RU2562859C1 - СПОСОБ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ Listeria monocytogenes НА ПИТАТЕЛЬНОЙ СРЕДЕ, ПРИГОТОВЛЕННОЙ НА ОСНОВЕ ЛИСТОВОГО САЛАТА (Lactuca sativa) - Google Patents
СПОСОБ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ Listeria monocytogenes НА ПИТАТЕЛЬНОЙ СРЕДЕ, ПРИГОТОВЛЕННОЙ НА ОСНОВЕ ЛИСТОВОГО САЛАТА (Lactuca sativa) Download PDFInfo
- Publication number
- RU2562859C1 RU2562859C1 RU2014143435/10A RU2014143435A RU2562859C1 RU 2562859 C1 RU2562859 C1 RU 2562859C1 RU 2014143435/10 A RU2014143435/10 A RU 2014143435/10A RU 2014143435 A RU2014143435 A RU 2014143435A RU 2562859 C1 RU2562859 C1 RU 2562859C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- listeria
- leaf lettuce
- nutrient medium
- listeria monocytogenes
- juice
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к микробиологии, а именно к санитарно-гигиеническому контролю объектов. Способ культивирования листериозного микроба предусматривает приготовление питательной среды, содержащей маточный раствор сока листового салата, агар и фосфатный буфер в заданном соотношении. На подготовленную питательную среду наносят Listeria monocytogenes и культивируют при температуре 20-22°С не менее 24 часов. При этом маточный раствор сока листового салата готовят путем последовательного промывания его водопроводной и стерильной водой с последующим высушиванием при комнатной температуре, измельчением и выжиманием из полученной массы сока. Изобретение позволяет повысить точность выявления листерий и упростить способ культивирования. 1 з.п. ф-лы, 3 ил., 1 табл., 6 пр.
Description
Изобретение относится к микробиологии, а именно к санитарно-гигиеническому контролю за инфицированностью растений, употребляемых в пищу человеком, как фактора передачи возбудителя листериоза.
Одной из важных особенностей листериоза является то, что он относится к возбудителям сапрозоонозов, обладающим сапрофитной и паразитической природой, способными существовать как в организме человека и животных, вызывая инфекционный процесс, так и в объектах окружающей среды (почва, вода, растения и т.д.). Употребляемые в пищу человеком растения являются одним из важных факторов передачи Listeria monocytogenes (Г.П. Сомов, Л.С. Бузолева. Адаптация патогенных бактерий к абиотическим факторам окружающей среды./ Изд-во ОАО "Примполиграфкомбинат", г. Владивосток, 2004 г., с. 13).
Индикация L. monocytogenes из объектов внешней среды, в том числе из растений, вызывает определенные трудности, в основном из-за некорректного употребления в способах диагностики необходимых питательных сред и температуры культивирования на этих средах.
Известен способ культивирования иерсиний и листерий среды накопления листериозного микроба - среды Хоттингера (Биргер М.О. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования, Москва, 1967, с. 53-54). Среду готовят на основе гидролизата мяса или рыбы, которые варят, затем к отвару добавляют либо свежую перемолотую поджелудочную железу, либо сухой панкреатин, перемешивают, доводят до pH 7,8 - 8,0. Добавляют хлороформ и оставляют смесь для переваривания на 7-16 дней.
Недостатками среды Хотингера как диагностической среды для выявления листерий из растительных субстратов являются: неадаптированность к растительным субстратам (среда готовится на рыбном гидролизате), в связи с этим неполное выявление внеорганизменных популяций из смывов с овощей. Известно, что смена сред обитания (с растения на мясо) способствует формированию стресса у микроорганизмов (Работнова И.Л., Позмогова И.Н. Некоторые вопросы общей физиологии микроорганизмов // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиологии. 1994. № 4. С. 116-120), что, в свою очередь, приводит к модификационным изменениям биологических свойств листерий, а следовательно, к некорректной диагностике. Кроме того, приготовление среды трудоемко и в качестве компонентов используются дорогостоящие пищевые продукты.
