RU2768030C2 - Bifidobacterium longum, способный благоприятно модулировать иммунный ответ на респираторную вирусную инфекцию - Google Patents
Bifidobacterium longum, способный благоприятно модулировать иммунный ответ на респираторную вирусную инфекцию Download PDFInfo
- Publication number
- RU2768030C2 RU2768030C2 RU2019128539A RU2019128539A RU2768030C2 RU 2768030 C2 RU2768030 C2 RU 2768030C2 RU 2019128539 A RU2019128539 A RU 2019128539A RU 2019128539 A RU2019128539 A RU 2019128539A RU 2768030 C2 RU2768030 C2 RU 2768030C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- paragraphs
- strain
- virus
- bifidobacterium
- response
- Prior art date
Links
- 241001608472 Bifidobacterium longum Species 0.000 title claims abstract description 119
- 229940009291 bifidobacterium longum Drugs 0.000 title claims abstract description 55
- 206010062106 Respiratory tract infection viral Diseases 0.000 title claims abstract description 10
- 230000028993 immune response Effects 0.000 title abstract description 15
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 claims abstract description 32
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 claims abstract description 25
- 241000709661 Enterovirus Species 0.000 claims abstract description 22
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 claims abstract description 16
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 claims abstract description 16
- 241000725643 Respiratory syncytial virus Species 0.000 claims abstract description 14
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims abstract description 9
- 230000004044 response Effects 0.000 claims description 99
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 91
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 claims description 80
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 71
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 claims description 49
- 102100025248 C-X-C motif chemokine 10 Human genes 0.000 claims description 48
- 101710098275 C-X-C motif chemokine 10 Proteins 0.000 claims description 48
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 41
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 40
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 33
- 108090000467 Interferon-beta Proteins 0.000 claims description 31
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 29
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 claims description 26
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 claims description 26
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 claims description 25
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 claims description 25
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 25
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 claims description 24
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 claims description 23
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 20
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 claims description 18
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 claims description 18
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 claims description 18
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 claims description 18
- 208000006545 Chronic Obstructive Pulmonary Disease Diseases 0.000 claims description 17
- 108010007127 Pulmonary Surfactant-Associated Protein D Proteins 0.000 claims description 17
- 102100027845 Pulmonary surfactant-associated protein D Human genes 0.000 claims description 17
- 102000003996 Interferon-beta Human genes 0.000 claims description 16
- 108010018844 interferon type III Proteins 0.000 claims description 16
- 206010001052 Acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 claims description 15
- 229960001388 interferon-beta Drugs 0.000 claims description 15
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 14
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 14
- 230000010468 interferon response Effects 0.000 claims description 12
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 11
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 10
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 claims description 10
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 claims description 10
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 10
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 9
- 235000013406 prebiotics Nutrition 0.000 claims description 9
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 9
- 230000010472 type I IFN response Effects 0.000 claims description 9
- 239000003826 tablet Substances 0.000 claims description 8
- 235000013618 yogurt Nutrition 0.000 claims description 8
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims description 7
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 claims description 7
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 claims description 6
- 230000007815 allergy Effects 0.000 claims description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 6
- 235000015243 ice cream Nutrition 0.000 claims description 6
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 claims description 6
- 239000007922 nasal spray Substances 0.000 claims description 6
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 6
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 6
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 claims description 6
- 206010057190 Respiratory tract infections Diseases 0.000 claims description 5
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 5
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000008267 milk Substances 0.000 claims description 5
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 claims description 5
- 229940097496 nasal spray Drugs 0.000 claims description 5
- 208000019693 Lung disease Diseases 0.000 claims description 4
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 4
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 235000021262 sour milk Nutrition 0.000 claims description 4
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims description 3
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 claims description 3
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 claims description 3
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims description 3
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000002366 mineral element Substances 0.000 claims description 3
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 3
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 claims description 3
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 claims description 3
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 claims description 3
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 claims description 3
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 claims description 3
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 claims description 3
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 claims description 2
- 230000001332 colony forming effect Effects 0.000 claims description 2
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 claims description 2
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 claims description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 16
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 abstract description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 5
- 230000008030 elimination Effects 0.000 abstract description 4
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 abstract description 4
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 33
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 33
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 26
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 25
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 25
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 21
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 21
- 241001429370 Human rhinovirus A16 Species 0.000 description 19
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 19
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 17
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 16
- 102100026720 Interferon beta Human genes 0.000 description 15
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 15
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 15
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 14
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 14
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 14
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 14
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 14
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 12
- 108091023242 Internal transcribed spacer Proteins 0.000 description 12
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 12
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 12
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 12
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 11
- OHDXDNUPVVYWOV-UHFFFAOYSA-N n-methyl-1-(2-naphthalen-1-ylsulfanylphenyl)methanamine Chemical compound CNCC1=CC=CC=C1SC1=CC=CC2=CC=CC=C12 OHDXDNUPVVYWOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 11
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 11
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 10
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 10
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 10
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 9
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 9
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 9
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 9
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 9
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 8
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 8
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 8
- 239000000306 component Substances 0.000 description 8
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 8
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 8
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 8
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 7
- 208000013616 Respiratory Distress Syndrome Diseases 0.000 description 7
- 201000000028 adult respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 7
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 7
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 7
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 7
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 7
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 7
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 7
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 7
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 7
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 7
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 6
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 6
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 6
- 208000003322 Coinfection Diseases 0.000 description 6
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 6
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 6
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 6
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 6
- 102000002689 Toll-like receptor Human genes 0.000 description 6
- 108020000411 Toll-like receptor Proteins 0.000 description 6
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 6
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 6
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 6
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 6
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 6
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 6
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 6
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 5
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229920002444 Exopolysaccharide Polymers 0.000 description 5
- -1 IL-12p70 Proteins 0.000 description 5
- 102000013691 Interleukin-17 Human genes 0.000 description 5
- 108050003558 Interleukin-17 Proteins 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 5
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 5
- IQFVPQOLBLOTPF-HKXUKFGYSA-L congo red Chemical compound [Na+].[Na+].C1=CC=CC2=C(N)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3)C3=CC=C(C=C3)/N=N/C3=C(C4=CC=CC=C4C(=C3)S([O-])(=O)=O)N)=CC(S([O-])(=O)=O)=C21 IQFVPQOLBLOTPF-HKXUKFGYSA-L 0.000 description 5
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 5
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 5
- 230000005860 defense response to virus Effects 0.000 description 5
- 238000011161 development Methods 0.000 description 5
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 5
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 5
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 5
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 5
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 5
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 5
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 5
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 5
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 5
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 4
- 241000430519 Human rhinovirus sp. Species 0.000 description 4
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 4
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 4
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 4
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 4
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 4
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 4
- 230000034994 death Effects 0.000 description 4
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 4
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 4
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 4
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 4
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 4
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 4
- 230000007112 pro inflammatory response Effects 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 4
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 4
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 4
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 4
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 4
- 230000029812 viral genome replication Effects 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 3
- 102000016911 Deoxyribonucleases Human genes 0.000 description 3
- 108010053770 Deoxyribonucleases Proteins 0.000 description 3
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 3
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 3
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 3
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 3
- 102000002227 Interferon Type I Human genes 0.000 description 3
- 108010014726 Interferon Type I Proteins 0.000 description 3
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 description 3
- 102000003814 Interleukin-10 Human genes 0.000 description 3
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 3
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 description 3
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 3
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 description 3
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000193998 Streptococcus pneumoniae Species 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 3
- 239000002975 chemoattractant Substances 0.000 description 3
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 3
- 229960002433 cysteine Drugs 0.000 description 3
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 3
- 238000000432 density-gradient centrifugation Methods 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 3
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 3
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- 230000007407 health benefit Effects 0.000 description 3
- 150000005828 hydrofluoroalkanes Chemical class 0.000 description 3
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 208000002551 irritable bowel syndrome Diseases 0.000 description 3
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 3
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 3
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 3
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 3
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 3
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 3
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 3
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 3
- 108010009719 mutanolysin Proteins 0.000 description 3
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 3
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 3
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 3
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 3
- 235000008476 powdered milk Nutrition 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 239000003380 propellant Substances 0.000 description 3
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 3
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 3
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 241000894007 species Species 0.000 description 3
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 3
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 3
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 3
- MINDHVHHQZYEEK-UHFFFAOYSA-N (E)-(2S,3R,4R,5S)-5-[(2S,3S,4S,5S)-2,3-epoxy-5-hydroxy-4-methylhexyl]tetrahydro-3,4-dihydroxy-(beta)-methyl-2H-pyran-2-crotonic acid ester with 9-hydroxynonanoic acid Natural products CC(O)C(C)C1OC1CC1C(O)C(O)C(CC(C)=CC(=O)OCCCCCCCCC(O)=O)OC1 MINDHVHHQZYEEK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 206010006895 Cachexia Diseases 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010052764 Fructose-6-phosphate phosphoketolase Proteins 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 241000606768 Haemophilus influenzae Species 0.000 description 2
- 102000004157 Hydrolases Human genes 0.000 description 2
- 108090000604 Hydrolases Proteins 0.000 description 2
- 230000005353 IP-10 production Effects 0.000 description 2
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 2
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 241000588655 Moraxella catarrhalis Species 0.000 description 2
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 2
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 2
- 208000037656 Respiratory Sounds Diseases 0.000 description 2
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 2
- 241000194026 Streptococcus gordonii Species 0.000 description 2
- 244000057717 Streptococcus lactis Species 0.000 description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 206010047924 Wheezing Diseases 0.000 description 2
- 101000872823 Xenopus laevis Probable histone deacetylase 1-A Proteins 0.000 description 2
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 2
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 2
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 2
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 2
- 230000002074 deregulated effect Effects 0.000 description 2
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 2
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 2
- 108010060371 endo-N-acetylmuramidase Proteins 0.000 description 2
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 2
- ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N ethidium bromide Chemical compound [Br-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CC)=C1C1=CC=CC=C1 ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 125000003147 glycosyl group Chemical group 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 229940047650 haemophilus influenzae Drugs 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N hydrocortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 2
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 229960000598 infliximab Drugs 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 2
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 2
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 2
- 229940028885 interleukin-4 Drugs 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 239000007937 lozenge Substances 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 2
- 229940071648 metered dose inhaler Drugs 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 239000001788 mono and diglycerides of fatty acids Substances 0.000 description 2
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 2
- 229960003128 mupirocin Drugs 0.000 description 2
- 229930187697 mupirocin Natural products 0.000 description 2
- DDHVILIIHBIMQU-YJGQQKNPSA-L mupirocin calcium hydrate Chemical compound O.O.[Ca+2].C[C@H](O)[C@H](C)[C@@H]1O[C@H]1C[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](C\C(C)=C\C(=O)OCCCCCCCCC([O-])=O)OC1.C[C@H](O)[C@H](C)[C@@H]1O[C@H]1C[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](C\C(C)=C\C(=O)OCCCCCCCCC([O-])=O)OC1 DDHVILIIHBIMQU-YJGQQKNPSA-L 0.000 description 2
- 201000009240 nasopharyngitis Diseases 0.000 description 2
- 239000006199 nebulizer Substances 0.000 description 2
- 229940021182 non-steroidal anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 2
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 2
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 2
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 2
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 2
- 239000012465 retentate Substances 0.000 description 2
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 238000010845 search algorithm Methods 0.000 description 2
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 2
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 2
- 229940031000 streptococcus pneumoniae Drugs 0.000 description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 201000010740 swine influenza Diseases 0.000 description 2
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 2
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000016261 weight loss Diseases 0.000 description 2
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 2
- 208000002874 Acne Vulgaris Diseases 0.000 description 1
- 208000000884 Airway Obstruction Diseases 0.000 description 1
- HJCMDXDYPOUFDY-WHFBIAKZSA-N Ala-Gln Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O HJCMDXDYPOUFDY-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 1
- 244000144725 Amygdalus communis Species 0.000 description 1
- 235000011437 Amygdalus communis Nutrition 0.000 description 1
- 229920000856 Amylose Polymers 0.000 description 1
- 208000031295 Animal disease Diseases 0.000 description 1
- 206010003011 Appendicitis Diseases 0.000 description 1
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 208000031729 Bacteremia Diseases 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010006448 Bronchiolitis Diseases 0.000 description 1
- 206010006458 Bronchitis chronic Diseases 0.000 description 1
- 238000009631 Broth culture Methods 0.000 description 1
- 102100021943 C-C motif chemokine 2 Human genes 0.000 description 1
- 101710155857 C-C motif chemokine 2 Proteins 0.000 description 1
- 102100028990 C-X-C chemokine receptor type 3 Human genes 0.000 description 1
- 108700012434 CCL3 Proteins 0.000 description 1
- 101150093802 CXCL1 gene Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 102100035882 Catalase Human genes 0.000 description 1
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 1
- 102000000013 Chemokine CCL3 Human genes 0.000 description 1
- 102000001326 Chemokine CCL4 Human genes 0.000 description 1
- 108010055165 Chemokine CCL4 Proteins 0.000 description 1
- 208000014085 Chronic respiratory disease Diseases 0.000 description 1
- 241001112696 Clostridia Species 0.000 description 1
- 206010053567 Coagulopathies Diseases 0.000 description 1
- 208000015943 Coeliac disease Diseases 0.000 description 1
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 1
- 206010010774 Constipation Diseases 0.000 description 1
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 1
- 206010011416 Croup infectious Diseases 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 206010014561 Emphysema Diseases 0.000 description 1
- 208000017701 Endocrine disease Diseases 0.000 description 1
- 108010092408 Eosinophil Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 102100028471 Eosinophil peroxidase Human genes 0.000 description 1
- 108010008165 Etanercept Proteins 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 1
- 208000004262 Food Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 206010017533 Fungal infection Diseases 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 102100031181 Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 108010031186 Glycoside Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 102000005744 Glycoside Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 102100034221 Growth-regulated alpha protein Human genes 0.000 description 1
- 206010069767 H1N1 influenza Diseases 0.000 description 1
- 101000916050 Homo sapiens C-X-C chemokine receptor type 3 Proteins 0.000 description 1
- 101000599613 Homo sapiens Interferon lambda receptor 1 Proteins 0.000 description 1
- 101001002470 Homo sapiens Interferon lambda-1 Proteins 0.000 description 1
- 101001002657 Homo sapiens Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 101001076408 Homo sapiens Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 101000946889 Homo sapiens Monocyte differentiation antigen CD14 Proteins 0.000 description 1
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 208000029462 Immunodeficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 description 1
- 102100037971 Interferon lambda receptor 1 Human genes 0.000 description 1
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 1
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 description 1
- 102000014158 Interleukin-12 Subunit p40 Human genes 0.000 description 1
- 108010011429 Interleukin-12 Subunit p40 Proteins 0.000 description 1
- 108090000176 Interleukin-13 Proteins 0.000 description 1
- 102000003816 Interleukin-13 Human genes 0.000 description 1
- 102000003812 Interleukin-15 Human genes 0.000 description 1
- 108090000172 Interleukin-15 Proteins 0.000 description 1
