرات كالموصوفة في براءة الاختراع الأمريكية أرقام 0774471 5 OTEAY Ts قد تشتمل Yo مضادات الأجسام على طفرات لتثبيت ارتباط disulfide بين السلسلتين الثقيلتين لأجل globulin مناعي؛ Jie الطفرات في منطقة مفصلة 1804 كما هو موضح؛ Nie في .Angal et al. (1993) Mol. Immunol. 30:105-08
YAEL
تشتمل polypeptides ومضادات أجسام الاختراع الحالي على proteins تختلف Wily عن polypeptides ومضادات ١ لأجسام التي تم الكشف عنهاء مثل؛ التي لها ترتيب معدل مع نفس الخواص الكيميائية الحيوية حيث تتضمن polypeptides ومضادات الأجسام المكتشفة؛ Sia لها تغييرات في amino acids غير الأساسية وظيفيا. تشتمل هذه الجزيئات على أشكال متباينة allelic © طبيعية الوجود وأشكال Aili مصممة هندسيا بصورة محكمة تحتوي على تغيرات؛ استبدالاتء إحلالات؛ إدخالات؛ أو إزالات. إن تقنيات التغير؛ Jama! الإحلال؛ الإدخال؛
أو الإزالات تكون معروفة جيدا للماهرين في الفن. قد يتم إضافيا إنتاج مضادات أجسام من الاختراع باستخدام حيوانات طفرية غير آدمية محسنة لإنتاج مضادات أجسام آدمية كليا بدلا من مضادات الأجسام داخلية Load) استجابة ٠ الاختبار التحدي بواسطة مولد مضاد. انظر؛ مثلاء منشور WO 94/02602 PCT يتم إضعاف الجينات الداخلية المشفرة لسلاسل globulin المناعي الثقيلة والخفيفة في عائل غير (ool وتدخل المواقع النشطة المشفرة لأجل globulins المناعية للسلاسل الخفيفة والثقيلة الآدمية في genome العائل. تندمج جينات العائل؛ Sle باستخدام chromosomes صناعية الخميرة تشمل أجزاء DNA الآدمية اللازمة. يتم عندئذ الحصول على حيوان يوفر جميع التحسينات المطلوبة ١ كذرية بتهجين الحيوانات الطفرية الوسطية التي تتضمن أقل من الإكمال التام للتحسينات. تتضمن أحد تجسيدات هذا الحيوان غير الآدمي على فأرء؛ ويطلق عليه اسم LS XENOMOUSE™ هو موضح في منشورات WO 96/34096 3 WO 96/33735 PCT يقوم هذا الحيوان بإنتاج خلايا B تفرز globulins مناعية آدمية كليا. يمكن الحصول على مضادات الأجسام مباشرة من الحيوان بعد التحصين مع مولدات مناعية معينة؛ كتحضير» ٠ مثلاء لمضاد جسم عديد النسخ؛ أو بصورة بديلة من خلايا B مستبقاة من الحيوان» Fie مضادات الأجسام عديدة النسخ المنتجة للأورام الهجينة. بالإضافة لذلك؛ تستخلص الجينات المشفرة لأجل globulins المناعية مع مجالات سيطرة متغيرة آدمية وتظهر للحصول على مضادات الأجسام مباشرة؛ أو تحسن إضافيا للحصول على مماثلات مضادات أجسام؛ (Jia
جزيئات Fv وحيدة السلسلة. Yo بناءا على ذلك؛ يشتمل مصطلح مضاد الجسم أو protein ارتباط مولد alias كما هو مستخدم هنا على مضادات أجسام سليمة؛ shal مضادات calual مثل؛ أجزاء F(ab%)2 Fab dAb Fd و5677 ومضادات أجسام سليمة وأجزاء طفرية في مجالات السيطرة الثابتة و/ أو 1ّ""
المتغيرة (متل؛ طفرات إنتاج مضادات أجسام مختلطة؛ مكتسبة السمة الآدمية جزئيا أو مكتسبة السمة الآدمية (LIS بالإضافة إلى إنتاج مضادات أجسام لها سمات مطلوبة؛ مثل؛ ارتباط 4 المعزز و/ أو ارتباط FeR المنخفض). حيث تدخل مضادات الأجسام protein sl ارتباط مولد مضاد هذه ضمن مجال الاختراع؛ بشرط أن يتفاعل مضاد الجسم أو protein © ارتباط مولد مضاد بينيا مع -GDF8 قد تستخدم جزيئات ارتباط protein الأخرى لضبط نشاط -GDF8 إن جزيئات ارتباط مول مضاد هذه تتضمن عقاقير دوائية مناعية ضابطة صغيرة (SMIP™) .(Trubion Pharmaceuticals, Seattle, WA) تكون SMIPs هي polypeptides وحيدة السلسلة تتكون من مجال سيطرة رابط لبناء قرين alge Jie مضاد؛ مستقبل مضاد أو ما شابه؛ polypeptide ٠ منطقة مفصلة به واحد أو بدون متخلفات cysteine ومجالات سيطرة CH2 globulin CH3 مناعي. يتم الكشف عن SMIPs واستخداماتها وتطبيقاتها في؛ مثلا طلب براءة الاختراع الأمريكية المنشور أرقام لكمغدد عقت تمر 6 رك ITT Eq رتك كلنكعادإعمكت YAY. ارم 1 فك تدك إفيك كك اف نإل ٠١١/١7781471870 75874- ٠ وأعضاء مجموعة براءات الاختراع المتعلقة بنفس الموضع؛ والتي تندمج محتوياتها هنا كمرجع بالكامل. يمكن قياس قدرةٍ ارتباط مضاد جسم أو protein ارتباط alias ase الاختراع بالطرق التالية: تحليل (Biacore تحليل اختبار الامتصاص المناعي المرتبط بواسطة enzyme (ELISA) تحليل البلورات بأشعة #6 تحليل الترتيب وتكوين طفرات مسح كما هو موصوف ٠ في الأمثلة olf وطرق أخرى معروفة جيدا في الفن. قد يتم قياس قدرة مضاد جسم أو protein ارتباط مولد مضاد من الاختراع على تثبيط» خفض»؛ و/ أو معادلة واحد أو أكثر من الأنشطة المصاحبة 01178 عن طريق قائمة الطرق غير المحددة التالية: اختبارات قياس انقسام خط خلية معتمد على ¢GDF8 اختبارات قياس إظهار polypeptides تتوسطها ¢GDF8 اختبارات قياس نشاط جزيئات الإشارة اللاحقة؛ اختبارات فحص كفاءة مضاد جسم أو protein © ارتباط مولد alias من الاختراع لمنع الاضطرابات العضلية في نموذج حيواني مناسب؛ اختبارات كما هي موصوفة في الأمثلة أدناه؛ واختبارات أخرى معروفة جيدا في الفن.
ب jig جانب آخر من الاختراع طريقة لاختبار مضادات أجسام قادرة على التفاعل البيني مع «GDF8 و أو للتثبيط المحدد لواحد أو أكثر من أنشطة . تشتمل الطريقة على: خفض مجموعة مضادات الأجسام مع 0018؛ اختيار مجموعة ثانية من مضادات الأجسام المرتبطة مع 0018؛ اختيار قدرة المجموعة الثانية من مضادات الأجسام لربط أعضاء أخرى © من الطائفة العليا 101-0؛ واختيار مجموعة ثالثة لمضادات الأجسام من المجموعة الثانية لمضادات الأجسام حيث ترتبط المجموعة الثالثة لمضادات الأجسام بانجذاب أقل مع أعضاء أخرى من الطائفة العليا 1017-8. في تجسيد آخر؛ تشتمل الطريقة Lala) على الخطوات: اختبار قدرةٍ المجموعة الثالثة لمضادات أجسام لتثبيط نشاط 610178 واحد على الأقل (مثل منع ارتباط GDF مع مستقبل ((GDFS ٠ واختيار مضادات الأجسام القادرة على تثبيط واحد أو أكثر من أنشطة 00178 (مثل؛ منع ارتباط GDF8 مع مستقبله). تكون مضادات أجسام مضاد 0118 الخاصة بالاختراع مفيدة أيضا في (ie تنقية و/ أو الكشف عن 0018 في مادة (مواد) طافية؛ مادة تحلل خلوية؛ أو على سطح خلية. يمكن استخدام مضادات الأجسام المكتشفة في هذا الاختراع تشخيصيا لرصد مستويات protein ٠ 60178 كجزء من أجزاء اختبار تحليلي. بصورة إضافية؛ يمكن استخدام مضادات أجسام الاختراع في العلاجات التي تتطلب معادلة و/ أو تثبيط واحد أو أكثر من الاضطرابات المصاحبة 0018؛ مثل؛ علاجات الأمراض التي تصيب العضلات. كما يوفر الاختراع الحالي polynucleotides نقية ومعزولة جديدة و polypeptides متعلقة بمضادات أجسام جديدة موجهة ضد GDF8 آأدمي . Jain جينات؛ polypeptides proteins «polynucleotides Ye الخاصة بالاختراع الحالي؛ دون تحديد؛ على مضادات أجسام فأرية ومكتسبة السمة الآدمية إلى RK22 «Jie «GDFS والأشكال المتباينة منها. مضاد Polynucleotides و Polypeptides المخلق يوفر الاختراع الحالي nucleic acids منعزلة ونقية تشفر epitopes تخص «GDF8 أو مماثلات peptide أو مضادات أجسام منهاء كمضادات 0118 محددة؛ كما هو موضح أعلاه. Yo تشتمل nucleic acids وفقا للاختراع الحالي على DNA أو RNA وقد تكون مخلقة كليا أو جزئيا. إن مرجع ترتيب nucleotide كما هو موضح هنا يتضمن جزيئات DNA مع ترتيبات YAEL
TA
ذات ترتيبات محددة يتم فيها RNA محددة أو مكافئات جينومية؛ بالإضافة إلى جزيئات استبدال 7 محل لا ما لم يتطلب السياق خلاف ذلك. تعريفات (Jha المعزولة الخاصة بالاختراع الحالي؛ polynucleotides يمكن استخدام كمجسات ومواد أولية للتهجين لتحديد وعزل ١9و ١ NY) (4 الترتيب رقم: 7 8؛ 7ء لها ترتيبات مطابقة أو مماثلة للمجسات والمواد الأولية التي تشفر nucleic acids © المعزولة polynucleotide المكتشفة. كمثال غير محدد؛ يمكن استخدام polynucleotides lia مضاد في هذه الطريقة؛ Age ارتباط protein مضاد جسم أو polynucleotides باستخدام لإنتاج مضادات أجسام محددة مضادة 0018 أو لتحديد خلايا إظهار مضادات الأجسام polymerase على تفاعل سلسلة nucleic acids المذكورة. تشتمل طرق التهجين لتحديد وعزل وتكون معروفة جيدا Northern تهجين في الموضع وتهجين «Southern تهجينات «(PCR)» للماهرين في الفن. تنفذ تفاعلات التهجين تحت شروط الصرامة المختلفة. تشتمل صرامة تفاعل التهجين على إلى بعضهم البعض. بصورة مفضلة؛ يتهجن كل nucleic acid صعوبة تهجين أي جزيثان المقابل له تحت شروط صرامة قليلة؛ والأفضل polynucleotide تهجين إلى polynucleotide شروط صارمة والأفضل أكثر أن تكون شروط صارمة للغاية. يوضح الجدول ؟ أدناه أمثلة ٠ على شروط الصرامة. إن الشروط الصارمة للغاية هي شروط صارمة على الأقل بنفس درجة الشروط (أ) إلى (و)؛ مثلا؛ وتكون الشروط الصارمة هي شروط الصرامة على الأقل بنفس درجة الشروط (ز) إلى (ل)؛ وتكون شروط الصرامة القليلة هي شروط صارمة على الأقل بنفس درجة الشروط (م) إلى (ص). جدول ؟ ٠ الشروط | التهجين | طول | درجة حرارة التهجين ومثبت | درجة حرارة الغسل ومثبت الأس ١ التهجين الأس الهيدروجيني الهيدروجيني ؟ = أو- 0 مئوية؛ 1X SSC منوية؛ 15 | 0.< |DNA:DNA| (J) 0.3X SSC | Jo. (AX SSC "؛تمئوية؛ mn formamide
YAEL
7 ١ 0" 1 ٍْ ّ' 0 an > EEE formamide 1X SSC ¢TD* 1X SSC ¢TD* DNA:DNA لاأمئوية؛ ٠ أو- -172 SSC لاشمنوية؛ ١ | o.< | RNARNAT (م) 0.3 X SSC 7 Oe 1X SSC 445140 ٠ formamide 1X SSC ¢TF* 1X SSC ¢TF* RNA:RNA $3,401 0 - أو 4X SSC مئوية؛ 15 | ©0+< |DNA:DNA| (J) 1X 85C 70. «4X SSC 7؛تمنوية؛ formamide 4X SSC ¢TH* 4X SSC ¢TH* DNA:DNA (3g TY أو- —4X SSC 17تمنوية؛ | ©.< | RNADDNA | (ط) 1X 88C 150 4X SSC تمئوية؛ 0 formamide 4X SSC *[1؛ 4X SSC ¢TJ* RNA:DNA (ATV — Jf 4X SSC .صخري | o.< | RNARNA | ك) 1X 53 /5 6 «4X SSC 4350 « formamide 2X SSC ¢TL* 2X SSC ¢TL* RNA:RNA أو- « مثوية؛ —4X SSC .#ثمئوية؛ | 0> DNA:DNA (2) 2X SSC 704 6X SSC تمئوية؛ ٠ formamide 6X SSC ¢TN* 6X SSC ¢TN* DNA:DNA tdy4iloo أو -432 SSC ...م #5تمئوية؛ | DNA:DNA (س) 2X SSC 704 «6X SSC تمنوية؛ 7 formamide 6X SSC ¢«TP* 6X SSC ¢TP* RNA:DNA (Aggies أو- 4x SSC ign. | ou< | RNARNA )ف 2X SSC 70+ 6X SSC تمئوية؛ 0 formamide 4X SSC ¢TR* 4X SSC ¢TR* RNA:RNA
فل :١ يتوقع أن الطول الهجين لمنطقة (مناطق) مهجنة polynucleotides التهجين. عند تهجين polynucleotide إلى polynucleotide المستهدف من الترتيب المعروف. قد يتم فرض الطول الهجين بأنه طول polynucleotide التهجين. عند تهجين polynucleotides المعروف ترتيبهاء يمكن عندئذ تحديد الطول الهجين باصطفاف ترتيبات polynucleotides وتحديد منطقة 0 أو مناطق من تكملة الترتيب المثلى. I1xSSPE) SSPE :Y هو ١.٠١ NaCl جزيني جرامي؛ ٠١ NaH;POy مللي جزينئي جرامي» و ٠١7١# EDTA مللي As جرامي؛ أس هيدروجيني (Vf يمكن استبداله لأجل 1xSSC) SSC هو ٠.٠١ NaCl جزيئي جرامي 5 Vo sodium citrate مللي جزيئي جرامي) في التهجين ومثبتات الأس الهيدروجيني للغسيل؛ تجرى الغسلات لمدة 10 دقيقة بعد اكتمال Ye التهجين. Tr - *و1: يجب أن تكون درجة حرارة تهجين الأجزاء المهجنة المتوقع أن يكون طولها أقل من ٠ © زوج قاعدة في نطاق Augie’) =o وهي درجة ha أقل من درجة حرارة انصهار الهجين (Ty حيث يتحدد ,1 طبقا للمعادلات التالية. بالنسبة للأجزاء المهجنة التي يكون طولها VA زوج قاعدة» ,1 (*مثوية)- ١ (رقم +A قواعد (T +4 (رقم 6+ قواعد ©). بالنسبة ١ للأجزاء المهجنة التي يكون طولها بين VA £95 زوج قاعدة؛ ,1 ("مئوية)- ١.1 +A). C+G) ٠.4١ +008:187( 7)-(٠٠21/1)؛ حيث يمثل N عدد القواعد في الجزءٍ المهجنء ويمثل و11 تركيز sodium ions في مثبت الأس الهيدروجيني التهجين Na’) من أجل x) ١# - 060 جزيئي جرامي). تتوافر أمثلة إضافية للشروط الصارمة التي يتم تهجين polynucleotide تحتها في Sambrook, et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Chs. 9& 11, Cold Ye Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY (1989), and Ausubel et al., eds., Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, Inc., sections and 6.3-6.4, 2.10 المندمج هنا كمرجع. Yo يمكن استخدام polynucleotides المنعزلة الخاصة بالاختراع Mall كمجسات ومواد أولية للتهجين لتحديد وعزل DNA له ترتيبات تشفر أشكال متباينة polynucleotides Jay allelic المعلنة. إن الأشكال المتباينة allelic أشكال بديلة طبيعية الوجود لأجل polynucleotides
١لا المعلنة تشفر polypeptides المماثلة أو التي لها تشابه ملحوظ مع polypeptides التي تشفرها polynucleotides المعلنة. يفضل؛ أن يكون للأشكال المتباينة allelic تمائل ترتيب 798 على الأقل (يفضل أكثر؛ Jala 745 على الأقل؛ الأكثر تفضيلا؛ تماثل 799 على الأقل) مع polynucleotides المعلنة. ° يمكن Lad استخدام polynucleotides المنعزلة الخاصة بالاختراع الحالي كمجسات ومواد أولية للتهجين لتحديد وعزل DNAs لها ترتيبات تشضفر polypeptides مماثئلة لأجل 055 المعلنة. إن هذه المماثلات هي polynucleotides و polypeptides منعزلة من أنوا ع مختلفة عن تلك polypeptides و polynucleotides المعلنة؛ أو في نفس الأنوا ع لكن مع تشابه ترتيب ملحوظ مع polypeptides 5 polynucleotides المعلنة. بصورة مفضلة؛ ٠ فإن مماثلات polynucleotide لها JAWS ترتقيب من ٠ 79 على الأقل (يفضل أكثر؛ تماثل lve على الأقل؛ يفضل أكثر Jala 7980 على الأقل) مع polynucleotides المعلنة؛ بينما يكون لمماثلات polypeptide تماثل ترتيب من 770 على الأقل (يفضل أكثر؛ تماثل go على الأقل؛ الأكثر تفضيلا؛ تماثل 7760 على الأقل) مع 0088م©00170/ مضادات الأجسام المعلنة. يفضل أن تكون مماثلات polynucleotides و polypeptides المعلنة هي تلك Ve المماثلات المنعزلة من أنواع ثديية. قد يتم أيضا استخدام polynucleotides المنعزلة من الاختراع الحالي كمجسات ومواد أولية للتهجين لتحديد الخلايا والأنسجة التي epitope(s) edad تخص GDF8 أو مضادات أجسام من الاختراع الحالي والشروط التي تظهر تحتها. بصورة إضافية؛ قد يتم استخدام polynucleotides المنعزلة من الاختراع الحالي لتعديل ٠٠ (أي؛ تعزيزء خفض أو تحسين) إظهار الجينات المقابلة إلى polynucleotides الاختراع الحالي في خلية أو AS حي. إن هذه "الجينات المقابلة" هي ترتيبات DNA جينومي من الاختراع الحالي المنسوخة لإنتاج mRNAs التي يتم منها اشتفاق polynucleotides الاختراع الحالي. قد يتم الإظهار المتغير لترتيبات الاختراع في خلية أو كائن خلال استخدام polynucleotides ٠ تثبيطية مختلفة؛ مثل polynucleotides مضادة للإحساس؛ ribozymes التي تربط و/ أو تفصل Mma المنسوخة من جينات الاختراع؛ oligonucleotides تشكيل بناء YAEL
(DU تستهدف مناطق تنظيمية مستهدفة للجينات 5 RNA التداخلية القصيرة التي تسبب تحلل خاص بترتيب mRNA مستهدف؛ مثلاء Galderisi et al. (1999) J.
Cell.
Physiol. 181:251-57; Sioud (2001) Curr.
Mol.
Med. Knauert and Glazer (2001) Hum.
Mol.
Genet. 10:2243-51; Bass (2001) ;1:575-88 Nature 411:428-29. 8 تعتبر polynucleotides التثبيطية هي مضادات من الاختراع. يعرف الماهر في الفن ضرورة توجيه polynucleotides التثبيطية من الاختراع في مقابل epitope(s) تخص GDF8 كما هو موضح أعلاه (وغير مضادة لمضاد جسم الاختراع). ترتبط oligonucleotides تشسكيل بناء ثلاثي (TFOs) المذكور ضمن الاختراع ٠ الحالي مع أخدود كبير من 018 مزدوج له خصوصية كبيرة أو انجذاب كبير .(Knauert and Glazer, supra) يمكن تثبيط إظهار جينات الاختراع الحالي عن طريق استهداف 1705 التكميلية للمناطق التنظيمية للجينات (أي؛ ترتيبات العامل المحث و/ أو العامل المعزز) لتكوين بنيات حلزونية ثلاثية تمنع نسخ الجينات. في أحد تجسيدات الاختراع؛ تكون polynucleotides التثبيطية من الاختراع عبارة عن ٠ جزيئات RNA تدخلية قصيرة (siRNA) (انظرء Galderisi et al. (1999) J.
Cell «ia (Physiol. 181:251-57; Sioud (2001) Curr.
Mol.
Med. 1:575-88 - إن جزيئات siRNA هي جزيئات RNA ثنائية قصيرة تتسبب في انحلال خاص بالترتيب من MRNA المستهدفة. يعرف هذا الانحلال بتدخل (RNAi) RNA (مثلء 411:428-29 .(Bass (2001) Nature مع التحديد Lal) في كائنات حية أدنى؛ تستخدم RNA] بصورة مؤثرة في خلايا ٠ شيية وقد ظهرت حديثا قدرتها على منع التهاب الكبد المستفحل في الفئران المعالجة مع جزيئات siRNA التي تستهدف (Song et al. (2003) Nature Med. 9:347-51) Fas Mma بالإضافة إلى ذلك؛ تقرر حديثا أن SIRNA الموصلة داخلة الغمد يشبط استجابات الألم في نموذجين (نموذج ألم يحثه معضد ونموذج ألم اعتلال عصبي) في فار .(Dorn et al. (2004) Nucleic Acids Res. 32(5):e49) Yo تشتمل البنية المزدوجة لجزيئات SIRNA الخاصة بالاختراع على واحد أو أكثر من جدائل RNA المتبلمرء أي؛ يمكن تكوين البنية المزدوجة بواسطة شريط RNA ذاتية التكامل فردية تشمل لولب دبوسي أو شريطين تكميليين. قد وجد أن ترتيبات SIRNA مع إدخالات؛ إزالات؛ YAER vy وطفرات نقطة فردية بالنسبة إلى الترتيبات المستهدفة تكون فعالة في تثبيط إظهار till المستهدف )6,506,559 (Fire et al., U.S. Patent No. وفقا «al يفضل أن تشتمل جزيئات siRNA الخاصة بالاختراع على ترتيب nucleotide مع تماثل ترتيب جوهري مع قسم على الأقل من mRNA المقابلة إلى epitope مستهدف يخص 0018 الاختراع. على سبيل المثال؛ © يكون للمنطقة المزدوجة؛ من جزيء siRNA ما يزيد عن 790 من تماثل الترتيب؛ ويفضل ٠ من تماثل الترتيب ؛ مع قسم من MRNA المقابلة إلى epitope المستهدف الذي يخص .GDFB بصورة بديلة؛ يتحدد تمائل الترتيب الجوهري بقدرة شريط واحد على الأقل من المنطقة المزدوجة لجزيء SIRNA على التهجين إلى قسم على الأقل من epitope مستهدفة تخص 8 تحت شروط صارمة على الأقل Jie الشروط (ز)-(ل) في الجدول oF أعلاه. في ٠ تجسيد مفضل؛ غير محدد؛ من الاختراع؛ يتهجن جزيء SIRNA إلى قسم على الأقل من epitope مستهدف يخص GDF8 تحت شروط Alle الصرامة؛ مثل شروط بنفس صرامة الشروط (أ)-(و) في الجدول oF أعلاه. يصل طول ترتيبات nucleotide المتماثل جوهريا إلى د ذال كل لكت (YO (YY نف بنك (Yeu بنك Ev أو 0 nucleotides على الأقل؛ ويفضل أن تصل إلى 77-19 nucleotides والأفضل أن تصل إلى ١9 أو YY (Fire, et al., supra + (انظر nucleotides ٠١ التثبيطية اعتمادا على معايير معروفة جيدا في الفن (مثلاء polynucleotides تصمم hus و/ أو باستخدام حلول حسابية معروفة (Elbashir et al. (2001) EMBO J. 20:6877-88 القسم المستهدف من lay (مثل؛ الحلول الحسابية المتوافرة عموما). على سبيل المثال؛ يفضل مع (SIRNA المنطقة المزدوجة من جزيء (Jie) التثبيطي الخاص بالاختراع 01701006 الخاص بالاختراع SIRNA أو ه©؛ يفضل أن يشتمل جزيء (GA (TA (مفضل أكثر)؛ AA ٠ على ثلاثة SIRNA يجب ألا يحتوي جزيء 6700-80) GC على ترتيب تصل به نسبة
G/Cs على سبعة SIRNA في صف واحد؛ كما يجب ألا يحتوي جزيء nucleotides من نفس ia) مختلطة في صف واحد. اعتمادا على هذه المعايير؛ أو على معايير أخرى معروفة قد يقوم أحد الماهرين في الفن «(Reynolds et al. (2004) Nat. Biotechnol. 22:326-30 على سبيل .GDF8 يخص epitope الاختراع الحالي التي تستهدف siRNA بتصميم جزيئات YO الخاص بالاختراع و/ أو يتكون أساسيا من SIRNA المثال» في أحد التجسيدات؛ يكون لجزيء من تعريف الترتيب nucleotide منتقى من المجموعة المتكونة من ترتيب nucleotide ترتيب
رقم: ؟؛ ترتيب nucleotide من تعريف الترتيب رقم: ©« ترتيب nucleotide من تعريف الترتيب رقم: لاء ترتيب nucleotide من تعريف الترتيب رقم: 4؛ ترتيب nucleotide من تعريف الترتيب رقم: VY وأجزاء منها. في هذا التجسيدء يشتمل جزيء SIRNA الخاص بالاختراع على مكمل ترتيب nucleotide من تعريف الترتيب رقم: oF مكمل ترتيب nucleotide © من تعريف الترتيب رقم: © مكمل ترتيب nucleotide من تعريف الترتيب رقم: oY مكمل ترتيب nucleotide من تعريف الترتيب رقم: 9؛ مكمل ترتيب nucleotide من تعريف الترتيب رقم: ٠١ ومكملات أجزاء منها. على سبيل (JE يمكن أن تتولد جزيئات SIRNA من الاختراع الحالي بتقسية اثنين من جزيئات RNA فردي الشريط تكميلية مع بعضهما Fire) وآخرين؛ أعلاه) أو من خلال استخدام ٠ جزيء 1018 فردي يشبه دبوس شعر ينطوي إلى الخلف فوق بعضه لإنتاج القسم مزدوج الشريط المطلوب (99:6047-52 (Yu et al. (2002) Proc. Natl. Acad. Sci. USA قد تكون جزيئات siRNA مخلقة كيميائيا )411:494-98 (Elbashir et al. (2001) Nature أو قد تنتج بواسطة نسخ في المعمل باستخدام جزيئات تركيبية DNA فردي الشريط (Yu et al, supra) بطريقة بديلة؛ يمكن إنتاج جزيئات SIRNA حيويا؛ سواء بصورة مؤقتة (Yu et al., supra; Sui et al. (2002) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 99:5515-20( ٠ أو بدرجة ثابتة )99:1443-48 «(Paddison et al. (2002) Proc. Natl. Acad. Sci. USA باستخدام Jib (نواقل) إظهار؛ موضح أدناه؛ يحتوي على ترتيبات SIRNA إحساس ومضادة للإحساس. حديثاء ظهر تقليل لمستويات mRNA مستهدف في خلايا آدمية أولية؛ بطريقة مؤثرة وخاصة بالترتيب» باستخدام نواقل فيروس غدي تظهر RNAS دبوس شعرء التي تعالج إضافيا إلى .(Arts et al. (2003) Genome Res. 13:2325-32) siRNAs | ٠ التثبيطية الخاصة بالاختراع باستخدام تفاعلات التخليق الكيميائي polynucleotides تتكون الذي يشمل إجراءات معروفة جيدا في الفن. يمكن تعديل وصلات enzymatic والربط المخلقة كيميائيا لتعزيز قدرتهم على مقاومة الانحلال بسبب polynucleotides ( nucleotide
RNA تتولد بواسطة Ally تجنب استجابة الخوف العامة في بعض الكائنات الحية nuclease مزدوج؛ و/ أو لزيادة خصوصية ترتيبها. تشتمل تلك التعديلات للوصلات؛ دون تحديد على YO «phosphoroamidate «methylphosphonate «phosphorothioate <b ua) (Galderisi et al, (PNA) peptide nucleic acids <morpholino <boranophosphate ع7 vo supra; Heasman (2002) Dev.
Biol. 243 :209-14; Micklefield (2001) Curr.
