RU2590598C1 - Вакцина для профилактики сибирской язвы и некробактериоза животных и способ получения её - Google Patents
Вакцина для профилактики сибирской язвы и некробактериоза животных и способ получения её Download PDFInfo
- Publication number
- RU2590598C1 RU2590598C1 RU2015119346/10A RU2015119346A RU2590598C1 RU 2590598 C1 RU2590598 C1 RU 2590598C1 RU 2015119346/10 A RU2015119346/10 A RU 2015119346/10A RU 2015119346 A RU2015119346 A RU 2015119346A RU 2590598 C1 RU2590598 C1 RU 2590598C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- vaccine
- anthrax
- strain
- viev
- exotoxin
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области биотехнологии и микробиологии. Описана вакцина для профилактики сибирской язвы и некробактериоза животных. Вакцина содержит инактивированный формалином лейкоцидин-экзотоксин, адсорбированный на гидроокиси алюминия, а также суспензию живых спор сибиреязвенного вакцинного штамма 55-ВНИИВВиМ в физиологическом растворе. Вакцина также включает глицерин, сапонин и натриевую соль сукцината хитозана при определенных соотношениях компонентов. Кроме того, описан способ получения такой вакцины. Описанная вакцина обладает повышенной эффективностью за счет увеличения сроков иммунитета животных в вакцине против сибирской язвы и некробактериоза, Изобретение может быть использовано в ветеринарии. 2 н.п. ф-лы, 4 табл., 3 пр.
Description
Изобретение относится к области ветеринарии и биотехнологии и касается получения вакцины для профилактики сибирской язвы и некробактериоза животных.
Известна вакцина для профилактики некробактериоза рогатого скота, содержащая в равных объемных соотношениях инактивированные формалином эндотоксин и экзотоксин, полученные из местных эпизоотических культур возбудителя некробактериоза, и адъювант на основе минерального масла и ланолина (Патент RU 1816348, A61K 39/00, 1995).
Однако известная вакцина не достаточно иммуногенна, так как требует двукратного введения и обеспечивает иммунитет только против некробактериоза в течение 3,5-4 мес. Кроме того, при получении вакцины осуществляют предварительный подбор местных штаммов для каждого конкретного хозяйства, что невозможно при промышленном производстве.
Известна вакцина для профилактики сибирской язвы и некробактериоза животных и способ получения ее, содержащая инактивированный формалином лейкоцидин-экзотоксин, полученный из производственного штамма Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ, представляющий собой высокоочищенный белок с молекулярной массой 18-20 кДа и адсорбированный на гидроокиси алюминия, а также суспензию живых спор сибиреязвенного вакцинного штамма 55-ВНИИВВиМ в физиологическом растворе, глицерин и сапонин (Патент RU 2524430, МПК А61К 39/116, A61K 39/07, опубл. 27.07.2014, Бюл. №21).
Однако известная вакцина не обеспечивает создание достаточного иммунитета против сибирской язвы и некробактериоза.
Задачей изобретения является повышение эффективности вакцины против сибирской язвы и некробактериоза за счет увеличения сроков иммунитета животных и снижения реактогенности вакцины.
Технический результат изобретения достигается в вакцине против сибирской язвы и некробактериоза, содержащей инактивированный формалином лейкоцидин-экзотоксин, полученный из производственного штамма Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ, представляющий собой высокоочищенный белок с молекулярной массой 18-20 кДа и адсорбированный на гидроокиси алюминия, а также суспензию живых спор сибиреязвенного вакцинного штамма 55-ВНИИВВиМ в физиологическом растворе, глицерин и сапонин, причем инактивированный формалином лейкоцидин-экзотоксин, полученный из производственного штамма Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ, представляет собой высокоочищенный белок с молекулярной массой 18-20 кДа с содержанием 1,5-2,0 млрд. клеток Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ в 1 см3, адсорбированный на гидроокиси алюминия, и дополнительно содержит натриевую соль сукцината хитозана при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Технический результат изобретения достигается также в способе получения вакцины против сибирской язвы и некробактериоза путем культивирования штамма Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ, инактивирования его формалином, отделения бактериальной массы от культуральной жидкости центрифугированием, выделением из культуральной жидкости экзотоксина-лейкоцидина, его очистки и концентрирование ультрафильтрацией на полых волокнах и адсорбцией на гидроокиси алюминия в гликолевом буфере, добавлением суспензии живых спор сибириязвенного вакцинного штамма 55-ВНИИВВиМ и сапонина, причем перед адсорбцией на гидроокиси алюминия к экзотоксину добавляют 1-10% инактивированной бактериальной массы штамма Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ с содержанием 1,5-2,0 млрд. клеток в 1 см3, после чего последовательно добавляют натриевую соль сукцината хитозана и сапонин, а глицерин добавляют сразу после добавления сапонина.
