RU2732222C1 - Способ диагностики бактериемии - Google Patents
Способ диагностики бактериемии Download PDFInfo
- Publication number
- RU2732222C1 RU2732222C1 RU2019119090A RU2019119090A RU2732222C1 RU 2732222 C1 RU2732222 C1 RU 2732222C1 RU 2019119090 A RU2019119090 A RU 2019119090A RU 2019119090 A RU2019119090 A RU 2019119090A RU 2732222 C1 RU2732222 C1 RU 2732222C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- hemofilter
- blood
- patients
- liquid
- media
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
- C12Q1/04—Determining presence or kind of microorganism; Use of selective media for testing antibiotics or bacteriocides; Compositions containing a chemical indicator therefor
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- External Artificial Organs (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к бактериологии, микологии, реаниматологии и интенсивной терапии, и касается способа выявления бактериальных и грибковых возбудителей нозокомиальных инфекций из крови больных с подозрением на сепсис. Способ предусматривает микробиологическое исследование гемофильтра, используемого при экстракорпоральной детоксикации больным с сепсисом, и включает несколько последовательных этапов. Жидкость из использованного гемофильтра высевается на стандартный набор питательных микробиологических сред. Далее в гемофильтр заливается стерильный физиологический раствор и он помещается в термостат на 24 часа. Производится повторный высев этой жидкости на питательные среды. В случае роста микроорганизмов производится их идентификация. Способ прост при осуществлении, высокоэффективен, осуществляется без использования дополнительного дорогостоящего оборудования, универсален, может использоваться в любой бактериологической лаборатории. 1 ил., 1 табл., 1 пр.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к бактериологии, микологии, реаниматологии и интенсивной терапии и касается способа выявления бактериальных и грибковых возбудителей нозокомиальных инфекций из крови больных с подозрением на сепсис.
Известен способ выявления бактериемии при использовании заводских флаконов для посева крови (фирмы BD, Bio Merieux и др.), в которые осуществляется забор крови для дальнейшей инкубации в бактериологическом геманализаторе. При наличии роста микроорганизмов производится высев на стандартные питательные среды с последующей идентификацией возбудителя. Высеваемость микроорганизмов из крови при сепсисе колеблется в пределах от 10,8% до 29% по данным анализа в Онкологическом центре за 12 лет или от 30 до 50% по данным зарубежных авторов [Багирова Н.С., Дмитриева Н.В. Бактериемия истинная и ложная: значение критериев оценки клинической зничимости положительной гемокультуры. Клиническая лабораторная диагностика. Том 60,8, 2015, с. 55-61. Weinstein MP, Reller LB, Murphy JR, Lichtenstein KA. The clinical significance of positive blood cultures: a comprehensive analysis of 500 episodes of bacteremia and fungemia in adults I. Laboratory and epidemiologic observations. Rev Infect Dis. 1983 Jan-Feb;5(l):35-53.]
Этот способ является наиболее близким аналогом к предлагаемому нами новому способу диагностики бактериемии и принят за прототип.
Недостатками данного способа являются:
- большой процент (до 50%) ложно-положительных результатов вследствие нарушения технологии забора крови (микробная контаминация вследствие неадекватной обработки флаконов, кожи рук и пр.);
- недостаточное количество крови для исследования может приводить к ложно-отрицательным результатам в более чем 46% случаев. Вероятность выделения положительной гемокультуры находится в прямой зависимости от количества исследуемой крови. Оптимальным является исследование 60 мл крови с сутки у взрослого (у ребенка - в зависимости от веса), которое не всегда возможно выполнить. Количество крови, набираемой во флакон должно быть строго определенным - 10 мл. При превышении этого количества возможно проявление бактерицидного действия крови, при недостаточном количестве - меньше шансов попадания микроорганизма во флакон. Как следствие всего этого - отсутствие роста микроорганизма во флаконе;
- несоблюдение временного фактора забора крови: следует производить забор при повышении температуры тела и на высоте лихорадки, что часто на практике не выполнимо.
Задачей заявляемого изобретения является создание нового способа диагностики (выявления?) бактериемии, более эффективного и связанного с меньшим количеством ложных результатов.
Технический результат. Заявляемый способ прост в исполнении, высокоэффективен, осуществляется без использования дополнительного дорогостоящего оборудования, универсален, может использоваться в любой бактериологической лаборатории.
Задача решается тем, что заявляемый способ включает микробиологическое исследование гемофильтра, используемого в процессе экстракорпоральной детоксикации больным с подозрением на сепсис. Содержимое (жидкость) из использованного гемофильтра высевают на стандартный набор жидких и твердых питательных микробиологических сред. В гемофильтр заливают стерильный физиологический раствор, затем его помещают в термостат на 24 часа, после чего производят повторный высев этой жидкости на те же питательные среды. В случае роста микроорганизмов производят их идентификация и определение антибиотикочувствительности.
Изобретение иллюстрируется фигурой и таблицей.
