RU2771323C2 - Клеточная система направленной доставки фармацевтически активного вещества или метки - Google Patents
Клеточная система направленной доставки фармацевтически активного вещества или метки Download PDFInfo
- Publication number
- RU2771323C2 RU2771323C2 RU2018144424A RU2018144424A RU2771323C2 RU 2771323 C2 RU2771323 C2 RU 2771323C2 RU 2018144424 A RU2018144424 A RU 2018144424A RU 2018144424 A RU2018144424 A RU 2018144424A RU 2771323 C2 RU2771323 C2 RU 2771323C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- pharmaceutically active
- amino acid
- delivery system
- targeted delivery
- cell
- Prior art date
Links
- 239000013543 active substance Substances 0.000 title claims abstract description 183
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 title abstract description 10
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 261
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 claims abstract description 141
- 101000738771 Homo sapiens Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Proteins 0.000 claims abstract description 120
- 102100037422 Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Human genes 0.000 claims abstract description 120
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 115
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 114
- 102000008133 Iron-Binding Proteins Human genes 0.000 claims abstract description 80
- 108010035210 Iron-Binding Proteins Proteins 0.000 claims abstract description 80
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 67
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 38
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 25
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 23
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 21
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 19
- PMVSDNDAUGGCCE-TYYBGVCCSA-L Ferrous fumarate Chemical compound [Fe+2].[O-]C(=O)\C=C\C([O-])=O PMVSDNDAUGGCCE-TYYBGVCCSA-L 0.000 claims abstract description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 4
- 238000008416 Ferritin Methods 0.000 claims description 150
- 102000008857 Ferritin Human genes 0.000 claims description 149
- 108050000784 Ferritin Proteins 0.000 claims description 149
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 144
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 103
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 102
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims description 100
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 claims description 90
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 claims description 90
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 66
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 62
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 57
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 57
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 57
- 101001046686 Homo sapiens Integrin alpha-M Proteins 0.000 claims description 56
- 102100022338 Integrin alpha-M Human genes 0.000 claims description 56
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 claims description 54
- -1 CD86 Proteins 0.000 claims description 53
- 102000004338 Transferrin Human genes 0.000 claims description 53
- 108090000901 Transferrin Proteins 0.000 claims description 53
- 239000012581 transferrin Substances 0.000 claims description 53
- 210000004322 M2 macrophage Anatomy 0.000 claims description 46
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 46
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 38
- 230000008685 targeting Effects 0.000 claims description 36
- 230000007954 hypoxia Effects 0.000 claims description 34
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 33
- 210000003690 classically activated macrophage Anatomy 0.000 claims description 27
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 26
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 claims description 23
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 claims description 23
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 21
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 20
- 239000002872 contrast media Substances 0.000 claims description 20
- 230000001146 hypoxic effect Effects 0.000 claims description 20
- 239000000411 inducer Substances 0.000 claims description 19
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 19
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 19
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 19
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 19
- 101000946889 Homo sapiens Monocyte differentiation antigen CD14 Proteins 0.000 claims description 17
- 102100035877 Monocyte differentiation antigen CD14 Human genes 0.000 claims description 17
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 claims description 17
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 claims description 17
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 claims description 17
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 claims description 17
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 claims description 16
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 claims description 16
- 101000917858 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Proteins 0.000 claims description 15
- 101000917839 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Proteins 0.000 claims description 15
- 102000003814 Interleukin-10 Human genes 0.000 claims description 15
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 claims description 15
- 102100029185 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Human genes 0.000 claims description 15
- 102000007651 Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 claims description 15
- 108010046938 Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 claims description 15
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 claims description 15
- 229940076144 interleukin-10 Drugs 0.000 claims description 15
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 15
- 102100024222 B-lymphocyte antigen CD19 Human genes 0.000 claims description 14
- 102100022005 B-lymphocyte antigen CD20 Human genes 0.000 claims description 14
- 101000980825 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD19 Proteins 0.000 claims description 14
- 101000897405 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD20 Proteins 0.000 claims description 14
- 102100032768 Complement receptor type 2 Human genes 0.000 claims description 13
- 101000941929 Homo sapiens Complement receptor type 2 Proteins 0.000 claims description 13
- 108010076864 Nitric Oxide Synthase Type II Proteins 0.000 claims description 13
- 102000011779 Nitric Oxide Synthase Type II Human genes 0.000 claims description 13
- 108010033576 Transferrin Receptors Proteins 0.000 claims description 13
- 102100026144 Transferrin receptor protein 1 Human genes 0.000 claims description 13
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 13
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 claims description 13
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 claims description 13
- 102100031151 C-C chemokine receptor type 2 Human genes 0.000 claims description 12
- 101710149815 C-C chemokine receptor type 2 Proteins 0.000 claims description 12
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 claims description 12
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 claims description 12
- 102100031573 Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Human genes 0.000 claims description 12
- 101000777663 Homo sapiens Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Proteins 0.000 claims description 12
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 claims description 12
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 claims description 12
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 claims description 12
- ANZJBCHSOXCCRQ-FKUXLPTCSA-N mertansine Chemical compound CO[C@@H]([C@@]1(O)C[C@H](OC(=O)N1)[C@@H](C)[C@@H]1O[C@@]1(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](C)N(C)C(=O)CCS)CC(=O)N1C)\C=C\C=C(C)\CC2=CC(OC)=C(Cl)C1=C2 ANZJBCHSOXCCRQ-FKUXLPTCSA-N 0.000 claims description 12
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 11
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 11
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 claims description 11
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 claims description 11
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims description 11
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims description 11
- 229940117681 interleukin-12 Drugs 0.000 claims description 11
- 239000003446 ligand Substances 0.000 claims description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 11
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 claims description 11
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims description 10
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 10
- OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N adenosine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 claims description 10
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims description 10
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 claims description 9
- 101000581981 Homo sapiens Neural cell adhesion molecule 1 Proteins 0.000 claims description 9
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims description 9
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 claims description 9
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 claims description 9
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 claims description 9
- 102100027347 Neural cell adhesion molecule 1 Human genes 0.000 claims description 9
- 239000000975 dye Substances 0.000 claims description 9
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 claims description 9
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims description 9
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 claims description 9
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 claims description 9
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 claims description 9
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 claims description 9
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 claims description 9
- YZBAXVICWUUHGG-UHFFFAOYSA-N 2-[[4-[2-[dimethyl(oxido)azaniumyl]ethylamino]-5,8-dihydroxy-9,10-dioxoanthracen-1-yl]amino]-n,n-dimethylethanamine oxide Chemical compound O=C1C2=C(O)C=CC(O)=C2C(=O)C2=C1C(NCC[N+](C)(C)[O-])=CC=C2NCC[N+](C)([O-])C YZBAXVICWUUHGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims description 8
- 101000576894 Homo sapiens Macrophage mannose receptor 1 Proteins 0.000 claims description 8
- 101001134216 Homo sapiens Macrophage scavenger receptor types I and II Proteins 0.000 claims description 8
- 102100025354 Macrophage mannose receptor 1 Human genes 0.000 claims description 8
- 102100034184 Macrophage scavenger receptor types I and II Human genes 0.000 claims description 8
- 102100032727 Transcription factor RelB Human genes 0.000 claims description 8
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 claims description 8
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 claims description 8
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims description 8
- 102000017420 CD3 protein, epsilon/gamma/delta subunit Human genes 0.000 claims description 7
- 108050005493 CD3 protein, epsilon/gamma/delta subunit Proteins 0.000 claims description 7
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 101000584743 Homo sapiens Recombining binding protein suppressor of hairless Proteins 0.000 claims description 7
- 101000708741 Homo sapiens Transcription factor RelB Proteins 0.000 claims description 7
- 102000003816 Interleukin-13 Human genes 0.000 claims description 7
- 108090000176 Interleukin-13 Proteins 0.000 claims description 7
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 claims description 7
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 claims description 7
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 claims description 7
- 102100030000 Recombining binding protein suppressor of hairless Human genes 0.000 claims description 7
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 7
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 7
- 229950010936 banoxantrone Drugs 0.000 claims description 7
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 claims description 7
- 229960004630 chlorambucil Drugs 0.000 claims description 7
- JCKYGMPEJWAADB-UHFFFAOYSA-N chlorambucil Chemical compound OC(=O)CCCC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 JCKYGMPEJWAADB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 claims description 7
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 claims description 7
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 claims description 7
- SGDBTWWWUNNDEQ-LBPRGKRZSA-N melphalan Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 SGDBTWWWUNNDEQ-LBPRGKRZSA-N 0.000 claims description 7
- 229960001924 melphalan Drugs 0.000 claims description 7
- 229960005558 mertansine Drugs 0.000 claims description 7
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 claims description 7
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 claims description 7
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 claims description 7
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 claims description 7
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 claims description 6
- 102100021396 Cell surface glycoprotein CD200 receptor 1 Human genes 0.000 claims description 6
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims description 6
- 102100039622 Granulocyte colony-stimulating factor receptor Human genes 0.000 claims description 6
- 101000969553 Homo sapiens Cell surface glycoprotein CD200 receptor 1 Proteins 0.000 claims description 6
- 102100028198 Macrophage colony-stimulating factor 1 receptor Human genes 0.000 claims description 6
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 claims description 6
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 6
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 claims description 6
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 claims description 6
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 6
- 210000003979 eosinophil Anatomy 0.000 claims description 6
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 6
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 claims description 6
- 102000004452 Arginase Human genes 0.000 claims description 5
- 108700024123 Arginases Proteins 0.000 claims description 5
- 239000002126 C01EB10 - Adenosine Substances 0.000 claims description 5
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 claims description 5
- 206010017533 Fungal infection Diseases 0.000 claims description 5
- 101001033280 Homo sapiens Cytokine receptor common subunit beta Proteins 0.000 claims description 5
- 101000934338 Homo sapiens Myeloid cell surface antigen CD33 Proteins 0.000 claims description 5
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 claims description 5
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 claims description 5
- 208000031888 Mycoses Diseases 0.000 claims description 5
- 102100025243 Myeloid cell surface antigen CD33 Human genes 0.000 claims description 5
- 229960005305 adenosine Drugs 0.000 claims description 5
- 229960002707 bendamustine Drugs 0.000 claims description 5
- YTKUWDBFDASYHO-UHFFFAOYSA-N bendamustine Chemical compound ClCCN(CCCl)C1=CC=C2N(C)C(CCCC(O)=O)=NC2=C1 YTKUWDBFDASYHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 claims description 5
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims description 5
- UGJWRPJDTDGERK-UHFFFAOYSA-N evofosfamide Chemical compound CN1C(COP(=O)(NCCBr)NCCBr)=CN=C1[N+]([O-])=O UGJWRPJDTDGERK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 108010074605 gamma-Globulins Proteins 0.000 claims description 5
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims description 5
- 108010046018 leukocyte inhibitory factor Proteins 0.000 claims description 5
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 5
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 claims description 5
- VILCJCGEZXAXTO-UHFFFAOYSA-N 2,2,2-tetramine Chemical compound NCCNCCNCCN VILCJCGEZXAXTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- JHALWMSZGCVVEM-UHFFFAOYSA-N 2-[4,7-bis(carboxymethyl)-1,4,7-triazonan-1-yl]acetic acid Chemical compound OC(=O)CN1CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC1 JHALWMSZGCVVEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- HBBSDZXXUIHKJE-UHFFFAOYSA-N 6-hydrazinylpyridine-3-carboxylic acid Chemical compound NNC1=CC=C(C(O)=O)C=N1 HBBSDZXXUIHKJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- MXPOCMVWFLDDLZ-NSCUHMNNSA-N Apaziquone Chemical compound CN1C(\C=C\CO)=C(CO)C(C2=O)=C1C(=O)C=C2N1CC1 MXPOCMVWFLDDLZ-NSCUHMNNSA-N 0.000 claims description 4
- 102100031172 C-C chemokine receptor type 1 Human genes 0.000 claims description 4
- 101710149814 C-C chemokine receptor type 1 Proteins 0.000 claims description 4
- 102100025470 Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 8 Human genes 0.000 claims description 4
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 claims description 4
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 claims description 4
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 claims description 4
- 108010034145 Helminth Proteins Proteins 0.000 claims description 4
- 208000006968 Helminthiasis Diseases 0.000 claims description 4
- 102100026122 High affinity immunoglobulin gamma Fc receptor I Human genes 0.000 claims description 4
- 101000914320 Homo sapiens Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 8 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000913074 Homo sapiens High affinity immunoglobulin gamma Fc receptor I Proteins 0.000 claims description 4
- 101000917826 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-a Proteins 0.000 claims description 4
- 101000917824 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-b Proteins 0.000 claims description 4
- 108010063045 Lactoferrin Proteins 0.000 claims description 4
- 102100029204 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-a Human genes 0.000 claims description 4
- QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N N,N-bis{2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl}glycine Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(=O)O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 102000012064 NLR Proteins Human genes 0.000 claims description 4
- 108091005686 NOD-like receptors Proteins 0.000 claims description 4
- 108091005685 RIG-I-like receptors Proteins 0.000 claims description 4
- JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N Vinblastine Natural products O=C(O[C@H]1[C@](O)(C(=O)OC)[C@@H]2N(C)c3c(cc(c(OC)c3)[C@]3(C(=O)OC)c4[nH]c5c(c4CCN4C[C@](O)(CC)C[C@H](C3)C4)cccc5)[C@@]32[C@H]2[C@@]1(CC)C=CCN2CC3)C JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N 0.000 claims description 4
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 claims description 4
- 108010044540 auristatin Proteins 0.000 claims description 4
- 210000003651 basophil Anatomy 0.000 claims description 4
- 230000000035 biogenic effect Effects 0.000 claims description 4
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 claims description 4
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 claims description 4
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 claims description 4
- 244000000013 helminth Species 0.000 claims description 4
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 claims description 4
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 4
- 102000014909 interleukin-1 receptor activity proteins Human genes 0.000 claims description 4
- 108040006732 interleukin-1 receptor activity proteins Proteins 0.000 claims description 4
- CSSYQJWUGATIHM-IKGCZBKSSA-N l-phenylalanyl-l-lysyl-l-cysteinyl-l-arginyl-l-arginyl-l-tryptophyl-l-glutaminyl-l-tryptophyl-l-arginyl-l-methionyl-l-lysyl-l-lysyl-l-leucylglycyl-l-alanyl-l-prolyl-l-seryl-l-isoleucyl-l-threonyl-l-cysteinyl-l-valyl-l-arginyl-l-arginyl-l-alanyl-l-phenylal Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 CSSYQJWUGATIHM-IKGCZBKSSA-N 0.000 claims description 4
- 229940078795 lactoferrin Drugs 0.000 claims description 4
- 235000021242 lactoferrin Nutrition 0.000 claims description 4
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims description 4
- 208000014837 parasitic helminthiasis infectious disease Diseases 0.000 claims description 4
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 4
- 230000005855 radiation Effects 0.000 claims description 4
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 claims description 4
- WYWHKKSPHMUBEB-UHFFFAOYSA-N tioguanine Chemical compound N1C(N)=NC(=S)C2=C1N=CN2 WYWHKKSPHMUBEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229950002376 tirapazamine Drugs 0.000 claims description 4
- QVMPZNRFXAKISM-UHFFFAOYSA-N tirapazamine Chemical compound C1=CC=C2[N+]([O-])=NC(=N)N(O)C2=C1 QVMPZNRFXAKISM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229960003048 vinblastine Drugs 0.000 claims description 4
- JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N vincaleukoblastine Chemical compound C([C@@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(=O)OC)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1NC1=CC=CC=C21 JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N 0.000 claims description 4
- 102100022716 Atypical chemokine receptor 3 Human genes 0.000 claims description 3
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 claims description 3
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 claims description 3
- 229910052688 Gadolinium Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 102000009465 Growth Factor Receptors Human genes 0.000 claims description 3
- 108010009202 Growth Factor Receptors Proteins 0.000 claims description 3
- 108010085682 Hemoglobin A Proteins 0.000 claims description 3
- 102000007513 Hemoglobin A Human genes 0.000 claims description 3
- 108010085686 Hemoglobin C Proteins 0.000 claims description 3
- 108010068323 Hemoglobin E Proteins 0.000 claims description 3
- 108091005880 Hemoglobin F Proteins 0.000 claims description 3
- 108010068308 Hemoglobin H Proteins 0.000 claims description 3
- 108010026027 Hemopexin Proteins 0.000 claims description 3
- 101000971513 Homo sapiens Natural killer cells antigen CD94 Proteins 0.000 claims description 3
- 206010061216 Infarction Diseases 0.000 claims description 3
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 claims description 3
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 claims description 3
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 claims description 3
- 102100021462 Natural killer cells antigen CD94 Human genes 0.000 claims description 3
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 229940080774 Peroxisome proliferator-activated receptor gamma agonist Drugs 0.000 claims description 3
- 206010072170 Skin wound Diseases 0.000 claims description 3
- 102100037236 Tyrosine-protein kinase receptor UFO Human genes 0.000 claims description 3
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 claims description 3
- 206010048214 Xanthoma Diseases 0.000 claims description 3
- 206010048215 Xanthomatosis Diseases 0.000 claims description 3
- 150000001251 acridines Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 claims description 3
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 claims description 3
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 claims description 3
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 claims description 3
- ZYGHJZDHTFUPRJ-UHFFFAOYSA-N benzo-alpha-pyrone Natural products C1=CC=C2OC(=O)C=CC2=C1 ZYGHJZDHTFUPRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 claims description 3
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 claims description 3
- 239000003636 conditioned culture medium Substances 0.000 claims description 3
- 235000001671 coumarin Nutrition 0.000 claims description 3
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 claims description 3
- 108091006047 fluorescent proteins Proteins 0.000 claims description 3
- 102000034287 fluorescent proteins Human genes 0.000 claims description 3
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 claims description 3
- 108010071602 haptoglobin-hemoglobin complex Proteins 0.000 claims description 3
- 108010036302 hemoglobin AS Proteins 0.000 claims description 3
- 108010047389 hemoglobin D Proteins 0.000 claims description 3
- 229940124622 immune-modulator drug Drugs 0.000 claims description 3
- 230000007574 infarction Effects 0.000 claims description 3
- 230000004968 inflammatory condition Effects 0.000 claims description 3
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 claims description 3
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 229910052748 manganese Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000003550 marker Substances 0.000 claims description 3
- 239000002159 nanocrystal Substances 0.000 claims description 3
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 claims description 3
- 150000004893 oxazines Chemical class 0.000 claims description 3
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 claims description 3
- 230000005298 paramagnetic effect Effects 0.000 claims description 3
- 150000002979 perylenes Chemical class 0.000 claims description 3
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 208000032253 retinal ischemia Diseases 0.000 claims description 3
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims description 3
- 125000005504 styryl group Chemical group 0.000 claims description 3
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 125000001834 xanthenyl group Chemical class C1=CC=CC=2OC3=CC=CC=C3C(C12)* 0.000 claims description 3
- OWQPOVKKUWUEKE-UHFFFAOYSA-N 1,2,3-benzotriazine Chemical compound N1=NN=CC2=CC=CC=C21 OWQPOVKKUWUEKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- JYEUMXHLPRZUAT-UHFFFAOYSA-N 1,2,3-triazine Chemical compound C1=CN=NN=C1 JYEUMXHLPRZUAT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 102100025573 1-alkyl-2-acetylglycerophosphocholine esterase Human genes 0.000 claims description 2
- PNDPGZBMCMUPRI-HVTJNCQCSA-N 10043-66-0 Chemical compound [131I][131I] PNDPGZBMCMUPRI-HVTJNCQCSA-N 0.000 claims description 2
- AZICEEZSDKZDHX-UHFFFAOYSA-N 2-[n-(2-bromoethyl)-2-(2-hydroxyethylcarbamoyl)-4,6-dinitroanilino]ethyl methanesulfonate Chemical compound CS(=O)(=O)OCCN(CCBr)C1=C(C(=O)NCCO)C=C([N+]([O-])=O)C=C1[N+]([O-])=O AZICEEZSDKZDHX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- CTRPRMNBTVRDFH-UHFFFAOYSA-N 2-n-methyl-1,3,5-triazine-2,4,6-triamine Chemical compound CNC1=NC(N)=NC(N)=N1 CTRPRMNBTVRDFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- NDMPLJNOPCLANR-UHFFFAOYSA-N 3,4-dihydroxy-15-(4-hydroxy-18-methoxycarbonyl-5,18-seco-ibogamin-18-yl)-16-methoxy-1-methyl-6,7-didehydro-aspidospermidine-3-carboxylic acid methyl ester Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 NDMPLJNOPCLANR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- SVYBEBLNQGDRHF-UHFFFAOYSA-N 4-amino-N-(5-ethyl-1,3,4-thiadiazol-2-yl)benzenesulfonamide Chemical compound S1C(CC)=NN=C1NS(=O)(=O)C1=CC=C(N)C=C1 SVYBEBLNQGDRHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- WZRJTRPJURQBRM-UHFFFAOYSA-N 4-amino-n-(5-methyl-1,2-oxazol-3-yl)benzenesulfonamide;5-[(3,4,5-trimethoxyphenyl)methyl]pyrimidine-2,4-diamine Chemical compound O1C(C)=CC(NS(=O)(=O)C=2C=CC(N)=CC=2)=N1.COC1=C(OC)C(OC)=CC(CC=2C(=NC(N)=NC=2)N)=C1 WZRJTRPJURQBRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- PBCZSGKMGDDXIJ-HQCWYSJUSA-N 7-hydroxystaurosporine Chemical compound N([C@H](O)C1=C2C3=CC=CC=C3N3C2=C24)C(=O)C1=C2C1=CC=CC=C1N4[C@H]1C[C@@H](NC)[C@@H](OC)[C@]3(C)O1 PBCZSGKMGDDXIJ-HQCWYSJUSA-N 0.000 claims description 2
- PBCZSGKMGDDXIJ-UHFFFAOYSA-N 7beta-hydroxystaurosporine Natural products C12=C3N4C5=CC=CC=C5C3=C3C(O)NC(=O)C3=C2C2=CC=CC=C2N1C1CC(NC)C(OC)C4(C)O1 PBCZSGKMGDDXIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 108010024976 Asparaginase Proteins 0.000 claims description 2
- NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N Aziridine Chemical compound C1CN1 NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 108010006654 Bleomycin Proteins 0.000 claims description 2
- ZOXJGFHDIHLPTG-BJUDXGSMSA-N Boron-10 Chemical compound [10B] ZOXJGFHDIHLPTG-BJUDXGSMSA-N 0.000 claims description 2
- COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N Busulfan Chemical compound CS(=O)(=O)OCCCCOS(C)(=O)=O COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 102100025618 C-X-C chemokine receptor type 6 Human genes 0.000 claims description 2
- DLGOEMSEDOSKAD-UHFFFAOYSA-N Carmustine Chemical compound ClCCNC(=O)N(N=O)CCCl DLGOEMSEDOSKAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229940123587 Cell cycle inhibitor Drugs 0.000 claims description 2
- 102000009410 Chemokine receptor Human genes 0.000 claims description 2
- 108050000299 Chemokine receptor Proteins 0.000 claims description 2
- PTOAARAWEBMLNO-KVQBGUIXSA-N Cladribine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC(Cl)=NC=2N1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](CO)O1 PTOAARAWEBMLNO-KVQBGUIXSA-N 0.000 claims description 2
- 229940122204 Cyclooxygenase inhibitor Drugs 0.000 claims description 2
- 108010054218 Factor VIII Proteins 0.000 claims description 2
- 102000001690 Factor VIII Human genes 0.000 claims description 2
- 108010054017 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Receptors Proteins 0.000 claims description 2
- 108010092372 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Receptors Proteins 0.000 claims description 2
- 102000016355 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Receptors Human genes 0.000 claims description 2
- 108010043121 Green Fluorescent Proteins Proteins 0.000 claims description 2
- 102000004144 Green Fluorescent Proteins Human genes 0.000 claims description 2
- 101000678890 Homo sapiens Atypical chemokine receptor 3 Proteins 0.000 claims description 2
- 101000856683 Homo sapiens C-X-C chemokine receptor type 6 Proteins 0.000 claims description 2
- 101000934372 Homo sapiens Macrosialin Proteins 0.000 claims description 2
- 101000588302 Homo sapiens Nuclear factor erythroid 2-related factor 2 Proteins 0.000 claims description 2
- 101000651211 Homo sapiens Transcription factor PU.1 Proteins 0.000 claims description 2
- 101150065069 Hsp90b1 gene Proteins 0.000 claims description 2
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 claims description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229940123917 Lipid kinase inhibitor Drugs 0.000 claims description 2
- 239000000867 Lipoxygenase Inhibitor Substances 0.000 claims description 2
- 229940122142 Lipoxygenase inhibitor Drugs 0.000 claims description 2
- 108010058398 Macrophage Colony-Stimulating Factor Receptor Proteins 0.000 claims description 2
- 102100025136 Macrosialin Human genes 0.000 claims description 2
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 claims description 2
- 229930126263 Maytansine Natural products 0.000 claims description 2
- 150000001204 N-oxides Chemical class 0.000 claims description 2
- 102100031701 Nuclear factor erythroid 2-related factor 2 Human genes 0.000 claims description 2
- 108020005497 Nuclear hormone receptor Proteins 0.000 claims description 2
- 101150086211 OLR1 gene Proteins 0.000 claims description 2
- OAICVXFJPJFONN-OUBTZVSYSA-N Phosphorus-32 Chemical compound [32P] OAICVXFJPJFONN-OUBTZVSYSA-N 0.000 claims description 2
- 102000004005 Prostaglandin-endoperoxide synthases Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000459 Prostaglandin-endoperoxide synthases Proteins 0.000 claims description 2
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 claims description 2
- 229940116193 Protein phosphatase inhibitor Drugs 0.000 claims description 2
- 101710202172 Rho GDP-dissociation inhibitor Proteins 0.000 claims description 2
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 claims description 2
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 claims description 2
- PDMMFKSKQVNJMI-BLQWBTBKSA-N Testosterone propionate Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](OC(=O)CC)[C@@]1(C)CC2 PDMMFKSKQVNJMI-BLQWBTBKSA-N 0.000 claims description 2
- WDLRUFUQRNWCPK-UHFFFAOYSA-N Tetraxetan Chemical compound OC(=O)CN1CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC1 WDLRUFUQRNWCPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- FOCVUCIESVLUNU-UHFFFAOYSA-N Thiotepa Chemical compound C1CN1P(N1CC1)(=S)N1CC1 FOCVUCIESVLUNU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- HJLSLZFTEKNLFI-UHFFFAOYSA-N Tinidazole Chemical compound CCS(=O)(=O)CCN1C(C)=NC=C1[N+]([O-])=O HJLSLZFTEKNLFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 102000002689 Toll-like receptor Human genes 0.000 claims description 2
- 108020000411 Toll-like receptor Proteins 0.000 claims description 2
- 102100027654 Transcription factor PU.1 Human genes 0.000 claims description 2
- YCPOZVAOBBQLRI-WDSKDSINSA-N Treosulfan Chemical compound CS(=O)(=O)OC[C@H](O)[C@@H](O)COS(C)(=O)=O YCPOZVAOBBQLRI-WDSKDSINSA-N 0.000 claims description 2
- 229940122803 Vinca alkaloid Drugs 0.000 claims description 2
- FKKUMFTYSTZUJG-UHFFFAOYSA-N acediasulfone Chemical compound C1=CC(N)=CC=C1S(=O)(=O)C1=CC=C(NCC(O)=O)C=C1 FKKUMFTYSTZUJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229950010964 acediasulfone Drugs 0.000 claims description 2
- USZYSDMBJDPRIF-SVEJIMAYSA-N aclacinomycin A Chemical compound O([C@H]1[C@@H](O)C[C@@H](O[C@H]1C)O[C@H]1[C@H](C[C@@H](O[C@H]1C)O[C@H]1C[C@]([C@@H](C2=CC=3C(=O)C4=CC=CC(O)=C4C(=O)C=3C(O)=C21)C(=O)OC)(O)CC)N(C)C)[C@H]1CCC(=O)[C@H](C)O1 USZYSDMBJDPRIF-SVEJIMAYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960004176 aclarubicin Drugs 0.000 claims description 2
- 229940125666 actinium-225 Drugs 0.000 claims description 2
- QQINRWTZWGJFDB-YPZZEJLDSA-N actinium-225 Chemical compound [225Ac] QQINRWTZWGJFDB-YPZZEJLDSA-N 0.000 claims description 2
- 150000008052 alkyl sulfonates Chemical class 0.000 claims description 2
- 229940100198 alkylating agent Drugs 0.000 claims description 2
- 239000002168 alkylating agent Substances 0.000 claims description 2
- 229960003832 ambazone Drugs 0.000 claims description 2
- MLMFUKWWZIZRHX-UWRPRBHNSA-N ambazone Chemical compound C\1(=N/NC(=S)N)/C=C/C(=N/NC(=N)N)/C=C/1 MLMFUKWWZIZRHX-UWRPRBHNSA-N 0.000 claims description 2
- ROBVIMPUHSLWNV-UHFFFAOYSA-N aminoglutethimide Chemical compound C=1C=C(N)C=CC=1C1(CC)CCC(=O)NC1=O ROBVIMPUHSLWNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960003437 aminoglutethimide Drugs 0.000 claims description 2
- RGHILYZRVFRRNK-UHFFFAOYSA-N anthracene-1,2-dione Chemical compound C1=CC=C2C=C(C(C(=O)C=C3)=O)C3=CC2=C1 RGHILYZRVFRRNK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 230000002280 anti-androgenic effect Effects 0.000 claims description 2
- 229940046836 anti-estrogen Drugs 0.000 claims description 2
- 230000001833 anti-estrogenic effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000003388 anti-hormonal effect Effects 0.000 claims description 2
- 229940124599 anti-inflammatory drug Drugs 0.000 claims description 2
- 230000000340 anti-metabolite Effects 0.000 claims description 2
- 239000000051 antiandrogen Substances 0.000 claims description 2
- 229940100197 antimetabolite Drugs 0.000 claims description 2
- 239000002256 antimetabolite Substances 0.000 claims description 2
- 229950002465 apaziquone Drugs 0.000 claims description 2
- 229960002170 azathioprine Drugs 0.000 claims description 2
- LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N azathioprine Chemical compound CN1C=NC([N+]([O-])=O)=C1SC1=NC=NC2=C1NC=N2 LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 claims description 2
- JCXGWMGPZLAOME-RNFDNDRNSA-N bismuth-213 Chemical compound [213Bi] JCXGWMGPZLAOME-RNFDNDRNSA-N 0.000 claims description 2
- 229960001561 bleomycin Drugs 0.000 claims description 2
- OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O bleomycin A2 Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCCC=1SC=C(N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCC[S+](C)C)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1N=CNC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O 0.000 claims description 2
- 229960002092 busulfan Drugs 0.000 claims description 2
- KVUAALJSMIVURS-ZEDZUCNESA-L calcium folinate Chemical compound [Ca+2].C1NC=2NC(N)=NC(=O)C=2N(C=O)C1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC([O-])=O)C([O-])=O)C=C1 KVUAALJSMIVURS-ZEDZUCNESA-L 0.000 claims description 2
- 235000008207 calcium folinate Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000011687 calcium folinate Substances 0.000 claims description 2
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 claims description 2
- 229960004562 carboplatin Drugs 0.000 claims description 2
- 229960005243 carmustine Drugs 0.000 claims description 2
- 229960000590 celecoxib Drugs 0.000 claims description 2
- RZEKVGVHFLEQIL-UHFFFAOYSA-N celecoxib Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1C1=CC(C(F)(F)F)=NN1C1=CC=C(S(N)(=O)=O)C=C1 RZEKVGVHFLEQIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 230000022131 cell cycle Effects 0.000 claims description 2
- TVFDJXOCXUVLDH-YPZZEJLDSA-N cesium-131 Chemical compound [131Cs] TVFDJXOCXUVLDH-YPZZEJLDSA-N 0.000 claims description 2
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- 229960002436 cladribine Drugs 0.000 claims description 2
- 229940047766 co-trimoxazole Drugs 0.000 claims description 2
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 claims description 2
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 claims description 2
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 claims description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000000295 emission spectrum Methods 0.000 claims description 2
- 229930013356 epothilone Natural products 0.000 claims description 2
- HESCAJZNRMSMJG-KKQRBIROSA-N epothilone A Chemical class C/C([C@@H]1C[C@@H]2O[C@@H]2CCC[C@@H]([C@@H]([C@@H](C)C(=O)C(C)(C)[C@@H](O)CC(=O)O1)O)C)=C\C1=CSC(C)=N1 HESCAJZNRMSMJG-KKQRBIROSA-N 0.000 claims description 2
- 239000000328 estrogen antagonist Substances 0.000 claims description 2
- 150000002224 folic acids Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 claims description 2
- 239000005090 green fluorescent protein Substances 0.000 claims description 2
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 claims description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 claims description 2
- NBZBKCUXIYYUSX-UHFFFAOYSA-N iminodiacetic acid Chemical compound OC(=O)CNCC(O)=O NBZBKCUXIYYUSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 claims description 2
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 claims description 2
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 claims description 2
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 claims description 2
- 229940044173 iodine-125 Drugs 0.000 claims description 2
- 229940043355 kinase inhibitor Drugs 0.000 claims description 2
- WABPQHHGFIMREM-BKFZFHPZSA-N lead-212 Chemical compound [212Pb] WABPQHHGFIMREM-BKFZFHPZSA-N 0.000 claims description 2
- 150000002617 leukotrienes Chemical class 0.000 claims description 2
- OHSVLFRHMCKCQY-NJFSPNSNSA-N lutetium-177 Chemical compound [177Lu] OHSVLFRHMCKCQY-NJFSPNSNSA-N 0.000 claims description 2
- WKPWGQKGSOKKOO-RSFHAFMBSA-N maytansine Chemical compound CO[C@@H]([C@@]1(O)C[C@](OC(=O)N1)([C@H]([C@@H]1O[C@@]1(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](C)N(C)C(C)=O)CC(=O)N1C)C)[H])\C=C\C=C(C)\CC2=CC(OC)=C(Cl)C1=C2 WKPWGQKGSOKKOO-RSFHAFMBSA-N 0.000 claims description 2
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 claims description 2
- HDZGCSFEDULWCS-UHFFFAOYSA-N monomethylhydrazine Chemical class CNN HDZGCSFEDULWCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 108020004017 nuclear receptors Proteins 0.000 claims description 2
- 244000309459 oncolytic virus Species 0.000 claims description 2
- KDLHZDBZIXYQEI-OIOBTWANSA-N palladium-103 Chemical compound [103Pd] KDLHZDBZIXYQEI-OIOBTWANSA-N 0.000 claims description 2
- 108010089193 pattern recognition receptors Proteins 0.000 claims description 2
- 102000007863 pattern recognition receptors Human genes 0.000 claims description 2
- 239000003934 phosphoprotein phosphatase inhibitor Substances 0.000 claims description 2
- 229940097886 phosphorus 32 Drugs 0.000 claims description 2
- 230000002165 photosensitisation Effects 0.000 claims description 2
- 239000003504 photosensitizing agent Substances 0.000 claims description 2
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 150000003058 platinum compounds Chemical class 0.000 claims description 2
- HZEBHPIOVYHPMT-AKLPVKDBSA-N polonium-212 atom Chemical compound [212Po] HZEBHPIOVYHPMT-AKLPVKDBSA-N 0.000 claims description 2
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000002599 prostaglandin synthase inhibitor Substances 0.000 claims description 2
- 229940127293 prostanoid Drugs 0.000 claims description 2
- 150000003814 prostanoids Chemical class 0.000 claims description 2
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 claims description 2
- 239000003909 protein kinase inhibitor Substances 0.000 claims description 2
- 150000003212 purines Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000003230 pyrimidines Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000000018 receptor agonist Substances 0.000 claims description 2
- 229940044601 receptor agonist Drugs 0.000 claims description 2
- 229940044551 receptor antagonist Drugs 0.000 claims description 2
- 239000002464 receptor antagonist Substances 0.000 claims description 2
- KZUNJOHGWZRPMI-AKLPVKDBSA-N samarium-153 Chemical compound [153Sm] KZUNJOHGWZRPMI-AKLPVKDBSA-N 0.000 claims description 2
- 229960002953 sulfadicramide Drugs 0.000 claims description 2
- XRVJPLDTMUSSDE-UHFFFAOYSA-N sulfadicramide Chemical compound CC(C)=CC(=O)NS(=O)(=O)C1=CC=C(N)C=C1 XRVJPLDTMUSSDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960000973 sulfadimethoxine Drugs 0.000 claims description 2
- ZZORFUFYDOWNEF-UHFFFAOYSA-N sulfadimethoxine Chemical compound COC1=NC(OC)=CC(NS(=O)(=O)C=2C=CC(N)=CC=2)=N1 ZZORFUFYDOWNEF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960004257 sulfaguanidine Drugs 0.000 claims description 2
- BRBKOPJOKNSWSG-UHFFFAOYSA-N sulfaguanidine Chemical compound NC(=N)NS(=O)(=O)C1=CC=C(N)C=C1 BRBKOPJOKNSWSG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229950008582 sulfaguanole Drugs 0.000 claims description 2
- IJZUQDQOAFUFJY-UHFFFAOYSA-N sulfaguanole Chemical compound O1C(C)=C(C)N=C1N\C(N)=N\S(=O)(=O)C1=CC=C(N)C=C1 IJZUQDQOAFUFJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960005158 sulfamethizole Drugs 0.000 claims description 2
- VACCAVUAMIDAGB-UHFFFAOYSA-N sulfamethizole Chemical compound S1C(C)=NN=C1NS(=O)(=O)C1=CC=C(N)C=C1 VACCAVUAMIDAGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960005404 sulfamethoxazole Drugs 0.000 claims description 2
- GPTONYMQFTZPKC-UHFFFAOYSA-N sulfamethoxydiazine Chemical compound N1=CC(OC)=CN=C1NS(=O)(=O)C1=CC=C(N)C=C1 GPTONYMQFTZPKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960004936 sulfamethoxypyridazine Drugs 0.000 claims description 2
- VLYWMPOKSSWJAL-UHFFFAOYSA-N sulfamethoxypyridazine Chemical compound N1=NC(OC)=CC=C1NS(=O)(=O)C1=CC=C(N)C=C1 VLYWMPOKSSWJAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960002229 sulfametoxydiazine Drugs 0.000 claims description 2
- CYFLXLSBHQBMFT-UHFFFAOYSA-N sulfamoxole Chemical compound O1C(C)=C(C)N=C1NS(=O)(=O)C1=CC=C(N)C=C1 CYFLXLSBHQBMFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- FDDDEECHVMSUSB-UHFFFAOYSA-N sulfanilamide Chemical compound NC1=CC=C(S(N)(=O)=O)C=C1 FDDDEECHVMSUSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960000277 sulfaperin Drugs 0.000 claims description 2
- DZQVFHSCSRACSX-UHFFFAOYSA-N sulfaperin Chemical compound N1=CC(C)=CN=C1NS(=O)(=O)C1=CC=C(N)C=C1 DZQVFHSCSRACSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- YZMCKZRAOLZXAZ-UHFFFAOYSA-N sulfisomidine Chemical compound CC1=NC(C)=CC(NS(=O)(=O)C=2C=CC(N)=CC=2)=N1 YZMCKZRAOLZXAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960001975 sulfisomidine Drugs 0.000 claims description 2
- 229940124530 sulfonamide Drugs 0.000 claims description 2
- JLKIGFTWXXRPMT-UHFFFAOYSA-N sulphamethoxazole Chemical compound O1C(C)=CC(NS(=O)(=O)C=2C=CC(N)=CC=2)=N1 JLKIGFTWXXRPMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 230000020382 suppression by virus of host antigen processing and presentation of peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 claims description 2
- WAKIMVYUBWMMHJ-FXRZFVDSSA-N tarloxotinib bromide Chemical compound [Br-].CN1C=NC([N+]([O-])=O)=C1C[N+](C)(C)C\C=C\C(=O)NC(N=CC1=NC=N2)=CC1=C2NC1=CC=C(Cl)C(Br)=C1 WAKIMVYUBWMMHJ-FXRZFVDSSA-N 0.000 claims description 2
- 229960001712 testosterone propionate Drugs 0.000 claims description 2
- 229960001196 thiotepa Drugs 0.000 claims description 2
- 229960005053 tinidazole Drugs 0.000 claims description 2
- 229960003087 tioguanine Drugs 0.000 claims description 2
- 229960000303 topotecan Drugs 0.000 claims description 2
- UCFGDBYHRUNTLO-QHCPKHFHSA-N topotecan Chemical compound C1=C(O)C(CN(C)C)=C2C=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)[C@]5(O)CC)C4=NC2=C1 UCFGDBYHRUNTLO-QHCPKHFHSA-N 0.000 claims description 2
- 229960003181 treosulfan Drugs 0.000 claims description 2
- PXSOHRWMIRDKMP-UHFFFAOYSA-N triaziquone Chemical compound O=C1C(N2CC2)=C(N2CC2)C(=O)C=C1N1CC1 PXSOHRWMIRDKMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960004560 triaziquone Drugs 0.000 claims description 2
- IEDVJHCEMCRBQM-UHFFFAOYSA-N trimethoprim Chemical compound COC1=C(OC)C(OC)=CC(CC=2C(=NC(N)=NC=2)N)=C1 IEDVJHCEMCRBQM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960001082 trimethoprim Drugs 0.000 claims description 2
- 229960000875 trofosfamide Drugs 0.000 claims description 2
- UMKFEPPTGMDVMI-UHFFFAOYSA-N trofosfamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)OCCCN1CCCl UMKFEPPTGMDVMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 150000003672 ureas Chemical class 0.000 claims description 2
- 229960004528 vincristine Drugs 0.000 claims description 2
- OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N vincristine Chemical compound C([N@]1C[C@@H](C[C@]2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C([C@]56[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]7(CC)C=CCN([C@H]67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)C[C@@](C1)(O)CC)CC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N 0.000 claims description 2
- OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N vincristine Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(OC(C)=O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960004355 vindesine Drugs 0.000 claims description 2
- UGGWPQSBPIFKDZ-KOTLKJBCSA-N vindesine Chemical compound C([C@@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(N)=O)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1N=C1[C]2C=CC=C1 UGGWPQSBPIFKDZ-KOTLKJBCSA-N 0.000 claims description 2
- NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N Mytomycin Chemical compound C1N2C(C(C(C)=C(N)C3=O)=O)=C3[C@@H](COC(N)=O)[C@@]2(OC)[C@@H]2[C@H]1N2 NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N 0.000 claims 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- YASAKCUCGLMORW-UHFFFAOYSA-N Rosiglitazone Chemical compound C=1C=CC=NC=1N(C)CCOC(C=C1)=CC=C1CC1SC(=O)NC1=O YASAKCUCGLMORW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- RJURFGZVJUQBHK-UHFFFAOYSA-N actinomycin D Natural products CC1OC(=O)C(C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)C2CCCN2C(=O)C(C(C)C)NC(=O)C1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=CC=C3C(=O)NC4C(=O)NC(C(N5CCCC5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)C(C(C)C)C(=O)OC4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 RJURFGZVJUQBHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 claims 2
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 claims 2
- 125000002534 ethynyl group Chemical group [H]C#C* 0.000 claims 2
- FPVKHBSQESCIEP-UHFFFAOYSA-N (8S)-3-(2-deoxy-beta-D-erythro-pentofuranosyl)-3,6,7,8-tetrahydroimidazo[4,5-d][1,3]diazepin-8-ol Natural products C1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NCC2O)=C2N=C1 FPVKHBSQESCIEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- FDKXTQMXEQVLRF-ZHACJKMWSA-N (E)-dacarbazine Chemical compound CN(C)\N=N\c1[nH]cnc1C(N)=O FDKXTQMXEQVLRF-ZHACJKMWSA-N 0.000 claims 1
- AOJJSUZBOXZQNB-VTZDEGQISA-N 4'-epidoxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-VTZDEGQISA-N 0.000 claims 1
- STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 7-Cyan-hept-2t-en-4,6-diinsaeure Natural products C1=2C(O)=C3C(=O)C=4C(OC)=CC=CC=4C(=O)C3=C(O)C=2CC(O)(C(C)=O)CC1OC1CC(N)C(O)C(C)O1 STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- FVLVBPDQNARYJU-XAHDHGMMSA-N C[C@H]1CCC(CC1)NC(=O)N(CCCl)N=O Chemical compound C[C@H]1CCC(CC1)NC(=O)N(CCCl)N=O FVLVBPDQNARYJU-XAHDHGMMSA-N 0.000 claims 1
- JWBOIMRXGHLCPP-UHFFFAOYSA-N Chloditan Chemical compound C=1C=CC=C(Cl)C=1C(C(Cl)Cl)C1=CC=C(Cl)C=C1 JWBOIMRXGHLCPP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N Cytarabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N 0.000 claims 1
- 108010092160 Dactinomycin Proteins 0.000 claims 1
