RU2648753C2 - Лиофилизированные липосомы - Google Patents
Лиофилизированные липосомы Download PDFInfo
- Publication number
- RU2648753C2 RU2648753C2 RU2014120475A RU2014120475A RU2648753C2 RU 2648753 C2 RU2648753 C2 RU 2648753C2 RU 2014120475 A RU2014120475 A RU 2014120475A RU 2014120475 A RU2014120475 A RU 2014120475A RU 2648753 C2 RU2648753 C2 RU 2648753C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- liposomes
- liposome
- lyophilization
- agents
- composition according
- Prior art date
Links
- 239000002502 liposome Substances 0.000 title claims abstract description 272
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims abstract description 85
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 73
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 69
- 239000002577 cryoprotective agent Substances 0.000 claims abstract description 54
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 35
- 238000009826 distribution Methods 0.000 claims abstract description 28
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 claims abstract description 18
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims abstract description 15
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 claims abstract description 14
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 claims abstract description 14
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 claims description 94
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 claims description 46
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 38
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 22
- NRJAVPSFFCBXDT-HUESYALOSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC NRJAVPSFFCBXDT-HUESYALOSA-N 0.000 claims description 18
- UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N Cytarabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N 0.000 claims description 16
- FVJZSBGHRPJMMA-IOLBBIBUSA-N PG(18:0/18:0) Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@@H](O)CO)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC FVJZSBGHRPJMMA-IOLBBIBUSA-N 0.000 claims description 16
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 16
- STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 7-Cyan-hept-2t-en-4,6-diinsaeure Natural products C1=2C(O)=C3C(=O)C=4C(OC)=CC=CC=4C(=O)C3=C(O)C=2CC(O)(C(C)=O)CC1OC1CC(N)C(O)C(C)O1 STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 229960000684 cytarabine Drugs 0.000 claims description 15
- 229960000975 daunorubicin Drugs 0.000 claims description 15
- STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N daunorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(C)=O)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N 0.000 claims description 15
- 229960004768 irinotecan Drugs 0.000 claims description 15
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 claims description 8
- ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N [1-[2,3-dihydroxypropoxy(hydroxy)phosphoryl]oxy-3-hexadecanoyloxypropan-2-yl] (9e,12e)-octadeca-9,12-dienoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCC(O)CO)OC(=O)CCCCCCC\C=C\C\C=C\CCCCC ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N 0.000 claims description 6
- AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N alpha-glycerophosphate Natural products OCC(O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 claims description 6
- 230000009477 glass transition Effects 0.000 claims description 6
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 5
- 230000008859 change Effects 0.000 claims description 4
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 claims description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 2
- 238000002844 melting Methods 0.000 claims 2
- 230000008018 melting Effects 0.000 claims 2
- UWKQSNNFCGGAFS-XIFFEERXSA-N irinotecan Chemical compound C1=C2C(CC)=C3CN(C(C4=C([C@@](C(=O)OC4)(O)CC)C=4)=O)C=4C3=NC2=CC=C1OC(=O)N(CC1)CCC1N1CCCCC1 UWKQSNNFCGGAFS-XIFFEERXSA-N 0.000 claims 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 55
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 abstract description 14
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 4
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 43
- 101000919183 Homo sapiens Probable carboxypeptidase X1 Proteins 0.000 description 30
- 102100029401 Probable carboxypeptidase X1 Human genes 0.000 description 30
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 25
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 25
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 25
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 24
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 22
- 229940126534 drug product Drugs 0.000 description 16
- GURKHSYORGJETM-WAQYZQTGSA-N irinotecan hydrochloride (anhydrous) Chemical compound Cl.C1=C2C(CC)=C3CN(C(C4=C([C@@](C(=O)OC4)(O)CC)C=4)=O)C=4C3=NC2=CC=C1OC(=O)N(CC1)CCC1N1CCCCC1 GURKHSYORGJETM-WAQYZQTGSA-N 0.000 description 16
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 16
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 16
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 15
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 15
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 12
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 12
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 11
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 11
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 10
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 10
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 10
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 8
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 7
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 7
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 7
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 7
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000002296 dynamic light scattering Methods 0.000 description 6
- KILNVBDSWZSGLL-KXQOOQHDSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC KILNVBDSWZSGLL-KXQOOQHDSA-N 0.000 description 5
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 5
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 238000000859 sublimation Methods 0.000 description 5
- 230000008022 sublimation Effects 0.000 description 5
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 5
- KBPLFHHGFOOTCA-UHFFFAOYSA-N 1-Octanol Chemical compound CCCCCCCCO KBPLFHHGFOOTCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 4
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- VSJKWCGYPAHWDS-FQEVSTJZSA-N camptothecin Chemical compound C1=CC=C2C=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)[C@]5(O)CC)C4=NC2=C1 VSJKWCGYPAHWDS-FQEVSTJZSA-N 0.000 description 4
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 4
- 238000001125 extrusion Methods 0.000 description 4
- ODKNJVUHOIMIIZ-RRKCRQDMSA-N floxuridine Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(F)=C1 ODKNJVUHOIMIIZ-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 4
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 4
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 4
- 239000002691 unilamellar liposome Substances 0.000 description 4
- FQZQXPXKJFOAGE-KICCZPNWSA-N [(2r)-3-[hydroxy-[(5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxycyclohexyl]oxyphosphoryl]oxy-2-octadecanoyloxypropyl] octadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC)COP(O)(=O)OC1C(O)C(O)C(O)[C@@H](O)C1O FQZQXPXKJFOAGE-KICCZPNWSA-N 0.000 description 3
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 3
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 3
- 238000012792 lyophilization process Methods 0.000 description 3
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 3
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 3
- 238000013112 stability test Methods 0.000 description 3
- -1 sucrose Chemical class 0.000 description 3
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 3
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KLWPJMFMVPTNCC-UHFFFAOYSA-N Camptothecin Natural products CCC1(O)C(=O)OCC2=C1C=C3C4Nc5ccccc5C=C4CN3C2=O KLWPJMFMVPTNCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000232 Lipid Bilayer Substances 0.000 description 2
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 2
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 2
- 229940045799 anthracyclines and related substance Drugs 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 229940127093 camptothecin Drugs 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- VSJKWCGYPAHWDS-UHFFFAOYSA-N dl-camptothecin Natural products C1=CC=C2C=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)C5(O)CC)C4=NC2=C1 VSJKWCGYPAHWDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 229960000779 irinotecan hydrochloride Drugs 0.000 description 2
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 2
- 239000004973 liquid crystal related substance Substances 0.000 description 2
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000001095 phosphatidyl group Chemical group 0.000 description 2
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 2
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 2
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 2
- GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N α-tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N 0.000 description 2
- NAALWFYYHHJEFQ-ZASNTINBSA-N (2s,5r,6r)-6-[[(2r)-2-[[6-[4-[bis(2-hydroxyethyl)sulfamoyl]phenyl]-2-oxo-1h-pyridine-3-carbonyl]amino]-2-(4-hydroxyphenyl)acetyl]amino]-3,3-dimethyl-7-oxo-4-thia-1-azabicyclo[3.2.0]heptane-2-carboxylic acid Chemical compound N([C@@H](C(=O)N[C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)C(C(N1)=O)=CC=C1C1=CC=C(S(=O)(=O)N(CCO)CCO)C=C1 NAALWFYYHHJEFQ-ZASNTINBSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HSXKMKJYFOZAIV-UHFFFAOYSA-N 2-[bis(2-hydroxyethyl)amino]ethanol;copper Chemical compound [Cu].OCCN(CCO)CCO HSXKMKJYFOZAIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AOJJSUZBOXZQNB-VTZDEGQISA-N 4'-epidoxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-VTZDEGQISA-N 0.000 description 1
- CYDQOEWLBCCFJZ-UHFFFAOYSA-N 4-(4-fluorophenyl)oxane-4-carboxylic acid Chemical compound C=1C=C(F)C=CC=1C1(C(=O)O)CCOCC1 CYDQOEWLBCCFJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- OCUCCJIRFHNWBP-IYEMJOQQSA-L Copper gluconate Chemical compound [Cu+2].OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O OCUCCJIRFHNWBP-IYEMJOQQSA-L 0.000 description 1
- HTIJFSOGRVMCQR-UHFFFAOYSA-N Epirubicin Natural products COc1cccc2C(=O)c3c(O)c4CC(O)(CC(OC5CC(N)C(=O)C(C)O5)c4c(O)c3C(=O)c12)C(=O)CO HTIJFSOGRVMCQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical group C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N Fluorouracil Chemical compound FC1=CNC(=O)NC1=O GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010017533 Fungal infection Diseases 0.000 description 1
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 description 1
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 208000035150 Hypercholesterolemia Diseases 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- XDXDZDZNSLXDNA-TZNDIEGXSA-N Idarubicin Chemical compound C1[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1C2=C(O)C(C(=O)C3=CC=CC=C3C3=O)=C3C(O)=C2C[C@@](O)(C(C)=O)C1 XDXDZDZNSLXDNA-TZNDIEGXSA-N 0.000 description 1
- XDXDZDZNSLXDNA-UHFFFAOYSA-N Idarubicin Natural products C1C(N)C(O)C(C)OC1OC1C2=C(O)C(C(=O)C3=CC=CC=C3C3=O)=C3C(O)=C2CC(O)(C(C)=O)C1 XDXDZDZNSLXDNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 208000031888 Mycoses Diseases 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000030852 Parasitic disease Diseases 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- DVKFVGVMPLXLKC-PUGXJXRHSA-N [(2s,3r,4s,5s,6r)-2-[(2s,3s,4s,5r)-3,4-dihydroxy-2,5-bis(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl] dihydrogen phosphate Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@]1(CO)[C@@]1(OP(O)(O)=O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 DVKFVGVMPLXLKC-PUGXJXRHSA-N 0.000 description 1
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229940087168 alpha tocopherol Drugs 0.000 description 1
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000008485 antagonism Effects 0.000 description 1
- 230000000118 anti-neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 206010003119 arrhythmia Diseases 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 239000012867 bioactive agent Substances 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 238000010668 complexation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 229940108925 copper gluconate Drugs 0.000 description 1
- 229910000365 copper sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L copper(II) sulfate Chemical compound [Cu+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 230000000959 cryoprotective effect Effects 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 229960003109 daunorubicin hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000032798 delamination Effects 0.000 description 1
- 230000001687 destabilization Effects 0.000 description 1
- 230000001066 destructive effect Effects 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 238000011026 diafiltration Methods 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000000890 drug combination Substances 0.000 description 1
- 238000009509 drug development Methods 0.000 description 1
- 229940088679 drug related substance Drugs 0.000 description 1
- 229960001904 epirubicin Drugs 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 229940050410 gluconate Drugs 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 229960000908 idarubicin Drugs 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 239000002555 ionophore Substances 0.000 description 1
- 230000000236 ionophoric effect Effects 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000644 isotonic solution Substances 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 230000003859 lipid peroxidation Effects 0.000 description 1
- 229920001427 mPEG Polymers 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 description 1
- 230000009456 molecular mechanism Effects 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 229940127084 other anti-cancer agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003002 pH adjusting agent Substances 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 238000005192 partition Methods 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 238000005191 phase separation Methods 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 1
- YHHSONZFOIEMCP-UHFFFAOYSA-O phosphocholine Chemical compound C[N+](C)(C)CCOP(O)(O)=O YHHSONZFOIEMCP-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 239000003223 protective agent Substances 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 230000006916 protein interaction Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 208000037803 restenosis Diseases 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001540 sodium lactate Substances 0.000 description 1
- 229940005581 sodium lactate Drugs 0.000 description 1
- 235000011088 sodium lactate Nutrition 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 239000003351 stiffener Substances 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 229960000984 tocofersolan Drugs 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 238000011179 visual inspection Methods 0.000 description 1
- 239000002076 α-tocopherol Substances 0.000 description 1
- 235000004835 α-tocopherol Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/10—Dispersions; Emulsions
- A61K9/127—Liposomes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
- A61K31/4738—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
- A61K31/4745—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems condensed with ring systems having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. phenantrolines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
- A61K31/7034—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin
- A61K31/704—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin attached to a condensed carbocyclic ring system, e.g. sennosides, thiocolchicosides, escin, daunorubicin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
- A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
- A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
- A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
- A61K31/7068—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
- A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
- A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
- A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
- A61K31/7068—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid
- A61K31/7072—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid having two oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. uridine, uridylic acid, thymidine, zidovudine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/10—Dispersions; Emulsions
- A61K9/127—Liposomes
- A61K9/1277—Processes for preparing; Proliposomes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Manufacturing Of Micro-Capsules (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Изобретения относятся к химико-фармацевтической промышленности и представляют собой лиофилизированную липосомальную композицию в гелевой фазе для доставки терапевтического и/или диагностического агента, а также способ приготовления данной композиции. Композиция содержит внешний криопротектор, по отношению к указанным липосомам, и внутренний, концентрация которого меньше чем 125 мМ, и демонстрирует превосходные профили удерживания лекарственного средства и сохраняет распределение размеров после лиофилизации и воспроизведения. 3 н. и 9 з.п. ф-лы, 6 ил., 6 табл., 3 пр.
