RU2727156C2 - Система доставки на основе бортезомиба - Google Patents
Система доставки на основе бортезомиба Download PDFInfo
- Publication number
- RU2727156C2 RU2727156C2 RU2017135265A RU2017135265A RU2727156C2 RU 2727156 C2 RU2727156 C2 RU 2727156C2 RU 2017135265 A RU2017135265 A RU 2017135265A RU 2017135265 A RU2017135265 A RU 2017135265A RU 2727156 C2 RU2727156 C2 RU 2727156C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- bortezomib
- derivative
- delivery
- drug
- cells
- Prior art date
Links
- GXJABQQUPOEUTA-RDJZCZTQSA-N bortezomib Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)B(O)O)NC(=O)C=1N=CC=NC=1)C1=CC=CC=C1 GXJABQQUPOEUTA-RDJZCZTQSA-N 0.000 title claims abstract description 130
- 229960001467 bortezomib Drugs 0.000 title claims abstract description 115
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 claims abstract description 21
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 17
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims abstract description 16
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 7
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 113
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 claims description 56
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 claims description 20
- 239000003446 ligand Substances 0.000 claims description 19
- -1 antibodies Natural products 0.000 claims description 18
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims description 14
- BPSIOYPQMFLKFR-UHFFFAOYSA-N trimethoxy-[3-(oxiran-2-ylmethoxy)propyl]silane Chemical compound CO[Si](OC)(OC)CCCOCC1CO1 BPSIOYPQMFLKFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N N-Pteroyl-L-glutaminsaeure Natural products C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 229960000304 folic acid Drugs 0.000 claims description 10
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 claims description 10
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 claims description 10
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 5
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 claims description 4
- 108010022579 ATP dependent 26S protease Proteins 0.000 claims description 4
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 4
- OXYZDRAJMHGSMW-UHFFFAOYSA-N 3-chloropropyl(trimethoxy)silane Chemical compound CO[Si](OC)(OC)CCCCl OXYZDRAJMHGSMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000003550 marker Substances 0.000 claims description 3
- NHBRUUFBSBSTHM-UHFFFAOYSA-N n'-[2-(3-trimethoxysilylpropylamino)ethyl]ethane-1,2-diamine Chemical compound CO[Si](OC)(OC)CCCNCCNCCN NHBRUUFBSBSTHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- LFRDHGNFBLIJIY-UHFFFAOYSA-N trimethoxy(prop-2-enyl)silane Chemical compound CO[Si](OC)(OC)CC=C LFRDHGNFBLIJIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- SJECZPVISLOESU-UHFFFAOYSA-N 3-trimethoxysilylpropan-1-amine Chemical compound CO[Si](OC)(OC)CCCN SJECZPVISLOESU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- UUEWCQRISZBELL-UHFFFAOYSA-N 3-trimethoxysilylpropane-1-thiol Chemical compound CO[Si](OC)(OC)CCCS UUEWCQRISZBELL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- XODFSNXVWMJCOU-UHFFFAOYSA-N 3-trimethoxysilylpropyl thiocyanate Chemical compound CO[Si](OC)(OC)CCCSC#N XODFSNXVWMJCOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 claims description 2
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000011616 biotin Substances 0.000 claims description 2
- FPOSCXQHGOVVPD-UHFFFAOYSA-N chloromethyl(trimethoxy)silane Chemical compound CO[Si](CCl)(OC)OC FPOSCXQHGOVVPD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 claims description 2
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 claims description 2
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 claims description 2
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 claims description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 2
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- PHQOGHDTIVQXHL-UHFFFAOYSA-N n'-(3-trimethoxysilylpropyl)ethane-1,2-diamine Chemical compound CO[Si](OC)(OC)CCCNCCN PHQOGHDTIVQXHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 37
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 abstract description 15
- 238000012546 transfer Methods 0.000 abstract description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 abstract 1
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 40
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 30
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 29
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 24
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 22
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 22
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 235000012239 silicon dioxide Nutrition 0.000 description 20
- 239000000047 product Substances 0.000 description 18
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 17
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 16
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 15
- 238000000034 method Methods 0.000 description 15
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 15
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 14
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 14
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 12
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 11
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 11
- 239000000463 material Substances 0.000 description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 11
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 10
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 10
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 10
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 10
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 10
- HXITXNWTGFUOAU-UHFFFAOYSA-N phenylboronic acid Chemical compound OB(O)C1=CC=CC=C1 HXITXNWTGFUOAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 9
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 9
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 8
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 8
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 description 7
- ZADPBFCGQRWHPN-UHFFFAOYSA-N boronic acid Chemical compound OBO ZADPBFCGQRWHPN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 7
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 7
- 238000007306 functionalization reaction Methods 0.000 description 7
- 239000013335 mesoporous material Substances 0.000 description 7
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 7
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 7
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 229910052796 boron Inorganic materials 0.000 description 6
- 150000002009 diols Chemical class 0.000 description 6
- 210000001163 endosome Anatomy 0.000 description 6
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 6
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 6
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- UVMWVBMFEDQYRW-UHFFFAOYSA-N 3-methylbutylboronic acid Chemical compound CC(C)CCB(O)O UVMWVBMFEDQYRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000004593 Epoxy Substances 0.000 description 5
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000004566 IR spectroscopy Methods 0.000 description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 5
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 5
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 5
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 5
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 5
- 238000003760 magnetic stirring Methods 0.000 description 5
- 208000033808 peripheral neuropathy Diseases 0.000 description 5
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 5
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N Boron Chemical group [B] ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 4
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 4
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 4
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 4
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 4
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 4
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 4
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 4
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 4
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- SZUVGFMDDVSKSI-WIFOCOSTSA-N (1s,2s,3s,5r)-1-(carboxymethyl)-3,5-bis[(4-phenoxyphenyl)methyl-propylcarbamoyl]cyclopentane-1,2-dicarboxylic acid Chemical compound O=C([C@@H]1[C@@H]([C@](CC(O)=O)([C@H](C(=O)N(CCC)CC=2C=CC(OC=3C=CC=CC=3)=CC=2)C1)C(O)=O)C(O)=O)N(CCC)CC(C=C1)=CC=C1OC1=CC=CC=C1 SZUVGFMDDVSKSI-WIFOCOSTSA-N 0.000 description 3
- WYTZZXDRDKSJID-UHFFFAOYSA-N (3-aminopropyl)triethoxysilane Chemical compound CCO[Si](OCC)(OCC)CCCN WYTZZXDRDKSJID-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LXWLHXNRALVRSL-UHFFFAOYSA-N 3-(oxiran-2-ylmethoxy)propylsilane Chemical compound [SiH3]CCCOCC1CO1 LXWLHXNRALVRSL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 3
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 3
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 3
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 3
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 3
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 3
- 125000005620 boronic acid group Chemical group 0.000 description 3
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 3
- 201000008275 breast carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 229940126543 compound 14 Drugs 0.000 description 3
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 3
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 229910052809 inorganic oxide Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 3
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 3
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 3
- 210000003712 lysosome Anatomy 0.000 description 3
- 230000001868 lysosomic effect Effects 0.000 description 3
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 3
- 239000002539 nanocarrier Substances 0.000 description 3
- 239000013110 organic ligand Substances 0.000 description 3
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 3
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910021426 porous silicon Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 3
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 3
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 3
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- ZBSMRLIJXRWTAM-UHFFFAOYSA-N B1CCNN1 Chemical compound B1CCNN1 ZBSMRLIJXRWTAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 2
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- 208000025205 Mantle-Cell Lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 description 2
- BOTDANWDWHJENH-UHFFFAOYSA-N Tetraethyl orthosilicate Chemical compound CCO[Si](OCC)(OCC)OCC BOTDANWDWHJENH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003929 acidic solution Substances 0.000 description 2
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 2
- 150000001638 boron Chemical class 0.000 description 2
- 238000001460 carbon-13 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 238000002144 chemical decomposition reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- DIOQZVSQGTUSAI-UHFFFAOYSA-N decane Chemical compound CCCCCCCCCC DIOQZVSQGTUSAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 230000012202 endocytosis Effects 0.000 description 2
- 150000002118 epoxides Chemical class 0.000 description 2
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 2
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 2
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 description 2
- 230000004660 morphological change Effects 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 208000004296 neuralgia Diseases 0.000 description 2
- 208000021722 neuropathic pain Diseases 0.000 description 2
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 2
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 2
- 208000035824 paresthesia Diseases 0.000 description 2
- 210000000578 peripheral nerve Anatomy 0.000 description 2
- 208000027232 peripheral nervous system disease Diseases 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 2
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 2
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 2
- 238000012429 release testing Methods 0.000 description 2
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000010703 silicon Substances 0.000 description 2
- 239000012890 simulated body fluid Substances 0.000 description 2
- URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N sodium aluminosilicate Chemical compound [Na+].[Al+3].[O-][Si]([O-])=O.[O-][Si]([O-])=O URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- 238000004627 transmission electron microscopy Methods 0.000 description 2
- UMFJXASDGBJDEB-UHFFFAOYSA-N triethoxy(prop-2-enyl)silane Chemical compound CCO[Si](CC=C)(OCC)OCC UMFJXASDGBJDEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZISSAWUMDACLOM-UHFFFAOYSA-N triptane Chemical compound CC(C)C(C)(C)C ZISSAWUMDACLOM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000001364 upper extremity Anatomy 0.000 description 2
- HTSGKJQDMSTCGS-UHFFFAOYSA-N 1,4-bis(4-chlorophenyl)-2-(4-methylphenyl)sulfonylbutane-1,4-dione Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1S(=O)(=O)C(C(=O)C=1C=CC(Cl)=CC=1)CC(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 HTSGKJQDMSTCGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VBCBCUVBLVDLCB-UHFFFAOYSA-N 1-amino-3-(3-silylpropoxy)propan-2-ol Chemical compound NCC(COCCC[SiH3])O VBCBCUVBLVDLCB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QPKFVRWIISEVCW-UHFFFAOYSA-N 1-butane boronic acid Chemical compound CCCCB(O)O QPKFVRWIISEVCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XGJSDYRPTUQQHR-UHFFFAOYSA-N 3-(2-aminoethylsilyl)propan-1-amine Chemical compound NCCC[SiH2]CCN XGJSDYRPTUQQHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OTHCIGKQBMKICB-UHFFFAOYSA-N 3-(3-silylpropoxy)propane-1,2-diol Chemical compound OCC(O)COCCC[SiH3] OTHCIGKQBMKICB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KNTKCYKJRSMRMZ-UHFFFAOYSA-N 3-chloropropyl-dimethoxy-methylsilane Chemical compound CO[Si](C)(OC)CCCCl KNTKCYKJRSMRMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HKMVWLQFAYGKSI-UHFFFAOYSA-N 3-triethoxysilylpropyl thiocyanate Chemical compound CCO[Si](OCC)(OCC)CCCSC#N HKMVWLQFAYGKSI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YQHDQYPKFWETPO-UHFFFAOYSA-N 4-[methoxy(dimethyl)silyl]butan-1-amine Chemical compound CO[Si](C)(C)CCCCN YQHDQYPKFWETPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VGIURMCNTDVGJM-UHFFFAOYSA-N 4-triethoxysilylbutanenitrile Chemical compound CCO[Si](OCC)(OCC)CCCC#N VGIURMCNTDVGJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010001197 Adenocarcinoma of the cervix Diseases 0.000 description 1