- 102000049772 Interleukin-16 Human genes 0.000 description 1
- 101800003050 Interleukin-16 Proteins 0.000 description 1
- 102100033105 Interleukin-17C Human genes 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 102100030703 Interleukin-22 Human genes 0.000 description 1
- 108010065637 Interleukin-23 Proteins 0.000 description 1
- 102000013264 Interleukin-23 Human genes 0.000 description 1
- 108010002616 Interleukin-5 Proteins 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 1
- 108010002335 Interleukin-9 Proteins 0.000 description 1
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 1
- 208000004852 Lung Injury Diseases 0.000 description 1
- 241000282553 Macaca Species 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000002720 Malnutrition Diseases 0.000 description 1
- 101710085938 Matrix protein Proteins 0.000 description 1
- 101710127721 Membrane protein Proteins 0.000 description 1
- 241001575980 Mendoza Species 0.000 description 1
- 101710151803 Mitochondrial intermediate peptidase 2 Proteins 0.000 description 1
- 102100035877 Monocyte differentiation antigen CD14 Human genes 0.000 description 1
- 101100163162 Mus musculus Areg gene Proteins 0.000 description 1
- 101000746384 Mus musculus Granulocyte colony-stimulating factor Proteins 0.000 description 1
- 101001054328 Mus musculus Interferon beta Proteins 0.000 description 1
- 101100369993 Mus musculus Tnfsf10 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000031888 Mycoses Diseases 0.000 description 1
- MNLRQHMNZILYPY-MDMHTWEWSA-N N-acetyl-alpha-D-muramic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](C)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@@H]1NC(C)=O MNLRQHMNZILYPY-MDMHTWEWSA-N 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N N-acetyl-beta-D-glucosamine Chemical group CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N 0.000 description 1
- 206010061309 Neoplasm progression Diseases 0.000 description 1
- 108090000630 Oncostatin M Proteins 0.000 description 1
- 102000004140 Oncostatin M Human genes 0.000 description 1
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 description 1
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 1
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M Pyruvate Chemical compound CC(=O)C([O-])=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010061494 Rhinovirus infection Diseases 0.000 description 1
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 1
- 241000831652 Salinivibrio sharmensis Species 0.000 description 1
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 description 1
- 208000019802 Sexually transmitted disease Diseases 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 235000014897 Streptococcus lactis Nutrition 0.000 description 1
- 201000005010 Streptococcus pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 239000012163 TRI reagent Substances 0.000 description 1
- 108010055044 Tetanus Toxin Proteins 0.000 description 1
- 210000000447 Th1 cell Anatomy 0.000 description 1
- 206010069363 Traumatic lung injury Diseases 0.000 description 1
- 240000001398 Typha domingensis Species 0.000 description 1
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 description 1
- 208000025609 Urogenital disease Diseases 0.000 description 1
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 1
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 230000001594 aberrant effect Effects 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- YXVHVBFCVDBUMB-UHFFFAOYSA-N acetic acid 2-[2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl-(carboxymethyl)amino]acetic acid Chemical compound CC(O)=O.CC(O)=O.CC(O)=O.OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O YXVHVBFCVDBUMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 206010000496 acne Diseases 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000011149 active material Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 1
- 235000020224 almond Nutrition 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 1
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 208000022531 anorexia Diseases 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000030741 antigen processing and presentation Effects 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- 230000005784 autoimmunity Effects 0.000 description 1
- OGBUMNBNEWYMNJ-UHFFFAOYSA-N batilol Chemical class CCCCCCCCCCCCCCCCCCOCC(O)CO OGBUMNBNEWYMNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 239000003833 bile salt Substances 0.000 description 1
- 229940093761 bile salts Drugs 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 208000015294 blood coagulation disease Diseases 0.000 description 1
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 235000020299 breve Nutrition 0.000 description 1
- 210000000424 bronchial epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 206010006451 bronchitis Diseases 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 239000003715 calcium chelating agent Substances 0.000 description 1
- 230000000711 cancerogenic effect Effects 0.000 description 1
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 231100000315 carcinogenic Toxicity 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 description 1
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 208000037887 cell injury Diseases 0.000 description 1
- 230000010307 cell transformation Effects 0.000 description 1
- 208000015114 central nervous system disease Diseases 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 208000029771 childhood onset asthma Diseases 0.000 description 1
- 208000007451 chronic bronchitis Diseases 0.000 description 1
- 208000037976 chronic inflammation Diseases 0.000 description 1
- 208000037893 chronic inflammatory disorder Diseases 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 230000004186 co-expression Effects 0.000 description 1
- 230000009852 coagulant defect Effects 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 1
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 1
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 1
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 1
- 201000010549 croup Diseases 0.000 description 1
- 239000002577 cryoprotective agent Substances 0.000 description 1
- 230000000093 cytochemical effect Effects 0.000 description 1
- 230000016396 cytokine production Effects 0.000 description 1
- 230000002380 cytological effect Effects 0.000 description 1
- 206010061428 decreased appetite Diseases 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 239000007933 dermal patch Substances 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000009025 developmental regulation Effects 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000011026 diafiltration Methods 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 235000019961 diglycerides of fatty acid Nutrition 0.000 description 1
- IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N dihydroxy(oxo)silane Chemical compound O[Si](O)=O IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 230000007783 downstream signaling Effects 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 229960000403 etanercept Drugs 0.000 description 1
- 229960005542 ethidium bromide Drugs 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000002550 fecal effect Effects 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 235000020932 food allergy Nutrition 0.000 description 1
- 235000012041 food component Nutrition 0.000 description 1
- 239000005428 food component Substances 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 210000003736 gastrointestinal content Anatomy 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 238000012239 gene modification Methods 0.000 description 1
- 235000021474 generally recognized As safe (food) Nutrition 0.000 description 1
- 235000021473 generally recognized as safe (food ingredients) Nutrition 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 230000005017 genetic modification Effects 0.000 description 1
- 235000013617 genetically modified food Nutrition 0.000 description 1
- 231100000024 genotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001738 genotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 244000005709 gut microbiome Species 0.000 description 1
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 description 1
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000011132 hemopoiesis Effects 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 230000007366 host health Effects 0.000 description 1
- 230000005745 host immune response Effects 0.000 description 1
- 229960000890 hydrocortisone Drugs 0.000 description 1
- 229920003063 hydroxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229940031574 hydroxymethyl cellulose Drugs 0.000 description 1
- 239000001866 hydroxypropyl methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920003088 hydroxypropyl methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000010979 hydroxypropyl methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N hydroxypropyl methyl cellulose Chemical compound OC1C(O)C(OC)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C(CO)O2)O)C(CO)O1 UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004047 hyperresponsiveness Effects 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000036737 immune function Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000007813 immunodeficiency Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 229960001438 immunostimulant agent Drugs 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 210000004969 inflammatory cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000006749 inflammatory damage Effects 0.000 description 1
- 208000037801 influenza A (H1N1) Diseases 0.000 description 1
- 230000004941 influx Effects 0.000 description 1
- 229940041682 inhalant solution Drugs 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000008011 inorganic excipient Substances 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 108010074108 interleukin-21 Proteins 0.000 description 1
- 108010074109 interleukin-22 Proteins 0.000 description 1
- 230000007358 intestinal barrier function Effects 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 1
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 1
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 231100000636 lethal dose Toxicity 0.000 description 1
- 150000002617 leukotrienes Chemical class 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 1
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 1
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 230000004199 lung function Effects 0.000 description 1
- 231100000515 lung injury Toxicity 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 230000001071 malnutrition Effects 0.000 description 1
- 235000000824 malnutrition Nutrition 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 1
- 235000019960 monoglycerides of fatty acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 108700023801 mouse interferon-lambda Proteins 0.000 description 1
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 229950006780 n-acetylglucosamine Drugs 0.000 description 1
- 210000003928 nasal cavity Anatomy 0.000 description 1
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000030212 nutrition disease Diseases 0.000 description 1
- 208000015380 nutritional deficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 230000000414 obstructive effect Effects 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 229940100688 oral solution Drugs 0.000 description 1
- 239000008012 organic excipient Substances 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 238000012261 overproduction Methods 0.000 description 1
- 229940094443 oxytocics prostaglandins Drugs 0.000 description 1
- 230000000242 pagocytic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 239000002304 perfume Substances 0.000 description 1
- 208000028169 periodontal disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002688 persistence Effects 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 1
- 239000008024 pharmaceutical diluent Substances 0.000 description 1
- 210000005134 plasmacytoid dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000004983 pleiotropic effect Effects 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 238000010837 poor prognosis Methods 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 231100000586 procarcinogen Toxicity 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 150000003180 prostaglandins Chemical class 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 239000012048 reactive intermediate Substances 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000007115 recruitment Effects 0.000 description 1
- 239000001044 red dye Substances 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000025053 regulation of cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000024833 regulation of cytokine production Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 208000023504 respiratory system disease Diseases 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 230000003381 solubilizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 235000019722 synbiotics Nutrition 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 229940118376 tetanus toxin Drugs 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000011285 therapeutic regimen Methods 0.000 description 1
- 230000000451 tissue damage Effects 0.000 description 1
- 231100000827 tissue damage Toxicity 0.000 description 1
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000005751 tumor progression Effects 0.000 description 1
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 description 1
- 241001515965 unidentified phage Species 0.000 description 1
- 210000001215 vagina Anatomy 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 238000003260 vortexing Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 1
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
- A61K35/741—Probiotics
- A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
- A61K35/745—Bifidobacteria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0043—Nose
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
- A61P11/06—Antiasthmatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
- A23V2200/314—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on lung or respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
- A23V2200/324—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on the immune system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
- A23V2200/332—Promoters of weight control and weight loss
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/51—Bifidobacterium
- A23V2400/533—Longum
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии и пищевой промышленности. Выделенный штамм Bifidobacterium longum NCIMB 42020 полезен для лечения вирусных инфекций, в частности вирусных респираторных инфекций, таких как грипп, риновирус и RSV (респираторный синцитиальный вирус). Bifidobacterium longum NCIMB 42020 также полезен для элиминации вторичных бактериальных инфекций. 5 н. и 64 з.п. ф-лы, 19 ил., 1 табл., 10 пр.
Description
ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Изобретение относится к бифидобактериям, которые являются одними из нескольких преобладающих поддающихся культивированию видов бактерий, присутствующих в кишечной микрофлоре человека.
ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Бифидобактерии считают пробиотиками, поскольку они представляют собой живые организмы, которые при приеме внутрь в достаточном количестве помимо базового питания оказывают полезные для здоровья эффекты. Для оказания пробиотического эффекта большое количество поступивших бифидобактерий должно достигнуть места их действия. Предполагаемое минимальное количество составляет 106-107 живых бифидобактерий на грамм содержимого кишечника (Bouhnik, Y., Lait 1993). В литературе имеются данные, демонстрирующие, что исследования in vivo, проведенные на взрослых и детях, свидетельствуют, что некоторые штаммы бифидобактерий способны выживать при прохождении через желудочно-кишечный тракт. Наблюдались существенные различия в способности различных штаммов бифидобактерий переносить присутствие кислоты и желчных солей, что указывало, что выживание является важным критерием для отбора потенциальных пробиотических штаммов.
Прием бифидобактерий внутрь может улучшать транзит пищи по желудочно-кишечному тракту и может предупреждать или способствовать лечению заболеваний, которые могут быть вызваны недостатком или нарушением микрофлоры, таким как инфекции желудочно-кишечного тракта (GIT), запор, синдром раздраженного кишечника (IBS), воспалительное заболевание кишечника (IBD) - болезнь Крона и язвенный колит, пищевые аллергии, диарея, вызванная антибиотиками, сердечно-сосудистые заболевания и некоторые виды рака (например, колоректальный рак).
Вирусные инфекции являются основной причиной заболеваемости и смертности. Вирус гриппа, риновирус (обычная простуда) и респираторный синцитиальный вирус (RSV) являются высокозаразными вирусами, которые у здоровых индивидуумов обычно успешно элиминируются благодаря надлежащему иммунному ответу организма-хозяина. Однако основной проблемой при указанных инфекциях является не исходный вирус, а вторичные инфекции, которые часто его сопровождают, например, бактериальные инфекции, вызывающие пневмонию, инфекция ткани синуса и тому подобные. Предрасположенные индивидуумы, такие как страдающие COPD (хроническая обструктивная болезнь легких) или астмой или ожирением, очень плохо отвечают на вирусные инфекции, и последующие вторичные инфекции являются серьезными и могут угрожать жизни таких индивидуумов.
Такие индуцированные вирусом осложнения ассоциированы с существенными затратами на медицинское обслуживание и значительным страданием. Разработка новых и эффективных видов лечения для этих осложнений будет целесообразна, поскольку существует неудовлетворенная значительная клиническая потребность. Введение кортикостероидов пациентам, пораженным вирусом гриппа, в частности пандемичным вирусом птичьего гриппа, продолжает вызывать разногласия, хотя и является относительно частым. Рутинное применение стероидов при инфекции вирусом гриппа не является идеальным, поскольку не снижает вирусной нагрузки, а также впоследствии подавляет элиминацию вторичных бактериальных инфекций (Yang et al, 2015).
На ранних стадиях инфекции в эпителиальных клетках легких происходит репликация вируса гриппа, риновируса и RSV, приводящая к активации вирусных сенсоров и высвобождению противовирусных интерферонов (IFN) I типа и III типа, а также хемокинов и цитокинов. Указанные провоспалительные медиаторы помогают элиминировать первичную инфекцию, однако IFN I типа также могут вызывать последущее повреждение (иммунопатология). Было показано, что ответы IFN I типа, такие как повышение уровня молекул IFN-α и IFN-β, напрямую коррелируют с увеличением заболеваемости и смертности на моделях инфекции, представляющей собой грипп (Davidson et al, 2014). Избыточное образование противовирусного IFN I типа и связанного с ним хемокина IP-10 подавляет надлежащий иммунный ответ, направленный на элиминацию вторичных инфекций (Nakamura et al, 2011; Shahangian et al, 2009; Li et al, 2012), таких как вызванные такими бактериальными агентами, как Streptococcus pneumonia, Moraxella catarrhalis и Haemophilus influenzae и даже Staphylococcus aureus (Hewitt et al, 2016). Указанные вторичные инфекции вызывают избыточную гибель клеток в легких. У предрасположенных индивидуумов это ведет к повреждению ткани легких и снижению функции легких, что вызывает серьезные осложнения и смертность в некоторых случаях, например у пациентов с COPD. Важно, что провоспалительная активация происходит только при ответах IFN I типа, вызывающих рекрутирование нейтрофилов, но не при ответах IFN III типа (Galani et al, 2017).
Однако IFN III типа, такие как IFN лямбда (IFN-λ) могут ограничивать вирусную репликацию, не индуцируя провоспалительных ответов или иммунопатологии (Davidson et al, 2016; Galani et al, 2017).
Таким образом, терапевтические агенты, способные ограничивать ответы IFN I типа и сопутствующий провоспалительный и повреждающий ткани ответ на вирусную инфекцию, при этом поддерживая надлежащие ответы IFN III типа и противовирусную защиту, будут значительным шагом вперед в контроле респираторных вирусных инфекций. Такое уменьшение иммунопатологии имеет ключевое значение для выживаемости хозяина и разрешения заболевания.
Важную роль в ранней противовирусной защите также могут играть другие врожденные сенсоры или иммунные медиаторы. Сурфактантный белок D (SP-D) может предотвращать проникновение вируса гриппа в эпителиальные клетки, что является компонентом ранней фазы инфекции. (Thiel et al, 1989; Sastry et al, 1993). И вновь, терапевтические агенты, которые могут индуцировать этот врожденный сенсор, способный связываться с вирусом и предотвращать инфицирование им эпителиальных клеток бронхов, будут значительным шагом вперед в лечении вирусов, таких как вирус гриппа, риновирус и RSV. Кроме того, ингибирование фактора некроза опухоли-альфа (TNF-α), важного провоспалительного цитокина, имеет значительный эффект на выраженность иммунопатологии легких и ингибирует инфильтрацию воспалительными клетками и ответы цитокинов. Показана корреляция TNF-α с заболеваемостью и смертностью у обезьян макак и у людей, инфицированных высоковирулентными вирусами гриппа. Когда TNF-α был подавлен, наблюдали снижение репликации вируса гриппа и увеличение выживаемости мышей, инфицированных вирусом гриппа (Shi et al, 2013). Ингибирование данного провоспалительного цитокина этанерцептом обеспечивает защиту против летальной инфекции вирусом гриппа H1N1 у мышей (Shi et al, 2013).
Терапевтические агенты, которые способны индуцировать IFN-λ и/или SP-D, будут играть роль в ранней элиминации первичной вирусной инфекции, в то же время снижая вероятность вторичных бактериальных инфекций, и будут значительным шагом вперед в контроле над ARDS (острый респираторный дистресс-синдром), астмой, ожирением и COPD.
КРАТКОЕ ИЗЛОЖЕНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
В изобретении предложен штамм Bifidobacterium longum, имеющий регистрационный номер NCIMB 42020. Указанный штамм может быть в форме биологически чистой культуры.
Также предложен выделенный штамм Bifidobacterium longum NCIMB 42020.
Штамм может быть в форме жизнеспособных клеток и/или в форме нежизнеспособных клеток.
Штамм может быть выделен из кала или желудочно-кишечного тракта здоровых субъектов-людей.
Штамм может быть в форме бактериального бульона. В альтернативном варианте штамм находится в форме лиофилизированного порошка.
Штамм ослабляет ответ IP-10 на вирус. Это важно, поскольку IP-10 секретируется несколькими типами клеток в ответ на IFN-γ. Эти типы клеток включают моноциты и эндотелиальные клетки. IP-10 приписывают несколько ролей, включая роль хемоаттрактанта для моноцитов/макрофагов, Т-клеток, NK-клеток и дендритных клеток, а также облегчение адгезии Т-клеток к эндотелильным клеткам и выполнение роли маркера активации системы хозяина, индуцированной вирусом.
Штамм может усиливать ответ интерферона III типа на вирус, такой как ответ интерферона лямбда на вирус.
Штамм может подавлять ответ интерферона I типа на вирус, такой как ответ интерферона альфа на вирус и/или ответ интерферона бета на вирус.
Штамм может усиливать ответ сурфактантного белка D на вирус.
В изобретении также предложена композиция, содержащая штамм Bifidobacterium по изобретению.
Композиция может дополнительно содержать другой пробиотический материал и/или пребиотический материал.
Композиция может дополнительно содержать принимаемый внутрь носитель. Принимаемый внутрь носитель может представлять собой фармацевтически приемлемый носитель, такой как капсула, таблетка или порошок. Принимаемый внутрь носитель может представлять собой пищевой продукт, такой как кислое молоко, йогурт, замороженный йогурт, мороженое, порошковое молоко, концентрированное молоко, мороженое, сырная паста, заправка или напиток.
Композиция может дополнительно содержать белок и/или пептид, в частности белки и/или пептиды, богатые глутамином/глутаматом, липид, углевод, витамин, минерал и/или микроэлемент.
Штамм Bifidobacterium может присутствовать в количестве, превышающем 106 CFU (колониеобразующих единиц) на грамм композиции.
Композиция может дополнительно содержать адъювант, лекарственное средство и/или биологическое соединение.
Композиция может быть адаптирована для введения в легкие или в нос. Например, композиция может быть в форме назального спрея. Вязкость композиции может составлять от 1 сП (сантипуаз) до 2000 сП.
Штамм Bifidobacterium или его композиция могут быть для применения в пищевых продуктах или в качестве лекарственного средства.
Штамм Bifidobacterium или его композиция могут быть для применения в профилактике и/или лечении нежелательной воспалительной активности.
Штамм Bifidobacterium или его активное производное, или фрагмент, или мутант или вариант, могут быть для применения в профилактике и/или лечении нежелательной воспалительной активности.
Штамм Bifidobacterium или его композиция могут быть для применения в изготовлении лекарственного средства для лечения астмы и/или аллергии, где лекарственное средство может быть в форме, подходящей для ингаляции.
Штамм Bifidobacterium или его композиция могут быть для применения в профилактике и/или лечении вирусной инфекции у субъекта.
Штамм Bifidobacterium или его композиция могут быть для применения в профилактике вторичной бактериальной инфекции, ассоциированной с респираторной вирусной инфекцией, у субъекта.
В некоторых случаях вирус представляет собой респираторный вирус, который может быть выбран из вируса гриппа, риновируса и респираторного синцитиального вируса.
У субъекта может быть диагностировано воспалительное заболевание легких.
В некоторых случаях субъект имеет повышенную предрасположенность к респираторной инфекции.
Субъект может представлять собой одного или более из пациента с ожирением, пациента с острым респираторным дистресс-синдромом (ARDS), пациента с астмой или пациента с хронической обструктивной болезнью легких (COPD).
В одном случае субъект является ребенком в возрасте младше 5 лет.
В другом случае субъект является пожилым человеком в возрасте старше 60 лет.