Description
Родственные заявки
По настоящей заявке испрашивается приоритет заявки на патент США № 61/550047, зарегистрированной 21 октября 2011 года, содержание которой включено в настоящее описание в качестве ссылки в полном объеме.
Область техники
Изобретение относится к композиции и способам производства лиофилизированных липосом, которые содержат по меньшей мере два терапевтических или диагностических агента, которые могут храниться в течение пролонгированных промежутков времени. В одном аспекте изобретение относится к липосомам с низким содержанием холестерина, по желанию во внешней среде содержится криопротектор, имеющий устойчивость к замораживанию/таянию и дегидратационному разрушению липосом, таким образом сохраняя их размер и целостность.
Уровень техники, предшествующий изобретению
Липосомы представляют собой замкнутые везикулы, имеющие по меньшей мере один липидный бислой, окружающий водное ядро. Внутрилипосомальное пространство и липидный слой(и) могут удерживать большое разнообразие веществ, включая лекарственные средства, косметические средства, диагностические реагенты, генетический материал и биоактивные соединения. Так как нетоксичные липиды служат в качестве основы для липосом, они в основном проявляют низкую токсичность. Низкая токсичность вместе со способностью липосом повышать продолжительность циркуляции в плазме агентов делает липосомы пригодными в качестве носителей, особенно для доставки фармацевтически активных агентов. Во многих случаях доставляемые липосомой лекарственные средства приводят к превосходной клинической эффективности вместе с уменьшенной токсичностью.
Практическое применение липосомальных препаратов в качестве носителей для доставки лекарственного средства ограничено химической и физической стабильностью препарата. Для промышленного выпуска требуется стабильность в течение длительного промежутка времени как на химическом, так и на физическом уровне. Применение замороженных или высушенных замораживанием (лиофилизированных) препаратов для избежания разрушения лабильного лекарственного средства и/или липидных компонентов обеспечивает некоторое улучшение стабильности. Однако, во время процесса лиофилизирования, образование кристаллов льда может привести к механическому разрыву, агрегированию липосом и слиянию (приводя к увеличенному размеру липосом). Более того, когда липосомы, содержащие лекарственное средство, лиофилизируют и затем воспроизводят при комнатной температуре, часто происходят изменения в структуре их бислоя(ев), что приводит к ускоренной утечке лекарственного средства.
Предшествующие попытки приготовления лиофилизированных липосомальных композиций были основаны на стандартных липосомах, которые, как правило, находятся в жидкой фазе при температуре тела, перемещение липидов является текучим и неконтролируемым. Такие общепринятые липосомы делятся на две категории. Первые сохраняются в жидком состоянии из-за того, что они содержат липиды, где температура перехода из геля в жидкий кристалл (Tc) ниже температуры тела (т.е. они будут в жидкой фазе при температуре тела). Эти липосомы регулярно применяются в данной области, однако оборотной стороной текучести является то, что они обладают плохим удерживанием лекарственного средства для многих инкапсулированных агентов.
Второй тип общепринятых липосом никогда не подвергается превращению из жидкости в гель, так как они содержат высокие количества придающих жесткость мембране агентов, таких как холестерин (например, 30-45% мол.). Холестерин действует для увеличения толщины бислоя и текучести, при этом понижая проницаемость мембраны, белковые взаимодействия и липопротеиновую дестабилизацию липосомы. Такие высокие количества холестерина наиболее часто применяются в липосомальных исследованиях и ранее рассматривались как необходимые для достаточной стабильности в сыворотке и удерживания лекарственного средства in vivo, хотя не все лекарственные средства могут быть в достаточной степени удерживаемыми. Некоторые лекарственные средства проявляют лучшее лекарственное удерживание как в in vitro, так и в in vivo липосомах, по существу не содержащих холестерин. См., например, Dos Santos, et al., Biochim. Biophs. Acta, (2002) 1561:188-201.
С другой стороны, липосомы в гелевой фазе являются более стабильными и проявляют улучшенное лекарственное удерживание. Изобретение использует преимущество липосом, которые находятся в гелевой фазе при температуре тела (т.е. температура тела ниже Tc липосом). Липосомы в гелевой фазе могут быть приготовлены из ряда липидов; однако для липосом, приготовленных с более насыщенной ацильной боковой цепью фосфатидильных липидов, таких как гидрогенизированный соевый PC, дипальмитоил фосфатидилхолин (DPPC) или дистеароил фосфатидилхолин (DSPC), требуется не менее чем 30% холестерина для того, чтобы получить гелевые фазы при температуре тела. Примером общепринятых липосом, которые не находятся в гелевых фазах при температуре тела, являются приготовленные из яичного фосфатидилхолина (EPC), которые являются допускающими значительную утечку.
В предшествующих попытках приготовления лиофилизированных липосомальных композиций с применением общепринятых липосом были задействованы или пустые липосомы, или липосомы, содержащие только единственный агент. В них может быть применен криопротектор, как правило, сахарид, как внутри, так и снаружи липосом, или большой осмотический градиент через липосомальную мембрану.
Например, криопротекторы применяли для защиты от разрушения замораживанием/таянием 'жидких' липосом EPC, инкапсулирующих единственный агент, когда он представлен в достаточных количествах как внутри, так и снаружи липосом, идеально, когда эти количества равны. См., например, патенты США №№ 5077056 и 4883665. Наличие 1-10% криопротектора во внутренней липосомальной среде сохраняет состав лиофилизированных EPC липосом, инкапсулирующих доксорубицин, где внутренняя осмотическая концентрация предпочтительно близка к физиологической осмотической концентрации. См., например, патент США № 4927571. Нарушение включения криопротектора во внутреннем пространстве липосомы, как было продемонстрировано, приводит к потере целостности липосомы при воспроизведении, особенно с точки зрения удержания инкапсулированного агента. Как описано, "для предотвращения утечки требуется присутствие сахара как внутри, так и снаружи липосомы" (Lowery, M. (June 2002) Drug Development and Delivery, Vol. 2, № 4).
В одном случае, о защите от агрегирования и слияния везикул, а также от потери удерживаемого лекарственного средства сообщалось также для липосом гидрогенизированный соевый PC:холестерин:DSPE-mPEG (молярное соотношение 51:44:5), где липосомный препарат содержит 44% мол. холестерина, а также криопротектор и высокую концентрацию соли во внешней среде. Наличие 44% холестерина означает, что липосомы будут в жидкой фазе при или ниже температуры тела. Более того, защитный эффект реализуется, только если существует большой осмотический градиент через мембрану, такой, что осмотическая концентрация снаружи липосомы значительно выше, чем внутренняя осмотическая концентрация. См., например, WO 01/05372.
Связанные с мембраной криопротекторы также дополнительно улучшают устойчивость к замораживанию и лиофилизированию этих липосом в негелевой фазе. В частности, сообщается, что сахара, трансплантированные на поверхности липосомальных мембран EPC или EPC:холестерин (молярное соотношение 1:1) посредством олиго(этиленоксид) линкеров, состоящих из от одного до трех повторяющихся блоков, являются криозащитными для липосом, содержащих флуоресцентную пробу. См., например, Bendas, et al., Eur. J. Pharm. Sci. (1996) 4:211-222; Goodrich, et al., Biochem. (1991) 30:5313-5318; патент США № 4915951. Baldeschwieler, et al., сообщают, что в отсутствие терминальной сахарной группы липосомы, приготовленные с олигоэтиленоксидным линкером, сами по себе были не способны предоставлять защиту от слияния после замораживания. Патент США № 4915951.
Трегалоза во внешней среде липосомного состава PC, инкапсулирующего единственный агент, обеспечивает устойчивость к липосомальному агрегированию и слиянию. Патент США № 6319517. Для других способов производства малых липосом, стабилизированных от агрегирования, требуется образование пустых липосом PC:холестерин (молярное соотношение 1:1), к которым добавлен раствор сахара и единственный реагент, и которые затем высушены. Во время процесса высушивания внутри липосомы удерживается процентное содержание реагента. Эти липосомы, как сообщается, являются более стабильными при хранении, чем в отсутствие сахара. См., например, WО 99/65465.
Как указано ранее, большинство предшествующих технологий лиофилизации были направлены на лиофилизацию или пустых липосом, или липосом, инкапсулирующих единственный агент. Лиофилизация с сохранением целостности, когда два или более агента являются инкапсулированными, является более сложной, особенно если реагенты отличаются по их характеристикам растворимости. Инкапсулирование двух или более агентов часто выгодно, так как многие опасные для жизни заболевания, такие как рак, вызываются множеством молекулярных механизмов, и из-за их сложности лечение единственным агентом имело ограниченный успех. Следовательно, почти во всех способах лечения рака задействованы комбинации более чем одного терапевтического агента. Это также верно для лечения других состояний, включая инфекции и хронические заболевания.
В публикации согласно PCT WО03/041681, включенной в данный документ посредством ссылки, сообщается, что липосомы в гелевой фазе с температурами превращения 38°C или более могут быть приготовлены с использованием насыщенных фосфатидильных липидов, таких как DPPC и DSPC, и уменьшенных количеств (0-20%) холестерина, если по меньшей мере 1% мол. фосфоинозитола (PI) или фосфатидилглицерина (PG) включен в композиции. Было продемонстрировано, что эти липосомы при содержании комбинации инкапсулированных иринотекана и флоксуридина (FUDR) являлись стабильными при замораживании при -20°C. Простое замораживание в основном является менее жестким и менее деструктивным для целостности липосомы, чем лиофилизация.
Применение липосом в качестве носителей для доставки этих комбинаций является выгодным, особенно, если липосомы включают и способны к сохранению соотношения агентов, которые являются неантагонистическими. Этот общий подход подробно описан в патенте США 7850990, включенном в данный документ посредством ссылки. В этом патенте описывается, как определить неантагонистические или синергические соотношения различных терапевтических агентов, включая антинеопластичные противоопухолевые агенты, которые сохраняют неантагонизм или синергизм при широком диапазоне концентраций. В этом патенте описывается, что является существенным для доставки лекарственных средств во вводимом соотношении и сохранения этого соотношения, позволяя носителям для доставки регулировать фармакокинетику. В этом патенте проиллюстрированы липосомы, которые содержат, при сохранении соотношений, неантагонистические или синергические соотношения двух или более терапевтических агентов, включая иринотекан и FUDR. Такие комбинации, инкапсулированные в липосомы, будут иметь преимущество при хранении в лиофилизированной форме, если при воспроизведении целостность липосом и концентрации агентов и их соотношения сохраняются. Особенно пригодна комбинация цитарабина и даунорубицина, инкапсулированная в липосомы, описанная в патенте США 8022279, также включенном в данный документ посредством ссылки.
Применение этих комбинаций в терапевтических протоколах с неожиданно хорошими результатами описано в публикации PCT WО 2007/050784 и публикации PCT WО 2008/101214. Дополнительные составы со способами доставки лекарственного средства с липосомальной инкапсуляцией описаны в WО 2009/097011 и WО 2009/070761, а также WО 2010/043050. Эти составы являются простым примером пригодных композиций, в которых два или более терапевтических агента содержатся в липосомах для доставки пациенту.
