RU2779689C1 - Способ сбора биоматериала для микробиологического исследования при проведении стоматологического обследования пациентов с муковисцидозом - Google Patents

Способ сбора биоматериала для микробиологического исследования при проведении стоматологического обследования пациентов с муковисцидозом Download PDF

Info

Publication number
RU2779689C1
RU2779689C1 RU2022105519A RU2022105519A RU2779689C1 RU 2779689 C1 RU2779689 C1 RU 2779689C1 RU 2022105519 A RU2022105519 A RU 2022105519A RU 2022105519 A RU2022105519 A RU 2022105519A RU 2779689 C1 RU2779689 C1 RU 2779689C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
dental
biomaterial
patients
collected
examination
Prior art date
Application number
RU2022105519A
Other languages
English (en)
Inventor
Мария Сергеевна Сабурова
Ольга Владимировна Кондратенко
Артем Викторович Лямин
Михаил Александрович Постников
Оксана Евгеньевна Симановская
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации filed Critical Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации
Application granted granted Critical
Publication of RU2779689C1 publication Critical patent/RU2779689C1/ru

Links

Abstract

Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии и микробиологии, и предназначено для использования при сборе биоматериала для микробиологического исследования при проведении стоматологического обследования пациентов с муковисцидозом. Производят взятие материала с поверхности слизистой оболочки щеки, с поверхности спинки языка стерильными пластиковыми зондами с ватным тампоном вращательным движением производится сбор биоматериала; с щечной поверхности первых моляров верхней челюсти и язычной поверхности центральных резцов нижней челюсти стоматологическим скалером производится снятие минерализованных и неминерализованных зубных отложений; выделенный из выводных протоков околоушных и подъязычных слюнных желез слева и справа секрет собирается стерильным пластиковыми зондами; эндодонтическим бумажным штифтом размера 15.02 производится сбор десневой жидкости или экссудата из пародонтального кармана; все собранные пробы биоматериала помещаются в предварительно промаркированные пробирки с жидкой тиогликолевой средой. Способ за счет сбора материала с восьми различных локусов полости рта позволяет улучшить диагностику инфекционных стоматологических осложнений, повысить качество обследования у пациентов с муковисцидозом. 3 пр.

