RU2261903C1 - ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ Mycoplasma hominis И СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ УРОГЕНИТАЛЬНЫХ МИКОПЛАЗМОЗОВ - Google Patents

ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ Mycoplasma hominis И СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ УРОГЕНИТАЛЬНЫХ МИКОПЛАЗМОЗОВ Download PDF

Info

Publication number
RU2261903C1
RU2261903C1 RU2004108163/13A RU2004108163A RU2261903C1 RU 2261903 C1 RU2261903 C1 RU 2261903C1 RU 2004108163/13 A RU2004108163/13 A RU 2004108163/13A RU 2004108163 A RU2004108163 A RU 2004108163A RU 2261903 C1 RU2261903 C1 RU 2261903C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
cat
medium
usa
nutrient medium
becton dickinson
Prior art date
Application number
RU2004108163/13A
Other languages
English (en)
Inventor
Г.А. Шипулин (RU)
Г.А. Шипулин
В.М. Безруков (RU)
В.М. Безруков
Original Assignee
Общество с ограниченной ответственностью "ИнтерЛабСервис"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Общество с ограниченной ответственностью "ИнтерЛабСервис" filed Critical Общество с ограниченной ответственностью "ИнтерЛабСервис"
Priority to RU2004108163/13A priority Critical patent/RU2261903C1/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2261903C1 publication Critical patent/RU2261903C1/ru

Links

Abstract

Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано для культивирования Mycoplasma hominis и диагностики урогенитальных микоплазмозов путем выделения микоплазм из клинического материала. Питательная среда для выявления Mycoplasma hominis содержит питательную основу, стимуляторы роста, аргинин, лошадиную сыворотку и дистиллированную воду. В качестве питательной основы она содержит сердечно-мозговую вытяжку и триптозу, в качестве стимуляторов роста - дрожжевой экстракт и среду 199, и в качестве селективных добавок - антибиотики, и индикатор. Предложенный способ диагностики инфекций, вызываемых Mycoplasma hominis, включает введение питательной среды, способствующей обнаружению возбудителей заболеваний, в лунки культурального планшета, исследуемого материала, индикатора и вещества, создающего анаэробные условия и анализ изменения цвета питательной среды. В качестве питательной среды используют питательную среду вышеоговоренного качественного и количественного состава компонентов. Способ диагностики прост в постановке, не требует специального оборудования, позволяет проводить как выявление, так и идентификацию возбудителей, определить степень обсемененности и спектр чувствительности к различным антибактериальным препаратам, оценить эффективность проведенного лечения. Использование питательной среды позволяет упростить состав, повысить скорость и точность способа диагностики микоплазменной инфекции за счет повышения чувствительности среды. 2 н. и 2 з.п. ф-лы, 4 табл.

