RU2817262C1 - Способ получения смеси биогенных аминов дофамина, тирамина и триптамина - Google Patents
Способ получения смеси биогенных аминов дофамина, тирамина и триптамина Download PDFInfo
- Publication number
- RU2817262C1 RU2817262C1 RU2022132495A RU2022132495A RU2817262C1 RU 2817262 C1 RU2817262 C1 RU 2817262C1 RU 2022132495 A RU2022132495 A RU 2022132495A RU 2022132495 A RU2022132495 A RU 2022132495A RU 2817262 C1 RU2817262 C1 RU 2817262C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- dopamine
- tyramine
- tryptamine
- polymorpha
- biogenic amines
- Prior art date
Links
- VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N dopamine Chemical compound NCCC1=CC=C(O)C(O)=C1 VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 56
- DZGWFCGJZKJUFP-UHFFFAOYSA-N tyramine Chemical compound NCCC1=CC=C(O)C=C1 DZGWFCGJZKJUFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 43
- APJYDQYYACXCRM-UHFFFAOYSA-N tryptamine Chemical compound C1=CC=C2C(CCN)=CNC2=C1 APJYDQYYACXCRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 36
- 229960003638 dopamine Drugs 0.000 title claims abstract description 30
- 230000000035 biogenic effect Effects 0.000 title claims abstract description 20
- 229960003732 tyramine Drugs 0.000 title claims abstract description 20
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 title claims abstract description 19
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 title abstract description 21
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims abstract description 27
- 241000196329 Marchantia polymorpha Species 0.000 claims abstract description 25
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 21
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 15
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 14
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 14
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims abstract description 13
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 claims abstract description 7
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims abstract description 6
- 239000013543 active substance Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000004576 sand Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000002689 soil Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000004575 stone Substances 0.000 claims abstract description 4
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims abstract description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 3
- 238000000227 grinding Methods 0.000 claims description 5
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 10
- 241000195940 Bryophyta Species 0.000 abstract description 7
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract description 6
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 abstract description 5
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 abstract description 4
- 238000000605 extraction Methods 0.000 abstract description 3
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 abstract description 2
- 239000013043 chemical agent Substances 0.000 abstract description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 abstract description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 abstract description 2
- 239000010891 toxic waste Substances 0.000 abstract description 2
- 238000003801 milling Methods 0.000 abstract 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 abstract 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 6
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 5
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 5
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 5
- 241000227166 Harrimanella hypnoides Species 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 235000021533 Beta vulgaris Nutrition 0.000 description 3
- 241000335053 Beta vulgaris Species 0.000 description 3
- -1 Tyramine molecular ion Chemical class 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 210000004209 hair Anatomy 0.000 description 3
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 3
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 3
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 3
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 3
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UCTWMZQNUQWSLP-UHFFFAOYSA-N adrenaline Chemical compound CNCC(O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 UCTWMZQNUQWSLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001793 charged compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000006114 decarboxylation reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SFLSHLFXELFNJZ-QMMMGPOBSA-N (-)-norepinephrine Chemical compound NC[C@H](O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 SFLSHLFXELFNJZ-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 125000000022 2-aminoethyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])N([H])[H] 0.000 description 1
- 241000193755 Bacillus cereus Species 0.000 description 1
- CTENFNNZBMHDDG-UHFFFAOYSA-N Dopamine hydrochloride Chemical compound Cl.NCCC1=CC=C(O)C(O)=C1 CTENFNNZBMHDDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WTDRDQBEARUVNC-UHFFFAOYSA-N L-Dopa Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 WTDRDQBEARUVNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 241000196322 Marchantia Species 0.000 description 1