- MQJKPEGWNLWLTK-UHFFFAOYSA-N Dapsone Chemical compound C1=CC(N)=CC=C1S(=O)(=O)C1=CC=C(N)C=C1 MQJKPEGWNLWLTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- HTIJFSOGRVMCQR-UHFFFAOYSA-N Epirubicin Natural products COc1cccc2C(=O)c3c(O)c4CC(O)(CC(OC5CC(N)C(=O)C(C)O5)c4c(O)c3C(=O)c12)C(=O)CO HTIJFSOGRVMCQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- QXRSDHAAWVKZLJ-OXZHEXMSSA-N Epothilone B Natural products O=C1[C@H](C)[C@H](O)[C@@H](C)CCC[C@@]2(C)O[C@H]2C[C@@H](/C(=C\c2nc(C)sc2)/C)OC(=O)C[C@H](O)C1(C)C QXRSDHAAWVKZLJ-OXZHEXMSSA-N 0.000 claims 1
- XOZIUKBZLSUILX-SDMHVBBESA-N Epothilone D Natural products O=C1[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)CCC/C(/C)=C/C[C@@H](/C(=C\c2nc(C)sc2)/C)OC(=O)C[C@H](O)C1(C)C XOZIUKBZLSUILX-SDMHVBBESA-N 0.000 claims 1
- GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N Fluorouracil Chemical compound FC1=CNC(=O)NC1=O GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 102000013271 Hemopexin Human genes 0.000 claims 1
- 229940076838 Immune checkpoint inhibitor Drugs 0.000 claims 1
- 102000037984 Inhibitory immune checkpoint proteins Human genes 0.000 claims 1
- 108091008026 Inhibitory immune checkpoint proteins Proteins 0.000 claims 1
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 claims 1
- 102000010445 Lactoferrin Human genes 0.000 claims 1
- TYMRLRRVMHJFTF-UHFFFAOYSA-N Mafenide Chemical compound NCC1=CC=C(S(N)(=O)=O)C=C1 TYMRLRRVMHJFTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N N-debenzoyl-N-(tert-butoxycarbonyl)-10-deacetyltaxol Chemical compound O([C@H]1[C@H]2[C@@](C([C@H](O)C3=C(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C=4C=CC=CC=4)C[C@]1(O)C3(C)C)=O)(C)[C@@H](O)C[C@H]1OC[C@]12OC(=O)C)C(=O)C1=CC=CC=C1 ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N 0.000 claims 1
- ARFHIAQFJWUCFH-IZZDOVSWSA-N Nifurtimox Chemical compound CC1CS(=O)(=O)CCN1\N=C\C1=CC=C([N+]([O-])=O)O1 ARFHIAQFJWUCFH-IZZDOVSWSA-N 0.000 claims 1
- 102000007399 Nuclear hormone receptor Human genes 0.000 claims 1
- KYGZCKSPAKDVKC-UHFFFAOYSA-N Oxolinic acid Chemical compound C1=C2N(CC)C=C(C(O)=O)C(=O)C2=CC2=C1OCO2 KYGZCKSPAKDVKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- QPFYXYFORQJZEC-FOCLMDBBSA-N Phenazopyridine Chemical compound NC1=NC(N)=CC=C1\N=N\C1=CC=CC=C1 QPFYXYFORQJZEC-FOCLMDBBSA-N 0.000 claims 1
- HFVNWDWLWUCIHC-GUPDPFMOSA-N Prednimustine Chemical compound O=C([C@@]1(O)CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)[C@@H](O)C[C@@]21C)COC(=O)CCCC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 HFVNWDWLWUCIHC-GUPDPFMOSA-N 0.000 claims 1
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 claims 1
- ZLYHTQKHXIVMLY-UHFFFAOYSA-N Sulfatolamide Chemical compound NCC1=CC=C(S(N)(=O)=O)C=C1.NC(=S)NS(=O)(=O)C1=CC=C(N)C=C1 ZLYHTQKHXIVMLY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- IVTVGDXNLFLDRM-HNNXBMFYSA-N Tomudex Chemical compound C=1C=C2NC(C)=NC(=O)C2=CC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)S1 IVTVGDXNLFLDRM-HNNXBMFYSA-N 0.000 claims 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims 1
- RJURFGZVJUQBHK-IIXSONLDSA-N actinomycin D Chemical compound C[C@H]1OC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)[C@@H]2CCCN2C(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H]1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=CC=C3C(=O)N[C@@H]4C(=O)N[C@@H](C(N5CCC[C@H]5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)[C@@H](C(C)C)C(=O)O[C@@H]4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 RJURFGZVJUQBHK-IIXSONLDSA-N 0.000 claims 1
- YAYRGNWWLMLWJE-UHFFFAOYSA-L carboplatin Chemical compound O=C1O[Pt](N)(N)OC(=O)C11CCC1 YAYRGNWWLMLWJE-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims 1
- 125000000332 coumarinyl group Chemical class O1C(=O)C(=CC2=CC=CC=C12)* 0.000 claims 1
- 229960000684 cytarabine Drugs 0.000 claims 1
- 229960003901 dacarbazine Drugs 0.000 claims 1
- 229960000640 dactinomycin Drugs 0.000 claims 1
- 229960000860 dapsone Drugs 0.000 claims 1
- 229960000975 daunorubicin Drugs 0.000 claims 1
- STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N daunorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(C)=O)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N 0.000 claims 1
- CFCUWKMKBJTWLW-UHFFFAOYSA-N deoliosyl-3C-alpha-L-digitoxosyl-MTM Natural products CC=1C(O)=C2C(O)=C3C(=O)C(OC4OC(C)C(O)C(OC5OC(C)C(O)C(OC6OC(C)C(O)C(C)(O)C6)C5)C4)C(C(OC)C(=O)C(O)C(C)O)CC3=CC2=CC=1OC(OC(C)C1O)CC1OC1CC(O)C(O)C(C)O1 CFCUWKMKBJTWLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- XOZIUKBZLSUILX-UHFFFAOYSA-N desoxyepothilone B Natural products O1C(=O)CC(O)C(C)(C)C(=O)C(C)C(O)C(C)CCCC(C)=CCC1C(C)=CC1=CSC(C)=N1 XOZIUKBZLSUILX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 claims 1
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 claims 1
- GMJFVGRUYJHMCO-UHFFFAOYSA-N dibrompropamidine Chemical compound BrC1=CC(C(=N)N)=CC=C1OCCCOC1=CC=C(C(N)=N)C=C1Br GMJFVGRUYJHMCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229960000493 dibrompropamidine Drugs 0.000 claims 1
- RGLYKWWBQGJZGM-ISLYRVAYSA-N diethylstilbestrol Chemical compound C=1C=C(O)C=CC=1C(/CC)=C(\CC)C1=CC=C(O)C=C1 RGLYKWWBQGJZGM-ISLYRVAYSA-N 0.000 claims 1
- 229960000452 diethylstilbestrol Drugs 0.000 claims 1
- 229960003668 docetaxel Drugs 0.000 claims 1
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 claims 1
- 229960001904 epirubicin Drugs 0.000 claims 1
- HESCAJZNRMSMJG-HGYUPSKWSA-N epothilone A Natural products O=C1[C@H](C)[C@H](O)[C@H](C)CCC[C@H]2O[C@H]2C[C@@H](/C(=C\c2nc(C)sc2)/C)OC(=O)C[C@H](O)C1(C)C HESCAJZNRMSMJG-HGYUPSKWSA-N 0.000 claims 1
- QXRSDHAAWVKZLJ-PVYNADRNSA-N epothilone B Chemical compound C/C([C@@H]1C[C@@H]2O[C@]2(C)CCC[C@@H]([C@@H]([C@@H](C)C(=O)C(C)(C)[C@@H](O)CC(=O)O1)O)C)=C\C1=CSC(C)=N1 QXRSDHAAWVKZLJ-PVYNADRNSA-N 0.000 claims 1
- XOZIUKBZLSUILX-GIQCAXHBSA-N epothilone D Chemical compound O1C(=O)C[C@H](O)C(C)(C)C(=O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)CCC\C(C)=C/C[C@H]1C(\C)=C\C1=CSC(C)=N1 XOZIUKBZLSUILX-GIQCAXHBSA-N 0.000 claims 1
- 229960004750 estramustine phosphate Drugs 0.000 claims 1
- ADFOJJHRTBFFOF-RBRWEJTLSA-N estramustine phosphate Chemical compound ClCCN(CCCl)C(=O)OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)OP(O)(O)=O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 ADFOJJHRTBFFOF-RBRWEJTLSA-N 0.000 claims 1
- 229950007048 furalazine Drugs 0.000 claims 1
- RWOLIGKRDWLZSV-OWOJBTEDSA-N furalazine Chemical compound N1=NC(N)=NC=C1\C=C\C1=CC=C([N+]([O-])=O)O1 RWOLIGKRDWLZSV-OWOJBTEDSA-N 0.000 claims 1
- 210000000224 granular leucocyte Anatomy 0.000 claims 1
- 239000012274 immune-checkpoint protein inhibitor Substances 0.000 claims 1
- XMBWDFGMSWQBCA-YPZZEJLDSA-N iodane Chemical compound [125IH] XMBWDFGMSWQBCA-YPZZEJLDSA-N 0.000 claims 1
- 229960003640 mafenide Drugs 0.000 claims 1
- 229960004961 mechlorethamine Drugs 0.000 claims 1
- HAWPXGHAZFHHAD-UHFFFAOYSA-N mechlorethamine Chemical compound ClCCN(C)CCCl HAWPXGHAZFHHAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229960002985 medroxyprogesterone acetate Drugs 0.000 claims 1
- PSGAAPLEWMOORI-PEINSRQWSA-N medroxyprogesterone acetate Chemical compound C([C@@]12C)CC(=O)C=C1[C@@H](C)C[C@@H]1[C@@H]2CC[C@]2(C)[C@@](OC(C)=O)(C(C)=O)CC[C@H]21 PSGAAPLEWMOORI-PEINSRQWSA-N 0.000 claims 1
- 229960000901 mepacrine Drugs 0.000 claims 1
- GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N mercaptopurine Chemical compound S=C1NC=NC2=C1NC=N2 GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229960001428 mercaptopurine Drugs 0.000 claims 1
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 claims 1
- VAOCPAMSLUNLGC-UHFFFAOYSA-N metronidazole Chemical compound CC1=NC=C([N+]([O-])=O)N1CCO VAOCPAMSLUNLGC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229960000282 metronidazole Drugs 0.000 claims 1
- CFCUWKMKBJTWLW-BKHRDMLASA-N mithramycin Chemical compound O([C@@H]1C[C@@H](O[C@H](C)[C@H]1O)OC=1C=C2C=C3C[C@H]([C@@H](C(=O)C3=C(O)C2=C(O)C=1C)O[C@@H]1O[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2O[C@H](C)[C@H](O)[C@H](O[C@@H]3O[C@H](C)[C@@H](O)[C@@](C)(O)C3)C2)C1)[C@H](OC)C(=O)[C@@H](O)[C@@H](C)O)[C@H]1C[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)O1 CFCUWKMKBJTWLW-BKHRDMLASA-N 0.000 claims 1
- 229960004857 mitomycin Drugs 0.000 claims 1
- 229960000350 mitotane Drugs 0.000 claims 1
- 229960001156 mitoxantrone Drugs 0.000 claims 1
- KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N mitoxantrone Chemical compound O=C1C2=C(O)C=CC(O)=C2C(=O)C2=C1C(NCCNCCO)=CC=C2NCCNCCO KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229960000210 nalidixic acid Drugs 0.000 claims 1
- MHWLWQUZZRMNGJ-UHFFFAOYSA-N nalidixic acid Chemical compound C1=C(C)N=C2N(CC)C=C(C(O)=O)C(=O)C2=C1 MHWLWQUZZRMNGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229960002136 nifuratel Drugs 0.000 claims 1
- SRQKTCXJCCHINN-NYYWCZLTSA-N nifuratel Chemical compound O=C1OC(CSC)CN1\N=C\C1=CC=C([N+]([O-])=O)O1 SRQKTCXJCCHINN-NYYWCZLTSA-N 0.000 claims 1
- 229960003888 nifuroxazide Drugs 0.000 claims 1
- YCWSUKQGVSGXJO-NTUHNPAUSA-N nifuroxazide Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C(=O)N\N=C\C1=CC=C([N+]([O-])=O)O1 YCWSUKQGVSGXJO-NTUHNPAUSA-N 0.000 claims 1
- 229960002644 nifurtimox Drugs 0.000 claims 1
- 229960001420 nimustine Drugs 0.000 claims 1
- VFEDRRNHLBGPNN-UHFFFAOYSA-N nimustine Chemical compound CC1=NC=C(CNC(=O)N(CCCl)N=O)C(N)=N1 VFEDRRNHLBGPNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229960000321 oxolinic acid Drugs 0.000 claims 1
- 229960004448 pentamidine Drugs 0.000 claims 1
- XDRYMKDFEDOLFX-UHFFFAOYSA-N pentamidine Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1OCCCCCOC1=CC=C(C(N)=N)C=C1 XDRYMKDFEDOLFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229960002340 pentostatin Drugs 0.000 claims 1
- FPVKHBSQESCIEP-JQCXWYLXSA-N pentostatin Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(N=CNC[C@H]2O)=C2N=C1 FPVKHBSQESCIEP-JQCXWYLXSA-N 0.000 claims 1
- 229960001181 phenazopyridine Drugs 0.000 claims 1
- 229960001106 phthalylsulfathiazole Drugs 0.000 claims 1
- PBMSWVPMRUJMPE-UHFFFAOYSA-N phthalylsulfathiazole Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1C(=O)NC1=CC=C(S(=O)(=O)\N=C\2SC=CN/2)C=C1 PBMSWVPMRUJMPE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229960000952 pipobroman Drugs 0.000 claims 1
- NJBFOOCLYDNZJN-UHFFFAOYSA-N pipobroman Chemical compound BrCCC(=O)N1CCN(C(=O)CCBr)CC1 NJBFOOCLYDNZJN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229960003171 plicamycin Drugs 0.000 claims 1
- 229960004694 prednimustine Drugs 0.000 claims 1
- 229960004618 prednisone Drugs 0.000 claims 1
- XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N prednisone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N 0.000 claims 1
- GBCXKHLKJHRTAB-HKBOAZHASA-N preussin Chemical compound CN1[C@H](CCCCCCCCC)C[C@H](O)[C@@H]1CC1=CC=CC=C1 GBCXKHLKJHRTAB-HKBOAZHASA-N 0.000 claims 1
- GBCXKHLKJHRTAB-UHFFFAOYSA-N preussin Natural products CN1C(CCCCCCCCC)CC(O)C1CC1=CC=CC=C1 GBCXKHLKJHRTAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229960000624 procarbazine Drugs 0.000 claims 1
- CPTBDICYNRMXFX-UHFFFAOYSA-N procarbazine Chemical compound CNNCC1=CC=C(C(=O)NC(C)C)C=C1 CPTBDICYNRMXFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229960000611 pyrimethamine Drugs 0.000 claims 1
- WKSAUQYGYAYLPV-UHFFFAOYSA-N pyrimethamine Chemical compound CCC1=NC(N)=NC(N)=C1C1=CC=C(Cl)C=C1 WKSAUQYGYAYLPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- GPKJTRJOBQGKQK-UHFFFAOYSA-N quinacrine Chemical compound C1=C(OC)C=C2C(NC(C)CCCN(CC)CC)=C(C=CC(Cl)=C3)C3=NC2=C1 GPKJTRJOBQGKQK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229960004432 raltitrexed Drugs 0.000 claims 1
- ZAHRKKWIAAJSAO-UHFFFAOYSA-N rapamycin Natural products COCC(O)C(=C/C(C)C(=O)CC(OC(=O)C1CCCCN1C(=O)C(=O)C2(O)OC(CC(OC)C(=CC=CC=CC(C)CC(C)C(=O)C)C)CCC2C)C(C)CC3CCC(O)C(C3)OC)C ZAHRKKWIAAJSAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229960000371 rofecoxib Drugs 0.000 claims 1
- RZJQGNCSTQAWON-UHFFFAOYSA-N rofecoxib Chemical compound C1=CC(S(=O)(=O)C)=CC=C1C1=C(C=2C=CC=CC=2)C(=O)OC1 RZJQGNCSTQAWON-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229960004586 rosiglitazone Drugs 0.000 claims 1
- 229960003440 semustine Drugs 0.000 claims 1
- 229960002930 sirolimus Drugs 0.000 claims 1
- QFJCIRLUMZQUOT-HPLJOQBZSA-N sirolimus Chemical compound C1C[C@@H](O)[C@H](OC)C[C@@H]1C[C@@H](C)[C@H]1OC(=O)[C@@H]2CCCCN2C(=O)C(=O)[C@](O)(O2)[C@H](C)CC[C@H]2C[C@H](OC)/C(C)=C/C=C/C=C/[C@@H](C)C[C@@H](C)C(=O)[C@H](OC)[C@H](O)/C(C)=C/[C@@H](C)C(=O)C1 QFJCIRLUMZQUOT-HPLJOQBZSA-N 0.000 claims 1
- 229960001052 streptozocin Drugs 0.000 claims 1
- ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N streptozocin Chemical compound O=NN(C)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N 0.000 claims 1
- 229960001940 sulfasalazine Drugs 0.000 claims 1
- NCEXYHBECQHGNR-QZQOTICOSA-N sulfasalazine Chemical compound C1=C(O)C(C(=O)O)=CC(\N=N\C=2C=CC(=CC=2)S(=O)(=O)NC=2N=CC=CC=2)=C1 NCEXYHBECQHGNR-QZQOTICOSA-N 0.000 claims 1
- 229960001544 sulfathiazole Drugs 0.000 claims 1
- JNMRHUJNCSQMMB-UHFFFAOYSA-N sulfathiazole Chemical compound C1=CC(N)=CC=C1S(=O)(=O)NC1=NC=CS1 JNMRHUJNCSQMMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229960003356 sulfatolamide Drugs 0.000 claims 1
- 229960002066 vinorelbine Drugs 0.000 claims 1
- GBABOYUKABKIAF-GHYRFKGUSA-N vinorelbine Chemical compound C1N(CC=2C3=CC=CC=C3NC=22)CC(CC)=C[C@H]1C[C@]2(C(=O)OC)C1=CC([C@]23[C@H]([C@]([C@H](OC(C)=O)[C@]4(CC)C=CCN([C@H]34)CC2)(O)C(=O)OC)N2C)=C2C=C1OC GBABOYUKABKIAF-GHYRFKGUSA-N 0.000 claims 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 abstract description 2
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 abstract 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 283
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 283
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 283
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 46
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 33
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 28
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 24
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 24
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 23
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 23
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 22
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 20
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 19
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 19
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 description 18
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 17
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- INGWEZCOABYORO-UHFFFAOYSA-N 2-(furan-2-yl)-7-methyl-1h-1,8-naphthyridin-4-one Chemical compound N=1C2=NC(C)=CC=C2C(O)=CC=1C1=CC=CO1 INGWEZCOABYORO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 15
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 15
- 102000002070 Transferrins Human genes 0.000 description 14
- 108010015865 Transferrins Proteins 0.000 description 14
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 14
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 13
- 210000001503 joint Anatomy 0.000 description 13
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 12
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 12
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 12
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 12
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 11
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 11
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 11
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 11
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 11
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 11
- 150000003278 haem Chemical class 0.000 description 10
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 10
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 10
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 9
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 9
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 9
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 208000003788 Neoplasm Micrometastasis Diseases 0.000 description 8
- 108010003723 Single-Domain Antibodies Proteins 0.000 description 8
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 8
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 7
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 7
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 7
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 7
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 7
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 7
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 7
- XNSAINXGIQZQOO-SRVKXCTJSA-N protirelin Chemical compound NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)CC1=CN=CN1 XNSAINXGIQZQOO-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 7
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 7
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 101000973177 Homo sapiens Nuclear factor interleukin-3-regulated protein Proteins 0.000 description 6
- 101000766306 Homo sapiens Serotransferrin Proteins 0.000 description 6
- 102100022163 Nuclear factor interleukin-3-regulated protein Human genes 0.000 description 6
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 6
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 6
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 description 6
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 6
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 6
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 6
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 6
- 238000002600 positron emission tomography Methods 0.000 description 6
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 6
- 230000010415 tropism Effects 0.000 description 6
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 5
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 5
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 102100034256 Mucin-1 Human genes 0.000 description 5
- IEDXPSOJFSVCKU-HOKPPMCLSA-N [4-[[(2S)-5-(carbamoylamino)-2-[[(2S)-2-[6-(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl)hexanoylamino]-3-methylbutanoyl]amino]pentanoyl]amino]phenyl]methyl N-[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(3R,4S,5S)-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-3-[[(1S,2R)-1-hydroxy-1-phenylpropan-2-yl]amino]-1-methoxy-2-methyl-3-oxopropyl]pyrrolidin-1-yl]-3-methoxy-5-methyl-1-oxoheptan-4-yl]-methylamino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]-N-methylcarbamate Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H]([C@@H](CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)c1ccccc1)OC)N(C)C(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)OCc1ccc(NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CCCCCN2C(=O)CCC2=O)C(C)C)cc1)C(C)C IEDXPSOJFSVCKU-HOKPPMCLSA-N 0.000 description 5
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 5
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 5
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 5
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 5
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 5
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 5
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 5
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 description 5
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 5
- 108010093470 monomethyl auristatin E Proteins 0.000 description 5
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 5
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 5
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 5
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 5
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 description 5
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 5
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 5
- 229920002477 rna polymer Polymers 0.000 description 5
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 5
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 5
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 5
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 5
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 4
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 4
- 102100021943 C-C motif chemokine 2 Human genes 0.000 description 4
- 241000282465 Canis Species 0.000 description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 4
- 101000897480 Homo sapiens C-C motif chemokine 2 Proteins 0.000 description 4
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 4
- 102100022430 Melanocyte protein PMEL Human genes 0.000 description 4
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 4
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 4
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 4
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 4
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 4
- JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N hydrocortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 4
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 4
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 4
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 4
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 4
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 4
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 4
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 4
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 4
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 239000012460 protein solution Substances 0.000 description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 4
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 4
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102100027211 Albumin Human genes 0.000 description 3
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 3
- 102000006306 Antigen Receptors Human genes 0.000 description 3
- 108010083359 Antigen Receptors Proteins 0.000 description 3
- 102100021723 Arginase-1 Human genes 0.000 description 3
- 101710129000 Arginase-1 Proteins 0.000 description 3
- 102100039510 Cancer/testis antigen 2 Human genes 0.000 description 3
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 3
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 3
- 102000001301 EGF receptor Human genes 0.000 description 3
- 108091008794 FGF receptors Proteins 0.000 description 3
- 102000044168 Fibroblast Growth Factor Receptor Human genes 0.000 description 3
- 102100037362 Fibronectin Human genes 0.000 description 3
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 description 3
- 101000889345 Homo sapiens Cancer/testis antigen 2 Proteins 0.000 description 3
- 108090000144 Human Proteins Proteins 0.000 description 3
- 102000003839 Human Proteins Human genes 0.000 description 3
- 241000701044 Human gammaherpesvirus 4 Species 0.000 description 3
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 3
- 102100032241 Lactotransferrin Human genes 0.000 description 3
- PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N Maleimide Chemical compound O=C1NC(=O)C=C1 PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102100028389 Melanoma antigen recognized by T-cells 1 Human genes 0.000 description 3
- 108010008707 Mucin-1 Proteins 0.000 description 3
- 206010028851 Necrosis Diseases 0.000 description 3
- 101710160107 Outer membrane protein A Proteins 0.000 description 3
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 3
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 3
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 3
- 102000004584 Somatomedin Receptors Human genes 0.000 description 3
- 108010017622 Somatomedin Receptors Proteins 0.000 description 3
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 3
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 3
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000004900 autophagic degradation Effects 0.000 description 3
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 3
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 3
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000002591 computed tomography Methods 0.000 description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 3
- KZNICNPSHKQLFF-UHFFFAOYSA-N dihydromaleimide Natural products O=C1CCC(=O)N1 KZNICNPSHKQLFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 3
- 102000052116 epidermal growth factor receptor activity proteins Human genes 0.000 description 3
- 108700015053 epidermal growth factor receptor activity proteins Proteins 0.000 description 3
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 3
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 3
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 3
- 102000055647 human CSF2RB Human genes 0.000 description 3
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 3
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 3
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 3
- 238000002595 magnetic resonance imaging Methods 0.000 description 3
- 239000002679 microRNA Substances 0.000 description 3
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 3
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 3
- YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N n-[3-[[6-[3-(trifluoromethyl)anilino]pyrimidin-4-yl]amino]phenyl]cyclopropanecarboxamide Chemical compound FC(F)(F)C1=CC=CC(NC=2N=CN=C(NC=3C=C(NC(=O)C4CC4)C=CC=3)C=2)=C1 YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 3
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 3
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 3
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 3
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 3
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 3
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 3
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 3
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 3
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 2
- VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 1-monostearoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VSNHCAURESNICA-NJFSPNSNSA-N 1-oxidanylurea Chemical compound N[14C](=O)NO VSNHCAURESNICA-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 2
- 102100030310 5,6-dihydroxyindole-2-carboxylic acid oxidase Human genes 0.000 description 2
- 101710163881 5,6-dihydroxyindole-2-carboxylic acid oxidase Proteins 0.000 description 2
- IYLLULUTZPKQBW-UHFFFAOYSA-N Acrinol Chemical compound CC(O)C(O)=O.C1=C(N)C=CC2=C(N)C3=CC(OCC)=CC=C3N=C21 IYLLULUTZPKQBW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HJCMDXDYPOUFDY-WHFBIAKZSA-N Ala-Gln Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O HJCMDXDYPOUFDY-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- IKYJCHYORFJFRR-UHFFFAOYSA-N Alexa Fluor 350 Chemical compound O=C1OC=2C=C(N)C(S(O)(=O)=O)=CC=2C(C)=C1CC(=O)ON1C(=O)CCC1=O IKYJCHYORFJFRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100037982 Alpha-1,6-mannosylglycoprotein 6-beta-N-acetylglucosaminyltransferase A Human genes 0.000 description 2
- 108010002084 Apoferritins Proteins 0.000 description 2
- 102000000546 Apoferritins Human genes 0.000 description 2
- 108010083590 Apoproteins Proteins 0.000 description 2
- 102000006410 Apoproteins Human genes 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 2
- 102100021663 Baculoviral IAP repeat-containing protein 5 Human genes 0.000 description 2
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 2
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 2
- 108010040471 CC Chemokines Proteins 0.000 description 2
- 102000001902 CC Chemokines Human genes 0.000 description 2
- 108091007914 CDKs Proteins 0.000 description 2
- 108090000835 CX3C Chemokine Receptor 1 Proteins 0.000 description 2
- 102100039196 CX3C chemokine receptor 1 Human genes 0.000 description 2
- 102100033620 Calponin-1 Human genes 0.000 description 2
- 102100025570 Cancer/testis antigen 1 Human genes 0.000 description 2
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 2
- 102100038916 Caspase-5 Human genes 0.000 description 2
- 101710090333 Caspase-5 Proteins 0.000 description 2
- 102100026548 Caspase-8 Human genes 0.000 description 2
- 108090000538 Caspase-8 Proteins 0.000 description 2
- 102100028914 Catenin beta-1 Human genes 0.000 description 2
- 102100025064 Cellular tumor antigen p53 Human genes 0.000 description 2
- 102100023509 Chloride channel protein 2 Human genes 0.000 description 2
- 102100039498 Cytotoxic T-lymphocyte protein 4 Human genes 0.000 description 2
- 108010043648 Discoidin Domain Receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000002706 Discoidin Domain Receptors Human genes 0.000 description 2
- 101150029707 ERBB2 gene Proteins 0.000 description 2
- 102100031334 Elongation factor 2 Human genes 0.000 description 2
- 108010066687 Epithelial Cell Adhesion Molecule Proteins 0.000 description 2
- 102100031940 Epithelial cell adhesion molecule Human genes 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101710099785 Ferritin, heavy subunit Proteins 0.000 description 2
- 101710113436 GTPase KRas Proteins 0.000 description 2
- 102100039788 GTPase NRas Human genes 0.000 description 2
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 2
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 2
- 108010074032 HLA-A2 Antigen Proteins 0.000 description 2
- 102100034629 Hemopexin Human genes 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 101000945318 Homo sapiens Calponin-1 Proteins 0.000 description 2
- 101000856237 Homo sapiens Cancer/testis antigen 1 Proteins 0.000 description 2
- 101000906633 Homo sapiens Chloride channel protein 2 Proteins 0.000 description 2
- 101000744505 Homo sapiens GTPase NRas Proteins 0.000 description 2
- 101001133056 Homo sapiens Mucin-1 Proteins 0.000 description 2
- 101000692455 Homo sapiens Platelet-derived growth factor receptor beta Proteins 0.000 description 2
- 101000655352 Homo sapiens Telomerase reverse transcriptase Proteins 0.000 description 2
- 101000652736 Homo sapiens Transgelin Proteins 0.000 description 2
- 241000701806 Human papillomavirus Species 0.000 description 2
- 102000007482 Interleukin-13 Receptor alpha2 Subunit Human genes 0.000 description 2
- 108010085418 Interleukin-13 Receptor alpha2 Subunit Proteins 0.000 description 2
- 102000003810 Interleukin-18 Human genes 0.000 description 2
- 108090000171 Interleukin-18 Proteins 0.000 description 2
- 102000019298 Lipocalin Human genes 0.000 description 2
- 108050006654 Lipocalin Proteins 0.000 description 2
- 101001022947 Lithobates catesbeianus Ferritin, lower subunit Proteins 0.000 description 2
- 239000006137 Luria-Bertani broth Substances 0.000 description 2
- 108010010995 MART-1 Antigen Proteins 0.000 description 2
- 108090000143 Mouse Proteins Proteins 0.000 description 2
- 238000012879 PET imaging Methods 0.000 description 2
- 108010016731 PPAR gamma Proteins 0.000 description 2
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 description 2
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- 108010077519 Peptide Elongation Factor 2 Proteins 0.000 description 2
- 102100040283 Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase B Human genes 0.000 description 2
- 102100038825 Peroxisome proliferator-activated receptor gamma Human genes 0.000 description 2
- 102100026547 Platelet-derived growth factor receptor beta Human genes 0.000 description 2
- 108010072866 Prostate-Specific Antigen Proteins 0.000 description 2
- 102100038358 Prostate-specific antigen Human genes 0.000 description 2
- 102100035703 Prostatic acid phosphatase Human genes 0.000 description 2
- 101710100969 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-3 Proteins 0.000 description 2
- 101710100963 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-4 Proteins 0.000 description 2
- 101710173693 Short transient receptor potential channel 1 Proteins 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 108010002687 Survivin Proteins 0.000 description 2
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 description 2
- NKANXQFJJICGDU-QPLCGJKRSA-N Tamoxifen Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(/CC)=C(C=1C=CC(OCCN(C)C)=CC=1)/C1=CC=CC=C1 NKANXQFJJICGDU-QPLCGJKRSA-N 0.000 description 2
- 102400001320 Transforming growth factor alpha Human genes 0.000 description 2
- 101800004564 Transforming growth factor alpha Proteins 0.000 description 2
- LVTKHGUGBGNBPL-UHFFFAOYSA-N Trp-P-1 Chemical compound N1C2=CC=CC=C2C2=C1C(C)=C(N)N=C2C LVTKHGUGBGNBPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940122429 Tubulin inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 102000003425 Tyrosinase Human genes 0.000 description 2
- 108060008724 Tyrosinase Proteins 0.000 description 2
- 108091008605 VEGF receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000009484 Vascular Endothelial Growth Factor Receptors Human genes 0.000 description 2
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 2
- 102000013529 alpha-Fetoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108010026331 alpha-Fetoproteins Proteins 0.000 description 2
- 150000001412 amines Chemical group 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 102000001307 androgen receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010080146 androgen receptors Proteins 0.000 description 2
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 230000002917 arthritic effect Effects 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 2
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 210000004979 bone marrow derived macrophage Anatomy 0.000 description 2
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 2
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 150000004775 coumarins Chemical class 0.000 description 2
- 108010048032 cyclophilin B Proteins 0.000 description 2
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 2
- 238000004163 cytometry Methods 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 2
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 2
- 229940124447 delivery agent Drugs 0.000 description 2
- 229960003957 dexamethasone Drugs 0.000 description 2
- UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N dexamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N 0.000 description 2
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 2
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 102000015694 estrogen receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010038795 estrogen receptors Proteins 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 2
- 239000003269 fluorescent indicator Substances 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 2
- 229920001519 homopolymer Polymers 0.000 description 2
- 229960000890 hydrocortisone Drugs 0.000 description 2
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 2
- 230000006054 immunological memory Effects 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 102000028416 insulin-like growth factor binding Human genes 0.000 description 2
- 108091022911 insulin-like growth factor binding Proteins 0.000 description 2
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 2
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 2
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 2
- 208000018937 joint inflammation Diseases 0.000 description 2
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 2
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 2
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 2
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 2
- 208000037819 metastatic cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000011575 metastatic malignant neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 108091070501 miRNA Proteins 0.000 description 2
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 2
- 238000001565 modulated differential scanning calorimetry Methods 0.000 description 2
- 238000002887 multiple sequence alignment Methods 0.000 description 2
- 125000001446 muramyl group Chemical group N[C@@H](C=O)[C@@H](O[C@@H](C(=O)*)C)[C@H](O)[C@H](O)CO 0.000 description 2
- 210000000066 myeloid cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000004985 myeloid-derived suppressor cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000004897 n-terminal region Anatomy 0.000 description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 description 2
- NFHFRUOZVGFOOS-UHFFFAOYSA-N palladium;triphenylphosphane Chemical compound [Pd].C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 NFHFRUOZVGFOOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 2
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 2
- 108010044156 peptidyl-prolyl cis-trans isomerase b Proteins 0.000 description 2
- 210000002824 peroxisome Anatomy 0.000 description 2
- 150000004032 porphyrins Chemical class 0.000 description 2
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 108010043671 prostatic acid phosphatase Proteins 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 2
- 230000027756 respiratory electron transport chain Effects 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 235000002020 sage Nutrition 0.000 description 2
- 238000002864 sequence alignment Methods 0.000 description 2
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 2
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 2
- 229960002317 succinimide Drugs 0.000 description 2
- JJAHTWIKCUJRDK-UHFFFAOYSA-N succinimidyl 4-(N-maleimidomethyl)cyclohexane-1-carboxylate Chemical compound C1CC(CN2C(C=CC2=O)=O)CCC1C(=O)ON1C(=O)CCC1=O JJAHTWIKCUJRDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 2
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 2
- 229940124676 vascular endothelial growth factor receptor Drugs 0.000 description 2
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WOWDZACBATWTAU-FEFUEGSOSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-(dimethylamino)-3-methylbutanoyl]amino]-n-[(3r,4s,5s)-1-[(2s)-2-[(1r,2r)-3-[[(1s,2r)-1-hydroxy-1-phenylpropan-2-yl]amino]-1-methoxy-2-methyl-3-oxopropyl]pyrrolidin-1-yl]-3-methoxy-5-methyl-1-oxoheptan-4-yl]-n,3-dimethylbutanamide Chemical class CC(C)[C@H](N(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N(C)[C@@H]([C@@H](C)CC)[C@H](OC)CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)C1=CC=CC=C1 WOWDZACBATWTAU-FEFUEGSOSA-N 0.000 description 1
- MHJJUOJOAJLYBS-ZBRNBAAYSA-N (2s)-2-aminopropanoic acid;(2s)-pyrrolidine-2-carboxylic acid Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O.OC(=O)[C@@H]1CCCN1 MHJJUOJOAJLYBS-ZBRNBAAYSA-N 0.000 description 1
- NMWKYTGJWUAZPZ-WWHBDHEGSA-N (4S)-4-[[(4R,7S,10S,16S,19S,25S,28S,31R)-31-[[(2S)-2-[[(1R,6R,9S,12S,18S,21S,24S,27S,30S,33S,36S,39S,42R,47R,53S,56S,59S,62S,65S,68S,71S,76S,79S,85S)-47-[[(2S)-2-[[(2S)-4-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-3-methylbutanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-4-yl)propanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]-18-(4-aminobutyl)-27,68-bis(3-amino-3-oxopropyl)-36,71,76-tribenzyl-39-(3-carbamimidamidopropyl)-24-(2-carboxyethyl)-21,56-bis(carboxymethyl)-65,85-bis[(1R)-1-hydroxyethyl]-59-(hydroxymethyl)-62,79-bis(1H-imidazol-4-ylmethyl)-9-methyl-33-(2-methylpropyl)-8,11,17,20,23,26,29,32,35,38,41,48,54,57,60,63,66,69,72,74,77,80,83,86-tetracosaoxo-30-propan-2-yl-3,4,44,45-tetrathia-7,10,16,19,22,25,28,31,34,37,40,49,55,58,61,64,67,70,73,75,78,81,84,87-tetracosazatetracyclo[40.31.14.012,16.049,53]heptaoctacontane-6-carbonyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-7-(3-carbamimidamidopropyl)-25-(hydroxymethyl)-19-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-28-(1H-imidazol-4-ylmethyl)-10-methyl-6,9,12,15,18,21,24,27,30-nonaoxo-16-propan-2-yl-1,2-dithia-5,8,11,14,17,20,23,26,29-nonazacyclodotriacontane-4-carbonyl]amino]-5-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-3-carboxy-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(1S)-1-carboxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-(1H-imidazol-4-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound CC(C)C[C@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](Cc1c[nH]cn1)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CSSC[C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H]2CSSC[C@@H]3NC(=O)[C@H](Cc4ccccc4)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](Cc4c[nH]cn4)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H]4CCCN4C(=O)[C@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](Cc4c[nH]cn4)NC(=O)[C@H](Cc4ccccc4)NC3=O)[C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](Cc3ccccc3)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N3CCC[C@H]3C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N2)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](Cc2ccccc2)NC(=O)[C@H](Cc2c[nH]cn2)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)C(C)C)C(C)C)[C@@H](C)O)C(C)C)C(=O)N[C@@H](Cc2c[nH]cn2)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](Cc2ccc(O)cc2)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O NMWKYTGJWUAZPZ-WWHBDHEGSA-N 0.000 description 1
- SSOORFWOBGFTHL-OTEJMHTDSA-N (4S)-5-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[2-[(2S)-2-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S,3S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-5-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-5-amino-1-[[(2S)-5-carbamimidamido-1-[[(2S)-5-carbamimidamido-1-[[(1S)-4-carbamimidamido-1-carboxybutyl]amino]-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxopentan-2-yl]amino]-1,5-dioxopentan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1,5-dioxopentan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]carbamoyl]pyrrolidin-1-yl]-2-oxoethyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-3-(1H-imidazol-4-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2,6-diaminohexanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]propanoyl]amino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)CNC(=O)[C@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](Cc1ccccc1)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](Cc1ccccc1)NC(=O)[C@H](Cc1c[nH]cn1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CCCCN)C(C)C)C(C)C)C(C)C)C(C)C)C(C)C)C(C)C)C(=O)N[C@@H](Cc1ccccc1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O SSOORFWOBGFTHL-OTEJMHTDSA-N 0.000 description 1
- YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N (6E,10E,14E,18E)-2,6,10,15,19,23-hexamethyltetracosa-2,6,10,14,18,22-hexaene Chemical compound CC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CWUAAQVTCQLNTH-UHFFFAOYSA-N 1-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C(C)N1CCN(CCO)CC1 CWUAAQVTCQLNTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCXUVYAZINUVJD-AHXZWLDOSA-N 2-deoxy-2-((18)F)fluoro-alpha-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H]([18F])[C@@H](O)[C@@H]1O ZCXUVYAZINUVJD-AHXZWLDOSA-N 0.000 description 1
- DVLFYONBTKHTER-UHFFFAOYSA-N 3-(N-morpholino)propanesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)CCCN1CCOCC1 DVLFYONBTKHTER-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LKKMLIBUAXYLOY-UHFFFAOYSA-N 3-Amino-1-methyl-5H-pyrido[4,3-b]indole Chemical compound N1C2=CC=CC=C2C2=C1C=C(N)N=C2C LKKMLIBUAXYLOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WEVYNIUIFUYDGI-UHFFFAOYSA-N 3-[6-[4-(trifluoromethoxy)anilino]-4-pyrimidinyl]benzamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CC(C=2N=CN=C(NC=3C=CC(OC(F)(F)F)=CC=3)C=2)=C1 WEVYNIUIFUYDGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- INZOTETZQBPBCE-NYLDSJSYSA-N 3-sialyl lewis Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@H]([C@H](O)CO)[C@@H]([C@@H](NC(C)=O)C=O)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@]2(O[C@H]([C@H](NC(C)=O)[C@@H](O)C2)[C@H](O)[C@H](O)CO)C(O)=O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 INZOTETZQBPBCE-NYLDSJSYSA-N 0.000 description 1
- RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N Acetaminophen Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(O)C=C1 RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- 102100021305 Acyl-CoA:lysophosphatidylglycerol acyltransferase 1 Human genes 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 102100034594 Angiopoietin-1 Human genes 0.000 description 1
- 108010048154 Angiopoietin-1 Proteins 0.000 description 1
- 108010049777 Ankyrins Proteins 0.000 description 1
- 102000008102 Ankyrins Human genes 0.000 description 1
- 101100067974 Arabidopsis thaliana POP2 gene Proteins 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 108010014223 Armadillo Domain Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108050008792 Atypical chemokine receptor 3 Proteins 0.000 description 1
- 102100035526 B melanoma antigen 1 Human genes 0.000 description 1
- 108700004676 Bence Jones Proteins 0.000 description 1
- 102000015735 Beta-catenin Human genes 0.000 description 1
- 108060000903 Beta-catenin Proteins 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000009010 Bradford assay Methods 0.000 description 1
- 102100029894 Bromodomain testis-specific protein Human genes 0.000 description 1
- 108090000342 C-Type Lectins Proteins 0.000 description 1
- 102000003930 C-Type Lectins Human genes 0.000 description 1
- 101150013553 CD40 gene Proteins 0.000 description 1
- 108010021064 CTLA-4 Antigen Proteins 0.000 description 1
- 229940045513 CTLA4 antagonist Drugs 0.000 description 1
- 102000055006 Calcitonin Human genes 0.000 description 1
- 102100038518 Calcitonin Human genes 0.000 description 1
- 108060001064 Calcitonin Proteins 0.000 description 1
- 108090000932 Calcitonin Gene-Related Peptide Proteins 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical class [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 101710167800 Capsid assembly scaffolding protein Proteins 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 1
- 102000013392 Carboxylesterase Human genes 0.000 description 1
- 108010051152 Carboxylesterase Proteins 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 102000004225 Cathepsin B Human genes 0.000 description 1
- 108090000712 Cathepsin B Proteins 0.000 description 1
- 102000005600 Cathepsins Human genes 0.000 description 1
- 108010084457 Cathepsins Proteins 0.000 description 1
- 102000005483 Cell Cycle Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010031896 Cell Cycle Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000000844 Cell Surface Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010001857 Cell Surface Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100023441 Centromere protein J Human genes 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 101710181340 Chaperone protein DnaK2 Proteins 0.000 description 1
- 102000011022 Chorionic Gonadotropin Human genes 0.000 description 1
- 108010062540 Chorionic Gonadotropin Proteins 0.000 description 1
- 241000157855 Cinchona Species 0.000 description 1
- 235000001258 Cinchona calisaya Nutrition 0.000 description 1
- 102000050083 Class E Scavenger Receptors Human genes 0.000 description 1
- 102000011591 Cleavage And Polyadenylation Specificity Factor Human genes 0.000 description 1
- 108010076130 Cleavage And Polyadenylation Specificity Factor Proteins 0.000 description 1
- 108010078015 Complement C3b Proteins 0.000 description 1
- 108010043471 Core Binding Factor Alpha 2 Subunit Proteins 0.000 description 1
- 108010058546 Cyclin D1 Proteins 0.000 description 1
- 108010009392 Cyclin-Dependent Kinase Inhibitor p16 Proteins 0.000 description 1
- 108090000266 Cyclin-dependent kinases Proteins 0.000 description 1
- 102000003903 Cyclin-dependent kinases Human genes 0.000 description 1
- 102000015833 Cystatin Human genes 0.000 description 1
- 102000005927 Cysteine Proteases Human genes 0.000 description 1
- 108010005843 Cysteine Proteases Proteins 0.000 description 1
- 102100027350 Cysteine-rich secretory protein 2 Human genes 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N D-ribofuranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 1
- 230000000970 DNA cross-linking effect Effects 0.000 description 1
- 102000052510 DNA-Binding Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108700020911 DNA-Binding Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000289632 Dasypodidae Species 0.000 description 1
- 108010049207 Death Domain Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000009058 Death Domain Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010053770 Deoxyribonucleases Proteins 0.000 description 1
- 102000016911 Deoxyribonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108700022150 Designed Ankyrin Repeat Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- 208000030453 Drug-Related Side Effects and Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 108050002772 E3 ubiquitin-protein ligase Mdm2 Proteins 0.000 description 1
- 102000012199 E3 ubiquitin-protein ligase Mdm2 Human genes 0.000 description 1
- 102100026245 E3 ubiquitin-protein ligase RNF43 Human genes 0.000 description 1
- 102100037238 E3 ubiquitin-protein ligase UBR4 Human genes 0.000 description 1
- 108060006698 EGF receptor Proteins 0.000 description 1
- 102100025137 Early activation antigen CD69 Human genes 0.000 description 1
- 101150039808 Egfr gene Proteins 0.000 description 1
- 108010055191 EphA3 Receptor Proteins 0.000 description 1
- 102100030324 Ephrin type-A receptor 3 Human genes 0.000 description 1
- 241001198387 Escherichia coli BL21(DE3) Species 0.000 description 1
- 101150092822 FGF5 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100038652 Ferritin heavy polypeptide-like 17 Human genes 0.000 description 1