Description

Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии и микробиологии, и может быть использовано для сбора биоматериала для микробиологического исследования при проведении стоматологического обследования пациентов с муковисцидозом.
Уровень техники
Известны способы взятия проб материала для изучения микроорганизмов полости рта при котором материал берут тонкими ватными турундами на корневых иглах или плотно скрученными из ваты шариками диаметром от 2 до 5 мм, предварительно простерилизованными в чашках Петри или бумажных пакетиках суховоздушным методом; способ взятия проб материала для микробиологических исследований полости рта и устройство для его осуществления; способ исследования тканей пародонта; способ сбора и первичного посева жидкости назального лаважа от пациентов с муковисцидозом для микробиологического исследования.
Известен способ взятия проб материала для микробиологических исследований полости рта и устройство для его осуществления. Суть способа заключается в том, что пробы на микрофлору берут с локальных участков слизистой оболочки и зубных протезов непосредственно в стерилизованные металлические гильзы с находящейся там питательной средой. Устройство для взятия проб материала для микробиологических исследований полости рта содержит простерилизованную емкость, которая выполнена в виде металлической гильзы, помещенной в гильзодержатель, соединенный с головкой, ручкой, при этом ручка соединена с хвостовиком головки резьбой с возможностью осевого поворота, гильзодержатель прикреплен к головке шарнирно. Головка выполнена упругой с возможностью регулировки трения в шарнире, а гильза имеет элемент локализации пробы в виде носика с острыми краями. Шарнирные соединения головки с гильзодержателем выполнены в виде полукольцевой упругой пластины, внутри которой на двух полуосях подвешен гильзодержатель, при этом одна из осей снабжена резьбой регулировочным винтом [Патент РФ № 2101692].
Недостатками данного способа являются технические сложности, связанные с необходимостью наличия указанного в способе аппарата для сбора проб, а также расходных материалов для него.
Известен способ исследования тканей пародонта. Суть способа заключается в том, что осуществляют забор десневой жидкости из десневых карманов и под опорными элементами несъемных конструкций, при их наличии, с помощью полоски из высокогигроскопичного поролона с развитой впитывающей поверхностью и размерами: длина - 7-10 мм, ширина - 1,8-2,2 мм, толщина - 0,8-1,5 мм. Захват поролоновых полосок осуществляют пинцетом стоматологическим, содержащим две пружинящие бранши с захватными губками в виде округлых пластинок на их рабочих концах и имеющих продолжение бранш в виде шеек с поперечными размерами, меньшими поперечных размеров бранш, и ориентированием обеих шеек в одну сторону под углом, величина которого ограничена величинами от 100° до 145° по отношению к горизонтальному направлению бранш. На предметные стекла помещают несколько нативных проб десневой жидкости, фиксируют цитограммы отпечатков в нескольких полях зрения и обеспечивают сохранность их изображений для последующих сравнений с образцами из библиотеки эталонов ЭВМ [Патент РФ № 2299437].
Недостатками данного способа является отсутствие возможности проведения микробиологического исследования исследуемых образцов, ограничение возможностей исследования рамками микроскопического метода, а также необходимостью наличия программного обеспечения для ЭВМ.