- 241001148464 Marchantiaceae Species 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 1
- 239000000808 adrenergic beta-agonist Substances 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000011681 asexual reproduction Effects 0.000 description 1
- 238000013465 asexual reproduction Methods 0.000 description 1
- 239000003124 biologic agent Substances 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 230000003177 cardiotonic effect Effects 0.000 description 1
- 150000003943 catecholamines Chemical class 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 1
- MHUWZNTUIIFHAS-CLFAGFIQSA-N dioleoyl phosphatidic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(O)=O)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC MHUWZNTUIIFHAS-CLFAGFIQSA-N 0.000 description 1
- 229960001149 dopamine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- 239000003136 dopamine receptor stimulating agent Substances 0.000 description 1
- 229940005501 dopaminergic agent Drugs 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 230000004907 flux Effects 0.000 description 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 1
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930005303 indole alkaloid Natural products 0.000 description 1
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002475 indoles Chemical class 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 229960004502 levodopa Drugs 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 239000002366 mineral element Substances 0.000 description 1
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 1
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 1
- 229960002748 norepinephrine Drugs 0.000 description 1
- SFLSHLFXELFNJZ-UHFFFAOYSA-N norepinephrine Natural products NCC(O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 SFLSHLFXELFNJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000243 photosynthetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- 239000004810 polytetrafluoroethylene Substances 0.000 description 1
- 229920001343 polytetrafluoroethylene Polymers 0.000 description 1
- 230000009090 positive inotropic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 description 1
- 125000003410 quininyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 239000011435 rock Substances 0.000 description 1
- 230000014639 sexual reproduction Effects 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 229940127230 sympathomimetic drug Drugs 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003639 vasoconstrictive effect Effects 0.000 description 1
Abstract
Изобретение относится к области химии и фармацевтики, а именно к способу получения смеси биогенных аминов дофамина, триптамина и тирамина, включающий выращивание моховидного растения Marchantia polymorpha в лабораторных условиях при комнатной температуре в диапазоне 18-25°С в контейнерах, заполненных на 1/3 по объему стерилизованным увлажненным грунтом, песком и камнями в соотношении по объему 1:1:1 с последующим снятием М. polymorpha с субстрата, измельчением моховидного растения, экстрагированием смеси биологически активных веществ из измельченного растительного сырья в присутствии растворителя метилового спирта в соотношении измельченная биомасса растения : объем растворителя, равном 1 к 10, в условиях перемешивания на протяжении 1 часа, затем центрифугирование при скорости 4 тыс. об/мин на протяжении 10 минут, далее охлаждение в термостате при температуре 6°С на протяжении 8 часов, после чего повторное центрифугирование при 13,5 тыс. об/мин, фильтрацию полученного экстракта. Технический результат заключается в одновременном получении ряда биогенных аминов – дофамина, триптамина и тирамина, без использования многостадийных процессов химического и микробиологического синтеза, а также отсутствии токсичных отходов в виде органических растворителей, аммиака и других химических агентов. 4 ил., 8 табл., 3 пр.
Description
Настоящее изобретение относится к медицине, а именно к химико-фармацевтической промышленности, и может быть использовано для получения ряда биогенных аминов - дофамина, тирамина и триптамина с использованием сырья моховидного растения - печеночного мха Marchantia polymorpha. Содержание в растительной массе моховидных растений ряда биогенных аминов и возможность реализации способа получения биогенных аминов путем экстракции из растительного сырья дают возможность применения предлагаемого изобретения в фармацевтических и биомедицинских производствах.
Marchantia polymorpha L., или маршанция многообразная - представитель семейства Marchantiaceae. Печеночный слоевищный мох. Двудомное растение. Является космополитным видом, встречается на всех континентах. Произрастает в сырых местообитаниях, по берегам ручьев, на скалах, на пожарищах, избегая конкуренции с другими растениями. Имеет дихотомически ветвящийся лентовидный таллом, длиной до 20 см с углублением на вершине, где располагается точка роста. Растение способно как к половому, так и к бесполому размножению.
Биогенные амины - низкомолекулярные вещества, образующиеся в организмах животных, человека и растений из аминокислот и являющиеся биологически активными молекулами, которые оказывают значительное влияние на организм. Типовыми представителями биогенных аминов выступают дофамин, триптамин, тирамин и др.