- 208000034246 Adenocarcinoma of the cervix uteri Diseases 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920003319 Araldite® Polymers 0.000 description 1
- 241000208199 Buxus sempervirens Species 0.000 description 1
- LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M Cetrimonium bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)C LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000610640 Homo sapiens U4/U6 small nuclear ribonucleoprotein Prp3 Proteins 0.000 description 1
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 229920002415 Pluronic P-123 Polymers 0.000 description 1
- 101001110823 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) 60S ribosomal protein L6-A Proteins 0.000 description 1
- 101000712176 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) 60S ribosomal protein L6-B Proteins 0.000 description 1
- 229910004298 SiO 2 Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000003917 TEM image Methods 0.000 description 1
- 239000004809 Teflon Substances 0.000 description 1
- 229920006362 Teflon® Polymers 0.000 description 1
- ZMZDMBWJUHKJPS-UHFFFAOYSA-M Thiocyanate anion Chemical compound [S-]C#N ZMZDMBWJUHKJPS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 102100040374 U4/U6 small nuclear ribonucleoprotein Prp3 Human genes 0.000 description 1
- COQLPRJCUIATTQ-UHFFFAOYSA-N Uranyl acetate Chemical compound O.O.O=[U]=O.CC(O)=O.CC(O)=O COQLPRJCUIATTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 150000001336 alkenes Chemical class 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 238000005452 bending Methods 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000002051 biphasic effect Effects 0.000 description 1
- HOQPTLCRWVZIQZ-UHFFFAOYSA-H bis[[2-(5-hydroxy-4,7-dioxo-1,3,2$l^{2}-dioxaplumbepan-5-yl)acetyl]oxy]lead Chemical compound [Pb+2].[Pb+2].[Pb+2].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O.[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O HOQPTLCRWVZIQZ-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 238000001354 calcination Methods 0.000 description 1
- 238000007707 calorimetry Methods 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 125000005626 carbonium group Chemical group 0.000 description 1
- 229920006317 cationic polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000025084 cell cycle arrest Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 201000006662 cervical adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- ZDOBWJOCPDIBRZ-UHFFFAOYSA-N chloromethyl(triethoxy)silane Chemical compound CCO[Si](CCl)(OCC)OCC ZDOBWJOCPDIBRZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZXZMFKUGAPMMCJ-UHFFFAOYSA-N chloromethyl-dimethoxy-methylsilane Chemical compound CO[Si](C)(CCl)OC ZXZMFKUGAPMMCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 1
- 238000002485 combustion reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 238000013267 controlled drug release Methods 0.000 description 1
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000006704 dehydrohalogenation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 150000004985 diamines Chemical class 0.000 description 1
- 238000001938 differential scanning calorimetry curve Methods 0.000 description 1
- WHGNXNCOTZPEEK-UHFFFAOYSA-N dimethoxy-methyl-[3-(oxiran-2-ylmethoxy)propyl]silane Chemical compound CO[Si](C)(OC)CCCOCC1CO1 WHGNXNCOTZPEEK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000011549 displacement method Methods 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 238000006735 epoxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 125000003700 epoxy group Chemical group 0.000 description 1
- HHBOIIOOTUCYQD-UHFFFAOYSA-N ethoxy-dimethyl-[3-(oxiran-2-ylmethoxy)propyl]silane Chemical compound CCO[Si](C)(C)CCCOCC1CO1 HHBOIIOOTUCYQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000012737 fresh medium Substances 0.000 description 1
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 1
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 1
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 1
- 150000003944 halohydrins Chemical class 0.000 description 1
- ZMZDMBWJUHKJPS-UHFFFAOYSA-N hydrogen thiocyanate Natural products SC#N ZMZDMBWJUHKJPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 1
- 210000005061 intracellular organelle Anatomy 0.000 description 1
- 238000007917 intracranial administration Methods 0.000 description 1
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 208000037841 lung tumor Diseases 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000001570 methylene group Chemical group [H]C([H])([*:1])[*:2] 0.000 description 1
- SNVLJLYUUXKWOJ-UHFFFAOYSA-N methylidenecarbene Chemical compound C=[C] SNVLJLYUUXKWOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001000 micrograph Methods 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- PDDBPPDHEVWBRW-UHFFFAOYSA-N n'-(3-trimethoxysilylpropyl)ethane-1,2-diamine Chemical compound CO[Si](OC)(OC)CCCNCCN.CO[Si](OC)(OC)CCCNCCN PDDBPPDHEVWBRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MQWFLKHKWJMCEN-UHFFFAOYSA-N n'-[3-[dimethoxy(methyl)silyl]propyl]ethane-1,2-diamine Chemical compound CO[Si](C)(OC)CCCNCCN MQWFLKHKWJMCEN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000001119 neuropathy Diseases 0.000 description 1
- 230000007823 neuropathy Effects 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010534 nucleophilic substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 239000005416 organic matter Substances 0.000 description 1
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 1
- 238000006053 organic reaction Methods 0.000 description 1
- 229910000489 osmium tetroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012285 osmium tetroxide Substances 0.000 description 1
- BDOLXPFAFMNDOK-UHFFFAOYSA-N oxazaborolidine Chemical compound B1CCON1 BDOLXPFAFMNDOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 230000000149 penetrating effect Effects 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 150000004965 peroxy acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 231100000683 possible toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 208000023958 prostate neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000003586 protic polar solvent Substances 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- FZHAPNGMFPVSLP-UHFFFAOYSA-N silanamine Chemical compound [SiH3]N FZHAPNGMFPVSLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000005372 silanol group Chemical group 0.000 description 1
- 238000002115 silicon-29 solid-state nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000007974 sodium acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000000371 solid-state nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 230000001360 synchronised effect Effects 0.000 description 1
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002626 targeted therapy Methods 0.000 description 1
- BSYVTEYKTMYBMK-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofurfuryl alcohol Chemical compound OCC1CCCO1 BSYVTEYKTMYBMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002411 thermogravimetry Methods 0.000 description 1
- 238000001757 thermogravimetry curve Methods 0.000 description 1
- 230000006663 ubiquitin-proteasome pathway Effects 0.000 description 1
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 1
- 238000009777 vacuum freeze-drying Methods 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F7/00—Compounds containing elements of Groups 4 or 14 of the Periodic Table
- C07F7/02—Silicon compounds
- C07F7/08—Compounds having one or more C—Si linkages
- C07F7/18—Compounds having one or more C—Si linkages as well as one or more C—O—Si linkages
- C07F7/1804—Compounds having Si-O-C linkages
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/695—Silicon compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/69—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit
- A61K47/6921—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere
- A61K47/6923—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere the form being an inorganic particle, e.g. ceramic particles, silica particles, ferrite or synsorb
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
- C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
- C07D241/10—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D241/12—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F7/00—Compounds containing elements of Groups 4 or 14 of the Periodic Table
- C07F7/02—Silicon compounds
- C07F7/08—Compounds having one or more C—Si linkages
- C07F7/18—Compounds having one or more C—Si linkages as well as one or more C—O—Si linkages
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Ceramic Engineering (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
Изобретение относится к производным общей формулы (II),где Y и Z представляют собой -O- и A является,где R1, R2, R3 независимо друг от друга представляют собой OCH; X представляет собой O; n равно 3 и m равно 1. Технический результат: получены новые производные с Бортезомибом через связи боронового диэфира, которые являются стабильными в нейтральной среде, но которые способны расщепляться в слегка кислой среде (pH=4,5-5,0), выделяя лекарственное средство Бортезомиб, для доставки лекарственных средств, которые могут применяться для переноса и выделения Бортезомиба. 3 н. и 6 з.п. ф-лы, 5 табл., 14 ил.
Description
Область техники изобретения
Данное изобретение относится к системе выделения на основе Бортезомиба в форме микро- или наночастиц (или носителя), обеспеченным системами доставки лекарственных средств. Бортезомиб в носителе может присутствовать как таковой или в форме производного, как объясняется ниже.
Более конкретно, изобретение относится к классу производных, полученных взаимодействием молекулярной единицы (или линкера) с Бортезомибом через связь типа боронового диэфира.
Эти производные являются стабильными в нейтральной окружающей среде, но способны расщепляться в слегка кислой среде (pH=4,5-5,0), выделяя лекарственное средство Бортезомиб, и они также могут быть конъюгированы с носителем через линкер.
Производные в соответствии с данным изобретением представляют класс пролекарств Бортезомиба, относящихся к гидролизу боронового эфира, и могут применяться для переноса Бортезомиба и его выделения в среде со слегка кислым pH, такой как внутриклеточная среда, после прохождения через среду, имеющую нейтральный pH (такую как кровоток), в которой лекарственное средство остается стабильно конъюгированным в форме не биологически активного боронового эфира.
На практике производные в соответствии с данным изобретением могут применяться для внутриклеточного выделения Бортезомиба в том, что они позволяют переносить лекарственное средство в кровотоке, который характеризуется приблизительно нейтральным pH (7,4), в биологически неактивной форме, в то время как, попадая во внутриклеточную среду, которая характеризуется кислым pH (приблизительно 4,5-5,0), с ним происходит вызванное pH химическое расщепление, вызывая диффузию терапевтически эффективной формы Бортезомиба.
Если такие производные применяют в качестве составляющих системы доставки и выделения лекарственного средства, они могут быть прикреплены к ним линкерной единицей, и она (система доставки лекарственного средства), имеющая функцию доставки, способна достигать внутриклеточной среды при pH 4,5-5,0, где происходит расщепление пролекарства, к которому относится данное изобретение, вызывая диффузию Бортезомиба. Например, производные в соответствии с данным изобретением могут применяться для целей достижения внутриклеточного выделения (при pH 4,5-5,0) Бортезомиба после внутривенного введения (в среде с нейтральным pH).
Производные в соответствии с данным изобретением применяют для получения терапевтических систем, способных выделять Бортезомиб во внутриклеточной среде.
Уровень техники
Бортезомиб [3-метил-1-(3-фенил-2-(пиразин-2-карбоксамидо)-пропанамидо)бутилбороновая кислота] представлен формулой (I) и имеет в структуре функциональную группу бороновой кислоты, и как таковой обладает похожей реакционной способностью с бороновыми кислотами.
Бортезомиб является синтетическим соединением, принадлежащим к классу нового поколения противоопухолевых агентов, которые действуют через ингибирование хемотрипсиноподобной активности протеасомы 26S и, следовательно, расщепление белков клетки [Adams J, Palombella VJ, Sausville EA, Johnson J, Destree A, Lazarus DD, Maas J, Pien CS, Prakash S, Elliott PJ. Cancer Res (1999), 59:2615-2622; Pickart CM, Eddins MJ. Biochim Biophys Acta. 2004 Nov 29;1695(1-3):55-72.]
Его применяют клинически для лечения диагностированной впервые или не поддающейся лечению множественной миеломы (MM) и других форм опухолей, таких как мантийноклеточная лимфома [Jagannath S, Barlogie B, Berenson J, Siegel D, Irwin D, Richardson PG, et al. Brit J Haematol (2004) 127: 165-172; Orlowski RZ. Exp Rev Anticancer Ther (2004) 4:171-179]. Его также тестировали для лечения многих солидных опухолей, таких как опухоли простаты, молочной железы, легких, почек и яичников [Cusack JC. Cancer Treat Rev (2003) 29: 21-31]. Бортезомиб ингибирует путь убиквитин-протеасома. Такое ингибирование вызывает различное действие на опухолевые клетки, включая изменения в пролиферации клеток [King RW, Deshaies RJ, Peters JM, Kirschner MW. Science (1996) 274: 1652-1659], адгезии клеток [Read MA, Neish AS, Luscinskas FW, Palombella VJ, Maniatis T, Collins T. Immunity (1995) 2: 493-506] и ангиогенезе [Dulic V, Kaufmann WK, Wilson SJ, Tlsty TD, Lees E, Harper JW, et al. Cell (1994) 76:1013-1023], что приводит к остановке клеточного цикла и апоптозу. Эти действия в основном применимы к опухолевым клеткам, но также могут задевать нормальные клетки [Adams J. Semin Oncol (2001), 28:613-619].