- 102100021062 Ferritin light chain Human genes 0.000 description 1
- 108010069446 Fertilins Proteins 0.000 description 1
- 102000001133 Fertilins Human genes 0.000 description 1
- 102000003967 Fibroblast growth factor 5 Human genes 0.000 description 1
- 108090000380 Fibroblast growth factor 5 Proteins 0.000 description 1
- 108090000382 Fibroblast growth factor 6 Proteins 0.000 description 1
- 102100028075 Fibroblast growth factor 6 Human genes 0.000 description 1
- 102100020714 Fragile X mental retardation 1 neighbor protein Human genes 0.000 description 1
- 102100024165 G1/S-specific cyclin-D1 Human genes 0.000 description 1
- LQEBEXMHBLQMDB-UHFFFAOYSA-N GDP-L-fucose Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC1C(O)C(O)C(N2C3=C(C(N=C(N)N3)=O)N=C2)O1 LQEBEXMHBLQMDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LQEBEXMHBLQMDB-JGQUBWHWSA-N GDP-beta-L-fucose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](C)O[C@@H]1OP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)O1 LQEBEXMHBLQMDB-JGQUBWHWSA-N 0.000 description 1
- 102100024405 GPI-linked NAD(P)(+)-arginine ADP-ribosyltransferase 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710144640 GPI-linked NAD(P)(+)-arginine ADP-ribosyltransferase 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100029974 GTPase HRas Human genes 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 102100041003 Glutamate carboxypeptidase 2 Human genes 0.000 description 1
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 108091008603 HGF receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000027430 HGF receptors Human genes 0.000 description 1
- 102100028972 HLA class I histocompatibility antigen, A alpha chain Human genes 0.000 description 1
- 108010075704 HLA-A Antigens Proteins 0.000 description 1
- 108010036972 HLA-A11 Antigen Proteins 0.000 description 1
- 102000025850 HLA-A2 Antigen Human genes 0.000 description 1
- 102000014702 Haptoglobin Human genes 0.000 description 1
- 108050005077 Haptoglobin Proteins 0.000 description 1
- 101710178419 Heat shock protein 70 2 Proteins 0.000 description 1
- 206010061201 Helminthic infection Diseases 0.000 description 1
- 102100027685 Hemoglobin subunit alpha Human genes 0.000 description 1
- 108091005902 Hemoglobin subunit alpha Proteins 0.000 description 1
- 102100021519 Hemoglobin subunit beta Human genes 0.000 description 1
- 108091005904 Hemoglobin subunit beta Proteins 0.000 description 1
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 description 1
- 102100035108 High affinity nerve growth factor receptor Human genes 0.000 description 1
- 101001042227 Homo sapiens Acyl-CoA:lysophosphatidylglycerol acyltransferase 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000951392 Homo sapiens Alpha-1,6-mannosylglycoprotein 6-beta-N-acetylglucosaminyltransferase A Proteins 0.000 description 1
- 101000874316 Homo sapiens B melanoma antigen 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000794028 Homo sapiens Bromodomain testis-specific protein Proteins 0.000 description 1
- 101000916173 Homo sapiens Catenin beta-1 Proteins 0.000 description 1
- 101000721661 Homo sapiens Cellular tumor antigen p53 Proteins 0.000 description 1
- 101000907924 Homo sapiens Centromere protein J Proteins 0.000 description 1
- 101000726255 Homo sapiens Cysteine-rich secretory protein 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000889276 Homo sapiens Cytotoxic T-lymphocyte protein 4 Proteins 0.000 description 1
- 101000692702 Homo sapiens E3 ubiquitin-protein ligase RNF43 Proteins 0.000 description 1
- 101000807547 Homo sapiens E3 ubiquitin-protein ligase UBR4 Proteins 0.000 description 1
- 101100118549 Homo sapiens EGFR gene Proteins 0.000 description 1
- 101000934374 Homo sapiens Early activation antigen CD69 Proteins 0.000 description 1
- 101000851181 Homo sapiens Epidermal growth factor receptor Proteins 0.000 description 1
- 101001031604 Homo sapiens Ferritin heavy polypeptide-like 17 Proteins 0.000 description 1
- 101000818390 Homo sapiens Ferritin light chain Proteins 0.000 description 1
- 101000932499 Homo sapiens Fragile X mental retardation 1 neighbor protein Proteins 0.000 description 1
- 101000584633 Homo sapiens GTPase HRas Proteins 0.000 description 1
- 101000942158 Homo sapiens Gamma-crystallin B Proteins 0.000 description 1
- 101000892862 Homo sapiens Glutamate carboxypeptidase 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000899111 Homo sapiens Hemoglobin subunit beta Proteins 0.000 description 1
- 101000596894 Homo sapiens High affinity nerve growth factor receptor Proteins 0.000 description 1
- 101001057504 Homo sapiens Interferon-stimulated gene 20 kDa protein Proteins 0.000 description 1
- 101001055144 Homo sapiens Interleukin-2 receptor subunit alpha Proteins 0.000 description 1
- 101000614481 Homo sapiens Kidney-associated antigen 1 Proteins 0.000 description 1
- 101001130171 Homo sapiens L-lactate dehydrogenase C chain Proteins 0.000 description 1
- 101001054842 Homo sapiens Leucine zipper protein 4 Proteins 0.000 description 1
- 101001051093 Homo sapiens Low-density lipoprotein receptor Proteins 0.000 description 1
- 101001014223 Homo sapiens MAPK/MAK/MRK overlapping kinase Proteins 0.000 description 1
- 101001028659 Homo sapiens MORC family CW-type zinc finger protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000825217 Homo sapiens Meiotic recombination protein SPO11 Proteins 0.000 description 1
- 101000620359 Homo sapiens Melanocyte protein PMEL Proteins 0.000 description 1
- 101000578784 Homo sapiens Melanoma antigen recognized by T-cells 1 Proteins 0.000 description 1
- 101001036689 Homo sapiens Melanoma-associated antigen B5 Proteins 0.000 description 1
- 101001036675 Homo sapiens Melanoma-associated antigen B6 Proteins 0.000 description 1
- 101001036406 Homo sapiens Melanoma-associated antigen C1 Proteins 0.000 description 1
- 101001057156 Homo sapiens Melanoma-associated antigen C2 Proteins 0.000 description 1
- 101000628547 Homo sapiens Metalloreductase STEAP1 Proteins 0.000 description 1
- 101000623901 Homo sapiens Mucin-16 Proteins 0.000 description 1
- 101000597425 Homo sapiens Nuclear RNA export factor 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000588345 Homo sapiens Nuclear transcription factor Y subunit gamma Proteins 0.000 description 1
- 101001114051 Homo sapiens P antigen family member 5 Proteins 0.000 description 1
- 101000619805 Homo sapiens Peroxiredoxin-5, mitochondrial Proteins 0.000 description 1
- 101000610208 Homo sapiens Poly(A) polymerase gamma Proteins 0.000 description 1
- 101000874141 Homo sapiens Probable ATP-dependent RNA helicase DDX43 Proteins 0.000 description 1
- 101001136981 Homo sapiens Proteasome subunit beta type-9 Proteins 0.000 description 1
- 101001130763 Homo sapiens Protein OS-9 Proteins 0.000 description 1
- 101000842302 Homo sapiens Protein-cysteine N-palmitoyltransferase HHAT Proteins 0.000 description 1
- 101000679365 Homo sapiens Putative tyrosine-protein phosphatase TPTE Proteins 0.000 description 1
- 101001012157 Homo sapiens Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Proteins 0.000 description 1
- 101000591201 Homo sapiens Receptor-type tyrosine-protein phosphatase kappa Proteins 0.000 description 1
- 101001073409 Homo sapiens Retrotransposon-derived protein PEG10 Proteins 0.000 description 1
- 101000693082 Homo sapiens Serine/threonine-protein kinase 11-interacting protein Proteins 0.000 description 1
- 101000665150 Homo sapiens Small nuclear ribonucleoprotein Sm D1 Proteins 0.000 description 1
- 101000665250 Homo sapiens Small nuclear ribonucleoprotein Sm D2 Proteins 0.000 description 1
- 101000825253 Homo sapiens Sperm protein associated with the nucleus on the X chromosome A Proteins 0.000 description 1
- 101000643620 Homo sapiens Synaptonemal complex protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000596845 Homo sapiens Testis-expressed protein 15 Proteins 0.000 description 1
- 101000666379 Homo sapiens Transcription factor Dp family member 3 Proteins 0.000 description 1
- 101000664703 Homo sapiens Transcription factor SOX-10 Proteins 0.000 description 1
- 101000904724 Homo sapiens Transmembrane glycoprotein NMB Proteins 0.000 description 1
- 101000889756 Homo sapiens Tudor domain-containing protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000851376 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8 Proteins 0.000 description 1
- 108010048209 Human Immunodeficiency Virus Proteins Proteins 0.000 description 1
- DOMWKUIIPQCAJU-LJHIYBGHSA-N Hydroxyprogesterone caproate Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@@](C(C)=O)(OC(=O)CCCCC)[C@@]1(C)CC2 DOMWKUIIPQCAJU-LJHIYBGHSA-N 0.000 description 1
- XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N IDUR Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(I)=C1 XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 1
- XDXDZDZNSLXDNA-TZNDIEGXSA-N Idarubicin Chemical compound C1[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1C2=C(O)C(C(=O)C3=CC=CC=C3C3=O)=C3C(O)=C2C[C@@](O)(C(C)=O)C1 XDXDZDZNSLXDNA-TZNDIEGXSA-N 0.000 description 1
- XDXDZDZNSLXDNA-UHFFFAOYSA-N Idarubicin Natural products C1C(N)C(O)C(C)OC1OC1C2=C(O)C(C(=O)C3=CC=CC=C3C3=O)=C3C(O)=C2CC(O)(C(C)=O)C1 XDXDZDZNSLXDNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010043496 Immunoglobulin Idiotypes Proteins 0.000 description 1
- 101000668058 Infectious salmon anemia virus (isolate Atlantic salmon/Norway/810/9/99) RNA-directed RNA polymerase catalytic subunit Proteins 0.000 description 1
- 108010054267 Interferon Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 1
- 102100027268 Interferon-stimulated gene 20 kDa protein Human genes 0.000 description 1
- 102000004551 Interleukin-10 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010017550 Interleukin-10 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 1
- 102000010781 Interleukin-6 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010038501 Interleukin-6 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 108010002586 Interleukin-7 Proteins 0.000 description 1
- 102100021592 Interleukin-7 Human genes 0.000 description 1
- 102100034872 Kallikrein-4 Human genes 0.000 description 1
- 102100040442 Kidney-associated antigen 1 Human genes 0.000 description 1
- LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N L-cystine Chemical compound [O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])CSSC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- 102100031413 L-dopachrome tautomerase Human genes 0.000 description 1
- 101710093778 L-dopachrome tautomerase Proteins 0.000 description 1
- 102100031357 L-lactate dehydrogenase C chain Human genes 0.000 description 1
- 108010007622 LDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000007330 LDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 101150113776 LMP1 gene Proteins 0.000 description 1
- 108091008555 LTK receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100025640 Lactase-like protein Human genes 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 102100026910 Leucine zipper protein 4 Human genes 0.000 description 1
- 108010000817 Leuprolide Proteins 0.000 description 1
- GQYIWUVLTXOXAJ-UHFFFAOYSA-N Lomustine Chemical compound ClCCN(N=O)C(=O)NC1CCCCC1 GQYIWUVLTXOXAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100024640 Low-density lipoprotein receptor Human genes 0.000 description 1
- 108010074338 Lymphokines Proteins 0.000 description 1
- 102000008072 Lymphokines Human genes 0.000 description 1
- 102100031520 MAPK/MAK/MRK overlapping kinase Human genes 0.000 description 1
- 239000007993 MOPS buffer Substances 0.000 description 1
- 102100037200 MORC family CW-type zinc finger protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 102000005727 Mammaglobin A Human genes 0.000 description 1
- 108010031030 Mammaglobin A Proteins 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241000282342 Martes americana Species 0.000 description 1
- 102100022253 Meiotic recombination protein SPO11 Human genes 0.000 description 1
- 102100039475 Melanoma-associated antigen B5 Human genes 0.000 description 1
- 102100039483 Melanoma-associated antigen B6 Human genes 0.000 description 1
- 102100039447 Melanoma-associated antigen C1 Human genes 0.000 description 1
- 102100027252 Melanoma-associated antigen C2 Human genes 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102100026712 Metalloreductase STEAP1 Human genes 0.000 description 1
- 108700011259 MicroRNAs Proteins 0.000 description 1
- 108091008553 MuSK receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100023123 Mucin-16 Human genes 0.000 description 1
- 108010063954 Mucins Proteins 0.000 description 1
- 102000015728 Mucins Human genes 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 101100023550 Mycobacterium bovis (strain ATCC BAA-935 / AF2122/97) cmaD gene Proteins 0.000 description 1
- 102000003505 Myosin Human genes 0.000 description 1
- 108060008487 Myosin Proteins 0.000 description 1
- GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]-N-methylprop-2-en-1-amine Chemical compound CN(CCC1=CNC2=C1C=CC=C2)CC=C GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100022913 NAD-dependent protein deacetylase sirtuin-2 Human genes 0.000 description 1
- 108010045510 NADPH-Ferrihemoprotein Reductase Proteins 0.000 description 1
- 102100035403 Nuclear RNA export factor 2 Human genes 0.000 description 1
- 102100031719 Nuclear transcription factor Y subunit gamma Human genes 0.000 description 1
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 108700022034 Opsonin Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000016978 Orphan receptors Human genes 0.000 description 1
- 108070000031 Orphan receptors Proteins 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 102100023238 P antigen family member 5 Human genes 0.000 description 1
- 108060006580 PRAME Proteins 0.000 description 1
- 102000036673 PRAME Human genes 0.000 description 1
- 102100034640 PWWP domain-containing DNA repair factor 3A Human genes 0.000 description 1
- 108050007154 PWWP domain-containing DNA repair factor 3A Proteins 0.000 description 1
- 241000282577 Pan troglodytes Species 0.000 description 1
- 235000019483 Peanut oil Nutrition 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000017794 Perilipin-2 Human genes 0.000 description 1
- 108010067163 Perilipin-2 Proteins 0.000 description 1
- 102100022078 Peroxiredoxin-5, mitochondrial Human genes 0.000 description 1
- 108010022181 Phosphopyruvate Hydratase Proteins 0.000 description 1
- 102000012288 Phosphopyruvate Hydratase Human genes 0.000 description 1
- 102100037419 Pituitary tumor-transforming gene 1 protein-interacting protein Human genes 0.000 description 1
- 101710199379 Pituitary tumor-transforming gene 1 protein-interacting protein Proteins 0.000 description 1
- 102100040153 Poly(A) polymerase gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010039918 Polylysine Proteins 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- 229920001219 Polysorbate 40 Polymers 0.000 description 1
- 229920001214 Polysorbate 60 Polymers 0.000 description 1
- 229920002642 Polysorbate 65 Polymers 0.000 description 1
- 102100035724 Probable ATP-dependent RNA helicase DDX43 Human genes 0.000 description 1
- 101710130420 Probable capsid assembly scaffolding protein Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 102100035764 Proteasome subunit beta type-9 Human genes 0.000 description 1
- 102100031492 Protein OS-9 Human genes 0.000 description 1
- 102000018471 Proto-Oncogene Proteins B-raf Human genes 0.000 description 1
- 108010091528 Proto-Oncogene Proteins B-raf Proteins 0.000 description 1
- 102100022578 Putative tyrosine-protein phosphatase TPTE Human genes 0.000 description 1
- 239000012614 Q-Sepharose Substances 0.000 description 1
- 108091008551 RET receptors Proteins 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 108091008552 RYK receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100030086 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Human genes 0.000 description 1
- 102100029986 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-3 Human genes 0.000 description 1
- 102100029981 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-4 Human genes 0.000 description 1
- 102100034089 Receptor-type tyrosine-protein phosphatase kappa Human genes 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 102100035844 Retrotransposon-derived protein PEG10 Human genes 0.000 description 1
- 208000025747 Rheumatic disease Diseases 0.000 description 1
- 108010083644 Ribonucleases Proteins 0.000 description 1
- 102000006382 Ribonucleases Human genes 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 1
- 102000000395 SH3 domains Human genes 0.000 description 1
- 108050008861 SH3 domains Proteins 0.000 description 1
- 108091058557 SILV Proteins 0.000 description 1
- 108700019345 SYT-SSX fusion Proteins 0.000 description 1
- 101100123851 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) HER1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101710204410 Scaffold protein Proteins 0.000 description 1
- 101710173694 Short transient receptor potential channel 2 Proteins 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N Silver Chemical compound [Ag] BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010041216 Sirtuin 2 Proteins 0.000 description 1
- 102100038685 Small nuclear ribonucleoprotein Sm D2 Human genes 0.000 description 1
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102100022327 Sperm protein associated with the nucleus on the X chromosome A Human genes 0.000 description 1
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- NHUHCSRWZMLRLA-UHFFFAOYSA-N Sulfisoxazole Chemical compound CC1=NOC(NS(=O)(=O)C=2C=CC(N)=CC=2)=C1C NHUHCSRWZMLRLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000205098 Sulfolobus acidocaldarius Species 0.000 description 1
- 239000012505 Superdex™ Substances 0.000 description 1
- 102100036234 Synaptonemal complex protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 108700005078 Synthetic Genes Proteins 0.000 description 1
- 229940123237 Taxane Drugs 0.000 description 1
- 108010017842 Telomerase Proteins 0.000 description 1
- 102100035116 Testis-expressed protein 15 Human genes 0.000 description 1
- BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N Tetramethylsqualene Natural products CC(=C)C(C)CCC(=C)C(C)CCC(C)=CCCC=C(C)CCC(C)C(=C)CCC(C)C(C)=C BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100030951 Tissue factor pathway inhibitor Human genes 0.000 description 1
- 102100038129 Transcription factor Dp family member 3 Human genes 0.000 description 1
- 108090000952 Transcription factor RelB Proteins 0.000 description 1
- 102100038808 Transcription factor SOX-10 Human genes 0.000 description 1
- 102100023935 Transmembrane glycoprotein NMB Human genes 0.000 description 1
- 206010066901 Treatment failure Diseases 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 102000005924 Triose-Phosphate Isomerase Human genes 0.000 description 1
- 108700015934 Triose-phosphate isomerases Proteins 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 102100034392 Trypsin-2 Human genes 0.000 description 1
- 101710119666 Trypsin-2 Proteins 0.000 description 1
- 229940122530 Tubulin polymerization inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 102100040192 Tudor domain-containing protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 108010078814 Tumor Suppressor Protein p53 Proteins 0.000 description 1
- 102100040245 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 5 Human genes 0.000 description 1
- 102100036857 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8 Human genes 0.000 description 1
- 102100033254 Tumor suppressor ARF Human genes 0.000 description 1
- 102100031929 UDP-N-acetylglucosamine-peptide N-acetylglucosaminyltransferase 110 kDa subunit Human genes 0.000 description 1
- 101710117112 UDP-N-acetylglucosamine-peptide N-acetylglucosaminyltransferase 110 kDa subunit Proteins 0.000 description 1
- 108090000848 Ubiquitin Proteins 0.000 description 1
- 102000044159 Ubiquitin Human genes 0.000 description 1
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 1
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 1
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 1
- PNDPGZBMCMUPRI-XXSWNUTMSA-N [125I][125I] Chemical compound [125I][125I] PNDPGZBMCMUPRI-XXSWNUTMSA-N 0.000 description 1
- 230000001594 aberrant effect Effects 0.000 description 1
- BGLGAKMTYHWWKW-UHFFFAOYSA-N acridine yellow Chemical compound [H+].[Cl-].CC1=C(N)C=C2N=C(C=C(C(C)=C3)N)C3=CC2=C1 BGLGAKMTYHWWKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 108010071391 adenocarcinoma antigen recognized by T cells-4 Proteins 0.000 description 1
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- GZCGUPFRVQAUEE-SLPGGIOYSA-N aldehydo-D-glucose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O GZCGUPFRVQAUEE-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- 108010034034 alpha-1,6-mannosylglycoprotein beta 1,6-N-acetylglucosaminyltransferase Proteins 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000473 altretamine Drugs 0.000 description 1
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K aluminium phosphate Chemical compound O1[Al]2OP1(=O)O2 ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 1
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003945 anionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- 230000003466 anti-cipated effect Effects 0.000 description 1
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 239000003080 antimitotic agent Substances 0.000 description 1
- 108010046973 apohemoglobin Proteins 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- VSRXQHXAPYXROS-UHFFFAOYSA-N azanide;cyclobutane-1,1-dicarboxylic acid;platinum(2+) Chemical compound [NH2-].[NH2-].[Pt+2].OC(=O)C1(C(O)=O)CCC1 VSRXQHXAPYXROS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 238000002306 biochemical method Methods 0.000 description 1
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 1
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 229920001400 block copolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 239000003633 blood substitute Substances 0.000 description 1
- 230000036770 blood supply Effects 0.000 description 1
- 229960004015 calcitonin Drugs 0.000 description 1
- BBBFJLBPOGFECG-VJVYQDLKSA-N calcitonin Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(N)=O)C(C)C)C(=O)[C@@H]1CSSC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1 BBBFJLBPOGFECG-VJVYQDLKSA-N 0.000 description 1
- 210000000234 capsid Anatomy 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003093 cationic surfactant Substances 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 1
- 210000003855 cell nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 230000004700 cellular uptake Effects 0.000 description 1
- 230000009920 chelation Effects 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 1
- 229930002869 chlorophyll b Natural products 0.000 description 1
- NSMUHPMZFPKNMZ-VBYMZDBQSA-M chlorophyll b Chemical compound C1([C@@H](C(=O)OC)C(=O)C2=C3C)=C2N2C3=CC(C(CC)=C3C=O)=[N+]4C3=CC3=C(C=C)C(C)=C5N3[Mg-2]42[N+]2=C1[C@@H](CCC(=O)OC\C=C(/C)CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H](C)C2=C5 NSMUHPMZFPKNMZ-VBYMZDBQSA-M 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 229960002173 citrulline Drugs 0.000 description 1
- 238000000942 confocal micrograph Methods 0.000 description 1
- 238000004624 confocal microscopy Methods 0.000 description 1
- 238000011443 conventional therapy Methods 0.000 description 1
- 239000006184 cosolvent Substances 0.000 description 1
- 108050004038 cystatin Proteins 0.000 description 1
- 229960003067 cystine Drugs 0.000 description 1
- 102000003675 cytokine receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010057085 cytokine receptors Proteins 0.000 description 1
- 210000004395 cytoplasmic granule Anatomy 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 101150047356 dec-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 229960003964 deoxycholic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 229940042399 direct acting antivirals protease inhibitors Drugs 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N dodecahydrosqualene Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 1
- 239000000890 drug combination Substances 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012149 elution buffer Substances 0.000 description 1
- 230000012202 endocytosis Effects 0.000 description 1
- HKSZLNNOFSGOKW-UHFFFAOYSA-N ent-staurosporine Natural products C12=C3N4C5=CC=CC=C5C3=C3CNC(=O)C3=C2C2=CC=CC=C2N1C1CC(NC)C(OC)C4(C)O1 HKSZLNNOFSGOKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000925 erythroid effect Effects 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 229960002413 ferric citrate Drugs 0.000 description 1
- 210000004700 fetal blood Anatomy 0.000 description 1
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 1
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000799 fluorescence microscopy Methods 0.000 description 1
- PLHJDBGFXBMTGZ-WEVVVXLNSA-N furazolidone Chemical compound O1C([N+](=O)[O-])=CC=C1\C=N\N1C(=O)OCC1 PLHJDBGFXBMTGZ-WEVVVXLNSA-N 0.000 description 1
- 229960001625 furazolidone Drugs 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N gemcitabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1C(F)(F)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N 0.000 description 1
- 229960005277 gemcitabine Drugs 0.000 description 1
- 102000054767 gene variant Human genes 0.000 description 1
- 102000034356 gene-regulatory proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091006104 gene-regulatory proteins Proteins 0.000 description 1
- YQEMORVAKMFKLG-UHFFFAOYSA-N glycerine monostearate Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC(CO)CO YQEMORVAKMFKLG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SVUQHVRAGMNPLW-UHFFFAOYSA-N glycerol monostearate Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO SVUQHVRAGMNPLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002337 glycosamines Chemical group 0.000 description 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- XLXSAKCOAKORKW-AQJXLSMYSA-N gonadorelin Chemical class C([C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)C1=CC=C(O)C=C1 XLXSAKCOAKORKW-AQJXLSMYSA-N 0.000 description 1
- 229910021389 graphene Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000003394 haemopoietic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009931 harmful effect Effects 0.000 description 1
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 1
- UUVWYPNAQBNQJQ-UHFFFAOYSA-N hexamethylmelamine Chemical compound CN(C)C1=NC(N(C)C)=NC(N(C)C)=N1 UUVWYPNAQBNQJQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010045676 holotransferrin Proteins 0.000 description 1
- 229940084986 human chorionic gonadotropin Drugs 0.000 description 1
- 238000007871 hydride transfer reaction Methods 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950000801 hydroxyprogesterone caproate Drugs 0.000 description 1
- 229960000908 idarubicin Drugs 0.000 description 1
- 229960004716 idoxuridine Drugs 0.000 description 1
- 229960001101 ifosfamide Drugs 0.000 description 1
- HOMGKSMUEGBAAB-UHFFFAOYSA-N ifosfamide Chemical compound ClCCNP1(=O)OCCCN1CCCl HOMGKSMUEGBAAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 239000012642 immune effector Substances 0.000 description 1
- 230000003832 immune regulation Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 229940027941 immunoglobulin g Drugs 0.000 description 1
- 239000000568 immunological adjuvant Substances 0.000 description 1
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 239000002596 immunotoxin Substances 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000003978 infusion fluid Substances 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N iodine Chemical compound II PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 229960004768 irinotecan Drugs 0.000 description 1
- UWKQSNNFCGGAFS-XIFFEERXSA-N irinotecan Chemical compound C1=C2C(CC)=C3CN(C(C4=C([C@@](C(=O)OC4)(O)CC)C=4)=O)C=4C3=NC2=CC=C1OC(=O)N(CC1)CCC1N1CCCCC1 UWKQSNNFCGGAFS-XIFFEERXSA-N 0.000 description 1
- NPFOYSMITVOQOS-UHFFFAOYSA-K iron(III) citrate Chemical compound [Fe+3].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NPFOYSMITVOQOS-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000741 isoleucyl group Chemical group [H]N([H])C(C(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])[H])C(=O)O* 0.000 description 1
- 108010024383 kallikrein 4 Proteins 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- GFIJNRVAKGFPGQ-LIJARHBVSA-N leuprolide Chemical compound CCNC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 GFIJNRVAKGFPGQ-LIJARHBVSA-N 0.000 description 1
- 229960004338 leuprorelin Drugs 0.000 description 1
- GZQKNULLWNGMCW-PWQABINMSA-N lipid A (E. coli) Chemical compound O1[C@H](CO)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@H](OC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCC)[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](OC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](OP(O)(O)=O)O1 GZQKNULLWNGMCW-PWQABINMSA-N 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 108010013555 lipoprotein-associated coagulation inhibitor Proteins 0.000 description 1
- YAFQFNOUYXZVPZ-UHFFFAOYSA-N liproxstatin-1 Chemical compound ClC1=CC=CC(CNC=2C3(CCNCC3)NC3=CC=CC=C3N=2)=C1 YAFQFNOUYXZVPZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 229960002247 lomustine Drugs 0.000 description 1
- 210000004324 lymphatic system Anatomy 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 230000002132 lysosomal effect Effects 0.000 description 1
- 210000003712 lysosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000001868 lysosomic effect Effects 0.000 description 1
- 230000005291 magnetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 125000005439 maleimidyl group Chemical group C1(C=CC(N1*)=O)=O 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000013507 mapping Methods 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002500 microbody Anatomy 0.000 description 1
- 230000004089 microcirculation Effects 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 230000008880 microtubule cytoskeleton organization Effects 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000011278 mitosis Effects 0.000 description 1
- 101150024128 mmaA1 gene Proteins 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 210000004980 monocyte derived macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940035032 monophosphoryl lipid a Drugs 0.000 description 1
- 210000002894 multi-fate stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 239000002091 nanocage Substances 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 229960002592 nifurtoinol Drugs 0.000 description 1
- UIDWQGRXEVDFCA-XCVCLJGOSA-N nifurtoinol Chemical compound O=C1N(CO)C(=O)CN1\N=C\C1=CC=C([N+]([O-])=O)O1 UIDWQGRXEVDFCA-XCVCLJGOSA-N 0.000 description 1
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 1
- 210000004882 non-tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 102000006255 nuclear receptors Human genes 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 1
- OELZFJUWWFRWLC-UHFFFAOYSA-N oxazine-1 Chemical compound C1=CC(N(CC)CC)=CC2=[O+]C3=CC(N(CC)CC)=CC=C3N=C21 OELZFJUWWFRWLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000242 pagocytic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 229960005489 paracetamol Drugs 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 239000000312 peanut oil Substances 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 230000003836 peripheral circulation Effects 0.000 description 1
- 210000004303 peritoneum Anatomy 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 210000001539 phagocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000000680 phagosome Anatomy 0.000 description 1
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 1
- IEQIEDJGQAUEQZ-UHFFFAOYSA-N phthalocyanine Chemical class N1C(N=C2C3=CC=CC=C3C(N=C3C4=CC=CC=C4C(=N4)N3)=N2)=C(C=CC=C2)C2=C1N=C1C2=CC=CC=C2C4=N1 IEQIEDJGQAUEQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 1
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 1
- 210000004180 plasmocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- DKPOGYJJFLIBKP-UHFFFAOYSA-M platinum(II) octaethylporphyrin ketone Chemical compound [Pt+2].[N-]1C(C=C2C(C(=O)C(C=C3C(=C(CC)C(=C4)[N-]3)CC)=N2)(CC)CC)=C(CC)C(CC)=C1C=C1C(CC)=C(CC)C4=N1 DKPOGYJJFLIBKP-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000010287 polarization Effects 0.000 description 1
- 229920000724 poly(L-arginine) polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920001481 poly(stearyl methacrylate) Polymers 0.000 description 1
- 108010054442 polyalanine Proteins 0.000 description 1
- 108010011110 polyarginine Proteins 0.000 description 1
- 108010094020 polyglycine Proteins 0.000 description 1
- 229920000232 polyglycine polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920000656 polylysine Polymers 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000249 polyoxyethylene sorbitan monopalmitate Substances 0.000 description 1
- 235000010483 polyoxyethylene sorbitan monopalmitate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001818 polyoxyethylene sorbitan monostearate Substances 0.000 description 1
- 235000010989 polyoxyethylene sorbitan monostearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001816 polyoxyethylene sorbitan tristearate Substances 0.000 description 1
- 235000010988 polyoxyethylene sorbitan tristearate Nutrition 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 229940068977 polysorbate 20 Drugs 0.000 description 1
- 229940101027 polysorbate 40 Drugs 0.000 description 1
- 229940113124 polysorbate 60 Drugs 0.000 description 1
- 229940099511 polysorbate 65 Drugs 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 229940068968 polysorbate 80 Drugs 0.000 description 1
- 229940068965 polysorbates Drugs 0.000 description 1
- 239000008057 potassium phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000013630 prepared media Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- QQONPFPTGQHPMA-UHFFFAOYSA-N propylene Natural products CC=C QQONPFPTGQHPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004805 propylene group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([*:1])C([H])([H])[*:2] 0.000 description 1
- 239000002096 quantum dot Substances 0.000 description 1
- 125000003410 quininyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 230000000552 rheumatic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002336 ribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- 235000017709 saponins Nutrition 0.000 description 1
- 108010038379 sargramostim Proteins 0.000 description 1
- 229960002530 sargramostim Drugs 0.000 description 1
- 108091005418 scavenger receptor class E Proteins 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 238000010187 selection method Methods 0.000 description 1
- 239000008159 sesame oil Substances 0.000 description 1
- 235000011803 sesame oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004332 silver Substances 0.000 description 1
- 238000002603 single-photon emission computed tomography Methods 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- FHHPUSMSKHSNKW-SMOYURAASA-M sodium deoxycholate Chemical compound [Na+].C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC([O-])=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 FHHPUSMSKHSNKW-SMOYURAASA-M 0.000 description 1
- RYYKJJJTJZKILX-UHFFFAOYSA-M sodium octadecanoate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O RYYKJJJTJZKILX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 230000007480 spreading Effects 0.000 description 1
- 238000003892 spreading Methods 0.000 description 1
- 229940031439 squalene Drugs 0.000 description 1
- TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N squalene Natural products CC(=CCCC(=CCCC(=CCCC=C(/C)CCC=C(/C)CC=C(C)C)C)C)C TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010088201 squamous cell carcinoma-related antigen Proteins 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- HKSZLNNOFSGOKW-FYTWVXJKSA-N staurosporine Chemical compound C12=C3N4C5=CC=CC=C5C3=C3CNC(=O)C3=C2C2=CC=CC=C2N1[C@H]1C[C@@H](NC)[C@@H](OC)[C@]4(C)O1 HKSZLNNOFSGOKW-FYTWVXJKSA-N 0.000 description 1
- CGPUWJWCVCFERF-UHFFFAOYSA-N staurosporine Natural products C12=C3N4C5=CC=CC=C5C3=C3CNC(=O)C3=C2C2=CC=CC=C2N1C1CC(NC)C(OC)C4(OC)O1 CGPUWJWCVCFERF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000021 stimulant Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 229960003288 sulfaethidole Drugs 0.000 description 1
- 229960000654 sulfafurazole Drugs 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960001603 tamoxifen Drugs 0.000 description 1
- DKPFODGZWDEEBT-QFIAKTPHSA-N taxane Chemical class C([C@]1(C)CCC[C@@H](C)[C@H]1C1)C[C@H]2[C@H](C)CC[C@@H]1C2(C)C DKPFODGZWDEEBT-QFIAKTPHSA-N 0.000 description 1
- 229960001278 teniposide Drugs 0.000 description 1
- NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N teniposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@@H](OC[C@H]4O3)C=3SC=CC=3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N 0.000 description 1
- 229960005353 testolactone Drugs 0.000 description 1
- BPEWUONYVDABNZ-DZBHQSCQSA-N testolactone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(OC(=O)CC4)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 BPEWUONYVDABNZ-DZBHQSCQSA-N 0.000 description 1
- JGVWCANSWKRBCS-UHFFFAOYSA-N tetramethylrhodamine thiocyanate Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(N(C)C)=CC2=[O+]C2=CC(N(C)C)=CC=C2C=1C1=CC=C(SC#N)C=C1C(O)=O JGVWCANSWKRBCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036962 time dependent Effects 0.000 description 1
- 208000037816 tissue injury Diseases 0.000 description 1
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 229910052723 transition metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000003624 transition metals Chemical class 0.000 description 1
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 1
- HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K trisodium citrate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940038773 trisodium citrate Drugs 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003827 upregulation Effects 0.000 description 1
- 210000005166 vasculature Anatomy 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 239000000277 virosome Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 1
- FBTUMDXHSRTGRV-BJISBDEGSA-N zorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(C)=NNC(=O)C=1C=CC=CC=1)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 FBTUMDXHSRTGRV-BJISBDEGSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/69—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit
- A61K47/6901—Conjugates being cells, cell fragments, viruses, ghosts, red blood cells or viral vectors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/14—Blood; Artificial blood
- A61K35/15—Cells of the myeloid line, e.g. granulocytes, basophils, eosinophils, neutrophils, leucocytes, monocytes, macrophages or mast cells; Myeloid precursor cells; Antigen-presenting cells, e.g. dendritic cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/14—Blood; Artificial blood
- A61K35/17—Lymphocytes; B-cells; T-cells; Natural killer cells; Interferon-activated or cytokine-activated lymphocytes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/40—Transferrins, e.g. lactoferrins, ovotransferrins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/41—Porphyrin- or corrin-ring-containing peptides
- A61K38/42—Haemoglobins; Myoglobins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/461—Cellular immunotherapy characterised by the cell type used
- A61K39/4614—Monocytes; Macrophages
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/462—Cellular immunotherapy characterized by the effect or the function of the cells
- A61K39/4622—Antigen presenting cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
- A61K39/4643—Vertebrate antigens
- A61K39/4644—Cancer antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
- A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
- A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
- A61K47/644—Transferrin, e.g. a lactoferrin or ovotransferrin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
- A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
- A61K47/6445—Haemoglobin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
- A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
- A61K47/6811—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being a protein or peptide, e.g. transferrin or bleomycin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
- A61K49/0013—Luminescence
- A61K49/0017—Fluorescence in vivo
- A61K49/005—Fluorescence in vivo characterised by the carrier molecule carrying the fluorescent agent
- A61K49/0056—Peptides, proteins, polyamino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/06—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations
- A61K49/18—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by a special physical form, e.g. emulsions, microcapsules, liposomes
- A61K49/1896—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by a special physical form, e.g. emulsions, microcapsules, liposomes not provided for elsewhere, e.g. cells, viruses, ghosts, red blood cells, virus capsides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/0497—Organic compounds conjugates with a carrier being an organic compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/12—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by a special physical form, e.g. emulsion, microcapsules, liposomes, characterized by a special physical form, e.g. emulsions, dispersions, microcapsules
- A61K51/1203—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by a special physical form, e.g. emulsion, microcapsules, liposomes, characterized by a special physical form, e.g. emulsions, dispersions, microcapsules in a form not provided for by groups A61K51/1206 - A61K51/1296, e.g. cells, cell fragments, viruses, virus capsides, ghosts, red blood cells, viral vectors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/18—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for pancreatic disorders, e.g. pancreatic enzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/10—Drugs for disorders of the urinary system of the bladder
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/02—Ophthalmic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
- C12N5/0636—T lymphocytes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
- C12N5/0642—Granulocytes, e.g. basopils, eosinophils, neutrophils, mast cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
- C12N5/0645—Macrophages, e.g. Kuepfer cells in the liver; Monocytes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
- C12N5/0646—Natural killers cells [NK], NKT cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46
- A61K2239/31—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46 characterized by the route of administration
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46
- A61K2239/38—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46 characterised by the dose, timing or administration schedule
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46
- A61K2239/46—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46 characterised by the cancer treated
- A61K2239/50—Colon
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/10—Growth factors
- C12N2501/15—Transforming growth factor beta (TGF-β)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/20—Cytokines; Chemokines
- C12N2501/21—Chemokines, e.g. MIP-1, MIP-2, RANTES, MCP, PF-4
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/20—Cytokines; Chemokines
- C12N2501/23—Interleukins [IL]
- C12N2501/2304—Interleukin-4 (IL-4)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/20—Cytokines; Chemokines
- C12N2501/23—Interleukins [IL]
- C12N2501/231—Interleukin-10 (IL-10)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/20—Cytokines; Chemokines
- C12N2501/23—Interleukins [IL]
- C12N2501/2313—Interleukin-13 (IL-13)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/20—Cytokines; Chemokines
- C12N2501/24—Interferons [IFN]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/20—Cytokines; Chemokines
- C12N2501/25—Tumour necrosing factors [TNF]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/90—Polysaccharides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/999—Small molecules not provided for elsewhere
Abstract
Настоящее изобретение относится к области клеточной биологии и медицины, в частности к системе направленной доставки, а также способу получения такой системы. Указанная система содержит клетку, представляющую собой CD45+лейкоцит, которая выбрана, в частности, из CD45+моноцита, CD45+моноцит-макрофага, CD45+лимфоцита или CD45+гранулоцита. При этом в указанной клетке содержится комплекс по меньшей мере одного железосвязывающего белка и фармацевтически активного вещества и/или метки. Настоящее изобретение позволяет обеспечить доставку фармацевтически активных веществ и/или меток в клетки в плохо или неваскуляризированные области; снизить побочные эффекты лекарственных средств за счет их направленной доставки; а также обеспечить более высокую эффективность лечения более низкими дозами лекарственных средств за счет их направленной доставки. 5 н. и 36 з.п. ф-лы, 27 ил., 18 пр.
Description
В соответствии с настоящим изобретением предложена выделенная клеточная система направленной доставки, содержащая клетку, представляющую собой CD45+ лейкоцит, при этом в указанной клетке содержится комплекс по меньшей мере одного железосвязывающего белка и фармацевтически активного вещества и/или метки, а также предложены способы получения указанной выделенной клеточной системы направленной доставки и применение указанной системы для профилактики, терапии, диагностики или терагностики, в частности, для профилактической или терапевтической вакцинации, терапии рака, в особенности метастатического рака, или воспалительных заболеваний.
Уровень техники
Современные средства визуализации способны обеспечивать обнаружение больших метастазов (размером более 0,5-1 см). Тем не менее, указанные средства редко обеспечивают обнаружение раннего распространения метастатических опухолевых клеток. У человека метастазы размером менее 0,5 см являются аваскулярными и поэтому не обеспечиваются надлежащим образом кровью и кислородом. Это означает, что доставка контрастных агентов через систему кровообращения для маркировки указанных метастазов и их визуализации является невозможной. Наличие гипоксии является общей характеристикой микрометастазов, при которых гипоксическая фракция может достигать 90% при незначительном или отсутствующем кровотоке (Li, et al., 2012, Journal of Solid Tumours, 2(2): 28-33). Таким образом, высокая степень гипоксии считается общим отличительным признаком микрометастазов.
Направленное воздействие на один или более микрометастазов, скрытых в большой популяции нормальных клеток, представляет собой уникальную проблему, поскольку доступ к микрометастазам затруднен несколькими биобарьерами, плохим кровоснабжением, при этом дополнительными препятствиями являются малые размеры микрометастазов и их распространение в органах.
По той же причине микрометастазы часто являются рефракторными к терапии. Тогда как солидные опухоли, из которых образуются микрометастазы, часто хорошо реагируют на традиционную терапию, часто наблюдается повторный рост в месте первичной опухоли или в местах метастазирования. Это представляет собой серьезную проблему в клинической онкологии (Muthana, et al., 2012, Cancer Res; 73(2); 490-495). Данная особенность связана с характеристиками микрокружения солидных опухолей, которые ограничивают проникновение лекарственных средств, тем самым подвергая опухоль воздействию более низких, чем эффективные, концентраций лекарственных средств (Hobbs, et al., 1998, Proc Natl Acad Sci USA: 4607-4612). Это вызвано ненормальной сосудистой системой, приводящей к: высокой гетерогенности раковых клеток, низкому кислородному потенциалу (гипоксии), низкому рН и низкой концентрации глюкозы в массе опухоли (Kizaka-Kondoh, et al., 2003, Cancer Sci 94(12): 1021-1028). Кроме того, быстрая пролиферация опухолевых клеток в некоторых областях может опережать скорость роста новых кровеносных сосудов, способствуя формированию области гипоксии (Lewis and Murdoch, 2005, Am J Pathol 167(3): 627-635). Такая аномальная структура сосудов и, следовательно, их нарушенная функция, приводящая к гипоксии опухоли, ассоциирована с более злокачественным фенотипом и низкой выживаемостью у пациентов, страдающих солидными опухолями, и приводят как к неэффективности лечения из-за уменьшения усвоения лекарственного средства, так и к вызываемым гипоксией изменениям в раковых клетках (Sun, et al., 2012, Clin Cancer Res 18(3): 758-770; Sullivan, et al., 2008 Mol Cancer Ther 7(7): 1961-1973; Kizaka-Kondoh, et al., 2003, Cancer Sci 94(12): 1021-1028). Кроме того, химиотерапия или лучевая терапия дополнительно вызывают образование больших областей гипоксии опухоли, что делает лечение опухоли еще более затруднительным. Тот факт, что эффективность противоопухолевой терапии ограничена наличием опухолевых клеток в области гипоксии, привел к внедрению различных терапевтических подходов, направленных на преодоление указанной проблемы.