Дофамин представляет собой моноаминовое соединение с положительной инотропной активностью. Встречается в природе в виде катехоламина, образующегося в результате декарбоксилирования дегидроксифенилаланина. Является предшественником норэпинефрина и адреналина. Выполняет функции кардиотонического препарата, бета-адренергического агониста, дофаминергического агента и симпатомиметического агента.
Триптамин представляет собой аминоалкилиндол, состоящий из индола, имеющего 2-аминоэтильную группу в положении С-3. Является промежуточным звеном при биосинтезе большинства индольных алкалоидов и алкалоидов группы хинина. Большинство производных триптамина обладают психоактивными свойствами.
Тирамин представляет собой первичный амин, полученный декарбоксилированием тирозина. Биологически активен, в связи с сосудосуживающим действием повышает кровяное давление, влияет на процессы возбуждения и торможения в нервной системе.
Приведенные биогенные амины применяются в профилактике и терапии нейродегенеративных заболеваний.
Из существующего уровня техники известно, что существует несколько способов получения биогенных аминов. Известен способ получения дофамина из культур корневых волосков Beta vulgaris RU, патент РФ на изобретение RU 2326946 С2 (WO 2004/055192). Способ заключается в получении целевого продукта из культивированных клеток на питательных средах. Недостатком данного метода является трудоемкий способ получения культур клеток - продуцентов и требования по обеспечению стерильности производства.
Известен патент РФ на изобретение «Продуцент дофамина» RU 2737557 С1, в котором предложено средство для получения дофамина - штамм Bacillus cereus ВКПМ В-12401, продуцирующий дофамин. Недостатком средства являются малые выходы целевого продукта (12 пг/мл), необходимость пересевов, вырождение культуры продуцента, требования по обеспечению стерильности производства.
Известен химический способ получения тирамина, приведенный в патенте РФ на изобретение RU 2218326 С2 - «Способ получения 4-(2-аминоэтил)фенола». Приведенный способ позволяет с высоким выходом получить гидробромид тирамина из доступного исходного соединения в две химические стадии из фенола без выделения и очистки промежуточного вещества - 4-(2-бромэтилфенола). Недостатком данного способа является использование дорогого химического сырья и получение побочных высокотоксичных продуктов.
Наиболее близким к заявленному техническому решению (прототипом) является способ по патенту RU №2326946 С2 (WO 2004/055192). Недостатки известного технического решения приведены выше. Кроме того, в отличие от способа-прототипа, основным биологическим агентом которого являются клетки корневых волосков Beta vulgaris, которые можно получить только с помощью ручного труда в малых количествах, в рамках предлагаемого изобретения использованы растения мхов, выращенные в нестерильных условиях и способные обеспечивать быстрый прирост биомассы.
Задачей, на решение которой направлено заявляемое изобретение, является разработка способа одновременного получения ряда биогенных аминов из растительного сырья, а именно из моховидного растения Marchantia polymorpha.
Технический результат - одновременное получение ряда биогенных аминов - дофамина, триптамина и тирамина значительно дешевле, без использования многостадийных процессов химического и микробиологического синтеза, а также отсутствие токсичных отходов в виде органических растворителей, аммиака и других химических агентов.
Технический результат достигается тем, что предлагаемый способ получения смеси биогенных аминов дофамина, триптамина и тирамина включает выращивание моховидного растения Marchantia polymorpha в лабораторных условиях при комнатной температуре в диапазоне 18-25°С в контейнерах, заполненных на по объему стерилизованным увлажненным грунтом, песком и камнями в соотношении по объему 1:1:1 с последующим снятием М. polymorpha с субстрата, измельчением моховидного растения, экстрагированием смеси биологически активных веществ из измельченного растительного сырья М. polymorpha в присутствии растворителя метилового спирта в соотношении измельченная биомасса растения : объем растворителя, равном 1 к 10, в условиях перемешивания на протяжении 1 часа, затем центрифугирование при скорости 4 тыс.об/мин на протяжении 10 минут, далее охлаждение в термостате при температуре 6°С на протяжении 8 часов, после чего повторное центрифугирование при 13,5 тыс. об/мин, фильтрацию полученного экстракта.
