RU2628536C2 - Получение и применение бактериального гистамина - Google Patents
Получение и применение бактериального гистамина Download PDFInfo
- Publication number
- RU2628536C2 RU2628536C2 RU2014106509A RU2014106509A RU2628536C2 RU 2628536 C2 RU2628536 C2 RU 2628536C2 RU 2014106509 A RU2014106509 A RU 2014106509A RU 2014106509 A RU2014106509 A RU 2014106509A RU 2628536 C2 RU2628536 C2 RU 2628536C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- histamine
- histidine
- strain
- production
- strains
- Prior art date
Links
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 438
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 title claims abstract description 219
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 70
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 title claims abstract description 24
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 84
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 71
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 64
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 claims abstract description 42
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 claims abstract description 42
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 36
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 26
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims abstract description 25
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 claims abstract description 21
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 claims abstract description 21
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 19
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 claims abstract description 13
- 230000004968 inflammatory condition Effects 0.000 claims abstract description 7
- 241000186604 Lactobacillus reuteri Species 0.000 claims description 72
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 70
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 30
- 206010009887 colitis Diseases 0.000 claims description 19
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 16
- 150000002411 histidines Chemical class 0.000 claims description 15
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 14
- 229940001882 lactobacillus reuteri Drugs 0.000 claims description 14
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 11
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 claims description 11
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 11
- 208000002551 irritable bowel syndrome Diseases 0.000 claims description 11
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 claims description 11
- 210000000214 mouth Anatomy 0.000 claims description 9
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 9
- 238000012216 screening Methods 0.000 claims description 8
- 238000010187 selection method Methods 0.000 claims description 8
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 7
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 claims description 5
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 claims description 5
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 claims description 4
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 claims description 3
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 claims description 3
- 206010013554 Diverticulum Diseases 0.000 claims description 2
- 206010046914 Vaginal infection Diseases 0.000 claims description 2
- 201000008100 Vaginitis Diseases 0.000 claims description 2
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 claims description 2
- 208000007565 gingivitis Diseases 0.000 claims description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 34
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 5
- 230000002265 prevention Effects 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 description 64
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 62
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 61
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 56
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 48
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 48
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 32
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 description 27
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 20
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 20
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 19
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 19
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 19
- 102000019149 MAP kinase activity proteins Human genes 0.000 description 17
- 108040008097 MAP kinase activity proteins Proteins 0.000 description 17
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 17
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 17
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 17
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 14
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 14
- 230000006433 tumor necrosis factor production Effects 0.000 description 14
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 13
- 229940124647 MEK inhibitor Drugs 0.000 description 13
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 13
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 13
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 13
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 13
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 13
- NHJVRSWLHSJWIN-UHFFFAOYSA-N 2,4,6-trinitrobenzenesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C1=C([N+]([O-])=O)C=C([N+]([O-])=O)C=C1[N+]([O-])=O NHJVRSWLHSJWIN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 102000008130 Cyclic AMP-Dependent Protein Kinases Human genes 0.000 description 11
- 108010049894 Cyclic AMP-Dependent Protein Kinases Proteins 0.000 description 11
- 101100442557 Lactobacillus sp. (strain 30a) hdcA gene Proteins 0.000 description 11
- 102100031480 Dual specificity mitogen-activated protein kinase kinase 1 Human genes 0.000 description 10
- 101710146526 Dual specificity mitogen-activated protein kinase kinase 1 Proteins 0.000 description 10
- 102000054727 Serum Amyloid A Human genes 0.000 description 10
- 108700028909 Serum Amyloid A Proteins 0.000 description 10
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 9
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 9
- 229960005263 bucladesine Drugs 0.000 description 9
- CJGYSWNGNKCJSB-YVLZZHOMSA-N bucladesine Chemical compound C([C@H]1O2)OP(O)(=O)O[C@H]1[C@@H](OC(=O)CCC)[C@@H]2N1C(N=CN=C2NC(=O)CCC)=C2N=C1 CJGYSWNGNKCJSB-YVLZZHOMSA-N 0.000 description 9
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 9
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 9
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 9
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 8
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 8
- 102000000543 Histamine Receptors Human genes 0.000 description 8
- 108010002059 Histamine Receptors Proteins 0.000 description 8
- 108010014095 Histidine decarboxylase Proteins 0.000 description 8
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 8
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 8
- 239000003636 conditioned culture medium Substances 0.000 description 8
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 8
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 8
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 8
- 102100037095 Histidine decarboxylase Human genes 0.000 description 7
- 101000831567 Homo sapiens Toll-like receptor 2 Proteins 0.000 description 7
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 7
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 7
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 7
- 102100024193 Mitogen-activated protein kinase 1 Human genes 0.000 description 7
- 102100024333 Toll-like receptor 2 Human genes 0.000 description 7
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 7
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 7
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 7
- 229940044551 receptor antagonist Drugs 0.000 description 7
- 239000002464 receptor antagonist Substances 0.000 description 7
- 230000008054 signal transmission Effects 0.000 description 7
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 7
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 7
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 7
- 108090000084 Antiporters Proteins 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 6
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 6
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 6
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 description 6
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 6
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 6
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 6
- 208000031261 Acute myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 5
- 102000003669 Antiporters Human genes 0.000 description 5
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 5
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 5
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 5
- 102100033732 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 1A Human genes 0.000 description 5
- 101710187743 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 1A Proteins 0.000 description 5
- 230000009471 action Effects 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 5
- 230000008859 change Effects 0.000 description 5
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 5
- 230000036541 health Effects 0.000 description 5
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 5
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 5
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 5
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 5
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 5
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 5
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 5
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 4
- ZKZXNDJNWUTGDK-NSCUHMNNSA-N (E)-N-[2-(4-bromocinnamylamino)ethyl]isoquinoline-5-sulfonamide Chemical compound C1=CC(Br)=CC=C1\C=C\CNCCNS(=O)(=O)C1=CC=CC2=CN=CC=C12 ZKZXNDJNWUTGDK-NSCUHMNNSA-N 0.000 description 4
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 4
- ZCVMWBYGMWKGHF-UHFFFAOYSA-N Ketotifene Chemical compound C1CN(C)CCC1=C1C2=CC=CC=C2CC(=O)C2=C1C=CS2 ZCVMWBYGMWKGHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000043136 MAP kinase family Human genes 0.000 description 4
- 108091054455 MAP kinase family Proteins 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 208000033776 Myeloid Acute Leukemia Diseases 0.000 description 4
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 4
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 4
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 4
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 4
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 4
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 4
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 4
- 239000003485 histamine H2 receptor antagonist Substances 0.000 description 4
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 4
- CGIGDMFJXJATDK-UHFFFAOYSA-N indomethacin Chemical compound CC1=C(CC(O)=O)C2=CC(OC)=CC=C2N1C(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 CGIGDMFJXJATDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 4
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 4
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 4
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 4
- 229960004958 ketotifen Drugs 0.000 description 4
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 4
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 4
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 4
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 4
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 4
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 4
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 4
- 238000005173 quadrupole mass spectroscopy Methods 0.000 description 4
- 229960000620 ranitidine Drugs 0.000 description 4
- VMXUWOKSQNHOCA-LCYFTJDESA-N ranitidine Chemical compound [O-][N+](=O)/C=C(/NC)NCCSCC1=CC=C(CN(C)C)O1 VMXUWOKSQNHOCA-LCYFTJDESA-N 0.000 description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 4
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 4
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 3
- 241000792859 Enema Species 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000186679 Lactobacillus buchneri Species 0.000 description 3
- 241000186685 Lactobacillus hilgardii Species 0.000 description 3
- 102000004232 Mitogen-Activated Protein Kinase Kinases Human genes 0.000 description 3
- 108090000744 Mitogen-Activated Protein Kinase Kinases Proteins 0.000 description 3
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 3
- 239000002033 PVDF binder Substances 0.000 description 3
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 3
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 3
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 3
- 150000001491 aromatic compounds Chemical class 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 238000006114 decarboxylation reaction Methods 0.000 description 3
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 3
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 3
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 3
- 239000007920 enema Substances 0.000 description 3
- 229940095399 enema Drugs 0.000 description 3
- 244000005709 gut microbiome Species 0.000 description 3
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 3
- 238000002826 magnetic-activated cell sorting Methods 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 3
- 239000006872 mrs medium Substances 0.000 description 3
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000008447 perception Effects 0.000 description 3
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 3
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 125000001308 pyruvoyl group Chemical group O=C([*])C(=O)C([H])([H])[H] 0.000 description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000014101 wine Nutrition 0.000 description 3
- AKXKFZDCRYJKTF-UHFFFAOYSA-N 3-Hydroxypropionaldehyde Chemical compound OCCC=O AKXKFZDCRYJKTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000004998 Abdominal Pain Diseases 0.000 description 2
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 2
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 2
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 2
- 206010002198 Anaphylactic reaction Diseases 0.000 description 2
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 2
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 2
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 2
- 102100035067 Folylpolyglutamate synthase, mitochondrial Human genes 0.000 description 2
- 108091006027 G proteins Proteins 0.000 description 2
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 2
- 102000030782 GTP binding Human genes 0.000 description 2
- 108091000058 GTP-Binding Proteins 0.000 description 2
- 101000611183 Homo sapiens Tumor necrosis factor Proteins 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- 208000005374 Poisoning Diseases 0.000 description 2
- 239000012979 RPMI medium Substances 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 108030007214 Tetrahydrofolate synthases Proteins 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108060008683 Tumor Necrosis Factor Receptor Proteins 0.000 description 2
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 2
- 238000000516 activation analysis Methods 0.000 description 2
- 239000013566 allergen Substances 0.000 description 2
- 230000036783 anaphylactic response Effects 0.000 description 2
- 208000003455 anaphylaxis Diseases 0.000 description 2
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 description 2
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 2
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 2
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 2
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 2
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 229960001380 cimetidine Drugs 0.000 description 2
- CCGSUNCLSOWKJO-UHFFFAOYSA-N cimetidine Chemical compound N#CNC(=N/C)\NCCSCC1=NC=N[C]1C CCGSUNCLSOWKJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 238000000586 desensitisation Methods 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 238000001425 electrospray ionisation time-of-flight mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 235000021107 fermented food Nutrition 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 description 2
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 2
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 2
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 108091008053 gene clusters Proteins 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 238000005469 granulation Methods 0.000 description 2
- 230000003179 granulation Effects 0.000 description 2
- 230000007407 health benefit Effects 0.000 description 2
- 238000005570 heteronuclear single quantum coherence Methods 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000007366 host health Effects 0.000 description 2
- 102000057041 human TNF Human genes 0.000 description 2
- 235000020256 human milk Nutrition 0.000 description 2
- 210000004251 human milk Anatomy 0.000 description 2
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 2
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 2
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 description 2
- 229960000905 indomethacin Drugs 0.000 description 2
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000008991 intestinal motility Effects 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 2
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 2
- 239000002829 mitogen activated protein kinase inhibitor Substances 0.000 description 2
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 2
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 2
- 210000000066 myeloid cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 2
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 2
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 2
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 2
- 231100000572 poisoning Toxicity 0.000 description 2
- 230000000607 poisoning effect Effects 0.000 description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 2
- 229940043437 protein kinase A inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 239000012656 protein kinase A inhibitor Substances 0.000 description 2
- 108010065251 protein kinase modulator Proteins 0.000 description 2
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 2
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 2
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 2
- 235000019722 synbiotics Nutrition 0.000 description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- LOIYMIARKYCTBW-OWOJBTEDSA-N trans-urocanic acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C1=CNC=N1 LOIYMIARKYCTBW-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- LOIYMIARKYCTBW-UHFFFAOYSA-N trans-urocanic acid Natural products OC(=O)C=CC1=CNC=N1 LOIYMIARKYCTBW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 2
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 2
- 102000003298 tumor necrosis factor receptor Human genes 0.000 description 2
- 230000036269 ulceration Effects 0.000 description 2
- 101150084750 1 gene Proteins 0.000 description 1
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BHNQPLPANNDEGL-UHFFFAOYSA-N 2-(4-octylphenoxy)ethanol Chemical compound CCCCCCCCC1=CC=C(OCCO)C=C1 BHNQPLPANNDEGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-GASJEMHNSA-N 2-amino-2-deoxy-D-galactopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 238000005084 2D-nuclear magnetic resonance Methods 0.000 description 1
- 101150092476 ABCA1 gene Proteins 0.000 description 1
- 102000055510 ATP Binding Cassette Transporter 1 Human genes 0.000 description 1
- 108700005241 ATP Binding Cassette Transporter 1 Proteins 0.000 description 1
- 102000011767 Acute-Phase Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010062271 Acute-Phase Proteins Proteins 0.000 description 1
- ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N Ammonium bicarbonate Chemical compound [NH4+].OC([O-])=O ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000013 Ammonium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010003399 Arthropod bite Diseases 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- GAWIXWVDTYZWAW-UHFFFAOYSA-N C[CH]O Chemical group C[CH]O GAWIXWVDTYZWAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004031 Carboxy-Lyases Human genes 0.000 description 1
- 108090000489 Carboxy-Lyases Proteins 0.000 description 1
- 208000005623 Carcinogenesis Diseases 0.000 description 1
- 206010007572 Cardiac hypertrophy Diseases 0.000 description 1
- 208000006029 Cardiomegaly Diseases 0.000 description 1
- 208000002881 Colic Diseases 0.000 description 1
- 206010010774 Constipation Diseases 0.000 description 1
- 206010010904 Convulsion Diseases 0.000 description 1
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 208000027244 Dysbiosis Diseases 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 1
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 1
- 208000004262 Food Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 206010016952 Food poisoning Diseases 0.000 description 1
- 208000019331 Foodborne disease Diseases 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- 206010019233 Headaches Diseases 0.000 description 1
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 1
- 206010019375 Helicobacter infections Diseases 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108050007405 Histidine-histamine antiporter Proteins 0.000 description 1
- 101000946889 Homo sapiens Monocyte differentiation antigen CD14 Proteins 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 241000140561 Hydrogenovibrio halophilus Species 0.000 description 1
- 238000012404 In vitro experiment Methods 0.000 description 1
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 1
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 1
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 description 1
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 1
- 206010022998 Irritability Diseases 0.000 description 1
- 238000012313 Kruskal-Wallis test Methods 0.000 description 1
- 241001222923 Lactobacillus reuteri F275 Species 0.000 description 1
- 101100070264 Lactobacillus sp. (strain 30a) hdcB gene Proteins 0.000 description 1
- 206010067125 Liver injury Diseases 0.000 description 1
- 208000001145 Metabolic Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 101100038261 Methanococcus vannielii (strain ATCC 35089 / DSM 1224 / JCM 13029 / OCM 148 / SB) rpo2C gene Proteins 0.000 description 1
- 244000294411 Mirabilis expansa Species 0.000 description 1
- 235000015429 Mirabilis expansa Nutrition 0.000 description 1
- 102100035877 Monocyte differentiation antigen CD14 Human genes 0.000 description 1
- 208000031662 Noncommunicable disease Diseases 0.000 description 1
- 108020004485 Nonsense Codon Proteins 0.000 description 1
- 208000028571 Occupational disease Diseases 0.000 description 1
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 208000000114 Pain Threshold Diseases 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 208000003251 Pruritus Diseases 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 206010040070 Septic Shock Diseases 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- 108010073771 Soybean Proteins Proteins 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 102000001400 Tryptase Human genes 0.000 description 1
- 108060005989 Tryptase Proteins 0.000 description 1
- 101710187830 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 1B Proteins 0.000 description 1
- 102100033733 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 1B Human genes 0.000 description 1
- 206010048249 Yersinia infections Diseases 0.000 description 1
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 description 1
- 201000000690 abdominal obesity-metabolic syndrome Diseases 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 108060000200 adenylate cyclase Proteins 0.000 description 1
- 102000030621 adenylate cyclase Human genes 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 235000012538 ammonium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001099 ammonium carbonate Substances 0.000 description 1
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 1
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 210000003651 basophil Anatomy 0.000 description 1
- 235000013405 beer Nutrition 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactosamine Natural products NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011953 bioanalysis Methods 0.000 description 1
- 229940071604 biogaia Drugs 0.000 description 1
- 230000000035 biogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 230000036952 cancer formation Effects 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 231100000504 carcinogenesis Toxicity 0.000 description 1
- 238000012754 cardiac puncture Methods 0.000 description 1
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 230000005754 cellular signaling Effects 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 1
- 210000000795 conjunctiva Anatomy 0.000 description 1
- 239000013256 coordination polymer Substances 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 238000005100 correlation spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 208000035250 cutaneous malignant susceptibility to 1 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 108010016084 cyclopropane synthetase Proteins 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- OLHQOJYVQUNWPL-UHFFFAOYSA-N dimaprit Chemical compound CN(C)CCCSC(N)=N OLHQOJYVQUNWPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 210000001198 duodenum Anatomy 0.000 description 1
- 230000007140 dysbiosis Effects 0.000 description 1
- 230000000138 effect on histamine Effects 0.000 description 1
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 210000001671 embryonic stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000006274 endogenous ligand Substances 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 1
- 210000003038 endothelium Anatomy 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 230000028023 exocytosis Effects 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 235000019985 fermented beverage Nutrition 0.000 description 1
- 235000021001 fermented dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- 235000020932 food allergy Nutrition 0.000 description 1
- 235000012041 food component Nutrition 0.000 description 1
- -1 for example Substances 0.000 description 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 239000006481 glucose medium Substances 0.000 description 1
- 210000002288 golgi apparatus Anatomy 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 230000009931 harmful effect Effects 0.000 description 1
- 101150026550 hdcA gene Proteins 0.000 description 1
- 231100000869 headache Toxicity 0.000 description 1
- 230000008821 health effect Effects 0.000 description 1
- 231100000206 health hazard Toxicity 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 231100000234 hepatic damage Toxicity 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 239000000938 histamine H1 antagonist Substances 0.000 description 1
- 239000003386 histamine H2 receptor agonist Substances 0.000 description 1
- 229960004931 histamine dihydrochloride Drugs 0.000 description 1
- PPZMYIBUHIPZOS-UHFFFAOYSA-N histamine dihydrochloride Chemical compound Cl.Cl.NCCC1=CN=CN1 PPZMYIBUHIPZOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009610 hypersensitivity Effects 0.000 description 1
- 210000003405 ileum Anatomy 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 210000004969 inflammatory cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 238000011396 initial chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 230000030214 innervation Effects 0.000 description 1
- 210000002490 intestinal epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 230000007803 itching Effects 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- 238000011813 knockout mouse model Methods 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000008818 liver damage Effects 0.000 description 1
- 230000007108 local immune response Effects 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 230000023881 membrane protein ectodomain proteolysis Effects 0.000 description 1
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 1
- 235000013536 miso Nutrition 0.000 description 1
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 210000001640 nerve ending Anatomy 0.000 description 1
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 1
- 210000001331 nose Anatomy 0.000 description 1
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 1
- 150000002897 organic nitrogen compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000037040 pain threshold Effects 0.000 description 1
- 230000001314 paroxysmal effect Effects 0.000 description 1
- 102000007863 pattern recognition receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010089193 pattern recognition receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 235000015277 pork Nutrition 0.000 description 1
- 230000007112 pro inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000001902 propagating effect Effects 0.000 description 1
- 238000002731 protein assay Methods 0.000 description 1
- 239000002096 quantum dot Substances 0.000 description 1
- 235000020995 raw meat Nutrition 0.000 description 1
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 1
- 210000003370 receptor cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 210000000664 rectum Anatomy 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- JQXXHWHPUNPDRT-WLSIYKJHSA-N rifampicin Chemical compound O([C@](C1=O)(C)O/C=C/[C@@H]([C@H]([C@@H](OC(C)=O)[C@H](C)[C@H](O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)\C=C\C=C(C)/C(=O)NC=2C(O)=C3C([O-])=C4C)C)OC)C4=C1C3=C(O)C=2\C=N\N1CC[NH+](C)CC1 JQXXHWHPUNPDRT-WLSIYKJHSA-N 0.000 description 1
- 229960001225 rifampicin Drugs 0.000 description 1
- 101150085857 rpo2 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150090202 rpoB gene Proteins 0.000 description 1
- 235000013580 sausages Nutrition 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 229940001941 soy protein Drugs 0.000 description 1
- 235000013555 soy sauce Nutrition 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000013595 supernatant sample Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 210000002504 synaptic vesicle Anatomy 0.000 description 1
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001551 total correlation spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009281 ultraviolet germicidal irradiation Methods 0.000 description 1
- 210000001215 vagina Anatomy 0.000 description 1
- 238000010200 validation analysis Methods 0.000 description 1
- 210000000264 venule Anatomy 0.000 description 1
- 230000009278 visceral effect Effects 0.000 description 1
- 208000009935 visceral pain Diseases 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 1
- 235000013618 yogurt Nutrition 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
- C12Q1/04—Determining presence or kind of microorganism; Use of selective media for testing antibiotics or bacteriocides; Compositions containing a chemical indicator therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
- A23L33/175—Amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
- A61K31/4164—1,3-Diazoles
- A61K31/417—Imidazole-alkylamines, e.g. histamine, phentolamine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
- A61K31/4164—1,3-Diazoles
- A61K31/4172—Imidazole-alkanecarboxylic acids, e.g. histidine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7004—Monosaccharides having only carbon, hydrogen and oxygen atoms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
- A61K35/741—Probiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
- A61K35/741—Probiotics
- A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
- A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/02—Stomatological preparations, e.g. drugs for caries, aphtae, periodontitis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
- A61P15/02—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for disorders of the vagina
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
- G01N33/56911—Bacteria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
- A23V2200/324—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on the immune system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
- A23V2400/173—Reuteri
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K2035/11—Medicinal preparations comprising living procariotic cells
- A61K2035/115—Probiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/09—Lactobacillales, e.g. aerococcus, enterococcus, lactobacillus, lactococcus, streptococcus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
- A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
- A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/195—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from bacteria
- G01N2333/335—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from bacteria from Lactobacillus (G)
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Mycology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
Abstract
Предложенная группа изобретений относится к области медицины. Предложен способ отбора пробиотического молочнокислого бактериального штамма для применения в локальном продуцировании гистамина в млекопитающем. Предложены продукт и композиция для локального продуцирования гистамина в млекопитающем, содержащие молочнокислый бактериальный штамм, имеющий активный оперон гистидина и способный продуцировать гистамин, для применения в лечении и/или профилактике воспалительных состояний. Предложенная группа изобретений обеспечивает локальное продуцирование гистамина в млекопитающем посредством отбора определенных штаммов молочнокислых бактерий. 3 н. и 10 з.п. ф-лы, 9 ил., 2 табл., 5 пр.
Description
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ДАННОЕ ИЗОБРЕТЕНИЕ
Данное изобретение относится к способу отбора специфических пробиотических молочнокислых бактерий, продуцирующих гистамин, и к применению таких штаммов для доставки полезных эффектов для этого хозяина.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Продовольственная и сельскохозяйственная организация Объединенных Наций (ФАО) определяет пробиотики как «живые микроорганизмы, которые после введения в достаточных количествах человеку производят пользу для здоровья (вызывают укрепление здоровья) этого человека». В настоящее время ряд различных бактерий используют в качестве пробиотиков, например, продуцирующие молочную кислоту бактерии, такие как штаммы Lactobacillus и Bifidobacteria.
Продуцирующие молочную кислоту бактерии не только используются вследствие их полезного действия на здоровье человека или животного, но они также широко используются в пищевой промышленности для процессов ферментации. Эффективность пробиотиков является штаммспецифической, и каждый штамм может способствовать здоровью хозяина через различные механизмы. Пробиотики могут предотвращать или ингибировать пролиферацию патогенов, подавлять продуцирование вирулентных факторов патогенами или модулировать иммунную реакцию в провоспалительном или противовоспалительном пути. Применение различных штаммов пробиотических, продуцирующих молочную кислоту бактерий Lactobacillus reuteri является многообещающей терапией для устранения пароксизмальной боли («детской колики»), ослабления экземы, уменьшения приступов профессиональных заболеваний и супрессии инфекции Helicobacter pylori. L. reuteri считается свойственным желудочно-кишечному тракту человека организмом и присутствует, например, на слизистой оболочке гастрального корпуса, гастральной полости, двенадцатиперстной кишки и подвздошной кишки. См., например, патенты США с номерами 5439678, 5458875, 5534253, 5837238 и 5849289.
При выращивании клеток L. reuteri в анаэробных условиях в присутствии глицерина они продуцируют антимикробное вещество, известное как реутерин (β-гидроксипропиональдегид).
Взаимосвязь между хозяином и его микробами является сложной, и для некоторых бактерий эта взаимосвязь хозяин/микроб развивалась на протяжении многих лет ко-эволюции. Это, по-видимому, является особенно верным для Lactobacillus reuteri. Наши знания мутуалистической взаимосвязи между микробами кишечника и человека-хозяина существуют в ее периоде новорожденности, но мы уже в высокой степени осознаем, что микробиом кишечника играет важную роль в развитии кишечника и иммунной системы, питании, и новые звенья устанавливаются между микробиомом кишечника и головным мозгом. Дисбиоз, пертурбация нормального микробиома кишечника, подразумевался в широком диапазоне связанных с заболеваниями процессов, включающих в себя процессы, влияющие на локальную среду кишечника, таких как воспалительная болезнь кишечника (IBD) и синдром раздраженной толстой кишки (слизистый колит) (IBS), и процессы в участках, удаленных от кишечника, такие как метаболический синдром. Существенный терапевтический потенциал лежит в микробиоме кишечника, и прилагается исследование в направлении дальнейшей задачи изменения микрофлоры для предотвращения и/или лечения различных, связанных с заболеванием процессов.
Таким образом, существует необходимость в понимании таких специфических взаимодействий между микробами и человеком, связанных с конкретным заболеванием или другими ситуациями, влияющими на здоровье хозяина таким образом, что большая часть подходящих пробиотических штаммов может быть отобрана и использована для противодействия таким развитиям.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Описанное здесь изобретение обеспечивает локальное продуцирование гистамина в млекопитающих, в частности, в человеке, причем это локальное продуцирование гистамина включает в себя, но не ограничивается ими, продуцирование в GI-тракте (гастроэнтерологическом тракте), мочеполовом тракте (GU), полости рта, в легких и дыхательных путях, на коже и т. д. тела человека посредством отбора определенных штаммов молочнокислых бактерий. Эти бактерии могут доставляться вместе с некоторыми аминокислотами и/или сахарами, вводиться отдельно или уже присутствовать в активном участке.
Первичной целью данного изобретения является отбор (селекция) штаммов, которые могут локально продуцировать гистамин в разнообразных местоположениях, включающих в себя GI-тракт, GU-тракт, полость рта, в легких и дыхательных путях, на коже и т. д. тела человека.
Следующей целью этого изобретения является обеспечение продуктов, содержащих указанные штаммы.
Следующей целью данного изобретения является комбинирование введения бактерий с введением гистидина или содержащих гистидин пищевых продуктов или композиций для гарантии локального генерирования гистамина.
Таким образом, данное изобретение относится к новому способу для отбора клеток молочнокислых бактерий, которые применимы в качестве пробиотиков и в терапии. Этот новый способ предусматривает скрининг и отбор на штаммы молочнокислых бактерий, которые имеют активный оперон гистидина и способны продуцировать гистамин. Неожиданно эти молочнокислые бактериальные штаммы, отобранные таким способом, применимы в качестве пробиотиков и в терапии, в частности, в продуцировании противовоспалительных эффектов, посредством локального продуцирования гистамина. Эти эффекты данных бактерий являются неожиданными, как обсуждается в другом месте здесь, и ранее присутствие в пищевых продуктах бактерий, продуцирующих гистамин, активно избегалось вследствие узнаваемого риска для здоровья, например, потенциальных токсичных эффектов. Так, введение млекопитающему молочнокислых бактерий, способных локально продуцировать гистамин, или фактически скрининг и селекция (отбор) молочнокислых бактерий на такую способность локального продуцирования гистамина на основе присутствия активного оперона гистамина является контринтуитивным относительно такой доктрины. Действительно, ранее никогда не сообщалось, что пробиотики продуцируют гистамин.
Таким образом, в самом широком смысле данное изобретение обеспечивает способ отбора продуцирующего молочную кислоту бактериального штамма для применения в локальном продуцировании гистамина в млекопитающем, где указанный способ предусматривает скрининг бактерий на присутствие активного оперона гистидина и отбор штамма, который имеет активный оперон гистидина и способен продуцировать гистамин.