Наиболее близким к заявляемому техническому решению является способ культивирования и количественного учета иерсиний и листерий в объектах внешней среды на питательной среде, включающей продукты растительного происхождения. В качестве продуктов растительного происхождения используют отвары отрубей ржаных, капусты и моркови. Для приготовления 1 л питательной среды берут: 5-20 мл отвара отрубей ржаных, 10-30 мл отвара капусты, 5-20 мл отвара моркови, 10-15 г агара микробиологического и доводят до 1 л фосфатным буфером pH 7,4. Культивирование иерсиний и листерий на питательной среде ведут при температуре 37°С среды (Патент РФ № 2161655, МПК C12Q 1/04, C12N 1/20, опубл. 10.01.2001).
Недостатком данного способа является использование для культивирования листерий многокомпонентной среды на основе отвара капусты, моркови и отрубей. Многокомпонентность питательной среды в микробиологии считается отрицательным фактором из-за трудности сохранения состава среды, к тому же осложняется процесс способа культивирования, поскольку отвары для приготовления питательной среды готовятся в раздельных емкостях, при кипячении, далее полученные отвары требуют раздельной фильтрации и стерилизации. Однако основным недостатком данного способа следует считать невысокую корректность диагностики, связанную, в частности, с культивированием листерий при стандартной температуре 36-37°C, которая не обеспечивает получение листерий в устойчивой форме на этой среде (колонии имеют R-форму), а также с проявлением угнетающего действия моркови на рост листерий.
Задача, решаемая изобретением, разработка простого, нетрудоемкого способа культивирования Listeria monocytogenes, обеспечивающего точность и корректность диагностики листериоза, за счет получения листериозного микроба в устойчивой форме, а также расширение сырьевой базы для приготовления питательных сред, способствующих улучшению дифференциально-диагностических свойств в отношении количественного и качественного роста колоний листерий.
Поставленная задача решается тем, что в известном способе культивирования листериозного микроба (Listeria monocytogenes) на питательной среде, включающей продукт растительного происхождения, агар и фосфатный буфер, согласно изобретению, в качестве продукта растительного происхождения берут маточный раствор сока листового салата. Компоненты смешивают при следующем соотношении:
Маточный раствор сока листового салата, содержащего сухое вещество | 6-9 г |
Агар | 100 г |
Фосфатный буфер | до 1 л |
Затем в подготовленную среду вносят исследуемый материал и инкубируют для накопления листериозного микроба (Listeria monocytogenes) при температуре 20-22°C не менее 24 часов.
Использование в составе питательной среды в качестве продукта растительного происхождения маточного сока листового салата не только значительно упрощает и удешевляет процесс приготовления питательной среды, но и обеспечивает, в конечном результате, повышение точности диагностики очень опасного для человека заболевания - листериоза.
На основе данных литературы (базы данных SCOPUS, WEB of Science, РИНЦ) основным фактором передачи листерий является салат листовой, по сравнению с другими видами культурных растений (Koch, Stark, 2006; Doorduyh et al., 2007). На фиг. 1 представлено распределение количества случаев контаминации растений, как факторов передачи возбудителя Listeria monocytogenes по данным доступной литературы, где самый большой - столбик 2 - относится к листовому салату.
Однако по результатам поиска по научно-технической и патентной документации и питательных сред на основе листового салата не выявлено. На основании этого заявитель считает, что заявленное техническое решение соответствует критериям новизна и изобретательский уровень.
Листовой салат (Lactuca sativa) является одной из наиболее распространенных и любимых потребителями культур, поскольку он очень полезен - в нем много витаминов и минералов. Существует более ста видов салатов: самых разных форм и расцветок - от нежно-зеленых до темно-бордовых, и все удивительно вкусные. Для приготовления питательной среды может быть использован маточный раствор следующих видов листового салата: рукола, изумрудный, московский парниковый, одесский кучерявец, эндивий нежный, хрустящий витаминный, дубочек МС, энергия лета и др.
Для приготовления маточного раствора сока листового салата его промывают последовательно водопроводной и стерильной водой, высушивают при комнатной температуре, измельчают, и из полученной массы отжимают сок, и определяют содержание сухого вещества в 1 мл маточного раствора сока.