На фигуре представлено строение гемофильтра CVVHF, используемого при разработке данного способа. Верхней стрелкой обозначена точка входа крови; нижней - точка выхода крови; боковыми - точка выхода и точка входа замещающего раствора.
На таблице представлен рост микроорганизмов из гемофильтра до и после инкубации в течение 24 часов.
Заявляемый способ осуществляется следующим образом.
Гемофильтрацию больным с сепсисом выполняют на сертифицированном оборудовании (Multifiltrat (Fresenius) и др.) с использованием стандартных наборов KIT 4 и KIT 8. Продолжительность каждой процедуры составляет от 8 до 24 часов. Скорость кровотока в процессе гемофильтрации составляет 200-240 мл/мин, что соответствует прохождению через гемофильтр 120-144 л крови за 10 часов процедуры. Постоянный контакт крови больного с полупроницаемой мембраной гемофильтра обеспечивает осаждение на ней микроорганизмов или проникновение их в замещающий раствор в случае бактериемии (полупроницаемая мембрана гемофильтра пропускает частицы массой до 60 КДа, масса микроорганизмов колеблется от 30 до 114 КДа). По окончании процедуры гемофильтр помещают в стерильный пакет, запаковывают и доставляют в бактериологическую лабораторию. В ламинарном шкафу колонку протирают дезинфицирующим раствором над лотком. Подписывают три контейнера - N/N 1, 2, 3. Точку входа крови (фиг.) колонки открывают над контейнером N 1, сливают в него остаточную кровь (или элементы крови), промывают 5 мл физиологического раствора, снимают сгусток крови при его наличии и также опускают в контейнер, после чего добавляют в точку входа около 5 мл физиологического раствора и закрывают. Аналогичные действия производят с точкой выхода крови из колонки, используя контейнер N 2. В контейнер N 3 сливают фильтрат из точек входа замещающего раствора и выхода фильтрата. Из всех контейнеров делается высев на микробиологические твердые питательные среды - среда Эндо, Маннит-солевой агар, среда Сабуро и кровяной агар. Содержимое контейнеров заливают сердечно-мозговым экстрактом в соотношении 1:1. Колонку в новом стерильном пакете, посевы и контейнеры помещают в термостат на 24 часа при Т 37°С (оптимальная температура для роста большинства микроорганизмов). Через 24 часа делают повторный высев из контейнеров NN 1, 2, 3, а также из точек входа и выхода крови колонки на те же питательные среды, после чего колонка утилизируется, согласно установленным правилам. Одновременно изучаются результаты посева на средах от 1-го дня. При наличии роста производится идентификация выросшего микроорганизма и определяется его чувствительность к антибиотикам. Все посевы при отсутствии роста через 24 часа инкубируются до 5 суток с ежедневным анализом посевов.
Исследованию подлежали 23 гемофильтра (табл.), полученные после гемофильтрации в 16 случаях (5 больным гемофильтрация проводилась неоднократно по медицинским показаниям). 9 больным гемофильтрация выполнялась в связи с верифицированным (клиническими признаками, уровень прокальцитонина колебался от 4 до 200 нг/мл) сепсисом, 7 случаев составили контрольную группу: роста микроорганизмов при обследовании больных или гемофильтрата получено не было ни в одном случае
Описание опытной группы (16 случаев гемофильтрации, 13 больных).
В течение суток до начала гемофильтрации проводили бактериологический анализ крови из периферической вены/катетера. Из 16 случаев проведения гемофильтрации в 3-х случаях бактериологический анализ крови не проводили. Из оставшихся 13 - в 5 случаях (38,5%) - роста микрофлоры из крови получено не было. Рост был получен в 8 (61,5%) случаях и представлен 8 микроорганизмами.
До инкубации колонки (контейнеры 1-3) получен рост 8 (NN 1, 2, 3, 10, 6 и 8- по 2 контейнера) микроорганизмов, в то время как после инкубации колонки - 11 микроорганизмов (8-11, 16 по 2 контейнера). В 3-х случаях микроорганизмы выросли только до инкубации. В 1 (N 6) случае A.baumannii выросла до инкубации и из контейнера N 3 - содержащего фильтрат. Этот факт обращает внимание на вероятность прохождения микроорганизма через поры фильтра. В 2-х случаях микроорганизмы выросли только после инкубации (NN 9 и 16). До инкубации роста не отмечено.
Таким образом, в целом при полном бактериологическом анализе гемофильтров получен рост 18 микроорганизмов, в то время как в прототипе - только 8. Рост отмечен во всех исследуемых колонках в части случаев до, в части после инкубации. В первых 6 случаях инкубация фильтров не проводилась и результаты получены только до инкубации.
Выводы
1. Выделенные микроорганизмы из крови и из колонок совпадали.
2. Полное (до и после инкубации) бактериологическое исследование гемофильтров может быть дополнительным методом выявления случаев бактериемии у больных с подозрением на сепсис.
