RU2303999C1 - Способ получения ассоциированной коклюшной, дифтерийной и столбнячной вакцины - Google Patents
Способ получения ассоциированной коклюшной, дифтерийной и столбнячной вакцины Download PDFInfo
- Publication number
- RU2303999C1 RU2303999C1 RU2006103887/15A RU2006103887A RU2303999C1 RU 2303999 C1 RU2303999 C1 RU 2303999C1 RU 2006103887/15 A RU2006103887/15 A RU 2006103887/15A RU 2006103887 A RU2006103887 A RU 2006103887A RU 2303999 C1 RU2303999 C1 RU 2303999C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- mixture
- pertussis
- diphtheria
- tetanus
- dtp
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Изобретение относится к микробиологии и касается способа получения ассоциированной коклюшной, дифтерийной и столбнячной вакцины (АКДС). Способ получения ассоциированной коклюшной, дифтерийной и столбнячной вакцины включает смешивание коклюшного компонента, дифтерийного и столбнячного анатоксинов, сорбцию смеси на гидроксиде алюминия, дозирование смеси в емкость, лиофилизацию смеси и герметическое запаивание емкости, при этом в качестве коклюшного компонента используют бесклеточный коклюшный анатоксин, смешивание бесклеточного коклюшного анатоксина, дифтерийного и столбнячного анатоксинов осуществляют одновременно в присутствии физиологического раствора, забуференного фосфатом, полученную смесь выдерживают в течение 1 часа при 4-10°С с последующей сорбцией на гидроксиде алюминия, непосредственно перед лиофилизацией в смесь добавляют сахарозу до конечной концентрации 9-10,5%, после чего смесь перемешивают и выдерживают при 4-10°С в течение 1 часа. Преимущество изобретения заключается в снижении реактогенности. 4 табл.
Description
Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано для получения ассоциированной коклюшной, дифтерийной, столбнячной вакцины (АКДС).
Известен способ получения ассоциированной коклюшной, дифтерийной и столбнячной вакцины путем смешивания дифтерийного и столбнячного анатоксинов, сорбции смеси на гидроксиде алюминия, перемешивания смеси 15-20 минут и выдерживания при 4-10°С до следующего дня с последующим удалением надосадочной жидкости и замены ее на изотонический раствор хлорида натрия с сахарозой до конечной концентрации 8%, добавлением суспензии убитых коклюшных микробов, перемешиванием смеси в течение 30 минут, розливом готовой АКДС-вакцины в ампулы по 1-2 разовых дозы для человека и лиофилизацией ее обычным путем (Руководство по вакцинно-сывороточному делу, Москва, Медицина, 1978 г., с.165-169).
Проблема получения высокоэффективной и слаботоксичной ассоциированной АКДС-вакцины для профилактики коклюшной, дифтерийной и столбнячной инфекций остается актуальной, поскольку применяемая в практике АКДС-вакцина с корпускулярньм коклюшным компонентом значительно реактогенна (в основном из-за реактогенности корпускулярного коклюшного компонента).
Снижение реактогенности АКДС-вакцины - одно из важных условий совершенствования этих препаратов.
Технический результат заявленного способа заключается в получении высокоактивной и малотоксичной АКДС-вакцины.
Для достижения указанного технического результата в способе получения ассоциированной коклюшной, дифтерийной и столбнячной вакцины путем смешивания коклюшного компонента, дифтерийного и столбнячного анатоксинов, сорбции смеси на гидроксиде алюминия, дозирования смеси в емкость, лиофилизации смеси и герметического запаивания емкости, согласно изобретению, в качестве коклюшного компонента используют бесклеточный коклюшный анатоксин, смешивание бесклеточного коклюшного анатоксина, дифтерийного и столбнячного анатоксинов осуществляют одновременно в присутствии физиологического раствора, забуференного фосфатом, полученную смесь выдерживают в течение 1 часа при 4-10°С с последующей сорбцией на гидроксиде алюминия, непосредственно перед лиофилизацией в смесь добавляют сахарозу до конечной концентрации 9-10,5%, после чего смесь перемешивают и выдерживают при 4-10°С в течение 1 часа.
