RU2650594C1 - Человеческие анти-il-6 антитела с пролонгированным периодом выведения in vivo и их применение при лечении онкологических, аутоиммунных заболеваний и воспалительных заболеваний - Google Patents
Человеческие анти-il-6 антитела с пролонгированным периодом выведения in vivo и их применение при лечении онкологических, аутоиммунных заболеваний и воспалительных заболеваний Download PDFInfo
- Publication number
- RU2650594C1 RU2650594C1 RU2015150249A RU2015150249A RU2650594C1 RU 2650594 C1 RU2650594 C1 RU 2650594C1 RU 2015150249 A RU2015150249 A RU 2015150249A RU 2015150249 A RU2015150249 A RU 2015150249A RU 2650594 C1 RU2650594 C1 RU 2650594C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- antibody
- dose
- days
- weeks
- human
- Prior art date
Links
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 title claims abstract description 13
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 title claims abstract description 10
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 title abstract description 75
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 title abstract description 37
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title abstract description 19
- 230000006698 induction Effects 0.000 title description 3
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 title 1
- 230000000771 oncological effect Effects 0.000 title 1
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 claims abstract description 447
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 claims abstract description 447
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 348
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims abstract description 94
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 claims abstract description 54
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 17
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 13
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 82
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 63
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 58
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 53
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 51
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 51
- 230000011664 signaling Effects 0.000 claims description 49
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 33
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 claims description 32
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 claims description 26
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims description 25
- 208000003456 Juvenile Arthritis Diseases 0.000 claims description 17
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 17
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 16
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 16
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 claims description 15
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 claims description 15
- 206010059176 Juvenile idiopathic arthritis Diseases 0.000 claims description 13
- 206010002556 Ankylosing Spondylitis Diseases 0.000 claims description 11
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 11
- 208000006545 Chronic Obstructive Pulmonary Disease Diseases 0.000 claims description 9
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 claims description 8
- 201000002215 juvenile rheumatoid arthritis Diseases 0.000 claims description 8
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 claims description 6
- 206010006895 Cachexia Diseases 0.000 claims description 5
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 claims description 5
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 claims description 5
- 238000007906 compression Methods 0.000 claims description 5
- 230000006835 compression Effects 0.000 claims description 5
- 208000014674 injury Diseases 0.000 claims description 4
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 claims description 4
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 claims description 3
- 206010019233 Headaches Diseases 0.000 claims description 3
- 206010033645 Pancreatitis Diseases 0.000 claims description 3
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 claims description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims description 3
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 3
- 230000003902 lesion Effects 0.000 claims description 3
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 claims description 3
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 claims description 3
- 208000008035 Back Pain Diseases 0.000 claims description 2
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 claims description 2
- 208000001640 Fibromyalgia Diseases 0.000 claims description 2
- 201000005569 Gout Diseases 0.000 claims description 2
- 208000008930 Low Back Pain Diseases 0.000 claims description 2
- 208000019695 Migraine disease Diseases 0.000 claims description 2
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 claims description 2
- 201000001119 neuropathy Diseases 0.000 claims description 2
- 230000007823 neuropathy Effects 0.000 claims description 2
- 208000033808 peripheral neuropathy Diseases 0.000 claims description 2
- 206010006002 Bone pain Diseases 0.000 claims 1
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 claims 1
- 210000001032 spinal nerve Anatomy 0.000 claims 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 450
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 43
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 21
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract description 8
- 230000002265 prevention Effects 0.000 abstract description 2
- 208000037765 diseases and disorders Diseases 0.000 abstract 1
- 229940100601 interleukin-6 Drugs 0.000 description 438
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 189
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 180
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 93
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 90
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 90
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 90
- 101710117290 Aldo-keto reductase family 1 member C4 Proteins 0.000 description 76
- 102100024952 Protein CBFA2T1 Human genes 0.000 description 76
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 72
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 68
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 64
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 63
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 63
- 150000001720 carbohydrates Chemical group 0.000 description 61
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 60
- 238000006722 reduction reaction Methods 0.000 description 52
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 51
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 49
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 48
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 46
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 46
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 45
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 42
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 42
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 40
- 101001076408 Homo sapiens Interleukin-6 Proteins 0.000 description 38
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical group [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 38
- 102000052611 human IL6 Human genes 0.000 description 38
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 37
- 230000008409 synovial inflammation Effects 0.000 description 37
- 210000002437 synoviocyte Anatomy 0.000 description 37
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 32
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 32
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 31
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 29
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 29
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 29
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 27
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 description 27
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 26
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 25
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 25
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 25
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 25
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 24
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 24
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 24
- 229940071643 prefilled syringe Drugs 0.000 description 24
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 23
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 22
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 20
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 19
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 19
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 19
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 18
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 18
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 18
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 18
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 18
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 18
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 17
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 17
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 description 17
- 229940068968 polysorbate 80 Drugs 0.000 description 17
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 17
- 102100035360 Cerebellar degeneration-related antigen 1 Human genes 0.000 description 16
- -1 GMCSF Proteins 0.000 description 16
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 230000006870 function Effects 0.000 description 16
- 150000003839 salts Chemical group 0.000 description 16
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 16
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 15
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 15
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 14
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 14
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 14
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 14
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 14
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 14
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 14
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 14
- 238000011993 High Performance Size Exclusion Chromatography Methods 0.000 description 13
- 101710152369 Interleukin-6 receptor subunit beta Proteins 0.000 description 13
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 13
- 102220516627 Kynurenine-oxoglutarate transaminase 1_T256E_mutation Human genes 0.000 description 11
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 11
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 11
- 230000001594 aberrant effect Effects 0.000 description 11
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 11
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 11
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 11
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 11
- 238000004088 simulation Methods 0.000 description 11
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 11
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 10
- 101710177940 IgG receptor FcRn large subunit p51 Proteins 0.000 description 10
- 102100026120 IgG receptor FcRn large subunit p51 Human genes 0.000 description 10
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 10
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 10
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 10
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 10
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 10
- 230000009610 hypersensitivity Effects 0.000 description 10
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 10
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 10
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 10
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 10
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 9
- 201000001263 Psoriatic Arthritis Diseases 0.000 description 9
- 208000036824 Psoriatic arthropathy Diseases 0.000 description 9
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 9
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 9
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 9
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 9
- 206010039083 rhinitis Diseases 0.000 description 9
- 102220325920 rs746060028 Human genes 0.000 description 9
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 8
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 8
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 8
- 241000282567 Macaca fascicularis Species 0.000 description 8
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 8
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 8
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 8
- 239000000463 material Substances 0.000 description 8
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 8
- 229950008882 polysorbate Drugs 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 8
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 8
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 8
- 230000004044 response Effects 0.000 description 8
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 8
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 8
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 8
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 8
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 7
- 102100037792 Interleukin-6 receptor subunit alpha Human genes 0.000 description 7
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 7
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 7
- 201000002661 Spondylitis Diseases 0.000 description 7
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 7
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 7
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 7
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 7
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 7
- 230000008859 change Effects 0.000 description 7
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 7
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 7
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 7
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 7
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 7
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 7
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 7
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 7
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 7
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 7
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 7
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 7
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 7
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 7
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 7
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 7
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 7
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 6
- 108010038501 Interleukin-6 Receptors Proteins 0.000 description 6
- 102000010781 Interleukin-6 Receptors Human genes 0.000 description 6
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 6
- 101100350722 Mus musculus Pclaf gene Proteins 0.000 description 6
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 6
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 6
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 6
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 6
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical class OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 6
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 6
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 6
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 6
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 6
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 6
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 6
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 6
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 6
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 6
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 6
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 6
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 6
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 5
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 5
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 5
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 5
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 5
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 5
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 5
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 5
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 5
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 5
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 5
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 108010073929 Vascular Endothelial Growth Factor A Proteins 0.000 description 5
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 235000009697 arginine Nutrition 0.000 description 5
- 229960003121 arginine Drugs 0.000 description 5
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 5
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 5
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 5
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 5
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 5
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 5
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 5
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 5
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 5
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 5
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 5
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 5
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 5
- 231100000957 no side effect Toxicity 0.000 description 5
- 208000002815 pulmonary hypertension Diseases 0.000 description 5
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 5
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 5
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 5
- 208000020408 systemic-onset juvenile idiopathic arthritis Diseases 0.000 description 5
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 5
- 239000008181 tonicity modifier Substances 0.000 description 5
- 241001515965 unidentified phage Species 0.000 description 5
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 5
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 4
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 108010005939 Ciliary Neurotrophic Factor Proteins 0.000 description 4
- 102100031614 Ciliary neurotrophic factor Human genes 0.000 description 4
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 4
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000020401 Depressive disease Diseases 0.000 description 4
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 4
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- 101000690301 Homo sapiens Aldo-keto reductase family 1 member C4 Proteins 0.000 description 4
- 101001116548 Homo sapiens Protein CBFA2T1 Proteins 0.000 description 4
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 4
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 4
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 4
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 4
- 102000004140 Oncostatin M Human genes 0.000 description 4
- 108090000630 Oncostatin M Proteins 0.000 description 4
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 4
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 4
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 4
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 4
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 4
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 4
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 4
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 4
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 4
- 238000001516 cell proliferation assay Methods 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 210000000038 chest Anatomy 0.000 description 4
- 238000002983 circular dichroism Methods 0.000 description 4
- 238000012875 competitive assay Methods 0.000 description 4
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 4
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 4
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 4
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 4
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 4
- 238000012921 fluorescence analysis Methods 0.000 description 4
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 4
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 4
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 4
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 4
- 230000036541 health Effects 0.000 description 4
- 102000054751 human RUNX1T1 Human genes 0.000 description 4
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 4
- 108040006858 interleukin-6 receptor activity proteins Proteins 0.000 description 4
- 229960003646 lysine Drugs 0.000 description 4
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 4
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 4
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 4
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 4
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 4
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 4
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 4
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 4
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 4
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 4
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 4
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical group O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010005949 Bone cancer Diseases 0.000 description 3
- 208000018084 Bone neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 3
- 102100037362 Fibronectin Human genes 0.000 description 3
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 description 3
- 101000599048 Homo sapiens Interleukin-6 receptor subunit alpha Proteins 0.000 description 3
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 3
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 3
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 3
- 102000003815 Interleukin-11 Human genes 0.000 description 3
- 108090000177 Interleukin-11 Proteins 0.000 description 3
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 3
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 3
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 3
- 206010024229 Leprosy Diseases 0.000 description 3
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 3
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 3
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 description 3
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 3
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 3
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 3
- 101001076459 Rattus norvegicus Interleukin-6 Proteins 0.000 description 3
- 208000006265 Renal cell carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 description 3
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- GKLVYJBZJHMRIY-OUBTZVSYSA-N Technetium-99 Chemical compound [99Tc] GKLVYJBZJHMRIY-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 3
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 3
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 3
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 3
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 description 3
- 239000004067 bulking agent Substances 0.000 description 3
- 238000001818 capillary gel electrophoresis Methods 0.000 description 3
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 3
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 3
- 239000005515 coenzyme Substances 0.000 description 3
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 3
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 3
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 3
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 3
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 3
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 3
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 3
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 3
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 3
- 230000005713 exacerbation Effects 0.000 description 3
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 3
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 3
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 3
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 3
- 230000007954 hypoxia Effects 0.000 description 3
- 229940127121 immunoconjugate Drugs 0.000 description 3
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 3
- 238000001114 immunoprecipitation Methods 0.000 description 3
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 3
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 3
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 3
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 3
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 3
- 125000005645 linoleyl group Chemical group 0.000 description 3
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 3
- 238000013507 mapping Methods 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 238000000491 multivariate analysis Methods 0.000 description 3
- 125000001421 myristyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 3
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 3
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 3
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 3
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 3
- 229940068977 polysorbate 20 Drugs 0.000 description 3
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 3
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 3
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 3
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 3
- 208000020016 psychiatric disease Diseases 0.000 description 3
- 229910052702 rhenium Inorganic materials 0.000 description 3
- WUAPFZMCVAUBPE-UHFFFAOYSA-N rhenium atom Chemical compound [Re] WUAPFZMCVAUBPE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000001370 static light scattering Methods 0.000 description 3
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 3
- 229910052714 tellurium Inorganic materials 0.000 description 3
- PORWMNRCUJJQNO-UHFFFAOYSA-N tellurium atom Chemical compound [Te] PORWMNRCUJJQNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 3
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 3
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 description 3
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 description 3
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 description 3
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 description 3
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- HVAUUPRFYPCOCA-AREMUKBSSA-N 2-O-acetyl-1-O-hexadecyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCOC[C@@H](OC(C)=O)COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C HVAUUPRFYPCOCA-AREMUKBSSA-N 0.000 description 2
- GOJUJUVQIVIZAV-UHFFFAOYSA-N 2-amino-4,6-dichloropyrimidine-5-carbaldehyde Chemical group NC1=NC(Cl)=C(C=O)C(Cl)=N1 GOJUJUVQIVIZAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CFKMVGJGLGKFKI-UHFFFAOYSA-N 4-chloro-m-cresol Chemical compound CC1=CC(O)=CC=C1Cl CFKMVGJGLGKFKI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PVXPPJIGRGXGCY-TZLCEDOOSA-N 6-O-alpha-D-glucopyranosyl-D-fructofuranose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)C(O)(CO)O1 PVXPPJIGRGXGCY-TZLCEDOOSA-N 0.000 description 2
- FWEOQOXTVHGIFQ-UHFFFAOYSA-N 8-anilinonaphthalene-1-sulfonic acid Chemical compound C=12C(S(=O)(=O)O)=CC=CC2=CC=CC=1NC1=CC=CC=C1 FWEOQOXTVHGIFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 2
- 208000024893 Acute lymphoblastic leukemia Diseases 0.000 description 2
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 2
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 2
- 108010032595 Antibody Binding Sites Proteins 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical class OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 201000008283 Atrophic Rhinitis Diseases 0.000 description 2
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 2
- 208000032791 BCR-ABL1 positive chronic myelogenous leukemia Diseases 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 2
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241000282836 Camelus dromedarius Species 0.000 description 2
- 241000282465 Canis Species 0.000 description 2
- 208000005024 Castleman disease Diseases 0.000 description 2
- 208000010833 Chronic myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 2
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 2
- 206010010741 Conjunctivitis Diseases 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 2
- 150000008574 D-amino acids Chemical class 0.000 description 2
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N D-gluconic acid Chemical class OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N 0.000 description 2
- 206010012442 Dermatitis contact Diseases 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 238000005033 Fourier transform infrared spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 2
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 2
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 2
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 2
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 2
- 238000004566 IR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 108700005091 Immunoglobulin Genes Proteins 0.000 description 2
- 102000012745 Immunoglobulin Subunits Human genes 0.000 description 2
- 108010079585 Immunoglobulin Subunits Proteins 0.000 description 2
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 2
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 2
- 208000007766 Kaposi sarcoma Diseases 0.000 description 2
- 102220516587 Kynurenine-oxoglutarate transaminase 1_T256E_mutation Human genes 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- 241000282553 Macaca Species 0.000 description 2
- NBGXQZRRLOGAJF-UHFFFAOYSA-N Maltulose Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)(CO)OCC1O NBGXQZRRLOGAJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 2
- BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N Methylamine Chemical compound NC BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 2
- 208000033761 Myelogenous Chronic BCR-ABL Positive Leukemia Diseases 0.000 description 2
- QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N N,N-bis{2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl}glycine Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(=O)O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CMWTZPSULFXXJA-UHFFFAOYSA-N Naproxen Natural products C1=C(C(C)C(O)=O)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 CMWTZPSULFXXJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010029164 Nephrotic syndrome Diseases 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010004729 Phycoerythrin Proteins 0.000 description 2
- 108010003541 Platelet Activating Factor Proteins 0.000 description 2
- 229920001219 Polysorbate 40 Polymers 0.000 description 2
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 2
- 206010039088 Rhinitis atrophic Diseases 0.000 description 2
- 108010039491 Ricin Proteins 0.000 description 2
- 208000000924 Right ventricular hypertrophy Diseases 0.000 description 2
- KJTLSVCANCCWHF-UHFFFAOYSA-N Ruthenium Chemical compound [Ru] KJTLSVCANCCWHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- 206010039710 Scleroderma Diseases 0.000 description 2
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 2
- 206010051379 Systemic Inflammatory Response Syndrome Diseases 0.000 description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 229910052775 Thulium Inorganic materials 0.000 description 2
- YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N Tritium Chemical compound [3H] YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 2
- 229940035676 analgesics Drugs 0.000 description 2
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 2
- 239000000730 antalgic agent Substances 0.000 description 2
- 238000000376 autoradiography Methods 0.000 description 2
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 230000008512 biological response Effects 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 2
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 2
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 2
- 238000004422 calculation algorithm Methods 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 2
- 238000000423 cell based assay Methods 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N chlorobutanol Chemical compound CC(C)(O)C(Cl)(Cl)Cl OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 208000032852 chronic lymphocytic leukemia Diseases 0.000 description 2
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 238000003271 compound fluorescence assay Methods 0.000 description 2
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- 125000000151 cysteine group Chemical class N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 2
- 238000013499 data model Methods 0.000 description 2
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 2
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 2
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 2
- 238000000113 differential scanning calorimetry Methods 0.000 description 2
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 125000003438 dodecyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 2
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 2
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol Natural products OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 2
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 2
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 2
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 2
- 238000010324 immunological assay Methods 0.000 description 2
- 229910052738 indium Inorganic materials 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 239000007972 injectable composition Substances 0.000 description 2
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 2
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 2
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000000832 lactitol Substances 0.000 description 2
- 235000010448 lactitol Nutrition 0.000 description 2
- VQHSOMBJVWLPSR-JVCRWLNRSA-N lactitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]([C@H](O)CO)O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O VQHSOMBJVWLPSR-JVCRWLNRSA-N 0.000 description 2
- 229960003451 lactitol Drugs 0.000 description 2
- JCQLYHFGKNRPGE-FCVZTGTOSA-N lactulose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 JCQLYHFGKNRPGE-FCVZTGTOSA-N 0.000 description 2
- 229960000511 lactulose Drugs 0.000 description 2
- PFCRQPBOOFTZGQ-UHFFFAOYSA-N lactulose keto form Natural products OCC(=O)C(O)C(C(O)CO)OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O PFCRQPBOOFTZGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052747 lanthanoid Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000002602 lanthanoids Chemical class 0.000 description 2
- 230000031700 light absorption Effects 0.000 description 2
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 2
- 210000005265 lung cell Anatomy 0.000 description 2
- RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N m-cresol Chemical compound CC1=CC=CC(O)=C1 RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011147 magnesium chloride Nutrition 0.000 description 2
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000000845 maltitol Substances 0.000 description 2
- 235000010449 maltitol Nutrition 0.000 description 2
- VQHSOMBJVWLPSR-WUJBLJFYSA-N maltitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]([C@H](O)CO)O[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O VQHSOMBJVWLPSR-WUJBLJFYSA-N 0.000 description 2
- 229940035436 maltitol Drugs 0.000 description 2
- JCQLYHFGKNRPGE-HFZVAGMNSA-N maltulose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 JCQLYHFGKNRPGE-HFZVAGMNSA-N 0.000 description 2
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 2
- 206010027599 migraine Diseases 0.000 description 2
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 2
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 229960002009 naproxen Drugs 0.000 description 2
- CMWTZPSULFXXJA-VIFPVBQESA-N naproxen Chemical compound C1=C([C@H](C)C(O)=O)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 CMWTZPSULFXXJA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- QWVGKYWNOKOFNN-UHFFFAOYSA-N o-cresol Chemical compound CC1=CC=CC=C1O QWVGKYWNOKOFNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000005737 orchitis Diseases 0.000 description 2
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 2
- IWDCLRJOBJJRNH-UHFFFAOYSA-N p-cresol Chemical compound CC1=CC=C(O)C=C1 IWDCLRJOBJJRNH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003002 pH adjusting agent Substances 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 229960003330 pentetic acid Drugs 0.000 description 2
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 239000008180 pharmaceutical surfactant Substances 0.000 description 2
- XNGIFLGASWRNHJ-UHFFFAOYSA-N phthalic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1C(O)=O XNGIFLGASWRNHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 2
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 2
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 2
- 229920001993 poloxamer 188 Polymers 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 235000010483 polyoxyethylene sorbitan monopalmitate Nutrition 0.000 description 2
- 239000000249 polyoxyethylene sorbitan monopalmitate Substances 0.000 description 2
- 229940101027 polysorbate 40 Drugs 0.000 description 2
- 229940068965 polysorbates Drugs 0.000 description 2
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 230000001698 pyrogenic effect Effects 0.000 description 2
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 238000012552 review Methods 0.000 description 2
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical class [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102220324866 rs1064794265 Human genes 0.000 description 2
- 102200151022 rs202149403 Human genes 0.000 description 2
- 102220096850 rs876658799 Human genes 0.000 description 2
- 229910052707 ruthenium Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 230000008054 signal transmission Effects 0.000 description 2
- 229960003323 siltuximab Drugs 0.000 description 2
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 2
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 2
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 2
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 2
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 2
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 2
- 201000005671 spondyloarthropathy Diseases 0.000 description 2
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 210000001179 synovial fluid Anatomy 0.000 description 2
- 230000035488 systolic blood pressure Effects 0.000 description 2
- 229940056501 technetium 99m Drugs 0.000 description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 2
- FRNOGLGSGLTDKL-UHFFFAOYSA-N thulium atom Chemical compound [Tm] FRNOGLGSGLTDKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 2
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 2
- 241000701447 unidentified baculovirus Species 0.000 description 2
- 208000001319 vasomotor rhinitis Diseases 0.000 description 2
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 2
- 229910052727 yttrium Inorganic materials 0.000 description 2
- AHOUBRCZNHFOSL-YOEHRIQHSA-N (+)-Casbol Chemical compound C1=CC(F)=CC=C1[C@H]1[C@H](COC=2C=C3OCOC3=CC=2)CNCC1 AHOUBRCZNHFOSL-YOEHRIQHSA-N 0.000 description 1
- WCDDVEOXEIYWFB-VXORFPGASA-N (2s,3s,4r,5r,6r)-3-[(2s,3r,5s,6r)-3-acetamido-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-4,5,6-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1C[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](C(O)=O)O[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O WCDDVEOXEIYWFB-VXORFPGASA-N 0.000 description 1
- RTHCYVBBDHJXIQ-MRXNPFEDSA-N (R)-fluoxetine Chemical compound O([C@H](CCNC)C=1C=CC=CC=1)C1=CC=C(C(F)(F)F)C=C1 RTHCYVBBDHJXIQ-MRXNPFEDSA-N 0.000 description 1
- AXTGDCSMTYGJND-UHFFFAOYSA-N 1-dodecylazepan-2-one Chemical compound CCCCCCCCCCCCN1CCCCCC1=O AXTGDCSMTYGJND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PNDPGZBMCMUPRI-HVTJNCQCSA-N 10043-66-0 Chemical compound [131I][131I] PNDPGZBMCMUPRI-HVTJNCQCSA-N 0.000 description 1
- OTLLEIBWKHEHGU-UHFFFAOYSA-N 2-[5-[[5-(6-aminopurin-9-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy]-3,4-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-3,5-dihydroxy-4-phosphonooxyhexanedioic acid Chemical group C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C(C(C1O)O)OC1COC1C(CO)OC(OC(C(O)C(OP(O)(O)=O)C(O)C(O)=O)C(O)=O)C(O)C1O OTLLEIBWKHEHGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LMVGXBRDRZOPHA-UHFFFAOYSA-N 2-[dimethyl-[3-(16-methylheptadecanoylamino)propyl]azaniumyl]acetate Chemical compound CC(C)CCCCCCCCCCCCCCC(=O)NCCC[N+](C)(C)CC([O-])=O LMVGXBRDRZOPHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TYIOVYZMKITKRO-UHFFFAOYSA-N 2-[hexadecyl(dimethyl)azaniumyl]acetate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CC([O-])=O TYIOVYZMKITKRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QCDWFXQBSFUVSP-UHFFFAOYSA-N 2-phenoxyethanol Chemical compound OCCOC1=CC=CC=C1 QCDWFXQBSFUVSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BRMWTNUJHUMWMS-UHFFFAOYSA-N 3-Methylhistidine Natural products CN1C=NC(CC(N)C(O)=O)=C1 BRMWTNUJHUMWMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DIROHOMJLWMERM-UHFFFAOYSA-N 3-[dimethyl(octadecyl)azaniumyl]propane-1-sulfonate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CCCS([O-])(=O)=O DIROHOMJLWMERM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HUDPLKWXRLNSPC-UHFFFAOYSA-N 4-aminophthalhydrazide Chemical compound O=C1NNC(=O)C=2C1=CC(N)=CC=2 HUDPLKWXRLNSPC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WOVKYSAHUYNSMH-RRKCRQDMSA-N 5-bromodeoxyuridine Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(Br)=C1 WOVKYSAHUYNSMH-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 1
- 229940117976 5-hydroxylysine Drugs 0.000 description 1
- ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 5-oxo-L-proline Chemical group OC(=O)[C@@H]1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 102100031126 6-phosphogluconolactonase Human genes 0.000 description 1
- 108010029731 6-phosphogluconolactonase Proteins 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010066676 Abrin Proteins 0.000 description 1
- 108010022752 Acetylcholinesterase Proteins 0.000 description 1
- 102000012440 Acetylcholinesterase Human genes 0.000 description 1
- 208000030090 Acute Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000009304 Acute Kidney Injury Diseases 0.000 description 1
- 206010000830 Acute leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 208000014697 Acute lymphocytic leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 208000031261 Acute myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 206010001052 Acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 208000035285 Allergic Seasonal Rhinitis Diseases 0.000 description 1
- 206010001889 Alveolitis Diseases 0.000 description 1
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 description 1
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 description 1
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 description 1
- 244000303258 Annona diversifolia Species 0.000 description 1
- 235000002198 Annona diversifolia Nutrition 0.000 description 1
- 208000003343 Antiphospholipid Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010053555 Arthritis bacterial Diseases 0.000 description 1
- 208000006740 Aseptic Meningitis Diseases 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000037157 Azotemia Diseases 0.000 description 1
- 208000010839 B-cell chronic lymphocytic leukemia Diseases 0.000 description 1
- WOVKYSAHUYNSMH-UHFFFAOYSA-N BROMODEOXYURIDINE Natural products C1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C(Br)=C1 WOVKYSAHUYNSMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000027496 Behcet disease Diseases 0.000 description 1
- 208000009137 Behcet syndrome Diseases 0.000 description 1
- KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N Betaine Natural products C[N+](C)(C)CC([O-])=O KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010006654 Bleomycin Proteins 0.000 description 1
- 208000006386 Bone Resorption Diseases 0.000 description 1
- 208000003508 Botulism Diseases 0.000 description 1
- WKBOTKDWSSQWDR-OIOBTWANSA-N Bromine-77 Chemical compound [77Br] WKBOTKDWSSQWDR-OIOBTWANSA-N 0.000 description 1
- 229910000906 Bronze Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000011691 Burkitt lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-NJFSPNSNSA-N Carbon-14 Chemical compound [14C] OKTJSMMVPCPJKN-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 102000003846 Carbonic anhydrases Human genes 0.000 description 1
- 108090000209 Carbonic anhydrases Proteins 0.000 description 1
- 206010061005 Cardiac myxoma Diseases 0.000 description 1
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- 206010008909 Chronic Hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 208000000094 Chronic Pain Diseases 0.000 description 1
- 208000015943 Coeliac disease Diseases 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010010356 Congenital anomaly Diseases 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 1
- 108060002063 Cyclotide Proteins 0.000 description 1
- 201000003883 Cystic fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 102000018832 Cytochromes Human genes 0.000 description 1
- 108010052832 Cytochromes Proteins 0.000 description 1
- 102100037579 D-3-phosphoglycerate dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N D-Luciferin Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSC(C=2SC3=CC=C(O)C=C3N=2)=N1 IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N D-OH-Asp Natural products OC(=O)C(N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-QWWZWVQMSA-N D-arabinitol Chemical compound OC[C@@H](O)C(O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N D-gluconic acid Chemical class OCC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N D-ribofuranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 1
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 1
- 206010011971 Decreased interest Diseases 0.000 description 1
- CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N Dehydro-luciferin Natural products OC(=O)C1=CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000006313 Delayed Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 208000001490 Dengue Diseases 0.000 description 1
- 206010012310 Dengue fever Diseases 0.000 description 1
- 206010012374 Depressed mood Diseases 0.000 description 1
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 206010012438 Dermatitis atopic Diseases 0.000 description 1
- 108700022150 Designed Ankyrin Repeat Proteins Proteins 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical class OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 229920002491 Diethylaminoethyl-dextran Polymers 0.000 description 1
- 102000016607 Diphtheria Toxin Human genes 0.000 description 1
- 108010053187 Diphtheria Toxin Proteins 0.000 description 1
- 208000006926 Discoid Lupus Erythematosus Diseases 0.000 description 1
- QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N Disodium Chemical compound [Na][Na] QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010014612 Encephalitis viral Diseases 0.000 description 1
- 201000009273 Endometriosis Diseases 0.000 description 1
- 206010014954 Eosinophilic fasciitis Diseases 0.000 description 1
- 239000004386 Erythritol Substances 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N Erythritol Natural products OCC(O)C(O)CO UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000031637 Erythroblastic Acute Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 208000036566 Erythroleukaemia Diseases 0.000 description 1
- VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N Ethene Chemical compound C=C VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CTKXFMQHOOWWEB-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide/propylene oxide copolymer Chemical compound CCCOC(C)COCCO CTKXFMQHOOWWEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052693 Europium Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000002633 Febrile Neutropenia Diseases 0.000 description 1
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 1
- BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N Fivefly Luciferin Natural products OC(=O)C1CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YCKRFDGAMUMZLT-UHFFFAOYSA-N Fluorine atom Chemical compound [F] YCKRFDGAMUMZLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000004262 Food Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N Fucose Natural products C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 1
- 206010017533 Fungal infection Diseases 0.000 description 1
- 206010058872 Fungal sepsis Diseases 0.000 description 1
- GYHNNYVSQQEPJS-OIOBTWANSA-N Gallium-67 Chemical compound [67Ga] GYHNNYVSQQEPJS-OIOBTWANSA-N 0.000 description 1
- GYHNNYVSQQEPJS-YPZZEJLDSA-N Gallium-68 Chemical compound [68Ga] GYHNNYVSQQEPJS-YPZZEJLDSA-N 0.000 description 1
- 201000000628 Gas Gangrene Diseases 0.000 description 1
- 108700028146 Genetic Enhancer Elements Proteins 0.000 description 1
- 108700007698 Genetic Terminator Regions Proteins 0.000 description 1
- 206010018364 Glomerulonephritis Diseases 0.000 description 1
- 239000004366 Glucose oxidase Substances 0.000 description 1
- 108010015776 Glucose oxidase Proteins 0.000 description 1
- 108010018962 Glucosephosphate Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002527 Glycogen Polymers 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 1
- 206010018691 Granuloma Diseases 0.000 description 1
- 101710113242 Granzyme A Proteins 0.000 description 1
- 108010043121 Green Fluorescent Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004144 Green Fluorescent Proteins Human genes 0.000 description 1
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 description 1
- 208000037357 HIV infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 208000001204 Hashimoto Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000030836 Hashimoto thyroiditis Diseases 0.000 description 1
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 1
- 208000018565 Hemochromatosis Diseases 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 206010019728 Hepatitis alcoholic Diseases 0.000 description 1
- 206010019755 Hepatitis chronic active Diseases 0.000 description 1
- 206010019799 Hepatitis viral Diseases 0.000 description 1
- 208000002972 Hepatolenticular Degeneration Diseases 0.000 description 1
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000002291 Histiocytic Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 208000017604 Hodgkin disease Diseases 0.000 description 1
- 208000010747 Hodgkins lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 101001033249 Homo sapiens Interleukin-1 beta Proteins 0.000 description 1
- 101000599056 Homo sapiens Interleukin-6 receptor subunit beta Proteins 0.000 description 1
- 102000003839 Human Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000144 Human Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000701044 Human gammaherpesvirus 4 Species 0.000 description 1
- 101000963974 Hydrophis stokesii Alpha-elapitoxin-Ast2b Proteins 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N Hydroxyproline Chemical compound O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 1
- 208000037147 Hypercalcaemia Diseases 0.000 description 1
- 208000001953 Hypotension Diseases 0.000 description 1
- 201000003838 Idiopathic interstitial pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 206010021245 Idiopathic thrombocytopenic purpura Diseases 0.000 description 1
- 102000006496 Immunoglobulin Heavy Chains Human genes 0.000 description 1
- 108010019476 Immunoglobulin Heavy Chains Proteins 0.000 description 1
- 208000004575 Infectious Arthritis Diseases 0.000 description 1
- 206010022491 Insulin resistant diabetes Diseases 0.000 description 1
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 208000029523 Interstitial Lung disease Diseases 0.000 description 1
- 206010022941 Iridocyclitis Diseases 0.000 description 1
- 208000009388 Job Syndrome Diseases 0.000 description 1
- LKDRXBCSQODPBY-AMVSKUEXSA-N L-(-)-Sorbose Chemical compound OCC1(O)OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O LKDRXBCSQODPBY-AMVSKUEXSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N L-Aspartic acid Natural products OC(=O)[C@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 229930064664 L-arginine Natural products 0.000 description 1
- 235000014852 L-arginine Nutrition 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N L-fucopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N 0.000 description 1
- 241000589248 Legionella Species 0.000 description 1
- 208000007764 Legionnaires' Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000004554 Leishmaniasis Diseases 0.000 description 1
- 240000006240 Linum usitatissimum Species 0.000 description 1
- 235000004431 Linum usitatissimum Nutrition 0.000 description 1
- 102000019298 Lipocalin Human genes 0.000 description 1
- 108050006654 Lipocalin Proteins 0.000 description 1
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 1
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 1
- DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N Luciferin Natural products CCc1c(C)c(CC2NC(=O)C(=C2C=C)C)[nH]c1Cc3[nH]c4C(=C5/NC(CC(=O)O)C(C)C5CC(=O)O)CC(=O)c4c3C DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000019693 Lung disease Diseases 0.000 description 1
- 208000016604 Lyme disease Diseases 0.000 description 1
- 208000031422 Lymphocytic Chronic B-Cell Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 101100286715 Macaca fascicularis IL6 gene Proteins 0.000 description 1
- 108010026217 Malate Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 229920002774 Maltodextrin Polymers 0.000 description 1
- 201000009906 Meningitis Diseases 0.000 description 1
- 206010027201 Meningitis aseptic Diseases 0.000 description 1
- 206010058858 Meningococcal bacteraemia Diseases 0.000 description 1
- 206010060880 Monoclonal gammopathy Diseases 0.000 description 1
- 208000019022 Mood disease Diseases 0.000 description 1
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 description 1
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 1
- 101100456571 Mus musculus Med12 gene Proteins 0.000 description 1
- 241001502334 Mycobacterium avium complex bacterium Species 0.000 description 1
- 208000031888 Mycoses Diseases 0.000 description 1
- 208000014767 Myeloproliferative disease Diseases 0.000 description 1
- 201000007224 Myeloproliferative neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 201000002481 Myositis Diseases 0.000 description 1
- JDHILDINMRGULE-LURJTMIESA-N N(pros)-methyl-L-histidine Chemical compound CN1C=NC=C1C[C@H](N)C(O)=O JDHILDINMRGULE-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-O N,N,N-trimethylglycinium Chemical compound C[N+](C)(C)CC(O)=O KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N N-acelyl-D-glucosamine Natural products CC(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JJIHLJJYMXLCOY-BYPYZUCNSA-N N-acetyl-L-serine Chemical compound CC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O JJIHLJJYMXLCOY-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N N-acetyl-beta-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N 0.000 description 1
- MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N N-acetylglucosamine Natural products CC(=O)N[C@@H](C=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N 0.000 description 1
- 229930182474 N-glycoside Natural products 0.000 description 1
- FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N N-methylaminoacetic acid Natural products C[NH2+]CC([O-])=O FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000964025 Naja naja Long neurotoxin 3 Proteins 0.000 description 1
- 101000822778 Naja naja Long neurotoxin 4 Proteins 0.000 description 1
- 101000822797 Naja naja Long neurotoxin 5 Proteins 0.000 description 1
- 208000002454 Nasopharyngeal Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 206010061306 Nasopharyngeal cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010065673 Nephritic syndrome Diseases 0.000 description 1
- 102000010410 Nogo Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010077641 Nogo Proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000015914 Non-Hodgkin lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 1
- 108020005187 Oligonucleotide Probes Proteins 0.000 description 1
- 208000003435 Optic Neuritis Diseases 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- CBENFWSGALASAD-UHFFFAOYSA-N Ozone Chemical compound [O-][O+]=O CBENFWSGALASAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 1
- 206010033647 Pancreatitis acute Diseases 0.000 description 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 1
- 208000002774 Paraproteinemias Diseases 0.000 description 1
- AHOUBRCZNHFOSL-UHFFFAOYSA-N Paroxetine hydrochloride Natural products C1=CC(F)=CC=C1C1C(COC=2C=C3OCOC3=CC=2)CNCC1 AHOUBRCZNHFOSL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000029082 Pelvic Inflammatory Disease Diseases 0.000 description 1
- 206010034277 Pemphigoid Diseases 0.000 description 1
- 241000721454 Pemphigus Species 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-OUBTZVSYSA-N Phosphorus-32 Chemical compound [32P] OAICVXFJPJFONN-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
- 108010053210 Phycocyanin Proteins 0.000 description 1
- 208000021738 Plummer disease Diseases 0.000 description 1
- 208000005384 Pneumocystis Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 206010073755 Pneumocystis jirovecii pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 229920001744 Polyaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 206010036105 Polyneuropathy Diseases 0.000 description 1
- 229920001214 Polysorbate 60 Polymers 0.000 description 1
- 206010060932 Postoperative adhesion Diseases 0.000 description 1
- 208000006664 Precursor Cell Lymphoblastic Leukemia-Lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 208000005107 Premature Birth Diseases 0.000 description 1
- 206010036590 Premature baby Diseases 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 206010036774 Proctitis Diseases 0.000 description 1
- 206010036790 Productive cough Diseases 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 102220548959 Protein Bop_R207E_mutation Human genes 0.000 description 1
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 1
- 101000762949 Pseudomonas aeruginosa (strain ATCC 15692 / DSM 22644 / CIP 104116 / JCM 14847 / LMG 12228 / 1C / PRS 101 / PAO1) Exotoxin A Proteins 0.000 description 1
- 208000003782 Raynaud disease Diseases 0.000 description 1
- 208000012322 Raynaud phenomenon Diseases 0.000 description 1
- 208000033626 Renal failure acute Diseases 0.000 description 1
- 206010063837 Reperfusion injury Diseases 0.000 description 1
- 208000013616 Respiratory Distress Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000036284 Rhinitis seasonal Diseases 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 1
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 108010077895 Sarcosine Proteins 0.000 description 1
- 208000034189 Sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 206010039793 Seborrhoeic dermatitis Diseases 0.000 description 1
- BUGBHKTXTAQXES-AHCXROLUSA-N Selenium-75 Chemical compound [75Se] BUGBHKTXTAQXES-AHCXROLUSA-N 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- 206010053879 Sepsis syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010040070 Septic Shock Diseases 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710084578 Short neurotoxin 1 Proteins 0.000 description 1
- 208000021386 Sjogren Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010040943 Skin Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 206010040844 Skin exfoliation Diseases 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000004288 Sodium dehydroacetate Substances 0.000 description 1
- 206010041549 Spinal cord compression Diseases 0.000 description 1
- 101000677856 Stenotrophomonas maltophilia (strain K279a) Actin-binding protein Smlt3054 Proteins 0.000 description 1
- 208000007107 Stomach Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N Succinic acid Chemical class OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-AKLPVKDBSA-N Sulfur-35 Chemical compound [35S] NINIDFKCEFEMDL-AKLPVKDBSA-N 0.000 description 1
- 101800001271 Surface protein Proteins 0.000 description 1
- 201000009594 Systemic Scleroderma Diseases 0.000 description 1
- 208000004732 Systemic Vasculitis Diseases 0.000 description 1
- 206010042953 Systemic sclerosis Diseases 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Chemical class [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100024554 Tetranectin Human genes 0.000 description 1
- 208000031981 Thrombocytopenic Idiopathic Purpura Diseases 0.000 description 1
- 201000007023 Thrombotic Thrombocytopenic Purpura Diseases 0.000 description 1
- 206010044248 Toxic shock syndrome Diseases 0.000 description 1
- 231100000650 Toxic shock syndrome Toxicity 0.000 description 1
- 206010070863 Toxicity to various agents Diseases 0.000 description 1
- 101710182223 Toxin B Proteins 0.000 description 1
- 101710182532 Toxin a Proteins 0.000 description 1
- 102000004338 Transferrin Human genes 0.000 description 1
- 108090000901 Transferrin Proteins 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 206010048709 Urosepsis Diseases 0.000 description 1
- 208000024780 Urticaria Diseases 0.000 description 1
- 206010046851 Uveitis Diseases 0.000 description 1
- 206010047115 Vasculitis Diseases 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 206010047642 Vitiligo Diseases 0.000 description 1
- 208000018839 Wilson disease Diseases 0.000 description 1
- PNDPGZBMCMUPRI-XXSWNUTMSA-N [125I][125I] Chemical compound [125I][125I] PNDPGZBMCMUPRI-XXSWNUTMSA-N 0.000 description 1
- SXEHKFHPFVVDIR-UHFFFAOYSA-N [4-(4-hydrazinylphenyl)phenyl]hydrazine Chemical compound C1=CC(NN)=CC=C1C1=CC=C(NN)C=C1 SXEHKFHPFVVDIR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940022698 acetylcholinesterase Drugs 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 229940119059 actemra Drugs 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 208000021841 acute erythroid leukemia Diseases 0.000 description 1
- 201000011040 acute kidney failure Diseases 0.000 description 1
- 208000005298 acute pain Diseases 0.000 description 1
- 201000003229 acute pancreatitis Diseases 0.000 description 1
- 208000012998 acute renal failure Diseases 0.000 description 1
- 208000009956 adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 1
- 201000000028 adult respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 208000002353 alcoholic hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 208000002029 allergic contact dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 108010004469 allophycocyanin Proteins 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- 108010030291 alpha-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- 102000005840 alpha-Galactosidase Human genes 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 description 1
- 230000000202 analgesic effect Effects 0.000 description 1
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 1
- JFCQEDHGNNZCLN-UHFFFAOYSA-N anhydrous glutaric acid Natural products OC(=O)CCCC(O)=O JFCQEDHGNNZCLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003945 anionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 201000004612 anterior uveitis Diseases 0.000 description 1
- 230000001430 anti-depressive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 238000011230 antibody-based therapy Methods 0.000 description 1
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 210000000628 antibody-producing cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000935 antidepressant agent Substances 0.000 description 1
- 229940005513 antidepressants Drugs 0.000 description 1
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 239000002216 antistatic agent Substances 0.000 description 1
- 239000008365 aqueous carrier Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 125000000637 arginyl group Chemical group N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 description 1
- 210000004507 artificial chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Chemical class 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 description 1
- 206010003549 asthenia Diseases 0.000 description 1
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 201000003710 autoimmune thrombocytopenic purpura Diseases 0.000 description 1
- 238000002819 bacterial display Methods 0.000 description 1
- 239000008228 bacteriostatic water for injection Substances 0.000 description 1
- 238000013398 bayesian method Methods 0.000 description 1
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 description 1
- 229960001950 benzethonium chloride Drugs 0.000 description 1
- UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M benzethonium chloride Chemical compound [Cl-].C1=CC(C(C)(C)CC(C)(C)C)=CC=C1OCCOCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001576 beta-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 229960003237 betaine Drugs 0.000 description 1
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 1
- 238000010256 biochemical assay Methods 0.000 description 1
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 238000001815 biotherapy Methods 0.000 description 1
- 229960001561 bleomycin Drugs 0.000 description 1
- OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O bleomycin A2 Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCCC=1SC=C(N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCC[S+](C)C)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1N=CNC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O 0.000 description 1
- 230000036765 blood level Effects 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 230000024279 bone resorption Effects 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 206010006451 bronchitis Diseases 0.000 description 1
- 239000010974 bronze Substances 0.000 description 1
- 229950004398 broxuridine Drugs 0.000 description 1
- 108010049223 bryodin Proteins 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- 208000000594 bullous pemphigoid Diseases 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N butanedioic acid Chemical class O[14C](=O)CC[14C](O)=O KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003093 cationic surfactant Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 1
- 230000005754 cellular signaling Effects 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 1
- VDQQXEISLMTGAB-UHFFFAOYSA-N chloramine T Chemical compound [Na+].CC1=CC=C(S(=O)(=O)[N-]Cl)C=C1 VDQQXEISLMTGAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004926 chlorobutanol Drugs 0.000 description 1
- 229960002242 chlorocresol Drugs 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 208000023819 chronic asthma Diseases 0.000 description 1
- 208000017760 chronic graft versus host disease Diseases 0.000 description 1
- 201000009151 chronic rhinitis Diseases 0.000 description 1
- 230000004087 circulation Effects 0.000 description 1
- 238000007621 cluster analysis Methods 0.000 description 1
- GUTLYIVDDKVIGB-YPZZEJLDSA-N cobalt-57 Chemical compound [57Co] GUTLYIVDDKVIGB-YPZZEJLDSA-N 0.000 description 1
- 201000010989 colorectal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 208000010247 contact dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- KUNSUQLRTQLHQQ-UHFFFAOYSA-N copper tin Chemical compound [Cu].[Sn] KUNSUQLRTQLHQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004087 cornea Anatomy 0.000 description 1
- 208000004921 cutaneous lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 208000035250 cutaneous malignant susceptibility to 1 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 230000010250 cytokine signaling pathway Effects 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 238000007418 data mining Methods 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002939 deleterious effect Effects 0.000 description 1
- YSMODUONRAFBET-UHFFFAOYSA-N delta-DL-hydroxylysine Natural products NCC(O)CCC(N)C(O)=O YSMODUONRAFBET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000025729 dengue disease Diseases 0.000 description 1
- 230000035618 desquamation Effects 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- BFMYDTVEBKDAKJ-UHFFFAOYSA-L disodium;(2',7'-dibromo-3',6'-dioxido-3-oxospiro[2-benzofuran-1,9'-xanthene]-4'-yl)mercury;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Na+].O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(Br)=C([O-])C([Hg])=C1OC1=C2C=C(Br)C([O-])=C1 BFMYDTVEBKDAKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N dl-hydroxyproline Natural products OC1C[NH2+]C(C([O-])=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007876 drug discovery Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 239000000428 dust Substances 0.000 description 1
- 235000006694 eating habits Nutrition 0.000 description 1
- 230000005670 electromagnetic radiation Effects 0.000 description 1
- 230000005274 electronic transitions Effects 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 1
- 201000002491 encephalomyelitis Diseases 0.000 description 1
- 208000030172 endocrine system disease Diseases 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 231100000284 endotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002346 endotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 201000001564 eosinophilic gastroenteritis Diseases 0.000 description 1
- 201000010063 epididymitis Diseases 0.000 description 1
- 208000001606 epiglottitis Diseases 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N erythritol Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)CO UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N 0.000 description 1
- 229940009714 erythritol Drugs 0.000 description 1
- 235000019414 erythritol Nutrition 0.000 description 1
- YSMODUONRAFBET-UHNVWZDZSA-N erythro-5-hydroxy-L-lysine Chemical compound NC[C@H](O)CC[C@H](N)C(O)=O YSMODUONRAFBET-UHNVWZDZSA-N 0.000 description 1
- 229960004341 escitalopram Drugs 0.000 description 1
- WSEQXVZVJXJVFP-FQEVSTJZSA-N escitalopram Chemical compound C1([C@]2(C3=CC=C(C=C3CO2)C#N)CCCN(C)C)=CC=C(F)C=C1 WSEQXVZVJXJVFP-FQEVSTJZSA-N 0.000 description 1
- HQPMKSGTIOYHJT-UHFFFAOYSA-N ethane-1,2-diol;propane-1,2-diol Chemical compound OCCO.CC(O)CO HQPMKSGTIOYHJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol bis(2-aminoethyl)tetraacetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCOCCOCCN(CC(O)=O)CC(O)=O DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OGPBJKLSAFTDLK-UHFFFAOYSA-N europium atom Chemical compound [Eu] OGPBJKLSAFTDLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 208000021045 exocrine pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 210000003414 extremity Anatomy 0.000 description 1
- 201000001155 extrinsic allergic alveolitis Diseases 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 201000008825 fibrosarcoma of bone Diseases 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 1
- 229960002464 fluoxetine Drugs 0.000 description 1
- 235000020932 food allergy Nutrition 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 125000002485 formyl group Chemical group [H]C(*)=O 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 1
- 238000002825 functional assay Methods 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 150000008195 galaktosides Chemical class 0.000 description 1
- 229940006110 gallium-67 Drugs 0.000 description 1
- 201000005917 gastric ulcer Diseases 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 1
- 239000000174 gluconic acid Chemical class 0.000 description 1
- 235000012208 gluconic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940116332 glucose oxidase Drugs 0.000 description 1
- 235000019420 glucose oxidase Nutrition 0.000 description 1
- 102000010705 glucose-6-phosphate dehydrogenase activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108040005050 glucose-6-phosphate dehydrogenase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 125000000291 glutamic acid group Chemical group N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 229960002449 glycine Drugs 0.000 description 1
- 229940096919 glycogen Drugs 0.000 description 1
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 description 1
- 239000005090 green fluorescent protein Substances 0.000 description 1
- 229940093915 gynecological organic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000001631 haemodialysis Methods 0.000 description 1
- 201000009277 hairy cell leukemia Diseases 0.000 description 1
- 231100000869 headache Toxicity 0.000 description 1
- 201000011066 hemangioma Diseases 0.000 description 1
- 230000000322 hemodialysis Effects 0.000 description 1
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002008 hemorrhagic effect Effects 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 238000005734 heterodimerization reaction Methods 0.000 description 1
- 150000004687 hexahydrates Chemical class 0.000 description 1
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 description 1
- 125000000487 histidyl group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 108091008039 hormone receptors Proteins 0.000 description 1
- 208000033519 human immunodeficiency virus infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 229940014041 hyaluronate Drugs 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical group 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 229960002591 hydroxyproline Drugs 0.000 description 1
- 206010051040 hyper-IgE syndrome Diseases 0.000 description 1
- 230000000148 hypercalcaemia Effects 0.000 description 1
- 208000030915 hypercalcemia disease Diseases 0.000 description 1
- 208000022098 hypersensitivity pneumonitis Diseases 0.000 description 1
- 230000001969 hypertrophic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004179 hypothalamic–pituitary–adrenal axis Effects 0.000 description 1
- 230000001146 hypoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 239000012133 immunoprecipitate Substances 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- APFVFJFRJDLVQX-UHFFFAOYSA-N indium atom Chemical compound [In] APFVFJFRJDLVQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- APFVFJFRJDLVQX-AHCXROLUSA-N indium-111 Chemical compound [111In] APFVFJFRJDLVQX-AHCXROLUSA-N 0.000 description 1
- 229940055742 indium-111 Drugs 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 230000004968 inflammatory condition Effects 0.000 description 1
- 208000037797 influenza A Diseases 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- XMBWDFGMSWQBCA-BJUDXGSMSA-N iodane Chemical compound [126IH] XMBWDFGMSWQBCA-BJUDXGSMSA-N 0.000 description 1
- XMBWDFGMSWQBCA-LZFNBGRKSA-N iodane Chemical compound [133IH] XMBWDFGMSWQBCA-LZFNBGRKSA-N 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940044173 iodine-125 Drugs 0.000 description 1
- 230000005865 ionizing radiation Effects 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical group 0.000 description 1
- 239000012948 isocyanate Substances 0.000 description 1
- 150000002513 isocyanates Chemical class 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N isomaltotriose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)O1 FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N 0.000 description 1
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 239000000990 laser dye Substances 0.000 description 1
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 1
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 1
- 238000002898 library design Methods 0.000 description 1
- 201000011486 lichen planus Diseases 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 208000012866 low blood pressure Diseases 0.000 description 1
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 1
- HWYHZTIRURJOHG-UHFFFAOYSA-N luminol Chemical compound O=C1NNC(=O)C2=C1C(N)=CC=C2 HWYHZTIRURJOHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 201000003866 lung sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 230000002535 lyotropic effect Effects 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 1
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 1
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 1
- 238000010801 machine learning Methods 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 229960002337 magnesium chloride Drugs 0.000 description 1
- 230000005291 magnetic effect Effects 0.000 description 1
- 201000004792 malaria Diseases 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 201000006812 malignant histiocytosis Diseases 0.000 description 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 1
- 229960001855 mannitol Drugs 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 238000012067 mathematical method Methods 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 238000002483 medication Methods 0.000 description 1
- 102000006240 membrane receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020004084 membrane receptors Proteins 0.000 description 1
- 208000022089 meningococcemia Diseases 0.000 description 1
- 230000005906 menstruation Effects 0.000 description 1
- QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N mercury Chemical compound [Hg] QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052753 mercury Inorganic materials 0.000 description 1
- QSHDDOUJBYECFT-NJFSPNSNSA-N mercury-203 Chemical compound [203Hg] QSHDDOUJBYECFT-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 1
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N methanone Chemical compound O=[14CH2] WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 210000002500 microbody Anatomy 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000003020 moisturizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- LPUQAYUQRXPFSQ-DFWYDOINSA-M monosodium L-glutamate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O LPUQAYUQRXPFSQ-DFWYDOINSA-M 0.000 description 1
- 235000013923 monosodium glutamate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004223 monosodium glutamate Substances 0.000 description 1
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 238000002887 multiple sequence alignment Methods 0.000 description 1
- 231100000150 mutagenicity / genotoxicity testing Toxicity 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- NZXVYLJKFYSEPO-UHFFFAOYSA-N n-[3-(dimethylamino)propyl]-16-methylheptadecanamide Chemical compound CC(C)CCCCCCCCCCCCCCC(=O)NCCCN(C)C NZXVYLJKFYSEPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950006780 n-acetylglucosamine Drugs 0.000 description 1
- 201000011216 nasopharynx carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 201000008383 nephritis Diseases 0.000 description 1
- 208000009928 nephrosis Diseases 0.000 description 1
- 231100001027 nephrosis Toxicity 0.000 description 1
- 208000004296 neuralgia Diseases 0.000 description 1
- 230000001272 neurogenic effect Effects 0.000 description 1
- 208000021722 neuropathic pain Diseases 0.000 description 1
- ZLGLJDGHKLKKIV-UHFFFAOYSA-M nitrosooxy(phenyl)mercury Chemical compound [O-]N=O.[Hg+]C1=CC=CC=C1 ZLGLJDGHKLKKIV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 238000001668 nucleic acid synthesis Methods 0.000 description 1
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 1
- 230000000414 obstructive effect Effects 0.000 description 1
- 125000001117 oleyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])/C([H])=C([H])\C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000002751 oligonucleotide probe Substances 0.000 description 1
- QQBDLJCYGRGAKP-UHFFFAOYSA-N olsalazine Chemical compound C1=C(O)C(C(=O)O)=CC(N=NC=2C=C(C(O)=CC=2)C(O)=O)=C1 QQBDLJCYGRGAKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 238000012803 optimization experiment Methods 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 230000016087 ovulation Effects 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 229940124641 pain reliever Drugs 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 1
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 1
- 230000005298 paramagnetic effect Effects 0.000 description 1
- 208000012111 paraneoplastic syndrome Diseases 0.000 description 1
- 230000003071 parasitic effect Effects 0.000 description 1
- 229960002296 paroxetine Drugs 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 238000003909 pattern recognition Methods 0.000 description 1
- 230000006320 pegylation Effects 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 206010034674 peritonitis Diseases 0.000 description 1
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000002688 persistence Effects 0.000 description 1
- 229940124531 pharmaceutical excipient Drugs 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 229960005323 phenoxyethanol Drugs 0.000 description 1
- WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N phenyl(114C)methanol Chemical compound O[14CH2]C1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940097886 phosphorus 32 Drugs 0.000 description 1
- 239000003504 photosensitizing agent Substances 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 1
- 230000004983 pleiotropic effect Effects 0.000 description 1
- 201000000317 pneumocystosis Diseases 0.000 description 1
- 229940044519 poloxamer 188 Drugs 0.000 description 1
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 1
- 230000007824 polyneuropathy Effects 0.000 description 1
- 235000010989 polyoxyethylene sorbitan monostearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001818 polyoxyethylene sorbitan monostearate Substances 0.000 description 1
- 229920005606 polypropylene copolymer Polymers 0.000 description 1
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229940113124 polysorbate 60 Drugs 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 201000011461 pre-eclampsia Diseases 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 201000008171 proliferative glomerulonephritis Diseases 0.000 description 1
- 235000013930 proline Nutrition 0.000 description 1
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 201000001514 prostate carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 1
- 238000002818 protein evolution Methods 0.000 description 1
- 230000006916 protein interaction Effects 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 208000005069 pulmonary fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 230000009325 pulmonary function Effects 0.000 description 1
- 238000003751 purification from natural source Methods 0.000 description 1
- 239000002510 pyrogen Substances 0.000 description 1
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 238000000611 regression analysis Methods 0.000 description 1
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 208000023504 respiratory system disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002207 retinal effect Effects 0.000 description 1
- 210000003705 ribosome Anatomy 0.000 description 1
- 238000002702 ribosome display Methods 0.000 description 1
- 210000005241 right ventricle Anatomy 0.000 description 1
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 description 1
- 102220338615 rs1204310516 Human genes 0.000 description 1
- KJTLSVCANCCWHF-NJFSPNSNSA-N ruthenium-103 Chemical compound [103Ru] KJTLSVCANCCWHF-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- KJTLSVCANCCWHF-RNFDNDRNSA-N ruthenium-105 Chemical compound [105Ru] KJTLSVCANCCWHF-RNFDNDRNSA-N 0.000 description 1
- KJTLSVCANCCWHF-AHCXROLUSA-N ruthenium-97 Chemical compound [97Ru] KJTLSVCANCCWHF-AHCXROLUSA-N 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- 201000000306 sarcoidosis Diseases 0.000 description 1
- 229940043230 sarcosine Drugs 0.000 description 1
- SIXSYDAISGFNSX-NJFSPNSNSA-N scandium-47 Chemical compound [47Sc] SIXSYDAISGFNSX-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000008742 seborrheic dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 238000010517 secondary reaction Methods 0.000 description 1
- 229940124834 selective serotonin reuptake inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000012896 selective serotonin reuptake inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 201000001223 septic arthritis Diseases 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 229960001153 serine Drugs 0.000 description 1
- 239000003772 serotonin uptake inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229960002073 sertraline Drugs 0.000 description 1
- VGKDLMBJGBXTGI-SJCJKPOMSA-N sertraline Chemical compound C1([C@@H]2CC[C@@H](C3=CC=CC=C32)NC)=CC=C(Cl)C(Cl)=C1 VGKDLMBJGBXTGI-SJCJKPOMSA-N 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 208000007056 sickle cell anemia Diseases 0.000 description 1
- 235000021309 simple sugar Nutrition 0.000 description 1
- 201000009890 sinusitis Diseases 0.000 description 1
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 description 1
- 201000002859 sleep apnea Diseases 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- 108010010958 snake venom neurotoxin F Proteins 0.000 description 1
- 235000019259 sodium dehydroacetate Nutrition 0.000 description 1
- 229940079839 sodium dehydroacetate Drugs 0.000 description 1
- 229940074404 sodium succinate Drugs 0.000 description 1
- ZDQYSKICYIVCPN-UHFFFAOYSA-L sodium succinate (anhydrous) Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)CCC([O-])=O ZDQYSKICYIVCPN-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- DSOWAKKSGYUMTF-GZOLSCHFSA-M sodium;(1e)-1-(6-methyl-2,4-dioxopyran-3-ylidene)ethanolate Chemical compound [Na+].C\C([O-])=C1/C(=O)OC(C)=CC1=O DSOWAKKSGYUMTF-GZOLSCHFSA-M 0.000 description 1
- 239000008279 sol Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 230000003381 solubilizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 description 1
- 125000006850 spacer group Chemical class 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 208000024794 sputum Diseases 0.000 description 1
- 210000003802 sputum Anatomy 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 1
- 238000011146 sterile filtration Methods 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 125000000185 sucrose group Chemical group 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000008093 supporting effect Effects 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 238000011477 surgical intervention Methods 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Chemical class 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940104261 taurate Drugs 0.000 description 1
- XOAAWQZATWQOTB-UHFFFAOYSA-N taurine Chemical compound NCCS(O)(=O)=O XOAAWQZATWQOTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 description 1
- 108010013645 tetranectin Proteins 0.000 description 1
- MPLHNVLQVRSVEE-UHFFFAOYSA-N texas red Chemical compound [O-]S(=O)(=O)C1=CC(S(Cl)(=O)=O)=CC=C1C(C1=CC=2CCCN3CCCC(C=23)=C1O1)=C2C1=C(CCC1)C3=[N+]1CCCC3=C2 MPLHNVLQVRSVEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940033663 thimerosal Drugs 0.000 description 1
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 1
- 210000000115 thoracic cavity Anatomy 0.000 description 1
- FRNOGLGSGLTDKL-YPZZEJLDSA-N thulium-167 Chemical compound [167Tm] FRNOGLGSGLTDKL-YPZZEJLDSA-N 0.000 description 1
- 206010043778 thyroiditis Diseases 0.000 description 1
- 230000000451 tissue damage Effects 0.000 description 1
- 231100000827 tissue damage Toxicity 0.000 description 1
- 238000000954 titration curve Methods 0.000 description 1
- 229960003989 tocilizumab Drugs 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 239000012581 transferrin Substances 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 1
- 102000027257 transmembrane receptors Human genes 0.000 description 1
- 108091008578 transmembrane receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 125000000647 trehalose group Chemical group 0.000 description 1
- 150000003625 trehaloses Chemical class 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052722 tritium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940073585 tromethamine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- 239000002753 trypsin inhibitor Substances 0.000 description 1
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 229910052721 tungsten Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000005951 type IV hypersensitivity Effects 0.000 description 1
- 208000027930 type IV hypersensitivity disease Diseases 0.000 description 1
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 1
- 208000009852 uremia Diseases 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 238000007879 vasectomy Methods 0.000 description 1
- 230000002861 ventricular Effects 0.000 description 1
- 201000002498 viral encephalitis Diseases 0.000 description 1
- 201000001862 viral hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 238000011179 visual inspection Methods 0.000 description 1
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 1
- VWQVUPCCIRVNHF-UHFFFAOYSA-N yttrium atom Chemical compound [Y] VWQVUPCCIRVNHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
- C07K16/244—Interleukins [IL]
- C07K16/248—IL-6
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
- A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/18—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for pancreatic disorders, e.g. pancreatic enzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
- A61P11/06—Antiasthmatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
- A61P11/08—Bronchodilators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/06—Antigout agents, e.g. antihyperuricemic or uricosuric agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/06—Antimigraine agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/24—Antidepressants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
- C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
- C07K2317/622—Single chain antibody (scFv)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/72—Increased effector function due to an Fc-modification
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Immunology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Mycology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Cardiology (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биохимии. Описано антитело, которое специфично связывается с IL-6, где это антитело включает аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 9 и SEQ ID NO: 10. Кроме того, данное изобретение относится к фармацевтическим композициям, терапевтическим композициям и способам применения терапевтических антител, которые связывают IL-6 и которые имеют пролонгированный период полувыведения in vivo для лечения и профилактики IL-6 опосредованных заболеваний и расстройств, таких как, но не ограничиваясь приведенными, воспалительные заболевания и расстройства, аутоиммунные заболевания и расстройства и опухоли. Изобретение представляет человеческие анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения in vivo. 7 н. и 10 з.п. ф-лы, 18 ил., 3 табл., 3 пр.
Description
Заявление о приоритете
[0001] В данной заявке заявлен приоритет заявки США, серийный номер 61/148,106, поданной 29 января 2009 г., и заявки США, серийный номер 61/184,182, поданной 4 июня 2009 г., обе из которых включены в данную заявку полностью путем ссылок для всех целей.
Область техники
[0002] Данное изобретение относится к молекулам анти-IL-6 антител, ингибирующих биологические эффекты IL-6 и имеющих пролонгированный период полувыведения in vivo. Анти-IL-6 антитела являются полезными для лечения расстройств, связанных с IL-6, включая воспалительные расстройства, аутоиммунные расстройства, опухоли и депрессию.
Уровень техники
[0003] Интерлейкин 6 (IL-6) является 26 kDa плейотропным про-воспалительным цитокином, который вырабатывают многие клеточные типы, включая стимулированные фибробласты, моноциты и эндотелиальные клетки, образующие основной источник IL-6 in vivo. Клетки, такие, как Т клетки, В клетки, макрофаги, кератиноциты, остеобласты и несколько других типов, могут продуцировать IL-6 при стимуляции. IL-6 также экспрессируется из опухолевых клеточных линий и опухолевых клеток, например, клеток саркомы легких, рака простаты, миеломы, гипернефромы и сердечной миксомы (Kishimoto, Т., (1989) Blood 74:1-10; Smith Р.С. et al. (2001) Cytokine and Growth factor Reviews 12:33-40). В невоспалительных условиях IL-6 выделяется из адипозных тканей (Wallenius et al., (2002) Nat. Med. 8:75).
[0004] Для начала клеточных сигналов, IL-6 связывается с трансмембранным рецептором с низкой аффинностью, IL-6 рецептор альфа (который также имеет название IL-6Rα, IL-6Ra, IL-6R, gp80 или CD126) с образованием комплекса "IL-6:IL-6Ra". Данный комплекс связывается с рецептором сигналов gp130; IL-6Rα и gp130, которые вместе образуют сайт связывания IL-6 высокой аффинности, и приводят к образованию гексамера, составленного из двух копий каждого из IL-6, IL-6Ra и gp130 (Somers, W., et al. (1997) 1,9 EMBO J. 16:989-997). Трансмембранные и цитоплазмовые домены IL-6Ra не нужны для передачи сигналов, поскольку IL-6Ra также существует в виде растворимой выделенной формы (sIL-6R или sIL-6Ra). Растворимый рецептор вырабатывается либо путем дифференциального сплайсинга IL-6Ra сигнала, либо путем протеолитического слущивания. SIL-6R способен к формированию комплекса лиганд-рецепторов с IL-6, "IL-6: sIL-6Ra". Данный комплекс может связывать gp130 на клетках и, таким образом, начинать клеточную сигнализацию в gp130 позитивных клетках, даже если такие клетки не экспрессируют IL-6Ra. Таким образом, sIL-6R имеет потенциал к расширению спектра клеточного ответа на IL-6, и, как полагают, играет важную роль в IL-6-опосредованном воспалении (Jones, S. A et al. (2001) FASEB J. 15:43-58).
[0005] Была установлена кристаллическая структура человеческого IL-6 лиганда (Somers, W., et al. (1997) 1,9 EMBO J. 16:989-997). Кристаллическая структура внеклеточного домена человеческого IL-6Ra (Varghese et al. (2002) PNAS USA 99:15959-15964), и гексамерная структура IL-6/IL-6R/gp130 комплекса (Boulanger et al. (2003) Science 300:2101-2104), также была решена. Данные структуры в сочетании с исследованиями мутагенности идентифицировали три сайта на поверхности IL-6, которые участвуют в функциональной активности IL-6 в комплексе с различными компонентами рецепторов. Остатки сайта 1 участвуют во взаимодействии между IL-6 и IL-6Ra. Остатки сайта 2 участвуют во взаимодействии между IL-6 и gp130 домен связывания цитокинов. Остатки сайта 3 IL-6 участвуют во взаимодействии Ig-подобного домена второго gp130 в гексамерном комплексе. Четвертый сайт IL-6 был идентифицирован таким, в котором IL-6 взаимодействует со второй молекулой IL-6 в гексамерном IL-6/IL-6R/gp130 комплексе (Menziani et al. (1997) Proteins: Structure Function and Genetics 29, 528).
[0006] Был выделен ряд анти-IL-6 лигандных моноклональных антител. Были выполнены исследования картирования, которые показали, что они связываются в различных сайтах, как описано выше, на поверхности человеческого IL-6 (Brakenhoff et al. (1990) J. Immunol. 145:561-568; Wijdenes et al. (1991) Mol Immunol. 28:1183-1191; Brakenhoff et al. (1994) JBC 269:86; Kalai et al. (1996) Eur J Biochem 238 714-723; Kalai et al. (1997) Blood 89:1319-1333).
[0007] Повышенное IL-6 было задействовано в качестве основного цитокина для многих симптомов заболеваний. Уровни IL-6 в крови были показаны как повышенные в таких заболеваниях, как ревматоидный артрит, болезнь Кастлемана, ювенильный идиопатический артрит и болезнь Хрона (Nishimoto N, and Kishimoto Т. (2004) Curr Op in Pharmacology 4:386-391). Из-за этого IL-6 было задействовано в стимулировании патологии таких воспалительных показаний. Дополнительно, множество типов опухолей, как было показано, стимулируются IL-6, включая меланому, почечно-клеточный рак, саркому Капоши, карциному яичников, лимфому, лейкемию, множественную миелому и карциному простаты (Keller Е.Т. et al. (1996) Front Biosci. 1:340-57). Про повышенные уровни в крови IL-6 сообщали для нескольких видов рака. При некоторых признаках рака повышенные уровни IL-6 использовали в качестве прогностических индикаторов заболевания.
[0008] Ввиду особой роли IL-6 при заболевании, было разработано множество мышиных, химерных, гуманизированных и человеческих античеловеческих IL-6 моноклональных антител в качестве потенциальных терапий (например, US 5856135, WO 2004/020633, US 20060257407 A1, US 7291721). Химерное человеческо-мышиное анти-IL-6 антитело cCLB8 (известное, как CNTO 328) использовали для лечения пациентов с множественной миеломой (van Zaanen et al. (1998) Brit. Journal. Haematology 102:783), где стабилизация заболевания наблюдалась у большинства пациентов.
[0009] Положительное влияние ингибирования IL-6 сигналов при раковых и воспалительных заболеваниях было дополнительно описано путем применения гуманизированного анти-IL-6Ra антитела Тоцилизумаб (также известного как hПМ-1, MRA и Актемра). Это гуманизированная версия мышиного анти-IL6Ra антитела ПМ-1. Лечение пациентов данным антителом доказало эффективность для ряда заболевания, включая ревматоидный артрит, ювенильный идиопатический артрит, болезнь Хрона, миелопролиферативное расстройство, болезнь Кастлемана и системную красную волчанку (СКВ) (Mihara et al. (2005) Expert Opinion on Biological Therapy. 5:683-90).
