RU2644204C2 - Способ получения модели ожирения животного - Google Patents
Способ получения модели ожирения животного Download PDFInfo
- Publication number
- RU2644204C2 RU2644204C2 RU2015108075A RU2015108075A RU2644204C2 RU 2644204 C2 RU2644204 C2 RU 2644204C2 RU 2015108075 A RU2015108075 A RU 2015108075A RU 2015108075 A RU2015108075 A RU 2015108075A RU 2644204 C2 RU2644204 C2 RU 2644204C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- animal
- obesity
- axenic
- model
- mice
- Prior art date
Links
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 title claims abstract description 49
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 title claims abstract description 48
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 title claims abstract description 36
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 33
- 241000588697 Enterobacter cloacae Species 0.000 claims abstract description 20
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 10
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims abstract description 8
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims abstract description 8
- 108020004465 16S ribosomal RNA Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 230000003816 axenic effect Effects 0.000 claims description 18
- 206010022489 Insulin Resistance Diseases 0.000 claims description 14
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 13
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 claims description 10
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 claims description 8
- 208000001145 Metabolic Syndrome Diseases 0.000 claims description 5
- 208000037976 chronic inflammation Diseases 0.000 claims description 5
- 230000006020 chronic inflammation Effects 0.000 claims description 5
- 201000000690 abdominal obesity-metabolic syndrome Diseases 0.000 claims description 4
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 claims description 2
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 claims description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 claims description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 claims description 2
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 claims description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract description 32
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 18
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 8
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 7
- 238000009472 formulation Methods 0.000 abstract description 7
- 230000036541 health Effects 0.000 abstract description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 5
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 abstract description 3
- 239000002778 food additive Substances 0.000 abstract description 3
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 25
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 24
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 19
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 19
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 17
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 17
- 241000588914 Enterobacter Species 0.000 description 16
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 16
- 235000009200 high fat diet Nutrition 0.000 description 15
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 15
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 13
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 12
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 11
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 11
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 10
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 10
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 9
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 9
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 9
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 9
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 9
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 9
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 9
- 239000000463 material Substances 0.000 description 9
- 102000052508 Lipopolysaccharide-binding protein Human genes 0.000 description 8
- 108010053632 Lipopolysaccharide-binding protein Proteins 0.000 description 8
- 230000035508 accumulation Effects 0.000 description 8
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 8
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 8
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 7
- 201000010063 epididymitis Diseases 0.000 description 6
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 6
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 6
- 102000054727 Serum Amyloid A Human genes 0.000 description 5
- 108700028909 Serum Amyloid A Proteins 0.000 description 5
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 5
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 5
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 5
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 5
- 102000011690 Adiponectin Human genes 0.000 description 4
- 108010076365 Adiponectin Proteins 0.000 description 4
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 4
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 4
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 101150052909 CCL2 gene Proteins 0.000 description 3
- 102000016267 Leptin Human genes 0.000 description 3
- 108010092277 Leptin Proteins 0.000 description 3
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 3
- 101150082427 Tlr4 gene Proteins 0.000 description 3
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 description 3
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 3
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 3
- 230000007893 endotoxin activity Effects 0.000 description 3
- NRYBAZVQPHGZNS-ZSOCWYAHSA-N leptin Chemical compound O=C([C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)CCSC)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O NRYBAZVQPHGZNS-ZSOCWYAHSA-N 0.000 description 3
- 229940039781 leptin Drugs 0.000 description 3
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 3
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 3
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 3
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 3
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 3
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-REOHCLBHSA-N L-lactic acid Chemical compound C[C@H](O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- 208000031964 Other metabolic disease Diseases 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 2
- UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N beta-alanine Chemical compound NCCC(O)=O UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010876 biochemical test Methods 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000003304 gavage Methods 0.000 description 2
- 244000005709 gut microbiome Species 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 210000001630 jejunum Anatomy 0.000 description 2
- 229940116871 l-lactate Drugs 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 2
- JQXXHWHPUNPDRT-WLSIYKJHSA-N rifampicin Chemical compound O([C@](C1=O)(C)O/C=C/[C@@H]([C@H]([C@@H](OC(C)=O)[C@H](C)[C@H](O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)\C=C\C=C(C)/C(=O)NC=2C(O)=C3C([O-])=C4C)C)OC)C4=C1C3=C(O)C=2\C=N\N1CC[NH+](C)CC1 JQXXHWHPUNPDRT-WLSIYKJHSA-N 0.000 description 2
- 229960001225 rifampicin Drugs 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 2
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 2
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N (S)-malic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- PVXPPJIGRGXGCY-DJHAAKORSA-N 6-O-alpha-D-glucopyranosyl-alpha-D-fructofuranose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@](O)(CO)O1 PVXPPJIGRGXGCY-DJHAAKORSA-N 0.000 description 1
- 101001006370 Actinobacillus suis Hemolysin Proteins 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- 102000004118 Ammonia-Lyases Human genes 0.000 description 1
- 108090000673 Ammonia-Lyases Proteins 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 description 1
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-M Butyrate Chemical compound CCCC([O-])=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Natural products CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000489 Carboxy-Lyases Proteins 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- LKDRXBCSQODPBY-OEXCPVAWSA-N D-tagatose Chemical compound OCC1(O)OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O LKDRXBCSQODPBY-OEXCPVAWSA-N 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 241000147019 Enterobacter sp. Species 0.000 description 1
- 241000305071 Enterobacterales Species 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 206010015548 Euthanasia Diseases 0.000 description 1
- 101100218662 Felis catus GLB1 gene Proteins 0.000 description 1
- 108020004206 Gamma-glutamyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 241000192128 Gammaproteobacteria Species 0.000 description 1
- 102000053187 Glucuronidase Human genes 0.000 description 1
- 108010060309 Glucuronidase Proteins 0.000 description 1
- 101000669447 Homo sapiens Toll-like receptor 4 Proteins 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 description 1
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 description 1
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 description 1
- 108010048581 Lysine decarboxylase Proteins 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Malonic acid Chemical class OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- DKXNBNKWCZZMJT-UHFFFAOYSA-N O4-alpha-D-Mannopyranosyl-D-mannose Natural products O=CC(O)C(O)C(C(O)CO)OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O DKXNBNKWCZZMJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 241000192142 Proteobacteria Species 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- XDMACMMTPGFUCZ-UHFFFAOYSA-N Tetra-Ac-Benzyl glucopyranoside Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(COC(=O)C)OC1OCC1=CC=CC=C1 XDMACMMTPGFUCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100039360 Toll-like receptor 4 Human genes 0.000 description 1