Ассоциированную вакцину вводят однократно крупному рогатому скоту, овцам, козам, свиньям и северным оленям внутрикожно при помощи безыгольного инъектора в объеме 0,2-0,4 см3.
Вакцину против сибирской язвы и некробактериоза готовят следующим образом.
Пример 1. Для получения некробактериозного антигена - лейкоцидин-экзотоксина берут производственный штамм Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ, культивируют, инактивируют формалином в конечной концентрации 0,4%, отделяют бакмассу от культуральной жидкости центрифугированием, из культуральной жидкости выделяют экзотоксин, подвергают его высокой очистке ультрафильтрацией на полых волокнах с размером пор 13-17 кДа и концентрируют до содержания белка (по Лоури) 5,5-7,0 мг % с молекулярной массой 18-20 кДа. Далее к полученному антигену - экзотоксину-лейкоцидину добавляют 1-10% инактивированной бактериальной массы штамма Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ с содержанием 1,5 млрд. клеток в 1 см3, затем сорбируют на 12% гидроокисью алюминия в гликолевом буфере с pH 8,4, взятой в конечной концентрации 1,8%. После сорбции антигена на гидрате окиси алюминия проверяют нейтрализацию остаточного количества формалина. Далее к полученному антигену - экзотоксину-лейкоцидину добавляют инактивированную бактериальную массу штамма Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ до содержания Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ 1,5 млрд. клеток в 1 см3, затем сорбируют на 12% гидроокисью алюминия в гликолевом буфере с pH 8,4, взятой в конечной концентрации 1,0%. После сорбции антигена на гидрате окиси алюминия проверяют нейтрализацию остаточного количества формалина. К 77,55 г смеси инактивированного формалином экзотоксина-лейкоцидина и инактивированной бактериальной массы штамма Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ добавляют 1,2 г суспензии живых спор сибиреязвенного вакцинного штамма 55-ВНИИВВиМ с исходной концентрацией спор 2,5×107 в 1 см3 физиологического раствора, а затем последовательно добавляют натриевую соль сукцината хитозана, сапонин и глицерин, взятых в конечной концентрации 1,0, 0,25 и 20,0%, соответственно, получая состав 1 при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Вакцину эмульгируют в гомогенизаторе при 3500 об/мин в течение 15 мин.
Полученная вакцина представляет собой однородную эмульсию белого цвета.
Пример 2. Для получения некробактериозного антигена - лейкоцидин-экзотоксина берут производственный штамм Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ, культивируют, инактивируют формалином в конечной концентрации 0,4%, отделяют бакмассу от культуральной жидкости центрифугированием, из культуральной жидкости выделяют экзотоксин, подвергают его высокой очистке ультрафильтрацией на полых волокнах с размером пор 13-17 кДа и концентрируют до содержания белка (по Лоури) 5,5-7,0 мг % с молекулярной массой 18-20 кДа. Далее к полученному антигену - экзотоксину-лейкоцидину добавляют 1-10% инактивированной бактериальной массы штамма Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ с содержанием 2,0 млрд. клеток в 1 см3, затем сорбируют на 15% гидроокисью алюминия в гликолевом буфере с pH 8,6, взятой в конечной концентрации 3,0%. После сорбции антигена на гидрате окиси алюминия проверяют нейтрализацию остаточного количества формалина. Далее к полученному антигену - экзотоксину-лейкоцидину добавляют инактивированную бактериальной массы штамма Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ до содержания Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ 2,0 млрд. клеток в 1 см3, затем сорбируют на 15% гидроокисью алюминия в гликолевом буфере с pH 8,6, взятой в конечной концентрации 2,0%. После сорбции антигена на гидрате окиси алюминия проверяют нейтрализацию остаточного количества формалина. К 63,25 г смеси инактивированного формалином экзотоксина-лейкоцидина и инактивированной бактериальной массы штамма Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ, добавляют 1,0 г суспензии живых спор сибиреязвенного вакцинного штамма 55-ВНИИВВиМ с исходной концентрацией спор 3,0×107 в 1 см3 физиологического раствора, а затем последовательно добавляют натриевую соль сукцината хитозана, сапонин и глицерин, взятых в конечной концентрации 5,0, 0,75 и 30,0%, соответственно, получая состав 2 при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Вакцину эмульгируют в гомогенизаторе при 3500 об/мин в течение 15 мин.
