RU2303999C1 - Способ получения ассоциированной коклюшной, дифтерийной и столбнячной вакцины - Google Patents

Способ получения ассоциированной коклюшной, дифтерийной и столбнячной вакцины Download PDF

Info

Publication number
RU2303999C1
RU2303999C1 RU2006103887/15A RU2006103887A RU2303999C1 RU 2303999 C1 RU2303999 C1 RU 2303999C1 RU 2006103887/15 A RU2006103887/15 A RU 2006103887/15A RU 2006103887 A RU2006103887 A RU 2006103887A RU 2303999 C1 RU2303999 C1 RU 2303999C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
mixture
pertussis
diphtheria
tetanus
dtp
Prior art date
Application number
RU2006103887/15A
Other languages
English (en)
Inventor
Борис Федорович Семенов (RU)
Борис Федорович Семенов
Нинель Сергеевна Захарова (RU)
Нинель Сергеевна Захарова
Ирина Глебовна Бажанова (RU)
Ирина Глебовна Бажанова
Марина Васильевна Брицина (RU)
Марина Васильевна Брицина
Натали Устиновна Мерцалова (RU)
Наталия Устиновна Мерцалова
Мари Николаевна Озерецковска (RU)
Мария Николаевна Озерецковская
Елена Викторовна Ермолова (RU)
Елена Викторовна Ермолова
Евгений Михайлович Зайцев (RU)
Евгений Михайлович Зайцев
Александр Владимирович Поддубиков (RU)
Александр Владимирович Поддубиков
Original Assignee
Государственное учреждение Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова Российской академии медицинских наук
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Государственное учреждение Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова Российской академии медицинских наук filed Critical Государственное учреждение Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова Российской академии медицинских наук
Priority to RU2006103887/15A priority Critical patent/RU2303999C1/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2303999C1 publication Critical patent/RU2303999C1/ru

Links

Landscapes

  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

Изобретение относится к микробиологии и касается способа получения ассоциированной коклюшной, дифтерийной и столбнячной вакцины (АКДС). Способ получения ассоциированной коклюшной, дифтерийной и столбнячной вакцины включает смешивание коклюшного компонента, дифтерийного и столбнячного анатоксинов, сорбцию смеси на гидроксиде алюминия, дозирование смеси в емкость, лиофилизацию смеси и герметическое запаивание емкости, при этом в качестве коклюшного компонента используют бесклеточный коклюшный анатоксин, смешивание бесклеточного коклюшного анатоксина, дифтерийного и столбнячного анатоксинов осуществляют одновременно в присутствии физиологического раствора, забуференного фосфатом, полученную смесь выдерживают в течение 1 часа при 4-10°С с последующей сорбцией на гидроксиде алюминия, непосредственно перед лиофилизацией в смесь добавляют сахарозу до конечной концентрации 9-10,5%, после чего смесь перемешивают и выдерживают при 4-10°С в течение 1 часа. Преимущество изобретения заключается в снижении реактогенности. 4 табл.