Основным побочным эффектом, вызываемым лечением Бортезомибом, является периферийная невропатия, которая часто является ограничивающим дозу фактором для клинического применения, а также может привести к прерыванию лечения. В частности, вызванная Бортезомибом периферийная невропатия -принимает форму дистальной парестезии и невропатической боли, распространяющейся на нижние и верхние конечности [Cata JP, Weng HR, Burton AW, Villareal H, Giralt S, Dougherty PM. J Pain (2007) 8: 296-306; Cavaletti G, Pezzoni G, Pisano C, Oggioni N, Sala, F, Zoia C, Ferrarese C, Marmiroli P, Tredici G. Neurosci. Lett. (2002) 322:103-106; Richardson PG, Briemberg H, Jagannath S, Wen PY, Barlogie B, Berenson J, et al. J Clin Oncol (2006) 24: 3113-3120; Meregalli C, Canta A, Carozzi VA, Chiorazzi A, Oggioni N, Gilardini A, Ceresa C, Avezza F, Crippa L, Marmiroli P, Cavaletti G. Eur J Pain. (2010) 14:343-350]. Эти симптомы увеличиваются во время лечения Бортезомибом, но часто также продолжается после прерывания лечения, что приводит к существенной безрезультатности у пациентов с тяжелыми последствиями в отношении качества жизни [Jagannath S, Barlogie B, Berenson J, Siegel D, Irwin D, Richardson PG, et al. Brit J Haematol (2004) 127: 165-172]. Однако, до сих пор не ясно, какие специфические морфологические изменения в волокнах периферийных нервов связаны с различными болезненными компонентами вызванной Бортезомибом невропатии.
Системы, сконструированные с применением мезопористых частиц двуокиси кремния, которые потенциально могут применяться для выделения/доставки лекарственных средств или генов, описаны в перечисленных ниже документах: WO2007108016, WO201209448, US20090311332.
В документе WO2007108016 описаны микро- и наносистемы доставки лекарственных средств, созданные с применением мезопористых частиц двуокиси кремния, и отличающиеся присутствием рецептор-специфического лиганда на внешней поверхности частицы, и лекарственного средства, введенного в или преимущественно связанного с порами. Рецептор-специфический лиганд, рецепторы которого сверхэкспрессируются в опухолевых клетках, распознается и поглощается опухолевыми клетками и втягивает в них всю наносистему, которая выделяет лекарственное средство во внутриклеточную среду в ответ на определенные стимулы. Рецептор-специфический лиганд и лекарственное средство могут быть различных типов. Указанные выше системы делают возможным эффективное целевое лечение при низких дозах лекарственных средств и низкой токсичности и побочных эффектах.
В документе WO201209448 описаны субмикронные системы на основе пористой двуокиси кремния с поверхностями, покрытыми катионным полимером. Они могут включать олигонуклеотидный и терапевтический агент. Применение Бортезомиба указано среди заявленных терапевтических агентов, однако предложенные системы не дают механизмы для выделения pH-чувствительных лекарственных средств.
В документе US 200903110332 описан способ синтеза мезопористых наночастиц двуокиси кремния и их применение. Способ включает отделение частиц на основе их размера.
Доставляемый материал вводят в полученные частицы, и контролируемое выделение достигается снижением pH на поверхности мезопористых частиц двуокиси кремния. Бортезомиб или пролекарства Бортезомиба не упомянуты.
Объектом этого изобретения является разработка производных Бортезомиба, которые позволяют более эффективную доставку при снижении побочных эффектов по сравнению с Бортезомибом при введении в соответствии с известным уровнем техники. В частности, объектом изобретения является ингибирование периферийных невропатий, которые возникают в виде нежелательных побочных эффектов, связанных с введением Бортезомиба.
Сущность изобретения
Объектом данного изобретения, следовательно, является система выделения, содержащая ассоциацию носитель/линкер/Бортезомиб, как это определено ниже.
Другим объектом изобретения является класс производных Бортезомиба, способных выделять Бортезомиб в результате их разложения, которое имеет место при pH 4,0-5,5, предпочтительно, pH 4,5-5,0.
Эти производные имеют общую формулу (II), которая описана ниже. Они могут применяться для тех же терапевтических целей, что и Бортезомиб, и могут быть введены в известные микро- и наночастичные системы (такие как, например, описаны в WO2007108016), водя лиганд для доставки лекарственных средств.
Производные в соответствии с данным изобретением позволяют снижать побочные эффекты, обычно связанные с высокими дозами противоопухолевых лекарственных средств, которые необходимы при обычном лечении, благодаря прямому введению в опухолевые клетки исключительно непосредственно во внутриклеточную среду.
Еще одним объектом изобретения является конъюгат, содержащий производные Бортезомиба, определенные выше, с микро- и наночастицами. Предпочтительны субмикронные частицы на основе двуокиси кремния, имеющие морфологию, включающую полости, способные принимать терапевтический агент или агенты или пролекарство, которые должны быть доставлены. Особенно предпочтительны микро- и наночастицы, описанные в WO2007/108016.
Еще одним объектом являются фармацевтические композиции, содержащие пролекарство или систему доставки для лечения опухолей в общем или для облегчения побочных эффектов, связанных с введением Бортезомиба.
Другие объекты изобретения будут понятны из следующего подробного описания.
Краткое описание чертежей
Фигура 1. Диаграмма конъюгата, содержащего мезопористую двуокись кремния в сочетании с фолиевой кислотой на внешней поверхности и содержащего производное Бортезомиба (показанное на диаграмме как овал), химически закрепленное в порах.
Фигура 2. Микроснимок мезопористой двуокиси кремния типа MSU, полученный с применением сканирующего электронного микроскопа.
Фигура 3. 13C-ЯМР спектр боронового эфира.
Фигура 4. Хроматограмма Бортезомиба в концентрации 70 ч./млн. в стимулированной биологической жидкости при pH 5.
Фигура 5. Калибровочная прямая, относящаяся ко второму пику хроматограммы раствора при pH 5.
Фигура 6. Калибровочная прямая, относящаяся к третьему пику хроматограммы раствора при pH 5.
Фигура 7. Хроматограмма SBA-BORT образца во время тестирования выделения в стимулированной биологической жидкости при pH 5.
Фигура 8. Хроматограмма Бортезомиба в концентрации 50 ч./млн. в стимулированной биологической жидкости pH 7.
Фигура 9. Калибровочная прямая, относящаяся к 1 пику хроматограммы раствора при pH 7.
Фигура 10. Хроматограмма, полученная из раствора, буферированного до pH 7, в котором образец конъюгата двуокись кремния (SBA-15)/линкер/Бортезомиб суспендирован в течение 0,5 часа.
Фигура 11. Хроматограмма, полученная из раствора, буферированного до pH 7, в котором образец конъюгата двуокись кремния (SBA-15)/линкер/Бортезомиб суспендирован в течение 9,0 часов.
Фигура 12. Выделение Бортезомиба из стимулированной биологической жидкости при pH 5 и рH 7 ко времени.
Фигура 13. Изображения ТЭМ, иллюстрирующие поглощение MSN-FOL клетками HeLa, экспрессирующими FR через 1 час инкубирования (см. раздел Материалы и способы). Изображение (A) получают при увеличении ×8000, в то время как площадь, ограниченная квадратом, получают при увеличении ×25000 (B).
Фигура 14. MSN-FOL/GPS-BTZ ингибирует рост в FR-положительных клетках шейки матки HeLa (фигура 14A), но ни в клетках маммарной карциномы MCF-7 (фигура 14B), ни в нормальных клетках HEK293 (C), которые являются FR-отрицательными. Клетки обрабатывают MSN-FOL/GPS-BTZ или оставляют не обработанными (контроль C). MSN-FOL и MSN-FOL/GPS применяют в качестве отрицательного контроля (см. Материалы и способы). Жизнеспособность клеток оценивают через 1, 2 или 3 дня обработки. Представленные значения являются средними ± стандартное отклонение для четырех независимых экспериментов, проводимых трижды для каждого состояния.
Подробное описание изобретения
Следующие определения применяют в контексте данного изобретения:
- под системой доставки понимают конъюгат носитель/линкер/Бортезомиб;
- под пролекарством производного Бортезомиба понимают соединение общей формулы (II), полученное взаимодействием между линкером и Бортезомибом на функциональной группе бороновой кислоты;
- под линкером или молекулярной единицей или бидентатным лигандом понимают молекулу общей формулы (III), один конец которой способен взаимодействовать с функциональной группой бороновой кислоты Бортезомиба, и другой конец способен связываться с носителем;
- под лигандом или агентом, имеющим функцию доставки, понимают соединение, отвечающее за доставку и распознавание молекул, с избытком экспрессированных на поверхности опухолевых клеток, тем самым обеспечивая селективную доставку в целевую ткань;
- под носителем понимают частицу, например, частицу пористой двуокиси кремния, имеющую размеры от микро- до нанометрических, которая может связываться с борным производным Бортезомиба (определенное выше пролекарство) на ее поверхности, например, ей может быть частица пористой двуокиси кремния или матрица на основе неорганических оксидов, имеющих контролируемую пористость, которые, например, получают способом ʺмолекулярного импринтаʺ или с применением поверхностно-активных веществ (Katz, A.; Davis, M. E. Molecular Imprinting of Bulk, Microporous Silica, Nature, 2000, 403, 286-289.);
- под микро- или наносистемой доставки лекарственного средства понимают носитель, определенный выше, который несет на поверхности соединение, созданное для распознавания молекул, избыточно экспрессированных на поверхности опухолевых клеток, тем самым обеспечивая селективную доставку к целевым тканям, выбранный из, например: фолиевой кислоты, биотина, пептидов, антител, гликозидов, углеводородов или белков, все которые известны сами по себе.
Производные Бортезомиба в соответствии с данным изобретением представлены общей формулой (II) и могут быть получены химической реакцией Бортезомиба общей формулы (I) с бидентатным лигандом, который может быть представлен общей формулой (III), которые взаимодействуют с образованием циклического борного производного на конце лиганда R4.
В соединении формулы (II) Y и Z являются, независимо друг от друга, -NH, -O-, -S-, и A является заместителем, полученным после реакции между соединением формулы (I) (Бортезомиб) и соединением формулы (III).
В частности, A имеет следующее значение
Бидентатные лиганды (или линкеры) в соответствии с данным изобретением представлены общей формулой (III):
где:
R1, R2, R3, независимо друг от друга, выбирают из CH3, C2H5, OCH3, OC2H5, OC3H7, OC4H9, OC5H11;
X является одинарной связью или S, O, NH;
R4 выбирают из NH2, SH, эпоксида, галогена, CN, тиоцианата, -CH=CH2;
n и m равны положительным целым числам, так, чтобы n=0-5 и m=0-3, где n+m≥1.