Известен способ сбора и первичного посева жидкости назального лаважа от пациентов с муковисцидозом для микробиологического исследования. Суть способа заключается в том, что полость носа промывается стерильным 1,5-2% раствором NaCl с помощью индивидуального назального душа с последующим сбором свободно вытекающей лаважной жидкости в стерильный одноразовый контейнер. Собранный материал транспортируется в лабораторию не позднее 2 ч после сбора и вортексирируется. Посев 200 мкл собранного материала производят стерильным тампоном на 5 питательных сред, включающих 5% кровяной агар, шоколадный агар, универсальную хромогенную среду, селективную среду для Burkholderia cepacia (OFPBL-агар), а также агар Сабуро с использованием техники посева «газоном». Чашки с 5% кровяным агаром, универсальной хромогенной средой инкубируются в термостате при температуре 37°С в течение 24-48 ч с ежедневным просмотром посевов. Чашки с шоколадным агаром инкубируются при 35°С в атмосфере 5-7% СО2 в течение 24-48 ч с ежедневным просмотром посевов. Засеянные чашки с селективной средой для Burkholderia cepacia (OFPBL-агар) и агаром Сабуро инкубируются 24-48 ч при температуре 37°С, далее инкубируются до 14 сут. при комнатной температуре с ежедневным просмотром посевов, их последующей идентификацией и пересчетом КОЕ на 1 мл лаважной жидкости. Изобретение обеспечивает адекватное получение биоматериала из жидкости назального лаважа больных муковисцидозом с последующей качественной и количественной оценкой микробиоценоза назальных пазух пациента
[Патент РФ № 2659155].
Недостатками данного метода является отсутствие возможности сбора материала из локусов полости рта пациентов с мковисцидозом.
За прототип принимается способ взятия проб материала для изучения микроорганизмов полости рта, при котором материал берут тонкими ватными турундами на корневых иглах или плотно скрученными из ваты шариками диаметром от 2 до 5 мм, предварительно простерилизованными в чашках Петри или бумажных пакетиках суховоздушным методом. Стандартные условия стерилизации: 165-170°C (не выше, иначе слои бумаги и ваты могут стать хрупкими) в течение 1 ч, или 155-160°C в течение 2 ч. Турунду или ватный шарик непосредственно перед взятием пробы слегка увлажняют прикосновением к стерильному физраствору в пробирке. Немедленно после взятия пробы турунду, снятую пинцетом с корневой иглы, ватный шарик опускают в пробирку с питательной средой. Далее изучают микробную флору слюны [журнал "Стоматология", N 4, М.1971, с. 57-60, авт. Кускова В.Ф. Ребреева Л.И.].
Недостатками данного метода является технически сложная подготовка инструмента для взятия проб, а также отсутствие схемы сбора материала при стоматологическом обследовании пациентов с муковисцидозом с четким обозначением исследуемых локусов для сбора проб.
Раскрытие изобретения
Задачей изобретения является улучшение диагностики инфекционных стоматологических осложнений путем сбора материала с восьми различных локусов полости рта для повышения качества обследования у пациентов с муковисцидозом. Технический результат изобретения заключается в том, что заявленный способ сбора материала позволяет повысить вероятность выделения возбудителей, имеющих значение как в развитии стоматологических заболеваний, таких как Capnocytophaga spp., Eikenella spp., Veilonella spp., Actinomyces spp., Aggregatibacter spp, Streptococcus spp., Porphyromonas spp., так и выявить в полости рта потенциально возможные локусы для первичной адаптации значимых для развития бронхолегочных осложнений при муковисцидозе возбудителей, таких как Pseudomonas spp., Burkholderia spp., Acinetobacter spp., Stenotrophomonas spp., Achromobacter spp., Chryseobacterium spp., Brevundimonas spp., Inquilinus spp., Kingella spp., Staphylococcus spp., Mycobacterium spp.
Это достигается тем, что в отличие от известных способов сбора биоматериала для микробиологического исследования при проведении стоматологического обследования пациентов с муковисцидозом, производится взятие материала с восьми локусов полости рта, включая: жидкость десневой борозды или пародонтнального кармана, секрет выводных протоков правых и левых околоушной и подъязычной слюнных желез, поверхности слизистой оболочки щеки, спинки языка, материал фрагментов зубных отложений.
Осуществление изобретения