Как описано выше, в целом приготовление стабильных лиофилизированных композиций липосом, которые сохраняют их целостность при воспроизведении, являлось сложным и непредсказуемым. Получение таких стабильных липосомальных композиций для комбинации двух или более агентов является даже более затруднительным. Таким образом, успешность способа по изобретению в получении лиофилизированных липосом, где липосомы содержат два или более терапевтических или диагностических агента и где они сохраняют их целостность при воспроизведении, является исключительным достижением.
Раскрытие изобретения
Соответственно было сообщено, что криопротектор требуется как внутри, так и снаружи липосом для того, чтобы сохранять целостность липосомы при воспроизведении после лиофилизации, особенно для того, чтобы обеспечивать удерживание инкапсулированного агента. Авторы данного открытия идентифицировали стабильные липосомы, для которых не требуется какой-либо внутренний криопротектор для успешной лиофилизации липосом, инкапсулирующих не только один, но два или более активных агентов.
Изобретение относится к успешно лиофилизированным липосомальным препаратам в гелевой фазе, которые содержат более одного терапевтического и/или диагностического агента и не содержат внутренний криопротектор. Таким образом, в одном аспекте изобретение направлено на лиофилизированную липосомальную композицию, где указанные липосомы стабильно ассоциированы с по меньшей мере двумя терапевтическими и/или диагностическими агентами и где, когда указанная композиция воспроизведена, сохраняется средний диаметр липосом по сравнению с предлиофилизационным состоянием, и процентное содержание каждого из агентов, которые остаются инкапсулированными в липосомах, сохраняется на удовлетворяющем уровне. Целостность липосом, таким образом, измеряется как процентное содержание инкапсулированных агентов, удерживаемое после воспроизведения липосом. Дополнительным параметром, применяемым в качестве критерия для удовлетворяющей лиофилизации, является минимальное изменение распределения размеров. Особенно важным вариантом осуществления является тот, в котором агенты инкапсулированы внутри липосом в определенном соотношении, и где соотношение этих агентов сохраняется, когда лиофилизированные формы воспроизводятся.
Типичные условия для достижения этого результата содержат применение липосом в гелевой фазе с температурами превращения из геля в жидкий кристалл (Tc), которые по меньшей мере равны комнатной температуре и могут быть равны или выше температуры тела человека. Считается, что температура тела составляет приблизительно 37°C. Липосомы могут являться липосомами с низким содержанием холестерина, которые являются стабилизированными фосфатидилглицерином и/или фосфоинозитолом. Липосомы по существу не содержат внутренний криопротектор, но могут содержать внешний криопротектор на их поверхности и, таким образом, могут быть лиофилизированы при наличии среды, содержащей криопротектор. Подразумевается, что термин "по существу нет внутреннего криопротектора" включает липосомы, которые не содержат внутренний криопротектор, а также липосомы, которые содержат количество криопротектора, которое не влияет на процесс замораживания и/или лиофилизации указанных липосом (т.е. 125 мМ криопротектора или менее, которое является "неактивным" количеством). Следовательно, "по существу нет внутреннего криопротектора" определено как составляющее приблизительно 0-125 мМ криопротектора внутри липосом. Важно отметить, что предотвращение утечки лекарственного средства после процесса лиофилизирования является значительно более сложным, чем сохранение размера липосом. Как упомянуто выше, лекарственное удерживание после лиофилизации ранее достигалось посредством применения криопротектора как внутри, так и снаружи липосом.
Таким образом, в одном варианте осуществления липосомы имеют температуры превращения из геля в жидкий кристалл (Tc) мембраны больше, чем комнатная температура, или более 25°C или 37°C для того, чтобы по меньшей мере при комнатной температуре, например 25°C, липидная мембрана являлась достаточно гелеобразной для содействия удержанию лекарственных средств. Композиции предоставляют возможность удерживания инкапсулированных агентов и уменьшенного агрегирования и слияния при лиофилизации и воспроизведении, посредством этого предоставляя пригодные к употреблению композиции с продленным сроком хранения. Улучшенная защита от процесса лиофилизирования не зависит от осмотического потенциала. Эти липосомы сохраняют их распределение размеров и профили инкапсуляции лекарственного средства в течение длительных периодов времени при фармацевтически релевантных условиях.
Способы приготовления композиции лиофилизированных липосом, таким образом, могут содержать криопротектор, внешний по отношению к липосомам с выбранной концентрацией, где температура липосомальной мембраны перед замораживанием и лиофилизацией ниже ее температуры фазового перехода Tc. Предпочтительно, липосомы являются замороженными при температуре, которая ниже температуры стеклования (Tg) раствора, который содержит липосомы с инкапсулированным лекарственным средством, а также экстралипосомальную среду, которая содержит криопротектор.
Изобретение также в других аспектах направлено на способы приготовления лиофилизированных липосом, содержащих два или более терапевтических и/или диагностических агента в соответствии с вариантами осуществления, изложенными выше, способы воспроизведения указанных лиофилизированных композиций, способы введения воспроизведенных липосом пациентам и способы лечения пациентов, пораженных, подверженных заболеванию или с подозрением на поражение (например, рак).
Краткое описание чертежей
Фиг. 1 демонстрирует профиль размеров частиц липосом CPX-1 перед замораживанием.
Фиг. 2 демонстрирует профиль размеров частиц воспроизведенных липосом CPX-1 непосредственно после замораживания, лиофилизирования и воспроизведения.
Фиг. 3 демонстрирует профиль размеров частиц воспроизведенных липосом CPX-1 после 1 месяца хранения.
Фиг. 4A-4C демонстрируют профили размеров частиц воспроизведенных липосом CPX-1 после 6 месяцев хранения.
Способы воплощения изобретения
Изобретение впервые обеспечивает лиофилизированные липосомальные композиции в гелевой фазе, которые содержат два или более терапевтических и/или диагностических агента, таких, что характеристики и свойства воспроизведенной лиофилизированной композиции по существу соответствуют характеристикам и свойствам композиции перед лиофилизацией. Эти характеристики могут содержать средний диаметр, распределение размеров и емкость липосом. Емкость липосом относится к удерживанию агентов; в некоторых вариантах осуществления соотношения агентов также сохраняются.
Хотя липосомы содержат терапевтические и/или диагностические агенты, в данной заявке термин "лекарственные средства" иногда применяется в качестве краткого обозначения этого.
Липосомы в гелевой фазе содержат один или более липидных бислоев, окружающих внутренний компартмент. Эти липосомы могут являться двухслойными или однослойными везикулами. Однослойные липосомы (также известные как однослойные везикулы или "ULV") окружают единственный внутренний водный компартмент и классифицируются как или малые однослойные везикулы (SUV), или крупные однослойные везикулы (LUV). LUV и SUV варьируются в размере от приблизительно 50 до 500 нм и 20 до 50 нм, соответственно. Двухслойные липосомы имеют две липидные мембраны, где внутренняя мембрана окружает единственный внутренний водный компартмент, и вторая большая внешняя мембрана окружает внутреннюю мембрану, таким образом создавая второй внутренний водный компартмент.
Поддержание распределения размеров липосом в гелевой фазе может быть оценено экспериментально получением профилей размера частиц, таких как приведенные на фиг.1-4 в данном документе. Распределение размеров, определенное квазиупругим светорассеянием, как правило, представлено в виде гистограммы, демонстрирующей средний диаметр липосом. Значимыми измерениями распределения размеров, наиболее часто используемыми в данной области, являются D10, D90, D99 или стандартное отклонение или индекс полидисперсности. Величины "D99" означают, что 99% липосом имеют размер, меньший, чем референсный размер, или больший, чем референсный размер. Это особенно пригодно, если, например, важно исключить или верхний, или нижний размер. Например, в некоторых вариантах осуществления желательно обеспечивать то, чтобы не было представлено липосом со средним диаметром более 200 нм.
Специфический пример, в котором присутствует величина D99 178 нм, применяется для иллюстрации. Величина D99 для измерения 178 нм (как видно в таблице 1 примера 2) обеспечивает, что по меньшей мере 99% липосомной совокупности меньше чем 178 нм. Величины D10 и D90 для средних диаметров, также широко используемые, являются величинами, для которых не более чем 10% совокупности меньше минимального референсного размера (т.е. D10), и для D90, где 90% совокупности имеют размер меньше, чем верхний предел референсного размера. Например, как видно в группах 1 и 2, величина D10 составляет 68 нм, так что не более чем 10% совокупности липосом меньше чем 68 нм. Величина D90 демонстрирует, что 90% совокупности имеют размер менее чем 135 или 137 нм для групп 1 и 2, соответственно. Поддержание распределения размеров липосом после лиофилизации и воспроизведения определяется в данном документе как демонстрирующее, что референтная величина выбранных D величин изменяется на не более чем 50%, 25%, 20%, 15%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6% или 5% при воспроизведении по сравнению с величиной перед замораживанием и/или лиофилизацией. Выбранные величины D могут составлять 99, 98, 94 и промежуточные целочисленные значения для 90 или D10.
Одна характеристика лиофилизированных липосом относится к среднему диаметру липосом в композиции. Средний диаметр липосомальной композиции сохраняется при воспроизведении, когда средний диаметр липосом не увеличивается более чем на 50%, 25%, на основе объемной массы 20%, 15%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6% или 5% после лиофилизации и при воспроизведении на основании диаметра перед замораживанием. Сопутствующая величина, такая как 10% увеличение среднего липосомального диаметра вместе с 10% увеличением для референта для D90 (или другая D величина, такая как приведенные выше), является одной из мер для обеспечения того, что распределение размеров частицы (например, липосомальной) не изменилось. Общий характер распределения может также быть оценен предпочтительно на основе объемной массы, как продемонстрировано на фиг.1-4.
Более подробно, композиция липосом содержит диапазон размеров, как правило, следующий кривой Гаусса. Средний диаметр липосом может увеличиться на не более чем приблизительно 30%, 25%, 20%, 15%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6% или 5% от его исходного размера при воспроизведении после замораживания или лиофилизации и воспроизведения. Например, образец липосом, средний диаметр которых составляет 90 нм, будет считаться устойчивым к эффектам замораживания и/или лиофилизации, если при воспроизведении средний диаметр составляет не более чем на 30% больше, т.е. составляет приблизительно 117 нм. Если размер увеличивается больше, чем приведено, это предполагает, что произошло агрегирование и слияние липосом. Достаточно чувствительная технология измерения может быть применена для измерения изменения в распределении размеров или среднего диаметра так, что изменения менее чем 10% могут быть измерены.
Другим критерием сохранения целостности является удерживание инкапсулированных агентов. В отличие от среднего диаметра распределения размеров и лекарственного соотношения, которые оцениваются относительно предлиофилизационных величин, лекарственное удерживание оценивается относительно общего содержания лекарственного средства как такового после воспроизведения, т.е. на основании общего содержания лекарственного средства в лиофилизированной композиции. Процентное содержание лекарственного средства, инкапсулированного внутри липосом, или процентное содержание лекарственного средства во внешней среде снаружи липосом (% "неинкапсулированный") соотносится с общим количеством лекарственного средства в композиции. В одном варианте осуществления по меньшей мере приблизительно 75% инкапсулированных агентов удерживается в инкапсулированном виде после лиофилизации и при воспроизведении. По меньшей мере приблизительно 85% каждого может удерживаться в инкапсулированном виде и/или по меньшей мере приблизительно 90% или 95%. Это может подобным образом быть измерено посредством количества неинкапсулированного лекарственного средства в окружающей среде, которое не должно составлять больше чем 25%, 20%, 15%, 10% или 5% от исходных инкапсулированный количеств при воспроизведении лиофилизированных липосом.
Соотношения инкапсулированных терапевтических и/или диагностических агентов сохраняются при воспроизведении, если соотношения не варьируются больше чем на 20%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6% или 5% от соотношения в предлиофилизированной композиции самой по себе. Соотношения выражаются в виде молярных соотношений.