Сущность изобретения поясняется на следующих примерах.
Пример 1. Для приготовления 100 ампул АКДС-вакцины, содержащей по 2 дозы для человека в 1 ампуле и включающей 52 мкг белка бесклеточного коклюшного анатоксина, 30 Lf (флокулирующих единиц) дифтерийного анатоксина, 10 ЕС (единиц связывания) столбнячного анатоксина, 2 мг гидроксида алюминия аммиачного и 0,054 г сахарозы, смешивают 6240 мкг белка коклюшного анатоксина, 3600 Lf дифтерийного анатоксина и 1200 ЕС столбнячного анатоксина одновременно в присутствии физиологического раствора, забуференного фосфатом (PBS), смесь выдерживают в холодильнике 4-10°С в течение 1 часа, затем добавляют 240 мг гидроксида алюминия. Смесь встряхивают в течение 1 часа при 4-10°С и оставляют на ночь в холодильнике при 4-10°С. На следующий день добавляют 5,4 г сахарозы до конечной концентрации 9%. Общий объем смеси должен составлять 60 мл. Смесь осторожно перемешивают, затем держат в холодильнике в течение 1 часа при 4-10°С, разливают в ампулы по 0,6 мл и подвергают вакуумной лиофилизации. После лиофилизации ампулы запаивают под вакуумом и хранят в холодильнике при 4-10°С. Перед вакцинацией в 1 ампулу добавляют 1,2 мл апирогенной стерильной дистиллированной воды и вводят внутримышечно препарат в дозе 0,5 мл (1 доза для человека).
Пример 2. Для приготовления 100 ампул АКДС-вакцины, содержащей 2 дозы для человека в одной ампуле и включающей 52 мкг белка бесклеточного коклюшного анатоксина, 30 Lf (флокулирующих единиц) дифтерийного анатоксина, 10 ЕС (единиц связывания) столбнячного анатоксина, 2 мг гидроксида алюминия аммиачного и 0,063 г сахарозы, смешивают 6240 мкг белка коклюшного анатоксина, 3600 Lf дифтерийного анатоксина и 1200 ЕС столбнячного анатоксина в растворе PBS, смесь выдерживают в холодильнике(4-10°С) в течение 1 часа, затем добавляют 240 мг гидроксида алюминия, смесь встряхивают в течение 1 часа при 4-10°С и оставляют на ночь в холодильнике при 4-10°С. На следующий день добавляют 6,3 г сахарозы до конечной концентрации 10,5%. Общий объем смеси должен составлять 60 мл. Смесь осторожно перемешивают, оставляют в холодильнике при 4-10°С в течение 1 часа, затем разливают в ампулы по 0,6 мл и подвергают вакуумной лиофилизации. После лиофилизации ампулы запаивают под вакуумом и хранят в холодильнике при 4-10°С. При использовании в 1 ампулу добавляют 1,2 мл апирогенной стерильной дистиллированной воды и вводят препарат в дозе 0,5 мл (одна доза для человека).