Med. .Chem. 8:1157-79) المستمرة منهاء portions المعزولة؛ أو polynucleotides تتصل de كما هو موضح المتعلقة بالاختراع الحالي عمليا في اتجاه إحساس أو مضاد إحساس لترتيب التحكم في التثبيطية (مثل polynucleotides الإظهار و/ أو ترتبط في ناقل إظهار للإظهار المخلق من ٠ الخاصة بالاختراع. (siRNA جزيئات ناقل؛ حافظات نسخ أو إظهار التي plasmids كما يوفر الاختراع الحالي بنيات في شكل واحد على الأقل من الاختراع كما هو موضح أعلاه. nucleic acid تشمل من الاختراع الحالي المعزول مع ترتيب تحكم في إظهار polynucleotide يتصل عمليا أو مضادات أجسام من الاختراع (peptide النوعية (مثل؛ كمماثلات epitopes إنتاج مخلق من ٠ ارتباط protein الحالي. بصورة إضافية يعرف الماهر في الفن إمكانية اتصال مضاد الجسم أو معروفة جيدا nucleotide من الاختراع الحالي مع ترتيبات polynucleotides مولد مضاد يشفر polynucleotide «(Jia تشفر مجال السيطرة الثابت للأنواع المماثلة لمضاد جسم مختلف. ie) الاختراع الذي يشفر مجال السيطرة المتغير لسلسلة خفيفة من الاختراع يرتبط عمليا مع ترتيب ٠١ مذكور كتعريف ترتيب رقم: nucleotide لها ترتيسب (polynucleotides ٠ 2. يشفر مجال السيطرة الثابت (أو مشتقاته) من سلسلة خفيفة » أو سلسلة خفيفة nucleotide أو 120002 كاملة kappa بحيث يتسبب إظهار 55 المتصلة في تكون سلسلة خفيفة بصورة مماثلة؛ -GDF8 مع مجال سيطرة متغير يتفاعل بينيا مع و/ أو يثبط تحديدا من الاختراع (يرتبط ALE من الاختراع يشفر مجال سيطرة متغير سلسلة polynucleotide مع ١١ المذكور كتعريف ترتيب رقم: nucleotide له ترتقيب polynucleotide عملياء مثلاء ٠ (Jia (أو مشتقاته)؛ ALE يشفر مجال السيطرة الثابت لنوع مماتل لسلسلة nucleotide ترتيب المخلقة هي طرق proteins وطع1. تكون الطرق العامة لإظهار IgG و1 ع1 IgM المخلقة في شكل قابل للذوبان للاستخدام في proteins معروفة جيدا في الفن. تظهر هذه .GDF8 علاج اضطرابات مصاحبة مع قد تحمل نواقل الإظهار المخلقة من الاختراع ترتيبات إضافية؛ مثل الترتيبات التي تنظم Yo وجينات chistidine مصادر نسخ)؛ ترتيبات ملحق مثل Sli) Alle نسخ الناقل في خلايا الناقل. Led دلالة قابلة للانتقاء. يسهل جين الدلالة القابلة للانتقاء انتقاء خلايا عائلة يدخل vi يوفر جين الدلالة القابلة للانتقاء نموذجيا مقاومة لعقاقير؛ مثل 0418؛ Jud على سبيل على خلية عائلة يدخل فيها الناقل. تشتمل جينات الدلالة cmethotrexate أو hygromycin (للاستخدام في خلايا dihydrofolate reductase (DHFR) القابلة للانتقاء المفضلة على جين .)0418 (لانتقاء neo pally (methotrexate مع انتقاء/ تكبير hy عائلة يمكن اختيار أو تشييد نواقل مناسبة؛ تحتوي على ترتيبات تنظيمية ملائمة؛ تتضمن © ترتيبات محثة؛ ترتيبات إنهاء؛ ترتيبات 001780607121100 ترتيبات معززة؛ جينات دلالة أو فيروسية؛ مثلاء بلعم؛ أو plasmids وترتيبات أخرى حسب الملائمة. قد تكون النواقل حسب الملاثمة. لتفاصيل إضافية انظر مثلاء phagemid
Molecular Cloning: A Laboratory Manual: 2nd ed., Sambrook et al., Cold Spring
Harbor Laboratory Press, 1989. Ye على سبيل nucleic acids يتم تفصيليا وصف تقنيات وبروتوكولات كثيرة معروفة لمعالجة في خلايا DNA تكوين طفري؛ ترتيب؛ إدخال nucleic acid في تحضير بنيات (JU في «proteins وتحليل copa واظهار Current Protocols in Molecular Biology, 2nd ed., Ausubel et al. eds., John Wiley &
Sons, 1992. \o يوفر الاختراع الحالي خلية عائل تشتمل على واحد أو أكثر من البنيات المذكورة أعلاه؛ 13 12 (H1) CDR «GDF8 يخص epitope مخلق يشفر أي nucleic acid يشكل «Jw مضاد محدد كما alge مجال سيطرة .771؛ أو جزءٍ ربط ¢VH مجال سيطرة ¢(L3 أو 12 <LI هو موضح هناء جانب من جوانب الاختراع الحالي. من protein بإظهار peptide على طريقة لإنتاج Lad كما يشتمل الاختراع الحالي ٠ المشفر في الخلية العائلة. يتحقق الإظهار عن طريق زرع خلايا عائلة مخلقة nucleic acid تحت شروط ملائمة. nucleic acid تشمل polypeptides يعتبر عدد من خطوط الخلايا هو خلايا عائلة مناسبة للإظهار مخلق من ومضادات أجسام الاختراع الحالي. تشتمل خطوط الخلايا العائلة الثديية؛ دون تحديد؛ على:
LA «CV-1 خلايا 3T3 خلايا (A431 خلايا 1. خلايا «CHO خلايا «COS خلايا Yo
Jurkat LA (HaK خلايا 1937 خلايا (HL-60 LWA 8111621 خلايا (L LDA «Hela
YAER vy بالإضافة إلى سلالات خلايا مشتقة من مزرعة في المعمل لنسيج أولي وازدراعات أولية. تسمح جينومي. DNA من | لاختراع والتي تتكون من polynucleotides هذه الخلايا العائلة باقتران ومضادات أجسام الاختراع الحالي تخليقيا في polypeptides بصورة بديلةء يمكن إنتاج تكوينات حقيقية النواة دنيا مثل الخميرة أو في تكوين بدائي النواة. تشتمل سلالات الخميرة «Saccharomyces cerevisiae على سلالات (aaah المناسبة بدرجة ممكنة؛ دون ©
Jain كما Candida وسلالات «Kluyveromyces «Schizosaccharomyces pombe «Bacillus subtilis «Escherichia coli السلالات البكتيرية المناسبة بدرجة ممكنة على الخاصة بالاختراع الحالي في polypeptides عند تحضير Salmonella typhimurium 3 أو phosphorylation «Mis خميرة أو بكترياء؛ يكون من الضروري تعديلها بواسطة؛ وظيفية. قد تتحقق هذه الارتباطات proteins لمواضع ملائمة؛ للحصول على glycosylation ٠ معروفة جيدا. enzymatic التساهمية باستخدام طرق كيميائية أو ومضادات أجسام الاختراع الحالي تخليقيا عن طريق polypeptides قد يتم أيضا إنتاج المعزولة من الاختراع الحالي مع ترتيبات التحكم polynucleotides الاتصال الفعلي لأجل المناسبة في واحد أو أكثر من نواقل إظهار حشرة؛ مثل نواقل فيروس عصوي؛ واستخدام نظام متوافرة تجاريا في SIO إظهار خلية حشرة. تكون مواد وطرق أنظمة إظهار فيروس عصوي/ ١ .(CA Carlsbad «Invitrogen م تقال 0© kit Jin) شكل مجموعة ومضادات polypeptides بعد الإظهار المخلق في الخلايا العائلة الملائمة؛ يتم تنقية أجسام الاختراع الحالي من وسط مزرعة أو خلاصات خلية باستخدام عملية تنقية معروفة؛ مثل الترشيح الهلامي والتحليل الكروماتوجرافي للتبادل الأيوني. تشتمل التنقية على التحليل ومضادات أجسام الاختراع polypeptides الكروماتوجرافي للانجذاب مع عوامل معروفة لربط ٠ ومضادات أجسام الاختراع polypeptides الحالي. قد يتم أيضا استخدام عمليات التنقية لتنقية من مصدر طبيعي. ومضادات أجسام الاختراع الحالي polypeptides يتم تخليقيا إظهار Aly بصورة في شكل يسهل التنقية. على سبيل المثال»؛ قد تظهر 5 ا كاندماجات مع 0 «(GST) glutathione-S ناقل enzyme «(MBP) maltose ربط protein مثل proteins ؟ الاندماج من proteins Any عللامك»«منط. تتوافر تجاريا مجموعات إظهار (TRX) «New England BioLabs (Beverly, MA), Pharmacia (Piscataway, NJ), and Invitrogen تع
YA
ومضادات أجسام الاختراع الحالي على أجزاء ملحقة polypeptides على التوالي. قد تشتمل ارتباط مولد protein صغيرة وتحدد بعد ذلك أو تنقى باستخدام مضاد جسم أو epitope من مفضل ومتوافر تجاريا من epitope هو FLAG epitope يعد .epitope مضاد يخص .Eastman Kodak (New Haven, CT) ومضادات أجسام الاختراع الحالي عن طريق تخليق polypeptides يمكن أيضا إنتاج ° كيميائي تقليدي معروف. تعتبر طرق التخليق الكيميائي لأجل 5 ومضادات أجسام polypeptides ا لاختراع الحالي هي طرق معروفة جيدا للماهرين في الفن. قد تحتوي polypeptides ومضادات الأجسام المخلقة كيميائيا على خواص بيولوجية مشتركة مع ومضادات الأجسام النقية طبيعياء وتستخدم لذلك كبدائل مناعية أو نشطة بيولوجيا لأجل ومضادات | لأجسام الطبيعية. polypeptides | ٠ aucleic acids يوفر جانب إضافي من الاختراع الحالي خلية عائلة تشتمل نواقل؛ أو مضادات أجسام وأجزاء منها كما هو موضح هنا. كما يوفر جانب 48 الاختراع في خلية عائلة. قد يتم الإدخال بأي تقنية nucleic acid إضافي طريقة تتضمن إدخال «calcium phosphate تشتمل التقنيات المناسبة على استقيال eukaryotic متاحة. لخلايا الكهربي؛ استقبال حامل الجين من العائل بواسطة جسم دهني dill (DEAE Dextran ٠ مثل؛ فيروس جدري البقر أو؛ AT والتحويل باستخدام فيروس ارتجاعي أو فيروس عصوي. للخلايا البكتيرية؛ تشتمل التقنيات المناسبة على تحويل (ug pad لخلايا حشرة؛ التثقيب الكهربي والعدوى ببلعم بكتيري. «calcium chloride «nucleic acid من protein عن طريق إنتاج 0 للسماح بإنتاج nucleic acids يتبع إدخال مثلاء بزراعة الخلايا العائلة تحت شروط مناسبة لإظهار الجين. تكون هذه الشروط معروفة ٠ جيدا في الفن. peptide (مثل؛ ممائلات GDF8 تخص epitope(s) تتوافر 5 ام التثبيطية؛ مجالات (ala ارتباط مولد مضاد protein و/ أو المولدات المناعية)؛ أجزاء مضاد جسم أو المشفرة والنواقل وفقا nucleic acid وجزيئات «VL سيطرة 1711 5[ أو مجالات سيطرة في شكل Ole معزولة أو نقية؛ من بيئة طبيعية polynucleotides للاختراع؛ وتكون هذه © أو شكل خالي أو خالي جوهريا من nucleic acids متجانس أومنقى جوهريا؛ أو؛ في حالة يض
nucleic acids أو جينات من مصدر بخلاف الترتيب المشفر لأجل polypeptide مع الوظيفة اللازمة. طرق لكشف وتقدير 61718 في عينات بيولوجية يتعلق الاختراع الحالي بطرق لكشف وتقدير 6117-8 في عينات بيولوجية. في بعض ٠ التجسيدات؛ تشتمل الطريقة على اختبارات مناعية لكشف وتقدير 6117-8 حر وإجمالي في (uaa دم وبلازما. في أحد الحالات؛ توفر الاختبارات المناعية lily مفيدة كدلالات حيوية من علاجات مضاد 0017-8. بصورة محددة؛ تكون الاختبارات المناعية المكتشفة مفيدة كدلالات تشخيصية/ تنبؤية لنتاج إكلينيكي عند خط قاعدة قبل علاج مضاد ANS (GDF-8 على التعرض لعلاجات مضاد AVS (GDF-8 على استجابة وكفاءة عقار ¢GDF-8 alias ٠ وكدلالة لاشتراك GDF-8 في Alls مرضية معينة أو عملية بيولوجية. بصورة محددة؛ تعمل الطرق على توفير طرق تشخيصية و/ أو تنبؤية لكشف؛ تشخيص أو توقع مرض أو اضطراب مصاحب مع GDF-8 في كائنات ثديية مع أو عند مخاطر تطور المرض أو الاضطراب المصاحب مع .GDF-8 تكون هذه الطرق مناسبة تحديدا للاستخدام في تقييم ملائمة المرضى الآدميين لاستقبال عوامل ضبط 001-8؛ مثل؛ العوامل التي ترتبط مع (GDF-8 ١٠ أو تثبط النشاط البيولوجي من 601-8. في تجسيدات محددة؛ يوفر الاختراع طرق لرصد تطور الأفراد المستقبلين لعوامل ضبط 00748 أو علاجات .GDF-8 alias على سبيل المثال؛ تتوافر طرق لتقدير استجابة الأفراد للعلاج مع عامل ضبط 001-8. لتقدير استجابة الأفراد للعلاج؛ يتم إجراء طرق الاختبار المناعي قبل؛ أثناء؛ وبعد إعطاء عامل ضبط 6117-8. كما يتضمن الاختراع طرق الكشف Ye عن وجود GDF-8 في الكائنات الثديية التي تستقبل MY0-029 مضاد الجسم العلاجي. في أحد التجسيدات؛ تقوم طرق الاختبار المناعي بالكشف عن GDF-8 الحر. على سبيل المثال» يكون GDF-8 الحر هو GDF-8 غير مرتبط مع proteins ربط GDF-8 أو عوامل ضبط 0017-8؛ مثل؛ مضادات أجسام ربط أو معادلة .GDF-8 في تجسيد آخر؛ يتضمن الاختراع طرق الكشف عن إجمالي «is «GDF-8 6017-8 الحر وأي GDF-8 مرتبط. vo يعتبر الشخص الذي يعاني من أو اضطراب عضلي أو يعاني من خطورة تطوره هو الشخص المرشح للطرق الموضحة هنا. يؤدي تثبيط نشاط GDF-8 إلى زيادة AS العضلات في الأفرادء Ley في ذلك الأفراد المصابين بالاضطرابات المتعلقة بالعضلات. يرتبط عدد من ا
Ae هذه الاضطرابات بالنسيج العضلي الضعيف وظيفيا؛ مثل الحثل العضلي؛ التصلب الجانبي الضمور العضلي؛ الضمور العضوي؛ الهشاشة؛ مرض رئوي انسدادي (ALS) الضموري فقدان قوة العضلات؛ الدنف» وأعراض الهزال العضلي بسبب الأمراض ofall احتقاني؛ فشل والحالات الأخرى. علاوة على ذلك؛ يعد الفرد أو الكائن الثديي الراغب في زيادة الكتلة العضلية أو القوة العضلية؛ لزيادة نمو أو كتلة النسيج العضلي في الحيوانات الداجنة؛ هو فرد © مرشح للطريقة الموضحة هنا. كما يورشقح لهذه الطريقة أي فرد يعاني من حالة أو اضطراب متعلق بنسيج دهنيء أيضي؛ أو متعلق بالعظم؛ كما هو موضح ومذكور هنا. تشتمل هذه الاضطرابات والحالات على الاضطابات والحالات المصاحبة «glucose تحمل Cann +7 ا لاستتباب 086عن1ع مثل تطور سكر النوع ٠ المحثة بإصابة رضية؛ مثل insulin مقاومة ((X الأعراض الأيضية (مثل العرض وأمراض الأنسجة الدهنية (مثل السمنة) nitrogen الحروق أو اختلال توازن على سبيل المثال؛ (Kim et al., Biochem.
Biophys.
Res.
Comm. 281:902-906 (2001)) ويثبط (1d) بضبط تباين الخلايا الدهنية الناضجة إلى خلايا دهنية GDF-8 يقوم تكون الخلايا الدهنية من خلايا المصدر الأولي المتوسط والخلايا ٠ -(Rebbapragada et al., Mol.
Cell Bio. 23:7230-7242 (2003)) الدهنية الناضجة وفأر ناضج بري النوع GDF-8 يؤدي تراكم الدهون إلى خفض كل من فأر ناقص المناعة نظاميا GDF-8 protein والذي يتم فيه إعطاء (McPherron et ملة J.
Clinical Invest. 109:595-601 (2002); Zimmers et al., Science 296:1486-1488 (2002). Y. يتضح للماهرين في الفن استخدامات أخرى لطرق الاختراع الحالي؛ وتتضح إضافيا بالأمثلة أدناه. الاختبارات المناعية: من نوع ساندويتش تستخدم مضادين ELISA إن الاختبارات المناعية الموصوفة هنا هي يخص GDF-8 على الأقل؛ يتواجد أحدهما كعامل كاشف إمساك GDF-8 alias أجسام vo يكون كلا من مضادين .GDF8 يخص GDF-8 ويتواجد أحدهما كعامل كاشف لكشف GDF-8 الأجسام قادرين على ربط المولدات المضادة 6018 الموجودة في العينات البيولوجية. يتعرف
AY
يكون مضادين الأجسام قادرين على -BMP-11 عن GDF8 أحد مضادات الأجسام على علاوة على ذلك؛ في تجسيدات محددة؛ تتمكن مضادات الأجسام من .GDF-8 معرفة ربط
GDF-8 نشط؛ GDF-8 الموجود في أي من الأشكال البيولوجية (مثلء GDF-8 الارتباط مع مرتبط مع 1070-29 مضادات أجسام GDF-8 مصل؛ protein مرتبط مع GDF-8 كامن؛ مضاد 6017-8 معادلة). © (انظر RK35 في تجسيدات محددة؛ يكون مضاد الجسم المستخدم في الاختبار المعني هو المندمج هنا كمرجع)؛ ٠٠١7/00097500 تعريف الترتيب رقم: ١0-7؟ والطلب الأمريكي والذي يعد مضاد جسم أحادي النسخ فأري معزول يرتبط مع 011-8. في بعض التجسيدات؛ التي ترتبط مع RK35 يستخدم 81635 كمضاد جسم إمساك. كما يمكن استخدام أجزاء من في طرق الاختراع. 60748 ٠ في تجسيدات محددة؛ يكون مضاد الجسم الثاني المستخدم في الاختبار المعني هو مع RK22 لا يرتبط .GDF-8 مضاد جسم أحادي النسخ فأري معزول يرتبط مع (RK22 كعامل كاشف RK22 كما هو موضح أدناه. في بعض التجسيدات؛ يستخدم (BMP-11 للكشف؛ ويستخدم في بعض التجسيدات كعامل كاشف إمساك. كما يمكن استخدام أجزاء التي ترتبط مع 6017-8 في اختبارات الاختراع. 816222 ٠ في تجسيد آخر؛ تستخدم الاختبارات المناعية من الاختراع الحالي 170-029 مضاد (انظر MY0-029 آدمي. يمكن استخدام 1501 GDF-8 الجسم؛ وهو مضاد جسم مضاد ٠٠١/١٠ 48 تعريف الترتيب رقم: ؟؟ و4 ؟. الطلبات الأمريكية المنشورة في الاختبارات المناعية GDF-8 المندمجة هنا كمرجع) لإخماد كشف ؛)٠٠١ ١/١75 £AY للحصول على مستوى خلفية يمكن فصله عن الإشارة المتولدة في غياب 1470-029. يمكن ٠٠ استخدام هذا التجسيد لزيادة حساسية ودقة الاختبارات الكمية. lime alge كما تشتمل مضادات الأجسام المفيدة في طرق الاختراع على أجزاء ربط مضاد alge (ارتباط Fab shal VL ys VH التي تتكون من مجالات سيطرة Fy أجزاء Sie المتصلة تساهميا برابطة VL-CL 3 711-0111 جزء)ء؛ والتي تتكون من مجالات سيطرة بين المناطق الثابتة. لأجزاء ارتباط المولد المضاد المتاحة الأخرى؛ وتوضيح أبنية disulfide Yo مضاد الجسم؛ انظر
AY
Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, eds. Harlow et al., 1988. يشفر phagemid ناقل pCANTAB6 المتحولة فرديا مع E.coli تم إيداع مزارع غير خطية الجراثيم في ؟ أكتوبر 07٠٠7؛ في 5018170-29
American Tissue Culture Collection (ATCC) under respective Deposit Designation °
Numbers PTA-4741. -10801 University Blvd, Manassas, VA 20110, U.S.A يقع محل الإيدا 2 في بعد اتحاد العينة المحتوية على 00178 مع العامل الكاشف للإمساك؛ تزال بالغسل أي تحت GDF-8 مكونات غير مرتبطة؛ وتتصل عندئذ المكونات مع عينة يشتبه في احتوائها على شروط ارتباط ملائمة. بعد الغسل لإزالة أي جزيئات غير مرتبطة؛ يضاف مضاد جسم مضاد ٠ ثان تحت شروط ارتباط مناسبة. يطلق على مضاد الجسم الثاني اسم مضاد جسم 00748 الكشف أو العامل الكاشف. قد يشتمل مضاد جسم الكشف. قد يشتمل مضاد جسم الكشف
GDF-8 على علامة بارزة؛ وجزيئات ارتباط تتفاعل مع مضاد جسم الإمساك. لذلك؛ يقوم أي في العينة؛ وعامل كاشف GDF موجود بربط كل من عامل كاشف الإمساك المرتبط مع مضاد جسم الكشف. تزال الجزيئات والمكونات غير المرتبطة عن طريق الغسل. يشير وجود Vo العلامة إلى وجود 0127-8 في العينة البيولوجية. ساندويتش. تكون العينة البيولوجية ELISA بصورة أكثر تحديدا؛ يمكن استخدام طريقة -GDF8 هي عامل كاشف إمساك يخص GDF-8 المحتوية على أو المشتبه في احتوائها على مع العامل الكاشف للإمساك؛ يغسل GDF-8 بعد مدة من التحضين الكافي للسماح بارتباط الطبق (الأطباق) لإزالة المكونات غير المرتبطة ويضاف مكون كشف. تترك هذه الجزيئات Ye عينة إمساك؛ تغسل الأطباق ويتم الكشف عن وجود العلامة باستخدام GDF-8 للتفاعل مع أي طرق معروفة جيدا في الفن. قد يتم توفير العوامل الكاشفة للاختبار الموصوفة أعلاه؛ بما في ذلك الاختبار الحيوي مع مولدات مضادة؛ بالإضافة إلى مضادات الأجسام المقرر تفاعلها مع عينة الإمساك؛ في مجموعات؛ مع تعليمات مناسبة وعوامل كاشفة ضرورية أخرىء لإجراء الاختبارات المناعية Yo كما هو موضح أعلاه. قد تحتوي المجموعة؛ اعتمادا على الاختبار المناعي المحدد المستخدم؛
AY
على علامات مناسبة وعوامل كاشفة معبئة أخرى ومواد (أي مواد تثبيت غسلء إلخ). يمكن إجراء اختبارات مناعية؛ كالموضحة أعلاه؛ باستخدام هذه المجموعات. تجسيدات خاصة للاختبارات المناعية تحليل 6017-8 الحر الحر GDF-8 على طريقة للكشف عن وجود Mall في أحد التجسيدات؛ يشتمل الاختراع ° مثال تمثيلي لهذا التجسيد. ١١ في عينة بيولوجية. يوضح الشكل الحر على 6101-8 الموجود في حالته GDF-8 يشتمل مصطلح (Lia كما هو مستخدم .homodimer | «dimmer «monomer الناضج عبارة عن GDF-8 الناضجة النشطة. يكون ناضج مصاحب مع GDF-8 (أي («LS GDF-8 الحر على GDF-8 لا يشتمل المصاحب GDF-8 أو «GDF-8 ربط proteins مصاحب لأجل GDF8 «(GDF-8 propeptide ٠ :GDF-8 مضادات أجسام معادلة وربط «Jia لعوامل ضبط مضاد 011-8؛ في أحد التجسيدات؛ تشتمل طرق كشف وتقدير 0017-8 الحر على الخطوات التالية: (أ) عند التواجد في (GDF-8 وعينة تحت شروط تسمح بارتباط GDF-8 اتحاد مضاد جسم إمساك مضاد GDF-8 عينة بيولوجية؛ مع واحد أو أكثر من مضادات أجسام إمساك تشمل معقد حسن إمساك؛ إضافة مضاد جسم كشف تحت شروط تكوين المعقدء حيث يقوم مضاد جسم ١ مضاد جسم الإمساك؛ و(ب) الكشف عن المعقدات المتكونة بين GDF-8 الكشف بربط معقد في GDF-8 معقد 0101-8 مضاد جسم الإمساك ومضاد جسم الكشف؛ إن وجد؛ كدلالة على العينة البيولوجية. ارتباط مولد مضاد الكشف على علامة بارزة. في protein قد يشتمل أيضا مضاد جسم أو بعض الحالات؛ لا يتم تعليم مضاد جسم الكشف ويستخدم عامل كشف يميز تحديدا مضاد Ye جسم الكشف.
GDE-8 تحليل إجمالي
GDF- في أحد التجسيدات؛ يشتمل الاختراع الحالي على طريقة للكشف عن وجود إجمالي في عينة بيولوجية. 8 الموجود في حالته GDF-8 يشتمل مصطلح إجمالي 04 على lia حسب الاستخدام Yo الناضجة النشطة؛ وأي 0117-8 موجود في شكله الكامن (أي 0117-8 ناضج مصاحب مع أو 0117-8 مصاحب «GDF-8 ربط proteins مصاحب لأجل 00748 «(GDF-8 propeptide
At يشتمل قياس .GDF-8 مضادات أجسام معادلة وربط (Jie «GDF-8 لعوامل ضبط مضاد مضاد جسم علاجي. MYO0-029 إجمالي 6017-8 على قياس 0017-8 الذي يرتبط بواسطة التفكك الحمضى باستخدام طريقة التفكك GDF-8 في أحد التجسيدات؛ تقوم طرق كشف وتقدير إجمالي مع عينة بيولوجية GDF-8 الحمضي؛ وتشمل الخطوات التالية: (أ) اتحاد مضاد جسم إمساك © أس هدروجيني إلى حوالي 76 أس هيدروجيني؛ ويفضل ١ تحت شروط حمضية (بين حوالي عند الوجود في العينة البيولوجية؛ (GDF-8 أس هيدروجيني) مما يسمح بارتباط Y.0 حوالي مع واحد أو أكثر من مضاد أجسام إمساك تكوين معقد 0611-8 مضاد جسم إمساك؛ إضافة تحت شروط تكوين معقد؛ حيث يقوم مضاد جسم الكشف بربط (GDF-8 مضاد جسم كشف
GDF-8 مضاد جسم الإمساك؛ و(ب) الكشف عن المعقدات المتكونة بين معقد GDF-8 معقد V+ مضاد جسم الإمساك ومضاد جسم الكشف؛ إن وجد؛ كدلالة على 0117-8 في عينة بيولوجية. مضاد الكشف على علامة بارزة. في بعض alse ارتباط protein يشتمل مضاد جسم أو الحالات؛ لا يتم تعليم مضاد جسم الكشف ويستخدم عامل الكشف المميز لمضاد جسم الكشف. التفكك الحراري: ١٠ باستخدام طريقة التفكك GDF-8 (laa) في تجسيد آخرء؛ تقوم طرق كشف وتقدير مضاد alse ارتباط protein الحراري؛ وتشمل الخطوات التالية: (أ) توصيل مضاد جسم أو إمساك 0117-8 مع سطح دعامة صلبة؛ (ب) تسخين عينة بيولوجية إلى "١”مئوية على أو ٠٠”مئوية؛ لمدة ؟ PAL 5أ"مئوية؛ ١7أمئوية؛ 5ل7ا"مئوية؛ 80"مئوية؛ Jie الأقل؛ دقيقة واتحاد عينة بيولوجية مع ١٠5 أو ١4 OY ٠١ 4 07 co (Jha دقائق على الأقل؛ Y. عند وجوده في العينة البيولوجية؛ مع (GDF-8 الدعامة الصلبة تحت شروط تسمح بارتباط (=) مضاد جسم إمساك؛ GDF-8 واحد أو أكثر من مضادات أجسام إمساك تكوين معقد إضافة مضاد جسم كشف إلى دعامة صلبة من الخطوة (ب) تحت شروط حمضية لتكوين يقوم مضاد جسم الكشف بربط معقد 0117-8 مضاد جسم الإمساك؛ و(د) الكشف Cua معقد؛ مضاد جسم الإمساك ومضاد جسم الكشف؛ إن وجد؛ GDF-8 عن المعقدات المتكونة بين معقد Yo على 6101-8 في العينة البيولوجية. AVS
Ao مضاد الكشف على علامة بارزة. في alse ارتباط protein يشتمل أيضا مضاد جسم أو بعض الحالات؛ لا يتم تعليم مضاد جسم الكشف ويستخدم عامل الكشف المميز لمضاد جسم الكشف. أحد تجسيدات هذه الطريقة؛ حيث يوضح قيام 14770-029 مضاد الجسم ١١ يصور الشكل في هذه . (biotinylated-RK22 بتثبيط الإشارة الناتجة بواسطة مضاد جسم الكشف (مثل؛ ٠ الطريقة؛ يمكن حساب خلفية الاختبار ويطرح من القيمة الناتجة في الخطوة (د). والمجمل: all GDF-8 تجسيدات بديلة لتحليل في تجسيدات محددة؛ يتصل مضاد جسم الإمساك مع سطح دعامة صلبة؛ أو قارورة تفاعل» مثلا عن طريق الارتباط تساهميا أو غير تساهميا مع السطح. قد يكون هذا الاتصال عن طريق المعالجة الكيميائية أو الإشعاعية Sle مباشر أو غير مباشر. قد يتحسن السطح؛ Ye للتأثير على خواص ارتباط السطح. في تجسيدات محددة؛ بعد اتصال مضاد جسم الإمساك مع العينة البيولوجية وغسله لإزالة المكونات غير المرتبطة. تنخفض التفاعلات البينية غير المحددة إلى الحد الأدنى عن طريق خطوة الإخماد. حيث يضاف مثبت الأس الهيدروجيني المشتمل على عامل إخماد واحد على غير المرتبط تحديدا مع الهدف إلى قارورة التفاعل. قد تشتمل مثبتات protein Jie الأقل؛ ٠ الأس الهيدروجيني للإخماد على مثبتات الأس الهيدروجيني للإخماد؛ المصل؛ مصل الجنين دو/ أو عوامل التفكك غير الأيونية المتوافرة تجاريا. في بعض sgelatin «casein البقري؛ اللبن © التجسيدات؛ تغسل قارورة التفاعل بمثبت أس هيدروجيني مع أس هيدروجيني بين حوالي بصورة acetate أو مثبت Tris مثبت cphosphate مثبت «citrate وحوالي 9؛ مثل مثبت بديلة؛ يكون مثبت الأس الهيدروجيني بين حوالي ؟ أس هيدروجيني و© أس هيدروجيني؛ ٠٠ .GDF-8 مثلاء في طرق التفكك الحمضي لكشف وتقدير إجمالي اختبارها في طرق الاختراع من مصلء دم؛ بلازماء abl قد يتم استخدام العينة البيولوجية خزعة؛ عينة نسيج؛ معلق خلية؛ لعاب؛ مائع معوي؛ مائع دماغي نخاعي, مائع سلي؛ die إفراز غدة ثديية؛ سائل الأوعية الليمفاوية؛ البول؛ العرق؛ مائع زلالي ومائع دمعي. في ll لبن؛ تجسيدات محددة؛ تكون العينة البيولوجية عبارة عن مائع. في بعض التجسيدات؛ يتم اختيار Yo العينة البيولوجية من الدم؛ المصلء والبلازما. في تجسيدات محددة؛ تكون العينة البيولوجية هي بقرة؛ خروف؛ أو دجاجة. la ai إنسان» lia مصل من؛