Description

Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано для получения ассоциированной коклюшной, дифтерийной, столбнячной вакцины (АКДС).
Известен способ получения ассоциированной коклюшной, дифтерийной и столбнячной вакцины путем смешивания дифтерийного и столбнячного анатоксинов, сорбции смеси на гидроксиде алюминия, перемешивания смеси 15-20 минут и выдерживания при 4-10°С до следующего дня с последующим удалением надосадочной жидкости и замены ее на изотонический раствор хлорида натрия с сахарозой до конечной концентрации 8%, добавлением суспензии убитых коклюшных микробов, перемешиванием смеси в течение 30 минут, розливом готовой АКДС-вакцины в ампулы по 1-2 разовых дозы для человека и лиофилизацией ее обычным путем (Руководство по вакцинно-сывороточному делу, Москва, Медицина, 1978 г., с.165-169).
Проблема получения высокоэффективной и слаботоксичной ассоциированной АКДС-вакцины для профилактики коклюшной, дифтерийной и столбнячной инфекций остается актуальной, поскольку применяемая в практике АКДС-вакцина с корпускулярньм коклюшным компонентом значительно реактогенна (в основном из-за реактогенности корпускулярного коклюшного компонента).
Снижение реактогенности АКДС-вакцины - одно из важных условий совершенствования этих препаратов.
Технический результат заявленного способа заключается в получении высокоактивной и малотоксичной АКДС-вакцины.
Для достижения указанного технического результата в способе получения ассоциированной коклюшной, дифтерийной и столбнячной вакцины путем смешивания коклюшного компонента, дифтерийного и столбнячного анатоксинов, сорбции смеси на гидроксиде алюминия, дозирования смеси в емкость, лиофилизации смеси и герметического запаивания емкости, согласно изобретению, в качестве коклюшного компонента используют бесклеточный коклюшный анатоксин, смешивание бесклеточного коклюшного анатоксина, дифтерийного и столбнячного анатоксинов осуществляют одновременно в присутствии физиологического раствора, забуференного фосфатом, полученную смесь выдерживают в течение 1 часа при 4-10°С с последующей сорбцией на гидроксиде алюминия, непосредственно перед лиофилизацией в смесь добавляют сахарозу до конечной концентрации 9-10,5%, после чего смесь перемешивают и выдерживают при 4-10°С в течение 1 часа.
Сущность изобретения поясняется на следующих примерах.
Пример 1. Для приготовления 100 ампул АКДС-вакцины, содержащей по 2 дозы для человека в 1 ампуле и включающей 52 мкг белка бесклеточного коклюшного анатоксина, 30 Lf (флокулирующих единиц) дифтерийного анатоксина, 10 ЕС (единиц связывания) столбнячного анатоксина, 2 мг гидроксида алюминия аммиачного и 0,054 г сахарозы, смешивают 6240 мкг белка коклюшного анатоксина, 3600 Lf дифтерийного анатоксина и 1200 ЕС столбнячного анатоксина одновременно в присутствии физиологического раствора, забуференного фосфатом (PBS), смесь выдерживают в холодильнике 4-10°С в течение 1 часа, затем добавляют 240 мг гидроксида алюминия. Смесь встряхивают в течение 1 часа при 4-10°С и оставляют на ночь в холодильнике при 4-10°С. На следующий день добавляют 5,4 г сахарозы до конечной концентрации 9%. Общий объем смеси должен составлять 60 мл. Смесь осторожно перемешивают, затем держат в холодильнике в течение 1 часа при 4-10°С, разливают в ампулы по 0,6 мл и подвергают вакуумной лиофилизации. После лиофилизации ампулы запаивают под вакуумом и хранят в холодильнике при 4-10°С. Перед вакцинацией в 1 ампулу добавляют 1,2 мл апирогенной стерильной дистиллированной воды и вводят внутримышечно препарат в дозе 0,5 мл (1 доза для человека).
Пример 2. Для приготовления 100 ампул АКДС-вакцины, содержащей 2 дозы для человека в одной ампуле и включающей 52 мкг белка бесклеточного коклюшного анатоксина, 30 Lf (флокулирующих единиц) дифтерийного анатоксина, 10 ЕС (единиц связывания) столбнячного анатоксина, 2 мг гидроксида алюминия аммиачного и 0,063 г сахарозы, смешивают 6240 мкг белка коклюшного анатоксина, 3600 Lf дифтерийного анатоксина и 1200 ЕС столбнячного анатоксина в растворе PBS, смесь выдерживают в холодильнике(4-10°С) в течение 1 часа, затем добавляют 240 мг гидроксида алюминия, смесь встряхивают в течение 1 часа при 4-10°С и оставляют на ночь в холодильнике при 4-10°С. На следующий день добавляют 6,3 г сахарозы до конечной концентрации 10,5%. Общий объем смеси должен составлять 60 мл. Смесь осторожно перемешивают, оставляют в холодильнике при 4-10°С в течение 1 часа, затем разливают в ампулы по 0,6 мл и подвергают вакуумной лиофилизации. После лиофилизации ампулы запаивают под вакуумом и хранят в холодильнике при 4-10°С. При использовании в 1 ампулу добавляют 1,2 мл апирогенной стерильной дистиллированной воды и вводят препарат в дозе 0,5 мл (одна доза для человека).