- 108010046334 Urease Proteins 0.000 description 1
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-DVKNGEFBSA-N alpha-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-DVKNGEFBSA-N 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000000721 bacterilogical effect Effects 0.000 description 1
- 102000005936 beta-Galactosidase Human genes 0.000 description 1
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- 102000006995 beta-Glucosidase Human genes 0.000 description 1
- 108010047754 beta-Glucosidase Proteins 0.000 description 1
- 229940000635 beta-alanine Drugs 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 210000000028 corpus adiposum pararenale Anatomy 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-NGQZWQHPSA-N d-xylitol Chemical compound OC[C@H](O)C(O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-NGQZWQHPSA-N 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 235000001916 dieting Nutrition 0.000 description 1
- 230000037228 dieting effect Effects 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 238000002224 dissection Methods 0.000 description 1
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 1
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 108010038658 exo-1,4-beta-D-xylosidase Proteins 0.000 description 1
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 102000006640 gamma-Glutamyltransferase Human genes 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 229930182478 glucoside Natural products 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003405 ileum Anatomy 0.000 description 1
- 230000008676 import Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 229960002160 maltose Drugs 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000037323 metabolic rate Effects 0.000 description 1
- 125000001434 methanylylidene group Chemical group [H]C#[*] 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 208000008338 non-alcoholic fatty liver disease Diseases 0.000 description 1
- 102000042567 non-coding RNA Human genes 0.000 description 1
- 235000021590 normal diet Nutrition 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 1
- 238000007410 oral glucose tolerance test Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 235000013406 prebiotics Nutrition 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 1
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 1
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 238000003762 quantitative reverse transcription PCR Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 229960002920 sorbitol Drugs 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000011895 specific detection Methods 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 210000004003 subcutaneous fat Anatomy 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003868 tissue accumulation Effects 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 1
- HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K trisodium citrate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000012137 tryptone Substances 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000020985 whole grains Nutrition 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
- -1 α-galactose glucoside Chemical class 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K67/00—Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New or modified breeds of animals
- A01K67/027—New or modified breeds of vertebrates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K67/00—Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New or modified breeds of animals
- A01K67/027—New or modified breeds of vertebrates
- A01K67/0271—Chimeric vertebrates, e.g. comprising exogenous cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/0004—Screening or testing of compounds for diagnosis of disorders, assessment of conditions, e.g. renal clearance, gastric emptying, testing for diabetes, allergy, rheuma, pancreas functions
- A61K49/0008—Screening agents using (non-human) animal models or transgenic animal models or chimeric hosts, e.g. Alzheimer disease animal model, transgenic model for heart failure
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2207/00—Modified animals
- A01K2207/12—Animals modified by administration of exogenous cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2207/00—Modified animals
- A01K2207/25—Animals on a special diet
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2227/00—Animals characterised by species
- A01K2227/10—Mammal
- A01K2227/105—Murine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2267/00—Animals characterised by purpose
- A01K2267/03—Animal model, e.g. for test or diseases
- A01K2267/0337—Animal models for infectious diseases
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2267/00—Animals characterised by purpose
- A01K2267/03—Animal model, e.g. for test or diseases
- A01K2267/035—Animal model for multifactorial diseases
- A01K2267/0362—Animal model for lipid/glucose metabolism, e.g. obesity, type-2 diabetes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2267/00—Animals characterised by purpose
- A01K2267/03—Animal model, e.g. for test or diseases
- A01K2267/035—Animal model for multifactorial diseases
- A01K2267/0368—Animal model for inflammation
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к способу получения модели ожирения животного. Способ предусматривает инокулирование аксенического животного бактерией Enterobacter cloacae, имеющей ген 16S рРНК, для получения инокулированного животного, где последовательность гена 16S рРНК представляет собой SEQ ID NO.1; и кормление инокулированного животного кормом, имеющим 34,9% содержания жира, в течение по крайней мере четырех недель для получения модели ожирения животного. Полученная способом модель ожирения может быть использована для скрининга микроорганизмов, соединений, композиций, лекарственных средств, еды, составов или рецептов, лекарственных препаратов, пищевых добавок, продуктов для ухода за здоровьем или напитков на их роль в вызывании, предотвращении или лечении ожирения. 7 з.п. ф-лы, 3 ил., 1 табл., 5 пр.
Description
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
Данная заявка относится к биотехнологии, особенно применительно к способам создания животных моделей ожирения и применению таких животных моделей ожирения для скрининга микроорганизмов, соединений, композиций, лекарственных средств, еды, составов или рецептов, лекарственных препаратов, пищевых добавок, продуктов для ухода за здоровьем или напитков на их роль в вызывании, предотвращении или лечении ожирения.
Предшествующий уровень техники
Если в данном документе особым образом не указано иное, материалы, описанные в этом разделе, не являются предшествующим уровнем техники по отношению к формуле изобретения этой заявки, и не подразумевается, что они являются предшествующим уровнем техники из-за включения в этот раздел.
Большое количество симбиотических микробов живут внутри человеческого тела, их состояние и функция эквивалентны важному органу, приобретенному после рождения, при этом они играют незаменимую роль для человеческого здоровья. Внутри всего человеческого тела эукариотические клетки составляют только 10% от общего количества клеток; тогда как прокариотические клетки составляют оставшиеся 90%, поэтому нобелевский лауреат Ледерберг предположил, что человеческое тело является "суперорганизмом", состоящим как из эукариотических клеток, так и из эндокомменсальных симбиотических прокариотических клеток. Эндокомменсальные симбиотические микробы превышают 1000 видов, вес 1-2 кг и количество в диапазоне 1014, более чем в 10 раз большее, чем количество клеток человеческого тела, и количество кодирующих генов по меньшей мере в 100 раз больше, чем количество человеческих генов.
Хорошо известно, что ожирение стало в возрастающей степени острой проблемой общественного здоровья в современном обществе, однако до настоящего времени механизм остается непонятным в отношении того, как кишечная флора участвует в начале и развитии ожирения, резистентности к инсулину и других метаболических заболеваниях. Более того, не очевидно то, является ли кишечная флора причиной или эффектом метаболических заболеваний; какие типы бактерий могут приводить к возникновению метаболических заболеваний и какие типы бактерий способны улучшать симптомы ожирения, резистентности к инсулину и других метаболических заболеваний.
Краткая сущность изобретения
Следующее краткое изложение является только иллюстративным и не подразумевается, что оно является каким-либо образом ограничивающим. В добавление к иллюстративным объектам, вариантам осуществления и свойствам, описанным выше, дополнительные объекты, варианты осуществления и свойства станут очевидными со ссылками на чертежи и следующее подробное описание.
Один из объектов данной заявки относится к способам создания животной модели ожирения. В одном варианте осуществления способ содержит инокулирование животных с эндотоксин (LPS)-продуцирующей бактерией c питанием с высоким содержанием жира для продуцирования гнотобиологической животной модели ожирения. После того, как микроорганизм, такой как продуцирующая эндотоксин бактерия или композиция, содержащая эндотоксин-продуцирующую бактерию, инокулированы в аксенических животных, вскармливаемых с питанием с высоким содержанием жира, микроорганизм колонизируется в кишечнике аксенических животных. Животные могут проявлять ожирение, инсулиновую резистентность, хроническое воспаление или другие симптомы метаболического нарушения, нарушения иммунной системы или другие системные нарушения.
Другой объект заявки относится к способам скрининга микроорганизма или композиции микроорганизмов, которые вызывают ожирение.
Другой объект заявки относится к способам скрининга терапевтических мишеней для лечения метаболических нарушений, таких как ожирение.