Description

Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано для культивирования Mycoplasma hominis и диагностики урогенитальных микоплазмозов путем выделения микоплазм из клинического материала.
Этиологическая структура урогенитальных инфекций постоянно меняется. В последнее время резко возросла частота хламидийной, вирусной, микоплазменной, уреаплазменной и смешанной инфекций, борьба с которыми представляет значительные трудности в связи с развивающейся устойчивостью к антибиотикам и особенностями ответных реакций организма.
Лабораторная диагностика играет решающую роль в распознавании урогенитальных микоплазмозов. Это тем более важно, что среди людей широко распространено бессимптомное носительство. До недавнего времени традиционными методами являлись бактериологический и серологический методы.
Техногенные и другие неблагоприятные экологические и социальные факторы снижают популяционный иммунитет населения, ведут к росту иммунодефицитных состояний и изменению структуры инфекционной патологии. Отмечается увеличение заболеваемости инфекциями, передаваемыми половым путем, в том числе новыми или ранее недостаточно известными. Появление большого числа новых диагностических препаратов и методов требует оптимизации лабораторной диагностики урогенитальных инфекций.
Наибольшую диагностическую ценность имеют методы выявления возбудителей и их антигенов. Указанное определяется рядом особенностей урогенитальных инфекций и их возбудителей: их широким распространением и длительностью циркуляции антител после перенесенной инфекции (особенно IgG-антител, выявляемых в иммуноферментном анализе (ИФА)), наличием хронических и латентных форм, частыми микст-инфекциями, высокой серологической гетерогенностью и антигенной изменчивостью, широким спектром перекрестных серологических реакций, низкими титрами специфических иммуноглобулинов при локальных формах инфекций и др.
Из патентной литературы известна "ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ МИКОПЛАЗМ". Для приготовления среды в объем дистиллированной воды добавляют, г: питательный бульон 19,21, эритрит 0,01, тиамин-бромид 0,004, аргинин 0,08, цистин 0,4, глюкоза 0,8, ЭКД 4,0, агар 8,96, Na2CO3 0,64. Среду тщательно 2 перемешивают и доводят до кипения, затем автоклавируют. После остывания в среду добавляют 200 мл лошадиной сыворотки и пенициллин. При посевной дозе 10 млн./кл./мл вырастает 120 колоний. (См. патент РФ №1397481, 1988.)
Также известна ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ МИКОПЛАЗМ. Для приготовления среды используют перевар сгустков крови человека (триптический перевар) в качестве питательной основы. В качестве стимулятора роста используют сыворотку крови человека 0(1) группы, истощенную механизмами 10-20 мас.%. В состав среды входят, мас.%: 50%-ный дрожжевой экстракт 8-15; глюкоза 0,5-1; хлористый натрий 0,5-1. Все компоненты перемешивают и объем среды доводят до 100 мл переваром сгустков крови. рН среды 7,4-7,8. Рост микоплазм на 3-4-е сутки. (См. патент РФ №1527256, С 12 N 1/20, 1989.)
Наиболее близким к заявляемому способу является "Способ подсчета, обнаружения и идентификации микоплазм в общем и урогенитальных микоплазм в частности, и биологическая среда, специально приспособленная для этой цели". Способ характеризуется ферментативными реакциями, которые протекают при анаэробных условиях в жидкой среде для выращивания микоплазм, содержащей бульон для культивирования микоплазм, лошадиную сыворотку, ампициллин, бактрим, восстановитель тиогликолят натрия, дрожжевой экстракт, цистеин и аргинин. В качестве цветового индикатора используют феноловый красный. Для создания анаэробных условий используют парафиновое масло. Анализируя изменение цвета индикатора в течение одного - двух дней, делают выводы о наличии микоплазменной инфекции. (См. патент US №5091307, 1992.)