[0010] Критическим вопросом при лечении, основанном на антителах, является персистенция иммуноглобулинов в кровообращении. Скорость иммуноглобулинового клиренса непосредственно влияет на количество и частоту дозировки иммуноглобулина. Повышенная дозировка и частота дозировок могут приводить к неблагоприятным эффектам для пациентов и также повышать медицинские затраты. Ввиду фармацевтической важности терапий, основанных на анти-IL-6 антителе, существует необходимость в разработке модифицированного высокоаффинного человеческого анти-IL-6 антитела, имеющего увеличенный период полувыведения in vivo.
Сущность изобретения
[0011] Данное изобретение относится к высокоаффинным человеческим анти-IL-6 антителам, которые специфично связывают человеческое IL-6 и имеют пролонгированный период полувыведения in vivo. В одном варианте исполнения, период полувыведения in vivo анти-IL-6 антитела, описанного в данной заявке, составляет от 10 дней до 40 дней. В конкретном варианте исполнения, период полувыведения in vivo анти-IL-6 антитела, описанного в данной заявке, составляет от 25 дней до 35 дней. В одном варианте исполнения, анти-IL-6 антитело, описанное в данной заявке, содержит VH и/или VL домен анти-IL-6 антитела, описанные в публикации РСТ № WO 2008/065378. В одном варианте исполнения, анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением содержит человеческий IgG константный домен, имеющий одно или более аминокислотных замещений относительно человеческого IgG константный домен дикого типа. В конкретном варианте исполнения, анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением содержит человеческий IgG константный домен, содержащий M252Y, S254T и Т256Е аминокислотные замещения, где аминокислотные остатки пронумерованы в соответствии с индексом ЕС, как в Kabat. В другом варианте исполнения, анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением содержит последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:9 и последовательность легкой цепи SEQ ID NO:10.
[0012] Данное изобретение дополнительно относится к нуклеиновым кислотам, кодирующим человеческое анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения, векторам, содержащим нуклеиновые кислоты, клеткам, содержащим данные векторы, и способам получения человеческого анти-IL-6 антитела, имеющего пролонгированный период полувыведения.
[0013] В дополнительных аспектах данного изобретения представлена выделенная нуклеиновая кислота, содержащая последовательность, кодирующая человеческое анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения в соответствии с данным изобретением, и способы получения человеческого анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения, включающее экспрессирование указанной нуклеиновой кислоты в условиях для получения указанного человеческого анти-IL-6 антитела, и его восстановление.
[0014] В дополнительном аспекте представлена клетка-хозяина содержащая или трансформированная нуклеиновой кислотой в соответствии с данным изобретением.
[0015] Дополнительные аспекты данного изобретения обеспечивают композиции, содержащие анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением, и их применение в способах связывания, ингибирования и/или нейтрализации IL-6, включая способы лечения человеческого или животного организма при помощи терапии. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является стерильной жидкой композицией. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит как минимум 100 мг/мл анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением. В другом варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является лиофилизованной композицией. В дополнительном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением представляет собой фармацевтическую композицию.
[0016] Антитела в соответствии с этим изобретением могут быть использованы в способе лечения или диагностики, таком, как способ лечения (что может включать профилактическое лечение) заболевания или расстройства человеческого или животного организма (например, у человеческого пациента), который включает введение указанному пациенту эффективное количество связывающего агента в соответствии с этим изобретением. Состояния, которые можно вылечить в соответствии с данным изобретением включают любые состояния, в которых задействовано IL-6, как подробно описано по всей данной заявке.
[0017] Данное изобретение также включает способы нейтрализации IL-6 активности в сыворотке человеческого пациента, который нуждается в этом, включающие введение человеческому пациенту эффективное количество анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением. Данное изобретение дополнительно включает способы профилактики, контроля, лечения или облегчения воспалительного заболевания или расстройства, аутоиммунного заболевания или расстройства, пролиферативного заболевания, заболевания или расстройства, связанного с аберрантной экспрессией и/или активностью IL-6, заболевания или расстройства, связанного с аберрантной экспрессией и/или активностью IL-6 рецептора, или одним и более его симптомами, где указанные способы включают введение субъекту, который нуждается в этом, профилактически или терапевтически эффективного количества анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением.
[0018] Один аспект в соответствии с данным изобретением относится к выделенному модифицированному антителу, которое специфично связывается с IL-6, где модифицированное антитело содержит вариабельный домен и человеческий IgG константный домен, имеющий одно или более аминокислотных замещений относительно человеческого константного домена IgG дикого типа, где антитело имеет пролонгированный период полувыведения по сравнению с периодом полувыведения родительского антитела, содержащего указанный вариабельный домен и человеческий IgG константный домен дикого типа. В одном варианте исполнения данного аспекта в соответствии с данным изобретением, период полувыведения модифицированного антитела как минимум в 2 раза, как минимум 3 раза, как минимум 4 раза, как минимум 5 раз, как минимум 10 раз или как минимум 20 раз длиннее, чем период полувыведения антитела дикого типа. В другом варианте исполнения, период полувыведения модифицированного антитела в 2 раза, 3 раза, 4 раза, 5 раз, 10 раз или 20 раз длиннее, чем период полувыведения антитела дикого типа. В дополнительном варианте исполнения, период полувыведения модифицированного антитела от 2 раз до 3 раз, от 2 раз до 5 раз, от 2 раз до 10 раз, от 3 раз до 5 раз, или от 3 раз до 10 раз длиннее, чем период полувыведения антитела дикого типа. В еще одном варианте исполнения, период полувыведения модифицированного антитела составляет как минимум 10 дней, как минимум 15 дней, как минимум 20 дней, как минимум 25 дней, как минимум 26 дней, как минимум 27 дней, как минимум 28 дней, как минимум 29 дней, как минимум 30 дней, как минимум 35 дней, как минимум 40 дней, как минимум 45 дней или как минимум 50 дней. В еще одном дополнительном варианте исполнения, период полувыведения модифицированного антитела составляет 10 дней, 15 дней, 20 дней, 25 дней, 26 дней, 27 дней, 28 дней, 29 дней, 30 дней, 35 дней, 40 дней, 45 дней или 50 дней. В еще одном дополнительном варианте исполнения, период полувыведения модифицированного антитела составляет от 10 дней до 20 дней, от 10 дней до 30 дней, от 10 дней до 40 дней, от 10 дней до 50 дней, от 20 дней до 30 дней, от 20 дней до 40 дней, от 20 дней до 50 дней, от 25 дней до 30 дней, от 25 дней до 40 дней, от 25 дней до 50 дней, от 30 дней до 40 дней, от 30 дней до 50 дней или от 40 дней до 50 дней. В еще одном варианте исполнения, период полувыведения модифицированного антитела представляет собой период полувыведения, измеренный у млекопитающего. В другом варианте исполнения, период полувыведения модифицированного антитела представляет собой период полувыведения, измеренный у нечеловеческого примата. В дополнительном варианте исполнения, модифицированное антитело представляет собой период полувыведения, измеренный у человеческого субъекта.
[0019] Другой аспект, в соответствии с данным изобретением, относится к выделенному модифицированному антителу, которое специфично связывается с IL-6, где модифицированное антитело содержит человеческий IgG константный домен, имеющий одно или более аминокислотных замещений относительно человеческого константного домена IgG дикого типа, где антитело имеет уменьшенную скорость клиренса по сравнению со скоростью клиренса антитела дикого типа, содержащего человеческий IgG константный домен дикого типа. В одном варианте исполнения данного аспекта в соответствии с данным изобретением, скорость клиренса модифицированного антитела в как минимум 2 раза, как минимум 3 раза, как минимум 4 раза, как минимум 5 раз, как минимум 10 раз или как минимум 20 раз ниже, чем скорость клиренса антитела дикого типа. В другом варианте исполнения, скорость клиренса модифицированного антитела в 2 раза, 3 раза, 4 раза, 5 раз, 10 раз или 20 раз ниже, чем скорость клиренса антитела дикого типа. В еще одном дополнительном варианте исполнения, скорость клиренса модифицированного антитела в от 2 раз до 3 раз, от 2 раз до 5 раз, от 2 раз до 10 раз, от 3 раз до 5 раз, или от 3 раз до 10 раз ниже, чем скорость клиренса антитела дикого типа. В другом варианте исполнения, скорость клиренса модифицированного антитела составляет не более чем 1 мл/кг/день, не более чем 2 мл/кг/день, не более чем 3 мл/кг/день, не более чем 4 мл/кг/день, не более чем 5 мл/кг/день, не более чем 7 мл/кг/день, не более чем 10 мл/кг/день, не более чем 15 мл/кг/день или не более чем 20 мл/кг/день. В дополнительном варианте исполнения, скорость клиренса модифицированного антитела составляет 1 мл/кг/день, 2 мл/кг/день, 3 мл/кг/день, 4 мл/кг/день, 5 мл/кг/день, 7 мл/кг/день, 10 мл/кг/день, 15 мл/кг/день или 20 мл/кг/день. В еще одном варианте исполнения, скорость клиренса модифицированного антитела составляет от 1 мл/кг/день до 2 мл/кг/день, от 1 мл/кг/день до 3 мл/кг/день, от 1 мл/кг/день до 5 мл/кг/день, от 1 мл/кг/день до 10 мл/кг/день, от 1 мл/кг/день до 15 мл/кг/день, от 2 мл/кг/день до 5 мл/кг/день, от 2 мл/кг/день до 10 мл/кг/день, от 3 мл/кг/день до 5 мл/кг/день, от 3 мл/кг/день до 10 мл/кг/день или от 5 мл/кг/день до 10 мл/кг/день. В еще одном варианте исполнения, скорость клиренса модифицированного антитела представляет собой скорость клиренса, измеренную у млекопитающего. В другом варианте исполнения, скорость клиренса модифицированного антитела представляет собой скорость клиренса, измеренную у нечеловеческого примата. В дополнительном варианте исполнения, скорость клиренса модифицированного антитела представляет собой скорость клиренса, измеренную у человеческого субъекта. В еще одном варианте исполнения, аминокислотные замещения выбирают из группы, состоящей из: M252Y, M252F, M252W, М252Т, S254T, T256S, T256R, T256Q, Т256Е, T256D, Т256Т, L309P, Q311S, H433R, Н433К, H433S, H433I, Н433Р, H433Q, N434H, N434F, N434Y и N436H, где аминокислотные остатки пронумерованы в соответствии с индексом ЕС, как в Kabat. В другом варианте исполнения, как минимум одно из аминокислотных замещений выбирают из группы, состоящей из M252Y, S254T, Т256Е, Н433К, N434F и N436H, где аминокислотные остатки пронумерованы в соответствии с индексом ЕС, как в Kabat. В еще одном варианте исполнения, модифицированный IgG константный домен содержит M252Y, S254T и Т256Е аминокислотные замещения, где аминокислотные остатки пронумерованы в соответствии с индексом ЕС, как в Kabat. В еще одном варианте исполнения, модифицированный IgG константный домен имеет более высокую аффинность по отношению к FcRn, чем IgG константный домен дикого типа. В дополнительном варианте исполнения, человеческий IgG константный домен является человеческим IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4 константным доменом. В еще одном дополнительном варианте исполнения, IgG является IgG1.
[0020] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к модифицированным антителам, описанным выше, где вариабельный домен содержит: VH CDR1, имеющий аминокислотную последовательность, идентичную или содержащую 1, 2, или 3 замещений аминокислотных остатков относительно SEQ ID NO: 1; VH CDR2, имеющий аминокислотную последовательность, идентичную или содержащую 1, 2, или 3 замещений аминокислотных остатков относительно SEQ ID NO: 2; VH CDR3, имеющий аминокислотную последовательность, идентичную или содержащую 1, 2, или 3 замещений аминокислотных остатков относительно SEQ ID NO: 3; VL CDR1, имеющий аминокислотную последовательность, идентичную или содержащую 1, 2, или 3 замещений аминокислотных остатков относительно SEQ ID NO: 4; VL CDR2, имеющий аминокислотную последовательность, идентичную или содержащую 1, 2, или 3 замещений аминокислотных остатков относительно SEQ ID NO: 5; и VL CDR3, имеющий аминокислотную последовательность, идентичную или содержащую 1, 2, или 3 замещений аминокислотных остатков относительно SEQ ID NO: 6. В одном варианте исполнения, модифицированное антитело в соответствии с любым из пунктов формулы 1-26, где вариабельный домен содержит: VH CDR1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1; VH CDR2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2; VH CDR3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3; VL CDR1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4; VL CDR2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5; и VL CDR3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6. В другом варианте исполнения, вариабельный домен содержит VH домен, содержащий три CDRs, и VL домен, содержащий три CDRs; где три CDRs VH домена содержат: VH CDR1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1; VH CDR2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2; и VH CDR3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3. В дополнительном варианте исполнения, вариабельный домен содержит VH домен, содержащий три CDRs и VL домен, содержащий три CDRs, где три CDRs VL домена содержат: VL CDR1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4; VL CDR2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5; и VL CDR3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6. В еще одном варианте исполнения вариабельный домен содержит VH домен, содержащий аминокислотную последовательность, идентичную SEQ ID NO: 7 или содержащий 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, или 10 замещений аминокислотных остатков относительно SEQ ID NO: 7, и содержит VL домен, содержащий аминокислотную последовательность, идентичную SEQ ID NO:8 или содержащий 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, или 10 замещений аминокислотных остатков относительно SEQ ID NO:8. В другом варианте исполнения, вариабельный домен содержит VH домен SEQ ID NO:7 и VL домен SEQ ID NO:8.
[0021] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к нуклеиновой кислоте, кодирующей аминокислотную последовательность, кодирующую указанные выше антитела. В одном варианте исполнения, нуклеиновая кислота содержит нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:11-14.
[0022] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к вектору, содержащему указанные выше нуклеиновые кислоты
[0023] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к выделенной клетке, содержащей указанные выше векторы.
[0024] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к выделенной клетке, экспрессирующей указанные выше модифицированные антитела.
[0025] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к способу получения модифицированного антитела, включающему культивирование указанной выше выделенной клетки в условиях, достаточных для выработки антитела и восстановления антитела из культуры.
[0026] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к фармацевтической композиции, содержащей указанные выше модифицированные антитела.
[0027] Другой аспект в соответствии с данным изобретением, относится к способу нейтрализации как минимум 90% свободного IL-6 в сыворотке человека, который нуждается в этом, включающему введение эффективного количества указанного выше модифицированного антитела.
[0028] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к способу ингибирования как минимум 90% IL-6 опосредованной сигнализации в сыворотке человека, который нуждается в этом, включающему введение человеку эффективного количества указанного выше модифицированного антитела.
[0029] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к способу нейтрализации как минимум 90% свободного IL-6 в синовиальной жидкости человека, который нуждается в этом, включающему введение человеку эффективного количества модифицированного антитела.
[0030] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к способу ингибирования как минимум 90% IL-6 опосредованной сигнализации в синовиальной жидкости человека, который нуждается в этом, включающему введение человеку эффективного количества указанного выше антитела.
[0031] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к способу уменьшения роста синовиальных клеток у человека, включающему введение человеку, который нуждается в этом, терапевтически эффективного количества указанного выше антитела.
[0032] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к способу уменьшения синовиального воспаления у человека, включающему введение человеку, который нуждается в этом, терапевтически эффективного количества указанного выше антитела.
[0033] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к способу лечения аутоиммунного заболевания или расстройства у человека, включающему введение человеку, который нуждается в этом, терапевтически эффективного количества указанного выше антитела.
[0034] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к способу лечения злокачественности у человека, включающему введение человеку, который нуждается в этом, терапевтически эффективного количества указанного выше антитела.
[0035] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к способу лечения воспалительного заболевания или расстройства у человека, включающему введение человеку, который нуждается в этом, терапевтически эффективного количества указанного выше антитела.
[0036] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к способу лечения системной красной волчанки, ревматоидного артрита или воспалительного заболевания кишечника у человека, включающему введение человеку, который нуждается в этом, терапевтически эффективного количества указанного выше антитела. В одном варианте исполнения, согласно способу по любому из пунктов формулы 40-49, терапевтически эффективное количество содержит разовую или фракционированную дозу приблизительно 0,1-5 мг/кг, приблизительно 0,1-2 мг/кг, приблизительно 0,1-1 мг/кг, приблизительно 0,3-2 мг/кг, приблизительно 0,3-1 мг/кг, приблизительно 0,5-2 мг/кг, или приблизительно 0,5-1 мг/кг модифицированного антитела. В другом варианте исполнения, терапевтически эффективное количество содержит разовую или фракционированную дозу приблизительно 20-500 мг, приблизительно 20-200 мг, приблизительно 20-100 мг, приблизительно 50-500 мг, приблизительно 50-200 мг, или приблизительно 50-100 мг модифицированного антитела. В еще одном варианте исполнения, терапевтически эффективное количество модифицированного антитела вводят один раз в неделю, один раз в две недели, один раз в три недели, один раз в четыре недели, один раз в восемь недель или один раз в двенадцать недель. В еще одном дополнительном варианте исполнения, терапевтически эффективное количество модифицированного антитела вводят внутривенно или подкожно. В другом варианте исполнения, пациенту вводят разовую дозу нагрузки модифицированного антитела перед введением как минимум одной поддерживающей дозы модифицированного антитела. В еще одном дополнительном варианте исполнения доза нагрузки содержит разовую или фракционированную дозу приблизительно 0,1-5 мг/кг, приблизительно 0,1-2 мг/кг, приблизительно 0,1-1 мг/кг, приблизительно 0,3-2 мг/кг, приблизительно 0,3-1 мг/кг, приблизительно 0,5-2 мг/кг, или приблизительно 0,5-1 мг/кг модифицированного антитела. В еще одном дополнительном варианте исполнения доза нагрузки содержит разовую или фракционированную дозу приблизительно 20-500 мг, приблизительно 20-200 мг, приблизительно 20-100 мг, приблизительно 50-500 мг, приблизительно 50-200 мг, или приблизительно 50-100 мг модифицированного антитела. В еще одном варианте исполнения, поддерживающая доза содержит разовую или фракционированную дозу приблизительно 0,1-5 мг/кг, приблизительно 0,1-2 мг/кг, приблизительно 0,1-1 мг/кг, приблизительно 0,3-2 мг/кг, приблизительно 0,3-1 мг/кг, приблизительно 0,5-2 мг/кг, или приблизительно 0,5-1 мг/кг модифицированного антитела. В еще одном варианте исполнения, поддерживающая доза содержит разовую или фракционированную дозу приблизительно 20-500 мг, приблизительно 20-200 мг, приблизительно 20-100 мг, приблизительно 50-500 мг, приблизительно 50-200 мг, или приблизительно 50-100 мг модифицированного антитела. В другом варианте исполнения, поддерживающую дозу вводят через одну неделю, две недели, три недели, четыре недели, 8 недель, или двенадцать недель после введения дозы нагрузки. В еще одном варианте исполнения, пациенту вводят как минимум две поддерживающие дозы, и поддерживающие дозы вводят один раз в неделю, один раз в две недели, один раз в три недели, один раз в четыре недели, один раз в восемь недель или один раз в двенадцать недель. В еще одном варианте исполнения, дозу нагрузки модифицированного антитела вводят внутривенно или подкожно. В другом варианте исполнения поддерживающую дозу вводят внутривенно или подкожно. В дополнительном варианте исполнения, терапевтически эффективное количество модифицированного антитела вводят в сочетании со вторым терапевтическим агентом.
[0037] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к стерильной стабильной водной композиции, содержащей указанные выше антитела. В одном варианте исполнения данного аспекта в соответствии с данным изобретением, антитело не подвергают лиофилизации. В другом варианте исполнения, антитело подвергают лиофилизации. В другом варианте исполнения, концентрация указанного модифицированного антитела составляет как минимум приблизительно 5 мг/мл, как минимум приблизительно 10 мг/мл, как минимум приблизительно 15 мг/мл, как минимум приблизительно 20 мг/мл, как минимум приблизительно 50 мг/мл, как минимум приблизительно 100 мг/мл, как минимум приблизительно 120 мг/мл, как минимум приблизительно 150 мг/мл, как минимум приблизительно 160 мг/мл, как минимум приблизительно 180 мг/мл, как минимум приблизительно 200 мг/мл, как минимум приблизительно 250 мг/мл, или как минимум приблизительно 300 мг/мл. В дополнительном варианте исполнения, композиция дополнительно содержит как минимум приблизительно один буферный компонент. В другом варианте исполнения, композиция дополнительно содержит как минимум один эксципиент. В еще одном варианте исполнения, буферный компонент выбирают из группы, состоящей из гистидина, цитрата, фосфата, глицина, ацетата. В еще одном варианте исполнения, буферный компонент имеет концентрацию от приблизительно 1 мМ до приблизительно 200 мМ, от приблизительно 1 мМ до приблизительно 50 мМ, или от приблизительно 5 мМ до приблизительно 20 мМ. В еще одном варианте исполнения, буферный компонент имеет концентрацию приблизительно 10 мМ, приблизительно 15 мМ, приблизительно 20 мМ или приблизительно 25 мМ. В дополнительном варианте исполнения, эксципиент является сахаридом. В еще одном варианте исполнения, сахарид является дисахаридом. В еще одном варианте исполнения, дисахаридом является треталоза или сукроза. В дополнительном варианте исполнения, дисахарид имеет концентрацию от приблизительно 1% до приблизительно 40%, от приблизительно 2% до приблизительно 20%, или от приблизительно 2% до приблизительно 10%. В еще одном дополнительном варианте исполнения, дисахарид имеет концентрацию, составляющую приблизительно 2%, приблизительно 4% или приблизительно 8%. В еще одном варианте исполнения, эксципиент является солью. В еще одном варианте исполнения, соль представляет собой хлорид натрия. В дополнительном варианте исполнения, хлорид натрия имеет концентрацию от приблизительно 50 мМ до приблизительно 200 мМ. В другом варианте исполнения, хлорид натрия имеет концентрацию, составляющую приблизительно 70 мМ, приблизительно 75 мМ, приблизительно 80 мМ, приблизительно 100 мМ, приблизительно 120 мМ, или приблизительно 150 мМ. В дополнительном варианте исполнения, эксципиент представляет собой поверхностно-активное вещество. В дополнительном варианте исполнения, поверхностно-активное вещество представляет собой полисорбат. В еще одном дополнительном варианте исполнения, полисорбат является полисорбатом 20 или полисорбатом 80. В еще одном варианте исполнения, поверхностно-активное вещество имеет концентрацию от приблизительно 0,001% до приблизительно 2%. В другом варианте исполнения, поверхностно-активное вещество имеет концентрацию, составляющую приблизительно 0,01%, приблизительно 0,02%, приблизительно 0,04% или приблизительно 0,08%. В еще одном дополнительном варианте исполнения, эксципиент является аминокислотой. В еще одном варианте исполнения, аминокислоту выбирают из группы, состоящей из глицина, гистидина или аргинина. В еще одном варианте исполнения аминокислота имеет концентрацию, составляющую от приблизительно 10 мМ до приблизительно 400 мМ. В еще одном варианте исполнения, аминокислота имеет концентрацию, составляющую приблизительно 25 мМ, приблизительно 50 мМ, приблизительно 100 мМ, приблизительно 150 мМ, приблизительно 200 мМ, приблизительно 250 мМ, приблизительно 300 мМ, приблизительно 350 мМ, или приблизительно 400 мМ. В еще одном варианте исполнения, композиция имеет значение рН от приблизительно 5,5 до приблизительно 6,5. В еще одном варианте исполнения, указанная композиция имеет значение рН приблизительно 6,0. В еще одном варианте исполнения композиция является изотонической. В другом варианте исполнения композиция является стабильной при хранении при 40°C в течение как минимум приблизительно 4 недель. В еще одном варианте исполнения, композиция является стабильной при хранении при 5°C в течение как минимум приблизительно 3 месяцев. В другом варианте исполнения композиция является стабильной при хранении при 5°C в течение как минимум приблизительно 12 месяцев. В еще одном варианте исполнения, антитело теряет не более чем 20% его IL-6 активности связывания во время хранения указанной композиции при 40°C в течение как минимум приблизительно 4 недель. В еще одном варианте исполнения, антитело теряет не более чем 20% его IL-6 активности связывания во время хранения указанной композиции при 5°C в течение как минимум приблизительно 3 месяцев. В еще одном варианте исполнения, антитело теряет не более чем 20% его IL-6 активности связывания во время хранения указанной композиции при 5°C в течение как минимум приблизительно 12 месяцев. В еще одном варианте исполнения, антитело теряет не более чем 10% его IL-6 активности связывания во время хранения указанной композиции при 40°C в течение как минимум приблизительно 4 недель. В другом варианте исполнения, композиция в соответствии с любым из пунктов формулы 64-93, где указанное антитело теряет не более чем 10% его IL-6 активности связывания во время хранения указанной композиции при 5°C в течение как минимум приблизительно 3 месяцев. В другом варианте исполнения, антитело теряет не более чем 10% его IL-6 активности связывания во время хранения указанной композиции при 5°C в течение как минимум приблизительно 12 месяцев. В другом варианте исполнения, антитело теряет не более чем 5% его IL-6 активности связывания во время хранения указанной композиции при 40°C в течение как минимум приблизительно 4 недель. В другом варианте исполнения, антитело теряет не более чем 5% его IL-6 активности связывания во время хранения указанной композиции при 5°C в течение как минимум приблизительно 3 месяцев. В другом варианте исполнения, антитело теряет не более чем 5% его IL-6 активности связывания во время хранения указанной композиции при 5°C в течение как минимум приблизительно 12 месяцев. В другом варианте исполнения, антитело является чувствительным к агрегации, или фрагментации. В другом варианте исполнения, менее чем приблизительно 2% указанного антитела образует агрегат при хранении при 40°C в течение как минимум приблизительно 4 недель, как определено при помощи ВЭЭХ (высокоэффективной эксклюзионной хроматографии). В другом варианте исполнения, менее чем приблизительно 2% указанного антитела образует агрегат при хранении при 5°C в течение как минимум приблизительно 3 месяцев, как определено при помощи ВЭЭХ. В другом варианте исполнения, менее чем приблизительно 2% указанного антитела образует агрегат при хранении при 5°C в течение как минимум приблизительно 12 месяца, как определено при помощи ВЭЭХ. В другом варианте исполнения, менее чем приблизительно 5% указанного антитела фрагментируется при хранении при 40°C в течение как минимум приблизительно 4 недель, как определено при помощи ЭХ (эксклюзионной хроматографии). В другом варианте исполнения, менее чем приблизительно 5% указанного антитела фрагментируется при хранении при 5°C в течение как минимум приблизительно 3 месяцев, как определено при помощи ЭХ. В другом варианте исполнения, менее чем приблизительно 5% указанного антитела фрагментируется при хранении при 5°C в течение как минимум приблизительно 12 месяцев, как определено при помощи ЭХ. В другом варианте исполнения, композиция является инъекционной композицией. В другом варианте исполнения, композиция приемлема для внутривенного, подкожного, или внутримышечного введения. В другом варианте исполнения, композиция приемлема для аэрозольного введения.
[0038] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к фармацевтической стандартной лекарственной форме, приемлемой для парентерального введения человеку, которая содержит любые композиции указанного выше антитела в приемлемом контейнере. В одном варианте исполнения, композицию антитела вводят внутривенно, подкожно, или внутримышечно.
[0039] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к фармацевтической стандартной лекарственной форме, приемлемой для аэрозольного введения человеку, которая содержит любые композиции указанного выше антитела. В одном варианте исполнения данного аспекта в соответствии с данным изобретением, композицию антитела вводят интраназально.
[0040] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к герметичному контейнеру, содержащему любые указанные выше композиции.
[0041] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к предварительно наполненному шприцу, содержащему любые указанные выше композиции.
[0042] Другой аспект в соответствии с данным изобретением относится к набору, содержащему любые указанные выше композиции.
[0043] Эти и другие аспекты в соответствии с данным изобретением описаны более подробно ниже.
Терминология
[0044] В данной заявке можно подчеркнуть, что "и/или" при использовании здесь должно быть использовано в качестве конкретного описания каждого из двух указанных признаков или компонентов с другим таким признаком или компонентом или без него. Например, "А и/или В" должно быть использовано как конкретное описание каждого из (i) A, (ii) В и (iii) А и В, так, как, если бы каждый из них был отдельно приведен в данной заявке.
IL-6 и IL-6 рецептор
[0045] IL-6 является интерлейкином 6. IL-6 может также иметь в данной заявке название "антиген".
[0046] Полноразмерная аминокислотная последовательность человеческого IL-6 представляет собой SEQ ID NO: 15. данную последовательность расщепляют in vivo для удаления N-концевого лидерного пептида с получением зрелого IL-6. Зрелое человеческое IL-6 имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16. Зрелая последовательность представляет собой in vivo IL-6 в кровообращении, которое является антигеном-мишенью для терапевтических и in vivo диагностических применений, как описано в данной заявке. Соответственно, IL-6, указанное в данной заявке, обычно является зрелым человеческим IL-6, если иное не следует из контекста.
[0047] IL-6 может быть конъюгировано с детектируемой меткой, такой, как HIS FLAG, например, для применения в анализах, описанных в данной заявке. Например, может быть использован гибридизованный белок, содержащий IL-6, конъюгированное с последовательностью HIS FLAG.
[0048] IL-6 рецептор, IL-6Ra, представляет собой рецептор для интерлейкина 6. IL-6Ra также известен как IL-6Rα, IL-6Ra, IL-6R и ЦД126. IL-6Ra существует in vivo в трансмембранной форме и в растворимой форме. Ссылки на IL-6Ra могут быть трансмембранным IL-6Ra и/или растворимым IL-6Ra, если иное не следует из контекста.
[0049] IL-6 рецептор, указанный в данной заявке, является обычно IL-6 рецептором, если не указано иное. Аминокислотная последовательность человеческого растворимого IL-6Ra (sIL-6Ra, sIL-6R) представляет собой SEQ ID NO: 17. Аминокислотная последовательность человеческого трансмембранного IL-6Ra представляет собой SEQ ID NO: 18.
[0050] IL-6 связывается IL-6Ra с образованием комплекса, IL-6:IL-6Ra. Комплекс может быть или растворимым (с sIL-6Ra), или мембранно-связанным (с трансмембранным IL-6Ra). Если IL-6Ra представляет собой растворимую форму, то комплекс обозначен IL-6:sIL-6Ra. Ссылки на IL-6:IL-6Ra могут включать IL-6 в комплексе с трансмембранным IL-6Ra или с растворимым IL-6Ra, если иное не следует из контекста.
gp130
[0051] gp130 представляет собой рецептор для IL-6:IL-6Ra комплекса. Клонирование и характеристика gp130 сообщены в Hibi et al., Cell 63:1149-1157 (1990).
Последовательность человеческого gp130 приведена в SEQ ID NO: 19.
Агент связывания
[0052] Он описывает один член пары молекул, которые связываются друг с другом. Компоненты пары связывания могут быть получены целиком природные или получены частично синтетически. Один член пары молекул имеет площадь поверхности, или полость, которая связывается и поэтому комплементарна конкретной пространственной и полярной организации другого члена пары молекул. Примеры типов пар связывания представляют собой антиген-антитело, биотин-авидин, гормон-гормон рецептор, рецептор-лиганд, фермент-субстрат. Данное изобретение касается реакций типа антиген-антитело.
[0053] Агент связывания обычно содержит молекулу, содержащую сайт связывания антигена. Например, агент связывания может быть молекулой антитела или белком неантитела, содержащим сайт связывания антигена.
[0054] Сайт связывания антигена может быть обеспечен при помощи компоновки CDRs на белковых каркасах не-антитела, таких, как фибронектин или цитохром В и т.д. (Haan & Maggos (2004) BioCentury, 12(5): А1-А6; Koide et al. (1998) Journal of Molecular Biology, 284: 1141-1151; Nygren et al. (1997) Curr. Op. Structural Biology, 7:463-469), или путем рандомизации или мутирования аминокислотных остатков петли внутри белкового каркаса для придания специфичности связывания для желаемой мишени. Каркасы для разработки новых сайтов связывания у белков, были рассмотрены подробно в Nygren et al. (Nygren et al. (1997) Curr. Op. Structural Biology, 7: 463-469). Белковые каркасы для мимиков антител описаны в WO/0034784, которая включена полностью в данную заявку путем ссылки, в которой изобретатели описывают белки (мимики антител), содержащие домен фибринонектина типа III, имеющий как минимум одну рандомизованную петлю. Приемлемый каркас, в который трансплантируют один или более CDRs, например, набор HCDRs, может быть обеспечен при помощи любого доменного члена иммуноглобулинового генного суперсемейства. Каркас может быть человеческим или нечеловеческим белком. Преимуществом белкового не-антительного каркаса является то, что он может обеспечивать сайт связывания антигена в молекуле каркаса, меньший и/или более легкий для производства, чем как минимум некоторые молекулы антитела. Небольшой размер агента связывания может придавать полезные физиологические свойства, например способность, проникать в клетки, глубоко проникать в ткани или достигать мишеней внутри других структур, или связывать внутри белковых полостей антиген-мишень. Применение сайтов связывания антигена в белковых не-антительных каркасах рассмотрено в Wess (Wess, L. (2004) In: BioCentury, The Bernstein Report on BioBusiness, 12(42), A1-A7). Типичными являются белки, имеющие стабильный каркас и одну или более вариабельных петель, в которых аминокислотная последовательность петли или петель специфично или рандомизировано мутировала с образованием сайта связывания антигена, который связывает антиген-мишень. Такие белки включают IgG-связывающие домены белка А из S, ауреус, трансферрин, тетранектин, фибронектин (например, 10-ый домен фибронектина типа III), липокалины, а также гамма-кристаллические и другие аффилин™ каркасы (Scil Proteins). Примеры других подходов включают синтетические "микрободи", основанные на циклотидах - небольших белках, имеющих внутримолекулярные дисульфидные связи, микробелки (версабоди™, амуникс) и анкирин повторные белки (DARPins, Molecular Partners).
[0055] В дополнение к последовательностям антител и/или сайту связывания антигена, агент связывания в соответствии с данным изобретением может содержать другие аминокислоты, например, образуя пептид или полипептид, такой, как складчатый домен, или придавать молекуле другую функциональную характеристику в дополнение к способности связывать антиген. Агенты связывания в соответствии с данным изобретением могут нести детектируемую метку, или могут быть конъюгированы с токсином или направленным фрагментом или ферментом (например, посредством пептидильной связи или линкера). Например, агент связывания может содержать каталитический сайт (например, в ферментом домене), а также сайт связывания антигена, где сайт связывания антигена связывается с антигеном и, таким образом, направляет каталитический сайт на антиген. Каталитический сайт может ингибировать биологическую функцию антигена, например, при помощи расщепления.
[0056] Хотя, как отмечено, CDRs могут нести каркасы не антител, структура для несения CDR или набора CDRs в соответствии с данным изобретением будет в общем последовательностью тяжелой или легкой цепи антитела или его существенной частью, где CDR или набор CDRs расположены в месте, соответствующем CDR или набору CDRs, встречающихся в природе вариабельных доменов VH и VL антител, кодированных реаранжированными иммуноглобулиновыми генами. Структуры и расположения иммуноглобулиновых вариабельных доменов могут быть определены путем ссылки на Kabat, et al. (Kabat, E.A. et al., Последовательности of Proteins of Immunological Interest. 4th Edition. US Department of Health and Human Services. (1987)), и его обновления. Для запроса в данной базе данных доступен ряд академических и коммерческих он-лайн ресурсов. Например, см. ссылку Martin, A.C.R. (Accessing the Kabat Antibody Sequence Database by Computer PROTEINS: Structure, Function and Genetics, 25 (1996), 130-133) и связанный он-лайн ресурс, который в данное время находится по интернет-адресу bioinf.org.uk/abs/simkab.html.
[0057] Под CDR участком, или CDR, подразумевают гипервариабельные участки тяжелой и легкой цепей иммуноглобулина, как определено Kabat et al. (Kabat, E.A. et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Edition. US Department of Health and Human Services, Public Service, NIH, Washington or later editions) или Chothia and Lesk (J. Mol. Biol., 196:901-917 (1987)). Антитело типично содержит 3 CDRs тяжелой цепи и 3 CDRs легкой цепи. Термин CDR или CDRs используют в данной заявке для указания, соответственно случаю, одного из этих участков, или нескольких, или даже целиком, этих участков, содержащих большинство аминокислотных остатков, отвечающих за связывание при помощи аффинности антитела к антигену или эпитопу, который оно распознает.
[0058] Среди шести коротких CDR последовательностей, третий CDR тяжелой цепи (HCDR3) имеет больший размер вариабельности (большее различие существенно из-за механизмов расположения генов, что приводит к нему). Он может содержать не менее чем 2 аминокислоты, хотя наибольший известный размер - 26. Длина CDR может также варьироваться в соответствии с длиной, которая может быть отрегулирована при помощи конкретного лежащего под ним каркаса. Функционально HCDR3 частично участвует в определении специфичности антитела (Segal et al., (1974) PNAS, 71:4298-4302; Amit et al., (1986) Science, 233:747-753; Chothia et al., (1987) J. Mol. Biol., 196:901-917; Chothia et al., (1989) Nature, 342:877-883; Caton et al., (1990) J. Immunol., 144:1965-1968; Sharon et al., (1990) PNAS, 87:4814-4817; Sharon et al., (1990) J. Immunol., 144:4863-4869; Kabat et al., (1991) J. Immunol., 147:1709-1719; Holliger & Hudson, Nature Biotechnology 23(9): 1126-1136 2005).
[0059] HCDR1 может иметь длину 5 аминокислот, состоящих из Kabat остатков 31-35.
[0060] HCDR2 может иметь длину 17 аминокислот, состоящих из Kabat остатков 50-65.
[0061] HCDR3 может быть иметь длину 11 или 12 аминокислот, состоящих из Kabat остатков 95-102, необязательно включая Kabat остаток 100D.
[0062] LCDR1 может быть иметь длину 11 аминокислот, состоящих из Kabat остатков 24-34.
[0063] LCDR2 может иметь длину 7 аминокислот, состоящих из Kabat остатков 50-56.
[0064] LCDR3 может иметь длину 8 или 9 аминокислот, состоящих из Kabat остатков 89-97, необязательно включая Kabat остаток 95.
Молекула антитела
[0065] Она описывает иммуноглобулин, природный или частично или полностью полученный синтетическим путем. Термин также охватывает любой полипептид или белок, содержащий антительный сайт связывания антигена. В данной заявке должно быть понятно, что данное изобретение не относится к антителу в природном виде, то есть, оно не встречается в его природном окружении, но его можно было выделить или получить путем очистки из природных источников, или также получено путем генетической рекомбинации, или химическим синтезом, и в связи с этим оно может содержать неприродные аминокислоты, как будет описано далее. Фрагменты антитела, содержащие антительный сайт связывания антигена, включают, не ограничиваясь приведенными, такие молекулы, как Fab, Fab’, Fab’-SH, scFv, Fv, dAb и Fd. Были сконструированы различные другие молекулы антител, включая один или более антительные сайты связывания антигенов, включая, например, Fab2, Fab3, диабоди, триабоди, тетрабоди и минибоди. Молекулы антител и способы их конструирования и применения описаны в Holliger & Hudson (Nature Biotechnology 23(9): 1126-1136 (2005)).
[0066] Возможно, взять моноклональные и другие антитела и использовать методы рекомбинантной ДНК технологии для получения других молекул антител или химерных молекул, связывающих целевой антиген. Такие методы могут включать введение ДНК, кодирующей иммуноглобулиновый вариабельный участок, или CDRs, антитела в константные участки, или константные участки плюс каркасные участки, разных иммуноглобулинов. См., например, ЕР-А-184187, GB 2188638 А или ЕР-А-239400, и литературу о последовательностях больших тел. Гибридома или другая клетка, продуцирующая антитело, может быть подвергнута генетической мутации или другим изменениям, которые могут или не могут изменять специфичность связывания полученного антитела.
[0067] Поскольку антитела могут быть модифицированы при помощи ряда способов, термин "молекула антитела" должен быть истолкован как охватывающий любой агент связывания или вещество, содержащее антительный сайт связывания антигена с необходимой специфичностью и/или связыванием антигена. Таким образом, данный термин охватывает фрагменты и производные антител, включая любой полипептид, содержащий антительный сайт связывания антигена, природный или полностью или частично синтетический. Поэтому включены химерные молекулы, содержащие антительный сайт связывания антигена, или эквивалент, гибридизованный с другим полипептидом (например, полученные из других видов или относящихся к другому классу или подклассу антитела). Клонирование и экспрессия химерного антитела описаны в ЕР-А-0120694 и ЕР-А-0125023, и в литературе о последовательностях больших тел.
[0068] Дополнительно, методы, доступные из уровня техники для конструирования антител, давали возможность выделить человеческие и гуманизированные антитела. Например, человеческие гибридомы могут быть получены так, как описано у Kontermann & Dubel (Kontermann, R & Dubel, S, Антитело Engineering, Springer-Verlag New York, LLC; 2001, ISBN: 3540413545). Фаговый дисплей и другие установленные методы генерирования агентов связывания, были подробно описаны во многих публикациях, например, Kontermann & Dubel (Kontermann, R & Dubel, S, Антитело Engineering, Springer-Verlag New York, LLC; 2001, ISBN: 3540413545) и WO 92/01047 (обсуждены дополнительно ниже), и патентах США US 5969108, US 5565332, US 5733743, US 5858657, US 5871907, US 5872215, US 5885793, US 5962255, US 6140471, US 6172197, US 6225447, US 6291650, US 6492160, US 6521404.
[0069] Трансгенные мыши, например, мыши, у которых гены мышиного антитела инактивированы и функционально замещены генами человеческого антитела при оставлении интактными других компонентов мышиной иммунной системы, могут быть применены для выделения человеческого антитела (Mendez, М. et al. (1997) Nature Genet, 15(2): 146-156). Гуманизированные антитела могут быть получены при помощи способов, известных из уровня техники, таких, как описаны, например в WO 91/09967, US 5,585,089, ЕР 592106, US 565,332 и WO 93/17105. Кроме того, в WO 2004/006955 описаны способы гуманизирования антитела, основанные на отборе каркасной последовательности вариабельного участка из генов человеческого антитела, путем сравнения канонических типов структур CDR последовательности вариабельного участка нечеловеческого антитела с каноническими типами структур CDR для соответствующих CDRs из библиотеки последовательностей человеческого антитела, например, генных сегментов зародышевых антител. Вариабельные участки человеческого антитела, имеющие канонические структурные типы CDR, аналогичные нечеловеческим CDRs, образуют подмножество членов последовательностей человеческого антитела, из которых отбирают человеческие каркасные последовательности. Члены подмножества могут быть дополнительно ранжированы путем аминокислотной схожести человеческой и нечеловеческой CDR последовательностей. В способе, описанном в WO 2004/006955, человеческие последовательности в верхней части рейтинга отбирали для обеспечения каркасных последовательностей для конструирования химерного антитела, которое функционально замещает человеческие CDR последовательности на нечеловеческие CDR-аналоги при помощи отобранных человеческих каркасов - членов подмножества, таким образом, обеспечивая гуманизированное антитело с высокой аффинностью и низкой иммуногенностью без необходимости в сравнении каркасной последовательности нечеловеческого и человеческого антитела. Также описаны химерные антитела, полученные в соответствии со способом.
[0070] Синтетические молекулы антитела могут быть созданы путем экспрессии из генов, полученных при помощи олигонуклеотидов, синтезированных и собранных в приемлемых векторах экспрессии, например как описано Knappik et al. (Knappik et al. (2000) J. Mol. Biol. 296, 57-86) или Krebs et al. (Krebs et al. (2001) J. Immunological Methods 254 67-84).
[0071] Было показано, что фрагменты полного антитела могут выполнять функцию связывания антигенов. Примеры фрагментов связывания следующие: (i) Fab фрагмент, состоящий из VL, VH, CL и СН1 доменов; (ii) Fd фрагмент, состоящий из VH и СН1 доменов; (iii) Fv фрагмент, состоящий из VL и VH доменов одного антитела; (iv) dAb фрагмент (Ward, E.S. et al., (1989) Nature 341, 544-546; McCafferty et al. (1990) Nature, 348, 552-554; Holt et al. (2003) Trends in Biotechnology 21, 484-490), состоящий из VH или VL домена; (v) выделенные CDR участки; (vi) F(ab’)2 фрагменты, бивалентный фрагмент, содержащий два связанных Fab фрагмента (vii) одноцепочечные Fv молекулы (scFv), где VH домен и VL домен связаны пептидным линкером, что позволяет ассоциацию двух доменов с образованием сайта связывания антигена (Bird et al., (1988) Science, 242,423-426; Huston et al., (1988) PNAS USA, 85, 5879-5883); (viii) биспецифические одноцепочечные Fv димеры (PCT/US 92/09965) и (ix) "диабоди", мультивалентные или мультиспецифичные фрагменты, сконструированные при помощи генной гибридизации (WO 94/13804; Holliger, P. et al., (1993) PNAS USA 90 6444-6448). Молекулы Fv, scFv или диабоди могут быть стабилизированы путем введения дисульфидных мостиков, соединяющих VH и VL домены (Reiter, Y. et al., (1996) Nature Biotech, 14,1239-1245). Могут быть также получены минибоди, содержащие scFv, соединенный с CH3 доменом (Hu, S. et al., (1996) Cancer Res., 56, 3055-3061). Другие примеры фрагментов связывания представляют собой Fab’, который отличается от Fab фрагментов путем добавления нескольких остатков на карбоксильном конце тяжелой цепи СН1 домена, включая один и более цистеинов из шарнирного участка антитела, и Fab’-SH, который представляет собой Fab’ фрагмент, в котором цистеиновый остаток (остатки) константного домена имеют свободную тиольную группу.
[0072] Qui et al. (Qui et al., (2007) Nat. Biotechnol. 25:921-929) описал молекулы антитела, содержащие только два CDRs, связанные каркасным участком. CDR3 из VH или VL домена были связаны с CDR1 или CDR2 петлей другого домена. Связь проходила через С конец CDR1 или CDR2 к N концу CDR3, через FR участок. Qui et al. отобрали FR участок, имеющий наименьшее количество гидрофобных участков. Наилучшая комбинация для проанализированных антител, как было найдено, является VL CDR1, связанный посредством VH FR2 с VH CDR3 (VHCDR1-VHFR2-VLCDR3). При молекулярной массе приблизительно 3 kDa, данные молекулы антитела предлагают преимущества в терминах улучшенного проникновения через ткани по сравнению с полными иммуноглобулинами (приблизительно 150 kDa) или scFv (приблизительно 28 kDa).
[0073] Фрагменты антител в соответствии с данным изобретением могут быть получены, начиная от молекулы родительского антитела или любых молекул антител 2, 3, 4, 5, 7, 8, 10, 14, 16, 17, 18, 19, 21, 22 и 23, такими способами, как дигестия при помощи ферментов, например, пепсина или папаина и/или путем расщепления дисульфидных мостиков путем химического восстановления. Другим способом, фрагменты антител, описанные в данном изобретении, могут быть получены методами генетической рекомбинации аналогично хорошо известным специалисту в данной области или также путем пептидного синтеза при помощи, например, автоматических пептидных синтезаторов, таких, как поставляет компания Applied Biosystems, и т.д., или при помощи нуклеиново-кислотного синтеза или экспрессии.
[0074] Функциональные фрагменты антител в соответствии с данным изобретением включают любые функциональные фрагменты, период полувыведения которых увеличен путем химической модификации, в особенности пегилирования, путем введения липосомы путем гибридизации в альбумин или его фрагмент.
[0075] dAb (домен антитело) является небольшим мономерным антиген-связывающим фрагментом антитела, а именно тяжелой и легкой цепью вариабельного участка антитела (Holt et al. (2003) Trends in Biotechnology 21, 484-490). VH dAbs встречается в природе в кэмелбоди (например, верблюда, ламы) и может быть получено путем иммунизации верблюжьей антиген-мишени, выделением антиген-специфичной В клетки и непосредственным клонированием dAb генов из индивидуальных В клеток. dAbs также можно получать в клеточной культуре. Их малый размер, хорошая растворимость и температурная устойчивость делает их особо физиологически полезными и приемлемыми для отбора и аффинной мацурации. Верблюжьи VH dAbs разрабатывают для терапевтического применения под названием "нанободи™". Агент связывания в соответствии с данным изобретением может быть dAb, содержащим VH или VL домен в существенной степени, как приведено в данной заявке, или VH или VL домен, содержащий множество CDRs в существенной степени, как приведено в данной заявке.
[0076] Биспецифичные или бифункциональные антитела образуют второе поколение моноклональных антител, в которых два различных вариабельных участка соединены в одной и той же молекуле (Holliger and Bohlen (1999) Cancer & Metastasis Rev. 18: 411-419). Их использование было продемонстрировано как в области диагностики, так и в области терапии, благодаря их способности придавать новые эффекторные функции или направлять несколько молекул на поверхность опухолевой клетки. Если биспецифичные антитела должны быть использованы, то они могут быть традиционными биспецифичными антителами, которые могут быть произведены различными способами (Holliger, P. and Winter G. (1993) Curr. Op. Biotech. 4,446-449), например, получены химически или из гибридных гибридом, или могут быть любыми фрагментами биспецифичных антител, указанных выше. Такие антитела могут быть получены химическими способами (Glennie М J et al. (1987) J. Immunol. 139,2367-2375; Repp R. et al. (1995) J. Hematother. 4: 415-21) или соматическими способами (Staerz U.D. and Bevan M.J. (1986) PNAS USA 83: 1453-7; Suresh M.R. et al. (1986) Method Enzymol. 121: 210-228), но аналогично и преимущественно, способами генетического конструирования, что позволяет усиление гетеродимеризации и, таким образом, облегчает процесс очистки рассматриваемого антитела (Merchand et al. (1998) Nature Biotech. 16:677-681). Примеры биспецифичных антител включают антитела, полученные по BiTE™ технологии, в которой связывающие домены двух антител с различной специфичностью могут быть использованы и непосредственно связаны при помощи коротких гибких пептидов. Это соединяет два антитела на короткой одинарной полипептидной цепи. Диабоди и scFv могут быть сконструированы без Fc участка, с использованием только вариабельных доменов, возможно уменьшая влияния анти-идиотипичной реакции.
[0077] Биспецифичные антитела могут быть сконструированы как полные IgG, ввиду биспецифичности Fab’2, как Fab’PEG, как диабоди или также как scFv. Дополнительно, два биспецифичных антитела могут быть соединены при помощи стандартных способов, известных из уровня техники для образования тетравалентных антител.
[0078] Биспецифичные диабоди, в отличие от биспецифичных цельных антител, могут быть также в особенности полезными, поскольку они могут быть легко сконструированы и экспрессированы в E.coli. Диабоди (и многие другие полипептиды, такие, как фрагменты антител) с соответствующей специфичностью связывания, могут быть легко отобраны при помощи фагового дисплея (WO 94/13804) из библиотек. Если одно плечо диабоди должно сохраняться константным, например, со специфичностью, направленной на IL-6, то может быть получена библиотека, в которой другое плечо переменное, и выбирают антитело с соответствующей специфичностью. Биспецифичные цельные антитела могут быть получены при помощи альтернативных способов конструирования, как описано в Ridgeway et al., (Ridgeway, J.В.В. et al. (1996) Protein Eng., 9, 616-621).
[0079] В данной области существуют различные способы получения антител против IL-6. Антитела могут быть моноклональными антителами, в особенности человеческого, мышиного, химерного или гуманизированного происхождения, которые могут быть получены в соответствии со стандартными способами, которые хорошо известны специалисту в данной области.
[0080] В общем, для получения моноклональных антител или их функциональных фрагментов, в особенности мышиного происхождения, возможно обратиться к методам, которые описаны в частности в руководстве "Antibodies" (Harlow and Lane, Антитела: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor N.Y., pp. 726, 1988) или к методу получения гибридов, описанных and Milstein ( and Milstein (1975) Nature, 256:495-497).
[0081] Моноклональные антитела могут быть получены, например, из В клетки животного, иммунизированного против IL-6, или одного из ее фрагментов, содержащих эпитоп, распознанный указанным моноклональным антителом. Приемлемые фрагменты и пептиды или полипептиды, содержащие их, описаны в данной заявке и могут быть использованы для иммунизации животных с получением антитела против IL-6. Указанное IL-6, или один из его фрагментов, могут быть в частности получены в соответствии с обычными методами работы, путем генетической рекомбинации, начиная с последовательности нуклеиновой кислоты, которая содержится в кДНК последовательности, кодирующей IL-6 или его фрагмент, путем пептидного синтеза, начиная с последовательности аминокислоты, которая содержится в пептидной последовательности IL-6 и/или его фрагмента.
[0082] Моноклональные антитела могут, например, быть очищены на колонке для аффинной хроматографии, на которой IL-6 или один из его фрагментов, содержащих эпитоп, распознанный указанным моноклональным антителом, был предварительно иммобилизован. Более конкретно, моноклональные антитела могут быть очищены при помощи хроматографии на белке А и/или G, с последующей ион-обменной хроматографией, направленной на устранение остаточных белковых загрязнений, а также ДНК и липолисахарид, самих по себе, или без ион-обменной хроматографии, с последующей эксклюзионной хроматографией на сефарозном геле для устранения возможных агрегатов, вызванных присутствием димеров или других мультимеров, или без эксклюзионной хроматографии. В одном варианте исполнения, все из этих методов могут быть использованы одновременно или последовательно.
Сайт связывания антигена
[0083] Это описывает часть молекулы, которая связывается и комплементарна всей или части антигена-мишени. Если молекулу антитела называют антительным сайтом связывания антигена, она составляет часть антитела, которая связывается со всем или с частью антигена-мишени. Если антиген больший, антитело может только связывать конкретную часть антигена, такую часть называют эпитопом. Антительный сайт связывания антигена может быть обеспечен одним или более вариабельным доменом антитело. Антительный сайт связывания антигена может содержать антитело вариабельный участок легкой цепи (VL) и вариабельный участок тяжелой цепи антитела (VH).
[0084] WO 2006/072620 описывает конструирование сайтов связывания антигенов в структурных (не-CDR) петлях, расширяя бета-ветви иммуноглобулиновых доменов. Сайт связывания антигена может быть сконструирован в участке молекулы антитела отдельно от природного расположения CDRs, например, в каркасном участке VH или VL домена, или в константном домене антитела, например, СН1 и/или CH3. Сайт связывания антигена, сконструированный в структурном участке, может быть дополнительным, или замещать, сайт связывания антигена, образованный множествами CDRs VH и VL доменов. Там, где множественные сайты связывания антигенов присутствуют в молекулах, они могут связывать тот же самый антиген (IL-6), таким образом, повышая валентность агента связывания. Альтернативно, множественные сайты связывания антигенов могут связывать различные антигены (IL-6 и один или более других антигенов), и они могут быть использованы для добавления эффекторных функций, удлинения периода полувыведения или улучшения доставки молекулы антитела in vivo.
Выделенный
[0085] Это относится к состоянию, в котором агенты связывания в соответствии с данным изобретением, или нуклеиновая кислота, кодирующая такие агенты связывания, будет в общем находится в соответствии с данным изобретением. Таким образом, агенты связывания, VH и/или VL домены, и кодирующие молекулы нуклеиновой кислоты и векторы в соответствии с данным изобретением могут быть обеспечены выделенными и/или очищенными, например, из природного окружения, в существенно чистой или гомогенной форме, или в случае нуклеиновой кислоты, не содержащей или в существенной степени не содержащей нуклеиновой кислоты или генов, которые получены не из последовательности, кодирующей полипептид с необходимой функцией. Выделенные компоненты и выделенная нуклеиновая кислота будут свободны, или в существенной степени свободны, от материала, с которым они природно связаны, например, других полипептидов или нуклеиновых кислот, с которыми они встречаются в природной окружающей их среде, или окружающей среде, в которой их получают (например, клеточной культуре), если такое получение производят путем рекомбинантной ДНК-технологии, которую реализуют in vitro или in vivo. Члены и нуклеиновая кислота могут быть составлены в композицию с разбавителями или адъювантами и выделены в практических целях, например, компоненты будут обычно смешаны с желатином или другими носителями при использовании для покрытия пластин микротитратора для применения в иммуноанализах, или будут смешаны с фармацевтически приемлемыми носителями или разбавителями при использовании в диагностике или терапии. Агенты связывания могут быть гликолизированы природно или при помощи систем гетерологических эукариотических клеток (например, СНО или NS0 (ЕСАСС 85110503) клетки, или могут быть негликолизированы (например, если они получены путем экспрессии в прокариотическую клетку).
[0086] Гетерогенные препараты, содержащие молекулы анти-IL-6 антитела также входят в данное изобретение. Например, такие препараты могут быть смесями антител с полноразмерными тяжелыми цепями и тяжелыми цепями, не содержащими С-концевой лизин, с различными степенями гликолизирования и/или с дериватизированными аминокислотами, например, циклизацией N- концевой глутамовой кислоты с образованием пироглютамового кислотного остатка.
[0087] Как используют в данной заявке, фраза "существенно, как приведено" относится к характеристике (кам) релевантных CDRs. VH VL члены доменного связывания, описанные в данной заявке, будут идентичны или в высокой степени аналогичны указанным участкам, последовательность которых приведена в данной заявке. Как описано в данной заявке, фраза "в высокой степени аналогичны" в отношении указанного участка (указанных участков) одного или более вариабельных доменов, охватывает, например, от 1 до приблизительно 5, от 1 до 4, включая 1-3, или 1 или 2, или 3 или 4, аминокислотных замещений, которые могут быть произведены в CDR и/или VH или VL домене.
Краткое описание фигур
[0088] На Фигуре 1 представлен Антительный 18Е, но не Антительный 18 Fc участок содержит YTE эпитоп. Наличие YTE эпитопа в Fc участке было детектировано путем применения анти-YTE иммобилизованного антителав анализе ELISA (твердофазного иммуноферментного анализа). Показаны кривые титрования ELISA для Антитела 18 и Антитела 18Е.
[0089] На Фигуре 2 представлено связывание Антитела 18, Антитела 18Е, IL-6 антитела А (АВ А) и IL-6 антитела В (АВ В) контролировали при помощи анализов ELISA. Полученный из Е. coli рекомбинантный IL-6 использовали как иммобилизованный агент. Антитело 18 и Антитело 18Е проявляли существенно идентичные IL-6 активности связывания. ЕС50, детектированные для Антитела 18 и Антитела 18Е, составляли 6,1 пМ и 6,5 пМ, соответственно.
[0090] 81/1
[0091] На Фигуре 3 представлено Антитело 18 и Антитело 18Е ингибируют IL-6 вызванную TF-1 клеточную пролиферацию с существенно идентичной эффективностью. IC50 значения были определены для антитела 18, Антитела 18Е, IL-6 антитела А (АВ А) и IL-6 антитела В (АВ В). Показаны кривые % максимального ингибирования как функция концентрации антител. IC50, детектированные для Антитела 18 и Антитела 18Е, составляли 4,5 пМ и 5,2 пМ, соответственно.
[0092] На Фигуре 4 представлено Антитело 18 и Антитело 18Е ингибируют эндогенное IL-6, вызвавший фактор роста эндотелия сосудов высвобождение из человеческих синовиальных фибробластов с существенно идентичной эффективностью. IC50 значения были определены для антитела 18, Антитела 18Е, IL-6 антитела А (АВ А) и IL-6 антитела В (АВ В). Показаны кривые % максимального ингибирования как функция концентрации антитела. IC50, детектированные для Антитела 18 и Антитела 18 Е, составляли 1,3 пМ и 1,2 пМ, соответственно.
[0093] На Фигуре 5 представлен фармакокинетический профиль Антитела 18 и Антитела 18Е. Одинарную дозу 5 мг/кг Антитела 18 или Антитела 18Е вводили подкожно или внутривенно яванским макакам. Уровни антитела в плазме детектировали после введения антитела показаны как функция времени. Период полувыведения Антитела 18 составляет приблизительно от 8,5 дней до 9,1 дней после внутривенного и подкожного введения, соответственно. Период полувыведения Антитела18Е составляет приблизительно от 28,4 дней до 28,8 дней после внутривенного и подкожного введения, соответственно.
[0094] На Фигуре 6 представлен фармакокинетический и фармакодинамический профиль антитела 18 и Антитела 18Е. 5 мг/кг Антитела18 или Антитела 18Е вводили подкожно яванским макакам. Уровни антитела в плазме общие уровни IL-6 в плазме, которые детектировали после введения антитела, показаны как функция времени. Символы представляют экспериментальные РК и PD и пунктирные линии являются моделью PKPD, которые подогнаны одновременно к данным РК и PD. Оцененный период полувыведения Антитела 18 и Антитела 18Е составляет от 9,1 дней до 28,8 дней, соответственно. Оцененный клиренс Антитела18 и Антитела 18Е составляет 13,1 мл/день/кг и 2,8 мл/день/кг, соответственно.
[0095] На Фигуре 7 представлена симуляция свободных IL-6 уровней в плазме RA пациентов после подкожного введения различных доз Антитела18Е. Симуляция прогнозирует, что непрерывное как минимум 90% ингибирование IL-6 опосредованной сигнализации должно быть достигнуто путем подкожного введения 100 мг Антитела 18Е каждые 8 недель или путем подкожного введения 50 мг Антитела 18Е каждые 4 недели. Подкожное введение 100 мг Антитела 18Е каждые 12 недель, как прогнозируют, не достигает непрерывного как минимум 90% ингибирования IL-6 опосредованной сигнализации.
[0096] На Фигуре 8 представлена симуляция свободных IL-6 уровней в плазме RA пациентов после подкожного введения Антитела18 или Антитела 18Е. Симуляция прогнозирует, что непрерывное как минимум 90% ингибирование IL-6 опосредованной сигнализации должно быть достигнуто путем введения разовой дозы нагрузки 200 мг Антитела 18Е с последующими поддерживающими дозами 100 мг Антитела 18Е, которые давали один раз каждые 8 недель. Симуляция дополнительно прогнозирует, что введение 500 мг Антитела 18 каждые 8 недель не должно достигать непрерывного как минимум 90% ингибирования IL-6 опосредованной сигнализации.
[0097] На Фигуре 9 представлена симуляция свободных IL-6 уровней в плазме RA пациентов после подкожного введения различных доз антитела 18 или Антитела 18Е. Симуляция показывает, что непрерывное как минимум 90% ингибирование IL-6 опосредованной сигнализации должно быть достигнуто путем введения одинарной подкожной дозы нагрузки 100 мг Антитела 18Е с последующими ежемесячными подкожными поддерживающими дозами 50 мг Антитела 18Е. Симуляция дополнительно прогнозирует, что непрерывное как минимум 90% ингибирование IL-6 опосредованной сигнализации должно быть достигнуто путем введения два раза в неделю подкожных доз 100 мг Антитела 18, но не путем введения ежемесячно подкожных доз 100 мг Антитела 18.
[0098] На Фигуре 10 представлена симуляция свободных IL-6 уровней в плазме RA пациентов после подкожного введения различных доз антитела 18 или Антитела 18Е. Симуляция прогнозирует, что непрерывное как минимум 90% ингибирование IL-6 опосредованной сигнализации должно быть достигнуто путем введения одинарной подкожной дозы нагрузки 200 мг Антитела 18Е с последующим введением подкожно поддерживающих доз 100 мг Антитела 18Е каждые 4 или 8 недель. Симуляция дополнительно прогнозирует, что непрерывное как минимум 90% ингибирование IL-6 опосредованной сигнализации не может быть достигнуто путем введения 100 мг Антитела 18 каждые 4 или 8 недель.
[0099] На Фигуре 11 представлено влияние mAab406 на гиперчувствительность к нагреванию при 46°C в мышиной ПАФ хвостовой модели.
Без побочных эффектов
**=р<0,01 ***=р<0,001, критерий Стьюдента для одной выборки (IgG1 по сравнению с mAb406) в каждый момент времени.
IgG1 контроль или mAb406 введенное через 6 часов после полного адъюванта Фрейнда
[00100] На Фигуре 12 представлено влияние mAab406 на гиперчувствительность к механическому сжатию в мышиной ПАФ хвостовой модели. Без побочных эффектов *=р<0,05, критерий Стьюдента для одной выборки (IgG1 по сравнению с mAb406) в каждый момент времени.
IgG1 контроль или mAb406 введенное через 6 часов после полного адъюванта Фрейнда
[00101] На Фигуре 13 представлено влияние mAab406 на гиперчувствительность к нагреванию в мышиной ПАФ 24 часовой модели.
Уровень значимости: * *=р<0,01, * * *=р<0,001.
Статистика: однонаправленный ANOVA с последующим тестом Холм Сидак с запаздыванием IgG1 контрольный изотип или mAb406 дозированное интраперитонеально через 6 часов после введения полного адъюванта Фрейнда. NT относится к мышам «без лечения».
[00102] На Фигуре 14 представлена доза-зависимые влияния mAb406 на гиперчувствительность к нагреванию в мышиной ПАФ 48 часовой модели.
Уровень значимости: **=р<0,05, ***=р<0,001.
Статистика: однонаправленный ANOVA с последующим тестом Холм Сидак с запаздыванием IgG1 контрольный изотип или mAb406 дозированное интраперитонеально через 6 часов после введения полного адъюванта Фрейнда. NT относится к мышам «без лечения».
[00103] На Фигуре 15 представлена доза-зависимые влияния mAb406 на гиперчувствительность к механическому сжатию в мышиной ПАФ модели при 24 часах.
Уровень значимости: **=р<0,05, ***=р<0,001.
Статистика: однонаправленный ANOVA с последующим тестом Холм Сидак с запаздыванием IgG1 контрольный изотип или mAb406 дозированное интраперитонеально через 6 часов после введения полного адъюванта Фрейнда. Nt относится к мышам «без лечения».
[00104] На Фигуре 16 представлено доза-зависимые влияния mAb406 на гиперчувствительность к механическому сжатию в мышиной ПАФ модели при 48 часах. Без побочных эффектов.
Уровень значимости: **=р<0,01, ***=р<0,001.
Статистика: однонаправленный ANOVA с последующим тестом Холм Сидак с запаздыванием IgG1 контрольный изотип или mAb406 дозированное интраперитонеально через 6 часов после введения полного адъюванта Фрейнда. NT относится к мышам «без лечения».
Фигура 17. Показано влияние малой молекулы напроксена на гиперчувствительность к нагреванию в мышиной ПАФ хвостовой модели при 48 часах.
Без побочных эффектов.
*=р<0,05, **=р<0,01, ***=р<0,001, однонаправленный ANOVA с последующим тестом Холм Сидак с запаздыванием.
[00105] Фигура 18. Показано влияние малой молекулы напроксена на гиперчувствительность к механическому сжатию в мышиной ПАФ хвостовой модели при 48 часах. Без побочных эффектов.
*=р<0,05, **=р<0,01, ***=р<0,001, однонаправленный ANOVA с последующим тестом Холм Сидак с запаздыванием.
Подробное описание данного изобретения
[00106] Данное изобретение относится к способам генерирования анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения in vivo. С использованием способов в соответствии с данным изобретением, анти-IL-6 родительское антитело может быть модифицировано с получением анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения in vivo. Любое анти-IL-6 антитело, которое специфично связывается с человеческим IL-6 антигеном, может быть использовано для реализации способа в соответствии с данным изобретением. В одном варианте исполнения, анти-IL-6 антитела, описанные в публикации РСТ № WO 2008/065378, могут быть модифицированы или применены для реализации способа в соответствии с данным изобретением. В конкретном варианте исполнения, анти-IL-6 антитело, обозначенное в публикации РСТ № WO 2008/065378 как Антитело 18 (в данной заявке Антитело 18 или Ab 18), может быть модифицировано или применено для реализации способа в соответствии с данным изобретением.
[00107] Данное изобретение представляет анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения in vivo. В одном варианте исполнения, анти-IL-6 антитело, описанное в данной заявке, имеет пролонгированный период полувыведения in vivo, более длинные, чем у антитела, содержащего те же самые вариабельные домены и константные домены дикого типа. В конкретном варианте исполнения, анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением имеет пролонгированный период полувыведения in vivo, более длинный, чем у Антитела 18.
[00108] Данное изобретение представляет анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения in vivo. В одном варианте исполнения, период полувыведения анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением представляет собой период полувыведения, измеренный у млекопитающего. В другом варианте исполнения, период полувыведения анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением представляет собой период полувыведения, измеренный у нечеловеческого примата (например, не ограничиваясь приведенным, у яванских макак или макак). В дополнительном варианте исполнения, период полувыведения анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением представляет собой период полувыведения, измеренный у человеческого субъекта.
[00109] В одном варианте исполнения, период полувыведения анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением как минимум в 2 раза, как минимум 3 раза, как минимум 4 раза, как минимум 5 раз, как минимум 10 раз или как минимум 20 раз длиннее, чем период полувыведения антитела, содержащего те же самые вариабельные домены и константные домены дикого типа. В другом варианте исполнения, период полувыведения анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением в 2 раза, 3 раза, 4 раза, 5 раз, 10 раз или 20 раз длиннее, чем период полувыведения антитела, содержащего те же самые вариабельные домены и константные домены дикого типа. В дополнительном варианте исполнения, период полувыведения анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением от 2 раз до 3 раз, от 2 раз до 5 раз, от 2 раз до 10 раз, от 3 раз до 5 раз, или от 3 раз до 10 раз длиннее, чем период полувыведения антитела, содержащего те же самые вариабельные домены и константные домены дикого типа.
[00110] В одном варианте исполнения, период полувыведения анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением как минимум приблизительно в 2 раза, как минимум приблизительно 3 раза, как минимум приблизительно 4 раза, как минимум приблизительно 5 раз, как минимум приблизительно 10 раз или как минимум приблизительно 20 раз длиннее, чем период полувыведения антитела, содержащего те же самые вариабельные домены и константные домены дикого типа. В другом варианте исполнения, период полувыведения анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением в приблизительно 2 раза, приблизительно 3 раза, приблизительно 4 раза, приблизительно 5 раз, приблизительно 10 раз или приблизительно 20 раз длиннее, чем период полувыведения антитела, содержащего те же самые вариабельные домены и константные домены дикого типа. В дополнительном варианте исполнения, период полувыведения анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением составляет от приблизительно 2 раз до приблизительно 3 раз, от приблизительно 2 раз до приблизительно 5 раз, от приблизительно 2 раз до приблизительно 10 раз, от приблизительно 3 раз до приблизительно 5 раз, или от приблизительно 3 раз до приблизительно 10 раз длиннее, чем период полувыведения антитела, содержащего те же самые вариабельные домены и константные домены дикого типа.