Другой объект заявки относится к способам скрининга или оценки микроорганизмов, еды, рецептов, составов, композиций, соединений, лекарственных средств, пищевых добавок, продуктов по уходу за здоровьем, напитков или других средств, которые могут быть применены для предотвращения или лечения метаболических заболеваний, таких как ожирение.
Краткое описание чертежей
Вышеприведенные и другие свойства этого открытия станут более понятными из следующего описания и прилагаемой формулы изобретения в сочетании с прилагаемыми чертежами. Принимая во внимание то, что эти чертежи отображают только некоторые варианты осуществления, воплощенные в соответствии с открытием и, следовательно, не должны рассматриваться как ограничивающие объем, открытие будет описано с дополнительной определенностью и подробностями посредством прилагаемых чертежей, в которых:
Фиг. 1 иллюстрирует колонизацию изолятов B29 в кишечнике аксенических мышей, вскармливаемых с питанием с высоким содержанием жира посредством сравнения уровней популяции Enterobacter sp. B29 в ассоциированной с Enterobacter гнотобиологической модели ожирения мышей с уровнями у контрольных мышей.
Фиг. 2 иллюстрирует эффекты B29 на симптомы ожирения и резистентность к инсулину аксенических мышей, вскармливаемых с питанием с высоким содержанием жира; фиг. 2a демонстрирует массу тела ассоциированной с Enterobacter гнотобиологической модели ожирения и контролях; фиг. 2b демонстрирует массу эпидидимального, мезентериального, подкожного ингвинального и ретроперитонеального скопления жировой ткани в ассоциированной с Enterobacter гнотобиологической модели ожирения и контролях; фиг. 2c демонстрирует абдоминальные фотографии в ассоциированной с Enterobacter гнотобиологической модели ожирения и контролях; фиг. 2d демонстрирует оральный тест на толерантность к глюкозе (OGTT) и площадь под кривой (AUC) у мышей с ассоциированной с Enterobacter гнотобиологической моделью ожирения и контролей; и фиг. 2e демонстрирует сывороточные уровни через 2 часа после загрузки инсулина в ассоциированной с Enterobacter гнотобиологической модели ожирения и контролях; и
Фиг. 3 иллюстрирует эффект B29 на уровень воспаления аксенических мышей, вскармливаемых с питанием с высоким содержанием жира; фиг. 3a демонстрирует сывороточные LBP уровни у ассоциированной с Enterobacter гнотобиологический модели ожирения и контролей; фиг. 3b демонстрирует сывороточные SAA уровни в ассоциированной с Enterobacter гнотобиологической модели ожирения и контролях; фиг. 3c демонстрирует сывороточный адипонектин, скорректированный по уровням массы тела в ассоциированной с Enterobacter гнотобиологической модели ожирения и контролях; фиг. 3d демонстрирует анализ с количественной ПЦР с обратной транскрипцией (ОТ) экспрессии Tnfα, Il1β, Il6, Mcp1, Ikk ε и Tlr4 в печени в ассоциированной с Enterobacter гнотобиологической модели ожирения и контролях; фиг. 3e демонстрирует анализ с количественной ПЦР с обратной транскрипцией (ОТ) экспрессии Tnfα, Il1β, Il6, Mcp1, Ikk ε и Tlr4 в эпидидимальном скоплении жировой ткани в ассоциированной с Enterobacter гнотобиологической модели ожирения и контролях; и фиг. 3f демонстрирует анализ с количественной ПЦР с обратной транскрипцией (ОТ) экспрессии Tnfα, Il1β, Il6, Mcp1, Ikk ε и Tlr4 в подвздошной кишке в ассоциированной с Enterobacter гнотобиологической модели ожирения и контролях.
Подробное описание изобретения
В следующем подробном описании осуществлена ссылка на прилагаемые чертежи, которые формируют его часть. В чертежах схожие символы, как правило, идентифицируют схожие компоненты, если контекст не указывает однозначно на обратное. Не подразумевается, что иллюстративные варианты осуществления, описанные в подробном описании, чертежах и формуле изобретения, являются ограничивающими. Могут быть использованы другие варианты осуществления, и могут быть внесены другие изменения, без выхода за рамки основной идеи и объема объекта патентования, представленного в данном документе. Нетрудно понять, что объекты данного открытия, как в целом описано в данном документе и проиллюстрировано на чертежах, могут быть упорядочены, заменены, комбинированы, разделены и сконструированы в виде широкого разнообразия различных конфигураций, все из которых однозначно предусмотрены данным документом.
Заявка в целом среди прочего относится к новым способам создания животных моделей ожирения, новым способам скрининга микроорганизма или композиции микроорганизмов, которые могут вызвать ожирение, новым способами скрининга терапевтических мишеней для лечения метаболических нарушений и новым способам для скрининга или оценки микроорганизмов, соединений, композиций, еды, рецептов, составов, лекарственных средств, пищевых добавок, продуктов для ухода за здоровьем, напитков и других средств для предотвращения и лечения метаболических заболеваний.
В одном примере данная заявка относится к способу предоставления животной модели ожирения, в которой аксенических животных инокулируют с микроорганизмом, при этом вскармливая их питанием с высоким содержанием жира. Микроорганизм может являться единичным микроорганизмом или комбинацией микроорганизмов. Питание с высоким содержанием жира может содержать по меньшей мере 5% жира. Микроорганизм или комбинация могут колонизировать кишечник аксенических животных внутри и формировать основу популяции кишечной микробиоты для получения в результате животных моделей. Животная модель может проявлять симптомы по меньшей мере одного метаболического нарушения или нарушения иммунной системы.
Симптомы метаболических или нарушений иммунной системы могут являться метаболическим синдромом или нарушениями иммунной системы, включая без ограничения ожирение, инсулиновую резистентность, хроническое воспаление или неалкогольную жировую дистрофию печени.
Аксеническое животное может являться млекопитающим или немлекопитающим. Примером млекопитающих могут быть мышь, крыса, морская свинка, свинья, кролик или обезьяна.
Количество жира в питании с высоким содержанием жира может составлять по меньшей мере 5%, по меньшей мере 10%, по меньшей мере 15%, по меньшей мере 20% или по меньшей мере 25%.
Микроорганизм может являться бактерией, такой как продуцирующая эндотоксин бактерия. Продуцирующая эндотоксин бактерия относится к бактерии, способной к продуцированию веществ(а), которые(ое) обладают(ет) эндотоксинной активностью. Примеры продуцирующей эндотоксин бактерии могут включать, без ограничения, штамм B29 Enterobacter cloacae, Enterobacter cloacae, Enterobacter, энтеробактерии, γ-Proteobacteria, Proteobacteria или грамотрицательные бактерии. Микроорганизм может быть в композиции, содержащей множество штаммов продуцирующих эндотоксин бактерий или содержащей штаммы продуцирующих эндотоксин и не продуцирующих эндотоксин бактерий. В одном примере, микроорганизм может содержать ген синтеза эндотоксина, последовательность которого по меньшей мере на 15%, 20%, 30%, 50%, 75% или 95% подобна последовательности штамма B29 Enterobacter cloacae.