Культуральный метод диагностики урогенитальных инфекций для выявления Mycoplasma hominis на селективной жидкой питательной среде является наиболее простым и надежным. Использование этого метода позволяет осуществлять выявление и идентификацию Mycoplasma hominis, а также оценивать степень обсемененности исследуемого материала в цветообразующих единицах (ЦОЕ/мл). Последнее особенно важно для клинической оценки этиологии воспалительных процессов. Имеющим этиологическое значение считается концентрация микоплазм в исследуемом материале не менее 10000 ЦОЕ/мл. Определение чувствительности выделенных культур к антибиотикам и целенаправленное назначение препаратов существенно повышает эффективность проводимой терапии, что выгодно отличает культуральный метод от других методов диагностики урогенитальных микоплазмозов (полимеразной цепной реакции (ПЦР) и реакции иммунофлюоресценции (РИФ)). Культуральный метод диагностики урогенитальных микоплазмозов является более достоверным в сравнении с РИФ, более низкая чувствительность и специфичность которой определяется малыми линейными размерами этих микроорганизмов, выраженной их гетерогенностью и изменчивостью, часто встречающейся низкой концентрацией микоплазм в первичном материале и, соответственно, необходимостью их накопления для выявления, сложностью взятия качественного соскоба для этой реакции.
Разработана технология получения селективной питательной среды, что дает возможность проведения идентификации выделенных культур микоплазм и оценки их количества (титра) в образцах. При разработке были получены оптимальные соотношения компонентов селективной жидкой питательной среды для выявления Mycoplasma hominis, что привело к повышению ее чувствительности.
Среда обеспечивает рост Mycoplasma hominis, сопровождающийся изменением цвета среды за счет проявления ферментативной активности, и тормозит рост сопутствующих грамположительных и грамотрицательных бактерий и грибов.
Питательная среда для выявления Mycoplasma hominis содержит питательную основу, стимуляторы роста, аргинин, лошадиную сыворотку и дистиллированную воду. Отличается тем, что в качестве питательной основы она содержит сердечно-мозговую вытяжку и триптозу, в качестве стимуляторов роста - дрожжевой экстракт и среду 199, и в качестве селективных добавок - антибиотики, и индикатор; при следующем соотношении ингредиентов, г/л:
- сердечно-мозговая вытяжка ("Becton Dickinson microbiology systems"США, кат. №237500, 2002 г.) - 18-22
- триптоза ("Becton Dickinson microbiology systems", США, кат. №211709, 2002 г.) - 8-12
- дрожжевой экстракт ("Becton Dickinson microbiology systems", США, кат. №211929, 2002 г.) - 3-4
- среда 199 сухая ("Sigma", кат. № М5017, 2002 г.) - 4,70-5,20
- L-аргинина гидрохлорид ("Sigma", США, кат. №А3909, 2002 г.) - 5-10
- индикатор - феноловый красный ("Sigma", США, кат. № Р5530, 2002 г.) - 0,04-0,07
- сыворотка лошадиная - 0,25-0,30
- селективные добавки - антибиотики - 0,64-1,27
- дистиллированная вода - остальное
Питательная среда содержит селективные добавки - антибиотики при следующем соотношении ингредиентов, г/л:
- ампициллина натриевая соль - 0,5-1,0
- ванкомицина гидрохлорид - 0,1 -0,2
- полимиксин В сульфат - 0,01-0,02
- амфотерицин В - 0,01-0,02
- эритромицин - 0,02-0,03