[00111] В одном варианте исполнения, период полувыведения анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением составляет как минимум 10 дней, как минимум 15 дней, как минимум 20 дней, как минимум 25 дней, как минимум 26 дней, как минимум 27 дней, как минимум 28 дней, как минимум 29 дней, как минимум 30 дней, как минимум 35 дней, как минимум 40 дней, как минимум 45 дней или как минимум 50 дней. В другом варианте исполнения, период полувыведения анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением составляет 10 дней, 15 дней, 20 дней, 25 дней, 28 дней, 29 дней, 30 дней, 35 дней, 40 дней, 45 дней или 50 дней. В дополнительном варианте исполнения, период полувыведения анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением составляет от 10 дней до 20 дней, от 10 дней до 30 дней, от 10 дней до 40 дней, от 10 дней до 50 дней, от 20 дней до 30 дней, от 20 дней до 40 дней, от 20 дней до 50 дней, от 25 дней до 30 дней, от 25 дней до 40 дней, от 25 дней до 50 дней, от 30 дней до 40 дней, от 30 дней до 50 дней или от 40 дней до 50 дней.
[00112] В одном варианте исполнения, период полувыведения анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением составляет как минимум приблизительно 10 дней, как минимум приблизительно 15 дней, как минимум приблизительно 20 дней, как минимум 25 приблизительно дней, как минимум приблизительно 26 дней, как минимум приблизительно 27 дней, как минимум приблизительно 28 дней, как минимум 29 приблизительно дней, как минимум приблизительно 30 дней, как минимум приблизительно 35 дней, как минимум приблизительно 40 дней, как минимум приблизительно 45 дней или как минимум приблизительно 50 дней. В другом варианте исполнения, период полувыведения анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением составляет приблизительно 10 дней, приблизительно 15 дней, приблизительно 20 дней, приблизительно 25 дней, приблизительно 28 дней, приблизительно 29 дней, приблизительно 30 дней, приблизительно 35 дней, приблизительно 40 дней, приблизительно 45 дней или приблизительно 50 дней. В дополнительном варианте исполнения, период полувыведения анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением составляет от приблизительно 10 дней до приблизительно 20 дней, от приблизительно 10 дней до приблизительно 30 дней, от приблизительно 10 дней до приблизительно 40 дней, от 10 дней до приблизительно 50 дней, от приблизительно 20 дней до приблизительно 30 дней, от приблизительно 20 дней до приблизительно 40 дней, от приблизительно 20 дней до приблизительно 50 дней, от приблизительно 25 дней до приблизительно 30 дней, от приблизительно 25 дней до приблизительно 40 дней, от v25 дней до приблизительно 50 дней, от приблизительно 30 дней до приблизительно 40 дней, от приблизительно 30 дней до приблизительно 50 дней или от приблизительно 40 дней до приблизительно 50 дней.
[00113] Данное изобретение дополнительно представляет анти-IL-6 антитела с уменьшенной скоростью клиренса. Термин клиренс, как используют в данной заявке понимают как отражающий объем плазмы, из которой состоит лекарственное средство, т.е. анти-IL-6 антитело, полностью удаляют за единицу времени. В одном варианте исполнения, анти-IL-6 антитело, описанное в данной заявке, имеет уменьшенную скорость клиренса по сравнению со скоростью клиренса родительского анти-IL-6 антитела. В конкретном варианте исполнения, анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением имеет уменьшенную скорость клиренса по сравнению со скоростью клиренса Антитела 18.
[00114] Данное изобретение представляет анти-IL-6 антитела с уменьшенной скоростью клиренса. В одном варианте исполнения, скорость клиренса анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением представляет собой скорость клиренса, измеренную у млекопитающего. В другом варианте исполнения, скорость клиренса анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением представляет собой скорость клиренса, измеренную у нечеловеческого примата (например, и не ограничиваясь приведенным, у яванских макак). В дополнительном варианте исполнения, скорость клиренса анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением представляет собой скорость клиренса, измеренную у человеческого субъекта.
[00115] В одном варианте исполнения, скорость клиренса анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением в как минимум 2 раза, как минимум 3 раза, как минимум 4 раза, как минимум 5 раз, как минимум 10 раз или как минимум 20 раз ниже, чем скорость клиренса антитела, имеющего те же самые вариабельные домены и константные домены дикого типа. В другом варианте исполнения, скорость клиренса анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением в 2 раза, 3 раза, 4 раза, 5 раз, 10 раз или 20 раз ниже, чем скорость клиренса антитела, имеющего те же самые вариабельные домены и константные домены дикого типа. В дополнительном варианте исполнения, скорость клиренса анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением от 2 раз до 3 раз, от 2 раз до 5 раз, от 2 раз до 10 раз, от 3 раз до 5 раз, или от 3 раз до 10 раз ниже, чем скорость клиренса антитела, имеющего те же самые вариабельные домены и константные домены дикого типа.
[00116] В одном варианте исполнения, скорость клиренса анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением в как минимум приблизительно 2 раза, как минимум приблизительно 3 раза, как минимум приблизительно 4 раза, как минимум приблизительно 5 раз, как минимум приблизительно 10 раз или как минимум приблизительно 20 раз ниже, чем скорость клиренса антитела, имеющего те же самые вариабельные домены и константные домены дикого типа. В другом варианте исполнения, скорость клиренса анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением в приблизительно 2 раза, приблизительно 3 раза, приблизительно 4 раза, приблизительно 5 раз, приблизительно 10 раз или приблизительно 20 раз ниже, чем скорость клиренса антитела, имеющего те же самые вариабельные домены и константные домены дикого типа. В дополнительном варианте исполнения, скорость клиренса анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением от приблизительно 2 раз до приблизительно 3 раз, от приблизительно 2 раз до приблизительно 5 раз, от приблизительно 2 раз до приблизительно 10 раз, от приблизительно 3 раз до приблизительно 5 раз, или от приблизительно 3 раз до приблизительно 10 раз ниже, чем скорость клиренса антитела, имеющего те же самые вариабельные домены и константные домены дикого типа.
[00117] В одном варианте исполнения, скорость клиренса анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением составляет не более, чем 1 мл/кг/день, не более, чем 2 мл/кг/день, не более, чем 3 мл/кг/день, не более, чем 4 мл/кг/день, не более, чем 5 мл/кг/день, не более, чем 7 мл/кг/день, не более, чем 10 мл/кг/день, не более, чем 15 мл/кг/день или не более, чем 20 мл/кг/день. В другом варианте исполнения, скорость клиренса анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением составляет 1 мл/кг/день, 2 мл/кг/день, 3 мл/кг/день, 4 мл/кг/день, 5 мл/кг/день, 7 мл/кг/день, 10 мл/кг/день, 15 мл/кг/день или 20 мл/кг/день. В дополнительном варианте исполнения, скорость клиренса анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением составляет от 1 мл/кг/день до 2 мл/кг/день, от 1 мл/кг/день до 3 мл/кг/день, от 1 мл/кг/день до 5 мл/кг/день, от 1 мл/кг/день до 10 мл/кг/день, от 1 мл/кг/день до 15 мл/кг/день, от 2 мл/кг/день до 5 мл/кг/день, от 2 мл/кг/день до 10 мл/кг/день, от 3 мл/кг/день до 5 мл/кг/день, от 3 мл/кг/день до 10 мл/кг/день или от 5 мл/кг/день до 10 мл/кг/день.
[00118] В одном варианте исполнения, скорость клиренса анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением составляет не более чем приблизительно 1 мл/кг/день, не более чем приблизительно 2 мл/кг/день, не более чем приблизительно 3 мл/кг/день, не более чем приблизительно 4 мл/кг/день, не более чем приблизительно 5 мл/кг/день, не более чем приблизительно 7 мл/кг/день, не более чем приблизительно 10 мл/кг/день, не более чем приблизительно 15 мл/кг/день или не более чем приблизительно 20 мл/кг/день. В другом варианте исполнения, скорость клиренса анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением составляет приблизительно 1 мл/кг/день, приблизительно 2 мл/кг/день, приблизительно 3 мл/кг/день, приблизительно 4 мл/кг/день, приблизительно 5 мл/кг/день, приблизительно 7 мл/кг/день, приблизительно 10 мл/кг/день, приблизительно 15 мл/кг/день или приблизительно 20 мл/кг/день. В дополнительном варианте исполнения, скорость клиренса анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением составляет от приблизительно 1 мл/кг/день до приблизительно 2 мл/кг/день, от приблизительно 1 мл/кг/день до приблизительно 3 мл/кг/день, от приблизительно 1 мл/кг/день до приблизительно 5 мл/кг/день, от приблизительно 1 мл/кг/день до приблизительно 10 мл/кг/день, от приблизительно 1 мл/кг/день до приблизительно 15 мл/кг/день, от приблизительно 2 мл/кг/день до приблизительно 5 мл/кг/день, от приблизительно 2 мл/кг/день до приблизительно 10 мл/кг/день, от приблизительно 3 мл/кг/день до приблизительно 5 мл/кг/день, от приблизительно 3 мл/кг/день до приблизительно 10 мл/кг/день или от приблизительно 5 мл/кг/день до приблизительно 10 мл/кг/день.
[00119] В одном варианте исполнения, анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением содержит вариантный Fc участок. В другом варианте исполнения, анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением содержит вариантный Fc участок, имеющий измененную аффинность для Fc лигандного белка. В конкретном варианте исполнения, анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением содержит вариантный Fc участок, имеющий измененную аффинность для FcRn. В конкретном варианте исполнения, FcRn может быть мышиным, человеческим или приматным (например, яванской макаки) FcRn белком.
[00120] В одном варианте исполнения, анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением содержит вариантный Fc участок, имеющий повышенную аффинность для Fc лигандного белка. В конкретном варианте исполнения, анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением содержит вариантный Fc участок, имеющий повышенную аффинность для FcRn. В конкретном варианте исполнения, FcRn может быть мышиным, человеческим или приматным (например, яванской макаки) FcRn белком.
[00121] В одном варианте исполнения, анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением содержит вариантный Fc участок, аффинность связывания которого для Fc лигандного белка является рН зависимой. В конкретном варианте исполнения, анти-IL-6 в соответствии с данным изобретением содержит вариантный Fc участок с рН зависимой аффинностью связывания для FcRn. В конкретном варианте исполнения, FcRn может быть может быть мышиным, человеческим или приматным (например, яванской макаки) FcRn белком.
[00122] В одном варианте исполнения, анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением содержит человеческий IgG константный домен, имеющий одно или более аминокислотных замещений относительно человеческого константного домена IgG дикого типа. В различных вариантах исполнения человеческий IgG константный домен может быть человеческим IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4 константным доменом. В конкретном варианте исполнения, анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением содержит человеческий IgG1 константный домен, имеющий одно или более аминокислотных замещений относительно человеческого дикого типа IgG1 константного домена.
[00123] В одном варианте исполнения, анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением содержит человеческий IgG константный домен, имеющий одно или более аминокислотных замещений, выбранных из группы, состоящей из: M252Y, M252F, M252W, М252Т, S254T, T256S, T256R, T256Q, Т256Е, T256D, Т256Т, L309P, Q311S, H433R, Н433К, H433S, H433I, Н433Р, H433Q, N434H, N434F, N434Y и N436H, где аминокислотные остатки пронумерованы в соответствии с индексом ЕС как в Kabat. В другом варианте исполнения, анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением содержит человеческий IgG константный домен, имеющий одно или более аминокислотных замещений, выбранных из группы, состоящей из: M252Y, S254T, Т256Е, Н433К, N434F и N436H, где аминокислотные остатки пронумерованы в соответствии с индексом ЕС как в Kabat. В другом варианте исполнения, анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением содержит человеческий IgG константный домен, имеющий одно или более аминокислотных замещений, выбранных из группы, состоящей из: M252Y, S254T и Т256Е, где аминокислотные остатки пронумерованы в соответствии с индексом ЕС как в Kabat. В конкретном варианте исполнения, анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением содержит человеческий IgG константный домен, содержащий M252Y, S254T и Т256Е аминокислотные замещения, где аминокислотные остатки пронумерованы в соответствии с индексом ЕС как в Kabat. В различных вариантах исполнения человеческий IgG константный домен может быть человеческим IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4 константным доменом. В конкретном варианте исполнения, анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением содержит человеческий IgG1 константный домен, содержащий M252Y, S254T и Т256Е аминокислотные замещения, где аминокислотные остатки пронумерованы в соответствии с индексом ЕС как в Kabat.
[00124] В одном варианте исполнения, анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением содержит один, два, три, четыре, пять или все шесть CDRs Антитела 18 (см., публикацию РСТ WO 2008/065378).
[00125] Аминокислотные последовательности для CDR1, CDR2 и CDR3 вариабельный участок тяжелой цепи Антитела 18, определенный в соответствии с Kabat, идентифицированный как SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO:2 и SEQ ID NO:3 соответственно. Аминокислотные последовательности для CDR1, CDR2 и CDR3 вариабельного участка легкой цепи Антитела18, определенный в соответствии с Kabat, идентифицированный как SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5 и SEQ ID NO:6 соответственно.
[00126] Нумерация Kabat основана на продуктивной работе Kabat et al. (1991) Последовательность of Proteins of Immunological Interest, Publication No. 91-3242, опубликована как трехтомник National Institutes of Health, National Technical Information Service (в данной заявке "Kabat"). Kabat представляет множественные выравнивания последовательностей иммуноглобулиновых цепей из многочисленных видов изотипов антител. Выровненные последовательности нумеруют в соответствии с одной системой нумерации, системой нумерации Kabat. Последовательности Kabat были обновлены после публикации в 1991 г. и доступны в виде электронной базы данных последовательностей (наиболее поздняя версия для загрузки от 1997 г.). Любая иммуноглобулиновая последовательность может быть пронумерована в соответствии с Kabat путем выполнения выравнивания с реперной последовательностью Kabat. Соответственно, система нумерации Kabat представляет однородную систему для нумерации иммуноглобулиновых цепей. Если не указано иное, все иммуноглобулиновые аминокислотные последовательности, описанные в данной заявке, пронумерованы в соответствии с системой нумерации Kabat. Аналогично, все одиночные аминокислотные положения, указанные в данной заявке, как пронумеровано в соответствии с системой нумерации Kabat.
[00127] В определенных вариантах исполнения, анти-IL-6 антитело, описанное в данной заявке, может содержать вариабельный участок тяжелой цепи, VH, содержащий как минимум один CDR, имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:1, SEQ ID NO:2 и SEQ ID NO:3. В определенных вариантах исполнения, анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением может содержать VH домен, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:7.
[00128] В определенных вариантах исполнения, анти-IL-6 антитело, описанное в данной заявке, может содержать вариабельный участок легкой цепи, VL, содержащий как минимум один CDR, имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5 и SEQ ID NO:6. В определенных вариантах исполнения, анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением может содержать VL домен содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:8.
[00129] В одном варианте исполнения, анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением содержит VL домен содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:8 and дополнительно включает VH домен содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:7.
[00130] Данное изобретение охватывает антитела, которые связывают человеческое IL-6, содержащее производные VH домена, VH CDR1, VH CDR2, VH CDR3, VL домена, VL CDR1, VL CDR2, или VL CDR3, описанные в данной заявке, которые могут связывать человеческое IL-6. Стандартные методы, известные специалисту в данной области, могут быть применены для введения мутаций (например, добавлений, делеций и/или замещений) в нуклеотидную последовательность, кодирующую антитело, включая, например, сайт-направленный мутагенез и ПЦР-опосредованный мутагенез, которые обычно используют с получением аминокислотных замещений. В одном варианте исполнения, VH и/или VL CDR производные могут включать менее, чем 25 аминокислотных замещений, менее, чем 20 аминокислотные замещения, менее, чем 15 аминокислотных замещений, менее, чем 10 аминокислотных замещений, менее, чем 5 аминокислотных замещений, менее, чем 4 аминокислотных замещений я, менее, чем 3 аминокислотных замещений, менее, чем 2 аминокислотных замещений, или 1 аминокислотное замещение относительно оригинальных VH и/или VL CDRs антител 18 анти-IL-6 антитела. В другом варианте исполнения, VH и/или VL CDR производные могут содержать консервативные аминокислотные замещения (например, выше), полученные на одном или более предсказанных заменимых аминокислотных остатков (т.е., аминокислотных остатков, которые не являются критичными для антитела для специфичного связывания человеческого IL-6). Мутации могут быть также введены рандомизированно вдоль всех или части VH и/или VL CDR кодирующих последовательностей, например, путем мутагенеза насыщения, и полученные в результате мутанты могут быть подвергнуты скринингу на предмет биотической активности для идентификации мутантов, сохраняющих активность. После мутагенеза, кодированное антитело может быть экспрессировано и может быть определена активность антитела.
[00131] Данное изобретение дополнительно охватывает антитела, которые связывают человеческое IL-6, где указанные антитела или фрагменты антител содержащие один или более CDRs, где указанные CDRs содержат аминокислотную последовательность, которая составляет как минимум 45%, как минимум 50%, как минимум 55%, как минимум 60%, как минимум 65%, как минимум 70%, как минимум 75%, как минимум 80%, как минимум 85%, как минимум 90%, как минимум 95%, или как минимум 99% идентично аминокислотной последовательности одного или более CDRs Антитела18. Процент идентичности двух аминокислотных последовательностей может быть определен при помощи любого способа, известного специалисту в данной области, включая но, не ограничиваясь приведенным, поиском белков BLAST.
[00132] Данное изобретение дополнительно охватывает антитела, которые связывают человеческое IL-6 с указанными антителами или фрагментами антител, которые содержат VH и/или VL домен, где указанные VH и/или VL домены содержат аминокислотную последовательность, которая составляет как минимум 45%, как минимум 50%, как минимум 55%, как минимум 60%, как минимум 65%, как минимум 70%, как минимум 75%, как минимум 80%, как минимум 85%, как минимум 90%, как минимум 95%, или как минимум 99% идентичны аминокислотной последовательности VH и VL домена Антитела 18. Процент идентичности двух аминокислотных последовательностей может быть определен при помощи любого способа, известного специалисту в данной области, включая, но, не ограничиваясь приведенным, поиском белков BLAST.
[00133] В одном варианте исполнения, анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением может связывать человеческое IL-6 с аффинностью, сравнимой с аффинностью Антитела 18.
[00134] В одном варианте исполнения, анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением специфично связывает тот же самый эпитоп IL-6, что и Антитело 18.
[00135] В одном варианте исполнения, анти-IL-6 антитело специфично конкурирует с Антителом 18 за IL-6 связывание. Конкурентный анализ может быть выполнен при помощи любого анализа связывания, известного из уровня техники, например, но не ограничиваясь приведенным, анализа ELISA или радиоиммунологического исследования.
[00136] Данное изобретение дополнительно представляет полинуклеотиды, содержащие нуклеотидную последовательность, кодирующую анти-IL-6 антитело с пролонгированным периодом полувыведения in vivo. Данное изобретение также охватывает полинуклеотиды, которые гибридизуются в жестких или менее жестких условиях гибридизации, как определено в данной заявке, с полинуклеотидами, которые кодируют анти-IL-6 антитело с пролонгированным периодом полувыведения in vivo.
[0100] В одном варианте исполнения, полинуклеотид в соответствии с данным изобретением, кодирующий анти-IL 6 антитело с пролонгированным периодом полувыведения in vivo, описанное в данной заявке, содержит оптимизированную полинуклеотидную последовательность. В конкретном варианте исполнения, полинуклеотид в соответствии с данным изобретением, кодирующий VH домен анти-IL-6 антитела, описанного в данной заявке, содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID NO:11. В конкретном варианте исполнения, полинуклеотид в соответствии с данным изобретением, кодирующий VL домен анти-IL-6 антитела, описанного в данной заявке, содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 12. В конкретном варианте исполнения, полинуклеотид в соответствии с данным изобретением, кодирующий тяжелую цепь анти-IL-6 антитела, описанного в данной заявке, содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 13. В конкретном варианте исполнения, полинуклеотид в соответствии с данным изобретением, кодирующий легкую цепь анти-IL-6 антитела, описанного в данной заявке, содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 14.
[0101] Другой вариант исполнения в соответствии с данным изобретением представляет собой вектор, содержащий одну или более нуклеотидных последовательностей, кодирующих анти-IL-6 антитело с пролонгированным периодом полувыведения in vivo.
[0102] В одном варианте исполнения, вектор в соответствии с данным изобретением содержит одну или более нуклеотидных последовательностей, кодирующих анти-IL-6 антитело с пролонгированным периодом полувыведения in vivo, где нуклеотидная последовательность является оптимизированной нуклеотидной последовательностью. В конкретном варианте исполнения, вектор в соответствии с данным изобретением содержит любую из нуклеотидных последовательностей SEQ ID NO:11-14. В дополнительном конкретном варианте исполнения, вектор в соответствии с данным изобретением содержит одну или более нуклеотидных последовательностей, кодирующих анти-IL-6 антитело с пролонгированным периодом полувыведения in vivo, где нуклеотидную последовательность выбирают из группы, содержащей SEQ ID NO:11-14.
[0103] Данное изобретение дополнительно относится к выделенной клетке, содержащей вектор, где указанный вектор содержит одну или более нуклеотидных последовательностей, кодирующих анти-IL-6 антитело с пролонгированным периодом полувыведения in vivo. В конкретном варианте исполнения, выделенная клетка в соответствии с данным изобретением содержит полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:11-14.
[0104] Анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением включают антитела IgG1, IgG2, IgG3, или IgG4 человеческого изотипа.
[0105] Данное изобретение дополнительно относится к фармацевтическим композициям, содержащим анти-IL-6 антитело, содержащим любую из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO:1-10.
[0106] Анти-IL-6 антитела, описанные в данной заявке, могут иметь высокую аффинность связывания к человеческому IL-6 антигену. Например, антитело, описанное в данной заявке, может иметь скорость ассоциации или kon (антитело (Ab) + антиген (Ag)kon→Ab-Ag), составляющую как минимум 2×105 M-1s-1, как минимум 5×105 M-1s-1, как минимум 106 M-1s-1, как минимум 5×106 M-1s-1, как минимум 107 M-1s-1, как минимум 5×107 M-1s-1, или как минимум 108 M-1s-1.
[0107] В другом варианте исполнения, анти-IL-6 антитело может иметь скорость диссоциации koff е ((Ab-Ag)koff→ антитело (Ab) + антиген (Ag)), составляющую менее, чем 5×10-1 s-1, менее, чем 10-1 s-1, менее, чем 5×10-1 s-1, менее, чем 10-2 s-1, менее, чем 5×10-3 s-1, менее, чем 10-3 s-1, менее, чем 5×10-4 s-1, или менее, чем 10-4 s-1. В другом варианте исполнения, антитело в соответствии с данным изобретением имеет koff менее, чем 5×10-5 s-1, менее, чем 10-5 s-1, менее, чем 5×10-6 s-1, менее, чем 10-6 s-1, менее, чем 5×10-7 s-1, менее, чем 10-7 s-1, менее, чем 5×10-8 s-1, менее, чем 10-8 s-1, менее, чем 5×10-9 s-1, менее, чем 10-9 s-1, или менее, чем 10-10 s-1.
[0108] В другом варианте исполнения, анти-IL-6 антитело может иметь константу аффинности или Ка (kon/koff), составляющую как минимум 102 М-1, как минимум 5×102 М-1, как минимум 103 М-1, как минимум 5×103 М-1, как минимум 104 М-1, как минимум 5×104 М-1, как минимум 105 М-1, как минимум 5×105 М-1, как минимум 106 М-1, как минимум 5×106 М-1, как минимум 107 М-1, как минимум 5×107 М-1, как минимум 108 М-1, как минимум 5×108 М-1, как минимум 109 М-1, как минимум 5×109 М-1, как минимум 1010 М-1, как минимум 5×1010 М-1, как минимум 1011 М-1, как минимум 5×1011 М-1, как минимум 1012 М-1, как минимум 5×1012 М-1, как минимум 1013 М-1, как минимум 5×1013 М 1, как минимум 1014 М-1, как минимум 5×1014 М-1, как минимум 1015 М-1, или как минимум 5×1015 М-1. В еще одном варианте исполнения, анти-IL-6 антитело может иметь константу диссоциации, или Kd (koff/kon) менее, чем 5×10-2 М, менее, чем 10-2 М, менее, чем 5×10-3 М, менее, чем 10-3 М, менее, чем 5×10-4 М, менее, чем 10-4 М, менее, чем 5×10-5 М, менее, чем 10-5 М, менее, чем 5×10-6 М, менее, чем 10-6 М, менее, чем 5×10-7 М, менее, чем 10-7 М, менее, чем 5×10-8 М, менее, чем 10-8 М, менее, чем 5×10-9 М, менее, чем 10-9 М, менее, чем 5×10-10 М, менее, чем 10-10 М, менее, чем 5×10-11 М, менее, чем 10-11 М, менее, чем 5×10-12 М, менее, чем 10-12 М, менее, чем 5×10-13 М, менее, чем 10-12 М, менее, чем 5×10-14 М, менее, чем 10-14 М, менее, чем 5×10-155 М, или менее, чем 10-15 М.
[0109] Антитело, которое применяют в соответствии с со способом, описанным в данной заявке, может иммуноспецифично связывать IL-6 и иметь константу диссоциации (Kd) менее, чем 3000 пМ, менее, чем 2500 пМ, менее, чем 2000 пМ, менее, чем 1500 пМ, менее, чем 1000 пМ, менее, чем 750 пМ, менее, чем 500 пМ, менее, чем 250 пМ, менее, чем 200 пМ, менее, чем 150 пМ, менее, чем 100 пМ, менее, чем 75 пМ, как оценено при помощи способа, описанного в данной заявке или известно специалисту в данной области (например, анализ BIAcore, ELISA) (Biacore International АВ, Uppsala, Sweden). В конкретном варианте исполнения, антитело которое применяют в соответствии с со способом, описанным в данной заявке, может иммуноспецифично связывать человеческий IL-6 антиген и иметь константу диссоциации (Kd), составляющую 25-3400 пМ, 25-3000 пМ, 25-2500 пМ, 25-2000 пМ, 25-1500 пМ, 25-1000 пМ, 25-750 пМ, 25 -о 500 пМ, 25-250 пМ, 25-100 пМ, 25-75 пМ, 25-50 пМ, как оценено при помощи способа, описанного в данной заявке или известно специалисту в данной области (например, анализ BIAcore, ELISA). В другом варианте исполнения, анти-IL-6 антитело которое применяют в соответствии со способом, описанным в данной заявке, может иммуноспецифично связывать IL-6 и иметь константу диссоциации (Kd), составляющую 500 пМ, 100 пМ, 75 пМ или 50 пМ, как оценено при помощи способа, описанного в данной заявке или известно специалисту в данной области (например, анализ BIAcore, ELISA).
[0110] Данное изобретение дополнительно представляет полинуклеотиды, содержащие нуклеотидную последовательность, кодирующую анти-IL-6 антитело с пролонгированным периодом полувыведения in vivo. Данное изобретение также охватывает полинуклеотид, который гибридизуется в жестких и менее жестких условиях гибридизации, например, как определено в данной заявке, с полинуклеотидами, кодирующими анти-IL-6 антитело с пролонгированным периодом полувыведения in vivo.
[0111] Жесткие условия гибридизации включают, не ограничиваясь приведенным, гибридизацию до фильтр-связанной ДНК в 6Х хлориде натрия/цитрате натрия (ХЦН) при приблизительно 45°C с последующим одним или более промываниями 0,2Х ХЦН/0,1% ДСН при приблизительно 50-65°C, очень жесткую гибридизацию, такую, как гибридизация до фильтр-связанной ДНК в 6Х ХЦН при приблизительно 45°C с последующим одним или более промываниями в 0,1X ХЦН/0,2% ДСН (додецилсульфате натрия) при приблизительно 60°C, или любые другие жесткие условия гибридизации, известные специалистам в данной области (см., например, Ausubel, F.M. et al., eds. 1989 Current Protocols in Molecular Biology, vol. 1, Green Publishing Associates, Inc. and John Wiley and Sons, Inc., NY на страницах 6, 3, 1 - 6, 3, 6 и 2, 10, 3).
[0112] Полинулкеотиды могут быть получены и нуклеотидная последовательность полинуклеотидов определена любым способом, известным из уровня техники. Например, если нуклеотидная последовательность антитела известна, то полинуклеотид, кодирующий антитело, может быть собран из химически синтезированных олигонуклеотидов (например, как описано в Kutmeier et al., BioTechniques 17:242 (1994)), что, кратко, включает синтез перекрывающихся олигонуклеотидов, содержащих части последовательности, кодирующие антитело, гибридизацию и замыкание таких олигонуклеотидов с последующей амплификацией замкнутых олигонуклеотидов при помощи ПЦР.
[0113] Полинуклеотид, кодирующий антитело, может быть также получен из нуклеиновой кислоты из приемлемого источника. Если клон, содержащий нуклеиновую кислоту, кодирующую конкретное антитело, не доступен, но известна последовательность молекулы антитела, нуклеиновая кислота, кодирующая иммуноглобулин, может быть химически синтезирована или получена из приемлемого источника (например, библиотеки кДНК антител, или библиотеки кДНК, полученной из нуклеиновой кислоты, преимущественно полиА + РНК, выделенной из, любой ткани или клетки, экспрессирующей антитело, таких, как гибридомные клетки, выбранные для экспрессии антитела) при помощи ПЦР амплификации с использованием синтетических праймеров, которые могут быть гибридизованы в 3' и 5' концах последовательности, или путем клонирования при помощи олигонуклеотидного зонда, специфичного для идентификации конкретной генной последовательности, например, кДНК клона из библиотеки кДНК, которая кодирует антитело. Амплифицированные нуклеиновые кислоты, полученный при помощи ПЦР, могут затем быть клонированы в реплицируемые векторы клонирования при помощи любого способа, хорошо известного из уровня техники.
[0114] IL-6 участвовал в ряде заболевания и состояний. Данные заболевания и состояния включают, не ограничиваясь приведенным, воспаление, боль и рак. Анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением, описанные в данной заявке, преимущественно способны, например, к нейтрализации IL-6, уменьшению уровней IL-6 в организме и антагонизму сигнализации IL-6. Как таковые, анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением преимущественно способны действовать в качестве лекарственных средств для лечения таких состояний и заболеваний.
[0115] Данное изобретение дополнительно представляет антитела, которые эффективно нейтрализуют IL-6 активность у субъекта в течение продолжительных периодов времени. Не будучи ограниченными конкретным механизмом действия, анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением может нейтрализовать IL-6 путем его связывания и таким образом предотвращения участия IL-6 в белковых взаимодействиях, которые необходимы для IL-6 опосредованной передачи сигнала. В одном варианте исполнения, антитело в соответствии с данным изобретением способно к уменьшению концентрации в плазме свободного (т.е., не связанного анти-IL-6 антителом) IL-6. Уровни свободного IL-6 в биологической жидкости (например, плазме) могут быть определены при помощи количественных биоанализов, например, но не ограничиваясь приведенным, биоанализов, описанных в Papadopoulos et. al, Journal of Clinical Laboratory Analysis 9:234-37 (1995). Кратко, биоанализ измеряет IL-6 вызванную пролиферацию конкретной гибридомной клетки (например, В9 гибридомной клетки). Концентрация свободного IL-6 может быть также определена при помощи иммуноферментного сэндвич-анализа. Кратко, свободное IL-6 в сыворотке иммобилизовали при помощи анти-IL-6 иммобилизованного антитела. Такое иммобилизованное антитело только связывается с IL-6 в отсутствие Антитела18Е и растворимого IL-6 рецептора. Иммобилизованное IL-6 детектировали при помощи детекторного антитела, которое не конкурирует с иммобилизованным антителом и мечено рутением или ПХ (пероксидазой хрена). Измеренный электрохемилюминесцентный или колориметрический сигнал пропорционален концентрации свободного IL-6 в сыворотке. Концентрацию свободного IL-6 в сыворотке рассчитывали, исходя из стандартной кривой.
[0116] В одном варианте исполнения, антитело в соответствии с данным изобретением способно к уменьшению концентрации в сыворотке свободного (т.е., не связанного анти-IL-6 антителом) IL-6. Введение эффективной дозы анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением может достигать как минимум приблизительно 20%, как минимум приблизительно 30%, как минимум приблизительно 40%, как минимум приблизительно 50%, как минимум приблизительно 60%, как минимум приблизительно 70%, как минимум приблизительно 80%, как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 99%, или как минимум приблизительно 100% уменьшения концентрации в сыворотке свободного IL-6. Эффективная доза может содержать 1 мг, 5 мг, 10 мг, 25 мг, 50 мг, 75 мг, 100 мг, 150 мг, 200 мг, 250 мг, 300 мг, 400 мг или 500 мг анти IL-6 антитела, описанного в данной заявке. Уменьшение уровней свободного IL-6 может продолжаться в течение как минимум приблизительно 1 дня, как минимум приблизительно 2 дней, как минимум приблизительно 3 дней, как минимум приблизительно 4 дней, как минимум приблизительно 5 дней, как минимум приблизительно 6 дней, как минимум приблизительно 7 дней, как минимум приблизительно 10 дней, как минимум приблизительно 15 дней, или как минимум приблизительно 20 дней. Субъект может быть человеком или нечеловеческим приматом.
[0117] В другом варианте исполнения, введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением может достигать непрерывного как минимум приблизительно 20%, как минимум приблизительно 30%, как минимум приблизительно 40%, как минимум приблизительно 50%, как минимум приблизительно 60%, как минимум приблизительно 70%, как минимум приблизительно 80%, как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 99%, или как минимум приблизительно 100% уменьшения в сыворотке концентрации свободного IL-6. В одном варианте исполнения, каждая более чем из одной доз содержит одно и то же количество анти-IL-6 антитела. Эффективная доза может содержать 1 мг, 5 мг, 10 мг, 25 мг, 50 мг, 75 мг, 100 мг, 150 мг, 200 мг, 250 мг, 300 мг, 400 мг или 500 мг анти-IL-6 антитела, описанного в данной заявке. В другом варианте исполнения, за начальной дозой нагрузки следуют последовательные поддерживающие дозы. Начальная доза нагрузки может содержать в два, 3 раза, 4 раза, 5 раз, или 10 раз больше анти-IL-6 антитела, чем поддерживающие дозы. В одном варианте исполнения, временной интервал, разделяющий дозы, является постоянным. Дозы анти-IL-6 антитела могут быть введены один раз в неделю, один раз в две недели, один раз в три недели, один раз в четыре недели, один раз в восемь недель или один раз в двенадцать недель. В конкретном варианте исполнения, введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением каждые 4 недели достигает непрерывного как минимум 90% уменьшения в сыворотке концентрации свободного IL-6. В конкретном варианте исполнения, введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением каждые 8 недель достигает непрерывного как минимум 90% уменьшения в сыворотке концентрации свободного IL-6. В конкретном варианте исполнения, введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением каждые 12 недель достигает непрерывного как минимум 90% уменьшения в сыворотке концентрации свободного IL-6. Анти-IL-6 антитело может быть введено при помощи любого способа, известного из уровня техники, например, но не ограничиваясь приведенным, посредством подкожной или внутривенной инъекции. Субъект может быть человеком или нечеловеческим приматом.
[0118] В одном варианте исполнения, антитело в соответствии с данным изобретением способно нейтрализовать сывороточное IL-6 у субъекта. Введение эффективной дозы анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением может достигать как минимум приблизительно 20%, как минимум приблизительно 30%, как минимум приблизительно 40%, как минимум приблизительно 50%, как минимум приблизительно 60%, как минимум приблизительно 70%, как минимум приблизительно 80%, как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 99%, или как минимум приблизительно 100% нейтрализации сывороточного IL-6. Эффективная доза может содержать 1 мг, 5 мг, 10 мг, 25 мг, 50 мг, 75 мг, 100 мг, 150 мг, 200 мг, 250 мг, 300 мг, 400 мг или 500 мг анти IL-6 антитела, описанного в данной заявке. Нейтрализация сывороточного IL-6 может продолжаться в течение как минимум приблизительно 1 дня, как минимум приблизительно 2 дней, как минимум приблизительно 3 дней, как минимум приблизительно 4 дней, как минимум приблизительно 5 дней, как минимум приблизительно 6 дней, как минимум приблизительно 7 дней, как минимум приблизительно 10 дней, как минимум приблизительно 15 дней, или как минимум приблизительно 20 дней. Субъект может быть человеком или нечеловеческим приматом.
[0119] В другом варианте исполнения, введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением может достигать непрерывной как минимум приблизительно 20%, как минимум приблизительно 30%, как минимум приблизительно 40%, как минимум приблизительно 50%, как минимум приблизительно 60%, как минимум приблизительно 70%, как минимум приблизительно 80%, как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 99%, или как минимум приблизительно 100% нейтрализации сывороточного IL-6. В одном варианте исполнения, каждая более чем из одной дозы содержит то же самое количество анти-IL-6 антитела. Эффективная доза может содержать 1 мг, 5 мг, 10 мг, 25 мг, 50 мг, 75 мг, 100 мг, 150 мг, 200 мг, 250 мг, 300 мг, 400 мг или 500 мг анти IL-6 антитела, описанного в данной заявке. В другом варианте исполнения, за начальной дозой нагрузки следуют последующие поддерживающие дозы. Начальная доза нагрузки может содержать в два, 3 раза, 4 раза, 5 раз, или 10 раз более анти-IL-6 антитела, чем поддерживающие дозы. В одном варианте исполнения, временной интервал, разделяющий дозы, является постоянным. Дозы анти-IL-6 антитела могут быть введены один раз в неделю, один раз в две недели, один раз в три недели, один раз в четыре недели, один раз в восемь недель или один раз в двенадцать недель. В конкретном варианте исполнения, введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением каждые 4 недели достигает непрерывного как минимум 90% нейтрализации сывороточного IL-6. В конкретном варианте исполнения, введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением каждые 8 недель достигает непрерывного как минимум 90% нейтрализации сывороточного IL-6. В конкретном варианте исполнения, введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением каждые 12 недель достигает непрерывного как минимум 90% нейтрализации сывороточного IL-6. Анти-IL-6 антитело может быть введено при помощи любого способа, известного из уровня техники, например, не ограничиваясь приведенным, посредством подкожной или внутривенной инъекции. Субъект может быть человеком или нечеловеческим приматом.
[0120] В одном варианте исполнения, антитело в соответствии с данным изобретением способно к ингибированию IL-6 опосредованной сигнализации у субъекта. Введение эффективной дозы анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением может достигать как минимум приблизительно 20%, как минимум приблизительно 30%, как минимум приблизительно 40%, как минимум приблизительно 50%, как минимум приблизительно 60%, как минимум приблизительно 70%, как минимум приблизительно 80%, как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 99%, или как минимум приблизительно 100% ингибирование IL-6 опосредованной сигнализации у субъекта. Эффективная доза может содержать 1 мг, 5 мг, 10 мг, 25 мг, 50 мг, 75 мг, 100 мг, 150 мг, 200 мг, 250 мг, 300 мг, 400 мг или 500 мг анти IL-6 антитела, описанного в данной заявке. Ингибирование IL-6 опосредованной сигнализации у субъекта может продолжаться в течение как минимум приблизительно 1 дня, как минимум приблизительно 2 дней, как минимум приблизительно 3 дней, как минимум приблизительно 4 дней, как минимум приблизительно 5 дней, как минимум приблизительно 6 дней, как минимум приблизительно 7 дней, как минимум приблизительно 10 дней, как минимум приблизительно 15 дней, или как минимум приблизительно 20 дней. Субъект может быть человеком или нечеловеческим приматом.
[0121] В другом варианте исполнения, введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением может достигать непрерывного, как минимум приблизительно 20%, как минимум приблизительно 30%, как минимум приблизительно 40%, как минимум приблизительно 50%, как минимум приблизительно 60%, как минимум приблизительно 70%, как минимум приблизительно 80%, как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 99%, или как минимум приблизительно 100% ингибирования IL-6 опосредованной сигнализации у субъекта. В одном варианте исполнения, каждая более чем из одной дозы содержит то же самое количество анти-IL-6 антитела. Эффективная доза может содержать 1 мг, 5 мг, 10 мг, 25 мг, 50 мг, 75 мг, 100 мг, 150 мг, 200 мг, 250 мг, 300 мг, 400 мг или 500 мг анти IL-6 антитела, описанного в данной заявке. В другом варианте исполнения, за начальной дозой нагрузки следуют последующие поддерживающие дозы. Начальная доза нагрузки может содержать в два, 3 раза, 4 раза, 5 раз, или 10 раз больше анти-IL-6 антитела, чем поддерживающие дозы. В одном варианте исполнения, временной интервал, разделяющий дозы, является постоянным. Дозы анти-IL-6 антитела могут быть введены один раз в неделю, один раз в две недели, один раз в три недели, один раз в четыре недели, один раз в восемь недель или один раз в двенадцать недель. В конкретном варианте исполнения, введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением каждые 4 недели достигает непрерывного как минимум 90% ингибирования IL-6 опосредованной сигнализации у субъекта. В конкретном варианте исполнения, введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением каждые 8 недель достигает непрерывного как минимум 90% ингибирования IL-6 опосредованной сигнализации у субъекта. В конкретном варианте исполнения, введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением каждые 12 недель достигает непрерывного как минимум 90% ингибирования IL-6 опосредованной сигнализации у субъекта. Анти-IL-6 антитело может быть ведено при помощи любого способа, известного из уровня техники, например, но не ограничиваясь приведенным, посредством подкожной или внутривенной инъекции. Субъект может быть человеком или нечеловеческим приматом.
[0122] В одном варианте исполнения, антитело в соответствии с данным изобретением способно к уменьшению роста синовиальных клеток у субъекта. Введение эффективной дозы анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением может достигать как минимум приблизительно 20%, как минимум приблизительно 30%, как минимум приблизительно 40%, как минимум приблизительно 50%, как минимум приблизительно 60%, как минимум приблизительно 70%, как минимум приблизительно 80%, как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 99%, или как минимум приблизительно 100% уменьшения роста синовиальных клеток у субъекта. Эффективная доза может содержать 1 мг, 5 мг, 10 мг, 25 мг, 50 мг, 75 мг, 100 мг, 150 мг, 200 мг, 250 мг, 300 мг, 400 мг или 500 мг анти IL-6 антитела, описанного в данной заявке. Уменьшение роста синовиальных клеток у субъекта может продолжаться в течение как минимум приблизительно 1 дня, как минимум приблизительно 2 дней, как минимум приблизительно 3 дней, как минимум приблизительно 4 дней, как минимум приблизительно 5 дней, как минимум приблизительно 6 дней, как минимум приблизительно 7 дней, как минимум приблизительно 10 дней, как минимум приблизительно 15 дней, или как минимум приблизительно 20 дней. Субъект может быть человеком или нечеловеческим приматом.
[0123] В другом варианте исполнения, введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением может достигать непрерывного как минимум приблизительно 20%, как минимум приблизительно 30%, как минимум приблизительно 40%, как минимум приблизительно 50%, как минимум приблизительно 60%, как минимум приблизительно 70%, как минимум приблизительно 80%, как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 99%, или как минимум приблизительно 100% уменьшения роста синовиальных клеток у субъекта. В одном варианте исполнения, каждая более чем из одной дозы содержит то же самое количество анти-IL-6 антитела. Эффективная доза может содержать 1 мг, 5 мг, 10 мг, 25 мг, 50 мг, 75 мг, 100 мг, 150 мг, 200 мг, 250 мг, 300 мг, 400 мг или 500 мг анти IL-6 антитела, описанного в данной заявке. В другом варианте исполнения, за начальной дозой нагрузки следуют последующие поддерживающие дозы. Начальная доза нагрузки может содержать в два, 3 раза, 4 раза, 5 раз, или 10 раз больше анти-IL-6 антитела, чем поддерживающие дозы. В одном варианте исполнения, временной интервал, разделяющий дозы, является постоянным. Дозы анти-IL-6 антитела могут быть введены один раз в неделю, один раз в две недели, один раз в три недели, один раз в четыре недели, один раз в восемь недель или один раз в двенадцать недель. В конкретном варианте исполнения, введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением каждые 4 недели достигает непрерывного как минимум 90% уменьшения роста синовиальных клеток у субъекта. В конкретном варианте исполнения, введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением каждые 8 недель достигает непрерывного как минимум 90% уменьшения роста синовиальных клеток у субъекта. В конкретном варианте исполнения, введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением каждые 12 недель достигает непрерывного как минимум 90% уменьшения роста синовиальных клеток у субъекта. Анти-IL-6 антитело может быть введено при помощи любого способа, известного из уровня техники, например, но не ограничиваясь приведенным, посредством подкожной или внутривенной инъекции. Субъект может быть человеком или нечеловеческим приматом.
[0124] В одном варианте исполнения, антитело в соответствии с данным изобретением способно к уменьшению синовиального воспаления у субъекта. Введение эффективной дозы анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением может достигать как минимум приблизительно 20%, как минимум приблизительно 30%, как минимум приблизительно 40%, как минимум приблизительно 50%, как минимум приблизительно 60%, как минимум приблизительно 70%, как минимум приблизительно 80%, как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 99%, или как минимум приблизительно 100% уменьшения синовиального воспаления у субъекта. Эффективная доза может содержать 1 мг, 5 мг, 10 мг, 25 мг, 50 мг, 75 мг, 100 мг, 150 мг, 200 мг, 250 мг, 300 мг, 400 мг или 500 мг анти IL-6 антитела, описанного в данной заявке. Уменьшение синовиального воспаления у субъекта может продолжаться в течение как минимум приблизительно 1 дня, как минимум приблизительно 2 дней, как минимум приблизительно 3 дней, как минимум приблизительно 4 дней, как минимум приблизительно 5 дней, как минимум приблизительно 6 дней, как минимум приблизительно 7 дней, как минимум приблизительно 10 дней, как минимум приблизительно 15 дней, или как минимум приблизительно 20 дней. Субъект может быть человеком или нечеловеческим приматом.
[0125] В другом варианте исполнения, введение более, чем одной дозы анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением может достигать непрерывного как минимум приблизительно 20%, как минимум приблизительно 30%, как минимум приблизительно 40%, как минимум приблизительно 50%, как минимум приблизительно 60%, как минимум приблизительно 70%, как минимум приблизительно 80%, как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 99%, или как минимум приблизительно 100% уменьшения синовиального воспаления у субъекта. В одном варианте исполнения, каждая более чем из одной дозы содержит то же самое количество анти-IL-6 антитела. Эффективная доза может содержать 1 мг, 5 мг, 10 мг, 25 мг, 50 мг, 75 мг, 100 мг, 150 мг, 200 мг, 250 мг, 300 мг, 400 мг или 500 мг анти IL-6 антитела, описанного в данной заявке. В другом варианте исполнения, за начальной дозой нагрузки следуют последующие поддерживающие дозы. Начальная доза нагрузки может содержать в два, 3 раза, 4 раза, 5 раз, или 10 раз больше анти-IL-6 антитела, чем поддерживающие дозы. В одном варианте исполнения, временной интервал, разделяющий дозы, является постоянным. Дозы анти-IL-6 антитела могут быть введены один раз в неделю, один раз в две недели, один раз в три недели, один раз в четыре недели, один раз в восемь недель или один раз в двенадцать недель. В конкретном варианте исполнения, введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением каждые 4 недели достигает непрерывного как минимум 90% уменьшения синовиального воспаления у субъекта. В конкретном варианте исполнения, введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением каждые 8 недель достигает непрерывного как минимум 90% уменьшения синовиального воспаления у субъекта. В конкретном варианте исполнения, введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением каждые 12 недель достигает непрерывного как минимум 90% уменьшения синовиального воспаления у субъекта. Анти-IL-6 антитело может быть введено при помощи любого способа, известного из уровня техники, например, но не ограничиваясь приведенным, посредством подкожной или внутривенной инъекции. Субъект может быть человеком или нечеловеческим приматом.
[0126] Данное изобретение дополнительно представляет способы уменьшения концентрации в сыворотке свободного IL-6, для нейтрализации сывороточного IL-6 у субъекта, для нейтрализации IL-6 у субъекта, для ингибирования IL-6 опосредованной сигнализации у субъекта, для уменьшения роста синовиальных клеток у субъекта и для уменьшения синовиального воспаления у субъекта.
[0127] В одном варианте исполнения, способ уменьшения концентрации в сыворотке свободного IL-6 (т.е. не связанного анти-IL-6 антитела) у субъекта включает введение эффективной дозы анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения. Введение эффективной дозы анти-IL-6 антитела может достигать как минимум приблизительно 20%, как минимум приблизительно 30%, как минимум приблизительно 40%, как минимум приблизительно 50%, как минимум приблизительно 60%, как минимум приблизительно 70%, как минимум приблизительно 80%, как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 99%, или как минимум приблизительно 100% уменьшения в сыворотке концентрации свободного IL-6. Эффективная доза может содержать 1 мг, 5 мг, 10 мг, 25 мг, 50 мг, 75 мг, 100 мг, 150 мг, 200 мг, 250 мг, 300 мг, 400 мг или 500 мг анти IL-6 антитела, описанного в данной заявке. Уменьшение уровней свободного IL-6 может продолжаться в течение как минимум приблизительно 1 дня, как минимум приблизительно 2 дней, как минимум приблизительно 3 дней, как минимум приблизительно 4 дней, как минимум приблизительно 5 дней, как минимум приблизительно 6 дней, как минимум приблизительно 7 дней, как минимум приблизительно 10 дней, как минимум приблизительно 15 дней, или как минимум приблизительно 20 дней. Субъект может быть человеком или нечеловеческим приматом. В конкретном варианте исполнения, способ уменьшения концентрации в сыворотке свободного IL-6 на как минимум приблизительно 90% у субъекта включает введение эффективной дозы 1 мг, 5 мг, 10 мг, 25 мг, 50 мг, 75 мг, 100 мг, 150 мг, 200 мг, 250 мг, 300 мг, 400 мг или 500 мг анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения, где как минимум 90% уменьшения в сыворотке концентрации свободного IL-6 продолжается в течение как минимум приблизительно 1 дня, как минимум приблизительно 2 дней, как минимум приблизительно 3 дней, как минимум приблизительно 4 дней, как минимум приблизительно 5 дней, как минимум приблизительно 6 дней, как минимум приблизительно 7 дней, как минимум приблизительно 10 дней, как минимум приблизительно 15 дней, или как минимум приблизительно 20 дней.
[0128] В одном варианте исполнения, способ уменьшения концентрации в сыворотке свободного IL-6 у субъекта включает введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения. Введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела может уменьшать концентрацию в сыворотке свободного IL-6 на как минимум приблизительно 20%, как минимум приблизительно 30%, как минимум приблизительно 40%, как минимум приблизительно 50%, как минимум приблизительно 60%, как минимум приблизительно 70%, как минимум приблизительно 80%, как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 99%, или как минимум приблизительно 100%. В одном варианте исполнения, способ поддерживания уменьшенной концентрации в сыворотке свободного IL-6 у субъекта включает введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения. Введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела может поддерживать как минимум приблизительно 20%, как минимум приблизительно 30%, как минимум приблизительно 40%, как минимум приблизительно 50%, как минимум приблизительно 60%, как минимум приблизительно 70%, как минимум приблизительно 80%, как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 99%, или как минимум приблизительно 100% уменьшения в сыворотке концентрации свободного IL-6. В одном варианте исполнения, способ достижения непрерывного уменьшения в сыворотке концентрации свободного IL-6 у субъекта включает введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения. Введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела может достигать как минимум приблизительно 20%, как минимум приблизительно 30%, как минимум приблизительно 40%, как минимум приблизительно 50%, как минимум приблизительно 60%, как минимум приблизительно 70%, как минимум приблизительно 80%, как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 99%, или как минимум приблизительно 100% непрерывного уменьшения в сыворотке концентрации свободного IL-6. В одном варианте исполнения, каждая более чем из одной дозы содержит то же самое количество анти-IL-6 антитела. Разовая доза может содержать 1 мг, 5 мг, 10 мг, 25 мг, 50 мг, 75 мг, 100 мг, 150 мг, 200 мг, 250 мг, 300 мг, 400 мг или 500 мг анти IL-6 антитела, описанного в данной заявке. В другом варианте исполнения, за начальной дозой нагрузки следуют последующие поддерживающие дозы. Начальная доза нагрузки может содержать в два, 3 раза, 4 раза, 5 раз, или 10 раз больше анти-IL-6 антитела, чем поддерживающие дозы. В одном варианте исполнения, временной интервал, разделяющий дозы, является постоянным. Дозы анти-IL-6 антитела могут быть введены один раз в неделю, один раз в две недели, один раз в три недели, один раз в четыре недели, один раз в восемь недель или один раз в двенадцать недель. Анти-IL-6 антитело может быть введено при помощи любого способа, известного из уровня техники, но, не ограничиваясь приведенным, посредством подкожной или внутривенной инъекции. Субъект может быть человеком или нечеловеческим приматом.
[0129] В конкретном варианте исполнения, способ уменьшения концентрации в сыворотке свободного IL-6 у субъекта на как минимум 90% включает введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В конкретном варианте исполнения, способ уменьшения концентрации в сыворотке свободного IL-6 у субъекта на как минимум 90% включает введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В конкретном варианте исполнения, способ уменьшения концентрации в сыворотке свободного IL-6 у субъекта на как минимум 90% включает введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. В конкретном варианте исполнения, способ поддерживания как минимум на 90% уменьшенной концентрации в сыворотке свободного IL-6 у субъекта включает введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В конкретном варианте исполнения, способ поддерживания как минимум на 90% уменьшенной концентрации в сыворотке свободного IL-6 у субъекта включает введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В конкретном варианте исполнения, способ поддерживания как минимум на 90% уменьшенной концентрации в сыворотке свободного IL-6 у субъекта включает введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. В конкретном варианте исполнения, способ достижения непрерывного как минимум 90% уменьшения в сыворотке концентрации свободного IL-6 у субъекта включает введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В конкретном варианте исполнения, способ достижения непрерывного как минимум 90% уменьшения в сыворотке концентрации свободного IL-6 у субъекта включает введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В конкретном варианте исполнения, способ достижения непрерывного как минимум 90% уменьшения в сыворотке концентрации свободного IL-6 у субъекта включает введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. Анти-IL-6 антитело может быть введено при помощи любого способа, известного из уровня техники, но, не ограничиваясь приведенным, посредством подкожной или внутривенной инъекции. Субъект может быть человеком или нечеловеческим приматом.
[0130] В конкретном варианте исполнения, способ уменьшения концентрации в сыворотке свободного IL-6 у субъекта на как минимум 90% включает (а) введение дозы нагрузки 100 мг анти-IL-6 антитело и (b) введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В конкретном варианте исполнения, способ уменьшения концентрации в сыворотке свободного IL-6 у субъекта на как минимум 90% включает (а) введение дозы нагрузки 200 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В конкретном варианте исполнения, способ уменьшения концентрации в сыворотке свободного IL-6 у субъекта на как минимум 90% включает (а) введение дозы нагрузки 400 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. В конкретном варианте исполнения, способ поддерживания как минимум на 90% уменьшенной концентрации в сыворотке свободного IL-6 у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 100 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В конкретном варианте исполнения, способ поддерживания как минимум на 90% уменьшенной концентрации в сыворотке свободного IL-6 у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 200 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В конкретном варианте исполнения, способ поддерживания как минимум на 90% уменьшенной концентрации в сыворотке свободного IL-6 у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 400 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. В конкретном варианте исполнения, способ достижения непрерывного как минимум 90% уменьшения в сыворотке концентрации свободного IL-6 у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 100 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В конкретном варианте исполнения, способ достижения непрерывного как минимум 90% уменьшения в сыворотке концентрации свободного IL-6 у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 200 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В конкретном варианте исполнения, способ достижения непрерывного как минимум 90% уменьшения в сыворотке концентрации свободного IL-6 у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 400 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. Анти-IL-6 антитело может быть введено при помощи любого способа, известного из уровня техники, например, но не ограничиваясь приведенным, посредством подкожной или внутривенной инъекции. Субъект может быть человеком или нечеловеческим приматом.
[0131] В одном варианте исполнения, способ нейтрализации сывороточного IL-6 у субъекта включает введение эффективной дозы анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения. Введение эффективной дозы анти-IL-6 антитела может достигать как минимум приблизительно 20%, как минимум приблизительно 30%, как минимум приблизительно 40%, как минимум приблизительно 50%, как минимум приблизительно 60%, как минимум приблизительно 70%, как минимум приблизительно 80%, как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 99%, или как минимум приблизительно 100% нейтрализации сывороточного IL-6. Эффективная доза может содержать 1 мг, 5 мг, 10 мг, 25 мг, 50 мг, 75 мг, 100 мг, 150 мг, 200 мг, 250 мг, 300 мг, 400 мг или 500 мг анти IL-6 антитела, описанного в данной заявке. Нейтрализация сывороточного IL-6 может продолжаться в течение как минимум приблизительно 1 дня, как минимум приблизительно 2 дней, как минимум приблизительно 3 дней, как минимум приблизительно 4 дней, как минимум приблизительно 5 дней, как минимум приблизительно 6 дней, как минимум приблизительно 7 дней, как минимум приблизительно 10 дней, как минимум приблизительно 15 дней, или как минимум приблизительно 20 дней. Субъект может быть человеком или нечеловеческим приматом. В конкретном варианте исполнения, способ нейтрализации как минимум приблизительно 90% сывороточного IL-6 у субъекта включает введение эффективной дозы 1 мг, 5 мг, 10 мг, 25 мг, 50 мг, 75 мг, 100 мг, 150 мг, 200 мг, 250 мг, 300 мг, 400 мг или 500 мг анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения, где как минимум 90% нейтрализации сывороточного IL-6 продолжается в течение как минимум приблизительно 1 дня, как минимум приблизительно 2 дней, как минимум приблизительно 3 дней, как минимум приблизительно 4 дней, как минимум приблизительно 5 дней, как минимум приблизительно 6 дней, как минимум приблизительно 7 дней, как минимум приблизительно 10 дней, как минимум приблизительно 15 дней, или как минимум приблизительно 20 дней.
[0132] В одном варианте исполнения, способ нейтрализации сывороточного IL-6 у субъекта включает введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения. Введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела может достигать как минимум приблизительно 20%, как минимум приблизительно 30%, как минимум приблизительно 40%, как минимум приблизительно 50%, как минимум приблизительно 60%, как минимум приблизительно 70%, как минимум приблизительно 80%, как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 99%, или как минимум приблизительно 100% нейтрализации сывороточного IL-6. В одном варианте исполнения, способ поддерживания нейтрализации сывороточного IL-6 у субъекта включает введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения. Введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела может поддерживать как минимум приблизительно 20%, как минимум приблизительно 30%, как минимум приблизительно 40%, как минимум приблизительно 50%, как минимум приблизительно 60%, как минимум приблизительно 70%, как минимум приблизительно 80%, как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 99%, или как минимум приблизительно 100% нейтрализации сывороточного IL-6. В одном варианте исполнения, способ достижения непрерывной нейтрализации сывороточного IL-6 у субъекта включает введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения. Введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела может достигать непрерывной как минимум приблизительно 20%, как минимум приблизительно 30%, как минимум приблизительно 40%, как минимум приблизительно 50%, как минимум приблизительно 60%, как минимум приблизительно 70%, как минимум приблизительно 80%, как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 99%, или как минимум приблизительно 100% нейтрализации сывороточного IL-6. В одном варианте исполнения, каждая более чем из одной дозы содержит то же самое количество анти-IL-6 антитела. Разовая доза может содержать 1 мг, 5 мг, 10 мг, 25 мг, 50 мг, 75 мг, 100 мг, 150 мг, 200 мг, 250 мг, 300 мг, 400 мг или 500 мг анти IL-6 антитела, описанного в данной заявке. В другом варианте исполнения, за начальной дозой нагрузки следуют последующие поддерживающие дозы. Начальная доза нагрузки может содержать в два, 3 раза, 4 раза, 5 раз, или в 10 раз больше анти-IL-6 антитела, чем поддерживающие дозы. В одном варианте исполнения, временной интервал, разделяющий дозы, является постоянным. Дозы анти-IL-6 антитела могут быть введены один раз в неделю, один раз в две недели, один раз в три недели, один раз в четыре недели, один раз в восемь недель или один раз в двенадцать недель. Анти-IL-6 антитело может быть введено при помощи любого способа, известного из уровня техники, но, не ограничиваясь приведенным, посредством подкожной или внутривенной инъекции. Субъект может быть человеком или нечеловеческим приматом.
[0133] В конкретном варианте исполнения, способ нейтрализации как минимум приблизительно 90% сывороточного IL-6 у субъекта включает введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В конкретном варианте исполнения, способ нейтрализации как минимум приблизительно 90% сывороточного IL-6 у субъекта включает введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В конкретном варианте исполнения, способ нейтрализации как минимум приблизительно 90% сывороточного IL-6 у субъекта включает введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. В конкретном варианте исполнения, способ поддерживания как минимум 90% нейтрализации сывороточного IL-6 у субъекта включает введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В конкретном варианте исполнения, способ поддерживания как минимум 90% нейтрализации сывороточного IL-6 у субъекта включает введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В конкретном варианте исполнения, способ поддерживания как минимум 90% нейтрализации сывороточного IL-6 у субъекта включает введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. В конкретном варианте исполнения, способ достижения непрерывного как минимум 90% нейтрализации сывороточного IL-6 у субъекта включает введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В конкретном варианте исполнения, способ достижения непрерывного как минимум 90% нейтрализации сывороточного IL-6 у субъекта включает введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В конкретном варианте исполнения, способ достижения непрерывного как минимум 90% нейтрализации сывороточного IL-6 у субъекта включает введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. Анти-IL-6 антитело может быть введено при помощи любого способа, известного из уровня техники, например, но не ограничиваясь приведенным, посредством подкожной или внутривенной инъекции. Субъект может быть человеком или нечеловеческим приматом.
[0134] В конкретном варианте исполнения, способ нейтрализации как минимум приблизительно 90% сывороточного IL-6 у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 100 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В конкретном варианте исполнения, способ нейтрализации как минимум приблизительно 90% сывороточного IL-6 у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 200 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В конкретном варианте исполнения, способ нейтрализации как минимум приблизительно 90% сывороточного IL-6 у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 400 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. В конкретном варианте исполнения, способ поддерживания как минимум 90% нейтрализации сывороточного IL-6 у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 100 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В конкретном варианте исполнения, способ поддерживания как минимум 90% нейтрализации сывороточного IL-6 у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 200 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В конкретном варианте исполнения, способ поддерживания как минимум 90% нейтрализации сывороточного IL-6 у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 400 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. В конкретном варианте исполнения, способ достижения непрерывного как минимум 90% нейтрализации сывороточного IL-6 у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 100 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В конкретном варианте исполнения, способ достижения непрерывного как минимум 90% нейтрализации сывороточного IL-6 у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 200 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В конкретном варианте исполнения, способ достижения непрерывного как минимум 90% нейтрализации сывороточного IL-6 у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 400 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. Анти-IL-6 антитело может быть введено при помощи любого способа, известного из уровня техники, но, не ограничиваясь приведенным, посредством подкожной или внутривенной инъекции. Субъект может быть человеком или нечеловеческим приматом.
[0135] В одном варианте исполнения, способ нейтрализации IL-6 у субъекта включает введение эффективной дозы анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения. Введение эффективной дозы анти-IL-6 антитела может достигать как минимум приблизительно 20%, как минимум приблизительно 30%, как минимум приблизительно 40%, как минимум приблизительно 50%, как минимум приблизительно 60%, как минимум приблизительно 70%, как минимум приблизительно 80%, как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 99%, или как минимум приблизительно 100% нейтрализации IL-6. Эффективная доза может содержать 1 мг, 5 мг, 10 мг, 25 мг, 50 мг, 75 мг, 100 мг, 150 мг, 200 мг, 250 мг, 300 мг, 400 мг или 500 мг анти IL-6 антитела, описанного в данной заявке. Нейтрализация IL-6 может продолжаться в течение как минимум приблизительно 1 дня, как минимум приблизительно 2 дней, как минимум приблизительно 3 дней, как минимум приблизительно 4 дней, как минимум приблизительно 5 дней, как минимум приблизительно 6 дней, как минимум приблизительно 7 дней, как минимум приблизительно 10 дней, как минимум приблизительно 15 дней, или как минимум приблизительно 20 дней. Субъект может быть человеком или нечеловеческим приматом. В конкретном варианте исполнения, способ нейтрализации как минимум приблизительно 90% IL-6 у субъекта включает введение эффективной дозы 1 мг, 5 мг, 10 мг, 25 мг, 50 мг, 75 мг, 100 мг, 150 мг, 200 мг, 250 мг, 300 мг, 400 мг или 500 мг анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения, где как минимум 90% нейтрализации IL-6 продолжается в течение как минимум приблизительно 1 дня, как минимум приблизительно 2 дней, как минимум приблизительно 3 дней, как минимум приблизительно 4 дней, как минимум приблизительно 5 дней, как минимум приблизительно 6 дней, как минимум приблизительно 7 дней, как минимум приблизительно 10 дней, как минимум приблизительно 15 дней, или как минимум приблизительно 20 дней.
[0136] В одном варианте исполнения, способ нейтрализации IL-6 у субъекта включает введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения. Введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела может достигать как минимум приблизительно 20%, как минимум приблизительно 30%, как минимум приблизительно 40%, как минимум приблизительно 50%, как минимум приблизительно 60%, как минимум приблизительно 70%, как минимум приблизительно 80%, как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 99%, или как минимум приблизительно 100% нейтрализации IL-6. В одном варианте исполнения, способ поддерживания IL-6 нейтрализации у субъекта включает введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения. Введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела может поддерживать как минимум приблизительно 20%, как минимум приблизительно 30%, как минимум приблизительно 40%, как минимум приблизительно 50%, как минимум приблизительно 60%, как минимум приблизительно 70%, как минимум приблизительно 80%, как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 99%, или как минимум приблизительно 100% нейтрализации IL-6. В одном варианте исполнения, способ достижения непрерывной нейтрализации IL-6 у субъекта включает введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения. Введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела может достигать непрерывной как минимум приблизительно 20%, как минимум приблизительно 30%, как минимум приблизительно 40%, как минимум приблизительно 50%, как минимум приблизительно 60%, как минимум приблизительно 70%, как минимум приблизительно 80%, как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 99%, или как минимум приблизительно 100% нейтрализации IL-6. В одном варианте исполнения, каждая более чем из одной дозы содержит то же самое количество анти-IL-6 антитела. Разовая доза может содержать 1 мг, 5 мг, 10 мг, 25 мг, 50 мг, 75 мг, 100 мг, 150 мг, 200 мг, 250 мг, 300 мг, 400 мг или 500 мг анти IL-6 антитела, описанного в данной заявке. В другом варианте исполнения, за начальной дозой нагрузки следуют последующие поддерживающие дозы. Начальная доза нагрузки может содержать в два, 3 раза, 4 раза, 5 раз, или 10 раз больше анти-IL-6 антитела, чем поддерживающие дозы. В одном варианте исполнения, временной интервал, разделяющий дозы, является постоянным. Дозы анти-IL-6 антитела могут быть введены один раз в неделю, один раз в две недели, один раз в три недели, один раз в четыре недели, один раз в восемь недель или один раз в двенадцать недель. Анти-IL-6 антитело может быть введено при помощи любого способа, известного из уровня техники, но, не ограничиваясь приведенным, посредством подкожной или внутривенной инъекции. Субъект может быть человеком или нечеловеческим приматом.
[0137] В конкретном варианте исполнения, способ нейтрализации как минимум приблизительно 90% IL-6 у субъекта включает введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В конкретном варианте исполнения, способ нейтрализации как минимум приблизительно 90% IL-6 у субъекта включает введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В конкретном варианте исполнения, способ нейтрализации как минимум приблизительно 90% IL-6 у субъекта включает введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. В конкретном варианте исполнения, способ поддерживания как минимум 90% нейтрализации IL-6 у субъекта включает введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В конкретном варианте исполнения, способ поддерживания как минимум 90% нейтрализации IL-6 у субъекта включает введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В конкретном варианте исполнения, способ поддерживания как минимум 90% нейтрализации IL-6 у субъекта включает введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. В конкретном варианте исполнения, способ достижения непрерывный как минимум 90% нейтрализации IL-6 у субъекта включает введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В конкретном варианте исполнения, способ достижения непрерывной как минимум 90% нейтрализации IL-6 у субъекта включает введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В конкретном варианте исполнения, способ достижения непрерывной как минимум 90% нейтрализации IL-6 у субъекта включает введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. Анти-IL-6 антитело может быть введено при помощи любого способа, известного из уровня техники, но, не ограничиваясь приведенным, посредством подкожной или внутривенной инъекции. Субъект может быть человеком или нечеловеческим приматом.
[0138] В конкретном варианте исполнения, способ нейтрализации как минимум приблизительно 90% IL-6 у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 100 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В конкретном варианте исполнения, способ нейтрализации как минимум приблизительно 90% IL-6 у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 200 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В конкретном варианте исполнения, способ нейтрализации как минимум приблизительно 90% IL-6 у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 400 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. В конкретном варианте исполнения, способ поддерживания как минимум 90% нейтрализации IL-6 у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 100 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В конкретном варианте исполнения, способ поддерживания как минимум 90% нейтрализации IL-6 у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 200 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В конкретном варианте исполнения, способ поддерживания как минимум 90% нейтрализации IL-6 у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 400 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. В конкретном варианте исполнения, способ достижения непрерывной как минимум 90% нейтрализации IL-6 у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 100 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В конкретном варианте исполнения, способ достижения непрерывной как минимум 90% нейтрализации IL-6 у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 200 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В конкретном варианте исполнения, способ достижения непрерывной как минимум 90% нейтрализации IL-6 у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 400 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. Анти-IL-6 антитело может быть введено при помощи любого способа, известного из уровня техники, но, не ограничиваясь приведенным, посредством подкожной или внутривенной инъекции. Субъект может быть человеком или нечеловеческим приматом.