Модель ожирения животного, представленная выше, может включать кишечную бактерию, имеющую ген 16S рРНК, последовательность которого по меньшей мере на 15%, 20%, 30%, 50%, 75% или 95% подобна SEQ ID NO.1.
Способ инокулирования, как отмечено выше, может являться любым способом инокулирования или введения в биологической, медицинской или фармацевтической областях. Пример способов инокулирования может включать гаваж, диетические добавки, добавку к питьевой воде и намазываемое или топическое применение на кожу и мех. После инокулирования инокулированные микроорганизмы, такие как бактерии, могут колонизировать кишечник животного или могут быть детектированы в экскрементах животного. В одном примере, инокулированные бактерии могут быть постоянно детектированы в экскрементах животного. Животные могут проявлять среди прочего сопутствующие метаболические синдромы, прирост массы, повышенное содержание жира, липидов крови, инсулиновую резистентность, резистентность к сывороточному липополисахарид-связывающему белку или лептиновую резистентность, повышенный сывороточный уровень воспаления или повышенные уровни экспрессии воспалительного фактора.
Другой объект данной заявки относится к способам скрининга вызывающего ожирение микроорганизма или их комбинации. В одном примере бактерия позитивного контроля, которая способна к колонизированию кишечника аксенического животного, инокулирована животному, которое подвергается кормлению с питанием с высоким содержанием жира. Полученное в результате животное может проявлять по меньшей мере один тип метаболических или нарушений иммунной системы. Указанную бактерию позитивного контроля сравнивают с тестируемым микроорганизмом или их комбинацией. Если тестируемый микроорганизм или его комбинация проявляет эффект, подобный позитивному контролю, это указывает на то, что тестируемый микроорганизм или его комбинация может вызывать ожирение.
Другой объект данной заявки относится к способам скрининга микроорганизма или его комбинации, которая имеет предупредительный или терапевтический эффект на симптом метаболического нарушения или нарушения иммунной системы. В одном примере в способе применяют животную модель, которая проявляет по меньшей мере один симптом метаболических или нарушений иммунной системы. После введения тестируемого микроорганизма или его комбинации, если животное проявляет улучшение по меньшей мере одного симптома метаболических или нарушений иммунной системы, это указывает на то, что указанный микроорганизм или его комбинация обладает предупредительным или терапевтическим эффектом на симптом метаболических или нарушений иммунной системы. В одном примере, улучшение по меньшей мере одного симптома метаболических или нарушений иммунной системы может включать облегчение симптома ожирения, инсулиновой резистентности или хронического воспаления. Например, после введения тестируемого микроорганизма или его комбинации, если животное проявляет одно или более из потери массы, сниженного содержания жира, понижения липидов крови, улучшенной инсулиновой резистентности, сниженного уровня сывороточного липополисахарид-связывающего белка, пониженной лептиновой резистентности, пониженного сывороточного уровня воспаления или пониженных уровней экспрессии воспалительного фактора, это указывает на то, что тестируемый микроорганизм или его комбинация могут обладать предупредительным или терапевтическим эффектом на симптом метаболического нарушения или нарушения иммунной системы.
Тестируемый микроорганизм может являться любым микроорганизмом. В одном примере тестируемый микроорганизм может включать молочнокислые бактерии, Bifidobacteria, продуцирующие бутират бактерии, грамположительные кокки или пробиотики.
Другой объект данной заявки относится к способам скрининга материала, который может обладать предупредительным или терапевтическим эффектом на симптом метаболических или нарушений иммунной системы. В одном примере в способе применяют животную модель, проявляющуюся в одном симптоме метаболических или нарушений иммунной системы. После введения материала, если животное проявляет улучшение по меньшей мере одного симптома метаболических нарушений или нарушений иммунной системы, это указывает на то, что материал может обладать предупредительным или терапевтическим эффектом на симптом метаболических нарушений или нарушений иммунной системы. Например, улучшение может включать потерю массы, пониженную инсулиновую резистентность или сниженное хроническое воспаление. В одном примере после введения материала, если гнотобиологическая модель ожирения животного проявляет одно или более из потери массы, сниженного содержания жира, понижения липидов крови, улучшенной инсулиновой резистентности, сниженного уровня сывороточного липополисахарид-связывающего белка, пониженной лептиновой резитентности, пониженного сывороточного уровня воспаления или пониженных уровней экспрессии воспалительного фактора, это указывает на то, что материал может обладать предупредительным или терапевтическим эффектом на симптом метаболического нарушения или нарушения иммунной системы.
Вышеупомянутый материал может являться съедобным. Например, материал может включать, без ограничения, еду, рецептуры, составы, соединения, композиции, лекарственные средства, пищевые добавки, продукт для ухода за здоровьем или напиток.
Следующие примеры предназначены для иллюстрации осуществления и свойства показательного способа применения. Не подразумевается, что эти примеры ограничивают объем заявки.
ПРИМЕР 1. Материалы и животные модели
Самцов мышей C57BL/6J (аксенические) применяли в качестве животного. Enterobacter cloacae B29 применяли в качестве иллюстративного инокуляционного микроорганизма. Указанная Enterobacter cloacae B29 относится к превосходному штамму, выделенному из экскрементов пациента-добровольца с болезненным ожирением. Анализ последовательности гена 16s РНК и биохимические испытания идентифицировали бактерии как Enterobacter cloacae.
24 здоровых самца мышей C57BL/6J (аксенические) приобретали у Research Diets, Inc. (New Brunswick, NJ) и подвергали кормлению или нормальной пищевой диете (NCD, содержание жира 4,62%, 3,45 килокалорий/грамм), или питанию с высоким содержанием жира (HFD, содержание жира 34,9%, 5,21 килокалорий/грамм).
Способ на мышах: мышей содержали с 12-часовым световым циклом (освещение начинали с 6:30 утра) при 22±3°C. Стерильных мышей возрастом шесть-десять недель случайно распределяли в четыре группы (6 на группу), и они получали следующее лечение: (1) группа NCD+LB: эту группу инокулировали через гаваж с 0,1 мл стерильной среды LB и подвергали кормлению с NCD; (2) группа NCD+B29: группу инокулировали через гаваж с суспензией B29 (102 клеток) в 0,1 мл стерильной среды LB и подвергали кормлению с NCD; (3) группа HFD+LB: эту группу инокулировали через гаваж с 0,1 мл стерильной среды LB и подвергали кормлению с HFD; и (4) группа HFD+B29: эту группу инокулировали через гаваж с суспензией B29 (102 клетки) в 0,1 мл стерильной среды LB и подвергали кормлению с HFD. Эксперимент продолжался 16 недель. Мышей выращивали в клетках из 3 или 4 в гнотобиологических изоляторах и массу тела каждой мыши измеряли каждую неделю. Каждая группа животных располагалась в их отдельных изоляторах, их подвергали кормлению со стерильным питанием и стерильной водой вплоть до эвтаназии и выполняли наблюдение за бактериальным заражением периодическим бактериологическим исследованием гнотобиологических изоляторов.