В предложенном составе питательной среды представлено оптимальное количественное соотношение компонентов, концентрация антибиотиков и индикаторного красителя. Предложенный способ диагностики инфекций, вызываемых Mycoplasma hominis, включает введение питательной среды, способствующей обнаружению возбудителей заболеваний, в лунки культурального планшета, исследуемого материала, индикатора и вещества, создающего анаэробные условия и анализ изменения цвета питательной среды. В качестве питательной среды используют питательную основу, стимуляторы роста, аргинин, лошадиную сыворотку, дистиллированную воду, в качестве питательной основы сердечно-мозговую вытяжку и триптозу, в качестве стимуляторов роста - дрожжевой экстракт и среду 199, и в качестве селективных добавок - антибиотики, и индикатор.
Способ диагностики прост в постановке, не требует специального оборудования, позволяет проводить как выявление, так и идентификацию возбудителей, определить степень обсемененности и спектр чувствительности к различным антибактериальным препаратам, оценить эффективность проведенного лечения.
Использование заявляемого состава питательной среды позволяет упростить состав, повысить скорость и точность способа диагностики микоплазменной инфекции за счет повышения чувствительности среды.
Для приготовления основы питательной среды в 650 мл дистиллированной воды растворяют сердечно-мозговую вытяжку ("Becton Dickinson microbiology systems", США, кат. №237500, 2002 г.) - 18-24 г, триптозу ("Becton Dickinson microbiology systems", США, кат. №211709, 2002 г.) - 8-12 г, дрожжевой экстракт ("Becton Dickinson microbiology systems", США, кат. №211929, 2002 г.) - 3-4 г. Полученную основу среды стерилизуют автоклавированием.
Отдельно в 100 мл дистиллированной воды растворяют среду 199 сухую ("Sigma", кат. № М5017, 2002 г.) - 4,7-5,2 г, L-аргинина гидрохлорид ("Sigma", США, кат. №А3909, 2002 г.) - 5-10 г/л, феноловый красный ("Sigma", США, кат. № Р5530, 2002 г.) - 0,04-0,07 г; полученный раствор добавок стерилизуют фильтрованием.
Для приготовления питательной среды смешивают 650 мл основы среды, 100 мл раствора добавок и 250-300 мл лошадиной сыворотки. Смесь тщательно перемешивают, затем добавляют ампициллина натриевая соль - 0,5-1,0 г, ванкомицина гидрохлорид - 0,1-0,2 г, полимиксина В сульфат - 0,01-0,02 г, амфотерицин В - 0,01-0,02 г, эритромицин - 0,02-0,03 г. Под контролем рН-метра устанавливают рН 6,1-6,3, добавляя по каплям концентрированную соляную кислоту.
Пример 1.
Для приготовления основы среды в 650 мл дистиллированной воды растворяют сердечно-мозговую вытяжку ("Becton Dickinson microbiology systems", США, кат. №237500, 2002 г.) - 18 г, триптозу ("Becton Dickinson microbiology systems", США, кат. №211709, 2002 г.) - 8 г, дрожжевой экстракт ("Becton Dickinson microbiology systems", США, кат. №211929, 2002 г.) - 3 г. Полученную основу среды стерилизуют автоклавированием.
Отдельно в 100 мл дистиллированной воды растворяют среду 199 сухую ("Sigma", кат. № М5017, 2002 г.) - 4,7 г, L-аргинина гидрохлорид ("Sigma", США, кат. №А3909, 2002 г.) - 5 г, феноловый красный ("Sigma", США, кат. № Р5530, 2002 г.) - 0,04 г; полученный раствор добавок стерилизуют фильтрованием.
Для приготовления среды смешивают 650 мл основы среды, 100 мл раствора добавок и 250 мл лошадиной сыворотки. Смесь тщательно перемешивают, затем добавляют ампициллина натриевая соль - 0,5 г, ванкомицина гидрохлорид - 0,1 г, полимиксина В сульфат - 0,01 г, амфотерицин В - 0,01 г, эритромицин - 0,02 г. Устанавливают рН 6,1-6,3.
Пример 2 (оптимальный).