[0139] В одном варианте исполнения, способ ингибирования IL-6 опосредованной сигнализации у субъекта включает введение эффективной дозы анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения. Введение эффективной дозы анти-IL-6 антитела может достигать как минимум приблизительно 20%, как минимум приблизительно 30%, как минимум приблизительно 40%, как минимум приблизительно 50%, как минимум приблизительно 60%, как минимум приблизительно 70%, как минимум приблизительно 80%, как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 99%, или как минимум приблизительно 100% ингибирования IL-6 опосредованной сигнализации. Эффективная доза может содержать 1 мг, 5 мг, 10 мг, 25 мг, 50 мг, 75 мг, 100 мг, 150 мг, 200 мг, 250 мг, 300 мг, 400 мг или 500 мг анти IL-6 антитела, описанного в данной заявке. Ингибирование IL-6 опосредованной сигнализации может продолжаться в течение как минимум приблизительно 1 дня, как минимум приблизительно 2 дней, как минимум приблизительно 3 дней, как минимум приблизительно 4 дней, как минимум приблизительно 5 дней, как минимум приблизительно 6 дней, как минимум приблизительно 7 дней, как минимум приблизительно 10 дней, как минимум приблизительно 15 дней, или как минимум приблизительно 20 дней. Субъект может быть человеком или нечеловеческим приматом. В конкретном варианте исполнения, способ ингибирования как минимум приблизительно 90% IL-6 опосредованной сигнализации у субъекта включает введение эффективной дозы 1 мг, 5 мг, 10 мг, 25 мг, 50 мг, 75 мг, 100 мг, 150 мг, 200 мг, 250 мг, 300 мг, 400 мг или 500 мг анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения, где как минимум 90% ингибирование IL-6 опосредованной сигнализации продолжается в течение как минимум приблизительно 1 дня, как минимум приблизительно 2 дней, как минимум приблизительно 3 дней, как минимум приблизительно 4 дней, как минимум приблизительно 5 дней, как минимум приблизительно 6 дней, как минимум приблизительно 7 дней, как минимум приблизительно 10 дней, как минимум приблизительно 15 дней, или как минимум приблизительно 20 дней.
[0140] В одном варианте исполнения, способ ингибирования IL-6 опосредованной сигнализации у субъекта включает введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения. Введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела может достигать как минимум приблизительно 20%, как минимум приблизительно 30%, как минимум приблизительно 40%, как минимум приблизительно 50%, как минимум приблизительно 60%, как минимум приблизительно 70%, как минимум приблизительно 80%, как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 99%, или как минимум приблизительно 100% ингибирования IL-6 опосредованной сигнализации. В одном варианте исполнения, способ поддерживания ингибирования IL-6 опосредованной сигнализации у субъекта включает введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения. Введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела может поддерживать как минимум приблизительно 20%, как минимум приблизительно 30%, как минимум приблизительно 40%, как минимум приблизительно 50%, как минимум приблизительно 60%, как минимум приблизительно 70%, как минимум приблизительно 80%, как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 99%, или как минимум приблизительно 100% ингибирования IL-6 опосредованной сигнализации. В одном варианте исполнения, способ достижения непрерывного ингибирования IL-6 опосредованной сигнализации у субъекта включает введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения. Введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела может достигать непрерывного как минимум приблизительно 20%, как минимум приблизительно 30%, как минимум приблизительно 40%, как минимум приблизительно 50%, как минимум приблизительно 60%, как минимум приблизительно 70%, как минимум приблизительно 80%, как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 99%, или как минимум приблизительно 100% ингибирования IL-6 опосредованной сигнализации. В одном варианте исполнения, каждая более чем из одной дозы содержит то же самое количество анти-IL-6 антитела. Разовая доза может содержать 1 мг, 5 мг, 10 мг, 25 мг, 50 мг, 75 мг, 100 мг, 150 мг, 200 мг, 250 мг, 300 мг, 400 мг или 500 мг анти IL-6 антитела, описанного в данной заявке. В другом варианте исполнения, за начальной дозой нагрузки следуют последующие поддерживающие дозы. Начальная доза нагрузки может содержать в два, 3 раза, 4 раза, 5 раз, или в10 раз больше анти-IL-6 антитела, чем поддерживающие дозы. В одном варианте исполнения, временной интервал, разделяющий дозы, является постоянным. Дозы анти-IL-6 антитела могут быть введены один раз в неделю, один раз в две недели, один раз в три недели, один раз в четыре недели, один раз в восемь недель или один раз в двенадцать недель. Анти-IL-6 антитело может быть введено при помощи любого способа, известного из уровня техники, но, не ограничиваясь приведенным, посредством подкожной или внутривенной инъекции. Субъект может быть человеком или нечеловеческим приматом.
[0141] В конкретном варианте исполнения, способ ингибирования как минимум приблизительно 90% IL-6 опосредованной сигнализации у субъекта включает введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В конкретном варианте исполнения, способ ингибирования как минимум приблизительно 90% IL-6 опосредованной сигнализации у субъекта включает введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В конкретном варианте исполнения, способ ингибирования как минимум приблизительно 90% IL-6 опосредованной сигнализации у субъекта включает введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. В конкретном варианте исполнения, способ поддерживания как минимум 90% ингибирование IL-6 опосредованной сигнализации у субъекта включает введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В конкретном варианте исполнения, способ поддерживания как минимум 90% ингибирования IL-6 опосредованной сигнализации у субъекта включает введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В конкретном варианте исполнения, способ поддерживания как минимум 90% ингибирования IL-6 опосредованной сигнализации у субъекта включает введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. В конкретном варианте исполнения, способ достижения непрерывного как минимум 90% ингибирования IL-6 опосредованной сигнализации у субъекта включает введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В конкретном варианте исполнения, способ достижения непрерывного как минимум 90% ингибирования IL-6 опосредованной сигнализации у субъекта включает введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В конкретном варианте исполнения, способ достижения непрерывного как минимум 90% ингибирования IL-6 опосредованной сигнализации у субъекта включает введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. Анти-IL-6 антитело может быть введено при помощи любого способа, известного из уровня техники, но, не ограничиваясь приведенным, посредством подкожной или внутривенной инъекции. Субъект может быть человеком или нечеловеческим приматом.
[0142] В конкретном варианте исполнения, способ ингибирования как минимум приблизительно 90% IL-6 опосредованной сигнализации у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 100 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В конкретном варианте исполнения, способ ингибирования как минимум приблизительно 90% IL-6 опосредованной сигнализации у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 200 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В конкретном варианте исполнения, способ ингибирования как минимум приблизительно 90% IL-6 опосредованной сигнализации у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 400 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. В конкретном варианте исполнения, способ поддерживания как минимум 90% ингибирования IL-6 опосредованной сигнализации у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 100 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В конкретном варианте исполнения, способ поддерживания как минимум 90% ингибирования IL-6 опосредованной сигнализации у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 200 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В конкретном варианте исполнения, способ поддерживания как минимум 90% ингибирования IL-6 опосредованной сигнализации у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 400 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. В конкретном варианте исполнения, способ достижения непрерывного как минимум 90% ингибирования IL-6 опосредованной сигнализации у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 100 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В конкретном варианте исполнения, способ достижения непрерывного как минимум 90% ингибирования IL-6 опосредованной сигнализации у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 200 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В конкретном варианте исполнения, способ достижения непрерывного как минимум 90% ингибирования IL-6 опосредованной сигнализации у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 400 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. Анти-IL-6 антитело может быть введено при помощи любого способа, известного из уровня техники, но, не ограничиваясь приведенным, посредством подкожной или внутривенной инъекции. Субъект может быть человеком или нечеловеческим приматом.
[0143] В одном варианте исполнения, способ уменьшения роста синовиальных клеток у субъекта включает введение эффективной дозы анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения. Введение эффективной дозы анти-IL-6 антитела может достигать как минимум приблизительно 20%, как минимум приблизительно 30%, как минимум приблизительно 40%, как минимум приблизительно 50%, как минимум приблизительно 60%, как минимум приблизительно 70%, как минимум приблизительно 80%, как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 99%, или как минимум приблизительно 100% уменьшения роста синовиальных клеток. Эффективная доза может содержать 1 мг, 5 мг, 10 мг, 25 мг, 50 мг, 75 мг, 100 мг, 150 мг, 200 мг, 250 мг, 300 мг, 400 мг или 500 мг анти IL-6 антитела, описанного в данной заявке. Уменьшение роста синовиальных клеток может продолжаться в течение как минимум приблизительно 1 дня, как минимум приблизительно 2 дней, как минимум приблизительно 3 дней, как минимум приблизительно 4 дней, как минимум приблизительно 5 дней, как минимум приблизительно 6 дней, как минимум приблизительно 7 дней, как минимум приблизительно 10 дней, как минимум приблизительно 15 дней, или как минимум приблизительно 20 дней. Субъект может быть человеком или нечеловеческим приматом. В конкретном варианте исполнения, способ уменьшения роста синовиальных клеток на как минимум приблизительно 90% у субъекта включает введение эффективной дозы 1 мг, 5 мг, 10 мг, 25 мг, 50 мг, 75 мг, 100 мг, 150 мг, 200 мг, 250 мг, 300 мг, 400 мг или 500 мг анти-IL-6 антитело с пролонгированным периодом полувыведения, где как минимум 90% уменьшения роста синовиальных клеток продолжается в течение как минимум приблизительно 1 дня, как минимум приблизительно 2 дней, как минимум приблизительно 3 дней, как минимум приблизительно 4 дней, как минимум приблизительно 5 дней, как минимум приблизительно 6 дней, как минимум приблизительно 7 дней, как минимум приблизительно 10 дней, как минимум приблизительно 15 дней, или как минимум приблизительно 20 дней.
[0144] В одном варианте исполнения, способ уменьшения роста синовиальных клеток у субъекта включает введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения. Введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела может достигать как минимум приблизительно 20%, как минимум приблизительно 30%, как минимум приблизительно 40%, как минимум приблизительно 50%, как минимум приблизительно 60%, как минимум приблизительно 70%, как минимум приблизительно 80%, как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 99%, или как минимум приблизительно 100% уменьшения роста синовиальных клеток. В одном варианте исполнения, способ поддерживания уменьшения роста синовиальных клеток у субъекта включает введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения. Введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела может поддерживать как минимум приблизительно 20%, как минимум приблизительно 30%, как минимум приблизительно 40%, как минимум приблизительно 50%, как минимум приблизительно 60%, как минимум приблизительно 70%, как минимум приблизительно 80%, как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 99%, или как минимум приблизительно 100% уменьшения роста синовиальных клеток. В одном варианте исполнения, способ достижения непрерывного уменьшения роста синовиальных клеток у субъекта включает введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения. Введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела может достигать непрерывного как минимум приблизительно 20%, как минимум приблизительно 30%, как минимум приблизительно 40%, как минимум приблизительно 50%, как минимум приблизительно 60%, как минимум приблизительно 70%, как минимум приблизительно 80%, как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 99%, или как минимум приблизительно 100% уменьшения роста синовиальных клеток. В одном варианте исполнения, каждая более чем из одной дозы содержит то же самое количество анти-IL-6 антитела. Разовая доза может содержать 1 мг, 5 мг, 10 мг, 25 мг, 50 мг, 75 мг, 100 мг, 150 мг, 200 мг, 250 мг, 300 мг, 400 мг или 500 мг анти IL-6 антитела, описанного в данной заявке. В другом варианте исполнения, за начальной дозой нагрузки следуют последующие поддерживающие дозы. Начальная доза нагрузки может содержать в два, 3 раза, 4 раза, 5 раз, или в 10 раз больше анти-IL-6 антитела, чем поддерживающие дозы. В одном варианте исполнения, временной интервал, разделяющий дозы, является постоянным. Дозы анти-IL-6 антитела могут быть введены один раз в неделю, один раз в две недели, один раз в три недели, один раз в четыре недели, один раз в восемь недель или один раз в двенадцать недель. Анти-IL-6 антитело может быть введено при помощи любого способа, известного из уровня техники, но, не ограничиваясь приведенным, посредством подкожной или внутривенной инъекции. Субъект может быть человеком или нечеловеческим приматом.
[0145] B конкретном варианте исполнения, способ уменьшения роста синовиальных клеток на как минимум приблизительно 90% у субъекта включает введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В конкретном варианте исполнения, способ уменьшения роста синовиальных клеток на как минимум приблизительно 90% у субъекта включает введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В конкретном варианте исполнения, способ уменьшения роста синовиальных клеток на как минимум приблизительно 90% у субъекта включает введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. В конкретном варианте исполнения, способ поддерживания как минимум 90% уменьшения роста синовиальных клеток у субъекта включает введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В конкретном варианте исполнения, способ поддерживания как минимум 90% уменьшения роста синовиальных клеток у субъекта включает введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В конкретном варианте исполнения, способ поддерживания как минимум 90% уменьшения роста синовиальных клеток у субъекта включает введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. В конкретном варианте исполнения, способ достижения непрерывного как минимум 90% уменьшения роста синовиальных клеток у субъекта включает введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В конкретном варианте исполнения, способ достижения непрерывного как минимум 90% уменьшения роста синовиальных клеток у субъекта включает введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В конкретном варианте исполнения, способ достижения непрерывного как минимум 90% уменьшения роста синовиальных клеток у субъекта включает введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. Анти-IL-6 антитело может быть введено при помощи любого способа, известного из уровня техники, но, не ограничиваясь приведенным, посредством подкожной или внутривенной инъекции. Субъект может быть человеком или нечеловеческим приматом.
[0146] В конкретном варианте исполнения, способ уменьшения роста синовиальных клеток на как минимум приблизительно 90% у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 100 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В конкретном варианте исполнения, способ уменьшения роста синовиальных клеток на как минимум приблизительно 90% у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 200 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В конкретном варианте исполнения, способ уменьшения роста синовиальных клеток на как минимум приблизительно 90% у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 400 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. В конкретном варианте исполнения, способ поддерживания как минимум 90% уменьшения роста синовиальных клеток у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 100 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В конкретном варианте исполнения, способ поддерживания как минимум 90% уменьшения роста синовиальных клеток у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 200 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В конкретном варианте исполнения, способ поддерживания как минимум 90% уменьшения роста синовиальных клеток у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 400 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. В конкретном варианте исполнения, способ достижения непрерывного как минимум 90% уменьшения роста синовиальных клеток у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 100 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В конкретном варианте исполнения, способ достижения непрерывного как минимум 90% уменьшения роста синовиальных клеток у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 200 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В конкретном варианте исполнения, способ достижения непрерывного как минимум 90% уменьшения роста синовиальных клеток у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 400 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. Анти-IL-6 антитело может быть введено при помощи любого способа, известного из уровня техники, например, но не ограничиваясь приведенным, посредством подкожной или внутривенной инъекции. Субъект может быть человеком или нечеловеческим приматом.
[0147] В одном варианте исполнения, способ уменьшения синовиального воспаления у субъекта включает введение эффективной дозы анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения. Введение эффективной дозы анти-IL-6 антитела может достигать как минимум приблизительно 20%, как минимум приблизительно 30%, как минимум приблизительно 40%, как минимум приблизительно 50%, как минимум приблизительно 60%, как минимум приблизительно 70%, как минимум приблизительно 80%, как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 99%, или как минимум приблизительно 100% уменьшения синовиального воспаления. Эффективная доза может содержать 1 мг, 5 мг, 10 мг, 25 мг, 50 мг, 75 мг, 100 мг, 150 мг, 200 мг, 250 мг, 300 мг, 400 мг или 500 мг анти IL-6 антитела, описанного в данной заявке. Уменьшение синовиального воспаления может продолжаться в течение как минимум приблизительно 1 дня, как минимум приблизительно 2 дней, как минимум приблизительно 3 дней, как минимум приблизительно 4 дней, как минимум приблизительно 5 дней, как минимум приблизительно 6 дней, как минимум приблизительно 7 дней, как минимум приблизительно 10 дней, как минимум приблизительно 15 дней, или как минимум приблизительно 20 дней. Субъект может быть человеком или нечеловеческим приматом. В конкретном варианте исполнения, способ уменьшения синовиального воспаления на как минимум приблизительно 90% у субъекта включает введение эффективной дозы 1 мг, 5 мг, 10 мг, 25 мг, 50 мг, 75 мг, 100 мг, 150 мг, 200 мг, 250 мг, 300 мг, 400 мг или 500 мг анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения, где как минимум 90% уменьшения синовиального воспаления продолжается в течение как минимум приблизительно 1 дня, как минимум приблизительно 2 дней, как минимум приблизительно 3 дней, как минимум приблизительно 4 дней, как минимум приблизительно 5 дней, как минимум приблизительно 6 дней, как минимум приблизительно 7 дней, как минимум приблизительно 10 дней, как минимум приблизительно 15 дней, или как минимум приблизительно 20 дней.
[0148] В одном варианте исполнения, способ уменьшения синовиального воспаления у субъекта включает введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения. Введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела может достигать как минимум приблизительно 20%, как минимум приблизительно 30%, как минимум приблизительно 40%, как минимум приблизительно 50%, как минимум приблизительно 60%, как минимум приблизительно 70%, как минимум приблизительно 80%, как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 99%, или как минимум приблизительно 100% уменьшения синовиального воспаления. В одном варианте исполнения, способ поддерживания уменьшения синовиального воспаления у субъекта включает введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения. Введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела может поддерживать как минимум приблизительно 20%, как минимум приблизительно 30%, как минимум приблизительно 40%, как минимум приблизительно 50%, как минимум приблизительно 60%, как минимум приблизительно 70%, как минимум приблизительно 80%, как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 99%, или как минимум приблизительно 100% уменьшения синовиального воспаления. В одном варианте исполнения, способ достижения непрерывного уменьшения синовиального воспаления у субъекта включает введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения. Введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела может достигать непрерывного как минимум приблизительно 20%, как минимум приблизительно 30%, как минимум приблизительно 40%, как минимум приблизительно 50%, как минимум приблизительно 60%, как минимум приблизительно 70%, как минимум приблизительно 80%, как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 99%, или как минимум приблизительно 100% уменьшения синовиального воспаления. В одном варианте исполнения, каждая более чем из одной дозы содержит то же самое количество анти-IL-6 антитела. Разовая доза может содержать 1 мг, 5 мг, 10 мг, 25 мг, 50 мг, 75 мг, 100 мг, 150 мг, 200 мг, 250 мг, 300 мг, 400 мг или 500 мг анти IL-6 антитела, описанного в данной заявке. В другом варианте исполнения, за начальной дозой нагрузки следуют последующие поддерживающие дозы. Начальная доза нагрузки может содержать в два, 3 раза, 4 раз, 5 раз, или 10 раз больше анти-IL-6 антитела, чем поддерживающие дозы. В одном варианте исполнения, временной интервал, разделяющий дозы, является постоянным. Дозы анти-IL-6 антитела могут быть введены один раз в неделю, один раз в две недели, один раз в три недели, один раз в четыре недели, один раз в восемь недель или один раз в двенадцать недель. Анти-IL-6 антитело может быть введено при помощи любого способа, известного из уровня техники, но, не ограничиваясь приведенным, посредством подкожной или внутривенной инъекции. Субъект может быть человеком или нечеловеческим приматом.
[0149] В конкретном варианте исполнения, способ уменьшения синовиального воспаления на как минимум приблизительно 90% у субъекта включает введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В конкретном варианте исполнения, способ уменьшения синовиального воспаления на как минимум приблизительно 90% у субъекта включает введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В конкретном варианте исполнения, способ уменьшения синовиального воспаления на как минимум приблизительно 90% у субъекта включает введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. В конкретном варианте исполнения, способ поддерживания как минимум 90% уменьшения синовиального воспаления у субъекта включает введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В конкретном варианте исполнения, способ поддерживания как минимум 90% уменьшения синовиального воспаления у субъекта включает введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В конкретном варианте исполнения, способ поддерживания как минимум 90% уменьшения синовиального воспаления у субъекта включает введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. В конкретном варианте исполнения, способ достижения непрерывного как минимум 90% уменьшения синовиального воспаления у субъекта включает введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В конкретном варианте исполнения, способ достижения непрерывного как минимум 90% уменьшения синовиального воспаления у субъекта включает введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В конкретном варианте исполнения, способ достижения непрерывного как минимум 90% уменьшения синовиального воспаления у субъекта включает введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. Анти-IL-6 антитело может быть введено при помощи любого способа, известного из уровня техники, но, не ограничиваясь приведенным, посредством подкожной или внутривенной инъекции. Субъект может быть человеком или нечеловеческим приматом.
[0150] В конкретном варианте исполнения, способ уменьшения синовиального воспаления на как минимум приблизительно 90% у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 100 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В конкретном варианте исполнения, способ уменьшения синовиального воспаления на как минимум приблизительно 90% у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 200 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В конкретном варианте исполнения, способ уменьшения синовиального воспаления на как минимум приблизительно 90% у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 400 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. В конкретном варианте исполнения, способ поддерживания как минимум 90% уменьшения синовиального воспаления у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 100 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В конкретном варианте исполнения, способ поддерживания как минимум 90% уменьшения синовиального воспаления у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 200 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В конкретном варианте исполнения, способ поддерживания как минимум 90% уменьшения синовиального воспаления у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 400 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. В конкретном варианте исполнения, способ достижения непрерывного как минимум 90% уменьшения синовиального воспаления у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 100 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В конкретном варианте исполнения, способ достижения непрерывного как минимум 90% уменьшения синовиального воспаления у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 200 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В конкретном варианте исполнения, способ достижения непрерывного как минимум 90% уменьшения синовиального воспаления у субъекта включает (а) введение дозы нагрузки 400 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. Анти-IL-6 антитело может быть введено при помощи любого способа, известного из уровня техники, но, не ограничиваясь приведенным, посредством подкожной или внутривенной инъекции. Субъект может быть человеком или нечеловеческим приматом.
[0151] Дополнительные аспекты данного изобретения обеспечивают композиции, содержащие агенты связывания в соответствии с данным изобретением, и их применение в способах связывания, ингибирования и/или нейтрализации IL-6, включая способы лечения человеческого или животного организма при помощи терапии.
[0152] Агенты связывания в соответствии с данным изобретением могут быть использованы в способе лечения или диагностики, таких способов лечения (что может включать профилактическое лечение) заболевания или расстройства человеческого или животного организма (например, у человеческого пациента), которые включают введение указанному пациенту эффективное количество агента связывания в соответствии с данным изобретением. Состояния, которые поддаются лечению в соответствии с данным изобретением, включают любые состояния, в которых задействовано IL-6, как подробно описано по всей данной заявке.
[0153] В одном варианте исполнения, способ лечения человека, который нуждается в этом, включает введение терапевтически эффективной дозы анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения. В одном варианте исполнения, способ лечения ревматоидного артрита, ювенильного хронического артрита, ювенильного идиопатического артрита с системным началом, серонегативных спондилоартропатий (включая анкилозирующий спондилит, псориатический артрит и триаду Рейтера) псориаз или СКВ у человека включает введение терапевтически эффективной дозы анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения. В конкретном варианте исполнения, способ лечения ревматоидного артрита у человека включает введение терапевтически эффективной дозы анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения. В конкретном варианте исполнения, способу лечения воспалительного заболевания кишечника или СКВ у человека включает введение терапевтически эффективной дозы анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения. В одном варианте исполнения, терапевтически эффективная доза может содержать 1 мг, 5 мг, 10 мг, 25 мг, 50 мг, 75 мг, 100 мг, 150 мг, 200 мг, 250 мг, 300 мг, 400 мг или 500 мг анти IL-6 антитела, описанного в данной заявке. В одном варианте исполнения, терапевтически эффективная доза может содержать приблизительно 0,1-5 мг/кг, приблизительно 0,1-2 мг/кг, приблизительно 0,1-1 мг/кг, приблизительно 0,3-2 мг/кг, приблизительно 0,3-1 мг/кг, приблизительно 0,5-2 мг/кг, или приблизительно 0,5-1 мг/кг анти-IL-6 антитела. В другом варианте исполнения, терапевтически эффективная доза может содержать приблизительно 20-500 мг, приблизительно 20-200 мг, приблизительно 20-100 мг, приблизительно 50-500 мг, приблизительно 50-200 мг, или приблизительно 50-100 мг анти-IL-6 антитела. Анти-IL-6 антитело может быть введено при помощи любого способа, известного из уровня техники, но, не ограничиваясь приведенным, посредством подкожной или внутривенной инъекции. В конкретном варианте исполнения, способ лечения ревматоидного артрита, воспалительного заболевания кишечника или СКВ у человека включает введение 1 мг, 5 мг, 10 мг, 25 мг, 50 мг, 75 мг, 100 мг, 150 мг, 200 мг, 250 мг, 300 мг, 400 мг или 500 мг анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения. В конкретном варианте исполнения, способ лечения ревматоидного артрита, воспалительного заболевания кишечника или СКВ у человека включает введение приблизительно 0,1-5 мг/кг, приблизительно 0,1-2 мг/кг, приблизительно 0,1-1 мг/кг, приблизительно 0,3-2 мг/кг, приблизительно 0,3-1 мг/кг, приблизительно 0,5-2 мг/кг, или приблизительно 0,5-1 мг/кг анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения. В конкретном варианте исполнения, способ лечения ревматоидного артрита, воспалительного заболевания кишечника или СКВ у человека включает введение приблизительно 20-500 мг, приблизительно 20-200 мг, приблизительно 20-100 мг, приблизительно 50-500 мг, приблизительно 50-200 мг, или приблизительно 50-100 мг анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения.
[0154] В одном варианте исполнения, способ лечения человека, который нуждается в этом, включает введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения. В одном варианте исполнения, способ лечения ревматоидного артрита, ювенильного хронического артрита, ювенильного идиопатического артрита с системным началом, серонегативных спондилоартропатий (включая анкилозирующий спондилит, псориатический артрит и триаду Рейтера), псориаз или СКВ у человека включает введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения. В конкретном варианте исполнения, способ лечения ревматоидного артрита, воспалительного заболевания кишечника или СКВ у человека включает введение более чем одной дозы анти-IL-6 антитела с пролонгированным периодом полувыведения. В одном варианте исполнения, каждая более чем из одной дозы содержит то же самое количество анти-IL-6 антитела. В одном варианте исполнения, разовая доза может содержать 1 мг, 5 мг, 10 мг, 25 мг, 50 мг, 75 мг, 100 мг, 150 мг, 200 мг, 250 мг, 300 мг, 400 мг или 500 мг анти IL-6 антитела, описанного в данной заявке. В одном варианте исполнения, разовая доза может содержать приблизительно 0,1-5 мг/кг, приблизительно 0,1-2 мг/кг, приблизительно 0,1-1 мг/кг, приблизительно 0,3-2 мг/кг, приблизительно 0,3-1 мг/кг, приблизительно 0,5-2 мг/кг, или приблизительно 0,5-1 мг/кг анти-IL-6 антитела. В другом варианте исполнения, разовая доза может содержать приблизительно 20-500 мг, приблизительно 20-200 мг, приблизительно 20-100 мг, приблизительно 50-500 мг, приблизительно 50-200 мг, или приблизительно 50-100 мг анти-IL-6 антитела. В одном варианте исполнения, каждая из более чем одной дозы содержит то же самое количество анти-IL-6 антитела. В одном варианте исполнения, за начальной дозой нагрузки следуют последующие поддерживающие дозы. В одном варианте исполнения, начальная доза нагрузки может содержать в два, 3 раза, 4 раза, 5 раз, или в 10 раз больше анти-IL-6 антитела, чем поддерживающие дозы. В одном варианте исполнения, доза нагрузки может содержать 1 мг, 5 мг, 10 мг, 25 мг, 50 мг, 75 мг, 100 мг, 150 мг, 200 мг, 250 мг, 300 мг, 400 мг или 500 мг анти IL-6 антитела, описанного в данной заявке. В одном варианте исполнения, доза нагрузки может содержать приблизительно 0,1-5 мг/кг, приблизительно 0,1-2 мг/кг, приблизительно 0,1-1 мг/кг, приблизительно 0,3-2 мг/кг, приблизительно 0,3-1 мг/кг, приблизительно 0,5-2 мг/кг, или приблизительно 0,5-1 мг/кг анти-IL-6 антитела. В другом варианте исполнения, доза нагрузки может содержать приблизительно 20-500 мг, приблизительно 20-200 мг, приблизительно 20-100 мг, приблизительно 50-500 мг, приблизительно 50-200 мг, или приблизительно 50-100 мг анти-IL-6 антитела. В одном варианте исполнения, временной интервал, разделяющий введение доз, является постоянным. Дозы анти-IL-6 антитела могут быть введены один раз в неделю, один раз в две недели, один раз в три недели, один раз в четыре недели, один раз каждые восемь недель, один раз в двенадцать недель, один раз каждые шестнадцать недель или один раз каждые шесть месяцев. Анти-IL-6 антитело может быть введено при помощи любого способа, известного из уровня техники, но, не ограничиваясь приведенным, посредством подкожной или внутривенной инъекции.
[0155] В одном варианте исполнения, способ лечения человека, который нуждается в этом, включает введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В одном варианте исполнения, способ лечения человека, который нуждается в этом, включает введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В одном варианте исполнения, способ лечения человека, который нуждается в этом, включает введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. В одном варианте исполнения, способ лечения человека, который нуждается в этом, включает (а) введение дозы нагрузки 100 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В одном варианте исполнения, способ лечения человека, который нуждается в этом, включает (а) введение дозы нагрузки 200 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В одном варианте исполнения, способ лечения человека, который нуждается в этом, включает (а) введение дозы нагрузки 400 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель.
[0156] В одном варианте исполнения, способ лечения ревматоидного артрита, ювенильного хронического артрита, ювенильного идиопатического артрита с системным началом, серонегативных спондилоартропатий (включая анкилозирующий спондилит, псориатический артрит и триаду Рейтера), псориаз или СКВ включает введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В одном варианте исполнения, способ лечения ревматоидного артрита, ювенильного хронического артрита, ювенильного идиопатического артрита с системным началом, серонегативных спондилоартропатий (включая анкилозирующий спондилит, псориатический артрит и триаду Рейтера), псориаз или СКВ включает введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В одном варианте исполнения, способ лечения ревматоидного артрита, ювенильного хронического артрита, ювенильного идиопатического артрита с системным началом, серонегативных спондилоартропатий (включая анкилозирующий спондилит, псориатический артрит и триаду Рейтера), псориаз или СКВ включает введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. В одном варианте исполнения, способ лечения ревматоидного артрита, ювенильного хронического артрита, ювенильного идиопатического артрита с системным началом, серонегативных спондилоартропатий (включая анкилозирующий спондилит, псориатический артрит и триаду Рейтера), псориаз или СКВ включает (а) введение дозы нагрузки 100 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В одном варианте исполнения, способ лечения ревматоидного артрита, ювенильного хронического артрита, ювенильного идиопатического артрита с системным началом, серонегативных спондилоартропатий (включая анкилозирующий спондилит, псориатический артрит и триаду Рейтера), псориаз или СКВ включает (а) введение дозы нагрузки 200 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В одном варианте исполнения, способ лечения ревматоидного артрита, ювенильного хронического артрита, ювенильного идиопатического артрита с системным началом, серонегативных спондилоартропатий (включая анкилозирующий спондилит, псориатический артрит и триаду Рейтера), псориаз или СКВ включает (а) введение дозы нагрузки 400 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель.
[0157] В одном варианте исполнения, способ лечения ревматоидного артрита, воспалительного заболевания кишечника или СКВ у человека включает введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В одном варианте исполнения, способ лечения ревматоидного артрита, воспалительного заболевания кишечника или СКВ у человека включает введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В одном варианте исполнения, способ лечения ревматоидного артрита, воспалительного заболевания кишечника или СКВ у человека включает введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель. В одном варианте исполнения, способ лечения ревматоидного артрита, воспалительного заболевания кишечника или СКВ у человека включает (а) введение дозы нагрузки 100 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 50 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 4 недели. В одном варианте исполнения, способ лечения ревматоидного артрита, воспалительного заболевания кишечника или СКВ у человека включает (а) введение дозы нагрузки 200 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 100 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 8 недель. В одном варианте исполнения, способ лечения ревматоидного артрита, воспалительного заболевания кишечника или СКВ у человека включает (а) введение дозы нагрузки 400 мг анти-IL-6 антитела и (b) введение 200 мг дозы анти-IL-6 антитела каждые 12 недель.
Анти-IL-6 антитела
[0158] Агент связывания в соответствии с данным изобретением, как было показано, нейтрализует IL-6 с высокой эффективностью. Нейтрализация означает ингибирование биологической активности IL-6. Агент связывания в соответствии с данным изобретением может нейтрализовать одну или более активностей IL-6. Ингибированная биологическая активность является типично IL-6 связыванием с одним или более его партнерами связывания. Например, ингибированная биологическая активность может быть связыванием IL-6 с трансмембранным и/или растворимым IL-6Rα. Это может быть продемонстрировано в следующих анализах, которые кратко описаны в данном разделе и более подробно ниже: Анализ TF-1 демонстрирует, что агент связывания в соответствии с данным изобретением ингибирует IL-6 связывание с мембраной IL-6Ra, поскольку TF-1 клетки не продуцируют растворимое IL-6Ra. Как таковые, агенты связывания в соответствии с данным изобретением, поэтому ингибируют IL-6 связывание с мембранным рецептором. В анализе синовиальных фибробластов, агенты связывания в соответствии с данным изобретением ингибируют IL-6 связывание с растворимым IL-6Ra, поскольку sIL-6Ra необходимо добавлять в анализ для того, чтобы он работал. Добавленный IL-1бета индуцирует продуцирование эндогенного IL-6, который ингибируется агентом связывания в соответствии с данным изобретением и предотвращает продуцирование фактора роста эндотелия сосудов.
[0159] В соответствии с данным изобретением, связывание человеческого или нечеловеческого приматного, например, яванской макаки, IL-6 с IL-6Rα может быть ингибировано, например, агент связывания может ингибировать связывание зрелого человеческого IL-6 с IL-6Rα.
[0160] Ингибирование биологической активности может быть частичным или полным. Агент связывания может ингибировать IL-6 биологическую активность на 100%, или как минимум 95%, как минимум 90%, как минимум 85%, как минимум 80%, как минимум 75%, как минимум 70%, как минимум 60%, или как минимум 50% активности в отсутствие агента связывания.
[0161] Эффективность нейтрализации агента связывания может быть определена. Эффективность обычно выражают как значение IC50, в нМ, если не указано иное. В функциональных анализах, IC50 представляет собой концентрацию агента связывания, которая уменьшает биологический ответ на 50% от его максимума. В исследованиях лигандного связывания, IC50 представляет собой концентрацию, которая уменьшает образование комплекса лиганд-рецептор на 50% максимального уровня специфичного связывания. IC50 может быть рассчитан путем нанесения на график % максимального биологического ответа как функции логарифма концентрации агента связывания и при помощи программного обеспечения, такого, как Prism (GraphPad) или Origin (Origin Labs) для подгонки сигмоидальной функции данных с получением значений IC50. Эффективность может быть определена или измерена при помощи одного или более анализов, известных специалисту в данной области и/или как описано или указано в данной заявке.
[0162] Нейтрализация IL-6 активности агентом связывания в анализе, описанном в данной заявке, например, анализе пролиферации TF-1 или других клеточных анализах, описанных ниже, указывает на то, что агент связывания связывается и нейтрализует IL-6. Другие способы, которые могут быть использованы для определения связывания агента связывания с IL-6, включают ELISA, Вестерн блоттинг, иммуноосаждение, аффинную хроматографию и биохимические анализы.
[0163] Агенты связывания, описанные в данной заявке, были продемонстрированы как связывающие и нейтрализующие биологические эффекты эндогенного человеческого IL-6, как показано в анализе, ингибирования высвобождающих факторы роста эндотелия сосудов из человеческих синовиальных фибробластов, в ответ на эндогенное человеческое IL-6, о чем сообщено в Примерах 1,7 и 2,7 в данной заявке. В данном анализе, синовиальные фибробласты от пациентов с ревматоидным артритом продуцируют IL-6 в ответ на стимуляцию и IL-1β и растворимым IL-6Rα, приводя к IL-6 индуцированной экскреции фактора роста эндотелия сосудов. IL-6 продуцированное человеческими синовиальными фибробластами, таким образом, представляет собой эндогенное человеческое IL-6. Эндогенное IL-6 является молекулярной мишенью для медицинского лечения у людей, таким образом, нейтрализация эндогенного IL-6 является важным индикатором терапевтического потенциала агентов связывания. Поскольку анализы были проведены с синовиальными фибробластами, полученными от пациентов с ревматоидным артритом, результаты являются особенно релевантными для использования в качестве агентов связывания для лечения ревматоидного артрита. Эффективность нейтрализации оптимизированных молекул антитела анализировали в анализе высвобождения фактора роста эндотелия сосудов, превышающей эффективность нейтрализации известного анти Il-6 антитела CNTO-328.
[0164] Агент связывания в соответствии с данным изобретением может иметь IC50 менее, чем 50 нМ, например, менее, чем 5 нМ, например, менее, чем 1 нМ в анализе ингибирования фактора роста эндотелия сосудов, высвобожденных из человеческих синовиальных фибробластов, стимулированных 0,6 пМ человеческим IL-1β и 2,4 нМ растворимым человеческим IL-6Rα.
[0165] Как известно, эндогенный IL-6 является смесью гликозилированных и негликозилированных форм. Связывающие агента связывания в соответствии с данным изобретением с эндогенным IL-6 были продемонстрированы в анализе синовиальных фибробластов, в котором используют IL-6 из человеческих синовиальных фибробластов, т.е. эндогенное IL-6.
[0166] Агент связывания в соответствии с данным изобретением может ингибировать IL-6 индуцированную пролиферацию TF-1 клетки. TF-1 является человеческой премиелоидной клеточной линией, установленной от пациента с эритролейкемией (Kitamura et al. 1989). TF-1 клеточная линия требует присутствия фактора роста для выживания и пролиферации. Индивидуальные факторы роста TF-1 клетки, которые могут отвечать, включают IL-6, ГМКСФ и онкостатин М. Агент связывания в соответствии с данным изобретением может иметь IC50 менее, чем 100 нМ, например, менее, чем 20 нМ, 10 нМ или 1 нМ, например, менее, чем 100 пМ, 70 пМ, 50 пМ, 40 пМ, 30 пМ, 20 пМ или 10 пМ, в анализе ингибирования пролиферации TF-1 клетки в ответ на 20 пМ человеческое IL-6. Как описано в данной заявке (см. Примеры 1,5), родительское IgG "CAN022D10" было показано как имеющее IC50 в анализе пролиферации TF-1, составляющее приблизительно 93 нМ, и мы затем сгенерировали оптимизированные варианты CAN022D10, имеющие в существенной степени повышенную эффективность (IC50 в общем менее, чем 100 пМ), как показано в Примерах 2,2, 2,5 и 2,6 (Таблицы 3, 4 и 5, соответственно). В особенности, IC50 значения для некоторых оптимизированных клонов, как измеряли, 5 пМ или менее, например для зародышевых IgG Антитела 7, Антитела 17 и Антитела 18, представляя собой чрезвычайно высокую эффективность нейтрализации данных антител.
[0167] Агент связывания в соответствии с данным изобретением может ингибировать IL-6 вызванную пролиферацию В9 клетки. В9 клетки являются субклоном мышиной В-клеточной гибридомной клеточной линии, В13,29, выбранной исходя из их специфичного ответа на IL-6. В9 клетки требуют IL-6 для выживания и пролиферации и отвечают на очень низкие концентрации IL-6. Как таковая, пролиферация данных клеток в присутствии IL-6 антитела может быть оценена и определена аффинность антитела. Пример 2,10 в данной заявке демонстрирует, что Антитело 18 ингибировало клеточную В9 клеточную пролиферацию в ответ на IL-6, и демонстрировали высокую аффинность в данном анализе.
[0168] Продуцирование ауто-антител при ревматоидном артрите по большей части производится IgM классом. SKW6,4 является клональным IgM экскретирующей человеческой лимфобластоидной В клеточной линией. После стимуляции IL-6 данные клетки экскретируют IgM, таким образом, данный анализ рассматривали как релевантный при ревматоидном артрите. SKW6,4 клетки могут быть использованы в анализе для определения эффективности связывания компонентов в течение нейтрализации IL-6, путем определения ингибирования IgM экскреции в ответ на IL-6. Агент связывания в соответствии с данным изобретением может иметь IC50 менее, чем 10 пМ, например, менее, чем 5 пМ, в SKW6,4 клеточном анализе ингибирования IgM экскреции в ответ на 100 пМ человеческого IL-6. Антитело 18, как было показано, нейтрализует действие IL-6 в данном анализе - см. Пример 2,11 (Таблица 9).
[0169] Данное изобретение представляет высокоаффинные агенты связывания для человеческого IL-6. Высокая аффинность IL-6 из яванских макак также была продемонстрирована. Агент связывания в соответствии с данным изобретением может связывать человеческое IL-6 и/или IL-6 яванских макак с KD не более чем 1 нМ, например, не более чем 100 пМ, 50 пМ, 30 пМ или 10 пМ. KD может быть определено при помощи поверхностного плазмонного резонанса, например, BIAcore®. BIAcore® измерения аффинности описаны в данной заявке в Примере 2,9. Следует отметить, что аффинность антитела 7 и 18, как было найдено, находится вне пределов, измеримых с использованием устройства BIAcore®, что указывает на значение KD менее 10 пМ.
[0170] Как указано во всей данной заявке, поверхностный плазмонный резонанс включает пропускание аналита в жидкой фазе над лигандом, присоединенным к подложке, и определение связывания аналита и лиганда. Может быть, например, выполнен поверхностный плазмонный резонанс, где IL-6 пропускают в жидкой фазе над агентом связывания, присоединенным к подложке. Данные поверхностного плазмонного резонанса могут быть подогнаны к модели данных моновалентного аналита. Константа аффинности Kd может быть рассчитана из соотношения констант kd/ka, как определено при помощи поверхностного плазмонного резонанса при помощи модели данных моновалентного аналита.
[0171] Аффинность агента связывания для IL-6 может быть альтернативно рассчитана при помощи анализа по Шильд, например, исходя из анализа ингибирования TF-1 клеточной пролиферации в ответ на различные концентрации человеческого IL-6. Агент связывания в соответствии с данным изобретением может иметь аффинность менее чем 10 пМ, например, менее чем 1 пМ, как рассчитано при помощи анализа по Шильд. Как сообщено в Примере 2,10 в данной заявке, аффинность Антитела 18 для человеческого IL-6 была рассчитана как 0,4 пМ с использованием анализа по Шильд.
[0172] Агент связывания в соответствии с данным изобретением может необязательно не реагировать перекрестно с одним или более, или со всеми, из следующих: фактор ингибирования лейкемии (ФИЛ), цилиарный нейротрофический фактор (ЦНТФ), IL-11 или онкостатин М.
[0173] Агент связывания в соответствии с данным изобретением может необязательно не реагировать перекрестно с крысиным IL-6, мышиным IL-6 и/или собачим IL-6.
[0174] Перекрестная реактивность агентов связывания для связывания других белков или нечеловеческого IL-6 может быть проанализирована, например, при помощи анализа флуоресценции с временным разрешением для ингибирования связывания человеческого IL-6 с агентом связывания, иммобилизированным на подложке, таким, как анализ конкурирования эпитопов DELFIA®, как описано в Примере 1,6. Например, любой или все из ФИЛ, ЦНТФ, IL-11, онкостатина М, крысиного IL-6 и мышиного IL-6 может проявлять не менее чем 50% ингибирования, или может иметь IC50 более 0,5 мМ или более 1 мМ в анализе флуоресценции с временным разрешением для ингибирования и связывания меченого человеческого IL-6 с агентом связывания, иммобилизированном на подложке. Например, любой или все из ФИЛ, ЦНТФ, IL-11, онкостатина М, крысиного IL-6 и мышиного IL-6 может не проявлять ингибирования или может иметь IC50 в как минимум 10- или 100-раза более чем немеченый человеческий IL-6 в анализе флуоресценции с временным разрешением для анализа перекрестной реактивности. В данном анализе, меченое зрелое человеческое IL-6 дикого типа используют при конечной концентрации Kd его взаимодействия с агентом связывания.
[0175] Агент связывания в соответствии с данным изобретением может перекрестно реагировать с IL-6 яванских макак. Перекрестная реактивность может быть определена как ингибирование связывания меченого человеческого IL-6 с агентом связывания, иммобилизированного на подложке в анализе флуоресценции с временным разрешением, описанном выше. Например, IL-6 яванских макак может иметь IC50 менее чем 5 нМ, например, менее чем 2,5 нМ, например, приблизительно 1 нМ, в данном анализе флуоресценции с временным разрешением. IL-6 яванских макак может иметь IC50 менее чем в 10 раз отличное, например, менее чем в 5 раз отличное, от IC50 немеченого человеческого IL-6 в данном анализе.
[0176] В одном варианте исполнения, анти-IL-6 антитело связывает эпитоп на IL-6, который является консервированным человеческим и IL-6 яванских макак последовательности, и отличается от мышиной, крысиной и собачей IL-6 последовательности по сравнению с человеческой последовательностью.
[0177] В одном варианте исполнения, агент связывания связывает участок "сайта 1" IL-6, который представляет собой участок, который взаимодействует с IL-6Rα. Агент связывания в соответствии с данным изобретением может таким образом конкурентно ингибировать IL-6 связывание с IL-6Rα, таким образом нейтрализуя биологический эффект IL-6, которой опосредован через IL-6Rα.
[0178] Агент связывания в соответствии с данным изобретением может связывать человеческое IL-6 при рНе102 и/или Ser204. Агент связывания в соответствии с данным изобретением может также связывать человеческое IL-6 при Arg207. Необязательно агент связывания может связывать боковые остатки или структурно соседние остатки в молекуле IL-6, в дополнение связывания Phe102 и/или Ser 204. По договоренности, нумерация остатков соответствует полноразмерному человеческому IL-6 (SEQ ID NO: 15). Однако связывание может быть определено при помощи зрелого человеческого IL-6. Связывание с IL-6 остатками определяется сайт-направленным мутагенезом, как объяснено ниже.
[0179] Мутагенез одинарных аминокислот участков белков для корреляции структуры с активностью хорошо известен специалисту в данной области и был использован для определения участков белка, которые связывают антитела (Lu et al., (2005) Biochemistry 44:11106-14). Связывание и/или нейтрализация мутантного человеческого IL-6 могут быть использованы для оценки того, связывает ли агент связывания Phe102, Ser204 и/или Arg207. Отсутствие связывания или нейтрализации, или значительно уменьшенное связывание или нейтрализация, с мутантным IL-6 по сравнению с диким типом указывает на то, что агент связывания связывается с мутировавшим остатком.
[0180] Связывание с остатком в IL-6 может быть определено при помощи IL-6, мутировавшего в выбранном остатке в анализе флуоресценции с временным разрешением ингибирования связывания меченого человеческого IL-6 дикого типа с агентом связывания, иммобилизованном на подложке, где меченое зрелое человеческое IL-6 дикого типа находится к конечной концентрации, равной i Kd его взаимодействия с агентом связывания. Если мутантное IL-6 не ингибирует связывание меченого IL-6 дикого типа с агентом связывания, или если мутантное IL-6 имеет IC50 более чем у немеченого IL-6 дикого типа (например, более чем в 10 раз или в 100 раз), это указывает на то, что мутированный остаток связан агентом связывания.
[0181] Агент связывания в соответствии с данным изобретением может необязательно не связывать и/или нейтрализовать мутантное человеческое IL-6, имеющее мутацию на остатке Phe102, Ser204 и/или Arg207, например, мутацию Phe102Glu, Ser204Glu, Ser204Tyr и/или Arg207Glu.
[0182] Агент связывания в соответствии с данным изобретением может содержать молекулу антитела, например, молекулу человеческого антитела. Агент связывания обычно содержит VH и/или VL домен антитела. Компоненты связывания VH и VL доменов также обеспечены как часть данного изобретения. Внутри каждого из VH и VL доменов находятся гипервариабельные участки, ("CDRs"), и каркасные участки, ("FRs"). VH домен содержит множество HCDRs, и VL домен содержит множество LCDRs. Молекула антитела может содержать VH домен антитела, содержащий VH CDR1, CDR2 и CDR3 и каркас. Он может альтернативно или также содержать VL домен антитела, содержащий VL CDR1, CDR2 и CDR3 и каркас. Каркас VH или VL домена содержит четыре каркасных участка, FR1, FR2, FR3 и FR4, распределенных в CDRs в следующей структуре: FR1-CDR1-FR2-CDR2-FR3-CDR3-FR4.
[0183] Примеры VH и VL доменов антитела и CDRs в соответствии с данным изобретением являются такими, как перечислено в перечне последовательностей, который входит в данное описание. Дополнительно CDRs описаны в публикации РСТ № WO 2008/065378. Все VH и VL последовательности, CDR последовательности, множества CDRs и множества HCDRs и множества LCDRs, которые описаны в данной заявке и в публикации РСТ № WO 2008/065378, представляют собой аспекты и варианты исполнения в соответствии с данным изобретением. Как описано в данной заявке, "множество CDRs" содержит CDR1, CDR2 и CDR3. Таким образом, множество HCDRs относится к HCDR1, HCDR2 и HCDR3, и множество LCDRs относится к LCDR1, LCDR2 и LCDR3. Если не указано иное, "множество CDRs" включает HCDRs и LCDRs. Типично, агенты связывания в соответствии с данным изобретением являются моноклональными антителами.
[0184] Агент связывания в соответствии с данным изобретением может содержать сайт связывания антигена в молекуле не-антитела, обычно обеспеченного одним или более CDRs например, множеством CDRs в клеточном каркасе не-антительного белка, как дополнительно обсуждено ниже.
[0185] Как отмечено выше, агент связывания в соответствии с данным изобретением модулирует и может нейтрализовать биологическую активность IL-6. Как описано в данной заявке, IL-6-агенты связывания в соответствии с данным изобретением могут быть оптимизированы для эффективности нейтрализации. В общем, оптимизация эффективности включает мутацию последовательности выбранного агента связывания (обычно последовательности вариабельного домена антитела) с получением библиотеки агентов связывания, которые затем оценивают на предмет эффективности и выбирают более эффективные агенты связывания. Таким образом, выбранные "оптимизированные по эффективности" агенты связывания имеют тенденцию к тому, чтобы иметь более высокую эффективность, чем агент связывания, из которого была получена библиотека. Тем не менее, высокоэффективные агенты связывания могут быть также получены без оптимизации, например высокоэффективный агент связывания, может быть получен непосредственно из начального скрининга, например, анализа биохимической нейтрализации. "Оптимизированный по эффективности" агент связывания относится к агенту связывания с оптимизированной эффективностью нейтрализации конкретной активности или нижнего функционального IL-6. Анализы по эффективности более подробно описаны во всей данной заявке. Данное изобретение представляет как оптимизированные по эффективности, так и неоптимизированные агенты связывания, а также способы оптимизации эффективности из выбранного агента связывания. Данное изобретение, таким образом, позволяет специалисту в данной области получать агенты связывания с высокой эффективностью.
[0186] В дополнительном аспекте, данное изобретение представляет способ получения одного или более агентов связывания, способных к связыванию антигена, где способ включает контактирование агентов связывания библиотеки в соответствии с данным изобретением и указанного антигена, и выбор одного или более агентов связывания библиотеки, способных к связыванию указанного антигена.
[0187] Библиотека может быть визуализирована на частицах или молекулярных комплексах, например, реплицируемых генетических упаковках, таких, как частицы дрожжей, бактериальные или бактериофаговые (например, Т7) частицы, вирусы, клетки или ковалентные, рибосомальные или другие in vitro системы отображения, где каждая частица или молекулярный комплекс содержит нуклеиновую кислоту, кодирующую VH вариабельный домен антитела, отображаемый на нем, и необязательно также отображаемый VL домен, если он присутствует. Фаговый дисплей описан в WO 92/01047 и, например, патентах США US 5969108, US 5565332, US 5733743, US 5858657, US 5871907, US 5872215, US 5885793, US 5962255, US 6140471, US 6172197, US6225447, US 6291650, US 6492160 и US 6521404, каждый, из которых, включен в данную заявку полностью путем ссылки.
[0188] После отбора агентов связывания, способных связывать антиген, и отображения на бактериофагах или других частицах или молекулярных комплексах библиотек, нуклеиновая кислота может быть взята из бактериофага или другой частицы или молекулярного комплекса, отображающего указанный выбранный агент связывания. Такая нуклеиновая кислота может быть использована в последующем продуцировании агента связывания или антительного VH или VL вариабельного домена путем экспрессии из нуклеиновой кислоты с последовательностью нуклеиновой кислоты, взятой из бактериофага или другой частицы или молекулярного комплекса, отображающего указанный выбранный агент связывания.
[0189] Варианты VH и VL доменов и CDRs в соответствии с данным изобретением, включая те из них, для которых аминокислотные последовательности указаны в данной заявке и которые могут быть применены в агентах связывания в соответствии с данным изобретением, могут быть получены при помощи способов изменения или мутации последовательностей и скрининга для нахождения агентов связывания антигена с желаемыми характеристиками. Приемы желательных характеристик включают, не ограничиваясь приведенным:
- Повышенная аффинность связывания к антигену относительно известных антител, которые являются специфичными для данного антигена;
- Повышенная нейтрализация активности антигена относительно известных антител, которые являются специфичными для данного антигена, если его активность известна;
- Указанная конкурентоспособность по сравнению с известным антителом или лигандом, к антигену при конкретном молярном соотношении;
- Способность к иммуноосаждению комплекса;
- Способность связывать указанный эпитоп:
о линейный эпитоп, например, пептидную последовательность, идентифицированную при помощи сканирования пептидного связывания, как описано в данной заявке, например, при помощи пептидов, которые подвергали скринингу в линейной и/или ограниченной конформации;
о конформационный эпитоп, сформированный не-непрерывными остатками;
- Способность модулировать новую биологическую активность IL-6, или нижней молекулы.
Такие способы также обеспечены в данной заявке.
[0190] Варианты молекул антитела, описанные в данной заявке, могут быть получены и применены в данном изобретении. В соответствии с руководством по компьютерной химии по применению методов анализа мультивариантных данных к соотношениям структура/свойство (Wold, et al. Multivariate data analysis in chemistry. Chemometrics - Mathematics and Statistics in Chemistry (Ed.: B. Kowalski), D. Reidel Publishing Company, Dordrecht, Holland, 1984 (ISBN 90-277-1846-6)) могут быть получены антитела с количественными соотношениями активность-свойство при помощи хорошо известных математических методов, таких, как статическая регрессия, распознавание образцов и классификация (Norman et al. Applied Regression Analysis. Wiley-Interscience; 3rd edition (April 1998) ISBN: 0471170828; Kandel, Abraham & Backer, Eric. Computer-Assisted Reasoning in Cluster Analysis. Prentice Hall PTR, (May 11, 1995), ISBN: 0133418847; Krzanowski, Wojtek. Principles of Multivariate Analysis: A User’s Perspective (Oxford Statistical Science Series, No 22 (Paper)). Oxford University Press; (December 2000), ISBN: 0198507089; Witten, Ian H. & Frank, Eibe. Data Mining: Practical Machine Learning Tools and Techniques with Java Implementations. Morgan Kaufmann; (October 11, 1999), ISBN: 1558605525; Denison David G.T. (Editor), Christopher C. Holmes, Bani K. Mallick, Adrian F.M. Smith. Bayesian Methods for Nonlinear Classification and Regression (Wiley Series in Probability and Statistics). John Wiley & Sons; (July 2002), ISBN: 0471490369; Ghose, Arup K. & Viswanadhan, Vellarkad N. Combinatorial Library Design and Evaluation Principles, Software, Tools, and applications in Drug Discovery. ISBN: 0-8247-0487-8). Свойства антител могут быть получены из эмпирических и теоретических моделей (например, анализа вероятно контактирующих остатков или рассчитанного физико-химического свойства) последовательности антитела, функциональных и трехмерных структур, и данные свойства должны быть рассмотрены по отдельности и в комбинации.
[0191] Антительный сайт связывания антигена, состоящий из VH домена и VL домена, типично образован шестью петлями полипептида: три из вариабельного домена (VL) легкой цепи и три из вариабельного домена (VH) тяжелой цепи. Анализ антитела известной атомной структуры разъяснил взаимосвязь последовательности и сайтов сочетания трехмерной структуры антитела (Chothia С. et al. (1992) J. Molecular Biology 227, 799-817; Al-Lazikani, et al. (1997) J. Molecular Biology 273(4), 927-948). Такие взаимосвязи предполагают что, за исключением третьего участка (петли) в VH домене, петли сайтов связывания имеют один из небольшого количества конформаций основной цепи: канонические структуры. Канонические структуры, образованные в конкретной петле, были показаны как определяемые их размером и присутствием определенных остатков в ключевых сайтах, как в петле, так и в каркасном участке (Chothia С. et al. (1992) J. Molecular Biology 227, 799-817; Al-Lazikani, et al. (1997) J. Molecular Biology 273(4), 927-948).
[0192] Такое исследование взаимосвязи последовательность-структура может быть применено для прогнозирования остатков в антителе известной последовательности, но неизвестной трехмерной структуры, что является важным при сохранении трехмерной структуры его CDR петель и поэтому сохранения специфичности связывания. Такие прогнозы могут быть основаны на сравнении прогнозов результатов основных экспериментов оптимизации. В структурном подходе может быть создана модель молекулы антитела (Chothia, et al. (1986) Science, 223, 755-758) при использовании любого бесплатного или коммерческого программного обеспечения, такого, как WAM (Whitelegg, N.R.u. & Rees, A.R (2000). Prot. Eng., 12, 815-824). Затем может быть использовано программное обеспечение анализа визуализации белков, такое, как Insight II (Accelrys, Inc.) или Deep View (Guex, N. and Peitsch, M.C. (1997) Electrophoresis 18, 2714-2723) для оценки возможных замещений в каждом положении в CDR. Эта информация может затем быть использована для получения замещений, которые, вероятно, имеют минимальное или благоприятное влияние на активность.
[0193] Методы, необходимые для получения замещений в аминокислотных последовательностях CDRs, антительных VH или VL доменах и агентах связывания, в общем, известны в данной области. Могут быть получены вариантные последовательности, с замещениями, которые могут быть или могут не быть прогнозированы, как имеющие минимальное или благоприятное влияние на активность, и проанализированы на предмет способности связывать и/или нейтрализовать IL-6 и/или для получения другого желательного свойства.
[0194] Варианты аминокислотных последовательностей вариабельного домена любого из VH и VL домена, последовательности, которых конкретно описаны в данной заявке, могут быть применены в соответствии с данное изобретение, как обсуждено.
[0195] Варианты VL домена в соответствии с данным изобретением, и агенты связывания или молекулы антитела, содержащие их, включают VL домены, в которых не присутствует аргинин, в остатке Kabat 108, например, если остаток Kabat 108 является другим остатком или удален. Например, молекула антитела, такая, как молекула антитела, в которой отсутствует константный домен, например, scFv, может содержать VL домен, содержащий последовательность VL домена или его вариант, как описано в данной заявке, в которой аргинин в остатке Kabat 108 аминокислотного остатка не является аргинином или удален.
[0196] Дополнительный аспект в соответствии с данным изобретением представляет собой молекулу антитела, содержащую VH домен, имеющий как минимум 60, 70, 80, 85, 90, 95,98 или 99% идентичности аминокислотной последовательности с VH доменом Антитела18, который приведен в перечне последовательностей, который прилагается, и/или содержит VL домен, имеющий как минимум 60, 70, 80, 85, 90,95, 98и ли 99% идентичности аминокислотной последовательности с VL доменом Антитела18, показанным в перечне последовательностей, который прилагается. Алгоритмы, которые могут быть использованы для расчета % идентичности двух аминокислотных последовательностей включают, например, BLAST (Altschul et al. (1990) J. Mol. Biol. 215:405-410), FASTA (Pearson and Lipman (1988) PNAS USA 85: 2444-2448), или алгоритм Смита-Ватермана (Smith and Waterman (1981) J. Mol Biol. 147: 195-197), например, с применением параметров по умолчанию.
[0197] Конкретные варианты могут включать одно или более изменений аминокислотной последовательности (добавление, делению, замещение и/или инсерцию аминокислотного остатка).
[0198] Изменения могут быть произведены в одном или более каркасных участках и/или одном или более CDRs. Изменения обычно не приводят к утрате функции, таким образом, агент связывания, содержащий измененную аминокислотную последовательность, может сохранять способность к связыванию и/или нейтрализации IL-6. Он может сохранять ту же самую способность к количественному связыванию и/или нейтрализации в качестве агента связывания, в котором не было произведено изменение, например, как измерено в анализе описанного в данной заявке. Агент связывания, содержащий таким образом измененную аминокислотную последовательность, может иметь улучшенную способность связывания и/или нейтрализации IL-6.
[0199] Изменение может включать замену одного или более аминокислотного остатка на не встречающиеся в природе или нестандартные аминокислоты, модификацию одного или более аминокислотного остатка на не встречающуюся в природе или нестандартную форму, или инсерцию одной или более не встречающейся в природе или нестандартной аминокислоты на последовательность. Примеры номеров и положений изменений последовательности в соответствии с данным изобретением описаны по всей данной заявке. Встречающиеся в природе аминокислоты включают 20 "стандартных" 1-аминокислот, идентифицированных как G, А, V, L, I, М, Р, F, W, S, Т, N, Q, Y, С, К, R, Н, D, Е по их стандартным однобуквенным кодам. Нестандартные аминокислоты включают любой другой остаток, который может быть введен в полипептидный каркас или быть результатом модификации существующего аминокислотного остатка. Нестандартные аминокислотами могут встречаться в природе или не встречаться в природе. Несколько встречающихся в природе нестандартных аминокислот известны в данной области, такие, как 4-гидроксипролин, 5-гидроксилизин, 3-метилгистидин, N-ацетилсерин, и т.д. (Voet & Voet, Biochemistry, 2nd Edition, (Wiley) 1995). Те аминокислотные остатки, которые дериватизованы в их N-альфа положении, будут расположены только на N-конце аминокислотной последовательности. Обычно в данном изобретении аминокислота представляет собой 1-аминокислоту, но она может быть d-аминокислотой. Изменение может, поэтому включать модификацию 1-аминокислоты в, или замену на, d-аминокислоту. Метилированные, ацетилированные и/или фосфорилированные формы аминокислот также известны, и аминокислоты в данном изобретении могут быть подвержены такой модификации.
[0200] Аминокислотные последовательности в доменах антител и агентах связывания в соответствии с данным изобретением могут содержать неприродные или нестандартные аминокислоты, описанные выше. Нестандартные аминокислоты (например, d-аминокислоты) могут быть введены в аминокислотную последовательность во время синтеза, или путем модификации или замены "исходной" стандартной аминокислоты после синтеза аминокислотной последовательности.
[0201] Применение нестандартных и/или не встречающихся в природе аминокислот повышает структурное и функциональное разнообразие, и может таким образом увеличивать потенциал для достижения желательного IL-6-связывания и нейтрализующих свойств агента связывания в соответствии с данным изобретением. Дополнительно, d-аминокислоты и аналоги, как было показано, имеют различные фармакокинетические профили по сравнению со стандартными 1-аминокислотами, например из-за распада in vivo полипептидов, имеющих 1-аминокислоты после введения животному, например, человеку, что означает, что d-аминокислоты являются преимущественными для некоторых применений in vivo.
[0202] Новые VH или VL участки, содержащие CDR-производные последовательности в соответствии с данным изобретением могут быть получены при помощи рандомизованного мутагенеза одного или более выбранных VH и/или VL генов с получением мутаций внутри всего вариабельного домена. Такая методика описана в Gram et al. (Gram et al., (1992) PNAS USA 89:3576-3580), которые использовали ПЦР пониженной точности. В некоторых вариантах исполнения одно или два аминокислотных замещений произведены внутри всего вариабельного домена или множества CDRs.
[0203] Другой способ, который может быть использован, является прямой мутагенез в CDR участки VH или VL генов. Такие методы описаны Barbas et al. (Barbas et al., (1994) PNAS USA 91:3809-3813) и Schier et al. (Schier et al., (1996) J. Mol. Biol. 263:551-567).
[0204] Все описанные выше методы известны как таковые из уровня техники и специалист в данной области сможет применить такие методы для обеспечения агентов связывания в соответствии с данным изобретением при помощи стандартной методологии в данной области.
[0205] Дополнительный аспект данного изобретения представляет способ получения антительного сайта связывания антигена к IL-6, где способ включает обеспечение путем добавления, делеции, замещения или инсерции одной или более аминокислот в аминокислотной последовательности VH домена, указанных в данной заявке, где VH домен, который является вариантом аминокислотной последовательности VH домена, необязательно комбинируя VH домен, обеспеченный, таким образом, с одним или более VL доменами, и анализ VH домена или VH/VL комбинации или комбинаций для идентификации агента связывания или антительного сайта связывания антигена для IL-6 и необязательно одним или более желательными свойствами, например, способностью нейтрализации IL-6 активности. Указанный VL домен может иметь аминокислотную последовательность, которая является незаменимой, как приведено в данной заявке. Может быть применен аналогичный способ, в котором один или более вариантов последовательностей VL домена, описанных в данной заявке, комбинируют с одним или более VH доменами.
[0206] Как отмечено выше, CDR аминокислотная последовательность в существенной степени, как приведено в данной заявке, может быть произведена как CDR в вариабельном домене человеческого антитела или в его большей части. HCDR3 последовательности в существенной степени, как приведено в данной заявке представляют варианты исполнения данного изобретения и каждая из них может быть произведена как HCDR3 в человеческой тяжелой цепи вариабельного домена или в его большей части.
[0207] Вариабельные домены, примененные в данном изобретении, могут быть получены или дериватизованы от любой зародышевой линии или реарранжированного человеческого вариабельного домена, или могут быть синтетическим вариабельным доменом, исходя из консенсусной или фактической последовательности известного человеческого вариабельного домена. Вариабельный домен может быть дериватизован из нечеловеческого антитела. CDR последовательность в соответствии с данным изобретением (например, CDR3) может быть введена в спектр вариабельных доменов, у которых отсутствует CDR (например, CDR3), при помощи рекомбинантной ДНК технологии. Например, Marks et al. (Marks et al. (1992) Bio/Technology 10:779-783) описывают способы продуцирования спектров вариабельных доменов антител, в которых консенсусные праймеры, направленные на прилегающие к 5' концу области вариабельного домена используют в соединении с консенсусными праймерами к третьему каркасному участку генов человеческого VH для обеспечения спектра VH вариабельных доменов, у которых отсутствует CDR3. Marks et al. дополнительно описывают, каким образом такой спектр может быть скомбинирован с CDR3 конкретного антитела. Используя аналогичные методы, CDR3-дериватизованные последовательности в соответствии с данным изобретением могут быть перетасованы со спектрами VH или VL доменов, у которых отсутствует CDR3, и перетасованные полные VH или VL домены скомбинированы с родственным VL или VH доменом с обеспечением агентов связывания в соответствии с данным изобретением. Спектр может затем быть проявлен в приемлемой системе хозяина, например, в системе фагового дисплея в WO 92/01047, который включен полностью в данную заявку путем ссылки, или любого последующего большого тела, описанного в литературе, включая Kay, Winter & McCafferty (Kay, B.K., Winter, J., and McCafferty, J. (1996) Phage Display of Peptides and Proteins: A Laboratory Manual, San Diego: Academic Press), таким образом, что могут быть выбраны приемлемые агенты связывания. Спектр может состоять из любых 104 индивидуальных компонентов выше, например как минимум 105, как минимум 106, как минимум 107, как минимум 108, как минимум 109 или как минимум 1010 компонентов или более. Другие приемлемые системы хозяев включают, не ограничиваясь приведенным, дрожжевой дисплей, бактериальный дисплей, Т7 дисплей, вирусный дисплей, клеточный дисплей, рибосомный дисплей и ковалентный дисплей.
[0208] Обеспечен способ получения агента связывания IL-6 антигена, где способ включает:
(а) обеспечение начального спектра нуклеиновых кислот, кодирующих VH домен, который содержит CDR3 для замещения или не содержит CDR3 кодирующий участок;
(б) комбинирование указанного спектра с донорной нуклеиновой кислотой, кодирующей аминокислотную последовательность в существенной степени, как приведено в данной заявке для VH CDR3, таким образом, что указанная донорная нуклеиновая кислота вставлена в CDR3 участок в спектре, таким образом, чтобы обеспечить спектр продуктов нуклеиновых кислот, кодирующих VH домен;
(в) экспрессию нуклеиновых кислот указанным спектром продуктов;
(г) выбор агента связывания для IL-6;
(д) восстановление указанного агента связывания или нуклеиновой кислоты, которая его кодирует.
[0209] Снова, может быть применен аналогичный способ, в котором VL CDR3 в соответствии с данным изобретением соединяют со спектром нуклеиновых кислот, кодирующих VL домен, который включает CDR3 для замещения или не содержит CDR3 кодирующий участок.
[0210] Аналогично, один или более, или все три CDRs могут быть привиты в спектр VH или VL доменов, которые подвергают скринингу на предмет агентов связывания или агентов связывания IL-6.
[0211] Аналогично, могут быть применены другие VH и VL домены, множества CDRs и множества HCDRs и/или множества LCDRs, описанные в данной заявке.
[0212] Существенная часть иммуноглобулинового вариабельного домена может содержать как минимум три CDR участка, вместе с их промежуточными каркасными участками. Данная часть может также содержать как минимум приблизительно 50% любого из или обоих из первого и четвертого каркасных участков, 50% являются С-концевыми 50% первого каркасного участка, и N-концевого 50% четвертого каркасного участка. Дополнительными остатками на N-конце или С-конце существенной части вариабельного домена могут быть остатки, которые обычно связаны с встречающимися в природе участками вариабельного домена. Например, конструирование компонентов связывания в соответствии с данным изобретением, произведенное путем рекомбинантных ДНК методов, может привести к введению N-или С-концевых остатков, кодированных линкерами, введенными для способствования клонирования или других стадий манипуляций. Другие стадии манипуляций включают введение линкеров для присоединения вариабельных доменов в соответствии с данным изобретением к дополнительной белковой последовательности, включая константные участки антитела, другие вариабельные домены (например при продуцировании диабоди) или детектируемые/функциональные метки, как более подробно обсуждено по всей данной заявке.
[0213] Хотя в некоторых аспектах в соответствии с данным изобретением, агенты связывания содержат пару VH и VL доменов, одинарные домены связывания, основанные на VH или VL доменных последовательностях, образуют дополнительные аспекты в соответствии с данным изобретением. Известно, что одинарные иммуноглобулиновые домены, в особенности VH домены, способны связывать антитела-мишени особым образом. Например, см. обсуждение dAbs, приведенное выше.