Сущность предложенного метода заключается в следующем: с поверхности слизистой оболочки щеки, с поверхности спинки языка стерильными пластиковыми зондами с ватным тампоном вращательным движением производится сбор биоматериала; с щечной поверхности первых моляров верхней челюсти и язычной поверхности центральных резцов нижней челюсти стоматологическим скалером производится снятие минерализованных и неминерализованных зубных отложений; выделенный из выводных протоков околоушных и подъязычных слюнных желез слева и справа секрет собирается стерильным пластиковыми зондами; эндодонтическим бумажным штифтом размера 15.02 производится сбор десневой жидкости или экссудата из пародонтального кармана; все собранные пробы биоматериала помещаются в предварительно промаркированные пробирки с жидкой тиогликолевой средой.
Предлагаемый способ позволяет получать более точные качественные и количественные характеристики состояния микробиоценоза полости рта пациентов с муковисцидозом для улучшения качества стоматологического обследования, прогнозирования рисков развития стоматологических заболеваний, а также проведения комплекса профилактических мероприятий у данной группы пациентов.
Это может быть необходимо для проведения регулярного стоматологического мониторинга пациентов с муковисцидозом, как находящихся в группе риска по развитию инфекционных осложнений полости рта ввиду генетических особенностей заболевания, а также осложнений проводимой терапии.
В предложенном способе сбора биоматериала для микробиологического исследования при проведении стоматологического обследования пациентов с муковисцидозом предусмотрены следующие отличия: использование расширенного перечня локусов для сбора материала, включающих в себя жидкость десневой борозды или пародонтального кармана, секрет выводных протоков правых и левых околоушной и подъязычной слюнных желез, поверхности слизистой оболочки щеки, спинки языка, материал фрагментов зубных отложений позволяет выявлять при проведении стоматологического обследования не только возбудителей, имеющих значение в развитии стоматологических заболеваний, таких как Capnocytophaga spp., Eikenella spp., Veilonella spp., Actinomyces spp., Aggregatibacter spp., Streptococcus spp., Porphyromonas spp., но и выявить в полости рта потенциально возможные локусы для первичной адаптации значимых для развития бронхолегочных осложнений при муковисцидозе возбудителей, таких как Pseudomonas spp., Burkholderia spp., Acinetobacter spp., Stenotrophomonas spp., Achromobacter spp., Chryseobacterium spp., Brevundimonas spp., Inquilinus spp., Kingella spp., Staphylococcus spp., Mycobacterium spp.
Осуществление предлагаемого способа можно продемонстрировать на следующих примерах пациентов.
Figure 00000001
Figure 00000002
Предлагаемый нами способ был апробирован на 45 пациентах с муковисцидозом Самарской области. В результате проведенного исследования были получены следующие результаты.
Локус Микрофлора, имеющая значение в развитии стоматологических заболеваний (в %, доля пациентов) Микрофлора, имеющая значение при муковисцидозе
(в %, доля пациентов)
ОТДЕЛЯЕМОЕ ДЕСНЕВОЙ БОРОЗДЫ 48,9% 17,8%
СЕКРЕТ ВЫВОДНОГО ПРОТОКА ПРАВОЙ ПОДЪЯЗЫЧНОЙ СЛЮННОЙ ЖЕЛЕЗЫ 37,8% 20,0%
СЕКРЕТ ВЫВОДНОГО ПРОТОКА ЛЕВОЙ ПОДЪЯЗЫЧНОЙ СЛЮННОЙ ЖЕЛЕЗЫ 42,2% 15,6%
СЕКРЕТ ВЫВОДНОГО ПРОТОКА ПРАВОЙ ОКОЛОУШНОЙ СЛЮННОЙ ЖЕЛЕЗЫ 40,0% 11,1%
СЕКРЕТ ВЫВОДНОГО ПРОТОКА ЛЕВОЙ ОКОЛОУШНОЙ СЛЮННОЙ ЖЕЛЕЗЫ 33,3% 13,3%
МАТЕРИАЛ ЗУБНЫХ ОТЛОЖЕНИЙ 26,7% 8,9%
МАЗОК СО СПИНКИ ЯЗЫКА 22,2% 33,3%
МАЗОК СО СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ ЩЕКИ 26,7% 31,1%
Итого суммарно при использовании способа посева с 8 локусов 64,4% 55,6%
Из представленной таблицы видно, что использование предлагаемого нами способа повышает вероятность выявления клинически значимых штаммов микроорганизмов у пациентов с муковисцидозом, что способствует улучшению качества обследования пациентов с муковисцидозом.
Таким образом, использование предлагаемого нами способа сбора материала для микробиологического исследования позволяет повысить вероятность выявления микроорганизмов, имеющих значение в развитии стоматологических заболеваний, а также возбудителей бактериальных осложнений дыхательных путей при муковисцидозе.

