RU2659155C1 - Способ сбора и первичного посева жидкости назального лаважа от пациентов с муковисцидозом для микробиологического исследования - Google Patents
Способ сбора и первичного посева жидкости назального лаважа от пациентов с муковисцидозом для микробиологического исследования Download PDFInfo
- Publication number
- RU2659155C1 RU2659155C1 RU2017122649A RU2017122649A RU2659155C1 RU 2659155 C1 RU2659155 C1 RU 2659155C1 RU 2017122649 A RU2017122649 A RU 2017122649A RU 2017122649 A RU2017122649 A RU 2017122649A RU 2659155 C1 RU2659155 C1 RU 2659155C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- agar
- lavage fluid
- nasal
- hours
- incubated
- Prior art date
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/483—Physical analysis of biological material
- G01N33/487—Physical analysis of biological material of liquid biological material
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине и может быть использовано для сбора и первичного посева жидкости назального лаважа пациентов с муковисцидозом для проведения микробиологического исследования. Для этого полость носа промывается стерильным 1,5-2% раствором NaCl с помощью индивидуального назального душа с последующим сбором свободно вытекающей лаважной жидкости в стерильный одноразовый контейнер. Собранный материал транспортируется в лабораторию не позднее 2 ч после сбора и вортексирируется. Посев 200 мкл собранного материала производят стерильным тампоном на 5 питательных сред, включающих 5% кровяной агар, шоколадный агар, универсальную хромогенную среду, селективную среду для Burkholderia cepacia (OFPBL-агар), а также агар Сабуро с использованием техники посева «газоном». Чашки с 5% кровяным агаром, универсальной хромогенной средой инкубируются в термостате при температуре 37°С в течение 24-48 ч с ежедневным просмотром посевов. Чашки с шоколадным агаром инкубируются при 35°С в атмосфере 5-7% СО2 в течение 24-48 ч с ежедневным просмотром посевов. Засеянные чашки с селективной средой для Burkholderia cepacia (OFPBL-агар) и агаром Сабуро инкубируются 24-48 ч при температуре 37°С, далее инкубируются до 14 сут при комнатной температуре с ежедневным просмотром посевов, их последующей идентификацией и пересчетом КОЕ на 1 мл лаважной жидкости. Изобретение обеспечивает адекватное получение биоматериала из жидкости назального лаважа больных муковисцидозом с последующей качественной и количественной оценкой микробиоценоза назальных пазух пациента. 1 пр.
Description
Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к медицине, а именно к микробиологии, и может быть использовано для сбора и первичного посева жидкости назального лаважа, собранной от пациентов с муковисцидозом для проведения микробиологического исследования.
Уровень техники
Известны способы сбора и первичного посева жидкости назального лаважа от пациентов с муковисцидозом для микробиологического исследования с использованием 10 мл 0,9% раствора NaCl с последующим сбором вытекающей лаважной жидкости в стерильный контейнер и посевом на питательные среды; с использованием 5 мл 0,9% раствора NaCl с последующим сбором вытекающей лаважной жидкости либо ее аспирацией в стерильный контейнер; с использованием эндоскопического забора материала из параназальных пазух с введением 5 мл стерильного 0,9% раствора NaCl в каждый носовой ход с последующей аспирацией через в стерильный пластиковый контейнер, с последующим посевом на питательные среды: шоколадный агар, кровяной агар с азтреонамом и колистином, селективный агар для Burkholderia cepacia (ВС-агар), CLED-агар и агар Сабуро.
Известен способ сбора и первичного посева жидкости назального лаважа от пациентов с муковисцидозом для микробиологического исследования, основанный на введении в каждую носовую полость пациента по 10 мл 0,9% раствора NaCl с последующим самостоятельным сбором вытекающей жидкости назального лаважа пациентом в стерильный контейнер с последующим посевом на питательные среды в соответствии с немецким стандартом по микробиологической диагностике при муковисцидозе [J.G. Mainz, L. Naehrlich et al. Concordant genotype of upper and lower airways P. aeruginosa and S. aureus isolates in cystic fibrosis / Thorax 2009; 64:535-540].
Недостатками данного способа является малый объем свободно вытекающей промывной жидкости, который может быть недостаточен для проведения исследования, а также изотоничность применяемого раствора, что может не в полной мере отражать микробиологическую картину в параназальных пазухах ввиду отсутствия градиента осмотического давления.
Известен способ сбора жидкости назального лаважа, основанный на введении в каждый носовой ход по 5 мл стерильного 0,9% раствора NaCl, с последующим нахождением пациента в таком положении в течение 3-5 с; при этом для сбора материала опускают голову пациента вперед, чтобы жидкость вылилась из носовых ходов в стерильный одноразовый контейнер или аспирируют жидкость введением резинового дренажа в каждую ноздрю [МУ 4.2.2039-05. Техника сбора и транспортирования биоматериалов в микробиологические лаборатории].