Разработанный способ обладает рядом преимуществ ввиду удешевления процессов получения ряда биогенных аминов за счет следующих факторов:
- моховидные растения могут быть выращены (культивированы) в контролируемых, неконтролируемых и в условно контролируемых условиях (температурные условия, условия освещенности, тип и состав спектра света);
- моховидные растения могут быть выращены в питательных средах с низкой концентрацией минеральных элементов, на уровне содержания последних в водопроводной воде;
- моховидные растения могут быть выращены в средах и в воде без добавления низкомолекулярных гормонов;
- моховидные растения могут синтезировать метаболиты в нестерильных условиях.
Изобретение иллюстрируется следующими чертежами:
Фиг. 1 - Хроматограмма экстракта образца мха М. polymorpha, выращенного в лабораторных условиях. Молекулярный ион тирамина 138.0 Да (диагностические ионы 121.1 Да, 103.0 Да, 93.1 Да, 91.0 Да, 77.0 Да).
Фиг. 2 - Хроматограмма экстракта образца мха М. polymorpha, выращенного в лабораторных условиях. Молекулярный ион триптамина 161.0 Да (диагностический ион 144.0 Да).
Фиг. 3 - Хроматограмма раствора стандартного образца дофамина 2 мг/л. Молекулярный ион дофамина 154,0 Да (диагностические ионы 137,0 Да и 91,0 Да).
Фиг. 4 - Хроматограмма экстракта образца мха М. polymorpha, выращенного в лабораторных условиях. Молекулярный ион дофамина 154,0 Да (диагностические ионы 137,0 Да и 91,0 Да).
Способ осуществляется следующим образом.
Растения мха Marchantia polymorpha культивировали в лабораторных условиях, при комнатной температуре в диапазоне 18-25°С. Для культивирования мха использовали полипропиленовые прозрачные контейнеры, заполненные на грунтом, песком и камнями в соотношении 1:1:1. Субстрат стерилизовали в автоклаве при 121°С. Далее некоторое начальное количество биомассы растений мха М. polymorpha измельчали блендером в водопроводной воде и орошали ими подготовленный субстрат. Каждый 3 дня мхи орошали водопроводной водой или раствором питательной среды Тамия в различных концентрациях (от 1 до 10%). Среду Тамия готовили в соответствии с ПНД Ф Т 14.1:2:4.10-2004 Т 16.1:23:3.7-2004. Водопроводную воду предварительно отстаивали в пластиковых емкостях. Для освещения использовали фитолампы с фотопериодом 12/12 ч, фотосинтетическим фотонным потоком 9 мкмоль/с. Культивацию проводили на протяжении 8 недель, или до прироста биомассы в объеме не менее чем на 50%.
Образцы мха снимали с подложки и промывали в потоке водопроводной воды. Затем мхи измельчали блендером в метаноле (100%, ХЧ) в соотношении 1 к 10, обеспечив тем самым экстракцию из измельченного растительного сырья природных биологически активных веществ - биогенных аминов. Затем образец оставляли в условиях перемешивания на протяжении 1 часа. Образцы центрифугировали при скорости 4 тыс.об/мин. на протяжении 10 минут. Затем образцы помещали в термостат при температуре 6°С на 8 часов, после чего образцы повторно центрифугировали при 13,5 тыс. об/мин и переносили в виалы, предварительно профильтровав экстракты через PTFE шприцевые фильтры (0,45 мкм) для хромато-масс-спектрометрического анализа.
Содержание в полученном из измельченного растительного сырья М. polymorpha целевых продуктов подтверждено путем хромато-масс-спектрометрического анализа. Общий хромато-масс-спектрометрический анализ образцов проводили на базе хромато-масс-спектрометра Agilent Technologies Infinity II с масс-спектрометрическим детектором 6470 В. Хроматографические условия представлены в таблице 1.