Оперон гистидина содержит три гена (антипортера гистидина/гистамина, гистидин-декарбоксилазы-пирувоил типа А (HdcA) и гистидин-декарбоксилазы-пирувоил типа В (HdcB)). Считается, что активность каждого из этих генов является важной для данного изобретения. Так, в способах скрининга этого изобретения кандидатные бактерии оценивали на присутствие всех трех генов и отбирали штаммы, положительные в отношении всех трех генов. Любой подходящий способ может быть использован для детектирования присутствия всех трех генов, например, генетические способы, такие как ПЦР. Получение хороших уровней гистамина может быть также индикатором присутствия всех трех генов и присутствия активного оперона гистидина. Таким образом, этот способ отбора данного изобретения включает в себя также стадию отбора штамма, который способен продуцировать гистамин. Предпочтительными являются штаммы с высокими уровнями продуцирования гистамина. Таким образом, в предпочтительных вариантах осуществления штамм отбирают на его способность продуцировать гистамин на уровне, большем чем 200, предпочтительно большем чем 250, или более предпочтительно большем чем 300 пг/мл, например на уровне, большем чем 350, 400, 450 или 500 пг/мл. Такие величины обычно относятся к величинам гистамина, измеренным в супернатанте штаммов в культуре.
Подходящие способы измерения уровней продуцирования гистамина будут хорошо известны лицу с квалификацией в данной области. Здесь приводится в качестве примера и является предпочтительным способ масс-спектрометрии, более конкретно тройной квадрупольной масс-спектрометрии. Однако ELISA или иммуноанализы могут быть равным образом использованы для оценивания и количественного определения продуцирования гистамина. Так, в некоторых вариантах осуществления способ отбора будет включать в себя стадию детектирования количества или уровня гистамина, продуцируемого кандидатным штаммом. Вследствие дальнейших применений штаммов, которые отбирают способами этого изобретения, после отбора или выделения продуцирующих гистамин штаммов другие варианты осуществления будут включать в себя дополнительные способы культивирования или размножения таких штаммов или, возможно, хранения таких штаммов для последующих применений.
Такие дополнительные стадии (и фактически стадии отбора способов этого изобретения) будут обычно необходимыми для проведения в подходящей культуральной среде, которая поддерживает продуцирование гистамина. Предпочтительные культуральные среды будут содержать подходящий источник углерода, который будет поддерживать продуцирование гистамина указанным штаммом. В особенно предпочтительных вариантах осуществления эти среды будут содержать глюкозу в качестве источника углерода и предпочтительно не будут содержать сахарозы или по меньшей мере будут содержать только сахарозу при таком уровне, который не будет значимо ухудшать продуцирование гистамина этим штаммом. Гистидин или аналог гистидина могут быть также обеспечены, необязательно вместе с источниками других аминокислот.
В предпочтительных вариантах осуществления указанным штаммом является штамм Lactobacillus reuteri.
Сразу после отбора подходящего штамма с использованием способа данного изобретения он может быть затем использован для локального продуцирования гистамина в млекопитающем. Таким образом, указанные штаммы способны также к локальному продуцированию гистамина в млекопитающем.
Таким образом, один дополнительный аспект данного изобретения обеспечивает продукт, содержащий клетки штамма молочнокислых бактерий, получаемого способом отбора этого изобретения, где указанный штамм молочнокислых бактерий имеет активный оперон гистидина и способен продуцировать гистамин, для применения в локальном продуцировании гистамина в млекопитающем. Как будет описано в другом месте здесь, предпочтительными применениями являются применения в лечении и/или профилактике воспалительных состояний или в лечении и/или профилактике состояний или заболеваний, которые будут получать пользу от локального продуцирования гистамина. Например, такое локальное продуцирование гистамина может приводить к противовоспалительному эффекту.
Альтернативные варианты осуществления этого изобретения обеспечивают штамм молочнокислых бактерий, который способен продуцировать гистамин, для применения в локальном продуцировании гистамина в млекопитающем, где указанный штамм молочнокислых бактерий имеет активный оперон гистидина. Предпочтительные признаки этого штамма и его применения описаны в другом месте здесь.
Обеспечены также способы лечения или способы локального продуцирования гистамина в млекопитающем, причем указанные способы предусматривают введение продукта, содержащего клетки штамма молочнокислых бактерий, получаемые способом отбора этого изобретения, или введение штамма молочнокислых бактерий, где указанный штамм молочнокислых бактерий имеет активный оперон гистидина и способен продуцировать гистамин, указанному млекопитающему в количестве, эффективном для возможности локального продуцирования гистамина в указанном млекопитающем. Предпочтительные признаки этого штамма и его терапевтические применения описаны здесь в другом месте.
Данное изобретение обеспечивает также применение продукта, содержащего клетки молочнокислых бактерий, получаемые способом отбора этого изобретения, где указанный штамм молочнокислых бактерий имеет активный оперон гистидина и способен продуцировать гистамин, в приготовлении композиции или лекарственного средства для применения в локальном продуцировании гистамина в млекопитающем. Альтернативные варианты осуществления обеспечивают применение штамма молочнокислых бактерий, где указанный штамм молочнокислых бактерий имеет активный оперон гистидина и способен к локальному продуцированию гистамина в млекопитающем. Предпочтительные признаки этого штамма и его терапевтические применения описаны здесь в другом месте.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ФИГУР
Фигура 1 - количественное определение гистамина во фракциях HILIC-HPLC. Использовали тройную квадрупольную масс-спектрометрии для количественного определения гистамина, присутствующего в выбранном диапазоне фракций HILIC-HPLC. TNF-ингибирующие фракции имели наивысшие количества гистамина из всех испытанных фракций.
Фигура 2 - очищенный гистамин и гистамин из L. reuteri 6475 ингибирует продуцирование TNF через H2-рецептор гистамина. A. Очищенный гистамин значимо ингибировал продуцирование TNF, эффект, который блокируется специфическими антагонистами H2-рецепторов зависимым от дозы образом. Кондиционированные среды (или супернатант), содержащие секретированные факторы из штамма 6475 (включающие в себя гистамин), значимо ингибировали продуцирование TNF - эффект, который частично блокируется специфическими антагонистами H2-рецепторов. N=3, p-величина <0,05 в сравнении с контрольной средой, **p-величина <0,05 в сравнении с гистамином, ***p-величина <0,05 в сравнении с кондиционированной средой ATCC 6475 (CM). B. Промывка осадка клеток из штамма 6475, содержащая гистамин, подавляла продуцирование TNF - эффект, который частично блокировался специфическими антагонистами H2-рецепторов. Фракция В3, которая содержит относительно чистый гистамин, ингибировала продуцирование TNF - эффект, который полностью блокировался специфическими антагонистами H2-рецепторов. N=3, p-величина <0,05 в сравнении с контрольной средой, p-величина <0,05 в сравнении с промывкой клеток ATCC 6475 (CP), ***p-величина <0,05 в сравнении с фракцией B3.
Фигура 3 - оперон гистидина является важным для TNF-ингибирующего фенотипа L. reuteri 6475. A. Этот оперон гистидина состоит из трех генов: антипортера гистидина/гистамина, hdcA и hdcB. B. Мутация в любом одном гене в этом опероне гистидина приводит к частичной потере супрессии TNF L. reuteri 6475. N=9, p-величина <0,05 в сравнении с контрольной средой, **p-величина <0,05 в сравнении с ATCC PTA 6475.
Фигура 4 - L. reuteri 6475 значимо уменьшал потерю массы, индуцированную введением TNBS; эта фигура представляет данные из двух независимых экспериментов: *p<0,05, **p<0,01, ***p<0,001.
Фигура 5 - L. reuteri 6475 значимо уменьшал макроскопическое повреждение ободочной кишки, индуцированное введением TNBS; эта фигура представляет данные из двух независимых экспериментов: *p<0,05, ***p<0,001.
Фигура 6 - L. reuteri 6475 значимо уменьшал концентрацию SAA, индуцированную введением TNBS; эта фигура представляет данные из двух независимых экспериментов: *p<0,05, ***p<0,001.
Фигура 7 - мутант hdcA давал уменьшенную способность аттенуированного колита; эта фигура представляет данные из двух независимых экспериментов: *p<0,05, ***p<0,001.
Фигура 8 - мутант hdcA давал уменьшенную способность аттенуированного колита; эта фигура представляет данные из двух независимых экспериментов: *p<0,01, ***p<0,001.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ЭТОГО ИЗОБРЕТЕНИЯ И ЕГО ПРЕДПОЧТИТЕЛЬНЫХ ВАРИАНТОВ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ
Авторы данного изобретения обнаружили здесь, что отобранная группа лактобацилл, включающих в себя определенные штаммы Lactobacillus reuteri, локально продуцирует гистамин при конкретных условиях роста, и что такой гистамин будет давать пользу для хозяина, например, уменьшение воспаления, уменьшение некоторых типов рака и т. д.
Histamine
Гистамин является органическим азотистым соединением, участвующим в нескольких, ассоциированных со здоровьем процессов млекопитающего, включающих в себя локальные иммунные реакции, а также регулирующим физиологическую функцию в кишечнике и действующим в качестве нейротрансмиттера. В качестве части иммунной реакции на чужеродные патогены гистамин продуцируется базофилами и мастоцитами (тучными клетками). Гистамин может быть получен из декарбоксилирования аминокислоты гистидина - реакции, катализируемой ферментом L-гистидиндекарбоксилазой.
Бактерии способны продуцировать гистамин с использованием ферментов гистидиндекарбоксилаз, неродственных с ферментами, обнаруживаемыми в эукариотах. До сих пор такое продуцирование гистамина некоторыми бактериальными штаммами рассматривалось скорее как опасность для здоровья, чем как возможная польза для людей. Например, отравление Scombroid (форма неинфекционного заболевания новорожденных) обусловлено продуцированием гистамина бактериями в испортившейся пище, в частности, рыбы. Ферментированные пищевые продукты и напитки природно содержат малые количества гистамина вследствие сходного превращения, выполняемого ферментацией бактерий или дрожжей. Доставка некоторых контролируемых количеств гистамина из отобранных бактерий может неожиданно давать скорее полезные эффекты, чем вредные эффекты, как можно было бы ожидать из вышеупомянутых исследований.
Рецепторы гистамина являются классом G-белоксвязанных рецепторов с гистамином в качестве их эндогенного лиганда. Имеются четыре известных рецептора гистамина: Н1-рецептор (H1R), H2-рецептор (H2R), H3-рецептор (H3R) и H4-рецептор (H4R).
Vannier et al. (Histamine Suppresses Gene Expression and Synthesis of Tumor Necrosis Factor a via Histamine H2-Receptors; J Exp Med. 1991 July 1; 174(1):281-4) показали, что LPS-индуцируемый синтез TNF-α в мононуклеарных клетках периферической крови подавлялся гистамином, и авторы дополнительно предполагают, что высвобождение гистамина из тучных клеток может ограничивать степень воспалительных и иммунных реакций подавлением локального синтеза цитокинов в H2-рецепторнесущих клетках.
Противовоспалительная активность гистамина была ранее описана Wang et al. (Histamine Antagonizes Tumor Necrosis Factor (TNF) Signaling by Stimulating TNF Receptor Shedding from the Cell Surface and Golgi Storage Pool; J. Biol. Chem. 278(24): 21751-21760), которые показали, что гистамин вызывает транзиторную потерю поверхностного TNFR1, увеличивает выделение TNFR1 и мобилизацию молекул TNFR1 из аппарата Гольджи в культивируемых эндотелиальных клетках человека. Инъекция гистамина в кожу человека, трансплантированную на иммунонедостаточных мышах, вызывала выделение TNFR1 или уменьшала TNF-опосредованную индукцию эндотелиальных молекул адгезии.
Vannier et al. and Wang et al. не упоминали ничего ни об использовании бактериальных штаммов в качестве пробиотиков, ни о том, как отбирать эти штаммы на основе их гистамин-продуцирующих способностей для гарантии определенных, полезных для здоровья эффектов для хозяина, таких как противовоспалительные эффекты.
Цеплен, форму фармацевтической категории дигидрохлорида гистамина, используют для предотвращения рецидива в пациентах, диагностированных как имеющих острый миелоидный лейкоз (AML). Цеплен вводят вместе с низкими дозами иммуноактивирующего цитокина интерлейкина-2 (IL-2) в постремиссионной фазе AML, то есть когда пациенты завершили первоначальную химиотерапию. Исследования показали, что Цеплен/IL-2 может индуцировать иммуноопосредованное убивание лейкозных клеток. Это лечение (подкожные инъекции) предоставляется в виде 3-недельных циклов пациентами дома в течение 18 месяцев. Побочные эффекты Цеплена включают в себя транзиторные приливы и головную боль. Для пациентов было бы предпочтительным получение локально производимого гистамина по мере необходимости, вместо подкожных инъекций; эта стратегия доставки может быть достигнута введением бактериально-производимого гистамина пациенту с использованием штаммов, отобранных в соответствии с этим исследованием.
Было известно ранее, что грамотрицательные бактерии образуют гистамин, например, в сырой рыбе и сыром мясе после неприемлемой температуры, и что грамположительные бактерии вызывают порчу от гистамина ферментируемых продуктов, таких как сыр, колбаса, мисо, соевый соус, пиво и вино. Идентификация продуцирующих гистамин бактерий в пищевых продуктах была трудной.
Lactobacillus reuteri был ранее также ассоциирован с продуцированием гистамина, Casas et al. (Validation of the Probiotic Concept: Lactobacillus reuteri Confers Broad-spectrum Protection against Disease in Humans and Animals.; 2000, ISSN 0891-060X) сообщает, что было показано, что два штамма L. reuteri в руках Straub et.al. (Z Lebensm Unters Forsch (1995) 201: 79-82) декарбоксилируют L-гистидин с образованием гистамина, и эти авторы предостерегают против использования таких штаммов для ферментации пищевых продуктов и в качестве пробиотиков.
Trip et al. (HdcB, a novel enzyme catalyzing maturation of pyruvoyl-dependent histidine decarboxylase; Molecular Microbiology (2011) 79(4), 861-871) ссылаются на три типа генетической организации локусов декарбоксилирования гистидина среди гистамин-продуцирующих грамположительных бактерий. Наибольшая группа обнаружена в молочнокислых бактериях, включающих в себя L. hilgardii 0006, L. buchneri B301, L. reuteri F275 и T. halophilus. Было показано, что Lactobacillus hilgardii 0006 продуцирует гистамин; в исследовании, выполняемом Lucas et al. (Histamine-Producing Pathway Encoded on an Unstable Plasmid in Lactobacillus hilgardii 0006; APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY, Mar. 2005, Vol. 71, No. 3, p. 1417-1424), они дополнительно утверждают, что гистамин является примесью, которая появляется в некоторых продуктах во время роста нежелательных бактерий. Lucas et al. выполнили скрининг коллекции молочнокислых бактерий вина для идентификации генов, участвующих в гистамин-продуцирующем пути грамположительной бактерии вина.