Claims (1)

  1. Способ сбора биоматериала для микробиологического исследования при проведении стоматологического обследования пациентов с муковисцидозом, отличающийся тем, что производится взятие материала с поверхности слизистой оболочки щеки, с поверхности спинки языка стерильными пластиковыми зондами с ватным тампоном вращательным движением производится сбор биоматериала; с щечной поверхности первых моляров верхней челюсти и язычной поверхности центральных резцов нижней челюсти стоматологическим скалером производится снятие минерализованных и неминерализованных зубных отложений; выделенный из выводных протоков околоушных и подъязычных слюнных желез слева и справа секрет собирается стерильным пластиковыми зондами; эндодонтическим бумажным штифтом размера 15.02 производится сбор десневой жидкости или экссудата из пародонтального кармана; все собранные пробы биоматериала помещаются в предварительно промаркированные пробирки с жидкой тиогликолевой средой.
RU2022105519A 2022-03-01 Способ сбора биоматериала для микробиологического исследования при проведении стоматологического обследования пациентов с муковисцидозом RU2779689C1 (ru)

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2779689C1 true RU2779689C1 (ru) 2022-09-12

Family

ID=

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2299437C1 (ru) * 2006-01-10 2007-05-20 Медицинская Клиника "Медстом" Общество С Ограниченной Ответственностью Medical Firm "Medstom" Способ исследования состояния пародонта
WO2010141921A1 (en) * 2009-06-05 2010-12-09 Integenx Inc. Universal sample preparation system and use in an integrated analysis system
RU2607046C2 (ru) * 2015-05-29 2017-01-10 Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственная фирма ДНК-Технология" (ООО "НПФ ДНК-Технология") Способ оценки обсемененности пародонта патогенными бактериями с применением полимеразной цепной реакции в реальном времени
RU2659155C1 (ru) * 2017-06-27 2018-06-28 Ольга Владимировна Кондратенко Способ сбора и первичного посева жидкости назального лаважа от пациентов с муковисцидозом для микробиологического исследования

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2299437C1 (ru) * 2006-01-10 2007-05-20 Медицинская Клиника "Медстом" Общество С Ограниченной Ответственностью Medical Firm "Medstom" Способ исследования состояния пародонта
WO2010141921A1 (en) * 2009-06-05 2010-12-09 Integenx Inc. Universal sample preparation system and use in an integrated analysis system
RU2607046C2 (ru) * 2015-05-29 2017-01-10 Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственная фирма ДНК-Технология" (ООО "НПФ ДНК-Технология") Способ оценки обсемененности пародонта патогенными бактериями с применением полимеразной цепной реакции в реальном времени
RU2659155C1 (ru) * 2017-06-27 2018-06-28 Ольга Владимировна Кондратенко Способ сбора и первичного посева жидкости назального лаважа от пациентов с муковисцидозом для микробиологического исследования

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Gold et al. The prevalence of enterococci in the human mouth and their pathogenicity in animal models
Newman et al. Predominant cultivable microbiota in periodontosis
Doyle et al. Evaluation of the microbiology of chronic ethmoid sinusitis
Paranjpe et al. Efficacy of the self-adjusting file system on cleaning and shaping oval canals: a microbiological and microscopic evaluation
Singletary et al. Dark‐field microscopic monitoring of subgingival bacteria during periodontal therapy
Rutar et al. Retrospective assessment of clinical and microbiological factors affecting periimplant tissue conditions
Beltrami et al. The effect of supragingival plaque control on the composition of the subgingival microflora in human periodontitis
BUDTZ‐JÖRGENSEN et al. Method for studying the development, structure and microflora of denture plaque
Hayes et al. Evaluation of two bronchofiberscopic methods of culturing the lower respiratory tract
Engström et al. Experiences of bacteriological root canal control
Thilo et al. Dark-field observation of the bacterial distribution in root canals following pulp necrosis
Arpağ et al. Presence of Trichomonas tenax and Entamoeba gingivalis in peri-implantitis lesions
RU2779689C1 (ru) Способ сбора биоматериала для микробиологического исследования при проведении стоматологического обследования пациентов с муковисцидозом
Flatauer et al. Fiberoptic bronchoscopy in bacteriologic assessment of lower respiratory tract secretions: Importance of microscopic examination
Joyce Sputum analysis and culture
RU85332U1 (ru) Заборник пробы содержимого зубодесневого кармана и/или зубодесневой борозды для микробиологического исследования
Krasse Serendipity or luck: stumbling on gingival crevicular fluid
Alin et al. The bacterial flora of odontogenic infections and its sensitivity to antibiotics
Kaufman et al. The microbiologic approach in endodontics
Oates et al. Polyester sponge swabs to facilitate examination for genital infection in women.
MAW et al. Are the tonsils and adenoids a reservoir of infection in otitis media with effusion (glue ear)?
Ulrich Technics of skin sampling for microbial contaminants
Kidd et al. Relevance of the use of rubber dam in microbiological sampling of carious dentine
CN215227865U (zh) 一种呼吸科咽拭子取样器械
Browne et al. A method for sampling the cavity wall/material interface for microbiological culture