Авторы настоящего изобретения обнаружили, что клетки, представляющие собой CD45+ лейкоциты, в частности активированные макрофаги, их предшественники моноциты, лимфоциты и гранулоциты, могут поглощать фармацевтически активные вещества, метки или фармацевтически активные вещества и метки в комплексе с одним или более железосвязывающими белками in vitro и доставлять указанные комплексы к клеткам или в клетки, предпочтительно к опухолевым клеткам in vivo или другим клеткам, подвергающимся стрессу (например, окислительному стрессу), или в указанные клетки. На основе результатов указанного исследования авторы настоящего изобретения решили по меньшей мере одну из указанных выше проблем, известных в уровне техники. Таким образом, система направленной доставки согласно настоящему изобретению обеспечивает, помимо прочего, одно или более из следующих преимуществ: (i) специфичную доставку одного или более фармацевтически активных веществ, меток или фармацевтически активных веществ и меток к тканям, которые привлекают упомянутые выше CD45+ лейкоциты, предпочтительно в пораженные заболеванием клетки, (ii) защиту фармацевтически активных веществ, меток или фармацевтически активных веществ и меток от инактивации в системе кровообращения или от выведения из организма, (iii) доставку фармацевтически активных веществ, меток или фармацевтически активных веществ и меток к клеткам, предпочтительно в клетки, в слабо- или неваскуляризированных областях заболевания, например, метастазах, областях гипоксии внутри более крупных опухолей, очагах ревматического повреждения, воспаленных лимфатических узлах, аваскулярных ранах, коже, (iv) снижение токсичности фармацевтически активных веществ, меток или фармацевтически активных веществ и меток, (v) доставку фармацевтически активных веществ, меток или фармацевтически активных веществ и меток с плохой фармакокинетикой, (vi) снижение побочных эффектов лекарственных средств благодаря их направленной доставке, (vii) обеспечение более высокой эффективности лечения более низкими дозами лекарственных средств благодаря их направленной доставке; и/или (viii) снижение риска локального повреждения ткани в месте введения лекарственного средства благодаря введению лекарственного средства, связанного с железосвязывающим белком, который загружен в CD45+ лейкоцит; и/или (ix) возможность выявления небольших метастазов с высокой степенью гипоксии; и/или (x) раннее выявление воспалительных заболеваний.
Краткое описание изобретения
В первом своем аспекте настоящее изобретение относится к выделенной системе направленной доставки, содержащей CD45+ моноцит-макрофаг, CD45+ лимфоцит, в частности, CD45+ натуральные клетки-киллеры (NK-клетки), предшественников любых из указанных типов клеток, предпочтительно MDSC, и/или CD45+ гранулоцит ("клетку, представляющую собой CD45+ лейкоцит"), или их предшественники, предпочтительно MDSC, при этом в указанной клетке содержится комплекс одного или более железосвязывающих белков и фармацевтически активного вещества, метки или фармацевтически активного вещества и метки.
Во втором аспекте настоящее изобретение относится к выделенной системе направленной доставки метки, содержащей клетку, представляющую собой CD45+ лейкоцит, предпочтительно обеспечивающую возможность мечения, содержащей одну или более меток, предпочтительно радиоактивных меток, или их конъюгаты и комбинации.
В третьем аспекте настоящее изобретение относится к способу получения выделенной системы направленной доставки по пп. 1-25, включающему стадии:
a) обеспечения очищенного железосвязывающего белка;
b) ковалентного или нековалентного связывания фармацевтически активного вещества, метки или фармацевтически активного вещества и метки с железосвязывающим белком и/или инкапсулирования фармацевтически активного вещества, метки или фармацевтически активного вещества и метки в железосвязывающем белке;
c) обеспечения клетки, представляющей собой CD45+ лейкоцит; и
d1) инкубирования клетки, представляющей собой CD45+ лейкоцит, в присутствии железосвязывающего белка, полученного на стадии b), до получения по меньшей мере частичной загрузки клетки, представляющей собой CD45+ лейкоцит, комплексом железосвязывающего белка и фармацевтически активного вещества, метки или фармацевтически активного вещества и метки, полученного на стадии b); и/или
d2) инкубирования клетки, представляющей собой CD45+ лейкоцит, в присутствии метки до получения по меньшей мере частичного связывания клетки, представляющей собой CD45+ лейкоцит, с меткой.
В четвертом аспекте настоящее изобретение относится к выделенной системе направленной доставки по первому аспекту или второму аспекту настоящего изобретения, или получаемой в соответствии со способом по третьему аспекту настоящего изобретения, для применения в качестве лекарственного средства или для диагностики.
В пятом аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической или диагностической композиции, содержащей выделенную систему направленной доставки по первому или второму аспекту настоящего изобретения, или получаемую в соответствии со способом по третьему аспекту настоящего изобретения, и фармацевтически приемлемое вещество-носитель и/или подходящий(е) вспомогательное(ые) вещество(а).
В шестом аспекте настоящее изобретение относится к выделенной системе направленной доставки по первому аспекту или второму аспекту настоящего изобретения, или получаемой в соответствии со способом по третьему аспекту настоящего изобретения, для применения при предотвращении, лечении или диагностике заболевания, характеризующегося зонами гипоксии в пораженной ткани и/или областями окислительного стресса; опухолей, предпочтительно солидных опухолей и/или их метастазов, предпочтительно рака молочной железы, рака поджелудочной железы, рака мочевого пузыря, рака легкого, рака толстой кишки или опухоли, характеризующейся наличием областей гипоксии, воспалительного заболевания, воспаленной ткани, предпочтительно воспаленных суставов или пораженных артритом суставов, воспаленных легких, воспаленного кишечника или других воспаленных тканей; лимфатических узлов, предпочтительно воспаленных лимфатических узлов, или других нефизиологических лимфатических узлов, которые развиваются во время заболевания, предпочтительно, но не только, во время инфекции, рака или аутоиммунного заболевания; или областей ишемии, в частности в ранах кожи, или после инфаркта органа (сердца) или ретинальной ишемии, или для профилактической или терапевтической вакцинации, в частности для предотвращения или лечения инфекционного заболевания или рака. Указанный аспект также включает антигены к физиологическим или нефизиологическим лимфатическим узлам для вакцинации индивидуума или индуцирования иммунной памяти.
Подробное описание предпочтительных вариантов реализации
Перед тем, как настоящее изобретение будет подробно описано ниже, следует понимать, что настоящее изобретение не ограничивается конкретной методологией, протоколами и реагентами, описанными в настоящем документе, поскольку они могут изменяться. Также следует понимать, что применяемая в настоящем документе терминология предназначена только для описания конкретных вариантов реализации и не предназначена для ограничения объема настоящего изобретения, который определяется только пунктами прилагаемой формулы изобретения. Если не указано иное, все технические и научные термины, применяемые в настоящем документе, имеют те же значения, которые обычно понимаются специалистом в данной области техники.
Далее будут описаны элементы настоящего изобретения. Указанные элементы перечислены с конкретными вариантами реализации, тем не менее, следует понимать, что их можно комбинировать любым образом и в любом количестве для получения дополнительных вариантов реализации. Различные описанные примеры и предпочтительные варианты реализации не ограничивают настоящее изобретение только явно описанными вариантами реализации. Следует понимать, что настоящее описание обосновывает и охватывает варианты реализации, которые объединяют явно описанные варианты реализации с любым количеством раскрытых и/или предпочтительных элементов. Кроме того, любые перестановки и комбинации всех описанных элементов в указанной заявке раскрываются в описании настоящей заявки, если контекст не указывает на иное.
Несколько документов цитируются по всему тексту настоящей заявки. Содержание каждого из документов, процитированных в настоящем документе (включая все патенты, патентные заявки, научные публикации, спецификации производителя, инструкции и т.п.), приведенные выше или ниже, включено в настоящую заявку во всей полноте посредством ссылки. Ничто в настоящем документе не должно рассматриваться как признание того, что такое раскрытие предвосхищало настоящее изобретение.
Определения
Если не указано иное, для практической реализации настоящего изобретения применяют общепринятые способы из химии, биохимии и технологии рекомбинантных ДНК, которые объяснены в литературе из данной области (см., например, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd Edition, J. Sambrook et al. eds., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor 1989).
Если контекст не требует иного, во всем объеме настоящей заявки и последующих пунктов формулы изобретения слово "содержит" и вариации, такие как "содержат" и "содержащий", подразумевают включение указанного целого числа или стадии или группы целых чисел или стадий, но не исключение любого другого целого числа или стадии или группы целых чисел или стадий. Применяемые в настоящей заявке и в пунктах прилагаемой формулы изобретения формы единственного числа включают формы множественного числа, если контекст явно не указывает на иное.
Термин "направленная доставка фармацевтически активного вещества" относится к доставке фармацевтически активного вещества пациенту, которая приводит к повышенной концентрации фармацевтически активного вещества в конкретной области тела по сравнению с другими областями тела указанного пациента. Предпочтительно относительные концентрации сравнивают для пораженной(ых) области(ей) тела и другими областями тела, имеющими аналогичный доступ к системе кровообращения. В предпочтительных вариантах реализации концентрация фармацевтически активного вещества в заданном количестве клеток или заданном объеме пробы для биопсии из пораженной области по меньшей мере на 10% превышает концентрацию в идентичном количестве клеток или объеме пробы для биопсии из не пораженной области после введения системы направленной доставки фармацевтически активного вещества согласно настоящему изобретению, предпочтительно через 2-24 ч. Более предпочтительно концентрация фармацевтически активного вещества в пораженной области тела пациента по меньшей мере на 20%, по меньшей мере на 30%, по меньшей мере на 40%, по меньшей мере на 50%, по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 100%, по меньшей мере на 150%, по меньшей мере на 200%, по меньшей мере на 250%, по меньшей мере на 300%, по меньшей мере на 350%, по меньшей мере на 400%, по меньшей мере на 450%, по меньшей мере на 500%, более предпочтительно по меньшей мере на 1000% превышает концентрацию в не пораженной области тела после введения системы направленной доставки фармацевтически активного вещества согласно настоящему изобретению, предпочтительно через 2-24 ч. При оценке на основе общего распределения в теле предпочтительно, чтобы по меньшей мере 5% фармацевтически активного вещества, вводимого пациенту, доставлялось в пораженную область тела, предпочтительно по меньшей мере 10%, более предпочтительно по меньшей мере 15%. Направленная доставка фармацевтически активного вещества ограничивает потенциальное вредное влияние фармацевтически активного вещества на пораженную область тела.
Термин "направленная доставка метки" или "направленная доставка контрастного агента" относится к доставке метки, в частности, контрастного агента, пациенту или индивидууму, подлежащему диагностированию, которая приводит к повышенной концентрации метки, в частности, контрастного агента, в конкретной области тела по сравнению с другими областями тела указанного пациента. Предпочтительно относительные концентрации сравнивают для пораженной(ых) области(ей) тела и другими областями тела, имеющими аналогичный доступ к системе кровообращения. В предпочтительных вариантах реализации концентрация метки, в частности, контрастного агента, в заданном количестве клеток или заданном объеме пробы для биопсии из пораженной области по меньшей мере на 10% превышает концентрацию в идентичном количестве клеток или объеме пробы для биопсии из не пораженной области после введения системы направленной доставки согласно настоящему изобретению, предпочтительно через 1-24 ч. Более предпочтительно концентрация метки, в частности, контрастного агента, в пораженной области тела пациента по меньшей мере на 20%, по меньшей мере на 30%, по меньшей мере на 40%, по меньшей мере на 50%, по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 100%, по меньшей мере на 150%, по меньшей мере на 200%, по меньшей мере на 250%, по меньшей мере на 300%, по меньшей мере на 350%, по меньшей мере на 400%, по меньшей мере на 450%, по меньшей мере на 500%, более предпочтительно по меньшей мере на 1000% превышает концентрацию в не пораженной области тела после введения системы направленной доставки согласно настоящему изобретению, предпочтительно через 2-24 ч. При оценке на основе общего распределения в теле предпочтительно, чтобы по меньшей мере 5% метки, в частности, контрастного агента, вводимого пациенту или индивидууму, подлежащему диагностированию, доставлялось в пораженную область тела, предпочтительно по меньшей мере 10%, более предпочтительно по меньшей мере 15%. Направленная доставка метки, в частности, контрастного агента, ограничивает потенциальное вредное влияние метки, в частности, контрастного агента, на пораженную область тела.
Термин "направленная терагностическая доставка" имеет значение, аналогичное приведенному выше для "направленной доставки фармацевтически активного вещества" и "направленной доставки метки", тем не менее, вместо доставки только фармацевтически активного вещества или метки происходит доставка комплекса железосвязывающего белка, содержащего в указанном варианте реализации как фармацевтически активное вещество, так и метку, что позволяет одновременно доставлять фармацевтически активное вещество и метку.
Термин "система направленной доставки фармацевтически активного вещества" применяют в настоящей заявке для обозначения системы, которая способна доставлять фармацевтически активное вещество в целевую область, т.е. способна к направленной доставке в теле пациента, предпочтительно в пораженную область.
Термин "система направленной доставки метки" применяют в настоящей заявке для обозначения системы, которая способна доставлять метку в целевую область, т.е. способна к направленной доставке в теле пациента, предпочтительно в пораженную область.
Термин "система направленной терагностической доставки" применяют в настоящей заявке для обозначения системы, которая способна доставлять комплекс фармацевтически активного вещества и метки в целевую область, т.е. способна к направленной доставке в теле пациента, предпочтительно в пораженную область, и, таким образом, позволяет одновременно проводить лечение и диагностику и/или мониторинг лечения.
Термин "система направленной доставки" обычно применяют для обозначения терминов "система направленной доставки фармацевтически активного вещества", "система направленной доставки метки" и "система направленной терагностической доставки".
Термин "фармацевтически активное вещество" применяют в контексте настоящего изобретения для обозначения вещества, которое модифицирует или модулирует клеточную активность, предпочтительно клеточную активность, которая приводит к заболеванию у пациента. Термин охватывает как вещества, которые уже являются фармацевтически активными, так и вещества, которые можно активировать, т.е. пролекарства. Примеры таких фармацевтически активных веществ включают так называемые (i) "малые молекулы", (ii) полинуклеотиды и (iii) пептиды или белки. Термин "малая молекула" применяют в контексте настоящего изобретения для обозначения углеводорода с молекулярной массой менее 1500 г/моль или фармацевтически активных радиоактивных изотопов. Предпочтительные лекарственные средства, которые можно применять, включают противораковые лекарственные средства, фармацевтически активные радиоактивные изотопы или ферригидрит.
Термин "пролекарство", применяемый в контексте настоящего изобретения, относится к любому активному ингредиенту, который после введения метаболизируется или иным образом превращается в биологически активный или более активный ингредиент (или лекарственное средство) в отношении по меньшей мере одного свойства. По сравнению с лекарственным средством пролекарство химически модифицировано таким образом, чтобы являться менее активным или неактивным по сравнению с лекарственным средством, но при этом химическая модификация является такой, что в результате метаболических или других биологических процессов после введения пролекарства пациенту образуется соответствующее лекарственное средство. По сравнению с лекарственным средством пролекарство может иметь, например, измененную метаболическую стабильность или транспортные характеристики, меньшее количество побочных эффектов или более низкую токсичность, или улучшенный вкус (см., например, ссылку Nogrady, 1985, Medicinal Chemistry A Biochemical Approach, Oxford University Press, New York, pages 388-392, включенную в настоящую заявку посредством ссылки). Пролекарство можно синтезировать с применением реагентов, отличных от соответствующего лекарственного средства.
Термины "полинуклеотид" и "нуклеиновая кислота" применяют взаимозаменяемо и понимают как полимерную или олигомерную макромолекулу, полученную из нуклеотидных мономеров. Нуклеотидные мономеры состоят из нуклеотидного основания, пятиуглеродного сахара (таких как, но не ограничиваясь ими, рибоза или 2'-дезоксирибоза) и от одной до трех фосфатных групп. Как правило, полинуклеотид образуется через фосфодиэфирные связи между индивидуальными нуклеотидными мономерами. В контексте настоящего изобретения упомянутые молекулы нуклеиновых кислот включают, но не ограничиваются ими, рибонуклеиновую кислоту (РНК), дезоксирибонуклеиновую кислоту (ДНК) и их смеси, такие как, например, РНК/ДНК-гибриды. Например, нуклеиновые кислоты можно синтезировать химически, например, в соответствии с фосфотриэфирным способом (см., например, Uhlmann, Е. & Peyman, А. (1990) Chemical Reviews, 90, 543-584). "Аптамеры" представляют собой нуклеиновые кислоты, которые связываются с полипептидом с высокой аффинностью. Аптамеры можно выделять путем способов отбора, таких как SELEmir146-a (см., например, Jayasena (1999) Clin. Chem., 45, 1628-50; Klug and Famulok (1994) M. Mol. Biol. Rep., 20, 97-107; US 5,582,981), из большого пула различных молекул одноцепочечных РНК. Аптамеры также можно синтезировать и выделять в виде их зеркальных форм, например, в виде L-рибонуклеотида (Nolte et al. (1996) Nat. Biotechnol., 14, 1116-9; Klussmann et al. (1996) Nat. Biotechnol., 14, 1112-5). Формы, которые можно выделять таким образом, обладают тем преимуществом, что они не разлагаются встречающимися в природе рибонуклеазами и, следовательно, обладают большей стабильностью.
Термины "пептид" и "полипептид" в контексте настоящего изобретения применяют взаимозаменяемо для обозначения цепи из по меньшей мере двух аминокислот, соединенных пептидными связями. Таким образом, термин "пептид" в контексте настоящего изобретения также применяют для обозначения аминокислотных цепей, содержащих более 50, более 100 или более 150 аминокислот.
Термин "антитело", применяемый в контексте настоящего изобретения, относится к гликопротеину, принадлежащему к суперсемейству иммуноглобулинов; термины "антитело" и "иммуноглобулин" часто применяют взаимозаменяемо. Антитело относится к белковой молекуле, продуцируемой плазматическими клетками, и используется иммунной системой для идентификации и нейтрализации инородных объектов, таких как бактерии и вирусы. Антитело распознает уникальную часть инородной мишени, ее антиген.
Термин "фрагмент антитела", применяемый в настоящем документе, относится к одному или более фрагментам антитела, которые сохраняют способность специфично связываться с антигеном. Примеры связывающих фрагментов, охватываемых термином "фрагмент антитела" включают антигенсвязывающий фрагмент (Fab), фрагмент Fab', фрагмент F(ab')2, антитело с тяжелыми цепями, однодоменное антитело (sdAb), одноцепочечный вариабельный фрагмент (scFv), вариабельный фрагмент (Fv), домен VH, домен VL, однодоменное антитело, нанотело, IgNAR (новый иммуноглобулиновый антигенный рецептор), ди-scFv, привлекающий Т-клетки биспецифичный активатор (BITE), молекулу переориентирующегося антитела с двойной аффинностью (DART), тройное тело, диатело, одноцепочечное диатело, альтернативный каркасный белок и их гибридные белки.
Термин "диатело", применяемый в настоящем описании, относится к гибридному белку или бивалентному антителу, которое может связывать различные антигены. Диатело состоит из двух отдельных белковых цепей, которые содержат фрагменты антитела, а именно вариабельные фрагменты. Диатела содержат вариабельный домен тяжелой цепи (VH), соединенный с вариабельным доменом легкой цепи (VL) в той же полипептидной цепи (VH-VL или VL-VH). При использовании короткого пептида, соединяющего два вариабельных домена, домены вынуждены образовывать пары с комплементарным доменом другой цепи и, таким образом, образовывать два антигенсвязывающих сайта. Диатела могут направленно действовать на одни и те же (моноспецифичные) или разные антигены (биспецифичные).
Термин "однодоменное антитело" относится к фрагментам антитела, состоящим из одного мономерного вариабельного домена антитела. Т.е. они содержат только мономерные вариабельные области тяжелой цепи антител с тяжелыми цепями, продуцируемых верблюдами или хрящевыми рыбами. Из-за их различного происхождения они также относятся к фрагментам VHH или VNAR (новый вариабельный антигенный рецептор). В качестве альтернативы, однодоменные антитела можно получать мономеризацией вариабельных доменов обычных антител мыши или человека с применением генной инженерии. Они демонстрируют молекулярную массу приблизительно 12-15 кДа и, таким образом, являются наименьшими фрагментами антител, способными распознавать антигены. Дополнительные примеры включают нанотела или наноантитела.
Термин "миметик антитела", применяемый в контексте настоящего описания, относится к соединениям, которые могут специфично связывать антигены, подобно антителу, но структурно не относящиеся к антителам. Обычно миметики антител представляют собой искусственные пептиды или белки с молярной массой приблизительно от 3 до 20 кДа, которые содержат один, два или более экспонированных доменов, специфично связывающихся с антигеном. Примеры включают, помимо прочих, ЛАКИ-D1 (липопротеин-ассоциированный коагуляционный ингибитор); аффилины, например, γ-В кристаллин человека или убиквитин человека; цистатин; Sac7D, полученный из Sulfolobus acidocaldarius; липокалин и антикалины, полученные из липокалинов; DARPins (сконструированные домены с анкириновым повтором); домен SH3 Fyn; домен Куница ингибиторов протеаз; монотела, например, 10ый домен фибронектина III типа; аднектины: ноттины (минипротеины цистинового узла); атримеры; эвитела, например, связующие на основе CTLA4, аффитела, например, трехспиральный пучок из Z-домена белка А, полученного из Staphylococcus aureus; транстела, например, трансферрин человека; тетранектины, например, мономерный или тримерный домен лектина С-типа человека; микротела, например, ингибитор II трипсина; аффилины; белки с armadillo-повторами. Нуклеиновые кислоты и малые молекулы иногда также рассматривают в качестве миметиков антител (аптамеров), но не рассматривают искусственные антитела, фрагменты антител и гибридные белки, составленные из них. Характерными преимуществами по сравнению с антителами являются лучшая растворимость, лучшее проникновение в ткани, устойчивость к воздействию тепла и ферментов и сравнительно низкие издержки производства.
Термин "антиген" применяют для обозначения вещества, предпочтительно иммуногенного пептида, который содержит по меньшей мере один эпитоп, предпочтительно эпитоп, который вызывает ответ В- или Т-клеток или ответ В-клеток и Т-клеток.
"Эпитоп", также известный как антигенная детерминанта, представляет собой ту часть вещества, например, иммуногенного полипептида, которая распознается иммунной системой. Предпочтительно указанное распознавание опосредуется связыванием антител, В-клеток или Т-клеток с рассматриваемым эпитопом. В указанном контексте термин "связывание" предпочтительно относится к специфичному связыванию. Эпитопы обычно состоят из химически активных поверхностных групп молекул, таких как боковые цепи аминокислот или сахара, и обычно имеют специфические трехмерные структурные характеристики, а также специфические характеристики заряда. Термин "эпитоп" включат как конформационные, так и неконформационные эпитопы. Конформационные и неконформационные эпитопы отличаются тем, что связывание с первыми, но не с последними, нарушается в присутствии денатурирующих растворителей.
В предпочтительных вариантах реализации иммуногенный полипептид в соответствии с настоящим изобретением предпочтительно получают из патогена, выбранного из группы, состоящей из вирусов, бактерий и простейших. Тем не менее, в альтернативном варианте реализации настоящего изобретения иммуногенный полипептид представляет собой опухолевый антиген, т.е. полипептид или фрагмент полипептида, специфично экспрессируемый раком.
Термин "идентичность последовательностей" применяют во всем объеме настоящего описания при сравнении полипептидных и нуклеотидных последовательностей. При сравнении двух последовательностей, если не указана эталонная последовательность, в сравнении с которой рассчитывают процент идентичности последовательностей, идентичность последовательностей следует рассчитывать со ссылкой на более длинную из двух последовательностей, подлежащих сравнению, если конкретно не указано иное. Если эталонная последовательность указана, идентичность последовательностей определяют на основе полной длины эталонной последовательности, обозначенной SEQ ID, если конкретно не указано иное. Например, при сравнении полипептидной последовательности, состоящей из 200 аминокислот, с эталонной полипептидной последовательностью длиной 300 аминокислот максимальный процент идентичности последовательностей может составлять 66,6% (200/300), тогда как для последовательности длиной 150 аминокислот максимальный процент идентичности последовательностей может составлять 50% (150/300). Если 15 из указанных 150 аминокислот отличаются от соответствующих аминокислот эталонной последовательности длиной 300 аминокислот, уровень идентичности последовательностей снижается до 45%. Сходство нуклеотидных и аминокислотных последовательностей, т.е. процент идентичности последовательностей, можно определять при помощи выравнивания последовательностей. Такие выравнивания можно проводить при помощи нескольких алгоритмов, известных в данной области техники, предпочтительно при помощи математического алгоритма Карлина и Альтшуля (Karlin & Altschul (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 5873-5877), при помощи hmmalign (пакет HMMER, http://hmmer.wustl.edu/) или при помощи алгоритма CLUSTAL (Thompson, J.D., Higgins, D.G. & Gibson, T.J. (1994) Nucleic Acids Res. 22, 4673-80), доступного, например, по адресу http://www.ebi.ac.uk/Tools/clustalw/, или по адресу http://www.ebi.ac.uk/Tools/clustalw2/index.html, или по адресу http://npsa-pbil.ibcp.fr/cgi-bin/npsa_automat.pl?page=/NPSA/npsa_clustalw.html. Предпочтительными применяемыми параметрами являются параметры по умолчанию, поскольку они установлены согласно http://www.ebi.ac.uk/Tools/clustalw/ или http://www.ebi.ac.uk/Tools/clustalw2/index.html. Степень идентичности последовательностей (совпадение последовательностей) можно рассчитывать с применением, например, BLAST, BLAT или BlastZ (или BlastX). Поиск белков с применением BLAST осуществляют при помощи программы BLASTP, вес выравнивания = 50, длина слова = 3. Для получения gapped-выравнивания для целей сравнения применяют Gapped BLAST, как описано в Altschul et al. (1997) Nucleic Acids Res. 25: 3389-3402. При применении программ BLAST и Gapped BLAST примеряют параметры по умолчанию для соответствующих программ. Анализ совпадения последовательностей можно дополнять установленными техниками картирования гомологов, такими как Shuffle-LAGAN (Brudno М., Bioinformatics 2003b, 19 Suppl 1:I54-I62), или с применением марковских случайных полей. Также можно применять структурные выравнивания для множественных последовательностей белков и/или структур с применением информации, полученной по результатам поиска в базах данных последовательностей, доступных гомологов с трехмерными структурами и определяемых пользователем ограничений (Pei J, Grishin NV: PROMALS: towards accurate multiple sequence alignments of distantly related proteins. Bioinformatics 2007, 23: 802-808; 3DCoffee@igs: веб-сервер для комбинирования последовательностей и структур при множественном выравнивании последовательностей. Poirot О, Suhre K, Abergel С, , Notredame С. Nucleic Acids Res. 2004 Jul 1; 32: W37-40). При упоминании в настоящей заявке процентов идентичности последовательностей указанные проценты рассчитывают относительно полной длины более длинной последовательности, если конкретно не указано иное.
Термин "метка", применяемый в контексте настоящего изобретения, относится к любому виду соединения, подходящего для диагностических целей. Предпочтительные соединения выбирают из флуоресцентного красителя, радиоизотопа и контрастного агента. Контрастный агент представляет собой краситель или другое вещество, которое помогает визуализировать аномальные области внутри тела. В одном из вариантов реализации термин "метка" относится к соединению, которое содержит хелатирующий агент, который образует комплекс с катионами двухвалентного или трехвалентного металла. Предпочтительные радиоизотопы/изотопы, испускающие флуоресценцию, выбирают из группы, состоящей из изотопов, испускающих альфа-излучение, изотопов, испускающих гамма-излучение, изотопов, испускающих Оже-электроны, изотопов, испускающих рентгеновское излучение, флуоресцентных изотопов, таких как 65Tb, изотопов, испускающих флуоресценцию, таких как 18F, 51Cr, 67Ga, 68Ga, 111In, 99mTc, 140La, 175Yb, 153Sm, 166Ho, 88Y, 89Zr, 90Y, 149Pm, 177Lu, 47Sc, 142Pr, 159Gd, 212Bi, 72As, 72Se, 97Ru, 109Pd, 105Rh, 101m15Rh, 119Sb, 128Ba, 123I, 124I, 131I, 197Hg, 211At, 169Eu, 203Pb, 212Pb, 64Cu, 67Cu, 188Re, 186Re, 198Au и 199Ag, а также конъюгатов, соединений, содержащих такие изотопы, и комбинаций указанных выше изотопов с белками, пептидами, низкомолекулярными ингибиторами, антителами или другими соединениями, например, 18F-фтордезоксиглюкоза (18F-ФДГ), 89Zr-оксид или 64Cu-порфирин. Предпочтительные флуоресцентные красители выбирают из следующих классов красителей: ксантены (например, флуоресцеин), акридины (например, акридин желтый), оксазины (например, оксазин 1), цинины (например, Су7/Су3), стириловые красители (например, Dye-28), кумарины (например, Alexa Fluor 350), порфины (например, хлорофилл В), комплексы металл-лиганд (например, PtOEPK), флуоресцентные белки (например, АРС, R-фикоэритрин), нанокристаллы (например, QuantumDot 705), перилены (например, люмоген красный F300) и фталоцианины (например, IRDYE™700DX), а также из конъюгатов и комбинаций указанных классов красителей или излучающих флуоресцентный 65Tb. Предпочтительные контрастные агенты выбирают из парамагнитных агентов, например, Gd, Eu, W и Mn, предпочтительно в комплексе с хелатирующим агентом. Другими вариантами являются суперпарамагнитные комплексы и частицы железа (Fe), соединения, содержащие атомы с высоким атомным числом, т.е. йод, для компьютерной томографии (КТ), микропузырьки и носители, такие как липосомы, которые содержат указанные контрастные агенты.
Термин "лейкоцит" применяют в контексте настоящего изобретения для обозначения клеток иммунной системы, которые участвуют в защите организма как от инфекционного заболевания, так и от инородных агентов. Все лейкоциты образуются в костном мозге и происходят из мультипотентных клеток, известных как гемопоэтические стволовые клетки. Лейкоциты обнаруживают во всем теле, включая кровеносную и лимфатическую системы. Все лейкоциты имеют ядра, которые отличают их от других клеток крови, безъядерных красных кровяных телец (ККТ) и тромбоцитов. Лейкоциты можно классифицировать по типам при помощи обычных способов. Две пары наиболее крупных категорий основаны на классификации по структуре (гранулоциты или агранулоциты) или по линии клеточного деления (миелоидные клетки или лимфоидные клетки). Указанные наиболее крупные категории можно дополнительно разделять на пять основных типов: нейтрофилы, эозинофилы, базофилы, лимфоциты и моноциты. Указанные типы отличаются по своим физическим и функциональным характеристикам. Моноциты и нейтрофилы являются фагоцитарными. Можно классифицировать дополнительные подтипы; например, среди лимфоцитов имеются В-клетки, Т-клетки и NK-клетки. Гранулоциты отличаются от агранулоцитов по форме ядра (дольчатая в сравнении с круглой, т.е. полиморфноядерные в сравнении с моноядерными) и по гранулам цитоплазмы (присутствующим или отсутствующим, более точно, видимым в световой микроскоп или не видимым таким образом). Другая дихотомия основана на линии дифференциации: миелоидные клетки (нейтрофилы, моноциты, эозинофилы и базофилы) отличаются от лимфоидных клеток (лимфоцитов) гемопоэтической линией дифференциации (линией дифференциации клеток).
Авторы настоящего изобретения наблюдали, что экспрессия CD45+ характерна для подгруппы клеток лейкоцитов, т.е. моноцитов, моноцитов-макрофагов, лимфоцитов, гранулоцитов, NK-клеток, которые подходят для применения в контексте системы направленной доставки согласно настоящему изобретению, в частности, поскольку клетки, представляющие собой CD45+ лейкоциты, притягиваются к определенным тканям и клеткам в теле, и способны доставлять комплексы одного или более железосвязывающих белков и одного или более фармацевтически активных веществ, меток или фармацевтически активных веществ и меток к клеткам или в них. Указанную подгруппу лейкоцитов в дальнейшем называют "клетками, представляющими собой CD45+ лейкоцит" или "CD45+ лейкоцитами". Предпочтительно моноцит не является дендритной клеткой, дифференциация которой контролируется одним или более из следующих факторов транскрипции: IFN-регуляторный фактор 8 (IRF8), ядерный фактор, регулирующий белок интерлейкин (IL)-3 (NFIL3), основной фактор транскрипции лейциновой молнии, ATF-подобный 3 (BATF3) или фактор транскрипции RelB (субъединица NF-KB) - RELB, Spi-1 протоонкоген (PU/1), рекомбинантный связывающий белковый супрессор безволосых (RBPJ), IFN-регуляторный фактор 4 (IRF4) или фактор транскрипции Е2-2 (также известный как (TCF4)).
Специалисту будет понятно, что клетки, представляющие собой CD45+ лейкоциты, как определено выше, за исключением случаев клонального происхождения, представляют собой смешанную популяцию различных лейкоцитов, которые обладают общим свойством экспрессии поверхностного антигена CD45+. Соответственно, субпопуляции клеток в разнообразной группе клеток, представляющих собой CD45+ лейкоциты, как определено выше, характеризуют во всем объеме настоящего описания по дополнительным функциональным и/или структурным характеристикам. Термин "CD45+" указывает, что большинство клеток в популяции клеток или по существу все клетки экспрессируют поверхностный антиген CD45+. В указанном контексте, а также со ссылкой на другие клеточные поверхностные антигены, термин "экспрессирует" указывает на то, что поверхностный антиген продуцируется в клетке и экспонируется на поверхности клетки с возможностью обнаружения. Уровень экспрессии и, таким образом, количество поверхностных антигенов, экспонированных на поверхности клетки с возможностью обнаружения, может сильно варьироваться для разных лейкоцитов. В целом, клетку считают положительной, т.е. ее обозначают, как "+", для клеточного поверхностного антигена, если по меньшей мере 5, предпочтительно по меньшей мере 10 копий поверхностного антигена экспонируются на поверхности клетки с возможностью обнаружения. Специалисту хорошо известно, как обнаруживать, количественно определять и производить отбор клеток, которые являются положительными (или отрицательными) для данного клеточного поверхностного антигена. Предпочтительные способы включают сортировку клеток с активированной флуоресценцией (FACS). В указанной технологии антитела с флуоресцентной меткой применяют для связывания с клеточными поверхностными антигенами популяции клеток, причем указанные клетки затем выделяют в отдельные клетки и на основе интенсивности флуоресценции, измеренной для отдельной клетки, характеризуют, как положительные или отрицательные для данного клеточного поверхностного антигена. В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения указывается, что экспрессия данного белка является высокой или низкой. Это означает, что белок экспрессируется с возможностью обнаружения в обоих случаях, т.е. обозначается, как "+", но на разных уровнях. Высокая и низкая экспрессии, соответственно, означают разные абсолютные количества белков на клетку для разных белков. Таким образом, можно считать, что данный белок экспрессируется на высоких уровнях, если имеется более 500 обнаруживаемых копий указанного белка на клетку, и экспрессируется на низких уровнях, если имеется от 1 до 50 обнаруживаемых копий указанного белка на клетку. Тем не менее можно считать, что другой белок экспрессируется на высоких уровнях, если имеется более 5000 обнаруживаемых копий, и экспрессируется на низких уровнях, если имеется от 1 до 500 обнаруживаемых копий на клетку. В данной области техники хорошо известно, как можно определять количество белков, экспрессируемых или продуцируемых в клетке, с применением проточной цитометрии и способа с применением калибровочных частиц Becton Dickinson Quantibrite™ (см., например, Pannu, K.K., 2001, Cytometry. 2001 Dec 1; 45(4): 250-8) или масс-спектрометрии (см., например, Milo, R., 2013, Bioessays, 35(12): 1050-1055). Для целей настоящего изобретения термин "высокая экспрессия" данного белка относится к обнаруживаемой экспрессии указанного белка, которая составляет по меньшей мере 70% от самого высокого обнаруженного уровня экспрессии, т.е. числа копий на клетку, в популяции здоровых CD45+ лейкоцитов. Термин "низка экспрессия" данного белка относится к обнаруживаемой экспрессии указанного белка, которая 30% или менее от самого высокого обнаруженного уровня экспрессии, т.е. числа копий указанного белка на клетку, в популяции здоровых CD45+ лейкоцитов. Предпочтительно "самый высокий уровень экспрессии" определяют, как среднее значение самых высоких уровней экспрессии, обнаруженных в здоровых CD45+ лейкоцитах у разных субъектов. В некоторых вариантах реализации предпочтительные субпопуляции клеток характеризуются, как "продуцирующие" данный белок. Под этим понимают, что белок не обязательно обнаруживается на поверхности клетки, и он может присутствовать только внутри клетки. Специалисту понятно, как обнаруживать и/или количественно определять образование белка внутри клетки и/или выбирать клетки, продуцирующие такие белки. В качестве альтернативы, клеточные популяции можно определять по экспрессии специфичных факторов транскрипции. В данной области техники хорошо известно, как определять экспрессию данного белка или его кодирующей мРНК в популяции клеток или даже в отдельных клетках, например, с применением мечения антителами in vivo, анализов FISH, флуоресцентной микроскопии одиночных молекул in vivo (Crawford, R. et al. Biophys J. (2013) 105(11): 2439), отдельно или в комбинации с сортировкой клеток с активированной флуоресценцией (FACS), или при помощи метода PrimeFlow (eBioscience) (Adam S. Venable, et al., (2015) Methods in Molecular Biology).
Термин "дифференцированный моноцит" применяют в контексте настоящего изобретения для обозначения моноцита, дифференцированного от коммитированного предшественника, обозначаемого как предшественник макрофагов-ДК (MDP), который в основном содержится в костном мозге (но может также присутствовать в селезенке), и дифференцирующегося в дендритные клетки или макрофаги. У мышей они состоят из двух основных субпопуляций: (i) CD11b+ клетка с высокой экспрессией CX3CR1, низкой экспрессией CCR2 и Ly6C-, и (ii) CD11b+ клетка с низкой экспрессией CX3CR1, высокой экспрессией CCR2 и Ly6C+. После выхода из костного мозга Ly6C+ моноциты мыши дифференцируются в кровотоке в Ly6C- моноциты. Аналогично, при дифференцировании моноцитов человека полагают, что классические CD14++ моноциты выходят из костного мозга и дифференцируются в промежуточные CD14++CD16+ моноциты, а затем в неклассические CD14+CD16++ моноциты в периферическом кровотоке (Yang et al. 2014; Biomark Res 2(1) doi. 10.1186/2050-7771-2-1). Предпочтительно дифференцированный моноцит не является дендритной клеткой, дифференциация которой контролируется одним или более из следующих факторов транскрипции: IRF8, NFIL3, BATF3, RELB, PU/1, RBPJ, IIRF4 и/или TCF4, и более предпочтительно не является дендритной клеткой.
Макрофаги представляют собой резидентные тканевые профессиональные фагоциты и антигенпрезентирующие клетки (АРС), которые отличаются от циркулирующих моноцитов периферической крови (РВМ). Термин "активированный макрофаг" применяют в контексте настоящего изобретения для обозначения любого поляризованного макрофага. Активацию макрофагов обычно достигают путем инкубирования с интерлейкинами, цитокинами и/или факторами роста. В частности, в качестве активирующих агентов можно применять IL-4 и М-КСФ. Активированные макрофаги разных фенотипов классифицируют на M1-макрофаги, классически активированные макрофаги (САМ) и М2-макрофаги, альтернативно активированные макрофаги (ААМ). Классически активированные M1-макрофаги включают иммунные эффекторные клетки с острым воспалительным фенотипом. Они очень агрессивны в отношении бактерий и продуцируют большое количество лимфокинов (Murray, and Wynn, 2011, J Leukoc Biol, 89(4): 557-63). Альтернативно активированные, противовоспалительные М2-макрофаги можно разделить по меньшей мере на три подгруппы. Указанные подтипы обладают множеством различных функций, включая регуляцию иммунитета, поддержание толерантности и восстановление тканей/заживление ран. Термин "M1-индуктор" применяют в контексте настоящего изобретения для обозначения соединения, которое управляет дифференцированием РВМ в макрофаги типа M1. Термин "М2-индуктор" применяют в контексте настоящего изобретения для обозначения соединения, которое управляет дифференцированием РВМ в макрофаги типа М2. Специалисту известно большое количество способов стимулирования дифференцирования в M1- или М2-макрофаги.
Термин "фагоцитоз макрофагами" представляет собой процесс, посредством которого макрофаг поглощает твердую частицу с образованием внутренней везикулы, известной, как фагосома.
Термин "железосвязывающий белок" применяют для обозначения белка, который нековалентно связывает ион железа. Примеры таких белков включают ферритин, гемоглобин, трансферрин и лактоферрин. Железосвязывающие белки связываются рецепторами клеточной поверхности, которые облегчают интернализацию указанных белков в клетки.
В первом аспекте настоящее изобретение относится к выделенной системе направленной доставки, содержащей CD45+ моноцит, CD45+ моноцит-макрофаг, CD45+ лимфоцит, CD45+ NK-клетку и/или CD45+ гранулоцит (далее называемый "клеткой, представляющей собой CD45+ лейкоцит"), содержащей в указанной клетке комплекс одного или более железосвязывающих белков и фармацевтически активного вещества, метки или фармацевтически активного вещества и метки. Предпочтительно CD45+ моноцит не является дендритной клеткой, дифференциация которой контролируется одним или более из следующих факторов транскрипции: IRF8, NFIL3, BATF3, RELB, PU/1, RBPJ, IIRF4 и/или TCF4, и более предпочтительно не является дендритной клеткой.
Авторы настоящего изобретения неожиданно обнаружили, что клетки, представляющие собой CD45+ лейкоциты, предпочтительно активированные макрофаги, предпочтительно M1-макрофаги, более предпочтительно М2-макрофаги захватывают фармацевтически активные вещества, метки или фармацевтически активные вещества и метки и доставляют фармацевтически активные вещества, метки или фармацевтически активные вещества и метки в количестве, достаточном (i) для обнаружения с применением систем визуализации, позволяющих применять их для отслеживания их местоположения в теле. В случае 18F-ФДГ это особенно предпочтительно для моноцитов и активированных моноцитов, макрофагов, активированных макрофагов, предпочтительно M1-макрофагов и наиболее предпочтительно М2-макрофагов. Введение клеток, нагруженных меткой (18F-ФДГ, 89Zr-оксид), предпочтительно радиоактивной меткой, можно визуализировать орган с накоплением меченых клеток, предпочтительно путем позитронно-эмиссионной томографии (ПЭТ), (ii) для проявления профилактического или терапевтического эффекта или одновременного проведения терапии и диагностики заболевания.
Во втором аспекте настоящее изобретение относится к выделенной системе направленной доставки метки, содержащей клетку, представляющую собой CD45+ лейкоцит, предпочтительно способную нести одну или более меток, предпочтительно радиоактивных меток, или их конъюгатов и комбинаций. В предпочтительном варианте реализации второго аспекта настоящего изобретения клетка непосредственно связана с меткой или помечена меткой. Метка может находиться в указанной клетке или на ее поверхности, предпочтительно она находится на поверхности клетки.
Следующие предпочтительные варианты реализации в каждом случае дополнительно определяют как первый, так и второй аспекты настоящего изобретения.
Способность данной клетки, представляющей собой CD45+ лейкоцит, или популяции клеток интернализировать железосвязывающие белки зависит от экспрессии рецепторов, участвующих в указанном процессе интернализации. Рецепторы, которые приводят к интернализации ферритина, включают, например, TfR, CXCR4, CD163 и TIM-2. Специалисту хорошо известно, как количественно измерять поглощение железосвязывающего белка, и предпочтительный способ измерения поглощения описан ниже в разделе "примеры". Авторы настоящего изобретения также отметили, что субпопуляции клеток, представляющих собой CD45+ лейкоциты, обладают определенной склонностью к интернализации одного железосвязывающего белка по сравнению с другим железосвязывающим белком и, таким образом, могут обеспечивать более высокие концентрации комплекса и/или демонстрировать меньшую утечку комплекса из клеток. Такие субпопуляции CD45+ лейкоцитов более подробно описаны ниже.
