RU2728776C1 - Стабильная жидкая композиция, содержащая ботулинический токсин - Google Patents

Стабильная жидкая композиция, содержащая ботулинический токсин Download PDF

Info

Publication number
RU2728776C1
RU2728776C1 RU2019126073A RU2019126073A RU2728776C1 RU 2728776 C1 RU2728776 C1 RU 2728776C1 RU 2019126073 A RU2019126073 A RU 2019126073A RU 2019126073 A RU2019126073 A RU 2019126073A RU 2728776 C1 RU2728776 C1 RU 2728776C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
botulinum toxin
polysorbate
buffer
alanine
composition
Prior art date
Application number
RU2019126073A
Other languages
English (en)
Inventor
Хёна ЙИМ
Чхён-Сей КИМ
Original Assignee
Тэун Ко., Лтд.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Тэун Ко., Лтд. filed Critical Тэун Ко., Лтд.
Application granted granted Critical
Publication of RU2728776C1 publication Critical patent/RU2728776C1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08—Solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
    • A61K38/46—Hydrolases (3)
    • A61K38/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • A61K38/4886—Metalloendopeptidases (3.4.24), e.g. collagenase
    • A61K38/4893—Botulinum neurotoxin (3.4.24.69)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/12—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
    • A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
    • A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
    • A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A61K47/38—Cellulose; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medical Preparation Storing Or Oral Administration Devices (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Группа изобретений относится к области медицины и фармацевтики. Первый объект представляет собой стабильную жидкую композицию, содержащую (1) ботулинический токсин, (2) L-аланин или метилцеллюлозу, (3) неионное поверхностно-активное вещество, представляющее собой полисорбат 20 или полисорбат 80, и (4) буфер, а также дополнительно содержащую изотонический агент. Второй объект представляет собой способ стабилизации ботулинического токсина с использованием жидкой композиции. Технический результат заключается в стабильности разработанной жидкой композиции ботулинического токсина. 2 н. и 7 з.п. ф-лы, 7 табл., 6 пр.