Производные Бортезомиба выделяют его при pH 4,5-5,0 через раскрытие боронового кольца, в то время как другой конец может быть свободен или, более предпочтительно, связан с известной микро- или наночастичной системой.
Производные Бортезомиба в соответствии с данным изобретением могут быть получены способом, включающим следующие основные стадии.
Производные Бортезомиба в соответствии с данным изобретением могут быть получены сначала взаимодействием Бортезомиба с линкером формулы (III) с получением соединения формулы (II), которое потом связывается с носителем. В качестве альтернативы, линкер формулы (III) взаимодействует с носителем через R1, R2 и R3 заместители, и полученный продукт взаимодействует с Бортезомибом с получением системы носитель/линкер/Бортезомиб в соответствии с данным изобретением. Все реакции являются органическими реакциями, которые входят в объем знаний специалиста в данной области техники. Типовые условия реакции, например, иллюстрированы в разделе примеров.
Производные Бортезомиба могут применяться для внутриклеточного выделения Бортезомиба, так как они позволяют транспортировать лекарственное средство в биологически неактивной форме через кровоток, но как только они достигают внутриклеточной среды, с ними происходит химическое расщепление, вызванное характеристиками среды (pH), с выделением свободного Бортезомиба.
Если производное применяют в качестве составляющего системы доставки лекарственных средств, оно прикрепляется к ней и, так как вся система имеет функцию доставки, она способна достигать внутриклеточной среды при pH 4,5-5,0 где происходит расщепление пролекарства с выделением свободного Бортезомиба.
Производное расщепляется, выделяя Бортезомиб при pH 4,5-5,0 (типовой pH внутриклеточной среды). Общее описание микро-наносистем, представленных здесь, где их применяют для переноса пролекарств Бортезомиба, являющихся объектом изобретения, дано в документе WO2007108016.
Показанная ниже диаграмма описывает потенциальное применение описанного изобретения. В частности, показано потенциальное применение в качестве компонента микро- или наносистемы для внутриклеточного выделения Бортезомиба. Система содержит матрицу на основе неорганических оксидов с правильной и контролируемой пористостью (в конкретном случае, показаны частицы мезопористой двуокиси кремния), отличающуюся тем, что вещество, ответственное за доставку и молекулярное распознавание (показано на диаграмме звездочками; например, на фигуре 1 выбрана фолиевая кислота), селективно сочетается, предпочтительно, на внешней поверхности и, предпочтительно, в порах, с молекулой, принадлежащей к классу молекул, которые являются объектом изобретения (пролекарство Бортезомиба, представленное на диаграмме как овал), химически прикрепляется к системе.
В другом варианте изобретения неорганическая матрица содержит, в дополнение к или в качестве замены веществ, отвечающих за доставку и молекулярное распознавание, другие молекулы, имеющие функцию маркера, в частности, флуоресцентные маркеры. Эти молекулы могут быть объединены на внешней поверхности неорганической матрицы в сочетании с доставляющими веществами. Предпочтительны родамин и флуоресцеин. Способ получения описан у Morelli, C. et al. L. PEG-templated mesoporous silica nanoparticles exclusively target cancer cells. Nanoscale. 2011 Aug;3(8):3198-207, где описано получение мезопористой двуокиси кремния, связанной с флуоресцеином и фолиевой кислотой.
Производные Бортезомиба в соответствии с данным изобретением представляют класс пролекарств Бортезомиба, относящийся к гидролизу боронового эфира, и также могут быть конъюгированы на поверхности микро-наносистемы для доставки лекарственного средства так, чтобы стать ее составляющей.
Они химически стабильны при нейтральном pH, но они расщепляются с выделением Бортезомиба при слегка кислом pH (4,5-5,0). Они могут применяться для переноса и выделения Бортезомиба при необходимости его диффузии в среды, имеющие слегка кислый pH после прохождения через среду, имеющую нейтральный pH, в которой лекарственное средство остается стабильно конъюгированным в форме не биологически активного боронового производного.
Эти производные также могут быть связаны с микро- и наночастичными системами, применяемыми для переноса Бортезомиба когда необходима его диффузия в средах, имеющих слегка кислый pH после прохождения через среду, имеющую нейтральный pH, в которой лекарственное средство остается стабильно конъюгированным в форме не биологически активного боронового эфира, в условиях, которые возникают, если указанные выше микро- и наносистемы доставки лекарственных средств применяют для внутривенной инъекции.
Производное Бортезомиба в соответствии с данным изобретением имеет в структуре функциональную группу боронового эфира и, как таковое, обладает реакционной способностью, подобной реакционной способности бороновых эфиров.
Молекулы (бидентатные лиганды), которые предназначены для взаимодействия с Бортезомибом для получения пролекарств, имеющих описанные выше свойства, иллюстрированы общей формулой (III).
Особенно предпочтительной молекулой является 3-глицидоксипропилтриметоксисилан формулы 2.1:
Другие особенно предпочтительные молекулы включают:
3-аминопропилтриэтоксисилан
3-аминопропилтриметоксисилан
4-аминобутилдиметилметоксисилан
3-(2-аминоэтиламино)пропилтриметоксисилан (N-[3-(триметоксисилил)пропил]этилендиамин)
3-[2-(2-аминоэтиламино)этиламино]пропилтриметоксисилан; (CH3O)3Si(CH2)3NHCH2CH2NHCH2CH2NH2
3-(2-аминоэтиламино)пропилметилдиметоксисилан
3-меркаптопропилтриметоксисилан
3-глицидоксипропилдиметоксиметилсилан
3-глицидоксипропилдиметилэтоксисилан
3-глицидоксипропилтриметоксисилан
Аллилтриэтоксисилан
Аллилтриметоксисилан
3-цианопропилтриэтоксисилан
Хлорметил(метил)диметоксисилан
Хлорметилтриметоксисилан
Хлорметилтриэтоксисилан
(3-хлорпропил)диметоксиметилсилан
(3-хлорпропил)триметоксисилан
3-тиоцианатопропилтриэтоксисилан
3-тиоцианатопропилтриметоксисилан
Введение фармацевтических композиций
Данное изобретение также включает фармацевтические композиции, содержащие производные Бортезомиба формулы (II) и конъюгаты на основе Бортезомиба, вместе с фармацевтически приемлемым носителем.
В соответствии с данным изобретением производные и конъюгаты в соответствии с данным изобретением могут быть составлены для однократного или одновременного, последовательного или отложенного введения с другими активными ингредиентами или пролекарствами, такими как, например, противоопухолевые лекарственные средства, генетический материал, радионуклеиды или флуоресцентные маркеры, и поэтому могут быть введены в единую композицию или в отдельные композиции.
Для применения в области терапевтики фармацевтические композиции получают в виде композиций, подходящих для предполагаемого назначения и носителей для пациентов, требующих лечения, как известно специалистам в данной области техники.
Композиция может быть, например, получена с применением солей и буферных веществ или других наполнителей, которые известны специалистам в данной области техники и фармацевтически приемлемы.
Введение производных и конъюгатов в соответствии с данным изобретением, например, может происходить назально, буккально, перорально, внутрикожно, подкожно, внутримышечно, внутрибрюшинно, внутривенно, подоболочечно, внутричерепно, парентерально или внутрибрюшинно.
Фармацевтические формы, которые могут применяться для инъекций, например, могут включать стерильные водные растворы или дисперсии, такие как стерильные порошки для получения экстемпоральных дисперсий, и все наполнители, носители и буферы, известные специалистам в данной области техники для приготовления инъекций. Стерильные порошки предпочтительно получают методами сушки, известными специалистам в данной области техники, например, сушкой в вакууме и сушкой вымораживанием.
Терапевтически приемлемые дозы устанавливаются специалистом в данной области техники, отвечающим за лечение, на основе тяжести состояния пациента, требующего лечения, и выбранного способа введения.
Любые композиции в соответствии с данным изобретением могут быть включены в набор для введения. В качестве не ограничивающего примера, набор в соответствии с данным изобретением может содержать производное Бортезомиба или систему доставки носитель/линкер/Бортезомиб, составленную подходящим образом для конкретного введения, вместе с фармацевтически приемлемым носителем, например, водой для инъекций, или фармацевтически приемлемым носителем для перорального введения, если применяется.
Компоненты набора в соответствии с данным изобретением могут быть в жидкой форме или лиофилизированной форме и, предпочтительно, упакованы в подходящие стерильные контейнеры, такие как, например, бутылки, пробирки или шприцы, по-отдельности или уже смешанными.
Наборы в соответствии с данным изобретением также могут включать инструменты или устройства для введения наноносителей в соответствии с данным изобретением различными возможными путями введения, например, парентеральным, внутримышечным или внутривенным введением.
Наборы в соответствии с данным изобретением также включают инструкции для применения компонентов и любых других реагентов, не включенных в сами наборы.
Системы доставки и пролекарства на основе Бортезомиба в соответствии с данным изобретением предпочтительно применяют для лечения опухолей, в частности, их применяют для облегчения побочных эффектов и улучшения клинических состояний пациентов, больных раком, в частности, карциномами, множественной миеломой, лимфомами, такими как мантийноклеточная лимфома, опухолями простаты, молочной железы, легких, почек и яичников, более конкретно, карциномами яичников, почек, мозга, легких и молочной железы.
Системы доставки и пролекарства в соответствии с данным изобретением предпочтительно могут применяться для всех заболеваний, для которых применяют Бортезомиб, для снижения его дозы и для облегчения побочных эффектов, таких как, например, морфологические изменения периферийных нервных волокон, периферийные невропатии, периферийные парестезии и невропатическая боль в верхних и нижних конечностях.
Следующие примеры, вместе с чертежами, представлены только для иллюстрации изобретения и не должны считаться ограничивающими объем.
Примеры
Связывание линкера формулы (III) с наноносителем и последующая реакция с Бортезомибом
Синтез двуокиси кремния, функционализированной 3-глицидоксипропилом
Методика
Высушенную двуокись кремния (SBA-15 0,55 г) подвергают взаимодействию в инертной атмосфере азота с 3-глицидоксипропилсиланом (0,74 мл) в безводном толуоле. Реакцию проводят при кипении с обратным холодильником при магнитном перемешивании в течение восьми часов. Функционализированную двуокись кремния отфильтровывают и промывают тетрагидрофураном на полиамидных фильтрах и затем сушат. Таким образом, восстанавливают двуокись кремния, функционализированную глицидоксипропильным линкером (1,1 г).
[N-2(-аминоэтил)-3-аминопропилсилан)] (AEAPS)
(3-триметоксисилилпропил)диэтилентриамин (SiDETA)
Мезопористую двуокись кремния (SBA-15 или другую) предварительно активируют при приблизительно 120°C в сушильной печи в течение ночи и затем охлаждают и обрабатывают аминосиланом (AEAPS или SiDETA).
Смесь нагревают при кипении с обратным холодильником с безводным толуолом (30 мл/г подложки) в течение 24 часов в атмосфере N2. Реакционную смесь охлаждают до температуры окружающей среды, толуол и избыток диамина удаляют фильтрацией в вакууме.
Восстановленный продукт промывают несколько раз дихлорметаном и сушат в вакууме при 40°C.
Альтернатива A
Альтернативно, реакция функционализации с 3-глицидоксипропилтриметоксисиланом может проводиться в сухом диоксане.
Реакция прививки в сухом диоксане в течение 18 часов при температуре окружающей среды
Способ синтеза включает суспендирование 400 мг мезопористого* материала и растворение 0,80 мл 3-глицидоксипропилтриметоксисилана в 12 мл сухого диоксана при температуре окружающей среды. Смесь выдерживают при магнитном перемешивании при температуре окружающей среды в течение 18 часов. Смесь затем фильтруют и промывают в диоксане и сухом ТГФ и сушат при 45°C.