Фраза "комплекс одного или более железосвязывающих белков и фармацевтически активного вещества, метки или фармацевтически активного вещества и метки", применяемая в контексте настоящего изобретения, относится к композиции, в которой одна или более молекул фармацевтически активного вещества, метки или фармацевтически активного вещества и метки ковалентно или нековалентно связаны с одним или более железосвязывающими белками. Ковалентное или нековалентное связывание между одним или более железосвязывающими белками и одним или более фармацевтически активными веществами, метками или фармацевтически активными веществами и метками может являться прямым или непрямым. В последнем случае фармацевтически активное вещество, метка или фармацевтически активное вещество и метка связаны с железосвязывающим белком через линкер или спейсер. Специалисту известны линкеры или спейсеры, такие как полиаланин, полиглицин, углеводы, группы (СН2)n или полипептидные линкеры. Таким образом, специалист способен выбрать соответствующий(е) подходящий(е) линкер(ы) или спейсер(ы) в зависимости от соответствующего применения. Если железосвязывающие белки образуют кейдж-структуры, наподобие, например, ферритина, то термин "комплекс" также охватывает включения фармацевтически активных веществ, меток или фармацевтически активных веществ и меток в кейдж-структурах, даже при отсутствии ковалентной или нековалентной связи между белком(ами) и активным(и) соединением(ями). Образование комплекса позволяет переносить фармацевтически активное вещество, метку или фармацевтически активное вещество и метку в клетку, когда клетка интернализирует железосвязывающий белок. Таким образом, предпочтительно, чтобы фармацевтически активные вещества, метки или фармацевтически активные вещества и метки связывались с железосвязывающим белком таким образом, чтобы не препятствовать механизму переноса. Специалист легко может исследовать это с применением анализов поглощения, известных в данной области техники и описанных ниже в разделе "примеры". Предпочтительно, чтобы комплекс являлся достаточно стабильным для сохранения в процессе переноса в клетке до целевой области в теле. Таким образом, предпочтительно, чтобы комплекс, а не только фармацевтически активное вещество, метка или фармацевтически активное вещество и метка, доставлялся к клеткам или в клетки в целевой области. Указанное свойство также снижает возможные нежелательные эффекты, например, цитотоксичность фармацевтически активного вещества, метки или фармацевтически активного вещества и метки в отношении клетки, представляющей собой CD45+ лейкоцит. Если фармацевтически активные вещества, метки или фармацевтически активные вещества и метки ковалентно связаны с железосвязывающими белками, такое связывание предпочтительно осуществляется через аминокислотные остатки, которые, как известно, расположены в поверхностных областях, которые не участвуют в связывании с клеточными рецепторами, необходимыми для клеточного поглощения железосвязывающих белков. Железосвязывающие белки, применяемые в контексте настоящего изобретения, могут образовывать стабильные нековалентно связанные комплексы с широким спектром активных фармацевтически активных веществ, меток или фармацевтически активных веществ и меток. Если фармацевтически активное вещество или метка представляет собой пептид, например, антигенный пептид, предпочтительно, чтобы он не экспрессировался в виде гибрида с железосвязывающим белком, поскольку в указанном случае для освобождения пептида от железосвязывающего белка потребуется эндосомальная обработка всего гибридного белка на основе железосвязывающего белка и пептида.
Клетки, представляющие собой CD45+ лейкоциты, получают от пациента, который подлежит лечению, в таком случае клетка, нагруженная комплексом, будет аутологичной для пациента. Также предполагают, что пациентов распределяют по типам ГКГС перед лечением с применением направленной доставки согласно настоящему изобретению, и что тип клеток лейкоцитов, применяемый для данного пациента, совместим с ГКГС пациента. В двух указанных предпочтительных вариантах реализации клетка, представляющая собой CD45+ лейкоцит, представляет собой первичную клетку, или ее получают из первичной клетки, прошедшей небольшое количество стадий дифференцирования. В качестве альтернативы, клетку, представляющую собой CD45+ лейкоцит, можно получать из иммортализованной, но предпочтительно нетрансформированной линии клеток, представляющих собой CD45+ лейкоциты. Таким образом, кровь, применяемую для выделения клеток, представляющих собой CD45+ лейкоциты, т.е. CD45+ моноцита, CD45+ моноцит-макрофага, CD45+ гранулоцита или CD45+ лимфоцита, в частности, CD45+ NK-клетки, предпочтительно получают от пациента, подлежащего лечению, или от здорового донора. В качестве альтернативы, кровь можно получать из банка крови. В настоящем документе также рассматривается применение пуповинной крови.
Авторы настоящего изобретения отметили, что субпопуляция клеток, представляющих собой CD45+ лейкоциты, которые можно получить из CD34+ гемопоэтической клетки-предшественника, является особенно подходящей для специфичной направленной доставки фармацевтически активного вещества, метки или фармацевтически активного вещества и метки. Соответственно, предпочтительно, чтобы лейкоциты, применяемые для получения системы направленной доставки, получали из CD34+ гемопоэтических клеток-предшественников. Специалисту хорошо известно, как выбирать CD34+ гемопоэтические клетки-предшественники и как проводить дифференциацию указанных клеток в лейкоциты.
Как указано выше, термин "клетка, представляющая собой CD45+ лейкоцит" применяют во всем объеме настоящего описания для обозначения CD45+ моноцита, CD45+ моноцит-макрофага, CD45+ лимфоцита и/или CD45+. Предпочтительно моноцит не является дендритной клеткой, дифференциация которой контролируется одним или более из следующих факторов транскрипции: IRF8, NFIL3, BATF3, RELB, PU/1, RBPJ, IIRF4 и/или TCF4, и более предпочтительно не является дендритной клеткой. Предпочтительные субпопуляции в указанных общих категориях лейкоцитов далее определяют по структурным параметрам, например, наличие или отсутствие данного белка, функциональным свойствам и/или способу их образования/дифференцирования. Как указано выше, система направленной доставки согласно настоящему изобретению все еще обеспечивает описанные выше преимущества, если в популяции клеток не каждая клетка обладает конкретным свойством при условии, что большинство клеток в указанной популяции обладают указанным свойством. Таким образом, далее описано свойство одной из предпочтительных клеток системы направленной доставки согласно настоящему изобретению. Специалисту понятно, что фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению содержит миллионы клеток, и что не каждая клетка в популяции имеет функциональные и/или структурные свойства, описанные в настоящем документе, но при этом фармацевтическую композицию, тем не менее, можно применять для лечения заболевания, если большинство клеток обладают соответствующими функциональными и/или структурными свойствами.
Авторы настоящего изобретения установили, что субпопуляции клеток, представляющих собой CD45+ лейкоциты, обладают особенно предпочтительными свойствами, включая, помимо прочего, эффективность поглощения и/или количество поглощенного комплекса, в целом, способность удерживать комплекс в клетке, т.е. избегать утечки и нецелевого высвобождения фармацевтически активного вещества, метки или фармацевтически активного вещества и метки, эффективность поглощения конкретного железосвязывающего белка и/или направленной доставки к конкретным тканям или клеткам и, таким образом, применимость для лечения или облегчения конкретного заболевания. Авторы настоящего изобретения наблюдали, что, например, клетки, представляющие собой CD45+ лейкоциты, которые экспрессируют один или более из следующих антигенов: CD204, CD206, CD200R, CCR2, предпочтительно поглощают ферритин по сравнению с поглощением других железосвязывающих белков. Таким образом, если железосвязывающий белок в комплексе представляет собой ферритин, предпочтительно выбирать клетки, представляющие собой CD45+ лейкоциты, которые экспрессируют один или более из следующих антигенов: CD204, CD206, CD200R, CCR2. Соответственно, в предпочтительном варианте реализации настоящего изобретения:
(i) моноцит представляет собой CD11b+ моноцит, предпочтительно выбранный из группы, состоящей из CD11b+ CD14+ моноцита, CD11b+ CD16+ моноцита, CD11b+ CD14+ CD16+ моноцита, CD11b+ CD14+ MHCII+ моноцита, CD11b+ CD14+ CD115+ моноцита, CD11b+ CD114+ моноцита, CD11b+ CD116+ моноцита, CD11b+ CCR1+ моноцита, CD11b+ CCR2+ моноцита, CD11b+ CX3CR+ моноцита, CD11b+ CXR4+ моноцита, CD11b+ CXR6+ моноцита и CD11b+ CD14+ CD33+ моноцита, предпочтительно моноцит не является дендритной клеткой, дифференциация которой контролируется одним или более из следующих факторов транскрипции: IRF8, NFIL3, BATF3, RELB, PU/1, RBPJ, IIRF4 и/или TCF4, и более предпочтительно не является дендритной клеткой;
(ii) дифференцированный моноцит или моноцит-макрофаг дифференцируется посредством М-КСФ и выбран из группы, состоящей из макрофага, активированного макрофага, предпочтительно CD11b+ макрофага, более предпочтительно CD11b+ CD16+ макрофага, CD11b+ CD32+ макрофага, CD11b+ CD64+ макрофага, CD11b+ CD68+ макрофага, предпочтительно CD11b+ CD86+ M1-макрофага, предпочтительно продуцирующего индуцибельную синтазу оксида азота (iNOS) и/или секретирующего интерлейкин 12 (IL-12), или предпочтительно CD11b+ CCR2+ М2-макрофага, CD11b+ CD204+ М2-макрофага, CD11b+ CD206+ М2-макрофага, CD11b+ CD204+ CD206+ М2-макрофага, CD11b+ М2-макрофага (с низкой или высокой экспрессией) главного комплекса гистосовместимости II+ типа (MHCII+), CD11b+ CD200R+ М2-макрофага, CD11b+ CD163+ М2-макрофага или активированного макрофага, продуцирующего и/или секретирующего аргиназу-1 и/или интерлейкин 10 (IL-10); предпочтительно дифференцированный моноцит не является ксантомной клеткой, экспрессирующей лектин-подобный рецептор 1 окисленного липопротеина низкой плотности (Lox1+), рецептор С-Х-С-хемокинов 7 типа (CXCR7+) и ядерный фактор 2, подобный эритроидному деривату-2 (NRF2+). Ксантомная клетка представляет собой тип макрофаг, который локализуется в жировых отложениях на стенках кровеносных сосудов, где они поглощают липопротеины низкой плотности и нагружаются липидами, что придает им пенистый вид. Указанные клетки секретируют различные вещества, участвующие в росте бляшек, и их гибель провоцирует воспаление, тем самым, способствуя сердечно-сосудистым заболеваниям;
(iii) моноцит-макрофаг или активированный моноцит-макрофаг дифференцируется посредством М-КСФ и предпочтительно экспрессирует по меньшей мере один рецептор хемокинов, предпочтительно выбранный из группы, состоящей из CCR1, CCR2, CXCR4 и CXCR6, или по меньшей мере один рецептор фактора роста, предпочтительно выбранный из группы, состоящей из рецептора макрофагального колониестимулирующего фактора (CD115), рецептора гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (CD114) и рецептора гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора (состоящего из CD116 и CD131); моноциты с указанными характеристиками являются особенно подходящими для лечения воспалительных состояний и рака;
(iv) лимфоцит выбран из группы, состоящей из CD3+ и CD4+ или CD8+ Т-лимфоцита; или CD19+, CD20+, CD21+, CD19+ CD20+, CD19+ CD21+, CD20+ CD21+ или CD19+ CD20+ CD21+ В-лимфоцита; или натуральной клетки-киллера (NK), предпочтительно NK-клетка выбрана из группы, состоящей из CD56+ и без экспрессии CD3, или CD16+CD56+, CD56+CD94+, CD56+CD158a+, CD56+CD158f+, CD56+CD314+, CD56+CD335+ клетки; или
(v) гранулоцит выбран из группы, состоящей из нейтрофила, предпочтительно CD66b+ нейтрофила, эозинофила и базофила, предпочтительно CD193+ эозинофила.
В предпочтительном варианте реализации системы направленной доставки согласно настоящему изобретению активированный макрофаг:
(i) можно продуцировать путем инкубирования in vitro моноцита, или макрофага, или их предшественников с фактором, который способен изменять маркеры экспрессии на поверхности макрофагов, предпочтительно
(a) с по меньшей мере одним M1-индуктором,
(b) с по меньшей мере одним М2-индуктором,
(c) или с фактором, который способен изменять способность макрофагов секретировать цитокины, предпочтительно IL-10 и IL-12, хемокины и/или продуцировать iNOS, аргиназу или другие иммуномодулирующие ферменты; примеры таких факторов представляют собой: активированные тромбоциты, IL-4, IL-10, IL-13, иммунный комплекс антигена и антитела, IgG, термически активируемый гамма-глобулин, глюкокортикостероид, фактор роста опухоли-β (ФРО-β), IL-1R, лиганд СС-хемокина 2 (CCL-2), IL-6, макрофагальный колониестимулирующий фактор (М-КСФ), агонист рецептора γ, активирующего пролиферацию пероксисом (PPARγ), фактор ингибирования лейкоцитов (ФИЛ), аденозин, гельминтную и грибковую инфекции, липополисахарид (ЛПС), интерферон-γ (IFN-γ), вирусную и бактериальную инфекции; в этом отношении было отмечено, что активация моноцита M1-индуктором, в частности, ЛПС, вызывает в клетке экспрессию iNOS, что активация моноцита M1-индуктором, в частности, ЛПС, не вызывает в клетке экспрессию аргиназы-1, что активация моноцита М2-индуктором, в частности, IL-4, вызывает в клетке экспрессию аргиназы-1, и что активация моноцита М2-индуктором, в частности, IL-4, не вызывает в клетке экспрессию iNOS,
(ii) характеризуется экспрессией по меньшей мере одного из следующих антигенов: CD64, CD86, CD16, CD32, высокой экспрессией MHCII и/или продуцированием iNOS и/или IL-12;
(iii) можно продуцировать путем инкубирования in vitro моноцита или макрофага с фактором, который способен индуцировать способность макрофага к фагоцитозу, например, IL-18, опсонинами (например, полученными из комплемента белками, такими как iC3b, иммуноглобулин G), пептидом, связанным с геном кальцитонина (CGRP), липополисахаридом (ЛПС), интерфероном-γ (IFN-γ), вирусной инфекцией и/или бактериальной инфекцией;
(iv) характеризуется экспрессией по меньшей мере одного из следующих антигенов: CD204, CD206, CD200R; CCR2, рецептор трансферрина (TfR), рецептор 4 СХС-мотива хемокинов (CXCR4), CD163 и/или домен Т-клеточного иммуноглобулина и домен муцина 2 (TIM-2), и/или демонстрирует низкую экспрессию MHCII; активированные макрофаги, обладающие указанными свойствами, являются особенно подходящими для комплексов, содержащих ферритин в качестве железосвязывающего белка;
(v) обладает способностью к фагоцитозу; и/или
(vi) способен секретировать цитокины, предпочтительно IL-12 или IL-10, или продуцировать индуцибельную синтазу оксида азота (iNOS) (или другие провоспалительные соединения), аргиназу или другие иммуносупрессивные/противовоспалительные соединения.
В предпочтительном варианте реализации системы направленной доставки согласно настоящему изобретению M1-индуктор для дифференцирования макрофагов в M1-макрофаги выбран из группы, состоящей из липополисахарида (ЛПС), интерферона-γ (IFN-γ) и вирусной и бактериальной инфекций, и М2-индуктор для дифференцирования макрофагов в М2-макрофаги выбран из группы, состоящей из IL-4, IL-10, IL-13, иммунного комплекса антигена и антитела, IgG, термически активируемого гамма-глобулина, глюкокортикостероида, фактора роста опухоли-β (ФРО-β), IL-1R, лиганда СС-хемокина 2 (CCL-2), IL-6, макрофагального колониестимулирующего фактора (М-КСФ), агониста рецептора γ, активирующего пролиферацию пероксисом (PPARγ), фактора ингибирования лейкоцитов (ФИЛ), аденозина, гельминтной и грибковой инфекций.
Авторы настоящего изобретения неожиданно обнаружили, что комплекс, нагруженный M1-макрофагами и М2-макрофагами, является подходящим для направленной доставки активного агента в гипоксические ткани, предпочтительно в опухоль или ее метастазы. В целом, авторы настоящего изобретения наблюдали, что от 3 до 5% вводимых M1-макрофагов локализируются в области опухоли, в то время как приблизительно 35% М2-макрофагов демонстрируют специфичное направленное воздействие на опухоль. Тем не менее, указанное общее преимущество М2-макрофагов пропадает при применении комплекса, содержащего гемоглобин и лекарственное средство, поскольку в M1-макрофаги можно нагружать значительно большие количества указанного комплекса по сравнению с М2-макрофагами. В целом, указанный специфичный тропизм делает М2-макрофаги более подходящими для лечения опухолей и заболеваний, характеризующихся гипоксической тканью.
Авторы настоящего изобретения также обнаружили, что CCL2-активированные макрофаги (полученные из костного мозга) особенно подходят для направленного воздействия на лимфатические узлы, предпочтительно воспаленные лимфатические узлы. Таким образом, применение таких макрофагов является предпочтительным во всех случаях, в которых желательно направленное воздействие лимфатические узлы, в частности, для профилактической или терапевтической вакцинации, а также для диагностики воспаленных лимфатических узлов. Соответственно, загрузка CCL2-активированных макрофагов комплексами железосвязывающих белков и антигенов является предпочтительной.
В предпочтительном варианте реализации системы направленной доставки согласно настоящему изобретению моноцит-макрофаг:
(i) можно продуцировать из CD34+ гемопоэтической клетки-предшественника;
(ii) можно продуцировать путем инкубирования in vitro моноцитов с по меньшей мере одним индуктором, предпочтительно M1- или М2-индуктором, более предпочтительно по меньшей мере одним М2-индуктором;
(iii) характеризуется экспрессией по меньшей мере одного из следующих антигенов: TfR, CD163, TIM-2, CD14, CD16, CD33 и/или CD115;
(iv) характеризуется экспрессией по меньшей мере одного из следующих антигенов: TfR, CD163, TIM-2, CXCR4, CD14 и/или CD16; и/или
(v) обладает способностью к фагоцитозу; и/или
(vi) не является дендритной клеткой, дифференциация которой контролируется одним или более из следующих факторов транскрипции: IRF8, NFIL3, BATF3 или RELB, PU/1, RBPJ, IRF4 или TCF4.
В указанном варианте реализации системы направленной доставки согласно настоящему изобретению M1-индуктор для дифференцирования клеток моноцит-макрофагов выбран из группы, состоящей из ЛПС, IFN-γ или вирусной или бактериальной инфекции, или М2-индуктор для дифференцирования моноцитов выбран из группы, состоящей из IL-4, IL-10, IL-13, иммунного комплекса антигена и антитела, IgG, термически активируемых гамма-глобулинов, глюкокортикостероидов, ФРО-β, IL-1R, CCL-2, IL-6, М-КСФ, агониста PPARγ, фактора ингибирования лейкоцитов (ФИЛ), среды, кондиционированной раковыми клетками, раковых клеток, аденозина и гельминтной или грибковой инфекции.
Авторами настоящего изобретения неожиданно было обнаружено, что моноциты являются подходящими для направленной доставки активного агента в гипоксические ткани, предпочтительно в опухоль или ее метастазы, при этом моноциты, обработанные М2-активаторами, являются более подходящими для направленной доставки активного агента в гипоксические ткани, предпочтительно в опухоль или ее метастазы. Указанные специфичные тропизмы делают моноциты, обработанные М2-активаторами, более подходящими для направленного воздействия на опухоли и гипоксические участки, например, участки воспаления.
В предпочтительном варианте реализации системы направленной доставки согласно настоящему изобретению лимфоцит:
(i) можно получать из крови, селезенки или костного мозга или можно продуцировать из CD34+ клетки-предшественника, как известно специалисту, а также описано, например, в Lefort and Kim, 2010, J Vis Exp 40: 2017; Tassone and Fidler, 2012, Methods in Molecular Biology 882: 351-357; Kouro et al. 2005, Current Protocols in Immunology, 66:F22F.1:22F.1.1-22F.1.9;
(ii) представляет собой иммунологически компетентный лимфоцит;
(iii) экспрессирует антигенспецифичные Т-клеточные рецепторы; и/или
(iv) характеризуется экспрессией по меньшей мере одного из следующих антигенов: (a) CD3 и CD4 или CD8 или (b) CD19, CD20, CD21, CD19 CD20, CD19 CD21, CD20 CD21 или CD19 CD20 CD21 антиген, и предпочтительно способен продуцировать иммуноглобулины.
В особенно предпочтительном варианте реализации CD45+ лимфоциты представляют собой NK-клетку, которую
(i) можно получать из крови, селезенки или костного мозга или можно продуцировать из CD34+ клетки-предшественника; и/или
(ii) характеризуется отсутствием экспрессии CD3 и экспрессией по меньшей мере одного из следующих: CD56+ и/или CD94+, CD158a+ CD158f+ CD314+ CD335+.
В предпочтительном варианте реализации системы направленной доставки согласно настоящему изобретению гранулоцит:
(i) можно получать из крови, селезенки или костного мозга или можно продуцировать из CD34+ клетки-предшественника, как описано, например, в Kuhs et al. 2015, Curr Protoc Immunol 111:7.23-1-7.23.16; Coquery et al. 2012, Cytometry A 81(9): 806-814; Swemydas and Lionakis 2013, J Vis Exp 77: 50586;
(ii) характеризуется экспрессией по меньшей мере одного из следующих: CD66b и/или CD193;
(iii) представляет собой полиморноядерный лейкоцит, характеризующийся наличием гранул в своей цитоплазме; и/или
(iii) характеризуется экспрессией по меньшей мере одного из следующих: TfR, CD163, TIM-2, и/или CXCR4.
В предпочтительном варианте реализации системы направленной доставки согласно настоящему изобретению железосвязывающий белок выбран из группы, состоящей из ферритина, предпочтительно ферритина тяжелого (Н) типа, ферритина легкого (L) типа и/или митохондриального ферритина; гемоглобина, предпочтительно гемоглобина А, гемоглобина AS, гемоглобина SC, гемоглобина С, гемоглобина D, гемоглобина Е, гемоглобина F, гемоглобина Н; комплекса гемоглобин-гаптоглобин, гемопексина, трансферрина и лактоферрина. Термины "ферритин"; "гемоглобин", предпочтительно "гемоглобин А", "гемоглобин AS", "гемоглобин SC", "гемоглобин С", "гемоглобин D", "гемоглобин Е", "гемоглобин F", "гемоглобин Н"; "комплекс гемоглобин-гаптоглобин", "гемопексин", "трансферрин" и "лактоферрин" охватывают структурные варианты встречающихся в природе белков и, таким образом, относятся к белкам, которые обладают по меньшей мере 70%, предпочтительно по меньшей мере 75%, более предпочтительно по меньшей мере 80%, более предпочтительно по меньшей мере 85%, более предпочтительно по меньшей мере 90%, более предпочтительно по меньшей мере 95% более предпочтительно по меньшей мере 100% способностью соответствующего белка дикого типа связывать ион(ы) железа. Железосвязывающие белки, применяемые в контексте настоящего изобретения, предпочтительно имеют в качестве источника млекопитающее, более предпочтительно мышь, крысу, собаку, обезьяну, в частности, шимпанзе, или человека, наиболее предпочтительно человека. Консенсусные последовательности предпочтительных железосвязывающих белков, применяемых в контексте настоящего изобретения, показаны ниже на Фиг. 1. Предпочтительные структурные варианты основаны на последовательностях, указанных на Фиг. 1. Остатки, отмеченные X, варьируются для различных ферритинов, трансферринов и гемоглобинов млекопитающих. Изменение указанных остатков не оказывает решающего влияния на способность белков связываться с ионами железа. Соответственно, предпочтительно, чтобы мутации или делеции аминокислот влияли на один или более остатков, отмеченных X.
Белки плазмы всегда являлись предпочтительными носителями для доставки активных фармацевтических ингредиентов в терапии рака. Таким образом, альбумин, самый распространенный белок плазмы, в настоящее время применяют в терапевтических протоколах для доставки таксановых молекул и производных доксорубицина (Larsen МТ et al. 2016, Mol Cell Ther 27; 4:3).
Белки человека трансферрин и ферритин считаются эффективными носителями для доставки малых молекул или конъюгатов токсинов для специфичного направленного воздействия на раковые клетки. На сегодняшний день, несмотря на значительные усилия, эффективные комплексы лекарственных средств с трасферрином или ферритином не достигли клинического применения (Luck AN et al. 2013, Adv Drug Deliv Rev 65(8):1012-9).
Ферритин имеет архитектуру в виде кейдж-структуры и обладает способностью связывать железо, что можно использовать для инкапсулирования фармацевтически активных веществ и/или меток в его полости. Ферритины не содержатся в плазме в большом количестве, но их можно легко получать с высоким выходом в качестве рекомбинантных белков в общих векторах экспрессии белков, таких как клетки Escherichia coli. Н- или L-цепи ферритинов кодируются, как малый белок мономер (21 кДа и 19 кДа для Н- and L-целей, соответственно), который способен собираться в 24-мерную кейдж-подобную структуру, которая ограничивает полость диаметром 8 нм. Авторы настоящего изобретения в контексте работы согласно настоящему изобретению отметили, что гомополимеры Н-ферритина представляют собой предпочтительную белковую конструкцию для специфичной доставки инкапсулированных лекарственных средств в клетки, представляющие собой CD45+ лейкоциты, экспрессирующие TfR. Кроме того, Н-ферритин обеспечивает направленную доставку комплекса фармацевтически активных веществ, меток или фармацевтически активных веществ и меток к ядру клетки (и, следовательно, непосредственно доставляет ДНК-связывающие белки в ядро).
Очищенный трансферрин можно эффективно конъюгировать с различными молекулами, включая противораковые лекарственные средства, посредством ковалентных линкеров, которые соответствующим образом высвобождаются внутри клеток (Beyer U et al. 1998, J Med Chem 41(15): 2701-2708). В случае трансферрина, только лизиновые группы на поверхности белка уже доступны для ковалентного присоединения.
В прошлом гемоглобин рассматривали в качестве возможного носителя для лекарственных средств из-за его универсальности при химическом конъюгировании с лекарственными средствами, его присутствия в большом количестве и относительно стабильности в крови (Somatogen, 1993, WO 1993008842 A1). Тем не менее отсутствие свойств направленного воздействия на рецепторы не способствовало его биомедицинским применениям, отличным от применения в качестве заменителей крови или агента против серповидно-клеточной анемии. На самом деле, Hb может распознаваться только эпитопами CD163 (гаптоглобиновый/гемоглобиновый рецептор) на лейкоцитах, особенно моноцитарно-макрофагального происхождения. CD45+ лейкоцит, в частности, макрофаг для доставки белка, описанный в настоящей заявке, делает гемоглобин предпочтительным в качестве специфичного к мишени носителя фармацевтически активных веществ и/или меток. Гемоглобин можно легко ковалентно связывать с соответствующими фармацевтически активными веществами и/или метками, он может размещать гидрофобные фармацевтически активные вещества и/или метки в гемсвязывающем кармане или даже переносить малые молекулы, например, цитотоксические молекулы, связанные с гемовым железом. Hb можно легко модифицировать путем селективного присоединения соответствующего конъюгата лекарственного средства к остатку цистеина в положении 93 бета-цепи, единственному титруемому цистеину на поверхности белка. Лекарственные средства, функционализированные малеимидом, такие как ингибитор тубулина, монометилауристатин (ММАЕ), или лекарственное средство для перекрестного сшивания ДНК, пирролбензодиазепиновый димер (PBD), являются наиболее важными примерами чрезвычайно сильнодействующих цитотоксических препаратов, которые можно легко и специфично присоединять к соответствующему остатку цистеина в положении 93 бета-цепей.
В качестве альтернативы, остатки лизина на поверхности Hb (по меньшей мере 10 титруемых остатков лизина на тетрамер Hb) можно легко конъюгировать с лекарственным средством посредством расщепляемых сукцинимидных линкеров. Гемоглобин также обладает уникальной способностью к высвобождению нековалентно связанной гемовой группы при кислотных значениях рН. Получаемый таким образом апогемоглобин способен размещать в пустом гемовом кармане несколько гидрофобных молекул, как показано для паклитаксела (Meng Z et al. 2015 J Pharm Sci 104(3): 1045-55) или для меток с флуоресцентными свойствами (например, хлорин е6, гиперицин, производные фталоцианина) (Dong J et al. J Photochem Photobiol В 2014, 140: 163-172).
При любом способе конъюгирования/адсорбции/связывания гемоглобин (Hb), трансферрин (Tf) и ферритины представлены в настоящем изобретении в качестве предпочтительных носителей фармацевтически активных веществ и меток, нагруженных в соответствующие клеточные системы, обладающие свойствами направленного воздействия на опухоль, например, активированные макрофаги. Легкая, быстрая, дешевая и безопасная процедура очистки указанных белков также обеспечивает огромную практическую пользу.
На основе последовательностей ферритинов Н-типа, ферритинов L-типа, альфа-цепей гемоглобина, бета-цепей гемоглобина и трансферринов млекопитающих определяли консенсусную последовательность для каждого из указанных белков. Они показаны на Фиг. 1 в SEQ ID №: 2, 7, 9, 14, 16, 20 и 25, соответственно. Исходя из этого, а также на основе анализа делеции и структурного анализа, раскрытого в предшествующем уровне техники, определяли минимальный фрагмент для ферритинов Н-типа, ферритинов L-типа, альфа-цепей гемоглобина и бета-цепей гемоглобина млекопитающих, достаточный для поглощения CD45+ лейкоцитами. Они показаны в SEQ ID №: 1, 3, 5 (ферритин Н-типа); 8, 10, 12 (ферритин L-типа), 15 и 17 (альфа-цепь гемоглобина) и 19 и 21 (бета-цепь гемоглобина). Трансферрин содержит домен в N-концевой области и домен в С-концевой области, которые необходимы для связывания железа и поглощения CD45+ лейкоцитами, если они содержатся в одном полипептиде и расположены на расстоянии от 100 до 450 аминокислот друг от друга, предпочтительно от 150 до 400, более предпочтительно от 200 до 350 аминокислот и более предпочтительно от 250 до 320 аминокислот друг от друга. N-концевой домен содержит с 1 по 82 аминокислоты полноразмерного консенсусного трансферрина (SEQ ID №: 25) или полноразмерного трансферрина человека (SEQ ID №: 28). С-концевой домен содержит с 396 по 510 аминокислоты полноразмерного консенсусного трансферрина (SEQ ID №: 25) или полноразмерного трансферрина человека (SEQ ID №: 28). В каждом случае, когда X указывают в консенсусной последовательности, он независимо обозначает любую аминокислоту и характеризует аминокислоту, которая является не консервативной или слабо консервативной среди ферритинов Н-типа млекопитающих, которая может мутировать без ущерба или с незначительным ущербом в отношении железосвязывающих свойств соответствующего железосвязывающего белка. Предпочтительно, чтобы X в каждом случае принимал значение аминокислоты соответствующего железосвязывающего белка человека, выравненной с X. Указанную информацию можно взять, например, из Фиг. 1, на которой показаны выравнивания консенсусных последовательностей с белками человека, а в некоторых случаях с белками мыши.
Предпочтительные ферритины Н-типа содержат или состоят из аминокислотной последовательности, указанной в SEQ ID №: 1, и ее вариантов, обладающих по меньшей мере 70% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 75% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 80% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 85% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 90% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 95% идентичностью аминокислот, и в каждом случае по меньшей мере 70% способностью ферритина Н-типа, состоящего из аминокислотной последовательности в соответствии с SEQ ID №: 1, поглощаться CD45+ лейкоцитами, предпочтительно М2-лейкоцитами. В SEQ ID №: 1 X в положении 5 может присутствовать или отсутствовать, при этом в случае присутствия он обозначает любую аминокислоту, предпочтительно Ile, X в положении 6 обозначает любую аминокислоту, предпочтительно Asn, X в положении 14 обозначает любую аминокислоту, предпочтительно Tyr, X в положении 24 обозначает любую аминокислоту, предпочтительно Tyr или Cys, X в положении 66 обозначает любую аминокислоту, предпочтительно Phe, X в положении 68 обозначает любую аминокислоту, предпочтительно Gln, X в положении 75 обозначает любую аминокислоту, предпочтительно Arg или Cys, X в положении 90 обозначает любую аминокислоту, предпочтительно His, X в положении 94 обозначает любую аминокислоту, предпочтительно Ser или Asn, X в положении 120 может присутствовать или отсутствовать, при этом в случае присутствия он обозначает любую аминокислоту, предпочтительно His или Tyr, более предпочтительно His, X в положении 123 обозначает любую аминокислоту, предпочтительно Asn или Ser, более предпочтительно Asn, X в положении 128 обозначает любую аминокислоту, предпочтительно Ala или Ser, более предпочтительно Ala.
В предпочтительном варианте реализации ферритин Н-типа содержит или состоит из ферритина мыши в соответствии с SEQ ID №: 3. Соответственно, предпочтительные структурные варианты обладают по меньшей мере 70% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 75% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 80% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 85% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 90% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 95% идентичностью аминокислот, и в каждом случае по меньшей мере 70% способностью ферритина Н-типа, состоящего из аминокислотной последовательности в соответствии с SEQ ID №: 3, поглощаться CD45+ лейкоцитами, предпочтительно М2-макрофагами.
В предпочтительном варианте реализации ферритин Н-типа содержит или состоит из ферритина человека в соответствии с SEQ ID №: 5. Соответственно, предпочтительные структурные варианты обладают по меньшей мере 70% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 75% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 80% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 85% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 90% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 95% идентичностью аминокислот, и в каждом случае по меньшей мере 70% способностью ферритина Н-типа, состоящего из аминокислотной последовательности в соответствии с SEQ ID №: 5, поглощаться CD45+ лейкоцитами, предпочтительно М2-макрофагами.
В предпочтительном варианте реализации ферритин Н-типа содержит или состоит из консенсусной последовательности млекопитающего, полученной путем выравнивания полноразмерных ферритинов Н-типа в соответствии с SEQ ID №: 2 или 7, при этом 2 является предпочтительной. Соответственно, предпочтительные структурные варианты обладают по меньшей мере 70% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 75% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 80% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 85% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 90% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 95% идентичностью аминокислот, и в каждом случае по меньшей мере 70% способностью ферритина Н-типа, состоящего из аминокислотной последовательности в соответствии с SEQ ID №: 2 или 7, при этом 2 является предпочтительной, поглощаться CD45+ лейкоцитами, предпочтительно М2-макрофагами. В SEQ ID №: 2 X в положении 6 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Pro, X в положении 14 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно His, X в положении 16 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Asp, X в положении 21 может присутствовать или отсутствовать, при этом в случае присутствия он обозначает любую аминокислоту, предпочтительно Ile, X в положении 22 обозначает любую аминокислоту, предпочтительно Asn, X в положении 30 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Tyr, X в положении 40 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Tyr или Cys, более предпочтительно Tyr, X в положении 82 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Phe, X в положении 84 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Gln, X в положении 91 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Arg или Cys, более предпочтительно Cys, X в положении 106 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно His, X в положении 110 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Asn или Ser, более предпочтительно Asn, X в положении 137 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно His или Tyr, более предпочтительно His, X в положении 140 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Asn или Ser, более предпочтительно Asn, X в положении 145 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Ala или Ser, более предпочтительно Ala, X в положении 164 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Ala или Ser, более предпочтительно Ser, X в положении 166 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Met или Leu, предпочтительно Leu, X в положении 178 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Asp или His, более предпочтительно Asp, X в положении 181 отсутствует или представляет собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Asn, X в положении 182 отсутствует или представляет собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Glu, X в положении 183 отсутствует или представляет собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Ser. В SEQ ID №: 7 X в положении 6 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Pro, X в положении 14 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно His, X в положении 16 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Asp, X в положении 21 может присутствовать или отсутствовать, при этом в случае присутствия он обозначает любую аминокислоту, предпочтительно Ile, X в положении 29 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Tyr, X в положении 81 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Phe, X в положении 83 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Gln, X в положении 105 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно His, X в положении 144 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Ala или Ser, более предпочтительно Ala, X в положении 180 отсутствует или представляет собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Asn, X в положении 181 отсутствует или представляет собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Glu, X в положении 182 отсутствует или представляет собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Ser.
В предпочтительном варианте реализации ферритин Н-типа содержит или состоит из полноразмерного ферритина мыши в соответствии с SEQ ID №: 4, являющейся предпочтительной. Соответственно, предпочтительные структурные варианты обладают по меньшей мере 70% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 75% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 80% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 85% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 90% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 95% идентичностью аминокислот, и в каждом случае по меньшей мере 70% способностью ферритина мыши Н-типа, состоящего из аминокислотной последовательности в соответствии с SEQ ID №: 4, поглощаться CD45+ лейкоцитами, предпочтительно М2-макрофагами.
В предпочтительном варианте реализации ферритин Н-типа содержит или состоит из полноразмерного ферритина человека в соответствии с SEQ ID №: 6, являющейся предпочтительной. Соответственно, предпочтительные структурные варианты обладают по меньшей мере 70% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 75% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 80% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 85% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 90% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 95% идентичностью аминокислот, и в каждом случае по меньшей мере 70% способностью ферритина человека Н-типа, состоящего из аминокислотной последовательности в соответствии с SEQ ID №: 6, поглощаться CD45+ лейкоцитами, предпочтительно М2-макрофагами.
Предпочтительные ферритины L-типа содержат или состоят из аминокислотной последовательности, указанной в SEQ ID №: 8, и ее вариантов, обладающих по меньшей мере 70% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 75% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 80% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 85% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 90% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 95% идентичностью аминокислот, и в каждом случае по меньшей мере 70% способностью ферритина L-типа, состоящего из аминокислотной последовательности в соответствии с SEQ ID №: 8, поглощаться CD45+ лейкоцитами, предпочтительно М2-лейкоцитами. В SEQ ID №: 8 X в положении 5 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Asp или Glu, более предпочтительно Asp, X в положении 12 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Arg или Ser, более предпочтительно Ser, X в положении 17 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Ser или Arg, более предпочтительно Ser, X в положении 19 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Arg или Gln, более предпочтительно Gln, X в положении 29 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Phe, X в положении 30 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Tyr или Phe, более предпочтительно Tyr, X в положении 42 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Ser или Gly, более предпочтительно Ser, X в положении 56 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Ala или Tyr, более предпочтительно Tyr, X в положении 61 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Glu или Lys, более предпочтительно Lys, X в положении 62 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Met или Phe, более предпочтительно Met, X в положении 65 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Asp или Gln, более предпочтительно Gln, X в положении 75 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Ilе или Val, более предпочтительно Ilе, X в положении 76 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Lys или Gln, более предпочтительно Lys, X в положении 79 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Ala или Ser, более предпочтительно Ala, X в положении 80 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Glu или Gln, более предпочтительно Gln, X в положении 87 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Pro или Gln, более предпочтительно Pro, X в положении 88 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Glu или Asp, более предпочтительно Asp, X в положении 91 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Glu или Lys, более предпочтительно Lys, X в положении 94 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Met или Leu, более предпочтительно Leu, X в положении 96 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Met или Leu, более предпочтительно Met, X в положении 99 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Lys или Asn, предпочтительно Lys, X в положении 115 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Thr или Ala, более предпочтительно Thr, X в положении 119 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Leu, X в положении 125 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Ser или Thr, более предпочтительно Thr, X в положении 127 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Tyr или Phe, более предпочтительно Phe, X в положении 130 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Lys или Glu, более предпочтительно Glu, X в положении 140 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Asp или Asn, более предпочтительно Asp, X в положении 146 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Arg или His, более предпочтительно His, и X в положении 148 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Leu или Val, более предпочтительно Leu.
В предпочтительном варианте реализации ферритин L-типа содержит или состоит из ферритина мыши L-типа в соответствии с SEQ ID №: 10. Соответственно, предпочтительные структурные варианты обладают по меньшей мере 70% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 75% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 80% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 85% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 90% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 95% идентичностью аминокислот, и в каждом случае по меньшей мере 70% способностью ферритина L-типа, состоящего из аминокислотной последовательности в соответствии с SEQ ID №: 10, поглощаться CD45+ лейкоцитами, предпочтительно М2-макрофагами.
В предпочтительном варианте реализации ферритин L-типа содержит или состоит из ферритина человека в соответствии с SEQ ID №: 12. Соответственно, предпочтительные структурные варианты обладают по меньшей мере 70% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 75% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 80% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 85% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 90% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 95% идентичностью аминокислот, и в каждом случае по меньшей мере 70% способностью ферритина L-типа, состоящего из аминокислотной последовательности в соответствии с SEQ ID №: 12, поглощаться CD45+ лейкоцитами, предпочтительно М2-макрофагами.
В предпочтительном варианте реализации ферритин L-типа содержит или состоит из консенсусной последовательности млекопитающего, полученной путем выравнивания полноразмерных ферритинов Н-типа в соответствии с SEQ ID №: 9 или 14, при этом 9 является предпочтительной. Соответственно, предпочтительные структурные варианты обладают по меньшей мере 70% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 75% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 80% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 85% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 90% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 95% идентичностью аминокислот, и в каждом случае по меньшей мере 70% способностью ферритина L-типа, состоящего из аминокислотной последовательности в соответствии с SEQ ID №: 9 или 14, при этом 9 является предпочтительной, поглощаться CD45+ лейкоцитами, предпочтительно М2-макрофагами. В SEQ ID №: 9 X в положении 12 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Asp или Glu, более предпочтительно Asp, X в положении 19 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Ser или Arg, более предпочтительно Ser, X в положении 24 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Ser или Arg, более предпочтительно Ser, X в положении 26 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Arg или Gln, более предпочтительно Gln, X в положении 36 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Phe, X в положении 37 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Tyr или Phe, более предпочтительно Tyr, X в положении 47 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Ser или Gly, более предпочтительно Ser, X в положении 63 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Ala or Tyr, более предпочтительно Tyr, X в положении 68 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Glu или Lys, более предпочтительно Lys, X в положении 69 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Met или Phe, более предпочтительно Met, X в положении 72 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Asp или Gln, более предпочтительно Gln, X в положении 82 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Ilе или Val, более предпочтительно Ile, X в положении 83 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Lys или Gln, более предпочтительно Lys, X в положении 86 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Ala или Ser, более предпочтительно Ala, X в положении 87 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Glu или Gln, более предпочтительно Gln, X в положении 94 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Pro или Gln, более предпочтительно Pro, X в положении 95 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Glu или Asp, более предпочтительно Asp, X в положении 98 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Glu или Lys, более предпочтительно Lys, X в положении 101 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Met или Leu, более предпочтительно Leu, X в положении 103 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Met или Leu, более предпочтительно Met, X в положении 106 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Lys или Asn, предпочтительно Lys, X может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, X в положении 126 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Leu, X в положении 132 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Ser или Thr, более предпочтительно Thr, X в положении 134 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Tyr или Phe, более предпочтительно Phe, X в положении 137 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Lys или Glu, более предпочтительно Glu, X в положении 147 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Asp или Asn, более предпочтительно Asp, X в положении 153 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Arg или His, более предпочтительно His, X в положении 155 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Leu или Val, более предпочтительно Leu, X в положении 161 может отсутствовать или представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Ala, X в положении 163 может отсутствовать или представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Thr, X в положении 166 может отсутствовать или представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Pro, и X в положении 168 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Gly или Ala, более предпочтительно Ala. В SEQ ID №: 14 X в положении 36 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Phe, X в положении 37 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Tyr или Phe, более предпочтительно Tyr, X в положении 94 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Pro или Gln, более предпочтительно Pro, X в положении 126 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Leu, X в положении 137 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Lys или Glu, более предпочтительно Glu, X в положении 147 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Asp или Asn, более предпочтительно Asp, X может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, X в положении 163 может отсутствовать или представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Thr, X в положении 166 может отсутствовать или представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Pro, X в положении 168 может представлять собой любую встречающуюся в природе аминокислоту, предпочтительно Gly или Ala, более предпочтительно Ala.
В предпочтительном варианте реализации ферритин L-типа содержит или состоит из полноразмерного ферритина мыши в соответствии с SEQ ID №: 11, являющейся предпочтительной. Соответственно, предпочтительные структурные варианты обладают по меньшей мере 70% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 75% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 80% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 85% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 90% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 95% идентичностью аминокислот, и в каждом случае по меньшей мере 70% способностью ферритина мыши L-типа, состоящего из аминокислотной последовательности в соответствии с SEQ ID №: 11, поглощаться CD45+ лейкоцитами, предпочтительно М2-макрофагами.