Из швейцарского сыра был выделен гистамин-продуцирующий штамм Lactobacillus buchneri, который, по-видимому, участвовал во вспышке отравления гистамином. (Summer et al. Isolation of histamine-producing Lactobacillus buchneri from Swiss cheese implicated in a food poisoning outbreak.; Applied and Environmental Microbiology (1985), Vol. 50, Issue 4, p. 1094-1096).
Calles-Enriquez et al. (Sequencing and Transcriptional Analysis of the Streptococcus thermophiles Histamine Biosynthesis Gene Cluster: Factors That Affect Differential hdcA Expression; APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY, Sept. 2010, Vol 76, No. 18, p. 6231-6238) описывают гистамин-продуцирующие штаммы Streptococcus thermophiles, термофильную закваску, используемую для приготовления йогурта и некоторых разновидностей сыра. Кроме того, они указывают на то, что присутствие штаммов со способностью декарбоксилирования гистидина могло бы приводить к продуктам, содержащим гистамин, продуцируемый во время приготовления или во время хранения, перед употреблением, и что это лежит в основе важности использования только гистаминотрицательных штаммов в приготовлении ферментированных молочных продуктов.
Даже если ранее было известно, что некоторый Lactobacillus может производить гистамин, определенно не известно, что способность продуцировать гистамин является ключевым фактором для гарантии определенных полезных эффектов для здоровья для его хозяина, например, противовоспалительных свойств некоторых штаммов Lactobacillus.
Из предыдущего уровня техники не известно и не является очевидным, что это может быть использовано для скрининга или отбора определенных пробиотических штаммов Lactobacillus.
Мастоциты (тучные клетки)
Тучная клетка (также известная как мастоцит и лаброцит) является резидентной тучной клеткой нескольких типов тканей и содержит многие гранулы, богатые гистомином и гепарином. Хотя они наиболее хорошо известны из-за их роли в аллергии и анафилаксии, тучные клетки также играют важную защитную роль, будучи, например, тесно связанными с заживлением ран и защитой против патогенов.
Тучные клетки присутствуют в большинстве тканей, обычно окружая кровеносные сосуды и нервы, и особенно заметны вблизи пограничных слоев между наружным миром и внутренней средой, такой как кожа, слизистая оболочка легких и пищеварительный тракт, а также в полости рта, конъюнктивы и носа.
В аллергических реакциях тучные клетки остаются неактивными, пока аллерген не связывается с IgE уже в ассоциации с этой клеткой. Другие события активации мембраны могут либо праймировать тучные клетки для последующей дегрануляции, либо могут действовать в синергии с трансдукцией сигнала FceRI. Гистамин из такой грануляции сужает посткапиллярные венулы, активирует эндотелий и увеличивает проницаемость кровеносных сосудов. Высвобождение гистамина приводит к локальному отеку (опуханию), теплу, покраснению и аттрагированию других воспалительных клеток к сайту высвобождения. Оно также раздражает нервные окончания (приводя к зуду или боли). Кожными признаками высвобождения гистамина является реакция «прилива крови к лицу и волдырей». Шишка и краснота сразу же после укуса комара являются хорошим примером этой реакции, которая осуществляется в течение секунд после обработки тучных клеток аллергеном. Другие физиологические активности тучных клеток являются гораздо менее хорошо понимаемыми. Несколько линий доказательства предполагают, что тучные клетки могут иметь явно фундаментальную роль в наследственном иммунитете - они способны усовершенствовать широкий ряд важных цитокинов и других воспалительных медиаторов, таких как TNFα, они экспрессируют множественные «рецепторы узнавания паттернов», которые, как считается, включены в распознавание широких классов патогенов, и мыши без тучных клеток считаются гораздо более чувствительными к различным инфекциям.
С учетом токсичности бактериального гистамина в пищевых продуктах и того факта, что рекомендуется избегание гистамин-продуцирующих штаммов в ферментированных продуктах (см. дополнительно примеры в Calles-Enriquez et al. Sequencing and Transcriptional Analysis of the Streptococcus thermophiles Histamine Biosynthesis Gene Cluster: Factors That Affect Differential hdcA Expression; APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY, Sept. 2010, Vol. 76, No. 18, p. 6231-6238), нельзя считать очевидным применение определенных отобранных штаммов Lactobacillus для локального продуцирования гистамина в лечении и/или профилактике различных заболеваний.
Взаимоотношение между хозяином и его микробами является комплексным, так как имеются определенно собственные типы клеток млекопитающих, такие как тучные клетки. Это взаимоотношение хозяин-микроб развивалось на протяжении многих лет ко-эволюции, это включает в себя продуцирование микробами различных метаболитов, которые могут быть полезными для хозяина с точки зрения питания, иммунологически и т. д., действует в качестве всех или части антагонистов, агонистов, десенсибилизации и т. д. специфических рецепторов или других процессов. Таким образом, имеется необходимость в понимании таких специфических взаимодействий между микробами и человеком таким образом, чтобы большая часть подходящих пробиотических штаммов могла быть отобрана и использована для противодействия таким развитиям.
Авторы изобретения обнаружили здесь, что отобранная группа лактобацилл, включающая в себя некоторые штаммы Lactobacillus reuteri, локально продуцирует гистамин в специфических условиях роста. Такой локально продуцированный гистамин, в противоположность прежним мнениям, будет приносить пользу хозяину множественными путями, включающими в себя уменьшение воспаления, уменьшение определенных типов рака и т. д.
Одной целью этого изобретения является обеспечение продуктов, содержащих указанные штаммы вместе со специфическим источником углерода, для получения синбиотического продукта.
Другие цели и преимущества будут более полно очевидными из следующего описания и прилагаемой формулы изобретения.
Введение штаммов молочнокислых бактерий, отобранных в соответствии с данным способом, млекопитающему будет приводить к локально продуцируемому гистамину, который мог бы быть полезным по нескольким причинам.
Первичной целью данного изобретения является обеспечение способа отбора штаммов молочнокислых бактерий, гарантирующих хороший противовоспалительный эффект. Эти штаммы могли бы предпочтительно использоваться для лечения и/или профилактики воспалительных состояний, так как оперон гистидина и продуцирование гистамина является существенным для противовоспалительной способности определенной молочнокислой бактерии. Предпочтительно эти штаммы могут быть использованы для лечения и/или профилактики воспалительных процессов в GI-тракте, GU-тракте, полости рта, в легких и дыхательных путях, на коже и т. д. тела млекопитающего, в том числе, но не ограничивающихся ими, колита, IBD, IBS, дивертикулеза, гингивита, вагинита и т. д. Ранее было известно, что гистамин через H2-рецептор может уменьшать экспрессию гена TNF-альфа. Кроме того, тучные клетки способны вырабатывать широкий ряд важных цитокинов и других воспалительных медиаторов, таких как TNF-альфа. Однако ранее не было известно, что оперон гистидина и локальное продуцирование гистамина таких отобранных штаммов может быть полезным для этого хозяина и является, например, ключевым фактором в противовоспалительной способности отобранных штаммов L. reuteri. Ранее не было известно применение отобранного L. reuteri в лечении, требующем гистамина.
Предпочтительными продуктами и штаммами для лечения и/или профилактики воспалительных состояний являются Lactobacillus reuteri, в частности, Lactobacillus reuteri 6475 (ATCC PTA 6475). В других вариантах осуществления этого изобретения используемым штаммом не является Lactobacillus reuteri 6475 (ATCC PTA 6475).
Терапевтические применения этих штаммов, продуктов и композиций этого изобретения, определенных здесь, приводят к уменьшению или облегчению релевантных заболеваний или симптомов заболевания, например, могут приводить к значимому уменьшению уровней воспаления в млекопитающем. Например, локально производимый гистамин может быть активирующим H2-рецепторы на кишечных эпителиальных клетках, а также иммунных клетках для супрессии мукозного иммунитета хозяина, например, через ингибирование провоспалительных цитокинов. Таким образом, данное изобретение позволяет превращать диетический компонент (гистидин) в гистамин в сайте активности и локально модулировать иммунную реакцию хозяина (например, в кишечнике). Можно видеть, что такое локальное продуцирование гистамина, обеспечиваемое данным изобретением, может обеспечивать реальные преимущества относительно, например, перорального проглатывания или других форм введения гистамина, особенно в связи с тем фактом, что такое пероральное проглатывание не может пропагандироваться вследствие узнаваемых токсичных эффектов и рисков для здоровья.
В частности, когда речь идет о воспалительных заболеваниях кишечника, эти терапевтические применения штаммов, продуктов и композиций этого изобретения могут приводить к значимому уменьшению образования язв и повреждения кишечника (например, повреждения ободочной кишки), измеряемому стандартным способом, таким как показатель Wallace, значимому уменьшению потери массы или значимому уменьшению воспаления кишечника, например, ободочной кишки.
Такое уменьшение или облегчение заболевания или его симптомов может быть измерено любым подходящим анализом. Предпочтительно уменьшение или ослабление заболевания или симптомов является статистически значимым, предпочтительно с величиной вероятности <0,05. Такое уменьшение или ослабление заболевания или симптомов обычно определяют в сравнении с подходящим контрольным индивидуумом или контрольной популяцией, например, здоровым млекопитающим или не получающим лечения или получающим плацебо млекопитающим.
Один подходящий способ введения и приготовления этих штаммов и т. д. выбирают в зависимости от участка, в котором желательным является продуцирование гистамина. Одним предпочтительным способом введения является пероральный способ, однако равным образом для некоторых обработок будет подходящей местная или некая другая форма локального введения в кожу, прямую кишку, влагалище или десны или внутривенная или внутримышечная инъекция.
Хотя приведенные здесь примеры демонстрируют применение штаммов этого изобретения и их подходящие дозы для лечения колита, будет понятно, что это является только одним примером воспалительных состояний, которые могут лечиться в соответствии с данным изобретением, и что подходящие дозы этих штаммов, продуктов и композиций этого изобретения, описанного здесь, могут быть выбраны в зависимости от подлежащего лечению заболевания, способа введения и соответствующей композиции.
Диетические смеси, содержащие гистидин, могут быть использованы для гарантии присутствия гистидина и увеличения посредством этого эффективности этих бактерий. Гистидин может вводиться отдельно или вместе с этими бактериями.
Одной возможностью гарантии бактериальной доставки гистидина является употребление богатой гистидином пищи, в том числе, но не только, соевого белка, сыра, яиц, куриного мяса или свинины.
Было показано, что оперон гистидина в бактериях улучшает способность роста в условиях низкого рН или ограничения источника энергии (Calles-Enriquez et al.), но оперон гистидина не был ассоциирован с противовоспалительными признаками некоторых штаммов L. reuteri.
Другой целью данного изобретения является применение штаммов, отобранных в соответствии с данным способом, в раковой терапии. Гистамин в комбинации с IL-2 использовали для лечения AML. Применение штаммов данного изобретения будет приводить к локально продуцируемому гистамину, который в комбинации с IL-2 мог бы быть использован для лечения AML.
Другой целью данного изобретения является применение отобранных штаммов для уменьшения пищевой аллергии, других аллергических реакций или других аутоиммунных заболеваний. Системные увеличения гистамина являются, как было известно ранее, следствием аллергии, вызываемой грануляцией тучных клеток. При введении штаммов, отобранных в соответствии с этим изобретением, реципиенту этот локально продуцируемый гистамин будет приводить к эффекту десенсибилизации, который будет уменьшать аллергию или другие аутоиммунные заболевания.
Целью данного изобретения является также применение продуцирующих гистамин штаммов молочнокислых бактерий для уменьшения риска поноса путешественников. Пациенты, лечившиеся блокаторами гистамина, имеют увеличенный риск приобретения поноса путешественников, и этот увеличенный риск мог бы быть нейтрализован введением молочнокислых бактерий в соответствии с данным способом.
Еще одной целью данного изобретения является применение отобранных штаммов в лечении MS. Гистамин был предложен в качестве важной молекулы для развития новых способов лечения для MS, и штаммы, отобранные в соответствии с данным изобретением, будут обеспечивать пациента гистамином.
Еще одной целью данного изобретения является применение продуцирующих гистамин бактерий в качестве противовоспалительного лечения кожи с использованием доступных гистидина и аналогов гистидина в коже. Поскольку гистидин является субстратом уроканиновой кислоты, которую кожа производит при УФ-облучении, эта уроканиновая кислота проявляет противовоспалительные свойства на коже.
Другой целью является применение таких отобранных штаммов для ингибирования активации ERK1/2.
Другой целью этого изобретения является ингибирование TNF-альфа.
Другой целью этого изобретения является уменьшение воспаления, локально или системно.
Другой целью этого изобретения является усиление экзоцитоза синаптических пузырьков ингибированием ERK1/2.
Другой целью этого изобретения является стимуляция самообновления эмбриональных стволовых клеток ингибированием ERK1/2.
Другой целью этого изобретения является индуцирование экспрессии макрофага ABCA1 и отток холестерина ингибированием ERK1/2.
Другой целью этого изобретения является уменьшение сердечной гипертрофии и сердечной недостаточности ингибированием ERK1/2.
Другой целью этого изобретения является уменьшение пролиферации некоторых типов рака, включающих в себя лейкоз (например, AML) или злокачественную меланому. Таким образом, такие типы рака являются предпочтительными заболеваниями, которые могут лечиться с использованием этих штаммов, продуктов и композиций данного изобретения.
Другой целью этого изобретения является применение отобранных штаммов для продуцирования гистамина в определенных условиях в качестве нейротрансмиттера, например, во взаимодействиях GU-тракта с CNS, а также передаче невральных сигналов в случае локальной боли. Эта роль в качестве нейротрансмиттера может распространяться до действий на перистальтику кишечника (для лечения констипации или диареи) и для передачи болевых сигналов в кишечнике.