Режимы хроматографирования и работы масс-спектрометрического детектора представлены в таблицах 2 и 3.
Выявление в полученном экстракте биогенных аминов проводили с применением аналитических стандартов и совокупности MRM-переходов при фрагментации молекул. MRM - переходы, используемые в качестве диагностических, приведены в таблице 4 ниже [Wallace W. Е. Mass spectra //NIST chemistry webbook, NIST standard reference database. - 2018. - №. 69.]:
Для идентификации и установления концентрации дофамина, полученного в экстракте из растительного сырья мха Marchantia polymorpha, применяли аналитический стандарт дофамина гидрохлорида (Sigma -Aldrich, lot № BCBV9268).
Хромато-масс-спектрометрический анализ по определению концентрации дофамина в экстракте проводили на базе хромато-масс-спектрометра Agilent Technologies Infinity II с масс-спектрометрическим детектором 6470 В. Хроматографические условия представлены в таблице 5.
Заявленный способ поясняем следующими примерами:
Пример 1. Выявление тирамина в экстрактах мха М. polymorpha при выращивании мха в лабораторных условиях и экстракции тирамина из растения и из субстрата, на котором произрастало растение.
На фиг. 1. представлены материалы, характеризующие хроматограммы MRM-переходов тирамина. Тирамин обнаружен в образцах мха М. polymorpha, выращенного в лабораторных условиях, описанных выше. Тирамин получен посредством измельчения сырья и экстракции раствором метилового спирта. Анализ субстрата, на котором был выращен мох, указывает на отсутствие тирамина, что свидетельствует о внутриклеточном (экзогенном) синтезе тирамина в концентрации 1 мг/кг. Сводные материалы представлены в таблице 6.
Пример 2. Выявление триптамина в экстрактах мха М. polymorpha при выращивании мха в лабораторных условиях и экстракции триптамина из растения и из субстрата, на котором произрастало растение.
На фиг. 2. представлены материалы, характеризующие хроматограммы MRM-переходов триптамина. Триптамин обнаружен в образцах мха М. polymorpha, выращенного в лабораторных условиях, описанных выше. Триптамин получен посредством измельчения сырья и экстракции раствором метилового спирта. Анализ субстрата, на котором был выращен мох, указывает на отсутствие триптамина, что свидетельствует о внутриклеточном синтезе триптамина в концентрации 1 мг/кг. Сводные материалы представлены в таблице 7.
Пример 3. Выявление дофамина в экстрактах мха М. polymorpha при выращивании мха в лабораторных условиях и экстракции дофамина из растения и из субстрата, на котором произрастало растение.
На фиг. 3. представлены материалы, характеризующие MRM-переходы стандартного образца дофамина. На фиг. 4 представлены материалы, характеризующие MRM-переходы дофамина в полученных экстрактах мха. Дофамин обнаружен в образцах мха М. polymorpha, выращенного в лабораторных условиях, описанных выше. Дофамин получен посредством измельчения сырья и экстракции раствором метилового спирта. Анализ субстрата, на котором был выращен мох М. polymorpha, также указывает на наличие дофамина в среде. Эндогенная (внутриклеточная) концентрация дофамина составляет 2 мг/кг биомассы мха. Экзогенная (внеклеточная) концентрация дофамина в воде составляет 2 мг/кг субстрата. Сводные материалы представлены в таблице 8.
Таким образом, предлагаемое изобретение может быть внедрено в практику фармацевтических и биомедицинских предприятий, направленных на получение биогенных аминов, в т.ч. дофамина, триптамина и тирамина. Принимая во внимание преимущества данного способа, в т.ч. одновременное получение ряда названных биогенных аминов, отсутствие требований по стерильности производственного процесса, выраженный экзогенный синтез, а также широкий спектр условий культивирования мха, использование мхов М. polymorpha является конкурентным способом получения биогенных аминов.