В предпочтительном варианте реализации ферритин L-типа содержит или состоит из полноразмерного ферритина человека в соответствии с SEQ ID №: 13, являющейся предпочтительной. Соответственно, предпочтительные структурные варианты обладают по меньшей мере 70% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 75% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 80% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 85% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 90% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 95% идентичностью аминокислот, и в каждом случае по меньшей мере 70% способностью ферритина человека L-типа, состоящего из аминокислотной последовательности в соответствии с SEQ ID №: 13, поглощаться CD45+ лейкоцитами, предпочтительно М2-макрофагами.
В предпочтительном варианте реализации альфа-гемоглобин содержит или состоит из минимальной консенсусной последовательности млекопитающего, полученной в результате выравнивания полноразмерных альфа-гемоглобинов в соответствии с SEQ ID №: 15. Предпочтительно он содержит или состоит из аминокислотной последовательности, указанной в SEQ ID №: 15, и ее вариантов, обладающих по меньшей мере 70% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 75% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 80% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 85% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 90% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 95% идентичностью аминокислот, и в каждом случае по меньшей мере 70% способностью альфа-гемоглобина, состоящего из аминокислотной последовательности в соответствии с SEQ ID №: 15, поглощаться CD45+ лейкоцитами, предпочтительно M1-макрофагами.
В предпочтительном варианте реализации альфа-гемоглобин содержит или состоит из минимальной аминокислотной последовательности человека, полученной из альфа-гемоглобина в соответствии с SEQ ID №: 17. Соответственно, предпочтительные структурные варианты обладают по меньшей мере 70% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 75% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 80% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 85% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 90% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 95% идентичностью аминокислот, и в каждом случае по меньшей мере 70% способностью альфа-гемоглобина, состоящего из аминокислотной последовательности в соответствии с SEQ ID №: 17, поглощаться CD45+ лейкоцитами, предпочтительно M1-макрофагами.
В предпочтительном варианте реализации альфа-гемоглобин содержит или состоит из консенсусной последовательности млекопитающего, полученной в результате выравнивания полноразмерных альфа-гемоглобинов в соответствии с SEQ ID №: 16. Соответственно, предпочтительные структурные варианты обладают по меньшей мере 70% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 75% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 80% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 85% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 90% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 95% идентичностью аминокислот, и в каждом случае по меньшей мере 70% способностью альфа-гемоглобинов, состоящих из аминокислотной последовательности в соответствии с SEQ ID №: 16, поглощаться CD45+ лейкоцитами, предпочтительно М2-макрофагами.
В предпочтительном варианте реализации альфа-гемоглобин содержит или состоит из полноразмерного альфа-гемоглобина человека в соответствии с SEQ ID №: 18. Соответственно, предпочтительные структурные варианты обладают по меньшей мере 70% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 75% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 80% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 85% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 90% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 95% идентичностью аминокислот, и в каждом случае по меньшей мере 70% способностью полноразмерного альфа-гемоглобина человека, состоящего из аминокислотной последовательности в соответствии с SEQ ID №: 18, поглощаться CD45+ лейкоцитами, предпочтительно М2-макрофагами.
В предпочтительном варианте реализации альфа-гемоглобин содержит или состоит из минимальной консенсусной последовательности млекопитающего, полученной в результате выравнивания полноразмерных бета-гемоглобинов в соответствии с SEQ ID №: 19, и ее вариантов, обладающих по меньшей мере 70% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 75% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 80% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 85% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 90% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 95% идентичностью аминокислот, и в каждом случае по меньшей мере 70% способностью бета-гемоглобина, состоящего из аминокислотной последовательности в соответствии с SEQ ID №: 19, поглощаться CD45+ лейкоцитами, предпочтительно M1-макрофагами.
В предпочтительном варианте реализации альфа-гемоглобин содержит или состоит из минимальной аминокислотной последовательности человека, полученной из бета-гемоглобина человека в соответствии с SEQ ID №: 21. Соответственно, предпочтительные структурные варианты обладают по меньшей мере 70% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 75% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 80% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 85% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 90% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 95% идентичностью аминокислот, и в каждом случае по меньшей мере 70% способностью бета-гемоглобина, состоящего из аминокислотной последовательности в соответствии с SEQ ID №: 21, поглощаться CD45+ лейкоцитами, предпочтительно M1-макрофагами.
В предпочтительном варианте реализации бета-гемоглобин содержит или состоит из консенсусной последовательности млекопитающего, полученной в результате выравнивания полноразмерных бета-гемоглобинов в соответствии с SEQ ID №: 20. Соответственно, предпочтительные структурные варианты обладают по меньшей мере 70% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 75% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 80% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 85% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 90% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 95% идентичностью аминокислот, и в каждом случае по меньшей мере 70% способностью бета-гемоглобина, состоящего из аминокислотной последовательности в соответствии с SEQ ID №: 20, поглощаться CD45+ лейкоцитами, предпочтительно М2-макрофагами.
В предпочтительном варианте реализации бета-гемоглобин содержит или состоит из полноразмерного бета-гемоглобина человека в соответствии с SEQ ID №: 22. Соответственно, предпочтительные структурные варианты обладают по меньшей мере 70% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 75% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 80% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 85% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 90% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 95% идентичностью аминокислот, и в каждом случае по меньшей мере 70% способностью полноразмерного бета-гемоглобина человека, состоящего из аминокислотной последовательности в соответствии с SEQ ID №: 22, поглощаться CD45+ лейкоцитами, предпочтительно М2-макрофагами.
В предпочтительном варианте реализации трансферрин содержит или состоит из консенсусной последовательности млекопитающего, полученной в результате выравнивания полноразмерных альфа-гемоглобинов в соответствии с SEQ ID №: 25. Таким образом, в частности, предпочтительные трансферрины содержат или состоят из аминокислотной последовательности, указанной в SEQ ID №: 25, и ее вариантов, обладающих по меньшей мере 70% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 75% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 80% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 85% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 90% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 95% идентичностью аминокислот, и в каждом случае по меньшей мере 70% способностью трансферрина, состоящего из аминокислотной последовательности в соответствии с SEQ ID №: 25, поглощаться CD45+ лейкоцитами, предпочтительно M1-макрофагами.
В предпочтительном варианте реализации трансферрин содержит или состоит из трансферрина человека в соответствии с SEQ ID №: 28. Соответственно, предпочтительные структурные варианты обладают по меньшей мере 70% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 75% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 80% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 85% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 90% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 95% идентичностью аминокислот, и в каждом случае по меньшей мере 70% способностью трансферрина, состоящего из аминокислотной последовательности в соответствии с SEQ ID №: 28, поглощаться CD45+ лейкоцитами, предпочтительно M1-макрофагами.
Железосвязывающие свойства трансферринов зависят от доменов в N-концевой и С-концевой областях. Таким образом, в предпочтительном варианте реализации трансферрин, применяемый в настоящем изобретении, содержит по меньшей мере N-концевой домен в соответствии с SEQ ID №: 23 и С-концевой домен в соответствии с SEQ ID №: 24. Предпочтительный трансферрин содержит белки, которые содержат аминокислотную последовательность, указанную в SEQ ID №: 23 и 24, а также ее варианты, обладающие по меньшей мере 70% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 75% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 80% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 85% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 90% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 95% идентичностью аминокислот, в каждом случае по меньшей мере 70% способностью трансферрина, состоящего из аминокислотной последовательности в соответствии с SEQ ID №: 23 и 24, поглощаться CD45+ лейкоцитами, предпочтительно M1-макрофагами. SEQ ID №: 23 или 24 обозначает консенсусную последовательность трансферринов млекопитающих.
Таким образом, в предпочтительном варианте реализации трансферрин, применяемый в настоящем изобретении, содержит по меньшей мере N-концевой домен в соответствии с SEQ ID №: 26 и С-концевой домен в соответствии с SEQ ID №: 27. Предпочтительный трансферрин содержит белки, которые содержат аминокислотную последовательность, указанную в SEQ ID №: 26 и 27, а также ее варианты, обладающие по меньшей мере 70% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 75% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 80% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 85% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 90% идентичностью аминокислот, более предпочтительно по меньшей мере 95% идентичностью аминокислот, в каждом случае по меньшей мере 70% способностью трансферрина, состоящего из аминокислотной последовательности в соответствии с SEQ ID №: 26 и 27, соответственно, поглощаться CD45+ лейкоцитами, предпочтительно M1-макрофагами.
Предпочтительные ферритины также содержат белки, которые независимо от заданной аминокислотной последовательности собираются в состоящую из 24 субъединиц структуру белкового модуля в виде четырехспирального пучка, соответствующую выравниванию заданных последовательностей отдаленно родственных белков, что определяют путем выравниваний на основе трехмерных структур.
Авторы настоящего изобретения неожиданно наблюдали, что моноциты, макрофаги и предпочтительно М2-макрофаги способны поглощать количество метки, достаточное для придания им видимости при применении методов визуализации в месте их накопления (например, в опухоли или ее метастазах, области гипоксии). Неожиданно, авторы настоящего изобретения обнаружили, что лимфоциты и М2-макрофаги лучше поглощают комплексы, содержащие один или более ферритинов и одно или более фармацевтически активных веществ, меток или фармацевтически активных веществ и меток, что M1-макрофаги лучше поглощают комплексы, содержащие один или более гемоглобинов и одно или более фармацевтически активных веществ, меток или фармацевтически активных веществ и меток, и что макрофаги лучше поглощают комплексы, содержащие один или более трансферринов и одно или более фармацевтически активных веществ, меток или фармацевтически активных веществ и меток. Соответственно, на основе тканевого и клеточного тропизма CD45+ лейкоцитов: моноциты, M1- и М2-макрофаги, гранулоциты и лимфоциты, описанные выше комплексы, содержащие один или более ферритины и одно или более фармацевтически активных веществ, меток или фармацевтически активных веществ и меток, применяют для нагрузки М2-макрофагов, лимфоцитов или моноцитов, если желателен тропизм М2-макрофагов, лимфоцитов или моноцитов, и комплексы, содержащие один или более гемоглобинов и одно или более фармацевтически активных веществ, меток или фармацевтически активных веществ и меток, применяют для нагрузки M1-макрофагов, если желателен тропизм M1-макрофагов.
В предпочтительном варианте реализации системы направленной доставки согласно настоящему изобретению фармацевтически активное вещество, метка или фармацевтически активное вещество и метка выбраны из группы, состоящей из белка, нуклеиновой кислоты, химического небелкового соединения, не являющегося нуклеиновой кислотой, с молекулярной массой менее 1,5 кДа, более предпочтительно менее 1 кДа, предпочтительно противоракового лекарственного средства, в частности, цитостатического лекарственного средства, цитотоксического лекарственного средства и их пролекарств; противоартериосклеротического лекарственного средства; и противовоспалительного лекарственного средства; и фотосенсибилизирующего соединения; вируса, в частности, онколитического вируса; и радиоизотопа, испускающего α- или β-излучение, который также испускает γ-излучение в количестве, вызывающем повреждение клеток, предпочтительно выбранного из группы, состоящей из лютеция-177, иттербия-90, йода-131, самария-153, фосфора-32, цезия-131, палладия-103, радия-233, йода-125 и бора-10, или α-излучение в количестве, вызывающем повреждение клеток, предпочтительно выбранного из группы, состоящей из актиния-225, висмута-213, свинца-212 и полония-212. Также предпочтительным является комплекс указанных выше соединений и изотопов, связанный с наночастицами (например, золота, серебра, графена), или указанные наночастицы.
Предпочтительные противораковые лекарственные средства выбраны из лекарственного средства, индуцирующего апоптоз/аутофагию или некроз. Лекарственное средство, индуцирующее апоптоз/аутофагию или некроз, может представлять собой любое лекарственное средство, которое способно эффективно индуцировать апоптоз/аутофагию или некроз даже в клетках с аномальной пролиферацией. Указанные лекарственные средства предпочтительно применяют в комплексах с одним или более ферритинами.
Предпочтительные противораковые лекарственные средства выбраны из группы, состоящей из лекарственного средства, индуцирующего апоптоз, алкилирующего вещества, антиметаболитов, антибиотиков, эпотилонов, агонистов и антагонистов ядерных рецепторов, антиандрогена, антиэстрогена, соединения платины, гормона, антигормона, интерферона, ингибитора зависимых от клеточного цикла протеинкиназ (CDK), ингибитора циклооксигеназ и/или липоксигеназ, биогенной жирной кислоты, производного биогенной жирной кислоты, включая простаноиды и лейкотриены, ингибитора протеинкиназ, ингибитора протеинфосфатаз, ингибитора липидкиназ, координационного комплекса платины, этиленимина, метилмеламина, триазина, алкалоида барвинка, пиримидинового аналога, пуринового аналога, алкилсульфоната, аналога фолиевой кислоты, антрацендиона, замещенной мочевины, производного метилгидразина, ендиинового антибиотика, ингибитора полимеризации тубулина, такого как майтанзиноид или производное ауристатина, ингибитора иммунных контрольных точек и ингибитора опухолеспецифичного белка или маркера, предпочтительно ингибитора диссоциации Rho-GDP, более предпочтительно Grp94, или ингибитора AXL.
Другие предпочтительные противораковые лекарственные средства выбраны из группы, состоящей из ацедиасульфона, акларубицина, амбазона, аминоглютетимида, L-аспарагиназы, азатиоприна, баноксантрона, бендамустина, блеомицина, бусульфана, фолината кальция, карбоплатина, карпецитабина, кармустина, целекоксиба, хлорамбуцила, цисплатина, кладрибина, циклофосфамида, цитарабина, дакарбазина, дактиномицина, дапсона, даунорубицина, дибромпропамидина, диэтилстильбестрола, доцетаксела, доксорубицина, ендиинов, эпирубицина, эпотилона В, эпотилона D, эстрамустина фосфата, эстрогена, этинилэстрадиола, этопозида, флавопиридола, флоксуридина, флударабина, фторурацила, флуоксиместерона, флутамида, фосфоэстрола, фуразолидона, гемцитабина, аналога гонадотропин-высвобождающего гормона, гексаметилмеламина, гидроксикарбамида, гидроксиметилнитрофурантоина, гидроксипрогестеронкапроата, гидроксимочевины, идарубицина, идоксуридина, ифосфамида, интерферона-α, иринотекана, лейпролида, ломустина, луртотекана, мафенида сульфатоламида, мехлорэтамина, медроксипрогестерона ацетата, мегастролацетата, мелфалана, мепакрина, меркаптопурина, метотрексата, метронидазола, митомицина С, митоподозида, митотана, митоксантрона, митрамицина, налидиксовой кислоты, нифуратела, нифуроксазида, нифуралазина, нифуртимокса, нимустина, ниноразола, нитрофурантоина, азотистых ипритов, олеомуцина, оксолиновой кислоты, пентамидина, пентостатина, феназопиридина, фталилсульфатиазола, пипобромана, преднимустина, преднизона, преуссина, прокарбазина, пириметамина, ралтитрекседа, рапамицина, рофекоксиба, розиглитазона, салазосульфапиридина, скрифлавиния хлорида, семустина, стрептозоцина, сульфакарбамида, сульфацетамида, сульфахлорпиридазина, сульфадиазина, сульфадикрамида, сульфадиметоксина, сульфаэтидола, сульфафуразола, сульфагуанидина, сульфагуанола, сульфаметизола, сульфаметоксазола, ко-тримоксазола, сульфаметоксидиазина, сульфаметоксипиридазина, сульфамоксола, сульфаниламида, сульфаперина, сульфафеназола, сульфатиазола, сульфисомидина, стауроспорина, тамоксифена, таксола, тенипозида, тертипозида, тестолактона, тестостеронпропионата, тиогуанина, тиотепа, тинидазола, топотекана, триазиквона, треосульфана, триметоприма, трофосфамида, UCN-01, винбластина, винкристина, виндезина, винбластина, винорелбина и зорубицина, предпочтительно выбраны из группы, состоящей из ауристатина, баноксантрона, бендамустина, хлорамбуцила, халицеамицина, циклофосфамида, динемицина А, майтанзина, мелфалана, мертанзина и неоказиностатина, наиболее предпочтительно баноксантрона, бендамустина, хлорамбуцила, циклофосфамида, пирролбензодиазепина и мелфалана.
Особенно предпочтительно противораковое лекарственное средство представляет собой белок, ингибирующий пролиферацию, предпочтительно ингибитор клеточного цикла, или антитело, или антителоподобный связывающий белок, который специфично связывается с белком-промотором пролиферации, или нуклеиновую кислоту, предпочтительно кодирующую ингибирующий пролиферацию белок, или антитело, или антителоподобный связывающий белок, который специфично связывается с белком-промотором пролиферации, или миРНК, или ДНК-фермент.
Предпочтительными являются иммуномодулирующие лекарственные средства, которые активируют или ингибируют активность иммунных клеток. Они могут представлять собой природные или синтетические лиганды или антагонисты паттерн-распознающих рецепторов, в частности, Toll-подобных рецепторов, NOD-подобных рецепторов (NLR), RIG-I-подобных рецепторов (RLR). Физиологически указанные рецепторы распознают класс сигналов, известных, как молекулярные паттерны, ассоциированные с патогенами (РАМР), и молекулярные паттерны, ассоциированные с повреждениями (DAMP).
Предпочтительные примеры антител, которые следует применять в контексте настоящего изобретения, представляют собой одноцепочечные антитела, фрагменты антител, нанотела, легкие или тяжелые цепи, вариабельные легкие или вариабельные тяжелые цепи или диатела. Предпочтительные фрагменты антител включают антигенсвязывающий фрагмент (Fab), фрагмент Fab', фрагмент F(ab')2, антитело с тяжелыми цепями, однодоменное антитело (sdAb), одноцепочечный вариабельный фрагмент (scFv), вариабельный фрагмент (Fv), домен VH, домен VL, однодоменное антитело, нанотело, IgNAR (новый иммуноглобулиновый антигенный рецептор), ди-scFv, привлекающий Т-клетки биспецифичный активатор (BITE), молекулу переориентирующегося антитела с двойной аффинностью (DART), тройное тело, диатело, одноцепочечное диатело и их гибридные белки.
Авторы настоящего изобретения неожиданно обнаружили, что воспаленные суставы являются мишенями для макрофаг-моноцитов, предпочтительно активированных макрофагов. Таким образом, в диагностических применениях, в которых детектируют воспаленные суставы, макрофаг-моноциты предпочтительно нагружены меткой или комплексом, содержащим железосвязывающий белок и метку. В терапевтических применениях предпочтительно, чтобы комплекс содержал фармацевтически активное вещество с противовоспалительной активностью для доставки противовоспалительного вещества к воспаленной ткани.
Авторы настоящего изобретения неожиданно обнаружили, что система направленной доставки согласно настоящему изобретению направленно воздействует на лимфатические узлы, что делает ее особенно подходящей для доставки антигенов к дендритным клеткам, находящимся в лимфатических узлах. Направленное воздействие на лимфатические узлы особенно выражена, если клетки, нагруженные комплексом, представляют собой макрофаги, в частности, активированные макрофаги, более предпочтительно CCL-2-активированные макрофаги, полученные из костного мозга, или лимфоциты, в частности, В-клетки или Т-клетки. Таким образом, в предпочтительном варианте реализации систему направленной доставки применяют для доставки одного или более антигенов для инициирования профилактического и/или терапевтического иммунного ответа на один или более антигенов. Предпочтительные антигены получают из патогенов, т.е. бактерий или вирусов, или они являются опухолеспецифичными антигенами. Термин "опухолеспецифичные антигены" относится к белкам или эпитопам (включая пептиды с измененными профилями гликозилирования), которые в большей степени экспрессированы на поверхности опухолевых клеток по сравнению с неопухолевыми клетками, предпочтительно к антигенам или эпитопам, которые экспрессируются только на поверхности опухолевых клеток. Предпочтительные антигены выбраны из группы, состоящей из рецептора эпидермального фактора роста (EGFR, ErbB-1, HER1), ErbB-2 (HER2/neu), ErbB-3/HER3, ErbB-4/HER4, семейства лигандов EGFR; семейства рецепторов инсулиноподобного фактора роста (IGFR), IGF-связывающих белков (IGFBP), семейства лигандов IGFR; семейства рецепторов фактора роста тромбоцитов (PDGFR), семейства лигандов PDGFR; семейства рецепторов фактора роста фибробластов (FGFR), семейства лигандов FGFR, семейства рецепторов фактора роста эндотелия сосудов (VEGFR), семейства VEGF; семейства рецепторов HGF; семейства рецепторов TRK; семейства рецепторов эфрина (ЕРН); семейства рецепторов AXL; семейства рецепторов лейкоцитарных тирозинкиназ (LTK); семейства рецепторов TIE, ангиопоэтина-1, -2; семейства подобных рецепторной тирозинкиназе орфанных рецепторов (ROR); семейства рецепторов с дискоидиновым доменом (DDR); семейства рецепторов RET; семейства рецепторов KLG; семейства рецепторов RYK; семейства рецепторов MuSK; рецепторов трансформирующего фактора роста-α (ТФР-α), ФРО-β; рецепторов цитокинов, рецепторов класса I (семейство рецепторов гематопоэтина) и класса II (семейство рецепторов интерферонов/IL-10), суперсемейства (TNFRSF) рецепторов фактора некроза опухоли (ФНО), семейства рецепторов смерти; раково-тестикулярных антигенов (СТ), линиеспецифичных антигенов, дифференцировочных антигенов, альфа-актитина-4, ARTC1, гибридных продуктов кластерного региона точечного разрыва/белка Абельсона (Bcr-abl), B-RAF, каспазы-5 (CASP-5), каспазы-8 (CASP-8), β-катенина (CTNNB1), белка цикла клеточного деления 27 (CDC27), циклинзависимых киназ 4 (CDK4), CDKN2A, СОА-1, гибридного белка dek-can, EFTUD-2, фактора элонгации 2 (ELF2), гибридного белка, кодируемого вариантом гена 6 Ets/геном острого миелоидного лейкоза 1 ETS (ETC6-AML1), фибронектина (FN), GPNMB, гибридного белка рецептор липидов низкой плотности/GDP-L-фукоза:β-D-галактоза 2-α-L-фукозилтрансфераза (LDLR/FUT), HLA-A2. замены аргинина на изолейцин в положении 170 в α-спирали α-2-домена в гене HLA-A2 (HLA-A*201-R170I), HLA-A11, мутированного белка теплового шока 70-2 (HSP70-2M), KIAA0205, MART2, убиквитарного мутированного белка меланомы 1, 2, 3 (MUM-1, 2, 3), простатической кислой фосфатазы (РАР), neo-РАР, миозина класса I, NFYC, OGT, OS-9, гибридного белка pml-RAR-альфа, PRDX5, PTPRK, K-ras (KRAS2), N-ras (NRAS), HRAS, RBAF600, SIRT2, SNRPD1, гибридного белка SYT-SSX1 или -SSX2, триозофосфатизомеразы, BAGE, BAGE-1, BAGE-2,3,4,5, GAGE-1,2,3,4,5,6,7,8, GnT-V (аберрантной N-ацетилглюкозаминилтрансферазы V, MGAT5), HERV-K-MEL, KK-LC, KM-HN-1, LAGE, LAGE-1, распознаваемого CTL антигена на меланоме (CAMEL), MAGE-A1 (MAGE-1), MAGE-A2, MAGE-A3, MAGE-A4, MAGE-A5, MAGE-A6, MAGE-A8, MAGE-A9, MAGE-A10, MAGE-A11, MAGE-A12, MAGE-3, MAGE-B1, MAGE-B2, MAGE-B5, MAGE-B6, MAGE-C1, MAGE-C2, муцина 1 (MUC1), MART-1/Melan-A (MLANA), gp100, gp100/Pmel17 (SILV), тирозиназы (TYR), TRP-1, HAGE, NA-88, NY-ESO-1, NY-ESO-1/LAGE-2, SAGE, Sp17, SSX-1,2,3,4, TRP2-INT2, раково-эмбрионального антигена (РЭА), калликреина 4, маммаглобина-А, ОА1, простатспецифического антигена (ПСА), TRP-1/gp75, TRP-2, адипофилина, интерферон-индуцируемого белка 2, отсутствующего при меланоме (AIM-2), BING-4, CPSF, циклина D1, молекулы клеточной адгезии эпителия (Ер-САМ), EphA3, фактора роста фибробластов-5 (FGF-5), гликопротеина 250 (gp250), EGFR (ERBB1), HER-2/neu (ERBB2), цепи α2 рецептора интерлейкина 13 (IL13Ralpha2), рецептора IL-6, интестинальной карбоксилэстеразы (iCE), альфа-фетопротеина (АФП), М-КСФ, mdm-2, MUC1, р53 (ТР53), PBF, PRAME, PSMA, RAGE-1, RNF43, RU2AS, SOX10, STEAP1, сурвивина (BIRC5), обратной транскриптазы теломеразы человека (hTERT), теломеразы, гена опухоли Вильмса (WT1), SYCP1, BRDT, SPANX, XAGE, ADAM2, PAGE-5, LIP1, CTAGE-1, С SAGE, ММА1, CAGE, BORIS, HOM-TES-85, AF15ql4, HCA661, LDHC, MORC, SGY-1, SPO11, TPX1, NY-SAR-35, FTHL17, NXF2, TDRD1, TEX15, FATE, ТРТЕ, идиотипов иммуноглобулина, белка Бенса-Джонса, рецепторов эстрогена (ER), рецепторов андрогена (AR), CD40, CD30, CD20, CD19, CD33, ракового антигена 72-4 (СА 72-4), ракового антигена 15-3 (СА 15-3), ракового антигена 27-29 (СА 27-29), ракового антигена 125 (СА 125), ракового антигена 19-9 (СА 19-9), β-субъединицы хорионического гонадотропина человека, 1-2 микроглобулина, антигена плоскоклеточной карциномы, нейронспецифичной енолазы, белка теплового шока gp96, GM2, сарграмостима, CTLA-4, 707 аланин-пролина (707-АР), антигена аденокарциномы, распознаваемого Т-клетками 4 (ART-4), белка-1 раково-эмбрионального антигена (САР-1), активируемого кальцием хлоридного канала-2 (CLCA2), циклофилина В (Сур-В), белка перстневидной опухоли-2 человека (HST-2), белков вируса папилломы человека (ВПЧ) (ВПЧ-Е6, ВПЧ-Е7, основного или минорного капсидных антигенов, других), белков вируса Эпштейна-Барра (ВЭБ) (ВЭБ латентных мембранных белков LMP1, LMP2; других), белков вируса гепатита В или С и белков ВИЧ.
Если фармацевтически активное вещество представляет собой нуклеиновую кислоту, предпочтительно, чтобы она представляла собой микроРНК, миРНК, химически модифицированную РНК, ДНК-фермент или нуклеиновую кислоту, кодирующую фармацевтически активный белок, например, антитело, миметик антитела, цитокин, превращающий пролекарство фермент, иммуногенный пептид и т.п.
В предпочтительном варианте реализации системы направленной доставки согласно настоящему изобретению метка выбрана из флуоресцентного красителя, изотопа, испускающего флуоресценцию, радиоизотопа, детектируемого полипептида или нуклеиновой кислоты, кодирующей такой детектируемый полипептид, и контрастного агента.
В предпочтительном варианте реализации системы направленной доставки согласно настоящему изобретению метка содержит хелатирующий агент, который образует комплекс с катионами двухвалентных или трехвалентных металлов.
В предпочтительном варианте реализации системы направленной доставки согласно настоящему изобретению хелатирующий агент выбран из группы, состоящей из 1,4,7,10-тетраазациклододекан-N,N',N,N'-тетрауксусной кислоты (DOTA), этилендиаминтетрауксусной кислоты (EDTA), 1,4,7-триазациклононан-1,4,7-триуксусной кислоты (NOTA), триэтилентетрамина (ТЕТА), иминодиуксусной кислоты, диэтилентриамин-N,N,N',N',N''-пентауксусной кислоты (DTPA) и 6-гидразинопиридин-3-карбоновой кислоты (HYNIC).
В предпочтительном варианте реализации системы направленной доставки согласно настоящему изобретению контрастный агент включает парамагнитный агент, предпочтительно выбранный из Gd, Eu, W и Mn, или ферригидрит.
В предпочтительном варианте реализации системы направленной доставки согласно настоящему изобретению радиоизотоп/изотоп, испускающий флуоресценцию, выбран из группы, состоящей из изотопов, испускающих альфа-излучение, изотопов, испускающих гамма-излучение, изотопов, испускающих Оже-электроны, изотопов, испускающих рентгеновское излучение, изотопов, испускающих флуоресценцию, таких как 18F, 51Cr, флуоресцентный 65Tb, 67Ga, 68Ga, 111In, 99mTc, 140La, 175Yb, 153Sm, 166Ho, 88Y, 90Y, 149Pm, 177Lu, 47Sc, 142Pr, 159Gd, 212Bi, 72As, 72Se, 97Ru, 109Pd, 105Rh, 101m15Rh, 119Sb, 128Ba, 123I, 124I, 131I, 197Hg, 211At, 169Eu, 203Pb, 212Pb, 64Cu, 89Zr, 67Cu, 188Re, 186Re, 198Au и 199Ag, а также конъюгатов и комбинаций указанных выше изотопов с белками, пептидами, низкомолекулярными ингибиторами, антителами или другими соединениями, (например, 18F-ФДГ, 89Zr-оксид или 64Cu-порфирин).
В предпочтительном варианте реализации системы направленной доставки согласно настоящему изобретению флуоресцентный краситель выбран из группы, состоящей из следующих классов флуоресцентных красителей: ксантены, акридины, оксазины, цинины, стириловые красители, кумарины, порфины, комплексы металл-лиганд, флуоресцентные белки, нанокристаллы, перилены и фталоцианины, а также конъюгатов и комбинаций указанных классов красителей.
В предпочтительном варианте реализации системы направленной доставки согласно настоящему изобретению детектируемый полипептид представляет собой аутофлуоресцентный белок, предпочтительно зеленый флуоресцентный белок, или любой его структурный вариант с измененным спектром адсорбции и/или эмиссии.
Как было указано выше, система направленной доставки согласно настоящему изобретению является особенно подходящей для доставки фармацевтически активных веществ, меток или фармацевтически активных веществ и меток в области гипоксии. Гипоксия характерна для различных заболеваний, включая рак и воспалительные заболевания, и, таким образом, позволяет направленно воздействовать на такие заболевания.
В дополнение к направленной доставке применение фармацевтически активных веществ, которые активируются в гипоксических условиях, обеспечивает дополнительную специфичность направленной доставке и/или дополнительно снижает неблагоприятные эффекты фармацевтически активных веществ, меток или фармацевтически активных веществ и меток. Таким образом, в особенно предпочтительных вариантах реализации фармацевтически активное вещество, метка или фармацевтически активное вещество и метка представляют собой пролекарство, активируемое гипоксией. В основе всех пролекарств, активируемых гипоксией, лежит наличие одного из пяти различных химических фрагментов (нитрогрупп, хининов, ароматических и алифатических N-оксидов и переходных металлов), которые под воздействием ферментов восстанавливаются в тканях при гипоксических условиях. Пролекарства, активируемые гипоксией, представляют собой любое пролекарство, которое менее активно или неактивно по сравнению с соответствующим лекарственным средством и содержат лекарственное средство и одну или более биовосстанавливаемых групп. Такие пролекарства, активируемые гипоксией, включают все пролекарства, активируемые различными восстанавливающими агентами и восстанавливающими ферментами, включая без ограничений ферменты, переносящие одиночные электроны (такие как цитохром Р450 редуктазы), и ферменты, переносящие два электрона (или переносящие гидрид). В соответствии с предпочтительным вариантом реализации настоящего изобретения пролекарство, активируемое гипоксией, представляет собой ТН-302. Способы получения ТН-302 описаны в заявках РСТ № WO 07/002931 и № WO 08/083101. Предпочтительно примеры таких пролекарств выбраны из группы I класса, состоящей из: N-оксидов бензотриазина, апазиквона (EO9), тирапазамина (TPN) и SN30000; или группы II класса, состоящей из: нитросоединений PR-104А, ТН-302, ТН-4000 и AQ4N.
В предпочтительном варианте реализации выделенной системы направленной доставки согласно настоящему изобретению связь(и) между железосвязывающим(и) белком(ами) и фармацевтически активным веществом, меткой или фармацевтически активным веществом и меткой, содержащимися в комплексе, является(ются) ковалентной(ыми) и/или нековалентной(ыми); и/или фармацевтически активное вещество, метка или фармацевтически активное вещество и метка, содержащиеся в комплексе, захватываются/инкапсулируются железосвязывающим белком, предпочтительно ферритином или его мультимерами. В одном из вариантов реализации ковалентное и/или нековалентное связывание осуществляется непрямым образом через линкер или спейсер. Если желательно образование ковалентных связей, для ковалентного связывания фармацевтически активных веществ, меток или фармацевтически активных веществ и меток, прямым или непрямым образом, с одним или более железосвязывающими белками применяют соответствующие тиольные группы, аминогруппы или карбоксильные группы железосвязывающих белков.
Также предполагают, что в комплексе содержатся различные фармацевтически активные вещества, метки или фармацевтически активные вещества и метки. Например, один тип фармацевтически активного вещества, метки или фармацевтически активного вещества и метки может связываться с железосвязывающим белком (нековалентное связывание), тогда как другой тип является инкапсулированным. В данном подходе используют различные скорости высвобождения фармацевтически активных веществ, меток или фармацевтически активных веществ и меток из железосвязывающего белка после доставки в целевую ткань и/или клетки. Например, фармацевтически активное вещество, метка или фармацевтически активное вещество и метка могут ковалентно присоединяться к молекуле ферритина, на поверхности 24-мера или во внутренней полости, за счет реакционной способности соответствующих тиольных групп, аминогрупп или карбоксильных групп. Типы таких подходящих реакций хорошо известны в данной области техники, и специалист в данной области техники может адоптировать их для конкретного фармацевтически активного вещества, метки или фармацевтически активного вещества и метки без какой-либо дополнительной работы. Примеры таких реакций описаны в Behrens CR, Liu В. Methods for site-specific drug conjugation to antibodies. MAbs. 2014 Jan-Feb; 6(1):46-53.
В терагностических применениях, т.е. в которых комплекс содержит как метку, так и фармацевтически активное вещество, предпочтительно, чтобы метка ковалентно присоединялась к железосвязывающему белку, а фармацевтически активное вещество нековалентно связывалось с железосвязывающим белком и/или захватывалось внутренней полостью, образующейся при сборке железосвязывающих белков.
В третьем аспекте настоящее изобретение относится к способу получения выделенной системы направленной доставки по первому или второму аспектам, включающему стадии:
a) получения очищенного железосвязывающего белка;
b) ковалентного или нековалентного связывания фармацевтически активного вещества, метки или фармацевтически активного вещества и метки с железосвязывающим белком и/или инкапсулирования фармацевтически активного вещества, метки или фармацевтически активного вещества и метки в железосвязывающий белок;
c) получения клетки, представляющей собой CD45+ лейкоцит; и
d1) инкубирования клетки, представляющей собой CD45+ лейкоцит, в присутствии железосвязывающего белка, полученного на стадии b), до получения по меньшей мере частичной загрузки клетки, представляющей собой CD45+ лейкоцит, комплексом железосвязывающего белка и фармацевтически активного вещества, метки или фармацевтически активного вещества и метки, полученного на стадии b); и/или
d2) инкубирования клетки, представляющей собой CD45+ лейкоцит, в присутствии метки до получения по меньшей мере частичного связывания клетки, представляющей собой CD45+ лейкоцит, с меткой.
В дополнительном аспекте настоящее изобретение относится к выделенной системе направленной доставки, получаемой при помощи способа в соответствии с третьим аспектом настоящего изобретения.
Образование аддукта между белком и фармацевтически активным веществом и/или меткой предпочтительно осуществляется путем нековалентного связывания с железосвязывающим белком и может быть описано следующим образом: в случае ферритина фармацевтически активные вещества и/или метки обычно можно инкапсулировать во внутреннюю полость (физическое удерживание) за счет свойств ассоциации и диссоциации самой макромолекулы ферритина. Молекулы фармацевтически активного вещества и/или метки удерживаются на месте путем нековалентных взаимодействий с аминокислотными остатками на внутренней поверхности полости. Макромолекулы гемоглобина также обладают возможностью нековалентного связывания выбранных молекул фармацевтически активных веществ и/или меток, которые могут размещаться в гемсвязывающем кармане самого гемоглобина. Гем в кармане может замещаться и может заменяться на фармацевтически активные вещества и/или метки с соответствующим профилем гидрофобности. В дополнительном аспекте все белки, рассматриваемые в настоящем изобретении, можно ковалентно присоединять к молекулам фармацевтически активного вещества и/или метки, модифицированным при помощи конкретных активных линкерных фрагментов, реакционноспособных в отношении тиольных групп или аминогрупп самого белка. Таким образом, ферритины или гемоглобин можно связывать с реакционноспособными в отношении тиольной группы цистеина фармацевтически активными веществами и/или метками, несущими расщепляемый линкер на основе пептида (например, чувствительную к катепсину валин-цитруллиновую последовательность и пара-аминобензилкарбаматный спейсер). В качестве важнейшего примера применяли антимитотический агент монометилауристатин Е (ММАЕ). Линкер на основе пептида стабильно связывает белок с цитотоксическим соединением, так что лекарственное средство не может легко высвобождаться из белка в физиологических условиях, что помогает предотвращать токсичность в отношении здоровых клеток и обеспечивает эффективность дозировки. Образуемый таким образом аддукт белка и фармацевтически активного вещества и/или метки может присоединяться к выбранным типам рецепторов, т.е. CD163 в случае гемоглобина и TfR в случае ферритина или трансферрина, соответственно. После связывания аддукт белка и фармацевтически активного вещества и/или метки интернализируется путем эндоцитоза и, таким образом, избирательно поглощается клетками-мишенями. Везикула, содержащая лекарственное средство, сливается с лизосомами и лизосомальными цистеиновыми протеазами, в частности, катепсин В начинает разрушать валин-цитруллиновый линкер, и ММАЕ больше не является связанным с железосвязывающим белком и высвобождается непосредственно в среду опухоли.
В качестве альтернативы, DM1-SMCC представляет собой эффективное производное мертанзина, несущее линкер, который специфично связывается с лизиновыми остатками, образуя ковалентный комплекс с ферритином, гемоглобином или трансферрином в реакции, которая была успешно описана для антибиотиков. В частности, гемоглобин, ферритин или трансферрин могут взаимодействовать с DM1-SMCC, таким образом, обеспечивая получение ковалентного аддукта белка и лекарственного средства, который может расщепляться внутри клеток и высвобождать активное лекарственное средство зависящим от времени образом. Подавление динамики микротрубочек при помощи DM1 индуцирует блокировку митоза и гибель клеток.
Термин "полная загрузка" применяют в контексте настоящего изобретения для обозначения максимального количества железосвязывающего белка, предпочтительно ферритина, находящегося комплексе с фармацевтически активным веществом, меткой или фармацевтически активным веществом и меткой, которое может поглощаться клеткой, представляющей собой CD45+ лейкоцит, предпочтительно макрофагом, более предпочтительно активированным макрофагом.
В четвертом аспекте настоящее изобретение относится к выделенной системе направленной доставки по первому аспекту или второму аспекту настоящего изобретения или получаемой в соответствии со способом по третьему аспекту настоящего изобретения для применения в качестве лекарственного средства или для диагностики.
В пятом аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической или диагностической композиции, содержащей выделенную систему направленной доставки по первому или второму аспекту настоящего изобретения или получаемую в соответствии со способом по третьему аспекту настоящего изобретения и фармацевтически приемлемое вещество-носитель и/или подходящий(е) вспомогательное(ые) вещество(а). Поскольку выделенная система направленной доставки содержит живые клетки, предпочтительно, чтобы носители и вспомогательные вещества были выбраны таким образом, чтобы оставлять клетки живыми.
"Фармацевтически приемлемый" означает одобренный регулирующим органом федерального правительства или правительства штата или перечисленный в фармакопее США или другой общепринятой фармакопее для применения на животных, в частности, на людях.
Термин "носитель", применяемый в настоящем документе, относится к фармакологически неактивному веществу, такому как, но не ограничиваясь ими, разбавитель, вспомогательное вещество, поверхностно-активные вещества, стабилизаторы, физиологические буферные растворы или вещества-носители, с которыми вводят фармацевтически активное вещество. Такие фармацевтические носители могут быть жидкими или твердыми. Жидкие носители включают, но не ограничиваются ими, стерильные жидкости, такие как солевые растворы в воде или маслах, включая, но не ограничиваясь ими, масла нефтяного, животного, растительного или синтетического происхождения, такие как арахисовое масло, соевое масло, минеральное масло, кунжутное масло и т.п. Солевые растворы и водные растворы декстрозы и глицерина также можно применять в качестве жидких носителей, в частности, для растворов для инъекций. Солевой раствор является предпочтительным носителем, когда фармацевтическую композицию вводят внутривенно. Примеры подходящих фармацевтических носителей описаны в "Remington's Pharmaceutical Sciences" за авторством Е.W. Martin.
Подходящие фармацевтические "вспомогательные вещества" включают крахмал, глюкозу, лактозу, сахарозу, желатин, солод, рис, муку, мел, силикагель, стеарат натрия, глицерина моностеарат, тальк, хлорид натрия, сухое обезжиренное молоко, глицерин, пропилен, гликоль, воду, этанол и т.п.
"Поверхностно-активные вещества" включают анионогенные, катионогенные и неионогенные поверхностно-активные вещества, такие как, но не ограничиваясь ими, дезоксихолат натрия, додецилсульфат натрия, Triton Х-100 и полисорбаты, такие как полисорбат 20, полисорбат 40, полисорбат 60, полисорбат 65 и полисорбат 80.
"Стабилизаторы" включают, но не ограничиваются ими, маннит, сахарозу, трегалозу, альбумин, а также антагонисты протеаз и/или нуклеаз.
"Физиологические буферные растворы" включают, но не ограничиваются ими, раствор хлорида натрия, деминерализованную воду, а также подходящие органические или неорганические буферные растворы, такие как, но не ограничиваясь ими, фосфатный буфер, цитратный буфер, трис-буфер (трис(гидроксиметил)аминометан), буфер HEPES ([4-(2-гидроксиэтил)пиперазино]этансульфоновая кислота) или буфер MOPS (3-морфолино-1-пропансульфоновая кислота). Выбор соответствующего буфера, в целом, зависит от желаемой молярности буфера. Фосфатный буфер является подходящим, например, для растворов для инъекций или инфузий.
Термин "адъювант" относится к агентам, которые усиливают, стимулируют, активируют, увеличивают или модулируют иммунный ответ на фармацевтически активное вещество, содержащееся в композиции, на клеточном или гуморальном уровне, например, иммунологические адъюванты стимулируют ответ иммунной системы на фактический антиген, но сами по себе не обладают иммунологическим эффектом. Примеры таких адъювантов включают, но не ограничиваются ими, неорганические адъюванты (например, соли неорганических металлов, такие как фосфат алюминия или гидроксид алюминия), органические адъюванты (например, сапонины или сквален), адъюванты на масляной основе (например, полный адъювант Фрейнда и неполный адъювант Фрейнда), цитокины (например, IL-1β, IL-2, IL-7, IL-12, IL-18, ГМ-КСФ и IFN-γ), адъюванты в виде частиц (например, иммуностимулирующие комплексы (ISCOMS), липосомы или биологически разлагаемые микросферы), виросомы, бактериальные адъюванты (например, монофосфориллипид А или мурамиловые пептиды), синтетические адъюванты (например, неионогенные блок-сополимеры, аналоги мурамиловых пептидов или синтетический липид А) или синтетические полинуклеотидные адъюванты (например, полиаргинин или полилизин).
Поразительным наблюдением являлось специфическое для заболевания направленное воздействие системы направленной доставки согласно настоящему изобретению. Клетки, представляющие собой CD45+ лейкоциты, по-видимому, обладают тропизмом к областям гипоксии и областям окислительного стресса. Гипоксия является отличительной чертой различных заболеваний, как и окислительный стресс. Соответственно, в шестом аспекте настоящее изобретение относится к выделенной системе направленной доставки по первому аспекту или второму аспекту настоящего изобретения или получаемой в соответствии со способом по третьему аспекту настоящего изобретения для применения для предотвращения, лечения или диагностирования заболевания, характеризующегося областями гипоксии в пораженных тканях и/или областями окислительного стресса (Фиг. 27); опухолей, предпочтительно солидных опухолей, и/или их метастаз, предпочтительно рака молочной железы, рака поджелудочной железы, рака мочевого пузыря, рака легкого, рака толстой кишки или опухоли, характеризующейся областями гипоксии, воспалительного заболевания, воспаленной ткани, предпочтительно воспаленных суставов или пораженных артритом суставов, воспаленных легких, воспаленного кишечника или других воспаленных тканей; лимфатических узлов, предпочтительно воспаленных лимфатических узлов, или других нефизиологических лимфатических узлов, которые развиваются во время заболевания, предпочтительно, но не только, во время инфекции, рака или аутоиммунного заболевания; или областей ишемии, в частности, в ранах кожи, или после инфаркта органа (сердца) или ретинальной ишемии, или для профилактической или терапевтической вакцинации, в частности, для предотвращения или лечения инфекционного заболевания или рака. Указанный аспект также включает антигены к физиологическим или нефизиологическим лимфатическим узлам для вакцинации индивидуума или для индуцирования иммунной памяти.