В одном варианте осуществления средний диаметр липосом после лиофилизации и при воспроизведении указанных липосом будет увеличен на не более чем 25% по сравнению с указанной величиной, измеренной перед лиофилизацией. В другом варианте осуществления средний диаметр липосом после лиофилизации и при воспроизведении указанных липосом изменяется не более чем на 15% по сравнению с указанной величиной, измеренной перед лиофилизацией. В других вариантах осуществления средний диаметр липосом после лиофилизации и при воспроизведении указанных липосом изменяется не более чем на 10%, 9%, 8%, 7%, 6% или 5% по сравнению с указанной величиной, измеренной перед лиофилизацией.
В некоторых вариантах осуществления процент неинкапсулированного лекарственного средства составляет не более чем 25% от исходно инкапсулированного при воспроизведении указанных липосом. В других вариантах осуществления процент неинкапсулированного лекарственного средства составляет не более чем 15% от исходно инкапсулированного при воспроизведении указанных липосом. В других вариантах осуществления процент неинкапсулированного лекарственного средства составляет не более чем 10% или составляет не более чем 9%, 8%, 7%, 6% или 5% от исходно инкапсулированного при воспроизведении указанных липосом.
Иными словами, в некоторых вариантах осуществления процент удерживаемых инкапсулированных лекарственных средств составляет не менее чем 75% при воспроизведении указанных липосом. В других вариантах осуществления процент каждого инкапсулированного лекарственного средства составляет не менее чем 85% или 90% или 95% при воспроизведении указанных липосом.
Комбинации этих параметров также включены. Например, средний диаметр может увеличиться не более чем на 25%, и процентное содержание инкапсулированного лекарственного средства составляет по меньшей мере 90%, или средний диаметр может увеличиться не более чем на 10%, и процентное содержание инкапсулированного лекарственного средства составляет по меньшей мере 90%.
В некоторых вариантах осуществления распределение размеров липосом изменяется не более чем на 25% после лиофилизации и при воспроизведении указанных липосом по сравнению с предшествующим лиофилизации. В других вариантах осуществления распределение размеров липосом изменяется не более чем на 15%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6% или 5% после лиофилизации и при воспроизведении указанных липосом по сравнению с предшествующим лиофилизации.
Как отмечено выше, предположены различные комбинации этих параметров или критериев для успешности полного лиофилизирования и воспроизведения липосом, например, по меньшей мере 85% инкапсулированных лекарственных средств в сочетании с не более чем 15% увеличения среднего диаметра необязательно в сочетании с не более чем 5% изменением распределения размеров. Каждая из возможных комбинаций этих параметров охватывается объемом изобретения.
Липосомы в гелевой фазе могут быть образованы общепринятыми технологиями, например, способ эфирной инъекции (Deamer, et al., Acad. Sci. (1978) 308:250), способ с поверхностно-активным веществом (Brunner, et al., Biochim. Biophys. Acta (1976) 455:322), способ замораживания-оттаивания (Pick, et al., Arch. Biochim. Biophys. (1981) 212:186), способ испарения в обращенной фазе (Szoka, et al., Biochim. Biophys. Acta. (1980) 601:559-571), способ ультразвуковой обработки (Huang, et al., Biochemistry (1969) 8:344), способ этанольной инъекции (Kremer, et al., Biochemistry (1977) 16:3932), способ экструзии (Hope, et al., Biochim. Biophys. Acta (1985) 812:55-65) и способ с применением Френч-пресса (Barenholz, et al., FEBS Lett. (1979) 99:210).
Такие процессы могут быть применены в комбинации. Малые однослойные везикулы (SUV), в частности, могут быть приготовлены способом ультразвуковой обработки, способом этанольной инъекции и способом с применением Френч-пресса. Большие однослойные везикулы (LUV) могут быть приготовлены способом эфирной инъекции, способом с поверхностно-активным веществом, способом замораживания-оттаивания, способом испарения в обращенной фазе, с применением Френч-пресса или способом экструзии. Предпочтительно, LUV приготовлены в соответствии со способом экструзии.
Лиофилизирование и воспроизведение проводятся при условиях, в которых липосомы находятся в гелевой фазе. Следовательно, температура превращения из геля в жидкость липосом должна быть больше комнатной температуры, т.е. приблизительно 20-30°C, и более предпочтительно быть равной или выше температуры тела. Комнатные температуры могут существенно варьироваться, но важно, чтобы процесс лиофилизирования начинался при условиях, в которых липосомы находятся в гелевом состоянии. В некоторых вариантах осуществления Tc по меньшей мере равна температуре тела (т.е. приблизительно 37°C). В некоторых вариантах осуществления липосомы приготовлены при температуре ниже температуры фазового перехода для того, чтобы сохранять подобное гелевому состояние. Любая пригодная внутренняя среда может быть применена. Как правило, внутренняя среда является водной средой. Внутренняя среда по существу не содержит криопротектор (т.е. менее чем 125 мМ криопротектора). Внутренняя среда может содержать менее чем 100 мМ криопротектора, или менее чем 50 мМ криопротектора, или не содержать криопротектор.
Липосомные составы, которые имеют пригодные величины Tc, могут являться липосомами "с низким содержанием холестерина", т.е. приготовленными при наличии и содержащими количество холестерина, которого недостаточно для значительного изменения характеристик фазового перехода липосомы, т.е., как правило, 20% мол. или менее холестерина. Больше чем 20% мол. холестерина расширяет диапазон температур, при которых фазовый переход происходит, с исчезанием фазового перехода при более высоких уровнях холестерина. Липосома, имеющая низкое содержание холестерина, будет иметь менее чем 20% мол. или менее чем 15% мол. холестерина, или 10% мол. или 5% мол. или менее холестерина, или не будет содержать холестерин. Для таких липосом необязательно требуется по меньшей мере 1% мол. стабилизирующего агента, такого как PG или PI.
В этих способах, где применен криопротектор, криопротектор предпочтительно представлен только во внешней среде состава. Как правило, криопротекторы являются дисахаридами, такими как сахароза, мальтоза, трегалоза и лактоза. Криопротектор может являться дисахаридом, таким как сахароза, имеющим концентрацию, которая составляет приблизительно от 100 мМ до 500 мМ или приблизительно 250-400 мМ или выше 300 мМ. Внешняя среда может содержать приблизительно от 100 мМ до 500 мМ криопротектора, и внутренняя среда содержит менее чем 125 мМ криопротектора, или внешняя среда содержит приблизительно от 250 мМ до 400 мМ криопротектора, и внутренняя среда содержит менее чем 100 мМ криопротектора, или внешняя среда содержит приблизительно от 250 мМ до 400 мМ криопротектора, и внутренняя среда содержит менее чем 50 мМ криопротектора, или внешняя среда содержит приблизительно от 250 мМ до 400 мМ криопротектора, и внутренняя среда не содержит криопротектор. Криопротектор может являться сахаридом, таким как сахароза.
Гелевая фаза липосомальных составов может быть лиофилизированной или высушенной замораживанием с применением любого подходящего протокола. Начальная температура камеры для лиофилизирования предпочтительно ниже температуры стеклования (Tg) раствора, который содержит внешнюю среду, также содержащую липосомы с инкапсулированными лекарственными средствами. Например, липосомы могут быть замороженными при температуре ниже чем приблизительно -5°C, или ниже чем приблизительно -10°C, или ниже, чем приблизительно -20°C, или ниже чем приблизительно -30°C, или ниже чем приблизительно -40°C. В некоторых вариантах осуществления, когда сахароза применяется в качестве раствора криопротектора, начальная температура камеры для лиофилизирования составляет менее чем -32°C, что является Tg раствора сахарозы. "Tg" включает в себя "температуру стеклования" и "температуру перехода в стеклянную фазу", что является приблизительной средней температурой, при которой не замороженный раствор подвергается превращению из мягкого, вязкого геля в твердую и относительно ломкую форму.
Лиофилизированные липосомы могут храниться при или ниже комнатной температуры. В некоторых иллюстративных вариантах осуществления применяются липосомы, которые хранятся при или ниже 5°C. В некоторых других иллюстративных вариантах осуществления применяются липосомы, которые хранятся при 25°C. Лиофилизированный продукт остается стабильным (например, удерживается его относительный размер частиц и сохраняется инкапсулированным лекарственное средство) в течение по меньшей мере приблизительно шести месяцев, или по меньшей мере приблизительно девяти месяцев, или по меньшей мере приблизительно одного года, или по меньшей мере приблизительно от двадцати четырех до тридцати шести месяцев.
Удерживаемые агенты являются терапевтическими или диагностическими агентами, часто - противораковыми агентами. Удивительно то, что липосомальные композиции в гелевой фазе сохраняют содержимое и целостность, даже если агенты различаются по их характеристикам растворимости в воде и неводных растворителях. При применении подхода изобретения агенты, которые отличаются по log коэффициентов распределения (LogP) на вплоть до 1,0, могут являться полностью успешно удерживаемыми. Различия в log коэффициентов распределения 1,5 или 2,0 или 3,0 могут также являться переносимыми. Один из агентов может являться амфипатическим, тогда как другие являются растворимыми в воде, или один может являться гидрофобным, тогда как другие являются растворимыми в воде. Величины LogP основаны на коэффициентах разделения между октанолом и водой, т.е. являются логарифмом основания 10 соотношения количества в октаноле к количеству в воде, когда соединение подвергается фазовому разделению.
Противораковые агенты могут содержать антрациклин (например, даунорубицин, доксорубицин, эпирубицин или идарубицин). Эти агенты являются амфипатическими. Противораковые агенты могут содержать аналог нуклеозида, например цитозина арабинозид, 5-FU или FUDR, которые являются гидрофильными. Другие противораковые агенты содержат камптотецин или производное камптотецина, такое как иринотекан, которые являются амфипатическими. Как антрациклин, так и аналог нуклеозида являются инкапсулированными в некоторых случаях, или как камптотецин или производное камптотецина, так и аналог нуклеозида являются инкапсулированными. Инкапсуляция и/или загрузка агентов в липосомы может быть осуществлена с применением любых пригодных технологий загрузки, включая пассивную и активную загрузки. Важные варианты осуществления содержат описанные в вышеприведенных патенте США 7850990 и патенте США 8022279 комбинации иринотекан:флоксуридин (FUDR) в молярном соотношении 1:1 и даунорубицин:цитарабин (AraC) в молярном соотношении 1:5. Частные составы этих лекарственных средств обозначены CPX-1 и CPX-351, соответственно.
Лекарственные средства включены в водный(ые) внутренний(ие) компартмент(ы) липосом процедурами или пассивной или активной загрузки или некоторой их комбинацией. В пассивной загрузке биологически активный агент может быть легко включен в препарат, из которого образованы липосомы, или, альтернативно, активный агент может быть добавлен снаружи от предварительно приготовленных липосом и загружается пассивно по его градиенту концентрации в липосомы. Необязательно, неинкапсулированный материал может быть удален из препарата любыми пригодными процедурами. Альтернативно, может быть применена активная загрузка процедуры, такая как ионные градиенты, ионофоры, pH градиенты и процедуры загрузки на основе металлов на основании комплексообразования металлов. Одним вариантом осуществления, обычно применяемым для пригодных лекарственных средств, является загрузка посредством процедур на основе металлов.
Липосомы имеют размер приблизительно 80-500 нм. В одном варианте осуществления липосомы имеют диаметр менее чем 300 нм, иногда менее чем 200 нм. В одном примере номинальный размер этих липосом составляет приблизительно 100 нм. В некоторых вариантах осуществления липосомальная мембрана составлена из дистеароилфосфатидилхолина (DSPC), дистеароилфосфатидилглицерина (DSPG) и холестерина (CHOL). В некоторых вариантах осуществления липосомная мембрана составлена из 50-80% DSPC, 1-20% DSPG и 1-20% CHOL. В других вариантах осуществления липосомная мембрана составлена из 50-80% DSPC или DPPC, 1-20% DSPG или дистеароилфосфатидилинозитола (DSPI), 1-20% CHOL, и липосомы содержат менее чем 125 мМ криопротектора во внутрилипосомальной среде. В некоторых иллюстративных вариантах осуществления липосомальная мембрана составлена из 50-80% DSPC или DPPC, 1-20% DSPG или DSPI, 1-20% CHOL, и липосомы содержат менее чем 50 мМ криопротектора во внутрилипосомальной среде. В других иллюстративных вариантах осуществления липосомальная мембрана составлена из DSPC, DSPG и CHOL в молярном соотношении приблизительно 7:2:1 и не содержит криопротектор во внутренней липосомальной среде. В одном случае липосомы приготовлены способом получения липосом типа вода-в-масле, и полученные экструдированием липосомы суспендируются в забуференной фосфатом сахарозе при pH 7,0. В другом случае полученные экструдированием липосомы суспендируются в сахарозе. В одном варианте осуществления полученные экструдированием липосомы суспендируются в 250-400 мМ сахарозе.