Другой целью этого изобретения является применение отобранных штаммов для воздействия на ось головной мозг - кишечник, когда отобранные LAB будут продуцировать гистамин и воздействовать на восприятие висцеральной боли и передачу сигнала в брюшную нервную систему. Таким образом, можно видеть, что данное изобретение может быть использовано для лечения и/или профилактики любого заболевания, которое будет иметь пользу от локального продуцирования гистамина, или для лечения и/или профилактики любого заболевания, которое может лечиться локальным введением гистамина.
Дополнительной целью этого изобретения является обеспечение продуктов, содержащих указанные штаммы.
Дополнительной целью этого изобретения является обеспечение продуктов, содержащих указанные штаммы, вместе со специфическим источником углерода, чтобы иметь синбиотический продукт, который будет, через специфическую стимуляцию этого гистамин-продуцирующего штамма, усиливать эти эффекты.
Дополнительной целью этого изобретения является обеспечение продуктов, содержащих указанные штаммы, вместе с гистидином, в том числе аналогами гистидина или гистидин-содержащими продуктами или композицией гистидина. Предпочтительно такую смесь вводят перорально в защитной капсуле для высвобождения ее содержимого в нижней части GI-тракта для гарантии выживания как гистидина, так и бактерий в участке действия.
Дополнительной целью этого изобретения является объединенное введение указанных штаммов с богатой гистидином диетой.
Еще один дополнительный аспект этого изобретения обеспечивает продукт для терапевтических применений, как определено здесь в другом месте, где указанное применение предусматривает введение по меньшей мере одного дополнительного терапевтического или пищевого агента. В таких вариантах осуществления этим дополнительным терапевтическим агентом может быть любой дополнительный агент, который применим в лечении рассматриваемого заболевания, например, дополнительный противовоспалительный агент или иммунотерапевтический агент, такой как, например, хемокин или цитокин (например, IL-2).
В предпочтительных вариантах осуществления указанный дополнительный агент содержит гистидин или аналог гистидина, подходящий источник углерода, который поддерживает продуцирование гистамина бактериальным штаммом, или их комбинацию.
Указанные дополнительные агенты могут вводиться вместе со штаммами этого изобретения или могут вводиться по отдельности. Кроме того, указанные дополнительные агенты могут вводиться в то же самое время, что и штаммы этого изобретения, или в различных временных точках.
Данное изобретение обеспечивает также композицию, содержащую:
(i) штамм молочнокислой бактерии, получаемый способом отбора этого изобретения (или штамм молочнокислой бактерии, способный продуцировать гистамин, определенный в других случаях здесь), где указанный штамм молочнокислой бактерии имеет оперон гистидина и способен продуцировать гистамин; и
(ii) по меньшей мере один дополнительный компонент, выбранный из группы, состоящей из подходящего источника углерода, который поддерживает продуцирование гистамина указанным штаммом, источника гистидина или аналога гистидина, и их комбинации.
В продуктах, композициях и применениях этого изобретения, описанного здесь, предпочтительно указанный гистидин или аналог гистидина находится в форме содержащего гистидин или аналог гистидина пищевого продукта или пищевой добавки, или указанный источник углерода содержит глюкозу. Предпочтительно указанный источник углерода не будет содержать сахарозы или по меньшей мере будет содержать сахарозу при таком уровне, который не будет значимо ухудшать продуцирование гистамина этим штаммом. Необязательно могут быть также обеспечены источники других аминокислот.
В альтернативных вариантах осуществления штаммы, определенные в части (i), могут быть объединены с дополнительным компонентом, который используется в лечении рассматриваемого заболевания, то есть дополнительным терапевтическим агентом, например, дополнительным противовоспалительным агентом или иммунотерапевтическим агентом, таким как, например, хемокин или цитокин (например, IL-2).
Lactobacillus reuteri является гетероферментативным видом молочнокислой бактерии, который природно заселяет кишечник людей и животных. Конкретные пробиотические штаммы L. reuteri сильно подавляют продуцирование TNFα человека, тогда как другие пробиотические штаммы L. reuteri усиливают продуцирование TNFα человека.
Описанное здесь изобретение стало возможным посредством механистических исследований пробиотического штамма L. reuteri 6475 и других штаммов, которые продемонстрировали их действие на активированных миелоидных клетках человека. Метаболиты L. reuteri выделяли с использованием HILIC-HPLC, и гистамин идентифицировали при помощи NMR-спектроскопии и масс-спектрометрии. Количественное определение гистамина тройной квадрупольной MS выявило, что штамм L. reuteri 6475 продуцирует относительно высокие концентрации гистамина при выращивании в минимальной среде на основе глюкозы. Прежние исследования транскриптомики предполагали, что два гена в опероне гистидина L. reuteri могут играть роль в ингибировании TNF штаммом 6475. Нацеленный мутагенез этих генов выявил, что каждый ген в опероне гистидина, антипортера гистидина-гистамина, HdcA и HdcB, является важным для TNF-ингибирующего фенотипа штамма 6475. Механистические исследования продемонстрировали, что гистамин ингибирует TNF через передачу сигнала через H2-, но не через H1-рецептор. Передача сигнала через H2-рецептор увеличивает внутриклеточную cAMP (цАМФ), которая активирует PKA. PKA-активность является необходимой для супрессии TNF гистамином. Гистамин блокирует активацию пути передачи сигнала MEK-ERK MAPK.
Гистамин является более известным в отношении его провоспалительных эффектов в аллергии и анафилаксии, но несколько исследований продемонстрировали противовоспалительные функции гистамина. Исследования in vitro показали, что гистамин может ингибировать продуцирование провоспалительных цитокинов, IL-1, IL-12 и TNF из LPS-стимулированных моноцитов и макрофагов человека, и этот эффект является обратимым антагонистами H2-рецептора. Кроме того, гистамин может стимулировать продуцирование противовоспалительного цитокина, IL-10, через H2-рецептор. Передача сигнала через H2-рецептор приводит к уменьшенной экспрессии CD14-рецептора, рецептора, участвующего в узнавании LPS, на поверхности моноцитов человека. Гистамин действует также на TNF-рецептор. Передача сигнала через H1-рецептор индуцирует выделение как TNFR1, так и TNFR2. Исследования in vivo также выявили противовоспалительную роль гистамина. Лечение димапритом, специфическим агонистом H2-рецептора, уменьшало уровни TNF в плазме в мышиных моделях эндотоксинового шока (LPS-индуцирование) и гепатита (индуцирование LPS плюс галактозамином).
Гистамин был протективным в мышиной модели LPS-индуцированного повреждения печени, и эти эффекты были атенуированными в мыши с нокаутом H2-рецептора. В этом кишечнике гистамин может способствовать защите против бактериальной инфекции. Передача сигнала через H2-рецептор в пейеровых бляшках способствует предотвращению инфекции Yersinia enterocolitica.
Это действие гистамина может быть определено по экспрессии рецепторов гистамина на клетке-мишени. В T-клетках это действие гистамина зависит от того, какой рецептор гистамина является активированным.
Посредством передачи сигнала через H1-рецептор гистамин усиливает реакции TH1-типа, но подавляет реакции как TH1, так и TH2 через H2-рецептор. Одно исследование выполняли с наблюдением экспрессии рецептора гистамина в желудочно-кишечном тракте человека. Многие из этих испытанных типов клеток экспрессировали множественные рецепторы гистамина. Например, иммунные клетки, включающие в себя макрофаги, высоко экспрессировали H1- и H2-рецептор и демонстрировали низкую экспрессию H4-рецептора. Увеличенные тучные клетки и гистамин участвовали в висцеральной гиперчувствительности, ассоциированной с IBS. Увеличенное число и увеличенная активность тучных клеток вблизи иннервации слизистой оболочки ободочной кишки может приводить к повышенному восприятию боли в животе, ассоциированной с IBS. Исследование с кетотифеном, стабилизирующим агентом тучных клеток, демонстрировали увеличенный порог боли в пациентах с IBS, уменьшенные симптомы IBS, но не изменение в числе или активности (определяемых по высвобождению гистамина и триптазы) тучных клеток в ткани биопсии тучных клеток. Эти эффекты кетотифена в улучшении IBS могут не быть результатом стабилизации тучных клеток, но могут быть отнесены к их другой роли в качестве антагониста H1-рецептора. Если активация H1-рецептора ассоциирована с провоспалительной реакцией, блокирование его активности кетотифеном может позволить гистамину, производимому либо тучными клетками, либо микробиотой кишечника, такой как L. reuteri, передавать сигнал только через H2-рецептор. Как уже было продемонстрировано авторами изобретения, передача сигнала через H2-рецептор может подавлять продуцирование TNF и вызывать противовоспалительный эффект. Этот механизм кетотифена может быть использован для новых терапий, объединяющих антагонисты H1-рецептора с общим пробиотическим эффектом штамма L. reuteri.
Дополнительное изменение источника углерода сред для выращивания с глюкозы на сахарозу является достаточным для супрессии TNF-ингибирующего фенотипа отобранного штамма, например, штамма L. reuteri 6475. Кроме того, значимую понижающую регуляцию (даун-регуляцию) всех трех генов в опероне гистидина наблюдали с сахарозой в условиях роста.
Эта идентификация гистамина как противовоспалительного соединения, продуцируемого отобранными пробиотическими штаммами Lactobacillus, будет способствовать определению терапевтических применений для таких штаммов. Механистические исследования связывали активацию H2-рецептора на клетках THP-1 с гистамином и супрессией ERK-активации. ERK-активация участвует во многих клеточных функциях наряду с продуцированием TNF. ERK-активация участвует в пролиферации, онкогенезе, дифференцировке и выживании клеток. Эти результаты предполагают роль отобранных штаммов, таких как L. reuteri 6475, в защите против рака посредством супрессии воспаления, пролиферации клеток и апоптоза через ингибирование ERK-активации. Кроме того, гистамин является известным нейротрансмиттером. Продуцирование гистамина отобранными штаммами может влиять на передачу сигнала в кишечной нервной системе, влиять на восприятие боли и перистальтику кишечника. Для гарантии продуцирования гистамина в месте действия может быть предпочтительным обеспечение этих бактерий гистидином. Гистидин может вводиться вместе с этими бактериями или отдельно, рацион, богатый гистидином, может также увеличивать продуцирование гистамина.
Данное изобретение обеспечивает некоторые штаммы молочнокислых бактерий и способ отбора таких штаммов и продуктов, содержащих такие штаммы. Эти бактерии выбирают с использованием скрининга на оперон гистидина; неожиданно было показано, что присутствие активного оперона гистидина является существенным для различных полезных эффектов, таких как иммуномодулирующие свойства штаммов молочнокислых бактерий.
Другие цели и преимущества данного изобретения станут очевидными для читателя, и предполагается, что эти цели и преимущества находятся в пределах объема данного изобретения.
Это изобретение будет описываться далее со ссылкой на следующие неограничивающие примеры:
ПРИМЕРЫ
Таблица 1 Бактериальные штаммы, используемые в этом исследовании |
||
Бактериальные штаммы | Описание | Источник |
L. reuteri ATCC PTA 6475 | Изолят из молока финской матери | BioGaia AB (Raleigh, NC) |
L. reuteri ATCC PTA 6475::JP577 | Инсерционный мутант | Это исследование |
L. reuteri ATCC PTA 6475::1229 | Инсерционный мутант | Это исследование |
L. reuteri ATCC PTA 6475::1230 | Инсерционный мутант | Это исследование |
L. reuteri ATCC PTA 6475::1231 | Инсерционный мутант | Это исследование |
Таблица 2 Анализ транскриптомы оперона гистидина в мутантах штамма L. reuteri 6475 |
||||||
Ген HdcB | Гистидиндекарбоксилаза, пирувоил типа А (HdcA) | Гистидин/Гистамин Антипортер | ||||
Сравнение | Кратное изменение | р-величина | Кратное изменение | р-величина | Кратное изменение | р-величина |
CFAS*(23)/ 6475 |
-2,3 | <0,05 | -1,1 | 0,68 | -1,2 | 0,36 |
THFS1*/6475 | -1,33 | 0,60 | -3,28 | <0,05 | -3,45 | <0,001 |
Сахароза/ глюкоза |
-11,8 | <0,01 | -30,1 | <0,001 | -5,5 | <0,001 |
THFS2/6475 | - | - | 1,2 | 0,7 | 0,8 | 0,2 |
PocR/6475 | - | - | 2,4 | 0,10 | 1,3 | 0,66 |
*Инсерционные мутанты, которые теряют способность ингибирования продуцирования TNF в сравнении со штаммом дикого типа 6475. CFAS: циклопропан-жирная кислота-синтаза, THFS1: тетрагидрофолат-синтаза 1, THFS2: тетрагидрофолат-синтаза 2. §Дикий тип 6475, росший в LDMIIIS в сравнении с диким типом 6475, росшим в LDMIIIS, теряет способность ингибирования продуцирования TNF. |
ПРИМЕР 1
Продуцирование гистамина выбранным Lactobacillus
Бактериальные штаммы и условия культивирования
Все бактериальные штаммы, использованные в этом исследовании, описаны в таблице 1. Lactobacillus reuteri ATCC PTA 6475 является изолятом молока финской матери (доступного из ATCC, Manassas, VA, USA). L. reuteri штаммы ATCC PTA 6475, ATCC 6475 JP577, ATCC 6475 1229, ATCC 6475 1230 и ATCC 6475 1231 будут называться штаммами 6475, JP577, 1229, 1230 и 1231 соответственно на протяжении этого описания. Штаммы L. reuteri культивировали при анаэробных условиях в течение 16-18 часов в средах deMan, Rogosa, Sharpe (Difco, Franklin Lakes, NJ), и инокулировали в 2 л полуопределенной среды, LDMIII (OD600, корректированной до 0,1), которая была описана ранее. Источником углерода были либо глюкоза, LDMIIIG, либо сахароза, LDMIIIS. Эту культуру выращивали в течение 24 часов при 37°С в анаэробной рабочей установке (MACS MG-500, Microbiology International, Frederick, MD), поставляемой со смесью 10% СО2, 10% H2 и 80% N2. Пробы брали в разных временных точках для прослеживания роста измерением OD600. В стационарной фазе (24 ч), эти клетки осаждали из 2-литровой культуры (4000×g, 10 мин). Осадки клеток и свободные от бактерий супернатанты хранили при -20°C перед дальнейшей обработкой для разделения ВЖХ и тестирования в биоанализе на ингибирование TNF.