Во время эксперимента наблюдали за массой тела, массой скопления жировой ткани, чувствительностью к инсулину и уровнями воспаления у мышей.
ПРИМЕР 2
Выделение и характеризация Enterobacter cloacae B29
Анализ страдающей ожирением популяции выявил, что большинство страдающих болезненным ожирением пациентов страдает от тяжелого нарушения баланса в микробиоте кишечника. Например, было обнаружено, что 35% от общего количества бактерий кишечника представляют собой Enterobacter (анализировано посредством библиотеки генов 16S рРНК, у страдающего от болезненного ожирения добровольца (возраст 26 лет, мужчина, этническая принадлежность - хань, масса тела 174,9 кг, BMI 58,78 кг/м2)). В то же время, физическое обследование продемонстрировало, что доброволец страдает от острого метаболического синдрома. Доброволец подвергался 23 неделям соблюдения диеты (композиция: цельные злаки, средство традиционной китайской медицины и пребиотики), при этом он потерял 30,1 кг после 9 недель, 51,4 кг из 174,8 кг после 23 недель и демонстрировал улучшение всех показателей метаболического синдрома. Анализ популяции бактерий кишечника выявил, что популяция Enterobacter снижалась до 1,8% после 9 недель питания и становилась необнаруживаемой в конце 23-недельного исследования. Штаммы Enterobacter выделяли из экскрементов добровольца посредством схемы "направляемое последовательностью выделение" с использованием среды LB (Лурия-Бертани, состав приведен ниже) при 37°C, получали наиболее обильные изоляты и называли их B29. Выполняли анализ полноразмерного секвенирования на 16S рРНК B29, и было обнаружено, что B29 является на 99% гомологичным Enterobacter cloacae (GenBank номер доступа AB244457). Биохимический тест с грамотрицательной GN картой VITEK 2, bioMerieux, Marcy l'Étoile, France, также указывал на то, что B29 с вероятностью 98% принадлежит к Enterobacter cloacae (Таблица 1).
Липополисахарид (LPS) выделяли из B29 с применением набора для выделения LPS iNtRON Biotecnology Co., Seoul, Korea, и уровень активности эндотоксина измеряли применением набора для испытания активности эндотоксина LAL (ACC, USA). Результат продемонстрировал, что активность эндотоксина B29 составляет 4,45×106 ЕЭ мг-1 LPS, что сопоставимо с E. coli штамма 055:B5.
Для того чтобы выполнить специфическое к Enterobacter cloacae B29 детектирование, штамм B29, который является устойчивым к 500 мкг/мл рифампицина выделяли с применением способа скрининга устойчивых к рифампицину штаммов. Этот штамм инокулировали в среду LB и встряхивали в течение 12 часов при 37°C, и полученную в результате культуру бактерий применяли для конструирования животной модели.
Формула для среды LB (Лурия-Бертани) была следующей: триптон 10 г/л, дрожжевой экстракт 5 г/л, NaCl 10 г/л, Ph 7,4. Твердая LB среда: добавляли 15 грамм агарозы в 1 л жидкой среды LB, растворяли при нагревании и среду разливали на чашки перед охлаждением.
| Таблица 1 Биохимическая характеризация Enterobacter cloacae B29 с системой VITEK 2 ID-GN |
||||||
| Лунка | Аббревиатура | Испытание | Результат | |||
| 2 | APPA | Ala-Phe-Pro-Ариламидаза | - | |||
| 3 | ADO | Адонит | + | |||
| 4 | PyrA | L-Пиролидонил-ариламидаза | - | |||
| 5 | lARL | L-Арабит | - | |||
| 7 | dCEL | D-Целлобиоза | + | |||
| 9 | BGAL | β-d-Галактозидаза | + | |||
| 10 | H2S | Выработка H2S | - | |||
| 11 | BNAG | β-Ν-ацетил-глюкозаминидаза | + | |||
| 12 | AGLTp | Глутамилариламидаза pNA | - | |||
| 13 | dGLU | D-Глюкоза | + | |||
| 14 | GGT | γ-Глутамилтрансфераза | - | |||
| 15 | OFF | Ферментация глюкозы | + | |||
| 17 | BGLU | β-Глюкозидаза | (-) | |||
| 18 | dMAL | D-Мальтоза | + | |||
| 19 | dMAN | D-Маннит | + | |||
| 20 | dMNE | D-Манноза | + | |||
| 21 | BXYL | β-Ксилозидаза | + | |||
| 22 | BAlap | β-Аланин ариламидаза pNA | - | |||
| 23 | ProA | L- Пролин-ариламидаза | + | |||
| 26 | LIP | Липаза | - | |||
| 27 | PLE | Палатиноза | + | |||
| 29 | TyrA | Тирозин-ариламидаза | + | |||
| 31 | URE | Уреаза | - | |||
| 32 | dSOR | D-Сорбит | + | |||
| 33 | SAC | Сахароза | + | |||
| 34 | dTAG | D-Тагатоза | - | |||
| 35 | dTRE | D-Трегалоза | + | |||
| 36 | CIT | Соль лимонной кислоты (натрий) | + | |||
| 37 | MNT | Соли малоновой кислоты | + | |||
| 39 | 5KG | 5-Кето-глюкозид | - | |||
| 40 | lLATk | Алканизация L-лактата | + | |||
| 41 | AGLU | α-Глюкоза | (-) | |||
| 42 | SUCT | Алканизация сукцината | + | |||
| 43 | NAGA | N-Ацетил-β-d-галактоза аммиаклиаза | + | |||
| 44 | AGAL | α- Галактоза глюкозидный фермент | + | |||
| 45 | PHOS | Фосфатаза | - | |||
| 46 | GlyA | Глицинариламидаза | + | |||
| 47 | ODC | Метиндекарбоксилаза | + | |||
| 48 | LDC | Лизин-декарбоксилаза | - | |||
| 53 | lHISa | Усвоение гистидина | - | |||
| 56 | CMT | Кумарат | - | |||
| 57 | BGUR | β- Глюкуронидаза | - | |||
| 58 | 0129R | O/129 устойчивость | + | |||
| 59 | GGAA | Glu-Gly-Arg-Ариламидаза | - | |||
| 61 | lMLTa | Усвоение L- малата | - | |||
| 62 | ELLM | ELLMAN | - | |||
| 64 | lLATa | Усвоение L-лактата | - | |||
ПРИМЕР 3
Стабильная колонизация B29 в кишечнике аксенической мыши
Во время эксперимента свежие экскременты образцы отбирали каждые две недели, незамедлительно взвешивали и разбавляли 1:10 в стерильном 0,01М PBS. Буфер PBS был приготовлен в соответствии со следующей формулой: 135 мМ NaCl, 2,7 мМ KCl, 1,5 мМ KH2PO4 и 8 мМ K2HPO4, pH 7,2. Отбирали 100 мкл суспензии и разливали ее на LB чашки, культивировали при 37°C в течение 16 часов перед подсчетом колоний. Результаты продемонстрировали, что в течение периода эксперимента (недели 0-16) все модельные мыши (т.е. HDF+B29) и мыши NCD+B29 вырабатывали экскременты, которые содержали Enterobacter cloacae B29 с концентрацией 1010-1012 бактерий на грамм влажных экскрементов. Этот результат продемонстрировал, что Enterobacter cloacae B29 может стабильно колонизировать кишечник аксенических мышей после только одного инокулирования (фиг. 1).
