RU2596919C2

RU2596919C2 - Комбинированная вакцина для профилактики коклюша, дифтерии, столбняка

Info

Publication number: RU2596919C2
Application number: RU2015101147/10A
Authority: RU
Inventors: Алевтина Максимовна Николаева; Валентина Даниловна Семенова; Оксана Юрьевна Соснина; Вера Николаевна Сперанская; Диана Васильевна Грязнова; Елена Валентиновна Пушкарева
Priority date: 2015-01-16
Filing date: 2015-01-16
Publication date: 2016-09-10
Also published as: RU2015101147A

Abstract

Изобретение относится к области медицины и касается комбинированной вакцины для профилактики коклюша, дифтерии и столбняка. Представленная вакцина содержит коклюшный компонент, дифтерийный и столбнячный анатоксины, адсорбированные на алюминия гидроксиде. В качестве коклюшного компонента используется вакцина коклюшная бесклеточная очищенная, при следующем соотношении ингредиентов в одной дозе (0,5 мл):

Вакцина коклюшная бесклеточная очищенная 30-45 мкг Дифтерийный анатоксин 2,5-5 Lf Столбнячный анатоксин 2,5-5 Lf Алюминия гидроксид (в пересчете на алюминий Al³⁺) от 0,3 до 0,55 мг

Охарактеризованная вакцина не является реактогенной, полностью соответствует требованиям, предъявляемым Всемирной Организацией Здравоохранения к препаратам такого класса, и может быть использована для бустерной вакцинации. 2 табл.

Description

Изобретение относится к медицине, а именно к комбинированным бустерным вакцинам и может применяться для профилактики коклюша, дифтерии и столбняка у детей с 6-летнего возраста, подростков и взрослых.

За прототип принято описание вакцины коклюшно-дифтерийно-столбнячной адсорбированной (АКДС-вакцина) (инструкция по применению АКДС-вакцины, https://health.mail.ru/drug/vaktsina_koklyushnodifteriynostolbnyachnaya/).

Вакцина АКДС представляет собой смесь убитых формальдегидом коклюшных микробов 1 фазы (цельноклеточный коклюшный компонент) и сорбированных на алюминия гидроксиде дифтерийного и столбнячного анатоксинов. Лекарственная форма АКДС-вакцины представляет собой суспензию для внутримышечного введения.

Состав

Одна доза вакцины (0,5 мл) содержит:

Активные вещества:

Дифтерийный анатоксин	15 Lf
Столбнячный анатоксин	5 Lf
Коклюшные микробные клетки	10 млрд

Вспомогательные вещества:

Алюминия гидроксид (Al³⁺)	не более 0,55 мг
Формальдегид	не более 50 мкг
Консервант-мертиолят	от 42,5 до 57,5 мкг

Признаки прототипа, совпадающие с признаками заявленного изобретения, заключаются в наличии в составе комбинированного препарата коклюшного компонента, очищенных дифтерийного и столбнячного анатоксинов, адсорбированных на гидроксиде алюминия.

Причины, препятствующие получению технического результата в прототипе, который обеспечивается изобретением, заключаются в наличии в составе комбинированной вакцины цельноклеточного коклюшного компонента и высоком содержании дифтерийного анатоксина, что препятствует использованию вакцины для бустерной иммунизации.

Прививки АКДС-вакциной, содержащей коклюшный цельноклеточный компонент, проводят детям в возрасте от 3 месяцев до достижения возраста 3 года 11 месяцев 29 дней. В последующем для профилактики дифтерии, столбняка у детей, начиная с 6-летнего возраста, подростков и взрослых в соответствии с Национальным календарем прививок используется только анатоксин дифтерийно-столбнячный очищенный адсорбированный с уменьшенным содержанием антигенов жидкий (АДС-М - анатоксин). Длительность иммунитета к коклюшной инфекции у детей, вакцинированных АКДС вакциной, составляет 5-7 лет. Известно, что в эпидемический процесс вовлекаются не только дети, но подростки и взрослые, среди которых заболевание коклюшем протекает тяжело, нередко приводя к формированию осложнений (пневмонии, стойкие неврологические нарушения) и летальным исходам, что обуславливает необходимость иммунизации против коклюша разных возрастных групп. АКДС-вакцина, содержащая цельноклеточный коклюшный компонент, является наиболее реактогенным препаратом Национального календаря прививок и не может использоваться для иммунизации детей старше 6 лет, подростков и взрослых.