Как известно, реактогенность АКДС-вакцины, используемой в практике здравоохранения, в основном зависит от входящего в ее состав корпускулярного коклюшного компонента, представляющего собой суспензию убитых микробных клеток. Замена корпускулярного коклюшного компонента на слаботоксичный бесклеточный коклюшный компонент дает возможность снизить токсические свойства АКДС-вакцины. При конструировании АКДС-вакцины с бесклеточным коклюшным компонентом возникла проблема сорбции всех компонентов на гидроксиде алюминия вследствие того, что в АКДС-вакцине с корпускулярным коклюшным компонентом, получаемой известным способом, гидроксид алюминия требовался только для сорбции дифтерийного и столбнячного анатоксинов, а в АКДС-вакцине с бесклеточным коклюшным анатоксином все 3 компонента (коклюшный, дифтерийный и столбнячный) белковой природы и для оптимального проявления иммуногенных свойств каждый должен быть сорбирован на гидроксиде алюминия. При сорбции этих компонентов известным методом не было полной сорбции дифтерийного и столбнячного компонентов. При использовании заявляемого способа получения АКДС-вакцины удалось достигнуть сорбции всех 3 компонентов на оптимальном для вакцины количестве геля - 2 мг/мл (увеличение количества геля не рекомендовано Всемирной организацией здравоохранения). Полная сорбция коклюшного, дифтерийного и столбнячного анатоксинов была показана методом реакции нейтрализации антител (РНаТ) с соответствующими эритроцитарными диагностикумами.
Таблица 1. Определение полноты сорбции коклюшного, дифтерийного, столбнячного анатоксинов в АКДС-вакцине с бесклеточным коклюшным анатоксином. |
||
Состав АКДС в 1 мл | Количество гидроксида алюминия (в мг/мл) | % сорбции |
50 мкг коклюшного анатоксина | 2 | 100 |
30 Lf дифтерийного анатоксина | 2 | 100 |
10 ЕС столбнячного анатоксина | 2 | 100 |
Исследование протективных свойств АКДС-вакцины, полученной заявляемым способом, показало, что все компоненты, входящие в ее состав: бесклеточный коклюшный анатоксин, дифтерийный и столбнячный анатоксины, - обладали высокими протективными свойствами и соответствовали требованиям, предъявляемым ВОЗ к АКДС-вакцине (табл.2).
Таблица 2. Протективные свойства бесклеточного коклюшного анатоксина, дифтерийного и столбнячного анатоксинов в АКДС-вакцине. |
|||
Количество серий АКДС-вакцины | Количество иммунизирующих единиц в 1 мл АКДС-вакцин | ||
Коклюшный анатоксин (в МЗЕ*) | Дифтерийный анатоксин (в МИЕ**) | Столбнячный анатоксин (в МИЕ*) | |
1 серия | 12 | 124 | 534 |
2 серия | 17,9 | 95 | 368 |
3 серия | 14,7 | 115 | 422 |
4 серия | 19,5 | 101 | 474 |
Средняя величина с доверительным интервалом | 16 (14÷18) | 109 (102÷116) | 449 (374÷524) |
Кол-во иммунизирующих единиц для АКДС-вакцины, требуемое ВОЗ | 8 | 60 | 120 |
*МЗЕ - международные защитные единицы. **МИЕ - международные иммунизирующие единицы. |
АКДС-вакцина обладала сниженными токсическими свойствами; так, в реакции сенсибилизации к гистамину мыши, привитые 1 человеческой дозой АКДС-вакцины, полученной заявляемым способом, в 3 сериях не давали гибели при введении 2 мг гистамина и в 1 серии гибель была низкой (16,6%) (табл.3), а привитые АКДС-вакциной, полученной известным способом, давали 62,26% гибели.
Таблица 3. Гистаминсенсибилизирующая активность АКДС-вакцин. |
||||
Препарат | № серии | Доза, введенная 1 мыши | К-во введенного гистамина на мышь | Гибель мышей через 24 часа после введ. гист. в % |
АКДС- | 1 | |||
вакцина, полученная заявляемым способом | 1 | иммунизирующая доза для человека | 2 мг | 0 |
АКДС- | 1 | |||
вакцина, полученная заявляемым способом | 2 | иммунизирующая доза для человека | 2 мг | 0 |
АКДС- | 1 | |||
вакцина, полученная заявляемым способом | 3 | иммунизирующая доза для человека | 2 мг | 0 |
АКДС- | 1 | |||
вакцина, полученная заявляемым способом | 4 | иммунизирующая доза для человека | 2 мг | 16,6 |
АКДС- | 1 | |||
вакцина, полученная известным способом | 5 | иммунизирующая доза для человека | 2 мг | 62,26 (60,26÷64,26) |
Сравнительное изучение токсических свойств АКДС-вакцины, полученной заявляемым способом, и АКДС, полученной известным способом, показало, что в опытах острой токсичности АКДС-вакцина, полученная заявляемым способом, была в 13,7 раз менее токсична, а в опытах гистаминсенсибилизации в 7,5 раз менее токсична, чем АКДС (табл.4).