Полученная вакцина представляет собой однородную эмульсию белого цвета.
Пример 3. Полученные по примерам 1-2 составы 1-2 применяют для профилактических и вынужденных прививок клинически здоровых животных однократно. Молодняк, не достигший 3-месячного возраста, прививать ассоциированной вакциной не разрешается. Вакцину вводят внутрикожно с помощью безыгольного инъектора в бесшерстный участок тела крупному рогатому скоту и свиньям по 0,4 см3 (2 раза по 0,2 см3) овцам, козам и северным оленям по 0,2 см3.
Устойчивость к заражению сибирской язвой и некробактериозом сохраняется до 1,5 года, что в 1,5 раза длительней, чем известная вакцина (полученная по прототипу) - что подтверждают данные таблицы.
Кроме того, реактогенность в группе контрольных животных, получавших вакцину, полученную по прототипу, составила 5,2±1,6 см2, в то время как в опытных группах она была равна 0.
Таким образом, вакцина против некробактериоза является высокоэффективным препаратом, способным более длительно защитить животных от некробактериоза (более двух лет) и снизить реактогенность с 3,6-6,8 см до 0 см.
Предлагаемая ассоциированная вакцина против сибирской язвы и некробактериоза создает длительный иммунитет у привитых животных, при этом по иммуногенности она превосходит известную вакцину против сибирской язвы и некробактериоза. Вакцина безвредна и авирулентна для лабораторных и сельскохозяйственных животных.
Claims (2)
1. Вакцина против сибирской язвы и некробактериоза, содержащая инактивированный формалином лейкоцидин-экзотоксин, полученный из производственного штамма Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ, представляющий собой высокоочищенный белок с молекулярной массой 18-20 кДа и адсорбированный на гидроокиси алюминия, а также суспензию живых спор сибиреязвенного вакцинного штамма 55-ВНИИВВиМ в физиологическом растворе, глицерин и сапонин, отличающаяся тем, что инактивированный формалином лейкоцидин-экзотоксин, полученный из производственного штамма Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ, представляет собой высокоочищенный белок с молекулярной массой 18-20 кДа с содержанием 1,5-2,0 млрд. клеток Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ в 1 см3, адсорбированный на гидроокиси алюминия, и дополнительно содержит натриевую соль сукцината хитозана при следующем соотношении компонентов, мас.%:
2. Способ получения вакцины против сибирской язвы и некробактериоза путем культивирования штамма Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ, инактивирования его формалином, отделения бактериальной массы от культуральной жидкости центрифугированием, выделением из культуральной жидкости экзотоксина-лейкоцидина, его очистки и концентрирования ультрафильтрацией на полых волокнах и адсорбцией на гидроокиси алюминия в гликолевом буфере, добавлением суспензии живых спор сибириязвенного вакцинного штамма 55-ВНИИВВиМ, сапонина и глицерина, отличающийся тем, что к экзотоксину-лейкоцидину добавляют инактивированную бактериальную массу штамма Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ с содержанием 1,5-2,0 млрд. клеток Fusobacterium necrophorum "0-1" ВИЭВ в 1 см3, а после добавления в реакционную смесь суспензии живых спор сибириязвенного вакцинного штамма 55-ВНИИВВиМ последовательно добавляют натриевую соль сукцината хитозана и сапонин, а глицерин добавляют сразу после добавления сапонина.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015119346/10A RU2590598C1 (ru) | 2015-05-22 | 2015-05-22 | Вакцина для профилактики сибирской язвы и некробактериоза животных и способ получения её |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015119346/10A RU2590598C1 (ru) | 2015-05-22 | 2015-05-22 | Вакцина для профилактики сибирской язвы и некробактериоза животных и способ получения её |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2590598C1 true RU2590598C1 (ru) | 2016-07-10 |
Family
ID=56371983