Может быть применено любое пригодное средство для инкапсуляции лекарственной комбинации в липосомы. В конкретном варианте осуществления иринотекан и флоксуридин совместно нагружаются в предварительно образованные липосомы DSPC/DSPG/CHOL (7/2/1), посредством чего флоксуридин пассивно нагружается в липосомы, и иринотекан активно нагружается при 50°C с использованием сульфата меди или глюконата меди во внутренней среде. См. патенты США №№ 7850990 и 7238367 тех же заявителей, оба из которых включены в данный документ посредством ссылки. В другом конкретном варианте осуществления цитарабин и даунорубицин являются инкапсулированными в липосому, посредством чего цитарабин пассивно инкапсулируется в предварительно образованные липосомы и даунорубицин активно накапливается внутри липосом с высокими эффективностями захвата с использованием процедуры загрузки на основе глюконата меди/триэтанолмамина. См., например, совместно рассматриваемые заявки согласно PCT WО 05/102359 и WО 07/076117A2 тех же заявителей, обе из которых также полностью включены посредством ссылки.
Лиофилизированные композиции по изобретению предоставляют удобство при хранении, сохранение и простоту транспортировки. Эти лиофилизированные композиции сохраняют их характеристики в течение длительных промежутков времени.
Для применения композиции по изобретению воспроизведены в пригодном фармацевтическом носителе или среде.
Эти составы для применения приготовлены в соответствии со стандартными технологиями воспроизведения с применением фармацевтически приемлемого носителя. В основном, изотонический раствор будет применен в качестве фармацевтически приемлемого носителя. Другие пригодные носители содержат, например, воду, забуференную воду, декстрозу, 0,4% хлорид натрия, 0,3% глицин и им подобные, включая гликопротеины для улучшенной стабильности, такие как альбумин, липопротеин, глобулин и т.д. Эти композиции могут быть стерилизованы посредством общепринятых хорошо известных технологий стерилизации. Полученные в результате водные растворы могут быть упакованы для применения или отфильтрованы при асептических условиях и лиофилизированы, при этом лиофилизированный препарат комбинируется со стерильным водным раствором перед введением. Композиции могут содержать фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества, как это требуется для приближения к физиологическим условиям, такие как регулирующие pH и буферные агенты, регулирующие тоничность агенты и им подобные, например, ацетат натрия, лактат натрия, хлорид натрия, хлорид калия, хлорид кальция и т.д. Дополнительно липосомная суспензия может содержать защищающие липиды агенты, которые защищают липиды от свободно-радикального и липид-пероксидационного разрушений при хранении. Пригодны липофильные свободно-радикальные гасители, такие как альфа-токоферол, и растворимые в воде специфичные к железу хелаторы, такие как ферриоксамин.
Воспроизведенные составы могут быть введены субъектам, включая людей или другие виды млекопитающих, таких как приматы, кроме человека, собаки, кошки, крупный рогатый скот, лошади, овцы и им подобные, и могут быть применены для лечения множества заболеваний. Примеры медицинских применений композиций по данному изобретению содержат, но не ограничены ими, лечение рака, лечение сердечно-сосудистых заболеваний, таких как гипертензия, сердечная аритмия и рестеноз, лечение бактериальных, грибковых или паразитических инфекций, лечение и/или предотвращение заболевания посредством применения композиций по данному изобретению в качестве вакцины, лечение воспаления или лечение аутоиммунных заболеваний. Для лечения человеческих болезней квалифицированный врач определит, как композиции по данному изобретению должны быть использованы относительно дозы, графика приема и пути введения с применением установленных протоколов. В таких применениях может также быть использовано увеличение дозы, если биоактивные агенты, инкапсулированные в липосомы, и липидные носители по данному изобретению проявляют уменьшенную токсичность по отношению к здоровым тканям пациента.
Фармацевтические композиции, как правило, вводятся парентерально, например, внутривенно, но могут быть применены другие пути. Дозировка для липосомных составов будет зависеть от соотношения между лекарственным средством и липидами и мнения ведущего врача, основанного на возрасте, весе и состоянии пациента.
В целом, один процесс, пригодный в изобретении, содержит лиофилизирование композиции липосом, где указанные липосомы содержат 20% мол. или менее холестерина и два или более активных агента и где липосомальная мембрана находится при температуре ниже ее фазового перехода при комнатной температуре и во внешней среде, которая содержит криопротектор; хранение лиофилизированных липосом; и воспроизведение лиофилизированных липосом в заранее установленном водном объеме. Липосомы лиофилизируются при температуре ниже чем приблизительно -5°C, или ниже чем приблизительно -10°C, или ниже чем приблизительно -20°C, или даже ниже чем приблизительно -30°C или -40°C, и могут храниться при или ниже комнатной температуры (приблизительно 23-25°C).
В одном варианте осуществления липосомная композиция составлена из 2-20% холестерина или любого промежуточного значения, такого как 10% холестерина.
В одном варианте осуществления лиофилизированная композиция содержит липосомы, составленные из приблизительно 10% холестерина, дисахарида с выбранной концентрацией во внешней среде, где воспроизведение выполняется при комнатной температуре ниже Tc и где криопротектор не связан и представлен только снаружи липосом.
В другом варианте осуществления лиофилизированная липосомная композиция, содержащая два или более инкапсулированных лекарственных средства, при воспроизведении с заранее установленным объемом водной среды приводит к липосомной композиции, содержащей: (a) липосомы, содержащие 20% мол. или менее холестерина, (b) размер липосом преимущественно составляет приблизительно 80-500 нанометров, (c) удерживаемый(ые) липосомой агент(ы), где процент инкапсуляции указанного(ых) агента(ов) составляет не менее чем приблизительно 95%, 90%, 85%, 80% или 75%; и (d) между приблизительно 100-500 мМ криопротектора во внешней липосомальной среде. В некоторых вариантах осуществления представлено между 250-400 мМ криопротектора во внешней липосомальной среде. В некоторых вариантах осуществления представлено приблизительно 9,5-10% криопротектора во внешней липосомальной среде.
В одном варианте осуществления однослойные или двухслойные липосомы гелевой фазы, содержащие 20% мол. или менее холестерина, по меньшей мере два лекарственные средства и по меньшей мере приблизительно 300 мМ сахарозы снаружи липосом, лиофилизируются, и при воспроизведении по меньшей мере приблизительно 90% каждого из инкапсулированных лекарственных средств являются инкапсулированными, и средний диаметр липосом изменяется на менее чем приблизительно 25%.
В применяемом в данном документе значении употребление термина в единственном числе означает "по меньшей мере один" или "один или более", если только из контекста не очевидно, что подразумевается только единственный обозначаемый объект.
Следующие примеры представлены только для иллюстрации, но не для ограничения изобретения.
Пример 1
Лиофилизация CPX-1
Иринотекан и флоксуридин 1:1 совместно инкапсулировали в липосомы DSPC/DSPG/холестерин (молярное соотношение 7:2:1) и обозначали CPX-1. Лиофилизированные CPX-1 приводили в результате к стабильным нагруженным лекарственным средством липосомам, таким, что имела место минимальная утечка активных фармацевтических ингредиентов из воспроизведенной лекарственной формы. Гидрохлорид иринотекана, применяемый в CPX-1, имеет предсказанный log коэффициента распределения (LogP) 3,94. Флоксуридин имеет предсказанный LogP - 1,14.
Проводили термические анализы для липосомального лекарственного продукта CPX-1 с применением различных наборов для обеспечения информации о температуре стеклования (Tg), изменении теплоемкости и других экзотермических явлениях. Температуру коллапса липосомального лекарственного продукта CPX-1 определяли посредством микроскопа с сублимационной сушкой вымораживанием для двух наборов. Эти результаты применяли для определения конечного цикла лиофилизации.
Наборы состояли из голубовато-зеленого основного объема водной суспензии, составленной с липосомами, содержащими два активных фармацевтических ингредиента, гидрохлорид иринотекана и флоксуридин, в соотношении 1:1. Образцы хранили при -20°C (или в некоторых случаях -80°C) с относительной влажностью окружающей среды и размораживали в течение ночи в холодильнике, и тщательно перемешивали перед наполнением и лиофилизацией.
Цикл 1: применяя 20-мл пипетку класса А, 20 см3 CPX-1 заполняли отлитые стеклянные флаконы 60 см3. Двадцать четыре флакона загружали в полочное устройство для сушки LyoStarII с двумя флаконами с продуктом, оснащенными термоэлектрическими зондами для фиксирования температуры продукта, и высушивали сублимацией в течение четырех с половиной дней. После заполнения флаконов газообразным азотом до давления в камере приблизительно 720000 мТорр флаконы закупоривали, удаляли из полочной сушилки и помечали Lot TP-CPX1-001-032405. Несколько лиофилизированных флаконов затем помещали на ускоренное испытание на стабильность при 25°C и 40°C, при этом оставшиеся флаконы хранили при -20°C.
Цикл 2: приблизительно 21 мл CPX-1 заполняли отлитые стеклянные флаконы 60 см3 и трубчатые стеклянные флаконы 50 см3, соответственно. Флаконы загружали в полочное устройство для сушки LyoStarII™ с одним термоэлектрическим зондом во флаконе с продуктом на верхней полке и одним флаконом с продуктом на нижней полке. По окончании цикла лиофилизирования флаконы наполняли газообразным азотом до достижения давления камеры приблизительно 720000 мТорр, закупоривали, удаляли из полочной сушилки и помечали Lot TP-CPX1-002-041305T. Несколько лиофилизированных флаконов затем помещали на ускоренное испытание на стабильность при 25°C и 40°C, при этом оставшиеся флаконы хранили при -20°C.
Цикл 3: наборы для лиофилизации готовили аналогичным образом, как в цикле 2, за исключением заполнения трубчатых стеклянных флаконов 50 см3. Закупоренные флаконы помечали как лекарственный продукт CPX-1, Lot TP-CPX1-003-051105T. Несколько лиофилизированных флаконов затем помещали на ускоренное испытание на стабильность при 25°C и 40°C, при этом оставшиеся флаконы хранили при -20°C.
Цикл 4: наборы для лиофилизации готовили аналогичным образом, как в цикле 2, за исключением того, что CPX-1 заполняли трубчатые стеклянные флаконы 50 см3. Закупоренные лиофилизированные флаконы помечали как лекарственный продукт CPX-1, Lot TP-CPX1-004-051805T и хранили для исследований стабильности при -20°C, 5°C, 25°C и 40°C.
Цикл 5: наборы для лиофилизации готовили аналогичным образом, как в цикле 2, ими заполняли трубчатые стеклянные флаконы 50 см3. Закупоренные лиофилизированные флаконы помечали как лекарственный продукт CPX-1, TP-CPX1-005 062705T-300. Флаконы с липосомальным лекарственным продуктом CPX-1 хранили в климатических камерах при -20°C, 5°C и 25°C.
Первое испытание цикла лиофилизации. Первостепенной целью для первого испытания цикла лиофилизации (цикл 1) являлось определение того, мог ли быть успешно высушен сублимацией с осторожной первоначальной двухэтапной фазой высушивания составленный не расфасованный основной липосомальный лекарственный продукт CPX-1 (CPX-1). Успешность этого испытания лиофилизации оценивали посредством анализа температуры лекарственного продукта и профилей давления и визуальным контролем появления лиофилизированной массы.