Список литературы:
1. Патент РФ RU 2218326 С2 - "Способ получения 4-(2-аминоэтил)фенола". Авторы: Крысин А.П., Егорова Т.Г., Просенко А.Е., Кобрин B.C.
2. Патент РФ RU 2326946 С2 (WO 2004/055192) - "Способ получения ДОФА и дофамина из культур корневых волосков Beta vulgaris". Авторы: Токаре Р.А., Бхамиди С, Рао Р.С.
3. Патент РФ RU 2737557 C1 - "Продуцент дофамина". Авторы: Петров С.А., Субботин A.M., Костоломова Е.Г., Акунеева Т.В.
4. Wallace W.Е. Mass spectra //NIST chemistry webbook, NIST standard reference database. - 2018. - №. 69.
Claims (1)
- Способ получения смеси биогенных аминов дофамина, триптамина и тирамина, включающий выращивание моховидного растения Marchantia polymorpha в лабораторных условиях при комнатной температуре в диапазоне 18-25°С в контейнерах, заполненных на 1/3 по объему стерилизованным увлажненным грунтом, песком и камнями в соотношении по объему 1:1:1 с последующим снятием М. polymorpha с субстрата, измельчением моховидного растения, экстрагированием смеси биологически активных веществ из измельченного растительного сырья в присутствии растворителя метилового спирта в соотношении измельченная биомасса растения : объем растворителя, равном 1 к 10, в условиях перемешивания на протяжении 1 часа, затем центрифугирование при скорости 4 тыс. об/мин на протяжении 10 минут, далее охлаждение в термостате при температуре 6°С на протяжении 8 часов, после чего повторное центрифугирование при 13,5 тыс. об/мин, фильтрацию полученного экстракта.
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2817262C1 true RU2817262C1 (ru) | 2024-04-12 |
Family
ID=
Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2834293A1 (fr) * | 2002-01-03 | 2003-07-04 | Ricarimpex | Extraits de sangsues a effet psychosomatique |
| RU2326946C2 (ru) * | 2002-12-16 | 2008-06-20 | Каунсел Оф Сайнтифик Энд Индастриал Рисерч | Способ получения дофа и дофамина из культур корневых волосков beta vulgaris |
| WO2009143064A2 (en) * | 2008-05-18 | 2009-11-26 | Rice Science, Llc | Rice bran extracts for inflammation and methods of use thereof |
| CN114027324A (zh) * | 2021-11-24 | 2022-02-11 | 中国科学院成都生物研究所 | 地钱在防治根腐病中的应用 |
| KR102405455B1 (ko) * | 2021-04-27 | 2022-06-08 | 강원대학교산학협력단 | 우산이끼 분획물을 유효성분으로 함유하는 항염증용 조성물 |
| ES2918021A1 (es) * | 2021-01-13 | 2022-07-13 | Consejo Superior Investigacion | extracto de una planta de Marchantia y de polymorpha subsp. y sus usos |
| KR20220134700A (ko) * | 2021-03-25 | 2022-10-05 | 경희대학교 산학협력단 | 물대(Arundo donax) 추출물을 포함하는 여드름 예방 또는 치료용 조성물 |
Patent Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2834293A1 (fr) * | 2002-01-03 | 2003-07-04 | Ricarimpex | Extraits de sangsues a effet psychosomatique |
| RU2326946C2 (ru) * | 2002-12-16 | 2008-06-20 | Каунсел Оф Сайнтифик Энд Индастриал Рисерч | Способ получения дофа и дофамина из культур корневых волосков beta vulgaris |
| WO2009143064A2 (en) * | 2008-05-18 | 2009-11-26 | Rice Science, Llc | Rice bran extracts for inflammation and methods of use thereof |
| ES2918021A1 (es) * | 2021-01-13 | 2022-07-13 | Consejo Superior Investigacion | extracto de una planta de Marchantia y de polymorpha subsp. y sus usos |