ПРИМЕР 4
Штамм B29 индуцирует ожирение и резистентность к инсулину в мышах, подвергаемых кормлению с питанием с высоким содержанием жира.
Во время эксперимента массу тела каждой мыши точно измеряли с электронными весами (d=0,01) раз в неделю. В неделю 16 мышей орально вводили глюкозу (2 г/кг массы тела) после 5 часов голодания. Непосредственно перед введением глюкозы (0 минут) и через 15, 30, 60 и 120 минут после введения глюкозы отбирали кровь из хвостовой вены и незамедлительно измеряли уровни глюкозы в крови измерителем глюкозы в крови от Roche. Эти экспериментальные точки применяли для расчета теста устойчивости глюкозы в крови. Через 120 минут после введения глюкозы 50 мкл крови отбирали из ретроорбитальной вены, оставляли при комнатной температуре в течение одного часа; собирали сыворотку центрифугированием при 3000 об/мин в течение 15 минут; и измеряли уровни инсулина в крови посредством ELISA (Mercodia, Уппсала, Швеция). Эта экспериментальная точка представляет уровень инсулина через два часа после питания. В конце недели 16 мышей вскрывали, следуя следующим процедурам. Сначала делали изображения вскрытой брюшной полости с масштабной линейкой в качестве маркера на двух показательных мышах из каждой группы; впоследствии эпидидимальные жировые скопления, мезентериальные жировые скопления, паховые подкожные жировые скопления и периренальные жировые скопления мыши из каждой группы собирали и точно взвешивали. Выполняли статистические анализы и результаты выражали как среднее ±S.E.M, используя однофакторный дисперсионный анализ (post Hoc) в качестве анализа статистической достоверности (критерий множественного сравнения Turkey, SPSS 17.0). Результаты показаны на фиг. 2.
Результаты продемонстрировали, что модельные мыши, которых подвергали кормлению с питанием с высоким содержанием жира и которые получали инокулирование Enterobacter cloacae B29, проявляли значительно более высокую массу тела, чем другие три контрольные группы. В конце 16 недели, модельные мыши демонстрировали фенотип с очень заметным ожирением. В добавление, результаты из эпидидимальных жировых скоплений, мезентериальных жировых скоплений, паховых подкожных жировых скоплений и периренальных жировых скоплений демонстрировали, что модельные мыши, получающие питание с высоким содержанием жира и инокулирование Enterobacter cloacae B29, имели очень значимые увеличения массы в основных жировых скоплениях тела мышей. Изображения абдоминальной диссекции демонстрировали, что масса тела группы модельных мышей и абдоминальные накопления жира были заметно больше, чем у других групп. В заключение, глюкозная устойчивость модельной группы мышей была явно значительно ниже, чем у других групп, тогда как уровни инсулина после двух часов после питания были значительно более высокими в модельной группе по сравнению с другой контрольной группой.
ПРИМЕР 4
Эффекты Enterobacter cloacae B29 на уровень воспаления у мышей, подвергаемых кормлению с питанием с высоким содержанием жира
Для того чтобы продемонстрировать эффекты Enterobacter cloacae B29 на уровень воспаления у мышей, подвергаемых кормлению с питанием с высоким содержанием жира, измеряли концентрации сывороточного липополисахарид-связывающего белка (LBP), сывороточного амилоидного белка A (SAA) и адипонектина. Уровни экспрессии гена воспалительных факторов в печени, эпидидимальные скопления жира и ткани тощей кишки также количественно определяли. Результаты показаны на фиг. 3.
Уровень LBP в модели ожирения мышей (HFD+B29) был значительно более высоким, чем уровень у других групп, несмотря на то, что количества B29 в кишечнике мышей, подвергаемых кормлению с нормальным питанием, сильно превышали все другие группы. Так как B29 являлась только LPS-продуцирующей бактерией, значительное возрастание уровня эндотоксина в сыворотках модельных мышей могло происходить только от B29. Значительное возрастание уровня эндотоксина в сыворотке будет приводить в результате к системному воспалению, что в свою очередь приводит к резистентности к инсулину и другим симптомам метаболического нарушения. Модель ожирения мышей продемонстрировала значительное возрастание уровня SAA и значительное снижение уровня адипонектина, что подтверждает значительное возрастание системного воспаления. Результат уровней экспрессии генов воспалительных факторов в печени, эпидидимальных скоплениях жира и ткани тощей кишки продемонстрировал, что модель ожирения мышей имела наивысший уровень экспрессии Tnfα, IL-1β, IL-6, ΙΚΚ-ε и TLR4.
Таким образом, в модели ожирения мышей, которая создана на основе этого применения, сывороточный уровень LBP и сывороточный уровень SAA возрастали значительно по сравнению с тремя контрольными группами, уровень адипонектина понижался значительно по сравнению с тремя контрольными группами и локальные тканевые уровни экспрессии провоспалительных генов повышались значительно по сравнению с тремя контрольными группами.
В применяемом в данном документе значении формы единственного числа включают формы множественного числа, если контекст не указывает однозначно на обратное. Если однозначно не указано обратное, все технические и научные термины, применяемые в данном документе, имеют те же значения, как обычно понимает специалист в данной области. Ничего в данном открытии не должно рассматриваться как допущение того, что варианты осуществления, описанные в этом открытии, не имеют право иметь приоритет такого открытия на основании предшествующего открытия. В применяемом в данном документе значении термин "содержащий" означает "включающий, но неограниченный".
В добавление, когда свойства или объекты открытия описаны посредством групп Маркуша, специалист в данной области распознает, что открытие также тем самым описано посредством любого индивидуального члена или подгрупп членов групп Маркуша.
Как поймет специалист в данной области для любой и всех целей, такой как посредством предоставления письменного описания, все диапазоны, раскрытые в данном документе, также охватывают любой и все возможные поддиапазоны и комбинации их поддиапазонов. Любой приведенный диапазон может быть легко распознан как достаточное описание и позволение того, чтобы тот же диапазон был разделен на по меньшей мере одинаковые половины, трети, четверти, пятые части, десятые части и т.д. В качестве неграничивающего примера каждый диапазон, рассматриваемый в данном документе, может легко быть разделен на меньшую треть, среднюю и большую треть и т.д. Как поймет специалист в данной области все формулировки, такие как "вплоть до", "по меньшей мере" и подобные, включают приведенное количество и относятся к диапазонам, которые могут быть впоследствии разделены на поддиапазоны, как рассмотрено выше. В заключение, как поймет специалист в данной области, диапазон содержит каждый отдельный член. Таким образом, например, группа, имеющая 1-3 клетки, относится к группам, имеющим 1, 2 или 3 клетки. Подобным образом, группа, имеющая 1-5 клеток, относится к группам, имеющим 1, 2, 3, 4 или 5 клеток и так далее.