Термин "лечение", применяемый в настоящем документе, включает все типы профилактических и/или терапевтических вмешательств, разрешенных с медицинской точки зрения для лечения, временной ремиссии, предотвращения и различных других целей, включая задержку или остановку развития заболевания, регресс или исчезновение очага поражения, предотвращение начала развития заболевания или подавление рецидива.
Система направленной доставки в соответствии с настоящим изобретением позволяет осуществлять доставку к опухоли фармацевтически активных веществ, меток или фармацевтически активных веществ и меток, которые обычно не могут достигать опухоли (например, из-за проблем с растворимостью). Она также позволяет осуществлять доставку фармацевтически активных веществ, меток или фармацевтически активных веществ и меток в гипоксические опухоли или в области гипоксии опухоли. Указанная система также обеспечивает доставку фармацевтически активного вещества, метки или фармацевтически активного вещества и метки в любую область в организме, подверженную гипоксическим состояниям, например, во время ишемических инцидентов, или в которой происходит воспалительный процесс.
Как было указано выше, в настоящем изобретении также предложен способ направленной доставки в опухолевую массу. Указанный способ включает получение CD45+ лейкоцитов, предпочтительно активированных макрофагов, которые обеспечивают высокоэффективное поглощение железосвязывающего белка (ферритина, гемоглобина и/или трансферрина) макрофагами, при этом указанный ферритин, гемоглобин и/или трансферрин несет фармацевтически активное вещество, метку или фармацевтически активное вещество и метку (например, лекарственное средство/пролекарство), обеспечивают направленное воздействие на опухоль и перенос железосвязывающего белка в раковую клетку, в которой происходит высвобождение фармацевтически активного вещества, метки или фармацевтически активного вещества и метки.
В настоящем изобретении применяют CD45+ лейкоциты, предпочтительно активированные макрофаги, нагруженные железосвязывающими белками, связанными с лекарственным средством/пролекарством, в качестве системы направленной доставки к опухоли. Неудовлетворительный ответ опухолей на химиотерапию или трудности с их обнаружением с применением способов визуализации в основном связаны с изменениями в проникновении противораковых лекарственных средств в области гипоксии вследствие слабой сосудистой сети. Тем не менее, указанные аваскулярные участки привлекают CD45+ лейкоциты, предпочтительно активированные макрофаги, для миграции даже в удаленные от кровеносных сосудов области. Таким образом, они образуют систему доставки частиц к опухолевой массе. Перспективным примером таких частиц является железосвязывающий белок. Тем не менее, при их применении в качестве единственных агентов они не достигают областей гипоксии, аналогично другим соединениям, и накапливаются в других органах.
Авторы настоящего изобретения связывали противораковые лекарственные средства, активируемые гипоксией пролекарства (с целью лечения), метки или изотопы с гемоглобином или трансферрином с применением химических способов и нагружали ими CD45+ лейкоциты (моноциты, макрофаги, лимфоциты и/или гранулоциты), предпочтительно активированные макрофаги, обрабатывая клетки раствором железосвязывающего белка, как описано в примерах. Авторы настоящего изобретения наблюдали, что после введения животному нагруженные CD45+ лейкоциты, предпочтительно активированные макрофаги, мигрируют в области гипоксии опухоли и высвобождают в раковых клетках железосвязывающий белок с инкапсулированными фармацевтически активными веществами, метками или фармацевтически активными веществами и метками. Указанный способ позволяет осуществлять точное введение фармацевтически активных веществ, меток или фармацевтически активных веществ и меток в опухолевый участок (особенно в области гипоксии), избегая их накопления в других органах.
Краткое описание чертежей
Фиг. 1: В секции (А) показан минимальный активный фрагмент консенсусной аминокислотной последовательности среди Н-цепей ферритинов млекопитающих и две полноразмерные консенсусные последовательности на основе нескольких Н-цепей ферритинов млекопитающих (см. SEQ ID №: 1, 2 и 7, соответственно), а также минимальная и полноразмерная аминокислотные последовательности Н-цепи ферритина мыши (SEQ ID №: 3 и 4) и человека (SEQ ID №: 5 и 6). В секции (В) показан минимальный активный фрагмент консенсусной аминокислотной последовательности среди L-цепей ферритинов млекопитающих и две полноразмерные консенсусные последовательности на основе нескольких L-цепей ферритинов млекопитающих (см. SEQ ID №: 8, 9 и 14, соответственно), а также минимальная и полноразмерная аминокислотные последовательности L-цепи ферритина мыши (SEQ ID №: 10 и 11) и человека (SEQ ID №: 12 и 13). В секции (С) показан минимальный активный фрагмент консенсусной аминокислотной последовательности среди альфа-цепей гемоглобина млекопитающих и одна полноразмерная консенсусная последовательность на основе нескольких альфа-цепей гемоглобина млекопитающих (см. SEQ ID №: 15 и 16, соответственно), а также минимальная и полноразмерная аминокислотные последовательности альфа-цепи гемоглобина человека (SEQ ID №: 17 и 18). В секции (D) показан минимальный активный фрагмент консенсусной аминокислотной последовательности среди бета-цепей гемоглобина млекопитающих и полноразмерные консенсусные последовательности на основе нескольких бета-цепей гемоглобина млекопитающих (см. SEQ ID №: 19 и 20, соответственно), а также минимальная и полноразмерная аминокислотные последовательности бета-цепи гемоглобина человека (SEQ ID №: 21 и 22). В секции (Е) показан N- и С-концевой минимальный активный фрагмент консенсусной аминокислотной последовательности среди трансферринов млекопитающих (SEQ ID №: 23 и 24) и полноразмерные консенсусные последовательности на основе нескольких трансферринов млекопитающих (SEQ ID №: 25), а также N- и С-концевой минимальный активный фрагмент трансферрина человека (SEQ ID №: 26 и 27) и полноразмерная аминокислотная последовательность трансферрина человека (SEQ ID №: 28). В консенсусных последовательностях X указывает на вариабельное положение и обозначает любую встречающуюся в природе аминокислоту. Предпочтительно в каждом случае X в зависимости от других X обозначает аминокислоту, присутствующую в белке человека.
Фиг. 2: Показан макрофаг внутри опухолевой массы мыши (окрашивали TRITC перед инъекцией, нагружали меченым при помощи FITC ферритином).
Фиг. 3: Показано полученное путем конфокальной микроскопии изображение опухолевой ткани мыши, которой путем инъекции вводили клетки рака молочной железы и внутривенно вводили макрофаги, нагруженные FITC-ферритином (звездочка), где отчетливо видно, не только в макрофагах, но и в раковых клетках, что ферритин-FITC распространяется по всей опухолевой массе.
Фиг. 4: Показаны моментальные снимки в одном канале (в исходном зеленом канале, преобразованном в изображение в градациях серого), полученные с применением конфокальной микроскопии макрофагов (обозначенных *; нагруженных FITC-ферритином) и раковой клетки (обозначенной стрелкой; окрашенной при помощи красной метки и, следовательно, не наблюдаемой в зеленом канале до поглощения ферритина) in vitro, полученные в начальный момент времени (А) и после прохождения времени, достаточного для заполнения раковой клетки ферритином (В). Осуществляется динамический перенос FITC-ферритина в раковую клетку (с накоплением сначала в везикулах,; а затем с распространением по всей цитоплазме, как видно на указанном изображении (клетка появилась в зеленом канале)).
Фиг. 5: Показана выживаемость мышей, получавших плацебо и макрофаги, нагруженные мелфаланом, связанным с ферритином, и хлорамбуцилом, связанным с ферритином.
Фиг. 6: Показан апоптоз опухолевых клеток, вызванный обработкой циклофосфамидом и циклофосфамидом, инкапсулированным в ферритинах, загруженных в макрофаги (приведены в одинаковых дозах).
Фиг. 7: Показаны МРТ-изображения опухоли молочной железы мыши. Мышь лечили (в момент времени 0 ч) макрофагами (внутривенная инъекция), нагруженными ферритином Fh. Затем авторы настоящего изобретения наблюдали увеличенный диаметр кровеносных сосудов (стрелка), заполненных инъецированными макрофагами (что приводило к значительному снижению Т2-сигнала), а затем макрофаги распространялись по ткани (пятнообразный рисунок; стрелки). Указанные изменения (в одинаковые моменты времени) наблюдали у всех испытываемых мышей.
Фиг. 8: Показано поглощение ферритина, гемоглобина и трансферрина макрофагами, поглощение ферритина и гемоглобина моноцитами и поглощение ферритина лимфоцитами и гранулоцитами.
Фиг. 9: Показана стабильность удержания ферритина макрофагами.
Фиг. 10: Показан перенос ферритина, гемоглобина и трансферрина из макрофага в различные раковые клетки.
Фиг. 11: Показан перенос ферритина из макрофага в раковые и нераковые клетки.
Фиг. 12: Показан перенос ферритина с инкапсулированным пролекарством, активируемым гипоксией, из макрофага в раковые клетки.
Фиг. 13: Показан апоптоз в раковых клетках, которые получали ферритин с различными инкапсулированными противораковыми агентами из совместно культивированных макрофагов или растворимого ферритина с теми же агентами.
Фиг. 14: Показан перенос ферритина, гемоглобина и трансферрина из моноцита в различные раковые клетки.
Фиг. 15: Показан перенос ферритина и гемоглобина из гранулоцита в различные раковые клетки.
Фиг. 16: Показан перенос ферритина и гемоглобина из лимфоцита в различные раковые клетки.
Фиг. 17: Показано изображение, полученное путем двухфотонной микроскопии, демонстрирующее опухоль, полученную от мыши, которой вводили предварительно меченые (перед введением) макрофаги, содержащие ферритин-FITC.
Фиг. 18: Показано полноразмерное изображение мышей, которым внутривенно вводили меченые макрофаги, на котором демонстрируется накопление макрофагов в опухолевом участке и их распределение в других органах.
Фиг. 19: Показана миграция макрофагов в гипоксическую ткань, поперечный срез опухоли, полученной от мыши, которой внутривенно вводили предварительно меченые макрофаги, области гипоксии опухоли визуализированы при помощи маркера гипоксии - пимонидазолона.
Фиг. 20: Показана наблюдаемая локализация везикул, содержащих меченый при помощи FITC ферритин (круглые объекты), в микроокружении внутри опухолевой массы. Макрофаги, содержащие меченый при помощи FITC ферритин, вводили мышам внутривенно.
Фиг. 21: Показан регистрируемый при помощи ПЭТ сигнал, получаемый путем анализа всего тела мышей с метастатическим раком 4Т1. Мышам внутривенно вводили макрофаги, нагруженные 18F-ФДГ. Накопление сигнала повышено в легких мышей с микрометастазами (подтверждается патологическим исследованием). В случае мышей, получавших просто 18F-ФДГ, или мышей без рака 4Т1 наблюдали более слабый ПЭТ сигнал. MQ-ФДГ: обозначает мышей с метастатической опухолью 4Т1 + внутривенное введение макрофагов, нагруженных 18F-ФДГ. ФДГ: обозначает мышей с метастатической опухолью 4Т1 + внутривенное введение свободного 18F-ФДГ. Интактные мыши MQ-ФДГ: обозначает мышей без опухоли + внутривенное введение макрофагов, нагруженных 18F-ФДГ.
Фиг. 22: Показано направленное воздействие на опухоль различных типов клеток CD45+ лейкоцитов, применяемых в системах направленной доставки согласно настоящему изобретению. Мышам с опухолями СТ26 (отмеченными стрелками) внутривенно инъецировали ФСБ или флуоресцентно меченые клетки. Секция А - ФСБ, без добавления клеток, в секции В показано направленное воздействие субпопуляции CD45+ лейкоцитов, в секции С показано направленное воздействие активированных CD4+ Т-лимфоцитов, в секции D показано направленное воздействие макрофаг-моноцитарной клеточной линии. Через 24 часа после инъекции мышей анестезировали и делали снимок. В секции Е показано количественное определение направленного воздействия на опухоль различными клетками, представляющими собой CD45+ лейкоциты.
Фиг. 23: Показана выживаемость мышей с опухолью СТ26, получающих терапию моноцитами, нагруженными ферритин-цисплатином. n=6-8 мышей/группа. Выживаемость мышей рассчитывали путем достижения (1500 мм3) максимально допустимого объема опухоли (измеренного штангенциркулем в соответствии с формулой А × В2).
Фиг. 24: Показана направленная доставка введенных внутривенно клеток к воспаленным (артритным) суставам. Контрольной мыши (секция А) или мыши с тяжелым воспалением суставов (секция В) внутривенно инъецировали макрофаг-моноцитарную клеточную линию. Перед инъекцией клетки помечали флуоресцентным индикатором. Через 24 часа после инъекции суставы удаляли и готовили суспензию отдельных клеток. Клетки анализировали путем проточной цитометрии. Флуоресцентно меченые клетки представлены в области Р2. В секции С показано количественное определение флуоресцентных клеток в воспаленных суставах по сравнению с контрольными суставами. Макрофаг-моноцитарные клетки присутствуют в воспаленных суставах в большем количестве по сравнению с контрольными суставами.
Фиг. 25: Показана направленная доставка введенных внутривенно клеток к лимфатическим узлам. Контрольной мыши (секция А) или мыши с тяжелым воспалением суставов (секция В) внутривенно инъецировали активированные макрофаги (с М-КСФ и CCL2). Перед инъекцией клетки помечали флуоресцентным индикатором. Через 24 часа после инъекции мышей анестезировали и делали снимок. Мыши с воспалительным состоянием имеют положительный сигнал, полученный от клеток, меченых индикатором, в лимфатических узлах (отмеченных белыми стрелками).
Фиг. 26: Показано введение радиоактивной метки, просто 89Zr-оксината, в моноцитарно-макрофагальную клеточную линию, т.е. без железосвязывающего белка (~1,85 МБк), для получения ПЭТ изображения. Радиоактивность клеток после нагрузки 89Zr указана в МБк.
Фиг. 27: Перенос ферритина исследовали в раковых клетках (ЕМТ6), совместно культивированных с нагруженными ферритином макрофагами (RAW264.7) в течение 2 ч. Использовали три экспериментальных состояния: "контроль" (нормальное совместное культивирование, без стресса); "ЕМТ6 OS", когда клетки ЕМТ6 подвергали окислительному стрессу перед совместным культивированием, а затем совместно культивировали с макрофагами при условиях с нормальным содержанием кислорода, и "совместное культивирование и OS", когда оба типа клеток подвергали окислительному стрессу перед совместным культивированием. Результаты показали, что раковые клетки, подвергавшиеся окислительному стрессу, получали (от макрофагов) больше ферритинов, чем контрольные клетки. Поглощение являлось еще более эффективным, когда оба типа клеток подвергали окислительному стрессу. Это может быть связано с более высокой нагрузкой ферритином из-за окислительного стресса и, следовательно, более эффективным переносом, или с тем, что окислительный стресс инициирует более эффективную доставку ферритинов макрофагами к раковым клеткам для уменьшения окислительного стресса в соседних клетках. В секции А показано поглощение ферритина макрофагами (совместное культивирование в течение 2 ч) при окислительном стрессе (окисление глюкозы в течение 16 ч). В секции В показано поглощение ферритина макрофагами (совместное культивирование в течение 2 ч) при окислительном стрессе (окисление глюкозы в течение 16 ч).
ПРИМЕРЫ
Пример 1. Активация макрофагов
Макрофаги для применения в соответствии с настоящим изобретением получали, дифференцировали и активировали следующим образом. Для активирования макрофагов их сперва получали из клеток-предшественников костного мозга (см., например, документ: Weischenfeld and Porse, 2008, CSH Protoc, doi. 10.1101/pdb.prot.5080) или моноцитов крови. В качестве альтернативы, их можно получать из брюшины. Способы выделения, культивирования, дифференцирования и поляризации/активирования макрофагов хорошо известны специалистам в данной области техники. Например, они подробно описаны Мюрреем (Murray) et al. (Immunity, 2014, 41(1):14-20).
При указанной практической реализации настоящего изобретения макрофаги, полученные из костного мозга, получали у BALB/c или С57 В1/6 мыши, тем не менее, также применяли макрофаги, полученные из моноцитов собачьей крови, или коммерчески доступные макрофагальные клеточные линии (клетки моноцитарно-макрофагальной линии мышей: RAW 264.7, J744, человека: ТНР-1, U937, или клеточная линия собак DH82).
Вкратце, такие макрофаги, полученные из костного мозга, высеивали в пластиковую чашку Петри в 5 мл среды (3 мл клеток на чашку): DMEM:F12 + глутамин/глутамакс + 10% ФБС + пенициллин/стрептомицин и 20% кондиционированной среды L929 или М-КСФ (50 нг/мл). В течение последующих пяти дней указанную среду дополняли фактором роста и одним из активирующих соединений или их комбинацией в виде одного цитокинового коктейля.
В качестве альтернативы, макрофаги культивировали в "среде для образования М1/М2-макрофагов" (Promocell) или в эквивалентной коммерчески доступной или самостоятельно приготовленной среде, содержащей все необходимые цитокины и интерлейкины, чтобы считать их активированными.
Для получения макрофагов из моноцитов крови клетки свежей крови (не старше 12 часов) очищали путем центрифугирования с применением реагента Histopaque system 1,077 г/мл или эквивалента и белых кровяных телец (или, в качестве альтернативы, только белых кровяных телец, полученных из банка крови) в соответствующем количестве предварительно нагретой среды для присоединения моноцитов (или эквивалента, например, DMEM/RPMI, дополненной М-КСФ), например, 15 мл среды на Т-75 колбу. Плотность посева должна составлять 1-2 миллиона/см2 для мононуклеарных клеток при содержании моноцитов ≥ 25% и 1,5-3 миллиона/см2 при содержании моноцитов <25%. Затем клетки инкубировали в течение 1-1,5 часов в 5% атмосфере СО2 и при 37°С в инкубаторе без каких-либо дополнительных манипуляций.
После присоединения клеток их промывали по меньшей мере два раза, а затем к клеткам добавляли соответствующее количество полной "DXF-среды для образования M1- или М2-макрофагов" (например, 20 мл на Т-75 колбу) и клетки инкубировали в течение 6 дней при 37°С и в 5% атмосфере СО2 без изменения среды. Для активирования макрофагов всю среду заменяли на среду, дополненную активирующим соединением.
Активирующими соединениями, применяемыми в настоящем изобретении (для клеток, полученных из костного мозга, или для активирования клеток, полученных из моноцитарно-макрофагальных клеточных линий), являются следующие: IL-4 (20 нг/мл), IFN-γ (по меньшей мере 20 нг/мл), ЛПС (по меньшей мере 10 нг/мл), IL-13 (по меньшей мере 20 нг/мл), IL-10 (по меньшей мере 20 нг/мл), дексаметазон (по меньшей мере 20 мкг/мл), CCL2 (по меньшей мере 20 нг/мл), окЛПНП (по меньшей мере 20 нг/мл), ФНО-α (20 нг/мл), ФРО-β (20 нг/мл), кортизол (150-300 нг/мл) или их комбинации в виде одного цитокинового коктейля. Для получения неактивированных макрофагов не добавляли активирующее соединение.
Обратного процесса поляризации/активирования макрофагов (от классически активированных до альтернативно активированных) можно достигать, например, путем культивирования макрофагов в соответствующих цитокинах, перечисленных выше, в течение по меньшей мере 48 часов.
Пример 2. Выделение моноцитов
Для получения моноцитов для указанной практической реализации настоящего изобретения моноциты, полученные из костного мозга или селезенки, получали у BALB/c или С57В1/6 мыши, тем не менее, также применяли моноциты собачьей крови или коммерчески доступные моноцитарные клеточные линии (клетки моноцитарно-макрофагальной линии мышей: RAW 264.7, J744, человека: ТНР-1, U937 или собак DH82).
Для получения моноцитов крови клетки свежей крови (не старше 12 часов) очищали путем центрифугирования с применением реагента Histopaque system 1,077 г/мл или эквивалента, и белые кровяные тельца высеивали в соответствующем количестве предварительно нагретой среды для присоединения моноцитов (или эквивалента, например, DMEM/RPMI, дополненной 20 нг/мл М-КСФ), например, 15 мл среды на Т-75 колбу. В качестве альтернативы, можно применять только лейкоциты, полученные из банка крови (лейкоцитарная пленка). После присоединения клеток их промывали по меньшей мере два раза и адгезивные клетки считали моноцитами.
Для получения моноцитов, полученных из костного мозга, в указанной практической реализации настоящего изобретения моноциты получали у BALB/c или С57В1/6 мыши. Вкратце, такие клетки-предшественники, полученные из костного мозга, выделяли с применением набора Mouse Monocyte Enrichment Kit (StemCells) в соответствии с инструкциями производителя. Для получения моноцитов, полученных из селезенки, в указанной практической реализации настоящего изобретения селезенку механически диссоциировали для получения суспензии отдельных клеток и пропускали через 70 мкм сетчатый фильтр. Клетки центрифугировали и удаляли надосадочную жидкость. Необязательно проводили лизис эритроцитов перед выделением моноцитов при помощи набора EasySep™ Mouse Monocyte Enrichment Kit (StemCells) в соответствии с инструкциями производителя.
Для получения лучших эффектов от нагрузки их белком и миграции перед применением их можно предварительно обрабатывать стимулирующими веществами для активирования: IL-4 (20 нг/мл), IFN-γ (по меньшей мере 20 нг/мл), ЛПС (по меньшей мере 10 нг/мл), IL-13 (по меньшей мере 20 нг/мл), IL-10 (по меньшей мере 20 нг/мл), дексаметазоном (по меньшей мере 20 мкг/мл), CCL-2 (по меньшей мере 20 нг/мл), окЛПНП (по меньшей мере 20 нг/мл), ФНО-α (20 нг/мл), ФРО-β (20 нг/мл), кортизолом (150-300 нг/мл) или их комбинациями в виде одного цитокинового коктейля.
Пример 3. Выделение гранулоцитов
Для получения гранулоцитарных клеток из крови 9 частей крови разбавляли 1 частью ACD-буфера (содержащего 0,17 М d-глюкозы, 0,10 М лимонной кислоты, 0,11 М тринатрийцитрата). Кровь из указанной стадии дополнительно разбавляли ФСБ в отношении 1:1 и центрифугировали. После удаления плазмы и лейкоцитарной пленки оставшиеся клетки смешивали с ФСБ до 80% исходного объема, полученного на первой стадии (ACD-кровь), а затем разбавляли холодной дистиллированной водой в отношении 4:12. Затем добавляли 6 частей 2,7% раствора NaCl и центрифугировали. После удаления надосадочной жидкости клетки повторно суспендировали в среде RPMI-1640. Указанные клетки считали гранулоцитами.
Пример 4. Выделение лимфоцитов
Для получения лимфоцитов, полученных из селезенки, в указанной практической реализации настоящего изобретения селезенку механически диссоциировали для получения суспензии отдельных клеток и пропускали через 70 мкм сетчатый фильтр. Клетки центрифугировали и удаляли надосадочную жидкость. После лизиса эритроцитов лимфоциты выделяли с применением способа очистки с магнитными микроносителями при помощи набора EasySep™ CD4+ Enrichment Kit (StemCells) в соответствии с инструкциями производителя.
Лимфоциты активировали путем культивирования в течение 3-5 дней в RPMI-среде, дополненной смесью глутамин/глутамакс, 10% ФБС, пенициллин/стрептомицин, в присутствии гранул, покрытых анти-CD3 и анти-CD28 (Gibco), в соответствии с инструкциями производителя.
Активирование лимфоцитов подтверждали на основании повышающей регуляции экспрессии CD25 и CD69 на клеточной поверхности, что отслеживали путем проточной цитометрии.
Пример 5. Выделение лейкоцитов (CD45+ клеток)
Для получения макрофагов из моноцитов крови свежую кровь (не старше 12 часов) очищали путем центрифугирования с применением реагента Histopaque system 1,077 г/мл или эквивалента, и белые кровяные тельца (или, в качестве альтернативы, только белые кровяные тельца, полученные из банка крови) применяли для дальнейших стадий процедуры. В качестве альтернативы, лейкоциты получают после лизиса эритроцитов цельной крови, как это было осуществлено при практической реализации настоящего изобретения.
Пример 6. Получение ферритиновых комплексов
Для включения в ферритины противораковых лекарственных средств (например, классических лекарственных средств, таких как циклофосфамид, хлорамбуцил, мелфалан, бендамустин, баноксантрон, или активируемого гипоксией пролекарства, такого как ТН-302) или "контрастных агентов для визуализации" (например, ферригидрита или изотопа) ферритины следует получать до лечения макрофагами. Вкратце, получали рекомбинантные белки мыши в соответствии с SEQ ID №: 4 (Фиг. 1) следующим образом. Вектор экспрессии рЕТ-22b, содержащий синтетический ген, кодирующий белок ферритин SEQ ID №: 4, трансформировали в Е. coli BL21 (DE3). Культуру E.coli выращивали при 37°C до значения OD600 0,6 в 1 л бульоне Луриа-Бертани (LB) с добавлением ампициллина (100 мг/л). Экспрессию белка индуцировали добавлением 1 мМ изопропилтио-β-D-галактозида (IPTG) и культуру инкубировали в течение ночи. Клетки собирали путем центрифугирования (15000 g в течение 15 мин), суспендировали в 20 мМ HEPES (рН 7,5), 150 Мм NaCl, 0,1 мг/мл ДНКазы, 10 мМ MgCl2 и разрушали ультразвуком. Лиза центрифугировали при 15000 g в течение 30 мин и над осад очную жидкость обрабатывали в течение 10 мин при 50°С, центрифугировали для удаления денатурированных белков, а затем при 70°С в течение 10 мин и повторно центрифугировали. В надосадочную жидкость добавляли 30% (NH)4SO4 при 4°С при перемешивании в течение 1 ч и центрифугировали при 15000 g в течение 30 мин. В надосадочную жидкость добавляли 70% (NH)4SO4 при 4°С при перемешивании в течение 1 ч и центрифугировали при 15000 g в течение 30 мин. Осадок повторно суспендировали в 20 мМ HEPES (рН 7,5), 150 мМ NaCl и диализировали в течение ночи при 4°С против того же буфера. Белок нагружали в гель-фильтрационную колонку HILOAD 26/600 SUPERDEX 200 (GE-Healthcare), а затем фильтровали в стерильных условиях и хранили при 4°С (Фиг. 9). Концентрацию белка определяли спектрофотометрически при 280 нм с применением молярного коэффициента экстинкции 21000 М-1 м-1 и путем анализа Бредфорда с измерением поглощения при 595 нм.
Указанные ферритины включают рекомбинантные Н- и/или L-гомополимеры белков ферритинов млекопитающих.
Ферритины, полученные, как описано ранее, очищали при помощи стандартных способов для получения продукта доклинического уровня, не содержащего эндотоксина (см., например: Ceci et al. 2011, Extremophiles 15(3):431-439; Vanucci etal. 2012, Int J Nanomed 7:1489-1509). Вкратце, ферритин, хранящийся в стерильном консервирующем растворе, содержащем 20 мМ HEPES рН 7,5, разбавляли до конечной концентрации 24-мера 4 мкМ в кислотных условиях (конечный рН<3,0) или, в качестве альтернативы, при сильно щелочных значениях рН (рН>9,5) (см., например, Pontillo et al., 2016), обеспечивая диссоциацию мультимера. Лекарственные средства растворяли при очень высоких концентрациях в соответствующем растворителе, а затем в небольшом объеме добавляли к раствору ферритина с 200-молярным избытком. Затем получали нейтральный рН путем добавления соответствующих количеств растворов NaOH/HCl для обеспечения восстановления мультимера. Существующие экспериментальные способы показывают, что три/четыре промывки с применением ФСБ (стадии концентрирования) при критической для 100 кДа концентрации позволяют быстро и полностью устранять как сорастворители, так и не инкапсулированные лекарственные средства, и полностью восстанавливать нагруженные лекарственным средством нанокейдж-структуры ферритинов. Затем полученный таким образом комплекс ферритин-лекарственное средство подвергали сверхбыстрому замораживанию в жидком азоте и лиофилизировали.
В зависимости от выбора сорастворителя и присущих молекулам лекарственного средства химических свойств можно оценить, что вплоть до 150-180 молекул лекарственного средства могут быть захвачены/адсорбированы 24-мерной кейдж-структурой ферритина.
Фармацевтически активные вещества или метки также можно ковалентно связывать с боковыми цепями аминокислот ферритина (лизинами или цистеинами) путем соответствующего выбора лекарственных средств, активируемых фенилгидразоном, сукцинимидом или малеимидом. Соответственно, i) производное фенилгидразона может отрывать и высвобождать лекарственное средство с поверхности ферритина, ii) связанные с лизином производные могут активироваться после полного разложения белка до аминокислот, или iii) связанное с цистеином производное может высвобождаться в клетке в результате восстановительного гидролиза тиоэфирной связи малеимида.
Пример 7. Получение комплексов соединений с гемоглобином
Гемоглобин человека получали из свежих эритроцитов, как описано Роззи-Фанелли (Rossi-Fanelli) et al. (Archives of biochemistry and biophysics 77:478-492, 1958). Вкратце, гепаринизированную кровь, полученную от здоровых доноров, центрифугировали при 1600 об/мин в течение 30 минут (4°С) для осаждения ККТ. Лейкоцитарную пленку аккуратно удаляли путем аспирации с поверхности осадка. Надосадочную плазму удаляли и осадок ККТ три раза промывали путем повторного суспендирования ККТ в изотоническом 0,9% соляном растворе и центрифугирования при 1600 об/мин в течение 30 минут при 4°С. После заключительной стадии промывки и центрифугирования осадок ККТ повторно суспендировали в дистиллированной воде, забуференной при рН 7,2 5 мМ калий-фосфатным буфером (РВ, рН=7,2), и оставляли лизироваться при 4°С в течение ночи при осторожном перемешивании. Затем диализированный лизат ККТ центрифугировали при 13000 об/мин в течение 30 мин при 4°С и надосадочную жидкость непосредственно загружали в систему Explorer, снабженную колонкой XK 26/40, заполненной смолой Q-сефароза XL (GE Healthcare), при комнатной температуре. Колонки уравновешивали буфером А (20 мМ трис-HCl, рН=8,2) при скорости потока 12 мл/мин и три раза промывали тем же буфером. Элюирование в режиме линейного градиента осуществляли путем изменения состава подвижной фазы от 100% буфера А до 75% буфера В (20 мМ трис-Cl, плюс 0,2 М NaCl рН 8,20) с последующим режимом ступенчатого градиента с 100% буфера В. После элюирования для сбора белковых фракций применяли коллектор фракций. Полученный таким образом белок анализировали путем ДСН-ПААГ-электрофореза и хранили в замороженном виде при -80°С.
Гемоглобин человека (SEQ ID №: 18 или 22, см. Фиг. 1) может быть легко ковалентно связан с соответствующими конъюгатами лекарственных средств, может размещать гидрофобные молекулы лекарственного средства в гемсвязывающем кармане или даже переносить малые цитотоксические молекулы, связанные с гемовым железом. НЬ можно легко модифицировать путем селективного присоединения соответствующего конъюгата лекарственного средства к остатку цистеина в положении 93 бета-цепей, единственному титруемому цистеину на поверхности белка. Функционализированные малеимидом лекарственные средства, такие как ингибитор тубулина монометилауристатин (ММАЕ) или функционализированный сукцинимидом аналоги мертанзина (DM1-SMCC), являются наиболее важными примерами чрезвычайно сильнодействующих цитотоксических препаратов, которые можно легко и специфично присоединять к соответствующему остатку цистеина в положении 93 бета-цепей (для функционализированных малеимидом лекарственных средств) или к одному или более остаткам лизина (функционализированное сукцинимидом лекарственное средство), соответственно. Указанные лекарственные средства удобно конъюгировать с гемоглобином человека в соответствии со следующими процедурами:
Аналог ауристатина Е, малеимидокапроил-валин-цитруллин-и-аминобензоилоксикарбонил-монометил ауристатин Е (vcMMAE), получали от MedChem Express (Princeton, NJ). Аддукт гемоглобина и vcMMAE готовили следующим образом. Раствор гемоглобина человека доводили до концентрации гема 120 мкМ рабочим буферным раствором (50 мМ фосфатного буфера рН 6,8, содержащего 0,1 мМ EDTA) и конъюгировали с 10-кратным молярным избытком vcMMAE в присутствии 20% об./об. раствора ацетонитрила при 4°С в течение ночи. Малеимидные группы Maleimide эффективно и специфично взаимодействуют со свободными (восстановленными) сульфгидрилами при рН 6,5-7,5 с образованием стабильных тиоэфирных связей. Избыток vcMMAE очищали и буфер заменяли на ФСБ-Д с применением концентратора для ультрафильтрования РМ 100. Выход при конъюгировании составлял приблизительно 80% от общего количества цистеинов. Образование конъюгата vcMMAE подтверждали путем ЖХ-МС анализа и путем титрования остаточных свободных тиольных групп n-хлормеркурибензоатом. Концентрации конъюгатов Hb-vcMMAE определяли путем спектроскопического анализа в УФ- и видимой областях.
Аналог мертанзина DM1 SMCC (Alb Technology Ltd, Hederson, NV, USA), функционализированный для ковалентного присоединения лизина, готовили следующим образом. Раствор гемоглобина человека доводили до концентрации гема 400 мкМ рабочим буферным раствором (0,1 мМ фосфатного буфера рН 7,4, содержащего 0,5 мМ EDTA) и конъюгировали с 20-кратным молярным избытком DM1-SMCC в присутствии 10% об./об. раствора ДМСО при 4°С в течение 16 часов. Сложный сукцинимидиловый эфир, реакционноспособный в отношении амина, связывался с аминами, что приводило к образованию ковалентного аддукта с лизиновыми группами на поверхности белка. Избыток DM1-SMCC удаляли и буфер заменяли на ФСБ-Д с применением концентратора для ультрафильтрования РМ 100. Выход при конъюгировании составлял приблизительно 2,4 молекулы мертанзина на тетрамер гемоглобина. Образование конъюгата DM1-SMCC подтверждали путем ЖХ-МС анализа. Концентрации конъюгатов Hb-DM1-SMCC определяли путем спектроскопического анализа в УФ- и видимой областях.
В качестве альтернативы, раствор апобелка следует содержать на ледяной бане в течение всего процесса восстановления. 1,5-кратный молярный избыток CuT-СРР (Cu-ТСРР 4,4',4'',4'''-(порфин-5,10,15,20-тетраил)тетракис(бензойная кислота) - Cu67) в 0,1 М растворе NaOH следует добавлять по каплям в раствор апоглобина в 0,2 М буфере KPi при рН 7,0, быстро перемешивать на вортексе при комнатной температуре, а затем снова помещать на ледяную баню на 30 минут. Затем раствор белка следует профильтровать через шприцевой фильтр перед применением.
Пример 8. Получение комплексов соединений с трансферрином
Сыворотку получали от здорового донора и добавляли избыток железа в присутствии цитратных ионов в качестве хелатирующего агента и бикарбоната, который облегчает связывание железа с трансферрином. Реакционная смесь содержала 6,5 мг бикарбоната натрия и 153,16 цитрата трехвалентного железа при рН=8, 4°С в течение 1 часа на 100 мл сыворотки. Затем осаждали альбумин при помощи риванола (4%) путем добавления спиртового раствора к образцу сыворотки в отношении 3,5 об./об. при 4°С и рН=9,4 в течение 2 ч. Затем раствор центрифугировали при 3000 об/мин в течение 20 мин, а затем фильтровали через фильтр на 0,8 мм шприцевом фильтре. Затем удаляли избыток риванола путем гель-фильтрации на колонке Сефадекс G-25 с 0,025 М сульфатом аммония. Первое осаждение проводили 50% насыщенным сульфатом аммония при рН=6,5 с последующим центрифугированием при 3000 об/мин в течение 10 мин (удаление иммуноглобулина). Затем проводили второе осаждение в 80% насыщенном сульфате аммония, что позволяло извлекать трансферрин в виде осадка. Затем твердый осадок растворяли в 0,06 М трис-HCl буфере, рН=8, содержащем 1 М NaCl. Раствор диализировали в том же буфере для обеспечения полного удаления сульфата аммония. Затем раствор белка концентрировали с применением центробежного концентратора Centricon РМ50 вплоть до 10-15 мг/мл (оценивали по методу Бредфорда) и загружали в гель-фильтрационную колонку Сефадекс G-100 (2,4×80 см), уравновешенную в 1 MNaCl, скорость потока 15 мл/ч. Полученный таким образом трансферрин имел 88-90% чистоту, что оценивали путем ДСН-ПААГ-электрофореза. Затем в качестве конечной стадии очистки применяли ионообменную хроматографию с применением анионита ДЭАЭ-сефадекс А-50. Образец трансферрина загружали в колонку, уравновешенную 0,06 М трис-HCl при рН=8, и элюировали в режиме линейного градиента концентрации с применением буфера для элюирования, 0,3 М трис-HCl, рН=8. Чистота белка составляла более 98% с выходом приблизительно 150 мг на 100 мл сыворотки.
Холотрансферрин человека (SEQ ID №: 28, Фиг. 1), аналогично гемоглобину, можно легко ковалентно связывать с соответствующими конъюгатами лекарственных средств, хотя для него возможны только модификации по лизину из-за отсутствия свободно титруемых цистеиновых групп. Таким образом, функционализированный сукцинимидом аналог мертанзина (DM1-SMCC) применяли для ковалентного присоединения к одному или более остаткам лизина (функционализированное сукцинимидом лекарственное средство). Лекарственное средство конъюгировали с трансферрином в соответствии со следующей процедурой:
Аналог мертанзина DM1 SMCC (Alb Technology Ltd, Hederson, NV, USA), функционализированный для ковалентного присоединения лизина, готовили следующим образом. Раствор трансферрина доводили до концентрации гема 100 мкМ рабочим буферным раствором (0,1 мМ фосфатного буфера с рН 7,4, в указанном случае без EDTA из-за возможных эффектов хелатирования железа) и конъюгировали с 20-кратным молярным избытком DM1-SMCC в присутствии 8% об./об. раствора ДМСО при 4°С в течение 16 часов. Сложный сукцинимидиловый эфир, реакционноспособный в отношении амина, связывался с аминами, что приводило к образованию ковалентного аддукта с лизиновыми группами на поверхности белка. Избыток DM1-SMCC удаляли и буфер заменяли на ФСБ-Д с применением концентратора для ультрафильтрования РМ 100. Выход при конъюгировании составлял приблизительно 1,5 молекулы мертанзина на димер трансферрина. Образование конъюгата DM1-SMCC подтверждали путем ЖХ-МС анализа. Концентрации конъюгатов трансферрин-DM1-SMCC определяли путем спектроскопического анализа в УФ- и видимой областях.
В качестве альтернативы, раствор апобелка следует содержать на ледяной бане в течение всего процесса восстановления. 1,5-кратный молярный избыток CuT-СРР (Cu-ТСРР 4,4',4'',4'''-(порфин-5,10,15,20-тетраил)тетракис(бензойная кислота) - Cu67) в 0,1 М растворе NaOH следует добавлять по каплям в раствор апоглобина в 0,2 М буфере KPi при рН 7,0, быстро перемешивать на вортексе при комнатной температуре, а затем снова помещать на ледяную баню на 30 минут. Затем раствор белка следует профильтровать через шприцевой фильтр перед применением.
Пример 9. Получение клеток, нагруженных ферритином
Полученные клетки инкубировали в растворе ферритина в течение времени и при концентрации, достаточных для обеспечения надлежащего отношения ферритин/клетка для их полной нагрузки, а также для обеспечения надлежащего содержания лекарственного средства для получения терапевтического эффекта или контраста для надлежащей визуализации. Время и концентрация могут варьироваться в зависимости от числа молекул, инкапсулированных/адсорбированных в кейдж-структуру ферритина, состояния активации клеток, условий и количества их предполагаемых введений.
Например, для обеспечения надлежащей нагрузки ферритинами клетки инкубировали в течение 1-4 часов в 0,8 мг/мл растворе ферритина в стандартных условиях культивирования. Диапазон концентраций ферритина может варьироваться по меньшей мере от 0,01 до 4 мг/мл, а время инкубирования - от 5 мин до 6 часов или более. При регулировании времени и концентрации нагрузки клеток ферритином следует учитывать влияние ферритина и условий лечения на жизнеспособность клеток. Клетки, полученные указанным выше способом, очень легко поглощают ферритины за относительно короткое время (за минуты; Фиг. 8). После поглощения ферритинов они не высвобождают их в среду для культивирования (Фиг. 9).
Тем не менее, специалист в данной области техники способен отрегулировать указанные выше условия и оптимизировать протокол для собственных целей в собственной лаборатории.
Пример 10. Получение клеток, нагруженных гемоглобином
Полученные клетки инкубировали в растворе гемоглобина в течение времени и при концентрации, достаточных для обеспечения надлежащего отношения гемоглобин/клетка для их полной нагрузки, а также для обеспечения надлежащего содержания лекарственного средства для получения терапевтического эффекта или контраста для надлежащей визуализации. Время и концентрация могут варьироваться в зависимости от числа молекул, связанных с молекулой гемоглобина, состояния активации клеток, условий и количества их предполагаемых введений.
Например, для обеспечения надлежащей нагрузки гемоглобинами клетки инкубировали в течение 1-4 часов в 0,1 мг/мл растворе гемоглобина в стандартных условиях культивирования. Диапазон концентраций гемоглобина может варьироваться по меньшей мере от 0,01 до 0,2 мг/мл, а время инкубирования - от 5 мин до 4 часов или более. При регулировании времени и концентрации нагрузки клеток гемоглобином следует учитывать влияние ферритина и условий лечения на жизнеспособность клеток. Клетки, полученные указанным выше способом, очень легко поглощают гемоглобины за относительно короткое время (за минуты; Фиг. 8).
Тем не менее, специалист в данной области техники способен отрегулировать указанные выше условия и оптимизировать протокол для собственных целей в собственной лаборатории.
Пример 11. Получение клеток, нагруженных трансферрином
Полученные клетки инкубировали в растворе трансферрина в течение времени и при концентрации, достаточных для обеспечения надлежащего отношения трансферрин/клетка для их полной нагрузки, а также для обеспечения надлежащего содержания лекарственного средства для получения терапевтического эффекта или контраста для надлежащей визуализации. Время и концентрация могут варьироваться в зависимости от числа молекул, связанных с молекулой трансферрина, состояния активации клеток, условий и количества их предполагаемых введений.
Например, для обеспечения надлежащей нагрузки трансферринами клетки инкубировали в течение 1-4 часов в 0,1 мг/мл растворе трансферрина в стандартных условиях культивирования. Диапазон концентраций трансферрина может варьироваться по меньшей мере от 0,01 до 0,2 мг/мл, а время инкубирования - от 5 мин до 4 часов или более. При регулировании времени и концентрации нагрузки клеток трансферрином следует учитывать влияние трансферрина и условий лечения на жизнеспособность клеток. Клетки, полученные указанным выше способом, очень легко поглощают трансферрины за относительно короткое время (за минуты; Фиг. 8).
Тем не менее, специалист в данной области техники способен отрегулировать указанные выше условия и оптимизировать протокол для собственных целей в собственной лаборатории.
Пример 11. Комплекс ферритина/гемоглобина/трансферрина с макрофагом в качестве подходящего средства для доставки в раковые клетки
Макрофаги из Примера 1, полученные, как описано в Примерах 8, 9 и 10, очень легко переносят ферритины, гемоглобины, трансферрины в раковые клетки: клетки рака молочной железы и рака толстой кишки мыши, рака молочной железы собак, рака груди, поджелудочной железы и мочевого пузыря человека (Фиг. 4, 10). Более того, указанный перенос гораздо более специфичен в отношении раковых клеток по сравнению с нераковыми клетками (Фиг. 11). Тем не менее, в случае раковых клеток отношение обоих типов клеток имеет решающее значение. Чем больше макрофагов, тем лучше и быстрей происходит перенос.Наиболее эффективный перенос в раковые клетки наблюдали при отношении макрофагов к раковым клеткам 1:1 или более.