Клеточная линия и реагенты
In vitro эксперименты выполняли с клетками THP-1 (моноцитоидной клеточной линией, ATCC, Manassas, VA), сохраняемой в среде RPMI (ATCC) и инактивированной нагреванием фетальной телячьей сыворотке (Invitrogen, Carlsbad, CA) при 37°C, 5% CO2. MEK1/2, фосфо-MEK1/2, ERK1/2 и фосфо-ERKl/2-антитела и MEK-ингибитор получали из Cell Signaling Technology (Dan vers, MA), и β-Актин-антитело получали из Abeam (Cambridge, MA). Все другие реагенты получали из Sigma (St. Louis, MO), если нет другого указания.
HILIC-HPLC-разделение связанных с клеточной стенкой факторов
Осадки клеток (7 г) из штамма 6475, выращенного либо в LDMIIIG, либо в LDMIIIS, промывали 30 мл, охлажденной на льду смесью 50% ацетонитрил/0,1% трифторуксусная кислота (TFA). Эту супензию клеток центрифугировали в течение 10 мин, 4000×g при 4°С. Супернатанты фильтровали через поливинилиденфторидные (PVDF) мембранные фильтры (размер пор 0,45 мкм, Millipore, Bedford, MA), лиофилизировали и ресуспендировали в 10 мл 0,1% муравьиной кислоты. Эту ресуспендированную пробу фракционировали по размеру при помощи центрифужных фильтровальных устройств Amicon Ultra-15, использующих ultracel-3-мембрану (Millipore, Bedford, MA). Этот фильтрат (9 мл) высушивали до 1 мл с использованием скоростного вакуума (speed-вакуума) и 0,75 мл использовали для HILIC-HPLC. Эту пробу растворяли с использованием 100% ацетонитрила перед пропусканием через колонку PolyLC Hydroxyethyl с градиентом 100-0% ацетонитрила, 0,1% муравьиной кислотой. Эта проба проходила в течение 25 минут и 25 фракций (A1-C1) собирали при 10 мл/мин/пробирка. Три миллилитра из каждой фракции лиофилизировали, ресуспендировали в 3 мл 0,1% уксусной кислоты и опять лиофилизировали для тестирования в биоанализе ингибирования TNF.
Биоанализ ингибирования TNF и TNF-ELISA
Бактериальные супернатанты (10 мл) из 24-часовой культуры LDMIII стерилизовали с использованием стерилизующих мембранных фильтров PVDF (размер пор 0,22 мкм, Millipore) и фракционировали по размеру, как описано выше. Один миллилитр фильтрата <3 кДа сушили при помощи speed-вакуума и ресуспендировали в среде RPMI. Эти пробы обработанного супернатанта называют кондиционированными средами. Все супернатанты нормализовали по объему относительно OD600=1-0. Лиофилизированные фракции из HILIC-HPLC-разделения ресуспендировали в 400 мкл 10 мг/мкл бикарбоната аммония, сушили в speed-вакууме и ресуспендировали в 400 мкл среды. Кондиционированные среды и промывочные фракции осадка клеток тестировали на их способность модулировать продуцирование TNF в моноцитоидных клетках. Вкратце THP-1-клетки (приблизительно 5×l04 клеток) стимулировали для получения TNF добавлением 100 нг/мл Pam3Cys-SKKKK×3 HC1 (EMC Microcollections, Tuebingen, Germany), как описано ранее. Ингибиторы - антагонисты H2-рецептора, ранитидин и циметидин (10-4-106 M), антагонист H1-рецептора, индометацин (10~5-106 M), ингибитор MEK, U0126 (10 мкМ) и ингибитор PKA, H89 (дигидрохлорид N-[2-(п-бромциннамиламино)этил]-5-изохинолинсульфонамида) (10-5 M) - добавляли к этим клеткам THP-1 с последующим добавлением кондиционированных сред L. reuteri или промывочных фракций осадка клеток (5% о/о), гистамина (105 M) или дибутирил cAMP (10~3-10-7 M). Планшеты инкубировали при 37°C и 5% CO2 в течение 3,5 ч. Клетки THP-1 осаждали (3000×g, 5 мин, 4°C) и использовали количественные ELISA для определения количеств TNF в супернатантах THP-1-клеток в соответствии с инструкциями изготовителя (R&D Systems, Minneapolis, MN).
TNF-ингибирующие соединения L. reuteri 6475 выделяли с использованием жидкостной хроматографии гидрофильного взаимодействия - высокоэффективной жидкостной хроматографии (HILIC-HPLC)
Осадки бактериальных клеток промывали для удаления соединений, рыхло связанных с клеточной поверхностью. Компоненты промывок осадков клеток разделяли на основе гидрофобности с использованием HILIC-HPLC и полученные 25 фракций тестировали на удерживание этого TNF-ингибирующего соединения. L. reuteri 6475, выращенный в минимальной среде с глюкозой в качестве единственного источника углерода, продуцирует TNF-ингибирующие факторы, которые удерживались в 3 отдельных фракциях HILIC-HPLC (B3, B5 и B6, данные не показаны). L. reuteri 6475, выращенный с сахарозой в качестве единственных источников углерода, теряет TNF-ингибирующий фенотип, и он служил в качестве отрицательного контроля. Ни одна из фракций HILIC-HPLC из промывок осадка клеток 6475 с сахарозой не демонстрировала значимого ингибирования TNF (данные не показаны).
Гистамин идентифицировали в TNF-ингибирующей фракции HILIC-HPLC с использованием NMR (ЯМР)-спектроскопии и масс-спектрометрии
TNF-ингибирующую фракцию HILIC-HPLC B3 анализировали при помощи 1H NMR и сравнивали с соседней, не ингибирующей TNF фракцией В4. Уникальный ряд пиков с химическим смещением между 7,0-7,5 м.д., которое является характеристикой ароматического соединения, наблюдали во фракции В3, но не во фракции В4 (данные не показаны). Этот кластер ароматических соединений дополнительно анализировали 2-мерным (2D) ЯМР с гетеронуклеарной одноквантовой когерентностью (HSQC) для идентификации его компонентов. Эти ароматические соединения состояли из триптофана, фенилаланина, гистамина и одного соединениия, которое было неидентифицируемым. Триптофан и фенилаланин являются компонентами среды для выращивания бактерий, тогда как гистамин не был компонентом среды. Эти результаты были подтвержены с использованием дополнительного 2D NMR-способа общей корреляционной спектроскопией (TOCSY). Гистамин является биогенным амином, который продуцируется из гистидина через гистидиндекарбоксилазу некоторыми ферментативными бактериями, в том числе молочнокислыми бактериями. Гистамин идентифицировали также во фракции В3 с использованием времяпролетной масс-спектрометрии с ионизацией в электроспрее (ESI TOF MS).
Гистамин не является ковалентно модифицированным на основе его картины фрагментации в анализе MS/MS. Анализ соответствующей фракции В3 L. reuteri 6475, выращенного в содержащей сахарозу среде, с использованием ESI TOF MS не выявил никакого гистамина. L. reuteri 6475, выращенный в содержащей глюкозу среде, продуцирует гистамин, который присутствует в TNF-ингибирующей фракции HILIC-HPLC.
Гистамин определяли количественно в отобранных фракциях HILIC-HPLC с использованием тройной квадрупольной масс-спектрометрии
Тройная квадрупольная масс-спектрометрия является установленным, высокочувствительным способом квантификации малых молекулярных соединений. Гистамин квантифицируют (определяют количественно) в выбранном диапазоне фракций HILIC-HPLC из L. reuteri 6475 глюкозы (B2-B7) и сахарозы (B2-B9), а также в супернатанте бактериальной культуры. Высокие уровни гистамина (>300 нг/мл) коррелировали со способностью фракций HILIC-HPLC ингибировать TNF (фигура 1). Низкие уровни гистамина измеряли в большинстве испытанных фракций, в том числе фракций из 6475 сахарозы (фигура 1). Эта способность гистамина ингибировать продуцирование TNF является, по-видимому, зависимой от концентрации.
Синтетический гистамин и гистамин, продуцируемый L. reuteri 6475, ингибируют продуцирование TNF через H2-рецептор
Гистамин может значимо ингибировать продуцирование TNF из TLR-2-активированных моноцитоидных клеток человека (THP-1) (фигура 4A). Гистамин может передавать сигнал через четыре различных рецептора гистамина, однако моноцитоидные клетки экспрессируют высокие уровни только H1- и H2-рецепторов. Прежние исследования показали эффекты гистамина на продуцировании TNF через H2-рецептор. H1- и H2-рецепторспецифические антагонисты использовали для определения, какой рецептор опосредовал эффект гистамина на клетках THP-1. H2-рецепторспецифические антагонисты, ранитидин и циметидин, могли блокировать TNF-ингибирование гистамином зависимым от концентрации образом. (фигура 2A). Анализ проточной цитометрии с H2-рецепторспецифическими антителами выявил, что THP-1-клетки высоко экспрессируют H2-рецептор (данные не показаны). Один H1-рецепторспецифический антагонист, индометацин, не оказывал действия на TNF-ингибирование гистамином (фигура 2А). Гистамин блокирует продуцирование TNF из TLR-2-активированных THP-1-клеток через передачу сигнала через H2-рецептор. Кондиционированные L. reuteri 6475 среды, содержащие гистамин, значимо ингибируют TNF в сравнении с контрольной средой, и этот эффект частично блокируется H2-рецептором, но не антагонистами H1-рецептора (фигура 2А). Частичное блокирование в супрессии TNF показывает, что гистамин, присутствующий в 6475-кондиционированной среде, передает сигнал через H2-рецептор, но что другие TNF-ингибирующие факторы, которые действуют через альтернативные механизмы, могут также присутствовать в этих кондиционированных средах. Промывка осадка клеток, содержащая гистамин штамма 6475, также подавляет продуцирование TNF (фигура 2B). Как видно с кондиционированными 6475 средами, антагонисты H2-рецептора частично блокируют эффект промывки осадка клеток 6475 (фигура 2B), что предполагает, что множественные иммуномодулины присутствуют в этой нефракционированной промывке остатка клеток. Эффекты TNF-ингибирующей фракции B3, которая содержит высокие количества очищенного гистамина, полностью блокировались добавлением антагонистов H2-рецептора (фигура 2B).
ПРИМЕР 2
Отбор штаммов, продуцирующих гистамин
Идентификация/отбор продуцирующих гистамин бактерий
Штаммы, подлежащие тестированию и, возможно, отбору, культивировали при анаэробных условиях в течение 16-18 ч в средах deMan, Rogosa, Sharpe (Difco, Franklin Lakes, NJ) и инокулировали в 2 л полуопределенной среды, LDMIII (ΟD600, доведенной до 0,1). Источником углерода была глюкоза, LDMIIIG. Каждую культуру выращивали в течение 24 ч при 37°С в анаэробной рабочей установке (MACS MG-500, Microbiology International, Frederick, MD), снабжаемой смесью 10% CO2, 10% H2 и 80% N2. Пробы брали в различных временных точках для наблюдения роста посредством измерения OD600. В стационарной фазе (24 ч) эти клетки брали для анализа с использованием ПЦР реального времени для тестирования на присутствие трех генов, антипортера гистидин/гистамин, HdcA и HdcB.
Для штаммов, положительных в отношении этих трех генов, уровни продуцируемого гистамина определяют тройной квадрупольной масс-спектрометрией. Штаммы с наивысшим продуцированием гистамина (>250 пг/мл) отбирают. Продуцирование гистамина может также оцениваться и квантифицироваться при помощи ELISA или иммуноанализов.
ПРИМЕР 3
Демонстрация иммуномодуляции
Оперон гистидина способствует TNF-ингибирующему фенотипу L. reuteri 6475
Три гена, которые, по-видимому, являются частью оперона, участвуют в продуцировании гистамина L. reuteri 6475. Этими генами являются антипортер гистидина/гистамина, гистидин-декарбоксилаза пирувоил типа А (HdcA) и HdcB (фигура 3A). Прежние исследования транскриптомики предполагали, что гены антипортера гистидина/гистамина и HdcA были потенциально важными для TNF-ингибирующего фенотипа штамма 6475. Все три гена являются в сильной степени даун-регулируемыми в 6475, растущем в глюкозной среде (таблица 2). Кроме того, по меньшей мере 1 ген в этом опероне является даун-регулируемым в 2 мутантах, которые теряют TNF-ингибирование (таблица 2). Эти мутанты исследовали ранее, и даже когда продукты генов не имели TNF-ингибирующих свойств, эти гены, по-видимому, являются важными для противовоспалительного фенотипа 6475. В отличие от этого 2 мутанта, которые не теряют TNF-ингибирования, демонстрировали отсутствие даун-регулирования любого из этих генов в опероне гистидина (таблица 2). Производили мутации в каждом из этих 3 генов инсертированием преждевременного стоп-кодона в эту генную последовательность (штаммы 1229, 1230 и 1231). Производили также мутацию в неродственном гене, гене устойчивости к рифампицину, для использования в качестве отрицательного контроля (штамм JP577). Мутации всего лишь в одном из этих генов в опероне гистидина было достаточно, чтобы вызвать частичную потерю TNF-ингибирования в сравнении со штаммом дикого типа (фигура 3B), что позволяет предположить, что каждый один из этих генов является важным для TNF-ингибирующего фенотипа L. reuteri 6475. Частичная потеря активности позволяет предположить, что другие активные иммуномодулины все еще продуцируются L. reuteri 6475.
Активация ERK1/2 является существенной для продуцирования TNF TLR2-стимулируемыми моноцитоидными клетками
ERK1/2 активируется фосфорилированием от расположенных слева MAPKK, MEK1/2, и, как было показано ранее, является важным для продуцирования TNF. THP-1-клетки обрабатывали специфическим ингибитором MEK1/2, U0126, для варьирования периодов времени до стимуляции агонистом TLR2 для супрессии активации ERK1/2. Обработка U0126 в течение 30 мин была достаточной для предотвращения продуцирования TNF (данные не показаны). ERK1/2 активируется после стимуляции TLR2 и является важным для стимуляции продуцирования TNF в модельной системе авторов этого изобретения.