Альтернатива B
Альтернативно, данная реакция может проводиться в этаноле при температуре окружающей среды в течение большего периода времени реакции.
В типовом методе получения раствор, полученный растворением 8,11 г 3-аминопропилтриэтоксисилана (APTES, C9H23NO3Si) в 17,13 мл этанола, вводят в суспензию, полученную суспендированием 4 г мезопористой двуокиси кремния MSU* типа, соответствующе высушенной, в 14,3 этанола. Полученную суспензию перемешивают при температуре окружающей среды в течение 18 часов, затем промывают, фильтруют и сушат.
3,50 г продукта восстанавливают (необходимо иметь в виду, что следующая методика может относиться к материалу, поры которого пропитаны поверхностно-активным веществом синтеза, и к материалу без поверхностно-активного вещества. В приведенном выше случае, применяют материал, поры которого пропитаны поверхностно-активным веществом синтеза, и он при суспендировании в этаноле выделяет поверхностно-активное вещество или его часть, что делает расчетные данные качества продукта, восстановленного в конце, незначительными).
*Любая методика функционализации действительна для всех типов мезопористой двуокиси кремния, однако предложенные альтернативы (прежде всего, альтернатива A, в которой применяют диоксан, который является не протонным растворителем) подходят для функционализации микро-наносистем, к которым были ранее привязаны рецептор-специфические лиганды, такие как фолиевая кислота или другие, при условии, что их проводят при температуре окружающей среды и в условиях реакции, которые сохраняют их биологическую активность.
Представленные выше реакции функционализации могут применяться для всех линкеров общей формулы (III), с изменением времени реакции в зависимости от желаемой степени функционализации.
Синтез двуокиси кремния функционализированной 3-пропоксипропил-1,2-диолом
Методика
Проводят фильтрацию и промывание дистиллированной водой и ацетоном, чистым для анализов, на полиамидных фильтрах. Восстанавливают двуокись кремния, функционализированную диольной функциональной группой.
Прикрепление Бортезомиба к функционализированной двуокиси кремния
В инертной атмосфере азота Бортезомиб подвергают взаимодействию с двуокисью кремния, функционализированной диольной функциональной группой в безводном дихлорметане. Реакцию проводят при магнитном перемешивании в течение девяноста минут.
Фильтрацию и несколько промывок проводят на полиамидных фильтрах с применением безводного дихлорметана. Восстанавливают двуокись кремния с Бортезомибом, связанным в виде циклического боронового эфира.
Альтернативный способ получения
Эквимолярные количества Бортезомиба и функциональной группы мезопористой двуокиси кремния (SBA-15 или другой) функционализированной AEAPS и SiDETA лигандов нагревают до 40°C в безводном толуоле в присутствии молекулярных сит в течение 7 часов. Восстановленный продукт (диазаборолидин) промывают несколько раз дихлорметаном и сушат в вакууме.
Диазаборолидины гидролизуются быстро в разбавленных кислых растворах, но в нейтральных растворах гидролиз происходит очень медленно (J. Am. Chem. Soc., 1958, 80 (20), pp 5411-5413).
Получение производного Бортезомиба формулы (II) и последующее связывание с наноносителем
Соединение II
3-Глицидоксипропилсилан подвергают взаимодействию с 0,001N раствором HCl в ТГФ (тетрагидрофуране).
Реакционную смесь выдерживают в течение 3 часов при магнитном перемешивании.
Продукт с примесями восстанавливают удалением растворителя при пониженном давлении и затем обрабатывают водой и затем экстрагируют дихлорметаном. 3-(Силилпропокси)пропан-1,2-диол восстанавливают таким образом и затем подвергают взаимодействию с Бортезомибом в дихлорметане в течение приблизительно 2 часов. Полученный бороновый эфир обрабатывают двуокисью кремния (SBA-15 или другой) в этаноле в течение 48 часов при температуре окружающей среды.
Продукт фильтруют и промывают несколько раз на полиамидных фильтрах с применением этанола и безводного дихлорметана. Восстанавливают двуокись кремния с Бортезомибом, связанным в виде циклического боронового эфира.
С помощью AEAPS и SiDETA лигандов связь с Бортезомибом получают с применением тех же условий, которые применяют для связывания Бортезомиба с двуокисью кремния, функционализированной AEAPS и SiDETA. Полученное производное формулы (II) затем связывают с двуокисью кремния в виде производного формулы (II), полученного с глицидокси.
1-амино-3-(3-силил)пропокси)пропан-2-ол
Газообразный аммиак при температуре окружающей среды барботируют через раствор 3-глицидоксипропилсилана в этаноле в течение 10 часов. Растворитель удаляют при пониженном давлении, и восстанавливают 1-амино-3-[(3-силил)пропокси]пропан-2-ол (C), и затем обрабатывают Бортезомибом в эквимолярных количествах в толуоле при 40°C в присутствии молекулярных сит.
Полученный оксаазаборолидин обрабатывают двуокисью кремния (SBA-15 или другой) в этаноле в течение 48 часов при температуре окружающей среды.
Продукт фильтруют и промывают несколько раз на полиамидных фильтрах с применением этанола и безводного дихлорметана. В восстановленном продукте Бортезомиб связан с двуокисью кремния через циклическую оксаазаборолидиновую структуру.
Что касается лигандов общей формулы (III), в которых R4 является двойной связью (аллилтриэтоксисилан, аллилтриметоксисилан, и т.д.), двойная связь может быть превращена в эпоксид через реакцию эпоксидирования с надкислотами или через образование галогидрина и последующее внутримолекулярное нуклеофильное замещение. Полученный эпоксид затем обрабатывают так же, как глицидоксипропил.
В случае, если R4 является галогеном ((3-хлор-пропил)триметоксисилан), лиганд может быть превращен в соответствующий алкен через реакцию дегидрогалогенирования (β-отщепления) и затем обработан так же, как производные, в которых R4 является двойной связью.
Синтез боронового эфира
Бортезомиб может взаимодействовать с диолами, полученными раскрытием эпоксигруппы, присутствующей в молекуле, с получением циклического боронового эфира.
Предварительные эксперименты проводят с применением моделей бороновой кислоты для изучения и определения оптимальных условий реакции для образования бороновых эфиров, начиная с 3-глицидоксипропилтриметоксисилана. 3-Метилбутилбороновую кислоту и фенилбороновую кислоту применяют в качестве моделей субстратов для этой цели.
Присутствие триметоксисилильных групп позволяет связываться с поверхностью мезопористой двуокиси кремния. Образованная сложная эфирная связь может быть гидролизована в слегка кислой среде (pH 4,5-5,0) и позволяет выделять лекарственное средство в эндосомах и, следовательно, в мишени, ограничивая выделения вне клеточной среды.
Наночастицы, функционализированные производным бора в предыдущем примере
Функционализация
Пролекарства Бортезомиба могут применяться в качестве составляющих микро- или наносистем для доставки лекарственных средств.
Представленный ниже экспериментальный подход разработан для функционализации наночастиц мезопористой двуокиси кремния и последующего конъюгирования с функциональной группой, введенной бороновой кислотой. Мезопористый материал функционализируют с помощью 3-глицидоксипропилтриметоксисилана; эпоксидную функциональную группу затем гидролизуют для прикрепления Бортезомиб.
Молекула 3-глицидоксипропилтриметоксисилана способна связывать Бортезомиб и одновременно прикрепляться к поверхности мезопористой двуокиси кремния.
Мезопористый материал типа SBA-15 синтезируют модификацией способа получения, описанного в литературе (Colloids and Surfaces A: Physicochem. Eng Aspects 229 (2003)1-8). Применяемые стадии получения получают масштабированием оригинальной методики и модификацией ее в отношении молярного отношения EtOH/H2O. Получение образца SBA-15: 4,2 г Pluronic P-123 (Sigma Aldrich) и затем 0,7 г CTAB (Alfa Aesar) растворяют в растворе, содержащем 56,6 мл ультрачистой H2O, 35 мл 99+% EtOH (Sigma Aldrich) и 84 мл 2M HCl. Когда растворение завершается, добавляют 14 мл TEOS (Sigma Aldrich), полученную смесь выдерживают при перемешивании при температуре окружающей среды в течение 30 минут и затем переносят в тефлоновый автоклав, где ее оставляют созревать в течение 5 часов при 80°C и затем при температуре 120°C в течение 12 часов. Полученный белый осадок восстанавливают фильтрацией с применением полиамидных фильтров с пористостью 0,2 мкм.
Альтернативно, мезопористую двуокись кремния типа MSU получают согласно следующему протоколу синтеза или подобному (полученному из методов, заявленных в WO2007108016): раствор, содержащий 150 г дистиллированной H2O и 13,80 г Triton X-100 (Sigma-Aldrich), получают в 500 мл пластиковом химическом стакане. Как только поверхностно-активное вещество полностью растворится, получают раствор, содержащий 10 г н-декана (99+% C10H22, Carlo Erba) и 14,50 г TEOS (Si(OC2H5)4, Sigma-Aldrich). Раствор медленно выливают по стенкам стакана, в котором растворено поверхностно-активное вещество, при очень осторожном перемешивании. Полученную двухфазную эмульсию выдерживают при осторожном перемешивании при температуре окружающей среды в течение 8 дней. После удаления верхней органической фазы, эмульсию фильтруют с применением полиамидных фильтров, имеющих пористость 0,2 мкм.
Другие типы мезопористой двуокиси кремния могут применяться в качестве альтернативы.
SBA-15 мезопористый материал обрабатывают 3-глицидоксипропилтриметоксисиланом (5) в безводном толуоле при кипении с обратным холодильником в течение 8 часов (диаграмма 1.1).i
Диаграмма 1.1
После фильтрации и промывания тетрагидрофураном функционализированную мезопористую двуокись кремния восстанавливают и характеризуют инфракрасной (ИК) спектроскопией, термогравиметрическим анализом (ТГФА) и дифференциальной калориметрией (ДСК).
Сильное снижение абсорбции при 3450 см-1 связано с растягиванием O-H связи в силанольных группах двуокиси кремния и присутствием растягивающих полос C-H связей при 2951 и 2853 см-1, соответствующих цепи атомов углерода глицидоксипропильной группы, которые вместо этого отсутствуют в ИК спектре не функционализированного продукта, но были получены в ИК спектре.
Характеристики органического лиганда также включают полосы при 910 и 816 см-1, относящиеся к асимметричному растягиванию эпоксидного кольца.
ДСК и ТГФ анализ проводят для SBA-15 мезопористого материала после кальцинирования и для продукта (8), функционализированного 3-глицидоксипропилом.
Значительное различие видно на графиках (не показаны) ДСК и ТГФ анализов двух образцов. В случае функционализированного материала, ТГА кривая показывает потерю массы на приблизительно 11,3% (выражена в терминах массового отношения органической массы/(SiO2+органической) 0,113). В ДСК кривой экзотермический пик при температуре 248°C является доказательством реакции горения глицидоксипропильной группы.
Для синтеза бороновых эфиров из функционализированной мезопористой двуокиси кремния (8), эпоксидное кольцо превращают в соответствующий диол гидролизом в кислой среде.
Диаграмма 2.1
Реакцию гидролиза проводят обработкой мезопористой двуокиси кремния 8 водным раствором 0,001N хлористоводородной кислоты в течение 7 часов при температуре окружающей среды (диаграмма 2,1).