Указанный перенос происходил не только, когда проводили конъюгирование белков-носителей с флуоресцентной меткой (например, FITC или Alexa610), но также когда проводили их конъюгирование/инкапсулирование с применением других соединений, например, противораковых лекарственных средств (на Фиг. 12 показан указанный перенос ферритина, инкапсулированного с флуоресцентным пролекарством, активируемым гипоксией - баноксантроном). Указанный перенос соединений, конъюгированных с противораковыми лекарственными средствами, создавал эффект, индуцирующий апоптоз в раковых клетках (Фиг. 6, 13).
Пример 12. Комплекс ферритина/гемоглобина/трансферрина с моноцитом в качестве подходящего средства для доставки в раковые клетки
Моноциты из Примера 2, полученные, как описано в Примерах 8, 9 и 10, очень легко переносят ферритины, гемоглобины, трансферрины в раковые клетки (Фиг. 14). Тем не менее, отношение обоих типов клеток имеет большое значение. Чем больше моноцитов, тем лучше и быстрей происходит перенос. Наиболее эффективный перенос в раковые клетки наблюдали при отношении моноцитов к раковым клеткам 1:1 или более.
Пример 13. Комплекс ферритина/гемоглобина/трансферрина с гранулоцитом в качестве подходящего средства для доставки в раковые клетки
Гранулоциты из Примера 3, полученные, как описано в Примерах 8, 9 и 10, очень легко переносят ферритины, гемоглобины, трансферрины в раковые клетки (Фиг. 15). Тем не менее, отношение обоих типов клеток имеет решающее значение. Чем больше гранулоцитов, тем лучше и быстрей происходит перенос. Наиболее эффективный перенос в раковые клетки наблюдали при отношении гранулоцитов к раковым клеткам 1:1 или более.
Пример 14. Комплекс ферритина/гемоглобина/трансферрина с лимфоцитом в качестве подходящего средства для доставки в раковые клетки
Лимфоциты из Примера 4, полученные, как описано в Примерах 8, 9 и 10, очень легко переносят ферритины, гемоглобины, трансферрины в раковые клетки (Фиг. 16). Тем не менее, отношение обоих типов клеток имеет решающее значение. Чем больше лимфоцитов, тем лучше и быстрей происходит перенос. Наиболее эффективный перенос в раковые клетки наблюдали при отношении лимфоцитов к раковым клеткам 1:1 или более.
Пример 15. Введение в клетки радиоизотопных меток
В настоящем изобретении клетки помечали 18F-ФДГ или 89Zr-оксинатом для получения ПЭТ изображения. Клетки отделяли от планшета и инкубировали с раствором 18F-ФДГ или 89Zr-оксината в подходящей концентрации для обеспечения наиболее оптимального поглощения 18F-ФДГ или 89Zr-оксината клетками, обеспечивающего их радиообнаружение в месте скопления. В указанной практике настоящего изобретения клетки инкубировали при комнатной температуре в течение по меньшей мере 90 мин в растворе 89Zr-оксината, характеризующемся 3-9 МБк на 5 млн. клеток. Тем не менее, отношение радиоизотопов и клеток существенно влияет на эффективность реакции (Фиг. 26). После введения метки клетки центрифугировали и надосадочную жидкость удаляли. Указанную стадию следует повторять до того момента, когда в надосадочной жидкости исчезнет детектируемая радиоактивность.
Пример 16. Комплекс ферритина/гемоглобина/трансферрина/метки с лейкоцитом в качестве подходящего средства для доставки в опухоль, артритные суставы и лимфатические узлы
Макрофаги из Примера 1, полученные, как описано в Примерах 9, 10, 11 и 11; моноциты из Примера 2, полученные, как описано в Примерах 9, 10, 11 и 12, гранулоциты из Примера 3, полученные, как описано в Примерах 9, 10, 11 и 12, и лимфоциты из Примера 4, полученные, как описано в Примерах 9, 10, 11 и 12, очень эффективно мигрируют в опухоли (Фиг. 22 и Фиг. 23), артритные суставы (Фиг. 24, в конкретном указанном примере применяли моноцитарно-макрофагальную клеточную линию) и воспаленные лимфатические узлы (Фиг. 25, в конкретном указанном примере применяли моноциты/молодые макрофаги, активированные с применением М-КСФ и CCL-2). При миграции в опухоли или другие ткани они очень легко транспортируют ферритины, гемоглобины, трансферрины и метки в опухоль в количестве, достаточном для детектирования с применением систем визуализации (Фиг. 2, 3, 7, 17 и 18).
Пример 17. Комплекс лейкоцита с белком-носителем в качестве подходящей системы направленной доставки фармацевтически активного вещества в области гипоксии
Макрофаги, полученные, как описано выше, инъецировали в хвостовую вену животного с опухолью (соответствующее количество макрофагов следует отрегулировать под размер опухоли, стадию развития и наличие метастаз). Как показано на Фиг. 2 и 17, они специфичным образом достигают опухоли (через несколько часов), а также распространяются по другим органам всего тела животного (Фиг. 18). Более того, как показано на Фиг. 19, в модели гипоксии они также способны мигрировать в аваскулярные и гипоксические участки и переносить белки-носители в раковые клетки (Фиг. 3 и 20).
Для целей визуализации в хвостовую вену животного с раковой опухолью молочной железы или толстой кишки инъецировали 1-50 миллионов макрофагов. До этого макрофаги предварительно помечали при помощи Cell Tracker и нагружали ферритин-FITC (как показано в Примере 8). С применением двухфотонной микроскопии опухолевой массы через 8 часов после введения макрофагов детектировали присутствие макрофагов, несущих ферритин-FITC (Фиг. 17). Их специфичное воздействие на опухоль, а также их миграция в другие области, была представлена с применением визуализации всего тела животных (IVIS) после предварительного введения в макрофаги метки с применением цитоплазматического красителя DIR (Фиг. 18).
Мышам с опухолью внутривенно инъецировали 1-10 миллионов макрофагов, нагруженных ферритином с инкапсулированным циклофосфамидом, мелфаланом, и ферритином с инкапсулированным хлорамбуцилом (300000-500000 клеток ЕМТ6, инъецированных через кожу в боковой области). Авторы настоящего изобретения осуществляли 3 инъекции макрофагов на каждый третий день (в 5, 8 и 11 дни после инъецирования раковых клеток или в 7, 10 и 13 дни после инъецирования раковых клеток) или пять последовательных инъекций каждый день и наблюдали увеличение выживаемости мышей (Фиг. 5).
Пример 18. Комплекс лейкоцита с белком-носителем или меченый лейкоцит в качестве подходящего агента направленной доставки метки
Направленное воздействие системы направленной доставки, описанной в настоящем изобретении, может сопровождаться присоединением ферритина к контрастному агенту. Как показано на Фиг. 21, после инъецирования 1-50 мл макрофагов, нагруженных ферритином, связанным, как описано в Примере 8, с контрастным агентом (в указанном случае: ферригидритом, тем не менее, такие же результаты получали для изотопа, например, 123I), или меченых изотопом (в указанном случае 89Zr-оксидом или 18F-ФДГ) (Фиг. 21), их можно легко детектировать путем МРТ, ПЭТ или ОФЭКТ. В указанном примере (Фиг. 7) мышей с опухолью молочной железы визуализировали с применением МРТ через 3, 22 и 24 часа после внутривенной инъекции макрофагов, нагруженных ферритином Fh. Мышь лечили (в момент времени 0 ч) макрофагами. Затем наблюдали увеличенный диаметр кровеносных сосудов (стрелка), заполненных инъецированными макрофагами (что приводило к значительному снижению Т2-сигнала), а затем макрофаги распространялись по ткани (пятнообразный рисунок; стрелки). Указанные изменения (в одинаковые моменты времени) наблюдали у всех испытываемых мышей.
Макрофаги также помечали 89Zr-оксидом или 18F-ФДГ (5-50 млн.) и их радиоактивность подтверждали путем визуализации с применением ПЭТ после внутривенного введения мышам с опухолью. Указанным мышам инокулировали метастатическую клеточную линию 4Т1 за 3 недели до эксперимента и гистопатологически подтверждали наличие метастаз в легких, печени и селезенке. На Фиг. 21 видно, что макрофаги мигрировали в области с метастатическими опухолями, что позволяет визуализировать их путем ПЭТ.
Хотя приведенное выше письменное описание настоящего изобретения позволяет специалисту создавать и применять то, что в настоящее время считается наилучшим способом, специалисты поймут и оценят существование вариаций, комбинаций и эквивалентов конкретного варианта реализации, способа и примеров, приведенных в настоящем документе. Следовательно, настоящее изобретение не должно ограничиваться описанным выше вариантом реализации, способом и примерами и охватывает все варианты реализации и способы в пределах объема и сущности настоящего изобретения.
Claims (80)
1. Выделенная система направленной доставки, содержащая по меньшей мере одну клетку, представляющую собой CD45+ лейкоцит, которая выбрана из CD45+ моноцита, CD45+ моноцит-макрофага, CD45+ лимфоцита и CD45+ гранулоцита, при этом в указанной клетке содержится комплекс по меньшей мере одного железосвязывающего белка и фармацевтически активного вещества, метки или фармацевтически активного вещества и метки.
2. Выделенная система направленной доставки по п. 1, отличающаяся тем, что указанная клетка, представляющая собой CD45+ лейкоцит, получена из CD34+ гемопоэтической клетки-предшественника.
3. Выделенная система направленной доставки по п. 2, отличающаяся тем, что:
(i) указанный моноцит представляет собой CD11b+ моноцит, предпочтительно выбранный из группы, состоящей из CD11b+ CD14+ моноцита, CD11b+ CD16+ моноцита, CD11b+ CD14+ CD16+ моноцита, CD11b+ CD14+ MHCII+ моноцита, CD11b+ CD14+ CD115+ моноцита, CD11b+ CD114+ моноцита, CD11b+ CD116+ моноцита, CD11b+ CCR1+ моноцита, CD11b+ CCR2+ моноцита, CD11b+ CX3CR+ моноцита, CD11b+ CXR4+ моноцита, CD11b+ CXR6+ моноцита и CD11b+ CD14+ CD33+ моноцита, но не является дендритной клеткой, дифференцировка которой контролируется следующими факторами транскрипции: IFN-регуляторный фактор 8 (IRF8), ядерный фактор, регулирующий белок интерлейкин (IL)-3 (NFIL3), основной фактор транскрипции лейциновой молнии, ATF-подобный 3 (BATF3) или фактор транскрипции RelB (субъединица NF-KB) - RELB, Spi-1 протоонкоген (PU/1), рекомбинантный связывающий белковый супрессор безволосых (RBPJ), IFN-регуляторный фактор 4 (IRF4) или фактор транскрипции E2-2 (также известный как (TCF4));
(ii) указанный дифференцированный моноцит выбран из группы, состоящей из макрофага, активированного макрофага, предпочтительно CD11b+ макрофага, более предпочтительно CD11b+ CD16+ макрофага, CD11b+ CD32+ макрофага, CD11b+ CD64+ макрофага, CD11b+ CD68+ макрофага, предпочтительно CD11b+ CD86+ M1-макрофага, предпочтительно продуцирующего iNOS и/или секретирующего интерлейкин 12 (IL-12), или предпочтительно CD11b+ CCR2+ M2-макрофага, CD11b+ CD204+ M2-макрофага, CD11b+ CD206+ M2-макрофага, CD11b+ CD204+ CD206+ M2-макрофага, CD11b+ M2-макрофага (с низкой или высокой экспрессией) главного комплекса гистосовместимости II+ типа (MHCII+), CD11b+ CD200R+ M2-макрофага, CD11b+ CD163+ M2-макрофага или активированного макрофага, продуцирующего аргиназу и/или секретирующего интерлейкин 10 (IL-10); предпочтительно дифференцированный моноцит-макрофаг не является Lox1+, CXCR7+ и NRF2+ ксантомной клеткой;
(iii) указанный моноцит-макрофаг или активированный моноцит-макрофаг экспрессирует по меньшей мере один рецептор хемокинов, предпочтительно выбранный из группы, состоящей из CCR1, CCR2+, CXCR4+ и CXCR6+, или по меньшей мере один рецептор фактора роста, предпочтительно выбранный из группы, состоящей из рецептора макрофагального колониестимулирующего фактора (CD115), рецептора гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (CD114) и рецептора гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора (состоящего из CD116 и CD131); моноциты с указанными характеристиками являются особенно подходящими для лечения воспалительных состояний и рака;
(iv) указанный лимфоцит выбран из группы, состоящей из CD3+ и CD4+ или CD8+ T-лимфоцита или CD19+, CD20+, CD21+, CD19+ CD20+, CD19+ CD21+, CD20+ CD21+ или CD19+ CD20+ CD21+ B-лимфоцита; или натуральной клетки-киллера (NK); или
(v) указанный гранулоцит выбран из группы, состоящей из нейтрофила, предпочтительно CD66b+ нейтрофила, эозинофила и базофила, предпочтительно CD193+ эозинофила.
4. Выделенная система направленной доставки по п. 3, отличающаяся тем, что указанный активированный макрофаг:
(i) получен путем инкубирования in vitro моноцита или макрофага с фактором, который способен изменять маркеры экспрессии на поверхности макрофагов, предпочтительно
(a) с по меньшей мере одним M1-индуктором,
(b) с по меньшей мере одним M2-индуктором,
(c) или с фактором, который способен изменять способность макрофагов секретировать цитокины, предпочтительно IL-10 и IL-12, хемокины и/или продуцировать iNOS, аргиназу или другие иммуномодулирующие ферменты;
(ii) характеризуется экспрессией по меньшей мере одного из следующих антигенов: CD64, CD86, CD16, CD32, высокой экспрессией MHCII и/или продукцией iNOS и/или IL-12;
(iii) получен путем инкубирования in vitro моноцита или макрофага с фактором, который способен индуцировать способность макрофага к фагоцитозу;
(iv) характеризуется экспрессией по меньшей мере одного из следующих антигенов: CD204, CD206, CD200R; CCR2, рецептора трансферрина (TfR), рецептора 4 CXC-мотива хемокинов (CXCR4), CD163 и/или домена T-клеточного иммуноглобулина и домена муцина 2 (TIM-2), и/или демонстрирует низкую экспрессию MHCII;
(v) обладает способностью к фагоцитозу; и/или
(vi) способен секретировать цитокины, предпочтительно IL-12 или IL-10, или продуцировать индуцибельную синтазу оксида азота (iNOS) (или другие провоспалительные соединения), аргиназу или другие иммуносупрессивные/противовоспалительные соединения.
5. Система направленной доставки по п. 4, отличающаяся тем, что:
(i) указанный M1-индуктор выбран из группы, состоящей из ЛПС, IFN-γ и вирусной и бактериальной инфекции; или
(ii) указанный M2-индуктор выбран из группы, состоящей из IL-4, IL-10, IL-13, иммунного комплекса антигена и антитела, IgG, термически активируемого гамма-глобулина, глюкокортикостероида, ФРО-β, IL-1R, CCL-2, IL-6, М-КСФ, агониста PPARγ, фактора ингибирования лейкоцитов, аденозина, гельминтной и грибковой инфекции.
6. Выделенная система направленной доставки по п. 3, отличающаяся тем, что указанная клетка, представляющая собой моноцит-макрофаг:
(i) получена из CD34+ гемопоэтической клетки-предшественника;
(ii) получена путем инкубирования in vitro моноцитов/моноцитов-макрофагов с по меньшей мере одним индуктором, предпочтительно M1- или M2-индуктором, более предпочтительно по меньшей мере одним M2-индуктором;
(iii) характеризуется экспрессией по меньшей мере одного из следующих антигенов: TfR+, CD163+, TIM-2+, CD14+, CD16+, CD33+ и/или CD115+;
(iv) характеризуется экспрессией по меньшей мере одного из следующих антигенов: TfR+, CD163+, TIM-2+, CXCR4+, CD14+ и/или CD16+; и/или
(v) обладает способностью к фагоцитозу.
7. Система направленной доставки по п. 6, отличающаяся тем, что:
(i) указанный M1-индуктор выбран из группы, состоящей из ЛПС, IFN-γ или вирусной или бактериальной инфекции;
(ii) указанный M2-индуктор выбран из группы, состоящей из IL-4, IL-10, IL-13, иммунного комплекса антигена и антитела, IgG, термически активируемых гамма-глобулинов, глюкокортикостероидов, ФРО-β, IL-1R, CCL-2, IL-6, М-КСФ, агониста PPARγ, фактора ингибирования лейкоцитов, среды, кондиционированной раковыми клетками, раковых клеток, аденозина и гельминтной или грибковой инфекции.
8. Выделенная система направленной доставки по п. 3, отличающаяся тем, что указанный лимфоцит:
(i) получен из крови, селезенки или костного мозга или получен из CD34+ клетки-предшественника;
(ii) представляет собой иммунологически компетентный лимфоцит;
(iii) экспрессирует антигенспецифичные T-клеточные рецепторы; и/или
(iv) характеризуется экспрессией по меньшей мере одного из следующих антигенов: (a) CD3+ и CD4+ или CD8+ или (b): антигенов CD19+, CD20+, CD21+, CD19+ CD20+, CD19+ CD21+, CD20+ CD21+ или CD19+ CD20+ CD21+, и предпочтительно способен продуцировать иммуноглобулины.
9. Выделенная система направленной доставки по п. 3, отличающаяся тем, что указанный гранулоцит:
(i) получен из крови, селезенки или костного мозга или получен из CD34+ клетки-предшественника;
(ii) характеризуется экспрессией по меньшей мере одного из следующих: CD66b+ и/или CD193+;
(iii) представляет собой полиморфноядерный лейкоцит, характеризующийся наличием гранул в своей цитоплазме; и/или
(iv) характеризуется экспрессией по меньшей мере одного из следующих: TfR+, CD163+, TIM-2+ и/или CXCR4+.
10. Выделенная система направленной доставки по п. 3, отличающаяся тем, что указанная NK-клетка:
(i) получена из крови, селезенки или костного мозга или получена из CD34+ клетки-предшественника; и/или
(ii) характеризуется отсутствием экспрессии CD3 и экспрессией по меньшей мере одного из следующих: CD56+ и/или CD94+, CD158a+ CD158f+ CD314+ CD335+.
11. Выделенная система направленной доставки по любому из пп. 1-10, отличающаяся тем, что указанный железосвязывающий белок выбран из группы, состоящей из ферритина, предпочтительно ферритина тяжелого (H) типа, ферритина легкого (L) типа и/или митохондриального ферритина; гемоглобина, предпочтительно гемоглобина A, гемоглобина AS, гемоглобина SC, гемоглобина C, гемоглобина D, гемоглобина E, гемоглобина F, гемоглобина H; комплекса гемоглобин-гаптоглобин, гемопексина, трансферрина и лактоферрина.
12. Выделенная система направленной доставки по любому из пп. 1-11, отличающаяся тем, что указанное фармацевтически активное вещество выбрано из группы, состоящей из белка, нуклеиновой кислоты, небелкового соединения, не являющегося нуклеиновой кислотой, с молекулярной массой менее 1,5 кДа, предпочтительно противоракового лекарственного средства, в частности цитостатического лекарственного средства, цитотоксического лекарственного средства и их пролекарств; противоартериосклеротического лекарственного средства; и противовоспалительного лекарственного средства; и фотосенсибилизирующего соединения; вируса, в частности онколитического вируса; и радиоизотопа, испускающего α- или β-излучение, который также испускает γ-излучение в количестве, вызывающем повреждение клетки, предпочтительно выбранного из группы, состоящей из лютеция-177, иттербия-90, йода-131, самария-153, фосфора-32, цезия-131, палладия-103, радия-233, йода-125 и бора-10, или α-излучение в количестве, вызывающем повреждение клетки, предпочтительно выбранного из группы, состоящей из актиния-225, висмута-213, свинца-212 и полония-212, или комплекса соединения или изотопа, связанного с наночастицей.
13. Выделенная система направленной доставки по п. 12, отличающаяся тем, что указанное противораковое лекарственное средство выбрано из группы, состоящей из лекарственного средства, индуцирующего апоптоз, алкилирующего вещества, антиметаболитов, антибиотиков, эпотилонов, агонистов и антагонистов ядерного рецептора, антиандрогена, антиэстрогена, соединения платины, гормона, антигормона, интерферона, ингибитора зависимых от клеточного цикла протеинкиназ (CDK), ингибитора циклооксигеназ и/или липоксигеназ, биогенной жирной кислоты, производного биогенной жирной кислоты, включая простаноиды и лейкотриены, ингибитора протеинкиназ, ингибитора протеинфосфатаз, ингибитора липидкиназ, координационного комплекса платины, этиленимина, метилмеламина, триазина, алкалоида барвинка, пиримидинового аналога, пуринового аналога, алкилсульфоната, аналога фолиевой кислоты, антрацендиона, замещенной мочевины, производного метилгидразина, ендиинового антибиотика, майтанзиноида, производного ауристатина, ингибитора иммунных контрольных точек и ингибитора опухолеспецифичного белка или маркера, предпочтительно ингибитора диссоциации Rho-GDP, более предпочтительно Grp94, или ингибитора AXL.
14. Выделенная система направленной доставки по п. 12, отличающаяся тем, что указанное противораковое лекарственное средство представляет собой ацедиасульфон, акларубицин, амбазон, аминоглютетимид, L-аспарагиназу, азатиоприн, баноксантрон, бендамустин, блеомицин, бусульфан, фолинат кальция, карбоплатин, карпецитабин, кармустин, целекоксиб, хлорамбуцил, цисплатин, кладрибин, циклофосфамид, цитарабин, дакарбазин, дактиномицин, дапсон, даунорубицин, дибромпропамидин, диэтилстильбестрол, доцетаксел, доксорубицин, ендиины, эпирубицин, эпотилон B, эпотилон D, эстрамустина фосфат, эстроген, этинилэстрадиол, этопозид, флавопиридол, флоксуридин, флударабин, фторурацил, флуоксиместерон, флутамид, фосфоэстрол, фуразолидон, гемцитабин, аналог гонадотропин-высвобождающего гормона, гексаметилмеламин, гидроксикарбамид, гидроксиметилнитрофурантоин, гидроксипрогестеронкапроат, гидроксимочевину, идарубицин, идоксуридин, ифосфамид, интерферон-α, иринотекан, лейпролид, ломустин, луртотекан, мафенида сульфатоламид, мехлорэтамин, медроксипрогестерона ацетат, мегастролацетат, мелфалан, мепакрин, меркаптопурин, метотрексат, метронидазол, митомицин C, митоподозид, митотан, митоксантрон, митрамицин, налидиксовую кислоту, нифурател, нифуроксазид, нифуралазин, нифуртимокс, нимустин, ниноразол, нитрофурантоин, азотистые иприты, олеомуцин, оксолиновую кислоту, пентамидин, пентостатин, феназопиридин, фталилсульфатиазол, пипоброман, преднимустин, преднизон, преуссин, прокарбазин, пириметамин, ралтитрексед, рапамицин, рофекоксиб, розиглитазон, салазосульфапиридин, скрифлавиния хлорид, семустин, стрептозоцин, сульфакарбамид, сульфацетамид, сульфахлорпиридазин, сульфадиазин, сульфадикрамид, сульфадиметоксин, сульфаэтидол, сульфафуразол, сульфагуанидин, сульфагуанол, сульфаметизол, сульфаметоксазол, ко-тримоксазол, сульфаметоксидиазин, сульфаметоксипиридазин, сульфамоксол, сульфаниламид, сульфаперин, сульфафеназол, сульфатиазол, сульфисомидин, стауроспорин, тамоксифен, таксол, тенипозид, тертипозид, тестолактон, тестостеронпропионат, тиогуанин, тиотепа, тинидазол, топотекан, триазиквон, треосульфан, триметоприм, трофосфамид, UCN-01, винбластин, винкристин, виндезин, винбластин, винорелбин и зорубицин, предпочтительно выбрано из группы, состоящей из ауристатина, баноксантрона, бендамустина, хлорамбуцила, халицеамицина, динемицина A, майтанзина, мелфалана, мертанзина и неоказиностатина.
15. Выделенная система направленной доставки по п. 12, отличающаяся тем, что указанные иммуномодулирующие лекарственные средства активируют или ингибируют активность иммунных клеток, предпочтительно указанные иммуномодулирующие лекарственные средства представляют собой лиганды или антагонисты паттерн-распознающих рецепторов, в частности Toll-подобных рецепторов, NOD-подобных рецепторов (NLR), RIG-I-подобных рецепторов (RLR).
16. Выделенная система направленной доставки по п. 12, отличающаяся тем, что указанное противораковое лекарственное средство представляет собой белок, ингибирующий пролиферацию, предпочтительно ингибитор клеточного цикла, или антитело, или антителоподобный связывающий белок, который специфично связывается с белком, способствующим пролиферации, или нуклеиновую кислоту, предпочтительно кодирующую ингибирующий пролиферацию белок, или антитело, или антителоподобный связывающий белок, который специфично связывается с белком, способствующим пролиферации, или миРНК, или ДНК-фермент.
17. Выделенная система направленной доставки по любому из пп. 1-12, отличающаяся тем, что указанное фармацевтически активное вещество представляет собой пролекарство, активируемое гипоксией, предпочтительно выбранное из группы, состоящей из N-оксидов бензотриазина, апазиквона (EO9), тирапазамина (TPN), SN30000, PR-104A, TH-302, TH-4000, AQ4N.
18. Выделенная система направленной доставки по любому из пп. 1-12, отличающаяся тем, что указанное фармацевтически активное вещество представляет собой антиген или нуклеиновую кислоту, кодирующую антиген.
19. Выделенная система направленной доставки по любому из пп. 1-18, отличающаяся тем, что указанная метка выбрана из группы, состоящей из флуоресцентного красителя, изотопа, испускающего флуоресценцию, радиоизотопа, детектируемого полипептида или нуклеиновой кислоты, кодирующей детектируемый полипептид, и контрастного агента.
20. Выделенная система направленной доставки по любому из пп. 1-18, отличающаяся тем, что указанная метка содержит хелатирующий агент, который образует комплекс с катионами двухвалентного или трехвалентного металла.
21. Выделенная система направленной доставки по п. 20, отличающаяся тем, что указанный хелатирующий агент выбран из группы, состоящей из 1,4,7,10-тетраазациклододекан-N,N',N,N'-тетрауксусной кислоты (DOTA), этилендиаминтетрауксусной кислоты (EDTA), 1,4,7-триазациклононан-1,4,7-триуксусной кислоты (NOTA), триэтилентетрамина (TETA), иминодиуксусной кислоты, диэтилентриамин-N,N,N',N',N''-пентауксусной кислоты (DTPA) и 6-гидразинопиридин-3-карбоновой кислоты (HYNIC).
22. Выделенная система направленной доставки по п. 13, отличающаяся тем, что указанный контрастный агент включает парамагнитный агент, предпочтительно выбранный из Gd, Eu, W и Mn или ферригидрита.
23. Выделенная система направленной доставки по п. 19, отличающаяся тем, что радиоизотоп/изотоп, испускающий флуоресценцию, выбран из группы, состоящей из изотопов, испускающих альфа-излучение, изотопов, испускающих гамма-излучение, изотопов, испускающих Оже-электроны, изотопов, испускающих рентгеновское излучение, флуоресцентных изотопов, таких как 65Tb, изотопов, испускающих флуоресценцию, таких как 18F, 51Cr, 67Ga, 68Ga, 89Zr, 111In, 99mTc, 140La, 175Yb, 153Sm, 166Ho, 88Y, 90Y, 149Pm, 177Lu, 47Sc, 142Pr, 159Gd, 212Bi, 72As, 72Se, 97Ru, 109Pd, 105Rh, 101m15Rh, 119Sb, 128Ba, 123I, 124I, 131I, 197Hg, 211At, 169Eu, 203Pb, 212Pb, 64Cu, 67Cu, 188Re, 186Re, 198Au и 199Ag, а также конъюгатов, соединений, содержащих перечисленные выше изотопы, и комбинаций указанных молекул с белками, пептидами, низкомолекулярными ингибиторами, антителами или другими соединениями.
24. Выделенная система направленной доставки по п. 19, отличающаяся тем, что указанный флуоресцентный краситель выбран из группы, состоящей из следующих классов флуоресцентных красителей: ксантены, акридины, оксазины, цинины, стириловые красители, кумарины, порфины, комплексы металл-лиганд, флуоресцентные белки, нанокристаллы, перилены и фталоцианины, а также конъюгатов и комбинаций указанных классов красителей.
25. Выделенная система направленной доставки по п. 19, отличающаяся тем, что указанный детектируемый полипептид представляет собой аутофлуоресцентный белок, предпочтительно зеленый флуоресцентный белок, или любой его структурный вариант с измененным спектром адсорбции и/или эмиссии.
26. Выделенная система направленной доставки по любому из пп. 1-25, отличающаяся тем, что:
(i) связь(и) между указанным(ми) железосвязывающим(и) белком(ами) и указанным фармацевтически активным веществом, меткой или фармацевтически активным веществом и меткой, содержащимися в комплексе, является(ются) ковалентной(ыми) и/или нековалентной(ыми); и/или
(ii) фармацевтически активное вещество, метка или фармацевтически активное вещество и метка, содержащиеся в указанном комплексе, захватываются/инкапсулируются указанным железосвязывающим белком или его мультимерами.
27. Способ получения выделенной системы направленной доставки по любому из пп. 1-26, включающий стадии:
a) обеспечения очищенного железосвязывающего белка;
b) осуществления ковалентного или нековалентного связывания фармацевтически активного вещества, метки или фармацевтически активного вещества и метки с железосвязывающим белком и/или инкапсулирования фармацевтически активного вещества, метки или фармацевтически активного вещества и метки в железосвязывающий белок;
c) обеспечения клетки, представляющей собой CD45+ лейкоцит; и
d) инкубирования клетки, представляющей собой CD45+ лейкоцит, в присутствии указанного железосвязывающего белка, полученного на стадии b), до достижения по меньшей мере частичной загрузки указанной клетки, представляющей собой CD45+ лейкоцит, комплексом указанного железосвязывающего белка и фармацевтически активного вещества, метки или фармацевтически активного вещества и метки, полученного на стадии b).
28. Выделенная система направленной доставки по любому из пп. 1-26 для доставки фармацевтически активного вещества, метки или фармацевтически активного вещества и метки в области гипоксии.
29. Выделенная система направленной доставки по п. 28, отличающаяся тем, что указанные области гипоксии включают опухоли и/или области воспаления.
30. Выделенная система направленной доставки по любому из пп. 28, 29, отличающаяся тем, что доставляют лекарственное средство.
31. Выделенная система направленной доставки по любому из пп. 28, 29, отличающаяся тем, что доставляют диагностическое средство.
32. Выделенная система направленной доставки по любому из пп. 28-30, отличающаяся тем, что указанная доставка предназначена для предотвращения или лечения опухоли, воспалительного заболевания или областей ишемии или для профилактической или терапевтической вакцинации.
33. Выделенная система направленной доставки по любому из пп. 28, 29 или 31, отличающаяся тем, что указанная доставка предназначена для диагностики опухоли, воспалительного заболевания или областей ишемии.
34. Выделенная система направленной доставки по любому из пп. 28-33, отличающаяся тем, что указанная опухоль представляет собой солидную опухоль и/или ее метастазы, рак молочной железы, рак поджелудочной железы, рак мочевого пузыря, рак легкого, рак толстой кишки или опухоль, характеризующуюся областями гипоксии.
35. Выделенная система направленной доставки по любому из пп. 28-33, отличающаяся тем, что указанные области ишемии присутствуют в ранах кожи или после инфаркта органа (сердца) или ретинальной ишемии.
36. Выделенная система направленной доставки по любому из пп. 28-32, отличающаяся тем, что указанная вакцинация предназначена для предотвращения или лечения инфекционного заболевания или рака.
37. Композиция для обеспечения направленной доставки фармацевтически активного вещества, метки или фармацевтически активного вещества и метки нуждающемуся в этом субъекту, содержащая выделенную систему направленной доставки по любому из пп. 1-26 в эффективном количестве, и фармацевтически приемлемое вещество-носитель и/или подходящее(ие) вспомогательное(ые) вещество(а).
38. Композиция по п. 37, отличающаяся тем, что указанная доставка предназначена для диагностики опухоли, воспалительного заболевания или областей ишемии.
39. Композиция по п. 37, отличающаяся тем, что указанная доставка предназначена для предотвращения или лечения опухоли, воспалительного заболевания или областей ишемии или для профилактической или терапевтической вакцинации.
40. Композиция по п. 38 или 39, отличающаяся тем, что указанная композиция представляет собой фармацевтическую композицию.
41. Применение CD45+ лейкоцита, который содержит комплекс по меньшей мере одного железосвязывающего белка и фармацевтически активного вещества, метки или фармацевтически активного вещества и метки для доставки фармацевтически активного вещества, метки или фармацевтически активного вещества и метки в области гипоксии.
Applications Claiming Priority (6)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
PL412787A PL412787A1 (pl) | 2015-06-22 | 2015-06-22 | Oparty na makrofagach celowany system dostarczania związków związanych z ferrytyną |
PCT/EP2016/064484 WO2016207257A1 (en) | 2015-06-22 | 2016-06-22 | Cellular targeted active ingredient delivery system |
EPPCT/EP2016/064484 | 2016-06-22 | ||
EPPCT/EP2016/064483 | 2016-06-22 | ||
PCT/EP2016/064483 WO2016207256A1 (en) | 2015-06-22 | 2016-06-22 | Cellular targeted label delivery system |
PCT/PL2016/050057 WO2017222398A1 (en) | 2016-06-22 | 2016-12-21 | Cellular targeted pharmaceutically active substance or label delivery system |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2018144424A3 RU2018144424A3 (ru) | 2020-07-22 |
RU2018144424A RU2018144424A (ru) | 2020-07-22 |
RU2771323C2 true RU2771323C2 (ru) | 2022-04-29 |
Family
ID=56235808
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2018144424A RU2771323C2 (ru) | 2015-06-22 | 2016-12-21 | Клеточная система направленной доставки фармацевтически активного вещества или метки |
Country Status (18)
Country | Link |
---|---|
US (5) | US11464879B2 (ru) |
EP (2) | EP3310904B1 (ru) |
JP (3) | JP7053269B2 (ru) |
KR (5) | KR20180027521A (ru) |
CN (2) | CN108026514A (ru) |
AU (2) | AU2016282846B2 (ru) |
BR (1) | BR112017027876A2 (ru) |
CA (3) | CA2989491A1 (ru) |
CL (1) | CL2017003307A1 (ru) |
EA (1) | EA039755B1 (ru) |
HK (1) | HK1253919A1 (ru) |
IL (1) | IL256363B (ru) |
MX (1) | MX2017017079A (ru) |
MY (1) | MY195009A (ru) |
NZ (1) | NZ739133A (ru) |
PL (1) | PL412787A1 (ru) |
RU (1) | RU2771323C2 (ru) |
WO (2) | WO2016207256A1 (ru) |
Families Citing this family (15)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20130116404A1 (en) | 2011-11-08 | 2013-05-09 | Case Western Reserve University | Targeted non-invasive imaging probes of egfr expressing cells |
FR3004650B1 (fr) * | 2013-04-22 | 2015-05-29 | Affilogic | Composition topique comprenant un variant d'une protéine sauvage à pli-OB, ainsi que son procédé de préparation |
PL412787A1 (pl) | 2015-06-22 | 2017-01-02 | Magdalena Król | Oparty na makrofagach celowany system dostarczania związków związanych z ferrytyną |
EP3475415A1 (en) * | 2016-06-22 | 2019-05-01 | Cellis AG | Cellular targeted pharmaceutically active substance or label delivery system |
WO2019183633A1 (en) | 2018-03-23 | 2019-09-26 | Case Western Reserve Univeristy | Psma targeted conjugate compounds and uses thereof |
CN108671237A (zh) * | 2018-05-31 | 2018-10-19 | 同济大学 | 一种增强药物靶向递送的载体及其获得方法与应用 |
WO2020018434A1 (en) * | 2018-07-17 | 2020-01-23 | Scripps Health | Compositions and methods for disrupting a macrophage network |
EP3650046A1 (en) | 2018-11-08 | 2020-05-13 | Cellis AG | Mesenchymal stem cell based targeted active ingredient delivery system |
WO2020236952A1 (en) * | 2019-05-20 | 2020-11-26 | Ohio State Innovation Foundation | Apohemoglobin-haptoglobin complexes and methods of using thereof |
CN112107556A (zh) * | 2019-06-03 | 2020-12-22 | 北京大学 | 一种含砷纳米药物及其制备方法 |
WO2021137611A1 (ko) * | 2019-12-30 | 2021-07-08 | (주)테라베스트 | 나노 구조체가 부착된 면역세포 |
JP2023518932A (ja) | 2020-03-18 | 2023-05-09 | セリス アーゲー | 安定性、複合体形成能力及びトランスフェリン受容体親和性が向上したフェリチン変異体 |
EP4163294A1 (en) * | 2020-06-09 | 2023-04-12 | Ajinomoto Co., Inc. | Modified ferritin and method for producing same |
CN113367335B (zh) * | 2021-06-24 | 2022-05-06 | 中国农业大学 | 一种提高虾青素水溶性且保护其免受Fe2+氧化降解的方法 |
WO2024056413A1 (en) | 2022-09-13 | 2024-03-21 | Cellis Ag | Isolated targeted delivery system for the treatment of glioma |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2011119881A1 (en) * | 2010-03-24 | 2011-09-29 | Northeastern University | Multi-compartmental macrophage delivery |
RU2552609C1 (ru) * | 2013-10-28 | 2015-06-10 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт молекулярной биотехнологии им. В.А. Энгельгардта Российской академии наук (ИМБ РАН) | Способ получения системы направленной доставки белковых молекул (онколитических белков) в опухолевые ткани на основе активированных лимфоцитов |
Family Cites Families (17)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5582981A (en) | 1991-08-14 | 1996-12-10 | Gilead Sciences, Inc. | Method for identifying an oligonucleotide aptamer specific for a target |
AU665599B2 (en) | 1991-11-08 | 1996-01-11 | Hemosol Inc. | Hemoglobins as drug delivery agents |
US7097841B2 (en) * | 2002-05-10 | 2006-08-29 | New Century Pharmaceuticals, Inc. | Ferritin fusion proteins for use in vaccines and other applications |
ES2579235T3 (es) | 2005-06-29 | 2016-08-08 | Threshold Pharmaceuticals, Inc. | Profármacos Alquilantes de Fosforamidato |
AU2007232356A1 (en) | 2006-04-03 | 2007-10-11 | Keele University | Targeted therapy |
GB0606660D0 (en) * | 2006-04-03 | 2006-05-10 | Univ Keele | Targeted Therapy |
WO2008054509A2 (en) | 2006-04-14 | 2008-05-08 | Celsense, Inc. | Methods for assessing cell labeling |
ES2884044T3 (es) | 2006-12-26 | 2021-12-10 | Immunogenesis Inc | Profármaco alquilante de fosforamidato para el tratamiento del cáncer |
TWI458512B (zh) * | 2008-02-21 | 2014-11-01 | Immunolight Llc | 利用電漿子增強之光譜療法(pepst)及激子-電漿增強之光療法〈epep〉治療細胞增生病症之組合物及產生自體疫苗之系統 |
WO2012027376A2 (en) | 2010-08-23 | 2012-03-01 | The Research Foundation Of State University Of New York | Method for expansion of stem cells and the use of such cells |
AU2013251785B2 (en) * | 2012-04-24 | 2018-05-10 | Dan S. Kaufman | Method for developing natural killer cells from stem cells |
WO2014031727A1 (en) | 2012-08-21 | 2014-02-27 | Brown University | Ferritin-based tumor targeting agent, and imaging and treatment methods |
WO2014078768A1 (en) * | 2012-11-19 | 2014-05-22 | Troyer Deryl L | Leukocytes as delivery cells for imaging and disease therapy |
WO2014208100A1 (ja) | 2013-06-28 | 2014-12-31 | 学校法人慶應義塾 | 間葉系細胞を利用した巨核球、血小板及び/又はトロンボポエチンの製造方法 |
US10022659B2 (en) | 2013-07-24 | 2018-07-17 | Aichi Prefecture | Device for isolating periphery circulating tumor cells or rare cells, and method of isolating periphery circulating tumor cells or rare cells |
WO2015135597A1 (en) * | 2014-03-12 | 2015-09-17 | Cic Nanogune - Asociación Centro De Investigación Cooperativa En Nanociencias | Uses and methods for delivery to the nucleus |
PL412787A1 (pl) * | 2015-06-22 | 2017-01-02 | Magdalena Król | Oparty na makrofagach celowany system dostarczania związków związanych z ferrytyną |
-
2015
- 2015-06-22 PL PL412787A patent/PL412787A1/pl unknown
-
2016
- 2016-06-22 CA CA2989491A patent/CA2989491A1/en active Pending
- 2016-06-22 EA EA201890079A patent/EA039755B1/ru unknown
- 2016-06-22 JP JP2017567303A patent/JP7053269B2/ja active Active
- 2016-06-22 MX MX2017017079A patent/MX2017017079A/es unknown
- 2016-06-22 AU AU2016282846A patent/AU2016282846B2/en active Active
- 2016-06-22 CA CA2989489A patent/CA2989489A1/en active Pending
- 2016-06-22 KR KR1020187001583A patent/KR20180027521A/ko not_active IP Right Cessation
- 2016-06-22 KR KR1020227003859A patent/KR102447396B1/ko active IP Right Grant
- 2016-06-22 EP EP16732271.8A patent/EP3310904B1/en active Active
- 2016-06-22 MY MYPI2017001887A patent/MY195009A/en unknown
- 2016-06-22 KR KR1020217016460A patent/KR20210075196A/ko not_active Application Discontinuation
- 2016-06-22 NZ NZ739133A patent/NZ739133A/en unknown
- 2016-06-22 EP EP16733390.5A patent/EP3310905B1/en active Active
- 2016-06-22 CN CN201680047506.5A patent/CN108026514A/zh active Pending
- 2016-06-22 WO PCT/EP2016/064483 patent/WO2016207256A1/en active Application Filing
- 2016-06-22 US US15/739,382 patent/US11464879B2/en active Active
- 2016-06-22 WO PCT/EP2016/064484 patent/WO2016207257A1/en active Application Filing
- 2016-06-22 IL IL256363A patent/IL256363B/en unknown
- 2016-06-22 BR BR112017027876A patent/BR112017027876A2/pt active Search and Examination
- 2016-06-22 US US15/739,392 patent/US20200030468A1/en not_active Abandoned
- 2016-06-22 JP JP2017567293A patent/JP7092505B2/ja active Active
- 2016-06-22 CN CN201680047507.XA patent/CN108138143A/zh active Pending
- 2016-06-22 KR KR1020227032814A patent/KR102621732B1/ko active IP Right Grant
- 2016-12-21 CA CA3027531A patent/CA3027531A1/en active Pending
- 2016-12-21 RU RU2018144424A patent/RU2771323C2/ru active
- 2016-12-21 JP JP2019519948A patent/JP7045370B2/ja active Active
- 2016-12-21 AU AU2016410262A patent/AU2016410262B2/en active Active
- 2016-12-21 US US16/312,726 patent/US20190328911A1/en not_active Abandoned
- 2016-12-21 KR KR1020197001831A patent/KR20190038540A/ko not_active Application Discontinuation
-
2017
- 2017-12-21 CL CL2017003307A patent/CL2017003307A1/es unknown
-
2018
- 2018-10-12 HK HK18113067.1A patent/HK1253919A1/zh unknown
-
2021
- 2021-06-29 US US17/361,897 patent/US20210322584A1/en active Pending
-
2022
- 2022-05-16 US US17/745,016 patent/US20220280663A1/en active Pending
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2011119881A1 (en) * | 2010-03-24 | 2011-09-29 | Northeastern University | Multi-compartmental macrophage delivery |
RU2552609C1 (ru) * | 2013-10-28 | 2015-06-10 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт молекулярной биотехнологии им. В.А. Энгельгардта Российской академии наук (ИМБ РАН) | Способ получения системы направленной доставки белковых молекул (онколитических белков) в опухолевые ткани на основе активированных лимфоцитов |
Non-Patent Citations (5)
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2771323C2 (ru) | Клеточная система направленной доставки фармацевтически активного вещества или метки | |
WO2017222398A1 (en) | Cellular targeted pharmaceutically active substance or label delivery system | |
US20230174624A1 (en) | Ferritin variants with increased stability, complexation ability and transferrin receptor affinity | |
EP2827908A2 (en) | Peptides | |
WO2022195092A1 (en) | Ferritin variants with increased stability and complexation ability | |
US20240060045A1 (en) | Cellular targeted active ingredient delivery system |