لم في تجسيدات pal تؤخذ العينة البيولوجية من 358 أو أفراد وتعالج اختياريا قبل الاختبار. على سبيل المثال؛ قد يتم تخفيف العينة. قد يشتمل مثبت التخفيف على كمية ثابتة من عينة بيولوجية مقارنة؛ مختارة لتقابل العينة البيولوجية Lad مثلا للتحكم في تأثير الخلفية أو تدخل المادة البينية للعينة. في أحد التجسيدات؛ تخفف عينة اختبار plasma أدمية في AY 0 أضعاف من مثبت الأس الهيدروجيني )04 مللي جزيئي جرامي من A (Tris-HCI أس هيدروجيني» يشمل ١ مللي جزيئي جرامي من 6:08راع» (a ٠.* جرامي من NaCl و70.05 (حجم/ (Tween 20® (aaa وتحضر تخفيفات العينة البيولوجية بعد A أضعاف في THST مع 717.5 من مصل آدمي مستنفد .GDF-8 تخفف العينة البيولوجية إلى EF TY OT 0 VE VY ل١ A co 14 أو ١78 ضعف. في تجسيدات gyal تخفف ٠ العينة البيولوجية بالتسلسل )1.00 أو )1.7 للحصول على مدى نقاط بيانات تسمح بتأكيد خطية التخفيف وتأثيرات المادة البينية. في بعض المواد البينية للعينة البيولوجية؛ يتم اختيار التخفيف الذي يصل عنده تداخل المادة البينية وحساسية الاختبار إلى الحد الأمثل. لا تتقيد المادة المخففة تحديدا ولكنها قد تشتمل؛ Die على مصل آدميء؛ مصل = مستنفد (GDF-8 مصل فأري؛ مصل فأري مستنفد 0017-8؛ ماء مزال التأين أو مثبتات أس ١٠ هيدروجيني أخرى لها تأثير مثبت GU الهيدروجيني في مدى أس هيدروجيني من حوالي ؟ إلى حوالي od اعتمادا على سواء أتم تنفيذ الاختبار في شروط حمضية of لا. لتحليل GDF-8 الحرء المنفذ عند أس هيدروجيني معادل؛ يصل أس الهيدروجيني إلى حوالي 1.5 إلى حوالي Ao حوالي 1.5 إلى حوالي oY حوالي 7 إلى حوالي 7.8ء. حوالي 7.5 إلى oh حوالي 8 إلى حوالي 8.5 (مثل مثبت الأس الهيدروجيني citrate مثبت الأس الهيدروجيني «phosphate ٠ مثبت الأس الهميدروجيني Tris مثبت الأس الههيدروجيني cacetate أو مثبت الأس الهيدروجيني (borate لتحليل إجمالي «GDF-8 المنفذ عند أس هيدروجيني حمضي؛ يتراوح الأس الهيدروجيني بين حوالي ١ إلى حوالي Yoo حوالي 7.8 إلى حوالي 0.0 حوالي Yeo إلى حوالي oF حوالي ؟ إلى حوالي vie حوالي *.؟ إلى حوالي 4؛ حوالي ؛ إلى حوالي 4.0 أو حوالي 4.0 إلى حوالي coo حوالي (Hoo حوالي eo Yo في بعض التجسيدات؛ يمكن اختياريا تجزئة أو تركيز العينة البيولوجية باستخدام طرق معروفة جيدا ثم تضاف إلى اختبار كما هو موصوف هنا لكشف .GDF-8 يمكن استخدام التجزئة Ley) في ذلك التنقية) أو التركيز؛ مثلا؛ إذا قام تدخل المادة البينية يكشف عامل ضبط
AY
في الاختبار. تشتمل تقنيات التجزئة والتركيزء دون تحديد؛ على الطرد المركزي؛ GDF-8 trichloroacetic acid ترسيب <polyethylene glycol ترسيب cammonium sulfate ترسيب Jia مرتبط مع شريك ارتباط نوعي resin الترسيب المناعي مع Jin) تقنيات انجذاب (TCA) تقنيات التحليل الكروماتوجرافي؛ وتقنيات ((GDF-8 مضاد جسم مضاد (Jie مضاد جسم؛ فصل أخرى. ٠ بيولوجية مأخوذة قبل؛ أثناء أو بعد due يمكن جمع العينة البيولوجية من فرد أصليء أو ؛١ إعطاء عامل ضبط 001-8. على سبيل المثال؛ يمكن الحصول على عينة من الفرد بعد أو أكثر من إعطاء عامل ضبط ١ Yo ٠١ Yo كك لأ ىنال ال كل oY
AY ف AY كت FY كما يمكن الحصول على عينة بيولوجية بعد فت .0074 أو أسبوع أو أكثر من إعطاء عامل ضبط 6117-8. في بعض الحالات؛ تكون 11 ae. النقاط الزمنية لما يزيد إلى عام أو أكثر ملائمة. تختبر العينات البيولوجية لأجل كل من المجمل والحر. يعتبر تحليل إجمالي 0601-8 مهما تحديدا في الأفراد المعالجين GDF-8 حيث تتدخل هذه العوامل في قدرة عامل على كشف أو إمساك على (GDF-8 بعوامل ضبط أصبحت طريقة التفكك الحمضي أو الحراري المستخدمة GA في عينة بيولوجية. GDF-8 ربط هي طريقة هامة تحديدا. GDF-8 في تحليل إجمالي ١ في تجسيد محدد؛ يتصل قاسم تام من العينة البيولوجية المراد اختبارها مع مضاد جسم أو =) دقيقة؛ أو ١١-١ (Jie) ارثباط مولد مضاد إمساك ويحضن لمدة زمنية كافية protein
GDF- ؟؟"مئوية) للسماح بربط مضاد جسم الإمساك مع (Jia) ساعات) وتحت شروط مناسبة إن وجدء في العينة البيولوجية والسماح بتكوين معقدات مضاد الجسم/ 0117-8. في تجسيد 8 آخرء يتم تفاعل مضاد الجسم/ 6117-8 تحت شروط استخدام الطريقة العادية الاختبارات Ye المناعية التقليدية. يشتمل الإجراء النموذجي على تحضين أو السماح بإقامة نظام تفاعل يتضمن مضاد جسم إمساك وعينة بيولوجية عند درجة حرارة لا تزيد عن 5؟*مئوية؛ مثل؛ بين ؛"مئوية أو بين حوالي ٠ 4*مئوية؛ أو بين حوالي ؟7"مئوية وحوالي ٠ وحوالي Buse حوالي و4 ساعة؛ مثل؛ بين حوالي ساعة واحدة و١٠ ساعة. 0.0 بعد فترة التحضين؛ يغسل معقد مضاد الجسم/ 0611-8؛ في بعض الحالات؛ مع مثبت Yo الأس الهيدروجيني لإزالة المواد المنحلة غير المرتبطة. في تجسيدات أخرى؛ يجرى اختبار
AA
متزامن؛ يتم فيه إضافة العينة البيولوجية ومضاد جسم الكشف إلى قارورة التفاعل في نفس الوقت. في تجسيدات محددة؛ يتم فيها إضافة مضاد جسم الكشف بعد العينة البيولوجية؛ يشتمل
GDF-8 الجسم/ alias الإجراء على تحضين أو السماح بإقامة نظام تفاعل يتضمن معقد ومضاد جسم كشف عند درجة حرارة لا تزيد عن ©4"مئوية؛ مثل بين حوالي ؟"مئوية وحوالي ٠ cio "مئوية أو بين حوالي 0.5 و50 ساعة؛ 4 ٠ أو بين حوالي © 7"مئوية وحوالي ؛ةيوثم“٠ ساعة. Yo أو بين حوالي ساعة واحدة مضاد أو أجزاء منهما alge ارتباط protein في بعض التجسيدات؛ يشتمل مضاد جسم» الكشف على علامة بارزة. في تجسيدات إضافية؛ يتم الكشف عن مضاد جسم الكشف بطريقة عن طريق عامل كشف. في بعض التجسيدات؛ يكون عامل الكشف زائداء Ol غير مباشرة؛ ٠ بحيث ترتبط جوهريا كل مضادات أجسام الكشف الموجودة في قارورة التفاعل. هي أي جزيء مرتبط أو ile في بعض التجسيدات؛ قد تكون علامة مقترن بعضو ارتباط محدد قادر على الإنتاج التلقائي لإشارة بارزة دون إضافة
SH 1251 عامل كاشف مساعد. تشتمل بعض التجسيدات على نظائر إشعاعية (مثل fluorescein ءرضخأ fluorescent protein «luciferase (مثل؛ fluorophore ¢(14C ٠ 1-N-(2,2,6,6-tetramethyl-1- «tetramethylrhodamine isothiocyanate «isothiocyanate «phycocyanin «Ji x) صبغة «(oxyl-4-piperidyl)-5-N-(aspartate)-2,4-dinitrobenzene جزيئات ضوئية؛ تشتمل جزيئات ضوئية ((o-phthalaldehyde «Texas Red «phycoerythrin غروانية؛ جسيمات معادن silver غروانية؛ جسيمات gold كيميائية وضوئية حيوية؛ جسيمات محاليل صبغية؛ Jie جسيمات لحظية التلون polystyrene جسيمات صبغة (yal غروانية ٠٠ المتلونة. تعرف العديد من جزيئات العلامة المناسبة للماهرين في الفن وقد يتم latex وجسيمات استخدامهم في طرق الاختراع. قلويء phosphatase «J's enzyme في بعض الحالات؛ قد تكون العلامة عبارة عن في تجسيدات مختلفة؛ يتم .B-galactosidase أو «glucose oxidase الفجل الحارء peroxidase المقابل؛ enzyme المحددة لإنتاج؛ في وجود enzymes اختيار المواد المقرر استخدامها مع Yo مع مضاد enzyme قد يقترن luminescence أو «fluorescence تغير ملحوظ في اللون؛ amination أو تشابك glutaraldehyde ارتباط مولد مضاد بواسطة protein sl الجسم
قم الاختزالي. كما سيتضح بسهولة؛ يوجد العديد من تقنيات الاقتران المختلفة والتي تتوافر بسهولة للماهرين في الفن. في تجسيد مفضل؛ يكون مضاد جسم أو protein ارتباط مولد مضاد الكشف معالج مع صناماط. إن مضادات أجسام مضاد 6017-8 المفيدة كمضادات أجسام كشف؛ تكون biotinylated 0 كما هو موضح بالمثال ١ (انظر Sle مثال ١؛ المقطع ١ الفقرة ©). تكون العوامل الكاشفة biotinylation قادرة على تعليم proteins بكفاءة؛ Le في ذلك مضادات ١ لأجسام . تكون النسب الجزيئية جرامية من مشتقات biotin إلى مضاد الجسم هي حوالي Ye ao 0٠١ 40 أو 86 إلى »٠ وقد تختلف أزمنة التفاعل؛ تركيزات المواد المتفاعلة؛ ودرجات الحرارة لضبط كمية biotin المندمج في التفاعل. تعتبر مشتقات biotin معروفة جيدا أو متوافرة في الفن؛ بما في ٠ ذلك الأذرع المباعدة المتغيرة؛ تحسينات للتأثير على قابلية الذوبان» و/أو مجموعات متفاعلة للسماح بانشقاق أجزاء biotin قد يتم استخدام succinimidyl esters من biotin ومشتقاته؛ Les في ذلك sulfosuccinimidyl esters القابلة للذويان لإجراء biotinylation لأجل «GDF-8 مثلاء لتقدير كمية biotin المندمج؛ تستخدم تقنيات قياسية وتحليلية معروفة جيدا تشمل؛ مثلا؛ التحليل الكروماتوجرافي السائل عالي ضغط الطور العكسي؛ التحليل الطيفي الكتلي؛ إلخ. Ve بصورةٍ إضافية؛ تتوافر مجموعات تجارية لتقدير biotin بواسطة اختيارات قياس اللون أو قياس ee ey Bebe sma «Pierce «EZ™ Biotin Quantitation Kit يستخدم HABA (2-(4’-hydroxyazo benzenc)- -(benzoic acid) في أحد التجسيدات؛ يكون RK-22 المعالج مع biotin هو عامل كشف للكشف عن GDF- ٠ 8 المرتبط مع RK35 في تجسيد محدد؛ يضاف عامل الكشف المعلم enzyme و/أو المعالج مع biotin مثل مضاد الجسم أو protein ارتباط مولد مضاد إلى معقد مضاد الجسم/ (GDF-8 ويترك للارتباط. يزال العامل الكاشف الزائد بالغسل»؛ ويضاف عندئذ محلول يحتوي على ale ملاثمة إلى قارورة التفاعل. تخضع المادة إلى تفاعل تحفيز enzyme الذي يتسبب في تغير قابل Yo للقياس بمقياس الطيف الضوئي والذي يشير إلى كمية GDF-8 الموجودة في العينة. على سبيل المثال؛ يمكن الكشف عن مضاد جسم أو protein ارتباط alge مضاد الكشف المعالج مع biotin خلال تفاعله البيني مع اقتران peroxidase Jie «avidin enzyme الفجل YAER
الحار avidin بعد التحضين المتعاقب مع اقتران avidin enzyme ومواد مناسبة مولدة للون أو مولدة الاستشعاع. كما يمكن الكشف عن مضاد جسم كشف معالج مع biotin بواسطة streptavidin معلم -Europium في تجسيدات معينة؛ يتم الكشف عن معقد مضاد جسم/011-8/ مضاد جسم المرتبط ٠ بسطح قارورة التفاعل عن طريق التقديرات النوعية والكمية لإشارة العلامة. في بعض الحالات؛ تقاس العلامة مباشرة؛ lia عن طريق fluorescence أو luminescence أو بطريقة غير مباشرة؛ خلال إضافة مادة؛ في تجسيدات أخرى تقاس العلامة بعد التحضين مع عامل كاشف إضافي. في التجسيدات التي تكون فيها العلامة هي biotin يضاف اقتران Mie) avidin peroxidase الفجل الحار) في خطوة لاحقة. في أحد التجسيدات المحددة»؛ يرتبط اقتران avidin ٠ مع مضاد جسم أو protein ارتباط مولد مضاد الكشف الثابت. يزال اقتران avidin الزائد بالغسل. تضاف عندئذ مادة enzyme مما يتسبب في حدوث تغير قابل للقياس في؛ Ola اللون» fluorescence أو -lumincscence في بعض التجسيدات؛ تكون مادة peroxidase الفجل الحار هي -3,3",5,5tetramethylbenzidine التقدير الكمي لأجل GDF-8 الحر والمجمل Vo قد يتم تقدير مستويات 01-8 باستخدام طرق معروفة للماهرين في الفن. في تجسيدات محددة؛ تقارن مستويات GDF-8 في العينة البيولوجية مع المستويات المعروفة؛ كالناتجة؛ a باستخدام منحنى قياسي. يتضح توليد المنحنيات القياسية لأجل 6017-8 في المثال 28.10 يشتمل المنحنى القياسي على 0101-8 من تركيزات معروفة مخففة في مثبت الأس الهيدروجيني. في تجسيدات معينة يكون مثبت الأس الهيدروجيني هو مصل؛ مثل؛ مصل ٠ آدميء مصل فأري؛ مصل حيوان pu مصل بقري؛ أو مصل خراف. يفرغ المصل اختياريا من GDF-8 الداخلي المنشاً قبل إضافة التركيزات المعروفة من 0101-8. يمكن الحصول على المصل من ماشية (Belgian Blue المحرومة طبيعيا من GDF-8 في أحد التجسيدات؛ تشتمل طريقة التقدير الكمي لأجل 0617-8 الحر في Lie بيولوجية على اتحاد مضاد جسم أو protein ارتباط alse مضاد إمساك 0171-8 وعينة بيولوجية تحت Yo شروط تسمح بارتباط (GDF-8 عند وجوده في العينة البيولوجية؛ مع واحد أو أكثر من مضادات أجسام الإمساك التي تشكل معقد GDE-8 مضاد جسم أو protein ارتباط مولد مضاد إمساك؛ إضافة مضاد جسم أو protein ارتباط مولد slime كشف GDF-8 معلم إلى الدعامة
الصلبة من الخطوة (ب)؛ (د) الكشف عن المعقدات المتكونة بين معقد GDF-8 مضاد جسم الإمساك ومضاد جسم الكشف عن طريق الكشف عن الإشارة المتولدة من العلامة على مضاد جسم كشف ¢GDF-8 و(ه) تقدير مستوى 0117-8 في العينة البيولوجية عن طريق مقارنة الإشارة المتولدة بواسطة المعقدات المحتوية على مضاد جسم كشف 0017-8 المعلم مع ٠ المنحنيات القياسية المتولدة بواسطة تحديد هويات الإشارة المقابلة لكميات معروفة من GDF- 8 تتشابه طرق التقدير الكمي لإجمالي (GDF-8 فيما عدا أن العينة البيولوجية يتم تخفيفها في مثبت أس هيدروجيني حمضي. طرق معالجة؛ تحسين؛ aie تثبيط تطور الاضطرابات المصاحبة مع GDF-8 Ve إن تدخل 6017-8 في تطور و/أو تنظيم اضطرابات مصاحبة مع Mie GDF-8 استقرار glucose العظم؛ العضلات الهيكلية؛ إلخ؛ واكتشاف مضادات 0101-8 محددة جديدة من الاختراع» يوفر طرق لمعالجة؛ تحسين أو منع الاضطرابات المصاحبة مع (GDF-8 مثل؛ الاضطرابات العضلية؛ الاضطرابات العضلية العصبية؛ اضطرابات الانحلال العظمي؛ اضطرابات العظم المحثة أو الأيضية؛ اضطرابات أيض glucose الاضطرابات الدهنية؛ ٠ وإلاضطرابات المتعلقة insulin بالإضافة إلى ذلك؛ تسمح المضادات بتشخيص؛ توقع ورصد تطور هذه الاضطرابات عن طريق قياس مستوى 6121-8 في عينة بيولوجية. بصورة محددة؛ يمكن استخدام مضاد epitope تخص 61-8 (مثل؛ مماتلات peptide لهاء polynucleotides تثبيطية (Led مضادات أجسام لهاء جزيئات صغيرة؛ (Fd) من الاختراع لمعالجة Hd يعاني من اضطراب مصاحب مع 001-8؛ أو في طريقة تمييز سواء أكان ٠ المريض يعاني من الاضطراب المصاحب مع 0017-8 أو لا. تكون مضادات الاختراع الحالي مفيدة لمنع؛ تشخيص؛ أو معالجة اضطرابات مصاحبة مع GDF-8 الطبية المختلفة في آدميين أو حيوانات. تستخدم المضادات لتثبيط» خفض و/أو معادلة واحد أو أكثر من الأنشطة المصاحبة مع 001-8. والأفضل؛ أن تقوم المضادات بتثبيط أو خفض واحد أو أكثر من أنشطة 0017-8 بالنسبة إلى 6017-8 في حالة عدم وجود Yo مضادات الاختراع. في تجسيدات محددة؛ تقوم مضادات الاختراع بتثبيط نشاط GDF-8 بنسبة ٠ على الأقل ريفضل ١ت تتشت كت CTA CTT للك الاك كلا كلا خلا فى GAY 4 1 أو TAA على الأقل؛ والأفضل 50 JAY AY OY 294 والأفضل من ذلك ay الناضج والذي لا يرتبط بواحد أو أكثر GDF-8 protein على الأقل بالنسبة إلى 7) +0 JY) 5 مثلاء في (GDF-8 من مضادات أجسام مضاد 017-8. يمكن قياس تثبيط أو معادلة نشاط وآخرين» أعلاه؛ وفي Thies كما هو موصوف في pGL3(CAGA)I2 اختبار الجين المخبر اختبارات مستقبل 8008118 كما هو موضح في الأمثلة.
° تشتمل الاضطرابات الطبية التي يتم تشخيصهاء توقعهاء رصدها؛ معالجتها؛ تحسينها أو منعها بالمضادات المكتشفة حاليا على اضطرابات مصاحبة مع Jie (GDF-§ الاضطرابات العضلية أو العضلية العصبية؛ مثل؛ الحثل العضلي MD) يشمل الحثل العضلي (Duchenne التصلب الجافي الضموري (ALS) ضمور العضلات» ضمور عضوء الهشاشة؛ متلازمة النفق الرسغي» مرض روي انسدادي lial فقدان قوة العضلات؛ الدنف؛
٠ ومتلازمات ضمور العضلات lie) الناتجة عن أمراض وحالات أخرى). بالإضافة إلى ذلك تشتمل الاضطرابات الطبية الأخرى التي يتم تشخيصها؛ توقعها؛ء رصدهاء معالجتهاء تحسينها أو منعها بواسطة مضادات أجسام 0121-8 على اضطرابات أنسجة دهنية Jie السمنة؛ السكر من النوع of فشل تحمل cglucose متلازمات أيضية (Ji) متلازمة ¢(X مقاومة insulin المحثة بالإصابات الرضية (مثل الحروق أو عدم توازن «(nitrogen أو أمراض انحلال العظم
٠ (مثل؛ التهاب المفاصل؛ هشاشة العظام). في تجسيد مفضل؛ وغير محدد؛ من الاختراع؛ تشتمل الاضطرابات الطبية التي يتم تشخيصها؛ توقعها؛ رصدهاء معالجتهاء تحسينها أو منعها بالمضادات المكتشفة Ulla على اضطرابات عضلية أو عضلية عصبية. في تجسيد أفضل؛ غير محدد؛ من الاختراع» يكون الاضطراب العضلي والعضلي العصبي الذي يتم تشخيصه؛ توقعه؛ رصده؛ معالجته؛ تحسينه أو منعه بالمضادات المكتشفة هنا هو MD أو ALS
.9 تشتمل الاضطرابات الطبية الأخرى الممكن تشخيصها؛ معالجتهاء؛ تحسينها أو منعها بواسطة المضادات المكتشفة حاليا على الاضطرابات المصاحبة لفقد العظم؛ والتي تشتمل هشاشة العظام؛ خاصة عند كبار السن والنساء بعد سن اليأسء الهشاشة بسبب 40 نقص كثافة العظم؛ التهاب المفاصل؛ والكسور المتعلقة بالهشاشة. تشتمل aly واضطرابات العظم الأيضي المستهدف على انخفاض كتلة العظم بسبب علاج
glucocorticoid Yo الحاد؛ الفشل الغددي المبتسر؛ كبح androgen نقص فيتامين د؛ فرط نشاط الغدة الدرقية؛ نقص العوامل الغذائية؛ وفقدان الشهية العصبي. يفضل استخدام مضادات
YALE
KY
الاختراع لمنع؛ تشخيص؛ تحسين؛ أو معالجة هذه الاضطرابات الطبية في كائئات ثديية؛ تحديدا في الآدميين؛ مثل النساء الحوامل أو المتوقع حملهم. يتم إعطاء مضادات الاختراع الحالي بكميات فعالة علاجيا. بصفة عامة؛ تتنوع الكمية ونوع الكائن؛ الإضافة إلى شدة الحالة الطبية في الكائن. قد Alla المؤثرة علاجيا مع عمر؛ تتحدد الجرعة بواسطة الطبيب وتضبط؛ عند الضرورة؛ لملائمة التأثيرات الملاحظة للعلاج. © تتحدد السمية والكفاءة العلاجية لهذه المركبات عن طريق إجراءات دوائية قياسية في مزارع من الجمهرة) 75 ٠ الخلية أو حيوانات التجارب؛ مثلاء لتحديد 11050 (جرعة مميتة لأجل من الجمهرة). تكون نسبة الجرعة بين التأثير السام 75 ٠ و2050 (الجرعة المؤثرة علاجيا في هي المؤشر العلاجي وتفضل مؤشرات علاجية أكبر لتثبيط 5050 /150 «gf والعلاجي» المضادات. ٠ يمكن استخدام البيانات الناتجة عن اختبارات مزرعة الخلية والدراسات الحيوانية في تكوين مدى جرعة للاستخدام في الآدميين. تقع جرعة هذه المركبات بين مدى تركيزات الدورة الدموية أو منعدمة. تتنوع الجرعة في هذا المدى اعتمادا على شكل الجرعة Jif تشمل 2050 مع سمية
Ladle وطريقة الإعطاء. لأي مضاد مستخدم في الاختراع الحالي؛ تقدر مبدئيا الجرعة الفعالة plasma من اختبارات مزرعة الخلية. تتكون الجرعة في نماذج حيوانية لتحقيق مدى تركيز Ve الدورة الدموية الذي يشمل 1050 (مثل تركيز مضاد الاختبار الذي يحقق نصف التثبيط الأقصى للمتلازمات أو النشاط البيولوجي) كما هو محدد في مزرعة الخلية. قد يتم قياس عن طريق التحليل الكروماتوجرافي السائل عالي الأداء. يميكن «Nia cplasma المستويات في رصد تأثيرات أي جرعة محددة بواسطة الاختبار الحيوي المناسب. تحتوي أمثلة الاختبارات
A Niger alla ead ٠
GDF8 اختبارات معتمدة على الاستنساخ؛ اختبار ارتباط مستقبل/ (DNA على اختبارات نسخ اختبارات معتمدة على تباين الخلايا الدهنية الأولية؛ creatine kinase اختبارات «protein في الخلايا الدهنية؛ والاختبارات المناعية. glucose اختبارات معتمدة على امتصاص بصورة عامة؛ يتم إعطاء التركيبات بحيث يتم إعطاء المضادات أو أجزاء ارتباطها عند مجم/ ٠٠١ ميكروجرام/ كجم إلى ١ مجم/ كجم؛ من ٠5١0 ميكروجرام/ كجم إلى ١ جرعة من Yo مجم/ Yo ميكروجرام/ كجم إلى ١ مجم/ كجم؛ من 5٠ ميكروجرام/ كجم إلى ١ كجم؛ من مجم/ كجم؛ ١ ميكروجرام/ كجم إلى ١ مجم/ كجم؛ من ٠١ ميكروجرام/ كجم إلى ١ كجم؛ من q¢ ميكروجرام/ ٠٠١ ميكروجرام/ كجم إلى ٠١ مجم/ كجم؛ من ١ ميكروجرام/ كجم إلى ٠١ من مجم/ كجم. ١ مجم/ كجم؛ و0٠٠5 ميكروجرام/ كجم إلى ١ ميكروجرام إلى ٠٠١ كجم؛ من بصورة مفضلة؛ يتم إعطاء المضادات كجرعة قرص دوائي لرفع مستويات تدوير المضادات إلى أقصى حد لأكبر مدى زمني بعد الجرعة. يستخدم التشريب المستمر قبل؛ بعد أو في محل الدوائي. all جرعة © 011:8 طرق تحديد العوامل العلاجية للاضطرابات المصاحبة مع يوفر جانب آخر من الاختراع طريقة لتحديد عوامل علاجية مفيدة في علاج؛ مثلا؛ الجسيمات الدهنية والعظم. إن اختبارات الفحص الملائمة؛ مثل glucose اضطرابات أيض تكون معروفة في الفن. في اختبار الفحص؛ يتكون خليط (ELISA الاختبارات المعتمدة على protein يخص 61118 أو مضاد جسم أى peptide ربط أول بواسطة اتحاد مضاد؛ مماثل ٠ ارتباط مولد مضاد الاختراع ومركباته الترابطية؛ 0118؛ وتقاس كمية الارتباط بين المركب كما يتكون خليط ربط ثاني بواسطة (MO) الترابطي ومضاد الجسم في خليط الارتباط الأول اتحاد المضاد؛ المركب الترابطي؛ والمركب أو العامل المقرر فحصه؛ وتقاس كمية الارتباط بين تقارن عندئذ كميات الارتباط (M1) المركب الترابطي ومضاد الجسم في خليط الارتباط الثاني يعتبر المركب أو MOM في خلطات الارتباط الأول والثاني؛ مثلاء عن طريق حساب نسبة ٠ إذا لوحظ انخفاض ارتباط خليط الارتباط الأول (GDP قادر على التفاعل البيني مع Jalal يتم إنتاج وصياغة خليط الارتباط ضمن مستوى الماهر في الفن؛ وقد .)١ > MO MI (أي؛ تحتوي خلطات الارتباط هذه على مثبتات الأس الهيدروجيني وأملاح لازمة لتعزيز أو لتحسين وقد تدخل اختبارات المقارنة الإضافية في اختبار الفحص الخاصة بالاختراع. cali) يتم تحديد المركبات القادرة على خفض ارتباط مضاد المركب الترابطي بنسبة تصل إلى Ye )؛ ويفضل أن تكون أكبر من حوالي 7780 ثم ٠.1 < MO MIL على الأقل (أي 7٠١ حوالي مثل اختبار gyal تتحل ثانوياء عند الرغبة؛ للقدرة على تثبيط نشاط 60178 في اختبارات أو الاختبارات في الجسم والاختبارات المعتمدة على الخلية كما هو موضح (ACtRIIB ارتباط في الأمثلة أو كما هو معروف جيدا في الفن. الجزئيات الصغيرة Yo في كائن حي (أو كائن) مصاب (أو معرض للإصابة) GDFS يمكن تثبيط نشاط باضطراب مصاحب مع 00178؛ أو في خلية من هذا الكائن الذي يعاني من هذه
ان الاضطرابات»؛ وذلك من خلال استخدام جزيئات صغيرة مضادة (عادة جزيئات صغيرة عضوية) التي تعارض؛ أي؛ تبط نشاط 01378. يمكن تحديد جزيئات صغيرة مضادة جديدة بواسطة طرق الفحص الموصوفة أعلاه وقد يتم استخدامها في طرق علاج الاختراع الحالي الموصوفة هنا .
° بصورة عكسية؛ تتم زيادة نشاط 6018 في كائن حي (أو كائن) مصاب (أو معرض للإصابة) باضطراب مصاحب لنشاط و/أو لإظهار 61018 منخفض أو اضطراب مصاحب لمستويات 00178 المنخفضة ويتم ذلك من خلال استخدام جزيئات صغيرة (جزيئات صغيرة عضوية) تعضد؛ أي تعزز نشاط 017178. قد يتم تحديد الجزيئات الصغيرة المعضدة الجديدة بواسطة طرق النخل وقد يتم استخدامها في طرق علاج الاختراع الحالي الموصوفة هنا.
01018 توقع؛ ورصد تطور_الاضطرابات المصاحبة مع (adds طرق ٠ العظم؛ العضلات؛ والاضطرابات الدهنية؛ colucose بالإضافة إلى معالجة مثلاء أيض يوفر الاختراع الحالي طرق لتشخيص هذه الاضطرابات عن طريق الكشف عن انخفاض أو مائع غسل القصبي الحويصلي؛ plasma «Jaane زيادة 0118 في عينة بيولوجية؛ مثل؛ أو (diagnostic) النسيج العضلي)؛ إلخ. يشير مصطلح 'تشخيصي (Jia) نخامة؛ خزعة إلى تحديد وجود أو غياب حالة مرضية. تشتمل طرق (diagnosing) "تشخيص Ve تحديد كمية اختبار Mw التشخيص على الكشضف عن وجود 00118 عن طريق؛ في عينة بيولوجية من كائن (كائن ثديي آدمي أو غير آدمي)؛ GDF8 polypeptide من ومقارنة كمية الاختبار مع كمية أو مدى عادي (كمية أو مدى من فرد (أفراد) لا يعاني من هذا بينما لا تتمكن طريقة تشخيص محددة من توفير 60178 polypeptide الاضطراب) لأجل
٠ تشخيص حاسم للاضطرابات المصاحبة مع «GDI ويمكن أن توفر الطريقة دلالة إيجابية تساعد في التشخيص.
كما يوفر الاختراع الحالي طرق لتوقع حدوث الاضطرابات المصاحبة مع (GDF مثل؛ أيض glucose العظم؛ العضلات والاضطرابات الدهنية؛ بالكشف عن زيادة المكونات الخلوية لأجل . يشير مصطلح "توقعي 00800510 أو 'توقع (ع01:08:005108)" إلى توقع
vo التطور Gif, الشدة المحتملة لحالة مرضية. تشتمل طرق التوقع على تحديد كمية اختبار من
8 في عينة بيولوجية من كائن؛ ومقارنة كمية الاختبار بالكمية أو المدى المتوقع (مثل؛
كمية أو مدى من أفراد يعانون من مستويات مختلفة من شدة ALS مثلا) لأجل 00178.
تتناسب كميات مختلفة من 0118 في عينة الاختبار مع توقع معين لاضطراب مصاحب مع
8. يؤدي الكشف عن كمية 61278 عند مستوى متوقع محدد إلى التوقع بحالة الكاثئن. كما يوفر الاختراع الحالي طرق لرصد مسار أيض glucose عظم؛ عضلات واضطرابات دهنية مصاحبة مع 01718 عن طريق الكشف عن زيادة أو انخفاض المكونات الخلوية لأجل .GDF§ © تشتمل طرق الرصد على تحديد كميات اختبار 6018 في عينة بيولوجية مأخوذة من كائن لمرة أولى وثانية؛ مع مقارنة الكميات. يشير التغير في كمية 0118 بين المرةٍ الأولى والثانية إلى تغير مسار شدة الاضطرابات المصاحبة مع 01178. يعرف الماهر في الفن أنه في الاضطرابات المصاحبة مع 61288 وحيث تفضل زيادة الكتلة العضلية؛ يشير انخفاض كمية protein و/أو نشاط 0018 بين المرة الأولى والثانية إلى سكون الاضطراب؛ وتشير زيادة ٠ الكمية إلى توقع الاضطراب. بصورة عكسية؛ في الاضطرابات المصاحبة مع 01018 حيث يفضل انخفاض الكتلة العضلية؛ يشير انخفاض كمية protein و/أو نشاط 0018 بين المرة الأولى والثانية إلى تطور الاضطراب؛ كما تشير زيادة الكمية إلى سكون الاضطراب. كما تكون اختبارات الرصد مفيدة لتقييم كفاءة التدخل العلاجي المحدد (مثل؛ انعكاس و/أو تخفيض
المرض) في مرضى معالجين من الاضطرابات المصاحبة مع GDI Vo يمكن استخدام مضادات الاختراع الحالي لتشخيص؛ توقع أو رصد بالكشف عن وجود 98 في الجسم أو في المعمل. تكون طرق الكشف معروفة جيدا في الفن وتشمل ELISA الاختبار المناعي الإشعاعي؛ اختبار البقعة المناعية؛ اختبار بقعة (Western اختبار الاستشعاع المناعي؛ اختبار الترسيب المناعي؛ وتقنيات Ailes أخرى. قد تتوافر المضادات أيضا في مجموعة تشخيصية تضم واحد أو أكثر من هذه التقنيات الكشف عن .GDF8 وقد Ye تشتمل هذه المجموعة على مكونات أخرى؛ تعبئة؛ تعليمات؛ أو مواد أخرى للمساعدة في الكشف عن protein واستخدام المجموعة. عند استخدام المضادات لأغراض (Gad ll التوقع؛ أو الرصد؛ يفضل تحسين هذه المضادات؛ Nie مع مجموعة مركبات ترابطية (biotin Jie) أو مجموعة دلالة بارزة Jie) مجموعة cfluorescent مماثل إشعاعي أو (enzyme عند الرغبة؛ قد يتم تعليم المضادات © (سواء أحادية التكافؤ أو عديدة التكافو) باستخدام تقنيات تقليدية. تشتمل العلامات المناسبة على chromophores «fluorophores ذرات إشعاعية؛ عامل كاشضف شديد الإلكترون؛ «enzymes ومركبات ترابطية لها شركاء ارتباط محدد. يتم نموذجيا الكشف عن enzymes عن
Vv
طريق نشاطهم. على سبيل المثال؛ يمكن الكشف عن peroxidase الفجل الحار بقدرته على تحويل (TMB) tetramethylbenzidine مع صبغة زرقاء؛ مقدرة كميا بواسطة قياس الطيف الضوئي. تشتمل العلامات المناسبة الأخرى على A IgG streptavidin sl avidiny biotin «protein وأزواج مركبات ترابطية لمستقبل متعددة معروفة في الفن. تتضح بسهولة التعديلات
٠ والاحتمالات للماهرين في الفن؛ وتعتبر مكافئات ضمن مجال الاختراع الحالي.