Стимуляция H2-рецептора приводит к увеличению количества cAMP в этих клетках
H2-рецептор является G-белоксвязанным рецептором, который может активировать аденилатциклазу и увеличивать внутриклеточную cAMP (цАМФ). TNF может быть ингибирован на уровне транскрипции cAMP и аналогами cAMP. THP-1-клетки стимулировали агонистом TLR2 в присутствии контрольной среды, измеряли супернатант 6475 или гистамин с антагонистом или без антагониста H2-рецептора и внутриклеточные уровни cAMP. Супернатант L. reuteri 6475 вызывал малое, но значимое увеличение в cAMP (данные не показаны). Обработка H2-рецептором блокировала этот эффект. Увеличение в cAMP также наблюдали с обработкой гистамином, и этот эффект блокировался H2-антагонистом (данные не показаны). Синтетический аналог cAMP, дибутирил-cAMP (dcAMP), добавляли к TLR2-стимулированным THP-1-клеткам и действие на продуцировании TNF подвергали мониторингу. Добавление dcAMP (10-5-10-3 M) было достаточным для ингибирования для ингибирования продуцирования TNF (данные не показаны). Стимуляция H2-рецептора гистамина приводит к увеличенной cAMP, которая может блокировать последующее продуцирование TNF в активированных моноцитоидных клетках.
Активность протеинкиназы А (PKA) является важной для ингибирования TNF L. reuteri 6475, гистамином и dcAMP
Увеличенная концентрация cAMP может активировать PKA и затем ингибировать последующий путь передачи сигнала ERK MAPK. Для определения, является ли активность PKA важной для супрессии TNF гистамином, продуцируемым штаммом 6475, активированные клетки THP-1 обрабатывали специфическим ингибитором PKA, H89, в присутствии супернатанта 6475, фракции B3, гистамина или варьирующихся концентраций dcAMP. Добавление H89 частично блокировало ингибирование TNF всеми этими нормально TNF-ингибирующими соединениями (данные не показаны). Активность PKA является важной для супрессии TNF гистамином и dcAMP.
Передача сигнала через H2-рецептор блокирует активацию MEK1/2 и ERK1/2
Предыдущие исследования продемонстрировали, что PKA может ингибировать активацию Ras/Raf MEK и, следовательно, передачу сигнала ERK MAPK. Обработка активированных THP-1-клеток супернатантом 6475, гистамином или U0126 блокирует фосфорилирование как MEK1/2, так и затем ERK1/2 в сравнении со средой-контролем (данные не показаны). Обработка антагонистом H2-рецептора восстанавливает активацию как MEK1/2, так и ERK1/2 (данные не показаны). Не было различия в уровнях белка MEK1/2 и ERK1/2 с любым из способов этой обработки. Гистамин из штамма 6475 ингибирует активацию MEK и затем ERK с получением уменьшенного продуцирования TNF из TLR2-стимулируемых миелоидных клеток.
Таким образом, эти эксперименты показывают, что стимуляция H2-рецептора приводит к увеличенной cAMP, активации протеин киназы А (PKA) и ингибированию пути передачи сигнала MEK-ERK MAPK. Как описано выше, выполняли механистические исследования для определения действия гистамина на пути передачи сигнала активированной митогеном протеин киназы (MAPK). Ингибирование пути передачи сигнала MEK-ERK MEK-специфическим ингибитором является достаточным для блокирования продуцирования TNF. Обработка активированных THP-1-клеток супернатантом штамма 6475 или гистамином увеличивала внутриклеточную cAMP. Это увеличение в количестве cAMP блокировали ранитидином, специфическим антагонистом H2-рецептора. Обработка TLR2-стимулированных THP-1-клеток синтетическим аналогом cAMP, dcAMP, является достаточной для ингибирования продуцирования TNF. Ингибирование активности PKA частично блокирует супрессию TNF средой, ранее 6475-кондиционированной TNF-ингибирующими соединениями, фракцией B3, гистамином и dcAMP. Обработка активированных THP-1-клеток 6475-кондиционированной средой, гистамином или U0126 подавляла активацию MEK1/2, то есть производила эффект, который блокировался в присутствии ранитидина.
ПРИМЕР 4
Детектирование MEK1/2 и ERK1/2 с использованием вестерн-блоттинга
THP-1-клетки лизировали в охлажденном на льду лизирующем буфере, состоящем из 50 мМ Триса, pH 7,4, 250 мМ NaCl, 5 мМ ЭДТА, 50 мМ NaF, 1 мМ Na3VO4, 1% о/о Nonidet P40, 0,2% о/о NaN3 и ингибиторов протеазы и фосфатазы. Лизаты инкубировали на льду в течение 30 минут, встряхивали на вортексе каждые 10 минут и осветляли центрифугированием при 13000×g в течение 10 минут при 4°C. Концентрации белка измеряли с использованием набора Quant-iT™ Protein Assay (Invitrogen) и флуорометре Qubit в соответствии с инструкциями изготовителя. Равные количества белков загружали на гели электрофореза.
Анализ активации ERK1/2 выполняли с использованием специфических фосфо-ERKl/2-антител. Клеточные экстракты загружали на 10% ДСН-полиакриламидный гель и переносили на поливинилиден-дифторидные мембраны (Bio-Rad, Hercules, CA). Мембраны блокировали в течение ночи при 4°C в блокирующем буфере (Li-Cor Biosciences, Lincoln, NE). После нескольких промывок мембраны зондировали ERK1/2, фосфо-ERK1/2 или β-Актин-специфическими антителами, разведенными в блокирующем буфере (Li-Cor) в течение 1 часа при комнатной температуре. После промываний мембраны инкубировали с подходящим конъюгированным с пероксидазой хрена вторичным антителом в течение 1 часа при комнатной температуре и затем блоты проявляли с использованием хемилюминесцентного детектирования. Анализ активации MEK1/2 выполняли, как описано выше, за исключением того, что инкубирование первичных антител проводили на протяжении ночи при 4°C.
ПРИМЕР 5
hdcA-мутант дает уменьшенную способность ослабления колита
Бактериальные штаммы и культивирование
Мутанты генерировали с использованием RecT-опосредованной олигонуклеотидной рекомбинации. L. reuteri, экспрессирующий RecT (штамм RPRB0000), использовали для конструирования мутаций в rpoB (тэг локуса HMPREF0536_0828 (ZP_03961568)) и генах-мишенях, расположенных в кластере гистидиндекарбоксилазы HMPREF0536_1229 (ZP_03961969), HMPREF0536_1230 (ZP_03961970) и HMPREF0536_1231 (ZP_03961971) с получением штаммов RPRB3002, RPRB3004, RPRB3005 и RPRB3006 соответственно. Мутации проверяли при помощи ПЦК и целостность подтверждали анализом последовательностей.
L. reuteri ATCC PTA 6475 и мутант гена гистидиндекарбоксилазы (hdcA) культивировали в средах deMan, Rogosa, Sharpe (Difco, Franklin Lakes, NJ) при 37°C в анаэробной рабочей установке (MACS MG-500, Microbiology International, Frederick, MD), снабжаемой смесью 10% CO2, 10% H2 и 80% N2.
Приготовление клеток L. reuteri и введение мышам
Отдельную колонию каждого из штаммов L. reuteri инокулировали в 10 мл среды MRS и выращивали при 37°C в анаэробных условиях в течение 18-20 часов. Бактерии, доведенные до OD600=0,03, инокулировали в 40 мл MRS для начала ферментации и выращивали при 37°C при анаэробных условиях в течение 5,5 часов (OD600~2,5, бактерии находились в экспоненциальной фазе в этой временной точке). Эти клетки осторожно осаждали (2500×g, RT, 4 минуты) и суспендировали в MRS при концентрации 25×109 КОЕ/мл. В качестве среды-контроля использовали стерильную среду MRS. Каждая 8-недельная самка мыши Balb/c получала одну дозу свежеприготовленного L. reuteri 6475 дикого типа или hdcA-мутанта или MRS (0,2 мл в каждом случае) каждый день в течение семи дней принудительным кормлением с использованием зонда через полость рта и желудок после 10 дней акклиматизации. Все эксперименты на мышах выполняли в соответствии с одобренным протоколом (AN-4199; animal facility of Baylor College of Medicine). Мышей (45-дневных) получали из Harlan Laboratories (Houston, TX) и поддерживали при специфических, не содержащих патогенов условиях в клетках с фильтрующей крышкой (пять мышей на клетку), и они имели свободный отступ к дистиллированной воде и корму 2918 для грызунов Harlan. Мышей распределяли в различные группы случайным образом.
Индуцирование острого колита с использованием ректальной клизмы трибензолсульфоновой кислоты (TNBS)
Колит индуцировали за шесть часов перед шестым принудительным кормлением через зонд. Мышей анестезировали постоянной ингаляцией изофурана. 5% раствор TNBS в воде (Sigma-Aldrich, USA) разводили равным объемом абсолютного спирта и вводили в дозе 100 мг/кг массы тела внутриректально. Мышей держали вниз головой в вертикальном положении в течение 2 минут после клизмы для гарантии полного удерживания клизмы в ободочной кишке. Контрольные мыши процедуры получали 50% этанол в ЗФР. Мышей взвешивали перед введением TNBS и через два дня после введения TNBS. Затем мышей умерщвляли. Воспаление и повреждение ободочной кишки определяли по потере массы, макроскопическому баллу и концентрации SAA в сыворотке.
Макроскопическое оценивание колита
Ободочные кишки собирали, раскрывали продольно и изображения регистрировали цифровой камерой. Воспаление и повреждение ободочной кишки определяли согласно критериям Wallace (Morris et al., 1989). Каждую ободочную кишку оценивали вслепую. Статистику выполняли с использованием GraphPad Prism version 5.01 (GraphPad Software, La Jolla, CA). Тест Kruskal-Wallis использовали для детектирования значимого различия среди всех групп, включенных в этот анализ. Результаты суммировали в виде медианы и интерквартильного диапазона.
Измерение амилоидного белка А сыворотки (SAA) в качестве системного маркера воспаления
Пробы крови собирали сердечной пункцией, антикоагулировали и центрифугировали в течение 10 минут при 13000 об/мин для выделения плазмы. Концентрации сывороточного амилоида А (SAA) в пробах плазмы измеряли с использованием наборов ELISA из ALPCO (Salem, NH) в соответствии с инструкциями изготовителя. SAA является белком острой фазы, указывающим на системное воспаление в мышах, которое коррелирует с тяжестью колита.
Результаты
L. reuteri 6475 защищает мышей против TNBS-индуцированного острого колита
Противовоспалительные эффекты L. reuteri 6475 испытывали в TNBS-индуцированной модели острого колита мыши. Мышей, которые получали L. reuteri 6475 принудительным кормлением с использованием зонда через рот и желудок, сравнивали с мышами, которые получали среду-контроль. Мышей, которым вводили ЗФР вместо TNBS, также исследовали в качестве отрицательных контролей колита.
Фигуры 4-6 представляют данные из двух независимых экспериментов. Отрицательные контроли колита, которые получали ЗФР вместо TNBS интраректально, имели очень низкую потерю массы (или даже прибавляли массу), редкое повреждение ободочной кишки и низкие концентрации SAA в сыворотке. Колит-положительные мыши, которые получали среду MRS и TNBS/ETOH, развивали тяжелый колит, характеризующийся большой величиной потери массы, образованием язв с воспалением в ободочной кишке и основных участках повреждений, распространяющихся более чем на 1 см, и значимо увеличенными концентрациями SAA в сыворотке. Принудительное зондовое кормление L. reuteri 6475 через рот и желудок значимо уменьшало потерю массы, макроскопическое воспаление в ободочной кишке и концентрации SAA в сыворотке, показывая, что L. reuteri 6475 значимо аттенуирует колит.
Мутант hdcA дает уменьшенную способность аттенуирования колита
С использованием той же самой мышиной модели авторы изобретения испытывали, был ли ген hdcA, который кодирует гистидиндекарбоксилазу, необходим для противовоспалительных эффектов L. reuteri 6475. 8-недельных самок мышей BALB/c случайным образом распределяли в три группы, которые получали L. reuteri 6475 дикого типа, или hdcA-мутант, или среду MRS соответственно. Фигуры 7 и 8 представляют данные из двух независимых экспериментов. Опять зондовое введение L. reuteri 6475 через рот и желудок значимо уменьшало потерю массы и повреждение ободочной кишки в сравнении с группой среды-контроля. Мыши, получавшие hdcA-мутант, значимо увеличивали потерю массы и макроскопическое воспаление в ободочной кишке в сравнении с мышами, которые получали бактерии дикого типа, показывая, что hdcA-мутант дает уменьшенную способность аттенуирования колита.
Claims (15)
1. Способ отбора пробиотического молочнокислого бактериального штамма для применения в локальном продуцировании гистамина в млекопитающем, где указанный способ предусматривает скрининг бактерий на присутствие активного оперона гистидина и отбор штамма, который имеет активный оперон гистидина и способен продуцировать гистамин.
2. Способ по п. 1, где указанный штамм отбирают на его способность продуцировать гистамин на уровне, большем чем 250 пг/мл.
3. Способ по п. 1 или 2, где указанный штамм является Lactobacillus reuteri.
4. Продукт, содержащий клетки молочнокислого бактериального штамма, получаемый способом отбора по любому из пп. 1-3, где указанный бактериальный штамм имеет активный оперон гистидина и способен продуцировать гистамин, для применения в локальном продуцировании гистамина в млекопитающем, причем указанное применение является лечением и/или профилактикой воспалительных состояний.
5. Продукт по п. 4, где указанным млекопитающим является человек.
6. Продукт по п. 4 или 5, где локальное продуцирование гистамина происходит в желудочно-кишечном тракте (GI-тракте), мочеполовых путях (GU-тракте), полости рта, легких, дыхательных путях или на коже указанного млекопитающего.
7. Продукт по п. 4, где это воспалительное состояние выбрано из группы, состоящей из колита, воспалительной болезни кишечника, синдрома раздраженной толстой кишки (слизистого колита), дивертикулеза, гингивита и вагинита.
8. Продукт по п. 4 или 5, где указанным штаммом является Lactobacillus reuteri.
9. Продукт по п. 8, где указанным штаммом является Lactobacillus reuteri 6475.
10. Продукт по п. 4 или 5, где указанное применение дополнительно предусматривает введение по меньшей мере одного дополнительного терапевтического или пищевого агента.
11. Продукт по п. 10, где указанный дополнительный агент содержит гистидин или аналог гистидина, подходящий источник углерода, который поддерживает продуцирование гистамина указанным штаммом, или их комбинацию.
12. Композиция для локального продуцирования гистамина в млекопитающем, содержащая:
(i) молочнокислый бактериальный штамм, получаемый способом отбора по любому из пп. 1-3, где указанный молочнокислый бактериальный штамм имеет активный оперон гистидина и способен продуцировать гистамин; и
(ii) по меньшей мере один дополнительный компонент, выбранный из группы, состоящей из подходящего источника углерода, который поддерживает продуцирование гистамина указанным штаммом, источника гистидина или аналога гистидина, и их комбинации.