Профиль лиофилизационного продукта для цикла 1 демонстрировал, что основной объем льда удалялся во время первоначального этапа сушки при -10°C. Это было явным по той причине, что температура продукта слегка превышала температуру полки. Также, давление термопары, которое является мерой истинного давления с прибавлением парциального давление паров воды, снижалось по отношению к давлению емкостного манометра или истинному давлению. Кроме того, флаконы с лиофилизированным лекарственным продуктом оказались высушенными с небольшими или без признаков коллапса лиофилизатной массы. Однако наблюдали некоторую концентрацию аналита или расслаивание. Для оптимизации цикла фазы термической обработки и этапы первоначального высушивания были изменены во втором испытании.
Второе испытание цикла лиофилизации. Второе испытание лиофилизации (цикл 2) проводили, применяя схожим образом осторожно первоначальную и вторичную фазы сушки аналогично циклу 1. Для максимизации загрузки льда в лиофилизатор флаконы, наполненные деионизированной водой, загружали в незанятое пространство полок. Успешность испытания лиофилизирования также оценивали по температуре и профилям давления и визуальным контролем лиофилизированной массы.
Оказалось, что лекарственный продукт в трубчатых флаконах 50 см3 высушивался вымораживанием более гомогенным образом, несмотря на то что температура продукта и профили давления для трубчатого стеклянного флакона 50 см3 и стеклянного формованного флакона 60 см3 в четырех с половиной дневном цикле были сходными. Приблизительно через восемь с половиной часов после достижения вторичной температуры полки для сушки температура продукта отображает завершение сублимации основного объема льда прохождением ледяного барьера (т.е. температура продукта превышает 0°C). Однако эти флаконы недостаточно высушены. Температура продукта ниже температуры полки в конце первоначальной фазы высушивания и различие между давлением термопары и давлением емкостного манометра являлись неизменными с начала испытания до конца вторичной фазы высушивания, что указывает на наличие существенного основного объема льда во флаконах.
Из-за того, что температуры полки, применяемые в первоначальной фазе высушивания, не предоставляли достаточно энергии для доведения степени сублимации продукта до завершения, проводили третий цикл лиофилизации для доведения первоначальной высушивающей фазы до завершения, применяя температуру полки и давление камеры, которое увеличивает сублимацию льда, не превышая температуру коллапса.
Третье испытание цикла лиофилизации. На основании результатов цикла 2 и термических анализов температуру полки и давление камеры для цикла 3 регулировали для облегчения первоначального высушивания, при этом сохраняя температуры продукта ниже расчетной температуры коллапса -20°C. Для максимизации нагрузки льда цикл проводили в условиях полной нагрузки.
График профиля, полученный для цикла 3, демонстрировал, что исходная первоначальная температура полки для сушки, -20°C при давлении 100 мТорр, не доводила сублимацию основного объема льда в достаточной мере в течение 40 часов в условиях полной нагрузки. Также кривая давления термопары не снижалась значительно по отношению к давлению емкостного манометра до конца первоначальной фазы высушивания при -10°C из-за ограниченной продолжительности этой фазы. Однако профиль демонстрировал, что вторая первоначальная температура полки для сушки -10°C и продолжительность были способны сохранять температуру продукта ниже температуры коллапса -20°C до тех пор, пока не был сублимирован весь объем льда, что было очевидным по быстрому увеличению температуры продукта в конечном счете с повышенной температурой полки в конце фазы.
Четвертое испытание цикла лиофилизации. Для окончательного определения температур(ы) полки для фазы первоначального высушивания в четвертом цикле лиофилизации (цикл 4) применяли температуру полки -10°C в течение большего периода времени с 6-часовым исходным первоначальным этапом сушки при -20°C в условиях полной нагрузки.
На основании профиля цикла лиофилизирования и визуального наблюдения оказалось, что температура полки -20°C для первоначальной фазы высушивания давала небольшое преимущество в высушивании флаконов. Пробы температуры продукта превышали температуру полки при -10°C после времени выдерживания приблизительно 60 часов. Давление термопары во время вторичной высушивающей фазы указывало на то, что флаконы имели относительно низкую остаточную влажность, так как профиль температуры продукта близко соответствовал профилю температуры полки.
Рассчитывали инкапсуляцию лекарственных веществ, размер липосомальной частицы и среднюю остаточную влажность для флаконов лиофилизированного продукта. В применяемом способе Карла Фишера получали содержание средней остаточной влажности 3,1%, что не являлось излишне высушенным липосомальным продуктом. Также в анализах размера частицы и процента инкапсуляции иринотекана обнаруживали, что лиофилизированный продукт являлся неизменным по сравнению с предлиофилизированным материалом. Однако процентное содержание неинкапсулированного флоксуридина возрастало от 7,0% в предлиофилизированном основном объеме до 8,6% в лиофилизированном продукте при хранении при -20°C в течение 13 недель. Также после подвергания продукта в течение недели 25°C процентное содержание неинкапсулированного флоксуридина возрастало до 11,8%, что превышало предварительную спецификацию на менее чем 10% неинкапсулированного флоксуридина для этого лекарственного продукта.
Пятое испытание цикла лиофилизации. Целью пятого испытания цикла лиофилизации (цикл 5) являлось снижение температуры полки для вторичной высушивающей фазы от +20°C до +10°C для того, чтобы минимизировать утечку флоксуридина при достижении пригодной остаточной влажности в условиях полной нагрузки. Влагосодержание для этого материала оценивали во время вторичной фазы высушивания, периодически осуществляя измерение возрастания давления.
Профиль лекарственного продукта для цикла 5 демонстрировал, что основной объем льда был в значительной степени сублимирован после 72-84 часов первоначального высушивания при -10°C. Более того, оказалось, что материал был высушен достаточно посредством применения температуры полки +10°C при 50 мТорр в течение 12 часов, на основании различий детектора давления и исследований возрастания давления.
Для оценки пригодности этого лиофилизированного материала время воспроизведения для флаконов с лиофилизированным лекарственным продуктом из циклов 4 и 5 оценивали, используя 19 мл воды, инъецированной через пробки иглой калибра 18 и шприцем 30 см3. Было определено, что среднее время воспроизведения составляло 40 и 93 секунды для циклов 4 и 5, соответственно. Более того, результаты по Карлу Фишеру для цикла 5 показали среднюю остаточную влажность 3,2%, которая хорошо соотносилась с влажностью флаконов из цикла 4.
Также определяли инкапсуляцию лекарственных веществ и размер липосомальной частицы. Для лиофилизированного в цикле 5 лекарственного продукта процентное содержание неинкапсулированного иринотекана составляло 0,4% при -20°C после 7 недель хранения и 0,9% при 25°C после 4 недель хранения. Размер частицы для лиофилизированного лекарственного продукта увеличивался только слегка после 8 недель хранения при 5°C по сравнению с лекарственным продуктом, хранящимся при -20°C, но увеличивался почти на 10 нм после только 4 недель хранения при 25°C. Неудивительно, что процентное содержание неинкапсулированного флоксуридина демонстрировало аналогичную тенденцию относительно изменений размера частицы. Процентное содержание неинкапсулированного флоксуридина составляло 5,5% при -20°C после 7 недель, 7,7% после 8 недель при 5°C и 18,7% при 25°C после 4 недель.
Пятое испытание цикла лиофилизации, в котором применяли пониженную температуру полки во время его вторичной фазы высушивания, обеспечивало производство приемлемого лиофилизированного липосомального лекарственного продукта CPX-1 с увеличенным удерживанием инкапсулированного продукта.
Пример 2
Профиль размеров частиц с течением времени остается неизменившимся в лиофилизированных липосомах
Эксперименты проводили для того, чтобы проверить влияние замораживания, лиофилизации и хранения на распределение размеров двухнагруженных липосом CPX-1 и CPX-351. CPX-351 представляет собой состав из даунорубицина и цитарабина в молярных соотношениях 1:5 в липосомах, которые представляют собой дистеароил фосфохолин (DSPC):дистеароил фосфатидилглицерин (DSPG):холестерин (CHOL) в молярном соотношении 7:2:1. Даунорубицин имеет предсказанный LogP 1,68. Цитарабин имеет предсказанный LogP - 2,17.
Распределение размеров частиц совместно нагруженных липосом измеряли перед и после замораживания и лиофилизации липосомы, а также после одного и шести месяцев хранения лиофилизированных препаратов.
CPX-1 липосомы готовили с внешним буфером из 300 мМ сахарозы, 20 мМ фосфата, pH 7,0. Аликвоты по 900 мкл добавляли в 2 мл флаконы, помещали в металлический поддон (предварительно охлажденный до -20°C) и хранили при -20°C в течение ночи. После замораживания образцы перемещали в лиофилизатор (предварительно охлажденный до -20°C). Применяли вакуум и сохраняли температуру полки при -20°C в течение 7 часов, и впоследствии увеличивали ее до -10°C в течение приблизительно 16 часов. Затем на третьем температурном этапе температуру полки повышали дополнительно до 4°C в течение следующих 3 часов и затем завершали 3 часами сушки при комнатной температуре. Высушенные образцы гидратировали с 1 мл H2O и легко растворяли лиофилизированную массу. Затем образцы анализировали, применяя динамическое рассеяние света (ДРС).
Предварительно замороженные липосомы CPX-1 демонстрировали средний размер диаметра 110 нм (фиг.1). Размер липосом непосредственно после лиофилизации и регидратирования, как наблюдали, составлял 116 нм (фиг.2). Два образца лиофилизированных липосом CPX-1 хранили при 5°C в течение одного месяца или шести месяцев и измеряли размер липосом в регидратированных композициях. Средний размер липосом для каждого составлял 117 нм и 123 нм, соответственно (фиг.3 и 4, соответственно). Фиг.1-3 демонстрируют объемно-массовое распределение. Фиг.4B демонстрирует сопоставимое объемно-массовое распределение. Результаты других менее предпочтительных алгоритмов продемонстрированы на фиг.4A и 4C. Если особо не оговорено иное, средний диаметр относится к объемно-массовому распределению.
Эксперименты, подобные представленным на фиг.1-4, также осуществляли для липосом CPX-351.
Как отмечено выше, CPX-351 представляет собой липосомальный состав фиксированной комбинации противоопухолевых лекарственных средств цитарабин и даунорубицин гидрохлорид. Липосомы приготовлены с применением DSPC, DSPG и CHOL в молярном соотношении 7:2:1 и с буфером глюконат меди-триэтанолмамин, pH 7,4. Необработанные липосомы получены экструдированием для достижения распределения размеров липосомных частиц, где средний диаметр липосом должен составлять между 80 нм и 110 нм с D99 не больше чем 200 нм (анализ динамическим рассеянием света). Цитарабин инкапсулирован посредством механизма пассивной загрузки. Даунорубицин инкапсулирован посредством активного опосредованного медью механизма для достижения молярного соотношения цитарабин:даунорубицин 5:1. Все неинкапсулированные лекарственные вещества удаляли и основной объем буфера заменяли диафильтрацией. Множественные объемы 300 мМ сахарозы заменяли для завершения липосом CPX-351, которые затем проходили оптимизацию лиофилизации. Высушенные образцы CPX-351 воспроизводили с 19 мл H2O, и они легко восстанавливали липосомальную дисперсию. Затем образцы анализировали, применяя динамическое рассеяние света (ДРС).
Предлиофилизированные липосомы CPX-351 демонстрировали средний размер диаметра приблизительно 100 нм. Размер липосом непосредственно после замораживания и затем лиофилизации/регидратирования, как определяли, составлял 99 нм и 100 нм, соответственно для партии 1 ("1C001" в таблице 1 ниже). Для второй партии 1D002 размер липосом CPX-351 непосредственно после замораживания и затем лиофилизации/регидратирования, как определяли, составлял 104 нм и 105 нм, соответственно.