[0214] В случае одинарного домена связывания, такие домены могут быть использованы для скрининга комплементарности доменов, способных образовывать двухдоменный агент связывания, способный к связыванию IL-6. Это может быть достигнуто при помощи способов скрининга фаговым дисплеем с использованием так называемого иерархического двойного комбинаторного подхода, описанного в WO 92/01047, который полностью включен в данную заявку путем ссылки, в которой индивидуальную колонию, содержащую клон Н или L цепи, используют для инфицирования полной библиотеки клонов, кодирующих другую цепь (L или Н) и полученный в результате двухцепочечный агент связывания выбирают в соответствии с методами фагового дисплея, например, описанными в данной ссылке. Данный метод также описан в Marks et al., ibid. (Marks et al. (1992) Bio/Technology 10:779-783).
[0215] Агенты связывания в соответствии с данным изобретением могут дополнительно содержать константные участки антитела или их части, например, константные участки человеческого антитела, или их части. Например, VL домен может быть присоединен его С-концом к константному домену легкой цепи антитела, включая человеческие Сκ или Сλ цепи. Аналогично, агент связывания на основе VH домена может быть присоединен своим С-концом ко всей или части (например, СН1 домену) иммуноглобулиновой тяжелой цепи, полученной из любого изотипа антитела, например, IgG, IgA, IgE и IgM и любого изотипного подкласса, в частности IgG1 и IgG4. IgG1 является преимущественным, ввиду его эффекторной функции и легкости получения. Любой синтетический вариант или вариант константного участка, имеющий такие свойства и стабилизирующий вариабельные участки, может быть также полезным в данном изобретении.
[0216] Агенты связывания в соответствии с данным изобретением могут быть мечены детектируемой или функциональной меткой. Таким образом, агент связывания или молекула антитела могут присутствовать в форме иммуноконъюгата так, чтобы получать детектируемый и/или определяемый количественно сигнал. Иммуноконъюгаты могут содержать молекулу антитела в соответствии с данным изобретением, конъюгированную с детектируемой или функциональной меткой. Меткой может быть любая молекула, которая продуцирует или может быть индуцирована для продуцирования сигнала, включая, но, не ограничиваясь такими, как: флуорофоры, радиоактивные метки, ферменты, хемилюминесцентные вещества или фотосенсебилизаторы. Таким образом, связывание может быть детектировано и/или измерено путем детекции флуоресценции или люминесценции, радиоактивности, ферментной активности или поглощения света.
[0217] Приемлемые метки включают, для иллюстрации и не для ограничения:
- ферменты, такие, как щелочные фосфатазы, глюкоза-6-фосфат дегидрогеназа ("G6PDH"), альфа-D-галактозидаза, глюкозооксидаза, глюкозоамилаза, карбоангидраза, ацетилхолинэстераза, лизоцим, малатдегидрогеназа и ероксидаза, например, преоксидаза хрена;
- красители;
- флуоресцентные метки, или флуорофоры, такие, как флуоресцеин и его производные, флуорохром, соединения и производные родамина, ЗФБ (ЗФБ означает "зеленый флуоресцентный белок"), dAHCyl, умбелдиферон, фикоэритрин, фикоцианин, аллофикоцианин, о-фтальдегид и флуоресцамин; флуорофоры, такие, как криптаты и хелаты лантанидов например, европия и т.д. (Perkin Elmer and Cis Biointernational),
- хемолюминесцентные метки или хемилюминесцентные вещества, такие, как изолюминол, люминол и диокситаны;
- биолюминесцентные метки, например, люциферазу и люциферин;
- сенсибилизаторы;
- коферменты;
- ферментные субстраты;
- радиоактивные метки, включая, но, не ограничиваясь приведенным: бром 77, углерод 14, кобальт 57, фтор 8, галлий 67, галлий 68, водород 3 (тритий), индий 111, индий 113m, йод 123m, йод 125, йод 126, йод 131, йод 133, ртуть 107, ртуть 203, фосфор 32, рений 99m, рений 101, рений 105, рутений 95, рутений 97, рутений 103, рутений 105, скандий 47, селен 75, серу 35, технеций 99, технеций 99m, теллур 121m, теллур 122m, теллур 125m, тулий 165, тулий 167, тулий 168, иттрий 199 и другие радиоактивные метки, указанные в данной заявке;
- частицы, такие, как частицы латекса или углерода; золь металла; кристаллит; липосомы; клетки и т.д., которые могут быть дополнительно мечены красителем, катализатором или другой детектируемой группой;
- молекулы, например, биотин, дигоксигенин или 5-бромдезоксиуридин;
- фрагменты токсина, такие, как например, фрагмент токсина, выбранный из группы экзотоксин Pseudomonas (РЕ или его цитотоксический фрагмент или мутант), токсин дифтерии или его цитотоксический фрагмент или мутант, токсин ботулизма А, В, С, D, Е или F, рицин или его цитотоксический фрагмент, например, рицин А, абрин или его цитотоксический фрагмент, сапонин или его цитотоксический фрагмент, противовирусный токсин фитолакки или его цитотоксический фрагмент и бриодин 1 или его цитотоксический фрагмент.
[0218] Приемлемые токсины и коферменты описаны в Litman, et al., US 4275149, и Boguslaski, et al., US 4318980, каждый из которых полностью включен в данную заявку путем ссылки. Приемлемые флуорофоры и хемилюминесцентные вещества описаны в Litman, et al., US 4275149, которые полностью включены в данную заявку путем ссылки. Метки дополнительно включают химические фрагменты, такие, как биотин, который может быть детектирован путем связывания с конкретным родственным детектируемым фрагментом, например, меченым авидином или стрептавидином. Детектируемые метки могут быть присоединены к антителам в соответствии с данным изобретением при помощи стандартной химии, известной в данной области.
[0219] Иммуноконъюгаты или их функциональные фрагменты могут быть получены способами, известными специалистам в данной области. Они могут быть соединены с ферментами или флуоресцентными метками непосредственно или при помощи промежуточного звена в виде спейсерной группы или связывающей группы, такой, как полиальдегид, такой, как альдегид глутаровой кислоты, этилендиаминтетрауксусная кислота (ЭДТК), диэтилентриаминпентауксусная кислота (ДПА), или в присутствии агентов сочетания, таких, которые перечислены выше для терапевтических конъюгатов. Конъюгаты, содержащие метки флуоресценового типа, могут быть получены путем реакции с изоцианатом.
[0220] Способы, известные специалисту в данной области, существуют для сочетания терапевтических радиоизотопов и антитела непосредственно или при помощи хелатирующего агента, такого, как ЭДТК, ДТПК, указанных выше, и могут быть применены для радиоактивных элементов, которые могут применяться в диагностике. Аналогичным образом, можно провести метки натрий 125 по хлораминовому Т способу (Hunter W.М. and Greenwood F.С. (1962) Nature 194:495) или также с технеций 99m по методу Crockford et al., (US 4424200, который полностью включен в данную заявку путем ссылки) или присоединять при помощи ДТПК, как описано Hnatowich (US 4479930, который полностью включен в данную заявку путем ссылки).
[0221] Существуют многочисленные способы, при помощи которых метка может продуцировать сигнал, детектируемый внешними средствами, например, путем визуального осмотра, электромагнитного излучения, тепла и химических реактивов. Метка может быть также связана с другим агентом связывания, который связывает антитело в соответствии с данным изобретением, или подложку.
[0222] Метка может непосредственно продуцировать сигнал, и поэтому, для получения сигнала нет необходимости в дополнительных компонентах. Многочисленные органические молекулы, например, флуорофоры, способны поглощать ультрафиолетовый и видимый свет, где поглощение света переносит энергию в данные молекулы и переводит их в состояния повышенной энергии. Такая поглощенная энергия затем диссипируется путем эмиссии света при второй длине волны. Такая эмиссия второй длины волны может также переносить энергию в меченую акцепторную молекулу, и полученная в результате энергия диссипирует из акцепторной молекулы путем эмиссии света, например, резонансного переноса флуоресцентной энергии (РПЭФ). Другие метки, которые непосредственно продуцируют сигнал, включают радиоактивные изотопы и красители.
[0223] Альтернативно, метка может требовать другие компоненты для продуцирования сигнала, и система продуцирования сигнала будет затем содержать все компоненты, необходимые для получения измеримого сигнала, которые могут включать подложки, коферменты, энхансены, дополнительные ферменты, вещества, реагирующие с ферментными продуктами, катализаторы, активаторы, кофакторы, ингибиторы, ловушки, ионы металлов и специфично связывающие вещества, необходимые для связывания вещества, генерирующего сигнал. Подробное обсуждение приемлемых систем про индуцирующий сигнал, можно найти в Ullman, et al. US 5185243, каждое их которых полностью включено в данную заявку путем ссылки.
[0224] Данное изобретение представляет способ, включающий связывание агента связывания, обеспеченного в данной заявке, с IL-6. Как отмечено, такое связывание может происходить in vivo, например, после введения агента связывания, или нуклеиновой кислоты, кодирующей агент связывания, или может происходить in vitro, например, в анализе ELISA, вестерн-блоттинг, иммуноцитохимическом анализе, анализе иммуноосаждения, аффинной хроматографии и биохимическом или клеточном анализах, таких, как анализ TF-1 клеточной пролиферации.
[0225] Данное изобретение также представляет измерение уровней антигена непосредственно, путем применения агента связывания в соответствии с данным изобретением, например в биосенсорной системе. Например, данное изобретение включает способ детекции и/или измерения связывания с IL-6, включающий, (i) воздействие на указанный агент связывания IL-6 и (ii) детекцию связывания указанного агента связывания с IL-6, где связывание детектируют любым способом или при помощи детектируемой метки, описанной в данной заявке. Этот и любой другой способ детекции связывания, описанный в данной заявке, может быть интерпретирован непосредственно особой, реализующей данный способ, например, путем визуального наблюдения детектируемой метки. Альтернативно, данный способ или любой другой способ детекции связывания, описанный в данной заявке, может производить отчет в виде ауторадиографии, фотографии, компьютерной распечатки, проточного цитометрического отчета, графика, схемы, тестовой пробирки или контейнера, или ячейки, содержащей результат, или любого другого визуального или физического представления результата данного способа.
[0226] Количество связывания связывающего компоненты с IL-6 может быть определено. Количественное определение может относиться к количеству антигена в тестовой пробе, которая может представлять диагностический интерес. Скрининг IL-6 связывания и/или его количественное определение могут быть полезными, например, при скрининге пациентов на предмет заболеваний или расстройств, указанных в данной заявке, и/или любого другого заболевания или расстройства, включающих аберратнтую IL-6 экспрессию и/или активность.
[0227] Диагностический способ в соответствии с данным изобретением может включать (i) получение пробы ткани или жидкости от субъекта, (ii) воздействие на указанную пробу ткани или жидкости одного или более агентов связывания в соответствии с данным изобретением; и (iii) детекцию связывания IL-6 по сравнению с контрольной пробой где увеличение количества IL-6 связывания по сравнению с контрольной пробой может указывать на аберрантный уровень экспрессии или активности IL-6. Пробы ткани или жидкости для анализа включают кровь, сыворотку, мочевину, материалы биопсии, опухоли, или любую ткань, которую подозревают в том, что она содержит аберрантные уровни IL-6. Субъекты, которых анализируют как позитивные для аберрантных уровней и активности IL-6 могут также иметь преимущества от способов лечения, описанных в данной заявке ниже.
[0228] Специалисты в данной области способны выбрать приемлемый режим определения связывания агента связывания с антигеном в соответствии с их предпочтениями и общими знаниями, учитывая способы, описанные в данной заявке.
[0229] Радиоактивности компонентов связывания в пробе могут быть определены при помощи любых соответствующих средств. Радиоиммунологическое исследование (РИА) является одной из возможностей. Радиоактивно меченый антиген смешивают с немеченым антигеном (тестовой пробой) и позволяют связывать агент связывания. Связанный антиген физически отделяют от несвязанного антигена и определяют количество радиоактивного антигена, связанного с агентом связывания. Чем больше антигена находится в тестовой пробе, тем меньшее количество радиоактивного антигена будет связывать агент связывания. Анализ конкурентного связывания может быть также полезным для нерадиоактивного антигена, с использованием антигена или аналога, связанного с репортерной молекулой. Репортерная молекула представляет собой люминофор, фосфорный или лазерный краситель со спектрально выделенными характеристиками поглощения или испускания. Приемлемые люминофоры включают флуоресцеин, родамин, фикоэритрин и техасский красный, и хелаты или криптаты лантанидов. Приемлемые хромогенные красители включают диаминобензидин.
[0230] Другие репортеры включают макромолекулярные коллоидные частицы или материалы на основе частиц, такие, как окрашенные, магнитные или парамагнитные, или биологически или химически активные агенты, которые могут непосредственно или опосредованно производить детектируемые сигналы для визуального наблюдения электроннодетектируемые или зарегистрированные иным образом. Такие молекулы могут быть ферментами, катализирующими реакции, которые разбивают или изменяют цвета или приводят к изменениям электрических свойств, например, они могут быть молекулярно возбуждаемыми, так, что электронные переходы между уровнями энергии приводят к характерным спектральным поглощениям или испусканиям. Они могут включать химические объекты, которые используют в соединении с биосенсорами. Могут быть применены системы детекции биотин/авидин или биотин/стрептавидин и щелочная фосфатаза.
[0231] Сигналы, генерируемые индивидуальными конъюгатами агент связывания-репортер, могут быть использованы для получения определяемых количественно абсолютных или относительных данных о связывании релевантного агент связывания в пробах (нормальных и тестовых).
[0232] В качестве аспекта данного изобретения также обеспечен набор, содержащий агент связывания в соответствии с любым аспектом или вариантом исполнения данного изобретения. В данном наборе, агент связывания может быть меченым для детекции его реакционной способности в пробе для определения, например, как дополнительно описано ниже. Дополнительно, агент связывания может быть, а может и не быть присоединен к твердой подложке. Компоненты набора являются в общем стерильными и содержатся в герметично закрытых виолах или других контейнерах. Наборы могут быть применены для диагностического анализа или в других способах, для которых агенты связывания являются полезными. Набор может содержать инструкции по применению компонентов способом, например, в соответствии с данным изобретением. Вспомогательные материалы для способствования или для того, чтобы позволить реализацию такого способа, могут быть включены в набор в соответствии с данным изобретением. Вспомогательные материалы включают второй отличный агент связывания, который связывается с первым агентом связывания и конъюгирован с детектируемой меткой (например, флуоресцентной меткой, радиоактивным изотопом или ферментом). Наборы на основе антител могут также содержать подложки для проведения иммуноосаждения. Каждый компонент наборов, в общем, находится в собственном приемлемом контейнере. Таким образом, такие наборы содержат отдельные контейнеры, приемлемые для каждого агента связывания. Дополнительно, наборы могут содержать инструкции по выполнению анализа и способов интерпретации и анализа данных, полученных в результате выполнения данного анализа.
[0233] Данное изобретение также представляет применение агента связывания, указанного выше, для измерения уровней антигена в конкурентном анализе, то есть способе измерения уровня антигена в пробе путем применения агент связывания, как обеспечено в данном изобретении, в конкурентном анализе. Это может быть в случаях, когда отсутствует необходимость в физическом разделении связанных антител от несвязанных антител. Связывание репортерной молекулы с агентом связывания, происходит таким образом, чтобы происходило физическое или оптическое изменение при связывании, что является одной возможностью. Репортерная молекула может непосредственно или опосредованно генерировать детектируемые сигналы, которые могут быть определены количественно. Связь репортерных молекул может быть непосредственной или опосредованной, ковалентной, например, посредством пептидной связи, или нековалентной. Связь посредством пептидной связи может быть результатом рекомбинантной эксперссии генной гибридизации, кодирующей антитело и репортерную молекулу.
[0234] В различных аспектах и вариантах исполнения, данное изобретение охватывает агент связывания, конкурирующий за связывание с IL-6 с любым агентом связывания, определенным в данной заявке, например, Антителом 18, например, в формате IgGl. Конкуренция агентов связывания может быть легко проанализирована in vitro, например путем метки конкретной репортерной молекулой с одним агентом связывания, который может быть детектирован в присутствии другого немеченого агента связывания(агентов связывания), позволяя идентификацию компонентов связывания, которые связывают один и тот же перекрывающийся эпитоп. Конкуренция может быть определена, например, путем использования ELISA, где IL-6 иммобилизуют на планшете и первый и теговый или меченый агент связывания вместе с одним или более нетеговым или немеченым агентом связывания добавляют к планшету. Присутствие нетегового агента связывания, конкурирующего с теговым агент связывания, наблюдают путем уменьшения сигнала, испускаемого теговым агентом связывания.
[0235] Например, данное изобретение включает способ идентификации соединения, связывающего IL-6, включающий (i) иммобилизацию IL-6 на подложке, (ii) контактирование указанного IL-6 одновременно или поэтапно с, как минимум, одним теговым или меченым агентом связывания в соответствии с данным изобретением и одним или более нетеговым или немеченым тестовым связывающимся соединением, и (iii) идентификацию нового соединения, связывающего IL-6 путем наблюдаемого уменьшения количества связанного тега от тегового агента связывания. Такие способы могут быть реализованы высокоэффективным образом при помощи многолуночного или матричного формата. Такие анализы могут также быть произведены в растворе. См., например, U.S. 5,814,468, который включен полностью в данную заявку путем ссылки. Как описано выше, детекция связывания может быть интерпретирована непосредственно особой, реализующей данный способ, например, путем визуального наблюдения детектируемой метки, или уменьшения ее присутствия. Альтернативно, способы связывания в соответствии с данным изобретением могут производить отчет в форме ауторадиографии, фотографии, компьютерной распечатки, отчета проточной цитометрии, графика, схемы, тестовой пробирки, или контейнера, или ячейки, содержащей результат, или другой визуальной или физической репрезентации результата данного способа.
[0236] Конкурентные анализы могут быть также применены при эпитопном картировании. В одном случае эпитопное картирование может быть использовано для идентификации эпитопа, связанного IL-6 агентом связывания, который необязательно может иметь оптимизированные нейтрализующие и/или модулирующие характеристики. Такой эпитоп может быть линейным или конформационным. Конформационный эпитоп может содержать как минимум два различных IL-6, где указанные фрагменты расположены вблизи друг от друга, если IL-6 пропускают в его третичной или четвертичной структуре с образованием конформационного эпитопа, который признают в качестве ингибитора IL-6, такого, как IL-6-агент связывания. При анализе конкуренции может быть применен пептидный фрагмент антигена, в особенности пептид, содержащий или в существенной степени состоящий из рассматриваемых эпитопов. Может быть использован пептид, содержащий эпитопную последовательность плюс одну или более аминокислот на любом конце. Агенты связывания в соответствии с данным изобретением могут быть такими, что их связывание с антигеном ингибировано пептидом, содержащим или включающим данную последовательность.
[0237] Данное изобретение дополнительно представляет выделенную нуклеиновую кислоту, кодирующую агент связывания в соответствии с данным изобретением. Нуклеиновая кислота может включать ДНК и/или РНК. В одном аспекте, данное изобретение представляет нуклеиновую кислоту, кодирующую CDR или множество CDRs, или VH домен, или VL домен, или антительный сайт связывания антигена, или молекулу антитела, например, scFv или IgGl, в соответствии с данным изобретением, как определено выше.
[0238] Данное изобретение также представляет конструкты в форме плазмид, векторов, кассет транскрипции или экспрессии, которые содержат как минимум один полинуклеотид, как указано выше.
[0239] Данное изобретение также представляет рекомбинантную клетку-хозяина, содержащую один или более конструктов, как указано выше. Нуклеиновая кислота, кодирующая любой CDR или множество CDRs или VH домен или VL домен или антительный сайт связывания антигена или молекулы антитела, например, scFv или IgG1, как обеспечено, сама по себе образует аспект данного изобретения, как способ продуцирования кодированного продукта, где способ включает экспрессию из кодирующей его нуклеиновой кислоты. Экспрессия может быть традиционно достигнута путем культивирования в соответствующих условиях, где рекомбинантные клетки-хозяева содержат нуклеиновую кислоту. После продуцирования путем экспрессии VH или VL домен, или агент связывания может быть выделен и/или очищен при помощи любого приемлемого метода и затем применен в зависимости от ситуации.
[0240] Нуклеиновая кислота в соответствии с данным изобретением может содержать ДНК или РНК и может быть полностью или частично синтетической. Ссылка на нуклеотидную последовательность, как приведено в данной заявке, охватывает ДНК молекулу с указанной последовательностью и охватывает молекулу РНК с указанной последовательностью, в которой U замещен на Т, если иное не следует из контекста.
[0241] Еще один дополнительный аспект представляет способ продуцирования VH вариабельного домена антитела, где способ включает индуцирование экспрессии кодирующих нуклеиновых кислот. Такой способ может включать культивирование клетки-хозяина в условиях продуцирования VH вариабельного домена указанного антитела.
[0242] Аналогичные способы продуцирования VL вариабельного домена и агентов связывания, включающий VH и/или VL домен, обеспечен в качестве дополнительного аспекта данного изобретения.
[0243] Способ продуцирования может включать стадию выделения и/или очистки продукта. Способ продуцирования может включать составление продукта в композицию, содержащую как минимум один дополнительный компонент, такой, как фармацевтически приемлемый эксципиент.
[0244] Системы клонирования и экспрессии полипептида во множестве различных клеток-хозяев хорошо известны. Приемлемые клетки-хозяева включают бактерии, клетки млекопитающих, растительные клетки, гифомицеты, дрожжи и бакуловирусные системы и трансгенные растения и животные. Антитела и фрагменты антител экспрессирующие в прокариотических клетках хорошо известны из уровня техники. Обзор приведен в (, А. (1991) Bio/Technology 9: 545-551). Традиционным бактериальным хозяином является Е. coli.
[0245] Экспрессия эукариотических клеток в культуре также доступна специалистам в данной области, как возможность для продуцирования агентов связывания (Chadd НЕ and Chamow SM (2001) Current Opinion in Biotechnology 12: 188-194; Andersen DC and Krurnmen L (2002) Current Opinion in Biotechnology 13: 117; Larrick JW and Thomas DW (2001) Current Opinion in Biotechnology 12:411-418). Клеточные линии млекопитающих, доступные в данной области для экспрессии гетерологического полипептида включают клетки яичников китайских хомячков (ЯКХ), HeLa клетки, клетки почек новорожденных хомяков, меланомные клетки NS0 мыши, миеломные клетки YB2/0 крысы, клетки почек человеческих эмбрионов, клетки сетчатки человеческих эмбрионов и многие другие.
[0246] Могут быть выбраны или сконструированы приемлемые векторы, содержащие соответствующие регуляторные последовательности, включая промоторные последовательности, терминаторные последовательности, последовательности полиаденилирования, энхансерные последовательности, маркерные гены и другие последовательности, в зависимости от ситуации. Векторами могут быть плазмиды, например, фагмиды, или вирусный, например, ‘фаг, в зависимости от ситуации (Sambrook and Russell, Molecular Cloning: a Laboratory Manual: 3rd edition, 2001, Cold Spring Harbor Laboratory Press). Многие известные способы и протоколы манипуляций с нуклеиновыми кислотами, например при получении конструктов нуклеиновых кислот, мутагенеза, секвенирования, введения ДНК в клетки и генной экспрессии и анализа белков, подробно описаны в Ausubel et al. (Ausubel et al. eds., Short Protocols in Molecular Biology: A Compendium of Methods from Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, 4th edition 1999).
[0247] Дополнительный аспект данного изобретения представляет клетку-хозяина, содержащую нуклеиновую кислоту, как описано в данной заявке. Такая клетка-хозяин может быть in vitro и может быть в культуре. Такая клетка-хозяин может быть in vivo. In vivo присутствие клетки-хозяина может позволить внутриклеточную экспрессию агента связывания в соответствии с данным изобретением как "интрабоди" или внутриклеточные антитела. Интрабоди могут быть использованы для генной терапии.
[0248] Еще один дополнительный аспект представляет способ, включающий введение нуклеиновой кислоты в соответствии с данным изобретением в клетку-хозяин. Введение может задействовать любую доступную методику. Для эукариотических клеток, приемлемые методики могут включать трансфекцию фосфата кальция, диэтиламиноэтилдекстран, электропорацию, липосомно-опосредованную трансфекцию и передачу сигналов с использованием ретровируса или другого вируса, например, вакцин или, для инертных клеток, бакуловируса. Введение нуклеиновой кислоты в клетку-хозяин, в частности, эукариотическую клетку, может использовать вирусную или плазмидную систему. Плазмидная система может быть сохранена эписомально или может быть включена в клетку-хозяина или в искусственные хромосомы. Введение может быть рандомизованной или направленной интеграцией одной или более копий в одном или более местах. Для бактериальных клеток, приемлемые методы могут включать трансформацию хлорида кальция, электропорацию и трансфекцию при помощи бактериофага.
[0249] За введением может следовать индуцирование или разрешение экспрессии из нуклеиновой кислоты, например, путем культивирования клетки-хозяина в условиях экспрессии гена. Очистка экпрессированного продукта может быть достигнута способами, известными специалисту в данной области.
[0250] Нуклеиновая кислота в соответствии с данным изобретением может быть интегрирована в геном (например, хромосом) клетки-хозяина. Интеграция может быть промоутирована путем включения последовательности, которая промоутирует рекомбинацию с геномом, в соответствии со стандартным методом.
[0251] Данное изобретение также представляет способ, включающий применение конструкта, как указано выше, в системе экспрессии для экспрессии агента связывания или полипептида, как указано выше.
[0252] Существует свидетельство участия IL-6 в различных расстройствах, как обсуждено во всей данной заявке. Агенты связывания в соответствии с данным изобретением могут, поэтому быть применены в способе диагностики или лечения расстройства, связанного с IL-6. Такое расстройство может быть, например, воспалительным и/или аутоиммунным расстройством, таким, как, например, ревматоидный артрит, остеоартрит, кахексия, хроническое обструктивное легочное заболевание (ХОБЛ), ювенильный идиопатический артрит, астма, системной красной волчанки, воспалительное заболевание кишечника, болезнь Хрона или атеросклероз. Агент связывания в соответствии с данным изобретением может быть также, применен для лечения такого расстройства, как опухоль и/или рак. Дополнительно, агент связывания в соответствии с данным изобретением может быть использован для лечения и/или профилактики боли, возникающей в результате или связанной с заболеваниями или состояниями, указанными в данной заявке. Агент связывания в соответствии с данным изобретением может быть также применен в способе диагностики или лечения как минимум одного связанного с IL-6 заболевания, у пациента, животного, органа, ткани или клетки, включая, но не ограничиваясь приведенным: обструктивные заболевания дыхательных путей, включая хроническое обструктивное легочное заболевание (ХОБЛ); астму, такую, как бронхиальная, аллергическая, врожденная, наружная астма или астма на пыль, в частности хроническая или застарелая астма (например, поздняя астма и гипервосприимчивость дыхательных путей); бронхит; острый-, аллергический-, атрофический ринит и хронический ринит, включая вазомоторный ринит с казеозными пробками, гипертрофический ринит, гнойный ринит, сухой ринит и медикаментозный ринит; оболочечный ринит, включая крупозный, фиброзный и псевдооболочечный ринит и скрофулезный ринит; сезонный ринит, включая нейрогенный ринит (сенную лихорадку) и вазомоторный ринит, синусит, интерстециальный фиброз легких (ИФЛ); саркоидоз, аллергический альвеолит у сельскохозяйственных рабочих и родственные заболевания, синдром острой дыхательной недостаточности у взрослых, пневмония гиперчувствительности, пневмосклероз и идиопатическую интерстициальную пневмонию; ревматоидный артрит, ювенильный хронический артрит, ювенильный идиопатический артрит с системным началом, серонегативную спондилоартропатию, включая анкилозирующий спондилит, псориатический артрит и триаду Рейтера), синдром Бехчета, синдром Шегрена и системный склероз, подагру, остеопороз и остеоартрит; псориаз, атопический дерматит, контактный дерматит и другие экзематозные дерматозы, аллергический контактный дерматит, себоррейный дерматит, красный плоский лишай, склеродерму, пемфигус, буллезный пемфигоид, буллезный эпидермоз, крапивницу, ангиобласты, васкулиты, эритемы, кожные эозинофилии, увеиты, очаговую алопецию, аллергический конъюнктивит и верналвермальный конъюнктивит;
язву желудка (желудочно-кишечного тракта), целиакию, проктит, эозинофильный гастроэнтерит, мастоцит, воспалительное заболевание кишечника, болезнь Хрона, язвенный колит, антифосфолипидный синдром)), пищевые аллергии, которые имеют воздействия, удаленные от кишки, например, мигрень, ринит и экзема; кахексию, рассеянный склероз, атеросклероз, синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД), мезенгиальный пролиферативный гломерулонефрит, нефротический синдром, нефрит, гломерулонефрит, острую почечную недостаточность, гемодиализ, уремию, локализованную или дискоидную красную волчанку, системную красную волчанку, болезнь Кастлемана, тиреоидит Хашимото, миастению гравис, диабет I типа, инсулинрезистентный диабет типа В, серповидно-клеточную анемию, иридоциклит/увеит/оптический неврит, нефритический синдром, эозинофильный фасцит, гипер IgE синдром, системный васкулит/гранулематоз Вегенера, орхит/процедуры реверсивной вазэктомии, лепроматозная лепра, алкогольный гепатит, ретикулез Сезари и идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура; послеоперационные спайки, нефроз, синдром системной воспалительной реакции, сепсисный синдром, грампозитивный сепсис, грамнегативный сепсис, культурно-отрицательный сепсис, грибковый сепсис, нейтропеническую лихорадку, острый панкреатит, уросепсис, диффузный токсический зоб, болезнь Рейно, антитело-опосредованную цитотоксичность, реакции гиперчувствительности типа III, синдром Кроу-Фукаса (полинейропатию, органомегалию, эндокринопатию, моноклональную гаммопатию и синдром изменений кожи), смешанное поражение соединительной ткани, идиопатическую бронзовая болезнь, сахарный диабет, хронический активный гепатит, первичный билиарный синдром, витилиго, синдром после инфаркта миокарда (кардиотомический синдром), гиперчувствительность типа IV, гранулемы, вызванные внутриклеточными организмами, болезнь Вильсона, гемохроматоз, дефицит альфа-I-антитрипсина, диабетическая ретинопаия, тироидит Хашимото, оценку гипоталамо-гипофизарной-адренальной оси, тироидит, энцефаломиелит, хроническое легочное заболевание новорожденных, наследственный гематофагоцитарный лимфогистоцитоз, аллопецию, лучевую терапию (например, включая, но, не ограничиваясь приведенным, астению, анемию, кахексию и т.п.), хроническую салицилатную интоксикацию, приступы апноэ во сне, ожирение, сердечную недостаточность и менингококкемию; острые и хронические заболевания после, например, трансплантации почек, сердца, печени, легкого, поджелудочной желез, костного мозга, кости, тонкой кишки, кожи, хряща и роговой оболочки; и хроническое заболевание «трансплантат против хозяина»; лейкемию, острую лимфобластную лейкемию (ALL), острую лейкемию, Т-клеточную, В-клеточную или FAB (по франко-американской классификации) острую лимфоцитарную лейкемию, хроническую миелоцитарную лейкемию (ХМЛ), острую миелоидную лейкемию (ОМЛ), хроническую лимфоцитарную лейкемию (ХЛЛ), лейкемию волосатых клеток, миелодипластический синдром (МДС), любую лимфому, заболевание Ходжкина, не-ходжкинскую лимфому, любую злокачественную лимфому, лимфому Буркитта, множественную миелому, саркому Капоши, почечно-клеточный рак, колоректальную карциному, карциному простаты, карциному поджелудочной железы, назофарингеальную карциному, злокачественный гистиоцитоз, паранеоплатический синдром/злокачественную гиперкалциемию, солидные опухоли, аденокарциномы, саркомы, злокачественную меланому, гемангиому, метастатическое заболевание, резорбцию костей, связанную с раком, костную боль, связанную с раком; подавление раковых метастаз; улучшение раковой кахексии; кистозный фиброз, инсульт, реперфузионное поражение сердца, мозга, периферийных конечностей и других органов; ожоговые раны, травму/кровоизлияние, воздействие ионизирующего излучения, хронические язвы кожи; заболевания репродуктивных органов (например, расстройств овуляции, менструации и имплантации, преждевременные роды, преэклампсию, эндометриоз); острую или хроническую бактериальную инфекцию, острые или хронические паразитарные или инфекционные процессы, включая бактериальные, вирусные и грибковые инфекции, ВИЧ инфекцию/ВИЧ нейропатию, менингит, гепатит (А, В или С, или другой вирусный гепатит т.п.), септический артрит, перитонит, пневмонию, эпиглоттит, е. coli 0157:h7, гемолитический уретический синдром/тромботическую тромбоцитопеническую пурпуру, малярию, гемморагическую форму лихорадки Денге, лейшманиоз, проказу, синдром токсического шока, стрептококковый миозит, газовую гангрену, микобактерию туберкулеза, комплекс mycobacterium avium, пневмония пневмоциста Каринии, воспалительное заболевание тазовых органов, орхит/эпидидимит, легионеллу, болезнь Лайма, грипп А, вирус Эпштейна-Барр, связанный с жизненно важными органами гемафагоцитарный синдром, вирусный энцефалит/асептический менингит, депрессию и т.п. Соответственно, данное изобретение представляет способ лечения расстройства, связанного с IL-6, включающий введение пациенту, который нуждается в этом, эффективного количества одного или более агентом связывания в соответствии с данным изобретением отдельно или в режиме комбинационной терапии с другим соответствующим медикаментом, известным из уровня техники или описанным в данной заявке.
[0253] В одном варианте исполнения, расстройством, связанным с IL-6, является депрессия - также, указанная в данной заявке, как глубокое депрессивное расстройство. Глубокое депрессивное расстройство (также известное, как и указанное, в данной заявке, как клиническая депрессия, глубокая депрессия, монополярная депрессия, или монополярное расстройство) представляет собой психическое расстройство, характеризующееся охватывающим все пониженным настроением, сопровождающимся низкой самооценкой и потерей интереса или удовольствия от активности, обычно приносящей удовольствие. Термин "глубокое депрессивное расстройство" был выбран Американской Психиатрической Ассоциацией для обозначения данного кластера симптомов как расстройства настроения в версии классификации от 1980 г. Диагностико-статистического руководства по психическим расстройствам (ДСР-III) и с тех пор стало широко используемым. Общий термин «депрессия» часто используют для обозначения данного расстройства, но он может быть также использован для ссылки на другие типы физиологической депрессии, более точная терминология является преимущественной для расстройства при клиническом и исследовательском применении. Глубокая депрессия является состоянием, лишающим трудоспособности. Она неблагоприятно влияет на членов семейства, работу и учебу, сон и пищевые привычки и общее состояние здоровья.
[0254] Депрессия часто сопутствует заболеваниям, включающим системное воспаление. Системное воспаление наблюдают у многих пациентов с депрессией, что выражено повышенными уровнями биомаркеров воспаления в плазме. Дополнительно, активированные маршруты цитокиновых сигналов могут быть детектированы в крови и колинестимулирующего фактора пациентов с депрессией. Дополнительно, цитокины (IFN-a, IL-2) могут вызывать симптомы глубоких депрессивных расстройства у медицински больных пациентов, не имеющих психиатрических заболеваний в анамнезе. Соответственно, данное изобретение представляет способ лечения депрессии, включающий введение пациенту, который нуждается в этом, эффективного количества одного или более агентов связывания в соответствии с данным изобретением отдельно или в режиме комбинационной терапии с другим соответствующим медикаментом, известным из уровня техники, например, антидепрессантом, таким, как селективные ингибиторы обратного захвата серотонина (СИПЗС), таким, как сертралин, эсциталопрам, флуоксетин, пароксетин и питалопрам; или описанным в данной заявке.
[0255] Агенты связывания в соответствии с данным изобретением также имеют анальгетические свойства. Как таковые, они пригодны в качестве анальгетиков для лечения и/или профилактики боли, связанной с заболеваниями, приведенными в данной заявке, а также хронической и острой боли, которая возникает в результате или связана с ранами, медицинскими процедурами, хирургическими вмешательствами, поражениями, травмой и т.д. Например, агенты связывания могут быть использованы в качестве облегчителей боли - анальгетиков после хирургических вмешательств. Они могут быть также применены для лечения или профилактики боли, связанной с анкилозирующим спондилитом, воспалительным люмбаго, нейропатической болью, болезненной невомой, фибромиалгией, головными болями, например, хроническими головными болями и мигренями, панкреатитом, синдромами сдавливания спинномозгового нерва и не-злокачественной склетеной болью, воспалительной отеоартритной болью, болью, вызванной ревматоидным артритом, болью, вызванной раком, например, болью, вызванной раком кости.
[0256] Агенты связывания в соответствии с данным изобретением также могут быть использованы для лечения легочной гипертензии, связанной с несколькими заболеваниями, такими, как, но, не ограничиваясь приведенным, ХОБЛ, склеродерма, системная красная волчанка, синдромы Кроу-Фукаса, а также идиотипическая легочная гипертензия. Повышенные IL-6 уровни были сообщены для пациентов с легочной гипертензией, связанной со многими такими состояниями (Savale, L. et al. Respir. Res. (2009) 10, 6 и ссылки, приведенные там; Steiner, М.К. et al. Circ. Res. (2009) 104(2) 236-244 и ссылки, приведенные там). IL-6-дефицитные мыши, которых подвергали гипоксии, показывали пониженное систолическое кровяное давление правого желудочка и пониженную гипертрофию правого желудочка по сравнению с WT мышами, которых подвергали гипоксии (Savale, L. et al. Respir. Res. (2009) 10, 6 и ссылки, приведенные там). Дополнительно, у трансгенных мышей с чрезмерной экспрессией IL-6 развивалась повышенная гипертрофия правого желудочка и повышенное систолическое кровяное давление правого желудочка в условиях гипоксии по сравнению с нетрансгенными контрольными мышами (Steiner, М.К. et al. Circ. Res. (2009) 104(2) 236-244 и ссылки, приведенные там) и экзогенно введенное IL-6 усиливает развитие легочной гипертензии у мышей, которых подвергали хронической гипоксии (Golembeski, S.M. et al. Chest (2005) 128(6 Suppl) 572S-573S).
[0257] Дополнительно, пациенты со стабильным ХОБЛ, имели повышенные уровни IL-6 в сыворотке по сравнению со здоровыми контрольными пациентами (Yanbaeva, D.G. et al. ВМС Med Genet (2009) 10, 23; Savale, L. et al. Am. J. Respir. Crit Care Med. (2009) 179(7), 566-571; Eickhoff, P. et al. Am. J.Respir. Crit Care Med. (2008) 178(12) 1211-1218). Повышенные уровни IL-6 были связаны с ухудшенной функцией легких у пациентов с ХОБЛ (R.E. et al. Chest (2008) 133(1) 19-25; Thorleifesson, S.J. et al. Respir.Med. (2009) 103(10) 1548-1553). В нескольких исследованиях также сообщали про повышенные уровни IL-6 в мокроте и/или сыворотке при наступлении обострений ХОБЛ по сравнению с уровнями IL-6, которые измеряли при разрешении обострений или с уровнями IL-6, которые измеряли у пациентов со стабильным ХОБЛ (Valipour, A. et al. Clinical Science (2008) 115(7), 225-232; Groenewegen, K.H. et al. Respir. Med. (2007) 101(11) 2409-2415; Perera, W.R. et al. Er. Respir. J. (2007) 29(3), 527-534). Повышенные уровни IL-6 также были связаны с более частыми обострениями (Bhowmik, A. et al. Thorax (2000) 55(2) 114-120). Лечение мышей с анти-IL-6 антителами или мышей с недостатком IL-6 продемонстрировало уменьшенное легочное воспаление в определенных животных моделях, например индуцированном озоном легочном воспалении и индуцированном блеомецином легочном воспалении и фиброзе (Saito, F. et al. Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. (2008) 38(5) 566-571; Lang, J.E. et al. Am. J.Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. (2008) 294(5) L1013-L1020; Johnston, R.A. et al. Am. J.Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. (2005) 288(2) L390-L397). Более высокие IL-6 уровни также были связаны с определенной сопутствующей заболеваемостью ХОБЛ, например, легочной гипертензией (Chaouat, A. et al. Chest (2009) 136(3) 678-687; Eddahibi, S. et al. Proceedings of the American Thoracic Society (2006) 3(6), 475-476).
[0258] Свидетельства участия IL-6 в некоторых других заболеваниях хорошо понятны. Данные, приведенные в данной заявке и в публикации РСТ № WO 2008/065378 дополнительно указывают на то, что агенты связывания в соответствии с данным изобретением могут быть применены для лечения таких расстройств, включая профилактическое лечение и уменьшение тяжести расстройств. Соответственно, данное изобретение представляет способ лечения или уменьшения тяжести как минимум одного симптома любого из расстройств, указанных в данной заявке, включающий введение пациенту, который нуждается в этом, эффективное количество одного или более агентов связывания в соответствии с данным изобретением отдельно или в режиме комбинационной терапии с другим соответствующим медикаментом, известным из уровня техники или описанным в данной заявке, таким образом, что тяжесть как минимум одного симптома любого из приведенных выше расстройств уменьшена.
[0259] Таким образом, агенты связывания в соответствии с данным изобретением являются полезными в качестве терапевтических агентов при лечении заболеваний или расстройств, включающих IL-6 и/или IL-6Ra экспрессию и/или активность, в особенности аберрантную экспрессию/активность. Способ лечения может включать введение эффективного количества агента связывания, в соответствии с данным изобретением пациенту, который нуждается в этом, где аберрантная экспрессия и/или активность IL-6 и/или IL-6Ra уменьшена. Способ лечения может включать (i) идентификацию пациента, демонстрирующего аберрантные уровни IL-6:IL-6Ra или активность, например, с использованием способов диагностики, описанных выше, и (ii) введение эффективного количества агента связывания в соответствии с данным изобретением пациенту, где аберрантная экспрессия и/или активность IL-6Ra и/или IL-6 уменьшена. Эффективное количество в соответствии с данным изобретением представляет собой количество, которое уменьшает аберрантную экспрессию и/или активность IL-6 и/или IL-6Ra таким образом, чтобы уменьшить или минимизировать тяжесть как минимум одного симптома заболевания или расстройства, которое лечат, но не обязательно лечение заболевания или расстройства.
[0260] Данное изобретение также представляет способ антагонизирования как минимум одного эффекта IL-6, включающий контактирование или введение эффективного количества одного или более агентов связывания в соответствии с данным изобретением таким образом, что указанный как минимум один эффект IL-6 антагонизирован. Эффекты IL-6, которые могут быть антагонизированы при помощи способов в соответствии с данным изобретением, включают IL-6 связывание с gp130 и эффекты ниже, которые возникают вследствие такого связывания.
[0261] Соответственно, дополнительные аспекты в соответствии с данным изобретением обеспечивают способы лечения, включающие введение агента связывания, фармацевтические композиции, содержащие такие агенты связывания, и применение таких агентов связывания при получении медикамента для введения, например в способе получения медикамента или фармацевтической композиции, содержащей композиции агента связывания с фармацевтически приемлемым эксципиентом. Фармацевтически приемлемый эксципиент может быть соединением или комбинацией соединений, введенными в фармацевтическую композицию, не вызывая вторичных реакций, позволяющим, например, облегчение введения активного соединения (соединений), повышение его срока действия и/или его эффективности в организме, повышение его растворимости в растворе или также улучшение его сохранности. Такие фармацевтически приемлемые основы хорошо известны и будут адаптированы специалистом в данной области в качестве функции природы и режима введения выбранного активного компонента (компонентов).
[0262] Агент связывания в соответствии с данным изобретением будет обычно введен в виде фармацевтической композиции, которая может содержать как минимум один компонент в дополнение к агенту связывания. Таким образом, фармацевтические композиции в соответствии с данным изобретением, могут содержать, в дополнение к активному ингредиенту, фармацевтически приемлемый эксципиент, носитель, буфер, стабилизатор или другие материалы, известные специалистам в данной области. Такие материалы должны быть нетоксичными и не должны препятствовать эффективности активного ингредиента. Точная природа носителя или другого материала будет зависеть от маршрута введения, который может быть пероральным, через вдыхание, интратрахеальным, местным, внутрипузырьковым или путем инъекции, как обсуждено ниже.
[0263] Данное изобретение относится к стерильным стабильным фармацевтическим композициям, содержащим антитело в соответствии с данным изобретением.
[0264] Данное изобретение представляет способы стабилизации антитела в соответствии с данным изобретением.
[0265] Данное изобретение дополнительно относится к способам получения стерильной стабильной композиции, содержащей антитело в соответствии с данным изобретением.
[0266] Все композиции антитела в соответствии с данным изобретением описанным в заявке вместе имеют название "композиции в соответствии с данным изобретением", "жидкие композиции в соответствии с данным изобретением", "высококонцентрированные стабильные жидкие композиции в соответствии с данным изобретением", "жидкие композиции антитела в соответствии с данным изобретением", "восстановленные жидкие композиции в соответствии с данным изобретением" или "композиции антител в соответствии с данным изобретением
[0267] Фраза "фармацевтически приемлемый", как используют в данной заявке, означает утвержденный регулятивными органами федерального или государственного управления, или приведенный в Фармакопее США, Европейской фармакопее или другой в общем признанной фармакопее для применения у животных, и более конкретно у людей.
[0268] Термины "стабильность" и "стабильные", как используют в данной заявке в контексте жидкой композиции, содержащей антитело (включая его антительные фрагменты) в соответствии с данным изобретением, относится к сопротивлению антитела (включая его антительные фрагменты) в композиции к агрегации, распаду или фрагментации при данных условиях производства, получения, транспортировки и хранения. "Стабильные" композиции в соответствии с данным изобретением сохраняют биологическую активность при данных условиях производства, получения, транспортировки и хранения. Стабильность указанного антитела (включая его антительные фрагменты) может быть оценена в степенях агрегации, распада или фрагментации, согласно измерениям ВЭЭХ, обращеннофазной хроматографии, статического рассеяния света (СРС), инфракрасной спектроскопии с Фурье-преобразованием (FT-ИК), циркулярного дихроизма (ЦЦ), методов разворачивания мочевины, собственной флуоресценции триптофана, дифференциальной сканирующей калориметрии, и/или методов связывания АНС, по сравнению с реперной композицией. Например, реперная композиция может быть реперным стандартом, замороженным при -70°C, состоящим из 10 мг/мл антитела (включая его антительные фрагменты) в гистидине, рН 6,0-6,5 и необязательно одним или более эксципиентами, где реперная композиция регулярно дает один мономерный пик (например, ≥97% площади) при помощи ВЭЭХ. Общая стабильность композиции, содержащей антитело (включая его антительные фрагменты) может быть оценена при помощи различных иммунологических анализов, включая, например, ELISA и радиоиммунологическое исследование с использованием выделенных молекул антигена.
[0269] Фраза "низкий к детектируемым уровням агрегации", которую используют в данной заявке, относится к пробам, содержащим не более, чем приблизительно 5%, не более чем приблизительно 4%, не более чем приблизительно 3%, не более чем приблизительно 2%, не более чем приблизительно 1% и не более чем приблизительно 0,5% агрегации по массе белка согласно измерениям методами высокоэффективной эксклюзионной хроматографии (ВЭЭХ) или статического рассеяния света (СРС).
[0270] Термин "низкий к детектируемым уровням фрагментации", которую используют в данной заявке, относится к пробам, содержащим равное или большее количество, чем приблизительно 80%, приблизительно 85%, приблизительно 90%, приблизительно 95%, приблизительно 98% или приблизительно 99% общего содержания белка, например, в одном пике, как определено при помощи ВЭЭХ или обращеннофазной эхохроматографии, или в двух пиках (например, тяжелой и легкой цепи) (или в виде множества пиков, поскольку они являются субъединицами) при помощи восстановленного капиллярного гель-электрфореза (рКГЭ), представляющего нераспавшиеся антитела или его нераспавшийся фрагмент и не содержащего другие одинарные пики, имеющие более чем приблизительно 5%, более чем приблизительно 4%, более чем приблизительно 3%, более чем приблизительно 2%, более чем приблизительно 1%, или более чем приблизительно 0,5% общего содержания белка в каждом. Термин "восстановленный капиллярный гель-электрофорез", которую используют в данной заявке, относится к капиллярному гель-электрофорезу в условиях, достаточных для восстановления дисульфидных связей в антителе.
[0271] Данное изобретение относится к стабильным высококонцентрированным композициям антитела в соответствии с данным изобретением. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является жидкой композицией. В другом варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является лиофилизованной композицией. В дополнительном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является восстановленной жидкой композицией.
[0272] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является стабильной жидкой композицией. В одном варианте исполнения, жидкая композиция в соответствии с данным изобретением является водной композицией. В конкретном варианте исполнения, жидкая композиция в соответствии с данным изобретением является жидкой композицией, в которой жидкий носитель является дистиллированной водой.
[0273] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является стерильной.
[0274] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является гомогенной.
[0275] B одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является изотонической.
[0276] Данное изобретение охватывает стабильные жидкие композиции, содержащие одно рассматриваемое антитело (включая их антительные фрагменты), например, антитело, которое специфично связывается с IL-6. Данное изобретение также охватывает стабильные жидкие композиции, содержащие два или более рассматриваемых антител (включая их антительные фрагменты), например, антитела которые специфично связывают IL-6 полипептид(ы).
[0277] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит как минимум приблизительно 1 мг/мл, как минимум приблизительно 5 мг/мл, как минимум приблизительно 10 мг/мл, как минимум приблизительно 20 мг/мл, как минимум приблизительно 30 мг/мл, как минимум приблизительно 40 мг/мл, как минимум приблизительно 50 мг/мл, как минимум приблизительно 60 мг/мл, как минимум приблизительно 70 мг/мл, как минимум приблизительно 80 мг/мл, как минимум приблизительно 90 мг/мл, как минимум приблизительно 100 мг/мл, как минимум приблизительно 110 мг/мл, как минимум приблизительно 120 мг/мл, как минимум приблизительно 130 мг/мл, как минимум приблизительно 140 мг/мл, как минимум приблизительно 150 мг/мл, как минимум приблизительно 160 мг/мл, как минимум приблизительно 170 мг/мл, как минимум приблизительно 180 мг/мл, как минимум приблизительно 190 мг/мл, как минимум приблизительно 200 мг/мл, как минимум приблизительно 250 мг/мл, или как минимум приблизительно 300 мг/мл анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит как минимум приблизительно 100 мг/мл анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит как минимум приблизительно 125 мг/мл анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит как минимум приблизительно 130 мг/мл анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит как минимум приблизительно 150 мг/мл анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит как минимум приблизительно 90 мг/мл анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением. В другом варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит от приблизительно 1 мг/мл до приблизительно 25 мг/мл, от приблизительно 1 мг/мл до приблизительно 200 мг/мл, от приблизительно 25 мг/мл до приблизительно 200 мг/мл, от приблизительно 50 мг/мл до приблизительно 200 мг/мл, от приблизительно 75 мг/мл до приблизительно 200 мг/мл, от приблизительно 100 мг/мл до приблизительно 200 мг/мл, от приблизительно 125 мг/мл до приблизительно 200 мг/мл, от приблизительно 150 мг/мл до приблизительно 200 мг/мл, от приблизительно 25 мг/мл до приблизительно 150 мг/мл, от приблизительно 50 мг/мл до приблизительно 150 мг/мл, от приблизительно 75 мг/мл до приблизительно 150 мг/мл, от приблизительно 100 мг/мл до приблизительно 150 мг/мл, от приблизительно 125 мг/мл до приблизительно 150 мг/мл, от приблизительно 25 мг/мл до приблизительно 125 мг/мл, от приблизительно 50 мг/мл до приблизительно 125 мг/мл, от приблизительно 75 мг/мл до приблизительно 125 мг/мл, от приблизительно 100 мг/мл до приблизительно 125 мг/мл, от приблизительно 25 мг/мл до приблизительно 100 мг/мл, от приблизительно 50 мг/мл до приблизительно 100 мг/мл, от приблизительно 75 мг/мл до приблизительно 100 мг/мл, от приблизительно 25 мг/мл до приблизительно 75 мг/мл, от приблизительно 50 мг/мл до приблизительно 75 мг/мл, или от приблизительно 25 мг/мл до приблизительно 50 мг/мл анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит от приблизительно 90 мг/мл до приблизительно 110 мг/мл анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит от приблизительно 100 мг/мл до приблизительно 210 мг/мл анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением. В дополнительном варианте исполнения, композиция описанная в данной заявке содержит приблизительно 20 мг/мл, приблизительно 30 мг/мл, приблизительно 40 мг/мл, приблизительно 50 мг/мл, приблизительно 60 мг/мл, приблизительно 70 мг/мл, приблизительно 80 мг/мл, приблизительно 90 мг/мл, приблизительно 100 мг/мл, приблизительно 110 мг/мл, приблизительно 120 мг/мл, приблизительно 130 мг/мл, приблизительно 140 мг/мл, приблизительно 150 мг/мл, приблизительно 160 мг/мл, приблизительно 170 мг/мл, приблизительно 180 мг/мл, приблизительно 190 мг/мл, приблизительно 200 мг/мл, приблизительно 250 мг/мл, или приблизительно 300 мг/мл анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит приблизительно 100 мг/мл анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит приблизительно 125 мг/мл анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит приблизительно 130 мг/мл анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит приблизительно 150 мг/мл анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит приблизительно 200 мг/мл анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением.
[0278] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит как минимум 1 мг/мл, как минимум 5 мг/мл, как минимум 10 мг/мл, как минимум 20 мг/мл, как минимум 30 мг/мл, как минимум 40 мг/мл, как минимум 50 мг/мл, как минимум 60 мг/мл, как минимум 70 мг/мл, как минимум 80 мг/мл, как минимум 90 мг/мл, как минимум 100 мг/мл, как минимум 110 мг/мл, как минимум 120 мг/мл, как минимум 130 мг/мл, как минимум 140 мг/мл, как минимум 150 мг/мл, как минимум 160 мг/мл, как минимум 170 мг/мл, как минимум 180 мг/мл, как минимум 190 мг/мл, как минимум 200 мг/мл, как минимум 250 мг/мл, или как минимум 300 мг/мл анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит как минимум 100 мг/мл анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит как минимум 125 мг/мл анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит как минимум 150 мг/мл анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит как минимум 175 мг/мл анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит как минимум 200 мг/мл анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением. В другом варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит от 1 мг/мл до 25 мг/мл, от 1 мг/мл до 200 мг/мл, от 25 мг/мл до 200 мг/мл, от 50 мг/мл до 200 мг/мл, от 75 мг/мл до 200 мг/мл, от 100 мг/мл до 200 мг/мл, от 125 мг/мл до 200 мг/мл, от 150 мг/мл до 200 мг/мл, от 25 мг/мл до 150 мг/мл, от 50 мг/мл до 150 мг/мл, от 75 мг/мл до 150 мг/мл, от 100 мг/мл до 150 мг/мл, от 125 мг/мл до 150 мг/мл, от 25 мг/мл до 125 мг/мл, от 50 мг/мл до 125 мг/мл, от 75 мг/мл до 125 мг/мл, от 100 мг/мл до 125 мг/мл, от 25 мг/мл до 100 мг/мл, от 50 мг/мл до 100 мг/мл, от 75 мг/мл до 100 мг/мл, от 25 мг/мл до 75 мг/мл, от 50 мг/мл до 75 мг/мл, или от 25 мг/мл до 50 мг/мл анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит от 90 мг/мл до 110 мг/мл анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит от 100 мг/мл до 210 мг/мл анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением. В дополнительном варианте исполнения, композиция описанная в данной заявке содержит 20 мг/мл, 30 мг/мл, 40 мг/мл, 50 мг/мл, 60 мг/мл, 70 мг/мл, 80 мг/мл, 90 мг/мл, 100 мг/мл, 110 мг/мл, 120 мг/мл, 130 мг/мл, 140 мг/мл, 150 мг/мл, 160 мг/мл, 170 мг/мл, 180 мг/мл, 190 мг/мл, 200 мг/мл, 250 мг/мл, или 300 мг/мл анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит 100 мг/мл анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит 125 мг/мл анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит 150 мг/мл анти-IL-6 антитела. В конкретном варианте исполнения, композиция содержит 175 мг/мл анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением. В конкретном варианте исполнения, композиция содержит 200 мг/мл анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением.
[0279] Необязательно, композиции в соответствии с данным изобретением могут дополнительно содержать традиционные эксципиенты и/или добавки, такие, как буферные агенты, сахариды, соли и поверхностно-активные вещества. Дополнительно или альтернативно, композиции в соответствии с данным изобретением, могут содержать традиционные эксципиенты и/или добавки, такие, как, но, не ограничиваясь приведенным, солюбилизаторы, разбавители, связывающие вещества, стабилизаторы, соли, липофильные растворители, аминокислоты, хелаторы, консерванты, или т.п.
[0280] В определенных вариантах исполнения, буферный агент выбирают из группы, состоящей из гистидина, цитрата, фосфата, глицина, ацетата. В других вариантах исполнения сахаридный эксципиент выбирают из группы, состоящей из трегалозы, сукрозы, маннитола, мальтозы и раффинозы. В еще одних вариантах исполнения поверхностно-активное вещество выбирают из группы, состоящей из полисорбата 20, полисорбата 40, полисорбата 80 и Плюроник F68. В еще одних вариантах исполнения соль выбирают из группы, состоящей из NaCl, KCl, MgCl2 и CaCl2.
[0281] Необязательно, композиции в соответствии с данным изобретением могут дополнительно содержать другие обычные вспомогательные компоненты, такие как, но, не ограничиваясь приведенным, приемлемые эксципиенты, полиолы, солюбилизаторы, разбавители, связывающие вещества, стабилизаторы, липофильные растворители, хелаторы, консерванты, или т.п.
[0282] Композиции в соответствии с данным изобретением содержат буферный или регулирующий рН агент для обеспечения улучшенного контроля значения рН. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением имеет значение рН, составляющее от приблизительно 3,0 до приблизительно 9,0, от приблизительно 4,0 до приблизительно 8,0, от приблизительно 5,0 до приблизительно 8,0, от приблизительно 5,0 до приблизительно 7,0, от приблизительно 5,0 до приблизительно 6,5, от приблизительно 5,5 до приблизительно 8,0, от приблизительно 5,5 до приблизительно 7,0, или от приблизительно 5,5 до приблизительно 6,5. В дополнительном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением имеет значение рН, составляющее приблизительно 3,0, приблизительно 3,5, приблизительно 4,0, приблизительно 4,5, приблизительно 5,0, приблизительно 5,1, приблизительно 5,2, приблизительно 5,3, приблизительно 5,4, приблизительно 5,5, приблизительно 5,6, приблизительно 5,7, приблизительно 5,8, приблизительно 5,9, приблизительно 6,0, приблизительно 6,1, приблизительно 6,2, приблизительно 6,3, приблизительно 6,4, приблизительно 6,5, приблизительно 6,6, приблизительно 6,7, приблизительно 6,8, приблизительно 6,9, приблизительно 7,0, приблизительно 7,5, приблизительно 8,0, приблизительно 8,5, или приблизительно 9,0. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением имеет значение рН, составляющее приблизительно 6,0.
[0283] Композиции в соответствии с данным изобретением содержат буферный или регулирующий рН агент для обеспечения улучшенного контроля значения рН. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением имеет значение рН, составляющее от 3,0 до 9,0, от 4,0 до 8,0, от 5,0 до 8,0, от 5,0 до 7,0, от 5,0 до 6,5, от 5,5 до 8,0, от 5,5 до 7,0, или от 5,5 до 6,5. В дополнительном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением имеет значение рН, составляющее 3,0, 3,5, 4,0, 4,5, 5,0, 5,1, 5,2, 5,3, 5,4, 5,5, 5,6, 5,7, 5,8, 5,9, 6,0, 6,1, 6,2, 6,3, 6,4, 6,5, 6,6, 6,7, 6,8, 6,9, 7,0, 7,5, 8,0, 8,5, или 9,0. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением имеет значение рН, составляющее 6,0. Специалист в данной области поймет, что значение рН композиции в общем, не должно быть равным изоэлектрической точке конкретного антитела (включая его антительный фрагмент) для применения в композиции.
[0284] Типично, буферный агент является солью, полученной из органической или неорганической кислоты или основания. Репрезентативные буферные агенты включают, не ограничиваясь приведенным, соли органических кислот, такие, как соли лимонной кислоты, аскорбиновой кислоты, глюконовой кислоты, карбоновой кислоты, винной кислоты, янтарной кислоты, уксусной кислоты или фталевой кислоты; Трис, трометамин гидрохлорид, или фосфатные буферы. Дополнительно, аминокислотные компоненты могут также функционировать в качестве буферных агентов. Репрезентативные аминокислотные компоненты, которые могут быть использованы в композиции в соответствии с данным изобретением в качестве буферных агентов, включают, не ограничиваясь приведенным, глицин и гистидин. В определенных вариантах исполнения, буферный агент выбирают из группы, состоящей из гистидина, цитрата, фосфата, глицина, ацетата. В конкретном варианте исполнения, буферный агент является гистидином. В другом конкретном варианте исполнения, буферный агент является цитратом. Чистота буферного агента должны быть как минимум 98%, или как минимум 99%, или как минимум 99,5%. Как используют в данной заявке, термин "чистота" в контексте гистидина относится к химической чистоте гистидина, как понимают в данной области, например, как описано в The Merck Index, 13th ed., O’Neil et al. ed. (Merck & Co., 2001).
[0285] Буферные агенты типично используют при концентрациях от приблизительно 1 мМ до приблизительно 200 мМ или любом диапазоне или значении в данном диапазоне, в зависимости от желательной ионной силы и необходимой буферной емкости. Обычные концентрации традиционных буферных агентов, которые применяют в парентеральных композициях, можно найти в: Pharmaceutical Dosage Form: Parenteral Medications, Volume 1, 2nd Edition, Chapter 5, p. 194, De Luca and Boylan, "Formulation Small Volume Parenterals", Таблица 5: Commonly used additives in Parenteral Products. В одном варианте исполнения, буферный агент имеет концентрацию, составляющую приблизительно 1 мМ, или приблизительно 5 мМ, или приблизительно 10 мМ, или приблизительно 15 мМ, или приблизительно 20 мМ, или приблизительно 25 мМ, или приблизительно 30 мМ, или приблизительно 35 мМ, или приблизительно 40 мМ, или приблизительно 45 мМ, или приблизительно 50 мМ, или приблизительно 60 мМ, или приблизительно 70 мМ, или приблизительно 80 мМ, или приблизительно 90 мМ, или приблизительно 100 мМ. В одном варианте исполнения, буферный агент имеет концентрацию, составляющую 1 мМ, или 5 мМ, или 10 мМ, или 15 мМ, или 20 мМ, или 25 мМ, или 30 мМ, или 35 мМ, или 40 мМ, или 45 мМ, или 50 мМ, или 60 мМ, или 70 мМ, или 80 мМ, или 90 мМ, или 100 мМ. В конкретном варианте исполнения, буферный агент имеет концентрацию, составляющую приблизительно от 5 мМ до приблизительно 50 мМ. В другом конкретном варианте исполнения, буферный агент имеет концентрацию, составляющую от 5 мМ до 20 мМ.
[0286] В дополнительном варианте исполнения, буферный агент имеет концентрацию, составляющую 1 мМ, или 5 мМ, или 10 мМ, или 15 мМ, или 20 мМ, или 25 мМ, или 30 мМ, или 35 мМ, или 40 мМ, или 45 мМ, или 50 мМ, или 60 мМ, или 70 мМ, или 80 мМ, или 90 мМ, или 100 мМ. В одном варианте исполнения, буферный агент имеет концентрацию, составляющую 1 мМ, или 5 мМ, или 10 мМ, или 15 мМ, или 20 мМ, или 25 мМ, или 30 мМ, или 35 мМ, или 40 мМ, или 45 мМ, или 50 мМ, или 60 мМ, или 70 мМ, или 80 мМ, или 90 мМ, или 100 мМ. В конкретном варианте исполнения, буферный агент имеет концентрацию, составляющую от 5 мМ до 50 мМ. В другом конкретном варианте исполнения, буферный агент имеет концентрацию, составляющую от 5 мМ до 20 мМ.
[0287] В определенных вариантах исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит буферный агент. В одном варианте исполнения, указанный буферный агент выбирают из группы, состоящей из гистидина, цитрата, фосфата, глицина, ацетата. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит гистидин в качестве буферного агента.
[0288] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит как минимум приблизительно 1 мМ, как минимум приблизительно 5 мМ, как минимум приблизительно 10 мМ, как минимум приблизительно 20 мМ, как минимум приблизительно 30 мМ, как минимум приблизительно 40 мМ, как минимум приблизительно 50 мМ, как минимум приблизительно 75 мМ, как минимум приблизительно 100 мМ, как минимум приблизительно 150 мМ, или как минимум приблизительно 200 мМ гистидина. В другом варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит от приблизительно 1 мМ до приблизительно 200 мМ, от приблизительно 1 мМ до приблизительно 150 мМ, от приблизительно 1 мМ до приблизительно 100 мМ, от приблизительно 1 мМ до приблизительно 75 мМ, от приблизительно 10 мМ до приблизительно 200 мМ, от приблизительно 10 мМ до приблизительно 150 мМ, от приблизительно 10 мМ до приблизительно 100 мМ, от приблизительно 10 мМ до приблизительно 75 мМ, от приблизительно 10 мМ до приблизительно 50 мМ, от приблизительно 10 мМ до приблизительно 40 мМ, от приблизительно 10 мМ до приблизительно 30 мМ, от приблизительно 20 мМ до приблизительно 75 мМ, от приблизительно 20 мМ до приблизительно 50 мМ, от приблизительно 20 мМ до приблизительно 40 мМ, или от приблизительно 20 мМ до приблизительно 30 мМ гистидина. В дополнительном варианте исполнения в соответствии с данным изобретением содержит приблизительно 1 мМ, приблизительно 5 мМ, приблизительно 10 мМ, приблизительно 20 мМ, приблизительно 25 мМ, приблизительно 30 мМ, приблизительно 35 мМ, приблизительно 40 мМ, приблизительно 45 мМ, приблизительно 50 мМ, приблизительно 60 мМ, приблизительно 70 мМ, приблизительно 80 мМ, приблизительно 90 мМ, приблизительно 100 мМ, приблизительно 150 мМ, или приблизительно 200 мМ гистидина. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит приблизительно 10 мМ гистидина.
[0289] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит как минимум 1 мМ, как минимум 5 мМ, как минимум 10 мМ, как минимум 20 мМ, как минимум 30 мМ, как минимум 40 мМ, как минимум 50 мМ, как минимум 75 мМ, как минимум 100 мМ, как минимум 150 мМ, или как минимум 200 мМ гистидина. В другом варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит от 1 мМ до 200 мМ, от 1 мМ до 150 мМ, от 1 мМ до 100 мМ, от 1 мМ до 75 мМ, от 10 мМ до 200 мМ, от 10 мМ до 150 мМ, от 10 мМ до 100 мМ, от 10 мМ до 75 мМ, от 10 мМ до 50 мМ, от 10 мМ до 40 мМ, от 10 мМ до 30 мМ, от 20 мМ до 75 мМ, от 20 мМ до 50 мМ, от 20 мМ до 40 мМ, или от 20 мМ до 30 мМ гистидина. В дополнительном варианте исполнения в соответствии с данным изобретением включает 1 мМ, 5 мМ, 10 мМ, 20 мМ, 25 мМ, 30 мМ, 35 мМ, 40 мМ, 45 мМ, 50 мМ, 60 мМ, 70 мМ, 80 мМ, 90 мМ, 100 мМ, 150 мМ, или 200 мМ гистидина. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит 10 мМ гистидина.
[0290] В определенных вариантах исполнения, композиции в соответствии с данным изобретением содержать углеводный эксципиент. Углеводные эксципиенты могут действовать, например, в качестве агентов, увеличивающих вязкость, стабилизаторов, объемообразующих агентов, солюбилизирующих агентов, и/или т.п. Углеводные эксципиенты в общем присутствуют при от приблизительно 1% до приблизительно 99% по массе или объему. В одном варианте исполнения, углеводный эксципиент присутствует при приблизительно от 0,1% до приблизительно 20%. В другом варианте исполнения, углеводный эксципиент присутствует при приблизительно от 0,1% до приблизительно 15%. В конкретном варианте исполнения, углеводный эксципиент присутствует при приблизительно от 0,1% до приблизительно 5%, или приблизительно от 1% до приблизительно 20%, или приблизительно от 5% до приблизительно 15%, или приблизительно от 8% до приблизительно 10%, или приблизительно от 10% до приблизительно 15%, или приблизительно от 15% до приблизительно 20%. В другом конкретном варианте исполнения, углеводный эксципиент присутствует при от 0,1% до 20%, или от 5% до 15%, или от 8% до 10%, или от 10% до 15%, или от 15% до 20%. В еще одном конкретном варианте исполнения, углеводный эксципиент присутствует при от приблизительно 0,1% до приблизительно 5%. В еще одном конкретном варианте исполнения, углеводный эксципиент присутствует при от приблизительно 5% до приблизительно 10%. В еще одних конкретных вариантах исполнения, углеводный эксципиент присутствует при от приблизительно 15% до приблизительно 20%. В еще одних конкретных вариантах исполнения, углеводный эксципиент присутствует при 1%, или при 1,5%, или при 2%, или при 2,5%, или при 3%, или при 4%, или при 5%, или при 10%, или при 15%, или при 20%.
[0291] В определенных вариантах исполнения, композиции в соответствии с данным изобретением содержать углеводный эксципиент. Углеводные эксципиенты могут действовать, например, в качестве агентов, увеличивающих вязкость, стабилизаторов, объемообразующих агентов, солюбилизирующих агентов, и/или т.п. Углеводные эксципиенты в общем присутствуют при от 1% до 99% по массе или объему. В одном варианте исполнения, углеводный эксципиент присутствует при от 0,1% до 20%. В другом варианте исполнения, углеводный эксципиент присутствует при от 0,1% до 15%. В конкретном варианте исполнения, углеводный эксципиент присутствует при от 0,1% до 5%, или от 1% до 20%, или от 5% до 15%, или от 8% до 10%, или от 10% до 15%, или от 15% до 20%. В другом конкретном варианте исполнения, углеводный эксципиент присутствует при от 0,1% до 20%, или от 5% до 15%, или от 8% до 10%, или от 10% до 15%, или от 15% до 20%. В еще одном конкретном варианте исполнения, углеводный эксципиент присутствует при от 0,1% до 5%. В еще одном конкретном варианте исполнения, углеводный эксципиент присутствует при от 5% до 10%. В еще одних конкретных вариантах исполнения, углеводный эксципиент присутствует при от 15% до 20%. В еще одних конкретных вариантах исполнения, углеводный эксципиент присутствует при 1%, или при 1,5%, или при 2%, или при 2,5%, или при 3%, или при 4%, или при 5%, или при 10%, или при 15%, или при 20%.