В изобретении также предложен способ профилактики или лечения вирусной инфекции у субъекта, включающий введение субъекту, которому это необходимо, эффективного количества штамма Bifidobacterium longum NCIMB 42020, или его активного производного, или фрагмента, или мутанта, или варианта.
Штамм Bifidobacterium longum NCIMB 42020 или его активное производное, или фрагмент, или мутант, или вариант может:
ослаблять ответ IP-10 на вирус;
усиливать ответ интерферона III типа на вирус, такой как ответ интерферона лямбда на вирус;
подавлять ответ интерферона I типа на вирус, такой как ответ интерферона альфа на вирус и/или ответ интерферона бета на вирус; и/или
усиливать ответ сурфактантного белка D на вирус.
Также предложена фракция клеточной стенки, выделенная из штамма Bifidobacterium longum NCIMB 42020.
Фракция клеточной стенки способна:
ослаблять ответ IP-10 на вирус;
усиливать ответ интерферона III типа на вирус, такой как ответ интерферона лямбда на вирус;
подавлять ответ интерферона I типа на вирус, такой как ответ интерферона альфа на вирус и/или ответ интерферона бета на вирус; и/или
усиливать ответ сурфактантного белка D на вирус.
В некоторых случаях вирус представляет собой респираторный вирус, который может быть выбран из вируса гриппа, риновируса и респираторного синцитиального вируса.
У субъекта может быть диагностировано воспалительное заболевание легких.
В некоторых случаях субъект имеет повышенную предрасположенность к респираторной инфекции.
Субъект может представлять собой одного или более из пациента с ожирением, пациента с острым респираторным дистресс-синдромом (ARDS), пациента с астмой или пациента с хронической обструктивной болезнью легких (COPD).
В одном случае субъект является ребенком в возрасте младше 5 лет.
В другом случае субъект является пожилым человеком в возрасте старше 60 лет.
Фракция клеточной стенки может иметь молекулярную массу более 100 кДа. Фракция клеточной стенки может иметь размер менее 0,45 мкм.
В одном воплощении фракция выделена путем разрушения Bifidobacterium longum и отделения фракции клеточной стенки от цитоплазматической фракции.
Также предложена фракция клеточной стенки, выделенная из штамма Bifidobacterium longum, для применения в профилактике или лечении респираторной вирусной инфекции у субъекта.
В изобретении также предложена фракция клеточной стенки, выделенная из штамма Bifidobacterium longum, для применения в профилактике вторичной бактериальной инфекции, ассоциированной с респираторной вирусной инфекцией, у субъекта.
Также предложен способ выделения фракции клеточной стенки Bifidobacterium longum, включающий стадии:
разрушения Bifidobacterium longum с образованием фракции клеточной стенки и цитоплазматической фракции; и
отделения фракции клеточной стенки от цитоплазматической фракции.
Разрушение Bifidobacterium longum может включать по меньшей мере одно из:
- обработки хелатирующим агентом;
- обработки ферментом; и
- воздействия силы сдвига.
Хелатирующий агент может представлять собой кальциевый хелатирующий агент, такой как этилендиаминтетрауксусная кислота (EDTA). Фермент может представлять собой гликозидгидролазу, такую как лизоцим. Альтернативно или дополнительно фермент может представлять собой муралитический фермент, такой как мутанолизин.
Силой сдвига можно воздействовать посредством ультразвука и/или давления, например, при помощи френч-пресса.
Разделение может включать центрифугирование.
В некоторых случаях после разделения фракцию клеточной стенки фильтруют для получения фракции размером менее 0,45 мкм.
Также предложена композиция, которая содержит фракцию клеточной стенки.
Композиция может дополнительно содержать другой пробиотический материал и/или пребиотический материал.
Композиция может дополнительно содержать принимаемый внутрь носитель. Принимаемый внутрь носитель может представлять собой фармацевтически приемлемый носитель, такой как капсула, таблетка или порошок. Принимаемый внутрь носитель может представлять собой пищевой продукт, такой как кислое молоко, йогурт, замороженный йогурт, мороженое, порошковое молоко, концентрированное молоко, мороженое, сырная паста, заправка или напиток.
Композиция может дополнительно содержать белок и/или пептид, в частности белки и/или пептиды, богатые глутамином/глутаматом, липид, углевод, витамин, минерал и/или микроэлемент.
Композиция может дополнительно содержать адъювант, лекарственное средство и/или биологическое соединение.
Композиция может быть адаптирована для введения в легкие или в нос. Например, композиция может быть в форме назального спрея. Вязкость композиции может составлять от 1 до 2000 сП.
В изобретении предложен выделенный штамм Bifidobacterium longum NCIMB 42020 (АН0106).
В изобретении также предложен мутант или вариант выделенного штамма Bifidobacterium longum NCIMB 42020.
Выделенный штамм может быть в форме жизнеспособных клеток.
Выделенный штамм может быть в форме нежизнеспособных клеток.
В изобретении также предложена композиция, содержащая выделенный штамм Bifidobacterium longum NCIMB 42020.
Композиция может дополнительно содержать принимаемый внутрь носитель. Принимаемый внутрь носитель может представлять собой фармацевтически приемлемый носитель, такой как капсула, таблетка или порошок. Принимаемый внутрь носитель может представлять собой пищевой продукт, такой как кислое молоко, йогурт, замороженный йогурт, порошковое молоко, концентрированное молоко, сырные пасты, заправки или напитки.
В одном воплощении штамм ослабляет ответ IP-10 на вирус.
В одном воплощении штамм усиливает ответ интерферона III типа на вирус.
В одном воплощении штамм подавляет ответ интерферона альфа на вирус.
В одном воплощении штамм подавляет ответ интерферона бета на вирус.
В одном случае штамм:
- ослабляет ответ IP-10 на вирус;
- усиливает ответ интерферона III типа на вирус;
- подавляет ответ интерферона альфа на вирус; и
- подавляет ответ интерферона бета на вирус.
Штамм может присутствовать в количестве, превышающем 106 CFU на грамм принимаемого внутрь носителя.
В изобретении также предложена композиция, содержащая выделенный штамм Bifidobacterium longum NCIMB 42020 и фармацевтически приемлемый носитель.
В изобретении также предложено применение штамма Bifidobacterium longum NCIMB 42020 в качестве пробиотического штамма.
В одном воплощении композиция может быть адаптирована для введения в легкие или в нос.
Следует принимать во внимание, что конкретный штамм по изобретению можно вводить животным (включая людей) в пероральной принимаемой внутрь форме в стандартном препарате, таком как капсулы, микрокапсулы, таблетки, гранулы, порошки, пастилки, пилюли, суппозитории, суспензии и сиропы. Подходящие композиции можно получать обычно применяемыми способами с применением стандартных органических и неорганических добавок. Количество активного ингредиента в композиции медицинского назначения может находиться на уровне, который будет оказывать желаемый терапевтический эффект.
Композиция может также включать бактериальный компонент, лекарственное средство и/или биологическое соединение.
Кроме того, вакцина, содержащая штаммы по изобретению, может быть получена с использованием любого подходящего способа и может включать фармацевтически приемлемый носитель или адъювант.
В изобретении также предложен штамм Bifidobacterium по изобретению или композиция по изобретению для применения в профилактике или лечении вирусной инфекции у субъекта.
В одном случае субъект представляет собой пациента с острым респираторным дистресс-синдромом (ARDS).
В другом случае субъект представляет собой пациента с астмой.
В следующем случае субъект представляет собой пациента с хронической обструктивной болезнью легких (COPD).
В изобретении также предложена фракция клеточной стенки, выделенная из Bifidobacterium longum NCIMB 42020, где фракция клеточной стенки ослабляет ответ IP-10 на вирус.
В одном случае фракция усиливает ответ интерферона III типа на вирус.
В одном случае фракция подавляет ответ интерферона альфа на вирус.
В одном случае фракция подавляет ответ интерферона бета на вирус.
В изобретении также предложена фракция клеточной стенки, выделенная из Bifidobacterium longum NCIMB 42020, где фракция клеточной стенки:
- ослабляет ответ IP-10 на вирус;
- усиливает ответ интерферона III типа на вирус;
- подавляет ответ интерферона альфа на вирус; и
- подавляет ответ интерферона бета на вирус.
В одном случае молекулярная масса фракции клеточной стенки составляет более 100 кДа.
В одном случае фракция клеточной стенки имеет размер менее 0,45 мкм.
В одном случае фракция клеточной стенки имеет молекулярную массу более 100 кДа и размер менее 0,45 мкм.
В изобретении также предложен способ профилактики или лечения вирусной инфекции у субъекта, включающий стадию введения фракции клеточной стенки, выделенной из Bifidobacterium longum NCIMB 42020.
В одном случае фракция клеточной стенки ослабляет ответ IP-10 на вирус.
В одном случае фракция усиливает ответ интерферона III типа на вирус.
В одном случае фракция подавляет ответ интерферона альфа на вирус.
В одном случае фракция подавляет ответ интерферона бета на вирус.
Также предложен способ профилактики или лечения вирусной инфекции у субъекта, включающий введение фракции клеточной стенки, выделенной из Bifidobacterium longum NCIMB 42020, где указанная фракция:
- ослабляет ответ IP-10 на вирус;
- усиливает ответ интерферона III типа на вирус;
- подавляет ответ интерферона альфа на вирус; и
- подавляет ответ интерферона бета на вирус.
В одном случае молекулярная масса фракции клеточной стенки составляет более 100 кДа.
В одном случае фракция клеточной стенки имеет размер менее 0,45 мкм.
В одном случае фракцию клеточной стенки вводят в композиции, подходящей для легочного или интраназального введения.
В одном случае субъект представляет собой пациента с острым респираторным дистресс-синдромом (ARDS).
В другом случае субъект представляет собой пациента с астмой.
В следующем случае субъект представляет собой пациента с хронической обструктивной болезнью легких (COPD).
Изобретение также включает мутанты и варианты депонированных штаммов. В данном описании термины мутант, вариант и генетически модифицированный мутант включают штамм, чьи генетические и/или фенотипические свойства изменены по сравнению с родительским штаммом. Вариант естественного происхождения включает спонтанные изменения избирательно отобранных целевых свойств. Намеренное изменение свойств родительского штамма осуществляют посредством стандартных (in vitro) генетических манипуляций, таких как разрушение гена, конъюгационный перенос и тому подобное. Генетическая модификация включает введение экзогенных и/или эндогенных последовательностей ДНК в геном штамма, например посредством встраивания в геном бактериального штамма при посредством векторов, включающих плазмидную ДНК, или бактериофагов.
Естественные или индуцированные мутации включают изменение по меньшей мере одного основания, такое как делеция, вставка, трансверсия или иные модификации ДНК, что может привести к изменению аминокислотной последовательности, кодируемой последовательностью ДНК.
Термины мутант, вариант и генетически модифицированный мутант также включают штамм, который претерпел генетические изменения, которые накапливаются в геноме со скоростью, которая по природе постоянна для всех микроорганизмов, и/или генетические изменения, возникающие в результате спонтаной мутации, и/или приобретение генов и/или потерю генов, которые произошли не в результате преднамеренной (in vitro) манипуляции с геномом, а в результате естественного отбора вариантов и/или мутантов, которые обеспечивают селективное преимущество, для поддержания выживаемости бактерии при воздействии давления окружающей среды, такого как антибиотики. Мутант может быть создан посредством намеренного (in vitro) встраивания в геном определенных генов, которые фундаментально не нарушают биохимическую функциональность организма, но чьи продукты можно применять для идентификации или отбора бактерии, например, по устойчивости к антибиотикам.
Специалисту в области техники понятно, что мутантные или вариантные штаммы могут быть идентифицированы посредством анализа гомологии последовательности ДНК с родительским штаммом. Штаммы, имеющие близкую идентичность последовательности с родительским штаммом без демонстрируемых фенотипических или поддающихся измерению функциональных различий, считают мутантными или вариантными штаммами. Штамм с идентичностью (гомологией) последовательности 99,5% или более с родительской последовательностью ДНК может считаться мутантом или вариантом. Гомологию последовательностей можно определять с применением он-лайн алгоритма поиска гомологии программы BLAST, доступ к которому можно получить по ссылке http://www.ncbi.nlm.nih,gov/BLAST/
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
Описание, приведенное ниже в целях иллюстрации, со ссылкой на прилагающиеся графические материалы, позволит лучше понять изобретение.
На Фиг. 1 представлена столбчатая диаграмма, демонстрирующая профиль индуцирования IL-10 в РВМС (мононуклеарные клетки периферической крови) и в MDDC (дендритные клетки моноцитарного происхождения) после стимуляции in vitro повышающимися концентрациями (средней и высокой) штаммов В. longum 35624, АН1206, АН1362, 1714, BL1207 и АН0106;
На Фиг. 2 представлена столбчатая диаграмма, демонстрирующая профиль индуцирования EL-12p40 в РВМС и в MDDC после стимуляции in vitro повышающимися концентрациями (средней и высокой) штаммов В. longum 35624, АН1206, АН1362, 1714, BL1207 и АН0106;
На Фиг. 3 представлена столбчатая диаграмма, демонстрирующая профиль индуцирования TNF-α в РВМС и в MDDC после стимуляции in vitro повышающимися концентрациями (средней и высокой) штаммов В. longum 35624, АН1206, АН1362, 1714, BL1207 и АН0106;
На Фиг. 4 представлена столбчатая диаграмма, демонстрирующая профиль индуцирования EL-Iβ в РВМС и в MDDC после стимуляции in vitro повышающимися концентрациями (средней и высокой) штаммов В. longum 35624, АН1206, АН1362, 1714, BL1207 и АН0106;
На Фиг. 5 представлена столбчатая диаграмма ответа IP-10 на риновирус в присутствии В. longum АН0106;
На Фиг. 6(а) - 6(c) представлен ряд столбчатых диаграмм ответов интерферона лямбда (интерферона III типа), интерферона альфа и интерферона бета (интерфероны I типа) на риновирус в присутствии В. longum АН0106;
На Фиг. 7 представлена столбчатая диаграмма, где сравнивается ответ IP-10 на риновирус 16 в присутствии штаммов В. longum АН0106 или Staphylococcus aureus;
На Фиг. 8 представлена столбчатая диаграмма ответа IP-10 на LPS (липополисахарид) в присутствии штаммов В. longum АН0106 и 35624;
На Фиг. 9 представлена столбчатая диаграмма ответа TNF-α на LPS в присутствии штаммов В. longum АН0106 и 35624;
На Фиг. 10 представлен график вирусной репликации в легких в ответ на штаммы В. longum АН0106, В. longum 35624 и плацебо после инфицирования вирусом;
На Фиг. 11 представлен график выживаемости с течением времени после инфицирования штаммами В. longum АН0106, 35624 и плацебо;
На Фиг. 12 представлен ряд графиков цитокиновых ответов в полученной при бронхоальвеолярном лаваже жидкости (BAL) и ответов сурфактантного белка D в сыворотке на штаммы В. longum АН0106, 35624 и плацебо после инфицирования вирусом;
На Фиг. 13 показана тепловая карта различных биомаркеров, измеренных в BAL в ответ на штаммы В. longum АН0106, 35624 и плацебо после инфицирования вирусом; чем больше интенсивность полосы, тем выше индуцирование;
На Фиг. 14 представлен график количества макрофагов в BAL в ответ на штаммы В. longum АН0106, 35624 и плацебо после инфицирования вирусом;
На Фиг. 15 представлена схема процесса, использованного для выделения фракции клеточной стенки из Bifidobacterium longum АН0106;
На Фиг. 16(a) представлен график ответа IP-10 на риновирус человека (HRV16) в присутствии фракции клеточной стенки (осадок Bif АН0106) штамма АН0106 в дендритных клетках моноцитарного происхождения;
На Фиг. 16(b) представлен график ответа IFN-α на риновирус человека (HRV16) в присутствии фракции клеточной стенки (осадок Bif АН0106) штамма АН0106 в дендритных клетках моноцитарного происхождения;
На Фиг. 16(c) представлен график ответа IFN-β на риновирус человека (HRV16) в присутствии фракции клеточной стенки (осадок Bif АН0106) штамма АН0106 в дендритных клетках моноцитарного происхождения;
На Фиг. 17(a) представлена столбчатая диаграмма ответа IP-10 на риновирус человека (HRV16) в присутствии фракции клеточной стенки штамма UCC2003 по сравнению с фракцией клеточной стенки штамма АН0106 в дендритных клетках моноцитарного происхождения;
На Фиг. 17(b) представлена столбчатая диаграмма ответа IP-10 на интерферон бета (IFN-β) в присутствии фракции клеточной стенки штамма UCC2003 по сравнению с фракцией клеточной стенки штамма АН0106 в дендритных клетках моноцитарного происхождения;
На Фиг. 18(a) представлена столбчатая диаграмма ответа TNF-α на LPS в присутствии фракции клеточной стенки штамма UCC2003 по сравнению с фракцией клеточной стенки штаммов В. longum АН0106 и 35624 в дендритных клетках моноцитарного происхождения;
На Фиг. 18(b) представлена столбчатая диаграмма ответа TNF-α на Ро1у:IC в присутствии фракции клеточной стенки штамма UCC2003 по сравнению с фракцией клеточной стенки штаммов В. longum АН0106 и 35624 в дендритных клетках моноцитарного происхождения;
Фиг. 19(a) является иллюстрацией каскада аномального ответа на вирусную инфекцию; и
Фиг. 19(b) является иллюстрацией каскада ответа на вирусную инфекцию, опосредованного штаммом В. longum АН106 или фракцией клеточной стенки.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Депонирование штамма Bifidobacterium longum АН0106 осуществили в национальной коллекции промышленных и морских бактерий (NCIMB) Ferguson Building, Craibstone Estate, Bucksburn, Aberdeen, AB21 9YA, Scotland, UK 2 августа 2012 с присвоением регистрационного номера NCIMB 42020.
В описании также упоминается Bifidobacterium longum NCIMB 41003 (штамм 35624®). Данный штамм описан в WO00/42168, содержание которого включено во всей полноте путем ссылки. Штамм депонирован в национальной коллекции промышленных и морских бактерий Ferguson Building, Craibstone Estate, Bucksburn, Aberdeen, AB21 9YA, Scotland, UK 13 января 1999.