Как известно, реактогенность АКДС-вакцины, используемой в практике здравоохранения, в основном зависит от входящего в ее состав корпускулярного коклюшного компонента, представляющего собой суспензию убитых микробных клеток. Замена корпускулярного коклюшного компонента на слаботоксичный бесклеточный коклюшный компонент дает возможность снизить токсические свойства АКДС-вакцины. При конструировании АКДС-вакцины с бесклеточным коклюшным компонентом возникла проблема сорбции всех компонентов на гидроксиде алюминия вследствие того, что в АКДС-вакцине с корпускулярным коклюшным компонентом, получаемой известным способом, гидроксид алюминия требовался только для сорбции дифтерийного и столбнячного анатоксинов, а в АКДС-вакцине с бесклеточным коклюшным анатоксином все 3 компонента (коклюшный, дифтерийный и столбнячный) белковой природы и для оптимального проявления иммуногенных свойств каждый должен быть сорбирован на гидроксиде алюминия. При сорбции этих компонентов известным методом не было полной сорбции дифтерийного и столбнячного компонентов. При использовании заявляемого способа получения АКДС-вакцины удалось достигнуть сорбции всех 3 компонентов на оптимальном для вакцины количестве геля - 2 мг/мл (увеличение количества геля не рекомендовано Всемирной организацией здравоохранения). Полная сорбция коклюшного, дифтерийного и столбнячного анатоксинов была показана методом реакции нейтрализации антител (РНаТ) с соответствующими эритроцитарными диагностикумами.
Таблица 1.
Определение полноты сорбции коклюшного, дифтерийного, столбнячного анатоксинов в АКДС-вакцине с бесклеточным коклюшным анатоксином.
Состав АКДС в 1 мл Количество гидроксида алюминия (в мг/мл) % сорбции
50 мкг коклюшного анатоксина 2 100
30 Lf дифтерийного анатоксина 2 100
10 ЕС столбнячного анатоксина 2 100
Исследование протективных свойств АКДС-вакцины, полученной заявляемым способом, показало, что все компоненты, входящие в ее состав: бесклеточный коклюшный анатоксин, дифтерийный и столбнячный анатоксины, - обладали высокими протективными свойствами и соответствовали требованиям, предъявляемым ВОЗ к АКДС-вакцине (табл.2).
Таблица 2.
Протективные свойства бесклеточного коклюшного анатоксина, дифтерийного и столбнячного анатоксинов в АКДС-вакцине.
Количество серий АКДС-вакцины Количество иммунизирующих единиц в 1 мл АКДС-вакцин
Коклюшный анатоксин (в МЗЕ*) Дифтерийный анатоксин (в МИЕ**) Столбнячный анатоксин (в МИЕ*)
1 серия 12 124 534
2 серия 17,9 95 368
3 серия 14,7 115 422
4 серия 19,5 101 474
Средняя величина с доверительным интервалом 16 (14÷18) 109 (102÷116) 449 (374÷524)
Кол-во иммунизирующих единиц для АКДС-вакцины, требуемое ВОЗ 8 60 120
*МЗЕ - международные защитные единицы.
**МИЕ - международные иммунизирующие единицы.
АКДС-вакцина обладала сниженными токсическими свойствами; так, в реакции сенсибилизации к гистамину мыши, привитые 1 человеческой дозой АКДС-вакцины, полученной заявляемым способом, в 3 сериях не давали гибели при введении 2 мг гистамина и в 1 серии гибель была низкой (16,6%) (табл.3), а привитые АКДС-вакциной, полученной известным способом, давали 62,26% гибели.
Таблица 3.
Гистаминсенсибилизирующая активность АКДС-вакцин.
Препарат № серии Доза, введенная 1 мыши К-во введенного гистамина на мышь Гибель мышей через 24 часа после введ. гист. в %
АКДС- 1
вакцина, полученная заявляемым способом 1 иммунизирующая доза для человека 2 мг 0
АКДС- 1
вакцина, полученная заявляемым способом 2 иммунизирующая доза для человека 2 мг 0
АКДС- 1
вакцина, полученная заявляемым способом 3 иммунизирующая доза для человека 2 мг 0
АКДС- 1
вакцина, полученная заявляемым способом 4 иммунизирующая доза для человека 2 мг 16,6
АКДС- 1
вакцина, полученная известным способом 5 иммунизирующая доза для человека 2 мг 62,26 (60,26÷64,26)
Сравнительное изучение токсических свойств АКДС-вакцины, полученной заявляемым способом, и АКДС, полученной известным способом, показало, что в опытах острой токсичности АКДС-вакцина, полученная заявляемым способом, была в 13,7 раз менее токсична, а в опытах гистаминсенсибилизации в 7,5 раз менее токсична, чем АКДС (табл.4).
Таблица 4
Сравнение токсических свойств АКДС-вакцин при равноценной протективной активности препаратов.
Препарат Острая токсичность (ЛД50)* ГСД50**
АКДС-вакцина, полученная заявляемым способом 746 мкг белка 151,6 мкг белка
Количество токсических доз на одну иммунизирующую дозу для человека (25 мкг белка) 0,027 0,13
АКДС-вакцина, полученная известным способом 27 мдрд. микроб. кл. 9,78 млрд. микроб. кл.
Количество токсических доз на 1 иммунизирующую дозу для человека (10 млрд.кл.) 0,37 0,978
Снижение токсичности АКДС-вакцины, полученной заявляемым способом, по отношению к АКДС-вакцине, полученной известным способом 13,7раз 7,5 раз
Примечание:
*ЛД50 - средняя расчетная токсическая доза препарата, вызывающая гибель 50% мышей.
**ГСД50 - средняя расчетная сенсибилизирующая к гистамину токсическая доза, вызывающая гибель 50% мышей после введения гистамина.
Полученные данные свидетельствуют о высоких протективных свойствах и сниженной токсичности АКДС-вакцины, полученной заявленным способом, по сравнению с АКДС-вакциной, полученной известным способом.
Преимущество изобретения заключается в том, что разработан способ получения высокоактивного и малотоксичного препарата АКДС-вакцины, полученной заявленным способом (АКбДС-вакцины), с бесклеточным коклюшным анатоксином, который может быть использован в практике здравоохранения для профилактики коклюша, дифтерии и столбняка у детей.