[0292] Углеводные эксципиенты, приемлемые для применения в композициях в соответствии с данным изобретением включают, например, моносахариды, такие, как фруктоза, мальтоза, галактоза, глюкоза, D-манноза, сорбоза и т.п.; дисахариды, такие, как лактоза, сукроза, трегалоза, целлибиоза и т.п.; полисахариды, такие, как раффиноза, мелезитоза, мальтодекстрины, декстраны, крахмалы и т.п.; альдитолов, таких, как маннитол, ксилитол, мальтитол, лактитол, ксилитол сорбитол (глюцитол) и т.п. В одном варианте исполнения, углеводные эксципиенты для применения в данном изобретении выбирают из группы, состоящей из сукрозы, трегалозы, лактозы, маннитола и раффинозы. В конкретном варианте исполнения, углеводный эксципиент представляет собой трегалозу. В другом конкретном варианте исполнения, углеводный эксципиент представляет собой маннитол. В еще одних конкретных вариантах исполнения, углеводный эксципиент представляет собой сукрозу. В еще одном конкретном варианте исполнения, углеводный эксципиент представляет собой раффинозу. Чистота углеводного эксципиента должна составлять как минимум 98%, или как минимум 99%, или как минимум 99,5%.
[0293] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит как минимум приблизительно 1%, как минимум приблизительно 2%, как минимум приблизительно 4%, как минимум приблизительно 8%, как минимум приблизительно 20%, как минимум приблизительно 30%, или как минимум приблизительно 40% трегалозы. В другом варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит от приблизительно 1% до приблизительно 40%, от приблизительно 1% до приблизительно 30%, от приблизительно 1% до приблизительно 20%, от приблизительно 2% до приблизительно 40%, от приблизительно 2% до приблизительно 30%, от приблизительно 2% до приблизительно 20%, от приблизительно 4% до приблизительно 40%, от приблизительно 4% до приблизительно 30%, или от приблизительно 4% до приблизительно 20% трегалозы. В дополнительном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит приблизительно 1%, приблизительно 2%, приблизительно 4%, приблизительно 8%, приблизительно 20%, приблизительно 30%, или приблизительно 40% трегалозы. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит приблизительно 4% трегалозы.
[0294] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит как минимум 1%, как минимум 2%, как минимум 4%, как минимум 8%, как минимум 20%, как минимум 30%, или как минимум 40% трегалозы. В другом варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит от 1% до 40%, от 1% до 30%, от 1% до 20%, от 2% до 40%, от 2% до 30%, от 2% до 20%, от 4% до 40%, от 4% до 30%, или от 4% до 20% трегалозы. В дополнительном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит 1%, 2%, 4%, 8%, 20%, 30%, или 40% трегалозы.
[0295] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит эксципиент. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит как минимум один эксципиент выбранный из группы, состоящей из: сахара, соли, поверхностно-активного вещества, аминокислоты, полиола, хелатирующего агента, эмульгатора и консерванта. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит соль. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит соль выбранных из группы, состоящей из: NaCl, KCl, CaCl2, and MgCl2. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит NaCl.
[0296] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит как минимум приблизительно 10 мМ, как минимум приблизительно 25 мМ, как минимум приблизительно 50 мМ, как минимум приблизительно 75 мМ, как минимум приблизительно 80 мМ, как минимум приблизительно 100 мМ, как минимум приблизительно 125 мМ, как минимум приблизительно 150 мМ, как минимум приблизительно 175 мМ. как минимум приблизительно 200 мМ, или как минимум приблизительно 300 мМ хлорида натрия. В дополнительном варианте исполнения, композиция описанного в данной заявке содержит от приблизительно 10 мМ до приблизительно 300 мМ, от приблизительно 10 мМ до приблизительно 200 мМ, от приблизительно 10 мМ до приблизительно 175 мМ, от приблизительно 10 мМ до приблизительно 150 мМ, от приблизительно 25 мМ до приблизительно 300 мМ, от приблизительно 25 мМ до приблизительно 200 мМ, от приблизительно 25 мМ до приблизительно 175 мМ, от приблизительно 25 мМ до приблизительно 150 мМ, от приблизительно 50 мМ до приблизительно 300 мМ, от приблизительно 50 мМ до приблизительно 200 мМ, от приблизительно 50 мМ до приблизительно 175 мМ, от приблизительно 50 мМ до приблизительно 150 мМ, от приблизительно 75 мМ до приблизительно 300 мМ, от приблизительно 75 мМ до приблизительно 200 мМ, от приблизительно 75 мМ до приблизительно 175 мМ, от приблизительно 75 мМ до приблизительно 150 мМ, от приблизительно 100 мМ до приблизительно 300 мМ, от приблизительно 100 мМ до приблизительно 200 мМ, от приблизительно 100 мМ до приблизительно 175 мМ, или от приблизительно 100 мМ до приблизительно 150 мМ хлорида натрия. В дополнительном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит приблизительно 10 мМ. приблизительно 25 мМ, приблизительно 50 мМ, приблизительно 75 мМ, приблизительно 80 мМ, приблизительно 100 мМ, приблизительно 125 мМ, приблизительно 150 мМ, приблизительно 175 мМ, приблизительно 200 мМ, или приблизительно 300 мМ хлорида натрия.
[0297] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит как минимум 10 мМ, как минимум 25 мМ, как минимум 50 мМ, как минимум 75 мМ, как минимум 80 мМ, как минимум 100 мМ, как минимум 125 мМ, как минимум 150 мМ, как минимум 175 мМ, как минимум 200 мМ, или как минимум 300 мМ хлорида натрия. В дополнительном варианте исполнения, композиция описанная в данной заявке содержит от 10 мМ до 300 мМ, от 10 мМ до 200 мМ, от 10 мМ до 175 мМ, от 10 мМ до 150 мМ, от 25 мМ до 300 мМ, от 25 мМ до 200 мМ, от 25 мМ до 175 мМ, от 25 мМ до 150 мМ, от 50 мМ до 300 мМ, от 50 мМ до 200 мМ, от 50 мМ до 175 мМ, от 50 мМ до 150 мМ, от 75 мМ до 300 мМ, от 75 мМ до 200 мМ, от 75 мМ до 175 мМ, от 75 мМ до 150 мМ, от 100 мМ до 300 мМ, от 100 мМ до 200 мМ, от 100 мМ до 175 мМ, или от 100 мМ до 150 мМ хлорид натрия. В дополнительном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит 10 мМ. 25 мМ, 50 мМ, 75 мМ, 80 мМ, 100 мМ, 125 мМ, 150 мМ, 175 мМ, 200 мМ, или 300 мМ хлорида натрия.
[0298] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит аминокислоту. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит соль аминокислоты. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из лизина, аргинина и гистидина. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит как минимум приблизительно 25 мМ аминокислоты, как минимум приблизительно 50 мМ аминокислоты, как минимум приблизительно 100 мМ аминокислоты, как минимум приблизительно 150 мМ аминокислоты, как минимум приблизительно 200 мМ аминокислоты, как минимум приблизительно 250 мМ аминокислоты, как минимум приблизительно 300 мМ аминокислоты, как минимум приблизительно 350 мМ аминокислоты, или как минимум приблизительно 400 мМ аминокислоты. В другом варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит от приблизительно 25 мМ до приблизительно 250 мМ, от приблизительно 25 мМ до приблизительно 300 мМ, от приблизительно 25 мМ до приблизительно 350 мМ, от приблизительно 25 мМ до приблизительно 400 мМ, от приблизительно 50 мМ до приблизительно 250 мМ, от приблизительно 50 мМ до приблизительно 300 мМ, от приблизительно 50 мМ до приблизительно 350 мМ, от приблизительно 50 мМ до приблизительно 400 мМ, от приблизительно 100 мМ до приблизительно 250 мМ, от приблизительно 100 мМ до приблизительно 300 мМ, от приблизительно 100 мМ до приблизительно 400 мМ, от приблизительно 150 мМ до приблизительно 250 мМ, от приблизительно 150 мМ до приблизительно 300 мМ, или от приблизительно 150 мМ до приблизительно 400 мМ аминокислоты. В дополнительном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит приблизительно 25 мМ, приблизительно 50 мМ, приблизительно 100 мМ, приблизительно 150 мМ, приблизительно 200 мМ, приблизительно 250 мМ, приблизительно 300 мМ, приблизительно 350 мМ, или приблизительно 400 мМ аминокислоты. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит приблизительно 25 мМ аминокислоты. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит приблизительно 50 мМ аминокислоты. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит приблизительно 75 мМ аминокислоты. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит приблизительно 100 мМ аминокислоты. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит приблизительно 200 мМ аминокислоты.
[0299] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит трегалозу и аминокислоту. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит трегалозу и аминокислоту при молярном соотношении, составляющем приблизительно 0,1, приблизительно 0,5, приблизительно 0,75, приблизительно 1, приблизительно 5, приблизительно 10, приблизительно 20, приблизительно 30, приблизительно 40, приблизительно 50, приблизительно 60, приблизительно 70, приблизительно 80, приблизительно 90, приблизительно 100, приблизительно 200, или приблизительно 300. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит трегалозу и аминокислоту при молярном соотношении, составляющем приблизительно 1,5, приблизительно 1,7, приблизительно 1,8, приблизительно 1,9, приблизительно 2, приблизительно 2,1, приблизительно 2,2, приблизительно 2,3, приблизительно 2,4, приблизительно 2,5, приблизительно 2,6, приблизительно 2,7, приблизительно 2,8, приблизительно 2,9, приблизительно 3, приблизительно 3,1, приблизительно 3,2, приблизительно 3,3, приблизительно 3,4, приблизительно 3,5, или приблизительно 4. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит трегалозу и аминокислоту при молярном соотношении, составляющем приблизительно 2,1. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит трегалозу и аминокислоту при молярном соотношении, составляющем приблизительно 2,2. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит трегалозу и аминокислоту при молярном соотношении, составляющем приблизительно 2,4. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит трегалозу и аминокислоту при молярном соотношении, составляющем приблизительно 2,5. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит трегалозу и аминокислоту при молярном соотношении, составляющем приблизительно 2,6. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит трегалозу и аминокислоту при молярном соотношении, составляющем приблизительно 2,7.
[0300] Композиции в соответствии с данным изобретением могут дополнительно содержать поверхностно-активное вещество. Термин "поверхностно-активное вещество", которое используют в данной заявке, относится к органическим веществам, имеющим амфифильные структуры; а именно, они состоят из групп с различными тенденциями к растворимости, типично жирорастворимой углеводородной цепи и водорастворимой ионной группы. Поверхностно-активные вещества могут быть классифицированы, в зависимости от заряда поверхностно-активного фрагмента, на анионные, катионные и неионные поверхностно-активные вещества. Поверхностно-активные вещества часто используют в качестве увлажняющих, эмульгирующих, солюбилизирующих и диспергирующих агентов для различных фармацевтических композиций и препаратов из биологических материалов. Фармацевтически приемлемые поверхностно-активные вещества, такие, как полисорбаты (например, полисорбаты 20 или 80); полиоксамеры (например, полоксамер 188); тритонn; натрий октил гликозид; лаурил-, миристил-, линолеил-, или стеарил-сульфобетаин; лаурил-, миристил-, линолеил- или стеарил-саркозин; линолеил-, миристил-, или цетил-бетаин; лауроамидопропил-, кокамидопропил-, линолеамидопропил-, миристамидопропил-, пальмидопропил-, или изостеарамидопропил-бетаин (например, лауроамидопропил); миристамидопропил-, пальмидопропил-, или изостеарамидопропил-диметиламин; натрий метил кокоил-, или динатрий метил олеил таурат; и серия MONAQUA™ (Мопа Industries, Inc., Paterson, N.J.), полиэтиленгликоль, полипропилгликоль и сополимеры этилена и пропиленгликоля (например, Плюроники, PF68 etc), могут быть необязательно добавлены в композиции в соответствии с данным изобретением для уменьшения агрегации. Поверхностно-активные вещества являются в особенности полезными, если помпа или пластиковый контейнер используется для введения композиция. Присутствие фармацевтически приемлемого поверхностно-активного вещества уменьшает склонность к агрегации белков. В конкретном варианте исполнения, композиции в соответствии с данным изобретением содержит полисорбат, который находится в концентрации в диапазоне от приблизительно 0,001% до приблизительно 1%, или от приблизительно 0,001% до приблизительно 0,1%, или от приблизительно 0,01% до приблизительно 0,1%. В других конкретных вариантах исполнения, композиции в соответствии с данным изобретением содержит полисорбат, который имеет концентрацию, составляющую 0,001%, или 0,002%, или 0,003%, или 0,004%, или 0,005%, или 0,006%, или 0,007%, или 0,008%, или 0,009%, или 0,01%, или 0,015%, или 0,02%. В другом конкретном варианте исполнения, полисорбат является полисорбатом-80. В конкретном варианте исполнения, композиции в соответствии с данным изобретением содержит полисорбат, который находится при концентрации в диапазоне от 0,001% до 1%, или 0,001% до 0,1%, или 0,01% до 0,1%. В других конкретных вариантах исполнения, композиции в соответствии с данным изобретением содержит полисорбат, который имеет концентрацию, составляющую 0,001%, или 0,002%, или 0,003%, или 0,004%, или 0,005%, или 0,006%, или 0,007%, или 0,008%, или 0,009%, или 0,01%, или 0,015%, или 0,02%. В другом конкретном варианте исполнения, полисорбат является полисорбатом-80.
[0301] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит поверхностно-активное вещество. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит Полисорбат 20, Полисорбат 40, Полисорбат 60, или Полисорбат 80. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит Полисорбат 80.
[0302] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит как минимум приблизительно 0,001%, как минимум приблизительно 0,002%, как минимум приблизительно 0,005%, как минимум приблизительно 0,01%, как минимум приблизительно 0,02%, как минимум приблизительно 0,05%, как минимум приблизительно 0,1%, как минимум приблизительно 0,2%, или как минимум приблизительно 0,5% Полисорбат 80. В другом варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит от приблизительно 0,001% до приблизительно 0,5%, от приблизительно 0,001% до приблизительно 0,2%, от приблизительно 0,001% до приблизительно 0,1%, от приблизительно 0,001% до приблизительно 0,05%, от приблизительно 0,002% до приблизительно 0,5%, от приблизительно 0,002% до приблизительно 0,2%, от приблизительно 0,002% до приблизительно 0,1%, от приблизительно 0,002% до приблизительно 0,05%, от приблизительно 0,005% до приблизительно 0,5%, от приблизительно 0,005% до приблизительно 0,2%, от приблизительно 0,005% до приблизительно 0,1%, от приблизительно 0,005% до приблизительно 0,05%, от приблизительно 0,01% до приблизительно 0,5%, от приблизительно 0,01% до приблизительно 0,2%, от приблизительно 0,01% до приблизительно 0,1%, или от приблизительно 0,01% до приблизительно 0,05% Полисорбат 80. В дополнительном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит приблизительно 0,001%, приблизительно 0,002%, приблизительно 0,005%, приблизительно 0,01%, приблизительно 0,02%, приблизительно 0,05%, приблизительно 0,1%, приблизительно 0,2%, до приблизительно 0,5% Полисорбат 80. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит приблизительно 0,02% Полисорбат 80. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит приблизительно 0,04% Полисорбат 80. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит приблизительно 0,05% Полисорбат 80.
[0303] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит как минимум 0,001%, как минимум 0,002%, как минимум 0,005%, как минимум 0,01%, как минимум 0,02%, как минимум 0,05%, как минимум 0.1%, как минимум 0,2%, или как минимум 0,5% Полисорбат 80. В другом варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит от 0,001% до 0,5%, от 0,001% до 0,2%, от 0,001% до 0,1%, от 0,001% до 0,05%, от 0,002% до 0,5%, от 0,002% до 0,2%, от 0,002% до 0,1%, от 0,002% до 0,05%, от 0,005% до 0,5%, от 0,005% до 0,2%, от 0,005% до 0,1%, от 0,005% до 0,05%, от 0,01% до 0,5%, от 0,01% до 0,2%, от 0,01% до 0,1%, или от 0,01% до 0,05% Полисорбата 80. В дополнительном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит 0,001%, 0,002%, 0,005%, 0,01%, 0,02%, 0,05%, 0,1%, 0,2% и 0,5% Полисорбата 80. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит 0,02% Полисорбата 80. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит 0,04% Полисорбата 80. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит 0,05% Полисорбата 80.
[0304] Необязательно, композиции в соответствии с данным изобретением дополнительно содержат другие традиционные эксципиенты и/или добавки, включая, но не ограничиваясь приведенным, разбавители, связывающие вещества, стабилизаторы, липофильные растворители, консерванты, адъюванты, или т.п. Фармацевтически приемлемые эксципиенты и/или добавки могут быть использованы в композиции в соответствии с данным изобретением. Традиционно используемые эксципиенты/добавки, такие, как фармацевтически приемлемые хелаторы (например, но, не ограничиваясь приведенным, ЭДТК, ДТПК или ЭГТК) могут необязательно быть добавлены в композиции в соответствии с данным изобретением для уменьшения агрегации. Такие добавки являются в особенности полезными, если помпа или пластиковый контейнер используется для введения композиции.
[0305] Консерванты, такие, как фенол, м-крезол, п-крезол, о-крезол, хлоркрезол, бензиловый спирт, фенилртутьнитрит, феноксиэтанол, формальдегид, хлорбутанол, хлорид магния например, но, не ограничиваясь приведенным, гексагидрат, алкилпарабен (метил, этил, пропил, бутил и т.п.), бензалконий хлорид, бензэтоний хлорид, натрий дегидроацетат и тимерозал, или их смеси, могут быть необязательно добавлены к композиции в соответствии с данным изобретением в любой приемлемой концентрации, такой, как от приблизительно 0,001% до приблизительно 5%, или в любом диапазоне или значении в данном диапазоне. Концентрация консерванта, который используют в композиции в соответствии с данным изобретением, является концентрацией, достаточной для получения бактериального эффекта. Такие концентрации зависят от выбранного консерванта и легко определяются специалистом в данной области.
[0306] Другие описанные эксципиенты/добавки, которые могут быть использованы в композиции в соответствии с данным изобретением включают, например, ароматизиризующие вещества, противомикробные агенты, подсластители, антиоксиданты, антистатики, липиды, такие, как фосфолипиды или жирные кислоты, стероиды, такие, как холестерин, белковые эксципиенты, такие, как сывороточный альбумин (человеческий сывороточный альбумин (ЧСА), рекомбинантный человеческий альбумин (гНА)), желатин, казеин, солеобразующие противоионы, такие, как натрий и т.п. Такие дополнительно известные фармацевтические эксципиенты и/или добавки, приемлемые для применения в композициях в соответствии с данным изобретением известны в данной области, например, как приведено в "Remington: The Science & Practice of Pharmacy", 21st ed., Lippincott Williams & Wilkins, (2005), и в "Physician’s Desk Reference", 60th ed., Medical Economics, Montvale, N.J. (2005). Могут быть стандартно выбраны фармацевтически приемлемые носители, приемлемые для режима введения, растворимости и/или стабильности Fc вариантного белка, а также хорошо известны из уровня техники или описаны в данной заявке.
[0307] Специалисту в данной области будет понятно, что композиция в соответствии с данным изобретением может быть изотонической с человеческой кровью, то есть композиция в соответствии с данным изобретением имеет в существенной степени то же самое осмотическое давление, что и человеческая кровь. Такие изотонические композиции будут, в общем, иметь осмотическое давление от приблизительно 250 миллиосмоль до приблизительно 350 миллиосмоль. Изотоничность может быть измерена путем, например, использования осмометра давления паров или замораживания льдом. Тоничность композиция регулируют путем применения модификаторов тоничности. "Модификаторы тоничности" являются такими фармацевтически приемлемыми инертными веществами, которые могут быть добавлены в композицию для обеспечения тоничности композиции. Модификаторы тоничности, приемлемые для применения в данном изобретении, включают, не ограничиваясь приведенным, сахариды, соли и аминокислоты.
[0308] В определенных вариантах исполнения, композиции в соответствии с данным изобретением, имеют осмотическое давление от приблизительно 100 миллиосмоль до приблизительно 1200 миллиосмоль, или от приблизительно 200 миллиосмоль до приблизительно 1000 миллиосмоль, или от приблизительно 200 миллиосмоль до приблизительно 800 миллиосмоль, или от приблизительно 200 миллиосмоль до приблизительно 600 миллиосмоль, или от приблизительно 250 миллиосмоль до приблизительно 500 миллиосмоль, или от приблизительно 250 миллиосмоль до приблизительно 400 миллиосмоль, или от приблизительно 250 миллиосмоль до приблизительно 350 миллиосмоль.
[0309] В определенных вариантах исполнения, композиции в соответствии с данным изобретением, имеют осмотическое давление от 100 миллиосмоль до 1200 миллиосмоль, или от 200 миллиосмоль до 1000 миллиосмоль, или от 200 миллиосмоль до 800 миллиосмоль, или от 200 миллиосмоль до 600 миллиосмоль, или от 250 миллиосмоль до 500 миллиосмоль, или от 250 миллиосмоль до 400 миллиосмоль, или от 250 миллиосмоль до 350 миллиосмоль.
[0310] Концентрацию любого одного или любой комбинации различных компонентов композиции в соответствии с данным изобретением регулируют для достижения желаемой тоничности конечной композиции. Например, соотношение углеводного эксципиента и антитела может быть отрегулировано в соответствии со способами, известными из уровня техники (например, патент США №6,685,940). В определенных вариантах исполнения, молярное соотношение углеводного эксципиента и антитела может составлять от приблизительно 100 моль до приблизительно 1000 моль углеводного эксципиента к приблизительно 1 моль антитела, или от приблизительно 200 моль до приблизительно 6000 моль углеводного эксципиента к приблизительно 1 моль антитела, или от приблизительно 100 моль до приблизительно 510 моль углеводного эксципиента к приблизительно 1 моль антитела, или от приблизительно 100 моль до приблизительно 600 моль углеводного эксципиента к приблизительно 1 моль антитела.
[0311] Концентрацию любого одного или любой комбинации различных компонентов композиции в соответствии с данным изобретением регулируют для достижения желаемой тоничности конечной композиции. Например, соотношение углеводного эксципиента и антитела может быть отрегулировано в соответствии со способами, известными из уровня техники (например, патент США №6,685,940). В определенных вариантах исполнения, молярное соотношение углеводного эксципиента и антитела может составлять от 100 моль до 1000 моль углеводного эксципиента к 1 моль антитела, или от 200 моль до 6000 моль углеводного эксципиента к 1 моль антитела, или от 100 моль до 510 моль углеводного эксципиента к 1 моль антитела, или от 100 моль до 600 моль углеводного эксципиента к 1 моль антитела.
[0312] Желаемая изотоничность конечной композиции может быть также достигнута путем регулирования концентрации соли композиции. Соли, которые являются фармацевтически приемлемыми и пригодными для данного изобретения в качестве модификаторов тоничности включают, не ограничиваясь приведенным, хлорид натрия, сукцинат натрия, сульфат натрия, хлорид калия, хлорид магния, сульфат магния и хлорид кальция. В конкретных вариантах исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержат NaCl, MgCl2, и/или CaCl2. В одном варианте исполнения, концентрация NaCl составляет приблизительно от 75 мМ до приблизительно 150 мМ. В другом варианте исполнения, концентрация MgCl2 составляет приблизительно от 1 мМ до приблизительно 100 мМ. Аминокислоты, которые являются фармацевтически приемлемыми и пригодными для данного изобретения в качестве модификаторов тоничности, включают, не ограничиваясь приведенным, пролин, аланин, L-аргинин, аспарагин, L-аспартамовую кислоту, глицин, серин, лизин и гистидин.
[0313] В одном варианте исполнения композиции в соответствии с данным изобретением являются апирогенными композициями, которые в существенной степени не содержат эндотоксины и/или родственные пирогенные вещества. Эндотоксины включают токсины, которые заключены в микроорганизмах и высвобождаются только при разрушении или смерти микроорганизмов. Пирогенные вещества также включают вызывающие лихорадку термостабильные вещества (гликопротеины) из внешней мембраны бактерий и других микроорганизмов. Оба из этих веществ могут вызвать лихорадку, пониженное давление и шок при введении людям. Из-за возможного вредного влияния, даже малые количества эндотоксинов должны быть удалены из внутривенно введенных фармацевтических растворов лекарственных средств. Управление по продовольствию и лекарственным средствам ("FDA") установило верхний предел в 5 эндотоксических единиц (ЭЕ) на дозу на килограмм массы тела на один одночасовой период для внутривенных применений лекарственных средств (The United States Pharmacopeial Convention, Pharmacopeial Forum 26 (1):223 (2000)). Если терапевтические белки вводят в количествах, составляющих несколько сот или тысяч миллиграмм на килограмм массы тела, что может быть в случае антител, даже остаточные количества вредных и опасных эндотоксинов должны быть удалены. В некоторых конкретных вариантах исполнения, уровни эндотоксинов и пирогенов в композиции составляют менее чем 10 ЭЕ/мг, или менее чем 5 ЭЕ/мг, или менее чем 1 ЭЕ/мг, или менее чем 0,1 ЭЕ/мг, или менее чем 0,01 ЭЕ/мг, или менее чем 0,001 ЭЕ/мг.
[0314] При использовании для введения in vivo, композиции в соответствии с данным изобретением должны быть стерильными. Композиции в соответствии с данным изобретением могут быть стерилизованы при помощи различных способов стерилизации, включая стерильную фильтрацию, излучение и т.д. В одном варианте исполнения, композицию антитела стерилизуют на предварительно простерилизованном фильтре в 0,22 микрон. Стерильные композиции для инъекций могут быть составлены в композицию в соответствии с традиционной фармацевтической практикой, как описано в "Remington: The Science & Practice of Pharmacy", 21st ed., Lippincott Williams & Wilkins, (2005). Композиции, содержащие антитела, такие, как описано в данной заявке, обычно будут хранить в лиофилизированной форме или в растворе. Описано, что стерильные композиции, содержащие антитела, помещены в контейнер, имеющий стерильный порт доступа, например, пакет для внутривенного раствора или ампулу, имеющую наконечник, который позволяет извлечение композиции, такой, как пробка, протыкаемая иглой для подкожных введений. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением обеспечены в предварительно наполненном шприце.
[0315] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является лиофилизованной композицией. Термин "лиофилизированная" или "высушенная сублимацией" включает состояние вещества, которое подвергали процедуре высушивания, такой, как лиофилизация, где было удалено как минимум 50% влаги.
[0316] Фраза "объемообразующий агент" включает соединение, которое является фармацевтически приемлемой и добавляет объем в лиофилизованную лепешку. Объемообразующие агенты, известные в данной области, включают, например, углеводы, в том числе простые сахара, такие, как декстроза, рибоза, фруктозы и т.п.; спиртовые сахара, такие, как маннитол, инозитол и сорбитол, дисахариды, включая трегалозу, сукрозу и лактозу, встречающиеся в природе полимеры, такие, как крахмал, декстраны, хитозан, гиалуронат, белки (например, желатин и сывороточный альбумин), гликоген и синтетические мономеры и полимеры.
[0317] "Лиопротектант" представляет собой молекулу, которая при сочетании с рассматриваемым белком, в значительной степени предотвращает или уменьшает химическую и/или физическую нестабильность белка после лиофилизации и последующего хранения. Лиопротектанты включают, не ограничиваясь приведенным, сахара и соответствующие им сахарные спирты; аминокислоту, такую, как глутамат мононатрия или гистидин; метиламин, такой, как бетаин; лиотропную соль, такую, как сульфат магния; полиол, такой, как трехводные или более высокомолекулярные сахарные спирты, например, глицерин, декстран, эритритол, глицерол, арабитол, ксилитол, сорбитол и маннитола; пропиленгликоль; полиэтиленгликоль; Плюроники™.; и их комбинации. Дополнительные примеры лиопротектантов включают, не ограничиваясь приведенным, глицерин и желатин, и сахара меллибиозу, мелезитозу, раффинозу, маннотриозу и стахиозу. Примеры восстанавливающих сахаров включают, не ограничиваясь приведенным, глюкозу, мальтозу, лактозу, мальтулозу, изо-мальтулозу и лактулозу. Примеры невосстанавливающих сахаров включают, не ограничиваясь приведенным, невосстанавливающие гликозиды, полигидрокси соединения, выбранные из сахарных спиртов и других полиспиртов с неразветвленной цепью. Примеры сахарных спиртов включают, не ограничиваясь приведенным, моногликозиды, соединения, полученные восстановлением дисахарида, такие, как лактоза, мальтоза, лактулоза и мальтулоза. Гликозидная боковая группа может быть гликозидной или галактозидной. Дополнительные примеры сахарных спиртов включают, не ограничиваясь приведенным, глюцитол, мальтитол, лактитол и изо-мальтулозу. В конкретных вариантах исполнения, трегалозу или сукрозу используют в качестве лиопротектантов.
[0318] Лиопротектант добавляют в предварительно лиофилизированную композицию в "лиозащитном количестве", что означает, что после лиофилизации белка в присутствии лиозащитного количества лиопротектанта, белок в существенной степени сохраняет свою физическую и химическую стабильность и целостность после лиофилизации и хранения.
[0319] В одном варианте исполнения, молярное соотношение лиопротектанта (например, трегалозы) и молекул анти-IL-6 антитела композиции в соответствии с данным изобретением составляет как минимум приблизительно 10, как минимум приблизительно 50, как минимум приблизительно 100, как минимум приблизительно 200, или как минимум приблизительно 300. В другом варианте исполнения, молярное соотношение лиопротектанта (например, трегалозы) и молекул анти-IL-6 антитела композиции в соответствии с данным изобретением составляет приблизительно 1, составляет приблизительно 2, приблизительно 5, приблизительно 10, приблизительно 50, приблизительно 100, приблизительно 200, или приблизительно 300.
[0320] "Восстановленной" композицией является композиция, которая была получена путем растворения лиофилизованной композиции антитела в таком разбавителе, что антитело диспергируется в восстановленной композиции. Восстановленная композиция приемлема для введения (например, парентерального введения) пациенту, который подлежит лечению рассматриваемым белком и, в определенных вариантах исполнения в соответствии с данным изобретением, может быть приемлема для внутривенного введения.
[0321] Рассматриваемый "разбавитель" в данной заявке представляет собой разбавитель, который фармацевтически приемлем (безопасен и нетоксичен для введения человеку) и является полезным для получения жидкой композиции, такой, как композиция, восстановленная после лиофилизации. В некоторых вариантах исполнения, разбавители включают, не ограничиваясь приведенным, стерильную воду, бактериостатическую воду для инъекций (БВДИ), рН буферный раствор (например, фосфатно-буферный раствор), стерильный солевой раствор, раствор Рингера или раствор декстрозы. В альтернативном варианте исполнения, разбавители могут включать водные растворы солей и/или буферов.
[0322] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является лиофилизованной композицией, содержащей IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением, где как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 98%, или как минимум приблизительно 99% указанного антитела может быть восстановлено из ампулы после встряхивания указанной ампулы в течение 4 часов при скорости 400 встряхиваний в минуту, где указанную ампулу наполняют наполовину ее объема указанной композицией. В другом варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является лиофилизованной композицией, содержащей IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением, где как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 98%, или как минимум приблизительно 99% указанного антитела может быть восстановлено из ампулы после того, как композицию подвергают трем циклам замораживания/оттаивания, где указанную ампулу наполняют наполовину ее объема указанной композицией. В дополнительном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является лиофилизованной композицией, содержащей IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением, где как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 98%, или как минимум приблизительно 99% указанного антитела может быть восстановлено путем восстановления лиофилизованной лепешки, полученной из указанной композиции.
[0323] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является лиофилизованной композицией, содержащей IL-6, где как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 98%, или как минимум приблизительно 99% указанного антитела может быть восстановлено из ампулы после встряхивания указанной ампулы в течение 4 часов при скорости 400 встряхиваний в минуту, где указанную ампулу наполняют наполовину ее объема указанной композицией. В другом варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является лиофилизованной композицией, содержащей IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением, где как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 98%, или как минимум приблизительно 99% указанного антитела может быть восстановлено из ампулы после того, как композицию подвергают трем циклам замораживания/оттаивания, где указанную ампулу наполняют наполовину ее объема указанной композицией. В дополнительном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является лиофилизованной композицией, содержащей IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением, где как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 98%, или как минимум приблизительно 99% указанного антитела может быть восстановлено путем восстановления лиофилизованной лепешки, полученной из указанной композиции.
[0324] В одном варианте исполнения, лиофилизованная композиция в соответствии с данным изобретением содержит молекулы анти-IL-6 антитела, где как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 98%, или как минимум приблизительно 99% указанного антитела восстанавливают путем восстановления указанной лиофилизованной композиции при хранении при приблизительно 40°C в течение как минимум приблизительно 1 недели, как минимум приблизительно 2 недель, как минимум приблизительно 3 недель, как минимум приблизительно 4 недель, как минимум приблизительно 5 недель, или как минимум приблизительно 6 недель. В одном варианте исполнения, лиофилизованная композиция в соответствии с данным изобретением содержит молекулы анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением, где как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 98%, или как минимум приблизительно 99% указанного антитела восстанавливают путем восстановления указанной лиофилизованной композиции при хранении при приблизительно 40°C в течение, как минимум приблизительно 1 месяца, как минимум приблизительно 2 месяцев, как минимум приблизительно 3 месяцев, как минимум приблизительно 4 месяцев, как минимум приблизительно 5 месяцев, или как минимум приблизительно 6 месяцев.
[0325] В одном варианте исполнения, лиофилизованная композиция в соответствии с данным изобретением содержит молекулы анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением, где как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 98%, или как минимум приблизительно 99% указанного антитела восстанавливают путем восстановления указанной лиофилизованной композиции при хранении при приблизительно 5°C в течение как минимум приблизительно 1 месяца, как минимум приблизительно 2 месяцев, как минимум приблизительно 3 месяцев, как минимум приблизительно 4 месяцев, как минимум приблизительно 5 месяцев, как минимум приблизительно 6 месяцев, как минимум приблизительно 7 месяцев, как минимум приблизительно 8 месяцев, как минимум приблизительно 9 месяцев, как минимум приблизительно 10 месяцев, как минимум приблизительно 11 месяцев, или как минимум приблизительно 12 месяцев. В одном варианте исполнения, лиофилизованная композиция в соответствии с данным изобретением содержит молекулы анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением, где как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 98%, или как минимум приблизительно 99% указанного антитела восстанавливают путем восстановления указанной лиофилизованной композиции при хранении при приблизительно 5°C в течение как минимум приблизительно 1 года, как минимум приблизительно 2 лет, как минимум приблизительно 3 лет, как минимум приблизительно 4 лет, или как минимум приблизительно 5 лет.
[0326] В одном варианте исполнения, лиофилизованная композиция в соответствии с данным изобретением содержит молекулы анти-IL-6 антитела, где как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 98%, или как минимум приблизительно 99% указанного антитела получают путем восстановления указанной лиофилизованной композиции при хранении при приблизительно 40°C в течение приблизительно 1 недели, приблизительно 2 недель, приблизительно 3 недель, приблизительно 4 недель, приблизительно 5 недель, или приблизительно 6 недель. В одном варианте исполнения, лиофилизованная композиция в соответствии с данным изобретением содержит молекулы анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением, где как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 98%, или как минимум приблизительно 99% указанного антитела восстанавливают путем восстановления указанной лиофилизованной композиции при хранении при приблизительно 40°C в течение приблизительно 1 месяца, приблизительно 2 месяцев, приблизительно 3 месяцев, приблизительно 4 месяцев, приблизительно 5 месяцев, или приблизительно 6 месяцев.
[0327] В одном варианте исполнения, лиофилизованная композиция в соответствии с данным изобретением содержит молекулы анти-IL-6 антитела, где как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 98%, или как минимум приблизительно 99% указанного антитела получают путем восстановления указанной лиофилизованной композиции при хранении при приблизительно 5°C в течение приблизительно 1 месяца, приблизительно 2 месяцев, приблизительно 3 месяцев, приблизительно 4 месяцев, приблизительно 5 месяцев, приблизительно 6 месяцев, приблизительно 7 месяцев, приблизительно 8 месяцев, приблизительно 9 месяцев, приблизительно 10 месяцев, приблизительно 11 месяцев, или приблизительно 12 месяцев. В одном варианте исполнения, лиофилизованная композиция в соответствии с данным изобретением содержит молекулы анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением, где как минимум приблизительно 90%, как минимум приблизительно 95%, как минимум приблизительно 97%, как минимум приблизительно 98%, или как минимум приблизительно 99% указанного антитела получают путем восстановления указанной лиофилизованной композиции при хранении при приблизительно 5°C в течение приблизительно 1 года, приблизительно 2 лет, приблизительно 3 лет, приблизительно 4 лет, или приблизительно 5 лет.
[0328] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением представляет собой восстановленную композицию. В определенных вариантах исполнения, восстановленную жидкую композицию в соответствии с данным изобретением получают из лиофилизованной композиции, описанной в данной заявке.
[0329] В одном варианте исполнения, восстановленная жидкая композицию в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело при той же концентрации, что и предварительно лиофилизованная жидкая композиция.
[0330] В одном варианте исполнения, восстановленная жидкая композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело при более высокой концентрации, чем предварительно лиофилизованная жидкая композиция. В конкретных вариантах исполнения, восстановленная жидкая композиция содержит приблизительно в 2 раза, приблизительно 3 раза, приблизительно 4 раза, приблизительно 5 раз, приблизительно 6 раз, приблизительно 7 раз, приблизительно 8 раз, приблизительно 9 раз, приблизительно 10 раз, приблизительно 15 раз, приблизительно 20 раз, приблизительно 30 раз, приблизительно 40 раз более высокую концентрацию анти-IL-6 антитела, чем предварительно лиофилизованная жидкая композиция.
[0331] В одном варианте исполнения, восстановленная жидкая композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело при более низкой концентрации, чем предварительно лиофилизованная жидкая композиция. В конкретных вариантах исполнения, восстановленная жидкая композиция содержит приблизительно 2 раза, приблизительно 3 раза, приблизительно 4 раза, приблизительно 5 раз, приблизительно 6 раз, приблизительно 7 раз, приблизительно 8 раз, приблизительно 9 раз, приблизительно 10 раз, приблизительно 15 раз, приблизительно 20 раз, приблизительно 30 раз, приблизительно 40 раз более низкую концентрацию анти-IL-6 антитела, чем предварительно лиофилизованная жидкая композиция.
[0332] В одном варианте исполнения, восстановленная жидкая композиция в соответствии с данным изобретением является водной композицией. В конкретном варианте исполнения, восстановленная жидкая композиция в соответствии с данным изобретением является водной композицией, где водный носитель является дистиллированной водой.
[0333] В одном варианте исполнения, восстановленная композиция в соответствии с данным изобретением является стерильной.
[0334] В одном варианте исполнения, восстановленная композиция в соответствии с данным изобретением является гомогенной.
[0335] В одном варианте исполнения, восстановленная композиция в соответствии с данным изобретением является изотонической. В одном варианте исполнения, восстановленная композиция в соответствии с данным изобретением является гипотонической. В одном варианте исполнения, восстановленная композиция в соответствии с данным изобретением является гипертонической.
[0336] В определенных вариантах исполнения, восстановленные композиции в соответствии с данным изобретением имеют (или содержат как гранулированную фракцию) профиль частиц менее чем приблизительно 3,4 Е + 5 частиц/мл диаметра 2-4 мкм, менее чем приблизительно 4,0 Е + 4 частиц/мл диаметра 4-10 мкм, менее чем приблизительно 4,2 Е + 3 частиц/мл диаметра 10-20 мкм, менее чем приблизительно 5,0 Е + 2 частиц/мл диаметра 20-30 мкм, менее чем приблизительно 7,5 Е + 1 частиц/мл диаметра 30-40 мкм и менее чем приблизительно 9,4 частиц/мл диаметра 40-60 мкм как определено при помощи счетчика частиц. В определенных вариантах исполнения, восстановленные композиции в соответствии с данным изобретением не содержат детектируемых частиц более 40 мкм, или более 30 мкм.
[0337] В определенных вариантах исполнения, после хранения в течение приблизительно 1 часа, приблизительно 2 часов, приблизительно 3 часов, приблизительно 4 часов, приблизительно 5 часов, приблизительно 6 часов, приблизительно 7 часов, приблизительно 8 часов, приблизительно 9 часов, приблизительно 12 часов, приблизительно 15 часов, приблизительно 18 часов, или приблизительно 24 часов восстановленные жидкие композиции в соответствии с данным изобретением содержат (или как гранулированную фракцию) профиль частиц менее чем приблизительно 3,4 Е + 5 частиц/мл диаметра 2-4 мкм, менее чем приблизительно 4,0 Е + 4 частиц/мл диаметра 4-10 мкм, менее чем приблизительно 4,2 Е + 3 частиц/мл диаметра 10-20 мкм, менее чем приблизительно 5,0 Е + 2 частиц/мл диаметра 20-30 мкм, менее чем приблизительно 7,5 Е + 1 частиц/мл диаметра 30-40 мкм и менее чем приблизительно 9,4 частиц/мл диаметра 40-60 мкм как определено при помощи счетчика частиц. В определенных вариантах исполнения, жидкие композиции в соответствии с данным изобретением не содержат детектируемых частиц более 40 мкм, или более 30 мкм.
[0338] В конкретных вариантах исполнения, фармацевтические композиции включают, не ограничиваясь приведенным:
(a) стерильную жидкую композицию, состоящую из 100 мг/мл антитела, 25 мМ гистидина, 1,6 мМ глицина при рН 6,0;
(b) стерильную жидкую композицию, состоящую из 100 мг/мл антитела и 25 мМ гистидина при рН 6,0;
(c) стерильную жидкую композицию, состоящую из 5 мг/мл антитело, 20 мМ лимонной кислоты, 100 мМ NACl, 1,5% маннитола, 50 1 ДТПК (диэтилтриаминпентауксусной кислоты) и 0,02% PS80 при рН 6,0;
(d) стерильную жидкую композицию, состоящую из 100 мг/мл антитела, 25 мМ гистидина, 8% трегалозы и 0,02% PS80 при рН 6,0;
(e) стерильную жидкую композицию, состоящую из 20 мг/мл антитела, 10 мМ His, 2,35% (мас./об.) лизина-HCl и 0,02% PS-80 (мас./об.) при рН 6,0;
(f) стерильную жидкую композицию, состоящую из 5 мг/мл антитела, 10 мМ буфера цитрата натрия, NaCl (0,15М) и Tween 80 (0,02%) при рН 6,0;
(g) стерильную жидкую композицию, состоящую из 100 мг/мл антитела, 10 мМ гистидина и 150 мМ NaCl при рН 6,0.
[0339] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением стабилизирует анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением предотвращает агрегацию анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением. В другом варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением предотвращает фрагментацию анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением.
[0340] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является стабильной при хранении приблизительно при 40°C в течение как минимум приблизительно 1 недели, как минимум приблизительно 2 недель, как минимум приблизительно 3 недель, или как минимум приблизительно 4 недель. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является стабильной при хранении при приблизительно 40°C в течение как минимум приблизительно 1 месяца, как минимум приблизительно 2 месяцев, как минимум приблизительно 3 месяцев, как минимум приблизительно 4 месяцев, как минимум приблизительно 5 месяцев, или как минимум приблизительно 6 месяцев. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является стабильной после хранения в предварительно наполненном шприце.
[0341] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является стабильной при хранении приблизительно при 25°C в течение как минимум приблизительно 1 недели, как минимум приблизительно 2 недель, как минимум приблизительно 3 недель, или как минимум приблизительно 4 недель. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является стабильной при хранении при приблизительно 25°C в течение как минимум приблизительно 1 месяца, как минимум приблизительно 2 месяцев, как минимум приблизительно 3 месяцев, как минимум приблизительно 4 месяцев, как минимум приблизительно 5 месяцев, или как минимум приблизительно 6 месяцев. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является стабильной после хранения в предварительно наполненном шприце.
[0342] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является стабильной при хранении приблизительно при 5°C в течение как минимум приблизительно 1 месяца, как минимум приблизительно 2 месяцев, как минимум приблизительно 3 месяцев, как минимум приблизительно 4 месяцев, как минимум приблизительно 5 месяцев, как минимум приблизительно 6 месяцев, как минимум приблизительно 7 месяцев, как минимум приблизительно 8 месяцев, как минимум приблизительно 9 месяцев, как минимум приблизительно 10 месяцев, как минимум приблизительно 11 месяцев, или как минимум приблизительно 12 месяцев. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является стабильной при хранении приблизительно при 5°C в течение как минимум приблизительно 1 года, как минимум приблизительно 2 лет, как минимум приблизительно 3 лет, как минимум приблизительно 4 лет, как минимум приблизительно 5 лет, как минимум приблизительно 6 лет, как минимум приблизительно 7 лет, как минимум приблизительно 8 лет, как минимум приблизительно 9 лет, как минимум приблизительно 10 лет, как минимум приблизительно 11 лет, или как минимум приблизительно 12 лет. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является стабильной после хранения в предварительно наполненном шприце.
[0343] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является стабильной при хранении приблизительно при 40°C в течение приблизительно 1 недели, приблизительно 2 недель, приблизительно 3 недель, или приблизительно 4 недель. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является стабильной при хранении приблизительно при 40°C в течение приблизительно 1 месяца, приблизительно 2 месяцев, приблизительно 3 месяцев, приблизительно 4 месяцев, приблизительно 5 месяцев, или приблизительно 6 месяцев. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является стабильной после хранения в предварительно наполненном шприце.
[0344] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является стабильной при хранении приблизительно при 25°C в течение приблизительно 1 недели, приблизительно 2 недель, приблизительно 3 недель, или приблизительно 4 недель. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является стабильной при хранении приблизительно при 25°C в течение приблизительно 1 месяца, приблизительно 2 месяцев, приблизительно 3 месяцев, приблизительно 4 месяцев, приблизительно 5 месяцев, или приблизительно 6 месяцев. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является стабильной после хранения в предварительно наполненном шприце.
[0345] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является стабильной при хранении при приблизительно 5°C в течение приблизительно 1 месяца, приблизительно 2 месяцев, приблизительно 3 месяцев, приблизительно 4 месяцев, приблизительно 5 месяцев, или приблизительно 6 месяцев, приблизительно 7 месяцев, приблизительно 8 месяцев, приблизительно 9 месяцев, приблизительно 10 месяцев, приблизительно 11 месяцев, или приблизительно 12 месяцев. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является стабильной при хранении при приблизительно 5°C в течение приблизительно 1 года, приблизительно 2 лет, приблизительно 3 лет, приблизительно 4 лет, приблизительно 5 лет, приблизительно 6 лет, приблизительно 7 лет, приблизительно 8 лет, приблизительно 9 лет, приблизительно 10 лет, приблизительно 11 лет, или приблизительно 12 лет. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является стабильной после хранения в предварительно наполненном шприце.
[0346] Данное изобретение представляет стабильные композиции, содержащие анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением. Стабильность указанного антитела может быть оценена при помощи степеней агрегации, распада или фрагментации, согласно измерениям ВЭЭХ, обратнофазной хроматографии, статического рассеяния света (СРС), инфракрасной спектроскопии с Фурье-преобразованием (FT-ИК), циркулярного дихроизма (ЦД), методов разворачивания мочевины, собственной флуоресценции триптофана, дифференциальной сканирующей калориметрии, и/или АНС методов связывания, по сравнению с реперной композицией, содержащей реперное антитело. Например, реперная композиция может быть реперным стандартом, замороженным при -70°C, состоящим из 10 мг/мл реперного антитела антитело (включая его антительный фрагмент) (например, но, не ограничиваясь приведенным, антитело, содержащее 16С4 вариабельный участок и Fc участок, имеющий комплексные N-гликозид-связанные сахарные цепи, в которых фукоза не связана с N-ацетилглюкозамином на восстанавливающем конце в сахарной цепи) в 10 мМ гистидина (рН 6,0), содержащий 75 мMNaCl и 4% трегалозы, где реперная композиция регулярно дает один мономерный пик (например, ≥95% площади) при помощи ВЭЭХ. В определенных вариантах исполнения, реперная композиция идентична композиции, стабильность которой анализируют; реперная композиция может храниться замороженной при -70°C во время анализа стабильности для сохранения реперной композиции в ее исходном состоянии. Например, реперный стандарт для анализа какой-либо потери активности связывания IL-6 антигена в композиции, которую хранят при 40°C, может быть идентичен композиции, которую хранят при -70°C в течение 30 дней. Общая стабильность композиции, содержащей антитело (включая его антительный фрагмент) может быть также оценена при помощи различных иммунологических анализов, включая, например, ELISA и радиоиммунологическое исследование с использованием выделенных молекул антигенов. Дополнительно, стабильность композиции, содержащей антитело, может быть оценена при помощи различных анализов, разработанных для измерения функциональных характеристик антитела, например, анализов, разработанных для измерения аффинности связывания антигена, активности in vitro антитело-зависимой клеточно-обусловленной цитотоксичности, активности истощения in vivo, in vitro анализа ЦДС, анализов ингибирования, анализов клеточной пролиферации и т.д.
[0347] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением, имеющее IL-6 активность связывания как минимум 50%, как минимум 60%, как минимум 70%, как минимум 80%, как минимум 90%, как минимум 95%, или как минимум 99% IL-6 активности связывания реперного антитела, где указанную композицию хранили при приблизительно 40°C в течение как минимум приблизительно 1 недели, как минимум приблизительно 2 недель, как минимум приблизительно 3 недель, или как минимум приблизительно 4 недели. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением, имеющее IL-6 активность связывания, составляющую как минимум на 50%, как минимум 60%, как минимум 70%, как минимум 80%, как минимум 90%, как минимум 95%, или как минимум 99% IL-6 активности связывания реперного антитела, где указанную композицию хранили при приблизительно 40°C, в течение как минимум приблизительно 1 месяца, приблизительно 2 месяцев, приблизительно 3 месяцев, приблизительно 4 месяцев, приблизительно 5 месяцев, приблизительно 6 месяцев. В конкретном варианте исполнения, композицию в соответствии с данным изобретением хранят в предварительно наполненном шприце. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением, имеющее пролонгированный период полувыведения.
[0348] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, которое имеет IL-6 активность связывания, составляющую как минимум 50%, как минимум 60%, как минимум 70%, как минимум 80%, как минимум 90%, как минимум 95%, или как минимум 99% IL-6 активности связывания реперного антитела, где указанную композицию хранили при приблизительно 25°C в течение как минимум приблизительно 1 недели, как минимум приблизительно 2 недель, как минимум приблизительно 3 недель, или как минимум приблизительно 4 недели. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, которое имеет IL-6 активность связывания, составляющую как минимум 50%, как минимум 60%, как минимум 70%, как минимум 80%, как минимум 90%, как минимум 95%, или как минимум 99% IL-6 активности связывания реперного антитела, где указанную композицию хранили при приблизительно 25°C в течение как минимум приблизительно 1 месяца, приблизительно 2 месяцев, приблизительно 3 месяцев, приблизительно 4 месяцев, приблизительно 5 месяцев, приблизительно 6 месяцев. В конкретном варианте исполнения, композицию в соответствии с данным изобретением хранят в предварительно наполненном шприце. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением, имеющее пролонгированный период полувыведения.
[0349] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, которое имеет IL-6 активность связывания, составляющую как минимум 50%, как минимум 60%, как минимум 70%, как минимум 80%, как минимум 90%, как минимум 95%, или как минимум 99% IL-6 активности связывания реперного антитела, где указанную композицию хранили при приблизительно 5°C в течение как минимум приблизительно 1 месяц, как минимум приблизительно 2 месяца, как минимум приблизительно 3 месяца, как минимум приблизительно 4 месяца, как минимум приблизительно 5 месяцев, как минимум приблизительно 6 месяцев, как минимум приблизительно 7 месяцев, как минимум приблизительно 8 месяцев, как минимум приблизительно 9 месяцев, как минимум приблизительно 10 месяцев, как минимум приблизительно 11 месяцев, или как минимум приблизительно 12 месяцев. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело которое имеет IL-6 активность связывания, составляющую как минимум 50%, как минимум 60%, как минимум 70%, как минимум 80%, как минимум 90%, как минимум 95%, или как минимум 99% IL-6 активности связывания реперного антитела, где указанную композицию хранили при приблизительно 5°C в течение как минимум приблизительно 1 года, как минимум приблизительно 2 лет, как минимум приблизительно 3 лет, как минимум приблизительно 4 лет, как минимум приблизительно 5 лет, как минимум приблизительно 6 лет, как минимум приблизительно 7 лет, как минимум приблизительно 8 лет, как минимум приблизительно 9 лет, как минимум приблизительно 10 лет, как минимум приблизительно 11 лет, или как минимум приблизительно 12 лет. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения.
[0350] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, которое имеет IL-6 активность связывания, составляющую как минимум 50%, как минимум 60%, как минимум 70%, как минимум 80%, как минимум 90%, как минимум 95%, или как минимум 99% IL-6 активности связывания реперного антитела, где указанную композицию хранили при приблизительно 40°C в течение приблизительно 1 недели, приблизительно 2 недель, приблизительно 3 недель, или приблизительно 4 недели. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антител, которое имеет IL-6 активность связывания, составляющую как минимум 50%, как минимум 60%, как минимум 70%, как минимум 80%, как минимум 90%, как минимум 95%, или как минимум 99% IL-6 активности связывания реперного антитела, где указанную композицию хранили при приблизительно 40°C в течение приблизительно 1 месяц, приблизительно 2 месяца, приблизительно 3 месяца, приблизительно 4 месяца, приблизительно 5 месяца, или приблизительно 6 месяца. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения.
[0351] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, которое имеет IL-6 активность связывания, составляющую как минимум 50%, как минимум 60%, как минимум 70%, как минимум 80%, как минимум 90%, как минимум 95%, или как минимум 99% IL-6 активности связывания реперного антитела, где указанную композицию хранили при приблизительно 25°C в течение приблизительно 1 недели, приблизительно 2 недель, приблизительно 3 недель, или приблизительно 4 недели. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, которое имеет IL-6 активность связывания, составляющую как минимум 50%, как минимум 60%, как минимум 70%, как минимум 80%, как минимум 90%, как минимум 95%, или как минимум 99% IL-6 активности связывания реперного антитела, где указанную композицию хранили при приблизительно 25°C в течение приблизительно 1 месяц, приблизительно 2 месяца, приблизительно 3 месяца, приблизительно 4 месяца, приблизительно 5 месяца, или приблизительно 6 месяца. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения.
[0352] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, которое имеет IL-6 активность связывания, составляющую как минимум 50%, как минимум 60%, как минимум 70%, как минимум 80%, как минимум 90%, как минимум 95%, или как минимум 99% IL-6 активности связывания реперного антитела, где указанную композицию хранили при приблизительно 5°C в течение приблизительно 1 месяца, приблизительно 2 месяцев, приблизительно 3 месяцев, приблизительно 4 месяцев, приблизительно 5 месяцев, приблизительно 6 месяцев, приблизительно 7 месяцев, приблизительно 8 месяцев, приблизительно 9 месяцев, приблизительно 10 месяцев, приблизительно 11 месяцев, или приблизительно 12 месяцев. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, которое имеет IL-6 активность связывания, составляющую как минимум 50%, как минимум 60%, как минимум 70%, как минимум 80%, как минимум 90%, как минимум 95%, или как минимум 99% IL-6 активности связывания реперного антитела, где указанную композицию хранили при приблизительно 5°C в течение приблизительно 1 года, приблизительно 2 лет, приблизительно 3 лет, приблизительно 4 лет, приблизительно 5 лет, приблизительно 6 лет, приблизительно 7 лет, приблизительно 8 лет, приблизительно 9 лет, приблизительно 10 лет, приблизительно 11 лет, или приблизительно 12 лет. В конкретном варианте исполнения, композицию в соответствии с данным изобретением хранят в предварительно наполненном шприце. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения.
[0353] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, где антитело теряет не более чем 50%, не более чем 40%, не более, чем 30%, не более чем 20%, не более чем 10%, не более чем 5%, или не более чем 1% его IL-6 активности связывания во время хранения композиции при приблизительно 40°C в течение как минимум приблизительно 1 недели, как минимум приблизительно 2 недель, как минимум приблизительно 3 недель, или как минимум приблизительно 4 недель. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6, где антитело теряет не более чем 50%, не более чем 40%, не более чем 30%, не более чем 20%, не более чем 10%, не более чем 5%, или не более чем 1% его IL-6 активности связывания во время хранения композиции при приблизительно 40°C в течение как минимум приблизительно 1 месяца, приблизительно 2 месяцев, приблизительно 3 месяцев, приблизительно 4 месяцев, приблизительно 5 месяцев, приблизительно 6 месяцев. В конкретном варианте исполнения, композицию в соответствии с данным изобретением хранят в предварительно наполненном шприце. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения.
[0354] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, где антитело теряет не более чем 50%, не более чем 40%, не более чем 30%, не более чем 20%, не более чем 10%, не более чем 5%, или не более чем 1% его IL-6 активности связывания во время хранения композиции при приблизительно 40°C в течение как минимум приблизительно 1 недели, как минимум приблизительно 2 недель, как минимум приблизительно 3 недель, или как минимум приблизительно 4 недели. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, где антитело теряет не более чем 50%, не более чем 40%, не более чем 30%, не более чем 20%, не более чем 10%, не более чем 5%, или не более чем 1% его IL-6 активности связывания во время хранения композиции при приблизительно 40°C в течение, как минимум приблизительно 1 месяца, приблизительно 2 месяцев, приблизительно 3 месяцев, приблизительно 4 месяцев, приблизительно 5 месяцев, приблизительно 6 месяцев. В конкретном варианте исполнения, композицию в соответствии с данным изобретением хранят в предварительно наполненном шприце. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения.
[0355] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, где антитело теряет не более чем 50%, не более чем 40%, не более чем 30%, не более чем 20%, не более чем 10%, не более чем 5%, или не более чем 1% его IL-6 активности связывания во время хранения композиции при приблизительно 25°C в течение, как минимум приблизительно 1 недели, как минимум приблизительно 2 недель, как минимум приблизительно 3 недель, или как минимум приблизительно 4 недели. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, где антитело теряет не более чем 50%, не более чем 40%, не более чем 30%, не более чем 20%, не более чем 10%, не более чем 5%, или не более чем 1% его IL-6 активности связывания во время хранения композиции при приблизительно 25°C в течение, как минимум приблизительно 1 месяца, приблизительно 2 месяцев, приблизительно 3 месяцев, приблизительно 4 месяцев, приблизительно 5 месяцев, приблизительно 6 месяцев. В конкретном варианте исполнения, композицию в соответствии с данным изобретением хранят в предварительно наполненном шприце. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения.
[0356] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, где антитело теряет не более чем 50%, не более чем 40%, не более чем 30%, не более чем 20%, не более чем 10%, не более чем 5%, или не более чем 1% его IL-6 активности связывания во время хранения композиции при приблизительно 5°C в течение, как минимум приблизительно 1 месяц, как минимум приблизительно 2 месяца, как минимум приблизительно 3 месяца, как минимум приблизительно 4 месяца, как минимум приблизительно 5 месяцев, как минимум приблизительно 6 месяцев, как минимум приблизительно 7 месяцев, как минимум приблизительно 8 месяцев, как минимум приблизительно 9 месяцев, как минимум приблизительно 10 месяцев, как минимум приблизительно 11 месяцев, или как минимум приблизительно 12 месяцев. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, где антитело теряет не более чем 50%, не более чем 40%, не более чем 30%, не более чем 20%, не более чем 10%, не более чем 5%, или не более чем 1% его IL-6 активности связывания во время хранения композиции при приблизительно 5°C в течение, как минимум приблизительно 1 года, как минимум приблизительно 2 лет, как минимум приблизительно 3 лет, как минимум приблизительно 4 лет, как минимум приблизительно 5 лет, как минимум приблизительно 6 лет, как минимум приблизительно 7 лет, как минимум приблизительно 8 лет, как минимум приблизительно 9 лет, как минимум приблизительно 10 лет, как минимум приблизительно 11 лет, или как минимум приблизительно 12 лет. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения.
[0357] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6, где антитело теряет не более чем 50%, не более чем 40%, не более чем 30%, не более чем 20%, не более чем 10%, не более чем 5%, или не более чем 1% его IL-6 активности связывания во время хранения композиции при приблизительно 40°C в течение приблизительно 1 недели, приблизительно 2 недель, приблизительно 3 недель, или приблизительно 4 недель. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, где антитело теряет не более чем 50%, не более чем 40%, не более чем 30%, не более чем 20%, не более чем 10%, не более чем 5%, или не более чем 1% его IL-6 активности связывания во время хранения композиции при приблизительно 40°C в течение приблизительно 1 месяц, приблизительно 2 месяца, приблизительно 3 месяца, приблизительно 4 месяца, приблизительно 5 месяцев, или приблизительно 6 месяцев. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения.
[0358] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, где антитело теряет не более чем 50%, не более чем 40%, не более чем 30%, не более чем 20%, не более чем 10%, не более чем 5%, или не более чем 1% его IL-6 активности связывания во время хранения композиции при приблизительно 25°C в течение приблизительно 1 недели, приблизительно 2 недель, приблизительно 3 недель, или приблизительно 4 недель. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, где антитело теряет не более чем 50%, не более чем 40%, не более чем 30%, не более чем 20%, не более чем 10%, не более чем 5%, или не более чем 1% его IL-6 активности связывания во время хранения композиции при приблизительно 25°C в течение приблизительно 1 месяц, приблизительно 2 месяца, приблизительно 3 месяца, приблизительно 4 месяца, приблизительно 5 месяцев, или приблизительно 6 месяцев. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения.
[0359] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, где антитело теряет не более чем 50%, не более чем 40%, не более чем 30%, не более чем 20%, не более чем 10%, не более чем 5%, или не более чем 1% его IL-6 активности связывания во время хранения композиции при приблизительно 5°C в течение приблизительно 1 месяца, приблизительно 2 месяцев, приблизительно 3 месяцев, приблизительно 4 месяцев, приблизительно 5 месяцев, приблизительно 6 месяцев, приблизительно 7 месяцев, приблизительно 8 месяцев, приблизительно 9 месяцев, приблизительно 10 месяцев, приблизительно 11 месяцев, или приблизительно 12 месяцев. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением, где антитело теряет не более чем 50%, не более чем 40%, не более чем 30%, не более чем 20%, не более чем 10%, не более чем 5%, или не более чем 1% его IL-6 активности связывания во время хранения композиции при приблизительно 5°C в течение приблизительно 1 года, приблизительно 2 лет, приблизительно 3 лет, приблизительно 4 лет, приблизительно 5 лет, приблизительно 6 лет, приблизительно 7 лет, приблизительно 8 лет, приблизительно 9 лет, приблизительно 10 лет, приблизительно 11 лет, или приблизительно 12 лет. В конкретном варианте исполнения, композицию в соответствии с данным изобретением хранят в предварительно наполненном шприце. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения.
[0360] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, где менее чем 1%, менее чем 2%, менее чем 3%, менее чем 4%, менее чем 5%, менее чем 7% или менее чем 10% указанного антитела образует агрегат, что определено при помощи ВЭЭХ при хранении при приблизительно 40°C в течение как минимум приблизительно 1 недели, как минимум приблизительно 2 недель, как минимум приблизительно 3 недель, или как минимум приблизительно 4 недель. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, где менее чем 1%, менее чем 2%, менее чем 3%, менее чем 4%, менее чем 5%, менее чем 7% или менее чем 10% указанного антитела образует агрегат, как определено при помощи ВЭЭХ при хранении при приблизительно 40°C в течение как минимум приблизительно 1 месяца, приблизительно 2 месяцев, приблизительно 3 месяцев, приблизительно 4 месяцев, приблизительно 5 месяцев, приблизительно 6 месяцев. В конкретном варианте исполнения, композицию в соответствии с данным изобретением хранят в предварительно наполненном шприце. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения.
[0361] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, где менее чем 1%, менее чем 2%, менее чем 3%, менее чем 4%, менее чем 5%, менее чем 7% или менее чем 10% указанного антитела образует агрегат, что определено при помощи ВЭЭХ при хранении при приблизительно 25°C в течение как минимум приблизительно 1 недели, как минимум приблизительно 2 недель, как минимум приблизительно 3 недель, или как минимум приблизительно 4 недель. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, где менее чем 1%, менее чем 2%, менее чем 3%, менее чем 4%, менее чем 5%, менее чем 7% или менее чем 10% указанного антитела образует агрегат, что определено при помощи ВЭЭХ при хранении при приблизительно 25°C в течение, как минимум приблизительно 1 месяца, приблизительно 2 месяцев, приблизительно 3 месяцев, приблизительно 4 месяцев, приблизительно 5 месяцев, приблизительно 6 месяцев. В конкретном варианте исполнения, композицию в соответствии с данным изобретением хранят в предварительно наполненном шприце. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения.
[0362] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, где менее чем 1%, менее чем 2%, менее чем 3%, менее чем 4%, менее чем 5%, менее чем 7% или менее чем 10% указанного антитела образует агрегат, что определено при помощи ВЭЭХ при хранении при приблизительно 5°C в течение, как минимум приблизительно 1 месяц, как минимум приблизительно 2 месяца, как минимум приблизительно 3 месяца, как минимум приблизительно 4 месяца, как минимум приблизительно 5 месяцев, как минимум приблизительно 6 месяцев, как минимум приблизительно 7 месяцев, как минимум приблизительно 8 месяцев, как минимум приблизительно 9 месяцев, как минимум приблизительно 10 месяцев, как минимум приблизительно 11 месяцев, или как минимум приблизительно 12 месяцев. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, где менее чем 1%, менее чем 2%, менее чем 3%, менее чем 4%, менее чем 5%, менее чем 7% или менее чем 10% указанного антитела образует агрегат, что определено при помощи ВЭЭХ при хранении при приблизительно 5°C в течение, как минимум приблизительно 1 года, как минимум приблизительно 2 лет, как минимум приблизительно 3 лет, как минимум приблизительно 4 лет, как минимум приблизительно 5 лет, как минимум приблизительно 6 лет, как минимум приблизительно 7 лет, как минимум приблизительно 8 лет, как минимум приблизительно 9 лет, как минимум приблизительно 10 лет, как минимум приблизительно 11 лет, или как минимум приблизительно 12 лет. В конкретном варианте исполнения, композицию в соответствии с данным изобретением хранят в предварительно наполненном шприце. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения.
[0363] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, где менее чем 1%, менее чем 2%, менее чем 3%, менее чем 4%, менее чем 5%, менее чем 7% или менее чем 10% указанного антитела образует агрегат, что определено при помощи ВЭЭХ при хранении при приблизительно 40°C в течение приблизительно 1 недели, приблизительно 2 недель, приблизительно 3 недель, или приблизительно 4 недель. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, где менее чем 1%, менее чем 2%, менее чем 3%, менее чем 4%, менее чем 5%, менее чем 7% или менее чем 10% указанного антитела образует агрегат, что определено при помощи ВЭЭХ при хранении при приблизительно 40°C в течение приблизительно 1 месяца, приблизительно 2 месяцев, приблизительно 3 месяцев, приблизительно 4 месяцев, приблизительно 5 месяцев, или приблизительно 6 месяцев. В конкретном варианте исполнения, композицию в соответствии с данным изобретением хранят в предварительно наполненном шприце. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения.
[0364] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, где менее чем 1%, менее чем 2%, менее чем 3%, менее чем 4%, менее чем 5%, менее чем 7% или менее чем 10% указанного антитела образует агрегат, что определено при помощи ВЭЭХ при хранении при приблизительно 25°C в течение приблизительно 1 недели, приблизительно 2 недель, приблизительно 3 недель, или приблизительно 4 недель. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, где менее чем 1%, менее чем 2%, менее чем 3%, менее чем 4%, менее чем 5%, менее чем 7% или менее чем 10% указанного антитела образует агрегат, что определено при помощи ВЭЭХ при хранении при приблизительно 25°C в течение приблизительно 1 месяц, приблизительно 2 месяцев, приблизительно 3 месяцев, приблизительно 4 месяцев, приблизительно 5 месяцев, или приблизительно 6 месяцев. В конкретном варианте исполнения, композицию в соответствии с данным изобретением хранят в предварительно наполненном шприце. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения.
[0365] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, где менее чем 1%, менее чем 2%, менее чем 3%, менее чем 4%, менее чем 5%, менее чем 7% или менее чем 10% указанного антитела образует агрегат, что определено при помощи ВЭЭХ при хранении при приблизительно 5°C в течение приблизительно 1 месяца, приблизительно 2 месяцев, приблизительно 3 месяцев, приблизительно 4 месяцев, приблизительно 5 месяцев, приблизительно 6 месяцев, приблизительно 7 месяцев, приблизительно 8 месяцев, приблизительно 9 месяцев, приблизительно 10 месяцев, приблизительно 11 месяцев, или приблизительно 12 месяцев. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, где менее, чем 1%, менее чем 2%, менее чем 3%, менее чем 4%, менее чем 5%, менее чем 7% или менее чем 10% указанного антитела образует агрегат как определено при помощи ВЭЭХ при хранении при приблизительно 5°C в течение приблизительно 1 года, приблизительно 2 лет, приблизительно 3 лет, приблизительно 4 лет, приблизительно 5 лет, приблизительно 6 лет, приблизительно 7 лет, приблизительно 8 лет, приблизительно 9 лет, приблизительно 10 лет, приблизительно 11 лет, или приблизительно 12 лет. В конкретном варианте исполнения, композицию в соответствии с данным изобретением хранят в предварительно наполненном шприце. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения.
[0366] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, где менее чем 1%, менее чем 2%, менее чем 3%, менее чем 4%, менее чем 5%, менее, чем 7% или менее, чем 10% указанного антитела фрагментируется, что определено при помощи обращенно-фазной ВЭЖХ или ЭХ при хранении при приблизительно 40°C в течение, как минимум приблизительно 1 недели, как минимум приблизительно 2 недель, как минимум приблизительно 3 недель, или как минимум приблизительно 4 недель. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, где менее чем 1%, менее чем 2%, менее чем 3%, менее чем 4%, менее чем 5%, менее чем 7% или менее чем 10% указанного антитела фрагментируется, что определено при помощи обращенно-фазной ВЭЖХ или ЭХ при хранении при приблизительно 40°C в течение, как минимум приблизительно 1 месяца, приблизительно 2 месяцев, приблизительно 3 месяцев, приблизительно 4 месяцев, приблизительно 5 месяцев, приблизительно 6 месяцев. В конкретном варианте исполнения, композицию в соответствии с данным изобретением хранят в предварительно наполненном шприце. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения.