Задача, решаемая изобретением, состоит в повышении качества вакцины и расширении сферы ее применения для разных возрастных групп населения.

Технический результат, обеспечивающий решение указанной задачи, состоит в снижении реактогенности комбинированной вакцины и расширении сферы ее применения для разных возрастных групп.

Указанный технический результат достигается тем, что в комбинированной вакцине для профилактики коклюша, дифтерии, столбняка, содержащей коклюшный компонент, дифтерийный и столбнячный анатоксины, адсорбированные на алюминия гидроксиде, согласно изобретению, в качестве коклюшного компонента используется вакцина коклюшная бесклеточная очищенная, при следующем соотношении ингредиентов в одной дозе (0,5 мл):

При этом совокупность отличительных признаков обеспечивает снижение реактогенности вакцины и расширение сферы применения. Использование бесклеточного коклюшного компонента и уменьшение содержания дифтерийного анатоксина обеспечивают снижение реактогенности и расширяют ее сферу применения в отличие от прототипа - АКДС-вакцины, применяемой для профилактики коклюша, дифтерии, столбняка у детей до достижения возраста 3 года 11 месяцев 29 дней, вакцину аАКДС-М (где, индекс «а» обозначает бесклеточный коклюшный компонент) можно использовать для бустерной вакцинации детей с 6-летнего возраста, подростков и взрослых.

Новые признаки изобретения заключаются в использовании в составе комбинированного препарата в качестве коклюшного компонента вакцины коклюшной бесклеточной очищенной, при следующем соотношении ингредиентов в одной дозе (0,5 мл):

Лекарственная форма вакцины аАКДС-М представляет собой суспензию для внутримышечного введения.

Вакцину аАКДС-М получают следующим способом:

Последовательно добавляют к гелю гидроксида алюминия коклюшный, дифтерийный, столбнячный анатоксины.

Коклюшный компонент представляет собой антигенную фракцию Bordetella pertussis, очищенную без разделения компонентов, полученную по технологии (патент №2504399), включающей следующие основные операции:

1) выращивают культуры трех штаммов разных серовариантов Bordetella pertussis на плотной питательной среде (казеиново-угольный агар);

2) смывают полученную биомассу с поверхности питательной среды;

3) проводят экстракцию комплекса антигенов раствором дезоксихолата натрия;

4) центрифугируют для отделения полученного экстракта, содержащего комплекс антигенов, от микробной биомассы;

5) проводят очистку экстракта ультрадиафильтрацией, с последующим удалением эндотоксинов хроматографией;

6) проводят обезвреживание формальдегидом и теплом.

Полученная субстанция вакцины коклюшной бесклеточной содержит в одном мл:

- антигенную фракцию Bordetella pertussis, очищенную без разделения компонентов - не менее 1 мг белка;

- формальдегид - не более 200 мкг;

- сукцинатно-боратный буферный раствор 0,005 М до 1 мл.

Для приготовления вакцины аАКДС-М используют дифтерийный, столбнячный анатоксины, соответствующие по показателям качества требованиям нормативных документов.

Перед соединением указанных компонентов проводят расчет, исходя из того, что в одной прививочной дозе (0,5 мл) вакцины должно содержаться 30-45 мкг вакцины коклюшной бесклеточной очищенной, 2,5-5 Lf очищенного дифтерийного анатоксина, 2,5-5 Lf очищенного столбнячного анатоксина и не более 0,55 мг алюминия гидроксида (в пересчете на алюминий).