Для приготовления основы среды в 650 мл дистиллированной воды растворяют сердечно-мозговую вытяжку ("Becton Dickinson microbiology systems", США, кат. №237500, 2002 г.) - 20 г, триптозу ("Becton Dickinson microbiology systems", США, кат. №211709, 2002 г.) - 10 г, дрожжевой экстракт ("Becton Dickinson microbiology systems", США, кат. №211929, 2002 г.) - 3 г. Полученную основу среды стерилизуют автоклавированием.
Отдельно в 100 мл дистиллированной воды растворяют среду 199 сухую ("Sigma", кат. № М5017, 2002 г.) - 4,95 г, L-аргинина гидрохлорид ("Sigma", США, кат. №А3909, 2002 г.) - 7,5 г, феноловый красный ("Sigma", США, кат. № Р5530, 2002 г.) - 0,05 г; полученный раствор добавок стерилизуют фильтрованием.
Для приготовления среды смешивают 650 мл основы среды, 100 мл раствора добавок и 250 мл лошадиной сыворотки. Смесь тщательно перемешивают, затем добавляют ампициллина натриевая соль - 0,75 г, ванкомицина гидрохлорид - 0,15 г, полимиксина В сульфат - 0,01 г, амфотерицин В - 0,015 г, эритромицин - 0,025 г. Устанавливают рН 6,1-6,3.
Пример 3.
Для приготовления основы среды в 650 мл дистиллированной воды растворяют сердечно-мозговую вытяжку ("Becton Dickinson microbiology systems", США, кат. №237500, 2002 г.) - 24 г, триптозу ("Becton Dickinson microbiology systems", США, кат. №211709, 2002 г.) - 12 г, дрожжевой экстракт ("Becton Dickinson microbiology systems", США, кат. №211929, 2002 г.) - 4 г. Полученную основу среды стерилизуют автоклавированием.
Отдельно в 100 мл дистиллированной воды растворяют среду 199 сухую ("Sigma", кат. № М5017, 2002 г.) - 5,2 г, L-аргинина гидрохлорид ("Sigma", США, кат. №А3909, 2002 г.) - 10 г, феноловый красный ("Sigma", США, кат. № Р5530, 2002 г.) - 0,07 г; полученный раствор добавок стерилизуют фильтрованием.
Для приготовления среды смешивают 650 мл основы среды, 100 мл раствора добавок и 300 мл лошадиной сыворотки. Смесь тщательно перемешивают, затем добавляют ампициллина натриевая соль - 1 г, ванкомицина гидрохлорид - 0,2 г, полимиксина В сульфат - 0,02 г, амфотерицин В - 0,02 г, эритромицин - 0,03 г. Устанавливают рН 6,1-6,3.
Селективная питательная среда должна обеспечивать рост Mycoplasma hominis, сопровождающийся изменением цвета среды с оранжевого на малиновый за счет проявления ферментативной активности, и тормозить рост сопутствующих микроорганизмов (грамположительных и грамотрицательных бактерий, грибов).
Способ диагностики урогенитальных микроплазмозов.
1. Разморозить среду при комнатной температуре или на водяной бане при температуре 40°С-45°С.
2. Внести по 0,225 мл питательной среды в 4 последовательные лунки культурального 96-луночного планшета (или 4 микропробирки на 1,5 мл или 0,5 мл). Промаркировать лунки планшета (микропробирки): первую - 3, вторую - 4, третью - 5, четвертую - 6.
3. Тщательно суспендировать на вортексе исследуемый образец.
4. Сделать серию 10-кратных разведений исследуемого образца в питательной среде: внести 0,25 мл исследуемого образца в лунку (микропробирку) 3, тщательно пипетировать, перенести 0,25 мл из полученного разведения в следующею лунку (микропробирку) и повторить процедуру разведения.
5. В 4 последовательные лунки культурального планшета (микропробирки), обозначенные "К-", внести по 0,200 мл питательной среды и провести процедуру 10-кратного разведения, как описано в п.4, используя вместо исследуемого образца транспортную среду.
6. В каждую лунку планшета (микропробирку) внести по 0,70 мл стерильного минерального масла для создания анаэробной среды.
7. Поместить планшет (микропробирки) в термостат и инкубировать при температуре (37±1)°C.
8. Регистрацию результатов проводят на третьи сутки инкубации в термостате при ежедневном визуальном просмотре посевов и о степени обсемененности материала судят по изменению цвета питательной среды.