تركيبات دوائية وطرق للإعطاء يوفر الاختراع الحالي تركيبات؛ تشمل مضادات الاختراع المكتشفة حالياء أي؛ «polypeptides 001701101601108 نواقل؛ مضادات أجسام؛ أجزاء مضاد جسم أو protein ارتباط مولد مضاد وجزيئات صغيرة. تكون هذه التركيبة مناسبة للاستخدام الدوائي والإعطاء ٠ للمرضى. تشتمل التركيبات نموذجيا على واحد أو أكثر من جزيئات الاختراع الحالي؛ يفضل مضاد جسم أو protein ارتباط مولد مضاد؛ ومادة مسوغة مقبولة دوائيا. يمكن استخدام مضادات الاختراع في المعمل؛ خارج الجسم أو مندمجة في تركيبة دوائية عند الاتحاد مع مادة حاملة مقبولة دوائيا. حسب الاستخدام هناء تشتمل عبارة 'مادة مسوغة مقبولة دوائيا "(pharmaccutically acceptable excipient) على أي وكل مذيب؛ محلول؛ مثبت الأس ٠ الهيدروجيني؛ أوساط تشتيت؛ عوامل تغليف؛ عوامل مضادة للبكتيريا ومضادة للفطريات؛ محلول متساوي التوتر وعوامل تأخير الامتصاص؛ إلخ؛ ally تكون ملائمة للإعطاء الدوائي. قد تحتوي هذه التركيبة؛ بالإضافة إلى مضادات الاختراع ومادة حاملة؛ على مواد تخفيف متعددة؛ مواد حشوء؛ أملاح؛ Gl Sie أس هيدروجيني»؛ مواد تثبيت؛ مواد إذابة ومواد أخرى معروفة جيدا في الفن. يشير المصسطلح Joie’ دوائيا "(pharmaceutically acceptable) ٠ إلى مواد غير سامة لا تتدخل في فاعلية النشاط البيولوجي للمقومات النشطة. تعتمد خواص الحامل على طريقة الإعطاء. يعتبر استخدام هذه الأوساط والعوامل لمواد نشطة دوائيا هو أمر معروف جيدا في الفن وقد تحتوي التركيبات أيضا على مركبات نشطة أخرى ig وظائف علاجية تكميلية؛ إضافية؛ أو تعزيزية. كما توضع التركيبات الدوائية في حاوية؛ عبوة؛ أو موزع أدوية مع تعليمات عن كيفية الإعطاء. Yo قد تأخذ التركيبة الدوائية الخاصة بالاختراع شكل جسيم دهني يتحد فيه مضاد الاختراع؛ بالإضافة إلى أوساط حاملة مقبولة دوائيا أخرى؛ مع عامل كاره للماء Jie الدهون الموجودة في شكل متراكم كأيونات غروية؛ طبقات أحادية غير قابلة للذوبان؛ بلورات سائلة؛ أو طبقات YAEL aA رقائقية في محلول مائي. تشتمل الدهون المناسبة للتكوين الدهني؛ دون تحديدء على «saponin ¢phospholipids «lysolecithin «sulfatides «diglycerides «monoglycerides إلخ. يدخل تحضير هذه المستحضرات الدهنية ضمن مستوى الماهر في الفن. ebile acids (therapeutically effective Ladle كما هو مستخدم هناء يشير مصطلح "كمية مؤثرة كمية كل مكون نشط في الطريقة أو التركيبة الدوائية والتي تكفي laa) (صنمصة" إلى © تحسين المتلازمات؛ الشفاء؛ أو زيادة معدل شفاء بعض (Jia لإظهار فائدة واضحة للمريض؛ الحالات. عند تطبيق هذا المصطلح على مقوم نشط فردي؛ يعطى بمفرده؛ فإنه يشير إلى المقوم وحده. عند التطبيق على اتحاد؛ فإن هذا المصطلح يشير إلى كميات متحدة من المقومات النشطة التي تتسبب في تأثير علاجي؛ سواء تم إعطائها في اتحاد؛ تتابعي أو تزامني. ٠ عند تطبيق طريقة لمعالجة أو استخدام الاختراع الحالي؛ تعطى كمية مؤثرة علاجيا من؛ مضاد يخص 01278 إلى كائن؛ مثل؛ كائن ثديي (مثل؛ الإنسان). يتم إعطاء مضاد «is الاختراع وفقا لطريقة الاختراع وحده أو في اتحاد مع علاجات أخرى مثل العامل المضاد للالتهاب. عند الإعطاء المشترك مع واحد أو أكثر من العوامل؛ يمكن إعطاء مضاد الاختراع تزامنيا مع العامل الثاني؛ أو تتابعيا. عند الإعطاء التتابعي؛ يقرر الطبيب المعالج النظام Vo الملائم لإعطاء مضاد الاختراع في اتحاد مع عوامل أخرى. التركيبات الدوائية منهاء في (Jie في أحد التجسيدات؛ يتم إعطاء مضادات الاختراع؛ علاج اتحادي»؛ أي؛ في اتحاد مع عوامل أخرى مثل؛ العوامل العلاجية المفيدة لعلاج حالات أو اضطرابات مرضية؛ مثل الاضطرابات العضلية؛ الاضطرابات العضلية العصبية؛ اضطرابات العظم المحثة أو الأيضية؛ اضطرابات دهنية؛ اضطرابات ball اضطرابات تحلل ٠ مثلا؛ بالإضافة إلى الاضطرابات الالتهابية dnsulin أو اضطرابات متعلقة ب glucose أيض في هذا السياق إلى إعطاء العوامل "(in combination) والحساسية. يشير مصطلح "في اتحاد تزامنيا أو تتابعيا. عند الإعطاء التتابعي؛ عند بداية إعطاء Lal في نفس الوقت جوهريا؛ المركب الثاني يفضل أن يبقى أول المركبين مكتشف عند تركيزات فعالة في موضع المعالجة *؟ أو في الكاثن. تتكون التركيبة الدوائية للاختراع لتناسب الطريقة المقررة لإعطائها. تكون طرق الإعطاء معروفة للماهرين في الفن. كما يمكن الحصول على تركيبات يمكن إعطائها موضعيا أو
معوياء أو تكون قادرة على التنقل خلال الأغشية المخاطية. يمكن إعطاء مضاد الاختراع المستخدم في تركيبة دوائية لتطبيق طريقة الاختراع الحالي في تنوع من الطرق التقليدية؛ (Jie التناول المعوي؛ الاستنشاق؛ الحقن في الجلد؛ تحت الجلدء؛ أو الوريد. تشتمل المحاليل أو المعلقات المستخدمة للتطبيق تحت الجلد أو في الأدمة على واحد © أو أكثر من المكونات التالية: مادة مخففة معقمة مثل ماء الحقن؛ محلول ملحي؛ زيوت ثابتة propylene glycol «glycerine «polyethylene glycols أو مذيبات تخليقية أخرى؛ عوامل مضادة للبكتريا مثل ¢methyl parabens sl benzyl alcohol مضادات أكسدة مثل ascorbic acid أى ¢sodium bisulfite عوامل كلابية tethylenediaminetetraacetic acid Jie مثبتات citrates acetates Jia pH أو ¢phosphates وعوامل ضبط التواتر مثل sodium chloride ٠ أو ©0©01:05. يمكن ضبط pH مع أحماض أو قواعد؛ مقل hydrochloric acid أو sodium hydroxide تغلف هذه المستحضرات في أمبولات؛ محاقن طرح أو قوارير جرعة متعددة مصنوعة من الزجاج أو البلاستيك. تشتمل التركيبات الدوائية المناسبة للحقن على محاليل مائية معقمة أو مشتقات ومساحيق معقمة لمستحضر مرتجل من محلول أو مشتت معقم قابل للحقن. للإعطاء في الوريد؛ تشتمل ٠ المواد الحاملة المقبولة دوائيا المناسبة على محلول ملحي فسيولوجي؛ ماء كابح للجراثيم؛ (BASF, Parsippany, NJ) Cremophor™ EL أو محلول ملحي مثبت phosphate pH -(PBS) في جميع الحالات» يجب أن تكون التركيبة معقمة كما يجب أن تكون مائعة إلى مدى قابلية الحقن السهل. يجب أن تكون المادة الحاملة المقبولة دوائيا مناسبة تحت شروط تصنيع وتخزين وتحفظ ضد التأثيرات الملوثة من الكائئنات المتعضية مثل البكتريا والفطريات. تكون ٠ المادة الحاملة هي مذيب أو وسط تشتيت يحتوي؛ Nia على ما امصقطاء؛ polyol (على سبيل polyethylene glycol 5 cpropylene glycol «glycerol «lial سائل؛ إلخ)؛ وخلطات مناسبة منها. يمكن الحفاظ على الميوعة الملائمة؛ مثلاء بواسطة استخدام غلاف مثل lecithin عن طريق صيانة القياس الجسيمي اللازم في حالة التشتيت وبواسطة استخدام منشطات السطح. يتحقق منع تأثيرات cl KH المتعضية بواسطة Yo عوامل مضادة للبكتريا ومضادة للفطريات مثل «phenol «chlorobutanol «parabens «thimerosal «ascorbic acid إلخ. في حالات معينة؛ يفضل احتواء التركيبة على عوامل متساوية التواترء Jie « السكريات» sodium ¢sorbitol mannitol Jie polyalcohols
Yeo
chloride يتم امتصاص المطول لتركيبات الحقن عن طريق احتواء التركيبة على عامل يؤخر الامتصاص؛ ١ .gelatin 5 aluminum monostearate «fia
عند إعطاء كمية مؤثرة علاجيا من مضاد جسم أو protein ارتباط مولد مضاد من
'ٍ يكون عامل الربط في شكل cada بالحقن في الوريد؛ في الجلد أو تحت ia ep aay)
© محلول مائي مقبول عن غير الطريق المعوي خال من .pyrogen إن تحضير محاليل protein إٍْ المقبولة عن غير الطريق المعوي؛ والتي لها pH مقرر؛ تساوي تواتر» ثبات؛ :
إلخ» تدخل ضمن الماهر في الفن. تحتوي تركيبة دوائية مفضلة للحقن في الوريد؛ في إ
cals أو تحت الجلد؛ بالإضافة إلى عوامل ربط» على وسط ناقل متساوي التواتر مثل حقن ض ¢sodium chloride حقن <Ringer حقن «dextrose حقن «sodium chloride 5 dextrose حقن J dactated Ringer ٠ أو أوساط ناقلة أخرى معروفة في الفن. قد تشتمل أيضا التركيبات الدوائية للاختراع على مواد تثبيت؛ مواد حافظة؛ مثبتات (pH مضادات أكسدة؛ أو مواد إضافية أخرى إٍْ معروفة للماهر في الفن. ا تعتمد كمية مضاد الاختراع في التركيبة الدوائية للاختراع الحالي على طبيعة وشدة الحالة '
المراد علاجهاء وعلى طبيعة العلاجات السابقة التي يخضع لها المريض. بصورة نهائية؛ يقوم i
'ٍ الطبيب المعالج بتقرير كمية المضاد التي يتم بها معالجة كل مريض. مبدئيا؛ يقوم الطبيب ٠ بإعطاء جرع منخفضة من المضادات ويلاحظ استجابة المريض. قد يتم إعطاء جرع أكبر من إْ : المضادات حتى الوصول إلى أمثل تأثير علاجي على المريض؛ وفي هذه النقطة لا تزيد
i إضافيا. يعتقد أن التركيبات الدوائية المختلفة المستخدمة لتنفيذ طريقة الاختراع الحالي de yall
يجب أن تشمل ١٠ مجم إلى 00 ميكروجرام من المضاد لكل كجم من وزن الجسم. © تختلف مدة العلاج باستخدام التركيبة الدوائية من الاختراع الحالي؛ بالاعتماد على شدة ' المرض المعالج والحالة والاستجابة الذاتية المحتملة لكل مريض. يعتقد أن تكون مدة كل } تطبيق من مضادء ia خلال طريق تحت الجلد و» Sie في مدى أسبوع واحد. بصورة ْ نهائية؛ يقرر الطبيب المدة المناسبة للعلاج باستخدام التركيبة العلاجية الخاصة بالاختراع ا الحالي. :
i تشتمل التركيبات المعوية عموما على مادة مخففة خاملة أو مادة حاملة صالحة للأكل. Yo أو تضغط في أقراص. لأغراض الإعطاء العلاجي gelatin هذه التركيبات في كبسولات Calis : مضادء جزيء Age ارتباط protein المعوي؛ تندمج مضادات الاختراع (مثل؛ مضاد جسم أو ! YAER
٠١١ ِ صغير؛ إلخ) مع مواد مسوغة وتستخدم في شكل أقراص أو كبسولات. تدخل عوامل الربط المناسبة دوائياء و/أو المواد المساعدة كجزء من التركيبة. تحتوي الأقراص؛ الحبوب؛
Jie الكبسولات؛ إلخ؛ على أي من المقومات التالية؛ أو مركبات لها طبيعة متماثلة؛ رابط lactose مجهري التبلور» صمغ كثيراء أو «ناداءع؛ مادة مسوغة مثل النشا أو 6 magnesium Jie أو نشا الذرة؛ مادة مزلجة <Primogel™ «alginic acid عامل تفكك مثل © sucrose غروي؛ عامل تحلية مثل silicon dioxide Jie مزلقة 30k ¢Sterotes™ أو stearate أو نكهة البرتقال. cmethyl salicylate أو متتقطععةة؛ أو عامل نكهة مثل النعناع الفلفلي» عند الإعطاء المعوي لكمية مؤثرة علاجيا من تركيبة دوائية من الاختراع؛ مثل؛ يكون عامل الربط في شكل قرص؛ كبسولة؛ مسحوق؛ محلول أو «GDF مضاد يخص ٠ إلكسير. عند الإعطاء في شكل cpm تحتوي التركيبة الدوائية من الاختراع إضافيا على مادة حاملة صلبة gelatin Jie أو مادة مساعدة. يحتوي القرصء الكبسولة؛ والمسحوق على ما بين حوالي © إلى 7245 من عامل الربطء ويفضل من حوالي Yo إلى 7960 من عامل الربط. عند الإعطاء في شكل سائل؛ قد تضاف المادة الحاملة السائلة كماء؛ بترول؛ زيوت حيوانية أو نباتية Jie زيت الفول السوداني؛ زيت معدني؛ زيت فول الصوياء أو زيت السمسم؛ أو زيوت ٠ صناعية (بعد مراعاة حساسية كل مريض و/أو مجموعة كبيرة من الأفراد لهذه المواد الحاملة السائلة) . يشتمل شكل السائل من التركيبة الدوائية على محلول ملحي فسيولوجي؛ dextrose أو محلول saccharide آخرء أو propylene glycol «ethylene glycol Jie glycols أو polyethylene glycol عند الإعطاء في شكل سائل؛ تشتمل التركيبة الدوائية على ما بين ٠.٠ إلى 7/98 من وزن عامل الربط» ويفضل من حوالي ١ إلى ٠ 75 من عامل الربط. Y. للإعطاء بالاستنشاق؛ يتم توصيل مضاد الاختراع في شكل بخاخ رذاذ من حاوية مضغوطة أو أداة توزيع؛ تحتوي على عامل دفع مناسب؛ «Jia غاز «carbon dioxide Jie أو رذاذة. وفقا لذلك» يمكن إعطاء المركبات الموصوفة هنا بواسطة الاستنشاق إلى النسيج الرئوي. : يشير مصطلح 'نسيج رثوي (pulmonary tissue) كما هو مستخدم هنا إلى أي نسيج من الجهاز التنفسي ويشمل الجهاز التنفسي العلوي والسفلي؛ ما لم يحدد خلاف ذلك. يمكن إعطاء YO مضاد 6078 المحدد في اتحاد مع واحد أو أكثر من الأشكال الموجودة لعلاج الأمراض الرئوية. م7
في أحد أمثلة الإعطاء؛ يتكون المركب لرذاذة. في أحد التجسيدات؛ يمكن تخزين المركب في شكل مجفد lia) عند درجة حرارة الغرفة) ويعاد تكونها في محلول قبل الاستنشاق. يمكن أيضا صياغة مركب الاستنشاق باستخدام جهاز طبي؛ (Jia أداة استتشاق ail) مثلا براءة الاختراع الأمريكية أرقام 1٠07٠0708 (أداة استتشاق مسحوق) و4 48 10٠7 (أداة © استنشاق مسحوق جاف)). تشتمل أداة الاستنشاق على أقسام منفصلة لمركب نشط عند pH مناسب للتخزين وقسم آخر لمثبت pH معادل؛ وآلية اتحاد المركب مع مثبت pH معادل قبل الترذيذ. في أحد التجسيدات؛ تكون أداة الاستنشاق عبارة عن أداة استتشاق جرعة مقاسة. على الرغم من عدم وجود ضرورة؛ يمكن استخدام مواد تعزيز توصيل من منشطات السطح لتعزيز التوصيل الرئوي. يشير "منشط السطح (surfactant) المستخدم هنا إلى مركب له أجزاء ٠ محبة للماء ومحبة للدهون تحث امتصاص أي عقار بالتفاعل البيني مع السطح البيني بين طورين غير مختلطين. تكون منشطات السطح مفيدة مع الجسيمات الجافة لأسباب متعددة؛ Jie اختزال تكتل الجسيمات؛ اختزال خلايا بلعمية كبيرة؛ إلخ. عند الاقتران مع منشط سطح رئة؛ يمكن إجراء امتصاص أكثر كفاءة للمركب؛ بسبب قيام منشطات السطح؛ مثل DPPC بتسهيل انتشار المركب إلى حد كبير. تكون منشطات السطح معروفة جيدا في الفن وتشتمل؛ 1° دون تحديد؛ على «phosphoglycerides مثلا «phosphatidylcholines diphosphatidyl glycerol 5 (DPPC) L-alpha-phosphatidylcholine dipalmitoyl ¢(PEG) polyethylene glycol ¢fatty acids ¢hexadecanol ¢{(DPPG) sorbitan trioleate ¢oleic acid ¢palmitic acid ¢auryl ether ¢polyoxyethylene-9- ¢sorbitan fatty acid ester ¢poloxomer ¢surfactin ¢glycocholate ¢(Span 85) .phospholipids ¢tyloxapol ¢sorbitan trioleate ٠ قد يتم الإعطاء التظامي بوسائل عبر الغشاء المخاطي أو عبر الجلد. على سبيل JB في حالة مضادات الأجسام المشتملة على قسم Fe تكون التركيبات قادرة على التنقل عبر الغشاء المخاطي (Jia) الأمعاء؛ الفم؛ الرئة) خلال مسار متوسط بمستقبل FoRn (مثل؛ براءة الاختراع الأمريكية رقم 0517 107). بصفة عامة؛ يتم الإعطاء عبر الغشاء المخاطي؛ Sie vo .خلال استخدام أقراص مصء رشاشات أنفية؛ أدوات استنشاق؛ أو تحاميل. للإعطاء عبر الأدمة؛ تتكون المركبات النشطة في مراهم؛ دهانات ملطفة؛ هلامات؛ رقع أو كريمات كما هو معروف عموما في الفن. للإعطاء عبر الغشاء المخاطي أو عبر YAER
YoY الأدمة؛ تستخدم عوامل الإنفاذ الملائمة للحاجز المراد اختراقه في المستحضر. تكون عوامل ٍ مادة تنظيف؛ أملاح الصفراء؛ ومشتقات Sia الإنفاذ هذه معروفة عموما في الفن؛ وتشمل؛ -fusidic acid تتكون التركيبات الدوائية من تركيبات مناسبة لعلاج الجينات؛ أي؛ التركيبات المشتملة على علاج الجينات؛ تشتمل المادة الحاملة المقبولة Alla المكتشفة هناء في polynucleotides © pH ماء؛ مثبتات cationic أنظمة استحلاب collagen على دهون؛ كريات Dia دوائيا؛ Mi) polymer جسيمات مجهرية chylomicron محلول ملحي؛ نواقل فيروسية؛ بواقي dlipoplexes «polymer جسيمات ذهبية؛ معقدات ¢(chitosan-DNA أو gelatin-DNA إلخ؛ انظرء مثلا: epolyplexes (Gardlik et al. (2005) Med. Sci. Monit. 11(4):RA110-21). Ve التثبيت والاستبقاء في أحد التجسيدات؛ يرتبط فيزيائيا مضاد 061178 محدد مع جزء يحسن من ثباته واستبقائه في الدورة الدموية؛ مثلا؛ في الدم؛ المصلء السائل الليمفاوي. غسل قصبي حويصلي أو قصبي ضعف. 5٠0 أو ٠0 8 7 1.0 بما لا يقل عن a رثوي؛ أو أنسجة أخرى؛ لاختراع مع مواد حاملة تحمي من ١ يمكن تحضير المضادات المكتشفة حاليا من yo الإزالة السريعة من الجسم؛ مثل مستحضر الإطلاق الموجه؛ الذي يشمل ازدراعات ملائمة polymers وأنظمة توصيل مجهرية مكبسلة. يمكن استخدام مواد الانحلال الحيوي؛ «collagen «polyglycolic acid «polyanhydrides عصعايطا vinyl acetate حيوياء مثل ولاعه ع11ه01718. تتضح طرق تحضير هذه المستحضرات للماهرين في ¢polyorthoesters الفن . كما يمكن استخدام معلقات الجسيمات الدهنية المحتوية على المضادات المكتشفة كمواد ٠ حاملة مقبولة دوائيا. يمكن تحضير هذه المعلقات وفقا لطرق معروفة للماهرين في الفن. غير مولد polymer مثل» cpolymer على سبيل المثال؛ يرتبط مضاد 6018 المحدد مع : polymers تتغير polyethylene oxides أو polyalkylene oxides Jie مضاد جوهرياء
Yoo الجزيئي بين حوالي base التي متوسط أوزان polymers المناسبة بالوزن. يمكن استخدام إلى حوالي ٠000 إلى حوالي ٠١٠٠5٠ء أو حوالي ٠٠٠١ (أو حوالي Youre إلى حوالي 5 88
0 على سبيل المثال؛ يتحد مضاد 0178 المحدد مع polymer قابل للذوبان في الماء؛ Jie polyvinyl polymers محب للماء؛ مثلاء .polyvinylpyrrolidone s polyvinylalcohol تشتمل القائمة غير المحددة من polymers على Jie polyalkylene oxide homopolymers (PEG) polyethylene glycol أو «polyoxyethylenated polyols «polypropylene glycols copolymers © منها 5 copolymers إخماد منهاء بشرط الحفاظ على قابلية الذوبان في الماء لأجل 35 مم0 الإخماد. تشتمل polymers المفيدة Lilia) على Jis polyoxyalkylenes copolymers 5 ¢polyoxypropylene «polyoxyethylene إخماد من polyoxyethylene polysaccharides ¢carbomers ¢polymethacrylates ¢(Pluronics) polyoxypropylene s متفرعة أو غير متفرعة؛ التي تشتمل على «saccharide monomers D-mannose «D-glucuronic acid <L-arabinose «D-xylose «fructose «fucose «<D- and L-galactose Ve ا D-mannuronic acid «D-galacturonic acid «sialic acid (مثلاء «polymannuronic acid أو neuraminic acid y D-glucose «D-galactosamine «D-glucosamine «(alginic acid ض متضمنا homopolysaccharides و heteropolysaccharides مقل «amylopectin «lactose نشاء نشا «glycogen «dextrins «dextran «dextrane sulfate <amylose <hydroxyethyl 0 VO وحدة فرعية polysaccharide من mucopolysaccharides قتعي ¢hyaluronic acid «Mis polymers من alcohols السكر ¢heparin ¢polymannitol 5 polysorbitol Jie إلخ. ترتبط مركبات أخرى مع نفس «polymer مثل؛ cytotoxin علامة؛ أو عامل استهداف aT مثل مضاد 0610178 آخر أو مركب ترابطي غير مرتبط. يمكن استخدام «(PAOs) alkoxy-terminated ~~ polyalkylene oxides أحادي النخاط» مثلاء alkyl-terminated «(mPEGs) monomethoxy-terminated polyethylene glycols | ٠ بن polyethylene oxides (glycols) 5 <polymers متكرر النشاط لتنفيذ ارتباط مستعرض (انظرء Ola براءة الاختراع الأمريكية رقم 54514914). في أحد التجسيدات؛ يفضل»؛ دون ضرورة لذلك؛ أن يكون polymer قابل للذوبان في الماء قبل الارتباط المستعرض مع المركب الترابطي. بصورة عامة؛ بعد الارتباط المستعرض» يكون Yo المنتج قابل للذوبان في الماء؛ Sie يظهر قابلية ذوبان في الماء من حوالي 000٠1 مجم/ ملليلتر على الأقل؛ والأفضل أن يكون حوالي )+ مجم/ ملليلتر على (JH) والأفضل من ذلك أن يكون من ١ مجم/ ملليلتر على الأقل. بالإضافة إلى ذلك؛ لا يكون polymer مولد YAER i § Veo ٍ للمناعة عال في شكل اقتران؛ لا يكون له لزوجة غير ملائمة للانتشار في الوريدء الرشء أو ; الحقن؛ إذا تقرر إعطاء الاقتران بهذه الطرق. على مجموعة فردية متفاعلة. يساعد ذلك على ا polymer في أحد التجسيدات؛ يحتوي تفادي الارتباط المستعرض لجزيئات المركب الترابطي مع بعضها البعض. على الرغم من ذلك؛ تدخل ضمن نطاق الاختراع؛ زيادة شروط التفاعل إلى الحد الأقصى لخفض الارتباط إِ المستعرض بين جزيئات المركب الترابطي؛ أو لتنقية منتجات التفاعل خلال الترشيح الهلامي إٍُ أو التحليل الكروماتوجرافي للتبادل الأيوني لاستخلاص مشتقات متجانسة جوهريا. في ا : على اثنين أو أكثر من المجموعات المتفاعلة لأغراض ربط polymer تجسيدات أخرى؛ يحتوي مرة أخرى؛ يمكن استخدام الترشيح الهلامي polymer المركبات الترابطية المتعددة مع أساس ْ لأيوني لاستخلاص المشتقات المطلوبة في شكل متجانس ١ أو التحليل الكروماتوجرافي للتبادل ٠ جوهريا. i دالتون ٠7٠080١0 دالتون؛ ويفضل 500٠0٠6١ بين حوالي polymer يتراوح الوزن الجزيئي من على الأقل؛ أو 000636 دالتون على الأقل؛ أو 400659 دالتون على الأقل. يعتمد الوزن (مثل؛ بنيته؛ ا[ polymer الجزيئي المختار على المقاس المؤثر للاقتران المقرر تنفيذه؛ طبيعة خطي أو متفرع مثلا)؛ ودرجة الاشتقاق. VO ْ الارتباط Mia 001006: المحدد مع GDF8 يمكن استخدام رابطة تساهمية لربط مضاد i epsilon amino طرفي لمركبات ترابطية ومجموعات -N amino المستعرض مع مجموعة } «carboxyl «imino «amino المركب الترابطي» بالإضافة إلى lysine الموجودة على متخلفات ّ تساهميا مباشرة polymer أو مجموعات محبة للماء أخرى. قد يرتبط hydroxyl «sulfhydryl مع مضادات 0178 دون استخدام عامل ارتباط مستعرض متعدد الوظائف (ثنائي الوظيفة Ve 1 بطرق كيميائية معروفة تعتمد على amino عادة). يتحقق الارتباط التساهمي مع مجموعات ) PEG ) متفاعلة aldehyde ومجموعات carbonyl diimidazole <cyanuric chloride acetic و DMSO زائد PEG <bromoacetaldehyde من diethyl acetyl زائد alkoxide «4-hydroxybenzaldehyde من phenoxide +l) PEG chloride أو «anhydride ] 2,4,5-trichlorophenyl «Ja i dithiocarbonate PEG «dda ii succinimidyl esters 8
J يمكن اشتقاق مجموعات .(P-nitrophenylchloroformate نشط PEG أو cloroformate يمكن اشتقاق مجموعات إ carbodiimide باستخدام PEG-amine عن طريق اقتران carboxyl ُ YAR
1 ١ : alkoxy-PEG (مثلاء maleimido مستبدل مع PEG عن طريق الاقتران مع sulfhydryl sulfosuccinimidyl 4-(N-maleimidomethyl) cyclohexane-1 -carboxylate) زائد amine 1 لمجموعات thiolated بصورة بديلة؛ قد تتم . (PEG-maleimide أو (WO 97/10847 ail) 3 (lysine على متخلفات epsilon amino حر على المركب الترابطي (مثل » مجموعات amino i وتقترن عندئذ مع مشتقات تحتوي على (Traut (عامل كاشف 2-imino-thiolane مع © 4 مثلاء كما هو موصوف هنا في: (PEG من maleimide { Pedley et al. (1994) Br. J. Cancer 70:1126-30. 1 مثلاء من: (GDF الوظيفية التي يمكن ارتباطها مع مضاد PEG polymers تتوافر | Shearwater Polymers, Inc. (Huntsville, AL). : PEG amino acid esters «<amino-PEG على «Nie المتوافرة تجارياء PEG تشتمل مشتقات ٠ 1 «carboxymethylated PEG «PEG-succinate «PEG-thiol (PEG-hydrazide 1 (PEG succinimidyl succinate <PEG amino acids «PEG-propionic acid 1 «carboxymethylated PEG من succinimidyl ester <PEG succinimidyl propionate ً camino acid PEGs من succinimidyl esters <PEG من succinimidyl carbonate
PEG tresylate <PEG-nitrophenyl carbonate «PEG-oxycarbonylimidazole 1° : «PEG-maleimide PEG vinylsulfone «PEG-aldehyde «PEG-glycidyl ether : PEG vinyl مشتقات cheterofunctional PEGs «PEG-orthopyridyl-disulfide i هذه PEG تختلف شروط تفاعل اقتران مشتقات .PEG phospholides y «PEG silanes i PEG ومشتق PEGylation بالاعتماد على مضاد 00178 المحدد؛ الدرجة المطلوبة من على: النقطة المطلوبة PEG المستخدم. تشتمل بعض العوامل المشاركة في اختيار مشتقات ٠ : الثبات الهيدروليتي وتفاعلية المشتقات؛ (cysteine R أو مجموعات lysine Jie) من الارتباط الثبات؛ السمية والتوليد المضاد للاتصال. الملائمة للتحليل؛ إلخ. يوفر الصانع تعليمات محددة : لاستخدام أي مشتق محدد. j عن ie عن المواد البادئة غير المتفاعلة؛ polymer s GDF8 قد تنفصل اقترانات مضاد طريق الترشيح الهلامي أو التحليل الكروماتوجرافي للتبادل الأيوني؛ أو أشكال أخرى من ل Yo 1 تتقى الأنواع المتغايرة للاقترانات مع بعضهم البعض HPLC التحليل الكروماتوجرافي؛ مثل؛ الأنواع المحتوية على واحد أو اثنين إَ (Jie) بنفس الطريقة. كما يمكن انحلال الأنواع المختلفة م"
و
من متخلفات (PEG بسبب الاختلاف في الخواص الأيونية amino acids Jay غير المتفاعلة i (انظر؛ مثلاء 96/34015 (WO يعتقد أن تقوم proteins 5 polynucleotides الاختراع الحالي بإظهار واحد أو أكثر من ! ض الاستخدامات أو الأنشطة البيولوجية المذكورة هنا (بما في ذلك الأنشطة المصاحبة للاختبارات i © المذكورة أدناه) . تتوافر الاستخدامات أو الأنشطة المحددة لأجل 0165م الاختراع الحالي عن i طريق إعطاء أو استخدام هذه «proteins أو عن طريق إعطاء أو استخدام i polynucleotides تشفر هذه lia) proteins في علاجات الجينات أو نواقل مناسبة لإدخال (DNA 1 قد يكون من المفيد أن يتم صياغة تركيبات معوية أو غير معوية في شكل وحدة جرعة i لسهولة الإعطاء وانتظام الجرعة. يشير شكل وحدة الجرعة كما هو مستخدم هنا إلى وحدات i ٠ منفصلة ماديا ملائمة كجرعات وحدية للكائن المراد علاجه؛ تحتوي كل جرعة على كمية مقدرة ' مسبقا من مركب نشط محسوب للحصول على التأثير العلاجي المرغوب مع المادة الحاملة الدوائية المطلوبة. تتحدد مواصفة أشكال وحدة الجرعة من الاختراع بواسطة وتعتمد مباشرة على السمات الفريدة للمركب النشط؛ التأثير العلاجي الخاص المراد تحقيقه؛ والحدود المتداولة 1 في فن صياغة ذلك المركب النشط لمعالجة الأفراد. ل Vo يتعلق جانب آخر للاختراع الحالي طبقًا لذلك بمجموعات لإعطاء مضادات 0118 من i الاختراع الحالي؛ مثلاء مع أو بدون مركبات علاجية coral أو باستخدام مضادات 01:18 : كأداة بحثية أو علاجية لتحديد وجود و/أو مستوى 0118 في عينة حيوية؛ مثل مجموعة ; .ELISA في تطبيق؛ تشمل المجموعة واحدًا أو أكثر من مضادات 01178 مصاغة في مادة : حاملة دوائية؛ وعاملاً واحدًا على الأقل؛ ie عامل علاجي؛ مصاغ حسب الملاءمة؛ في 1 ٠ واحد أو أكثر من المستحضرات الدوائية المفضلة. 3 إن الأمثلة التالية مذكورة للمساعدة في فهم الاختراع» لكن لا يقصد بهاء ولا يجب اعتبارهاء 5 138 على نطاق الاختراع بأية طريقة. لا تتضمن الأمثلة الوصف التفصيلي للطرق التقليدية؛ : مثل تكوين ورم هجين» ELISA اختبارات الانقسام؛ تحليل قياس خلوي انسيابي وتقنيات ا DNA مخلق. إن تلك الطرق معروفة Tus لأصحاب المهارة العادية في الفن. i Yo إن المحتويات الكلية لكل المراجع؛ براءات الاختراع؛ طلبات براءة الاختراع المنشورة؛ :ٍ ووثائق براءة الاختراع الأخرى المذكورة على مدار هذا الطلب مدمجة هنا بالإشارة. ' م" إ
٠١ ومدعم بالأمثلة التالية. على أية حال؛ لا يجب اعتبار Lila) إن الاختراع الحالي موضح هذه الأمثلة بأية طريقة محددة إضافيًا لنطاق الاختراع. على النقيض؛ من له مهارة عادية في سوف يدرك تمامًا أن هناك تطبيقات؛ تعديلات ومكافئات أخرى للاختراع الحالي بدون dl التخلي عن جوهر الاختراع الحالي و/أو نطاق عناصر الحماية الملحقة. الأمثلة ©
GDF8 مضاد RK22 توليد خلايا ورم هجين وعزل :١ مثال (myostatin) GDF8 مزالة (jy تحصن (McPherron et al. (1997) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 94:12457-61) مخلق GDF8 dimer ميكروجرام من ٠١و Freund بحقن تحت الجلد مع مادة مساعدة كاملة في أوساط مشروطة حسب الوصف في CHO منقى من خلية ٠
Lee and McPherron (1999) Curr. Opin. Genet. Dev. 9:604-07.
Freund تعطى حقنات تعززية عديدة من نفس الكمية من 0118 ومادة مساعدة غير كاملة ميكروجرام ١ عند فترات فاصلة أسبوعين. يعطى حقن نهائي في الوريد في وريد الذيل بكمية قبل عزل خلايا الطحال من الفئران التي تظهر العيارات العالية من 808 مضادة 5 : فأري el aia تندمج خلايا الطحال المعزولة مع خلايا .60178 ١٠ : يوم تجمع المواد الطافية من ١-٠١ بعد (ATCC Accession No. P3X63.Ag8.653) ! انظر مثال (GDF8 المضاد WAb من أجل مستويات ELISA الأورام الهجينة وتختبر بواسطة : لتأكيد أحادية النسخ؛ تنسخ الأورام الهجينة المختارة لدراسات إضافية بتخفيف مقيد متكرر. ." ] منتقاة من المواد الطافية Abs إن المواد الطافية من أورام هجينة تظهر مضاد 01178 و/أو باستخدام طرق تحليل كروماتوجرافي بالانجذاب قياسية معروفة جيدًا في الفنء يتم اختبارها من ٠ : نسخة مختيرة أوليًا للارتباط VF أجل الخصوصية في الاختبارات الموصوفة في المثال 7. من من بين هذه المنتقاة للتحليل الإضافي. RK22 كان «GDF8 مع : 0118 متفاعل بصفة خاصة مع RK22 Ab :Y مثال : ELISA له انجذاب كبير من أجل 8 أكبر من 314011 في اختبارات 81+22 :١-١ مثال إ antibodies مضادات أجسام = Abs © i antibody مضاد جسم = Ab ©
7.4 تستخدم تقنيات ELISA قياسية تستخدم GDF8 Le) أو 311011 لتحديد خصوصية RK22 للارتباط مع «GDF8 أي؛ لتحديد ما )13 كانت Abs تظهر انجذابًا من أجل 00178 أكبر من الانجذاب من أجل 1. ينتقى GDF8 protein = مخلق GDF8) ناضج 5 peptide أولي 8) proteins 314011 ويتم تمييزهما حسب الشرح مسبقًا في U.S.
Patent Published Application No. 2004/0142382. ° تجرى عملية biotinylated منفردة من أجل معقد كامن 31/0011 عند نسبة ٠١ جزيء جرامي من )21217 EZ-link Sulfo-NHS-Biotin (Pierce, Rockford, IL, Cat.
No. إلى ١ جزيء جرامي من المعقد لمدة ساعتين على ثلج. ينتهي التفاعل بتقليل الأس الهيدروجيني باستخدم م «TFA ويخضع المعقد 40 لتحليل كروماتوجرافي على عمود C4 Jupiter 250 x 4.6 mm column (Phenomenex, Torrance, CA) ٠ لفصل protein الناضج Ji) 06118 ناضج من peptide أولي 58 أو 1 ناضج من peptide أولي .(BMP11 تجمع أجزاء biotinylated GDF8 الناضج أو biotinylated BMP11 الناضج المنفصلة مع تدرج «TFA/CH3CN تركز؛ وتقدر كميًا بواسطة مجموعة عامل كاشف اختبار .(Pierce, Rockford, IL, Cat.