Гидролизованный продукт 9, восстановленный фильтрацией, сушат и характеризуют ИК спектроскопией и ДСК и ТГФ анализами. Повышенная интенсивность в полосе, относящейся к растягиванию O-H связи при приблизительно 3443 см-1, объясняется присутствием диольной функциональной группы, и исчезновение полосы при 910 см-1, соответствующей асимметричному растягиванию эпоксидного кольца, видно в ИК спектре продукта 9.
Эксперименты проводят на образовании бороновых эфиров, начиная с функционализированной мезопористой двуокиси кремния 9 с применением 3-метилбутилбороновой кислоты (6) в качестве модели субстрата. Соединение 9 обрабатывают бороновой кислотой 6 (аналог Бортезомиба. Молекулы, подобные Бортезомибу, применяют для более прямого связывания реакционноспособности молекулы со структурой функциональной группы в поддержку исследования, чтобы сделать его более полноценным, в условиях, подобных тем, в которых происходит реакция Бортезомиба) в безводном толуоле при кипении с обратным холодильником в течение 24 часов (диаграмма 3.1).
Диаграмма 3.1
Продукт (10), восстановленный фильтрацией реакционной смеси, промывают ТГФ, в котором растворим растворитель 3-метилбутилбороновая кислоты, сушат и характеризуют ИК спектроскопией и ДСК и ТГФ анализами.
Получение боронового диэфира
Бороновый диэфир образуют с применением другой модели системы: фенилбороновой кислоты (аналога Бортезомиба). Реакцию соединения 9 с фенилбороновой кислотой проводят в других условиях: реакцию проводят при температуре окружающей среды в течение более короткого периода времени с применением дихлорметана в качестве растворителя. Мезопористый продукт 9 обрабатывают фенилбороновой кислотой (11) в безводном дихлорметане при температуре окружающей среды в течение 90 минут (диаграмма 4.1).
Диаграмма 4.1
Характеризация продукта 12, восстановленного после фильтрации и промывания дихлорметаном, с применением ИК спектроскопии и ДСК И ТГА анализов, подтверждает получение бороната. ИК спектр показал, в качестве характеристик структуры 12, полосу, соответствующую растягиванию ароматических C-H связей при 3015 см-1, соответствующую фенилборонату, полосу абсорбции при 1368 см-1, присущую асимметрической вибрации B-O связи бороната, и две полосы при 804 и 707 см-1, относящиеся к складыванию перпендикулярно плоскости Ar-H связей.
Бортезомиб затем прикрепляют к SBA-15 мезопористой двуокиси кремния с применением условий, таких же как в экспериментах с фенилбороновой кислотой (диаграмма 5.1).
Диаграмма 5.1
Анализ восстановленного продукта (14) ИК спектроскопией выявил присутствие полосы, соответствующей растягиванию амидной связи, присутствующей в молекуле Бортезомиба, при 1680 см-1, и полосы при 1533 см-1, которая может быть присуща складыванию NH группы. Также типовыми для молекулы Бортезомиба являются полосы при 1446 см-1, относящиеся к растягиванию C-N связи, и при 744 и 701 см-1, соответствующие изгибу вне плоскости ароматического кольца. Эти полосы отсутствуют в ИК спектре исходного диола (9).
Прикрепление Бортезомиба к функционализированному мезопористому материалу 9 также подтверждается ЯМР анализом соединения 14 в твердом состоянии.
Все сигналы, присущие и органическому лиганду и молекуле Бортезомиба, наблюдаются в 13C-ЯМР спектре соединения 14 (фигура 3).
Сигнал при 7,52 ч./млн. возникает из-за карбония метиленовой группы, связанной с двуокисью кремния (Si-CH2), в то время как два сигнала при 21,49 и 23,50 соответствуют, соответственно, метилам в боковой цепи аминокислотного остатка лейцина и центрального метилен углерода пропильной цепи, связанной с кремнием.
Сигналы, относящиеся к атомам углерода двух CH2 групп, связанных с атомом кислорода простого эфира органического линкера (CH2-O-CH2), также присутствуют при 70,50 и 71,56 ч./млн. В интервале 122,56-154,76 ч./млн. показаны сигналы, относящиеся к ароматическим атомам углерода молекулы Бортезомиба, и сигналы, которые могут быть присущи амидным карбонилам этой молекулы между 162,76 и 171,45 ч./млн.
В 29Si-ЯМР спектре в твердом состоянии (не показан) два очень сильных пика наблюдаются при -110,6 и -105,5 ч./млн., соответствующих структурам Q4[Si(OSi)4] и Q3[Si(OSi)3OH], соответственно. Два пика также присутствуют в нижних областях, -66,2 и -56,1 ч./млн., которые могут быть присущи кремнию из структур T3[RSi(OSi)3] и T2[RSi(OSi)2OH]. Присутствие T видов в спектре подтверждает, что органический лиганд присоединен к неорганической структуре двуокиси кремния. 11B-ЯМР анализ соединения 14 также показывает сигналы, которые могут быть присущи трикоординированному и тетракоординированному бору.
Пролекарства Бортезомиба как составляющие микро- и наносистем доставки лекарственных средств: оценка стабильности пролекарства при различном pH
Линкерным агентом для прикрепления лекарственного средства к матрице, как показано выше, является 3-глицидоксипропилтриметоксисилан, который способен взаимодействовать с функциональной группой бороновой кислоты лекарственного средства и, одновременно, с мезопористым материалом.
Согласно этому подходу, лекарственное средство ковалентно связывается на поверхности двуокиси кремния мезопористого материала. Связь является стабильной при нейтральном pH и становится лабильной при слегка кислом pH (4,5-5,0), который обычно находят в клетке в эндосомах и лизосомах.
Эти характеристики (вместе с возможностью конъюгирования рецептор-специфического лиганда с системой) представляют систему как полностью потенциально способную к диффузии в кровотоке (без значительных потерь Бортезомиба), распознаваемую и поглощаемую опухолевыми клетками, которые сверхэкспрессируют рецепторы рецептор-специфического лиганда, с выделением лекарственного средства после кислотного гидролиза ковалентной связи.
Поведение описанной выше системы оценивается ВЭЖХ (высокоэффективной жидкостной хроматографией) в буферных растворах при pH 5,0 и pH 7,0, которая имитирует внутриклеточную среду и кровоток, соответственно.
Выделение Бортезомиба системой доставки лекарственного средства, содержащей пролекарство Бортезомиба (конъюгат двуокись кремния (SBA-15)/линкер/Бортезомиб).
Профиль выделения лекарственного средства из всей системы изучают через воспроизведение физиологических сред, с которыми она контактирует, ʺin vitroʺ. Поэтому выделение имитируют в растворе при нейтральном pH (ИЖТ) для имитации пути системы матрица-лекарственное средство в кровотоке до ее попадания в целевую клетку, и в кислом растворе при pH=5, который имитирует среду, присутствующую в эндосомах, внутриклеточных пузырьках, которые образуются после поглощения системы лекарственное средство-матрица эндоцитами.
Получение c-ИЖТ (искусственной жидкости тела)
c-ИЖТ представляет собой растворы, буферированные до различных значений pH, которые имитируют среду жидкостей тела.
В частности, применяют:
1) буферный раствор с pH 7, полученный из дигидрофосфата калия (KH2PO4) и гидроксида натрия (NaOH), воспроизводящий нейтральную среду плазмы крови.
2) буферный раствор с pH 4,4 на основе ацетата натрия и уксусной кислоты, который воспроизводит кислую среду лизосом, с которыми контактирует лекарственное средство после эндоцитоза.
Условия анализа ВЭЖХ (высокоэффективной жидкостной хроматографии)
Профиль выделения лекарственного средства оценивают ВЭЖХ с применением ацетонитрила/воды (30/70 об./об.) с 0,1% муравьиной кислоты в качестве элюента, и со скоростью потока 1,0 мл/мин. КФ датчик установлен на 270 нм.
Применяют колонку Lichrosorb RP18 TEKNOKROMA 10 мкм 25×0,46.
Объем вспрыскиваемых растворов составляет 1 микролитр, и образцы раствора в физиологических условиях получают с интервалом 30 минут в течение 12 часов.
Калибровочные кривые строят с применением трех буферных растворов, имеющих различные концентрации Бортезомиба. Лекарственное средство показало три различных пика при pH 5 в ВЭЖХ хроматограмме.
Второй и третий пики рассматриваются для целей оценки выделения лекарственного средства, так как их площадь линейно коррелируется с концентрацией стандартных растворов.
Присутствие двух различных пиков объясняется существованием двух форм Бортезомиба при рассматриваемых pH, которые имеют разное время элюирования, как показано на фигуре 4.
Значения, полученные при анализе растворов Бортезомиба в различных концентрациях, показаны в таблицах 1.1 и 2.1 для пиков, идентифицированных под номерами 2 и 3, соответственно, в хроматограмме, полученной при pH 5, показанной на фигуре 4. Калибровочные кривые, полученные из пиков 2 и 3, показаны на фигурах 5 и 6, соответственно.
Таблица 1.1 Значения площади под вторым пиком для раствора при pH 5
| Концентрация (ч./млн.) | Площадь пика (мка) |
| 4 | 1550 |
| 10 70 |
1829 9650 |
Таблица 2.1 Значения площади под третьим пиком для раствора при pH 5
| Концентрация (ч./млн.) | Площадь пика (мка) |
| 4 | 1674 |
| 10 70 |
1830 9173 |
Выделение Бортезомиба в кислой среде (буфер при pH=5)
Пролекарство, к которому относится изобретение (конъюгат двуокись кремния (SBA-15)/линкер/Бортезомиб), как таковое или как составляющая микро- или наноситетмы доставки лекарственного средства (в этом случае носитель на фигуре 1), представляет собой молекулу, способную выделять активную форму Бортезомиба при слегка кислом pH. Слегка кислый pH является характеристикой внутриклеточной среды так, что лекарственное средство может диффундировать в среду клетки, если она является первой средой со слегка кислым pH, с которой контактирует пролекарство или система, частью которой оно является, после поглощения эндоцитом после прохождения через кровоток при нейтральном pH. Эндосомы (внутриклеточные органеллы) фактически характеризуются слегка кислым pH, близким к значению 5, поэтому выделение образца конъюгата двуокись кремния (SBA-15)/линкер/Бортезомиб оценивают в растворе, воспроизводящем кислую среду эндосомы. Буфер уксусная кислота/ацетат натрия, полученный смешиванием 51 мл водного раствора 0,2 M уксусной кислоты, полученного из 99% уксусной кислоты (Carlo Erba), и 49 мл 0,2 M водного раствора ацетата натрия, применяют для этой цели. Последний получают добавлением 0,803 г ацетата натрия [CH3COONa] (Sigma Aldrich) в 49 мл ультрачистой H2O.
Образец, впрыскиваемый в хроматографическую колонку, получают растворением 4 мг материала SBA-BORT в 15 мл буферного раствора при pH, близком к значению 5, и перемешивают при температуре 37°C с получением наилучшего воспроизведения физиологических условий внутриклеточной среды.
В таблице 3.1 показаны концентрации Бортезомиб, показанные ВЭЖХ в буферном растворе при pH 5, относительные площади рассматриваемых пиков и количества, выраженные в граммах в различные интервалы времени.
На фигуре 7 показана ВЭЖХ хроматограмма во время тестирования выделения, проводимого в имитированной жидкости тела при pH 5.