Таблица 4 Сравнение токсических свойств АКДС-вакцин при равноценной протективной активности препаратов. |
||
Препарат | Острая токсичность (ЛД50)* | ГСД50** |
АКДС-вакцина, полученная заявляемым способом | 746 мкг белка | 151,6 мкг белка |
Количество токсических доз на одну иммунизирующую дозу для человека (25 мкг белка) | 0,027 | 0,13 |
АКДС-вакцина, полученная известным способом | 27 мдрд. микроб. кл. | 9,78 млрд. микроб. кл. |
Количество токсических доз на 1 иммунизирующую дозу для человека (10 млрд.кл.) | 0,37 | 0,978 |
Снижение токсичности АКДС-вакцины, полученной заявляемым способом, по отношению к АКДС-вакцине, полученной известным способом | 13,7раз | 7,5 раз |
Примечание: *ЛД50 - средняя расчетная токсическая доза препарата, вызывающая гибель 50% мышей. **ГСД50 - средняя расчетная сенсибилизирующая к гистамину токсическая доза, вызывающая гибель 50% мышей после введения гистамина. |
Полученные данные свидетельствуют о высоких протективных свойствах и сниженной токсичности АКДС-вакцины, полученной заявленным способом, по сравнению с АКДС-вакциной, полученной известным способом.
Преимущество изобретения заключается в том, что разработан способ получения высокоактивного и малотоксичного препарата АКДС-вакцины, полученной заявленным способом (АКбДС-вакцины), с бесклеточным коклюшным анатоксином, который может быть использован в практике здравоохранения для профилактики коклюша, дифтерии и столбняка у детей.
Claims (1)
- Способ получения ассоциированной коклюшной, дифтерийной и столбнячной вакцины путем смешивания коклюшного компонента, дифтерийного и столбнячного анатоксинов, сорбции смеси на гидроксиде алюминия, дозирования смеси в емкость, лиофилизации смеси и герметического запаивания емкости, отличающийся тем, что в качестве коклюшного компонента используют бесклеточный коклюшный анатоксин, смешивание бесклеточного коклюшного анатоксина, дифтерийного и столбнячного анатоксинов осуществляют одновременно в присутствии физиологического раствора, забуференного фосфатом, полученную смесь выдерживают в течение 1 ч при 4-10°С с последующей сорбцией на гидроксиде алюминия, непосредственно перед лиофилизацией в смесь добавляют сахарозу до конечной концентрации 9-10,5%, после чего смесь перемешивают и выдерживают при 4-10°С в течение 1 ч.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2006103887/15A RU2303999C1 (ru) | 2006-02-10 | 2006-02-10 | Способ получения ассоциированной коклюшной, дифтерийной и столбнячной вакцины |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2006103887/15A RU2303999C1 (ru) | 2006-02-10 | 2006-02-10 | Способ получения ассоциированной коклюшной, дифтерийной и столбнячной вакцины |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2303999C1 true RU2303999C1 (ru) | 2007-08-10 |
Family
ID=38510750
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2006103887/15A RU2303999C1 (ru) | 2006-02-10 | 2006-02-10 | Способ получения ассоциированной коклюшной, дифтерийной и столбнячной вакцины |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2303999C1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2596919C2 (ru) * | 2015-01-16 | 2016-09-10 | Федеральное государственное унитарное предприятие "Научно-производственное объединение по медицинским иммунобиологическим препаратам "Микроген" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Комбинированная вакцина для профилактики коклюша, дифтерии, столбняка |