Эти результаты демонстрируют, что липосомы DSPC/DSPG с низким содержанием холестерина, совместно нагруженные или с иринотеканом и флоксуридином, или цитарабином и даунорубицином, эффективно сохраняют их профили распределения размеров при замораживании, а также лиофилизировании и в течение более длительных сроков хранения. Эти результаты также демонстрируют, что такие липосомы в гелевой фазе, приготовленные с низким содержанием холестерина, устойчивы к агрегированию и слиянию, которое обычно происходит в результате замораживания и лиофилизирования, особенно в отсутствие высоких уровней холестерина.
| Таблица 1 Эффекты замораживания и лиофилизации на размер липосом CPX-351 |
||||
| 1C001 (партия 1) | 1D002 (партия 2) | |||
| Липосомы CPX-351 | Заморожен-ные | Лиофилизированные/регид-ратированные | Замороженные | Лиофилизированные/регидратированные |
| Средний диаметр (нм) | 99 | 100 | 104 | 105 |
| D10 (нм) | 68 | 68 | 74 | 71 |
| D90 (нм) | 135 | 137 | 137 | 142 |
| D99 (нм) | 178 | 182 | 178 | 191 |
Пример 3
Процент инкапсуляции лекарственного средства остается неизменным с течением времени в лиофилизированных липосомах
Эксперименты проводили для того, чтобы проверить воздействие замораживания и/или лиофилизации и хранения на степень утечки лекарственного средства из двух нагруженных липосом CPX-1 или CPX-351.
Количество инкапсулированного иринотекана и флоксуридина в совместно нагруженных липосомах CPX-1 измеряли непосредственно после лиофилизирования ("исходное"), а также через 6 и 9 месяцев после хранения при 5°C. Исследования стабильности продемонстрировали, что процент (%) инкапсуляции иринотекана составлял 99% непосредственно после лиофилизации, 97% после шести месяцев хранения и 97% после девяти месяцев хранения (таблица 2 ниже). Подобным образом, процент инкапсуляции флоксуридина составлял 98% непосредственно после лиофилизации и 95% как после шести, так и после девяти месяцев хранения при 5°C (таблица 3 ниже).
Для липосом CPX-351 также исследовали воздействие эффектов замораживания и лиофилизации на процент инкапсуляции лекарственного средства. Как видно в таблице 4 ниже, количество инкапсулированного цитарабина в совместно нагруженных липосомах CPX-351, как было измерено, составляло 100% непосредственно после замораживания ("замороженные") и 98% после лиофилизации ("лиофилизированные") в двух отдельных партиях (1C001 и 1D002). Процент инкапсуляции даунорубицина составлял 99% как непосредственно после замораживания, так и после лиофилизации в обеих партиях. Инкапсуляция лекарственного средства также являлась стабильной, когда CPX-351 хранили при 5°C или 25°C (см. таблицы 5 и 6).
Эти результаты однозначно демонстрируют, что как CPX-1, так и CPX-351 липосомы в гелевой фазе, включающие низкие количества холестерина и криопротектора во внешнем растворе, могут быть эффективно заморожены, дегидратированы и воспроизведены с минимальной утечкой обоих инкапсулированных лекарственных средств.
| Таблица 2 Процент инкапсуляции иринотекана в воспроизведенных липосомах CPX-1 |
|||
| Интервалы стабильности | |||
| Тест | Начальная | 6 месяцев | 9 месяцев |
| % инкапсуляции иринотекана | 99% | 97% | 97% |
| Таблица 3 Процент инкапсуляции флоксуридина в воспроизведенных липосомах CPX-1 |
|||
| Интервалы стабильности | |||
| Тест | Начальная | 6 месяцев | 9 месяцев |
| % инкапсуляции флоксуридина | 98% | 95% | 95% |
| Таблица 4 Процент инкапсуляции цитарабина и даунорубицина в воспроизведенных CPX-351 липосомах |
||||
| Липосомы CPX-351 | 1C001 | 1D002 | ||
| Замороженные | Лиофилизированные | Замороженные | Лиофилизированные | |
| % инкапсуляции цитарабина | 100 | 98 | 100 | 98 |
| % инкапсуляции даунорубицина | 99 | 99 | 99 | 99 |
| Таблица 5 CPX-351: Процент инкапсуляции цитарабина |
|||
| Время после лиофилизации | Хранили при 5°C | Хранили при 25°C | |
| Партия 1C001 | Исходная | 98 | 98 |
| 3 месяца | 98 | 98 | |
| 6 месяцев | 98 | 98 | |
| 9 месяцев | 98 | - | |
| Партия 1D001 | Исходная | 98 | 98 |
| 3 месяца | 98 | 99 | |
| 6 месяцев | 99 | 99 | |
| 9 месяцев | 98 | - | |
| Таблица 6 CPX-351: Процент инкапсуляции даунорубицина |
|||
| Время после лиофилизации | Хранили при 5°C | Хранили при 25°C | |
| Партия 1C001 | Исходная | 99 | 99 |
| 3 месяца | 99 | 99 | |
| 6 месяцев | 99 | 99 | |
| 9 месяцев | 99 | - | |
| Партия 1D001 | Исходная | 99 | 99 |
| 3 месяца | 99 | 99 | |
| 6 месяцев | 99 | 99 | |
| 9 месяцев | 99 | - | |
Claims (19)
1. Лиофилизированная липосомальная композиция в гелевой фазе для доставки терапевтического и/или диагностического агента, в которой указанные липосомы в гелевой фазе проявляют фазовую температуру плавления (Tc) по меньшей мере 37°C и стабильно ассоциированы с по меньшей мере двумя терапевтическими и/или диагностическими агентами, где указанная композиция содержит криопротектор, внешний по отношению к указанным липосомам, и где концентрация любого криопротектора внутреннего по отношению к указанным липосомам меньше чем 125 мМ; и
а) где липосомы содержат не более чем 20 мол.% холестерина и содержат по меньшей мере 1% мол. фосфатидилглицерина (PG) и/или фосфоинозитола (PI); и/или
б) где липосомальная мембрана составлена из дистеароилфосфатидилхолина (DSPC), дистеароилфосфатидилглицерина (DSPG) и холестерина (CHOL).
2. Композиция по п.1, где указанная лиофилизированная липосомальная композиция в гелевой фазе воспроизведена в фармацевтически приемлемом носителе:
i) указанное соотношение агентов изменяется не больше, чем на 25% по сравнению с указанной величиной, измеренной перед лиофилизацией; и/или
ii) средний диаметр липосом увеличивается не более чем на 25% по сравнению с указанной величиной, измеренной перед лиофилизацией, и/или
iii) по меньшей мере 75 мол.% каждого агента удерживается в инкапсулированном виде по сравнению с указанной величиной, измеренной перед лиофилизацией; и/или
iv) распределение размеров липосом изменяется не более чем на 25% по сравнению с указанной величиной, измеренной перед лиофилизацией.
3. Композиция по п.2, где при воспроизведении средний диаметр липосом увеличивается не более чем на 15% по сравнению с указанной величиной, измеренной перед лиофилизацией.
4. Композиция по п.2, где при воспроизведении по меньшей мере 85 мол.% каждого агента удерживается при воспроизведении указанных липосом.
5. Композиция по п.2, где при воспроизведении распределение размеров липосом изменяется не более чем на 15% по сравнению с указанной величиной, измеренной перед лиофилизацией.
6. Композиция по п.1, где липосомальная мембрана составлена из 50-80 мол.% DSPC, 1-20 мол.% DSPG и 1-20 мол.% CHOL.
7. Композиция по п.6, где липосомальная мембрана составлена из DSPC, DSPG и CHOL в молярном соотношении 7:2:1.
8. Композиция по любому из пп.1-7, где агенты имеют log коэффициентов распределения, которые отличаются на по меньшей мере 1,0.
9. Композиция по любому из пп.1-7, где агенты являются противоопухолевыми агентами.
10. Композиция по п.9, где агенты представляют собой цитарабин и даунорубицин или иринотекан и флоксуридин.
11. Способ приготовления композиции по любому из пп.1-10, при этом способ включает подвергание лиофилизации водной среды, содержащей липосомы в гелевой фазе, которые проявляют фазовую температуру плавления (Tc) по меньшей мере 37°C и стабильно ассоциированы с по меньшей мере двумя терапевтическими и/или диагностическими агентами, и где указанные липосомы содержат криопротектор внешний по отношению к указанным липосомам, и где концентрация любого криопротектора внутреннего по отношению к указанным липосомам меньше чем 125 мМ,
где указанная среда, содержащая липосомы в гелевой фазе, заморожена при температуре, которая ниже температуры стеклования (Tg) указанной среды.
12. Способ приготовления фармацевтической композиции для введения терапевтических и/или диагностических агентов пациенту, при этом способ содержит воспроизведение липосомальной композиции по любому из пп.1-10 в фармацевтическом носителе для получения воспроизведенной композиции.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201161550047P | 2011-10-21 | 2011-10-21 | |
| US61/550,047 | 2011-10-21 | ||
| PCT/US2012/060293 WO2013059133A1 (en) | 2011-10-21 | 2012-10-15 | Lyophilized liposomes |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2018107407A Division RU2780489C2 (ru) | 2011-10-21 | 2012-10-15 | Лиофилизированные липосомы |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2014120475A RU2014120475A (ru) | 2015-11-27 |
| RU2648753C2 true RU2648753C2 (ru) | 2018-03-28 |
Family
ID=48141268
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2014120475A RU2648753C2 (ru) | 2011-10-21 | 2012-10-15 | Лиофилизированные липосомы |
Country Status (22)
| Country | Link |
|---|---|
| US (5) | US10028912B2 (ru) |
| EP (2) | EP2768484B1 (ru) |
| JP (6) | JP6133308B2 (ru) |
| KR (5) | KR102284689B1 (ru) |
| CN (2) | CN108853031A (ru) |
| AU (1) | AU2012326370C9 (ru) |
| BR (1) | BR112014009305B1 (ru) |
| CA (1) | CA2852777C (ru) |
| DK (1) | DK2768484T3 (ru) |
| ES (1) | ES2750368T3 (ru) |
| HK (1) | HK1201039A1 (ru) |
| HR (1) | HRP20191683T1 (ru) |
| HU (2) | HUE045978T2 (ru) |
| IL (1) | IL232161B (ru) |
| LU (1) | LUC00135I2 (ru) |
| NL (1) | NL301016I2 (ru) |
| NO (1) | NO2019041I1 (ru) |
| PL (1) | PL2768484T3 (ru) |
| PT (1) | PT2768484T (ru) |
| RU (1) | RU2648753C2 (ru) |
| SI (1) | SI2768484T1 (ru) |
| WO (1) | WO2013059133A1 (ru) |
Families Citing this family (21)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SI2768484T1 (sl) * | 2011-10-21 | 2019-12-31 | Jazz Pharmaceuticals Research Llc | Liofilizirani liposomi |
| AU2015308790B2 (en) | 2014-08-28 | 2020-12-03 | The General Hospital Corporation | Compositions and methods for treatment of neurological disorders |
| US11504322B2 (en) | 2014-08-28 | 2022-11-22 | The General Hospital Corporation | Injectable slurries and methods of manufacturing the same |
| US11471401B2 (en) | 2014-08-28 | 2022-10-18 | The General Hospital Corporation | Injectable slurries and methods of manufacturing the same |
| LT3324932T (lt) | 2015-07-22 | 2021-04-26 | Nitto Denko Corporation | Kompozicijos ir būdai, skirti liofilinėms nanodalelių formoms |
| US10927418B2 (en) | 2015-11-11 | 2021-02-23 | Celator Pharmaceuticals, Inc. | Assays and methods for selecting a treatment regimen for a subject with leukemia |