В качестве транспортной среды используют среду при следующем соотношении ингредиентов, г/л:
- сердечно-мозговую вытяжку ("Becton Dickinson microbiology systems" США, кат. №237500, 2002 г.) - 18-22
- триптозу ("Becton Dickinson microbiology systems", США, кат. №211709,2002 г.) - 8-12
- дрожжевой экстракт ("Becton Dickinson microbiology systems", США, кат. №211929, 2002 г.) - 3-4
- среда 199 сухая ("Sigma", кат. № М5017, 2002 г.) -4,70-5,20
- индикатор - феноловый красный ("Sigma", США, кат. № Р5530, 2002 г.) - 0,04-0,07
- сыворотку лошадиную - 0,25-0,30
- ампициллина натриевую соль - 0,50-1,00
- ванкомицина гидрохлорид - 0,10-0,20
- полимиксин В сульфат - 0,01-0,02
- амфотерицин В - 0,01-0,02
- дистиллированную воду - остальное.
Для проведения диагностики используется следующий клинический материал:
- соскоб клеток слизистой уретры, цервикального канала, влагалища;
- первая порция утренней мочи (осадок, полученный центрифугированием 10 мл первой порции утренней мочи);
- секрет предстательной железы (V-0,50-0,10 мл), эякулят (V-0,50-0,10 мл).
Ключевым моментом в диагностике возбудителей урогенитальных микоплазмозов являются взятие исследуемого материала и условия его хранения.
Необходимо:
1) брать материал до начала проведения антибактериальной терапии;
2) процедура взятия материала должна быть стандартной;
3) важно получить достаточное количество клеток, поскольку микоплазмы является микроорганизмами, колонизирующими клеточную поверхность;
4) не использовать при взятии материала местных антисептиков;
5) тщательное удаление слизи из цервикального канала;
6) взятие уретральных образцов следует проводить не ранее чем через 2-3 часа после мочеиспускания;
7) получение секрета предстательной железы и эякулята проводят непосредственно после мочеиспускания;
8) исследуемый материал помещают в специальную транспортную среду, наилучшим образом обеспечивающую сохранение жизнеспособности микоплазм.
табл.1
Условия хранения образцов.
Условия хранения Максим. продолжительность хранения, час.
При комнатной температуре от 18°С до 24°С 5
В холодильной камере (на нижней полке холодильника) при температуре от 2°С до 6°С 96
табл.2
Интерпретация результатов.
Результаты Интерпретация
+ - есть рост Mycoplasma hominis
- - отсутствие роста Mycoplasma hominis
Лунка(пробирка) Выявление Mycoplasma hominis Обсемененность исследуемого образца ЦОЕ (цветообразующих единиц)/мл образца
3 4 5 6
- - - - Не выявлено -
+ - - - Обнаружено 103
+ + - - Обнаружено 104
+ + + - Обнаружено 105
+ + + + Обнаружено 106
- + + + Обнаружено 106
Учет результатов.
Учет результатов проводят путем визуального просмотра засеянных планшетов (пробирок). Рост Mycoplasma hominis наблюдается в течение 48-72 часов. Рост Mycoplasma hominis сопровождается изменением цвета питательной среды с оранжевого на малиновый, без помутнения, за счет проявления ферментативной активности, гидролиза аргинина, образования аммиака и сдвига рН. При росте Mycoplasma hominis возможно образование незначительного придонного осадка. Рост отмечается на вторые сутки инкубации. В случае низкой обсемененности материала изменение цвета среды происходит на третьи сутки.
Табл.3
Среда для выявления Mycoplasma hominis
питательная среда число произведенных посевов число выделенных культур
абсолютное значение %
известная 132 15 11,4
предлагаемая 132 18 13,6
табл.4
Рост Mycoplasma hominis при посеве исследуемого материала в разных разведениях
разведение исследуемого материала (посевная доза) рост на известной среде рост на предлагаемой среде
10-3 15 18
10-4 15 18
10-5 14 18
10-6 11 14