Авторы изобретения обнаружили, что конкретный штамм бактерий способствует противовирусной защите и подавляет повреждающие провоспалительные ответы и особенно полезен для предупреждения и/или лечения ARDS, индуцированного вирусом, или индуцированных вирусом осложнений у пациентов с астмой и COPD.
ПРИМЕРЫ
Приведенные ниже примеры более подробно описывают и илюстрируют воплощения, входящие в объем изобретения. Примеры приведены только в целях иллюстрации и не должны рассматриваться как ограничивающие данное изобретение, поскольку в рамках изобретения возможны различные варианты, остающиеся в духе и в рамках изобретения.
Пример 1. Выделение Bifidobacterium longum NCIMB 42020
Штамм Bifidobacterium longum NCIMB 42020 выделяли из образцов кала здоровых людей.
В образцах кала проводили скрининг пробиотических бактериальных штаммов. Образцы переносили в пробирку для сбора, содержащую забуференный фосфатов физиологический раствор (PBS) с добавлением 0,05% цистеина-HCl). Затем растворы инкубировали в течение 10 минут. Образцы перемешивали на вортексе и высевали на селективный агар (агар MRS (Де Ман, Рогоза, Шарп) + 10% сахароза + мупироцин и конго красный + цистеин + мупироцин). Для фенотипического скрининга штаммов бактерий, экспрессирующих EPS (экзополисахарид), проводили скрининг на агаре с конго красным. Вкратце, 10 мл модифицированной бульонной среды Рогоза (+0,05% цистеин) инокулировали в аспетических условиях свежевыращенной колонией штамма бактерий и инкубировали в анаэробных условиях при 37°С до мутности (от приблизительно 16 до приблизительно 24 часов). Осуществляли в аспетических условиях посев штрихом бульонных культур на чашки с агаром с конго красным и инкубировали в анаэробных условиях при 37°С в течение 48 часов. Полагают, что EPS, продуцируемый как побочный продукт роста и/или метаболизма некоторых штаммов, предупреждает поглощение красителя конго красный, в результате чего колония имеет кремовую/белую окраску. Штаммы, продуцирующие меньше EPS, легко поглощают краситель конго красный, в результате чего колония имеет розовую/красную окраску. Штаммы, не продуцирующие EPS, окрашиваются в красный цвет и выглядят почти прозрачными на фоне красного агара.
Изолированные колонии брали с поверхности агара и делали посев тремя штрихами для подтверждения чистоты. Для определения предполагаемых видов бифидобактерий проводили микроскопическое исследование, окрашивание по Граму, исследование каталазы, фруктозо-6-фосфат фосфокетолазы и хранили изоляты в 40% глицерине при -80°С. Для подтверждения идентичности свежевыделенных штаммов проводили секвенирование межгенной спейсерной области 16S (IGS).
После выделения чистого штамма бифидобактерий, обозначенного как АН0106, его затем депонировали в NCIMB и обозначали как 42020. Исследовали микробиологические характеристики, которые обобщены ниже в Таблице 1. В. longum NCIMB 42020 представляет собой грам-положительную, каталаза-отрицательную бактерию плеоморфной формы, которая является положительной по фруктозо-6-фосфат фосфокетолазе, что подтверждает ее принадлежность бифидобактериям.
Таблица 1. Физико-химические характеристики В. longum NCIMB 42020
Для идентификации выделенных видов бифидобактерий проводили секвенирование межгенного спейсера (IGS) 16s-23s. Вкратце, ДНК выделяли из NCIMB 42020 с применением 100 мкл раствора для выделения и 25 мкл раствора для подготовки ткани (Sigma, набор XNAT2). Образцы инкубировали в течение 2 ч при комнатной температуре, затем 2 ч при 95°С и затем добавляли 100 мкл нейтрализующего раствора (Sigma, набор XNAT2). Раствор геномной ДНК подвергали количественному определению с применением спектрофотометра Nanodrop и хранили при 4°С. Проводили PCR (полимеразная цепная реакция) с применением праймеров IGS. Использовали пары праймеров IGS R 5'-CTGGTGCCAAGGCATCCA-3' (SEQ ID No. 1) и IGS L 5'-GCTGGATCACCTCCTTTCT-3' (SEQ ID No. 2). Условия циклов были следующими: 94°С в течение 4 мин (1 цикл), 94°С в течение 45 сек, 53°С в течение 45 сек и 72°С в течение 45 сек (28 циклов). Реакционная смесь для PCR содержала 21 мкл (100 нг) ДНК, смесь для PCR (Sigma, Red Taq), 0,025 нМ праймеров IGS L и R (MWG Biotech, Германия). Реакцию PCR проводили в термоциклере Biotherma. PCR-продукты (10 мкл) разделяли в 2% агарозном геле в ТАЕ (трис-ацетат-этилендиаминтетрауксусная кислота), окрашенном EtBr (бромистый этидий), вместе с маркером молекулярной массы (100 bp Ladder, Roche) для определения профиля IGS. PCR-продукты Bifidobacterium (одна полоса) очищали с применением набора для очистки PCR-продуктов Promega Wizard PCR purification. Очищенные PCR-продукты секвенировали с применением праймеров (выше) для межгенной спейсерной области. Для идентификации штамма по гомологии нуклеотидов осуществляли поиск отсеквенированных последовательностей в базе нуклеотидных последовательностей NCBI. Проводили стандартный поиск гомологии нуклеотидов полученных последовательностей ДНК при помощи поискового алгоритма BLAST (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/). Обнаружили наилучшее совпадение с последовательностью и затем осуществили выравнивание последовательностей для сравнения с применением программы DNASTAR MegAlign. Последовательности приведены в перечне последовательностей (Таблица 2). Поиск в базе данных NCIMB показал, что NCIMB 42020 имеет уникальную последовательность IGS (Таблица 2), с наибольшей гомологией последовательностей с Bifidobacterium longum.
Таблица 2. Последовательность IGS В. lonsum NCIMB 42020 (SEQ ID No. 3).
TTGCTGGGATCACCTCCTTTTTACGGAGAATTCAGTCGGATGTTCGTCCGACGGTGTGCGCCCCGCGCGTCGCATGGTGCGATGGCGGCGGGGTTGCTGGTGTGGAAAACGTCGTTGGCTTTGCCCTGCCGGTCGTGCGGTGGGTGCGGGGTGGTATGGATGCGCTTTTGGGCTCCCGGATCGCCACCCCAGGCTTTTTGCCTGGCGCGATTCGATGCCCGTCGTGCCTGGGGGCCGGCCGTGTGCCGGCGCGATGGCGTGGCGGTGCGTGGTGGCTTGAGAACTGGATAGTGGACGCGAGCAAAACAAGGGTTTTTGAATCTTTGTTTTGCTGTTGATTTCGAATCGAACTCTATTGTTCGTTTCGATCGTTTTGTGATCATTTTTAGTGTGATGATTTGTCGTCCTGGGAATTTGCTAGAGGAATACTTGCGGGCCATGCACTTTCGTGGTGTGTGTTGCTTGCAAGGGCGTATGGTGGAGGCCTTGGCACCAGAA
Пример 2. Профиль цитокинов AH106 и сравнение с профилем других штаммов Bifidobacteria longum, потенциально полезных для здоровья.
Мононуклеарные клетки периферической крови (РВМС) выделяли у здоровых доноров при помощи центрифугирования в градиенте плотности. РВМС промывали и ресуспендировали в среде Игла в модификации Дюльбекко - Glutamax (DMEM) ТМ (Glutamax (заменитель глутамина) + пируват + 4,5 г/л глкозы (Gibco, кат.номер 10569-010), содержащей 10% эмбриональную телячью сыворотку (Sigma, кат. номер F4135) и 1% пенициллин/стрептомицин (Sigma, кат. номер Р0781). РВМС активировали различными дозами Bifidobacteria longum (высокой (общее количество бактерий:РВМС) (100:1) и средней (50:1)) в течение 24 ч в DMEM с добавками при 37°С, 5% CO2.
Для получения дендритных клеток моноцитарного происхождения: Мононуклеарные клетки периферической крови (РВМС) выделяли у здоровых доноров при помощи центрифугирования в градиенте плотности. Моноциты периферической крови человека выделяли с применением CD 14-положительного выделения с использованием системы MACS (сортировка магнитно-активированных клеток) (Miltenyi Biotec, 130-050-201). Клетки культивировали в среде cRPMI (Life Technologies, 21875-091) с 1000 Ед/мл интерлейкина 4 (Novartis) и 1000 Ед/мл гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора (PeproTech, 300-03) в течение 6 суток для дифференцировки их в дендритные клетки моноцитарного происхождения (MDDC). MDDC активировали различными дозами В. longum (высокой (общее количество бактерий:MDDC) (100:1) и средней (50:1)) в течение 24 ч в cRPMI при 37°С, 5% CO2. Секрецию цитокинов определяли с применением имеющихся в продаже наборов для определения цитокинов (MesoScale Discovery) согласно инструкциям производителя.
АН0106 индуцировал больше IL-10, IL-12p40, TNF-α, IL-Iβ как в РВМС, так и в MDDC по сравнению с другими штаммами бактерий (35624, АН1206, АН1362, 1714, BL1207), которые имели схожие друг с другом профили (Фиг. 1-4). АН106 является гораздо более мощным стимулятором цитокинов, чем другие В. longum, особенно известные противовоспалительные штаммы, такие как 35624 и 1714, что демонстрирует, что АН0106 задействует иммунную систему человека иным способом, нежели другие штаммы В. longum, и является в большей мере иммуностимулирующим.
Пример 3. Штамм АН0106 (благоприятно блокирует интерфероны 1 типа и в результате индуцирование IP-10 (провоспалительного хемокина) и повышает интерферон 3 типа IFN-λ в дендритных клетках моноцитарного происхождения).
Избыточный иммунный ответ дендритных клеток на вирусную инфекцию вызывает провоспалительные ответы в легких. IFN 1 типа могут стимулировать продукцию хемокина IP-10, который является хемоаттрактантом Thl клеток. Для определения возможного благоприятного противовирусного эффекта В. longum АН0106 на человеческие дендритные клетки моноцитарного происхождения, MDDC стимулировали посредством В. longum АН0106 перед воздействием на них риновируса человека 16 (HRV16) и затем отслеживали ответ IP-10 на HRV16. MDDC активировали либо посредством HRV16 (MOI (множественность заражения) 25:1) в течение 24 ч в cRPMI при 37°С, 5% CO2 после предварительного воздействия (1 ч) различных доз В. longum АН0106 (100:1, 50:1, 25:1, 10:1, 1:1), либо только HRV16. Исследовали секрецию цитокинов при помощи мультиплексной суспензионной тест-системы Bio-Plex (Bio-Rad Laboratories), позволяющей измерять IFN-α, IFN-β, IFN-λ и IP-10. Неожиданно обнаружили, что В. longum АН0106 ослаблял ответ IP-10 на RV дозозависимым образом (фиг. 5). Также неожиданным было, что совместная инкубация со штаммом В. longum АН0106 в более низких дозах приводила к усилению ответов интерферона III типа (интерферона лямбда), тогда как ответы интерферона альфа и бета подавлялись при более высоких дозах, аналогично ответу IP-10 (Фиг. 6). Указанные данные свидетельствуют что В. longum АН0106 изменяет иммунный ответ на риновирус, поддерживая защитный иммунный ответ, при этом ослабляя повреждающие ответы.
Пример 4. Не все грам-положительные бактериальные штаммы имеют тот же эффект.
Для определения, имеет ли другой грам-положительный бактериальный штамм благоприятный противовирусный эффект в отношении человеческих дендритных клеток моноцитарного происхождения, MDDC, стимулированные посредством Staphylococcus aureus, подвергали воздействию риновируса человека 16 (HRV16) и отслеживали ответ IP-10. Вкратце, MDDC стимулировали либо посредством HRV16 (MOI) 25:1) в течение 24 ч в cRPMI при 37°С, 5% CO2 после предварительного воздействия (1 ч) различными дозами Staphylococcus aureus (100:1, 50:1) в сравнении с В. longum АН0106 (100:1), либо только HRV16. Штамм Staphylococcus aureus не снижал секрецию дендритными клетками IP-10 в ответ на HRV16 (Фиг. 7).
Пример 5. Штамм АН0106 благоприятно блокирует TNF-α в дендритных клетках моноцитарного происхождения, так же, как и IP-10, но не все штаммы Bifidobacteria longum имеют тот же эффект.
В воспаленной слизистой секрецию IP-10 и TNF-α индуцирует не только сам вирус, но его продукцию могут индуцировать и другие лиганды TLR (toll-подобных рецепторов). Таким образом, на MDDC предварительно воздействовали В. longum АН0106 или В. longum 35624 перед воздействием на них LPS. Отслеживали ответ IP-10 и TNF- на LPS, агонист TLR-4. Вкратце, MDDC стимулировали либо посредством LPS (50 нг/мл) в течение 24 ч в cRPMI при 37°С, 5% CO2 после предварительного воздействия (1 ч) В. longum АН0106 или 35624 в дозе (100:1), либо посредством только LPS. Неожиданно обнаружили, что В. longum АН106 ослаблял ответ IP-10 и TNF-α на LPS, тогда как ответ IP-10 на LPS после воздействия В. longum 35624 снижался лишь незначительно (Фиг. 8), а В. longum 35624 в той же самой дозе повышал TNF-α (Фиг. 9). Этот результат является очень неожиданным, поскольку В. longum 35624 является хорошо известным противовоспалительным штаммом и гипотетически был наилучшим кандидатом. Некоторые результаты, полученные по цитокинам для В. longum АН0106, позволяли предположить, что он будет вызывать генерализованную иммуностимулирующую реакцию, но на практике В. longum АН0106 вызывал более выраженный и специфический иммунный ответ в данной клеточной системе.
Пример 6. Сравнение B. longum АН106 и В. longum 35624 в доклиническом исследовании на модели респираторной инфекции in vivo.
Авторы изобретения проверили эффективность штамма В. longum AH0106 в доклинических моделях, разработанных для демонстрации терапевтической пользы. Модели риновирусной инфекции у мышей не считаются хорошим суррогатом инфекции у человека, поскольку у мышей отсутствует ICAM, рецептор основной группы риновирусов, обеспечивающий их проникновение в клетку. Поэтому авторы изобретения использовали модель летального гриппа у мышей, описанную Bartlett et al, 2015, которая считается лучшей моделью. Для инфицирования мышей использовали штамм вируса гриппа H1N1 A/PR8/34 (100 PFU (бляшкообразующих единиц)/50 мкл).
Штамм В. longum АН0106, штамм В. longum 35624 или плацебо вводили интраназально за 2 часа до, через 1 сутки и через 3 суток после инфицирования вирусом. Указанные штаммы вводили в дозе, где общее количество клеток составляло 1 × 109.
2 ч, сутки 1 и 3 введение контроля с растворителем (Группа 1), В. longum AH0106 (Группа 2) и фракции клеточной стенки В. longum 35624 (Группа 3) интраназально (в объеме 50 мкл).
Сутки 0 Введение летальной дозы вируса гриппа (PR8) интраназально (Группы 1-3).
Сутки 0-10 Контроль заболеваемости животных (масса тела, температура и клиническая оценка, Группы 1-3).
Сутки 5: Каждые сутки подвергали эвтаназии 5 животных из каждой группы для терминального взятия крови, забора органов и анализа. Сутки 5 (Группы 1-3).
Сутки 5: Забор BAL для определения цитокинов и клеточных инфильтратов. Забор ткани легких для количественного определения вирусного титра в легких посредством количественной PCR (половина всех долей легких).
Определение вирусного титра в ткани легких.
Выделенные доли легких подготавливали для количественного определения вирусной нагрузки в ткани легких при помощи количественной PCR. РНК получали с применением реагента TRI (Molecular Research Center) и затем обрабатывали ДНКазой (Invitrogen) во избежание контаминации геномной ДНК перед конвертированием РНК в кДНК (комплементарная ДНК) посредством обратной транскрипции с использованием Superscript III (Invitrogen). Количественное определение кДНК проводили при помощи PCR в реальном времени (iCycler; Bio-Rad) с использованием реагента SYBR Green (Stratagene) и нормализовали уровни экспрессии в образцах по GAPDH. Последовательности праймеров (прямого и обратного, соответственно) для белка М вируса гриппа PR8 были следующими: 5'-GGACTGCAGCGTAGACGCTT-3' (SEQ ID No. 4) и 5'CATCCTGTATATGAGGCCCAT-3' (SEQ ID No. 5).
Группы (1-3):
1. Воздействие плацебо - криопротектора, ресуспендированного в PBS.
2. Воздействие В. longum АН0106 109 клеток всего.
3. Воздействие В. longum 35624 109 клеток всего.
Количество мышей на группу (Группы 1-3) равно 5
Определение цитокинов и хемокинов.
Концентрации мышиных IL-Iβ, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-9, IL-10, IL-12p70, IL-12/IL-23p40, IL-13, IL-15, IL-16, IL-17A, IL-17A/F, IL-17C, IL-17E, IL-17F, IL-21, IL-22, IL-23, IL-30, IL-31, IL-33, IP-10, MIP3α, MIP-2, MIP-1β, MIP-1α, MCP-1, KC/GRO, TNF-α, VEGF, EPO, GM-CSF, IFN-γ как в сыворотке, так и в BAL определяли с применением имеющейся в продаже платформы U-PLEX Biomarker Group 1 Mouse 35-Plex (MesoScale Discovery) согласно инструкциям производителя; мышиный IL-28 (IFN-λ 2/3), мышиный G-CSF, мышиный TRAIL, мышиный AREG выявляли с применением наборов для ELISA (RayBiotech, Inc,); онкостатин М и мышиный сурфактантный белок D (SPD) определяли с применением наборов Quantikine компании R&D Systems согласно инструкциям производителя. IFN-α мыши в сыворотке и BAL определяли с применением набора mouse EFN alpha platinum ELISA (ThermoFisher scientific). Уровни интерферона-β (IFN-β) мыши в сыворотке и BAL определяли с применением наборов VeriKine Mouse Interferon Beta HS ELISA (PBL Assay Science).