Концентрации лекарственного средства в различные интервалы времени получают делением значения каждой площади под соответствующим пиком на значение градиента (y) калибровочной кривой.
В частности, концентрации, найденные во время первых 2,5 часов, получают исключительно из площадей под вторым пиком, так как третий начинает определяться только начиная с третьего часа. Оба пика, однако, рассматриваются в последующие моменты времени для того, чтобы получить конечное количество лекарственной формы из суммы концентраций, соответствующих всем отдельным площадям.
Как можно видеть из значений, показанных в таблице 3.1, концентрации лекарственного средства имеют тенденцию к постепенному увеличению в течение времени до приблизительно восьмого часа, и затем принимают примерно постоянные значения.
Выделение Бортезомиба в нейтральной среде (буфер при pH=7).
Чтобы продемонстрировать стабильность системы в среде с нейтральным pH, такой как кровоток, тестирование выделения проводят для образца SBA-BORT в среде, буферированной при pH 7 при температуре 37°C, имитируя кровоток.
KH2PO4/NaOH (дигидрофосфат калия/гидроксид натрия) буфер применяют для этой цели, полученный растворением 6,81 г дигидрофосфата калия в 291 мл 0,10M гидроксида натрия.
Таблица 3.1 Данные выделения SBA-BORT при pH=5 ко времени
| Время (часы) | Площадь (мка) 2-й пик | Площадь (мка) 3-й пик | Найденная концентрация BORT (ч./млн.) | Количество БОРТЕЗОМИБА, выделенное 4 мг матрицы |
| 1 | 6798 | // | 48,71 | 0,04871 мг |
| 2 | 7647 | // | 54,79 | 0,05479 мг |
| 3 | 6017 | 3500 | 69,42 | 0,06942 мг |
| 5 6 8 9 |
5581 5726 5778 5754 |
5394 5768 6404 6545 |
80,54 84,39 89,55 90,43 |
0,08054 мг 0,08439 мг 0,08955 мг 0,09043 мг |
Затем 4 мг образца SBA-BORT диспергируют в 15 мл буферного раствора. Смесь перемешивают в течение всего тестирования выделения при температуре 37°C.
Образцы указанной выше смеси берут каждые 30 минут для анализа ВЭЖХ. На фигуре 8 показана хроматограмма Бортезомиба в концентрации 50 ч./млн. в имитированной жидкости тела при pH 7.
Значения, полученные при анализе растворов Бортезомиба в разных концентрациях, показаны в таблице 4.1, относящейся к пику, идентифицированному под номером 1. Полученная калибровочная кривая показана на фигуре 9.
Таблица 4.1 Значения площади под пиком для раствора при pH 7
| Концентрация (ч./млн.) | Площадь пика (мка) |
| 10 | 46392 |
| 20 50 |
93083 181493 |
Из двух хроматограмм, показанных на фигуре 10 и фигуре 11 видно, что пик, идентифицированный под номером 1 на фигуре 8, практически отсутствует даже через 9 часов суспендирования в жидкости при pH 7.
В частности, никаких потерь из конъюгированной системы двуокись кремния (SBA-15)/линкер/Бортезомиб, которые могли бы быть определены ВЭЖХ, не наблюдается в течение приблизительно первых четырех часов.
В таблице 5.1 показаны данные выделения Бортезомиба при pH 7 ко времени
Количество Бортезомиба, выделенное из конъюгированной системы двуокись кремния (SBA-15)/линкер/Бортезомиб после ее нахождения в буферированном растворе в течение 9 часов, было приблизительно в 50 раз меньше, чем определялось в растворе, буферированном при pH 5 в течение того же периода времени.
На фигуре 12 показана динамика выделения Бортезомиба при двух разных значениях pH: в буфере при pH 5 и pH 7 ко времени.
Данные выделения, представленные на фигуре 12.1, позволяют сделать вывод, что система крайне стабильна в растворе, имитирующем плазму крови. В то время как система SBA-BORT оставалась в растворе вплоть до трех часов, применяемый метод не определил какое-либо присутствие лекарственного средства, после чего оно оставалось в значительной степени привязано к матрице мезопористой двуокиси кремния.
Данные экспериментов, относящихся к выделению Бортезомиба в кислой среде, показали, что значительные концентрации лекарственного средства присутствуют в растворе даже после того, как система SBA-BORT находилась в нем в течение незначительного времени, подтверждая лабильность связи боронового диэфира при слегка кислом pH.
Таблица 5.1 Данные выделения SBA-BORT при pH=7 ко времени
| Время (часы) | Площадь пика (мка) | Найденная концентрация BORT (ч./млн.) | Количество БОРТЕЗОМИБА, выделенное 4 мг матрицы |
| 1 | ~0 | ~0 | ~0 |
| 3 | ~0 | ~0 | ~0 |
| 4 | 4693 | 1,43 | 0,00143 мг |
| 6 7 9 |
5208 5365 5839 |
1,58 1,63 1,78 |
0,00158 мг 0,00163 мг 0,00178 мг |
Эксперименты с жизнеспособностью клеток
Эксперименты с жизнеспособностью клеток проводят на системах, включающих матрицу на основе неорганических оксидов, имеющую равномерную и контролируемую пористость, отличающуюся тем, что фолиевая кислота селективно сочетается с матрицей в качестве вещества, отвечающего за попадание и распознавание молекулы, и пролекарство Бортезомиба, прикрепленное в порах.
Для этой цели наночастицы мезопористой двуокиси кремния (MSN, также обозначенные выше как SBA) функционализируют фолиевой кислотой (с получением частиц, обозначенных как MSN-FOL) или фолиевой кислотой и Бортезомибом (последние обозначены как MSN-FOL/GPS-BTZ), получая более ʺзавершенныйʺ продукт в соответствии с данным изобретением, то есть микро-наносистему доставки лекарственного средства. В этом конкретном варианте, который был протестирован, линкером является функциональная группа глицидоксипропила (GPS).
Проводят эксперименты с обновлением и жизнеспособностью клеток. Потенциальную токсичность наночастиц определяют в экспериментах с жизнеспособностью клеток, которые показали, что они не являются токсичными вплоть до концентраций 3 мкг/105 клеток (не представленные результаты), и поэтому дальнейшие эксперименты проводились с соотношением MSN/количество клеток.
Наблюдения, проведенные с применением электронного микроскопа (ПЭМ), показали, что MSN-FOL успешно проникают в клетки HeLa, экспрессирующие высокие уровни FR даже через инкубирование в течение 1 часа, в основном расположенные в образованиях эндосом в цитоплазме (фигура 13).
Для определения того, могут ли наночастицы являться надежным инструментом для целевой терапии, MSN-FOL конъюгируют с Бортезомибом с применением pH-чувствительной системы (MSN-FOL/GPS-BTZ). Эти частицы затем разрабатывают в попытке получить противоопухолевое устройство, в котором применяется фолиевая кислота в качестве рецептор-специфического лиганда, исключительно отвечающего за распознавание FR-положительных клеток, и после эндоцитоза рецептора, медиированного MSN, pH-чувствительная система способна выделять лекарственное средство только в кислую среду эндолизосомальных полостей.
Токсичность/эффективность MSN-FOL/GPS-BTZ оценивают в экспериментах жизнеспособности клеток с применением теста вытеснения триптанового синего (см. раздел Материалы и способы). Явная остановка роста наблюдается уже через 1 день в клетках HeLa (FR-положительных), обработанных MSN-FOL/GPS-BTZ, по сравнению с контролем. Цитостатический эффект затем переходит в цитотоксический эффект на второй и, прежде всего, третий день обработки (фигура 14A). В подтверждение того, что токсичность достигается исключительно за счет присутствия BTZ, синтетические промежуточные соединения MSN-FOL и MSN-FOL/GPS, применяемые в качестве других отрицательных контролей, не показали значительного действия на пролиферацию клеток в любой из рассматриваемых моментов времени (фигура 14A).
Наоборот, клетки карциномы молочной железы MCF-7 и нормальные клетки почек эмбриона HEK293, которые являются FR-отрицательными колониями, не показали ингибирование роста после обработки MSN-FOL/GPS-BTZ по сравнению с контролем или образцами, обработанными MSN-FOL и MSN-FOL/GPS (фигуры 14B и 14C) (Morelli C., Maris P, Sisci D, Perrotta E, Brunelli E, Perrotta I, Panno ML, Tagarelli A, Versace C, Casula MF, Testa F, Andò S, Nagy JB, Pasqua L. PEG-templated mesoporous silica nanoparticles exclusively target cancer cells. Nanoscale. 2011 Aug;3(8):3198-207).
Полученные данные показали, что наши наночастицы мезопористой двуокиси кремния являются потенциальным носителем в области контролируемого выделения лекарственных средств, так как они могут быть селективно распознаны и поглощены только опухолевыми клетками, экспрессирующими FR, но не FR-отрицательными клетками (например, большинством нормальных клеток). Это позволяет выделять лекарственное средство в лизосомах (pH 4-5) и действовать только в целевых клетках, что позволяет значительно снизить побочные эффекты, возникающие из-за не селективного системного распределения.
Материалы и способы
Колонии клеток и условия культивирования
Клетки аденокарциномы шейки матки человека HeLa (American Type Culture Collection, ATCC, USA) и нормальные клетки почек эмбриона HEK293 культивируют в модифицированной по методу Дульбекко среде Игла (DMEM) с добавлением 10% фетальной телячьей сыворотки (ФТС); клетки карциномы молочной железы человека MCF-7 (Interlab Cell Line Collection, ICLC, Genoa, Italy) репродуцируют в DMEM:F12, содержащей 5% ФТС.
100 МЕ мл-1 пенициллина, 100 мкг мл-1 стрептомицина и 0,2 мМ L-глутамина добавляют в обе культуральные среды. Среды и реагенты получают из Gibco® (Thermo Fisher Scientific Inc.).
Просвечивающая электронная микроскопия (ПЭМ)
Клетки высевают в чашки Петри диаметром 60 мм для культивирования клеток и инкубируют при 37°C с MSN-FOL. Через 1 час инкубирования клетки промывают и собирают в физиологический раствор с фосфатным буфером (ФРФБ, Invitrogen, Italy) и центрифугируют при 14000 об./мин. Полученную лепешку затем сразу же закрепляют в ФРФБ с 3% глутаровым альдегидом (pH 7,4) в течение 2 часов, затем переносят в 3% раствор тетроксида осмия в течение еще 2 часов, обезвоживают на ацетоновом градиенте и, наконец, заливают Аралдитом (Fluka, Buchs, Switzerland). Ультратонкие срезы получают с помощью микротома, стратифицируют на 300 меш медной сетке, контрастируют цитратом свинца и ацетатом уранила и затем исследуют с применением электронного микроскопа ʺZeiss EM 900ʺ.