[0367] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, где менее чем 1%, менее чем 2%, менее чем 3%, менее чем 4%, менее чем 5%, менее чем 7% или менее чем 10% указанного антитела фрагментируется, что определено при помощи обращенно-фазной ВЭЖХ или ЭХ при хранении при приблизительно 25°C в течение, как минимум приблизительно 1 недели, как минимум приблизительно 2 недель, как минимум приблизительно 3 недель, или как минимум приблизительно 4 недели. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, где менее чем 1%, менее чем 2%, менее чем 3%, менее чем 4%, менее чем 5%, менее чем 7% или менее чем 10% указанного антитела фрагментируется, что определено при помощи обращенно-фазной ВЭЖХ или ЭХ при хранении при приблизительно 25°C в течение, как минимум приблизительно 1 месяца, приблизительно 2 месяцев, приблизительно 3 месяцев, приблизительно 4 месяцев, приблизительно 5 месяцев, приблизительно 6 месяцев. В конкретном варианте исполнения, композицию в соответствии с данным изобретением хранят в предварительно наполненном шприце. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения.
[0368] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, где менее чем 1%, менее чем 2%, менее чем 3%, менее чем 4%, менее чем 5%, менее чем 7% или менее чем 10% указанного антитела фрагментируется, что определено при помощи обращенно-фазной ВЭЖХ или ЭХ при хранении при приблизительно 5°C в течение, как минимум приблизительно 1 месяц, как минимум приблизительно 2 месяца, как минимум приблизительно 3 месяца, как минимум приблизительно 4 месяца, как минимум приблизительно 5 месяцев, как минимум приблизительно 6 месяцев, как минимум приблизительно 7 месяцев, как минимум приблизительно 8 месяцев, как минимум приблизительно 9 месяцев, как минимум приблизительно 10 месяцев, как минимум приблизительно 11 месяцев, или как минимум приблизительно 12 месяцев. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, где менее чем 1%, менее чем 2%, менее чем 3%, менее чем 4%, менее чем 5%, менее чем 7% или менее чем 10% указанного антитела фрагментируется, что определено при помощи обращенно-фазной ВЭЖХ или ЭХ при хранении при приблизительно 5°C в течение, как минимум приблизительно 1 года, как минимум приблизительно 2 лет, как минимум приблизительно 3 лет, как минимум приблизительно 4 лет, как минимум приблизительно 5 лет, как минимум приблизительно 6 лет, как минимум приблизительно 7 лет, как минимум приблизительно 8 лет, как минимум приблизительно 9 лет, как минимум приблизительно 10 лет, как минимум приблизительно 11 лет, или как минимум приблизительно 12 лет. В конкретном варианте исполнения, композицию в соответствии с данным изобретением хранят в предварительно наполненном шприце. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения.
[0369] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, где менее чем 1%, менее чем 2%, менее чем 3%, менее чем 4%, менее чем 5%, менее чем 7% или менее чем 10% указанного антитела фрагментируется, что определено при помощи обращенно-фазной ВЭЖХ или ЭХ при хранении при приблизительно 40°C в течение приблизительно 1 недели, приблизительно 2 недель, приблизительно 3 недель, или приблизительно 4 недель. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, где менее чем 1%, менее чем 2%, менее чем 3%, менее чем 4%, менее чем 5%, менее чем 7% или менее чем 10% указанного антитела фрагментируется, что определено при помощи обращенно-фазной ВЭЖХ или ЭХ при хранении при приблизительно 40°C в течение приблизительно 1 месяц, приблизительно 2 месяца, приблизительно 3 месяца, приблизительно 4 месяца, приблизительно 5 месяцев, или приблизительно 6 месяцев. В конкретном варианте исполнения, композицию в соответствии с данным изобретением хранят в предварительно наполненном шприце. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения.
[0370] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, где менее чем 1%, менее чем 2%, менее чем 3%, менее чем 4%, менее чем 5%, менее чем 7% или менее чем 10% указанного антитела фрагментируется, что определено при помощи обращенно-фазной ВЭЖХ или ЭХ при хранении при приблизительно 25°C в течение приблизительно 1 недели, приблизительно 2 недель, приблизительно 3 недель, или приблизительно 4 недель. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, где менее чем 1%, менее чем 2%, менее чем 3%, менее чем 4%, менее чем 5%, менее чем 7% или менее чем 10% указанного антитела фрагментируется, что определено при помощи обращенно-фазной ВЭЖХ или ЭХ при хранении при приблизительно 25°C в течение приблизительно 1 месяц, приблизительно 2 месяца, приблизительно 3 месяца, приблизительно 4 месяца, приблизительно 5 месяцев, или приблизительно 6 месяцев. В конкретном варианте исполнения, композицию в соответствии с данным изобретением хранят в предварительно наполненном шприце. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения.
[0371] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, где менее чем 1%, менее чем 2%, менее чем 3%, менее чем 4%, менее чем 5%, менее чем 7% или менее чем 10% указанного антитела фрагментируется, что определено при помощи обращенно-фазной ВЭЖХ или ЭХ при хранении при приблизительно 5°C в течение приблизительно 1 месяца, приблизительно 2 месяцев, приблизительно 3 месяцев, приблизительно 4 месяцев, приблизительно 5 месяцев, приблизительно 6 месяцев, приблизительно 7 месяцев, приблизительно 8 месяцев, приблизительно 9 месяцев, приблизительно 10 месяцев, приблизительно 11 месяцев, или приблизительно 12 месяцев. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, где менее чем 1%, менее чем 2%, менее чем 3%, менее чем 4%, менее чем 5%, менее чем 7% или менее чем 10% указанного антитела фрагментируется, что определено при помощи обращенно-фазной ВЭЖХ или ЭХ при хранении при приблизительно 5°C в течение приблизительно 1 года, приблизительно 2 лет, приблизительно 3 лет, приблизительно 4 лет, приблизительно 5 лет, приблизительно 6 лет, приблизительно 7 лет, приблизительно 8 лет, приблизительно 9 лет, приблизительно 10 лет, приблизительно 11 лет, или приблизительно 12 лет. В конкретном варианте исполнения, композицию в соответствии с данным изобретением хранят в предварительно наполненном шприце. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения.
[0372] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является прозрачной и бесцветной, что определено при помощи визуального исследования при хранении приблизительно при 40°C в течение, как минимум приблизительно 1 недели, как минимум приблизительно 2 недель, как минимум приблизительно 3 недель, или как минимум приблизительно 4 недель. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является прозрачной и бесцветной, что определено при помощи визуального исследования при хранении приблизительно при 40°C в течение, как минимум приблизительно 1 месяца, приблизительно 2 месяцев, приблизительно 3 месяцев, приблизительно 4 месяцев, приблизительно 5 месяцев, приблизительно 6 месяцев. В конкретном варианте исполнения, композицию в соответствии с данным изобретением хранят в предварительно наполненном шприце. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения.
[0373] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является прозрачной и бесцветной, что определено при помощи визуального исследования при хранении приблизительно при 25°C в течение, как минимум приблизительно 1 недели, как минимум приблизительно 2 недель, как минимум приблизительно 3 недель, или как минимум приблизительно 4 недель. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является прозрачной и бесцветной, что определено при помощи визуального исследования при хранении приблизительно при 25°C в течение, как минимум приблизительно 1 месяца, приблизительно 2 месяцев, приблизительно 3 месяцев, приблизительно 4 месяцев, приблизительно 5 месяцев, приблизительно 6 месяцев. В конкретном варианте исполнения, композицию в соответствии с данным изобретением хранят в предварительно наполненном шприце. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения.
[0374] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является прозрачной и бесцветной, что определено при помощи визуального исследования при хранении приблизительно при 5°C в течение, как минимум приблизительно 1 месяц, как минимум приблизительно 2 месяца, как минимум приблизительно 3 месяца, как минимум приблизительно 4 месяца, как минимум приблизительно 5 месяцев, как минимум приблизительно 6 месяцев, как минимум приблизительно 7 месяцев, как минимум приблизительно 8 месяцев, как минимум приблизительно 9 месяцев, как минимум приблизительно 10 месяцев, как минимум приблизительно 11 месяцев, или как минимум приблизительно 12 месяцев. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является прозрачной и бесцветной, что определено при помощи визуального исследования при хранении при приблизительно 5°C в течение, как минимум приблизительно 1 года, как минимум приблизительно 2 лет, как минимум приблизительно 3 лет, как минимум приблизительно 4 лет, как минимум приблизительно 5 лет, как минимум приблизительно 6 лет, как минимум приблизительно 7 лет, как минимум приблизительно 8 лет, как минимум приблизительно 9 лет, как минимум приблизительно 10 лет, как минимум приблизительно 11 лет, или как минимум приблизительно 12 лет. В конкретном варианте исполнения, композицию в соответствии с данным изобретением хранят в предварительно наполненном шприце. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения.
[0375] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является прозрачной и бесцветной, что определено при помощи визуального исследования при хранении приблизительно при 40°C в течение приблизительно 1 недели, приблизительно 2 недель, приблизительно 3 недель, или приблизительно 4 недели. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является прозрачной и бесцветной, что определено при помощи визуального исследования при хранении приблизительно при 40°C в течение приблизительно 1 месяц, приблизительно 2 месяца, приблизительно 3 месяца, приблизительно 4 месяца, приблизительно 5 месяца, или приблизительно 6 месяцев. В конкретном варианте исполнения, композицию в соответствии с данным изобретением хранят в предварительно наполненном шприце. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения.
[0376] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является прозрачной и бесцветной, что определено при помощи визуального исследования при хранении приблизительно при 25°C в течение приблизительно 1 недели, приблизительно 2 недель, приблизительно 3 недель, или приблизительно 4 недель. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является прозрачной и бесцветной, что определено при помощи визуального исследования при хранении приблизительно при 25°C в течение приблизительно 1 месяц, приблизительно 2 месяца, приблизительно 3 месяца, приблизительно 4 месяца, приблизительно 5 месяцев, или приблизительно 6 месяцев. В конкретном варианте исполнения, композицию в соответствии с данным изобретением хранят в предварительно наполненном шприце. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения.
[0377] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является прозрачной и бесцветной, что определено при помощи визуального исследования при хранении приблизительно при 5°C в течение приблизительно 1 месяца, приблизительно 2 месяцев, приблизительно 3 месяцев, приблизительно 4 месяцев, приблизительно 5 месяцев, приблизительно 6 месяцев, приблизительно 7 месяцев, приблизительно 8 месяцев, приблизительно 9 месяцев, приблизительно 10 месяцев, приблизительно 11 месяцев, или приблизительно 12 месяцев. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является прозрачной и бесцветной, что определено при помощи визуального исследования при хранении приблизительно при 5°C в течение приблизительно 1 года, приблизительно 2 лет, приблизительно 3 лет, приблизительно 4 лет, приблизительно 5 лет, приблизительно 6 лет, приблизительно 7 лет, приблизительно 8 лет, приблизительно 9 лет, приблизительно 10 лет, приблизительно 11 лет, или приблизительно 12 лет. В конкретном варианте исполнения, композицию в соответствии с данным изобретением хранят в предварительно наполненном шприце. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения.
[0378] В определенных вариантах исполнения, композиции в соответствии с данным изобретением сохраняют улучшенные профили агрегации после хранения, например, в течение пролонгированных периодов (например, но, не ограничиваясь приведенным, до 1 недели, 1 месяца, 6 месяцев, 1 года, 2 лет, 3 лет или 5 лет) при комнатной температуре или 4°C или в течение периодов (таких, как, но не ограничиваясь приведенным, до 1 недели, 2 недель, 3 недель, 1 месяца, 2 месяцев, 3 месяцев, или 6 месяцев) при повышенных температурах, например, 38°C-42°C. В определенных вариантах исполнения, композиции сохраняют улучшенные профили агрегации после хранения при воздействии света или хранении в темноте в условиях различной влажности, включая, но, не ограничиваясь приведенным, относительную влажность вплоть до 10%, или вплоть до 20%, или вплоть до 30%, или вплоть до 40%, или вплоть до 50%, или вплоть до 60%, или вплоть до 70%, или вплоть до 80%, или вплоть до 90%, или вплоть до 100%. В данной области будет понятно, что термин условия "окружающей среды" в общем, относится к температурам, составляющим приблизительно 20°C при относительной влажности от 10% до 60% при воздействии света. Аналогично, температуры от приблизительно 2°C до приблизительно 8°C при относительной влажности менее чем приблизительно 10%, вместе называют "4°C" или "5°C", температуры от приблизительно 23°C до приблизительно 27°C при относительной влажности приблизительно 60% вместе называют "25°C" и температуры от приблизительно 38°C до приблизительно 42°C при относительной влажности приблизительно 75% вместе называют "40°C." В конкретном варианте исполнения, композицию в соответствии с данным изобретением хранят в предварительно наполненном шприце.
[0379] В определенных вариантах исполнения, после хранения при 4°C в течение как минимум один месяц, композиции в соответствии с данным изобретением имеют (или содержат в виде агрегированной фракции) профиль частиц менее чем приблизительно 3,4 Е + 5 частиц/мл диаметра 2-4 мкм, менее чем приблизительно 4,0 Е + 4 частиц/мл диаметра 4-10 мкм, менее чем приблизительно 4,2 Е + 3 частиц/мл диаметра 10-20 мкм, менее чем приблизительно 5,0 Е + 2 частиц/мл диаметра 20-30 мкм, менее чем приблизительно 7,5 Е + 1 частиц/мл диаметра 30-40 мкм и менее чем приблизительно 9,4 частиц/мл диаметра 40-60 мкм, как определено при помощи счетчика частиц. В определенных вариантах исполнения, композиции в соответствии с данным изобретением не содержат детектируемых частиц более 40 мкм, или более 30 мкм. В конкретном варианте исполнения, композицию в соответствии с данным изобретением хранят в предварительно наполненном шприце.
[0380] В данной области известны многочисленные способы, известные для определения степени агрегации, и/или типов и/или размеров агрегатов, присутствующих в белковой композиции (например, композиции антитела в соответствии с данным изобретением), включая, но не ограничиваясь приведенным, эксклюзионную хроматографию (ЭХ), высокоэффективную эксклюзионную хроматографию (ВЭЭХ), статическое рассеяние света (СРС), инфракрасную спектроскопию с Фурье-преобразованием (FT-ИК), циркулярный дихроизм (ЦД), методы разворачивания белков, индуцированные мочевиной, собственную флуоресценцию триптофана, дифференциальную сканирующую калориметрию и способы связывания белков 1-анилино-8-нафталинсульфоновой кислотой (АНС). Например, эксклюзионная хроматография (ЭХ) может быть выполнена для разделения молекул, исходя из их размеров, путем прохождения молекул через колонку, упакованную соответствующей смолой, где большие молекулы (например, агрегаты) будут элюировать перед меньшими молекулами (например, мономерами). Молекулы, в общем, детектируют по УФ поглощению при 280 нМ и они могут быть собраны для дополнительной характеристики. Для ЭХ анализа (ВЭ-ЭХ) часто используют колонки для жидкой хроматографии высокого давления. Конкретные ЭХ способы подробно описаны в разделе под названием "Примеры" ниже. Альтернативно, может быть использовано аналитическое ультрацентрифугирование (АУЦ). АУЦ является ортогональной методикой, которая определяет коэффициенты седиментации (о которых сообщено в Svedberg, S) макромолекул в жидкой пробе. Аналогично ЭХ, АУЦ может разделять и детектировать фрагменты/агрегаты антител от мономеров и дополнительно способно предоставлять информацию про молекулярную массу. Агрегация белков в композиции может быть также охарактеризована анализом при помощи счетчика частиц Культера или при помощи измерений мутности с использованием нефелометра. Мутность является мерой количества, на которое частицы в растворе рассеивают свет и, таким образом, могут быть использованы в качестве общего индикатора агрегации белка. Дополнительно, не восстанавливающий электрофорез в полиакриламидном геле (PAGE) или капиллярный гель-электрофорез (КГЭ) могут быть использованы для характеристики состояния агрегации и/или фрагментации антитела или его фрагмента в композиции в соответствии с данным изобретением.
[0381] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением предназначена для парентерального введения. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением является композицией для инъекций. В конкретных вариантах исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением приемлема для внутривенной, внутримышечной, интраартериальной, интратекальной, интракапсулярной, интраорбитальной, интракардиальной, интрадермальной, интраперитонеальной, периневральной транстрахеальной, подкожной, субкутикулярной, внутрисуставной, субкапсулярной, субарахноидальной, интраспинальной, эпидуральной и надчревной инъекции или инфузии. В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением предназначена для внутривенного, подкожного, или внутримышечного введения. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, где указанная композиция предназначена для подкожной инъекции. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, где указанная композиция предназначена для внутривенной инъекции. В конкретном варианте исполнения, композицию в соответствии с данным изобретением хранят в предварительно наполненном шприце. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения.
[0382] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением предназначена для внутривенного введения, где указанная композиция содержит приблизительно от 1 мг/мл до приблизительно 60 мг/мл, приблизительно от 1 мг/мл до приблизительно 50 мг/мл, приблизительно от 1 мг/мл до приблизительно 40 мг/мл, приблизительно от 10 мг/мл до приблизительно 60 мг/мл, приблизительно от 10 мг/мл до приблизительно 50 мг/мл, приблизительно от 10 мг/мл до приблизительно 40 мг/мл, приблизительно от 20 мг/мл до приблизительно 60 мг/мл, приблизительно от 20 мг/мл до приблизительно 50 мг/мл, приблизительно от 20 мг/мл до приблизительно 40 мг/мл, приблизительно от 30 мг/мл до приблизительно 60 мг/мл, приблизительно от 30 мг/мл до приблизительно 50 мг/мл, или приблизительно от 30 мг/мл до приблизительно 40 мг/мл анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением, имеющее пролонгированный период полувыведения.
[0383] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением предназначена для периневрального или интратекального введения, где композиция содержит от приблизительно 0,01 мкг/мл до приблизительно 50 мкг/мл, от приблизительно 0,05 мкг/мл до приблизительно 45 мкг/мл, от приблизительно 0,1 мкг/мл до приблизительно 30 мкг/мл, от приблизительно 0,15 мкг/мл до приблизительно 25 мкг/мл, от приблизительно 0,2 мкг/мл до приблизительно 20 мкг/мл, от приблизительно 0,25 мкг/мл до приблизительно 17,5 мкг/мл, от приблизительно 0,5 мкг/мл до приблизительно 15 мкг/мл, от приблизительно 0,75 мкг/мл до приблизительно 12,5 мкг/мл, от приблизительно 0,6 мкг/мл до приблизительно 10 мкг/мл, от приблизительно 1,0 мкг/мл до приблизительно 8 мкг/мл, от приблизительно 1,25 мкг/мл до приблизительно 7,5 мкг/мл, или от приблизительно 1,5 мкг/мл до приблизительно 6 мкг/мл анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения.
[0384] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением предназначена для подкожного введения, где указанная композиция содержит от приблизительно 1 мг/мл до приблизительно 100 мг/мл, от приблизительно 1 мг/мл до приблизительно 150 мг/мл, от приблизительно 1 мг/мл до приблизительно 200 мг/мл, от приблизительно 25 мг/мл до приблизительно 100 мг/мл, от приблизительно 25 мг/мл до приблизительно 150 мг/мл, от приблизительно 25 мг/мл до приблизительно 200 мг/мл, от приблизительно 50 мг/мл до приблизительно 100 мг/мл, от приблизительно 50 мг/мл до приблизительно 150 мг/мл, от приблизительно 50 мг/мл до приблизительно 200 мг/мл, от приблизительно 75 мг/мл до приблизительно 100 мг/мл, от приблизительно 75 мг/мл до приблизительно 150 мг/мл или от приблизительно 75 мг/мл до приблизительно 200 мг/мл анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением обеспечена в предварительно наполненном шприце. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6, имеющее пролонгированный период полувыведения.
[0385] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением предназначена для аэрозольного введения.
[0386] Данное изобретение также представляет фармацевтическую стандартную лекарственную форму, приемлемую для парентерального введения человеку, которая содержит композицию анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением в приемлемом контейнере. В одном варианте исполнения, фармацевтическая стандартная лекарственная форма в соответствии с данным изобретением содержит внутривенно, подкожно, или внутримышечно доставленную композицию анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением. В другом варианте исполнения, фармацевтическая стандартная лекарственная форма в соответствии с данным изобретением одержит аэрозольно доставленную композицию анти-IL-6 антитела. В конкретном варианте исполнения, фармацевтическая стандартная лекарственная форма в соответствии с данным изобретением содержит подкожно доставленную композицию анти-IL-6 антитела. В другом варианте исполнения, фармацевтическая стандартная лекарственная форма в соответствии с данным изобретением одержит аэрозольно доставленную композицию анти-IL-6 антитела. В дополнительном варианте исполнения, фармацевтическая стандартная лекарственная форма в соответствии с данным изобретением содержит интраназально введенную композицию анти-IL-6 антитела. В одном варианте исполнения, приемлемый контейнер представляет собой предварительно наполненный шприц. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения.
[0387] В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением обеспечена герметиченым контейнером. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением обеспечена в предварительно наполненном шприце. В конкретном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением содержит анти-IL-6 антитело, имеющее пролонгированный период полувыведения.
[0388] Данное изобретение дополнительно представляет набор, содержавший композицию анти-IL-6 антитела в соответствии с данным изобретением. Данное изобретение представляет фармацевтическую упаковку или набор, содержавший один или более контейнеров, наполненных жидкой композицией или лиофилизированной композицией в соответствии с данным изобретением. В одном варианте исполнения, контейнер, наполненный жидкой композицией в соответствии с данным изобретением, является предварительно наполненным шприцем. В конкретном варианте исполнения, композиции в соответствии с данным изобретением содержит антитела (включая их антительные фрагменты), рекомбинантно гибридизованные или химически конъюгированные с другим фрагментом, включая, но, не ограничиваясь приведенным, гетерологический белок, гетерологический полипептид, гетерологический пептид, большую молекулу, малую молекулу, маркерную последовательность, диагностический или детектируемый агент, терапевтическую группу, лекарственную группу, ион радиоактивного металла, второе антитело и твердую подложку. В конкретном варианте исполнения, композиции в соответствии с данным изобретением составляют в ампулах для стандартных лекарственных доз в виде стерильной жидкости. Композиции в соответствии с данным изобретением могут быть поставлены в боросиликатных янтарных ампулах 3 сс USP типа I (West Pharmaceutical Serices - Part No. 6800-0675) с целевым объемом 1,2 мл. Необязательно вложенной в такой контейнер (такие контейнеры) может быть уведомление в форме, предписанной государственным органом, регулирующим производство, применение или продажу фармацевтических или биологических продуктов, где уведомление содержит утверждение органом производства, применения или продажи для введения человеку. В другом варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением может быть поставлена в предварительно наполненном шприце.
[0389] В одном варианте исполнения, контейнер, наполненный жидкой композицией в соответствии с данным изобретением, представляет собой предварительно наполненный шприц. Любой предварительно наполненный шприц, известный специалисту в данной области, может быть использован в комбинации с жидкой композицией в соответствии с данным изобретением. Предварительно наполненные шприцы, которые могут быть использованы, описаны в публикациях, но не ограничиваясь приведенным, РСТ публикациях WO 05032627, WO 08094984, WO 9945985, WO 03077976, US Patents US 6792743, US 5607400, US 5893842, US 7081107, US 7041087, US 5989227, US 6807797, US 6142976, US 5899889, патентных публикациях США US20070161961A1, US 20050075611 A1, US 20070092487 A1, US 20040267194 A1, US 20060129108 A1. Предварительно наполненные шприцы могут быть выполнены из различных материалов. В одном варианте исполнения предварительно наполненный шприц является стеклянным шприцом. В другом варианте исполнения предварительно наполненный шприц является пластиковым шприцом. Специалист в данной области поймет, что характер и/или количество материалов, которые используют при производстве шприца, могут влиять на белковую композицию, которую хранят в шприце. Например, понятно, что любриканты на силиконовой основе, осажденные на внутренней поверхности камеры шприца, могут влиять на образование частиц в белковой композиции. В одном варианте исполнения, предварительно наполненный шприц содержит любрикант на силиконовой основе. В одном варианте исполнения, предварительно наполненный шприц содержит запеченный силикон. В другом варианте исполнения, предварительно наполненный шприц не содержит любрикантов на силиконовой основе. Специалист в данной области также поймет, что небольшие количества загрязняющих элементов, которые вытекают в композицию из цилиндра шприца, защитного колпачка шприца, плунжера или стопера, могут также влиять на стабильность композиции. Например, понятно, что вольфрам, введенный во время процесса производства, может неблагоприятно влиять на стабильность композиции. В одном варианте исполнения, предварительно наполненный шприц может содержать вольфрам на уровне выше 500 ppb. В другом варианте исполнения, предварительно наполненный шприц является шприцем с низким содержанием вольфрама. В другом варианте исполнения, предварительно наполненный шприц может содержать вольфрам на уровне от приблизительно 500 ppb до приблизительно 10 ppb, от приблизительно 400 ppb до приблизительно 10 ppb, от приблизительно 300 ppb до приблизительно 10 ppb, от приблизительно 200 ppb до приблизительно 10 ppb, от приблизительно 100 ppb до приблизительно 10 ppb, от приблизительно 50 ppb до приблизительно 10 ppb, от приблизительно 25 ppb до приблизительно 10 ppb.
[0390] Готовые изделия
[0391] Данное изобретение также охватывает готовый упакованный и меченый фармацевтический продукт.Данное готовое изделие включает соответствующую стандартную лекарственную форму в соответствующем сосуде или контейнере, таком, как стеклянная ампула, предварительно наполненный шприц или другой контейнер, который герметично закрыт.В одном варианте исполнения, стандартная лекарственная форма обеспечена как стерильный раствор, не содержащий частиц, содержащий анти-IL-6 антитело, приемлемый для парентерального введения. В другом варианте исполнения, стандартная лекарственная форма обеспечена как стерильный лиофилизованный порошок, содержащий анти-IL-6 антитело, которое приемлемо для восстановления.
[0392] В одном варианте исполнения, стандартная лекарственная форма приемлема для внутривенной, внутримышечной, интраназальной, пероральной, местной или подкожной доставки. Таким образом, данное изобретение охватывает стерильные растворы, приемлемые для каждого маршрута доставки. Данное изобретение дополнительно охватывает стерильные лиофилизованные порошки, приемлемые для восстановления.
[0393] Как и с любым фармацевтическим продуктом, упаковочный материал разработан для защиты стабильности продукта во время хранения и перевозки. Дополнительно, продукты в соответствии с данным изобретением включают инструкции по применению или другой информационный материал, где приведена информация для терапевта, технического персонала или пациента о том, как соответствующим образом препятствовать или лечить рассматриваемое заболевание или расстройство. Иными словами, готовое изделие включает инструктивные средства, в которых указан или предложен режим дозирования, включая, но, не ограничиваясь приведенным, фактические дозы, процедуры мониторинга и другую информацию о мониторинге.
[0394] Конкретно, данное изобретение представляет готовое изделие, содержащее упаковочный материал, такой, как коробка, бутылка, пробирка, ампула, контейнер, предварительно наполненный шприц, распылитель, инсуффлятор, пакет для внутривенного (i.v.) введения, оболочку и т.п.; и как минимум одну стандартную лекарственную форму фармацевтического агента, которая содержится в указанном упаковочном материале, где указанный фармацевтический агент содержит жидкую композицию, содержащую антитело. Упаковочный материал включает инструктивные средства с указаниями того, каким образом указанное антитело может быть использовано для профилактики, лечения и/или контроля одного или более симптомов, связанных с заболеванием или расстройством.
[0395] Фармацевтические композиции для перорального введения, такие, как например, одинарные молекулы домена антитела (например, "нанободи™") и т.д., также предусмотрены в данном изобретении. Такие пероральные композиции могут быть в виде таблетки, капсулы, порошка, жидкой или полутвердой формы. Таблетка может содержать твердый носитель, такой, как желатин или адъювант. Жидкие фармацевтические композиции, в общем, содержат жидкий носитель, такой, как воду, нефть, животное или растительное масла, минеральное масло или синтетическое масло. Могут быть включены физиологический солевой раствор, декстроза или другой раствор дисахарида или гликоли, такие, как этиленгликоль, пропиленгликоль или полиэтиленгликоль.
[0396] Для внутривенного введения, или введения в место заболевания, активный ингредиент будет находиться в форме парентерально приемлемого водного раствора, который не содержит пирогенов и имеет приемлемое значение рН, изотоничность и стабильность. Специалисты в данной области легко смогут получить приемлемые растворы при помощи, например, изотонических основ, таких, как инъекция хлорида натрия, инъекция раствора Рингера, инъекция молочнокислого раствора Рингера. Консерванты, стабилизаторы, буферы, антиоксиданты и/или другие добавки могут быть применены при необходимости, включая такие буферы, как фосфат, цитрат и другие органические кислоты; антиоксиданты, такие, как аскорбиновая кислота и метионин; консерванты (такие, как октадецилдиметилбензиламмоний хлорид; гексаметоний хлорид; бензалконий хлорид; бензэтоний хлорид; фенол, бутиловый или бензиловый спирт; алкил парабены, такие, как метил или пропилпарабен; катехол; резорцинол; циклогексанол; 3'-пентанол; и м-крезол1); низкомолекулярные полипептиды; белки, такие, как сывороточный альбумин, желатин или иммуноглобулины; гидрофильные полимеры, такие, как поливинилпирролидон; аминокислоты, такие, как глицин, глутамин, аспарагины, гистидин, аргинин или лизин; моносахариды, дисахариды и другие углеводы, включая глюкозу, маннозу или декстрины; хелаторы, такие, как ЭДТК; сахара, такие, как сукроза, маннитол, трегалоза или сорбитол; солеобразующие противоионы, такие, как натрий; металлокомплексы (например, комплексы Zn-белок); и/или неионные поверхностно-активные вещества, такие, как TWEEN™, ПЛЮРОНИКИ™ или полиэтиленгликоль (ПЭГ).
[0397] Агенты связывания в соответствии с данным изобретением могут быть составлены в жидкой, полутвердой или твердой формах в зависимости от физико-химических свойств молекулы и маршрута введения. Композиции могут содержать эксципиенты, или комбинации эксципиентов, например: сахара, аминокислоты и поверхностно-активные вещества. Жидкие композиции могут содержать широкий диапазон концентраций и рН антител. Твердые композиции могут быть получены путем лиофилизации, высушивания распылением, или высушиванием при помощи технологий сверхкритических жидкостей, например. Компоненты связывания композиции будут зависеть от предполагаемого маршрута доставки: например, композиции для легочной доставки могут состоять из частиц с физическими свойствами, обеспечивающими проникновение глубоко в легкие после вдыхания; местные композиции (для лечения рубцов, например кожных рубцов) могут включать агенты, модифицирующие вязкость, что удлиняет время, в течение которого лекарственное средство остается на месте действия. Агент связывания может быть получен с носителем, который будет защищать агент связывания от быстрого высвобождения, например композиция контролируемого высвобождения, включая импланты, трансдермальные пластыри и микроинкапсулированные системы доставки. Могут быть использованы биоразлагаемые биосовместимые полимеры, например, этиленвинилацетат, полиангидриды, полигликолевая кислота, коллаген, полиортоэфиры и полимолочная кислота. Многие способы для получения такой композиции известны специалистам в данной области (Robinson, J.R. ed., (1978) Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, Marcel Dekker, Inc., New York).
[0398] Лечение может быть обеспечено перорально (так, как например молекулы одного домена антитела (например, "нанободи™")) путем инъекции (например, подкожно, внутрисуставно, внутривенно, интраперитонеально, интрааретриально, или внутримышечно), путем вдыхания, интратрахеально, или интравезикулярным маршрутом (установкой в мочевой пузырь), или местно (например, интраокулярно, интраназально, ректально, в раны, на кожу). Лечение может быть проведено путем импульсной инфузии, в частности уменьшающимися дозами агента связывания. Маршрут введения может быть определен физиологическими характеристиками лечения, конкретными соображениями о болезни или требованиями оптимизировать эффективность или минимизировать побочные эффекты. Одним конкретным маршрутом введения является внутривенный. Другим маршрутом введения фармацевтических композиций в соответствии с данным изобретением является подкожный. Предусмотрено, что лечение не будет ограничено использованием в клинике. Поэтому, подкожная инъекция с использованием устройства, не содержащего иглы, также является преимущественной.
[0399] Композиция может быть введена отдельно или в комбинации с другим лечением, одновременно или последовательно, в зависимости от состояния, подлежащего лечению.
[0400] Агент связывания в соответствии с данным изобретением может быть использован как часть комбинационной терапии в соединении с дополнительным медицинским компонентом. Комбинационное лечение может быть использовано для обеспечения значительного синергетического эффекта, в частности, комбинация агента связывания в соответствии с данным изобретением с одним или более лекарственными средствами. Агент связывания в соответствии с данным изобретением может быть введен параллельно или последовательно или в виде комбинированного препарата с другим терапевтическим агентом или агентами, для лечения одного или более состояний, перечисленных в данной заявке.
[0401] Агент связывания в соответствии с данным изобретением может быть использован в качестве химиосенсибилизатора, в соответствии, с чем он может повышать цитотоксическую эффективность цитотоксических агентов и может таким образом быть обеспечен для введения в комбинации с одним или более цитотоксическими агентами, одновременно или последовательно. Агент связывания может быть также использован как радиосенсибилизатор, в соответствии с чем он может повышать эффективность излучения и может таким образом быть использован для введения в комбинации с излучением, одновременно или последовательно.
[0402] Агент связывания в соответствии с данным изобретением может быть обеспечен в комбинации или с добавлением одного или более следующих агентов:
- цитокина или агониста или антагониста цитокиновой функции (например, агента, который действует на цитокиновые сигнальные маршруты, такого, как модулятор или системы - супрессоры цитокиновых сигналов), таких, как альфа-, бета-и/или гамма-интерферон; инсулиноподобный фактор роста типа I (IGF-1), его рецепторы, связанные с белками связывания; интерлейкины (IL), например, один или более из IL-1 - до -33, и/или антагонист или ингибитор интерлейкина, такой, как анакинра; ингибиторы рецепторов членов семейства интерлейкинов или ингибиторы конкретных подъединиц таких рецепторов, ингибитор фактора некрозов опухолей альфа (TNF-α), например, анти-TNF моноклональные антитела (например, инфликсимаб, адалимумаб и/или ЦДР-870) и/или антагонист TNF рецептора, например, молекула иммуноглобулина (например, этанерцепт) и/или низкомолекулярный агент, например, пентоксифиллин;
- модулятора В клеток, например, моноклонального антитела, направленного на В-лимфоциты (например, ЦД20 (ритуксимаб) или MRA-aIL16R) или Т-лимфоциты (например, CTLA4-Ig, HuMax Il-15 или абатацепт);
- модулятора, который ингибирует активность остеокластов, например антитело к RANKL;
- модулятора хемокина или функции рецепторов хемокина, такого, как антагонист CCR1, CCR2, CCR2A, CCR2B, CCR3, CCR4, CCR5, CCR6, CCR7, CCR8, CCR9, CCR10 и CCR11 (для С-С семейства); CXCR1, CXCR2, CXCR3, CXCR4 и CXCR5 и CXCR6 (для С-Х-С семейства) и CX3CR1 для С-Х3-С семейства;
- ингибитора матриксных металлопротеиназ (MMPs), т.е. одного или более стромелизинов, коллагеназ и желатиназ, а также аггреканазы, в особенности коллагеназы-1 (ММР-1), коллагеназы-2 (ММР-8), коллагеназы-3 (ММР-13), стромелизина-1 (ММР-3), стромелизина-2 (ММР-10) и/или стромелизина-3 (ММР-11) и/или ММР-9 и/или ММР-12, например, агента, такого, как доксициклин;
- ингибитора нейтрализации лейкотриенов, ингибитора 5-липоксигеназы (5-LO) или антагониста 5-липоксигеназа активирующего белка (FLAP), таких, как зилейтон; АВТ-761; фенлейтон; тепоксалин; Абботт-79175; Абботт-85761; N-(5-sзамещенные)-тиофен-2-сульфонамиды; 2,6-ди-трет-бутилфенолгидразоны; метокситетрагидропираны, такие, как Зенека ZD-2138; соединение SB-210661; пиридинил-замещенное 2-цианонафталиновое соединение, такое, как L-739,010; 2-цианохинолиновое соединение, такое, как L-746,530; индольное и/или хиноловое соединение, такие, как МК-591, МК-886 и/или BAY×1005;
- антагониста рецептора лейкотриенов (LT) В4, LTC4, LTD4 и LTE4, выбранного из группы, состоящей из фенотиазин-3-1-ов, таких, как L-651,392; амидиносоединений, таких, как CGS-25019c; бензоксаламинов, таких, как онтазоласт; бензолкарбоксимидаминов, таких, как BIIL 284/260; и соединений, таких, как зафирлукаст, аблукаст, монтелукласт, пранлукласт, верлукласт (МК-679), RG-12525, Ro-245913, иралукаст (CGP 45715А) и BAY×7195;
- ингибитора фосфодиэстеразы (PDE), такого, как метилксантанин, например, теофилин и/или аминофилин; и/или селективного ингибитора PDE изоэнзима, например, ингибитора PDE4 и/или ингибитора изоформного PDE4D и/или ингибитора PDE5;
- антагониста рецептора гистамина типа 1, такого, как цетиризин, лоратадин, деслоратадин, фексофенадин, акривастин, терфенадин, астемизол, азеластин, левокабастин, хлорфенирамин, прометазин, циклизин, и/или мизоластин (в общем, применяют перорально, местно или парентерально);
- ингибитора протонной помпы (такого, как омепразол) или антагониста гастропротекторного гистаминного рецептора 2 типа;
- антагониста гистаминного рецептора 4 типа;
- сосудосуживающего симпатомиметического агента - агониста альфа-1/альфа-2 адренорецептора, такого, как пропилгекседрин, фенилэфрин, фенилпропаноламин, эфедрин, превдоэфедрин, нафазолин гидрохлорид, оксиметазолин гидрохлорид, тетрагидрозолин гидрохлорид, ксилометазолин гидрохлорид, трамазолин гидрохлорид и этилнорэпинефрин гидрохлорид;
- антихолинергического агента, например, мускаринового рецептора (M1, М2 и М3) антагонист, такого, как атропин, гиоскин, гликопирролат, ипратропий бромид, тиотропий бромид, окситропий бромид, пирензепин и телензепин;
- агониста бета-адренорецептора (включая бета-рецептор подтипов 1-4), такого, как изопреналин, сальбутамол, формотерол, сальметерол, тербуталин, орципреналин, битолтерол мезилат и/или пирбутерол, например, его хиральный энантиомер;
- хромона, например, натрий хромогликата и/или недохромил натрия;
- глюкокортикоида, такого, как флунизолид, триамхинолон ацетонид, беклометазон дипропионат, будезонид, флутиказон пропионат, циклезонид, и/или мометазон фуроат;
- агента, модулирующего ядерные гормональные рецепторы, например, рецептора, активируемого пролифератором пероксисом (PPAR);
- иммуноглобулина (Ig) или Ig препарата или антагониста или антитела, модулирующего Ig функцию, такого, как анти-IgE (например, омализумаба);
- другого системного или местного противовоспалительного агента, например, талидомида или его производного, ретиноида, дитранола и/или кальципотриола;
- комбинации аминосалицилатов и сульфапиридина, например, сульфасалазина, месалазина, бальсалазида и ольсалазина; и иммуномодулирующих агентов, таких, как тиопурины; и кортикостероидов, таких, как будезонид;
- антибактериального агента, например, производного пенициллина, тетрациклина, макролида, бета-лактама, фтрохинолона, метронидазола и/или аминогликозида для ингаляций; и/или противовирусного агента, например, ацикловира, фамцикловира, вал ацикловира, ганцикловира, цидофовира; амантадина, ремантадина; рибавирина; занамавира и/или озельтамавира, ингибитора протеаз, такого, как индинавир, нельфинавир, ритонавир и/или саквинавир; нуклеозидного ингибитора обратной транскриптазы, такого, как диданозин, ламивудин, ставудин, зальцитабин, зидовудин; ненуклеозидного ингибитора обратной транскриптазы, такого, как нвирапин, эфавиренц;
- сердечно-сосудистого агента, такого, как блокатор кальциевых каналов, блокатор бета-адренорецепторов, ингибитор ангиотензин-превращающего фермента (АСЕ), антагонист ангиотензин-2 рецептора; агента, снижающего уровень липидов, такого, как статин и/или фибрат; модулятора морфологии эритроцитов, такого, как пентоксифилин; тромболитика и/или антикоагулянта, например, ингибитора агрегации тромбоцитов;
- агента, действующего на ЦНС, такого, как антидепрессант (такого, как сертралин), лекарственного средства от болезни Паркинсона (такого, как депренил, L-допа, ропинирол, прамипексол; ингибитора МАОВ, такого, как селегин и расгилин; ингибитора comP, такого, как тасмар; А-2 ингибитора, ингибитора обратного захвата допамина, антагониста N-метил-D-аспартата, агониста никотина, агониста допамина и/или ингибитора нейрональной синтазы оксида азота) и лекарственного средства против болезни Альцгеймера, такого, как донепезил, ривастигмин, такрин, ингибитор СОХ-2, пропентофиллин или метрифонат;
- агента для лечения острой и хронической боли, например, анальгетика для центральной или периферической нервной системы, такого, как опиоидный аналог или производное, карбамазепин, фенитоин, натрий вальпроат, амитриптилина или другого антидепрессанта, парацетамола или нестероидного противовоспалительного агента;
- парентерально или местно применяемого (включая ингаляцию) местного анестетика, такого, как лигнокаин или его аналог;
- средства от остеопороза, например, гормонального средства, такого, как ралоксифен, или бифосфонат, например, алендронат;
- (i) ингибитора триптазы; (ii) антагониста фактора активации тромбоцитов (PAF); (iii) ингибитора интерлейкин-превращающего фермента (ICE); (iv) ингибитора инозинмонофосфатдегидрогеназы; (v) ингибитора адгезии молекул, включая антагонист VLA-4; (vi) а катепсина; (vii) ингибитора киназ, например, ингибитора тирозинкиназ (например Btk, Itk, Jak3 MAP примеры ингибиторов могут включать гефитиниб, иматиниб мезилат), серин / треонин киназы (например, ингибитора MAP киназы, такой, как р38, c-Jun-N-терминальной киназ, протеин киназ А, В и С и IKK), или киназы, задействованной в регуляции клеточного цикла (например, цилин зависимой киназы); (viii) ингибитора глюкоза-6 фосфат дегидрогеназы; (ix) антагониста кинин-B1 - и/или В2 - рецептора; (х) противоподагрического средства, например, колхицина; (xi) ингибитора ксантин оксидазы, например, аллопуринола; (xii) средства, способствующего выведению мочевой кислоты, например, пробенецида, сильфинпиразона, и/или бензбромарона; (xiii) стимулятора секреции гормона роста; (xiv) трансформирующего фактора роста (TGFβ); (xv) тромбоцитарного фактора роста (PDGF); (xvi) фактора роста фибробластов, например, основного фактора роста фибробластов (bFGF); (xvii) гранулоцитарно-моноцитарного колониестимулирующего фактора (ГМКСФ); (xviii) капсаицинового крема; (xix) антагониста тахикининового NK1 и/или NK3 рецептора, например NKP-608C, SB-233412 (тальнетан) и/или D-4418; (хх) ингибитора эластазы, например, UT-77 и/или ZD-0892; (xxi) ингибитора TNF-альфа превращающего фермента (ТАСЕ); (xxii) ингибитора индуцибельной синтазы оксида азота (iNOS) или (xxiii) хемоаттрактантной рецептор-гомологичной молекулы, которая экспрессируется на ТН2 клетках (например, CRTH2 антагонист); (xxiv) ингибитора Р38 (xxv) агента, модулирующего функцию Толл-подобных рецепторов (TLR) и (xxvi) агента, модулирующего активность пуринэргических рецепторов, например Р2Х7; (xxvii) ингибитора фактора активации транскриптазы, например NFkB, API, и/или STATS (сигнального трансдуктора и активатора транскрипции).
[0403] Ингибитор может быть специфичным или может быть смешанным ингибитором, например, ингибитором, направленным на более чем одну молекулу (например, рецепторы) или молекулярные классы, указанные выше.
[0404] Агент связывания может быть также использован в комбинации с химиотерапевтическим агентом или другим ингибитором тирозинкиназ при совместном введении или в форме иммуноконъюгата. Фрагменты указанного антитела могут быть также использованы в биспецифичных антителах, полученных путем рекомбинантных механизмов или биохимическим сочетанием с последующей ассоциацией специфичности описанного выше антитела со специфичностью другого антитела, способного к распознаванию других молекул, задействованных в активности, для чего ассоциировано IL-6.
[0405] Для лечения воспалительного заболевания, агент связывания в соответствии с данным изобретением может быть скомбинирован с одним или более агентами, такими, как нестероидные противовоспалительные агенты (в данной заявке НСПВА), включая неселективные ингибиторы цикло-оксигеназы (СОХ)-1/СОХ-2, которые применяют местно или системно, например, пироксикам, диклофенак, пропионовые кислоты, такие, как напроксен, флубипрофен, фенопрофен, кетопрофен и ибупрофен, фенаматы, такие, как мефенаминовая кислота, индометацин, сулиндак, азапропазон, пиразолоны, такие, как фенилбутазон, салицилаты, такие, как аспирин); селективные ингибиторы СОХ-2 (такие, как мелоксикам, целекоксиб, рофецоксиб, вальдекоксиб, лумарококсиб, парекоксиб и эторикоксиб); доноры оксида азота - ингибиторы циклооксигеназы (CINODs); глюкокортикостероиды (введенные местным, пероральным, внутримышечным, внутривенным или внутрисуставными маршрутами); метотрексат, лефлуномид; гидроксихлорхин, d-пеницилламин, ауранофин или другие парентеральные или пероральные препараты золота; анальгетики; диацереин; внутрисуставные лекарственные средства, такие, как производные гиалуроновой кислоты; и пищевые добавки, такие, как глюкозамин.
[0406] Агент связывания в соответствии с данным изобретением может быть также использован в комбинации с существующим терапевтическим агентом для лечения рака. Приемлемые агенты для использования в комбинации включают:
(i) антипролиферативные/антинеопластические лекарственные средства и их комбинации, используемые в медицинской онкологии, такие, как Гливек (иматиниб мезилат), алкилирующие агенты (например, цис-платин, карбоплатин, циклофосфамид, азотистый иприт, мельфалан, хлорамбуцил, бусульфан и нитрозомочевины); антиметаболиты (например, антифолаты, такие, как фторпиримидины, такие, как 5-фторурацил и тегафур, ралтитрексед, метотрексат, цитозин арабинозид, гидроксимочевина, гемцитабин и паклитаксел); противоопухолевые антибиотики (например антрациклины, такие, как адриамицин, блеомицин, доксорубицин, дауномицин, эпирубицин, идарубицин, митомицин-С, дактиномицин и митрамицин); антимитотические агенты (например алкалоиды барвинка, такие, как винкристин, винбластин, виндезин и винорельбин и таксоиды, такие, как таксол и таксотер); и ингибиторы топоизомеразы (например эпиподофилотокисины, такие, как этопозид и тенипозид, амсакрин, топотекан и камптотецины);
(ii) цитостатические агенты, такие, как антиэстрогены (например, тамоксифен, торемифен, ралоксифен, дролоксифен и йодоксифен), down-регуляторы рецепторов эстрогена (например, фулвестрант), антиандрогены (например бикалутимид, флутамид, нилутамид и ципротерон ацетат), антагонисты лютеинизирующего релизинг-гормона (ЛГ-РГ) или агонисты ЛГ-РГ (например гозерелин, лейпрорелин и бузерелин), прогестрогены (например мегестрол ацетат), ингибиторы ароматазы (например анастрозол, летрозол, воразол и экземестан) и ингибиторы 5α-редуктазы, например, финастерид;
(iii) Агенты, ингибирующие инвазию раковых клеток (например, ингибиторы металлопротеиназы, такие, как маримастат и ингибиторы функции рецептора активатора плазминогена урокиназного типа);
(iv) ингибиторы функции фактора роста, например, такие ингибиторы включают антитела фактора роста, антитела рецептора фактора роста (например, анти-erbb2 антитело транстузумаб и анти-erbb1 антитело цетуксимаб [С225]), ингибиторы фарнезилтрансферазы, ингибиторы тирозинкиназы и ингибиторы серин/треонин киназы, например, ингибиторы семейства эпидермального фактора роста (например EGFR семейства ингибиторов тирозинкиназы, такие, как N-(3-хлор-4-фторфенил)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси) хиназолин-4-амин (гефитиниб, AZD1839), N-(3-этинилфенил)-6,7-бис(2-метоксиэтокси) хиназолин-4-амин (эрлотиниб, OSI-774) аи 6-акриламидо-N-(3-хлор-4-фторфенил-7-(3-морфолинопропокси) хиназолин-4-амин (CI 1033)), например, ингибиторы семейства тромбоцитарного фактора роста и, например, ингибиторы семейства гепатоцитарного фактора роста;
(v) антиангиогенные агенты, такие, как ингибиторы эффекта сосудистого эндотелиального фактора роста (например, антитело фактора роста анти-сосудистых эндотелиальных клеток бевацизумаб, соединения, такие, которые описаны в международных патентных заявках WO 97/22596, WO 97/30035, WO 97/32856 и WO 98/13354, каждая из которых включена в данную заявку полностью путем ссылки) и соединения, которые действуют по другим механизмам (например, линомид, ингибиторы интегриновой αvβ3 функции и ангиостатин);
(vi) агенты, повреждающие сосуды, такие, как комбретастатин А4 и соединения, описанные в международных патентных заявках WO 99/02166, WO 00/40529, WO 00/41669, WO 01/92224, WO 02/04434 и WO 02/08213 (каждая из которых включена в данную заявку полностью путем ссылки);
(vii) антисмысловые лекарственные средства, например, направленные на мишени, перечисленные выше, например, ISIS 2503, анти-ras антисмысловые агенты;
(viii) подходы генной терапии, включая, например, подходы для замены аберрантных генов, таких, как аберрантный р53 или аберрантный BRCA1 или BRCA2, подходы ГНФПЛТ (генно-направленная ферментная пролекарственная терапия), например, использующие цитозин деаминазу, тимидин киназу или бактериальный нитроредуктазный фермент и подходы для повышения переносимости пациентами химиотерапии или лучевой терапии, например, генная терапия для мультилекарственной резистентности; и
(ix) иммунотерапевтические подходы, включая, например ex vivo и in vivo подходы для повышения иммуногенности опухолевых клеток пациента, например, трансфекция цитокинами, такими, как интерлейкин 2, интерлейкин 4 или гранулоцитарно-моноцитарный колониестимулирующий фактор, подходы для уменьшения Т-клеточной толерантности, подходы с применением трансфектированных иммунных клеток, таких, как цитокин-трансфектированные дендритные клетки, подходы с применением цитокин-трансфектированных клеточных опухолевых линий и подходы с применением анти-идиопатических антител.
[0407] Агент связывания в соответствии с данным изобретением и один или более из приведенных выше дополнительных медицинских компонентов могут быть использованы при получении медикамента. Медикамент может быть для отдельного или комбинированного введения субъекту и соответственно может содержать агент связывания и дополнительный компонент в виде комбинированного препарата или отдельных препаратов. Отдельные препараты могут быть использованы для облегчения последовательного или одновременного введения и позволяют введение компонентов различными маршрутами, например, пероральное и парентеральное введение.
[0408] В соответствии с данным изобретением, обеспеченная композиция может быть введена млекопитающим. Введение обычно осуществляют в "терапевтически эффективном количестве", этого достаточно, чтобы проявить благоприятное воздействие на пациента. Такое благоприятное воздействие может быть как минимум улучшением одного симптома. Фактическое введенное количество и скорость и период введения будут зависеть от природы и тяжести того, что лечат, конкретного млекопитающего, которого лечат, клинического состояния отдельного пациента, причины расстройства, места доставки композиции, типа агента связывания, способа введения, режима введение и других факторов, известных практикующим врачам. За назначение лечения, например, решения о дозировке и т.д., несут ответственность врачи широкого профиля и другие врачи и оно может зависеть от тяжести симптомов и/или прогрессирования заболевания, которое лечат. Соответствующие дозы антител хорошо известны из уровня техники (Ledermann J.A. et al. (1991) Int. J. Cancer 47: 659-664; Bagshawe K.D. et al. (1991) Antibody, Immunoconjugates and Radiopharmaceuticals 4: 915-922). Могут быть использованы конкретные дозировки, указанные в данной заявке, или в Physician’s Desk Reference (2003) как соответствующие типу медикамента, который вводят. Терапевтически эффективное количество или приемлемая дозы агента связывания в соответствии с данным изобретением может быть определена путем сравнения его активности in vitro и in vivo в животной модели. Способы экстраполяции эффективных дозировок у мышей и других тестовых животных на людей известны. Точная доза будет зависеть от ряда факторов, включая то, предназначено ли антитело для диагностики, профилактики или для лечения, размера и расположения площади, подлежащей лечению, точного характера антитела (например, целое антитело, фрагмент или диабоди) и природы любой детектируемой метки или другой молекулы, присоединенной к антителу. Типичная доза антитела будет находиться в диапазоне от 100 мкг до 1 г для системных применений и от 1 мкг до 1 мг для местных применений. Может быть введена начально более высокая доза нагрузки, с последующей одной или более низкими дозами. Типично, антитело будет целым антителом, например, IgG1 изотипом. Это доза для эффективного лечения взрослого пациента, которая может быть пропорционально отрегулирована для детей и младенцев и также отрегулирована для других форматов антител в пропорции к молекулярной массе. Лечение может быть повторено ежедневно, два раза в неделю, еженедельно или ежемесячно, на усмотрение терапевта. Лечение может быть проведено каждые две - четыре недели для подкожного введения и каждые четыре - восемь недель для внутривенного введения. Лечение может быть периодическим, и период введения составляет приблизительно две недели или более, например, приблизительно три недели или более, приблизительно четыре недели или более, или приблизительно раз в месяц. Лечение может быть произведено до, и/или после хирургии, и/или может быть введено или применено непосредственно на анатомическое место хирургического лечения.
[0409] IL-6 агенты связывания в соответствии с данным изобретением могут предложить другие преимущества в терминах дозировки и требований к введению, по сравнению с антителами к sIL-6Ra. Как отмечено во всей нашей заявке, уровни IL-6 в крови значительно более низкие, чем уровни в крови sIL-6Ra при заболевании. Соответственно, использование IL-6 агента связывания, в отличие от анти-IL-6R агента связывания, имеет значительные преимущества, состоящие в том, что количество лекарственного средства для производства каждой дозы для пациентов может быть меньшим. Также если доза анти-IL6 терапевтического средства является более низкой, то могут быть значительные преимущества, состоящие в том, что низкая доза способствует подкожным инъекциям, а также внутривенным (i.v.) инъекциям. Специалистам в данной области хорошо известно, что подкожная дозировка может быть ограничена количеством компонента связывания, например, молекулой антитела, необходимой на одну дозу. Это вызвано тем, что подкожные инъекции ограничены объемом, который может быть впрыснут в одном месте на коже. Типично используют объемы подкожных инъекций 1,2 мл или менее. Поскольку могут составляться более сложные, композиции, то агент связывания для подкожной инъекции при концентрациях более 50 мг/мл, в дозах более 100 мг посредством данного маршрута обычно требует множественных инъекций, что более дискомфортно для пациента.
[0410] Более низкая доза анти-IL-6 лекарственных средств может также требовать более низкой дозы "нагрузки" антитела для ингибирования всех системных IL-6 по сравнению с системными sIL-6Ra, поскольку оно имеет более высокую концентрацию.
[0411] Дополнительные полезные эффекты могут быть связаны с направляющим IL-6, скорее, чем с IL-6 рецептором, что представляет собой дополнительные преимущества агентов связывания в соответствии с данным изобретением по сравнению с агентами связывания для IL-6Ra.
[0412] Например, существуют данные в литературе, которые демонстрируют, что уровни в крови IL-6 являются значительно более низкими, чем уровни в крови sIL-6Ra при заболевании (Desgeorges et al. (1997) J. Rheumatol 24:1510; Yokota et al. (2005) Arth & Rheum 52(3): 818-25). Поскольку уровни sIL-6R являются значительно более высокими, чем уровни IL-6, может требоваться большее количество анти-sIL-6R агента связывания для нейтрализации sIL-6Ra, по сравнению с количеством анти-IL-6 агента связывания, необходимого для нейтрализации IL-6. Следовательно, может быть необходима более низкая доза анти-лигандного агента связывания, по сравнению со случаями применения анти-рецепторного агента связывания.
[0413] Конъюгированный IL-6 лиганд, скорее, чем IL-6 рецептор, может уменьшать уровни IL-6 при заболевании, но продолжает позволять увеличение уровней IL-6 во время инфекции, когда IL-6 активирован как часть иммунного ответа.
[0414] Kawano et al. (Nature (1988) 332:83) показали, что IL-6 является эффективным фактором роста и показали, что миеломные клетки, свежевыделенные из пациентов, продуцировали IL-6 и экспрессировали его рецепторы. Дополнительно, анти-IL-6 антитело ингибирует рост in vitro миеломных клеток. Это непосредственно свидетельствует о том, что аутокринная петля задействована в онкогенезе человеческих миелом. После данного исследования, Van Zaanen et al. (J. Clin.Invest. (1996) 98:1441-1448) продемонстрировали, что продуцирование IL-6 у пациентов с множественной миеломой уменьшается при лечении анти-IL-6 лигандным антителом.
[0415] Ряд дополнительных исследований продемонстрировал, что IL-6 задействован в аутокринной петле обратной связи в других клеточных линиях, например, клетках гладких мышц (КГМ) (Klouche et al., (1999) J. Immunol. 163(8) 4583-9), U373-MG астроглиомных клетках (Oh et al., (2001) J. Immunol. 166: 2695-704), 3Т3 адипоцитах (Fasshauer et al., (2003) Horm. Metab. Res. 35(3) 147-52), нейронах (Marz et al., (1998) Proc. Natl. Acad. Sci USA 95(6) 3251-6), эндотелиальных клетках (Modur et al., (1997) J. Clin. Invest. 100(1) 2752-6) и клетках саркомы Капоши (Murakami-Morl et al., (1996) Cell Growth Differ. 7(12) 1697-703). Ингибирование IL-6 при помощи анти-IL6 агента связывания при заболевании может, поэтому приводить к уменьшению базального болезненного продуцирования IL-6.
[0416] Дополнительно, анти-IL-6 агенты связывания связывают IL-6 в большем круге кровообращения, в отличие от агентов связывания с IL-6 рецептором, которому требуется проникнуть в ткани для занятия рецептора на поверхности клетки, задействованной в патологии заболевания, которое подлежит лечению.
[0417] Агенты связывания с IL-6 могут образовывать равновесие с IL-6 в большом круге кровообращения, приводя к возникновению градиентов через барьеры, например, синовиальную оболочку, которая действует как сетка при удалении активного IL-6 из сустава и образует инактивный комплекс с агентом связывания. Следствием этого является то, что IL-6 агент связывания может иметь более быстрое проявление и что режим дозировок может отличаться и быть, возможно, более легким для оптимизации, по сравнению с IL-6R агентом связывания.
[0418] Передача IL-6 сигнала опосредована IL-6 связыванием с IL-6R и комплексным связыванием с gp130. При условии, что IL-6 и IL-6Ra связывание имеет наномолярную аффинность (приблизительно 5 нМ) и что IL6:IL6R комплекс и gp130 связывание имеет пикомолярную аффинность, агент связывания, направляющий IL-6, сталкивается с более низкой конкуренцией за IL-6 связывание и поэтому может подавлять большую часть IL-6 сигналов. Хотя это может также применяться для агента связывания, направленного на растворимый IL-6Ra и профилактику образования комплекса IL-6:IL-6Ra, если IL-6Ra мембранно связан, то ввиду стерических ограничений, это может быть более сложным для анти-IL-6Ra связывать и ингибировать IL-6Ra, присутствующий на оболочке.
[0419] Данное изобретение представляет способы профилактики, лечения и/или контроля расстройства, например, расстройства, связанного или характеризующегося аберрантной экспрессией и/или активностью IL-6, расстройства, связанного с аберрантной экспрессией и/или активностью IL-6 рецептора, аутоиммунного расстройства, воспалительного расстройства, пролиферативного расстройства, инфекции, или одного или более их симптомов путем введения субъекту эффективного количества композиций в соответствии с данным изобретением. Известны различные системы доставки, которые могут быть применены для введения композиции в соответствии с данным изобретением или профилактического или терапевтического агента. Способы введения композиций в соответствии с данным изобретением или терапии (например, профилактического или терапевтического агента) включают, не ограничиваясь приведенным, парентеральное введение (например, интрадермальное, внутримышечное, интраперитонеальное, внутривенное периневральной и подкожное), эпидуральное введение, местное введение и введение в слизистую оболочку (например, но, не ограничиваясь приведенным, интраназальный и пероральный маршруты). В конкретном варианте исполнения, композиции в соответствии с данным изобретением вводят внутримышечно, внутривенно, или подкожно. В одном варианте исполнения, композиции в соответствии с данным изобретением вводят подкожно. Композиция может быть введена любым удобным маршрутом, например путем инфузии или болюсной инъекции, путем поглощения через эпителиальные или кожно-слизистые слои (например, слизистую облачку полости рта, ректальную и кишечную слизистую оболочку и т.д.) и может быть введена вместе с другими биологически активными агентами. Введение может быть системным или местным.
[0420] Данное изобретение также представляет то, что композиция в соответствии с данным изобретением упакована в герметично закрытый контейнер, такой, как ампула или саше, с указанием количества антитела (включая его антительные фрагменты). В одном варианте исполнения, композиция в соответствии с данным изобретением находится в герметично закрытом контейнере с указанием количества и концентрации антитела (включая его антительные фрагменты). В одном варианте исполнения, композицию в соответствии с данным изобретением поставляют в герметично закрытом контейнере и она содержит приблизительно 10 мг/мл, приблизительно 15 мг/мл, приблизительно 20 мг/мл, приблизительно 30 мг/мл, приблизительно 40 мг/мл, приблизительно 50 мг/мл, приблизительно 60 мг/мл, приблизительно 70 мг/мл, приблизительно 80 мг/мл, приблизительно 90 мг/мл, приблизительно 100 мг/мл, приблизительно 150 мг/мл, приблизительно 175 мг/мл, приблизительно 200 мг/мл, приблизительно 250 мг/мл, или приблизительно 300 мг/мл антитела (включая его антительные фрагменты) которое специфично связывается с IL-6, в количестве приблизительно 1 мл, приблизительно 2 мл, приблизительно 3 мл, приблизительно 4 мл, приблизительно 5 мл, 6 приблизительно мл, приблизительно 7 мл, приблизительно 8 мл, приблизительно 9 мл, приблизительно 10 мл, приблизительно 15 мл, или приблизительно 20 мл. В конкретном варианте исполнения в соответствии с данным изобретением, композицию поставляют в герметично закрытом контейнере и содержат как минимум приблизительно 15 мг/мл, как минимум приблизительно 20 мг/мл, как минимум приблизительно 25 мг/мл, как минимум приблизительно 50 мг/мл, как минимум приблизительно 100 мг/мл, как минимум приблизительно 150 мг/мл, как минимум приблизительно 175 мг/мл, как минимум приблизительно 200 мг/мл, как минимум приблизительно 250 мг/мл или как минимум приблизительно 300 мг/мл антитела (включая его антительные фрагменты) которые специфично связываются с IL-6 (например, но, не ограничиваясь приведенным, Антитело 18Е) для внутривенных инъекций и как минимум приблизительно 15 мг/мл, как минимум приблизительно 20 мг/мл, как минимум приблизительно 50 мг/мл, как минимум приблизительно 80 мг/мл, как минимум приблизительно 100 мг/мл, как минимум приблизительно 150 мг/мл, как минимум приблизительно 175 мг/мл, как минимум приблизительно 200 мг/мл, как минимум приблизительно 250 мг/мл или как минимум приблизительно 300 мг/мл антитела которое специфично связывается с IL-6 (например, но, не ограничиваясь приведенным, Антитело 18Е) для повторного подкожного введения.
[0421] Количество композиции в соответствии с данным изобретением, которое будет эффективным для профилактики, лечения и/или контроля заболевания или расстройства, связанных или характеризующихся аберрантной экспрессией и/или активностью IL-6, заболевания или расстройства, связанных или характеризующихся аберрантной экспрессией и/или активностью IL-6 рецептора или его одного или более субъединиц, аутоиммунного заболевания, отторжения трансплантата, заболевания «трансплантат против хозяина», или одного или более их симптомов, может быть определено при помощи стандартных клинических методов, хорошо известных в данной области, или описанных в данной заявке. Точная доза для применения в композиции будет также зависеть от маршрута введения и серьезности воспалительного расстройства или аутоиммунного расстройства и должна быть определена на усмотрение практикующего врача и обстоятельств каждого из пациентов. Эффективные дозы могут быть экстраполированы из кривых доза-ответ, полученных из in vitro или из тестовых систем животных моделей.
[0422] Для композиций антител, охваченных данным изобретением, дозировка, введенная пациенту, может быть рассчитана с использованием массы пациента в килограммах (кг), умноженной на дозу для введения в мг/кг. Необходимый объем (в мл), который предназначен для приема, затем определяют путем взятия мг требуемой дозы, разделенной на концентрацию композиции антитела. Конечный рассчитанный необходимый объем будет получен путем объединения содержимого такого количества ампул, которое требуется для наполнения шприца (шприцов) для введения композиции антитела в соответствии с данным изобретением. Конечный рассчитанный необходимый объем будет получен путем объединения содержимого такого количества ампул, которое требуется для наполнения шприца (шприцов) для введения лекарственного средства. Максимальный объем в 2,0 мл композиции антитела может быть впрыснут на один сайт. Доза (в мл) может быть рассчитана при помощи следующей формулы: Доза (мл)=[масса добровольца](кг)×[доза] мг/кг÷100 мг/мл композиции антитела. Антитела в соответствии с данным изобретением имеют пролонгированный период полувыведения в человеческом организме. Таким образом, часто являются возможными более низкие дозировки антитела в соответствии с данным изобретением и менее частое введение. Дополнительно, дозировка, объем и частота введения композиций в соответствии с данным изобретением могут быть уменьшены путем увеличения концентрации антител в композиции, увеличения аффинности и/или авидности антитела.
[0423] В конкретном варианте исполнения, дозировка, введенная пациенту, будет рассчитана с использованием массы пациента в килограммах (кг), умноженной на дозу для введения в мг/кг. Необходимый объем (в мл) для введения затем определяют путем взятия мг необходимой дозы, разделенной на концентрацию антитела (включая его антительные фрагменты) в композиции (100 мг/мл). Конечный рассчитанный необходимый объем будет получен путем объединения содержимого такого количества ампул, которое требуется для наполнения шприца (шприцов) для введения лекарственного средства. Максимальный объем 2,0 мл антитела (включая его антительные фрагменты) в композиции будет впрыснут на одну точку.
[0424] В конкретном варианте исполнения, 0,1-20 мг/кг/неделя, 1-15 мг/кг/неделя, 2-8 мг/неделя, 3-7 мг/кг/неделя, или 4-6 мг/кг/неделя антитела (включая его антительные фрагменты), которое специфично связывается с IL-6 (например, но, не ограничиваясь приведенным, 1 Антитело 18Е), в композиции в соответствии с данным изобретением вводят субъекту с воспалительным расстройством или аутоиммунным расстройством. В другом варианте исполнения, субъекту вводят одну или более доз профилактически или терапевтически эффективного количества композиции в соответствии с данным изобретением, где профилактически или терапевтически эффективное количество не совпадает для каждой дозы.
[0425] В одном варианте исполнения, композицию в соответствии с данным изобретением вводят в режиме дозировки, который сохраняет концентрацию в плазме антитела специфичной для IL-6 на желательном уровне (например, от приблизительно 0,1 до приблизительно 100 мкг/мл), что непрерывно блокирует активность IL-6. В конкретном варианте исполнения, концентрация в плазме антитела сохраняется приблизительно 0,2 мкг/мл, приблизительно 0,5 мкг/мл, приблизительно 1 мкг/мл, приблизительно 2 мкг/мл, приблизительно 3 мкг/мл, приблизительно 4 мкг/мл, приблизительно 5 мкг/мл, приблизительно 6 мкг/мл, приблизительно 7 мкг/мл, приблизительно 8 мкг/мл, приблизительно 9 мкг/мл, приблизительно 10 мкг/мл, приблизительно 15 мкг/мл, приблизительно 20 мкг/мл, приблизительно 25 мкг/мл, приблизительно 30 мкг/мл, приблизительно 35 мкг/мл, приблизительно 40 мкг/мл, приблизительно 45 мкг/мл или приблизительно 50 мкг/мл. Концентрация в плазме, которая является желательной у субъекта, будет варьировать в зависимости от нескольких факторов, включая, но, не ограничиваясь приведенным, природу заболевания или расстройства, тяжести заболевания или расстройства и состояния субъекта. Такие режимы дозирования являются особенно полезными при профилактике, лечении и/или контроле хронического заболевания или расстройства.
[0426] В конкретных вариантах исполнения, композицию в соответствии с данным изобретением, которое содержит конъюгированное антитело (включая его антительные фрагменты), специфичные к IL-6, вводят с перерывами. Как используют в данной заявке, "конъюгированное антитело или фрагмент антитела" относится к антителу (включая его антительные фрагменты), которое конъюгировано или гибридизовано с другим фрагментом, включая, но, не ограничиваясь приведенным, гетерологический пептид, полипептид, другое антитело (включая его антительные фрагменты), маркерную последовательность, диагностический агент, полимер, альбумин и твердую подложку.