13. Продукт по п. 11 или композиция по п. 12, где указанный гистидин или аналог гистидина находится в форме содержащего гистидин или аналог гистидина пищевого продукта или пищевой добавки, или где указанный источник углерода содержит глюкозу.
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201161572742P | 2011-07-21 | 2011-07-21 | |
US61/572,742 | 2011-07-21 | ||
US13/552,686 US20130022586A1 (en) | 2011-07-21 | 2012-07-19 | Production and use of bacterial histamine |
US13/552,686 | 2012-07-19 | ||
PCT/EP2012/064351 WO2013011137A1 (en) | 2011-07-21 | 2012-07-20 | Production and use of bacterial histamine |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2014106509A RU2014106509A (ru) | 2015-08-27 |
RU2628536C2 true RU2628536C2 (ru) | 2017-08-18 |
Family
ID=47555915
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2014106509A RU2628536C2 (ru) | 2011-07-21 | 2012-07-20 | Получение и применение бактериального гистамина |
Country Status (26)
Country | Link |
---|---|
US (4) | US20130022586A1 (ru) |
EP (1) | EP2734845B1 (ru) |
JP (1) | JP6211516B2 (ru) |
KR (2) | KR20140047717A (ru) |
CN (2) | CN104160276B (ru) |
AU (1) | AU2012285657B2 (ru) |
BR (1) | BR112014001221B1 (ru) |
CA (1) | CA2842379C (ru) |
CL (1) | CL2014000128A1 (ru) |
DK (1) | DK2734845T3 (ru) |
ES (1) | ES2694567T3 (ru) |
GE (1) | GEP201706730B (ru) |
HK (1) | HK1203615A1 (ru) |
HR (1) | HRP20181599T1 (ru) |
IL (1) | IL229959B (ru) |
LT (1) | LT2734845T (ru) |
MX (1) | MX358347B (ru) |
PL (1) | PL2734845T3 (ru) |
PT (1) | PT2734845T (ru) |
RS (1) | RS57957B1 (ru) |
RU (1) | RU2628536C2 (ru) |
SI (1) | SI2734845T1 (ru) |
TR (1) | TR201816432T4 (ru) |
UA (1) | UA115864C2 (ru) |
WO (1) | WO2013011137A1 (ru) |
ZA (1) | ZA201400142B (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2813550C1 (ru) * | 2022-12-12 | 2024-02-13 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Иркутский государственный университет" (ФГБОУ ВО "ИГУ") | Способ получения смеси биологически активных веществ: биогенных аминов гистамина, триптамина, тирамина, кинуренина, а также производного кинуренина - кинуреновой кислоты |
Families Citing this family (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20130022586A1 (en) | 2011-07-21 | 2013-01-24 | James Versalovic | Production and use of bacterial histamine |
CN103907940B (zh) * | 2014-03-14 | 2016-04-13 | 西南民族大学 | 复合菌变温发酵降低肉制品生物胺的发酵剂及发酵方法 |
AU2016208009A1 (en) * | 2015-01-16 | 2017-07-20 | Biogaia Ab | Lactic Acid Bacteria and their use for the treatment of mastitis |
JP2018510631A (ja) * | 2015-03-26 | 2018-04-19 | バイオガイア・エイビーBiogaia AB | ヒスタミン産生細菌株及びがんにおけるそれらの使用 |
KR102587444B1 (ko) | 2015-09-29 | 2023-10-11 | 킴벌리-클라크 월드와이드, 인크. | 미생물총의 건강한 균형을 유지하기 위한 상승 조성물 |
BR112018072511A2 (pt) * | 2016-05-09 | 2019-03-12 | Biogaia Ab | métodos para selecionar uma cepa bacteriana e para profilaxia, inibição e/ou tratamento de uma alergia, cepa, e, composição antialérgica |
WO2019115576A1 (en) * | 2017-12-13 | 2019-06-20 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Methods of treating heart failure |
CN111004757B (zh) * | 2019-12-31 | 2021-11-02 | 深圳市沁帆科技有限公司 | 一种罗伊氏乳杆菌、微生物菌剂及食物制品 |
CN112168847A (zh) * | 2020-09-30 | 2021-01-05 | 浙江大学 | 罗伊氏乳杆菌在制备治疗急性肝衰竭药物中的用途 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2178975C1 (ru) * | 2000-06-08 | 2002-02-10 | Борц Михаил Самуилович | Пищевой продукт с биологически активными добавками |
WO2006110088A1 (en) * | 2005-04-15 | 2006-10-19 | Biogaia Ab | Selection and use of lactic acid bacteria for reducing inflammation in mammals |
Family Cites Families (20)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
ES23106A1 (es) | 1898-09-19 | 1898-10-01 | Welch Charles Kingston | Mejoras en los aros metálicos para ruedas. |
US5413960A (en) | 1987-05-01 | 1995-05-09 | Biogaia Ab | Antibiotic reuterin |
US5458875A (en) | 1990-06-15 | 1995-10-17 | Biogaia Ab | In ovo method for delivering Lactobacillus reuteri to the gastrointestinal tract of poultry |
JP3021789B2 (ja) | 1991-06-24 | 2000-03-15 | 三洋電機株式会社 | 培養装置 |
US5534253A (en) | 1995-06-07 | 1996-07-09 | Biogaia Ab | Method of treating enteropathogenic bacterial infections in poultry |
US5837238A (en) | 1996-06-05 | 1998-11-17 | Biogaia Biologics Ab | Treatment of diarrhea |
IT1288119B1 (it) * | 1996-06-28 | 1998-09-10 | Renata Maria Anna Ve Cavaliere | Composizioni dietetiche da utilizzare nell'alimentazione per via enterica |
IT1306716B1 (it) * | 1999-06-21 | 2001-10-02 | Mendes S U R L | Associazione di batteri lattici e suo uso per la prevenzione e/o iltrattamento terapeutico di infezioni e di stati infiammatori. |
CA2436264C (en) * | 2001-02-06 | 2014-01-28 | Societe Des Produits Nestle S.A. | Endotoxin binding by lactic acid bacteria and bifidobacteria |
US20050281756A1 (en) * | 2004-06-14 | 2005-12-22 | Eamonn Connolly | Use of lactic acid bacteria for decreasing gum bleeding and reducing oral inflammation |
US20040208863A1 (en) * | 2003-01-30 | 2004-10-21 | James Versalovic | Anti-inflammatory activity from lactic acid bacteria |
JP2004344004A (ja) * | 2003-04-24 | 2004-12-09 | Japan Science & Technology Agency | ヒスタミン生産菌の検出方法、及び該方法で用いるプライマー |
ES2310063B1 (es) * | 2005-07-29 | 2009-11-16 | Consejo Superior Investig. Cientificas | Deteccion de bacterias del acido lactico productoras de histamina mediante reaccion en cadena de la polimerasa cuantitativa a tiempo real (qrt-pcr) y sus aplicaciones. |
US20080254011A1 (en) * | 2007-04-11 | 2008-10-16 | Peter Rothschild | Use of selected lactic acid bacteria for reducing atherosclerosis |
CN101328468B (zh) * | 2007-06-21 | 2012-05-23 | 东宇生物科技股份有限公司 | 抗过敏的乳酸菌 |
CN101575582B (zh) * | 2008-05-08 | 2011-10-12 | 景岳生物科技股份有限公司 | 具有抗炎活性的乳杆菌分离株及其用途 |
CN102115721B (zh) * | 2008-05-08 | 2012-09-26 | 景岳生物科技股份有限公司 | 具有抗炎活性的乳杆菌分离株及其用途 |
WO2010013143A2 (en) * | 2008-08-01 | 2010-02-04 | Institut Pasteur | Methods for inhibiting mast cell activation and treating mast cell-dependent inflammatory diseases and disorders using lactobacillus |
AU2008361375B2 (en) | 2008-09-04 | 2014-05-22 | Om Pharma | Immunomodulatory extracts from Lactobacillus bacteria and methods of manufacturing and use thereof |
US20130022586A1 (en) * | 2011-07-21 | 2013-01-24 | James Versalovic | Production and use of bacterial histamine |
-
2012
- 2012-07-19 US US13/552,686 patent/US20130022586A1/en not_active Abandoned
- 2012-07-20 TR TR2018/16432T patent/TR201816432T4/tr unknown
- 2012-07-20 CA CA2842379A patent/CA2842379C/en active Active
- 2012-07-20 UA UAA201401697A patent/UA115864C2/uk unknown
- 2012-07-20 DK DK12738122.6T patent/DK2734845T3/en active
- 2012-07-20 JP JP2014520684A patent/JP6211516B2/ja active Active
- 2012-07-20 EP EP12738122.6A patent/EP2734845B1/en active Active
- 2012-07-20 BR BR112014001221-0A patent/BR112014001221B1/pt active IP Right Grant
- 2012-07-20 SI SI201231427T patent/SI2734845T1/sl unknown
- 2012-07-20 WO PCT/EP2012/064351 patent/WO2013011137A1/en active Application Filing
- 2012-07-20 CN CN201280035256.5A patent/CN104160276B/zh active Active
- 2012-07-20 GE GEAP201213351A patent/GEP201706730B/en unknown
- 2012-07-20 AU AU2012285657A patent/AU2012285657B2/en active Active
- 2012-07-20 PT PT12738122T patent/PT2734845T/pt unknown
- 2012-07-20 RS RS20181329A patent/RS57957B1/sr unknown
- 2012-07-20 RU RU2014106509A patent/RU2628536C2/ru active
- 2012-07-20 MX MX2014000844A patent/MX358347B/es active IP Right Grant
- 2012-07-20 LT LTEP12738122.6T patent/LT2734845T/lt unknown
- 2012-07-20 KR KR1020147004227A patent/KR20140047717A/ko active Search and Examination
- 2012-07-20 PL PL12738122T patent/PL2734845T3/pl unknown
- 2012-07-20 ES ES12738122.6T patent/ES2694567T3/es active Active
- 2012-07-20 CN CN201810062784.9A patent/CN109554435A/zh active Pending
- 2012-07-20 KR KR1020187032594A patent/KR102039289B1/ko active IP Right Grant
-
2013
- 2013-02-13 US US13/765,947 patent/US20130149291A1/en not_active Abandoned
- 2013-12-17 IL IL229959A patent/IL229959B/en active IP Right Grant
-
2014
- 2014-01-08 ZA ZA2014/00142A patent/ZA201400142B/en unknown
- 2014-01-17 CL CL2014000128A patent/CL2014000128A1/es unknown
-
2015
- 2015-04-24 HK HK15103998.9A patent/HK1203615A1/xx unknown
-
2016
- 2016-10-10 US US15/289,666 patent/US10004770B2/en active Active
-
2018
- 2018-05-23 US US15/987,210 patent/US10898529B2/en active Active
- 2018-10-04 HR HRP20181599TT patent/HRP20181599T1/hr unknown
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2178975C1 (ru) * | 2000-06-08 | 2002-02-10 | Борц Михаил Самуилович | Пищевой продукт с биологически активными добавками |
WO2006110088A1 (en) * | 2005-04-15 | 2006-10-19 | Biogaia Ab | Selection and use of lactic acid bacteria for reducing inflammation in mammals |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
CALLES-ENRIQUEZ M. et al. Sequencing and transcriptional analysis of the Streptococcus thermophilus histamine biosynthesis gene cluster: factors that affect differential hdcA expression. Appl Environ Microbiol. 2010 Sep; 76(18): 6231-6238. Epub 2010 Jul 23 [Найдено 20.05.2016] [он-лайн]. Найдено из Интернет: URL: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20656875. THOMAS C.M. et al. Probiotics-host communication: Modulation of signaling pathways in the intestine. Gut Microbes. 2010 May-Jun; 1(3): 148-163 [Найдено 02.09.2016] [он-лайн]. Найдено из Интернет: URL: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20672012. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2813550C1 (ru) * | 2022-12-12 | 2024-02-13 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Иркутский государственный университет" (ФГБОУ ВО "ИГУ") | Способ получения смеси биологически активных веществ: биогенных аминов гистамина, триптамина, тирамина, кинуренина, а также производного кинуренина - кинуреновой кислоты |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2628536C2 (ru) | Получение и применение бактериального гистамина | |
EP3377082B1 (en) | Compositions comprising bacterial strains | |
KR102138834B1 (ko) | 락토바실러스 가세리 kbl697 균주 및 그 용도 | |
BR112020022749A2 (pt) | cepa de lactobacillus paracasei e uso da mesma | |
Tsai et al. | Immunomodulating activity of Lactobacillus paracasei subsp. paracasei NTU 101 in enterohemorrhagic Escherichia coli O157H7-infected mice | |
JP6935632B2 (ja) | 胃腸炎の処置及び予防のためのフィーカリバクテリウム・プラウスニッツィcncm i−4573株 | |
TW201919668A (zh) | 包含細菌品系之組成物 | |
van der Kleij et al. | Protective effects of Lactobacillus reuteri and Bifidobacterium infantis in murine models for colitis do not involve the vagus nerve | |
US20080063666A1 (en) | New lactic bacteria useful as probiotics | |
KR20210008393A (ko) | 세균 균주를 포함하는 조성물 | |
Hou et al. | Transcriptomic responses of Caco-2 cells to Lactobacillus rhamnosus GG and Lactobacillus plantarum J26 against oxidative stress | |
KR20160046826A (ko) | 유아의 과도한 울음용 프로바이오틱 | |
JP6486837B2 (ja) | 腸疾患の予防および治療のための、微生物の使用 | |
US20200054692A1 (en) | Active substances of bifidobacterium lactis gkk2, composition comprising the same and method of promoting longevity using the same | |
JP2020022488A (ja) | 多様な機能性を有する新規乳酸菌およびその用途 | |
KR20180110848A (ko) | 신규한 락토바실러스 루테리 균주 및 그 프로바이오틱 용도 | |
NZ619605B2 (en) | Production and use of bacterial histamine | |
RU2798872C2 (ru) | ШТАММ Lactobacillus gasseri KBL697 И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ | |
Olmeda | The effect of Lactobacillus helveticus supplementation on calf performance and gut health during the pre-weaning and post-weaning period | |
JP2022511975A (ja) | 細菌株を含む組成物 | |
Kober et al. | International Journal of Women's Dermatology | |
TRUUSALU | KAI TRUUSALU |