Description

Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к стабильной жидкой композиции, содержащей ботулинический токсин в качестве активного ингредиента, которая готова к применению без необходимости процесса восстановления, и, в частности, к жидкой композиции, способной предотвращать агрегацию ботулинического токсина, даже когда ботулинический токсин содержится в низкой концентрации, что дает исключительную стабильность при хранении, и эффективно предотвращает адсорбцию и т. д., относится к контейнеру, относится к постоянной поддержке активности ботулинического токсина в каждой партии или в каждом наливном флаконе.
В частности, настоящее изобретение относится к жидкой композиции, содержащей (i) ботулинический токсин в качестве активного ингредиента, (ii) L-аланин или метилцеллюлозу, (iii) неионное поверхностно-активное вещество и (iv) буфер и, необязательно, изотонический агент.
Кроме того, настоящее изобретение относится к способу стабилизации ботулинического токсина с использованием жидкой композиции, причем жидкая композиция содержит (i) ботулинический токсин, (ii) L-аланин или метилцеллюлозу, (iii) неионное поверхностно-активное вещество и (iv) буфер и, необязательно, изотонический агент.
Предшествующий уровень техники
Множество штаммов Clostridium sp., которые выделяют нейротоксические токсины, было обнаружено начиная с 1890-х годов, и описание характеристик токсинов, которые секретируются этими бактериями, было проведено в течение последних 70 лет (Schant, E. J. et al., Microbiol. Rev., 56:80, 1992).
Обладающий нейротоксичностью токсин, полученный из штаммов рода Clostridium, то есть ботулинический токсин, классифицируется на 7 типов от типов A до G в соответствии с его серологическими характеристиками. Каждый из токсинов имеет белок токсина размером около 150 кДа, и в природе содержит комплекс нескольких нетоксичных белков, связанных с ним. Средний комплекс (300 кДа) состоит из белка токсина и нетоксичного белка негемагглютинина, а большой комплекс (450 кДа) и очень большой комплекс (900 кДа) состоит из средних размеров комплексов, связанных с гемагглютинином (Sugiyama H., Microbiol. Rev., 44:419, 1980). Такие нетоксичные гемагглютининовые белки, как известно, действуют, выполняя роль защиты токсина от низкого рН и различных протеаз в кишечнике.
В частности, было обнаружено, что, когда ботулинический токсин типа А вводят локально в дозировке, которая не оказывает системного воздействия на организм человека, то возможно парализовать мышцы, локализованные в участках местного введения, при этом данная особенность широко используется для удаления морщин, для терапевтических применений при ригидности при гемиплегии и церебральном параличе и т.д., и, следовательно, спрос быстро растет.
Между тем, готовая к употреблению форма жидкой композиции, содержащая ботулинический токсин в качестве активного ингредиента без проведения процесса восстановления, является предпочтительной с точки зрения удобства пользователя, но ботулинический токсин имеет недостаток, который заключается в том, что стабильность ботулинического токсина значительно снижается в жидкой форме и, таким образом, для того, чтобы повысить стабильность белка, обычные коммерческие препараты ботулинического токсина готовят в лиофилизированной форме или в форме сухого порошка, который сушат в вакууме.
Однако составы сухого порошка, полученные лиофилизацией и т.п., имеют проблемы, которые заключаются в том, что, поскольку во время использования требуется выполнять процесс восстановления, это неудобно при использовании, и отклонение количества вводимого ботулинического токсина, в частности, отклонение по активности и т.п. имеют место из-за ошибок процесса разбавления в процессе восстановления и т.п. Таким образом, существует растущая потребность в жидкой композиции, способной повысить удобство пользователя и минимизировать ошибки в процессе восстановления.
В частности, поскольку ботулинический токсин является высокотоксичным, для терапевтических или косметических целей следует вводить следовое количество, и, таким образом, предпочтительной является жидкая композиция ботулинического токсина в более низкой концентрации, чем жидкая композиция ботулинического токсина высокой концентрации.
Однако известно, что когда ботулинический токсин присутствует в низкой концентрации, он имеет тенденцию агрегировать друг с другом и адсорбироваться в контейнере, и, таким образом, искомая и достаточная активность ботулинического токсина не проявляется или наоборот активность токсина становится выше и т.д., то есть отклонение активности ботулинического токсина происходит в каждой партии или в каждом наливном флаконе, что вызывает неожиданные побочные эффекты и т.п., и, следовательно, нелегко приготовить стабилизированную жидкую композицию, имеющую низкую концентрацию ботулинического токсина.
В этом аспекте существует острая потребность в новой форме жидкой композиции, способной улучшить удобство при использовании пользователем, эффективно предотвращающей агрегацию ботулинического токсина даже при низкой концентрации ботулинического токсина, эффективно предотвращающей адсорбцию ботулинического токсина контейнером, для постоянной поддержки активности ботулинического токсина в каждой партии или в каждом наливном флаконе.
Описание изобретения
Техническая проблема
Задачей настоящего изобретения является создание новой формы жидкой композиции, способной эффективно предотвращать агрегацию ботулинического токсина даже при низкой концентрации ботулинического токсина, эффективно предотвращать адсорбцию ботулинического токсина в контейнере, для постоянной поддержки активности ботулинического токсина в каждой партии или в каждом наливном флаконе.
Техническое решение
Для достижения вышеуказанных целей настоящее изобретение обеспечивает стабильную жидкую композицию ботулинического токсина, содержащую (i) ботулинический токсин в качестве активного ингредиента, (ii) L-аланин или метилцеллюлозу, (iii) неионное поверхностно-активное вещество и (iv) буфер и, необязательно, изотонический агент.
Кроме того, настоящее изобретение относится к способу стабилизации ботулинического токсина с использованием жидкой композиции, причем жидкая композиция содержит (i) ботулинический токсин, (ii) L-аланин или метилцеллюлозу, (iii) неионное поверхностно-активное вещество и (iv) буфер и, необязательно, изотонический агент.
Лучшее воплощение изобретения
Если не указано иное, все технические и научные термины, используемые в данном документе, имеют те же значения, что и те, которые обычно понимаются специалистами в области техники, к которой относится настоящее изобретение. В целом, номенклатура, используемая в настоящем описании, хорошо известна в технических областях и широко используется.
В частности, настоящее изобретение относится к жидкой композиции, содержащей (i) ботулинический токсин в качестве активного ингредиента, (ii) L-аланин или метилцеллюлозу, (iii) неионное поверхностно-активное вещество и (iv) буфер и, необязательно, изотонический агент.
В настоящем описании термин «ботулинический токсин» используется для охвата как нейротоксинов (NTX), продуцируемых штаммами Clostridium botulinum или их мутантами, так и модифицированных, рекомбинантных, гибридных и химерных ботулинических токсинов.
Рекомбинантный ботулинический токсин может иметь легкую цепь и/или тяжелую цепь, рекомбинантно продуцируемую видами, не являющимися Clostridium. Кроме того, ботулинический токсин по настоящему изобретению охватывает серотипы ботулинического токсина A, B, C, D, E, F и G и охватывает не только комплексы ботулинического токсина (то есть комплексы 300, 600 и 900 кДа), но также чистый ботулинический токсин (то есть, нейротоксичная молекула массой около 150 кДа), которые оба полезны при практическом осуществлении настоящего изобретения.
Предпочтительно ботулинический токсин, содержащийся в жидкой композиции по настоящему изобретению, представляет собой ботулинический токсин типа А.
Жидкая композиция согласно настоящему раскрытию может содержать ботулинический токсин в количестве от около 10 до 200 единиц/мл, или от около 20 до 150 единиц/мл, предпочтительно от около 25 до 100 единиц/мл, или от 25 до 75 единиц/мл, и наиболее предпочтительно от 25 до 50 ед./мл, но содержание ботулинического токсина этим не ограничивается.
Жидкой композиции ботулинического токсина согласно настоящему изобретению придается гидрофобность при использовании L-аланина, которая является разновидностью неполярной аминокислоты, или метилцеллюлозы. L-аланин может повышать растворимость ботулинического токсина за счет гидрофобного или солевого эффекта и может регулировать критическую концентрацию мицелл при использовании в комбинации с неионным поверхностно-активным веществом, в частности, с полисорбатом 20 или полисорбатом 80. Метилцеллюлоза представляет собой полимер, который обладает амфипатическим свойством, аналогичным полисорбату 20 или полисорбату 80, но обладает температурной чувствительностью в другой форме поверхностно-активного вещества, что, как ожидается, будет способствовать термической стабильности.