No. 23235) MicroBCATM protein ١٠ - يغطى طبق دقيق العيار به 97 عين (مغطى مسبقًا طوال الليل عند ؛؟"مئوية مع 0 ض ميكروجرام/ streptavidin alle في (PBS مع 0.+ ميكروجرام/ ماليلتقر GDF8 biotinylated أو biotinylated BMP11 لمدة ساعة واحدة عند درجة حرارة الغرفة. تزال الزيادة من 0018 أو 314011 بالغسيل مع PBS يحتوي على 7001 (حجم/ حجم) Tween 20 (مثبت أس هيدروجيني ٠ (PBST يخمد نشاط الأطباق لمدة ساعة واحدة عند درجة إٍ ٠ حرارة الغرفة في محلول (Pierce) SuperBlock™ ثم تشطف عندئذ مع PBS تحضن الأطباق المغطاة مع 60178 أو 1334011 عند درجة حرارة الغرفة sad ساعة واحدة مع ٠٠١ | ميكرولتر من مادة طافية مسبق إخماد نشاطها مجمعة من أورام dish 81222 أو مع RK22 Ab نقي عند تركيزات مختلفة. لمقارنة الارتباط غير الخاص يستخدم RK22 Ab (انظر طلب براءة الاختراع الأمريكية رقم: 708/10 4 Ve المندمج محتوياتها بالإشارة الكاملة كمرجع). Yo الذي يرتبط مع ويثبط كلا من BMP11 5 GDF8 إلى جانب أن Ab غير الخاص (Irr.
Ab) لا i يرتبط مع أي من GDF8 أو 514011 وتختبر ad بصورة منفردة أوساط المقارنة. يزال Ab غير المرتبط بثلاث مرات غسيل مع PBST ثم ؟ مرات غسيل مع PBS يضاف إلى كل YAEL
1 ١٠ ele فأري من IgG ميكرولتر من تخفيف )402 © من اتحاد (118- مضاد ٠5٠ عين | تحضن الأطباق عند درجة حرارة الغرفة لمدة ساعة واحدة. يغسل كل طبق © مرات مع : TMB ويجهز لتفاعل لون بإضافة عامل كاشضف PBS وبعد ذلك ؟ مرات مع PBST vA 112804 ميكرولتر من ٠٠١ (عص0 هدص 710إا602008)). يتوقف تفاعل اللون بإضافة 1 جزيئي جرامي . تقاس الإشارة المتولدة بقراءة الكثافة البصرية عند £04 نائومتر لكل عين © باستخدام قارئ طبق دقيق العيار. ْ RK22 يكون للمواد الطافية من الأورام الهجين ؛)ب(١و (NY كما هو مبين في الشكلين ! المقارن؛ Ab ارتباط أكبر مع 00178 من 314011 مقارنة بالمادة الطافية المعزولة من : بتوضيح أن الانجذاب RK22 يتأكد تمائل الانجذاب الأكبر من أجل 8 بواسطة .5
J الأكبر من أجل 6078 لمضادات الأجسام هذه غير معتمد على الجرعة. كما يتضح في ٠ المختبرة تظهر ارتباطًا مع 001:8 أكبر RK22 Abs الشكلين ١(أ) و(ب)؛ عند كل تركيز فإن مع 314011 بينما على النقيض؛ يرتبط aa ارتباطًا ضئيلاً RK22 يظهر BMPI1 منه مع i .BMP11 5 GDF8 مع كل من RK35 المقارن Ab
GDF8 Jal من RK22 انجذابات ارتباط :Y-Y مثال BlAcore بتقنية GDF-8 مع RK22 التفاعلات الحركية الجزيئية لمضاد الجسم GS تحلل Ne ْ' وتشتق ثوابت المعدل الحركي الظاهرة. في هذه الدراسات قمنا بقياس plasmon resonance مرتبط بطور صلب. يتم التحكم في التوجيه GDF-8 مع (AD) قابل للذوبان Ab ارتباط ' GDF-8 السطحي من أجل 0017-8 الساكن فوق سطح أداة الإحساس الحيوية باستخدام streptavidin فوق رقاقات إحساس حيوي bio-GDF-8 يسكن «(bio-GDF-8) biotinylated ْ في ثلاثة مقادير متساوية ويقاس الارتباط كوظيفة Ab وعندئذ؛ تستخدم تركيزات مختلفة من ٠ ; والتلازم (ي6) الظاهرة وتستخدم (Ko) للزمن. من هذه القياسات تشتق ثوابت معدل التفكك النشط؛ المحدد أنه الجزء إٍ RK22 للتفاعل. يتحدد تركيز (Kg) لحساب ثابت انجذاب الارتباط : القادر على الارتباط مع Ab بقياس جزء (ps الوظيفي AD من تحت قيود تحول كتلة جزئي بتغطية BlAcore الساكن على الرقاقة باستخدام bio-GDF-8 عند معدلات تدفق مختلفة. يحسب معدل التلازم والتفكك لكل إ Ab كثافة سطحية كبيرة وحقن Yo صفر-؟ -١ BIA في نفس الوقت باستخدام مطابقة شاملة مع طراز برنامج تقييم Ab تركيز ْ .(biaevaluation version 3.0.2) y YA£R
١ «(BR-1000-32) Sensor Chip SA «BlAcore 2000 يمكن الحصول على نظام 7.4 عند أس هيدروجيني HEPES مثبت أس هيدروجيني )00+ جزيئي جرامي 0 ٠١ polysorbate 70.205 3 EDTA ؟ مللي جزيئي جرامي NaCl جرامي Apa .؛ . .BIAcore AB, Uppsala, Sweden من (NHS-EP) N-hydroxysuccinimide (حجم/حجم) في (Sigma) (حجم/ حجم) TFA 7001 يحضر (Lot 25251-15) الآدمي bio-GDF8 ينقى © ماء. تحلل البيانات التجريبية من التحديدات الحركية لتفاعل 0م- مولد مضاد باستخدام .BIAevaluation software version 3.0.2 فوق HBS/EP يستبقى تدفق مستمر من مثبت أس هيدروجين «bio-GFDS لتجهيز سطح منها ض JS) على سطح أداة الإحساس مع © حقنات streptavidin سطح أداة الإحساس. يتكيف مللي جزيئي جرامي YO 3 NaCl جزيئي جرامي ١ المدة دقيقة واحدة) من محلول يحتوي على ٠ ميكروجرام/ ملليلتر ض ١ إلى bio-GDF8 يخفف (RU Yo + + >( لتغليف عالي الكثافة .NaOH بالتدفق فوقها. لتغليف streptavidin ويسكن على رقاقة HBS/EP في مثبت أس هيدروجيني ميكروجرام/ ملليلتر ويختلف ٠.١ يخفف 0017-8 إضافيا إلى (RU T+—Y +) قليل الكثافة على خلية streptavidin المحقون طبقًا للكثافة المطلوبة. يستخدم سطح bio-GDF-8 حجم | مقارن تستخدم خلية التدفق الأولى كسطح مرجعي لتصحيح JUS كسطح مرجعي. ١ تدفق ١ مؤشر انكسار الكتلة؛ تأثيرات المادة البينية والارتباط غير الخاص؛ وتغلف خلايا التدفق الثانية؛ الثالثة والرابعة مع جزيء الإمساك. الساكن على الرقاقة باستخدام bio-GDF-8 القادر على الارتباط مع RK22 Ab يحلل جزء مضاد 0178 عند Ab تحت قيود انتقال الكتلة الجزيئية. في هذه التجارب يحقن BlAcore عند معدلات تدفق (YA OD نانوجزيئي جرامي (تركيزات مقاسة على أساس ٠١٠١و You ٠٠ ميكرولتر/ دقيقة. يمكن تحديد قيود انتقال الكتلة بالفحص البصري ٠٠١١و 00 (Fe ٠٠ لرسوم أداة الإحساس» لأن قيم الميل تزداد مع زيادة معدلات التدفق. تتجدد أسطح أداة
Jv) TFA الإحساس الحيوية باستخدام © ميكرولتر من «(BlAcore) HBS-EP في مثبت أس هيدروجيني GDF المضاد RK22 ففخي ميكرولتر/ دقيقة؛ وبعد الحقن 7٠ الساكن عند معدل تدفق bio-GDF-8 (358 تحقن قواسم تامة Yo دقائق عند نفس ٠١ لمدة BlAcore يراقب التفكك في مثبت أس هيدروجيني (iE T لمدة أت تك AY ذلا فلك You 700 المحقونة هي Ab معدل التدفق. إن تركيزات ا
ARR
وصفر نانوجزيئي جرامي؛ يتم كل حقن في ثلاثة مقادير متساوية. تطرح تأثيرات العين ٠" الخالية ومثبت الأس الهيدروجيني لكل رسم إحساس باستخدام المقدار المرجعي المزدوج. تتجدد
HBS- 7؛ قبل حقن عينة 001 TFA أسطح أداة الإحساس الحيوية باستخدام © ميكرولتر من تمثل كتلة (RU) التالية وحدها المتدفقة خلال كل خلية. تقاس الاستجابة في وحدات رنين EP
RK22 ارثباط ٠ بافتراض أن مادة التحلل BlAevaluation 3.0.2 تحلل البيانات الحركية باستخدام برنامج .)8( مرتبطة مع مركب ترابطي أحادي التكافؤ (A) ثنائية التكافؤ
A+B = AB K,1*Kq1; AB+B = AB2 K;2*K42; :)8( مرتبطة مع مركب ترابطي أحادي التكافؤ (A) ومادة التحلل أحادية التكافؤ
A+B = AB 1مكا*1يكز ) الظاهرة من المناطق الملائمة في رسوم (Ky) والتلازم (Ko) تحسب ثوابت معدل التفكك و0018 من توابت المعدل الحركي Ab الإحساس. يحسب ثابت انجذاب الارتباط للتفاعل بين نانوجزيئي ١ Ky قيمة RK22 يظهر of كما يتضح في شكل Kg = kd / ka بالمعادلة التالية: جرامي في متوسط ثلاث تجارب. يثبط إشارات 6018 في المعمل وفي الجسم RK22 :“ مثال Ve آدمي مخلق نقي في اختبار جين مخبر GDF-8 تثبيط النشاط الحيوي من أجل 0) -F Jl
RK22 معتمد على خلية باستخدام في اختبار معملي معتمد على خلية؛ يستخدم اختبار جين مخبر GDF-8 لتوضيح نشاط تحت سيطرة محث يحثه luciferase يظهر (CAGA)12 pGL3 مخبر Jil يستعمل (RGA) هو ترتيب مستجيب 1017-8 في محث جين يحثه CAGA تقرر مسبقًا أن ترتيب .106©-8 ٠
CAGA صندوق VY مخبر يحتوي على Jil يحضر (Thies 5 et al 2001) PAI-1 TGF-B يدخل (Promega, Madison, WI) pGL3 لأساسي | luciferase مخبر plasmid باستخدام بين ( ٠١+ 5-( ومكان بداية نسخ من محث كامن كبير لفيروس غدي TATA صندوق تكرار من صناديق ١١ تحتوي على Oligonucleotides الأماكن 1 و]11100111. تتم تقسية وتتنسخ في مكان 1م7. يستقبل بدرجة مؤقتة خط خلية AGCCAGACA :CAGA ٠ pGL3 مع (ATCC HTB-82) A204 عضلي آدمي به ألياف مخططة rhabdomyosarcoma
FuGENE 6 2م باستخدام عامل كاشف استقبال حامل جين من العائل
YAER
١7 بعد استقبال حامل الجين من العائل ؛ تزرع الخلايا في (Boehringer Manheim, Germany) [UY «+ glutamine مع ؟ مللي جزيئي جرامي McCoy SA أطباق بها 97 عين في وسط مصل جنين بقري لمدة 7٠و penicillin ميكروجرام/ ملليلتر ٠٠١ cstreptomycin ملليلتر | نانوجرام/ ملليلتر 0117-4 في أوساط ٠١ ساعة. تعالج الخلايا عندئذ مع أو بدون V1 صتللتعنه»م» و١ ملليجرام/ ملليلتر مصل جنين «streptomycin «glutamine مع McCoy 5A 8 كميًا في الخلايا المعالجة Luciferase لمدة 7 ساعات عند 7١7”مئوية. يقدر albumin بقري نانوجرام/ ٠١ يكرر الاختبار باستخدام .the Luciferase Assay System (Promega) باستخدام BMP-11 ملليلتر من لمدة ساعة واحدة RK22 Ab مسبقًا مع GDF-8 التثبيطي» يحضن RK22 لاختبار نشاط عند درجة حرارة الغرفة. يضاف هذا الخليط عندئذ إلى الخلايا المستقبلة حامل الجين من ٠ كميّا باستخدام Luciferase العائل ويحضن لمدة 1 ساعات عند 7١7"مئوية. يقدر على إخماد نشاط RK22 تقاس قدرة .The Luciferase Assay System (Promega) باستخدام نفس البروتوكول. BMP-11 مثل 1.008 عندما pGL3(CAGA)I2 يتم حث نشاط مخبر oF كما يتضح في الشكل نانوجرام/ ملليلتر 0118 في غياب أو ٠١ مع dallas أو (bkgd) تكون الخلايا غير معالجة ١ من luciferase واحد على الأقل؛ أي؛ حث GDF8 هذه نشاط Abs وجود 101622. تقلل كل من
RK22 خلال 00178؛ بطريقة مستجيبة للجرعة» مع 1050 0.4 نانوجزيئي جرامي من أجل نانوجزيئي جرامي؛ وطذد!" له ١." IC50 المقارن 81635 له Ab إن Abs يثبط إشارات من خلال 0018 فإن RK22 نانوجزيئي جرامي. برغم أن ٠٠١ > 0 هذه لا تثبط بدرجة ملحوظة نشاط 334011 الحيوي؛ إن 1050 لتثبيط نشاط 31,011 بواسطة Yo نانوجزيئي جرامي؛ على الترتيب. توضح هذه ٠٠١ و> oF لم يمكن تحديدهاء 2
Ab في المعمل إلى درجة مشابهة مثل GDF8 يثبط بصفة خاصة إشارات RK22 البيانات أن .RK35 غير الخاص يثبط نشاط 0018 في الجسم RK22 :7-“ مثال كمضاد RK22 في الجسم؛ ينتقى GDF8 تعارض نشاط RK22 Abs لتحديد ما إذا كانت Yo من نقص SCID بالغة. تعاني فئران SCID جسم تمثيلي من أجل اختبار إضافي في فئران itelevant antibody = irTAb (*
YAER
ARE
في RK22 يحقن \RK22 مثل Abs مناعي شديد متحد؛ ولذلك لا تولد تفاعل مناعي بعد حقن كجم/ [ama و46 ٠١ ١٠ خلال فترة ؛ أسابيع. تعطى ؟ جرعات من 622ل8: SCID فئران كجم/ أسبوع كمثال مقارن موجب [ana ٠١ أسبوع. يستخدم 1470-29 معطى عند جرعة المعطاة. RK22 ويقارن مع تركيزات مختلفة من 0 تستخدم كتلة عضلة كمؤشر لنشاط 0618 في فثئران معالجة مع 81222. تزال ؟ مجموعات عضلة مختلفة: عضلة السمانة؛ العضلة الظنبوبية الأمامية والعضلة رباعية الرؤوس؛ ويتحدد وزن العضلة. كما هو مبين في الشكل of يزيد RK22 بدرجة ملحوظة كتلة العضلة عند جرعة ٠١ مجم/ كجم/ أسبوع. مقارنة بالمثال المقارن الموجبء 847029؛ تزداد كتلة العضلة 77٠0 تقريبًا في كل من ٠١ مجم/ كجم/ أسبوع لكل من My029 5 RK22
RK22 مثال 4: تمييز أماكن ربط ٠
ACtRIIB مع GDF8 لارتباط RK22 مثال 4 -1: تحديد تثبيط من ربط GDF8 بمنع GDF8 قادرة على معارضة نشاط RK22 Abs لتحديد ما إذا كانت اختبار تعادل). تفحص is) 800183 في اختبار ربط Abs مستقبله 8.008113؛ تختبر اندماج protein مع biotinylated GDF8 نقية من أجل القدرة على تثبيط ارتباط RK22 Abs ساكن على مادة لدنة في اختبار طبق دقيق العيار به 97 عين. تغطى هجائن 800818 ٠ فوق (R&D Systems, Minneapolis, MN, Cat. No. 339-RB/CF) مخلقة ActRIIB-Fe ١ عند (Costar, NY, Cat. No. 3590) أطباق اختبار مسطحة القاعدة بها 97 عين جزيئي جرامي طوال ٠.7 sodium carbonate ميكروجرام/ ملليلتر في مثبت أس هيدروجيني مصل بقري وتغسل albumin مجم/ ملليلتر ١ الليل عند ؛"مئوية. تخمد الأطباق عندئذ مع وحده أو biotinylated GDF8 نانوجرام/ ملليلتر Yo قياسي. يضاف ELISA باتباع بروتوكول ٠ إلى RK22 محضن مسبقًا لمدة ساعة واحدة عند درجة حرارة الغرفة مع تركيزات مختلفة من تضاف معايرة ICs خامد النشاط. لتحقيق فعالية النسخة حسب القياس بقيم ELISA طبق مقارن Ab غير خاص أو Ab محضن مسبقًا مع biotinylated GDF8 يتم تضمن Abs بعد ساعة واحدة عند درجة حرارة الغرفة؛ تزال بالغسيل LACtIRB مع GDF8 يخمد ارتباط وتتحدد كمية 6018 المرتبط مع 8201813 المرتبط بالطبق «Ab المخمدة مع protein مركبات Yo
DELFIATM باستخدام مجموعة عامل كاشف Buropeium معلم- streptavidin مع
١١ في اختبار قياس استشعاع متلاشي مع الزمن (PerkinElmer LifeSciences, Boston, MA) .(TRF)
Lut يبين شكل © نتائج اختبار معادلة 008118م. لذلك؛ برغم أنه من الممكن أن إشارات 0018 بتثبيط قدرة 0018 على الارتباط مع 8008118؛ فمن المحتمل AK22 Abs أكثر أن تكون هناك آلية أخرى مشتملة. ٠
GDF8 تخص epitopes يرتبط مع RK22 :7-4 مثال .00178 يخص RK22 متعلقان ببعضهما بدرجة كبيرة؛ فإن BMP11 5 01018 برغم أن تخص أيضا 8م ولذلك؛ يمكن Abs نتيجة لذلك؛ يفترض أن 065 التي تدركها هذه إشارات Jay fl (peptide كمضادات (مثلا؛ كمماثلات GDF8 تخص epitopes استخدام .00178 بصفة خاصة و/أو لفحص أو تحضير مضادات تخص 06078 ٠ -١١ متراكب مع peptides £A يصنع <Abs RK22 التي تدركها 61018 epitopes لتحديد متخلف تمثل الترتيب الكلي من أجل 6078 الناضج المذكور كتعريف الترتقيب باستخدام تقنية تكوين بقعة cellulose رقم: )¢ يصنع مباشرة (Molina et al. (1996) Peptide Res. 9:151-55; Frank et al. (1992) Tetrahedron 48:9217-32). Vo cysteine في هذا الترتيب» تستبدل متخلفات .amino acids ١١ عن 8)lie peptides إن تراكب تشترى أغشية cysteines لتقليل المضاعفات الكيميائية التي يسببها وجود serine مع محمية :11:0 مسن amino acids s "PEG معدلسة مع 86 «B-alanine يتحدد الترتيب على الغشاء باقتران مباعد .Abimed (Lagenfeld, Germany) باستخدام كيمياء اقتران peptides وتصنع ٠
DIC (diisopropylcarbodiimide)/HOBt (hydroxybenzotriazole) .(Molina et al., supra; Frank et al., supra) Base قياسية حسب الوصف 1060طم. تتم خطوات الغسيل ASP 222 نشطة باستخدام إنسان آلي amino acids ترش بعد دورةٍ التكوين النهائية. peptides طرفية-17 لأجل acetylated وتجرى Gay وإزالة الحماية إخماد النشاط sale دقائق وفي ٠١ لمدة methanol يغسل الغشاء في cpeptide بعد تصنيع © محلول ملح مثبت الأس الهيدورجيني-1:18 مع 7001 (حجم]/ حجم) -1118( TBST) polyethylene glycol :PEG ©
YAEL
١٠١ ٠.5 دقائق. يحضن الغشاء عندئذ مع ٠١ لمدة (casein (حجم/ وزن) 2١و )٠١ 41 مضاد 6118 في مادة إخماده لمدة ساعة واحدة مع الرج RK22 Ab ميكروجرام/ ملليلتر من ثانوي Ab دقائق؛ يحضن الغشاء مع ٠١ برفق. بعد الغسيل مع مادة ا لإخماد ؟ مرات لمدة دقيقة. يغسل الغشاء عندئذ 3٠0 ميكروجرام/ ملليلتر في مادة الإخماد) لمدة +. YO) معلم-118 دقائق في كل مرة مع ٠١ دقائق في كل مرةٍ مع مادة ا لإخماد ومرتين لمدة ٠١ Bad ؟ مرات (Pierce) SUPERSIGNALTM West المرتبط باستخدام عامل كاشف Ab تتم رؤية TBST + 02001600هملم). إن بقع النقطة مبينة في شكل Fluoromager) وأداة تصوير رقمية والنتائج ملخصة في جدول 4. توضح بقع النقطة أن 181622 يرتبط مع ينتقى من المجموعة amino acid لها و/أو تتكون أساسيًا من ترتيب GDF8 epitope(s) (تعريف FEAFGWDWIIAPKRY (تعريف الترتيب رقم: 4)؛ DFGLDS المتكونة من ٠
SSGESEFVF «(A (تعريف الترتيب رقم: FVFLQKYPHTLVHQ «(1 الترتيب رقم: (تعريف الترتيب WIAPKRYKANYSSGESEFVFLQKY »)٠١ (تعريف الترتيب رقم: من أجل epitope(s) رقم: ١١)؛ وبصورة ممكنة ترتيبات فرعية من ذلك. بصفة خاصة» فإن
I تخطط لمنطقة 0018 التي تتفاعل بصورة مفترضة مع مستقبل 0118 من النوع 2 (ALK4/ALKS) ٠ جدول ؛ مناطق تقريبية من أجل 0018 آدمي مرتبط بمضادات أجسام فأرية أحادية النسخ الا (تقريبية) ١ رقم: RK22 مثال ©: إكساب السمة الآدمية لمضاد الجسم
Ab مثال 1-05: ترتيب من خلايا RK22 التي تشفر (VL) والخفيفة المتغيرة (VH) تنسخ الجينات الثقيلة المتغيرة Y. إن هذه الترتيبات مذكورة في amino acids وعندئذ تتحدد ترتيبات RK22 Ab ورم هجين تنتج
Ag VE مثل تعريف الترتيب رقم: ١ جدول RK22 مثال ©-؟: تحديد الخط الجرثومي لمضاد الجسم
فلا تستخدم بيانات الترتّيب لمضادات الأجسام لتحديد ترتيب خط الجرثومة الأقرب للسلسلة الثقيلة والخفيفة من (RK22 مثلاء يظهر 07-5 و00-7 تمائل حوالي 778 و7771 مع RK22 1؛ على الترتيب (شكل ¢(Y بينما يظهر 24 0016 تماثل حوالي IVA مع RK22 VL (شكل (A . تجرى طفرات ملائمة باستخدام تقنيات تكوين طفري موجه لمكان © قياسية مع المواد الأولية الملائمة المولدة لطفرة. تتأكد طفرة الترتيبات 5 Abs بتحليل الترتيب. إن المواصفة يتم فهمها بصورة أكثر دقة على ضوء تعاليم المراجع المذكورة في المواصفة؛ المدمجة كل منها هنا بالإشارة الكاملة. توفر التطبيقات في المواصفة توضيحًا لتطبيقات الاختراع ولا يجب اعتبارها مقيدة لنطاق الاختراع. يدرك الصانع الماهر أن هناك تطبيقات أخرى كثيرة يشملها الاختراع المحدد. ٠ مثال :١ هيئات اختبار مناعي ساندويتش للتقدير الكمي والتحديد من أجل GDF8 تجرى biotinylated لكل من Abs الموصوفة في الأمثلة أدناه باستخدام مجموعة Sulfo-LC biotinylation متصلة ب MEZ من ع2160. من دراسات سابقة؛ تحدد أن زيادة 6 مرة في NHS-biotin مثالية لأجل biotinylation كل من Abs هذه. تجرى biotinylated لمقدار 6 ميكروجرام من كل AD باستخدام زيادة جزيئية جرامية bra 5 ٠ من biotin يؤدي ٠ هذا إلى دمج من ؟ إلى © مللي جزيء جرامي تقريبًا من [biotin مللي جزيء جرامي من Ab بعد cbiotinylation تجرى dialyzed لكل مضادات | لأجسام في PBS طوال الليل عند ؛ “مئوية ويتحدد تركيز protein الكلي مع 808. لتحديد النسبة الجزيئية الجرامية لدمج «biotin يضاف محلول biotinylated Ab إلى خليط من 2-(4’-Hydroxyazobenzene) Ha avidin s (HABA) benzoic acid لانجذابه الكبير لأجل avidin فإن biotin يزيح HABA ٠ من تفاعله مع avidin ويقل تناسبيًا الامتصاص عند 5٠٠ نانومتر. يمكن إجراء تقدير كمي لكمية biotin المتحد مع Ab بقياس امتصاص محلول HABA-avidin قبل وبعد إضافة العينة biotinylated إن التغير في الامتصاص مرتبط بكمية biotin المدمجة في Ab بالإضافة لذلك؛ فإن المصل المستخدم في الدراسات الموصوفة أدناه خالٍ من 01178 داخلي. يحضر عمود انجذاب لإنقاص مصل 6017-8 باستخدام ١ مجم من OmAb MYO-029 Ye ساكن فوق خرزات Sepharose منشطة مع cyanogen bromide يغسل العمود © 52: إتزيم enzyme :mAb )*( مضاد جسم أحادي السلسلة monoclonal antibody
لا مسبقًا مع 0.٠ جزيئي جرامي acetic acid ويتعادل مع PBS يحتوي على You مللي جزيئي جرامي 11801 عند أس هيدروجيني 7.7 قبل إضافة مصل آدمي. Blas للتنشيط الظاهر من أجل GDF-8 الكامن بالتسخين إلى ©+"مئوية؛ يسخن المصل مسبقًا إلى 15"مئوية لمدة ٠١ دقائق ثم يمرر عندئذ ؟ مرات فوق عمود انجذاب 1470-029 المضاد-00178 (١مجم) ٠ ويفحص من أجل النشاط في اختبارات 0017-8 الحر والكلي. تمرر Ul أحجام 7.5 ملليلتر من المصل فوق العمود. بعد الاختبار الأولي؛ تسخن أحجام أكبر من المصل (قاسم تامة VY ملليلتر) وتحرم من GDF-8 بالتمرير عدة مرات على عمود الانجذاب مع مرات غسيل وسطية للعمود في 8610 acetic ).+ جزيئي جرامي. يستخدم هذا المصل الناقص كمادة بينية لتوليد منحنيات قياسية مع تركيزات معلومة من GDF-8 الناضج. Ye مثال :٠-١ تجارب ازدواج طم: مقارنة هيئات الاختبار old : إمساك RK35 مع محدد 2 أو إمساك RK22 مع محدد RK35 يغطي كل mAb مضاد 0101-8 بصورة منفردة في sodium borate ).+ جزيئي جرامي على طبق ربط كبير به 93 عين (Immulon 4 HBX) طوال الليل عند ؛"مئوية أو لمدة ساعة واحدة عند ١””مئوية عند تركيز ١ ميكروجرام/ ملليلتر. يغسل الطبق ويخمد عندئذ لمدة ٠١ ١ دقائق مع عامل كاشف Pierce Superblock يخفف مخزون V.VY) GDF-8 مجم/ ملليلتر في trifluoroacetic acid-TFA 001 7) إلى ٠١ ميكروجرام/ ملليلتر في trifluoroacetic acid (TFA) 2001 في أنابيب لدنة siliconized ويخفف إضافيا في مصل آدمي ناقص GDF-8 عند تركيزات تتراوح من ١.١8 إلى oY نانوجرام/ ملليلتر كمقادير معايرة لتوليد المنحنيات القياسية. ينفذ المنحنى القياسي في * مقادير متساوية باستخدام الأعمدة 3-١ من طبق ٠ الاختبار. في طبق منفصل مسبق الإخماد به 97 عين؛ تضاف قواسم تامة 3٠ ميكرولتر من مصل الاختبار إللى كل من الستة عيون (لتقديرات ¥ مقادير متساوية) يحتوي مثبت أس هيدروجيني ١8١ THST ميكرولتر (تركيز نهائي» مصل 7730؛ حجم كلي؛ ١٠٠١ ميكرولتر). لاختبار 010178 الكلي؛ ينقل Av ميكرولتر من هذا المحلول إلى طبق PCR به 40 عين ويسخن إلى 80"مئوية لمدة © دقائق. تبرد العينات الساخنة على ثلج قبل الإضافة إلى طبق Ye الاختبار. إلى العيون المستخدمة للمنحنى القياسي؛ يضاف 10 ميكرولتر من مثبت أس هيدروجيني 1 إلى كل العيون ثم يضاف ٠١ ميكرولتر من مصل المعايرة؛ ليصل الحجم النهائي إلى م17
كلد ٠ ميكرولتر. من طبق التحضير؛ يزال 00 ميكرولتر من عينة المصل 77١ غير الساخنة وتضاف إلى طبق الاختبار من أجل تركيز مصل نهائي 1٠١ مصل في حجم كلي ٠٠١ ميكرولتر؛ من الطبق الساخن؛ يضاف ٠٠ ميكرولتر من مصل 770 إلى طبق اختبار ثانٍ. تحضن أطباق الاختبار الثانية هذه عند درجة حرارة الغرفة مع الرج. بعد ساعة ونصف؛ تغسل ٠ الأطباق ويضاف عامل كاشف Superblock لمدة © دقائق. يضاف biotinylated RK22 أو biotinylated RK35 إلى العيون عند You نانوجرام/ ملليلتر لمدة ساعة ونصف مع الرج. تغسل الأطباق ويعاد إخمادها مرة أخرى قبل إضافة ٠٠١ ميكرولتر من تخفيف strepavidin- )٠٠٠٠١:١( HRP حساس للغاية لمدة ساعة واحدة عند درجة حرارة الغرفة مع الرج. تغسل الأطباق ويعاد إخمادها قبل إضافة مادة خاضعة TMB لمدة ١١ دقيقة عند درجة حرارة الغرفة Ve مع الرج. يتوقف التفاعل بإضافة 112504 وصفر- ٠ © جزيئي جرامي وتتم القراءة على قارئ طبق Molecular Devices Spectramax عند £04 نانومتر. هناك مقارنة لهيئات الاختبار المناعي: إمساك [RK35 محدد RK22 أو إمساك [RK22 محدد 181635 موجودة في الشكلين 4 (ب). كما هو مبين؛ فإن أية صيغة قادرة على تحديد بين ٠٠١ و١٠ بيكوجرام/ ملليلتر GDF في مثبت أس هيدروجيني اختبار 11187 أو في مصل .7٠١ Vo مثال 1-¥: تأثيرات المصل على اختبار GDF-8 تقترح نتائج سابقة أن تأثيرات المصل الأساسية تزيد قيم الامتصاص في نطاق 0.7 وحدة OD إلى ١5 وحدة OD تقريبًا اعتمااًا على عينة المصل المحللة (البيانات غير مبينة). لقد تحدد أن سبب زيادة الإشارة هو تأثير HAMA (أي؛ تفاعل IgG مصل أدمي مع MAbs الفأرية المستخدمة في الاختبار) باختبار مصل آدمي ضد أطباق اختبار HBX مغطاة مع RK22 "٠ أو غير معطاة معه (مقارنة) (شكل .)٠١ إن الأطباق بدون mAb لا تظهر زيادة في الإشارة مما يقترح أن الزيادة الأساسية ليست بسبب المصل المرتبط بصفة غير خاصة مع الطبق لكنها معتمدة على وجود .mAb لقد أجريت محاولات كثيرة لتقليل القيمة الأساسية وكانت ناجحة وتتضمن تفكك حمض وإضافة زيادة من IgG من أنوا ع مختلفة لإخماد ارتباط IgG الآدمي مع IgGs الفأرية (البيانات YO غير مبينة). إن إضافة عامل كاشف متوافر (lad مصمم بصفة خاصة لتقليل تدخل عامل كاشف مثبط Ig لاختبار (IT R) HAMA كانت ناجحة عند الإضافة إلى الاختبار المناعي التالي. يستخدم ١ ميكروجرام/ ملليلتر من RK35 مخفف في Na Borate ).+ جزيئي جرامي YAEL
YY. +/- فوق الطبق -/+ المصل Myo-029 بأس هيدروجيني 8.5 كعامل كاشف للإمساك. يعاير بيكوجرام/ ملليلتر من 01018 ويحضن لمدة ساعة ونصف. يضاف Yoo وأيضًا 118
THST هيدروجيني اختبار oof في مثبت ٠٠٠١٠١١: عند تخفيف biotinylated RK22 7٠٠٠٠١:١ مخفف strepavidin-HRP ميكرولتر ٠٠١ ويحضن لمدة ساعة ونصف. يخفف كما يتضح في الشكل ١١؛ تقل القيمة الأساسية TMB .في 11151 ثم يحدث تفاعل في © .111 باستخدام العامل الكاشف AHMA
MyO-029 Ab مع GDF8 مثال 1—¥: تثبيط ارتباط
My0-029 إن (deposited on October 2, 2002, at American Tissue Culture Collection (ATCC) under respective Deposit Designation Numbers PTA-4741) Ve علاجي تم استخدامه في تجارب إكلينيكية في محاولة لزيادة قوة العضلة في المرضى Ab هو مع الاضطرابات العضلية. في الاختبار المناعي لتحديد 8 في مرضى تم إعطاؤهم
RK35 حسب الوصف هنا اتضح أن هناك تفاعلاً متبادلاً لمضاد جسم الاختبار 2470-9 للارتباط مع 06017-8. لتحديد هذا التفاعل المتبادلء Myo-029 مع GDF-8 بيكوجرام/ ملليلتر من ٠١٠١ فوق أطباق الاختبار. يضاف Myo-029 يغطى ١ biotinylated RK22 إلى كل عين. تضاف عندئذ تركيزات متزايدة من سواء يتنافس 00178 غير المعلم مع ١١ كما يتضح في شكل biotinylated RK35 أو لأنه لا تتولد إشارة في هذه الهيئة. لا تنتج MY0-029 للارتباط مع biotinylated RK3S و10-029 RK35 متبادل بين Jeli مما يدل على وجود chiotinylated RK35 إشارة مع .GDF8 للارتباط مع ٠