Claims (1)

  1. Способ получения ассоциированной коклюшной, дифтерийной и столбнячной вакцины путем смешивания коклюшного компонента, дифтерийного и столбнячного анатоксинов, сорбции смеси на гидроксиде алюминия, дозирования смеси в емкость, лиофилизации смеси и герметического запаивания емкости, отличающийся тем, что в качестве коклюшного компонента используют бесклеточный коклюшный анатоксин, смешивание бесклеточного коклюшного анатоксина, дифтерийного и столбнячного анатоксинов осуществляют одновременно в присутствии физиологического раствора, забуференного фосфатом, полученную смесь выдерживают в течение 1 ч при 4-10°С с последующей сорбцией на гидроксиде алюминия, непосредственно перед лиофилизацией в смесь добавляют сахарозу до конечной концентрации 9-10,5%, после чего смесь перемешивают и выдерживают при 4-10°С в течение 1 ч.
RU2006103887/15A 2006-02-10 2006-02-10 Способ получения ассоциированной коклюшной, дифтерийной и столбнячной вакцины RU2303999C1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2006103887/15A RU2303999C1 (ru) 2006-02-10 2006-02-10 Способ получения ассоциированной коклюшной, дифтерийной и столбнячной вакцины

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2006103887/15A RU2303999C1 (ru) 2006-02-10 2006-02-10 Способ получения ассоциированной коклюшной, дифтерийной и столбнячной вакцины