В жидкой композиции ботулинического токсина согласно настоящему раскрытию содержание L-аланина может составлять от 0,01 до 1% (масс./об.), предпочтительно от 0,05 до 0,5% (масс./об.) и наиболее предпочтительно от 0,075 до 0,3% (масс./об.) в расчете на общее содержание композиции. В примерном воплощении содержание L-аланина может составлять 0,1% (масс./об.) в расчете на общее содержание композиции.
В жидкой композиции ботулинического токсина согласно настоящему раскрытию содержание метилцеллюлозы может составлять от 0,00001 до 0,1% (масс./об.), предпочтительно от 0,0001 до 0,01% (масс./об.) и наиболее предпочтительно от 0,0005 до 0,0015 % (масс./об.) в расчете на общее содержание композиции. В примерном воплощении содержание метилцеллюлозы может составлять 0,00125 или 0,000625% (масс./об.) в расчете на общее содержание композиции.
В жидкой композиции ботулинического токсина по настоящему изобретению неионное поверхностно-активное вещество может представлять собой полисорбат 20 или полисорбат 80, но не ограничивается ими. Предпочтительно можно использовать полисорбат 20. Обнаружено, что неионное поверхностно-активное вещество, в частности, полисорбат 20, при использовании для предотвращения адсорбции ботулинического токсина в контейнере значительно повышает стабильность ботулинического токсина, одновременно улучшая гидрофобность и взаимодействие с поверхностью, и предотвращая адсорбцию в контейнере. Однако когда полисорбат 20 или полисорбат 80 включен в жидкую композицию, ботулинический токсин может быть одновременно стабилизирован, но существует проблема, которая заключается в том, что активность ботулинического токсина может быть выше, чем искомое значение.
Чтобы решить эту проблему, в настоящем раскрытии обнаружено, что при использовании полисорбата 20 или полисорбата 80 в следовом количестве в диапазоне от 0,00001 до 0,1% (масс./об.), предпочтительно от 0,0001 до 0,01% (масс./об.) и наиболее предпочтительно от 0,0005 до 0,0015% (масс./об.) в расчете на общее содержание композиции, проблема, связанная с высокой активностью ботулинического токсина, может быть предотвращена, и адсорбция в контейнере может быть эффективно предотвращена, что позволяет поддерживать активность ботулинического токсина в каждой партии или в каждом наливном флаконе. В примерном воплощении содержание полисорбата 20 составляет 0,001% (масс./об.) в расчете на общее содержание композиции.
Жидкая композиция ботулинического токсина по настоящему изобретению может содержать физиологически совместимый буфер для поддержания рН ниже изоэлектрической точки, тем самым обеспечивая долгосрочную стабильность. Требуется, чтобы физиологически совместимый буфер был способен поддерживать рН в диапазоне от 4,5 до 6,5, предпочтительно в диапазоне от 5,0 до 6,0 и наиболее предпочтительно около 5,5. В качестве физиологически подходящего буфера могут быть использованы цитрат натрия, янтарная кислота, фосфорная кислота, монофосфат калия, ацетат натрия, хлорид натрия и т.д. Предпочтительно в качестве буфера в жидкой композиции согласно настоящему раскрытию может быть использован цитрат натрия. Натрий-цитратный буфер способен контролировать изменение рН, что оказывает серьезное влияние на стабильность во время длительного хранения белковых лекарств, но может уменьшать их содержание и активность (эффективность) при использовании в сочетании со специфическими наполнителями, и, таким образом, использование натрий-цитратного буфера должно быть определено путем проведения теста на совместимость.
Физиологически совместимый буфер в жидкой композиции ботулинического токсина по настоящему изобретению может иметь содержание от 5 до 35 мМ, предпочтительно от 10 до 30 мМ и наиболее предпочтительно от 15 до 25 мМ в расчете на общее содержание композиции. В типичном воплощении цитрат натрия при рН 5,5 содержится в качестве физиологически совместимого буфера с содержанием 20 мМ в расчете на общее содержание композиции. Было обнаружено, что комбинация L-аланина и натрий-цитратного буфера значительно повышает стабильность ботулинического токсина типа А.
Кроме того, жидкая композиция ботулинического токсина по настоящему изобретению может дополнительно содержать изотонический агент. Примеры изотонического агента включают хлорид натрия, глицерин, маннит, сахарозу, хлорид калия, декстрозу и т.д. Содержание изотонического агента может составлять от 0,7 до 0,95% (масс./об.) в расчете на общее содержание композиции. Предпочтительно жидкая композиция ботулинического токсина по настоящему изобретению содержит от 0,7 до 0,95% (масс./об.) и наиболее предпочтительно 0,9% (масс./об.) хлорида натрия в качестве изотонического агента.
В примерном воплощении жидкая композиция ботулинического токсина по настоящему изобретению может содержать от 0,01 до 1% (масс./об.) аланина, от 0,00001 до 0,1% (масс./об.) полисорбата 20 или полисорбата 80, от 5 до 35 мМ цитрата натрия и от 0,7 до 0,95% (масс./об.) изотонического агента в расчете на общее содержание композиции.
В другом типичном воплощении жидкая инъекция ботулинического токсина типа А по настоящему изобретению может содержать от 0,00001 до 0,1% (масс./об.) метилцеллюлозы, от 0,00001 до 0,1% (масс./об.) полисорбата 20 или полисорбата 80, от 5 до 35 мМ натрия цитрат и от 0,7 до 0,95% (масс./об.) изотонического агента в расчете на общее содержание композиции.
Жидкую композицию ботулинического токсина по настоящему изобретению можно вводить обычными путями введения. В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения жидкую композицию ботулинического токсина вводят путем внутримышечной инъекции или подкожной инъекции, которая представляет собой способ местного введения, объекту, нуждающемуся в этом. Поскольку жидкая композиция ботулинического токсина по настоящему изобретению находится в жидком состоянии, ее можно вводить непосредственно без выполнения стадии восстановления при использовании. Кроме того, ботулинический токсин, включенный в жидкую композицию ботулинического токсина согласно настоящему раскрытию, может сохранять стабильность в течение около 12 недель при комнатной температуре или до 5 недель в стрессовых условиях.
Стабилизированная жидкая композиция ботулинического токсина по настоящему изобретению применима для лечения нервно-мышечных нарушений, характеризующихся гиперактивной скелетной мышцей. Кроме того, жидкая композиция ботулинического токсина по настоящему изобретению может быть использована для различных целей, таких как лечение заболеваний и совершенствование красоты и т.д., для лечения головной боли, мигрени, головной боли от напряжения, синусовой головной боли, головной боли в шейном отделе, нарушения потоотделения, аксиллярного гипергидроза, гипергидроза рук, гипергидроза стоп, синдрома Фрея, гиперкинетических кожных морщин, мимических морщин, межбровных морщин, морщин вокруг глаз, морщин возле рта, носогубной складки, кожных заболеваний, ахалазии, страбизма, хронической анальной трещины, судорог век, мышечно-скелетной боли, фибромиалгии, панкреатита, тахикардии, гипертрофии простаты, простатита, задержки мочи, недержания мочи, раздраженного мочевого пузыря, конвульсии половины лица, тремора, мышечных спазмов, желудочно-кишечных расстройств, диабета, сиализма, кооперативного расстройства детрузора-сфинктера, постинсультной ригидности, восстановления ран, детского церебрального паралича, спазма гладких мышц, рестеноза, местной дистонии, эпилепсии, шейной дистонии, нарушения щитовидной железы, гиперкальциемии, обсессивного расстройства, боли при артрите, синдрома Рейно, растяжки, перитонеальной адгезии, спазма сосудов, насморка, мышечной контрактуры, ларингеальной дистонии, почечного спазма и синдрома запястного канала и т.д.
Кроме того, настоящее изобретение относится к способу стабилизации ботулинического токсина с использованием жидкой композиции, причем жидкая композиция содержит (i) ботулинический токсин, (ii) L-аланин или метилцеллюлозу, (iii) неионное поверхностно-активное вещество и (iv) буфер и, необязательно, изотонический агент.
В примерном воплощении настоящее изобретение относится к способу стабилизации препарата ботулинического токсина, включающему формирование жидкой композиции путем объединения (i) ботулинического токсина с (ii) L-аланином, (iii) полисорбатом 20 или полисорбатом 80, (iv) цитратом натрия и, необязательно, хлоридом натрия, который является изотоническим агентом, где содержание аланина составляет от 0,01 до 1% (масс./об.), содержание полисорбата 20 или полисорбата 80 составляет от 0,00001 до 0,1% (масс./об.) цитрат натрия имеет концентрацию от 5 до 35 мМ, а хлорид натрия, который является изотоническим агентом, имеет содержание от 0,7 до 0,95% (масс./об.) в расчете на общее содержание жидкой композиции.
В другом типичном воплощении настоящее изобретение относится к способу стабилизации препарата ботулинического токсина, включающему формирование жидкой композиции путем смешивания (i) ботулинического токсина с (ii) метилцеллюлозой, (iii) полисорбатом 20 или полисорбатом 80, (iv) цитратом натрия и, необязательно, хлоридом натрия, который является изотоническим агентом, где содержание метилцеллюлозы составляет от 0,00001 до 0,1 (масс./об.), содержание полисорбата 20 или полисорбата 80 составляет от 0,00001 до 0,1% (масс./об.), цитрат натрия имеет концентрацию от 5 до 35 мМ, а хлорид натрия, который является изотоническим агентом, имеет содержание от 0,7 до 0,95% (масс./об.) в расчете на всю жидкую композицию.