Измерение клеточных инфильтратов в BAL.
Клетки выделяли из жидкости BAL и определяли общее количество клеток в полученной при бронхоальвеолярном лаваже жидкости (BAL) при помощи счетчика Coulter (IG Instrumenten-Gesellschaft AG, Basel, Switzerland). Дифференциальный подсчет клеток (подсчитывали 200 клеток/образец) проводили на основе стандартных морфологических и цитохимических критериев в цитологических препаратах, полученных путем центрифугирования, окрашенных раствором Diff-Quik (Dade Behring, Siemens Healthcare Diagnostics, Deerfield, IL).
Неожиданно обнаружили, что В. longum АН0106 защищал мышей лучше, чем штамм В. longum 35624. Оба штамма снижали вирусный титр до одинакового уровня (Фиг. 10), однако смертность снижалась больше у мышей, получавших В. longum АН0106 (Фиг. 11). Это улучшенное выживание было ассоциировано с пониженным ответом интерферона альфа и интерферона бета и усиленным ответом сурфактантного белка D (Фиг. 12). Кроме того, наблюдалось мощное индуцирование цитокинов и хемокинов у мышей, получавших АН0106 (Фиг. 13), ассоциированное с повышением макрофагов в BAL на 5 сутки (Фиг. 14). Указанный иммунный ответ способствовал улучшенной элиминации вируса, наблюдавшейся у животных, получавших В. longum АН0106, а начало процесса выздоровления вызывало приток макрофагов в легкие.
Пример 7. Получение осадка клеточной стенки
Сбор бактерий/отмывка
Способ
1. Эквивалент 250 мл исходной биомассы бактерий (общее количество клеток =1,5 × 1011) собирали путем центрифугирования (14000 об/мин, 4°С, 20 мин; ротор JA-20 (Avanti J-26 х Р Beckman Coulter). Бактериальный осадок промывали стерильным PBS, отбрасывали надосадочную жидкость и промывали снова (повторяли еще два раза).
2. В случае живых и неживых лиофилизированных бактерий (0,5 г порошка 3,0 × 1011 или общее количество клеток 1,5 × 1011) ресуспендировали в 50 мл и собирали путем центрифугирования (14000 об/мин, 4°С, 20 мин; ротор JA-20 (Avanti J-26 х Р Beckman Coulter). Бактериальный осадок промывали стерильным PBS, отбрасывали надосадочную жидкость и промывали снова (повторяли еще два раза).
3. В конце осадок ресуспендировали в 50 мл стерильного PBS и делили раствор, содержащий бактерии, на аликвоты по 25 мл.
Разрушение клеток
Задачей данной процедуры было получение фракции клеточной стенки из целых бактерий и удаление цитоплазматической фракции и других компонентов. Это включало одну или более стадий, выбранных из:
обработки хелатирующим агентом, возможно в сочетании с процедурой замораживания - оттаивания для предупреждения ДНКазной или протеазной активности при использовании ферментативной обработки для облегчения лизиса
ферментативной обработки гликозил-гидролазой и/или N-ацетилмурамидазой
прикладывания силы сдвига, такой как воздействие ультразвука или прикладывание высокого давления, например с применением френч-пресса
отделения фракции клеточной стенки от цитоплазматической фракции при помощи центрифугирования
фильтрации фракции клеточной стенки
Материалы:
EDTA (0,5 М Fluka) представляет собой хелатор для удаления ионов металлов (кальция или магния) для предупреждения ДНКазной или протеазной активности при использовании ферментов для лизиса клеточной стенки
Лизоцим (Sigma, 10 мг/мл) *не содержащий эндотоксинов, представляет собой гликозил-гидролазу, катализирующую гидролиз 1, 4-бета-связей между остатками N-ацетилмураминовой кислоты и N-ацетил-D-глюкозамина. Гидролиз нарушает целостность клеточной стенки бактерий, вызывая лизис бактерий.
Мутанолизин (10KU Sigma, разведенный в 1 мл H2O) представляет собой N-ацетилмурамидазу, которая представляет собой муралитический фермент, расщепляющий β-N-ацетилмурамил-(1→4)-N-ацетилглюкозаминную связь клеточной стенки бактерий. Такое расщепление нарушает целостность клеточной стенки бактерий, вызывая лизис бактерий.
Для облегчения лизиса наряду с воздействием ультразвука использовали стеклянные гранулы с размером частиц 90-150 мкм (VWR)
Способ:
1. В каждую 25 мл аликвоту добавить 250 мкл EDTA (0,5М матричный раствор, Fluka), таким образом, конечная концентрация EDTA составляет 5 мМ.
2. Заморозить аликвоты, помещая 2 аликвоты в жидкий азот до замораживания, затем разморозить аликвоты в воде; повторить эту процедуру дважды.
3. Каждую 25-мл аликвоту бактерий инкубируют с 250 мкл лизоцима (10 мг/мл) и 250 мкл мутанолизина (2,5 KU) в течение 1 часа при 37°С, периодически мягко перемешивая на вортексе. С этой стадии силу сдвига применяли для разрушения бактериальной клетки либо при помощи ультразвука, либо при помощи френч-пресса.
Воздействие ультразвука
непосредственно перед воздействием ультразвука к аликвотам бактерий добавляли половину чайной ложки автоклавированных стеклянных гранул с размером частиц 90-150 мкм (VWR).
обрабатывают ультразвуком 25 мл ресуспендированного бактериального материала за один прием, затем помещают на лед и обрабатывают ультразвуком другие аликвоты, с применением ультразвукового дезинтегратора (VibraCell SONICS) с зондом 50 мл. (Настройки: Мощность - 50, Частота - 60). Данную процедуру повторяют четыре раза в течение 10 минут на льду. После воздействия ультразвуком удаляют стеклянные гранулы, неразрушенные клетки и клеточный дебрис при помощи центрифугирования при 1000 об/мин в течение 10 мин при 4°С.
Высокое давление посредством френч-пресса
В альтернативном варианте бактериальные клетки разрушают при помощи давления 1500 фунтов на квадратный дюйм с переключающим клапаном в положении «high» (эквивалент 20000 фунтов на квадратный дюйм) при помощи френч-пресса (Thermo Electron Corporation FA-078A). Данную процедуру повторяют трижды на льду.
Воздействие силы сдвига с применением френч-пресса приводит к просветлению мутной суспензии бактериальных клеток после третьего прогона. После разрушения при помощи френч-пресса удаляют неразрушенные клетки и клеточный дебрис при помощи центрифугирования при 1000 об/мин в течение 10 мин при 4°С и сохраняют надосадочную жидкость, содержащую материал клеточной стенки и цитоплазматические фракции.
4. После воздействия силы сдвига (ультразвук или высокое давление) надосадочную жидкость, содержащую материал клеточной стенки и цитоплазматические фракции, сохраняли. Эту надосадочную жидкость центрифугировали в течение 20 мин при 14000 об/мин при 4°С для отделения материала клеточной стенки от цитоплазматического материала. Надосадочную жидкость отбрасывают.
5. Осадок, содержащий материал клеточной стенки, ресуспендируют в 5 мл PBS на 250 мл исходной бактериальной биомассы. Осадок материала клеточной стенки центрифугировали при 1000 об/мин в течение 10 минут для удаления черного остатка из осадка. Осадок, содержащий материал клеточной стенки, хранили при -80°С.
Центрифуги и роторы
Центрифуга Avanti J-E Beckman Coulter
Роторы: JA-20
Ультразвуковой дезинтегратор
VibraCell SONICS, Sonics and Materials
Зонд 435-09
Френч-пресс
Френч-пресс FA-078A
Ячейка FA-032 (40K стандартная) (стандартное давление френч-пресса 40000 фунтов на квадратный дюйм, ячейка вместимостью 35 мл, давление до 40000 фунтов на квадратный дюйм)
Гель-фильтрация с последующей ультрафильтрацией
Материалы:
мембранные фильтры из поливинилидендифторида (PVDF) (размер пор 0,45 мкм, Millipore, Bedford, MA)
приспособление для ультрафильтрации с MWCO (отсечение по молекулярной массе) 100 кДа (Millipore).
1. Ресуспендированный бактериальный осадок, содержащий материал клеточной стенки (5 мл), размораживают и фильтруют через мембранные фильтры из поливинилидендифторида (PVDF) (размер пор 0,45 мкм, Millipore, Bedford, MA; тщательно промытые PBS перед применением). Материал, проходящий через мембранный фильтр, не содержит интактных бактерий и представляет собой материал клеточной стенки с частицами размером менее 0,45 мкм. На данной стадии при пропускании через фильтр с размером пор 0,45 мкм получали 4 мл материала клеточной стенки. Из исходных 250 мл бактериальной культуры оставалось 4 мл суспендированного материала клеточной стенки.
2. Затем материал клеточной стенки с частицами размером менее 0,45 мкм подвергают ультрафильтрации.
а. Вначале промывают приспособление для ультрафильтрации 15 мл PBS, центрифугируют при 3500 × g при 4°С.
б. Берут экстракты бактериального осадка менее 0,45 мкм, загружают ~4 мл в приспособление для ультрафильтрации с MWCO 100 кДа.
в. Когда объем верхнего раствора (более 100 кДа) уменьшался, проводят диафильтрацию против PBS.
г. Материал, проходящий через фильтр с MWCO 100 кДа, сохраняют и хранят при -80°С.
д. Ретентат ресуспендируют в том же объеме PBS, какой добавляли в приспособление для ультрафильтрации (4 мл). Данный материал обозначают бактериальным осадком более 100 кДа. Итоговая масса полученной таким образом фракции клеточной стенки в сухом состоянии составляет 120 мг в 4 мл ретентата, что соответствует итоговой концентрации 30 мг фракции клеточной стенки на 1 мл.
е. Данную фракцию клеточной стенки концентрировали для улучшения растворимости для исследований in vitro и in vivo. Для получения более концентрированного материала с концентрацией больше 30 мг/мл, такой как 300 мг/мл (10х) или 150 мг/мл (5х) растворы клеточной фракции бактериального осадка более 100 кДа просто растворяют в объеме, который в 10 или в 5 раз меньше, чем объем исходного материала.
Пример 8. Фракция клеточной стенки АН0106 (благоприятно блокирует интерфероны 1 типа и в результате индуцирование IP-10 (провоспалительного хемокина) в дендритных клетках моноцитарного происхождения.
Для определения возможного благоприятного противовирусного эффекта фракции клеточной стенки, В. longum АН0106, полученной в Примере 7, инкубировали фракцию с человеческими MDDC, подвергнутыми воздействию HRV16, и отслеживали ответ интерферона 1 типа и IP-10. Для дендритных клеток, имеющих происхождение от моноцитов: Мононуклеарные клетки периферической крови (РВМС) выделяли у здоровых доноров при помощи центрифугирования в градиенте плотности. Моноциты периферической крови человека выделяли с применением CD14-положительной селекции с использованием системы MACS (Miltenyi Biotec, 130-050-201). Клетки культивировали в среде cRPMI (Life Technologies, 21875-091) с 1000 Ед/мл интерлейкина 4 (Novartis) и 1000 Ед/мл гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора (PeproTech, 300-03) в течение 6 суток для их дифференцировки в MDDC. Клетки культивировали в среде cRPMI (RPMI (Life Technologies, 21875-091) плюс 10% эмбриональной телячьей сыворотки (Sigma, кат.номер F4135) и 1% пенициллина/стрептомицина (Sigma, кат. номер Р0781).
MDDC стимулировали либо посредством HRV16 (MOI 25:1) в течение 24 ч в cRPMI при 37°С, 5% CO2 после предварительного воздействия (1 ч) фракции клеточной стенки В. longum АН0106 (30 мг/мл), либо только HRV16. Исследовали секрецию цитокинов при помощи мультиплексной суспензионной тест-системы Bio-Plex (Bio-Rad Laboratories) (IFN-α, IFN-β, IP-10).
Клеточная фракция штамма В. longum АН0106 ослабляла ответ IP-10 (Фиг. 16(a)), IFN-α (Фиг. 16(b)) и IFN-β (Фиг. 16(c)) на HRV16, что согласовалось с приведенными выше результатами для MDDC, стимулированных HRV16 после предварительного воздействия В. longum АН0106.
Пример 9. Не все виды бифидобактерий фракции клеточной стенки имеют тот же эффект.
С применением методики, описанной в Примере 4, также исследовали фракции клеточной стенки другого вида бифидобактерий, Bifidobacteria breve (Bif UCC2003), и не обнаружили аналогичных выраженных эффектов. Фракция Bif UCC2003 снижала продукцию IP-10 после вирусной стимуляции в 24-часовом исследовании, но не в такой степени, как фракция клеточной стенки В. longum АН0106 (Фиг. 17(a)).
Кроме того, в воспаленной слизистой секрецию IP-10 индуцирует не только сам вирус; продукцию IP-10 также могут индуцировать другие цитокины. Частью первичного противовирусного ответа организма-хозяина является образование таких цитокинов, как IFN-β. В частности, IFN-β является мощным индуктором IP-10. Таким образом, авторы изобретения изучали влияние фракции клеточной стенки на секрецию IP-10 в ответ на IFN-β (Фиг. 17(b)). MDDC стимулировали либо посредством IFN-β (200 нг/мл) в течение 24 ч в cRPMI при 37°С, 5% CO2 после предварительного воздействия (1 ч) фракций клеточной стенки (30 мг/мл), либо посредством только IFN-β. Фракция осадка клеточной стенки В. longum АН0106 подавляла секрецию IP-10 в ответ на указанные стимулы, тогда как фракция осадка клеточной стенки Bif UCC2003 совсем не снижала секрецию IP-10.
Пример 10. Фракция клеточной стенки штамма В. longum АН0106 имеет дополнительный благоприятный эффект (блокирует TNF-α) в дендритных клетках моноцитарного происхождения, что способствует уменьшению воспаления, но не все штаммы бифидобактерий имеют тот же эффект.
В воспаленной слизистой секрецию провоспалительного TNF-α индуцирует не только сам вирус, его продукцию могут индуцировать и другие лиганды TLR (toll-подобных рецепторов). Поэтому авторы изобретения изучали секрецию TNF-α в ответ на лиганды TLR Poly:IC (TLR-3) и LPS (TLR-4). MDDC предварительно подвергали воздействию клеточной стенки В. longum AH0106, В. longum 35624 и Bif UCC2003 перед воздействием LPS, агониста TLR-4 и отслеживали ответ IP-10 и TNF-α. MDDC активировали либо LPS - агонистом TLR-4, (50 нг/мл), либо Poly:IC - агонистом TLR-3 (5 мкг/мл) в течение 24 ч в cRPMI при 37°С, 5% CO2 после предварительного воздействия (1 ч) фракций клеточной стенки бифидобактерий в дозе 30 мг/мл, либо только агонистом TLR. Изучали секрецию TNF-α при помощи Quantikine ELISA (R&D systems). Фракция клеточной стенки В. longum АН106 ослабляла ответ TNF-α на LPS и Ро1у:IC, тогда как фракции клеточной стенки и В. longum 35624, и Bif UCC2003 в той же дозе повышали TNF-α (Фиг. 18а и 18b), что согласуется с результатами, полученными с целыми клетками штамма В. longum AH0106. Этот результат является очень неожиданным, поскольку В. longum 35624 является хорошо известным противовоспалительным штаммом, а В. longum AH0106 обеспечивал лучший ответ в данной системе.
Обсуждение
В заключение, как показано в Примерах 2-10, авторы изобретения продемонстрировали усиленный ответ интерферона III типа, что является благоприятным, и добавление фракции клеточной стенки AH0106 вызывает указанный желаемый ответ. В клетках, которые являются компонентом более позднего ответа иммунной системы человека (дендритных клетках) фракция клеточной стенки блокирует избыточный ответ интерферона 1 типа, который может приводить к повреждению клеток и вторичной инфекции. Такой направленный эффект благоприятен при инфекциях, вызванных вирусом гриппа, обычной простуде (риновирус) и RSV, вирусных осложнениях хронических респираторных заболеваний, таких как астма, COPD и ARDS, как у детей, так и у взрослых, а также у лиц с ожирением.
Каскадный ответ
Каскад аномального ответа на вирусную инфекцию проиллюстрирован на Фиг. 19(a).
Каскад ответа на вирусную инфекцию, опосредованный фракцией клеточной стенки АН0106, проиллюстрирован на Фиг. 19(b).
Основной противовирусный ответ контролируется IFN (интерферонами). Наиболее хорошо охарактеризованными интерферонами I типа являются IFN-α и IFN-β. Большинство типов клеток продуцируют IFN-β, тогда как гемопоэтические клетки, в частности плазмацитоидные дендритные клетки, являются основными производителями IFN-α (Ivashkiv and Donlin 2014). Как упоминалось ранее, ответы интерферонов I типа, таких как IFN-α и IFN-β, прямо коррелируют с увеличением заболеваемости и смертности на моделях с инфицированием вирусом гриппа (Davidson et al, 2014). Интерфероны 1 типа могут стимулировать продукцию IP-10 (также обозначаемого CXCL-10), хемокина который связывается с CXCR3, основной функцией является функция хемоаттрактанта Th1 клеток. Интерфероны лямбда (IFN1s, IFN III типа или IL-28 и IL-29) образуют более новый класс интерферонов, которые обладают гомологией, общими паттернами экспрессии и противовирусными функциями с интерферонами I типа (Lazear et al., 2015b; Wack et al., 2015). Они индуцируют нисходящий сигнальный путь, контролирующий экспрессию ISG и индуцирование противовирусных ответов, который удивительным образом схож с таковым у IFN I типа (Durbin et al, 2013; Mendoza et al, 2017). При этом интерфероны III типа играют важную роль в ограничении провоспалительных ответов или иммунопатологии.