-
2006
- 2006-02-10 RU RU2006103887/15A patent/RU2303999C1/ru active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Руководство по вакцинно-сыворотному делу. - М.: Медицина, 1978, с.165-169. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2596919C2 (ru) * | 2015-01-16 | 2016-09-10 | Федеральное государственное унитарное предприятие "Научно-производственное объединение по медицинским иммунобиологическим препаратам "Микроген" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Комбинированная вакцина для профилактики коклюша, дифтерии, столбняка |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6745223B2 (ja) | ワクチン組成物 | |
JP6796146B2 (ja) | 水酸化アルミニウムゲル−塩化ナトリウム複合免疫学的アジュバント、並びにその調製方法及びその使用 | |
CN115651088A (zh) | 人参总多糖的制备方法和应用、人参总多糖疫苗佐剂及其疫苗组合物 | |
RU2303999C1 (ru) | Способ получения ассоциированной коклюшной, дифтерийной и столбнячной вакцины | |
CN107261134B (zh) | 一种猪萎缩性鼻炎灭活疫苗用免疫增强剂及其制备方法 | |
RU2396978C1 (ru) | Способ профилактики развития лейкоза крупного рогатого скота | |
RU2306948C1 (ru) | Способ получения ассоциированной коклюшной, дифтерийной и столбнячной вакцины | |
CN114366810A (zh) | 一种可高效诱导体液和细胞免疫的天然微生物和植物来源复合双佐剂及其制备方法和应用 | |
RU2669811C1 (ru) | Применение спрея на основе аминокапроновой кислоты и сополимера 2-метил-5-винилпиридина и N-винилпирролидона | |
RU2115433C1 (ru) | Вакцина сибиреязвенная комбинированная | |
RU2662089C1 (ru) | Комплексный назальный спрей на основе аминокапроновой кислоты и сополимера 2-метил-5-винилпиридина и N-винилпирролидона | |
RU2083223C1 (ru) | Способ получения поликомпонентной вакцины для иммунотерапии заболеваний, вызываемых условно-патогенными микроорганизмами | |
RU2229895C1 (ru) | Вакцина против вирусной геморрагической болезни кроликов | |
RU2626532C2 (ru) | Комбинированная вакцина для профилактики коклюша, дифтерии, столбняка, гепатита в и инфекции, вызываемой haemophilus influenzae тип в | |
RU2571819C2 (ru) | Иммунометаболический состав с антимикробной активностью | |
RU2814593C1 (ru) | Способ профилактики эшерихиоза у поросят | |
RU2521513C1 (ru) | Применение этония в качестве адъюванта для производства сорбированной противоящурной вакцины | |
RU2231365C1 (ru) | Способ изготовления вакцины против вирусной гемморрагической болезни кроликов | |
RU2596919C2 (ru) | Комбинированная вакцина для профилактики коклюша, дифтерии, столбняка | |
RU2711630C1 (ru) | Способ лечения туберкулеза и состав для его осуществления | |
RU2590596C1 (ru) | Вакцина для профилактики некробактериоза животных и способ её получения | |
RU2669810C1 (ru) | Противовирусная и иммуномодулирующая комбинация аминокапроновой кислоты и сополимера 2-метил-5-винилпиридина и N-винилпирролидона | |
RU2408369C2 (ru) | Способ специфической профилактики острых кишечных заболеваний телят | |
RU2404807C1 (ru) | Лекарственное средство для профилактики и лечения болезней вирусной этиологии у крупного рогатого скота и способ профилактики и лечения этих болезней | |
Christodoulou et al. | Al-fumarate, a Metal-Organic Framework encapsulating antigen as a potent, versatile and resorbable vaccine adjuvant |