В питательную среду вводят маточный раствора сока, содержащий 6-9 г сухого вещества, именно данное количество необходимо для получения питательной среды, содержащей достаточное количество органического и минерального питания, а также витаминов для культивирования листериозного микроба.
Применение фосфатного буфера в заявляемом количестве позволяет получить бактериям необходимое минеральное питание, особенно фосфор, а также фосфатный буфер стабилизирует растительную среду, поддерживая значение pH постоянным 7,4.
Применение агара в количестве 100 г/л обеспечивает плотную основу для формирования колоний.
Выход за пределы заявленных значений компонентов среды приводит либо к перерасходу используемых реактивов, либо к снижению ростовых показателей среды и появлению нежелательной изменчивости листериозного микроба, и, как следствие, к некорректности определения количества Listeria monocytogenes.
Экспериментально установлено, что проведение процесса культивирования при температуре 20-22 МПК C12Q 1/04, C12N 1/20
Способ культивирования Listeria monocytogenes на питательной среде, приготовленной на основе листового салата (Lactuca sativa)
C позволяет получить листериозный микроб Listeria monocytogenes в наиболее устойчивой S-форме, вследствие чего, значительно повышается точность и корректность диагностики листериоза. Кроме того, это позволяет избежать изменения биологических свойств листерий, изначально обитающих на растениях при этой температуре, и увеличивает вероятность обнаружения листериозного микроба.
Накопление листериозного микроба при разных температурах в различных формах наглядно подтверждается результатами морфологических исследований, представленных на фиг. 2 и фиг. 3. Морфологическое изучение структуры колоний выявило, что при 37°C бактерии на растительных средах находились в R-форме (Фиг. 2), а при 20-22°C - в S-форме (Фиг. 3). Известно, что R-форма или шероховатые колонии листерий образуются за счет клеток, имеющих измененные поверхностные структуры, что сказывается при идентификации листерий. Так, например, при постановке биохимических рядов Гиса не ферментируются L-сорбоза, D-маннитол, D-раффиноза D-мелезидоза, являющиеся ключевыми диагностическими признаками для идентификации Listeria monocytogenes. Это проявляется в возможной неточности и замедленности проявления реакции агглютинации.
При температуре ниже 20°C культура растет медленно (2-3 суток), а при повышении температуры культивирования более 22°C большая часть колоний переходит в R-форму. Это, в конечном результате, приводит к получению некорректных результатов диагностики листериоза, а также к ухудшению дифференциально-диагностических свойств в отношении количественного и качественного роста колоний листерий.
Экспериментально установлено, что культивирование листериозного микроба целесообразно вести не менее 24 часов, если проводить культивирование меньше по времени, то колонии формируются в недостаточном количестве, что осложняет впоследствии их характеристику как качественного, так и количественного состава. Таким образом, суток вполне достаточно для накопления листериозного микроба, обеспечивающего корректность выявления листериоза, а также очень удобно с практической стороны работы.
Описание чертежей: на фиг. 1 представлено количество случаев контаминации растений, как факторов передачи возбудителя Listeria monocytogenes по данным доступной литературы, где столбец 1 картофель, столбец 2 - салат листовой, столбец 3 - другие овощи; на фиг. 2 - рост колоний Listeria monocytogenes на питательной среде на основе салата листового при культивировании при 37°C (R-форма); на фиг. 3 - рост колоний Listeria monocytogenes на питательной среде на основе салата листового при культивировании при 20-22°C (S-форма).
Для реализации способа культивирования Listeria monocytogenes предварительно готовят маточный раствор салата, фосфатный буфер и питательную среду.
Маточный раствор сока салата готовят следующим образом: берут 100-150 г листового салата определенного вида, промывают водопроводной и стерильной водой последовательно, высушивают при комнатной температуре и измельчают, затем получают сок при помощи соковыжималки. Сок можно готовить впрок, хранить в холодильнике, использовать по мере необходимости.