Недостатками данного метода является малый объем свободно вытекающей промывной жидкости, который может быть недостаточен для проведения исследования, а также изотоничность применяемого раствора, что может не в полной мере отражать микробиологическую картину в параназальных пазухах ввиду отсутствия градиента осмотического давления с учетом повышенной вязкости отделяемого секрета при муковисцидозе.
За прототип принимается метод сбора и первичного посева жидкости назального лаважа от пациентов с муковисцидозом для микробиологического исследования, основанный на эндоскопическом заборе материала из параназальных пазух с введением 5 мл стерильного 0,9% раствора NaCl в каждый носовой ход, с последующей аспирацией через 10 с в стерильный пластиковый контейнер, с последующим посевом на питательные среды: шоколадный агар, кровяной агар с азтреонамом и колистином, селективный агар для Burkholderia cepacia (ВС-агар), CLED-агар и агар Сабуро с инкубацией при 37°С до 7 сут с просмотром посевов каждые 8-16 ч [M.C. Berkhout, E. Rijntjes et al. Importance of bacteriology in upper airways of patients with Cystic Fibrosis / Journal of Cystic Fibrosis 12 (2013) 525-529].
Недостатками данного метода является необходимость эндоскопического забора материала, что значительно ограничивает возможности его использования для большинства пациентов с муковисцидозом.
Раскрытие изобретения
Задачей изобретения является получение адекватного по качественному и количественному составу биоматериала из жидкости назального лаважа пациентов с муковисцидозом с последующим получением в первичном посеве максимально возможного по широте спектра выделенных возбудителей с использованием минимального количества питательных сред.
Это достигается тем, что в отличие от известных способов сбора и первичного посева жидкости назального лаважа от пациентов с муковисцидозом для микробиологического исследования используется промывание полостей носа стерильным 1,5-2% раствором NaCl с помощью индивидуального назального душа с последующим сбором свободно вытекающей лаважной жидкости в стерильный одноразовый контейнер, последующим вортексированием и первичным посевом 200 мкл выделенной жидкости на 5 питательных сред, включающих в себя 5% кровяной агар, шоколадный агар, универсальную хромогенную среду, селективную среду для Burkholderia cepacia (OFPBL- агар), а также агар Сабуро.
Осуществление изобретения
Сущность предложенного метода заключается в следующем: полость носа промывается стерильным 1,5-2% раствором NaCl с помощью индивидуального назального душа с последующим сбором свободно вытекающей лаважной жидкости в стерильный одноразовый контейнер; собранный материал транспортируется в лабораторию не позднее 2 ч после сбора, вортексирируется, после этого производится посев 200 мкл собранного материала стерильным тампоном на 5 питательных сред, включающих в себя 5% кровяной агар, шоколадный агар, универсальную хромогенную среду, селективную среду для Burkholderia cepacia (OFPBL-агар), а также агар Сабуро с использованием техники посева «газоном». Затем засеянные чашки с 5% кровяным агаром, универсальной хромогенной средой инкубируются в термостате при температуре 37°С в течение 24-48 ч с ежедневным просмотром посевов. Чашки с шоколадным агаром инкубируются при 35°С в атмосфере 5-7% СО2 в течение 24-48 ч с ежедневным просмотром посевов. Засеянные чашки с селективной средой для Burkholderia cepacia (OFPBL-arap) и агаром Сабуро инкубируются 24-48 ч при температуре 37°С, далее инкубируются до 14 сут при комнатной температуре с ежедневным просмотром посевов. Затем осуществляется идентификация и пересчет выросших КОЕ на 1 мл лаважной жидкости.
Изобретенная методика позволяет получать точные качественные и количественные характеристики состояния микробиоценоза назальных пазух пациентов с муковисцидозом.
Это может быть необходимо для проведения регулярного микробиологического мониторинга пациентов с муковисцидозом с целью ранней профилактики развития бактериальных осложнений нижних дыхательных путей, а также для статистических исследований в рамках ведения ежегодного единого Регистра больных муковисцидозом в Российской Федерации [проект Регистр больных муковисцидозом Российской Федерации одобрен Комитетов по Этике ФГБНУ «МГНЦ» 20 декабря 2012 г.].