Claims (4)

1. Питательная среда для выявления Mycoplasma hominis, содержащая питательную основу, стимуляторы роста, аргинин, лошадиную сыворотку и дистиллированную воду, отличающаяся тем, что в качестве питательной основы она содержит сердечно-мозговую вытяжку и триптозу, в качестве стимуляторов роста - дрожжевой экстракт и среду 199, и в качестве селективных добавок - антибиотики, и индикатор при следующем соотношении ингредиентов, г/л:
Сердечно-мозговая вытяжка ("Becton Dickinson microbiology systems", США, кат. № 237500, 2002 г.) 18-22 Триптоза ("Becton Dickinson microbiology systems", США, кат. № 211709, 2002 г.) 8-12 Дрожжевой экстракт ("Becton Dickinson microbiology systems", США, кат. № 211929, 2002 г.) 3-4 Среда 199 сухая ("Sigma", кат.№ М5017, 2002 г.) 4,70-5,20 L-аргинина гидрохлорид ("Sigma", США, кат.№ А 3909, 2002 г.) 5-10 Индикатор - феноловый красный ("Sigma", кат. № Р5530, 2002 г.) 0,04-0,07 Сыворотка лошадиная 0,25-0,3 Селективные добавки - антибиотики 0,64-1,27 Дистиллированная вода Остальное
2. Питательная среда по п.1, отличающаяся тем, что содержит селективные добавки - антибиотики при следующем соотношении ингредиентов, г:
Ампициллина натриевая соль 0,5-1,0 Ванкомицина гидрохлорид 0,1-0,2 Полимиксин В сульфат 0,01-0,02 Амфотерицин В 0,01-0,02 Эритромицин 0,02-0,03
3. Способ диагностики инфекций, вызываемых Mycoplasma hominis, включающий введение питательной среды, способствующей обнаружению возбудителей заболеваний, в лунки культурального планшета, исследуемого материала и вещества, создающего анаэробные условия и анализ изменения цвета питательной среды, отличающийся тем, что в качестве питательной среды используют питательную основу, стимуляторы роста, аргинин, лошадиную сыворотку, дистиллированную воду, в качестве питательной основы - сердечно-мозговую вытяжку и триптозу, в качестве стимуляторов роста - дрожжевой экстракт и среду 199, в качестве селективных добавок - антибиотики, и индикатор при следующем соотношении ингредиентов, г/л:
Сердечно-мозговая вытяжка ("Becton Dickinson microbiology systems", США, кат.№ 237500, 2002 г.) 18-22 Триптоза ("Becton Dickinson microbiology systems", США, кат. № 211709, 2002 г.) 8-12 Дрожжевой экстракт ("Becton Dickinson microbiology systems", США, кат. № 211929, 2002 г.) 3-4 Среда 199 сухая ("Sigma", кат.№ М5017, 2002 г.) 4,70-5,20 L-аргинина гидрохлорид ("Sigma", США, кат.№ А 3909, 2002 г.) 5-10 Индикатор - феноловый красный ("Sigma", кат.№ Р5530, 2002 г.) 0,04-0,07 Сыворотка лошадиная 0,25-0,30 Ампициллина натриевая соль 0,50-1,00 Ванкомицина гидрохлорид 0,10-0,20 Полимиксин В сульфат 0,01-0,02 Амфотерицин В 0,01-0,02 Эритромицин 0,02-0,03 Дстиллированная вода Отальное
которую вносят в лунки культурального планшета, маркируют лунки планшета, суспендируют на вортексе исследуемый материал, делают серию 10-кратных разведений исследуемого образца в питательной среде и повторяют процедуру разведения; в лунки культурального планшета вносят питательную среду и проводят процедуру 10-тикратных разведений, используя транспортную среду; в каждую лунку планшета вносят минеральное масло, создающее анаэробные условия; планшет помещают в термостат и инкубируют при температуре (37±1)°С; регистрацию результатов проводят на третьи сутки инкубации в термостате, при ежедневном визуальном просмотре посевов, а о степени обсемененности материала судят по изменению цвета питательной среды.
4. Способ по п.3, отличающийся тем, что в качестве транспортной среды используют питательную среду при следующем соотношении ингредиентов, г/л:
Сердечно-мозговая вытяжка ("Becton Dickinson microbiology systems", США, кат. № 237500, 2002 г.) 18-22 Триптоза ("Becton Dickinson microbiology systems", США, кат. № 211709, 2002 г.) 8-12 Дрожжевой экстракт ("Becton Dickinson microbiology systems”, США, кат. № 211929, 2002 г.) 3-4 Среда 199 сухая ("Sigma", кат. № М5017, 2002 г.) 4,70-5,20 Индикатор - феноловый красный ("Sigma", кат. № Р5530, 2002 г.) 0,04-0,07 Сыворотка лошадиная 0,25-0,30 Ампициллина натриевая соль 0,50-1,00 Ванкомицина гидрохлорид 0,10-0,20 Полимиксин В сульфат 0,01-0,02 Амфотерицин В 0,01-0,02 Дистиллированная вода Остальное
RU2004108163/13A 2004-03-22 2004-03-22 ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ Mycoplasma hominis И СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ УРОГЕНИТАЛЬНЫХ МИКОПЛАЗМОЗОВ RU2261903C1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2004108163/13A RU2261903C1 (ru) 2004-03-22 2004-03-22 ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ Mycoplasma hominis И СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ УРОГЕНИТАЛЬНЫХ МИКОПЛАЗМОЗОВ