Буфер фосфатный готовят на основе стерильной воды. Для приготовления фосфатного буфера берут натрий фосфорнокислый двузамещенный - 8,7 г/л, калий фосфорнокислый однозамещенный - 2,7 г/л, до 1 л - дистиллированная вода, устанавливают pH 7,4, стерилизуют при давлении 0,5 атм в течение 30 мин.
Осуществление способа демонстрируется следующими примерами.
Пример 1.
К 100 мл маточного раствора сока листового салата «Рукола», содержащего 6 г сухого вещества, добавляют 100 г агара микробиологического и доводят стерильным буфером фосфатным до 1 л (установленного pH 7,4). Полученная питательная среда прозрачная, зеленоватого цвета, не имеет запаха, pH среды 7,4.
На приготовленную среду высевают листерий в физиологическом растворе в количестве 102 КОЕ/мл. На культивирование в течение 24 час термостатируют 5 проб при различных температурах: 19°C, 20°C, 21°C, 22°C и для контроля одну из проб при 37°C - стандартной, широко используемой температуре культивирования бактерий Listeria monocytogenes.
Полученные результаты отражены в табл. 1.
Пример 2.
К 150 мл маточного раствора сока листового салата «Рукола», содержащего 9 г сухого вещества, добавляют 100 г агара микробиологического и доводят стерильным буфером фосфатным до 1 л (установленного pH 7,4). Полученная питательная среда прозрачная, зеленоватого цвета, не имеет запаха, pH среды 7,4.
На приготовленную среду высевают листерий в физиологическом растворе в количестве 102 КОЕ/мл. На культивирование в течение 24 часов 10 минут термостатируют 5 проб при различных температурах: 19°C, 20°C, 21°C, 22°C и для контроля одну из проб при 37°C - стандартной, широко используемой температуре культивирования бактерий Listeria monocytogenes.
Полученные результаты отражены в табл. 1.
Пример 3.
К 100 мл маточного раствора сока листового салата «Кучерявец одесский», содержащего 6 г сухого вещества, добавляют 100 г агара микробиологического и доводят стерильным буфером фосфатным до 1 л (установленного pH 7,4). Полученная питательная среда прозрачная, зеленоватого цвета, не имеет запаха, pH среды 7,4.
На приготовленную среду высевают листерий в физиологическом растворе в количестве 102 КОЕ/мл. На культивирование в течение 24 час термостатируют 5 проб при различных температурах: 19°C, 20°C, 21°C, 22°C и для контроля одну из проб при 37°C - стандартной, широко используемой температуре культивирования бактерий Listeria monocytogenes.
Полученные результаты отражены в табл. 1.
Пример 4.
К 100 мл маточного раствора сока листового салата «Эндивий нежный», содержащего 6 г сухого вещества, добавляют 100 г агара микробиологического и доводят стерильным буфером фосфатным до 1 л (установленного pH 7,4). Полученная питательная среда прозрачная, зеленоватого цвета, не имеет запаха, pH среды 7,4.
На приготовленную среду высевают листерий в физиологическом растворе в количестве 102 КОЕ/мл. На культивирование в течение 24 час термостатируют пять проб при различных температурах: 19°C, 20°C, 21°C, 22°C и для контроля одну из проб при 37°C - стандартной, широко используемой температуре культивирования бактерий Listeria monocytogenes.
Полученные результаты отражены в табл. 1.
Пример 5.
К 100 мл маточного раствора сока листового салата «Лоло-росса», содержащего 6 г сухого вещества, добавляют 100 г агара микробиологического и доводят стерильным буфером фосфатным до 1 л (установленного pH 7,4). Полученная питательная среда прозрачная, зеленоватого цвета, не имеет запаха, pH среды 7,4.
На приготовленную среду высевают листерий в физиологическом растворе в количестве 102 КОЕ/мл. На культивирование в течение 24 час 30 минут термостатируют пять проб при различных температурах: 19°C, 20°C, 21°C, 22°C и для контроля одну из проб при 37°C - стандартной, широко используемой температуре культивирования бактерий Listeria monocytogenes.