В предложенном способе сбора и первичного посева жидкости назального лаважа от пациентов с муковисцидозом для микробиологического исследования предусмотрены следующие отличия - использование гипертонического раствора NaCl в концентрации 1,5-2% позволяет более эффективно осуществлять сбор биоматериала ввиду создания градиента осмотического давления с учетом повышенной вязкости отделяемого секрета при муковисцидозе, при этом не создает дискомфорта для пациента при осуществлении процедуры; кроме этого, метод сбора материала является доступным и легко воспроизводимым в амбулаторных условиях для большинства пациентов; использование указанного набора питательных сред и способа первичного посева позволяет выявить в исследуемом образце максимальное количество микроорганизмов, а также определить их количественное содержание в 1 мл.
Claims (1)
- Способ сбора и первичного посева жидкости назального лаважа от пациентов с муковисцидозом для микробиологического исследования. отличающийся тем, что полость носа промывается стерильным 1,5-2% раствором NaCl с помощью индивидуального назального душа с последующим сбором свободно вытекающей лаважной жидкости в стерильный одноразовый контейнер; собранный материал транспортируется в лабораторию не позднее 2 ч после сбора, вортексирируется, после этого производится посев 200 мкл собранного материала стерильным тампоном на 5 питательных сред, включающих в себя 5% кровяной агар, шоколадный агар, универсальную хромогенную среду, селективную среду для Burkholderia cepacia (OFPBL- агар), а также агар Сабуро с использованием техники посева «газоном»; затем засеянные чашки с 5% кровяным агаром, универсальной хромогенной средой инкубируются в термостате при температуре 37°С в течение 24-48 ч с ежедневным просмотром посевов; чашки с шоколадным агаром инкубируются при 35°С в атмосфере 5-7% СО2 в течение 24-48 ч с ежедневным просмотром посевов; засеянные чашки с селективной средой для Burkholderia cepacia (OFPBL- агар) и агаром Сабуро инкубируются 24-48 ч при температуре 37°С, далее инкубируются до 14 сут при комнатной температуре с ежедневным просмотром посевов; затем осуществляется идентификация и пересчет выросших КОЕ на 1 мл лаважной жидкости.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2017122649A RU2659155C1 (ru) | 2017-06-27 | 2017-06-27 | Способ сбора и первичного посева жидкости назального лаважа от пациентов с муковисцидозом для микробиологического исследования |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2017122649A RU2659155C1 (ru) | 2017-06-27 | 2017-06-27 | Способ сбора и первичного посева жидкости назального лаважа от пациентов с муковисцидозом для микробиологического исследования |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2659155C1 true RU2659155C1 (ru) | 2018-06-28 |
Family
ID=62815324
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2017122649A RU2659155C1 (ru) | 2017-06-27 | 2017-06-27 | Способ сбора и первичного посева жидкости назального лаважа от пациентов с муковисцидозом для микробиологического исследования |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2659155C1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2779689C1 (ru) * | 2022-03-01 | 2022-09-12 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ сбора биоматериала для микробиологического исследования при проведении стоматологического обследования пациентов с муковисцидозом |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2523888C1 (ru) * | 2013-01-31 | 2014-07-27 | Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Воронежская государственная медицинская академия им. Н.Н. Бурденко" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ прогнозирования динамики течения муковисцидоза, выявленного путем неонатального скрининга |
RU2559541C2 (ru) * | 2009-06-05 | 2015-08-10 | Интедженкс Инк. | Универсальная система подготовки образцов и применение в интегрированной системе анализа |
-
2017
- 2017-06-27 RU RU2017122649A patent/RU2659155C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2559541C2 (ru) * | 2009-06-05 | 2015-08-10 | Интедженкс Инк. | Универсальная система подготовки образцов и применение в интегрированной системе анализа |
RU2523888C1 (ru) * | 2013-01-31 | 2014-07-27 | Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Воронежская государственная медицинская академия им. Н.Н. Бурденко" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ прогнозирования динамики течения муковисцидоза, выявленного путем неонатального скрининга |
Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
BERKHOUT M.C. et al, Importance of bacteriology in upper airways of patients with Cystic Fibrosis, J. of Cystic Fibrosis, 2013, 12, рр. 525-529 найдено в Интернете 11.05.2018 [on line] на сайте https://ac.els-cdn.com/S156919931300009X/1-s2.0-S156919931300009X-main.pdf?_tid=30dc4346-642e-4168-81c9-4af8a9bd7a80&acdnat=1526033866_9c73da0fef0d72ba7c9aaf8bd193207f;. * |