Эксперименты с жизнеспособностью клеток
Действие MSN, конъюгированного с Бортезомибом (BTZ), на пролиферацию клеток оценивают с применением способа вытеснения триптанового синего, окрашивающего агента, способного проникать через мембраны поврежденных или мертвых клеток (которые исключены из подсчета), но который не проникает через мембрану неповрежденных клеток (которые, наоборот, принимаются в расчет). Клетки, в экпоненциальной фазе роста, затем инокулируют в культуральную среду в 12-луночные планшеты в количестве 105 клеток/лунку, и выращивают в течение ночи. На следующий день клетки синхронизируют в безсывороточной питательной среде (SFM) для получения популяции клеток, которые находятся в одинаковой фазе цикла, тем самым избегая разницы в росте клеток. Через 24 часа 3 мкгg/105 MSN-FOL, MSN-FOL/GPS и MSN-FOL/GPS-BTZ клетки добавляют к клетками в течение 1 часа; затем среду меняют на свежую среду, в которую добавляют 5% ФТС, и клетки собирают через 1, 2 или 3 дня трипсинизацией и инкубируют в 0,5% растворе триптанового синего при температуре окружающей среды в течение 10 минут. Жизнеспособность клеток определяют микроскопически подсчетом клеток, которые не окрасились (живых клеток) с применением проточного цитометра (Burker, Brand, Germany).
Claims (27)
1. Производное общей формулы (II)
где Y и Z представляют собой -O-
и A является
где R1, R2, R3 независимо друг от друга представляют собой OCH3;
X представляет собой O;
n равно 3 и m равно 1.
2. Производное по п.1, в котором А представляет собой бидентатный лиганд, который выбирают из:
3-глицидоксипропилтриметоксисилана;
3-аминопропилтриметоксисилана;
3-(2-аминоэтиламино)пропилтриметоксисилана;
(N-[3-(триметоксисилил)пропил]этилендиамина);
3-[2-(2-аминоэтиламино)этиламино]пропилтриметоксисилана;
3-меркаптопропилтриметоксисилана;
3-глицидоксипропилтриметоксисилана;
аллилтриметоксисилана;
хлорметилтриметоксисилана;
(3-хлорпропил)триметоксисилана;
3-тиоцианатопропилтриметоксисилана.
3. Производное по любому из пп. 1-2, отличающееся тем, что оно химически стабильно при нейтральном pH, но расщепляется с выделением Бортезомиба при слегка кислом pH от 4,0 до 5,5, предпочтительно, 4,5-5,0.
4. Производное по любому из пп. 1-3 для применения в области фармацевтики для ингибирования хемотрипсиноподобной активности протеасомы 26S.
5. Система доставки для ингибирования хемотрипсиноподобной активности протеасомы 26S, содержащая производное формулы (II) по любому из пп. 1-4, прикрепленное к пористой неорганической матрице, причем неорганическая матрица представляет собой мезопористую двуокись кремния.
6. Система по п. 5, в которой неорганическая матрица содержит одну или более молекул, выбранных из веществ, отвечающих за доставку и молекулярное распознавание, и молекул, действующих как маркеры.
7. Система по п. 6, в которой вещество, отвечающее за доставку и молекулярное распознавание, выбирают из фолиевой кислоты, биотина, пептидов, антител, гликозидов, углеводородов, белков.
8. Система по п. 7, в которой маркером является флуоресцентный маркер, в частности, флуоресцеин или родамин.
9. Фармацевтическая композиция ингибирующая хемотрипсиноподобную активность протеасомы 26S, содержащая производное или систему по любому из пп. 1-8 вместе с фармацевтически приемлемым носителем.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| ITRM2015A000184 | 2015-04-29 | ||
| ITRM20150184 | 2015-04-29 | ||
| PCT/IT2016/000111 WO2016174693A1 (en) | 2015-04-29 | 2016-04-29 | Bortezomib-based delivery system |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2017135265A RU2017135265A (ru) | 2019-04-08 |
| RU2017135265A3 RU2017135265A3 (ru) | 2019-08-29 |
| RU2727156C2 true RU2727156C2 (ru) | 2020-07-21 |
Family
ID=53765345
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017135265A RU2727156C2 (ru) | 2015-04-29 | 2016-04-29 | Система доставки на основе бортезомиба |
Country Status (14)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US10239897B2 (ru) |
| EP (1) | EP3288955B1 (ru) |
| CN (1) | CN107660210B (ru) |
| AU (1) | AU2016255738B2 (ru) |
| BR (1) | BR112017023250B1 (ru) |
| CA (1) | CA2985311A1 (ru) |
| DK (1) | DK3288955T3 (ru) |
| ES (1) | ES2762989T3 (ru) |
| HK (1) | HK1250370A1 (ru) |
| HU (1) | HUE047207T2 (ru) |
| PL (1) | PL3288955T3 (ru) |
| PT (1) | PT3288955T (ru) |
| RU (1) | RU2727156C2 (ru) |
| WO (1) | WO2016174693A1 (ru) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108421043B (zh) * | 2018-02-11 | 2021-03-26 | 华东师范大学 | 一种可示踪的硼酸类纳米药物复合物及其制备方法和用途 |
| US11191836B2 (en) * | 2018-06-01 | 2021-12-07 | Tae Life Sciences, Llc | Biodegradable nanocarrier(s) (BPMOs) for neutron capture therapy and methods thereof |
| CN109045272A (zh) * | 2018-08-01 | 2018-12-21 | 厦门市壳聚糖生物科技有限公司 | 一种硼替佐米磷脂复合物及其制备方法与应用 |
| CN108635590B (zh) * | 2018-08-15 | 2021-05-18 | 内蒙古农业大学 | 一种pH响应的多糖–硼替佐米纳米球及其制备方法和应用 |
| CN109439723A (zh) * | 2018-11-30 | 2019-03-08 | 王瑞明 | 一种多层纳米复合粒子的毒性测试方法 |
| WO2020236253A1 (en) | 2019-05-20 | 2020-11-26 | Massachusetts Institute Of Technology | Boronic ester prodrugs and uses thereof |
| CN113444288B (zh) * | 2021-06-10 | 2022-06-07 | 南昌工程学院 | 一种具有可逆交联结构的二氧杂硼烷基团修饰钛酸钡及其制备方法 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2529800C2 (ru) * | 2010-03-18 | 2014-09-27 | ИННОФАРМА, Инк. | Стабильные составы бортезомиба |
| WO2014170628A1 (en) * | 2013-04-16 | 2014-10-23 | Cipla Limited | Process for the preparation of bortezomib mannitol ester |
-
2016
- 2016-04-29 DK DK16733715.3T patent/DK3288955T3/da active
- 2016-04-29 HU HUE16733715A patent/HUE047207T2/hu unknown
- 2016-04-29 RU RU2017135265A patent/RU2727156C2/ru active
- 2016-04-29 AU AU2016255738A patent/AU2016255738B2/en not_active Ceased
- 2016-04-29 WO PCT/IT2016/000111 patent/WO2016174693A1/en active Application Filing
- 2016-04-29 PT PT167337153T patent/PT3288955T/pt unknown
- 2016-04-29 CA CA2985311A patent/CA2985311A1/en not_active Abandoned
- 2016-04-29 ES ES16733715T patent/ES2762989T3/es active Active
- 2016-04-29 BR BR112017023250-2A patent/BR112017023250B1/pt active IP Right Grant
- 2016-04-29 PL PL16733715T patent/PL3288955T3/pl unknown
- 2016-04-29 CN CN201680024374.4A patent/CN107660210B/zh active Active
- 2016-04-29 EP EP16733715.3A patent/EP3288955B1/en active Active
- 2016-04-29 US US15/570,254 patent/US10239897B2/en active Active
-
2018
- 2018-07-30 HK HK18109821.6A patent/HK1250370A1/zh unknown
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2529800C2 (ru) * | 2010-03-18 | 2014-09-27 | ИННОФАРМА, Инк. | Стабильные составы бортезомиба |
| WO2014170628A1 (en) * | 2013-04-16 | 2014-10-23 | Cipla Limited | Process for the preparation of bortezomib mannitol ester |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2016174693A1 (en) | 2016-11-03 |
| RU2017135265A3 (ru) | 2019-08-29 |
| HUE047207T2 (hu) | 2020-04-28 |
| HK1250370A1 (zh) | 2018-12-14 |
| AU2016255738A1 (en) | 2017-10-26 |
| CN107660210B (zh) | 2020-07-03 |
| RU2017135265A (ru) | 2019-04-08 |
| US20180127441A1 (en) | 2018-05-10 |
| ES2762989T3 (es) | 2020-05-26 |
| BR112017023250B1 (pt) | 2023-09-26 |
| EP3288955B1 (en) | 2019-09-18 |
| EP3288955A1 (en) | 2018-03-07 |
| CA2985311A1 (en) | 2016-11-03 |
| US10239897B2 (en) | 2019-03-26 |
| PT3288955T (pt) | 2020-01-06 |
| BR112017023250A2 (pt) | 2018-08-07 |
| AU2016255738B2 (en) | 2020-10-15 |
| PL3288955T3 (pl) | 2020-04-30 |
| CN107660210A (zh) | 2018-02-02 |
| DK3288955T3 (da) | 2020-01-02 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2727156C2 (ru) | Система доставки на основе бортезомиба | |
| TWI394774B (zh) | Novel block copolymers, microcell modifiers, and anticancer agents that are useful as an active ingredient | |
| Nasrolahi Shirazi et al. | Cyclic peptide–selenium nanoparticles as drug transporters | |
| JP4717016B2 (ja) | Ｏ，ｏ’−アミドマロネートおよびｎ，ｏ−アミドマロネート白金錯体 | |
| US20030224037A1 (en) | Liposome preparation | |
| CA2994809A1 (en) | Silica-based biomolecule carrier, pharmaceutical composition comprising the same, preparation method and use thereof | |
| CN111888480A (zh) | 一种在活细胞表面锚定修饰纳米药物的方法 | |
| CN109498627A (zh) | 一种治疗肿瘤的药物组合物及其应用 | |
| ES2867398T3 (es) | Nanosistemas para el transporte controlado de moléculas activas con fines diagnósticos, pronósticos y terapéuticos | |
| WO2018140220A1 (en) | Nanocomplexes of polyanion-modified proteins | |
| CN112535735B (zh) | 一种可同时放大免疫原性细胞死亡以及增强抗肿瘤效果的联合用药物 | |
| CN111529486A (zh) | 一种基于pH/MMP响应的“可解离”纳米胶束的制备方法及应用 | |
| CN112274495B (zh) | 一种h2o2自供型过氧化钙负载姜黄素纳米粒的制备方法及其应用 | |
| CN113398276B (zh) | 脑胶质瘤靶向小檗碱与叶酸修饰的脂质材料的制备与应用 | |
| KR101323102B1 (ko) | 글리콜키토산-담즙산 복합체에 항암제가 봉입된 나노입자 및 그 제조방법 | |
| CN112641760B (zh) | 二茂铁-黄连素/吲哚美辛@葡萄糖氧化酶@透明质酸纳米药物、制备方法与应用 | |
| WO2022054207A1 (ja) | 複合体 | |
| CN104174024B (zh) | 一种肉豆蔻酸介导的脑靶向聚合物胶束递药系统及其制备方法和应用 | |
| CN114276390B (zh) | 一种用于抗肿瘤药物递送的二硫代氨基甲酸酯衍生物纳米药物及其制备方法与应用 | |
| US20230405136A1 (en) | New Combinations of Boron Compounds and Adjuvants for the Treatment of Pathophysiological Conditions and Cancer and for Muscle Regeneration | |
| CN115105605B (zh) | 一种主动靶向的抗肿瘤自组装纳米粒的制备及其应用 | |
| US20240261390A1 (en) | Vaccine for prevention or treatment of viral infection | |
| CA2446659C (en) | Agent for improving tissue penetration | |
| KR20020000227A (ko) | 간세포 특이적인 담체 및 이의 ｄｎａ와의 복합체 | |
| CN108239181A (zh) | 一种壳聚糖衍生物r6h6-cs、其制备方法及应用 |