Поскольку состав ботулинического токсина, стабилизированный способом по настоящему изобретению, можно использовать как инъекцию, так же как и в виде жидкого препарата, отдельный процесс восстановления не является необходимым перед использованием, и, таким образом, препарат ботулинического токсина может быть удобно использован и может храниться в стабильном состоянии около 6 месяцев и более.
Примеры
Далее настоящее изобретение будет описано более подробно со ссылкой на следующие примеры. Однако следующие примеры предназначены только для иллюстрации настоящего изобретения, и специалистам в данной области техники будет очевидно, что объем настоящего изобретения не должен быть ограничен этими примерами.
Пример 1. Оценка содержания ботулинического токсина по типам и содержанию амфипатического наполнителя
Чтобы найти эксципиент, подходящий для повышения стабильности ботулинического токсина, различные типы амфипатических эксципиентов были добавлены к ботулиническому токсину Clostridium типа A, и затем влияние типов и содержания амфипатических эксципиентов на содержание ботулинического токсина было оценено с помощью теста ELISA с использованием считывателей микропланшетов Versamax BC-138 и BC-378 (Molecular Devices, LLC). В качестве буферов использовали натрий-цитратный буфер (далее называемый «SC-буфер» или «SC-буферный раствор») и хлоридно-натриевый буфер. Если не указано иное, использовали натрий-цитратный буфер, полученный с добавлением 0,9% (масс./об.) хлорида натрия в качестве изотонического агента.
Ботулинический токсин типа А, использованный в тесте, был получен способом, описанным в патенте Кореи № 1,339,349.
Для теста ELISA стандарты ботулинического токсина типа A (Daewoong Pharmaceutical), разведенные до различных концентраций, и жидкую композицию в соответствии с настоящим изобретением распределяли в 96-луночный планшет, покрытый антителом против ботулинического токсина типа A (NIBSC, 59/021), и проводили тест ELISA с использованием способа сэндвич-ELISA.
Соответствующие стандарты и жидкая композиция подвергались реакциям с первичными и вторичными антителами с последующей реакцией с субстратом. Затем активность жидкой композиции в соответствии со стандартной кривой измеряли путем измерения поглощения при длине волны от 450 до 540 нм. Здесь и далее в настоящем раскрытии другие способы ELISA также были испытаны тем же способом, и было рассчитано содержание.
Результаты теста выражали в процентах по сравнению с контрольной группой (0,02% человеческого сывороточного альбумина, 0,9% хлорида натрия), добавленной при той же концентрации исходного вещества (2 нг/мл), что и каждая другая композиция. К каждой композиции, показанной в таблице 1, добавляли эксципиент для приготовления 1 л жидкости-эксципиента, а затем добавляли ботулинический токсин в концентрации 40 ед/мл, и подтверждали пониженное содержание по сравнению с 40 ед/мл.
Таблица 1. Влияние типов и содержания амфипатических наполнителей на содержание ботулинического токсина
№ партии Амфипатические эксципиенты Содержание (масс./
об.%)		 Содержание (масс./об.%) Буфер Отношение концентраций
1 PEG 400 5 5 0,9% NaCl 2%
2 PEG 400 5 5 SC-буфер (рН 5,5) 11%
3 PEG 400 0,5 0,5 0,9% NaCl 7%
4 PEG 400 0,5 0,5 SC-буфер (рН 5,5) 9%
5 PEG 400 0,05 0,05 0,9% NaCl 3%
6 PEG 400 0,05 0,05 SC-буфер (рН 5,5) 8%
7 Метилцеллюлоза 0,05 0,05 0,9% NaCl 117%
8 Метилцеллюлоза 0,05 0,05 SC-буфер (рН 5,5) 99%
9 Метилцеллюлоза 0,01 0,01 0,9% NaCl 104%
10 Метилцеллюлоза 0,01 0,01 SC-буфер (рН 5,5) 103%
11 Метилцеллюлоза 0,002 0,002 0,9% NaCl 81%
12 Метилцеллюлоза 0,002 0,002 SC-буфер (рН 5,5) 96%
13 sod. CMC 0,1 0,1 0,9% NaCl 10%
14 sod. CMC 0,1 0,1 SC-буфер (рН 5,5) 24%
15 sod. CMC 0,02 0,02 0,9% NaCl 12%
16 sod. CMC 0,02 0,02 SC-буфер (рН 5,5) 18%
17 sod. CMC 0,04 0,004 0,9% NaCl 15%
18 sod. CMC 0,004 0,004 SC-буфер (рН 5,5) 17%
19 PVPK 17 1 1 0,9% NaCl 46%
20 PVPK 17 1 1 SC-буфер (рН 5,5) 84%
21 PVPK 17 0,2 0,2 0,9% NaCl 15%
22 PVPK 17 0,2 0,2 SC-буфер (рН 5,5) 74%
23 PVPK 17 0,04 0,04 0,9% NaCl 66%
24 PVPK 17 0,04 0,04 SC-буфер (рН 5,5) 74%
25 Полисорбат 20 0,05 0,05 0,9% NaCl 99%
26 Полисорбат 20 0,05 0,05 SC-буфер (рН 5,5) 93%
27 Полисорбат 20 0,01 0,01 0,9% NaCl 93%
28 Полисорбат 20 0,01 0,01 SC-буфер (рН 5,5) 96%
29 Полисорбат 20 0,002 0,002 0,9% NaCl 91%
30 Полисорбат 20 0,002 0,002 SC-буфер (рН 5,5) 101%
Как показано в таблице 1, было подтверждено, что при добавлении метилцеллюлозы или полисорбата 20 активность ботулинического токсина типа А сохраняется высокой. Напротив, при добавлении PEG 400, натрий карбоксиметилцеллюлозы (Sod. CMC) или повидона К17 (PVPK17), активность ботулинического токсина типа А была снижена. Соответственно, в настоящем описании метилцеллюлоза или полисорбат 20 использовались в качестве амфипатического эксципиента для стабилизации ботулинического токсина. Кроме того, можно подтвердить, что, когда буфер, в частности, натрий-цитратный буфер или натрий-хлоридный буфер, использовались вместе, свойство, которое служит для сохранения активности ботулинического токсина типа А, то есть свойство стабильности, было другим.
Пример 2. Другой эксципиент, который можно использовать в комбинации с полисорбатом 20
Была подтверждена максимальная доступная концентрация полисорбата 20, и было оценено влияние на содержание ботулинического токсина при использовании в сочетании с другим наполнителем, при этом полисорбат 20 был выбран в качестве основного наполнителя. Полисорбат 20 был выбран в качестве основного наполнителя в соответствии с результатами примера 1, и был проведен скрининг каждого наполнителя с использованием способа ELISA.
В качестве стабилизаторов, которые, как ожидается, будут функционировать вместе с выбранным полисорбатом 20, были добавлены L-пролин и L-аланин в качестве вспомогательных веществ-кандидатов с учетом физических свойств, таких как гидрофобность, величина pKa, pKb и изоэлектрическая точка аминокислоты и т.д. Поскольку для поддержания структурной стабильности белка требуется дополнительный стабилизатор, а также полисорбат 20, две аминокислоты, L-пролин и L-аланин, были выбраны с учетом pKa 6,0 ботулинического токсина А.
Тест на эффективность в животных проводили путем введения стандартных растворов, в которых ботулинический токсин типа A в форме сухого порошка разводили до различных концентраций и жидкую композицию в соответствии с настоящим изобретением вводили в брюшную полость 10 ICR-мышей (4 недели, масса тела: от 18 до 22 г) (0,1 мл/мышь), соответственно, и количество погибших животных и количество выживших животных подтверждали в течение 3 дней, а затем рассчитывали активность с использованием статистической программы (программа StatPlus® 2009) (релиз 5.9.8, AnalystSoft)). В дальнейшем, другие тесты на активность животных и расчет активности в настоящем раскрытии также выполнялись тем же способом.
Таблица. 2. Результаты комбинированного применения полисорбата 20 с аминокислотами
№ партии Наполнитель 1 Содержание (масс./об.) Наполнитель 2 Содержание (масс./об.%) Буфер ELISA Тест активности на животных
NBT-25I-L169 L-аланин (25 мМ) 0,223 Полисорбат 20 0,5 N/A 117% 143,8%
NBT-25I-L163 L-аланин (25 мМ) 0,223 Полисорбат 20 1 N/A 79% N/A
NBT-25I-L164 L-аланин (25 мМ) 0,223 Полисорбат 20!!!!! 2 N/A 48% N/A
NBT-25I-L 165 L-пролин (25 мМ) 0,29 Полисорбат 80 0.5 N/A 86% N/A
NBT-25I-L166 L-пролин (25 мМ) 0,29 Полисорбат 80 1 N/A 65% N/A
NBT-25I-L167 L-пролин (25 мМ) 0,29 Полисорбат 80 2 N/A 35% N/A
N/A; не применимо
Когда количество ботулинического токсина, обработанного в концентрации 40 Ед./мл, было конвертировано в 100% и проанализировано способом ELISA, содержание ботулинического токсина снижалось до 80% или менее, при содержании полисорбата 20 1% или более, что демонстрирует уменьшение содержания. В результате проведения теста на эффективность в животных с использованием тестовой группы NBT-25I-L169, которая является единственной группой, сохраняющей 100% содержание, активность составила 143,8% по сравнению со значением для 100% содержания, и эта активность была высоко оценена. Кроме того, когда полисорбат 20 использовали в комбинации с L-аланином, начальное значение содержания ботулинического токсина типа A было выше в тесте ELISA по сравнению с тем, когда полисорбат 20 использовался в комбинации с L-пролином и, таким образом, полисорбат 20 и L-аланин в настоящем раскрытии были использованы вместе.
Пример 3. Влияние комбинации полисорбата 20 и L-аланина на активность
Чтобы подтвердить влияние полисорбата 20 и L-аланина, которые были выбраны в примере 2, на активность (эффективность) ботулинического токсина, полисорбат 20 и L-аланин использовали вместе для приготовления композиции ботулинического токсина типа A, как описано ниже, и влияние на активность (эффективность) было подтверждено.
Таблица 3. Результаты измерения эффективности комбинации полисорбата 20 и L-аланина
№ партии Наполнитель 1 Содержание
(масс./об.)		 Наполнитель 2 Содержание (масс./об.%) Эффективность на животных (%)
NBTS 50I-T009 Полисорбат 80 0,015 L-аланин 0,01 120,7
NBTS 50I-T010 Полисорбат 80 0,015 L-аланин 0,01 114,3
NBTS 50I-T021 Полисорбат 80 0,1 L-аланин 0,1 201,4
NBTS 50I-T022 Полисорбат 80 0,1 L-аланин 0,1 142
NBTS 50I-T007 Полисорбат 80 0,1 L-аланин 0,2 148,2
NBTS 50I-T008 Полисорбат 80 0,1 L-аланин 0,2 136,8
