CN109439723A - 一种多层纳米复合粒子的毒性测试方法 - Google Patents
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Abstract
一种多层纳米复合粒子的毒性测试方法，包括：步骤1：称取110mg的
Description
技术领域
本发明涉及一种多层纳米复合粒子的毒性测试方法。
背景技术
多层纳米粒子能用作药物的缓释，是精细化工领域的研究重点，本申请才用了全新的流程来合成多层纳米复合粒子，并给出了毒性测试方法。
发明内容
一种多层纳米复合粒子的毒性测试方法，包括：
步骤1：称取110mg的将其溶解于50mL无水乙醇中，再加入10ml的3-氨基丙基三乙氧基硅烷和5mL的烯丙基三乙氧基硅烷；
步骤2：避光条件下，揽拌反应24小时，将合成物放置待用；
步骤3：取20mL氨水和400mL乙醇置于三口烧瓶中，40℃恒温水浴，200rpm机械揽拌；
步骤4：半小时后，加入步骤2制得合成物0.16mL；
步骤5：加入0.5mL的正硅酸乙酯，继续揽拌十二小时后；
步骤6：加入5mg四氯化硅，20mL乙醚，置于冰浴中冷却；
步骤7：在搅拌下滴加5g无水乙醇；
步骤8：加完后在水浴上加热回流2h，冷却后，加入乙醇钠中和至中性；
步骤9：反应十二小时后，将产物通过离屯、分离得到荧光二氧化硅纳米粒子；
步骤10：取30mg步骤6合成的荧光二氧化硅纳米粒子，并将其分散于40mL去离子水和20mL乙醇的混合介质中，加入0.6mL氨水，将体系超声分散5min后置于35℃的恒温水浴中，200rpm机械揽拌，然后加入0.15g十六烷基三甲基溴化铵和0.2g的溴代十六烷；
步骤11：半小时后，加入5mL的正硅酸乙酯，继续揽拌6小时；
步骤12：反应结束后，通过离心分离得到多层纳米复合粒子；
步骤13：将测试细胞按照20000个/孔的密度铺在九十六孔板上，在37℃和8%的二氧化碳条件下培育24小时，分别加入不同浓度的步骤12制得的多层纳米复合粒子的溶液；
步骤14：24小时后，除去培养基，通过测定560nm的吸光度获得细胞的存活率。
本发明的多层纳米复合粒子用于药物缓释领域。
具体实施方式
实施例1
一种多层纳米复合粒子的毒性测试方法，包括：
步骤1：称取110mg的将其溶解于50mL无水乙醇中，再加入10ml的3-氨基丙基三乙氧基硅烷和5mL的烯丙基三乙氧基硅烷；
步骤2：避光条件下，揽拌反应24小时，将合成物放置待用；
步骤3：取20mL氨水和400mL乙醇置于三口烧瓶中，40℃恒温水浴，200rpm机械揽拌；
步骤4：半小时后，加入步骤2制得合成物0.16mL；
步骤5：加入0.5mL的正硅酸乙酯，继续揽拌十二小时后；
步骤6：加入5mg四氯化硅，20mL乙醚，置于冰浴中冷却；
步骤7：在搅拌下滴加5g无水乙醇；
步骤8：加完后在水浴上加热回流2h，冷却后，加入乙醇钠中和至中性；
步骤9：反应十二小时后，将产物通过离屯、分离得到荧光二氧化硅纳米粒子；
步骤10：取30mg步骤6合成的荧光二氧化硅纳米粒子，并将其分散于40mL去离子水和20mL乙醇的混合介质中，加入0.6mL氨水，将体系超声分散5min后置于35℃的恒温水浴中，200rpm机械揽拌，然后加入0.15g十六烷基三甲基溴化铵和0.2g的溴代十六烷；
步骤11：半小时后，加入5mL的正硅酸乙酯，继续揽拌6小时；
步骤12：反应结束后，通过离心分离得到多层纳米复合粒子；
步骤13：将测试细胞按照20000个/孔的密度铺在九十六孔板上，在37℃和8%的二氧化碳条件下培育24小时，分别加入不同浓度的步骤12制得的多层纳米复合粒子的溶液；
步骤14：24小时后，除去培养基，通过测定560nm的吸光度获得细胞的存活率。
本发明的多层纳米复合粒子用于药物缓释领域。
实施例2
一种多层纳米复合粒子的毒性测试方法，包括：
步骤1：称取120mg的将其溶解于50mL无水乙醇中，再加入10ml的3-氨基丙基三乙氧基硅烷和5mL的烯丙基三乙氧基硅烷；