GDF8 مثال 4-7: استخدام 1470-029 كمنافس من أجل وكميات (RK22/RK35 أو RK35/RK22) تجرى اختبارات باستخدام كل هيئات الاختبار بيكوجرام/ ملليلتر) YOu) GDF-8 علاجي 1470-029 مع تركيز ثابت من Ab متزايدة من هو مبين في LSI يتم نثرها في مثبت أس هيدروجيني الاختبار أو في المصل الآدمي بيكوجرام/ You كمضاد جسم إمساك. يحضن 0017-8 عند RK22 يستخدم (IY شكل Yo
Vo. عند biotinylated RK35 لمدة ساعة ونصف عند درجة حرارة الغرفة مع able ميكروجرام/ ملليلتر). حتى ٠١ بيكوجرام/ ملليلتر وتركيزات متزايدة من 14770-029 (صفر إلى
١7١ يستخدم (IT تقريبًا. في شكل 727٠ يظهر فقط تثبيط MYO-029 عند أعلى تركيز من بيكوجرام/ ملليلتر لمدة ساعة ونصف YOu عند GDF-8 كمضاد جسم إمساك. يحضن 5 وتركيزات متزايدة من 1170-029. يلاحظ biotinylated RK22 عند درجة حرارة الغرفة مع ميكروجرام/ ملليلتر. © > MYO-029 تقريبًا للإشارة عند تركيزات 7٠٠0 تثبيط RK22 تحديد [RK35 باستخدام هيئة إمساك , dl مثال 10-1 استرجاع ثابت في مصل © في تجربة استرجاع ثابت. تخفف كل عينة GDF-8 تحلل ؟ عينات مصل آدمي لاسترجاع من أجل 06118 ناضج 5« تخفف بالتسلسل 7٠٠0 بيكوجرام/ ملليلتر في مصل ٠٠١ إلى بيكوجرام/ ملليلتر 0118. تحلل كل من هذه العينات Yor 5 00 600 مرتين لتنتج عينات ميكروجرام/ ملليلتر من ٠١ مع أو بدون إضافة RK22 تحديد [RK35 في هيئة إمساك يحسب التقليل في الإشارة بسبب إضافة .)(١4 انظر الشكل MYO-029 ٠ متولد في مثبت GDF-8 انظر شكل ؟١(ب). تقارن هذه القيم مع منحنى قياسي 70-9
GDF8 أس هيدروجيني اختبار 111571 وترسم بيانيًا القيم الملحوظة مقابل المتوقعة من أجل إن القيم الملحوظة أقل بصورة واضحة من القيم المتوقعة مما يدل على أن Vo في شكل المنحنيات القياسية في مثبت الأس الهيدروجيني وحده لا تقدر كميًا بدقة قيم 0017-8 الموجودة في عينات المصل. VO مثال 1-7: استخدام مصل مقابل مثبت أس هيدروجيني الاختبار لتوليد منحنيات قياسية تستعمل هذه .GDF-8 ومصل فأري مزال gale يستخدم في هذه الدراسة مصل فأري لتوليد (THST الأمصسال » إلى جانب المصل الآدمي العادي ومثبت الأس الهيدروجيني إن الاختلاف في الميل V0 ناضج؛ انظر شكل GDF-8 protein منحنيات قياسية باستخدام _بين المنحنيات القياسية المتولدة في المصل مقابل مثبت الأس الهيدروجيني يفسر اختلاف القيم ٠ الملحوظة مقابل المتوقعة في تجارب إخماد مفعول/ استرجاع بدرجة كبيرةٍ جدًا عندما يكون مثبت الأس الهيدروجيني هو الوسط المستخدم لتوليد منحنيات قياسية. (VT (شكل إن الميل القليل للمنحنى القياسي في المصل مقارنة بالمنحنى القياسي في مثبت الأس الهيدروجيني يلفت الانتباه إلى تأثيرات المادة البينية للمصل على الإشارة الناتجة ويقترح أن غير متوافر بالكميات KO المنحنيات القياسية يجب تولدها في المصل. إن مصل فأر ٠ الضرورية لإجراء الاختبار ومصل الفأر العادي به مستويات داخلية عالية من 0117-8 سوف في عينات المصل غير المعلوم. إن المصل الآدمي العادي به GDF-8 تعوق التنبؤ بوجود
YAS
١77 يضيف Wal أيضا مستويات داخلية من 001-8؛ برغم أنها أقل من الفأر العادي؛ وذلك عامل إعاقة غير مطلوب. إن البديل الممكن هو حرمان مجموعة المصل الآدمي العادي من للاستخدام كبنية معايرة اختبار. 8 في المصل Myo-029 Ab إخماد نشاط/ تفكك :7-7١ مثال يعوق التقدير الكمي الدقيق من أجل MYO-029 أظهرت دراسات سابقة أن وجود ° يفترض .RK35 لمضاد الجسم epitope بتفاعل متبادل مع RK35/RK22 في هيئة GDF-8 في العينة؛ فقد يمكن تطوير GDF-8/MY0-029 أنه إذا كانت هناك إمكانية لتفكك معقدات من Abs اختبار مناعي يقيس بدقة 0118 في وجود 11770-029. هناك احتمالات قليلة لتفكك تتضمن التفكك الحمضي وتغيير الطبيعة بالحرارة. اعتمادًا على التقدير (alias مولدات فإن 1017-8 الكامن يمكن تنشيطه بصورة (Brown et al., 1990, Growth Factors 3, 35-43) ٠ غير معكوسة بالمعالجة بالحرارة. إن تدرج درجة الحرارة من 15”مئوية إلى 80"مئوية في في Myo-029 مثبت أس هيدروجيني اختبار 11187 ليس له تأثير على التثبيط الذي يظهره اختبار 001-8. على أية حال» تجرى تجربة إرشادية مع مصل عادي غير باطل المفعول؛ مصل باطل المفعول مع 4050 بيكوجرام/ ملليلتر 0101-8 ناضج؛ أو مصل باطل المفعول مع ويسخن إلى 77٠١ و1470-029 في مصل Ab كامن. في هذه التجربة؛ ينثر 6101-3 Ve في الاختبار GDF-8 تدل النتائج على أن نشاط (VY دقائق (انظر شكل ١ لمدة ةيوئم٠ يكون خامد النشاط في مصل مسخن إلى 14770-029 Ab هذه وأن hall مستبقى عند درجة أن عينات المصل المخففة في وجود )١( يتضح هذا النشاط الخامد بطريقتين: .ةيوثم٠ لها نفس خرج الإشارة مثل عينات ساخنة مقارنة بدون إضافة Myo-029 يمكن مرة ثانية تقليل إشارةٍ الاختبار إلى مستويات الخلفية الأساسية بإضافة )١(و 070-029 ٠ حديث التحضير بعد تسخين العينة. تلاحظ هذه النتائج في مصل عادي؛ مصل 1470-9 كامن. تظهر عينات المصل المخمدة GDF8 مخمد مع 610178 ناضج؛ وفي مصل مخمد مع
GDF8 كامن زيادة في الإشارة يبدو أنها معتمدة على مادة 0017-8 الكامن وليس GDF-8 مع الناضج. لتحديد مدة زمنية دقيقة أكثر لإخماد النشاط المؤثر؛ تجرى تجربة المدى الزمني النتائج على أن Jas .MYO0-029 باستخدام مصل عادي مخمد مع © ميكروجرام/ ملليلتر YO وقت مبكر مثل “ دقائق عند 0 8"مئوية. die GIS يكون خامد النشاط MYO-029 Ab في المصل الأدمىي GDF8 مثال 8-7: إنقاص
١77 مجم ١ من أجل حرمان المصل الآدمي من 0017-8 داخلي» يحضر عمود انجذاب مع من خلال تتنشيط Sepharose ساكن تساهميًا مع خرزات MYO-029 | من تل 0ععم200ن. يغسل العمود مسبقًا وتمرر قواسم تامة صغيرة من مصل آدمي فوق bromide بالإضافة لذلك؛ يسخن .007-8 ELISA العمود وتختبر من أجل نشاط 0017-8 في اختبار (AL المصل مسبقًا إلى 16 "مئوية ثم يبرد عندئذ قبل تمريره فوق العمود. يظهر المصل © إشارة زائدة قد تكون بسبب التنشيط المناعي من أجل «GDF8 عند استخدامه في اختبار زيادة الإشارة في اختبار 0118 عند التسخين VA كامن في المصل. يبين شكل GDF-8 زيادة ملحوظة ang وأيضًا نقص في الإشارة في المصل الساخن/ الناقص 11/0. بالتحديد؛ لا 8"مئوية ٠ التسخين إلى sale) عند H/D في الإشارة في مصل
H/D مثال 14-1 المنحنيات القياسية فى مصل Ve داخلي تتولد منحنيات تفاعل مناعي قياسية تحت شروط GDF-8 باستخدام مصل بدون ينثر 0171-8 في ٠ الكامن GDF-8 5 الناضج GDF-8 تسخين وعدم تسخين باستخدام كل من مع/ ملليلتر. يستخدم 0017-8 الكامن 5٠0 إلى You ويخفف بالتسلسل من 7/٠٠١ مصل Aer إلى ٠٠000٠ مرةٍ مثل ذلك من أجل 8 الناضج يتراوح من Yo protein عند تركيز بيكوجرام/ ملليلتر (شكل ؟١) . تبين نتائج هذه التجربة زيادة ملحوظة في إشارةٍ الاختبار عند ٠ فإن ١8 إلى 860”مئوية. يلاحظ أنه في شكل 77٠٠0 H/D تسخين 001-8 الكامن في مصل المسخن إلى 80”مثوية لا يظهر زيادة الإشارة المميزة الملحوظة في المصل HD المصل GDF-8 العادي. يوفر هذا تصديقًا لفرضية أن الزيادة الموجودة في المصل العادي بسبب الناضج لا تزداد عند التسخين GDF-8 الداخلي الكامن. على النقيض» فإن الإشارة المتولدة مع وفي تجارب متكررة تميل إلى أن تقل مع التسخين عند 860"مئوية. ٠ gle Jae عينات A تحليل 60178 الحر والكلي في :٠١-١ مثال GDF-8 عينات مصل عادي؛ مجمدة مسبقًا؛ ذائبة من التجمد وتختبر من أجل A تستخدم باستخدام اختبار درجة حرارة الغرفة (الحر) وخطوة تسخين 0 8"مئوية (الكلي) ly الحر مع تركيزات H/D الكامن. يتولد المنحنى القياسي لهذا التحليل باستخدام مصل GDF-8 لتنشيط يتراوح المنحنى القياسي (GDF-8 الناضج مضافة كمادة معايرة 0017-8 protein معلومة من YO إلى 188 بيكوجرام/ ملليلتر ويستخدم تحليل مطابقة منحنى تراجع خطي مع ١5900 من لحساب قيم 610178 في عينات المصل الثماني غير (Yo (انظر شكل ٠.9949 معامل ارتباط
YAS
"١7 170-029 فإن التغير في الكثافة البصرية بسبب إضافة « Bie المعلومة. حسب الوصف هو تمثيل للبيانات YY مع الكمية الداخلية من 0101-8 في العينة. إن شكل Layla تتناسب يوضح هذا الشكل إشارة 6017-8 الحر وإشاراته (GDF-8 المجردة المستخدمة لتحديد تركيز الكلي وإشارته القليلة GDF-8 بالإضافة إلى (MY0-029 Ab القليلة المقابلة عند إضافة نتائج تجربة تجديد الاختبار. يظهر اختبار YY المقابلة بإضافة 1470-029. يقدم شكل ©
GDF-8 من التجدد. إن هذا حقيقي بصفة خاصة لاختبار Ale الحر والكلي درجة 8 الحر (درجة حرارة الغرفة). إن إشارة الاختبار الزائدة في الاختبار الكلي (تسخين إلى دقائق. إن التقليل ٠١ مئوية)؛ من يوم إلى يوم سببها زيادة في زمن التسخين من * إلى ٠ الاختبار مع زيادة زمن تسخين العينة ملحوظ بصورة متكررة وقد يعكس تغير طبيعة BLE في مولد المضاد وفقد النشاط المناعي. ٠
MYO-029 مثال 11-7: 6018 داخلي نشط بالحرارة محدد دونيًا في وجود 170-029 يحضن مصل آدمي في وجود أو غياب 7١ في التجربة المبينة في شكل يجرى (ELISA وتتغير طبيعته بالحرارة عندئذ عند درجات حرارة مختلفة قبل التحليل بواسطة تقدير كمي لمستويات 8 في عينات الاختبار بالاستقراء من نتائج اختبار منحنى قياسي مخلق نقي معلوم التركيز مضاف في مصل GDF-8 dimer يتكون من سلسلة تخفيف لأجل بتحليل كروماتوجرافي بالانجذاب. يحدث تحدي أقصى من أجل GDF-8 مجمع بدون =) يخفي تحديد MY0-029 5 عند ١٠”مئوية تقريبًا. إن وجود MYO0-029 في غياب GDF-8 في المصل عند درجات الحرارة المنخفضة. إن الحضانة عند درجات حرارة أكبر من 8 تبين تركيزات dla في وجود 14770-029. على أية GDF-8 مئوية تستعيد جزئيًا تحديد ٠ محسوية من أجل 0017-8 عند درجات حرارة أكبر من 15"مئوية أن الاختبار يقدر دونيًا ٠ جوهريًا الكمية الكلية من 60178 الموجودة في المصل. عند أس هيدروجيني منخفض Myo-029 في وجود GDF8 تحديد 1) Y—1 مثال إن التحديد دون الأمتل من أجل 06118 عند التسخين إلى درجات الحرارة الضرورية لتفكك تفكك الحمض على ELISA قدرة YE يحث تقييم الطرق البديلة. يوضح شكل 1770-9 في غياب ووجود 14770-029. في تجارب سابقة يتعادل GDF-8 تحديد مستويات متشابهة من YO
MYO- الإمساك. تحت هذه الشروط يكون Ab قبل الارتباط مع GDF-8/MYO0-029 خليط عند التعادل. في شكل (RK35 قادرًا على التنافس بالارتباط مع مضاد الجسم للإمساك؛ 9 م17
١١٠
RK35 يتضح أنه عند استبقاء شروط الإمساك عند أس هيدروجيني حمضي قليل» لا يزال Y 8 ولذلك يمكن تحقيق استرجاع كامل My0-029 بينما لا يستطيع ذلك GDF-8 قادرًا على ربط العلاجي. Ab لتحديد 0117-8 في وجود أو غياب تحت شروط حمضية 0117-8 Jay RK35 :١-١ مثال قادر على ربط 0127-8 تحت شروط حمضية؛ (MY0-029 لتحديد أن 5 (لكن ليس ° في مصل آدمي وتجرى خطوة إمساك مادة التحلل في Myo-029 5 RK35 يعاير بصورة منفردة شروط حمضية. إن الكميات الزائدة من 181635 في المحلول قادرة على ربط والتنافس لربط تحت شروط GDF-8 المرتبط بالطبق؛ مما يؤدي إلى تحديد قليل من أجل RK35 مع GDF-8 حمضية. إن 1470-029 غير قادر على ربط 0117-8 في محلول يقترب من أس هيدروجيني في محلول المتوافر للإرتباط GDF-8 بغض النظر عن تركيز 14770-029 المضاف؛ تاركًا oF ٠ على RK35 لذلك» يمكن تحديد قدرة (Yo (شكل ELISA المغطى في عين RK35 Ab مع تحت شروط لا يمكن أن يخدم فيها 170-029 كمادة مساهمة مفيدة يمكن GDF-8 ربط في وجود 2170-029. إن تفكك حمض لمضاد الجسم GDF-8 إنجازها لقياس مستويات تبين البيانات MYO0-029 مؤثر حتى عند زيادة تدريجية لتركيزات GDF-8 من MYO-029
GDF-8 ميكروجرام/ ملليلتر لا تقلل تحديد ٠٠١ أن زيادة تركيز 170-029 إلى Yo في شكل ٠
GDF-8 التقليل الملحوظ في تحديد Wad باستخدام بروتوكول تفكك الحمض. يبين هذا الشكل
XT باستخدام بروتوكول تفكك بالحرارة في شكل من تلك GDF-8 يؤدي تحميض المصل الآدمي إلى تقديرات أكبر بكثير لمستويات مصل
GDF-8 المقررة مسبقًا . لتوضيح أن تقديرات المصل الزائدة هي نتيجة لتحديد أكبر من أجل وليست بسبب صنيع يحثه حمض. يحلل المصل من كل من فأر مزال 0017-8 بالهندسة ٠٠ أن المصل YV يبين شكل Belgian Blue موجود طبيعيًا» البقرة GDF-8 الوراثية وحيوان مزال يفشل في إنتاج إشارة أكثر من الخلفية Belgian Blue من كل الفأر مزال 0017-8 والبقرة الأساسية للطبق مع القياس عند أس هيدروجيني سواء متعادل أو حمضي. إن القيم المقررة هنا تكون بوحدات كثافة بصرية وتسمح بتقييم مقارن وأيضا يؤدي فقد منحنى المعايرة إلى عدم .GDF-8 القدرة على تحديد الكمية المطلقة من Yo مطابقة منحني معايرة :١ 1-7 مثال
لتقييم التباين بين الاختبارات وفي الاختبار ذاته لطريقة تفكك بالحمض» تتحلل قواسم تامة من مصل Belgian Blue خامد المفعول مع GDF-8 dimer مخلق. تحضر أربعة محاليل مخزون غير معتمدة على منحنى المعايرة وتختبر في ثلاثة مقادير متساوية في خمسة مواقع مختلفة من طبق به 97 عين.
° يمكن استخدام نموذج منطقي من ؛ إلى © معايير لمطابقة منحنى المعايرة لهذا الاختبار. يمكن استخدام المتوسط الحسابي للثلاثة مقادير المتساوية كبيانات مجردة لمطابقة النموذج. نموذجيًا؛ فإن التباينات عند مستويات تركيز مختلفة تميل إلى كونها مختلفة. للحصول على منحنى معايرة دقيق عند كل من التركيزات القليلة والمرتفعة؛ لابد من استخدام طريقة أقل مربعات غير خطية موزونة؛ أو تحويل يثبت التباين لبيانات الكثافة البصرية متبوعًا بطريقة
٠ أقل المربعات غير الخطية غير الموزونة. تبين الأشكال YA (أ)-(ج) ثلاث طرق مختلفة لمطابقة منحنى المعايرة لخمسة أطباق GDF-8 ELISA بالنسبة للأخطاء النسبية للتركيزات المعاد حسابها للمقادير القياسية المعايرة. إذا كانت الأخطاء بنسبة 77١0 مقبولة؛ فعندئذ يمكن استخدام كل من النموذج المنطقي 4- و*©- للمعايير المطابقة على الجذر التربيعي للكثافة البصرية. Ve مثال 19-7: دقة وضبط الاختبار لتقييم التباين بين وفي نفس الاختبار لطريقة التفكك بالحمض تتحلل قواسم تامة من مصل Belgian Blue خامد النشاط مع GDF-8 dimer مخلق. تحضر أربعة محاليل مخزون غير معتمدة على منحنى المعايرة وتختبر في ثلاثة مقادير متساوية في خمسة مواقع مختلفة من طبق به 97 عين. يبين شكل YA نظام الطبق لخمسة أطباق معالجة في ثلاثة أيام مختلفة. Yo تحسب تركيزات العينة خامدة النشاط من منحنى المعايرة المطابق مع كل طبق نموذج منطقي من ©- معايير. إن معاملات التباين (CV) في الطبق وبين الأطباق والأخطاء النسبية (RE) تلخص في جدول ١و ؟. إن الدقة في كل من داخل الطبق وبين الأطباق تكون بصورة جيدة في حدود 727٠ اعتماذًا على طريقة حسابات CV جدول © Yo التباين في الطبق للعينات مخمدة النشاط قيمة اسمية عدد متوسط | متوسط CV | المتوسط العينة 0171 YAS
يكرد wr al ewe elu a eel eve er eevee vel [eee [SD = 1 متوسط العينة [SD << 82 تركيز القيمة الاسمية جدول ١ التباين في الطبق للعينات مخمدة النشاط 08 0 ً' اله اعد | al اس [Inter-Plate SD = CV#1 © متوسط العينة [Inter-Plate SD = CV#2 تركيز القيمة الاسمية مثال VY قياس تركيزات Myostatin في مصل )2 باستخدام الاختبار حسب الوصف أعلاه؛ تقاس تركيزات myostatin في الدورة الدموية وتقارن في أمصال آدمية صحيحة الجسم. في دراسة؛ يتم تقييم أمصال رجال صغار السن ٠ وأكبر Gu من أجل مستويات myostatin تختبر أيضا تأثيرات معالجة testosterone على مستويات myostatin في الدورة الدموية باستخدام عينات مخزونة من دراسة استجابة جرعة testosterone في تلك الدراسة؛ التي تم نشر تفاصيلها مسبقًا (Bhasin S et al.
J Clin Endocrinol Metab 2005;90:678-88, Bhasin S et al.
Am J Physiol Endocrinol Metab 2001 ;281 :El 172-81, and Storer TVV et al.
J Clin Endocrinol Metab 2003;88: 1478-85), Yo YAEL
YYA
مصاحبة a لرجال أصحاء صغار السن وأكبر testosterone تعطى جرعات متدرجة من بزيادة معتمدة على الجرعة في كتلة وقوة عضلة هيكلية. في دراسة أخرى يتم تقييم أمصال سيدات صحيحات الجسم ومنقطعة الطمث جراحيًا. في الدراسة الأولى تشتق عينات المصل من رجال أصحاء صغار السن؛ تتراوح أعمارهم طبيعية؛ testosterone من 19-68 عام؛ مع مستويات a ورجال أكبر ale ؟-١8 من © شاركوا في دراسته استجابة لجرعة كما هو مذكور أعلاء. إن بروتوكولات الدراسة المصرح بها testosterone في لوحات الدراسة المعهدية
Charles R. Drew University and Harbor-UCLA Research and Education Institute.
VY > نانوجرام/ ملليلترء درجة 4 > PSA ٠ تتضمن معايير الإقصاء تاريخ سرطان البروستاتا قيمة نسبة حجم الخلايا الحمراء في الدم AUA في استقصاء أعراض مجرى بولي سفلي ٠ الكلي > 48 7؛ توقف شديد للتنفس أثناء النوم؛ داء السكر؛ فشل قلب محتقن؛ احتشاء قلبي في السنة السابقة؛ أو المشاركة في androgens عضلي في الستة شهور السابقة؛ استخدام برامج تدريب متوسطة إلى شديدة التمرينات. بعد فترة تحكم ؛ أسابيع؛ يقسم المشاركون
GnRH إلى © مجموعات معالجة لتعاطي حقنات شهريًا من معضد ١ عشوائيًا من (leuprolide depot, 7.5 mg; TAP, North Chicago, IL) Vo داخلي. يتعاطى المشاركون أيضا حقنات في العضل أسبوعيًا من gonadotropin لكبح إنتاج testosterone enanthate (TE, Delatestryl, 200 mg/ml; Savient Pharmaceuticals, Inc., Iselin, NJ) مجمء أو 30 مجم أسبوعيًا. ١75 مجم؛ ٠٠ مجم؛ Yo إلى © جرعات: ١ من 7 تخلط عينات المصل (أو عينات معايرة في مصل (Belgian Blue مع مثبت أس هيدروجيني تفكك حمض Glycine HCI) .+ جزيئي جرامي أس هيدروجيني (Y.0 عند المعدل YLT لاختبارات غير تفككية؛ تخلط العينات مع مثبت أس هيدروجيني THST ٠٠ Tris-HCI) مللي جزيئي جرامي أس هيدروجيني 00s NaCl A مللي جزيئي جرامي؛ ١ Glycine مللي جزيثي جرامي» Tween-20 0.0.0 7؛ أس هيدروجيني (A بدلا من مثبت
Y مع (Immulon 4 HBX # 3855) تحضن أطباق الاختبار .Glycine-HCT أس هيدروجيني Yo مللي جزيئي ٠٠١ Sodium Borate) مجم/ ملليلتر 11635 في مثبت أس هيدروجيني تغليف ميكرولتر/ ٠00 الليل عند ؛”مئوية؛ تغسل؛ وتخمد مع isha )1.١ جرامي؛ أس هيدروجيني ال
i 4 عين مع )#37535 .SuperBlock-TBS (Pierce تنقل عينات الممسل المخففة ٠٠١( ميكرولتر) إلى طبق الاختبار؛ تحضن لمدة 90 دقيقة عند درجة حرارة al تغسل ؛ مرات مع THST ويضاف لكل عين ٠٠١ ميكرولتر من Ab ثانوي biotinlylated ٍْ 0.١( RK-22 ميكروجرام/ ملليلتر) لمدة 90 دقيقة عند درجة حرارة الغرفة. تغسل الأطباق ؛ ّْ © مرات مع «THST ويضاف ٠٠١ ميكرولتر من (SouthernBiotech ~~ Streptavidin-HRP '! )#7100-05 مخفف :40000 في مثبت oof هيدروجيني (THST لمدة ساعة عند درجة حرارة الغرفة. تغسل الأطباق مرة أخرى ؛ مرات مع 11187؛ وتتطور بإضافة ٠٠١ ميكرولتر ْ من مادة خاضعة TMB لمدة ١١ دقيقة عند درجة حرارة الغرفة. يضاف ٠٠١ ميكرولتر من ٍ] 4 © جزيئي جرامي للعين؛ وتتم قراءة أطباق ELISA عند 4٠0 OD نانومتر مع : ٠ تصحيح طول الموجة المضبوط عند +06 نانومتر. نطاق منحني المعايرة: يتولد منحنى معايرة برسم بياني لقيم OD والتركيز المقابل لكل مادة معايرة. تستخدم مطابقة ا منطقية من © معايير لمطابقة منحنى المعايرة. يحضر منحنى معايرة المتكون من تخفيفات ْ مرتين لأجل 0 ناضج آدمي مخلق في مصل Belgian Blue ممتد من VY إلى ٍ ٠ 25000 بيكوجرام/ ملليلتر قبل كل اختبار. تتحدد عدم الدقة في وبين الاختبارات لقيم القراءة إٍ المتكررة لعدد ١١ مادة معايرة من ١ دورات تحليلية. يحسب المتوسط الحسابي؛ JCV SD ٍ والميل 7 للتركيزات المستقرئة لكل دورة تحليلية (لتحديد عدم الدقة في الاختبار) ولكل الدورات إٍْ التحليلية (لتحديد عدم الدقة بين الاختبارات). يتحدد الحد السفلي والعلوي للتقدير الكمي بأنه i أقل (LQ) وأعلى (ULQ) تركيزات مادة معايرة (على الترتيب) يمكن قياسيها مع TCV : ddl ٠ في الاختبار < 120 : تحضير عينات تحديد صلاحية: : تحضر © مجموعات لعينات تحديد صلاحية مقابلة لتركيزات مصل ALE متوسط النطاق ّْ وعالية لأجل myostatin باستخدام عينات مصل من أشخاص أصحاء مع تركيزات myostatin آ داخلي في النطاق السفلي والمتوسط لمنحنى المعايرة؛ على الترتيب. إن عينة تحديد الصلاحية ْ Yo الكبيرة هي عينة مصل من شخص صحيح مخمدة مع myostatin protein مخلق. : عدم الدقة في وبين الاختبارات: إْ YA£T
ا : i . تقاس CVs في وبين الاختبارات في ١ قواسم تامة منفصلة لكل من عينات تحديد الصلاحية الثلاثة ALE) متوسطة؛ عالية) في * دورات تحليلية منفصلة. يتحدد نطاق قبول دورة تحليلية QC (المتوسط الحسابي للتباين الكلي للاختبار 0-/+) من تركيزات myostatin المقاسة في 77 قاسم تام منفصل لكل من © عينات QC في YO دورة تحليلة مستقلة. يحلل © قاسم تام من كل من عينات QC الثلاثة (QC-AL) متوسط-00؛ وعالية (QC- في كل دورة تحليلة للعينات. تكون الدورة التحليلية مقبولة إذا كانت تركيزات myostatin المقاسة في ١ من عينات QC الثلاثة في نطاق القبول المقرر. اختبارات أخرى: تقاس مستويات testosterone الكلية في المصل باختبار مناعي إشعاعي خاص محدد ٠ الصلاحية مسبقًا مقابل تحليل كروماتوجرافي سائل ترادفي مع قياس طيف كتلة ِْ (LC-MS/MS) تكون معاملات التباين في وبين الاختبارات لاختبار 7 كلي 78.7 TY على الترتيب. يقاس T الحرء المنتفصل من المصل بإجراء dialysis اتزان» باختبار مناعي إشعاعي حساس له حساسية 0.77 بيكوجرام/ملليلتر وتكون معاملات التباين في وبين الاختبارات 74.7 و 2717.7 على الترتيب (Sinha-Hikim et al.
J Clin Endocrinol Metab 1998;83: 1312-8). Vo يقارن الاختبار المناعي الإشعاعي وطرق LC-MS/MS بتحليل عينات محضرة في مصل منزوع بفحم نباتي مضافة إليه كميات معلومة من 1. توضح هذه القياسات ارتباط ١.94 بين قياس الاختبار المناعي الإشعاعي 5 LC-MS/MS تقاس مستويات globulin ربط هرمون جنس في المصل (SHBG) باختبار قياس استشعاع مناعي الحساسية 1.75 نانوجزيء ٠ جرامي/ لتر. تتحدد تركيبة الجسم عند خط القاعدة وخلال الأسبوع + ¥ بقياس امتصاص أشعة X مزدوجة الطاقة (DEW, Hologic 4500, Waltham, MA) تستخدم صورة تركيبة الجسم لمعايرة الماكينة قبل كل قياس. تحليلات إحصائية يتم تقييم المتغيرات الناتجة لتوزيع وتجانس التباين؛ إن المتغيرات التي لا تحقق افتراضات Yo تجانس التباين أو توزيع طيفي تكون متحولة لوغاريتميًا. يستخدم ANOVA لتقييم الاختلافات عبر مجموعات الجرعة طبقًا للسن؛ الأصغر مقابل الأكبرء عند نقطة زمنية واحدة مع اختبار Sheffe لتحديد المجموعات المختلفة بدرجة ملحوظة إذا تم تحديد وجود فرق بواسطة YAEL
ض YY ANOVA يتم التغيرات في المجموعات من خط القاعدة إلى المعالجة مع اختبارات-7 مزدوجة. يضبط ألفا عند ٠.05 لتحديد الدلالة الإحصائية. إن البيانات مقدمة مثل متوسط حسابي +/-SEM أو متوسط حسابي للتغير 7 من خط القاعدة 520/4-/+,؛ إذا لم يشار بخلاف ذلك في الرموز التفسيرية للشكل. 0 السمات المميزة لاختبار :myostatin النطاق الخطي: يتحدد متوسط عدم الدقة في وبين الاختبارات من ١ دورات تحليلية لكل من ١١ مادة ًَ معايرة (77- ١ بيكوجرام/ ملليلتر) في المنحنى القياسي (جدول 7ء أدناه) ٠ إن CV بين الاختبارات من أجل مادة مغايرة VT بيكوجرام/ ملليلتر هي AYE ولك تزيد عن الحد المقبول )5 (T+ لذلك؛ يتحدد LLQ للاختبار بواسطة نقطة مادة المعايرة التالية ١7( ٠ بيكوجرام/ ملليلتر) التي يكون عندها CV بين الاختبارات والميل7 7189-7 vgs على الترتيب. إن CV بين الاختبارات بمقدار 777.4 لمادة معايرة 59006 بيكوجرام/ ملليلتر ليست دكاة اه > CT Co La في النطاق المقبول )> ٠0 77) وبذلك يتحدد ULQ لنقطة مادة المعايرة الأقل التالية ( 7790 بيكوجرام/ ملليلتر) التي يكون عندها CV والميل 7 77.7 و8. 7 على الترتيب. إن النطاق الكمي الخطي للاختبار يمتد من VET إلى 7500© بيكوجرام/ ملليلتر في مادة بينية Vo هامة حيويًا. ِ] t ! . YAY
Q
— mn) a | و | 5١ ا 1 of FX : + = = . J *| 23 : 5 3 ٠ > ”ا 3] 53 223 1 0 1 +. 0 . +a, + 3 . 5 ' : + 1, 5 - يو > < | < >» في | > Pa © 5 7 > > > |r > o |Z 4 5 > 98 19 3 > < | a + + | 3 9 Q r > o >» 2 < 2 Sle : £ <= o ااي ~ في > 1 ْ . j 3 > ha 4 . 3 =| > — o o 32, سي | م 2722 > | | س3 3 الى | ا[ i > 1 ١ =) <Z 9 24 9 J ro J < > 3 > ~ < 3 صو | صو . 2) > . . ب = 4 > 0 ا : w | لم | w | ~ 7 ; sa 3 في وي 3 . بي ب > <£ i 3 w 4| > | > } = 3 . . g FF
S| | 7 ِ 3 > |< : — 4 << و | ~ z ST > = 1 ل أل
NE 2
Z |= 0 7 ا و i < o | ل | : 0 | مر 1 3 ف | > سر > > 9 r= و < > > 2 > | مو ; ب — | ~ 1 صر اي ج الس إ 3 في > |= z 202 !