IP-10 повышается в легких при инфекции вирусом гриппа (Ichikawa et al, 2013). Действительно, блокирование IP-10 с использованием моноклональных антител облегчает повреждение легких, индуцированное вирусом (Wang et al, 2013). IP-10 повышается в легких пациентов с ARDS, и показано, что он является важным фактором в патологии ARDS (Ichikawa et al, 2013).
SP-D играет важную роль во врожденной защите против гриппа, связываясь с богатыми маннозой гликанами на гликопротеинах HA/NA вируса (Hartshorn et al, 1997; Reading et al, 1997; Hartshorn et al, 2000). SP-D опосредует ряд противовирусных активностей in vitro, включая нейтрализацию инфективности вируса и подавление ферментативной активности вирусной NA, а мыши с дефицитом SP-D были больше подвержены инфекции вирусами гриппа с высоким уровнем гликозилирования. (Hartshorn et al, 1997; Reading et al, 1997; Tecle et al, 2007; LeVine et al, 2001; Vigerust et al, 2007; Hawgood et al, 2004). SP-D усиливает фагоцитоз и легочный клиренс RSV (LeVine et al, 2004).
Вторичные бактериальные инфекции являются основной проблемой, сопровождающей вирусную инфекцию. Вирусная и бактериальная ко-инфекция широко известна для вируса гриппа, риновируса и RSV. Основные бактериальные инфекции респираторного тракта включают Streptococcus pneumoniae, Moraxella catarrhalis и Haemophilus influenzae, однако было показано, что и Staphylococcus aureus также вызывает серьезные послевирусные инфекции (Hewitt et al, 2016). Вторичные бактериальные инфекции чаще всего возникают через 5-10 суток после первичных вирусных инфекций, что предполагает, что транзиторная иммуносуппрессия (первичный ответ) может быть ответственной за рост бактерий. Предложенный механизм синергии между вирусом гриппа и S. pneumoniae предполагает, что противовирусный ответ интерферона 1 типа (IFN-α/β), вызванный первичной инфекцией вируса гриппа, усиливает подверженность организма-хозяина вторичному бактериальному заражению за счет подавления антибактериального иммунитета (Nakamura et al, 2011; Shahangian et al, 2009; Li et al, 2012). Напротив, интерфероны III типа, такие как IFN-λ, способны ограничивать репликацию вируса, не подавляя элиминацию вторичных бактериальных инфекций, что имеет место после индуцирования IFN-α/β. Показано, что влияние ослабления передачи сигнала IFN-λ при помощи белка IFNLR1 Fc непосредственно перед бактериальным значительно заражением повышало бактериальную нагрузку в легких у животных по сравнению с контролем (Rich et al, 2017). Кроме того, дефицит SP-D был ассоциирован с усиленной колонизацией и инфекцией S. pneumoniae верхних и нижних дыхательных путей и более ранним началом и более длительной персистенцией бактериемии. Показано, что SP-D связывается и агглютинирует со Streptococcus pneumoniae in vitro (вторичный бактериальный инфицирующий агент, который представляет основную проблему при вторичных осложнениях у пациентов с астмой и COPD) (Jounblat et al, 2005).
Различные состояния, на которых резко отражается разрегулированный или аберрантный иммунный ответ на вирусную инфекцию, можно обобщить следующим образом: острый респираторный дистресс-синдром (ARDS), астма, включая астму детей, COPD, ожирение.
В мире острым респираторным дистресс-синдромом (ARDS) страдает большое количество людей, и он ассоциирован с очень высокой смертностью (30-50%). Респираторные вирусные инфекции (например, грипп) ассоциированы с ARDS.
Астма является хроническим воспалительным заболеванием дыхательных путей, обычно ассоциированным с гиперреактивностью и обструкцией дыхательных путей различной степени, которая часто разрешается спонтанно или в ходе лечения (WHO (Всемирная Организация Здравоохранения), 2007). Приблизительно от 80 до 85% осложнений астмы у детей, подростков и реже взрослых ассоциированы с вирусными инфекциями верхних отделов дыхательной системы, а на долю риновируса (RV) приходится ~60-70% таких вирус-ассоциированных осложнений. Вирусные инфекции тесно связаны с обструктивными заболеваниями у детей всех возрастов. RSV является основным агентом, вызывающим бронхиолит или круп, тогда как риновирус (RV) впоследствии чаще всего обнаруживается у детей со стерторозным дыханием. Тяжелое респираторное заболевание, вызванное любым из указанных вирусов, ассоцировано с последующим развитием астмы, и риск наиболее высок у маленьких детей со стерторозным дыханием с RV инфекциями (Jartti and Gern, 2017).
Ожирение ассоциировано с разрегулированным иммунным и воспалительным ответами. Влияние ожирения на возникновение астмы более выражено у женщин и у лиц, не страдающих алергией, при этом существует дозозависимое влияние увеличения индекса массы тела (BMI) на заболеваемость астмой. Становится все более очевидным, что ожирение ассоциировано с уникальным фенотипом астмы, который отличается более тяжелым заболеванием с вариабельным ответом на стандартную терапию астмы. Кроме того, во время пандемии гриппа A (H1N1) в 2009 обнаружили, что ожирение является фактором риска тяжелого гриппа, а у лиц с ожирением нарушена противовирусная защита от респираторных вирусов (Almond et al, 2013). Существуют данные, что такой неблагоприятный ответ обусловлен не самим вирусом, а природой иммунного ответа на RV (Steinke et al, 2016).
COPD является третьей ведущей причиной смертности в США. Фактически, COPD является единственной основной причиной смертности, доля которой повышается, и ожидается, что к 2030 году она будет третьей ведущей причиной смертности в развитых странах (уступая только заболеваниям сердца и инсульту). Она является следствием воспалительного повреждения дыхательных путей, вызывающего хронический бронхит и/или эмфизему. У пациентов с COPD осложнения может вызывать более широкий спектр вирусов, но и в данном случае полагают, что к ухудшению симптомов приводит не вирус, а иммунный ответ на вирус (Zhou et al, 2015).
Следует принимать во внимание, что штамм по изобретению можно вводить животным (включая человека) в пероральной принимаемой внутрь форме в стандартных лекарственных формах, таких как капсулы, микрокапсулы, таблетки, гранулы, порошки, троше, пилюли, суппозитории, суспензии и сиропы. Подходящие композиции можно получать обычно применяемыми способами с применением стандартных органических и неорганических вспомогательных веществ. Количество действующего вещества в медицинской композиции может находиться на уровне, который будет оказывать желаемый терапевтический эффект.
Композиция может также включать бактериальный компонент, лекарственное средство и/или биологическое соединение.
Кроме того, вакцина, содержащая штаммы по изобретению, может быть получена любым подходящим известным способом и может включать фармацевтически приемлемый носитель или адъювант.
Иммунная система человека играет важную роль в этиологии и патогенезе широкого спектра заболеваний человека. Гипер- и гипореактивность иммунной системы вызывает большинство патологических состояний или является их компонентом. Одна группа биологических соединений, под названием цитокины, является особенно важной для контролирования иммунных процессов. Нарушения этой хрупкой сети цитокинов все чаще ассоциируются со многими заболеваниями. Эти заболевания включают воспалительные расстройства, иммунодефицит, воспалительное заболевание кишечника, синдром раздраженного кишечника, рак (в частности, желудочно-кишечного тракта и иммунной системы), диарею, диарею, ассоциированную с антибиотиками, педиатрическую диарею, аппендицит, аутоиммунные расстройства, рассеянный склероз, болезнь Альцгеймера, ревматоидный артрит, целиакию, сахарный диабет, трансплантацию органов, бактериальные инфекции, вирусные инфекции, грибковые инфекции, заболевания периодонта, урогентиальное заболевание, заболевание, передающееся половым путем, HIV (вирус иммунодефицита человека) инфекцию, репликацию HIV, диарею, ассоциированную с HIV, травму, ассоциированную с операцией, метастатическое заболевание, индуцированное хирургическим вмешательством, сепсис, потерю веса, анорексию, контроль лихорадки, кахексию, заживление ран, язвы, барьерную функцию кишечника, аллергию, астму, респираторные расстройства, расстройства кровообращения, коронарную болезнь сердца, анемию, расстройства системы свертывания крови, заболевание почек, расстройства центральной нервной системы, заболевания печени, ишемию, расстройства питания, остеопороз, эндокринные расстройства, эпидермальные расстройства, псориаз и обыкновенные угри, но не ограничиваются перечисленными. Влияние на продуцирование цитокинов является специфическим для изученного пробиотического штамма. Так, можно отобрать конкретные пробиотические штаммы для нормализации уникального дисбаланса цитокинов, характерного для определенного типа заболевания. Подбор специфического для заболевания лечения можно осуществлять с использованием либо единственного штамма AN 1206, либо его мутантов или вариантов, либо набора этих штаммов.
Энтеральная флора важна для развития и надлежащего функционирования иммунной системы кишечника. Как показано в моделях на лишенных бактериальной флоры животных, в отсутствие энтеральной флоры иммунная система кишечника оказывается недостаточно развитой, а некоторые ее функциональные параметры сниженными, такие как фагоцитарная способность макрофагов и продукция иммуноглобулинов. Важность кишечной флоры в стимуляции неповреждающих иммунных ответов становится все более очевидной. Увеличение распространенности и тяжести аллергий в западных странах связывают с усилением гигиены и дезинфекции и параллельным снижением числа и спектра инфекционных агентов, с которыми встречается организм-хозяин. Такое отсутствие стимуляции иммунитета может позволить организму-хозяину реагировать на непатогенные, но являющиеся антигенами агенты, в результате чего развивается аллергия или аутоиммунитет. Намеренное употребление ряда непатогенных иммуномодулирующих бактерий обеспечит организм-хозяин необходимыми и надлежащими обучающими стимулами для правильного развития и контроля иммунной функции.
Термин воспаление используют для описания местной аккумуляции жидкости, белков плазмы и белых кровяных клеток в участке, где происходит длительное физическое повреждение, инфекция или где имеет место продолжающийся иммунный ответ. Контроль воспалительного ответа осуществляется на нескольких уровнях. Контролирующие факторы включают цитокины, гормоны (например, гидрокортизон), простагландины, реакционноспособные промежуточные соединения и лейкотриены. Цитокины представляют собой биологически активные белки с низкой молекулярной массой, задействованные в возникновении и регулировании иммунологического и воспалительного ответов, также регулирующие развитие, репарацию ткани и гемопоэз. Они обеспечивают средство коммуникации между самими лейкоцитами, а также клетками других типов. Большинство цитокинов являются плейотропными и проявляют множество биологически перекрывающихся активностей. Скорее, воспалительный ответ регулируют каскады и сети цитокинов, а не действие конкретного цитокина на конкретный тип клеток. Затухание воспалительного ответа приводит к понижению концентрации соответствующих активирующих сигналов и других воспалительных медиаторов, что приводит к прекращению воспалительного ответа. TNFα является ключевым провоспалительным цитокином, поскольку он запускает каскад цитокинов и биологических эффектов, что приводит к воспалительному состоянию. Таким образом, в настоящее время для лечения воспалительных заболеваний используются агенты, ингибирующие TNFα, например инфликсимаб.
Полагают, что провоспалительные цитокины играют главную роль в патогенезе многих воспалительных заболеваний, включая воспалительное заболевание кишечника (IBD). Существующие терапевтические средства для лечения IBD нацелены на снижение уровней этих провоспалительных цитокинов, включая IL-8 и TNFα. Такие терапевтические средства могут также играть важную роль в лечении системных воспалительных заболеваний, таких как ревматоидный артрит.
Штамм по данному изобретению может найти потенциальное применение в лечении ряда воспалительных заболеваний, особенно при применении в комбинации с другими противовоспалительными терапевтическими средствами, такими как нестероидные противовоспалительные средства (NSAID) или инфликсимаб.
Продуцирование многофункциональных цитокинов при различных типах опухолей позволяет предположить существование существенных воспалительных ответов у пациентов с опухолями. В настоящее время неясно, каким защитным эффектом против роста и развития опухолевых клеток in vivo обладает такой ответ. Однако указанные воспалительные ответы могут негативно влиять на организм хозяина-носителя опухоли. В регуляции продукции цитокинов и пролиферации клеток внутри опухоли и в нормальных тканях задействованы сложные взаимодействия цитокинов. Длительное время считалось, что потеря массы (кахексия) является единственной наиболее распространенной причиной смерти у пациентов с раком, и исходное истощение указывает на плохой прогноз. Для роста и распространения опухоли ей необходимо индуцировать формирование новых кровеносных сосудов и разрушать внеклеточный матрикс. Воспалительный ответ может играть важную роль в вышеуказанных механизмах, таким образом, способствуя ухудшению здоровья хозяина и прогрессированию опухоли. Благодаря противовоспалительным свойствам Bifidobacterium longum эти штаммы бактерий могут снижать скорость злокачественной трансформации клеток. Кроме того, кишечные бактерии могут продуцировать из поступающих с пищей соединений вещества с генотоксичной, канцерогенной и опухолестимулирующей активностью, и бактерии кишечника могут приводить к активации проканцерогенов в вещества, реагирующие с ДНК. Как правило, активность метаболизирующих ксенобиотики ферментов у видов Bifidobacterium низкая по сравнению с другими популяциями, обитающими в кишечнике, такими как бактероиды, эубактерии и клостридии. Таким образом, увеличение в кишечнике числа бактерий Bifidobacterium может благоприятно изменять уровни этих ферментов.
Большинство патогенных организмов поступают через поверхность слизистой. Эффективная вакцинация этих участков защищает от инвазии конкретных инфекционных агентов. До настоящего времени стратегии пероральной вакцинации были сфокусированы на применении ослабленных живых патогенных организмов или очищенных инкапсулированных антигенов. Пробиотические бактерии, конструированные для продуцирования антигенов инфекционного агента in vivo, могут стать привлекательной альтернативой, поскольку эти бактерии считаются безопасными для потребления человеком (статус GRAS).
Исследования на мышах показали, что потребление пробиотических бактерий, экспрессирующих чужеродные антигены, может вызывать защитные иммунные ответы. Ген, кодирующий фрагмент С столбнячного токсина (TTFC), экспрессировали в Lactococcus lactis и иммунизировали мышей пероральным способом. Данная система позволяла индуцировать достаточно высокий титр антител для защиты мышей от летального введения токсина. Помимо презентирования антигена, векторы на основе живых бактерий могут продуцировать in vivo биологически активные соединения, такие как иммуностимулирующие цитокины. L. lactis, секретирующие биологически активные IL-2 или IL-6 человека и TTFC, индуцировали в 10-15 раз более высокие титры IgG в сыворотке мышей при интраназальной иммунизации. Однако совместная экспрессия данных цитокинов в этом конкретном бактериальном штамме не повышала уровень общего IgA. Изучали также пригодность других бактериальных штаммов в качестве вакцин для нанесения на слизистые оболочки, таких как Streptococcus gordonii. Рекомбинантный S. gordonii, колонизирующий полость рта и влагалища мышей, индуцировал как антительный ответ слизистой, так и системный антительный ответ на антигены, экспрессируемые указанными бактериями. Таким образом, пероральная иммунизация с применением пробиотических бактерий в качестве векторов будет не только защищать организм хозяина от инфекции, но и может замещать иммунные стимулы, обычно вызываемые патогеном, таким образом, способствуя обучению иммунной системы хозяина.
Пребиотики
Введение пробиотических организмов осуществляют путем приема внутрь микроорганизма в подходящем носителе. Было бы предпочтительно обеспечивать среду, которая будет способствовать росту таких пробиотических штаммов в толстой кишке. Добавление одного или более чем одного из: олигосахаридов, полисахаридов или других пребиотиков усиливает рост молочнокислых бактерий в желудочно-кишечном тракте. Пребиотиками обозначают любые неживые компоненты пищи, которые специфически ферментируются в кишечнике резидентными бактериями, которые считаются полезными, например, бифидобактериями, лактобациллами. Типы пребиотиков могут включать такие, которые содержат фруктозу, ксилозу, сою, галактозу, глюкозу и маннозу. Комбинированное введение пробиотического штамма с одним или более чем одним пребиотическим соединением может усиливать рост вводимого пробиотика in vivo, в результате принося большую пользу здоровью, и обозначается синбиотическим.
Другие активные ингредиенты
Следует принимать во внимание, что пробиотические штаммы можно вводить профилактически или в качестве способа лечения, либо в отдельности, либо с другими пробиотическими и/или пребиотическими материалами, как описано выше. Кроме того, бактерии можно использовать как компонент профилактического или терапевтического режима, с использованием других активных материалов, таких как применяемые для лечения воспаления или других расстройств, особенно расстройств с иммунологическим компонентом. Такие комбинации можно вводить в составе единой композиции или в виде отдельных композиций, которые вводят в одно и то же или в разное время, с применением одного и того же или различных путей введения.
Фармацевтические композиции
Фармацевтическая композиция представляет собой композицию, которая содержит или состоит из терапевтически эффективного количества фармацевтически активного вещества. Она предпочтительно включает фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или эксципиенты (включая их комбинации). Приемлемые носители или разбавители для терапевтического применения хорошо известны в области фармакологии и описаны, например, в Remington's Pharmaceutical Sciences. Выбор фармацевтического носителя, эксципиента или разбавителя может зависеть от предполагаемого способа введения и стандартной фармацевтической практики. Фармацевтические композиции могут содержать в качестве носителя, эксципиента или разбавителя или в дополнение к ним любое(ые) подходящее(ие) связывающее(ие) вещество(а), смазывающее(ие) вещество(а), суспендирующий(ие) агент(ы), покрывающий(ие) агент(ы), солюбилизирующий(ие) агент(ы), пропеллент(ы).
Примеры фармацевтически приемлемых носителей включают, например, воду, солевые растворы, спирт, силикон, воска, вазелиновое масло, растительные масла, полиэтиленгликоли, пропиленгликоль, липосомы, сахара, желатин, лактозу, амилозу, стеарат магния, тальк, поверхностно-активные вещества, кремниевую кислоту, вязкий парафин, парфюмерное масло, моноглицериды и диглицериды жирных кислот, петролейноэфирные (petroethral) сложные эфиры жирных кислот, гидроксиметилцеллюлозу, поливинилпирролидон и тому подобное.