步骤2：避光条件下，揽拌反应24小时，将合成物放置待用；
步骤3：取20mL氨水和400mL乙醇置于三口烧瓶中，40℃恒温水浴，200rpm机械揽拌；
步骤4：半小时后，加入步骤2制得合成物0.16mL；
步骤5：加入0.5mL的正硅酸乙酯，继续揽拌十二小时后；
步骤6：加入5mg四氯化硅，20mL乙醚，置于冰浴中冷却；
步骤7：在搅拌下滴加5g无水乙醇；
步骤8：加完后在水浴上加热回流2h，冷却后，加入乙醇钠中和至中性；
步骤9：反应十二小时后，将产物通过离屯、分离得到荧光二氧化硅纳米粒子；
步骤10：取30mg步骤6合成的荧光二氧化硅纳米粒子，并将其分散于40mL去离子水和20mL乙醇的混合介质中，加入0.6mL氨水，将体系超声分散5min后置于35℃的恒温水浴中，200rpm机械揽拌，然后加入0.15g十六烷基三甲基溴化铵和0.2g的溴代十六烷；
步骤11：半小时后，加入5mL的正硅酸乙酯，继续揽拌6小时；
步骤12：反应结束后，通过离心分离得到多层纳米复合粒子；
步骤13：将测试细胞按照20000个/孔的密度铺在九十六孔板上，在37℃和8%的二氧化碳条件下培育24小时，分别加入不同浓度的步骤12制得的多层纳米复合粒子的溶液；
步骤14：24小时后，除去培养基，通过测定560nm的吸光度获得细胞的存活率。
本发明的多层纳米复合粒子用于药物缓释领域。
实施例3
一种多层纳米复合粒子的毒性测试方法，包括：
步骤1：称取130mg的将其溶解于50mL无水乙醇中，再加入10ml的3-氨基丙基三乙氧基硅烷和5mL的烯丙基三乙氧基硅烷；
步骤2：避光条件下，揽拌反应24小时，将合成物放置待用；
步骤3：取20mL氨水和400mL乙醇置于三口烧瓶中，40℃恒温水浴，200rpm机械揽拌；
步骤4：半小时后，加入步骤2制得合成物0.16mL；
步骤5：加入0.5mL的正硅酸乙酯，继续揽拌十二小时后；
步骤6：加入5mg四氯化硅，20mL乙醚，置于冰浴中冷却；
步骤7：在搅拌下滴加5g无水乙醇；
步骤8：加完后在水浴上加热回流2h，冷却后，加入乙醇钠中和至中性；
步骤9：反应十二小时后，将产物通过离屯、分离得到荧光二氧化硅纳米粒子；
步骤10：取30mg步骤6合成的荧光二氧化硅纳米粒子，并将其分散于40mL去离子水和20mL乙醇的混合介质中，加入0.6mL氨水，将体系超声分散5min后置于35℃的恒温水浴中，200rpm机械揽拌，然后加入0.15g十六烷基三甲基溴化铵和0.2g的溴代十六烷；
步骤11：半小时后，加入5mL的正硅酸乙酯，继续揽拌6小时；
步骤12：反应结束后，通过离心分离得到多层纳米复合粒子；
步骤13：将测试细胞按照20000个/孔的密度铺在九十六孔板上，在37℃和8%的二氧化碳条件下培育24小时，分别加入不同浓度的步骤12制得的多层纳米复合粒子的溶液；
步骤14：24小时后，除去培养基，通过测定560nm的吸光度获得细胞的存活率。
本发明的多层纳米复合粒子用于药物缓释领域。
实施例4
一种多层纳米复合粒子的毒性测试方法，包括：
步骤1：称取140mg的将其溶解于50mL无水乙醇中，再加入10ml的3-氨基丙基三乙氧基硅烷和5mL的烯丙基三乙氧基硅烷；
步骤2：避光条件下，揽拌反应24小时，将合成物放置待用；
步骤3：取20mL氨水和400mL乙醇置于三口烧瓶中，40℃恒温水浴，200rpm机械揽拌；
步骤4：半小时后，加入步骤2制得合成物0.16mL；
步骤5：加入0.5mL的正硅酸乙酯，继续揽拌十二小时后；
步骤6：加入5mg四氯化硅，20mL乙醚，置于冰浴中冷却；
步骤7：在搅拌下滴加5g无水乙醇；
步骤8：加完后在水浴上加热回流2h，冷却后，加入乙醇钠中和至中性；
步骤9：反应十二小时后，将产物通过离屯、分离得到荧光二氧化硅纳米粒子；
步骤10：取30mg步骤6合成的荧光二氧化硅纳米粒子，并将其分散于40mL去离子水和20mL乙醇的混合介质中，加入0.6mL氨水，将体系超声分散5min后置于35℃的恒温水浴中，200rpm机械揽拌，然后加入0.15g十六烷基三甲基溴化铵和0.2g的溴代十六烷；