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2015119346/10A RU2590598C1 (ru) | 2015-05-22 | 2015-05-22 | Вакцина для профилактики сибирской язвы и некробактериоза животных и способ получения её |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2590598C1 (ru) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2191599C1 (ru) * | 2001-11-01 | 2002-10-27 | Караваев Юрий Дмитриевич | Ассоциированная вакцина для профилактики сибирской язвы и некробактериоза животных |
| RU2286174C2 (ru) * | 2002-10-16 | 2006-10-27 | Юрий Олегович Селянинов | Ассоциированная вакцина против сибирской язвы и некробактериоза животных |
| RU2480237C1 (ru) * | 2011-11-15 | 2013-04-27 | Открытое Акционерное Общество "Институт Биотехнологий Ветеринарной Медицины" | Ассоциированная вакцина для профилактики сибирской язвы и некробактериоза животных |
| RU2524430C1 (ru) * | 2013-05-07 | 2014-07-27 | Николай Васильевич Мельник | Вакцина для профилактики сибирской язвы и некробактериоза животных и способ получения ее |
-
2015
- 2015-05-22 RU RU2015119346/10A patent/RU2590598C1/ru active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2191599C1 (ru) * | 2001-11-01 | 2002-10-27 | Караваев Юрий Дмитриевич | Ассоциированная вакцина для профилактики сибирской язвы и некробактериоза животных |
| RU2286174C2 (ru) * | 2002-10-16 | 2006-10-27 | Юрий Олегович Селянинов | Ассоциированная вакцина против сибирской язвы и некробактериоза животных |
| RU2480237C1 (ru) * | 2011-11-15 | 2013-04-27 | Открытое Акционерное Общество "Институт Биотехнологий Ветеринарной Медицины" | Ассоциированная вакцина для профилактики сибирской язвы и некробактериоза животных |
| RU2524430C1 (ru) * | 2013-05-07 | 2014-07-27 | Николай Васильевич Мельник | Вакцина для профилактики сибирской язвы и некробактериоза животных и способ получения ее |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP6667704B2 (ja) | 油性アジュバント | |
| US8980283B2 (en) | C. perfringens alpha toxoid vaccine | |
| BR112020011593A2 (pt) | Uma vacina para proteção contra streptococcus suis | |
| BRPI0211492B1 (pt) | "composição de vacina para uso na prevenção ou melhora de encefalite de west nile em equídeos, e uso de um componente imunogenicamente ativo na preparação da mesma | |
| EP3471706B1 (en) | Oral pharmaceutical composition comprising a pharmaceutically active agent, at least one cationic bioadhesive polymer and at least two anionic polymers | |
| RU2480237C1 (ru) | Ассоциированная вакцина для профилактики сибирской язвы и некробактериоза животных | |
| RU2524430C1 (ru) | Вакцина для профилактики сибирской язвы и некробактериоза животных и способ получения ее | |
| EP3661546B1 (en) | A vaccine for protection against streptococcus suis | |
| JPH02149530A (ja) | 水酸化亜鉛または水酸化鉄をアジュバントとして含有する抗原溶液 | |
| EP3076997B1 (en) | Swine vaccine against prrs and lawsonia intracellularis | |
| RU2355423C1 (ru) | Адъювант | |
| RU2590598C1 (ru) | Вакцина для профилактики сибирской язвы и некробактериоза животных и способ получения её | |
| RU2590596C1 (ru) | Вакцина для профилактики некробактериоза животных и способ её получения | |
| RU2191599C1 (ru) | Ассоциированная вакцина для профилактики сибирской язвы и некробактериоза животных | |
| RU2636454C2 (ru) | Вакцина для профилактики некробактериоза животных и способ её получения | |
| JP6712760B2 (ja) | サルモネラワクチン | |
| CN107496914B (zh) | 一种佐剂组合物及其制备方法和应用 | |
| RU2329828C1 (ru) | Способ изготовления вакцины для профилактики и лечения некробактериоза животных, вакцина для профилактики и лечения некробактериоза животных и способ профилактики и лечения некробактериоза животных | |
| RU2396978C1 (ru) | Способ профилактики развития лейкоза крупного рогатого скота | |
| Savina et al. | The effect of synthetic adjuvant on the formation of the immune response | |
| ES2301230T3 (es) | Antigenos de erysipelothrix rhusiopathiae y composiciones de vacuna. | |
| CA3081769A1 (en) | A vaccine comprising a delipidated c. burnetii polysaccharide | |
| CN105031645B (zh) | 一种人用狂犬病疫苗及其制备方法 | |
| RU2340357C2 (ru) | Вакцина против эшерихиоза животных | |
| RU2517733C1 (ru) | Вакцина ассоциированная против аденовирусной, герпесвирусной инфекцией, парагриппа-3 и вирусной диареи-болезни слизистых оболочек крупного рогатого скота инактивированная эмульсионная |