Где это необходимо, фармацевтические композиции можно вводить посредством одного или более чем одного из: ингаляции, в форме суппозитория или пессария, местно в форме лосьона, раствора, крема, мази или присыпки, с применением кожного пластыря, перорально в форме таблеток, содержащих такие эксципиенты, как крахмал или лактоза, или в капсулах или овулах, либо в отдельности, либо в смеси с эксципиентами, или в форме эликиров, растворов или суспензий, содержащих корригент или краситель, или их можно вводить путем парентеральной инъекции, например, внутрикавернозной, внутривенной, внутримышечной или подкожной. Для парентерального введения композиции лучше всего использовать в форме стерильного водного раствора, который может содержать другие вещества, например достаточно солей или моносахаридов для обеспечения раствору изотоничности с кровью. Для трансбуккального или подъязычного введения композиции можно вводить в форме таблеток или пастилок, которые могут быть приготовлены стандартным способом.
Интраназальное введение можно осуществлять с применением назального спрея, раствора для промывания носа или непосредственного введения в нос.
Введение в легкие можно осуществлять в форме сухого порошка, ингаляцию которого осуществляют с применением ингалятора. В некоторых случаях композиция находится в форме аэрозоля. Аэрозоль может быть в форме раствора, суспензии, спрея, взвеси, пара, капель, частиц или сухого порошка, например с применением дозирующего ингалятора, содержащего HFA (гидрофторалкановый) пропеллент, дозирующего ингалятора, не содержащего HFA пропеллент, небулайзера, банки под давлением или распылителя непрерывного действия.
Композиция может быть разработана для инкапсулирования, удаления и/или инактивации вируса. В качестве альтернативы или дополнительно композиция может препятствовать дальнейшему инфицированию вирусом респираторного тракта.
Для облегчения доставки и удержания в респираторном тракте, например, в полости носа, композиция может иметь желаемую вязкость от 1 сантипуаз до 2000 сантипуаз, например, от 5 спз до 500 спз или от 5 спз до 300 спз. Для достижения желаемой вязкости можно использовать любое подходящее модифицирующее вязкость вещество. Такими веществами могут быть подходящие полимерные материалы естественного или синтетического происхождения, такие как гидроксипропилметилцеллюлоза.
В зависимости от различных систем доставки требования к композициям/составам могут быть различными. Например, фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может быть изготовлена для доставки с применением мини-помпы или через слизистую, например в форме назального спрея или аэрозоля для ингаляции или раствора для приема внутрь, или парентерального введения, когда композицию изготавливают в инъекционной форме, для доставки, например, внутривенным, внутримышечным или подкожным способом. В альтернативном варианте композиция может быть разработана для доставки обоими способами.
Изобретение не ограничивается описанными выше воплощениями, детали которых могут варьировать.
Список литературы
Bouhnik, Y., Survie et effets chez l'homme des bacteries ingerees dans les laits fermentes. Lait 1993, 73; 241-247.
Yang JW., Fan LC, Miao XY., Мао В., Li MH., Lu HW., Liang S., Xu JF. Corticosteroids for the treatment of human infection with influenza virus: a systematic review and meta-analysis. Clin Microbiol Infect. 2015 Oct; 21(10):956-63.
Davidson S., Crotta S., McCabe TM., Wack A. Pathogenic potential of interferon αβ in acute influenza infection. Nat Commun. 2014 May 21; 5:3864.
Nakamura S., Davis KM., Weiser JN. Synergistic stimulation of type I interferons during influenza virus coinfection promotes Streptococcus pneumoniae colonization in mice. J Clin Invest 2011; 121:3657-65.
Shahangian A., Chow EK., Tian X. et al. Type I IFNs mediate development of postinfluenza bacterial pneumonia in mice. J Clin Invest 2009; 119:1910-20.
Li W., Moltedo В., Moran TM. Type I interferon induction during influenza virus infection increases susceptibility to secondary Streptococcus pneumoniae infection by negative regulation of gammadelta T cells. J Virol 2012; 86:12304-12.
Hewitt R., Fame H., Ritchie A., Luke E., Johnston SL., Mallia P. The role of viral infections in exacerbations of chronic obstructive pulmonary disease and asthma. Ther Adv RespirDis. 2016 Apr; 10(2): 158-74. doi: 10.1177/1753465815618113.
Galani EE., Triantafyllia V., Eleminiadou EE., Koltsida O., Stavropoulos A., Manioudaki M., Thanos D., Doyle SE., Kotenko SV., Thanopoulou K., Andreakos E. Interferon-λ Mediates Non-redundant Front-Line Antiviral Protection against Influenza Virus Infection without Compromising Host Fitness. Immunity. 2017 May 16; 46(5):875-890.
Davidson S., McCabe TM., Crotta S., Gad HH., Hessel EM., Beinke S., Hartmann R., Wack A. IFN-λ is a potent anti-influenza therapeutic without the inflammatory side effects of IFN-a treatment. EMBO Mol Med. 2016 Sep 1; 8(9): 1099- 112.
Thiel, S., and Reid K. 1989 -Structures and functions associated with the group of mammalian lectins containing collagen-like sequences. FEBS Lett. 250:78.2.
Sastry, K., and Ezekowitz R.A. 1993. CoUectins: pattern recognition molecules involved in first line host defense. Curr. Opin. Immunol. 5:59.
Shi X., Zhou W., Huang H., Zhu H., Zhou P., Zhu H., Ju D. Inhibition of the inflammatory cytokine tumor necrosis factor-alpha with etanercept provides protection against lethal H1N1 influenza infection in mice. Crit. Care, 2013; 17(6); R301.
Bartlett NW1., Singanayagam A., Johnston SL. Mouse models of rhinovirus infection and airways disease. Methods Mol Biol. 2015; 1221: 181-8. doi: 10.1007/978-1-4939-1571-2_14.
Ivashkiv LB., and Donlin LT. Regulation of type I interferon responses. Nat Rev Immunol. 2014 Jan; 14(1): 36-49.
Lazear HM., Nice TJ., Diamond MS. Interferon-λ: Immune Functions at Barrier Surfaces and Beyond. Immunity, 2015 Jul 21; 43(1): 15-28.
Wack A., Terczynska-Fyla E., Hartmann R. Guarding the frontiers: the biology of the type III interferons. Nat Immunol. 2015 Aug; 16(8): 802-9.
Durbin RK., Kotenko SV., Durbin JE. Interferon induction and function at the muscol surface. Immunol Rev. 2013 Sep; 255(l): 25-39.
Mendoza JL., Schneider WM, Hoffmann HH., Vercauteren K., Jude KM., Xiong A., Moraga I., Horton TM., Glenn JS., de Jong YP., Rice СМ., Garcia KC. The IFN∧-IFN∧R1-IL-10RP Complex Reveals Structural Features Underlying Type III IFN Functional Plasticity. Immunity. 2017 Mar 21; 46(3): 379-392.
Ichikawa A., Kuba K., Morita M., Chida S., Tezuka H., Hara H., Sasaki Т., Ohteki Т., Ranieri VM., dos Santos CC, Kawaoka Y., Akira S., Luster AD., Lu В., Penninger JM., Uhlig S., Slutsky AS., Imai Y. CXCL10-CXCR3 enhances the development of neutrophil-mediated fulminant lung injury of viral and nonviral origin. Am J Respir Crit Care Med. 2013 Jan 1; 187(1):65-77.
Wei Wang., Penghui Yang., et al. Monoclonal antibody against CXCL-lO/JP-10 ameliorates influenza A (H1N1) virus induced acute lung injury. Cell Research (2013) 23:577-580.
Hartshorn KL., White MR., Shepherd V., Reid K., Jensenius JC, Crouch EC. Mechanisms of anti-influenza activity of surfactant proteins A and D: comparison with serum collectins. Am J Physiol 1997; 273: L1156-L1166.
Reading PC, Morey LS., Crouch EC, Anders EM. Collectin-mediated antiviral host defense of the lung: evidence from influenza virus infection of mice. J Virol 1997; 71: 8204-8212.
Hartshorn KL., White MR., Voelker DR., Coburn J., Zaner K., Crouch EC. Mechanism of binding of surfactant protein D to influenza A viruses: importance of binding to haemagglutinin to antiviral activity. Biochem J 2000; 351 (Pt 2): 449-458.
Tecle Т., White MR., Crouch EC, Hartshorn KL. Inhibition of influenza viral neuraminidase activity by collectins. Arch Virol 2007; 152: 1731-1742.
LeVine AM., Whitsett JA., Hartshorn KL., Crouch EC, Korfhagen TR. SP- D enhances clearance of influenza A virus from the lung in in vivo mouse models. J Immunol 2001; 167:5868-5873.
Vigerust DJ., Ulett KB., Boyd KL., Madsen J., Hawgood S., McCullers JA. N-linked glycosylation attenuates H3N2 influenza viruses. J Virol 2007; 81:8593-8600.
Hawgood S., Brown C, Edmondson J., Stumbaugh A., Allen L., Goerke J. et al. Pulmonary collectins modulate strain- specific influenza a virus infection and host responses. J Virol 2004; 78: 8565-8572.
LeVine AM(1)., Elliott J., Whitsett JA., Srikiatkhachorn A., Crouch E., DeSilva N., Korfhagen T. Surfactant protein-d enhances phagocytosis and pulmonary clearance of respiratory syncytial virus. Am J Respir Cell Mol Biol. 2004 Aug; 31(2): 193-9.
Rich H., Robinson KE., McHugh KJ., Clay ME., Alcorn JF. The role of interferon lambda during influenza, Staphylococcus aureus super-infection. J Immunol May 1, 2017, 198 (1 Supplement) 77.16.
Jounblat R., Clark H., Eggleton P., Hawgood S., Andrew PW., Kadioglu A. The role of surfactant protein D in the colonisation of the respiratory tract and onset of bacteraemia during pneumococcal pneumonia Respir Res. 2005 Oct 28; 6: 126.
World Health Organisation 2007. Global surveillance, prevention and control of chronic respiratory diseases, a comprehensive approach. (Editors Jean Bousquet and Nikolai Khaltaev).
Jartti Т., Gern JE. Role of viral infections in the development and exacerbation of asthma in children. J Allergy Clin Immunol. 2017 Oct; 140(4): 895-906.
Almond MH1., Edwards MR., Barclay WS., Johnston SL. Obesity and susceptibility to severe outcomes following respiratory viral infection. Thorax. 2013 Jul; 68(7): 684-6. doi: 10.1136/thoraxjnl-2012-203009.
Steinke JW., Borish L. Immune Responses in Rhinovirus-Induced Asthma Exacerbations. Curr Allergy Asthma Rep. 2016 Nov; 16(11): 78.
Zhou X., Li Q., Zhou X. Exacerbation of Chronic Obstructive Pulmonary Disease. Cell Biochem Biophys. 2015 Nov; 73(2): 349-55.
--->
SEQUENCE LISTING
<110> Alimentary Health Limited
<120> Bifidobacterium longum
<130> ALIM70/C/WO
<150> EP17158564.9
<151> 2017-02-28
<150> EP17158567.2
<151> 2017-02-28
<160> 5
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 18
<212> DNA
<213> Bifidobacterium longum
<400> 1
ctggtgccaa ggcatcca 18
<210> 2
<211> 19
<212> DNA
<213> Bifidobacterium longum
<400> 2
gctggatcac ctcctttct 19
<210> 3
<211> 498
<212> DNA
<213> Bifidobacterium longum
<400> 3
ttgctgggat cacctccttt ttacggagaa ttcagtcgga tgttcgtccg acggtgtgcg 60
ccccgcgcgt cgcatggtgc gatggcggcg gggttgctgg tgtggaaaac gtcgttggct 120
ttgccctgcc ggtcgtgcgg tgggtgcggg gtggtatgga tgcgcttttg ggctcccgga 180
tcgccacccc aggctttttg cctggcgcga ttcgatgccc gtcgtgcctg ggggccggcc 240
gtgtgccggc gcgatggcgt ggcggtgcgt ggtggcttga gaactggata gtggacgcga 300
gcaaaacaag ggtttttgaa tctttgtttt gctgttgatt tcgaatcgaa ctctattgtt 360
cgtttcgatc gttttgtgat catttttagt gtgatgattt gtcgtcctgg gaatttgcta 420
gaggaatact tgcgggccat gcactttcgt ggtgtgtgtt gcttgcaagg gcgtatggtg 480
gaggccttgg caccagaa 498
<210> 4
<211> 20
<212> DNA
<213> Bifidobacterium longum
<400> 4
ggactgcagc gtagacgctt 20
<210> 5
<211> 21
<212> DNA
<213> Bifidobacterium longum
<400> 5
catcctgtat atgaggccca t 21
<---
Claims (69)
1. Иммуностимулирующий штамм Bifidobacterium longum, имеющий регистрационный номер NCIMB 42020.
2. Штамм Bifidobacterium по п. 1, который находится в форме биологически чистой культуры.
3. Штамм Bifidobacterium по п. 1 или 2 в форме жизнеспособных клеток.
4. Штамм Bifidobacterium по любому из пп. 1-3 в форме нежизнеспособных клеток.
5. Штамм Bifidobacterium по любому из пп. 1-4, где Bifidobacterium выделены из кала.
6. Штамм Bifidobacterium по любому из пп. 1-5, который находится в форме бактериального бульона.
7. Штамм Bifidobacterium по любому из пп. 1-5, который находится в форме лиофилизированного порошка.
8. Штамм по любому из пп. 1-7, который ослабляет ответ IP-10 на вирус.
9. Штамм по любому из пп. 1-8, который усиливает ответ интерферона III типа на вирус.
10. Штамм по любому из пп. 1-9, который усиливает ответ интерферона лямбда на вирус.
11. Штамм по любому из пп. 1-10, который подавляет ответ интерферона I типа на вирус.
12. Штамм по любому из пп. 1-11, который подавляет ответ интерферона альфа на вирус.
13. Штамм по любому из пп. 1-12, который подавляет ответ интерферона бета на вирус.
14. Штамм по любому из пп. 1-13, который усиливает ответ сурфактантного белка D на вирус.
15. Иммуностимулирующая композиция, содержащая штамм Bifidobacterium по любому из пп. 1-14 и носитель, разбавитель и/или эксципиент.
16. Композиция по п. 15, дополнительно содержащая другой пробиотический материал.
17. Композиция по п. 15 или 16, дополнительно содержащая пребиотический материал.
18. Композиция по п. 15 или 16, дополнительно содержащая принимаемый внутрь носитель.
19. Композиция по п. 18, где принимаемый внутрь носитель представляет собой фармацевтически приемлемый носитель, такой как капсула, таблетка или порошок.
20. Композиция по п. 18, где принимаемый внутрь носитель представляет собой пищевой продукт, такой как кислое молоко, йогурт, замороженный йогурт, мороженое, порошковое молоко, концентрированное молоко, мороженое, сырная паста, заправка или напиток.
21. Композиция по любому из пп. 15-20, дополнительно содержащая белок и/или пептид, в частности белки и/или пептиды, богатые глутамином/глутаматом, липид, углевод, витамин, минерал и/или микроэлемент.
22. Композиция по любому из пп. 15-21, где штамм Bifidobacterium присутствует в количестве более 106 CFU (колониеобразующих единиц) на грамм композиции.
23. Композиция по пп. 15-22, дополнительно содержащая адъювант.
24. Композиция по пп. 15-23, дополнительно содержащая лекарственное средство.
25. Композиция по пп. 15-24, дополнительно содержащая биологическое соединение.
26. Иммуностимулирующая композиция, содержащая штамм по любому из пп. 1-14, которая адаптирована для введения в легкие или в нос.
27. Композиция по п. 26 в форме назального спрея.
28. Композиция по п. 26 или 27, где вязкость композиции составляет от 1 сП до 2000 сП.
29. Штамм Bifidobacterium по любому из пп. 1-14 для применения в пищевых продуктах.
30. Композиция по любому из пп. 15-25 для применения в пищевых продуктах.
31. Штамм Bifidobacterium по любому из пп. 1-14 для применения в качестве лекарственного средства.
32. Композиция по любому из пп. 15-25 для применения в качестве лекарственного средства.
33. Штамм Bifidobacterium по любому из пп. 1-14 для применения в профилактике и/или лечении нежелательной воспалительной активности.
34. Композиция по любому из пп. 15-28 для применения в профилактике и/или лечении нежелательной воспалительной активности.
35. Штамм Bifidobacterium по любому из пп. 1-14 для применения в изготовлении лекарственного средства для лечения астмы и/или аллергии, где лекарственное средство может быть в форме, подходящей для ингаляции.
36. Композиция по любому из пп. 15-28 для применения в изготовлении лекарственного средства для лечения астмы и/или аллергии, где лекарственное средство может быть в форме, подходящей для ингаляции.
37. Штамм Bifidobacterium по любому из пп. 1-14 для применения в профилактике или лечении вирусной инфекции у субъекта.
38. Композиция по любому из пп. 15-28 для применения в профилактике или лечении вирусной инфекции у субъекта.
39. Штамм Bifidobacterium по любому из пп. 1-14 для применения в профилактике вторичной бактериальной инфекции, ассоциированной с респираторной вирусной инфекцией, у субъекта.
40. Композиция по любому из пп. 15-28 для применения в профилактике вторичной бактериальной инфекции, ассоциированной с респираторной вирусной инфекцией, у субъекта.
41. Штамм Bifidobacterium для применения по п. 37 или 39, где вирус представляет собой респираторный вирус.
42. Штамм Bifidobacterium для применения по п. 41, где респираторный вирус выбран из вируса гриппа, риновируса и респираторного синцитиального вируса.
43. Штамм Bifidobacterium longum для применения по любому из пп. 37, 39, 41 и 42, где у субъекта диагностировано воспалительное заболевание легких.
44. Штамм Bifidobacterium longum для применения по любому из пп. 37, 39 и 41-43, где субъект имеет повышенную предрасположенность к респираторной инфекции.