Расчет проводят по формуле:

, где

Vi - требуемый объем антигенного ингредиента в мл;

V - объем вакцины аАКДС-М, мл;

Т₁ - титр антигенного ингредиента в вакцине аАКДС-М (показатель специфической активности) или концентрация по белку в мкг/мл;

Т₂ - титр исходного антигенного полуфабриката (показатель специфической активности) или концентрация по белку в мкг/мл.

Пример: Требуется приготовить 80 л вакцины аАКДС-М с содержанием в одной прививочной дозе: 2,5 Lf дифтерийного анатоксина, 2,5 Lf столбнячного анатоксина, 30 мкг вакцины коклюшной бесклеточной очищенной, 0,45 мг алюминия гидроксида (в 1 мл соответственно: 5 Lf дифтерийного анатоксина, 5 Lf столбнячного анатоксина, 60 мкг вакцины коклюшной бесклеточной очищенной, 0,9 мг алюминия гидроксида).

Потребуется:

а) дифтерийного анатоксина (V₁) с титром 500 Lf/мл:

б) столбнячного анатоксина (V₂) с титром 500 Lf/мл:

в) бесклеточной коклюшной вакцины (V₃) с содержанием белка 1000 мкг/мл:

г) суспензии алюминия гидроксида (V₄) с содержанием алюминия 6,0 мг/мл:

е) 0,9% раствора натрия хлорида (V₅):

После выполнения расчетов проводят сорбцию компонентов вакцины: последовательно добавляют антигены в расчетных количествах к гелю гидроксида алюминия и тщательно перемешивают смесь в течение 20 минут после добавления каждого компонента. После соединения всех компонентов с гелем гидроксида алюминия добавляют стерильный апирогенный 0,9% раствор натрия хлорида до необходимого объема и доводят рН до 6,4-7,4.

Разработанный алгоритм приготовления аАКДС-М обеспечивает полноту сорбции на геле гидроксида алюминия всех компонентов на уровне не ниже 99%.

Препарат обладает высокой иммуногенной активностью: обеспечивает 100% резистентность иммунизированных морских свинок к 100 Dlm (минимальных летальных доз) дифтерийного тест-токсина; 80-100% резистентность иммунизированных белых мышей к 50 Dlm столбнячного тест-токсина; индуцирует образование коклюшных антител у 90-100% иммунизированных белых мышей.

Применение вакцинных препаратов может приводить к развитию сенсибилизации и аллергических реакций немедленного типа (ГНТ). Установлено, что сенсибилизирующий эффект бустерной вакцины аАКДС-М значимо меньше в сравнении с прототипом (АКДС-вакцина).

Кроме того, по содержанию бактериальных эндотоксинов, в основном определяющих реактогенность препаратов с цельноклеточным компонентом, предлагаемый состав вакцины аАКДС-М в отличие от прототипа содержит более чем в десять раз меньшее количество эндотоксических единиц в дозе и по данному показателю соответствует требованиям Европейской Фармакопеи (табл. 2).

Результаты проведенных испытаний показали, что комбинированная вакцина аАКДС-М по эффективности, безопасности, специфической активности полностью соответствует требованиям, предъявляемым Всемирной Организацией Здравоохранения к препаратам такого класса.

Claims

Комбинированная вакцина для профилактики коклюша, дифтерии, столбняка, содержащая коклюшный компонент, дифтерийный и столбнячный анатоксины, адсорбированные на алюминия гидроксиде, отличающаяся тем, что в качестве коклюшного компонента используется вакцина коклюшная бесклеточная очищенная, при следующем соотношении ингредиентов в одной дозе (0,5 мл):
Вакцина коклюшная бесклеточная очищенная 30-45 мкг Дифтерийный анатоксин 2,5-5 Lf Столбнячный анатоксин 2,5-5 Lf Алюминия гидроксид (в пересчете на алюминий Al³⁺) от 0,3 до 0,55 мг