[0427] В другом варианте исполнения, человеческому субъекту вводят одну или более доз профилактически или терапевтически эффективного количества антитела, которое специфично связывается с IL-6 (например, но не ограничиваясь приведенным, Антитело 18Е) в композиции в соответствии с данным изобретением, где доза профилактически или терапевтически эффективного количества антитела в композиции в соответствии с данным изобретением, введенная указанному субъекту, увеличена на, например, приблизительно 0,01 мкг/кг, приблизительно 0,02 мкг/кг, приблизительно 0,04 мкг/кг, приблизительно 0,05 мкг/кг, приблизительно 0,06 мкг/кг, приблизительно 0,08 мкг/кг, приблизительно 0,1 мкг/кг, приблизительно 0,2 мкг/кг, приблизительно 0,25 мкг/кг, приблизительно 0,5 мкг/кг, приблизительно 0,75 мкг/кг, приблизительно 1 мкг/кг, приблизительно 1,5 мкг/кг, приблизительно 2 мкг/кг, приблизительно 4 мкг/кг, приблизительно 5 мкг/кг, приблизительно 10 мкг/кг, приблизительно 15 мкг/кг, приблизительно 20 мкг/кг, приблизительно 25 мкг/кг, приблизительно 30 мкг/кг, приблизительно 35 мкг/кг, приблизительно 40 мкг/кг, приблизительно 45 мкг/кг, приблизительно 50 мкг/кг, приблизительно 55 мкг/кг, приблизительно 60 мкг/кг, приблизительно 65 мкг/кг, приблизительно 70 мкг/кг, приблизительно 75 мкг/кг, приблизительно 80 мкг/кг, приблизительно 85 мкг/кг, приблизительно 90 мкг/кг, приблизительно 95 мкг/кг, приблизительно 100 мкг/кг, или приблизительно 125 мкг/кг, в ходе лечения.
[0428] В другом варианте исполнения, субъекту (например, человеку) вводят одну или более доз профилактически или терапевтически эффективного количества антитела которое специфично связывается с IL-6 (например, но, не ограничиваясь приведенным, Антитело 18Е) в композиции в соответствии с данным изобретением, где доза профилактически или терапевтически эффективного количества антитела в композиции в соответствии с данным изобретением, введенная указанному субъекту, уменьшена на, например, приблизительно 0,01 мкг/кг, приблизительно 0,02 мкг/кг, приблизительно 0,04 мкг/кг, приблизительно 0,05 мкг/кг, приблизительно 0,06 мкг/кг, приблизительно 0,08 мкг/кг, приблизительно 0,1 мкг/кг, приблизительно 0,2 мкг/кг, приблизительно 0,25 мкг/кг, приблизительно 0,5 мкг/кг, приблизительно 0,75 мкг/кг, приблизительно 1 мкг/кг, приблизительно 1,5 мкг/кг, приблизительно 2 мкг/кг, приблизительно 4 мкг/кг, приблизительно 5 мкг/кг, приблизительно 10 мкг/кг, приблизительно 15 мкг/кг, приблизительно 20 мкг/кг, приблизительно 25 мкг/кг, приблизительно 30 мкг/кг, приблизительно 35 мкг/кг, приблизительно 40 мкг/кг, приблизительно 45 мкг/кг, приблизительно 50 мкг/кг, приблизительно 55 мкг/кг, приблизительно 60 мкг/кг, приблизительно 65 мкг/кг, приблизительно 70 мкг/кг, приблизительно 75 мкг/кг, приблизительно 80 мкг/кг, приблизительно 85 мкг/кг, приблизительно 90 мкг/кг, приблизительно 95 мкг/кг, приблизительно 100 мкг/кг, или приблизительно 125 мкг/кг, в ходе лечения.
Период полувыведения антитела
[0429] В определенных вариантах исполнения, период полувыведения анти-IL-6 антитела композиций и способов в соответствии с данным изобретением составляет как минимум приблизительно 10 дней. В определенных вариантах исполнения, средний период полувыведения анти-IL-6 антитела композиций и способов в соответствии с данным изобретением составляет как минимум приблизительно 20-40 дней, 25-40 дней, 26-40 дней, 20-30 дней, 25-30 дней, 26-30 дней, или 26-29 дней. В еще одних дополнительных вариантах исполнения период полувыведения анти-ICOS антитела композиций и способов в соответствии с данным изобретением может составлять до приблизительно 50 дней. В определенных вариантах исполнения, периоды полувыведения антитела композиций и способов в соответствии с данным изобретением могут быть пролонгированы при помощи способов, известных из уровня техники. Такое пролонгирование может в свою очередь уменьшать количество и/или частоту дозировок композиций антител. Антитела с улучшенными in vivo периодами полувыведения и способы их получения описаны в патенте США №6,277,375; и международных публикациях №№ WO 98/23289 и WO 97/3461.
[0430] Циркуляция в сыворотке анти-IL-6 антитела in vivo может быть также пролонгирована при помощи присоединения молекул инертного полимера, такого, как высокомолекулярный полиэтиленликоль (ПЭГ) к антителу с или без мультифункциональным линкером через сайт-специфичное конъюгирование ПЭГ и N-или С-конца антитела или посредством эпсилон-амино групп, присутствующих на лизильных остатках. Будет использована дериватизация линейного или разветвленного полимера, приводящая к минимальной потере биологической активности. Степень конъюгации может быть тщательно проконтролирована ДСН-PAGE и масс-спектрометрией для обеспечения надлежащей конъюгации молекул ПЭГ к антителу. Непрореагировавший ПЭГ может быть отделен от конъюгатов антитело-ПЭГ при помощи эксклюзионной или ион-обменной хроматографии. ПЭГ-дериватизованные антитела могут быть проанализированы на предмет активности связывания, а также на эффективность in vivo при помощи способов, известных специалисту в данной области, например, при помощи иммуноанализов, описанных в данной заявке.
[0431] Дополнительно, антитела композиций и способов в соответствии с данным изобретением могут быть конъюгированы с альбумином для того, чтобы сделать антитело более стабильным in vivo или имеющим более длительный период полувыведения in vivo. Такие методы хорошо известны из уровня техники, см., например, международные публикации №№ WO 93/15199, WO 93/15200 и WO 01/77137; и европейский патент № ЕР 413,622, все из которых включены в данную заявку путем ссылки.
[0432] Дополнительно, были описаны вариантные Fc участки, которые придают пролонгированный период полувыведения in vivo антителу (см., патентную публикацию США №:US 2003/0190311 A1). Описано применение Fc вариантов с пролонгированным периодом полувыведения in vivo в комбинации с композициями и способами в соответствии с данным изобретением. В одном варианте исполнения, анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением содержит вариантный Fc участок с пролонгированным периодом полувыведения in vivo. В дополнительном варианте исполнения, анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением содержит вариантный Fc участок, содержащий как минимум одно замещение аминокислотным остатком, выбранное из группы, состоящей из: остатков 252, 254 и 256, где аминокислотные положения определены в соответствии с конвенцией ЕС. В конкретном варианте исполнения, анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением содержит вариантный Fc участок, содержащий как минимум одно аминокислотное замещение, выбрано из группы, состоящей из: M252Y, S254T и Т256Е; где аминокислотные положения определены в соответствии с конвенцией ЕС. В дополнительном варианте исполнения, анти-IL-6 антитело в соответствии с данным изобретением содержит вариантный Fc участок, содержащий как минимум один аминокислотный остаток, выбранный из группы, состоящей из: Y в положении 252, Т в положении 254 и Е в положении 256; где аминокислотные положения определены в соответствии с конвенцией ЕС.
Fc варианты
[0433] Данное изобретение представляет анти-IL-6 антитела, содержащие вариантный Fc участок. То есть, не встречающийся в природе Fc участок, например Fc участок, содержащий один или более одного не встречающихся в природе аминокислотных остатков. Также вариантными Fc участками в соответствии с данным изобретением охвачены Fc участки, содержащие аминокислотные делеции, добавления и/или модификации.
[0434] Будет понятно, что Fc участок, как используют в данной заявке, включает полипептиды, содержащие константный участок антитела, за исключением иммуноглобулинового домена первого константного участка. Таким образом Fc относится к последним двум иммуноглобулиновым доменам константного участка IgA, IgD и IgG, и последним трем иммуноглобулиновым доменам константного участка IgE и IgM, и гибкому шарнирному N-концу к данным доменам. Для IgA и IgM Fc может включать J цепь. Для IgG, Fc содержит иммуноглобулиновые домены Сгамма2 и Сгамма3 (Cγ2 и Сγ3) и шарнир от Сгамма1 (Cγ1) и Сгамма2 (Сγ2). Хотя границы Fc участка могут варьироваться, человеческий IgG Fc участок тяжелой цепи обычно определяют как содержащий остатки С226 и Р230 к его карбокси-концу, где нумерация произведена в соответствии с индексом ЕС, как в Kabat et al. (1991, NIH публикация 91-3242, National Technical Information Service, Springfield, VA). "EU индекс, как приведено в Kabat" относится к нумерации остатков человеческого IgG1 EU антитела, как описано в Kabat et al. выше. Fc может относится к данному участку при выделении, или данному участку в контексте антитела, фрагмента антитела, или Fc гибридизованного белка. Fc вариантный белок может быть антителом, Fc гибридом, или любым белком или белковым доменом, содержащим Fc, включая, но, не ограничиваясь приведенным, белки, содержащие вариантные Fc участки, которые представляют собой не встречающиеся в природе варианты Fc. Примечание: полиморфизмы наблюдали в ряде Fc положений, включая, но, не ограничиваясь приведенным, Kabat 270, 272, 312, 315, 356 и 358, и, таким образом, существуют небольшие различия между представленной последовательностью и последовательностью из уровня техники.
[0435] Данное изобретение охватывает Fc вариантные белки, имеющие измененные свойства связывания для Fc лиганда (например, Fc рецептор, Clq) относительно сравнимой молекулы (например, белка, имеющего ту же самую аминокислотную последовательность, за исключением того, что она имеет Fc участок дикого типа). Примеры свойств связывания включают, не ограничиваясь приведенным, специфичность связывания, константу равновесия диссоциации (KD), скорости диссоциации и ассоциации (koff и kon соответственно), аффинность и/или авидность связывания. В общем, понятно, что молекула связывания (например, Fc вариантный белок, такой, как антитело) с низкой KD может иметь преимущества для связывания молекулы с высокой KD. Однако, в некоторых случаях, значение kon или koff может быть более релевантным, чем значение KD. Специалист в данной области может определить, какой кинетический параметр является наиболее важным для применения данного антитела.
[0436] Аффинности и свойства связывания Fc домена для его лиганда могут быть определены при помощи различных способов анализа in vitro (биохимические или иммунологические анализы), известных из уровня техники для определения Fc-FcγR взаимодействий, т.е., специфичного связывания Fc участка с FcγR, включая, но, не ограничиваясь приведенным, равновесные способы (например, иммуносорбентный ферментный анализ (ELISA), или радиоиммунологическое исследование (RIA)), или кинетические способы (например, анализ BIACORE®) и другие способы, такие, как анализы непрямого связывания, анализы конкурентного ингибирования, резонансный перенос энергии флуоресценции (РПЭФ), гель-электрофорез и хроматография (например, гель-фильтрация). Эти и другие способы могут использовать метку на одном и более компоненте, которые исследуют и/или используют множество способов детекции, включая, но, не ограничиваясь приведенным, хромогенные, флуоресцентные, люминесцентные или изотопные метки. Подробное описание аффинностей и кинетики связывания можно найти в Paul, W.E., ed., Fundamental Immunology, 4th Ed., Lippincott-Raven, Philadelphia (1999), которое направлено на взаимодействия антитело-иммуноген.
[0437] В одном варианте исполнения, Fc вариантный белок имеет повышенное связывание с одним или более Fc лигандами относительно сравнимой молекулы. В другом варианте исполнения, Fc вариантный белок имеет аффиность для Fc лиганды, которая в как минимум 2 раза, или как минимум 3 раза, или как минимум 5 раз, или как минимум 7 раз, или как минимум 10 раз, или как минимум 20 раз, или как минимум 30 раз, или как минимум 40 раз, или как минимум 50 раз, или как минимум 60 раз, или как минимум 70 раз, или как минимум 80 раз, или как минимум 90 раз, или как минимум 100 раза, или как минимум 200 раз превышает аффинность сравнимой молекулы. В конкретном варианте исполнения, Fc вариантный белок имеет повышенное связывание с Fc рецептором. В конкретном варианте исполнения, Fc вариантный белок имеет повышенное связывание с Fc рецептором FcRn.
[0438] Период полувыведения из сыворотки белков, содержащих Fc участки, может быть пролонгирован путем увеличения аффинности связывания Fc участка для FcRn. В одном варианте исполнения, Fc вариантный белок имеет пролонгированный период полувыведения из сыворотки относительно сравнимой молекулы.
[0439] В одном варианте исполнения, данное изобретение представляет композиции, где Fc участок содержит не встречающийся в природе аминокислотный остаток в одном или более положениях, выбранных из группы, состоящей из 234, 235, 236, 237, 238, 239, 240, 241, 243, 244, 245, 247, 251, 252, 254, 255, 256, 262, 263, 264, 265, 266, 267, 268, 269, 279, 280, 284, 292, 296, 297, 298, 299, 305, 313, 316, 325, 326, 327, 328, 329, 330, 332, 333, 334, 339, 341, 343, 370, 373, 378, 392, 416, 419, 421, 440 и 443, пронумерованных по EU индексу, как приведено в Kabat. Необязательно, Fc участок может содержать не встречающийся в природе аминокислотный остаток в дополнительных и/или альтернативных положениях, известных специалисту в данной области (см., например, патенты США 5,624,821; 6,277,375; 6,737,056; патентные публикации РСТ WO 01/58957; WO 02/06919; WO 04/016750; WO 04/029207; WO 04/035752; WO 04/074455; WO 04/099249; WO 04/063351; WO 05/070963; WO 05/040217, WO 05/092925 и WO 06/020114).
[0440] В конкретном варианте исполнения, данное изобретение представляет Fc вариантную белковую композицию, где Fc участок содержит как минимум один не встречающийся в природе аминокислотный остаток, выбранный из группы, состоящей из 234D, 234Е, 234N, 234Q, 234Т, 234Н, 234Y, 234I, 234V, 234F, 235A, 235D, 235R, 235W, 235Р, 235S, 235N, 235Q, 235Т, 235Н, 235Y, 235I, 235V, 235F, 236E, 239D, 239E, 239N, 239Q, 239F, 239T, 239H, 239Y, 240I, 240A, 240T, 240M, 241W, 241 L, 241Y, 241E, 241 R. 243W, 243L 243Y, 243R, 243Q, 244H, 245A, 247L, 247V, 247G, 251F, 252Y, 254T, 255L, 256E, 256M, 262I, 262A, 262T, 262E, 263I, 263A, 263T, 263M, 264L, 264I, 264W, 264T, 264R, 264F, 264M, 264Y, 264E, 265G, 265N, 265Q, 265Y, 265F, 265V, 265I, 265L, 265H, 265T, 266I, 266A, 266T, 266M, 267Q, 267L, 268E, 269H, 269Y, 269F, 269R, 270E, 280A, 284M, 292P, 292L, 296E, 296Q, 296D, 296N, 296S, 296T, 296L, 296I, 296H, 269G, 297S, 297D, 297E, 298H, 298I, 298T, 298F, 299I, 299L, 299A, 299S, 299V, 299H, 299F, 299E, 305I, 313F, 316D, 325Q, 325L, 325I, 325D, 325E, 325A, 325T, 325V, 325H, 327G, 327W, 327N, 327L, 328S, 328M, 328D, 328E, 328N, 328Q, 328F, 328I, 328V, 328T, 328H, 328A, 329F, 329H, 329Q, 330K, 330G, 330T, 330C, 330L, 330Y, 330V, 330I, 330F, 330R, 330H, 332D, 332S, 332W, 332F, 332E, 332N, 332Q, 332T, 332H, 332Y, 332A, 339T, 370E, 370N, 378D, 392T, 396L, 416G, 419H, 421K, 440Y и 434W, как пронумеровано при помощи ЕС индекса, как указано в Kabat. Необязательно, Fc участок может содержать дополнительные и/или альтернативные не встречающиеся в природе аминокислотные остатки, известные специалисту в данной области (см., например, патенты США 5,624,821; 6,277,375; 6,737,056; патентные публикации РСТ WO 01/58957; WO 02/06919; WO 04/016750; WO 04/029207; WO 04/035752 и WO 05/040217).
[0441] В другом варианте исполнения, данное изобретение представляет Fc вариантную белковую композицию, где Fc участок содержит как минимум не встречающуюся в природе аминокислоту в одном или более положениях, выбранных из группы, состоящей из 239, 330 и 332, как пронумеровано при помощи ЕС индекса, как приведено в Kabat. В конкретном варианте исполнения, данное изобретение представляет Fc вариантную белковую композицию, где Fc участок содержит как минимум одну не встречающуюся в природе аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из 239D, 330L и 332Е, как пронумеровано при помощи ЕС индекса, как приведено в Kabat. Необязательно, Fc участок может дополнительно содержать дополнительную не встречающиеся в природе а аминокислоту в одном или более положениях, выбранную из группы, состоящей из 252, 254 и 256, как пронумеровано при помощи ЕС индекса, как приведено в Kabat. В конкретном варианте исполнения, данное изобретение представляет Fc вариантную белковую композицию, где Fc участок содержит как минимум одну не встречающуюся в природе аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из 239D, 330L и 332Е, как пронумеровано при помощи EU индекса, как приведено в Kabat, и как минимум одну не встречающуюся в природе аминокислоту в одном или более положениях, которые выбирают из группы, состоящей из 252Y, 254Т и 256Е, как пронумеровано при помощи ЕС индекса, как приведено в Kabat.
[0442] В одном варианте исполнения, Fc варианты данного изобретения могут быть скомбинированы с другими известными Fc вариантами, такими, как описано в Ghetie et al., 1997, Nat Biotech. 15:637-40; Duncan et al., 1988, Nature 332:563-564; Lund et al., 1991, J. Immunol 147:2657-2662; Lund et al., 1992, Mol Immunol 29:53-59; Alegre et al., 1994, Transplantation 57:1537-1543; Hutchins et al., 1995, Proc Natl. Acad Sci USA 92:11980-11984; Jefferis et al., 1995, Immunol Lett. 44:111-117; Lund et al., 1995, Faseb J 9:115-119; Jefferis et al., 1996, Immunol Lett 54:101-104; Lund et al., 1996, J Immunol 157:4963-4969; Armour et al., 1999, Ser J Immunol 29:2613-2624; Idusogie et al., 2000, J Immunol 164:4178-4184; Reddy et al., 2000, J Immunol 164:1925-1933; Xu et al., 2000, Cell Immunol 200:16-26; Idusogie et al., 2001, J Immunol 166:2571-2575; Shields et al., 2001, J Biol Chem 276:6591-6604; Jefferis et al., 2002, Immunol Lett 82:57-65; Presta et al., 2002, Biochem Soc Trans. 30:487-490); патентах США №№5,624,821; 5,885,573; 5,677,425; 6,165,745; 6,277,375; 5,869,046; 6,121,022; 5,624,821; 5,648,260; 6,528,624; 6,194,551; 6,737,056; 6,821,505; 6,277,375; патентных публикациях США №№2004/0002587 и РСТ публикациях WO 94/29351; WO 99/58572; WO 00/42072; WO 02/060919; WO 04/029207; WO 04/099249; WO 04/063351. Также данное изобретение охватывает Fc участки, содержащие делеции, добавления и/или модификации. Другие модификации/замещения/добавления/делеции Fc домена будут с легкостью очевидны специалисту в данной области.
[0443] Способы генерирования не встречающихся в природе Fc участков известны в данной области. Например, аминокислотные замещения и/или делеции могут быть получены при помощи способов мутагенеза, включая, но, не ограничиваясь приведенным, сайт-направленный мутагенез (Kunkel, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 82:488-492 (1985)), ПЦР мутагенез (Higuchi, in "PCR Protocols: A Guide to Methods and Applications", Academic Press, San Diego, pp. 177-183 (1990)) и кассетный мутагенез (Wells et al., Gene 34:315-323 (1985)). Преимущественно, сайт-направленный мутагенез выполняют при помощи перекрывающего-расширяющего ПЦР способа (Higuchi, in "PCR Technology: Principles and Applications for DNA Amplification", Stockton Press, New York, pp. 61-70 (1989)). Метод перекрывающего-расширяющего ПЦР (Higuchi, ibid.) может быть также использован для введения любой желательной мутации(мутаций) в последовательность-мишень (исходную ДНК). Например, первый раунд ПЦР в перекрывающем-расширяющем способе включает амплификацию последовательности-мишени внешнего праймера (праймер 1) с внутренним мутагенезным праймером (праймер 3) и отдельно со вторым внешним праймером (праймер 4) со внутренним праймером (праймер 2), приводя к получению двух ПЦР сегментов (сегменты А и В). Внутренний мутагенезный праймер (праймер 3) разработан как содержащий несовпадения для последовательности-мишени, указывающей на желательную мутацию (мутации). Во втором цикле ПЦР, продукты первого цикла ПЦР (сегменты А и В) амплифицированы при помощи ПЦР с использованием двух внешних праймеров (праймеры 1 и 4). Полученный в результате полноразмерный ПЦР сегмент (сегмент С) расщеплен с рестриктазами и полученный фрагмент рестрикции клонирован в соответствующий вектор. В качестве первой стадии мутагенеза, начальная ДНК (например, кодирующая Fc гибридный белок, антитело или просто Fc участок), функционально клонирована в мутагенезный вектор. Праймеры разработаны для отображения желаемого аминокислотного замещения. Другие способы, полезные для генерирования вариантных Fc участков, известны из уровня техники (см., например, патенты США №№5,624,821; 5,885,573; 5,677,425; 6,165,745; 6,277,375; 5,869,046; 6,121,022; 5,624,821; 5,648,260; 6,528,624; 6,194,551; 6,737,056; 6,821,505; 6,277,375; патентные публикации США №№2004/0002587 и публикации РСТ WO 94/29351; WO 99/58572; WO 00/42072; WO 02/060919; WO 04/029207; WO 04/099249; WO 04/063351).
[0444] В некоторых вариантах исполнения, Fc вариантный белок содержит одну или более сконструированных гликоформ, т.е., углеводную композицию, которая ковалетно присоединена к молекуле, содержащей Fc участок. Сконструированные гликоформы могут быть полезны для различных целей, включая, но, не ограничиваясь приведенным, повышение или снижение эффекторной функции. Сконструированные гликоформы могут быть получены любым способом, известным специалисту в данной области, например путем применения сконструированных или вариантных штаммов экспрессии, путем совместной экспрессии с одним или более ферментами, например DI N-ацетилглюкозаминилтрансферазы III (GnTI11), путем экспрессии молекулы, содержащей Fc участок в различных организмах или клеточных линиях из различных организмов, или путем модифицирования углевода(ов) после экспрессии молекулы, содержащей Fc участок. Способы генерирования конструирования гликоформ известны в данной области и включают, не ограничиваясь приведенным, описанные в Umana et al., 1999, Nat. Biotechnol 17:176-180; Davies et al., 20017 Biotechnol Bioeng 74:288-294; Shields et al., 2002, J Biol Chem 277:26733-26740; Shinkawa et al., 2003, J Biol Chem 278:3466-3473) патент США №6,602,684; патентную заявку США серийный номер 10/277,370; патентную заявку США серийный номер 10/113,929; РСТ WO 00/61739 А1; РСТ WO 01/292246 А1; РСТ WO 02/311140 А1; РСТ WO 02/30954 А1; Potillegent™ технологию (Biowa, Inc. Princeton, N.J.); технологию конструирования гликозилирования GlycoMAb™ (GLYCART biotechnology AG, Zurich, Switzerland). См., например, WO 00061739; EA 01229125; US 20030115614; Okazaki et al., 2004, JMB, 336: 1239-49.
Примеры
[0445] Данное изобретение теперь описано со ссылкой на следующие примеры. Данные примеры обеспечены только в целях иллюстрации и данное изобретение не должно быть никоим образом истолковано как ограничивающее данные примеры, но скорее должно быть истолковано как охватывающее любые и все вариации, которые становятся очевидными как результат доктрин, обеспеченных в данной заявке.
Пример 1. Выделение анти-IL-6 антитела
[0446] Подробное описание выделения Антитела 18 и других анти-IL-6 антител, которые могут быть использованы для реализации изобретений, описанных в данной заявке, обеспечено в публикации РСТ № WO 2008/065378. Кратко, прекурсор к Антителу 18 был выделен посредством скрининга библиотеки фаговым дисплеем с использованием рекомбинантного человеческого IL-6 в качестве мишени. Прекурсор подвергали оптимизации аффиности с получением нескольких высокоаффинных человеческих анти-IL-6 антител. Характеристика данных антител описана в публикации РСТ № WO 2008/065378. Антитело 18 способно к блокированию IL-6 связывания с IL-6R. Антитело 18 связывается с человеческим IL-6 и IL-6 яванских макак, но не связывает IL-6, полученное от мыши, крысы или собаки. Антитело 18 связывается с человеческим IL-6 с аффинностью, которая превышает уровень детекции 10 пМ анализа BIAcore. Аффинность Антитела 18 к человеческому IL-6 была установлена для 0,40 пМ (95% CI 0,12 пМ - 0,69 пМ) с использованием TF-1 анализа клеточной пролиферации.
Пример 2. Анти-IL-6 антитело с пролонгированным периодом полувыведения
2,1 Генерация вариантного анти-IL-6 IgG1 антитела, содержащего Fc участок, содержащий M252Y, S254T и Т256Е замещения
[0447] Вектор экспрессии, кодирующий Антитело 18, был модифицирован при помощи стандартных лабораторных способов для введения M252Y, S254T и Т256Е замещений в Fc участок. Модифицированное Антитело 18, содержащее M252Y, S254T и Т256Е замещения, в данной заявке имеет название Антитело 18Е или 18Е.
[0448] Полинуклеотиды, кодирующие тяжелые и легкие цепи анти-IL6 антитела, могут быть подвержены оптимизации нуклеиновокислотных последовательностей. Конечной целью процесса оптимизации последовательностей является создание кодирующего участка, который транскрибирован и транслирован при наибольшей возможной эффективности. Оптимизация последовательностей достигается путем комбинации: (i) оптимизации использования кодонов, (ii) адаптации содержания G/C, (iii) устранения внутренних сайтов сплайсинга и сайтов преждевременного полиаденилирования, (iv) разрушения стабильных вторичных РНК структур, (v) устранения непосредственной повторной последовательности, (vi) устранения последовательности, которая может образовывать стабильные дсРНК с транскриптами клетки-хозяина, (vii) устранения последовательности, направленной микро РНК клеток хозяев, и (viii) введения РНК стабилизирующих сигналов и сигналов РНК транслокации. Подробные способы оптимизации последовательностей описаны в WO 2004059556 A2, WO 2006015789 A2, Bradel-Tretheway et al., J. Virol. Methods 111:145-56 (2003), Valencik & Mcdonald, Transgenic Res. 3:269-75 (2001). Альтернативно, последовательность может быть оптимизирована коммерческим провайдером (например, GENEART Inc.).
[0449] Нуклеотидные последовательности, кодирующие VH, VL, тяжелую цепь и легкую цепь Антитела 18Е были оптимизированы в соответствии со способами, описанными в данной заявке. Оптимизированные нуклеотидные последовательности, кодирующие VH, VI, тяжелую цепь и легкую цепь 18Е описаны как SEQ ID NOs:l 1-14, соответственно.
[0450] Антитело 18Е экспрессировали в пуле СНО-К1 клетки, стабильно трансфектированной вектором экспрессии, содержащим кодирующий участок полноразмерного 18Е антитела. Антитело 18Е очищали от супернатанта при помощи стандартных лабораторных методов.
2,2 Характеристика in vitro вариантного анти-IL-6 IgG1 антитела, содержащего Fc участок, имеющий M252Y, S254T и Т256Е замещения
[0451] Антитело 18Е содержит Fc участок, имеющий M252Y, S254T и Т256Е замещения. Присутствие M252Y, S254T и Т256Е замещений в Fc участке Антитела18Е было подтверждено при помощи анализа ELISA. В анализе в качестве улавливающих реактивов использовали два моноклональных антитела, которые специфично связывают Fc полипептид, содержащий M252Y, S254T и Т256Е замещения, но не соответствует Fc полипептиду дикого типа. Анализы ELISA выполняли в соответствии со стандартными протоколами. Кривая титрования ELISA, полученная с одним замещением специфичного моноклонального антитела показана на Фигуре 1. Антитело 18Е, но не антитело 18, было уловлено в анализе ELISA при помощи антитела, специфичного к M252Y, S254T и Т256Е Fc участку замещения. Поэтому, антитело 18 содержит Fc участок, имеющий M252Y, S254T и Т256Е замещения.
[0452] Fc полипептиды, содержащие M252Y, S254T и Т256Е замещения, имели повышенную аффинность связывания при рН 6 с FcRn по сравнению с аффинностью связывания Fc полипептида дикого типа. Аффинность связывания FcRn очищенного Антитела 18 и Антитела 18Е определяли при помощи анализа BIAcore. Анализ выполняли в соответствии со стандартными протоколами. Антитело 18Е связывается как с человеческим FcRn, так и с FcRn яванских макак при рН 6 со значительно более высокой аффинностью, чем у антител 18. Значение Kd, определенные при помощи BIAcore, показаны в Таблице 1.
[0453] Антитело 18 и18Е связывает IL-6 с в существенной степени равной аффинностью. Аффинность связывания IL-6 Антитела18 и 18Е получали при помощи анализов ELISA. Е. coli экспрессирующие рекомбинантный человеческий IL-6 препарат (rhuIL-6) использовали в качестве реагента улавливателя. Анализы ELISA выполняли в соответствии со стандартными протоколами. В дополнение к Антителу 18 и 18Е, два конкурентных анти-IL-6 антитела (АВ А и АВ В) были также включены в анализ в качестве позитивных контролей. Пример полученных данных показан на Фигуре 2. Значение ЕС50 для антитела 18 и 18Е составляло 6,1 пМ и 6,5 пМ, соответственно.
[0454] Антитело 18 и 18Е ингибируют IL-6 вызванную TF-1 клеточную пролиферацию с существенно идентичной эффективностью. Анализ IL-6 вызванной TF-1 клеточной пролиферации выполняли в существенной степени, как описано в данной заявке. В дополнение к Антителу 18 и 18Е, два конкурентные анти-IL-6 антитела (АВ А и АВ В) были также включены в анализ в качестве позитивных контролей. Репрезентативные данные приведены на Фигуре 3. Значения IC50, рассчитанные для Антитела 18 и 18Е, составляли 4,5 пМ и 5,2 пМ, соответственно.
[0455] Антитело 18 и 18Е ингибирует высвобождение эндогенного вызванного IL-6 фактора роста эндотелия сосудов из человеческих синовиальных фибробластов с существенно идентичной эффективностью. Анализ выполняли в существенной степени, как описано в данной заявке. В дополнение к Антителу 18 и 18Е, два конкурентных анти-IL-6 антитела (АВ А и АВ В) были также включены в анализ в качестве позитивных контролей. Репрезентативные данные приведены на Фигуре 4. Значения IC50, рассчитанные для Антитела 18 и 18Е, составляли 1,3 пМ и 1,2 пМ, соответственно.
2,3 In vivo характеристика вариантного анти-IL-6 IgG1 антитела, содержащего Fc участок, имеющий M252Y, S254T и Т256Е замещения.
[0456] Фармакокинетическое и фармакодинамическое исследование разовой дозы у яванских макак было проведено для определения периода полувыведения и клиренса Антитела 18 и 18Е в сыворотке. Дизайн исследования приведен в Таблице 2.
[0457] РК Assay (ECL) IL-6 улавливания антигена для количественного определения Антитела 18 или Антитела 18Е в плазме яванских макак: планшеты МА2400 на 96 лунок (MSD) покрывали 2,5 г/мл рекомбинатным человеческим IL-6 (R&D Systems) в течение ночи при 2-8°C, промывали фосфатно-буферным раствором, содержащим 0,05% Tween 20 и блокировали в течение 1-2 часов при комнатной температуре буфером I-Block (Tropix). Стандартные кривые для Антитела 18 и Антитела 18Е, контроль качества (КК) и разбавления тестовой пробы получали в 1% плазме яванских макак и добавляли к блокированным планшетам в течение 1 часа при комнатной температуре. Планшеты промывали, как описано выше, и инкубировали в течение еще 1 часа с 1 микрограмм/мл MSD-TAG (Рутений) - меченое-овечьим античеловеческим IgG (H+L) обезьяним поглощенным детекторным антителом (сайт связывания). Несвязанное детекторное антитело удаляли путем промывания и добавляли 150 микроль 1X считывающего буфера Т (MSD) в лунки планшеты. Планшеты считывали сразу же с MSD секторным преобразователем изображения 2400 и концентрации Антитела 18 и Антитела 18Е в КК и разведениях тестовой пробы на каждой планшете количественно определяли с использованием стандартной кривой для данной планшеты. Все анализы производили путем нанесения стандартной кривой концентрации - сигнал ECL на кривой подгонки Log-Log на программном обеспечении Softmax Pro GxP (Molecular Devices). Аналитический диапазон для количественного определения как Антитела 18, так и Антитела 18Е, составлял 10,000-13,7 нг/мл (10-0,0137 микрограмм/мл) в 100% плазме.
[0458] Данные анализа РК: Некомпартментный токсикокинетический анализ выполняли при индивидуальных данных РК от всех животных, используя WinNonlin Professional (версия 5,2, Pharsight Corp., Mountain View, СА), в соответствии со стандартной операционной процедурой MedImmune.
[0459] Полученные результаты приведены на Фигурах 5 и 6. Фигура 5 демонстрирует концентрацию в сыворотке Антитела 18 и 18Е через время после подкожного или внутривенного введения разовой дозы 5 мг/мл антитела. Как Антитело 18, так и 18Е, проявляли линейный профиль РК. Период полувыведения Антитела 18 в сыворотке составляет приблизительно от 8,5 дней до 9,1 дней после внутривенного и подкожного введения, соответственно. Период полувыведения Антитела 18Е в сыворотке составляет приблизительно 28,4 дней и 28,8 дней после внутривенного и подкожного введения, соответственно. Клиренс Антитела18 составляет приблизительно 12,1 мл/день/кг и 13,1 мл/день/кг после внутривенного и подкожного введения, соответственно. Клиренс Антитела18Е составляет приблизительно 2,8 мл/день/кг и 3,0 мл/день/кг после внутривенного и подкожного введения, соответственно. Биодоступность подкожно введенного Антитела 18 и 18Е составляла 94% и 96%, соответственно.
[0460] Фигура 6 демонстрирует концентрацию в сыворотке антител 18 и 18Е через время после подкожного введения разовой дозы 5 мг/кг антитела. Фигура 6 дополнительно демонстрирует общую концентрацию IL-6 в сыворотке, детектированную у животных после подкожного введения разовой дозы 5 мг/кг Антитела18 или 18Е. Общие уровни IL-6 возрастали приблизительно втрое логарифмически по сравнению с фоном. Большее накопление общего IL-6 наблюдали с Антителом 18Е. Уменьшение общих уровней IL-6 было приблизительно параллельным уменьшению РК.
2,3 Моделирование % нейтрализации свободного IL-6 в плазме путем подкожно введенного анти-IL-6 антитела.
[0461] Концентрации свободного IL-6 являются очень низким при фоновой линии у здоровых животных. Поэтому было сложно непосредственно оценить % направленной нейтрализации после введения анти-IL-6 антитела путем измерения уровней свободного IL-6. Мы разработали модель PK/PD на программном пакете SAAM II для прогнозирования кинетики нейтрализации свободного IL-6 по отношению к РК антитела с использованием общего IL-6 в качестве PD маркера. Модель PK/PD описывает кинетику антитела, свободное IL-6, комплекс IL-6 и антитело, растворимый рецептор и комплекс IL-6 и растворимого рецептора. Разработанная модель адекватно описывала РК антитела и общую кинетику IL-6, полученную из исследований обезьян, и была использована для симулирования профилей PK/PD у человеческих пациентов с ревматоидным артритом посредством различных режимов дозировок при помощи допущения стандартного аллометрического масштабирования. 90% уровень ингибирования в человеческой плазме уровней свободного IL-6 был установлен, исходя из концентраций в сыворотке свободного IL-6, детектированного у пациентов с ревматоидным артритом (Uson et. al., J. of Rheumatology (1997) 24(11)2069-75).
[0462] Результаты PD моделирования приведены на Фигурах 7-10 и в Таблице 3. Модель прогнозирует, что непрерывное как минимум 90% ингибирование свободного IL-6 (т.е. не связанного с sIL-6R или IL-6R) может быть достигнуто путем введения Антитела 18Е в соответствии с любым из следующих режимов дозировок:
- 100 мг Антитела 18Е вводят подкожно каждые 8 недель;
- 50 мг Антитела 18Е вводят подкожно каждые 4 недели;
- разовую дозу нагрузки 200 мг Антитела 18Е вводят подкожно с последующими 100 мг Антитела 18Е, которое вводят подкожно каждые 8 недель; и
- разовую дозу нагрузки 100 мг Антитела 18Е вводят подкожно с последующими 50 мг Антитела 18Е, которое вводят подкожно каждые 4 недели.
[0463] Модель дополнительно прогнозирует, что аналогичный уровень непрерывного ингибирования свободного IL-6 в сыворотке потребует более частых и/или больших доз Антитела 18. Например, непрерывное как минимум 90% ингибирование свободного IL-6 (т.е. не связанного с sIL-6R или IL-6R) может быть достигнуто путем подкожного введения 100 мг Антитела 18 каждые 2 недели.
[0464] Данные результаты демонстрируют способность анти-IL-6 антитела ингибировать системный эффект IL-6 in vivo. В то же время, конкретные варианты исполнения данного изобретения описаны выше, в целях описания, и специалист в данной области поймет, что различные вариации деталей могут быть произведены, не выходя за данное изобретение, как описано в формуле изобретения, которая прилагается.
Пример 3 Эффективность в модели воспалительной боли, вызванной мышиным ПАФ
[0465] mAb406 (анти-мышиное IL-6, очищенное от моноклонального IgG1, клон МР5-20F3, лот AHV100904A, R&D Systems) анализировали на предмет способности обращать воспалительную боль, вызванную местным подкожным введением полного адъюванта Фрейнда, ("ПАФ") (20 микролитров) в мышином хвосте (3 см от удаленного кончика хвоста). Данное вещество производит местный воспалительный ответ, постепенно увеличивающийся со временем и достигающий плато через 24-48 часов после введения. Полученное в результате воспаление продуцирует гиперчувствительность к термической или механической стимуляции хвоста. Термическая гипералгезия была оценена путем регистрации запаздывания отдергивания хвоста от термического стимула (теплая вода, 46°C), в то время как механическую гипералгезию оценивали по порогу отдергивания хвоста от постоянно возрастающего давления, производимого аналгезиметром (прибор Randall Selitto). Изотипный контроль IgG1 (mAb005, очищенный из крысиного моноклонального IgG1, клон 43414, лот CAN04904A, приобретенный у R&D Systems) и mAb406 были введены интраперитонеально через 6 часов после лечения ПАФ. Свидетельство, предполагающее, что воспалительный ответ начат в достаточной степени, включает повышенные уровни цитокинов, выработку оксида азота и гиперчувствительность к умеренно токсичным стимулам. В начальном исследовании оценивали разовую дозу (20 мг/кг) mAb406. Данная доза продуцировала Е-макс, составляющее 50% в анализе тепловой гипералгезии как через 24, так и через 48 часов (см. Фигуру 11) и 40% обратимость механической гипералгезии через 24 и через 48 часов (см. Фигуру 12). In vitro профайлинг уровней IL-6 в плазме организма у данных животных указывал на то, что все IL-6 были нейтрализованы. Соответственно, различные дозы mAb406 (и высокая доза IgG1 контроля) были оценены для характеристики эффективности и нейтрализации IL-6 в отношении ингибирования боли и обратимости гипералгезии. С использованием аналогичных экспериментальных парадигмальных доз в диапазоне от 1 до 20 мг/кг, интраперитонеально были исследованы как тепловая, так и механическая гипералгезия через 24 часа и 48 часов. Фигура 13 демонстрирует, что гипералгезия была обратимой в зависимости от дозы при помощи лечения анти-IL6 через 24 часа и аналогичные результаты были получены через 48 часов (см. Фигуру 14). Е-макс. в данном втором исследовании было обратимым на 64%, что немногим выше, но аналогично обратимым результатам, полученным выше. Фигуры 15 и Фигура 16 демонстрируют результаты для механической гипералгезии через 24 часа и 48 часов, соответственно. Снова зависимые от дозы обратимые результаты наблюдали при достижении Е-макс 91% через 48 часов, что превышает обратимые результаты, полученные в первом исследовании. При любой из тестовых доз и ни в одном исследовании не наблюдали побочных эффектов. В общем, эффективности in vivo с mAb406 были сравнимы или превышали реперную малую молекулу - соединение напроксен в той же модели (см. Фигуру 17 для напроксена при гиперчувствительности к нагреванию и Фигуру 18 для напроксена при гиперчувствительности механическому сжатию).
[0466] Все публикации, патенты и патентные заявки, приведенные в данном описании, включены путем ссылки в данное описание в той же мере, как если бы каждая из них была конкретно и отдельно указана как отдельная публикация, патент или патентная заявка, для включения в данную заявку путем ссылки.
Материалы и способы
Ингибирование IL-6 вызванной пролиферации TF-1 клетки очищенным scFv и IgG
[0467] TF-1 клетки были подарены R&D Systems и их хранили в соответствии с предоставленным протоколом. Аналитические среды включали RPMI-1640 с GLUTAMAXI (Invitrogen), содержащий 5% бычьей эмбриональной сыворотки (JRH) и 1% пирувата натрия (Sigma). Перед каждым анализом, TF-1 клетки осаждали посредством центрифугирования при 300g в течение 5 минут, среды удаляли путем отсасывания и клетки повторно суспендировали в аналитических средах. Этот процесс повторяли дважды с клетками, повторно суспендированными при конечной концентрации 5×105 клетки/мл в аналитической среде. Клетки высаживали на планшету при 100 мкл/лунка в аналитической планшете на 96 лунок. Планшеты инкубировали в течение 24 часов при 37°C и 5% СО2 для истощения клетки ГМКСФ. Тестовые растворы очищенных scFv или IgG (двойные) разбавляли до желательной концентрации в аналитических средах. Нерелевантное антитело, не направленное на IL-6, использовали в качестве негативного контроля. Рекомбинантное бактериальное человеческое (R&D) и яванских макак (местных) IL-6 добавляли до конечной концентрация 20 пМ (человеческое IL-6) или 100 пМ (яванские макаки) при смешивании с соответствующим тестовым антителом в общем объеме 100 мкл/лунка. Концентрацию IL-6, которую использовали в анализе, выбирали как дозу, которая при конечной аналитической концентрации, давала приблизительно 80% максимального пролиферативного ответа. Все пробы инкубировали в течение 30 минут при комнатной температуре. 100 мкл IL-6 и смеси антител затем добавляли в 100 мкл клеток с получением общего аналитического объема 200 мкл/лунка. Планшеты инкубировали в течение 24 часов при 37°C и 5% СО2. 20 мкл оттитрованного тимидина (5 мк Ci/мл) затем добавляли в каждый момент анализа и планшеты возвращали в инкубатор на еще дополнительно 24 часов. Клетки собирали на стекловолоконных фильтровальных пластинах (Perkin Elmer) при помощи харвестера клеток. Введение тимидина определяли при помощи Packard TopCount микропланшетного жидкостного сцинтилляционного счетчика. Затем данные анализировали при помощи программного оборудования Graphpad Prism.
Ингибирование высвобождение эндогенного вызванного IL-6 фактора роста эндотелия сосудов из человеческих синовиальных фибробластов при помощи очищенного IgG
[0468] Пробы коленей с ревматоидным артритом от хирургии общей замены суставов получали в антибиотиках, содержащих среду Игла, модифицированную по Дульбекко. Синовиальную оболочку, находящуюся в средах, рассекали от сустава и тонко измельчали. Синовиальную ткань промывали средами с добавлением 10% ФСК. Клеточную суспензию инкубировали в растворе коллагеназы в течение 2 часов в СО2 инкубаторе при 37°C. Дигестированную суспензию синовиальных клеток разрушали путем повторного отсасывания через 10 мл пипеткой, клетки процеживали и центрифугировали при 400 g при комнатной температуре в течение 5 минут. Клетки повторно суспендировали в среде Игла, модифицированной по Дульбекко, содержащей 10% ФСК, пропускали через клеточное сито, доводили до 1×106 клеток на мл и инкубировали в СО2 инкубаторе при 37°C в 225-см2 колбах с клеточной культурой (3001, CoStar Corning Inc.). После прилипания, большую часть среды убирали, заменяли свежей и возвращали в инкубатор для длительной инкубации. Клетки исследовали еженедельно и пропускали при конфлюэнтности путем трипсинизации при скорости пропускания 1 в 3.
[0469] Фибробласты (Р3-5) при конфлюэнтности удаляли из колб путем инкубирования с 10 мл 0,1% раствора трипсин-ЭДТК (25300-054, Gibco ФИЛе Sciences) на колбу в течение 5-10 минут при 37°C. равный объем культуральной среды на основе среды Игла, модифицированной по Дульбекко, с добавлением 10% ФСК, добавляли в клетки, которые затем осаждали центрифугированием при 330 g в течение 5 минут при комнатной температуре. После одной стадии промывания культуральной средой на основе среды Игла, модифицированной по Дульбекко, с добавлением 10% ФСК, добавляли клеточную суспензию кластера клеточных культур (1×105 клеток на мл)\(150 мкл на лунку) в лунки стерильных плоскодонных полистирольных планшет на 96 лунок (3598, Corning CoStar) при 1,5×104 клетки на лунку. Дополнительное добавление культуральной среды на основе среды Игла, модифицированной по Дульбекко, с добавлением 10% ФСК, добавляли в каждую лунку (100 мкл на лунку) с получением общего объема 250 мкл на лунку. Клетки инкубировали при 37°C в течение ночи для того, чтобы позволить прилипание и латентность.
[0470] Планшеты на 96 лунок исследовали для того, чтобы удостовериться, что клетки были конфлюэнтны и в хорошем состоянии (например, не содержали загрязнений). Среду затем отсасывали из лунок и немедленно добавляли 100 мкл культуральной среды на основе среды Игла, модифицированной по Дульбекко, с добавлением 10% ФСК. Для этого, 50 мкл культуральной среды на основе среды Игла, модифицированной по Дульбекко. С добавлением 10% ФСК, содержащей пробу IgG или только среду, добавляли в лунки (разведенную 1 в 5 в анализе).
[0471] За этим следовало добавление 50 мкл на лунку культуральной среды на основе среды Игла, модифицированной по Дульбекко, с добавлением 10% ФСК, содержащей рекомбинантное человеческое растворимое (rhs)IL-6Rα (500 нг на мл; 12 нМ) и rhIL-1β (50 пг на мл; 2,95 пМ, разбавленное 1 в 5 в анализе).
[0472] В отдельных лунках, 50 мкл среды Иггла, модифицированной по Дульбекко, с добавлением 10% фетальной сыворотки коров, содержащей; rh-IL-6 (0,100 нг на мл; 21,5 нМ), sIL-6Rα (500 ег на мл; 12 нМ), rhIL-1β (50 пг на мл; 2,95 пМ), или добавляли только среду (разбавленную 1 к 5 в анализе). Конечный объем в каждой лунке составлял 250 мкл.
[0473] Планшеты инкубировали в течение 48 часов при 37°C. Инкубирования производили в двойных или тройных лунках, как описано в формате планшет. Планшеты центрифугировали при 330 g в течение 5 минут при комнатной температуре и супернатантные среды удаляли и хранили при -40°C в микротитрованных плоскодонных планшетах (611F96, Sterilin).
[0474] Фактор роста эндотелия сосудов измеряли при помощи ELISA (DY293B, R&D Systems) следуя инструкциям производителя. Кратко, планшеты ELISA покрывали мышиным античеловеческим антителом фактора роста эндотелия сосудов в течение ночи при 4°C и блокировали 1% альбумином бычьей сыворотки/фосфатно-буферным раствором. Планшеты промывали 0,05% Tween 20/ фосфатно-буферным раствором и инкубировали культуральными супернатантными человеческих синовиальных фибробластов и биотинилированным козлиным антителом анти-человеческого фактора роста эндотелия сосудов в течение ночи при комнатной температуре. После промывания, фактор роста эндотелия сосудов детектировали при помощи стрепатвидиновой пероксидазы хрена. Планшеты развивали при помощи 1:1 H2O2 : тетраметилбензидина. Реакцию останавливали 2 М H2SO4 и оптическую плотность определяли при 450 нм с коррекционной длиной волны, установленной при 540 нм.
Измерение общих уровней IL-6 в плазме
[0475] Общее содержание IL-6 измеряли с использованием набора Milliplex™ MAP (MPXHCYTO60K) в соответствии с рекомендациями производителя. Все необходимые реактивы обеспечены в наборе для анализа. Кратко, фильтровальную аналитическую планшету увлажняли 200 мкл аналитического буфера и жидкость удаляли под вакуумом. Каждый из следующих реактивов добавляли в планшету при 25 мкл/лунку: (а) аналитический буфер (b) пробы плазмы, стандарты или КК и (с) подложки, конъюгированные с анти-IL-6 иммобилизованным антителом в аналитическом матриксе. Конечный аналитический объем составлял 75 мкл и конечный аналитический матрикс составлял 133,3 мкг/мл лекарственного средства - кандидата (Антитело 18 или Антитело 18Е) в 25% IL-6 обедненной нормальной ЭДТК плазме яванских макак. Планшету герметично закрывали и инкубировали всю ночь при 4°C. Через 2 промывания промывным буфером, добавляли 25 мкл/лунка биотинилированного анти-IL6 детекторного антитела. Через 30 минут инкубирования, добавляли 25 мкл/лунку SA-PE в лунки и планшету инкубировали в течение дополнительных 30 минут. Планшету дважды промывали и подложки повторно суспендировали 150 мкл/лунка проточной жидкостью Luminex. Интенсивность флуоресценции, связанную с подложками, измеряли при помощи планшетного ридера Luminex200. Поскольку как улавливание, так и детекция анти-IL-6 антитела способны связывать IL-6 в присутствии Антитела 18 или Антитела 18Е, интенсивность флуоресценции пропорциональна общей концентрации IL-6 в пробе. Концентрацию IL-6 экстраполировали из стандартной кривой, нанесенной при помощи программного обеспечения Bead View (Upstate Cell Signaling Solutions. Диапазон детекции для IL-6 составлял от 1,8 пг/мл до 5769 пг/мл в 100% плазме яванских макак.
[0476] Все ссылки, процитированные по всей данной заявке, включая процитированные в любом месте выше, включены путем ссылки полностью и для всех целей.
Claims (17)
1. Выделенное антитело, которое специфично связывается с IL-6, где это антитело включает аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 9 и SEQ ID NO: 10.
2. Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 9 и SEQ ID NO: 10.
3. Нуклеиновая кислота по п. 2, содержащая нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 13 и SEQ ID NO: 14.
4. Вектор для экспрессии антитела по п. 1, содержащий нуклеиновую кислоту по п. 3.
5. Выделенная клетка для получения антитела по п. 1, содержащая вектор по п. 4.
6. Выделенная клеточная линия яичников китайского хомячка (СНО) для получения антитела по п. 1, экспрессирующая антитело по п. 1, включающая нуклеиновую кислоту, кодирующую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9 и SEQ ID NO: 10.
7. Фармацевтическая композиция для лечения или профилактики расстройства, ассоциированного с IL-6, содержащая антитело по п. 1 в фармацевтически приемлемом носителе.
8. Способ лечения или профилактики боли у человека, включающий введение человеку, который нуждается в этом, терапевтически эффективного количества анти-IL-6 антитела, причем анти-IL-6 антитело включает аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 9 и SEQ ID NO: 10.
9. Способ по п. 8, отличающийся тем, что боль связана с или является результатом воспалительного и/или аутоиммунного расстройства.
10. Способ по п. 9, отличающийся тем, что воспалительное и/или аутоиммунное расстройство выбирают из группы, состоящей из ревматоидного артрита, остеоартрита, кахексии, хронического обструктивного легочного заболевания (ХОБЛ), ювенильного идиопатического артрита, астмы, системной красной волчанки, воспалительного заболевания кишечника, болезни Хрона, язвенного колита и атеросклероза.
11. Способ по п. 9, отличающийся тем, что воспалительное и/или аутоиммунное расстройство является системной красной волчанкой, остеоартритом или ревматоидным артритом.
12. Способ по п. 9, отличающийся тем, что боль связана с или является результатом состояния, вызванного повышенными уровнями IL-6.
13. Способ по п. 9, отличающийся тем, что боль связана с или является результатом анкилозирующего спондилита, воспалительного люмбаго, нейропатии, подагры, неврономы, фибромиалгии, острой и/или хронической головной боли, мигреней, панкреатита, сдавливания спинномозгового нерва, незлокачественной скелетной боли или рака.
14. Способ по п. 9, отличающийся тем, что боль связана с или является результатом ран, медицинской процедуры, хирургического вмешательства, поражения или травмы.
15. Способ по п. 9, отличающийся тем, что антитело вводят человеку профилактически до получения ранения, до проведения медицинской процедуры, хирургического вмешательства, до поражения или травмы.
16. Способ по п. 9, отличающийся тем, что нейтрализуют как минимум 90% свободного IL-6 в сыворотке.
17. Способ по п. 9, отличающийся тем, что в ткани-мишени ингибируют как минимум 90% IL-6 опосредованной сигнализации в пораженной ткани.
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US14810609P | 2009-01-29 | 2009-01-29 | |
US61/148,106 | 2009-01-29 | ||
US18418209P | 2009-06-04 | 2009-06-04 | |
US61/184,182 | 2009-06-04 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2011135422/10A Division RU2011135422A (ru) | 2009-01-29 | 2010-01-29 | Человеческие анти-il-6 антитела с пролонгированным периодом выведения in vivo и их применение при лечении онкологических, аутоиммунных заболеваний и воспалительных заболеваний |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2650594C1 true RU2650594C1 (ru) | 2018-04-17 |
Family
ID=42396023
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2015150249A RU2650594C1 (ru) | 2009-01-29 | 2010-01-29 | Человеческие анти-il-6 антитела с пролонгированным периодом выведения in vivo и их применение при лечении онкологических, аутоиммунных заболеваний и воспалительных заболеваний |
RU2011135422/10A RU2011135422A (ru) | 2009-01-29 | 2010-01-29 | Человеческие анти-il-6 антитела с пролонгированным периодом выведения in vivo и их применение при лечении онкологических, аутоиммунных заболеваний и воспалительных заболеваний |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2011135422/10A RU2011135422A (ru) | 2009-01-29 | 2010-01-29 | Человеческие анти-il-6 антитела с пролонгированным периодом выведения in vivo и их применение при лечении онкологических, аутоиммунных заболеваний и воспалительных заболеваний |
Country Status (14)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US20120034212A1 (ru) |
EP (1) | EP2391384A4 (ru) |
JP (3) | JP2012516158A (ru) |
KR (1) | KR20110108398A (ru) |
CN (2) | CN104119438A (ru) |
AU (1) | AU2010208125B2 (ru) |
BR (1) | BRPI1007005A2 (ru) |
CA (1) | CA2749200A1 (ru) |
HK (1) | HK1201847A1 (ru) |
MX (1) | MX337590B (ru) |
RU (2) | RU2650594C1 (ru) |
SG (3) | SG2014007637A (ru) |
WO (1) | WO2010088444A1 (ru) |
ZA (2) | ZA201104796B (ru) |
Families Citing this family (43)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
TW200831528A (en) | 2006-11-30 | 2008-08-01 | Astrazeneca Ab | Compounds |
SG2014007637A (en) * | 2009-01-29 | 2014-03-28 | Medimmune Llc | Human anti-il-6 antibodies with extended in vivo half-life and their use in treatment of oncology, autoimmune diseases and inflammatory diseases |
US9265834B2 (en) | 2009-03-05 | 2016-02-23 | Ablynx N.V. | Stable formulations of polypeptides and uses thereof |
EP2403873A1 (en) | 2009-03-05 | 2012-01-11 | Ablynx N.V. | Novel antigen binding dimer-complexes, methods of making/avoiding and uses thereof |
PL3438126T3 (pl) * | 2009-09-03 | 2021-03-08 | Ablynx N.V. | Stabilne formulacje polipeptydów i ich zastosowanie |
WO2012032181A2 (en) | 2010-09-10 | 2012-03-15 | Allozyne, Inc | Novel antibody derivatives |
ES2720136T3 (es) * | 2010-12-22 | 2019-07-18 | Teva Pharmaceuticals Australia Pty Ltd | Anticuerpo modificado con semivida mejorada |
SG192673A1 (en) * | 2011-02-10 | 2013-09-30 | Roche Glycart Ag | Mutant interleukin-2 polypeptides |
AU2012223449A1 (en) | 2011-03-03 | 2013-05-02 | Apexigen, Inc. | Anti-IL-6 receptor antibodies and methods of use |
EA201892619A1 (ru) | 2011-04-29 | 2019-04-30 | Роше Гликарт Аг | Иммуноконъюгаты, содержащие мутантные полипептиды интерлейкина-2 |
KR102239138B1 (ko) | 2011-09-30 | 2021-04-12 | 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 | 표적 항원에 대한 면역응답을 유도하는 항원 결합 분자 |
US20150050269A1 (en) | 2011-09-30 | 2015-02-19 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antigen-binding molecule promoting disappearance of antigens having plurality of biological activities |
KR102143331B1 (ko) | 2011-09-30 | 2020-08-11 | 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 | 항원의 소실을 촉진시키는 항원 결합 분자 |
ES2795419T3 (es) | 2012-02-24 | 2020-11-23 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Molécula de unión al antígeno que promueve la desaparición del antígeno vía Fc RIIB |
WO2013175276A1 (en) | 2012-05-23 | 2013-11-28 | Argen-X B.V | Il-6 binding molecules |
US9234035B2 (en) | 2012-10-22 | 2016-01-12 | Fountain Biopharma Inc. | Antibodies to interleukin-6 |
CA2885862A1 (en) * | 2012-10-25 | 2014-05-01 | Medimmune, Llc | Stable, low viscosity antibody formulation |
US10772940B1 (en) * | 2012-12-11 | 2020-09-15 | University Of Kentucky Research Foundation | Cocaine hydrolase-FC fusion proteins for cocaine and methods for utilizing the same |
CA2894225A1 (fr) * | 2012-12-17 | 2014-06-26 | Laboratoire Francais Du Fractionnement Et Des Biotechnologies | Utilisation d'anticorps monoclonaux pour le traitement de l'inflammation et d'infections bacteriennes |
FR2999431B1 (fr) * | 2012-12-17 | 2016-03-18 | Lfb Biotechnologies | Utilisation d'anticorps monoclonaux pour le traitement de l'inflammation et d'infections bacteriennes |
US10261094B2 (en) * | 2013-10-31 | 2019-04-16 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Competitive ligand binding assay for detecting neutralizing antibodies |
TWI713453B (zh) | 2014-06-23 | 2020-12-21 | 美商健生生物科技公司 | 干擾素α及ω抗體拮抗劑 |
DK3215530T3 (da) | 2014-11-07 | 2019-11-25 | Sesen Bio Inc | Forbedrede il-6 antistoffer |
MX2018000778A (es) | 2015-07-31 | 2018-08-15 | Medimmune Ltd | Metodos para tratar trastornos mediados por hepcidinas. |
CN108718522A (zh) | 2016-02-23 | 2018-10-30 | 赛森生物股份有限公司 | Il-6拮抗剂制剂及其用途 |
EP3440108A4 (en) * | 2016-04-07 | 2020-01-08 | Janssen Biotech, Inc. | TREATMENT OF DEPRESSION USING AGENTS THAT BLOCK THE LINKAGE OF IL-6 TO THE IL-6 RECEPTOR |
AU2018214554C1 (en) * | 2017-02-01 | 2022-12-15 | Novo Nordisk A/S | Treatment of diuretic resistance |
JP7395479B2 (ja) * | 2018-01-05 | 2023-12-11 | ノヴォ ノルディスク アー/エス | 免疫抑制なしにil-6媒介性炎症を処置する方法 |
KR20210035846A (ko) | 2018-07-24 | 2021-04-01 | 메디뮨 엘엘씨 | 에스. 아우레우스 클럼핑 인자 A(ClFA)에 지향되는 항체 |
TW202028232A (zh) | 2018-10-09 | 2020-08-01 | 美商麥迪紐有限責任公司 | 針對金黃色葡萄球菌白血球毒素的抗體 |
EP3864041A2 (en) | 2018-10-09 | 2021-08-18 | Medimmune, LLC | Combinations of anti-staphylococcus aureus antibodies |
US20220127338A1 (en) | 2019-03-13 | 2022-04-28 | Medimmune, Llc | Decreasing staphylococcus aureus infections in colonized patients |
EP3962942A1 (en) | 2019-05-01 | 2022-03-09 | Novo Nordisk A/S | Anti-il-6 antibody formulation |
CN111057152B (zh) * | 2019-12-11 | 2022-03-11 | 中国人民解放军第四军医大学 | 一种抗人IL-6Ra单克隆抗体及其应用 |
EP4084818A2 (fr) * | 2019-12-31 | 2022-11-09 | Peptinov | Composition pharmaceutique pour la prevention ou le traitement des douleurs post-operatoires |
WO2021186398A1 (en) | 2020-03-19 | 2021-09-23 | Medimmune Limited | Anti-klebsiella pneumoniae antibodies and uses thereof |
EP4153312A1 (en) | 2020-05-17 | 2023-03-29 | AstraZeneca UK Limited | Sars-cov-2 antibodies and methods of selecting and using the same |
AR122933A1 (es) | 2020-07-10 | 2022-10-19 | Novo Nordisk As | Métodos para tratar la enfermedad cardiovascular |
AU2021325339A1 (en) | 2020-08-10 | 2023-04-06 | Astrazeneca Uk Limited | SARS-CoV-2 antibodies for treatment and prevention of COVID-19 |
TW202342095A (zh) | 2021-11-05 | 2023-11-01 | 英商阿斯特捷利康英國股份有限公司 | 用於治療和預防covid—19之組成物 |
TW202342510A (zh) | 2022-02-18 | 2023-11-01 | 英商Rq生物科技有限公司 | 抗體 |
WO2023209177A1 (en) | 2022-04-29 | 2023-11-02 | Astrazeneca Uk Limited | Sars-cov-2 antibodies and methods of using the same |
WO2024073718A1 (en) * | 2022-09-30 | 2024-04-04 | Sonnet BioTherapeutics, Inc. | Low dose il-6 formulations and methods of use thereof |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2195960C2 (ru) * | 1998-03-17 | 2003-01-10 | Тугаи Сейяку Кабусики Кайся | Профилактический или терапевтический агент для лечения воспалительных заболеваний кишечника, содержащий в качестве активного ингредиента антагонист il-6 |
RU2318829C2 (ru) * | 2001-11-14 | 2008-03-10 | Сентокор, Инк. | Антитела против il-6, композиции, способы и применение |
US20080188401A1 (en) * | 2006-11-30 | 2008-08-07 | Simon Charles Cruwys | Compounds |
Family Cites Families (16)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US7658921B2 (en) * | 2000-12-12 | 2010-02-09 | Medimmune, Llc | Molecules with extended half-lives, compositions and uses thereof |
EP1355919B1 (en) * | 2000-12-12 | 2010-11-24 | MedImmune, LLC | Molecules with extended half-lives, compositions and uses thereof |
CN1678634A (zh) * | 2002-06-28 | 2005-10-05 | 多曼蒂斯有限公司 | 免疫球蛋白单个变体抗原结合区及其特异性构建体 |
AU2004229335C1 (en) * | 2003-04-04 | 2010-06-17 | Genentech, Inc. | High concentration antibody and protein formulations |
AU2005302453A1 (en) * | 2004-10-29 | 2006-05-11 | Medimmune, Llc | Methods of preventing and treating RSV infections and related conditions |
PE20061324A1 (es) * | 2005-04-29 | 2007-01-15 | Centocor Inc | Anticuerpos anti-il-6, composiciones, metodos y usos |
US8163881B2 (en) * | 2005-05-31 | 2012-04-24 | The Board Of Regents Of The University Of Texas System | Immunoglobulin molecules with improved characteristics |
US8309690B2 (en) * | 2005-07-01 | 2012-11-13 | Medimmune, Llc | Integrated approach for generating multidomain protein therapeutics |
KR20080098504A (ko) * | 2006-02-03 | 2008-11-10 | 메디뮨 엘엘씨 | 단백질 제제 |
WO2007104529A2 (en) * | 2006-03-13 | 2007-09-20 | Ablynx N.V. | Amino acid sequences directed against il-6 and polypeptides comprising the same for the treatment of diseases and disorders associated with il-6-mediated signalling |
MX2009007406A (es) * | 2007-01-09 | 2010-01-25 | Wyeth Corp | Formulaciones de anticuerpo anti-il-13 y usos de las mismas. |
US20080279851A1 (en) * | 2007-05-07 | 2008-11-13 | Medlmmune, Llc | Anti-icos antibodies and their use in treatment of oncology, transplantation and autoimmune disease |
SG183742A1 (en) * | 2007-05-21 | 2012-09-27 | Alderbio Holdings Llc | Antibodies to il-6 and use thereof |
WO2009002521A2 (en) * | 2007-06-25 | 2008-12-31 | Amgen Inc. | Compositions of specific binding agents to hepatocyte growth factor |
US20110008329A1 (en) * | 2007-06-26 | 2011-01-13 | Medlmmune, Llc | Methods of Treating RSV Infections And Related Conditions |
SG2014007637A (en) * | 2009-01-29 | 2014-03-28 | Medimmune Llc | Human anti-il-6 antibodies with extended in vivo half-life and their use in treatment of oncology, autoimmune diseases and inflammatory diseases |
-
2010
- 2010-01-29 SG SG2014007637A patent/SG2014007637A/en unknown
- 2010-01-29 KR KR1020117019221A patent/KR20110108398A/ko not_active Application Discontinuation
- 2010-01-29 CN CN201410349897.9A patent/CN104119438A/zh active Pending
- 2010-01-29 RU RU2015150249A patent/RU2650594C1/ru active
- 2010-01-29 JP JP2011548315A patent/JP2012516158A/ja active Pending
- 2010-01-29 RU RU2011135422/10A patent/RU2011135422A/ru not_active Application Discontinuation
- 2010-01-29 CN CN2010800103915A patent/CN102387814A/zh active Pending
- 2010-01-29 SG SG10201704214VA patent/SG10201704214VA/en unknown
- 2010-01-29 US US13/146,278 patent/US20120034212A1/en not_active Abandoned
- 2010-01-29 AU AU2010208125A patent/AU2010208125B2/en active Active
- 2010-01-29 SG SG2011046265A patent/SG172354A1/en unknown
- 2010-01-29 BR BRPI1007005A patent/BRPI1007005A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2010-01-29 WO PCT/US2010/022478 patent/WO2010088444A1/en active Application Filing
- 2010-01-29 EP EP10736433A patent/EP2391384A4/en not_active Ceased
- 2010-01-29 MX MX2011007832A patent/MX337590B/es active IP Right Grant
- 2010-01-29 CA CA2749200A patent/CA2749200A1/en not_active Abandoned
-
2011
- 2011-06-28 ZA ZA2011/04796A patent/ZA201104796B/en unknown
-
2012
- 2012-09-18 HK HK15102182.7A patent/HK1201847A1/xx unknown
- 2012-09-27 ZA ZA2012/07249A patent/ZA201207249B/en unknown
-
2014
- 2014-04-15 US US14/253,161 patent/US20140302058A1/en not_active Abandoned
-
2015
- 2015-06-19 JP JP2015123389A patent/JP2016019517A/ja active Pending
-
2016
- 2016-12-02 US US15/368,499 patent/US20170101468A1/en not_active Abandoned
-
2017
- 2017-06-07 JP JP2017112163A patent/JP2017206519A/ja active Pending
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2195960C2 (ru) * | 1998-03-17 | 2003-01-10 | Тугаи Сейяку Кабусики Кайся | Профилактический или терапевтический агент для лечения воспалительных заболеваний кишечника, содержащий в качестве активного ингредиента антагонист il-6 |
RU2318829C2 (ru) * | 2001-11-14 | 2008-03-10 | Сентокор, Инк. | Антитела против il-6, композиции, способы и применение |
US20080188401A1 (en) * | 2006-11-30 | 2008-08-07 | Simon Charles Cruwys | Compounds |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
US 20080188401 A (Simon Charles Cruwys), 07.08.2008. RU 2318829 C2 (СЕНТОКОР, ИНК. (US)), 10.03.2008. RU 2195960 C2 (ТУГАИ СЕЙЯКУ КАБУСИКИ КАЙСЯ), 10.01.2003. * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US20170101468A1 (en) | 2017-04-13 |
RU2011135422A (ru) | 2013-03-10 |
EP2391384A1 (en) | 2011-12-07 |
US20120034212A1 (en) | 2012-02-09 |
AU2010208125B2 (en) | 2015-02-12 |
SG2014007637A (en) | 2014-03-28 |
JP2012516158A (ja) | 2012-07-19 |
CA2749200A1 (en) | 2010-08-05 |
KR20110108398A (ko) | 2011-10-05 |
WO2010088444A1 (en) | 2010-08-05 |
MX2011007832A (es) | 2011-10-06 |
AU2010208125A1 (en) | 2011-07-21 |
US20140302058A1 (en) | 2014-10-09 |
SG10201704214VA (en) | 2017-06-29 |
CN102387814A (zh) | 2012-03-21 |
ZA201207249B (en) | 2013-08-28 |
JP2017206519A (ja) | 2017-11-24 |
CN104119438A (zh) | 2014-10-29 |
MX337590B (es) | 2016-03-11 |
EP2391384A4 (en) | 2012-12-26 |
ZA201104796B (en) | 2018-11-28 |
HK1201847A1 (en) | 2015-09-11 |
BRPI1007005A2 (pt) | 2016-03-22 |
SG172354A1 (en) | 2011-07-28 |
JP2016019517A (ja) | 2016-02-04 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2650594C1 (ru) | Человеческие анти-il-6 антитела с пролонгированным периодом выведения in vivo и их применение при лечении онкологических, аутоиммунных заболеваний и воспалительных заболеваний | |
US20210371513A1 (en) | Compounds | |
US20180327502A1 (en) | BINDING MEMBERS OF INTERLEUKIN-4 RECEPTOR ALPHA (IL4-Ra) | |
AU2014203248B2 (en) | BINDING MEMBERS FOR INTERLEUKIN-4 RECEPTOR ALPHA (IL-4Ralpha) | |
US20170281769A1 (en) | STABLE ANTI-IL-4Ra FORMULATION | |
US8153128B2 (en) | Antibodies specific for the complex of interleukin-6 and the interleukin-6 receptor | |
AU2015202502A1 (en) | Human anti-il-6 antibodies with extended in vivo half-life and their use in treatment of oncology, autoimmune diseases and inflammatory diseases |