| KR20220134700A (ko) * | 2021-03-25 | 2022-10-05 | 경희대학교 산학협력단 | 물대(Arundo donax) 추출물을 포함하는 여드름 예방 또는 치료용 조성물 |
| KR102405455B1 (ko) * | 2021-04-27 | 2022-06-08 | 강원대학교산학협력단 | 우산이끼 분획물을 유효성분으로 함유하는 항염증용 조성물 |
| CN114027324A (zh) * | 2021-11-24 | 2022-02-11 | 中国科学院成都生物研究所 | 地钱在防治根腐病中的应用 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| MOHAMMED G.I. et al. A critical overview on the chemistry, clean-up and recent advances in analysis of biogenic amines in foodstuffs // TrAC Trends in Analytical Chemistry. - 2016. - Vol. 78. - P. 84-94. KIM S.Y. et al. Anti-inflammatory effect of liverwort (Marchantia polymorpha L.) and racomitrium moss (Racomitrium canescens (Hedw.) Brid.) growing in Korea // Plants. - 2021. - Vol. 10. - No. 10. - Art. 2075. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Berkov et al. | Plant sources of galanthamine: phytochemical and biotechnological aspects | |
| Wu et al. | High yield production of salidroside in the suspension culture of Rhodiola sachalinensis | |
| JP4769868B2 (ja) | 植物細胞懸濁培養によるコロソール酸の製造方法 | |
| Muszyńska et al. | Indole compounds in fruiting bodies of some selected Macromycetes species and in their mycelia cultured in vitro | |
| RU2817262C1 (ru) | Способ получения смеси биогенных аминов дофамина, тирамина и триптамина | |
| RU2290936C1 (ru) | Способ получения средства для поддерживающей терапии, обладающего тканеспецифической активностью | |
| CN1124785C (zh) | 诱导水稻生成植物抗毒素的诱导剂的筛选方法和以诱导剂为有效成分的水稻病害防除剂 | |
| JP4297654B2 (ja) | フコキサンチンおよび／またはフコステロールの取得方法 | |
| JPH02242668A (ja) | 時宜を得た惹起による植物の代謝産物生産の最大増強 | |
| Jaremicz et al. | Multi‐development–HPTLC Method for Quantitation of Hyoscyamine, Scopolamine and their Biosynthetic Precursors in Selected Solanaceae Plants Grown in Natural Conditions and as In Vitro Cultures | |
| RU2813550C1 (ru) | Способ получения смеси биологически активных веществ: биогенных аминов гистамина, триптамина, тирамина, кинуренина, а также производного кинуренина - кинуреновой кислоты | |
| Addis et al. | Developmental Variation of the Neurotoxin, β-N-Oxalyl-l-α, β-diamino propionic acid (ODAP), in Lathyrus sativus | |
| RU2038086C1 (ru) | Способ получения биологически активного продукта из личинок большой восковой моли | |
| EP0197525B1 (en) | Plant culture cell and use thereof | |
| RU2296155C1 (ru) | Штамм культивированных клеток растений serratula coronata l. | |
| RU2639566C1 (ru) | Каллусный штамм культивируемых клеток растения живучка туркестанская Ajuga turkestanica (Regel) Briq. в условиях in vitro - продуцент туркестерона | |
| RU2558237C1 (ru) | Способ получения бактериородопсина | |
| JP5081346B2 (ja) | 酸化防止活性を有する化合物、該化合物を含有する食品インテグレーターとして有用な組成物及び該化合物の製法 | |
| RU2504577C2 (ru) | Способ получения масла из семян софоры японской и его состав | |
| CN114561294B (zh) | 一种耐高温高光的四爿藻的筛选 | |
| RU2713118C1 (ru) | Способ выделения суммы фурокумаринов из клеточной культуры болиголова пятнистого (Conium maculatum L.) | |
| KR930009510B1 (ko) | 배양 식물 세포 및 그의 제조방법 | |
| CN106978464B (zh) | 一种提高蛹虫草Cm04类胡萝卜素产量的固体发酵方法 | |
| RU2563349C1 (ru) | Способ получения бактериородопсина | |
| JP2545359B2 (ja) | 植物培養細胞 |