YAER
= الح 3 25 2 4 - ب | 1 “a .ا + 4 > 1 : << | - | | جو ا << a — < r = فيا 0 > Q -— a” -3 > 3 —- ~ ويح a Ww Q Q > 3 ao” < ~~ < ~ ” ww 3 J << ب > 0 ww 3 > 0 وي > . Q > < > -— > 3 3 3 3 3 ص > < > ~ Q > rr 0 a” w J J »> و |> yd بي > a” < < < < < < < < —- لحي اي اي حي سو | < Q و في فها | w حو وي J > 3 و و © £< . سق | |> سن a a a a 3 1 ~ »> و و > | w a ¥ a < 3 < > - > > < صر > ولح لإا ليبا ww ww rr | — — ~ 0 ~~ > في Q - — > > > * < . + 3 ا ود | w »> ba > >» >» > a 3 0 Q w a > | ~ - > سو سس > p= pos . اي اب . اب سور ويح . . . ٠ . ص 3 3 صر — 0 a w * . << ار اي - »> o > | 0 || ~ ~ | -1 0 3 سر —- . ~~ |r| > > + < << | ع > > > و > »> و ص ao < >» ٠ > Ww > رب a Q 3 ; ° ليح يي 0 a + —- سي حي اي — — حيو | حو | فيا | صر م | Ww | امن | حو r 0 3 : * . . YAEL
7" ض عدم دقة في وبين الاختبارات: , إن المتوسط الحسابي لتركيزات myostatin (بيكوجرام/ملليلتر « (SD في عينات صلاحية قليلة؛ متوسطة وعالية في * دورات تحليلية هفو قمتحكئك AYOEVTYIO AEARIATIA, على الترتيب. إن CV في الاختبار المقاسة لعينات الصلاحية القليلة؛ © والمتوسطة والعالية (العددد 0 لكل عينة صلاحية) هي 401 IVY EY على الترتيبء CV بين الاختبارات هي AYA 0.1 و 759.7 على الترتيب. خصوصية الاختبار: إن myostatin protein الناضج له درجة كبيرة من حماية الترتيب بين الأنوا ع الثديية (4)؛ مما يسمح باستخدام اختبار myostatin في عينات كثيرة غير Gaal تتضمن «JL حيوان ٠ قارض؛ كلب بقرةة؛ وقرد. تختبر عينات مصل من ماشية ناقصة (Belgian Blue) myostatin ومن Ohi مع طفرة إخمادية للنشاط في جين (mstn KO) myostatin تحت شروط حمضية تفككية؛ وتقارن مع حيوانات Ale من نفس النوع (شكل 9؟لأ)). إن myostatin المصل وفير بغزارة في الفثران العادية (حوالي ١٠١ نانوجرام/ ملليلتر)؛ بينما يكون المتوسط في مصل بقرة طبيعيهية ٠ ناانوجرام/ ملليلتر LT على par wl فإن myostatin protein ٠ لا يمن تحديده في أمصال من كل من ماشية Belgian Blue وفئران Lee «myostatin KO يؤكد خصوصية الاختبار لأجل myostatin لأن الطفرات في هذه الحيوانات ناقصة myostatin توقف تكوين .protein سمات خط القاعدة للآدميين: تكمل مرحلة المعالجة OF من TY رجل صغير السن و٠5 من 10 رجل كبير السن ٠ - مقسمين عشوائيًا. إن المصل الكافي لاختبارات myostatin وبيانات تركيبة الجسم يتوافران خلال الأسبوع ٠ في 90 رجل صغير السن و48 رجل أكبر tl إن هؤلاء الأشخاص متضمنون في هذا التحليل الثانوي وسمات خط القاعدة لهم مبينة في جدول cA أدناه. إن معدل الإذعان الكلي للعقار أكبر من 749 إن testosterone خط القاعدة الكلي؛ testosterone الحرء testosterone الحر#؛ تركيز SHBG Yo لا يختلفون بين © مجموعات جرعة عند خط القاعدة في أي من مجموعات الصغار أو الكبار في السن. على أية حال؛ فإن الرجال الأكبر سنا لديهم 06:06 كلي وحر في المصل أقل؛ 5 SHBG أعلى من الرجال صغار السن. إن وزن الجسم مؤشر كتلة الجسم؛ 13م
٠ وكتلة الدهن7 أكبر في كبار السن عن الأصغر سدًاء بينما يكون الطول متشابهًا في كل منهما. 4 جدول سمات خط القاعدة للأفراد المقيمين gen] pode] في رجال أصغر وأكبر سنًا: Myostatin مستويات © المصل موزعة طبيعيًا في كل من الرجال صغار السن وكبار myostatin إن مستويات السن. إن الرجال الصغار في السن لديهم مستويات myostatin أكبر بدرجة ملحوظة من الرجال كبار السن (8+ ٠.4 EV Lvs LT نانوجرام/ملليلتر» )٠..7-« (شكل ٠ ؟()). إن مستويات myostatin المصل لا ترتبط بدرجة ملحوظة بكتلة الجسم الخالية من الدهن المقاسة ٠ مع م016 في الرجال سواء صغار السن أو كبار السن (الشكلان ٠ ؟(ب) و + "(ج)). بصورة مشابهة؛ لا توجد علاقة ملحوظة بين مستويات myostatin ووزن الجسم مؤشر ATS الجسم أو مستويات testosterone المصل عند خط القاعدة (غير مبينة). تأثيرات إعطاء Testosterone على مستويات Myostatin في الرجال: إن مستويات 70 المصل عند خط القاعدة لا تختلف بدرجة ملحوظة عبر ه myostatin جرعات المعالجة في الرجال سواء صغار السن أو كبار السن. إن مستويات ٠ المصل أعلى بدرجة ملحوظة في اليوم 07 مقارنة مع خط القاعدة في كل من صغار وكبار السن (شكل (NY إن التغيرات في تركيزات myostatin المصل لا تختلف بدرجة ملحوظة بين © مجموعات المعالجة سواء في صغار السن أو كبار السن. إن الرجال الأكبر سنا لديهم زيادة أكبر بدرجة ملحوظة في مستويات myostatin عن الرجال صغار السن (شكل ١
YAS
yy ١(ب)). إن الزيادات في مستويات myostatin المصل أثناء علاج testosterone غير دائمة البقاء؛ لذلك؛ فإن مستويات 0 المصل في اليوم لا تختلف بدرجة ملحوظة عن تلك عند خط القاعدة. إن مقادير الزيادة في مستويات myostatin أعلى من خط القاعدة مرتبطة بالتغيرات في © تركيزات testosterone إن التغيرات في مستويات myostatin من خط القاعدة إلى اليوم 57 مرتبطة إيجاببًا بدرجة ملحوظة بالتغيرات في تركيزات ASH testosterone (شكل (hry والحر (شكل (ITY في الرجال صغار السن, لكن ليس في الرجال الأكبر سنا (إشكل (VY و7 ؟(د)). كما هو مقرر مسبقًا » فإن المعالجة بواسطة testosterone تصاحبها زيادات ملحوظة في ABS الجسم الخالية من الدهن ؛ إن التغيرات في كتلة الجسم الخالية من ٠ الدهن مرتبطة بدرجة ملحوظة مع جرعة وتركيز testosterone حسب الوصف مسبقًا. على أية Jl فإن التغيرات في ABS الجسم بدون دهن غير مرتبطة بدرجة ملحوظة مع سواء التغير المطلق أو التغير (شكل 7؟(ه) و 7 ؟(و)) في تركيزات myostatin مستويات Myostatin في الإناث في دراسة yl تشترى عينات المصل لسيدات حائضات صحيحات الجسم صغيرات Ve السن 71-١9 سنة من العمرء وسيدات بعد سن اليأس؛ 897-71 سنة من العمرء من MD «Beltsville 076 تقر المشاركات بالمشاركة في دراسة Bioserve مصرح بها من IRB إن السيدات منقطعة الطمث جراحيًا أعمارهن 00-7 ale خضعن لجراحة للمبيض لمدة 7 شهور على الأقل قبل انضمامهم للدراسة ولديهم FSH في المصل Tos وحدة/ لترء To > BMI كجم/ مأ؛ عينة PAP طبيعية ومسح ثديي طبيعي في الأثنى عشر AL) Bed ٠ ويوقعون على موافقة مكتوبة معلومة مصرح بها من جامعة بوسطن IRB إن مستويات 0 المصل في السيدات صغيرات السن لا تختلف بدرجة ملحوظة عن تلك في الرجال صغار السن (شكل (VY إن مستويات Myostatin في السيدات الحائضات صغيرات (oll السيدات منقطعة الطمث جراحيًا والسيدات في سن اليأس طبيعيًا لا تختلف بدرجة ملحوظة.
: ود , قائمة الترثيب
Wyeth <\) «> مضاد جسم مضاد 0118 واستخدامات من ذلك <VY >
Am102658 <\Y +> : 61/001783 <)o0+> ٠.ءاححئجملا >< ١ م >< : PatentIn Version 3.3 >19 +> ١ >< : ٠١١ >7 ١< : PRT >< i الجنس البشري <YIY> d ١ >. ١ Asp phe Gly Leu Asp Cys Asp Glu His Ser Thr Glu Ser Arg Cys Cys 3 أ ها Yo
Arg Tyr Pro Leu Thr Val Asp Phe Glu Ala Phe Gly Trp Asp Trp lle
Ye Yo AK : Ile Ala Pro Lys Arg Tyr Lys Ala Asn Tyr Cys Ser Gly Glu Cys Glu : Yo ga ¢0 ] Phe Val Phe Leu Gln Lys Tyr Pro His Thr His Leu Val His Gln Ala
Oa 00 أ ٠ ّْ Asn Pro Arg Gly Ser Ala Gly Pro Cys Cys Thr Pro Thr Lys Met Ser 1 o 7 ٠ ل 2 A ٠
Pro Ile Asn Met Leu Tyr Phe Asn Gly Lys Glu Gln Ile Ile Tyr Gly ; YAEL
VFA ض Ao a. qo Lys lle Pro Ala Met Val Val Asp Arg Cys Gly Cys Ser ٠ ٠. Y > ٠٠< ١< ؟> Yvo PRT <Y\Y> >7١< الجنس البشري Y <g> Met Gln Lys Leu Gln Leu Cys Val Tyr Ile Tyr Leu Phe Met Leu Ile ١ 2 ١١ yo Val Ala Gly Pro Val Asp Leu Asn Glu Asn Ser Glu Gin Lys Glu Asn 7٠ Yo Y. Val Glu Lys Glu Gly Leu Cys Asn Ala Cys Thr Trp Arg Gln Asn Thr Yo ٠ to Lys Ser Ser Arg Ile Glu Ala Ile Lys Ile Gln Ile Leu Ser Lys Leu On 00 Te Arg Leu Glu Thr Ala Pro Asn lle Ser Lys Asp Val Ile Arg Gln Leu Ye Yo A 10 Leu Pro Lys Ala Pro Pro Leu Arg Glu Leu Ile Asp Gln Tyr Asp Val Ao 4 qo Gln Arg Asp Asp Ser Ser Asp Gly Ser Leu Glu Asp Asp Asp Tyr His ٠ ٠١ ١٠١ Ala Thr Thr Glu Thr Ile Ile Thr Met Pro Thr Glu Ser Asp Phe Leu ١١١ YY.
Yo Met Gin Val Asp Gly Lys Pro Lys Cys Cys Phe Phe Lys Phe Ser Ser ٠١٠ ١٠ Yeo Lys Ile Gln Tyr Asn Lys Val Val Lys Ala Gln Leu Trp Ile Tyr Leu V¢o You Yoo "٠ Arg Pro Val Glu Thr Pro Thr Thr Val Phe Val Gln lle Leu Arg Leu دلا Vo VV lle Lys pro Met Lys Asp Gly Thr Arg Tyr Thr Gly Ile Arg Ser Leu YAEL
بد نما Yq.
Lys Leu Asp Met Asn Pro Gly Thr Gly Ile Trp Gln Ser He Asp Val ١5 Yoo Y.o
Lys Thr Val Leu Gln Asn Trp Leu Lys Gln Pro Glu Ser Asn Leu Gly ٠ 7١١ YY.
Ile Glu Ile Lys Ala Leu Asp Glu Asn Gly His Asp Leu Ala Val Thr
YYo YY. YYo 4
Phe Pro Gly Pro Gly Glu Asp Gly Leu Asn Pro Phe Leu Glu Val Lys
Y¢o YO. Yoo
Val Thr Asp Thr Pro Lys Arg Ser Arg Arg Asp Phe Gly Leu Asp Cys
Ye Ye YV.
Asp Glu His Ser Thr Glu Ser Arg Cys Cys Arg Tyr Pro Leu Thr Val ذا YA ع Asp Phe Glu Ala Phe Gly Tip Asp Trp Ile Ile Ala Pro Lys Arg Tyr
Ya. Yao Yeo
Lys Ala Asn Tyr Cys Ser Gly Glu Cys Glu Phe Val Phe Leu Gln Lys
Y.o 7٠ 7١١ YY.
Tyr Pro His Thr His Leu Val His Gln Ala Asn Pro Arg Gly Ser Ala 77١ YY. YYyo
Gly Pro Cys Cys Thr Pro Thr Lys Met Ser Pro Ile Asn Met Leu Tyr
Vee Yio You
Phe Asn Gly Lys Glu Gln Ile Ile Tyr Gly Lys Ile Pro Ala Met Val
Yoo Ye Yio
Val Asp Arg Cys Gly Cys Ser
YV. Yvoe 2 > ٠<
YA ><
DNA ؟> ١< الجنس البشري >7 ١< >).مء< م7
١٠ إ gattttggtc ~~ ttgactgt YA إٍْ <Y\).> ¢ : <١١؟> 1 PRT <Y\Y> <> الجنس البشري \ ل ّ Asp Phe Gly Leu Asp Cys ١ o <Y\.> © go <Y\V\> ١< ؟> DNA <١؟> الجنس البشري er ¢< 0 ٍِْ م tttgaagctt ttggatggga ttggattatc gctcctaaaa gatat <YY > 4“ ا <ا > Yo PRT <Y\Y> ٍِ ١ ١< > لجنس البشري <g> 1 : Phe Glu Ala Phe Gly Trp Asp Trp Ile Ile Ala Pro Lys Arg Tyr 1 YAET
٠١ \ 0 أ yo لا >< ْ go ><
DNA ؟> ١١< الجنس البشري ا >؟١< لا >. tttgtatttt 228 tcctcatact catctggtac accaa to / >< إْ Yo ؟> ١<
PRT <Y)Y> الجنس البشري >” ١< ا Phe Val Phe Leu Gin Lys Tyr Pro His Thr His Leu Val His Gln \ 5 Vo Vo q <YVY.>
YY > ١اا< i DNA ؟> ١< i الجنس البشري >7 ١< ' q <ي.)>
١١ tgctctggag agtgtgaatt tgtattt ف ٠١ <YY > ><
PRT <Y\Y> الجنس البشري ><
Yo >.
Cys Ser Gly Glu Cys Glu Phe Val Phe ١ 5
VY > ٠٠< علا > ١<
DNA ؟> ١< 7؟> الجنس البشري ١١<
VY <ي.> tggattatcg ctcctaaaag atataaggce aattactgct ctggagagtg tgaatttgta Te tttttacaaa aatat Vo ١٠١ ><
Yo 7؟> ١<
PRT >< الجنس البشري > ١؟<
VY >.
{ i
Vey
Trp Ile lle Ala Pro Lys Arg Tyr Lys Ala Asn Tyr Cys Ser Gly Glu ١ 5 Ye ١
Cys Glu Phe Val Phe Leu Gln Lys Tyr
Ye. Yo ٠١ > ٠٠< ٠١١ > <اا DNA <Y\Y>
Mus عضلة > ١١<
VW >. caggttcage tccagcagtc tggggetgag ctggcaagac ctggggcttc ع ٠ tcctgcaagg cttctggeta cacctttact agctactgga tgcagtgggt aaaacagagg ١٠١ cctggacagg gtctggaatg 211668681 atttatcctg gagatggtga tactaggtac YA actcagaagt tcaagggcaa ggccacattg actgcagata aatcctceag cacagcctac ٠ atgcaactca gcagcttgge atctgaggac tctgeggtet attactgtge aagaatgggt Yoo ggttacgacc ggtactactt tgactactgg ggccaaggea ccactctcac agtetectca Ye ٠١ > ٠٠< ١٠١ >ا١١<
PRT > <
Mus عضلة <YIY> ١ < $ “>
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Ala Arg Pro Gly Ala ١ o Ye Yo
Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr نك
١ ٠ Yo Ye
Trp Met Gln Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp lle
Yo $e م Gly Ala lle Tyr Pro Gly Asp Gly Asp Thr Arg Tyr Thr Gln Lys phe
Ow oo Te
Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 4 ل حت ٠ 7 Oo A ٠
Met Gln Leu Ser Ser Leu Ala Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
AO 5 ٠ q o
Ala Arg Met Gly Gly Tyr Asp Arg Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gin ٠ ٠١٠ ٠٠
Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser ١١٠١ ١١
Yo > ٠١< 771 ><
DNA <Y\Y>
Mus ؟> عضلة ١<
VO > v2 gacattgtga tgacacagtc tccatcctee ctggctatgt cagtaggaca gaaggtcact Te atgagctgca agtccagtca gagcectttta aatagtgcca atcaaaagaa ctatttggee ٠ tggtaccage agaaaccagg acagtctcct 8 tatactttgc atccactagg YA. gaatctgggg tccctgatcg cttcatagge agtggatctg ggacagattt cactcttace 97 atcagcagtg tgcaggcetga agacciggea gattacttct gtcagcaaca ttataacact ٠ ccgetcacgt teggtgetgg gaccaagetg gagetgaaa 771 ٠١ > ٠٠< ١٠١ ><
Veo
PRT ><
Mus عضلة > ١< ١٠١ >.
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ala Met Ser Val Gly ١ ° ٠١ ١١
Gln Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser عله Ser Leu Leu Asn Ser
Xe Yo Ye
Ala Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gin
Yo مع م
Ser Pro Lys Leu Leu Val Tyr Phe Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val 84 00 Te
Pro Asp Arg Phe Ile Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lo Ve. vo Ae le Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Asp Tyr Phe Cys Gln Gln
Ao 9. 40
His Tyr Asn Thr Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu ١١ ١ «0 ١ ١ ٠
Lys
VV > ٠١<
YY. > ١<
PRT >؟١١< الجنس البشري >” ١< ٠١ >.
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala ١ 2 أ ١ م Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr أ ٠ Y 0 أ ٠
YAER
١١
Trp Met Gln Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
Yo ge ¢o
Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asp Gly Asp Thr Arg Tyr Thr Gln Lys Phe oO. oo Ta
Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
Ya Yo Ae
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
Ao 9. 0
Ala Arg Met Gly Gly Tyr Asp Arg Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln
Yoo ٠١ ١٠
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser ١١٠١ ١١
YA > ٠١<
YAY ><
PRT <Y)Y> الجنس البشري >7 ١١<
YA >. حي | Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly ١ ° ٠١ yo
Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser
Yo Yo Ye
Ala Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
Yo 2 to
Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Phe Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
Oo. 00 Toe
Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr oe ولا Yo Ae
Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln
Ao q. qo
His Tyr Asn Thr Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile
YAER
٠
Yoo Y.o ١٠١
Lys 14 > ٠٠< ه>؟١<
PRT >< ض Mus عضلة > ١١< ض Yq >)..<
Ser Tyr Trp Met ماه \ هت Yo > ٠٠<
VV > ١<
PRT <Y\Y>
Mus ؟> عضلة ١١<
Yeo <{ «>
Ala Ile Tyr Pro Gly Asp Gly Asp Thr Arg Tyr Thr Gln Lys Phe Lys \ 0 Ye Vo
Gly
YY <Y).> ١١ > <ا PRT <Y\Y>
Mus عضلة >” ١١< انعلا
) 1 1 ؛ٍ 1 إٍْ | YEA
YY >].
Ala Arg Met Gly Gly Tyr Asp Arg Tyr Tyr Phe Asp Tyr ١ ° ٠١
YY >" ٠<
VV > ١<
PRT <Y\Y>
Mus عضلة >١7 ١١< إ YY >..< : Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser Ala Asn Gln Lys Asn Tyr Leu ١ 2 أ ١١
Ala
YY >< لا > ١< : PRT <Y\Y>
Mus عضلة <YYY> k yy <¢ “>
Phe Ala Ser Thr Arg Glu Ser 0 ٠ >١١ ٠١< ٍ 1 >7١< ْ PRT <Y\Y>
<4
Mus عضلة > ١<
YE >)..< ض Gln Gln His Tyr Asn Thr Pro Leu Thr ض ١ °
Yo > ٠١< ٠١ >7١١<
PRT >< ٍ Mus عضلة >77 ١١<
Yo <$ “> ٍْ Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Trp Met Gin ١ هه ١ ْ Y1<YY o> q <)>
PRT <Y)Y>
Mus عضلة <Y)¥> ٠١ <g>
Ala Ile Tyr Pro Gly Asp Gly Asp Thr 0
YV ؟> ٠< : ٠١ YY
YA£Y
You
PRT <Y\Y>
Mus عضلة >17 ١١< اجا <¢ a>
Ala Arg Met Gly Gly Tyr Asp Arg Tyr Tyr Phe Asp Tyr ١ ° ٠١ <دا اكلا ض ١١ <7؟> | PRT <Y)Y>
Mus عضلة >77 ١<
YA > حر ع
Lys Ser Ser ماه Ser Leu Leu Asn Ser Ala Asn Gln Lys Asn Tyr Leu \ 0 ١٠ ١١
Ala
Yq <Y\.> لا > ١١<
PRT <Y\)Y>
Mus عضلة > ١١<
Yq <¢ve>
Phe Ala Ser Thr Arg Glu Ser ١ 0
YALE
J
! ٠٠١ ٠١ > ٠١< 1 >؟١١<
PRT ><
Mus عضلة > ١١<©. <g>
Gln Gln His Tyr Asn Thr Pro Leu Thr \ ٍ
YY > ٠٠<
YEA >ا١١< j PRT <Y\Y>
Mus عضلة <YYY>
FY >..< igaagtgcage tggtggagte tgggggaggce ttagtgaage ctggagggtc cctgaaacte Te tcctgtgeag cctctggatt cactttcagt agetatgeca tgtettgggt tcgecagact ١٠١١ ccggagaaga ggctggagtg ggtcgcaace attagtagtg gtggtagtta cacctectat YAccagacagtg tgaagggtcg attcaccatc tccagagaca atgccaagaa caccctgtac ٠ ctgcaaatga gcagtctgag gtctgaggac acggecatgt attactgtge aagacaagac Yoo ا ; tatgctatga actactgggg tcaaggaacc tcagtcaccg 16018 YEA | YY <Y).> ©... >ا١١< ْ DNA <Y\Y>
Mus عضلة <Y)Y> 1 YAEL
YoY
YY >. gacattgaga tgacccagtc tcacaaattc atgtccacat cagtaggaga cagggtcagc Te atcacctgca aggecagtca ggatgtgagt actgetgtag cctggtatca acagaaacca ٠١ ggacaatctc ctaaactact gctttactcg 1606 ggtacactgg agtccctgat ا cggttcactg gcagtggatc tgggacggat 8 ccatcagcag tgtgcaggct Yeo gaagacctgg cagittatta ctgtcagcaa cattatagta ctccgtggac gttcggtgga Yoo
YY > ٠< ض Yo) ؟> ١
DNA <Y\Y> الجنس البشري > ١١<
FY <a> caggtgcage tggtgcaatc tggggctgag gtgaagaage ctggggcecte agtgaaggtt Te tcctgcaagg catctggata caccttcacc agctactata tgeactgggt gcgacaggee ٠١ cctggacaag ggcttgagtg gatgggaata atcaacccta gtggtggtag cacaagctac YA ! gcacagaagt tccagggeag agtcaccatg accagggaca cgtccacgag cacagtctac Yo atggagctga gcagectgag atctgaggac acggecgtgt attactgtge gagagacgag Yeo aactgggggt tcgacccctg gggecaggga accetggtea ccgtetcgag t Yo) i { Ye > ٠٠<
Yio ><
DNA ؟> ١< الجنس البشري >” ١< إ ذ
YoY
Ye <€ve> tcctatgage tgactcagec accctcagtg teegtgicte caggacagac agccaccatt Te acctgetctg gacatgecact gggggacaaa fttgtttcct ggtatcagea gggatcaggc ١٠١ cagtccectg tattggtcat ctatgacgat acccagegge cctcagggat ccctgggega YA ttctctgget ccaactctgg gaacacagec actclgacca tcagegggac ccaggctatg ٠ gatgaggetg actatttttg 482228166 2800661 181011256 cggagggace Yoo aaggtcaccg tccta Yio
Yo > ٠٠< :دا ض > ١٠< , DNA >؟١7< الجنس البشري >7 ١<
Yo >. <ي gaacatgacg gegeeetggg tggeectege 01016166 مدع gegeeggcete To tgggegtgge gaggetgaga cacgggagtg catctactac aacgecaact gggagcetgga ١٠١ gcgeaccaac cagageggee tggagegetg cgaaggegag caggacaage ggetgeactg YA. ctacgcetce tggegeaaca getctggeac catcgagetc gtgaagaagg getgetgget ٠ agatgacttc aactgctacg ataggcagga gtgtgtggee actgaggaga acccccaggt Yoo gtacttctge tgctgtgaag gcaacttctg caacgaacge ttcactcatt 6 Ye tgggggeeeg gaagtcacgt acgagecace cccgacagece 0080600186 tecacggtget "١ ggcctactca ctgetgeecca tegggggect ticcctcate gteetgetgg 1ه EA gtaccggeat cgcaagecce cctacggtca tgtggacatc catgaggace ctgggectce of accaccatcc cctetggtgg gectgaagee actgeagetg ctggagatca aggetegggg 1٠ gegetttgge tgtgtctgga aggeccaget catgaatgac tttgtagetg tcaagatctt 1. cccactccag gacaageagt cgtggcagag tgaacgggag atcttcageca cacctggeat ألا
ا gaagcacgag aacctgetac agticattge 166828006 cgaggeteca acctcgaagt YA agagctgtgg ctcatcacgg ccttccatga caagggcetee ctcacggatt acctcaaggg Ag gaacatcatc acatggaacg aactgtgtca tgtagcagag acgatgtcac gaggcctcte 4.6 atacctgcat gaggatgtge cctggtgeeg tggegaggec cacaagcegt ctattgecca 7. cagggacttt aaaagtaaga atgtattgct gaagagcgac ctcacagecg tgctggetga ٠١ ! ctttggettg getgttegat ttgagecagg gaaacctcca 666 acggacaggt ٠١ ! aggcacgaga cggtacatgg ctcctgaggt getcgaggga gccatcaact tccagagaga ١١ ' tgccttectg cgeattgaca tgtatgecat ggggttgglg ctgtgggage ttgtgtcteg ١٠١٠ ctgcaagget geagacggac ccgtggatga gtacatgetg cectttgagg aagagattgg YY. ccagcaccet tcgttggagg agetgeagga ggtggtggtg cacaagaaga tgaggeccac ١١ ٠ ' cattaaagat cactggttga aacacccggg cctggeecag ctttgtgtga 8 ٠ ِ gtgctgggac catgatgcag aggcetegett gtcegeggge tgtgtggagg agcgggatgatc ١8 ْ' cctgattcgg aggteggtca acggeactac ctcggactgt ctegtttcee tggtgacctc YO uu : tgtcaccaat gtggacctge cccctaaaga gtcaageatc taa YotY م >7٠١< : 7ه <Y))> ْ PRT <Y\Y> i ؟> الجنس البشري ١< ١ ١ >< i Met Thr Ala Pro Trp Val Ala Leu Ala Leu Leu Trp Gly Ser Leu Cys : ١ ° Ye yo : Ala Gly Ser Gly Arg Gly Glu Ala Glu Thr Arg Glu Cys Ile Tyr Tyr 1 1 Yo 7
Asn Ala Asn Trp Glu Leu Glu Arg Thr Asn Gln Ser Gly Leu Glu Arg
J Yo $e مع : Cys Glu Gly Glu Gln Asp Lys Arg Leu His Cys Tyr Ala Ser Trp Arg . on oo Te
YAER
] yoo : Asn Ser Ser Gly Thr Ile Glu Leu Val Lys Lys Gly Cys Trp Leu Asp 10 ول vo A : Asp Phe Asn Cys Tyr Asp Arg Gln Glu Cys Val Ala Thr Glu Glu Asn : Ao qe qo
Pro Gln Val Tyr Phe Cys Cys Cys Glu Gly Asn Phe Cys Asn Glu Arg ٠ ٠١ ١٠ : Phe Thr His Leu Pro Glu Ala Gly Gly Pro Glu Val Thr Tyr Glu Pro : "١ VY. 7 : Pro Pro Thr Ala Pro Thr Leu Leu Thr Val Leu Ala Tyr Ser Leu Leu : YY ١ ١ i pro Ile Gly Gly Leu Ser Leu Ile Val Leu Leu Ala Phe Trp Met Tyr i م Yo. yoo 1. i Arg His Arg Lys Pro Pro Tyr Gly His Val Asp Ile His Glu Asp Pro { Vio VV. مل ً Gly Pro Pro Pro Pro Ser Pro Leu Val Gly Leu Lys Pro Leu Gln Leu : VA YAO "٠٠ Leu Glu Ile Lys Ala Arg Gly Arg Phe Gly Cys Val Trp Lys Ala Gln ا Y.o مل I Yao i Leu Met Asn Asp Phe Val Ala Val Lys Ile Phe Pro Leu Gln Asp Lys
YY. Yio YY. i Gln Ser Trp Gln Ser Glu Arg Glu Ile Phe Ser Thr Pro Gly Met Lys ; Yo YY. Yvo Yi. 3 His Glu Asn Leu Leu Gln Phe Ile Ala Ala Glu Lys Arg Gly Ser Asn
Yéo Yo. Yoo : Leu Glu Val Glu Leu Trp Leu Ile Thr Ala Phe His Asp Lys Gly Ser 0 Y1. Yio YV. i Leu Thr Asp Tyr Leu Lys Gly Asn Ile Ile Thr Trp Asn Glu Leu Cys f ب مدل YAo 1 His Val Ala Glu Thr Met Ser Arg Gly Leu Ser Tyr Leu His Glu Asp ; Yd. Ydo Yo § Val Pro Trp Cys Arg Gly Glu Gly His Lys Pro Ser Ile Ala His Arg
I Yio Fy. Yio YY. i Asp Phe Lys Ser Lys Asn Val Leu Leu Lys Ser Asp Leu Thr Ala Val i Yo YY. Yvo 1 Leu Ala Asp Phe Gly Leu Ala Val Arg Phe Glu Pro Gly Lys Pro Pro k 1م
٠ ض Yio Yio Yo. ض Gly Asp Thr His Gly Gln Val Gly Thr Arg Arg Tyr Met Ala Pro Glu
Yoo Yi. Yio
Val Leu Glu Gly Ala Ile Asn Phe Gln Arg Asp Ala Phe Leu Arg lle
YV. rvo YA.