Таблица 3 показывает, что даже при использовании одинакового содержания полисорбата 20 и L-аланина в одних и тех же экспериментальных условиях, активность (эффективность) ботулинического токсина типа A была различной для каждой партии, и активность в целом имела высокую оценку. В целом, высокая оценка активности ботулинического токсина с полисорбатом 20 имеет место до тех пор, пока концентрация полисорбата 20 не достигнет 0,015%, что указывает на то, что поток значений для каждой произведенной партии не является постоянным и нестабильным. Поскольку считается, что это явление вызвано полисорбатом 20, обладающим амфипатическим свойством, было подтверждено, что необходимо включать полисорбат 20 в жидкую композицию в количестве, способном постоянно поддерживать активность (эффективность) ботулинического токсина.
Пример 4. Оценка активности в зависимости от содержания полисорбата 20
Чтобы исследовать влияние содержания полисорбата 20 на активность ботулинического токсина, проводили скрининг на эффективность в животных жидкой композиции, имеющей представленный ниже состав, путем изменения содержания. Тесты на эффективность в животных в отношении полисорбата 20 в различных концентрациях проводили, как описано ниже, для того, чтобы подтвердить, высокую оценку активность в зависимости от концентрации полисорбата 20. 5 мМ цитрата натрия использовали для компенсации явления, которое заключается в том, что стабильность белка снижается при уменьшении полисорбата 20.
Таблица 4. Результаты измерения эффективности на животных в зависимости от содержания полисорбата 20
№ партии L-аланин (масс./об.%) полисорбат 20 (масс./об.%) Буфер Эффективность на животных
(масс./об.)
NBTS-50-T078 0,1 0,0025 5 мМ SC-буфер, pH 5,5 132,6
NBTS-50-T079 0,1 0,001 5 мМ SC-буфер, pH 5,5 121,1
NBTS-50-T080 0,1 0,00075 5 мМ SC-буфер, pH 5,5 114,4
NBTS-50-T081 0,1 0,0005 5 мМ SC-буфер, pH 5,5 109,5
В тесте оценки активности ботулинического токсина с помощью теста на эффективность в животных в качестве подходящего диапазона приняли диапазон от 80 до 125%. Это явление вызвано изменением в тесте на эффективность в животных, и, таким образом, степень значительно выше по сравнению с обычными методами тестирования. Как показано в таблице 4 выше, было подтверждено, что титр ботулинического токсина составлял 114,4%, который был стабильным, даже при использовании незначительного количества полисорбата 20, например, следового количества 0,00075% (масс./об.).
Пример 5. Оценка титра и стабильности в зависимости от концентрации L-аланина
Чтобы исследовать влияние содержания L-аланина на эффективность ботулинического токсина, скрининг эффективности на животных проводили путем изменения содержания L-аланина. Чтобы подтвердить влияние L-аланина на эффективность синергического действия полисорбата 20 и влияние L-аланина на взаимодействие с натрий-цитратным буфером и стабильность, готовили жидкие инъекции, содержащие 5 мМ натрий-цитратный буфер и 0,001% полисорбат 20. L-аланин использовали в концентрациях 0,1%, 0,02% и 0,05%, и сравнивали и оценивали стабильность в стрессовых условиях от 0,1% до 0,02%.
При оценке стабильности в стрессовых условиях стрессовые условия были определены при 40ºС и 75% относительной влажности в соответствии с уведомлением KFDA или при 37ºС для того, чтобы сравнить и оценить аспект снижения эффективности с учетом термостабильности ботулинического токсина типа А и распорядка проведения теста эффективности на животных. Здесь и далее все оценки устойчивости в стрессовых условиях проводились с использованием одного и того же способа.
Таблица 5. Результаты измерения эффективности в животных и стабильности в зависимости от концентрации L-аланина
№ партии L-аланин (масс./об.%) Полисорбат 20 (масс./об.%) Буфер Титр в животных (%) 1 неделя в стрессовых условиях 3 недели в стрессовых условиях
NBTS-50-T084 0,1 0,001 5 мМ SC-буфер, pH 5,5 103,5 103,8 89,4
NBTS-50-T082 0.05 0,001 5 мМ SC-буфер, pH 5,5 104,4 N/A
NBTS-50-T083 0.02 0,001 5 мМ SC-буфер, pH 5,5 110,1 84,7 74,4
Подтвердилось, что чем выше содержание L-аланина, тем выше стабильность в стрессовых условиях, и что синергетическое действие титра полисорбата 20 также частично подавляется. Предполагалось, что L-аланин влияет на критическую концентрацию мицелл полисорбата 20, и было подтверждено, что комбинация с 0,1% L-аланином имела только 14% снижение активности в течение 3 недель в стрессовых условиях. Принимая во внимание вышеуказанные результаты, стабильность была особенно превосходной, когда концентрация L-аланина составляла 0,1%.
Пример 6. Оценка активности и стабильности ботулинического токсина типа А в зависимости от буфера
Буфер жидкой композиции был выбран с учетом изоэлектрической точки ботулинического токсина типа А. Натрий-цитратный буфер и хлорид натрия, которые имеют буферную емкость ниже рН 6,0, изоэлектрической точки ботулинического токсина, и которые наиболее широко используются в продуктах для введения в мышцу, что подтверждает безопасность, были определены в качестве основного буфера состава. Во всех настоящих экспериментах натрий-цитратный буфер готовили путем включения 0,9% (масс./об.) хлорида натрия в качестве изотонического агента, если не указано иное.
Состав ботулинического токсина типа A был приготовлен путем объединения (i) L-аланина или метилцеллюлозы и (ii) полисорбата 20 с любым одним из (iii) двух буферов, натрий-цитратным буфером (pH 5,5) и 0,9% (масс./об.) хлоридом натрия. Типы и концентрации эксципиентов, добавляемых к ботулиническому токсину Clostridium типа A, приведены в таблице 6 ниже.
После того, как буфер был приготовлен, добавляли L-аланин, метилцеллюлозу и полисорбат 20, в соответствии с каждой из концентраций, получая, таким образом, раствор эксципиента. Затем добавляли ботулинический токсин до концентрации 40 ед/мл.
Таблица 6. Результаты измерения стабильности ботулинического токсина типа А в зависимости от типа буфера
№ партии L-аланин (масс./
об.%)		 Метилцел-люлоза (масс./об.%) Полисор-бат 20
(масс./
об.)		 буфер Титр в живот-ных (%) 1 неделя в стрессовых условиях 2 недели в стрессовых условиях
NBTS-50-T068 0,1 0,001 0.9% NaCl 116 96 72,8
NBTS-50-T070 0,00125 0,001 0.9% NaCl 93,1 56,5 N/A
NBTS-50-T076 0,1 0,001 5 мМ SC-буфер (рН 5,5), 0,9% NaCl 111,9 92,9 73
NBTS-50-T077 0,00125 0,001 5 мМ SC-буфер (рН 5,5), 0,9% NaCl 128,6 86,7 86,7
Согласно экспериментальным результатам, показанным в таблице 6, при использовании буфера с хлоридом натрия 0,9% (масс./об.) комбинация метилцеллюлозы и полисорбата 20 показала очень низкую стабильность в стрессовых условиях. С другой стороны, комбинация L-аланина и полисорбата 20 показала снижение активности ниже, чем у комбинации метилцеллюлозы и полисорбата 20 через 1 неделю в стрессовых условиях по сравнению с 0 неделей.
Между тем, когда использовали натриево-цитратный буфер, стабильность комбинации метилцеллюлозы и полисорбата 20 достаточно выросла, и стабильность сохранялась 1 - 2 недели в стрессовых условиях.
То есть можно подтвердить, что при использовании натрий-цитратного буфера сохранение стабильности улучшалось. Это связано с тем, что стабильность ботулинического токсина может поддерживаться на уровне рН 6,0 или менее, и такое явление, как окисление, происходящее в таких окружающих условиях, как стрессовые условия и т.д., может быть смягчено функцией натрий-цитратного буфера.
Таблица 7. Результаты измерения эффективности на животных и стабильности ввиду эффективности на животных (2-й тест) в соответствии с концентрацией натрий-цитратного буфера (pH 5,5)
№ партии L-аланин (%) полисорбат 20 (%) SC-буфер
(рН 5,5), 0,9% NaCl)		 Эффективность на животных (%) 1 неделя в стрессовых условиях 2 недели в стрессовых условиях
NBTS-50-T076 0,1 0.001 5 мМ 111,9 92,9 73
NBTS-50-T084 0,1 0,001 10 мМ 103,5 103,8 82,1
NBTS-50-T085 0,1 0,001 20 мМ 106,6 97,5 89,4
Кроме того, в результатах вторичных испытаний было подтверждено, что 10 мМ или более натрий-цитратный буфер частично способствует поддержанию стабильности в стрессовых условиях. В частности, стабильность была самой высокой, когда использовали 20 мМ натрий-цитратный буфер.
Промышленная применимость
Жидкая композиция ботулинического токсина в соответствии с настоящим изобретением готова к использованию без выполнения процесса восстановления, и, таким образом, можно улучшить удобство для пользователя и уменьшить отклонение активности ботулинического токсина из-за ошибок разбавления в процесс восстановления и т.п. Кроме того, жидкая композиция в соответствии с настоящим изобретением эффективно предотвращает агрегацию ботулинического токсина даже при низкой концентрации ботулинического токсина, что позволяет получить исключительную стабильность при хранении, и эффективно предотвращает адсорбцию ботулинического токсина в контейнере, тем самым постоянно поддерживая активность ботулинического токсина в каждой партии или в каждом наливном флаконе.
Хотя конкретные воплощения настоящего изобретения подробно описаны, специалистам в данной области техники должно быть очевидно, что конкретное описание является просто желательным примерным воплощением и не должны рассматриваться как ограничение объема настоящего изобретения. Следовательно, существенный объем настоящего изобретения определяется прилагаемой формулой изобретения и ее эквивалентом.