| KR20180122642A (ko) | 2016-02-26 | 2018-11-13 | 더 제너럴 하스피탈 코포레이션 | 의료용 빙류 슬러리 제조 및 전달 시스템 및 방법 |
| UY37341A (es) | 2016-07-22 | 2017-11-30 | Flamel Ireland Ltd | Formulaciones de gamma-hidroxibutirato de liberación modificada con farmacocinética mejorada |
| US11602512B1 (en) | 2016-07-22 | 2023-03-14 | Flamel Ireland Limited | Modified release gamma-hydroxybutyrate formulations having improved pharmacokinetics |
| US11986451B1 (en) | 2016-07-22 | 2024-05-21 | Flamel Ireland Limited | Modified release gamma-hydroxybutyrate formulations having improved pharmacokinetics |
| US11602513B1 (en) | 2016-07-22 | 2023-03-14 | Flamel Ireland Limited | Modified release gamma-hydroxybutyrate formulations having improved pharmacokinetics |
| US11504347B1 (en) | 2016-07-22 | 2022-11-22 | Flamel Ireland Limited | Modified release gamma-hydroxybutyrate formulations having improved pharmacokinetics |
| CN111093623A (zh) * | 2017-07-10 | 2020-05-01 | 免疫疫苗技术公司 | 药物组合物、使用限定大小的脂质囊泡颗粒的制备方法及其用途 |
| JP7553453B2 (ja) | 2019-03-01 | 2024-09-18 | フラメル アイルランド リミテッド | 食事摂取状態における改善された薬物動態を有するガンマ－ヒドロキシ酪酸塩組成物 |
| CN114728101B (zh) * | 2019-06-28 | 2023-07-14 | 德州大学系统董事会 | 重构脂质体安那霉素的方法 |
| WO2021016457A1 (en) * | 2019-07-24 | 2021-01-28 | The General Hospital Corporation | Methods of creating a substance with different freezing points by encapsulation |
| US11980636B2 (en) | 2020-11-18 | 2024-05-14 | Jazz Pharmaceuticals Ireland Limited | Treatment of hematological disorders |
| US11583510B1 (en) | 2022-02-07 | 2023-02-21 | Flamel Ireland Limited | Methods of administering gamma hydroxybutyrate formulations after a high-fat meal |
| US11779557B1 (en) | 2022-02-07 | 2023-10-10 | Flamel Ireland Limited | Modified release gamma-hydroxybutyrate formulations having improved pharmacokinetics |
| CN115252563B (zh) * | 2022-06-24 | 2024-07-12 | 石药集团中奇制药技术（石家庄）有限公司 | 一种柔红霉素阿糖胞苷脂质体冻干品的制备方法 |
| CN116003493A (zh) * | 2022-12-16 | 2023-04-25 | 常州金远药业制造有限公司 | 一种二价铜离子及阿糖胞苷的回收方法 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2006052767A2 (en) * | 2004-11-05 | 2006-05-18 | Inex Pharmaceuticals Corporation | Compositions and methods for stabilizing liposomal camptothecin formulations |
| US20060110441A1 (en) * | 2004-10-28 | 2006-05-25 | Harry Wong | Lyophilized liposome formulations and method |
| RU2279872C2 (ru) * | 2001-04-11 | 2006-07-20 | Кью Эл Ти ИНК. | Система доставки лекарств для гидрофобных лекарственных препаратов |
| US20110002982A1 (en) * | 2001-11-13 | 2011-01-06 | Paul Tardi | Lipid carrier compositions with enhanced blood stability |
Family Cites Families (29)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5077056A (en) | 1984-08-08 | 1991-12-31 | The Liposome Company, Inc. | Encapsulation of antineoplastic agents in liposomes |
| US4880635B1 (en) * | 1984-08-08 | 1996-07-02 | Liposome Company | Dehydrated liposomes |
| EP0208764A4 (en) | 1985-01-11 | 1987-10-08 | Univ California | PRESERVATION PROCEDURE FOR LIPOSOME. |
| CA1256372A (en) | 1985-04-11 | 1989-06-27 | Koichiro Miyazima | Process for producing liposome composition |
| US4927571A (en) | 1987-05-18 | 1990-05-22 | Liposome Technology, Inc. | Preparation of injectable doxorubicin/liposome suspension |
| US4915951A (en) | 1987-12-03 | 1990-04-10 | California Institute Of Technology | Cryoprotective reagent |
| DE68916439T2 (de) * | 1988-10-05 | 1994-10-20 | Vestar Inc | Verfahren zur herstellung von liposomen mit verbesserter stabilität während des trocknens. |
| US5049392A (en) * | 1989-01-18 | 1991-09-17 | The Liposome Company, Inc. | Osmotically dependent vesicles |
| EA000900B1 (ru) | 1996-02-19 | 2000-06-26 | Никомед Имеджинг Ас | Термически стабилизированный контрастный агент |
| IT1289938B1 (it) | 1997-02-20 | 1998-10-19 | Angelini Ricerche Spa | Preparazione farmaceutica comprendente liposomi liofilizzati in cui e' incapsulato un principio attivo altamente insolubile in acqua e |
| GB9813100D0 (en) | 1998-06-18 | 1998-08-19 | Secr Defence | Method of forming liposomes |
| CN1156269C (zh) | 1999-07-16 | 2004-07-07 | 阿尔萨公司 | 抗冻/融损害的脂质体组合物 |
| US7850990B2 (en) * | 2001-10-03 | 2010-12-14 | Celator Pharmaceuticals, Inc. | Compositions for delivery of drug combinations |
| JP4822666B2 (ja) | 2001-10-03 | 2011-11-24 | セレーター ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド | 金属イオンをローディングするリポソーム |
| EP1448165B1 (en) | 2001-11-13 | 2007-09-19 | Celator Pharmaceuticals, Inc. | Lipid carrier compositions and methods for improved drug retention |
| CA2505520C (en) | 2002-11-06 | 2012-07-17 | Azaya Therapeutics, Inc. | Protein-stabilized liposomal formulations of pharmaceutical agents |
| EP1608337A2 (en) * | 2003-04-02 | 2005-12-28 | Celator Technologies Inc. | Combination compositions of camptothecins and fluoropyrimidines |
| EP1744764B1 (en) | 2004-04-22 | 2012-05-30 | Celator Pharmaceuticals, Inc. | Liposomal formulations of anthracycline agents and cytidine analogs |
| US7893338B2 (en) * | 2004-07-15 | 2011-02-22 | Creative Technology Ltd | Method of composing music on a handheld device |
| WO2006055903A1 (en) | 2004-11-18 | 2006-05-26 | Celator Pharmaceuticals, Inc. | Method for loading multiple agents into delivery vehicles |
| AU2006306108B2 (en) | 2005-10-25 | 2012-10-04 | Celator Pharmaceuticals, Inc. | Fixed ratio drug combination treatments for solid tumors |
| EP1976485A4 (en) | 2005-12-22 | 2011-10-26 | Celator Pharmaceuticals Inc | LIPOSOMAL FORMULATIONS COMPRISING SECONDARY AND TERTIARY AMINES AND METHODS FOR THE PREPARATION OF SAID FORMULATIONS |
| HRP20220428T3 (hr) | 2007-02-16 | 2022-05-27 | Rotalec Ip Holdings Llc | Fiksni omjeri lijeka za liječenje hematopoetskih tumora i proliferativnih poremećaja |
| US20120003294A1 (en) | 2007-08-17 | 2012-01-05 | Celator Pharmaceuticals, Inc. | Fixed ratio camptothecens/platinum agents |
| ES2535217T3 (es) | 2007-11-28 | 2015-05-07 | Celator Pharmaceuticals, Inc. | Sistema mejorado de administración de taxano |
| EP2344161B1 (en) | 2008-10-16 | 2018-12-19 | Celator Pharmaceuticals, Inc. | Combinations of a liposomal water-soluble camptothecin with cetuximab or bevacizumab |
| CN102271659B (zh) | 2009-12-03 | 2013-09-18 | 江苏恒瑞医药股份有限公司 | 伊立替康或盐酸伊立替康脂质体及其制备方法 |
| US20130052259A1 (en) * | 2010-02-01 | 2013-02-28 | Yechezkel Barenholz | Liposomes comprising amphipathic drugs and method for their preparation |
| SI2768484T1 (sl) * | 2011-10-21 | 2019-12-31 | Jazz Pharmaceuticals Research Llc | Liofilizirani liposomi |
-
2012
- 2012-10-15 SI SI201231668T patent/SI2768484T1/sl unknown
- 2012-10-15 KR KR1020207013990A patent/KR102284689B1/ko active IP Right Grant
- 2012-10-15 KR KR1020227034406A patent/KR20220141906A/ko not_active Application Discontinuation
- 2012-10-15 KR KR1020197027220A patent/KR102113753B1/ko active IP Right Grant
- 2012-10-15 PT PT128416161T patent/PT2768484T/pt unknown
- 2012-10-15 HU HUE12841616A patent/HUE045978T2/hu unknown
- 2012-10-15 AU AU2012326370A patent/AU2012326370C9/en active Active
- 2012-10-15 RU RU2014120475A patent/RU2648753C2/ru active
- 2012-10-15 DK DK12841616.1T patent/DK2768484T3/da active
- 2012-10-15 JP JP2014537142A patent/JP6133308B2/ja active Active
- 2012-10-15 ES ES12841616T patent/ES2750368T3/es active Active
- 2012-10-15 CN CN201810733439.3A patent/CN108853031A/zh active Pending
- 2012-10-15 EP EP12841616.1A patent/EP2768484B1/en not_active Revoked
- 2012-10-15 WO PCT/US2012/060293 patent/WO2013059133A1/en active Application Filing
- 2012-10-15 KR KR1020217023773A patent/KR102452305B1/ko active IP Right Grant
- 2012-10-15 BR BR112014009305-9A patent/BR112014009305B1/pt active IP Right Grant
- 2012-10-15 PL PL12841616T patent/PL2768484T3/pl unknown
- 2012-10-15 US US14/352,662 patent/US10028912B2/en active Active
- 2012-10-15 KR KR1020147012039A patent/KR102024836B1/ko active IP Right Grant
- 2012-10-15 CA CA2852777A patent/CA2852777C/en active Active
- 2012-10-15 CN CN201280059606.1A patent/CN104114156A/zh active Pending
- 2012-10-15 EP EP19183846.5A patent/EP3572071A1/en active Pending
-
2014
- 2014-04-22 IL IL232161A patent/IL232161B/en active IP Right Grant
-
2015
- 2015-01-27 HK HK15100906.6A patent/HK1201039A1/xx unknown
-
2017
- 2017-04-04 JP JP2017074348A patent/JP6359717B2/ja active Active
-
2018
- 2018-02-07 US US15/891,170 patent/US10166184B2/en active Active
- 2018-05-17 JP JP2018095127A patent/JP6592556B2/ja active Active
- 2018-11-05 US US16/181,203 patent/US10835492B2/en active Active
-
2019
- 2019-09-17 HR HRP20191683 patent/HRP20191683T1/hr unknown
- 2019-09-20 JP JP2019172314A patent/JP2020007367A/ja active Pending
- 2019-10-10 HU HUS1900047 patent/HUS1900047I1/hu unknown
- 2019-10-24 LU LU00135C patent/LUC00135I2/fr unknown
- 2019-10-25 NL NL301016C patent/NL301016I2/nl unknown
- 2019-11-25 NO NO2019041C patent/NO2019041I1/no unknown
-
2020
- 2020-11-13 US US17/097,530 patent/US20210169803A1/en not_active Abandoned
-
2021
- 2021-12-03 JP JP2021196626A patent/JP7476161B2/ja active Active
-
2022
- 2022-07-13 US US17/812,414 patent/US20230172855A1/en active Pending
-
2024
- 2024-01-05 JP JP2024000732A patent/JP2024045183A/ja active Pending
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2279872C2 (ru) * | 2001-04-11 | 2006-07-20 | Кью Эл Ти ИНК. | Система доставки лекарств для гидрофобных лекарственных препаратов |
| US20110002982A1 (en) * | 2001-11-13 | 2011-01-06 | Paul Tardi | Lipid carrier compositions with enhanced blood stability |
| US20060110441A1 (en) * | 2004-10-28 | 2006-05-25 | Harry Wong | Lyophilized liposome formulations and method |
| WO2006052767A2 (en) * | 2004-11-05 | 2006-05-18 | Inex Pharmaceuticals Corporation | Compositions and methods for stabilizing liposomal camptothecin formulations |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Pick, et al., Arch. - Biochim. Biophys. - 1981. - P. V. 186. - P.212. * |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US20230172855A1 (en) | Method of lyophilizing liposomes | |
| Muppidi et al. | Development and stability studies of novel liposomal vancomycin formulations | |
| JP4555569B2 (ja) | 増強された血中安定性を有する脂質キャリア組成物 | |
| JP2006510674A (ja) | 脂質：エモジン製剤に関する組成物および方法 | |
| KR20080046672A (ko) | 나노입자 제제를 보관하는 방법 | |
| RU2780489C2 (ru) | Лиофилизированные липосомы |