В вышеприведенном следует принимать во внимание, что различные варианты осуществления данного открытия были описаны в данном документе в целях иллюстрации и что различные модификации могут быть осуществлены без выхода за рамки объема и основной идеи данного открытия. Соответственно, подразумевается, что различные варианты осуществления, раскрытые в данном документе, не являются ограничивающими, при этом рамки объема и основной идеи указаны посредством последующей формулы изобретения.
Claims (10)
1. Способ получения модели ожирения животного, содержащий
инокулирование аксенического животного бактерией Enterobacter cloacae, имеющей ген 16S рРНК, для получения инокулированного животного, где последовательность гена 16S рРНК представляет собой SEQ ID NO.1; и
кормление инокулированного животного кормом, имеющим 34,9% содержания жира, в течение по крайней мере четырех недель для получения модели ожирения животного.
2. Способ по п.1, в котором модель ожирения животного проявляет метаболический синдром.
3. Способ по п.2, в котором метаболический синдром включает ожирение, инсулиновую резистентность, хроническое воспаление или их комбинацию.
4. Способ по п.1, в котором модель ожирения животного, не являющаяся человеком, является мышью, крысой, кроликом, обезьяной, свиньей или морской свинкой.
5. Способ по п.1, в котором инокулирование аксенического животного включает внутрижелудочное введение, местное введение, оральное введение или их комбинацию.
6. Способ по п.1, в котором инокулирование аксенического животного включает инокулирование аксенического животного по меньшей мере с 102 клеток бактерий.
7. Способ по п.1, в котором в корме содержится по меньшей мере 4,5 ккал на грамм.
8. Способ по п.1, в котором Enterobacter cloacae способна к колонизированию кишечника аксенического животного.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201210280927.6A CN102792919B (zh) | 2012-08-08 | 2012-08-08 | 悉生动物肥胖模型的构建方法及其应用 |
| CN201210280927.6 | 2012-08-08 | ||
| PCT/CN2013/080589 WO2014023178A1 (en) | 2012-08-08 | 2013-08-01 | Obesity animal model and methods for making and using thereof |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2015108075A RU2015108075A (ru) | 2016-09-27 |
| RU2644204C2 true RU2644204C2 (ru) | 2018-02-08 |
Family
ID=47192426
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2015108075A RU2644204C2 (ru) | 2012-08-08 | 2013-08-01 | Способ получения модели ожирения животного |
Country Status (16)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US10130080B2 (ru) |
| EP (1) | EP2882283A4 (ru) |
| JP (1) | JP2015531593A (ru) |
| KR (1) | KR20150040305A (ru) |
| CN (1) | CN102792919B (ru) |
| AU (1) | AU2013302036B2 (ru) |
| BR (1) | BR112015002610A2 (ru) |
| CA (1) | CA2880309C (ru) |
| HK (1) | HK1208993A1 (ru) |
| IL (1) | IL236980B (ru) |
| MX (1) | MX2015001658A (ru) |
| MY (1) | MY169265A (ru) |
| RU (1) | RU2644204C2 (ru) |
| SG (1) | SG11201500785TA (ru) |
| WO (1) | WO2014023178A1 (ru) |
| ZA (1) | ZA201500910B (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2709781C1 (ru) * | 2019-10-21 | 2019-12-20 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Новгородский государственный университет имени Ярослава Мудрого" | Способ моделирования ожирения у травоядных животных |
Families Citing this family (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102792919B (zh) | 2012-08-08 | 2015-09-09 | 上海交通大学 | 悉生动物肥胖模型的构建方法及其应用 |
| JP2015535227A (ja) * | 2012-10-26 | 2015-12-10 | エフ・ホフマン−ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト | Ｓｙｋの３，４−二置換１ｈ−ピラゾール及び４，５−二置換チアゾール阻害剤 |
| ES2616509T3 (es) * | 2013-03-28 | 2017-06-13 | Nestec S.A. | Trimetilamina como biomarcador de la eficacia prebiótica para la prevención de la ganancia de peso |
| CN103782955A (zh) * | 2013-12-25 | 2014-05-14 | 湖南师范大学 | 一种sd大鼠营养性肥胖模型的建立方法 |
| CN106755024B (zh) * | 2015-11-20 | 2020-06-09 | 中国农业大学 | 猪LepR基因敲除打靶载体、其构建方法及应用 |
| CN105594661A (zh) * | 2016-01-20 | 2016-05-25 | 上海市中医医院 | 一种骨髓抑制小鼠模型的建立方法 |
| KR101889753B1 (ko) * | 2016-09-27 | 2018-08-20 | 가천대학교 산학협력단 | 지방이상증 동물모델과 그 제작방법 및 이를 이용한 지방이상증 치료제의 스크리닝 방법 |
| CN106591458A (zh) * | 2016-12-23 | 2017-04-26 | 深圳市前海金卓生物技术有限公司 | 生物饲料活性度的评价方法 |
| CN110157771A (zh) * | 2019-05-30 | 2019-08-23 | 四川省旺达饲料有限公司 | 一种以猪肠道菌群为靶标的发酵豆粕活性度体内外评价方法 |
| CN110199952B (zh) * | 2019-07-16 | 2021-05-28 | 江西中医药大学 | 一种用于女性肥胖研究的动物模型构建方法及其应用 |
| CN110982757B (zh) * | 2019-12-30 | 2021-04-06 | 浙江工业大学 | 阴沟肠杆菌zjph1903及应用 |
| CN112056272A (zh) * | 2020-09-16 | 2020-12-11 | 华中农业大学 | 一种评价甜味剂摄入对小鼠影响的方法 |
| CN113812378B (zh) * | 2021-09-29 | 2023-02-03 | 湖北天勤生物技术研究院有限公司 | 一种食蟹猴肥胖症模型的建立方法及其应用 |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE1154146B (de) | 1956-11-06 | 1963-09-12 | Servo Corp Of America | Vorrichtung zum Feststellen der Erwaermung von Achslagerkaesten |
| EP1473370A3 (en) * | 2003-04-24 | 2005-03-09 | BioMerieux, Inc. | Genus, group, species and/or strain specific 16S rDNA Sequences |
| JPWO2006030792A1 (ja) * | 2004-09-17 | 2008-05-15 | 萬有製薬株式会社 | 非アルコール性脂肪性肝炎病態モデル動物 |
| PL2808024T3 (pl) * | 2009-06-19 | 2019-09-30 | Dupont Nutrition Biosciences Aps | Bifidobakterie do leczenia zastoinowej niewydolności serca |
| EP2459203B1 (en) * | 2009-07-30 | 2018-10-31 | DuPont Nutrition Biosciences ApS | Lactic acid bacteria and bifidobacteria for treating endotoxemia |
| US8748123B2 (en) * | 2009-12-15 | 2014-06-10 | 73100-Setenta e Tres Mil e Cem, Lda. | Fucose-containing bacterial biopolymer |