BERKHOUT M.C. et al, Importance of bacteriology in upper airways of patients with Cystic Fibrosis, J. of Cystic Fibrosis, 2013, 12, рр. 525-529 найдено в Интернете 11.05.2018 [on line] на сайте https://ac.els-cdn.com/S156919931300009X/1-s2.0-S156919931300009X-main.pdf?_tid=30dc4346-642e-4168-81c9-4af8a9bd7a80&acdnat=1526033866_9c73da0fef0d72ba7c9aaf8bd193207f;. ШАГИНЯН И.А. и др., Муковисцидоз: определение, диагностические критерии, терапия, Педиатр, 2016, VII, 1б стр. 80-96, найдено в Интернете 11.05.2018 [on line] на сайте https://cyberleninka.ru/article/v/konsensus-mukovistsidoz-opredelenie-diagnosticheskie-kriterii-terapiya-razdel-mikrobiologiya-i-epidemiologiya-hronicheskoy. HENTSCHEL J. et al, Influences of nasal lavage collection-, processing- and storage methods on inflammatory markers - Evaluation of a method for non-invasive sampling of epithelial lining fluid in cystic fibrosis and other respiratory diseases, J. of Immunological Methods, 2014, 404, 1, pp. 41-51, найдено в Ин * |
HENTSCHEL J. et al, Influences of nasal lavage collection-, processing- and storage methods on inflammatory markers - Evaluation of a method for non-invasive sampling of epithelial lining fluid in cystic fibrosis and other respiratory diseases, J. of Immunological Methods, 2014, 404, 1, pp. 41-51, найдено в Интернете 11.05.2018 [on line] на сайте https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0022175913003670?via%3Dihub. * |
ШАГИНЯН И.А. и др., Муковисцидоз: определение, диагностические критерии, терапия, Педиатр, 2016, VII, 1б стр. 80-96, найдено в Интернете 11.05.2018 [on line] на сайте https://cyberleninka.ru/article/v/konsensus-mukovistsidoz-opredelenie-diagnosticheskie-kriterii-terapiya-razdel-mikrobiologiya-i-epidemiologiya-hronicheskoy. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2779689C1 (ru) * | 2022-03-01 | 2022-09-12 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ сбора биоматериала для микробиологического исследования при проведении стоматологического обследования пациентов с муковисцидозом |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Moffett et al. | Centralized gonococcus culture for dispersed clinics | |
CN101177668B (zh) | 淋球菌培养基及其制备方法 | |
RU2659155C1 (ru) | Способ сбора и первичного посева жидкости назального лаважа от пациентов с муковисцидозом для микробиологического исследования | |
CN104560715A (zh) | 基于微流控芯片培养及检测肺癌细胞的方法 | |
RU2668406C1 (ru) | Способ первичного посева биоматериала, выделенного из нижних дыхательных путей пациентов с муковисцидозом | |
Al-Salihi et al. | Bacterial infection of diabetic foot ulcer | |
RU2732222C1 (ru) | Способ диагностики бактериемии | |
RU2190220C1 (ru) | Способ выявления микобактерий туберкулеза | |
RO134677A0 (ro) | Metodă de testare a infecţiei urinare cu escherichia coli şi sistem in vitro pentru aplicarea acesteia | |
CN106176719B (zh) | 可皆霉素在制备抗炎药物中的应用 | |
RU2794355C1 (ru) | Способ первичного посева отделяемого из пародонтальных карманов | |
RU2818369C1 (ru) | Способ оценки сохранения жизнеспособности лактобактерий при воздействии различных концентраций антисептика | |
RU2401862C2 (ru) | Способ выделения энтерококков из свежевзятого патологического материала | |
RU2739402C2 (ru) | Способ выявления микобактерий туберкулеза из контаминированных тканей | |
RU2784053C1 (ru) | Способ первичного посева при микробиологическом исследовании у пациенток с патологией шейки матки | |
RU2724856C1 (ru) | Способ подготовки и посева атеросклеротической бляшки для микробиологического исследования | |
ES2966679T3 (es) | Métodos y composiciones para mejorar la detección de microorganismos | |
Vignesh et al. | Iodine-glycerol as an alternative to lactophenol cotton blue for identification of fungal elements in clinical laboratory | |
RU2485183C1 (ru) | Способ диагностики кандидоза верхних дыхательных путей у работников агропромышленного комплекса | |
Antony | Study of Biofilm forming capacity of pathogens involved in Chronic Rhinosinusitis | |
RU2332671C2 (ru) | Способ прогнозирования хронического течения урогенитальной гонококковой инфекции | |
RU2203957C2 (ru) | Способ выявления микобактерий | |
Rai et al. | Elevated expression of miR-223 and miR-21 in Helicobacter pylori induced gastric cancer patients | |
Omar | Prevalence and Gender Related Etiology of Asymptomatic Bacteriuria in Medical Student of the Libyan International Medical University | |
RU2261903C1 (ru) | ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ Mycoplasma hominis И СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ УРОГЕНИТАЛЬНЫХ МИКОПЛАЗМОЗОВ |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20190628 |