Claims (9)

1. Стабильная жидкая композиция ботулинического токсина, содержащая (i) ботулинический токсин, (ii) L-аланин или метилцеллюлозу, (iii) неионное поверхностно-активное вещество и (iv) буфер, где неионогенное поверхностно-активное вещество представляет собой полисорбат 20 или полисорбат 80 и жидкая композиция содержит от 0,00001 до 0,1% (масс./об.) полисорбата 20 или полисорбата 80 в расчете на общее содержание композиции.
2. Стабильная жидкая композиция ботулинического токсина по п. 1, в которой ботулинический токсин представляет собой ботулинический токсин типа А.
3. Стабильная жидкая композиция ботулинического токсина по п. 1, содержащая от 0,01 до 1% (масс./об.) L-аланина в расчете на общее содержание композиции.
4. Стабильная жидкая композиция ботулинического токсина по п. 1, содержащая от 0,00001 до 0,1% (масс./об.) метилцеллюлозы в расчете на общее содержание композиции.
5. Стабильная жидкая композиция ботулинического токсина по п. 1, содержащая от 5 до 35 мМ цитрата натрия в качестве буфера в расчете на общее содержание композиции.
6. Стабильная жидкая композиция ботулинического токсина по п. 1, дополнительно содержащая изотонический агент, где изотонический агент имеет содержание от 0,7 до 0,95% (масс./об.) в расчете на общее содержание композиции.
7. Стабильная жидкая композиция ботулинического токсина по любому из пп. 1-6, которая готова к применению в виде инъекций.
8. Способ стабилизации ботулинического токсина с использованием жидкой композиции, содержащей (i) ботулинический токсин, (ii) L-аланин или метилцеллюлозу, (iii) неионное поверхностно-активное вещество и (iv) буфер, где неионогенное поверхностно-активное вещество представляет собой полисорбат 20 или полисорбат 80 и жидкая композиция содержит от 0,00001 до 0,1% (масс./об.) полисорбата 20 или полисорбата 80 в расчете на общее содержание композиции.
9. Способ по п. 8, в котором жидкая композиция дополнительно содержит изотонический агент.
RU2019126073A 2017-01-20 2017-10-17 Стабильная жидкая композиция, содержащая ботулинический токсин RU2728776C1 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020170009727A KR101744900B1 (ko) 2017-01-20 2017-01-20 보툴리눔 독소를 포함하는 안정한 액상 조성물
KR10-2017-0009727 2017-01-20
PCT/KR2017/011438 WO2018135722A1 (en) 2017-01-20 2017-10-17 Stable liquid composition comprising botulinum toxin