45. Штамм Bifidobacterium longum для применения по любому из пп. 37, 39 и 41-44, где субъект имеет ожирение.
46. Штамм Bifidobacterium longum для применения по любому из пп. 37, 39 и 41-45, где субъект представляет собой пациента с острым респираторным дистресс-синдромом (ARDS).
47. Штамм Bifidobacterium longum для применения по любому из пп. 37, 39 и 41-46, где субъект представляет собой пациента с астмой.
48. Штамм Bifidobacterium longum для применения по любому из пп. 37, 39 и 41-47, где субъект представляет собой пациента с хронической обструктивной болезнью легких (COPD).
49. Штамм Bifidobacterium longum для применения по любому из пп. 37, 39 и 41-48, где субъект представляет собой ребенка в возрасте младше 5 лет.
50. Штамм Bifidobacterium longum для применения по любому из пп. 37, 39 и 41-48, где субъект представляет собой пожилого пациента в возрасте старше 60 лет.
51. Способ профилактики или лечения вирусной инфекции у субъекта, включающий введение субъекту, которому это необходимо, эффективного количества штамма Bifidobacterium longum NCIMB 42020.
52. Способ по п. 51, где штамм Bifidobacterium longum NCIMB 42020 ослабляет ответ IP-10 на вирус.
53. Способ по п. 51 или 52, где штамм Bifidobacterium longum NCIMB 42020 усиливает ответ интерферона III типа на вирус.
54. Способ по пп. 51-53, где штамм Bifidobacterium longum NCIMB 42020 усиливает ответ интерферона лямбда на вирус.
55. Способ по любому из пп. 51-54, где штамм Bifidobacterium longum NCIMB 42020 подавляет ответ интерферона I типа на вирус.
56. Способ по любому из пп. 51-55, где штамм Bifidobacterium longum NCIMB 42020 подавляет ответ интерферона альфа на вирус.
57. Способ по любому из пп. 51-56, где штамм Bifidobacterium longum NCIMB 42020 подавляет ответ интерферона бета на вирус.
58. Способ по любому из пп. 51-57, где штамм Bifidobacterium longum NCIMB 42020 усиливает ответ сурфактантного белка D на вирус.
59. Способ профилактики или лечения вторичной бактериальной инфекции у субъекта, включающий стадию введения фракции клеточной стенки, выделенной из Bifidobacterium longum NCIMB 42020.
60. Способ по любому из пп. 51-59, где вирус представляет собой респираторный вирус.
61. Способ по любому из пп. 51-60, где вирус выбран из вируса гриппа, риновируса и респираторного синцитиального вируса.
62. Способ по любому из пп. 51-61, где у субъекта диагностировано воспалительное заболевание легких.
63. Способ по любому из пп. 51-62, где субъект имеет повышенную предрасположенность к респираторной инфекции.
64. Способ по любому из пп. 51-63, где субъект имеет ожирение.
65. Способ по любому из пп. 51-64, где субъект представляет собой пациента с острым респираторным дистресс-синдромом (ARDS).
66. Способ по любому из пп. 51-65, где субъект представляет собой пациента с астмой.
67. Способ по любому из пп. 51-66, где субъект представляет собой пациента с хронической обструктивной болезнью легких (COPD).
68. Способ по любому из пп. 51-67, где субъект представляет собой ребенка в возрасте младше 5 лет.
69. Способ по любому из пп. 51-67, где субъект представляет собой пожилого человека в возрасте старше 60 лет.
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP17158564.9 | 2017-02-28 | ||
EP17158564 | 2017-02-28 | ||
EP17158567 | 2017-02-28 | ||
EP17158567.2 | 2017-02-28 | ||
PCT/EP2018/054914 WO2018158306A1 (en) | 2017-02-28 | 2018-02-28 | Bifidobacterium longum able to beneficially modulate immune response to respiratory virus infection |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2019128539A RU2019128539A (ru) | 2021-03-30 |
RU2019128539A3 RU2019128539A3 (ru) | 2021-07-01 |
RU2768030C2 true RU2768030C2 (ru) | 2022-03-23 |
Family
ID=61521511
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2019128539A RU2768030C2 (ru) | 2017-02-28 | 2018-02-28 | Bifidobacterium longum, способный благоприятно модулировать иммунный ответ на респираторную вирусную инфекцию |
Country Status (13)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US11529381B2 (ru) |
EP (1) | EP3532603B1 (ru) |
JP (1) | JP7055814B2 (ru) |
KR (1) | KR20190123267A (ru) |
CN (1) | CN110352237B (ru) |
AU (1) | AU2018227020B2 (ru) |
BR (1) | BR112019017940A2 (ru) |
CA (1) | CA3054099A1 (ru) |
DK (1) | DK3532603T3 (ru) |
ES (1) | ES2834950T3 (ru) |
MX (1) | MX2019010143A (ru) |
RU (1) | RU2768030C2 (ru) |
WO (1) | WO2018158306A1 (ru) |
Families Citing this family (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR101687420B1 (ko) * | 2008-05-27 | 2016-12-20 | 나가유나 퍼틸라이저스 앤 케미칼스 리미티드 | 할로겐화물을 함유한 실리콘, 그의 제조방법 및 용도 |
WO2018209308A1 (en) * | 2017-05-12 | 2018-11-15 | The Regents Of The University Of California | Treating and detecting dysbiosis |
JP2019167327A (ja) * | 2018-03-26 | 2019-10-03 | 森永乳業株式会社 | ビフィドバクテリウム属細菌を有効成分とする、iii型インターフェロン産生促進用組成物 |
TW202110474A (zh) * | 2019-05-28 | 2021-03-16 | 多明尼加商艾巴爾生態科技股份有限公司 | 含溶菌酶之寬譜抗菌醫藥配方及其使用方法 |
US20230106819A1 (en) * | 2020-03-13 | 2023-04-06 | Precisionbiotics Group Limited | Bifidobacterium longum |
CN111529703B (zh) * | 2020-06-17 | 2023-09-15 | 湖南循天然营养有限公司 | 一种组合物及其制备方法与在制备免疫佐剂中的应用 |
WO2023120547A1 (ja) * | 2021-12-22 | 2023-06-29 | 株式会社明治 | 二次性感染症の予防又は発症リスクを低減するための組成物 |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2151606C1 (ru) * | 1998-07-09 | 2000-06-27 | Российский государственный медицинский университет | Штамм бактерий bifidobacterium longum z4 для приготовления бактерийных препаратов, нормализующих микрофлору при нарушениях микробиоценоза влагалища |
RU2216588C1 (ru) * | 2002-05-17 | 2003-11-20 | Государственное учреждение Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н.Габричевского | Штамм bifidobacterium longum я2, используемый для получения кисломолочных, ферментированных и неферментированных пищевых продуктов, заквасок, гигиенических и косметических средств, биологически активных добавок и бактерийных препаратов |
RU2314341C1 (ru) * | 2006-07-13 | 2008-01-10 | Федеральное Государственное учреждение науки "Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека | Штамм bifidobacterium longum гв-15, используемый для получения кисломолочных, ферментированных и неферментированных пищевых продуктов, заквасок, гигиенических и косметических средств, биологически активных добавок и бактерийных препаратов |
US20120230956A1 (en) * | 2009-08-25 | 2012-09-13 | Nestec S.A. | Bifidobacterium longum and functional gi disorders |
RU2557310C2 (ru) * | 2009-11-11 | 2015-07-20 | Алиментари Хелс Лимитед | ШТАММ Bifidobacterium longum, ПРИГОДНЫЙ ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ В ИММУНОМОДУЛЯЦИИ, ИНДУКЦИИ ПРОДУКЦИИ ЦИТОКИНОВ, ЛЕЧЕНИИ АУТОИММУННОГО ЗАБОЛЕВАНИЯ, КОНТРОЛЕ ОТНОШЕНИЯ IL - 10:IL - 12, И ЕГО ИСПОЛЬЗОВАНИЕ |
Family Cites Families (28)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB1598457A (en) | 1977-03-22 | 1981-09-23 | Glaxo Lab Ltd | Process for the preparation of a fraction containing peptidoglycan material from streptomyces griseus |
DE3024318A1 (de) | 1980-06-27 | 1982-01-28 | Chemisches Laboratorium Dr. Karl Richter GmbH, 1000 Berlin | Kosmetische mittel |
US20030092163A1 (en) * | 2001-07-26 | 2003-05-15 | Collins John Kevin | Probiotic bifidobacterium strains |
CN1183960C (zh) | 2003-02-27 | 2005-01-12 | 四川大学 | 双歧杆菌细胞壁蛋白在制药中的应用 |
JP2007169200A (ja) | 2005-12-21 | 2007-07-05 | Morinaga Milk Ind Co Ltd | インフルエンザ感染予防のための医薬及び飲食品 |
US20080118473A1 (en) | 2006-11-01 | 2008-05-22 | The Procter & Gamble Company | Methods of treating a respiratory condition comprising probiotic treatment |
US8557233B2 (en) | 2007-03-28 | 2013-10-15 | Alimentary Heath Limited | Probiotic bifidobacterium strains |
AU2008231467A1 (en) * | 2007-03-28 | 2008-10-02 | Alimentary Health Limited | Probiotic Bifidobacterium strains |
EP2176299B1 (en) | 2007-05-04 | 2017-07-05 | Alimentary Health Limited | Exopolysaccharide from bifidobacterium infantis 35624 (ncimb 41003) |
AU2009212295A1 (en) * | 2008-02-06 | 2009-08-13 | The Procter & Gamble Company | Compositions methods and kits for enhancing immune response to a respiratory condition |
BRPI0908718A2 (pt) * | 2008-03-17 | 2019-09-24 | Procter & Gamble | sistema de dosagem personalizável pelo usuário |
FR2937547B1 (fr) | 2008-10-28 | 2012-11-09 | Oreal | Utilisation d'un lysat de microorganisme pour le traitement des peaux grasses |
FI20096058A0 (fi) | 2009-10-13 | 2009-10-13 | Valio Oy | Koostumuksia ja niihin liittyviä menetelmiä ja käyttöjä |
AU2010317422A1 (en) * | 2009-11-11 | 2012-05-31 | Alimentary Health Limited | Probiotic Bifidobacterium strain |
WO2012029064A1 (en) | 2010-09-02 | 2012-03-08 | Sipnose Ltd | A nasal delivary device |
EP2455092A1 (en) | 2010-11-11 | 2012-05-23 | Nestec S.A. | Non-replicating probiotic micro-organisms protect against upper respiratory tract infections |
CN102321187B (zh) | 2011-08-15 | 2013-04-17 | 内蒙古双奇药业股份有限公司 | 一种从长双歧杆菌nq-1501中提取完整肽聚糖的方法 |
US20130165470A1 (en) * | 2011-12-21 | 2013-06-27 | The Procter & Gamble Company | Methods for Detecting and Treating Rhinovirus Infection |
US9861666B2 (en) | 2013-08-12 | 2018-01-09 | Mansel Griffiths | Antiviral methods and compositions comprising probiotic bacterial molecules |
WO2015140299A1 (en) | 2014-03-20 | 2015-09-24 | Universiteit Antwerpen | Oronasopharyngeal probiotics |
HUE042780T2 (hu) | 2014-07-16 | 2019-07-29 | Depofarma S P A | Immunszabályozó hatású Propionibacterium granulosum parietalisis frakció |
WO2016120320A1 (en) * | 2015-01-27 | 2016-08-04 | Dupont Nutrition Biosciences Aps | Immunomodulatory composition comprising bifidobacteria |
WO2016142767A1 (en) | 2015-03-09 | 2016-09-15 | Bioimmunizer Sagl | Anti-age composition comprising a combination of antioxidant agents in association with bifidobacteria and cell walls isolated from probiotics |
EP3341081B1 (en) | 2015-08-27 | 2020-11-11 | PrecisionBiotics Group Limited | Use of bifidobacterium longum and an exopolysaccharide produced thereby |
JP6637725B2 (ja) | 2015-10-28 | 2020-01-29 | ビオフェルミン製薬株式会社 | ウイルス感染症の予防及び/又は治療剤 |
IT201600091033A1 (it) | 2016-09-08 | 2018-03-08 | Bioimmunizer Sagl | Ceppi di batteri probiotici appartenenti al genere Bifidobacterium e loro estratti di cellule probiotiche (ECP) aventi proprietà immunostimolanti. |
WO2018158309A1 (en) | 2017-02-28 | 2018-09-07 | Alimentary Health Limited | Bifidobacterium longum able to beneficially modulate immune response to respiratory virus infection |
WO2018168449A1 (ja) | 2017-03-17 | 2018-09-20 | 国立大学法人東北大学 | ペプチドグリカン認識タンパク質産生促進用組成物 |
-
2018
- 2018-02-28 DK DK18707915.7T patent/DK3532603T3/da active
- 2018-02-28 MX MX2019010143A patent/MX2019010143A/es unknown
- 2018-02-28 JP JP2019546824A patent/JP7055814B2/ja active Active
- 2018-02-28 CA CA3054099A patent/CA3054099A1/en active Pending
- 2018-02-28 RU RU2019128539A patent/RU2768030C2/ru active
- 2018-02-28 ES ES18707915T patent/ES2834950T3/es active Active
- 2018-02-28 WO PCT/EP2018/054914 patent/WO2018158306A1/en unknown
- 2018-02-28 KR KR1020197024317A patent/KR20190123267A/ko not_active Application Discontinuation
- 2018-02-28 CN CN201880014451.7A patent/CN110352237B/zh active Active
- 2018-02-28 BR BR112019017940A patent/BR112019017940A2/pt unknown
- 2018-02-28 EP EP18707915.7A patent/EP3532603B1/en active Active
- 2018-02-28 US US16/489,141 patent/US11529381B2/en active Active
- 2018-02-28 AU AU2018227020A patent/AU2018227020B2/en active Active
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2151606C1 (ru) * | 1998-07-09 | 2000-06-27 | Российский государственный медицинский университет | Штамм бактерий bifidobacterium longum z4 для приготовления бактерийных препаратов, нормализующих микрофлору при нарушениях микробиоценоза влагалища |
RU2216588C1 (ru) * | 2002-05-17 | 2003-11-20 | Государственное учреждение Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н.Габричевского | Штамм bifidobacterium longum я2, используемый для получения кисломолочных, ферментированных и неферментированных пищевых продуктов, заквасок, гигиенических и косметических средств, биологически активных добавок и бактерийных препаратов |
RU2314341C1 (ru) * | 2006-07-13 | 2008-01-10 | Федеральное Государственное учреждение науки "Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека | Штамм bifidobacterium longum гв-15, используемый для получения кисломолочных, ферментированных и неферментированных пищевых продуктов, заквасок, гигиенических и косметических средств, биологически активных добавок и бактерийных препаратов |
US20120230956A1 (en) * | 2009-08-25 | 2012-09-13 | Nestec S.A. | Bifidobacterium longum and functional gi disorders |
AU2010288546B2 (en) * | 2009-08-25 | 2015-08-20 | Société des Produits Nestlé S.A. | Bifidobacterium longum and functional GI disorders |
RU2557310C2 (ru) * | 2009-11-11 | 2015-07-20 | Алиментари Хелс Лимитед | ШТАММ Bifidobacterium longum, ПРИГОДНЫЙ ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ В ИММУНОМОДУЛЯЦИИ, ИНДУКЦИИ ПРОДУКЦИИ ЦИТОКИНОВ, ЛЕЧЕНИИ АУТОИММУННОГО ЗАБОЛЕВАНИЯ, КОНТРОЛЕ ОТНОШЕНИЯ IL - 10:IL - 12, И ЕГО ИСПОЛЬЗОВАНИЕ |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
WO2018158306A1 (en) | 2018-09-07 |
BR112019017940A2 (pt) | 2020-05-19 |
CA3054099A1 (en) | 2018-09-07 |
JP7055814B2 (ja) | 2022-04-18 |
MX2019010143A (es) | 2019-10-02 |
JP2020508672A (ja) | 2020-03-26 |
EP3532603B1 (en) | 2020-09-09 |
ES2834950T3 (es) | 2021-06-21 |
CN110352237B (zh) | 2023-01-10 |
RU2019128539A3 (ru) | 2021-07-01 |
AU2018227020A1 (en) | 2019-08-29 |
RU2019128539A (ru) | 2021-03-30 |
AU2018227020B2 (en) | 2023-08-17 |
EP3532603A1 (en) | 2019-09-04 |
DK3532603T3 (da) | 2020-12-07 |
US11529381B2 (en) | 2022-12-20 |
CN110352237A (zh) | 2019-10-18 |
KR20190123267A (ko) | 2019-10-31 |
WO2018158306A8 (en) | 2019-04-25 |
US20200000859A1 (en) | 2020-01-02 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2768030C2 (ru) | Bifidobacterium longum, способный благоприятно модулировать иммунный ответ на респираторную вирусную инфекцию | |
US10960032B2 (en) | Use of Akkermansia muciniphila for treating inflammatory conditions | |
US20230210921A1 (en) | Bifidobacterium longum able to beneficially modulate immune response to respiratory virus infection | |
CA2454804C (en) | Probiotic lactobacillus salivarius strains | |
RU2511044C2 (ru) | ПОЛИСАХАРИД ИЗ ШТАММА Bifidobacterium infantis И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ИЛИ ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ РАССТРОЙСТВ. | |
US20030113306A1 (en) | Probiotic lactobacillus casei strains | |
AU2002329007A1 (en) | "Probiotic Lactobacillus salivarius strains" | |
US11883446B2 (en) | Probiotics for use in the prevention or treatment of illness and/or symptoms associated with coronaviruses | |
US20230106819A1 (en) | Bifidobacterium longum | |
KR102462392B1 (ko) | 락토바실러스 플란타럼 q1 균주를 함유하는 점막 면역 증진용 조성물 | |
Dimitrov et al. | Selected lactic acid bacteria strains reduce the expression of interleukin-8 in epithelial cells. | |
IE20020624A1 (en) | Probiotic Lactobacillus casei strains |