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2303999C1 true RU2303999C1 (ru) 2007-08-10

Family

ID=38510750

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2006103887/15A RU2303999C1 (ru) 2006-02-10 2006-02-10 Способ получения ассоциированной коклюшной, дифтерийной и столбнячной вакцины

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2303999C1 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2596919C2 (ru) * 2015-01-16 2016-09-10 Федеральное государственное унитарное предприятие "Научно-производственное объединение по медицинским иммунобиологическим препаратам "Микроген" Министерства здравоохранения Российской Федерации Комбинированная вакцина для профилактики коклюша, дифтерии, столбняка

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Руководство по вакцинно-сыворотному делу. - М.: Медицина, 1978, с.165-169. *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2596919C2 (ru) * 2015-01-16 2016-09-10 Федеральное государственное унитарное предприятие "Научно-производственное объединение по медицинским иммунобиологическим препаратам "Микроген" Министерства здравоохранения Российской Федерации Комбинированная вакцина для профилактики коклюша, дифтерии, столбняка

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP6745223B2 (ja) ワクチン組成物
JP6796146B2 (ja) 水酸化アルミニウムゲル−塩化ナトリウム複合免疫学的アジュバント、並びにその調製方法及びその使用
CN115651088A (zh) 人参总多糖的制备方法和应用、人参总多糖疫苗佐剂及其疫苗组合物
RU2303999C1 (ru) Способ получения ассоциированной коклюшной, дифтерийной и столбнячной вакцины
CN107261134B (zh) 一种猪萎缩性鼻炎灭活疫苗用免疫增强剂及其制备方法
RU2396978C1 (ru) Способ профилактики развития лейкоза крупного рогатого скота
RU2306948C1 (ru) Способ получения ассоциированной коклюшной, дифтерийной и столбнячной вакцины
CN114366810A (zh) 一种可高效诱导体液和细胞免疫的天然微生物和植物来源复合双佐剂及其制备方法和应用
RU2669811C1 (ru) Применение спрея на основе аминокапроновой кислоты и сополимера 2-метил-5-винилпиридина и N-винилпирролидона
RU2115433C1 (ru) Вакцина сибиреязвенная комбинированная
RU2662089C1 (ru) Комплексный назальный спрей на основе аминокапроновой кислоты и сополимера 2-метил-5-винилпиридина и N-винилпирролидона
RU2083223C1 (ru) Способ получения поликомпонентной вакцины для иммунотерапии заболеваний, вызываемых условно-патогенными микроорганизмами
RU2229895C1 (ru) Вакцина против вирусной геморрагической болезни кроликов
RU2626532C2 (ru) Комбинированная вакцина для профилактики коклюша, дифтерии, столбняка, гепатита в и инфекции, вызываемой haemophilus influenzae тип в
RU2571819C2 (ru) Иммунометаболический состав с антимикробной активностью
RU2814593C1 (ru) Способ профилактики эшерихиоза у поросят
RU2521513C1 (ru) Применение этония в качестве адъюванта для производства сорбированной противоящурной вакцины
RU2231365C1 (ru) Способ изготовления вакцины против вирусной гемморрагической болезни кроликов
RU2596919C2 (ru) Комбинированная вакцина для профилактики коклюша, дифтерии, столбняка
RU2711630C1 (ru) Способ лечения туберкулеза и состав для его осуществления
RU2590596C1 (ru) Вакцина для профилактики некробактериоза животных и способ её получения
RU2669810C1 (ru) Противовирусная и иммуномодулирующая комбинация аминокапроновой кислоты и сополимера 2-метил-5-винилпиридина и N-винилпирролидона
RU2408369C2 (ru) Способ специфической профилактики острых кишечных заболеваний телят
RU2404807C1 (ru) Лекарственное средство для профилактики и лечения болезней вирусной этиологии у крупного рогатого скота и способ профилактики и лечения этих болезней
Christodoulou et al. Al-fumarate, a Metal-Organic Framework encapsulating antigen as a potent, versatile and resorbable vaccine adjuvant