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2728776C1 true RU2728776C1 (ru) 2020-07-31

Family

ID=59221269

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2019126073A RU2728776C1 (ru) 2017-01-20 2017-10-17 Стабильная жидкая композиция, содержащая ботулинический токсин

Country Status (13)

Country Link
US (1) US11185503B2 (ru)
EP (1) EP3570816B1 (ru)
JP (1) JP6877560B2 (ru)
KR (1) KR101744900B1 (ru)
CN (1) CN110312505B (ru)
AU (1) AU2017394571B2 (ru)
BR (1) BR112019014876A2 (ru)
CA (1) CA3049755C (ru)
ES (1) ES2961458T3 (ru)
MX (1) MX2019008416A (ru)
RU (1) RU2728776C1 (ru)
TW (1) TWI653048B (ru)
WO (1) WO2018135722A1 (ru)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP7217700B2 (ja) 2016-09-13 2023-02-03 アラーガン、インコーポレイテッド 安定化非タンパク質クロストリジウム毒素組成物
KR101744900B1 (ko) * 2017-01-20 2017-06-08 주식회사 대웅 보툴리눔 독소를 포함하는 안정한 액상 조성물
KR102259423B1 (ko) * 2018-11-30 2021-06-02 주식회사 휴온스바이오파마 보툴리눔 독소의 안정화 액상 조성물
JP2022521237A (ja) 2019-02-21 2022-04-06 メルツ ファーマ ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング ウント コンパニー コマンディト ゲゼルシャフト アウフ アクティーン 振戦治療のためのボツリヌス神経毒素の新規用途
KR102324855B1 (ko) * 2020-05-20 2021-11-11 오스템임플란트 주식회사 보툴리눔 독소를 포함하는 약제학적 액상 조성물
KR102551301B1 (ko) * 2022-10-28 2023-07-03 주식회사 파마리서치바이오 보툴리눔 독소를 포함하는 안정한 액상 제제
KR20240060314A (ko) * 2022-10-28 2024-05-08 주식회사 파마리서치바이오 보툴리눔 독소를 포함하는 안정한 액상 제제