| WO2012024638A2 (en) | 2010-08-20 | 2012-02-23 | New York University | Compositions and methods for treating obesity and related disorders by characterizing and restoring mammalian bacterial microbiota |
| CN102792919B (zh) | 2012-08-08 | 2015-09-09 | 上海交通大学 | 悉生动物肥胖模型的构建方法及其应用 |
-
2012
- 2012-08-08 CN CN201210280927.6A patent/CN102792919B/zh active Active
-
2013
- 2013-08-01 RU RU2015108075A patent/RU2644204C2/ru active
- 2013-08-01 SG SG11201500785TA patent/SG11201500785TA/en unknown
- 2013-08-01 AU AU2013302036A patent/AU2013302036B2/en active Active
- 2013-08-01 JP JP2015525718A patent/JP2015531593A/ja active Pending
- 2013-08-01 KR KR20157004602A patent/KR20150040305A/ko not_active Application Discontinuation
- 2013-08-01 BR BR112015002610A patent/BR112015002610A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2013-08-01 CA CA2880309A patent/CA2880309C/en active Active
- 2013-08-01 WO PCT/CN2013/080589 patent/WO2014023178A1/en active Application Filing
- 2013-08-01 US US14/420,410 patent/US10130080B2/en active Active
- 2013-08-01 EP EP13827097.0A patent/EP2882283A4/en not_active Withdrawn
- 2013-08-01 MY MYPI2015700341A patent/MY169265A/en unknown
- 2013-08-01 MX MX2015001658A patent/MX2015001658A/es active IP Right Grant
-
2015
- 2015-01-29 IL IL236980A patent/IL236980B/en active IP Right Grant
- 2015-02-09 ZA ZA2015/00910A patent/ZA201500910B/en unknown
- 2015-10-05 HK HK15109716.7A patent/HK1208993A1/xx unknown
Non-Patent Citations (6)
| Title |
|---|
| CANI P. et al. Metabolic endotoxemia initiates obesity and insulin resistance // Diabetes, 2007, vol. 56, no. 7, pp. 1761-1772. * |
| CANI P. et al. Metabolic endotoxemia initiates obesity and insulin resistance // Diabetes, 2007, vol. 56, no. 7, pp. 1761-1772. База данных GenBank: * |
| PETERSON JW. Bacterial Pathogenesis. In: Baron S, editor. Medical Microbiology. 4th edition. Galveston (TX): University of Texas Medical Branch at Galveston; 1996. Chapter 7, с. 1-20. Найдено Онлайн: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK8526/?report=reader. ШЕНДЕРОВ Б.А. Медицинская микробная экология и функциональное питание. Том II: Социально-экологические и клинические последствия дисбаланса микробной экологии человека и животных. - М.: Издательство ГРАНТЪ, 1998, с. 127-130. * |
| База данных GenBank: EF179819, 16.03.2008 * |
| База данных GenBank: PETERSON JW. Bacterial Pathogenesis. In: Baron S, editor. Medical Microbiology. 4th edition. Galveston (TX): University of Texas Medical Branch at Galveston; 1996. Chapter 7, с. 1-20. * |
| Найдено Онлайн: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK8526/?report=reader. ШЕНДЕРОВ Б.А. Медицинская микробная экология и функциональное питание. Том II: Социально-экологические и клинические последствия дисбаланса микробной экологии человека и животных. - М.: Издательство ГРАНТЪ, 1998, с. 127-130. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2709781C1 (ru) * | 2019-10-21 | 2019-12-20 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Новгородский государственный университет имени Ярослава Мудрого" | Способ моделирования ожирения у травоядных животных |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CA2880309C (en) | 2018-10-23 |
| AU2013302036A1 (en) | 2015-02-19 |
| EP2882283A4 (en) | 2016-03-23 |
| JP2015531593A (ja) | 2015-11-05 |
| SG11201500785TA (en) | 2015-02-27 |
| WO2014023178A1 (en) | 2014-02-13 |
| CA2880309A1 (en) | 2014-02-13 |
| AU2013302036B2 (en) | 2017-04-20 |
| BR112015002610A2 (pt) | 2018-07-31 |
| KR20150040305A (ko) | 2015-04-14 |
| IL236980B (en) | 2018-01-31 |
| US10130080B2 (en) | 2018-11-20 |
| RU2015108075A (ru) | 2016-09-27 |
| HK1208993A1 (en) | 2016-03-24 |
| CN102792919A (zh) | 2012-11-28 |
| US20150208620A1 (en) | 2015-07-30 |
| MY169265A (en) | 2019-03-20 |
| CN102792919B (zh) | 2015-09-09 |
| EP2882283A1 (en) | 2015-06-17 |
| ZA201500910B (en) | 2016-10-26 |
| MX2015001658A (es) | 2015-07-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2644204C2 (ru) | Способ получения модели ожирения животного | |
| US11197901B2 (en) | Active substance of Lactobacillus paracasei GKS6, a composition comprising thereof and its use for promoting longevity | |
| TWI572354B (zh) | 抑制發炎之組成物 | |
| US10405569B2 (en) | Lanctobacillus plantarum HAC01 strain having anti-inflammatory efficacy and metabolic disease alleviating efficacy and use thereof | |
| ES2708450T3 (es) | Bacterias ácido lácticas y bifidobacterias para tratar endotoxemia | |
| JP2009269906A (ja) | 抗炎症活性を有するラクトバチルス分離株及びそれらの利用 | |
| JP6949906B2 (ja) | 長寿促進のための、ラクトバチルス・プランタルムｇｋｍ３の活性物質、それを含む組成物、およびその使用 | |
| JP2009242431A (ja) | 加齢に伴う代謝異常症の予防・改善・治療剤 | |
| TW201705969A (zh) | 新穎馬利乳酸桿菌ａｐｓ１及其用途 | |
| Sun et al. | Lactobacillus paracasei L9 ameliorated obesity-associated metabolic parameters and relevant gut microbiota in mice fed a high-fat diet | |
| WO2017061353A1 (ja) | スクロース摂取による血糖値上昇を抑制する物質の評価方法、スクリーニング方法及び製造方法 | |
| von Scholten et al. | Aetiological factors behind adipose tissue inflammation: an unexplored research area | |
| JP5155960B2 (ja) | 加齢に伴う代謝異常疾患の予防・改善・治療剤 | |
| EP3763829A1 (en) | Nanovesicles derived from enhydrobacter bacteria, and use thereof | |
| JP2015096555A (ja) | 加齢に伴う代謝異常疾患の予防・改善・治療剤 | |
| JP5592439B2 (ja) | 加齢に伴う代謝異常疾患の予防・改善・治療剤 | |
| JP5466268B2 (ja) | 加齢に伴う代謝異常症の予防・改善・治療剤 | |
| CN116270752A (zh) | Parasutterella菌属在制备治疗肥胖及其相关代谢疾病的产品中的应用 | |
| JP5804579B2 (ja) | 加齢に伴う代謝異常疾患の予防・改善・治療剤 | |
| CN115989848A (zh) | 一种酶组合物应用于制备防止肉鸡霉菌毒素中毒的饲料 | |
| CN118203603A (zh) | 一种后生元及其在调节脂代谢方向的应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| HZ9A | Changing address for correspondence with an applicant |