3. При суммарной оценке обоих способов выделения микроорганизмов из крови результат составил 75% (12 из 16 случаев). Это значительно превышает результаты прототипа.
Claims (1)
- Способ диагностики бактериемии при экстракорпоральной детоксикации больным с сепсисом путем микробиологического исследования используемого гемофильтра, при этом жидкость из использованного гемофильтра высевают на стандартный набор жидких и твердых питательных микробиологических сред, после чего в гемофильтр заливают стерильный физиологический раствор, помещают в термостат при 37°С на 24 часа, производят повторный высев этой жидкости на питательные среды, изучают результаты посевов на средах и при наличии роста микроорганизмов осуществляют их идентификацию.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2019119090A RU2732222C1 (ru) | 2019-06-19 | 2019-06-19 | Способ диагностики бактериемии |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2019119090A RU2732222C1 (ru) | 2019-06-19 | 2019-06-19 | Способ диагностики бактериемии |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2732222C1 true RU2732222C1 (ru) | 2020-09-14 |
Family
ID=72516448
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2019119090A RU2732222C1 (ru) | 2019-06-19 | 2019-06-19 | Способ диагностики бактериемии |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2732222C1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2780280C1 (ru) * | 2021-11-17 | 2022-09-21 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр трансплантологии и искусственных органов имени академика В.И. Шумакова" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ диагностики бактериемии, ассоциированной с грамотрицательными микроорганизмами, у реципиентов сердца или легких |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2098486C1 (ru) * | 1995-06-23 | 1997-12-10 | Наталья Михайловна Каргальцева | Способ диагностики бактериемии |
RU2217499C2 (ru) * | 2002-02-15 | 2003-11-27 | Мержвинский Иван Анатольевич | Способ выявления бактериемии при подозрении на сепсис |
-
2019
- 2019-06-19 RU RU2019119090A patent/RU2732222C1/ru active
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2098486C1 (ru) * | 1995-06-23 | 1997-12-10 | Наталья Михайловна Каргальцева | Способ диагностики бактериемии |
RU2217499C2 (ru) * | 2002-02-15 | 2003-11-27 | Мержвинский Иван Анатольевич | Способ выявления бактериемии при подозрении на сепсис |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
БАГИРОВА Н.С. Бактериемия истинная и ложная: значение критериев оценки клинической значимости положительной гемокультуры, Клиническая лабораторная диагностика, 2015, N 8, с.55-61. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2780280C1 (ru) * | 2021-11-17 | 2022-09-21 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр трансплантологии и искусственных органов имени академика В.И. Шумакова" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ диагностики бактериемии, ассоциированной с грамотрицательными микроорганизмами, у реципиентов сердца или легких |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Aneja | Experiments in microbiology, plant pathology and biotechnology | |
Weinstein | Current blood culture methods and systems: clinical concepts, technology, and interpretation of results | |
JP4047391B2 (ja) | 不純物のない全血に基づいたミクロ病理学的患者レプリカ | |
KR20140015512A (ko) | 시험 샘플에서 황색포도상구균의 존재 또는 부재를 검출하기 위한 방법 및 배지 | |
US20180230508A1 (en) | Device and method for treating fluids, particularly body fluids | |
Karapetyan | In vitro cultivation of Giardia duodenalis | |
CN106868094A (zh) | 一种原料乳中抗生素残留的快速检测方法 | |
RU2732222C1 (ru) | Способ диагностики бактериемии | |
JPH0242972A (ja) | 生物試料採集および輸送用具 | |
Armstrong | Time-concentration relationships of isoniazid with tubercle bacilli in vitro | |
Blair | Laboratory diagnosis of staphylococcal infections | |
RU2785461C1 (ru) | Экспресс-метод определения чувствительности грамотрицательных бактерий к бактериофагам | |
CN104922939B (zh) | 一种凝胶层析柱的清洗方法 | |
CN104922938B (zh) | 一种亲和层析柱的清洗方法 | |
Myhre et al. | A rapid method for determining the sterility of frozen‐reconstituted blood | |
Gangadharam et al. | Dynamic aspects of the sterilizing action of isoniazid on Mycobacterium tuberculosis | |
Corper | A tissue substrate microculture for tubercle bacilli | |
Eyre | The bacillus diphtheriae in milk | |
RU2650863C1 (ru) | Сердечно-мозговая питательная среда для диагностики инфекции в кровотоке и способ ее получения | |
RU2350656C2 (ru) | Способ определения зараженности продовольствия патогенными биологическими агентами в условиях чрезвычайных ситуаций | |
Abbas et al. | Detection of cefoxitin resistant Staphylococcus aureus in Khartoum Hospitals, Sudan, 2011 | |
RU2289813C2 (ru) | Способ выявления форм трихомонад | |
Eyre et al. | Discussion On Vaccine-Therapy | |
Cruickshank | Sir Alexander Fleming | |
Roddy | Medical bacteriology |