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2004108163/13A RU2261903C1 (ru) 2004-03-22 2004-03-22 ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ Mycoplasma hominis И СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ УРОГЕНИТАЛЬНЫХ МИКОПЛАЗМОЗОВ

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2261903C1 true RU2261903C1 (ru) 2005-10-10

Family

ID=35851237

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2004108163/13A RU2261903C1 (ru) 2004-03-22 2004-03-22 ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ Mycoplasma hominis И СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ УРОГЕНИТАЛЬНЫХ МИКОПЛАЗМОЗОВ

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2261903C1 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2553549C1 (ru) * 2014-04-11 2015-06-20 Федеральное бюджетное учреждение науки "Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Пастера" (ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера) Лиофилизированная питательная среда для визуального выявления mycoplasma hominis

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
СИДОРОВ М.А. и др. Определитель зоопатогенных микроорганизмов. Справочник. - М.: Колос, 1995, с.286-287. РАКОВСКАЯ И.В. Индикация микоплазм в клиническом материале. Вопросы физиологии, метаболизма и идентификации микроорганизмов. Сборник научных трудов. - М., 1987, с.124-128. *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2553549C1 (ru) * 2014-04-11 2015-06-20 Федеральное бюджетное учреждение науки "Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Пастера" (ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера) Лиофилизированная питательная среда для визуального выявления mycoplasma hominis

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Young Cultural diagnosis of gonorrhoea with modified New York City (MNYC) medium.
CN104105795B (zh) 检测沙门氏菌属微生物的方法
Onyenweaku et al. Prevalence of asymptomatic bacteriuria and its antibiotic susceptibility pattern in pregnant women attending private ante natal clinics in Umuahia Metropolitan
Baruti et al. Evaluation of the bacterial agents associated with PID among women of reproductive age at Kampala International University Teaching Hospital
CN101131362A (zh) 一种快速筛选牛奶类液体样中抗菌药物残留的方法
Pusterla et al. Diagnostic evaluation of real-time PCR in the detection of Rhodococcus equi in faeces and nasopharyngeal swabs from foals with pneumonia
RU2261903C1 (ru) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ Mycoplasma hominis И СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ УРОГЕНИТАЛЬНЫХ МИКОПЛАЗМОЗОВ
RU2265656C1 (ru) Питательная среда для выявления ureaplasma urealyticum и способ диагностики урогенитальных уреаплазмозов
RU2531236C1 (ru) Способ обнаружения микроорганизма вида vibrio parahaemolyticus
RU2553548C1 (ru) Набор для лабораторной диагностики инфекций, вызываемых mycoplasma hominis и ureaplasma urealyticum
Peretz et al. BACTEC™ FX system as a tool for culturing gastric biopsies and Helicobacter pylori diagnosis
RU2088938C1 (ru) Способ выявления кишечного дисбиоза и кишечной инфекции
RU2452774C1 (ru) Способ определения бактериологической обсемененности мочи, секрета предстательной железы и эякулята
Samuel et al. ANTIBIOTIC RESISTANCE PATTERN OF BACTERIAL ISOLATES ASSOCIATED WITH ASYMPTOMATIC URINARY TRACT INFECTIONS IN WUKARI METROPOLIS, TARABA STATE, NIGERIA.
RU2332671C2 (ru) Способ прогнозирования хронического течения урогенитальной гонококковой инфекции
SALIM et al. Phenotypically and genotypically estimation of virulence factors in Salmonella serovar typhi isolated from patients with enteric fever in Al-Najaf, Iraq
RU2553549C1 (ru) Лиофилизированная питательная среда для визуального выявления mycoplasma hominis
RU2705415C1 (ru) Способ диагностики стафилококковой абдоминальной хирургической инфекции
Miao et al. Microbial Culture and Its Clinical Application
RU2235324C1 (ru) Способ определения казеинолитической активности микроорганизмов при экспресс-диагностике дисбактериоза кишечника
Yatoo et al. Diagnostic Techniques in Goats
RU63358U1 (ru) Набор питательных сред для диагностики урогенитальных инфекций и определения чувствительности к антибиотикам
Mhawesh et al. Isolation and Diagnosis of Mycoplasma by Conventional and Molecular Methods from Pneumonia in Feedlot Calves
RU2112040C1 (ru) Питательная среда для выделения эшерихий с персистентными свойствами
Omar Prevalence and Gender Related Etiology of Asymptomatic Bacteriuria in Medical Student of the Libyan International Medical University

Legal Events

Date Code Title Description
QB4A Licence on use of patent

Effective date: 20060428

MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20070323

NF4A Reinstatement of patent

Effective date: 20100220

HE4A Notice of change of address of a patent owner