步骤11：半小时后，加入5mL的正硅酸乙酯，继续揽拌6小时；
步骤12：反应结束后，通过离心分离得到多层纳米复合粒子；
步骤13：将测试细胞按照20000个/孔的密度铺在九十六孔板上，在37℃和8%的二氧化碳条件下培育24小时，分别加入不同浓度的步骤12制得的多层纳米复合粒子的溶液；
步骤14：24小时后，除去培养基，通过测定560nm的吸光度获得细胞的存活率。
本发明的多层纳米复合粒子用于药物缓释领域。
实施例5
一种多层纳米复合粒子的毒性测试方法，包括：
步骤1：称取150mg的将其溶解于50mL无水乙醇中，再加入10ml的3-氨基丙基三乙氧基硅烷和5mL的烯丙基三乙氧基硅烷；
步骤2：避光条件下，揽拌反应24小时，将合成物放置待用；
步骤3：取20mL氨水和400mL乙醇置于三口烧瓶中，40℃恒温水浴，200rpm机械揽拌；
步骤4：半小时后，加入步骤2制得合成物0.16mL；
步骤5：加入0.5mL的正硅酸乙酯，继续揽拌十二小时后；
步骤6：加入5mg四氯化硅，20mL乙醚，置于冰浴中冷却；
步骤7：在搅拌下滴加5g无水乙醇；
步骤8：加完后在水浴上加热回流2h，冷却后，加入乙醇钠中和至中性；
步骤9：反应十二小时后，将产物通过离屯、分离得到荧光二氧化硅纳米粒子；
步骤10：取30mg步骤6合成的荧光二氧化硅纳米粒子，并将其分散于40mL去离子水和20mL乙醇的混合介质中，加入0.6mL氨水，将体系超声分散5min后置于35℃的恒温水浴中，200rpm机械揽拌，然后加入0.15g十六烷基三甲基溴化铵和0.2g的溴代十六烷；
步骤11：半小时后，加入5mL的正硅酸乙酯，继续揽拌6小时；
步骤12：反应结束后，通过离心分离得到多层纳米复合粒子；
步骤13：将测试细胞按照20000个/孔的密度铺在九十六孔板上，在37℃和8%的二氧化碳条件下培育24小时，分别加入不同浓度的步骤12制得的多层纳米复合粒子的溶液；
步骤14：24小时后，除去培养基，通过测定560nm的吸光度获得细胞的存活率。
本发明的多层纳米复合粒子用于药物缓释领域。
Claims (2)
1.一种多层纳米复合粒子的毒性测试方法，包括：
步骤1：称取110mg的将其溶解于50mL无水乙醇中，再加入10ml的3-氨基丙基三乙氧基硅烷和5mL的烯丙基三乙氧基硅烷；
步骤2：避光条件下，揽拌反应24小时，将合成物放置待用；
步骤3：取20mL氨水和400mL乙醇置于三口烧瓶中，40℃恒温水浴，200rpm机械揽拌；
步骤4：半小时后，加入步骤2制得合成物0.16mL；
步骤5：加入0.5mL的正硅酸乙酯，继续揽拌十二小时后；
步骤6：加入5mg四氯化硅，20mL乙醚，置于冰浴中冷却；
步骤7：在搅拌下滴加5g无水乙醇；
步骤8：加完后在水浴上加热回流2h，冷却后，加入乙醇钠中和至中性；
步骤9：反应十二小时后，将产物通过离屯、分离得到荧光二氧化硅纳米粒子；
步骤10：取30mg步骤6合成的荧光二氧化硅纳米粒子，并将其分散于40mL去离子水和20mL乙醇的混合介质中，加入0.6mL氨水，将体系超声分散5min后置于35℃的恒温水浴中，200rpm机械揽拌，然后加入0.15g十六烷基三甲基溴化铵和0.2g的溴代十六烷；
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步骤14：24小时后，除去培养基，通过测定560nm的吸光度获得细胞的存活率。
2.本发明的多层纳米复合粒子用于药物缓释领域。
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Legal Events
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| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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