Asp Met Tyr Ala Met Gly Leu Val Leu Trp Glu Leu Val Ser Arg Cys م va. ٠ 6
Lys Ala Ala Asp Gly Pro Val Asp Glu Tyr Met Leu Pro Phe Glu Glu $0 ٠٠ ١١
Glu lle Gly Gln His Pro Ser Leu Glu Glu Leu Gln Glu Val Val Val
EY ¢Yo ٠ ! His Lys Lys Met Arg Pro Thr Ile Lys Asp His Trp Leu Lys His Pro {yo ten t¢o
Gly Leu Ala Gln Leu Cys Val Thr Ile Glu Glu Cys Trp Asp His Asp £0 {oo 8 : Ala Glu Ala Arg Leu Ser Ala Gly Cys Val Glu Glu Arg Val Ser Leu ; 16 ٠ ف دلا : lle Arg Arg Ser Val Asn Gly Thr Thr Ser Asp Cys Leu Val Ser Leu م 86 5 i Val Thr Ser Val Thr Asn Val Asp Leu pro Pro Lys Glu Ser Ser Ile
Ou 0.0 oY. : YA£T
Claims (1)
- yov ضعناصر الحماية ض| جزء ربط مولد مضاد ol (isolated antibody) جسم مضاد معزول -١ ١ ويشتمل على: ض «GDF11 وليس GDF-8 منه يربط بصفة خاصة (antigen binding fragment) لجسم مضاد محتوي على (VH) (variable heavy domain) مجال سيطرة سلسلة ثقيلة متغيرة " أولى يحددها ترتيب (CDR) (complementarity determining region) ؛ منطقة تحديد تكميلية ثانية يحددها ترتيب ا CDR «Yo FREE مصتصتة من تعريف الترتيب رقم acid © amino acid ثالثة يحددها ترتيب CDR 1 أو ١: من تعريف الترتيب رقم amino acid 1 : YY أو 7١ ".من تعريف الترتيب رقم: , لجسم مضاد محتوي على (VL) (variable light domain) مجال سيطرة سلسلة خفيفة متغيرة A ' ثانية CDR «YA أو YY من تعريف الترتيب رقم: amino acid أولى يحددها تريب 008 4 أو 749؛ و0017 ثالثة يحددها ترتيب أ YY من تعريف الترتيب رقم: amino acid يحددها ترتيب ٠ .٠١ أو ١: من تعريف الترتيب رقم amino acid) ّ حيث يشتمل ١١ من عنصر الحماية (fragment) أو الجزء (antibody) الجسم المضاد =Y ١ ّْ AY أو ٠: من تعريف الترتيب رقم amino acid المذكور على ترتيب VH مجال السيطرة " : أو ١١ من تعريف الترتيب رقم: amino acid المذكور على ترتيب VE ويشتمل مجال السيطرة " NA ¢ ] أو 7؛ يشتمل ١ من عنصر الحماية (fragment) أو الجزء (antibody) ؟- الجسم المضاد ١ مناعي آدمي منتقى globulin إضافيا على مجال سيطرة ثقيل ثابت لجسم مضاد من نوع فرعي " : IgM 5 IgE «IgA2 <IgAl 04عل IgG3 dgG2 IgGl من المجموعة المتكونة من ¥ : حيث يعدل oF من عنصر الحماية (fragment) أو الجزء (antibody) الجسم المضاد -4 ١ ّ: مجال السيطرة الثقيل الثابت المذكور لتعديل وظيفة مستجيب لمجال سيطرة ثابت. Y : يشتمل «FY أو ١ من عنصر الحماية (fragment) jal) أو (antibody) الجسم المضاد -*© ١ ; Jambda أو kappa لجسم مضاد آدمي cull إضافيا على مجال سيطرة خفيف " : «GDF11 وليس GDF-8 يربط بصفة خاصة (isolated antibody) جسم مضاد معزول -١ ١ : ويشتمل على: ¥ 1 يحدده ترتيب VH سلسلتين ثقيلتين للجسم المضاد؛ تشمل كل منهما مجال سيطرة ¥ : متصل مع مجال سيطرة ثقيل ثابت آدمي؛ و ١١7 من تعريف الترتيب رقم: amino 1م 4 ّم" أ' ٠٠١ يحدده ترتيب VL سلسلتين خفيفتين للجسم المضاد؛ تشمل كل منهما مجال سيطرة © متصل مع مجال سيطرة خفيف ثابت آدمي. ض VA من تعريف الترتيب رقم: amino 2010 ١ ١ من أي واحد من عناصر الحماية من (fragment) أو الجزء (antibody) الجسم المضاد -7 ١ ٠١ إلى 7؛ حيث يربط الجسم المضاد أو الجزء المذكور 0018 بانجذاب أكبر بمقدار " BMPI11 أضعاف على الأقل عن " , ١ من عناصر الحماية من aly من أي (fragment) أو الجزء (antibody) الجسم المضاد =A ١ ٠٠١ إلى 7؛ حيث يربط الجسم المضاد أو الجزءٍ المذكور 0018 بانجذاب أكبر بمقدار " ! BMP11 أضعاف على الأقل عن " .ٍ ١ من أي واحد من عناصر الحماية من (fragment) أو الجزء (antibody) الجسم المضاد -4 ١ ' نانوجزيئي جرامي ٠١ إلى 1 حيث يرتبط الجسم المضاد المذكور مع 00178 بانجذاب حوالي " ' أو أكثر. " : من أي واحد من عناصر الحماية من (fragment) أو الجزء (antibody) الجسم المضاد -٠١ ١ : إلى 1 حيث يكون الجسم المضاد أو الجزء المذكور مكتسبا للسمة الآدمية كليا. ١ " ّ من أي واحد من عناصر الحماية من (fragment) أو الجزء (antibody) الجسم المضاد -١١ ١ : إلى ؛ حيث يكون الجسم المضاد أو الجزء المذكور معادلا. ١ " ِ على ترتيب Jade (isolated polynucleotide) معزول polynucleotide -١7 ١ ّ من الجسم المضاد أو الجزء من polypeptide أو مكمل له؛ يشفر سلسلة «nucleic acid ¥' .6 إلى ١ عناصر الحماية ¥ : من عنصر الحماية polynucleotide مشتمل على (expression vector) إظهار JAG -١ ١ ْ wo ' VY كما في عنصر الحماية polynucleotide تشتمل على (host cell) خلية عائل —VE ١ ' متصل تشغيليا مع ترتيب تنظيمي. " ٌْ لإنتاج جسم مضاد أو جزء ربط مولد مضاد منه يربط بصفة خاصة (method) طريقة -١٠١ ١ واسترجاع الجسم ٠4 عائل كما في عنصر الحماية Aa 0078؛ تشتمل على خطوة زراعة Y : المضاد أو الجزء الناتج بهذه الطريقة. " ' 10 الناتج عن طريقة عنصر الحماية (fragment) أو الجزء (antibody) الجسم المضاد -٠١ ١ : YAETض + ١4 يتهجن تحت شروط قاسية إلى (isolated polynucleotide) معزول polynucleotide -١١ ١ " ترتيب nucleic acid من تعريف الترتيب رقم ١١ أو Vo أو مكملات لهما. ! إلى ١ مشتملة على الجسم المضاد أو الجزء من عناصر الحماية (composition) تركيبة -١١ ١ ١ " أو ١١ ومادة حاملة (carrier) مقبولة دوائيا. ٍ ٍ' في تحضير ١١ إلى 6 أو ١ من عناصر الحماية (antibody) استخدام الجسم المضاد -١9 ١ " دواء لزيادة ABS عضلة في كائن ثديي. :).= استخدام الجسم المضاد (antibody) من عناصر الحماية ١ إلى + أو 1 في تحضير ٍ " دواء لمعالجة اضطراب يصاحبه 6018 منتقى من المجموعة المتكونة من: سوء تغذية ' " عضلية؛ سوء تغذية عضلية مع تضخم كاذب؛ سوء تغذية عضلية وجهي لوحي عضدي؛ سوء : ¢ تغذية عضلية لزناد (قوس عظمي لتثبيت الطرف)- طرف»؛ سوء تغذية عضلية (Duchenne ' © سوء تغذية عضلية (Becker سوء تغذية عضلية Emery Dreifuss متلازمة العمود الفقري أ ; «Walker Warberg متلازمة «Fukuyama سوء 45345 عضلية «Ullrich المتصلب؛ متلازمة ١ : مرض مخ- عضلة- عين؛ سوء تغذية عضلية خلقي؛ سوء تغذية وتيري عضلي (مرض ١" : ضمور العضلات الهيكلية مع تقدم ((ALS) تصلب عضلي جانبي «Gower مرض «(Steinart A 4 السن؛ eda فقدان قوة وكتلة العضلات؛ ضمور عضلي؛ هشاشة؛ اضطراب نسيج دهني؛ : ! خلل مستوى الدهن cglucose سمنةء اضطراب أيضي؛ مرض السكرء بوادر سكرء خلل تحمل ٠ : بسبب إصابة رضية؛ اضطراب بسبب فقدان عظم؛ insulin في الدم؛ متلازمة أيضية؛ مقاومة ١ قلة العظم؛ التهاب المفاصل العظمي؛ glucocorticoid «شاشة العظام؛ هشاشة العظام بسبب ١٠" i مزمن؛ فقدان العظم glucocorticoid كسر بسبب هشاشة العظام؛ فقدان العظم بسبب علاج ١" : فقدان عظم بسبب نقص androgen بسبب فشل تناسلي سابق للأوان؛ فقدان عظم بسبب كبح VE :ِ فقدان عظم بسبب فرط ثانوي لنشاط الغدة الجاردرقية؛ فقدان عظم بسبب أمراض vitamin © ٠٠ : نقص التغذية؛ وفقدان عظم بسبب فقدان شهية عصابي. ١١ ٍ م"
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US178307P | 2007-11-01 | 2007-11-01 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SA08290697B1 true SA08290697B1 (ar) | 2012-02-12 |
Family
ID=40303702
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SA8290697A SA08290697B1 (ar) | 2007-11-01 | 2008-11-01 | أجسام مضادة ضد gdf8 واستخداماتها |
Country Status (19)
Country | Link |
---|---|
US (4) | US8415459B2 (ar) |
EP (2) | EP2215118B1 (ar) |
JP (1) | JP5756291B2 (ar) |
KR (1) | KR20100074321A (ar) |
CN (1) | CN101970487A (ar) |
AR (1) | AR069157A1 (ar) |
AU (1) | AU2008319265A1 (ar) |
CA (1) | CA2704315C (ar) |
CO (1) | CO6270358A2 (ar) |
ES (1) | ES2514518T3 (ar) |
IL (1) | IL205448A0 (ar) |
MX (1) | MX2010004915A (ar) |
PA (1) | PA8802601A1 (ar) |
PE (1) | PE20091163A1 (ar) |
RU (1) | RU2447084C2 (ar) |
SA (1) | SA08290697B1 (ar) |
TW (1) | TW200934510A (ar) |
WO (1) | WO2009058346A1 (ar) |
ZA (1) | ZA201003876B (ar) |
Families Citing this family (85)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
ES2561048T3 (es) | 2004-07-23 | 2016-02-24 | Acceleron Pharma Inc. | Polipéptidos del receptor ActRII |
US8128933B2 (en) | 2005-11-23 | 2012-03-06 | Acceleron Pharma, Inc. | Method of promoting bone growth by an anti-activin B antibody |
KR20160137665A (ko) | 2005-11-23 | 2016-11-30 | 악셀레론 파마 인코포레이티드 | 액티빈-actrⅱa 길항제 및 골 성장을 촉진하기 위한 이들의 용도 |
DK3056568T3 (da) | 2006-03-31 | 2021-11-01 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Fremgangsmåder til kontrollering af antistoffers blodfarmakokinetik |
US8895016B2 (en) * | 2006-12-18 | 2014-11-25 | Acceleron Pharma, Inc. | Antagonists of activin-actriia and uses for increasing red blood cell levels |
US20100028332A1 (en) * | 2006-12-18 | 2010-02-04 | Acceleron Pharma Inc. | Antagonists of actriib and uses for increasing red blood cell levels |
NZ707292A (en) * | 2006-12-18 | 2017-06-30 | Acceleron Pharma Inc | Activin-actrii antagonists and uses for increasing red blood cell levels |
AU2008211007B2 (en) * | 2007-02-01 | 2013-09-19 | Acceleron Pharma Inc. | Activin-ActRIIa antagonists and uses for treating or preventing breast cancer |
TW202021980A (zh) | 2007-02-02 | 2020-06-16 | 美商艾瑟勒朗法瑪公司 | 衍生自ActRIIB的變體與其用途 |
CA3039330C (en) * | 2007-02-09 | 2021-11-09 | Acceleron Pharma Inc. | Activin-actriia antagonists and uses for promoting bone growth in cancer patients |
CN107412734A (zh) * | 2007-09-18 | 2017-12-01 | 阿塞勒隆制药公司 | 活化素‑actriia拮抗剂和减少或抑制fsh分泌的用途 |
CN106519025B (zh) | 2007-09-26 | 2021-04-23 | 中外制药株式会社 | 利用cdr的氨基酸取代来改变抗体等电点的方法 |
PE20091163A1 (es) * | 2007-11-01 | 2009-08-09 | Wyeth Corp | Anticuerpos para gdf8 |
KR102469853B1 (ko) | 2008-04-11 | 2022-11-22 | 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 | 복수 분자의 항원에 반복 결합하는 항원 결합 분자 |
EP3363453A1 (en) * | 2008-06-26 | 2018-08-22 | Acceleron Pharma Inc. | Soluble actriia as activin-actriia antagonist for use in treating anemia or bone-related disorders |
US8216997B2 (en) | 2008-08-14 | 2012-07-10 | Acceleron Pharma, Inc. | Methods for increasing red blood cell levels and treating anemia using a combination of GDF traps and erythropoietin receptor activators |
JP5922928B2 (ja) | 2008-08-14 | 2016-05-24 | アクセルロン ファーマ, インコーポレイテッド | 赤血球レベルを高めるためのgdfトラップの使用 |
US20100092470A1 (en) * | 2008-09-22 | 2010-04-15 | Icb International, Inc. | Antibodies, analogs and uses thereof |
US20100136584A1 (en) * | 2008-09-22 | 2010-06-03 | Icb International, Inc. | Methods for using antibodies and analogs thereof |
EP2387412A4 (en) | 2009-01-13 | 2013-04-03 | Acceleron Pharma Inc | METHODS FOR INCREASING ADIPONECTIN |
EP2440576A4 (en) | 2009-06-08 | 2013-11-20 | Acceleron Pharma Inc | PROCESS FOR INCREASING THE NUMBER OF THERMOUS ADIPOCYTES |
AU2010263182B2 (en) | 2009-06-12 | 2016-05-12 | Acceleron Pharma Inc. | Truncated ActRIIB-Fc fusion proteins |
CA2763727A1 (en) * | 2009-06-26 | 2010-12-29 | Atlas Antibodies Ab | Improvement of immunodetectability |
AU2010292203A1 (en) * | 2009-09-09 | 2012-04-12 | Acceleron Pharma Inc. | ActRIIb antagonists and dosing and uses thereof |
US20110129469A1 (en) * | 2009-11-03 | 2011-06-02 | Acceleron Pharma Inc. | Methods for treating fatty liver disease |
CA2781152A1 (en) * | 2009-11-17 | 2011-05-26 | Acceleron Pharma Inc. | Actriib proteins and variants and uses therefore relating to utrophin induction for muscular dystrophy therapy |
JO3340B1 (ar) * | 2010-05-26 | 2019-03-13 | Regeneron Pharma | مضادات حيوية لـعامل تمايز النمو 8 البشري |
US8512950B2 (en) | 2010-07-21 | 2013-08-20 | Saint Louis University | Biolayer interferometry measurement of biological targets |
AU2011292197B2 (en) * | 2010-08-16 | 2015-05-28 | Amgen Inc. | Antibodies that bind myostatin, compositions and methods |
CA2817008A1 (en) | 2010-11-08 | 2012-05-18 | Acceleron Pharma Inc. | Actriia binding agents and uses thereof |
AU2011337704B2 (en) | 2010-11-30 | 2017-06-15 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antigen-binding molecule capable of binding to plurality of antigen molecules repeatedly |
CN103561771B (zh) | 2011-03-17 | 2019-01-04 | 伯明翰大学 | 重新定向的免疫治疗 |
ES2663946T3 (es) | 2011-11-14 | 2018-04-17 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Composiciones y métodos para aumentar la masa y la fuerza muscular antagonizando específicamente GDF8 y/o Activina A |
TW201823460A (zh) * | 2012-05-29 | 2018-07-01 | 美商再生元醫藥公司 | 生產細胞株增強子 |
JP6433889B2 (ja) * | 2012-06-15 | 2018-12-05 | ファイザー・インク | Gdf−8に対する改善された拮抗抗体およびその使用 |
SG10201709559PA (en) | 2012-08-24 | 2017-12-28 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Fcγriib-specific fc region variant |
EP3597747B1 (en) | 2012-08-24 | 2023-03-15 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Mouse fcgammarii-specific fc antibody |
MY172863A (en) | 2012-09-13 | 2019-12-13 | Bristol Myers Squibb Co | Fibronectin based scaffold domain proteins that bind to myostatin |
ES2884095T3 (es) | 2012-11-02 | 2021-12-10 | Celgene Corp | Antagonistas de activina-actrii y usos para el tratamiento de trastornos óseos y otros trastornos |
US11267868B2 (en) | 2013-04-02 | 2022-03-08 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Fc region variant |
SG10201913751RA (en) | 2013-05-06 | 2020-03-30 | Scholar Rock Inc | Compositions and methods for growth factor modulation |
TW201920262A (zh) | 2013-07-30 | 2019-06-01 | 美商再生元醫藥公司 | 抗活化素a之抗體及其用途 |
EP2853898B1 (en) | 2013-09-27 | 2017-01-04 | Medizinische Hochschule Hannover | Analysis of myostatin in serum |
BR122023023170A2 (pt) | 2014-06-13 | 2024-02-20 | Acceleron Pharma Inc. | Uso de um antagonista de actrii no tratamento ou prevenção de úlcera cutânea associada com beta-talassemia |
MA41052A (fr) | 2014-10-09 | 2017-08-15 | Celgene Corp | Traitement d'une maladie cardiovasculaire à l'aide de pièges de ligands d'actrii |
CA3005158A1 (en) | 2014-11-06 | 2016-05-12 | Scholar Rock, Inc. | Anti-pro/latent-myostatin antibodies and uses thereof |
WO2016073879A2 (en) * | 2014-11-06 | 2016-05-12 | Scholar Rock, Inc. | Transforming growth factor-related antibodies and uses thereof |
MX2017006521A (es) | 2014-11-24 | 2017-08-09 | Somalogic Inc | Compuestos de acido nucleico para unirse al factor de diferenciacion de crecimiento 11. |
MD4801C1 (ro) | 2014-12-03 | 2022-10-31 | Celgene Corporation | Antagonişti ai activin-ActRII şi utilizarea lor pentru tratamentul sindroamelor mielodisplazice |
PE20221834A1 (es) | 2014-12-19 | 2022-11-29 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Anticuerpos antimiostatina |
WO2016120647A2 (en) * | 2015-01-30 | 2016-08-04 | Debreceni Egyetem | Muscle regeneration |
WO2016120652A1 (en) * | 2015-01-30 | 2016-08-04 | Debreceni Egyetem | Muscle differentiation |
KR20170110129A (ko) | 2015-02-05 | 2017-10-10 | 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 | 이온 농도 의존적 항원 결합 도메인을 포함하는 항체, Fc 영역 개변체, IL-8에 결합하는 항체, 및 그들의 사용 |
EP3283519A1 (en) | 2015-04-15 | 2018-02-21 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods of increasing strength and functionality with gdf8 inhibitors |
EP3878857A1 (en) | 2015-04-22 | 2021-09-15 | Biogen MA Inc. | Novel hybrid actriib ligand trap proteins for treating muscle wasting diseases |
LT3350220T (lt) | 2015-09-15 | 2021-09-27 | Scholar Rock, Inc. | Anti pro/latentinio miostatino antikūnai ir jų panaudojimas |
RU2710194C9 (ru) | 2015-11-10 | 2020-09-14 | МЕДИММЬЮН, ЭлЭлСи | Связывающие молекулы, специфичные в отношении asct2, и их применения |
AU2016372934B2 (en) * | 2015-12-18 | 2023-10-05 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Anti-myostatin antibodies, polypeptides containing variant Fc regions, and methods of use |
US11359009B2 (en) * | 2015-12-25 | 2022-06-14 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Anti-myostatin antibodies and methods of use |
CN109071645A (zh) | 2016-01-08 | 2018-12-21 | 供石公司 | 抗-原肌生长抑制素/潜伏肌生长抑制素抗体及其使用方法 |
WO2017124050A1 (en) * | 2016-01-14 | 2017-07-20 | Bps Bioscience, Inc. | Anti-pd-1 antibodies and uses thereof |
PL3365368T3 (pl) | 2016-03-11 | 2023-08-21 | Scholar Rock, Inc. | Immunoglobuliny wiążące tgfbeta1 i ich zastosowanie |
KR102271635B1 (ko) | 2016-06-13 | 2021-07-06 | 스칼러 락, 인크. | 미오스타틴 억제제의 용도 및 조합 요법 |
KR102456739B1 (ko) * | 2016-06-17 | 2022-10-19 | 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 | 항-마이오스타틴 항체 및 사용 방법 |
CA2971303A1 (en) | 2016-06-21 | 2017-12-21 | Bamboo Therapeutics, Inc. | Optimized mini-dystrophin genes and expression cassettes and their use |
CN116251182A (zh) | 2016-08-05 | 2023-06-13 | 中外制药株式会社 | 用于预防或治疗il-8相关疾病的组合物 |
WO2018129329A1 (en) | 2017-01-06 | 2018-07-12 | Scholar Rock, Inc. | ISOFORM-SPECIFIC, CONTEXT-PERMISSIVE TGFβ1 INHIBITORS AND USE THEREOF |
FI3565592T3 (fi) | 2017-01-06 | 2023-05-10 | Scholar Rock Inc | Metabolisten tautien hoitaminen estämällä myostatiinin aktivaatio |
CN111787981A (zh) | 2018-03-01 | 2020-10-16 | 瑞泽恩制药公司 | 改变身体组成的方法 |
MX2021000347A (es) | 2018-07-11 | 2021-04-19 | Scholar Rock Inc | Inhibidores de tgf?1 selectivos de isoforma, de alta afinidad y usos de los mismos. |
PL3677278T3 (pl) | 2018-07-11 | 2022-02-28 | Scholar Rock, Inc. | Selektywne względem izoformy inhibitory tgfbeta1 i ich zastosowanie |
WO2020014473A1 (en) | 2018-07-11 | 2020-01-16 | Scholar Rock, Inc. | TGFβ1 INHIBITORS AND USE THEREOF |
EP3897851A2 (en) | 2018-12-17 | 2021-10-27 | Revitope Limited | Twin immune cell engager |
CN113195532A (zh) | 2018-12-18 | 2021-07-30 | 瑞泽恩制药公司 | 使用针对瘦素受体、gdf8和活化素a的拮抗剂增加体重和瘦肌肉质量的组合物和方法 |
WO2020261178A1 (en) | 2019-06-27 | 2020-12-30 | Pfizer Inc. | Methods of treating duchenne muscular dystrophy using aav mini-dystrophin gene therapy |
WO2021026508A1 (en) * | 2019-08-07 | 2021-02-11 | Aqualung Therapeutics | Anti-nampt antibodies and uses thereof |
AU2021205440A1 (en) | 2020-01-11 | 2022-09-01 | Scholar Rock,Inc. | TGF-beta inhibitors and use thereof |
WO2021142427A1 (en) | 2020-01-11 | 2021-07-15 | Scholar Rock, Inc. | TGFβ INHIBITORS AND USE THEREOF |
WO2022204581A2 (en) | 2021-03-26 | 2022-09-29 | Scholar Rock, Inc. | Tgf-beta inhibitors and use thereof |
WO2022256723A2 (en) | 2021-06-03 | 2022-12-08 | Scholar Rock, Inc. | Tgf-beta inhibitors and therapeutic use thereof |
WO2022261480A1 (en) * | 2021-06-11 | 2022-12-15 | The Regents Of The University Of California | Heparan sulfate mimetics to improve glucose clearance |
CN114181908B (zh) * | 2021-07-23 | 2023-11-17 | 无锡傲锐东源生物科技有限公司 | 抗人s100b蛋白鼠单克隆抗体及其应用 |
WO2023168326A2 (en) * | 2022-03-03 | 2023-09-07 | The Brigham And Women´S Hospital, Inc. | Humanized and affinity-matured anti-ceacam1 antibodies and methods of use |
WO2024064842A1 (en) | 2022-09-21 | 2024-03-28 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods of treating obesity, diabetes, and liver dysfunction |
US11802870B1 (en) * | 2022-12-13 | 2023-10-31 | Panazee | Kinetic immunoassay systems and methods |
Family Cites Families (44)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4708871A (en) | 1983-03-08 | 1987-11-24 | Commonwealth Serum Laboratories Commission | Antigenically active amino acid sequences |
US4816567A (en) | 1983-04-08 | 1989-03-28 | Genentech, Inc. | Recombinant immunoglobin preparations |
EP0307434B2 (en) | 1987-03-18 | 1998-07-29 | Scotgen Biopharmaceuticals, Inc. | Altered antibodies |
ES2087911T3 (es) | 1989-04-28 | 1996-08-01 | Riker Laboratories Inc | Dispositivo de inhalacion de polvo seco. |
GB9015198D0 (en) | 1990-07-10 | 1990-08-29 | Brien Caroline J O | Binding substance |
ES2136092T3 (es) | 1991-09-23 | 1999-11-16 | Medical Res Council | Procedimientos para la produccion de anticuerpos humanizados. |
ATE381614T1 (de) | 1992-07-24 | 2008-01-15 | Amgen Fremont Inc | Bildung von xenogenen antikörpern |
US5951974A (en) | 1993-11-10 | 1999-09-14 | Enzon, Inc. | Interferon polymer conjugates |
DK0776337T3 (da) * | 1994-07-08 | 2005-12-12 | Univ Johns Hopkins Med | Vækstdifferentieringsfaktor-11 |
US5562332A (en) | 1994-12-27 | 1996-10-08 | Hss Industries, Inc. | Lobby table for lockable boxes with handicapped shelf |
US6030613A (en) | 1995-01-17 | 2000-02-29 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Receptor specific transepithelial transport of therapeutics |
US5695760A (en) | 1995-04-24 | 1997-12-09 | Boehringer Inglehiem Pharmaceuticals, Inc. | Modified anti-ICAM-1 antibodies and their use in the treatment of inflammation |
ES2304786T3 (es) | 1995-04-27 | 2008-10-16 | Amgen Fremont Inc. | Anticuerpos anti-il-8 humanos, derivados a partir de xenoratones inmunizados. |
EP0823941A4 (en) | 1995-04-28 | 2001-09-19 | Abgenix Inc | HUMAN ANTIBODIES DERIVED FROM IMMUNIZED XENO MOUSES |
SE9502800D0 (sv) | 1995-08-10 | 1995-08-10 | Astra Ab | Disposable inhaler |
WO1997010847A1 (en) | 1995-09-21 | 1997-03-27 | University Of Utah Research Foundation | Targeting of conjugates of poly(ethylene glycol) and antibodies against glutamic acid decarboxylase to islet cells |
US6696260B1 (en) | 1997-08-01 | 2004-02-24 | The Johns Hopkins University School Of Medicine | Methods to identify growth differentiation factor (GDF) binding proteins |
US6656475B1 (en) | 1997-08-01 | 2003-12-02 | The Johns Hopkins University School Of Medicine | Growth differentiation factor receptors, agonists and antagonists thereof, and methods of using same |
US6506559B1 (en) | 1997-12-23 | 2003-01-14 | Carnegie Institute Of Washington | Genetic inhibition by double-stranded RNA |
NZ513642A (en) | 1999-01-21 | 2004-02-27 | Metamorphix Inc | Growth differentiation factor inhibitors and uses therefor |
EP1322395B1 (en) | 2000-09-13 | 2011-02-23 | Entegris, Inc. | Liquid filtration device |
US20030133939A1 (en) | 2001-01-17 | 2003-07-17 | Genecraft, Inc. | Binding domain-immunoglobulin fusion proteins |
US7829084B2 (en) | 2001-01-17 | 2010-11-09 | Trubion Pharmaceuticals, Inc. | Binding constructs and methods for use thereof |
US7754208B2 (en) | 2001-01-17 | 2010-07-13 | Trubion Pharmaceuticals, Inc. | Binding domain-immunoglobulin fusion proteins |
US20040058445A1 (en) | 2001-04-26 | 2004-03-25 | Ledbetter Jeffrey Alan | Activation of tumor-reactive lymphocytes via antibodies or genes recognizing CD3 or 4-1BB |
DK1419179T3 (da) | 2001-08-10 | 2010-06-21 | Univ Aberdeen | Antigenbindingsdomæner fra fisk |
US7320789B2 (en) * | 2001-09-26 | 2008-01-22 | Wyeth | Antibody inhibitors of GDF-8 and uses thereof |
WO2003072714A2 (en) | 2002-02-21 | 2003-09-04 | Wyeth | Follistatin domain containing proteins |
IL163525A0 (en) | 2002-02-21 | 2005-12-18 | Wyeth Corp | A follistatin domain containing protein |
AR047392A1 (es) | 2002-10-22 | 2006-01-18 | Wyeth Corp | Neutralizacion de anticuerpos contra gdf 8 y su uso para tales fines |
US20040223966A1 (en) | 2002-10-25 | 2004-11-11 | Wolfman Neil M. | ActRIIB fusion polypeptides and uses therefor |
WO2004108157A2 (en) | 2003-06-02 | 2004-12-16 | Wyeth | Use of myostatin (gdf8) inhibitors in conjunction with corticosteroids for treating neuromuscular disorders |
CN1934266A (zh) * | 2004-03-23 | 2007-03-21 | 伊莱利利公司 | 抗肌肉生长抑素抗体 |
ES2384176T3 (es) * | 2004-03-23 | 2012-07-02 | Eli Lilly & Company | Anticuerpos anti-miostatina |
WO2006040153A2 (en) | 2004-10-13 | 2006-04-20 | Ablynx N.V. | Single domain camelide anti -amyloid beta antibodies and polypeptides comprising the same for the treatment and diagnosis of degenarative neural diseases such as alzheimer's disease |
CA2601086A1 (en) * | 2005-03-23 | 2006-10-12 | Wyeth | Detection of an immune response to gdf-8 modulating agents |
AU2006226878A1 (en) | 2005-03-23 | 2006-09-28 | Wyeth | Detection of GDF-8 modulating agents |
EP1877075A4 (en) * | 2005-04-25 | 2008-07-30 | Pfizer | ANTIBODIES DIRECTED AGAINST MYOSTATIN |
ES2534760T3 (es) | 2005-08-19 | 2015-04-28 | Wyeth Llc | Anticuerpos antagonistas contra GDF-8 y sus usos en el tratamiento de ELA y otros trastornos asociados con GDF-8 |
KR101135220B1 (ko) * | 2005-10-06 | 2012-04-24 | 일라이 릴리 앤드 캄파니 | 항-마이오스타틴 항체 |
UA92504C2 (en) | 2005-10-12 | 2010-11-10 | Эли Лилли Энд Компани | Anti-myostatin monoclonal antibody |
PL2066695T3 (pl) * | 2006-09-05 | 2013-08-30 | Lilly Co Eli | Przeciwciała przeciwko miostatynie |
PE20091163A1 (es) * | 2007-11-01 | 2009-08-09 | Wyeth Corp | Anticuerpos para gdf8 |
US8841340B2 (en) * | 2012-08-17 | 2014-09-23 | Gilead Sciences, Inc. | Solid forms of an antiviral compound |
-
2008
- 2008-10-30 PE PE2008001853A patent/PE20091163A1/es not_active Application Discontinuation
- 2008-10-31 CA CA2704315A patent/CA2704315C/en not_active Expired - Fee Related
- 2008-10-31 ES ES08843606.8T patent/ES2514518T3/es active Active
- 2008-10-31 CN CN2008801237727A patent/CN101970487A/zh active Pending
- 2008-10-31 TW TW097142277A patent/TW200934510A/zh unknown
- 2008-10-31 KR KR1020107011942A patent/KR20100074321A/ko not_active Application Discontinuation
- 2008-10-31 EP EP08843606.8A patent/EP2215118B1/en not_active Not-in-force
- 2008-10-31 AU AU2008319265A patent/AU2008319265A1/en not_active Abandoned
- 2008-10-31 PA PA20088802601A patent/PA8802601A1/es unknown
- 2008-10-31 EP EP14179630.0A patent/EP2805970A3/en not_active Withdrawn
- 2008-10-31 RU RU2010117018/10A patent/RU2447084C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2008-10-31 WO PCT/US2008/012338 patent/WO2009058346A1/en active Application Filing
- 2008-10-31 MX MX2010004915A patent/MX2010004915A/es not_active Application Discontinuation
- 2008-10-31 AR ARP080104796A patent/AR069157A1/es unknown
- 2008-10-31 US US12/262,712 patent/US8415459B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2008-10-31 JP JP2010532058A patent/JP5756291B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2008-11-01 SA SA8290697A patent/SA08290697B1/ar unknown
-
2010
- 2010-04-29 IL IL205448A patent/IL205448A0/en unknown
- 2010-04-30 CO CO10051492A patent/CO6270358A2/es not_active Application Discontinuation
- 2010-05-31 ZA ZA2010/03876A patent/ZA201003876B/en unknown
-
2013
- 2013-03-08 US US13/791,700 patent/US9409981B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2016
- 2016-08-07 US US15/230,430 patent/US9850301B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2017
- 2017-12-16 US US15/844,526 patent/US10189896B2/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP2805970A3 (en) | 2015-03-04 |
MX2010004915A (es) | 2010-05-27 |
EP2215118B1 (en) | 2014-08-06 |
CO6270358A2 (es) | 2011-04-20 |
JP5756291B2 (ja) | 2015-07-29 |
EP2805970A2 (en) | 2014-11-26 |
AU2008319265A1 (en) | 2009-05-07 |
PA8802601A1 (es) | 2009-06-23 |
US9850301B2 (en) | 2017-12-26 |
US20090148436A1 (en) | 2009-06-11 |
US20170145084A1 (en) | 2017-05-25 |
RU2447084C2 (ru) | 2012-04-10 |
RU2010117018A (ru) | 2011-12-10 |
CN101970487A (zh) | 2011-02-09 |
KR20100074321A (ko) | 2010-07-01 |
US10189896B2 (en) | 2019-01-29 |
IL205448A0 (en) | 2010-12-30 |
PE20091163A1 (es) | 2009-08-09 |
US9409981B2 (en) | 2016-08-09 |
AR069157A1 (es) | 2009-12-30 |
ZA201003876B (en) | 2011-04-28 |
CA2704315A1 (en) | 2009-05-07 |
US20180265578A1 (en) | 2018-09-20 |
EP2215118A1 (en) | 2010-08-11 |
ES2514518T3 (es) | 2014-10-28 |
TW200934510A (en) | 2009-08-16 |
WO2009058346A1 (en) | 2009-05-07 |
CA2704315C (en) | 2016-05-24 |
US8415459B2 (en) | 2013-04-09 |
US20140023638A1 (en) | 2014-01-23 |
JP2011504096A (ja) | 2011-02-03 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
SA08290697B1 (ar) | أجسام مضادة ضد gdf8 واستخداماتها | |
CN101379086B (zh) | 抗gdf-8的拮抗剂抗体以及在als和其他gdf-8-相关病症治疗中的用途 | |
AU2009246946B2 (en) | Anti-hepcidin antibodies and methods of use | |
JP6802796B2 (ja) | Bmp6を標的とする抗体のための組成物および方法 | |
AU2009206306B2 (en) | Ferroportin antibodies and methods of use | |
JP2017513882A (ja) | 股関節部骨折手術後の身体回復を改善または促進する方法 | |
US11897958B2 (en) | Hybridoma clones, monoclonal antibodies to VSIG-4, and methods of making and using | |
CN108362885A (zh) | 用于指导血压下降疗法的肾上腺髓质素 | |
US11434269B2 (en) | Methods for treating disease using inhibitors of bone morphogenetic protein 6 (BMP6) | |
JPWO2010147171A1 (ja) | ニワトリ由来抗lox−1抗体 | |
CN108699143A (zh) | Il-17c的抗体 | |
WO2011115231A1 (ja) | オステオポンチン特異的モノクローナル抗体 |