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5811096A (en) * 1995-05-11 1998-09-22 Sanofi Stable liquid composition containing urate oxidase and lyophilized composition for its preparation
RU2220163C1 (ru) * 2002-04-16 2003-12-27 Закрытое акционерное общество "Полицелл" - дочернее общество ОАО "Полимерсинтез" Композиция на основе метилцеллюлозы и способ ее получения
US20100330123A1 (en) * 2009-06-25 2010-12-30 Revance Therapeutics, Inc. Albumin-free botulinum toxin formulations

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20120238504A1 (en) * 1998-09-11 2012-09-20 Solstice Neurosciences, Llc Stable Formulations of Botulinum Toxin in Hydrogels
TW574036B (en) * 1998-09-11 2004-02-01 Elan Pharm Inc Stable liquid compositions of botulinum toxin
US20040086532A1 (en) * 2002-11-05 2004-05-06 Allergan, Inc., Botulinum toxin formulations for oral administration
GB2416122A (en) * 2004-07-12 2006-01-18 Ipsen Ltd Botulinum neurotoxin composition
US8168206B1 (en) * 2005-10-06 2012-05-01 Allergan, Inc. Animal protein-free pharmaceutical compositions
CN101175478A (zh) * 2005-10-06 2008-05-07 阿勒根公司 非蛋白稳定的梭菌毒素药物组合物
CA2690773C (en) * 2007-07-10 2013-09-17 Medy-Tox, Inc. Pharmaceutical liquid composition of botulinum toxin with improved stability
WO2010090677A1 (en) 2008-12-10 2010-08-12 Allergan, Inc. Clostridial toxin pharmaceutical compositions
EP2248518B1 (en) 2009-04-17 2013-01-16 Merz Pharma GmbH & Co. KGaA Formulation for stabilizing proteins, peptides or mixtures thereof.
ES2810098T3 (es) 2011-03-31 2021-03-08 Medy Tox Inc Preparación liofilizada de toxina botulínica
KR101135486B1 (ko) * 2011-05-25 2012-04-13 함종욱 보툴리눔 에이형 독소의 액상제품
JP2015525748A (ja) 2012-06-25 2015-09-07 エマージェント プロダクト デベロップメント ゲイザーズバーグ インコーポレイテッド 温度に安定なワクチン製剤
KR101339349B1 (ko) 2013-08-02 2013-12-09 주식회사 대웅 보툴리눔 독소의 제조방법
US9480731B2 (en) * 2013-12-12 2016-11-01 Medy-Tox, Inc. Long lasting effect of new botulinum toxin formulations
WO2017179775A1 (en) 2016-04-12 2017-10-19 Hugel Inc. Microstructure formulation techniques for botulinum toxin
KR101744900B1 (ko) * 2017-01-20 2017-06-08 주식회사 대웅 보툴리눔 독소를 포함하는 안정한 액상 조성물

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5811096A (en) * 1995-05-11 1998-09-22 Sanofi Stable liquid composition containing urate oxidase and lyophilized composition for its preparation
RU2220163C1 (ru) * 2002-04-16 2003-12-27 Закрытое акционерное общество "Полицелл" - дочернее общество ОАО "Полимерсинтез" Композиция на основе метилцеллюлозы и способ ее получения
US20100330123A1 (en) * 2009-06-25 2010-12-30 Revance Therapeutics, Inc. Albumin-free botulinum toxin formulations

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
PICKETT A. Botulinum toxin as a clinical product: manufacture and pharmacology // Clinical Applications of Botulinum Neurotoxin, Springer, New York, NY, 2014, p. 7-49. *

Also Published As

Publication number Publication date
KR101744900B1 (ko) 2017-06-08
JP6877560B2 (ja) 2021-05-26
TW201827073A (zh) 2018-08-01
EP3570816C0 (en) 2023-08-16
TWI653048B (zh) 2019-03-11
WO2018135722A1 (en) 2018-07-26
EP3570816A4 (en) 2020-10-21
EP3570816A1 (en) 2019-11-27
CA3049755C (en) 2021-12-21
US11185503B2 (en) 2021-11-30
CN110312505B (zh) 2022-03-15
CN110312505A (zh) 2019-10-08
ES2961458T3 (es) 2024-03-12
JP2020505382A (ja) 2020-02-20
CA3049755A1 (en) 2018-07-26
US20200121599A1 (en) 2020-04-23
EP3570816B1 (en) 2023-08-16
AU2017394571B2 (en) 2019-12-19
MX2019008416A (es) 2019-09-13
BR112019014876A2 (pt) 2020-05-19
AU2017394571A1 (en) 2019-07-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2728776C1 (ru) Стабильная жидкая композиция, содержащая ботулинический токсин
US9173944B2 (en) Formulation suitable for stabilizing proteins, which is free of mammalian excipients
US9198856B2 (en) Formulation for stabilizing proteins, which is free of mammalian excipient
JP5690785B2 (ja) 改良されたボツリヌス毒素組成物
JP6043627B2 (ja) アルブミン非含有ボツリヌス毒素製剤
ES2846350T3 (es) Formulación líquida de neurotoxina estabilizada con triptófano o tirosina
CN103006540B (zh) 含有因子viii的稳定药物组合物
KR102324855B1 (ko) 보툴리눔 독소를 포함하는 약제학적 액상 조성물
EP3156071A1 (en) Stable aqueous adalimumab preparation
KR20230020961A (ko) 안면 주름의 고용량 및 저용적 보툴리눔 독소 치료
EP4289418A1 (en) Botulinum toxin freeze-dried dosage form composition storable for long time
KR20240032688A (ko) 내성 발현이 감소된 보툴리눔 독소 제제 및 이와 관련된 방법