Полученные результаты отражены в табл. 1.
Пример 6 (используется питательная среда из способа прототипа).
Для приготовления 1 л питательной среды берут: 10 мл отвара отрубей ржаных, 15 мл отвара капусты, 10 мл отвара моркови, 15 г агара микробиологического и доводят до 1 л фосфатным буфером pH 7,4. На приготовленную среду высевают листерий в физиологическом растворе в количестве 102 КОЕ/мл. На культивирование в течение 24 час термостатируют пять проб при различных температурах: 19°C, 20°C, 21°C, 22°C и для контроля одну из проб при 37°C - стандартной, широко используемой температуре культивирования бактерий Listeria monocytogenes.
Полученные результаты отражены в табл. 1.
Из приведенных в таблице 1 данных видно, что прирост листерий в заявляемой питательной среде, в заявляемых режимных параметрах, значительно выше по сравнению с прототипом.
Таким образом, заявляемое техническое решение позволяет получить достаточно высокую численность листерий в устойчивой S-форме, что обеспечивает более полное выявление и учет внеорганизменных популяций неизмененных форм листерий, обитающих на растениях, являющихся факторами передачи инфекции.
Дополнительными преимуществами разработанного способа учета являются расширение сырьевой базы, а также улучшение ее дифференциально-диагностических свойств в отношении количественного и качественного роста колоний листерий. Способ прост в осуществлении, не требует использования специального оборудования и химических реактивов.
Claims (2)
1. Способ культивирования листериозного микроба Listeria monocytogenes на питательной среде, включающей продукт растительного происхождения, агар и фосфатный буфер, отличающийся тем, что в качестве продукта растительного происхождения берут маточный раствор сока листового салата, при следующем соотношении компонентов:
Маточный раствор сока листового салата,
содержащий сухого вещества 6-9 г
Агар 100 г
Фосфатный буфер до 1 л,
на приготовленную среду высевают листерии в физиологическом растворе в количестве 102 КОЕ/мл и инкубируют для накопления листериозного микроба Listeria monocytogenes при температуре 20-22°С не менее 24 часов.
на приготовленную среду высевают листерии в физиологическом растворе в количестве 102 КОЕ/мл и инкубируют для накопления листериозного микроба Listeria monocytogenes при температуре 20-22°С не менее 24 часов.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что для приготовления маточного раствора сока листового салата его промывают последовательно водопроводной и стерильной водой, высушивают при комнатной температуре, измельчают и из полученной массы отжимают сок.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2014143435/10A RU2562859C1 (ru) | 2014-10-29 | 2014-10-29 | СПОСОБ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ Listeria monocytogenes НА ПИТАТЕЛЬНОЙ СРЕДЕ, ПРИГОТОВЛЕННОЙ НА ОСНОВЕ ЛИСТОВОГО САЛАТА (Lactuca sativa) |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2014143435/10A RU2562859C1 (ru) | 2014-10-29 | 2014-10-29 | СПОСОБ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ Listeria monocytogenes НА ПИТАТЕЛЬНОЙ СРЕДЕ, ПРИГОТОВЛЕННОЙ НА ОСНОВЕ ЛИСТОВОГО САЛАТА (Lactuca sativa) |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2562859C1 true RU2562859C1 (ru) | 2015-09-10 |
Family
ID=54073828
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2014143435/10A RU2562859C1 (ru) | 2014-10-29 | 2014-10-29 | СПОСОБ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ Listeria monocytogenes НА ПИТАТЕЛЬНОЙ СРЕДЕ, ПРИГОТОВЛЕННОЙ НА ОСНОВЕ ЛИСТОВОГО САЛАТА (Lactuca sativa) |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2562859C1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2668172C2 (ru) * | 2016-12-28 | 2018-09-26 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Пастера Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека" (ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера) | Способ выращивания факультативно-анаэробных микроорганизмов |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2161655C2 (ru) * | 1998-11-10 | 2001-01-10 | Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии СО РАМН | Питательная среда для культивирования и количественного учета иерсиний и листерий в объектах внешней среды |
RU2184782C2 (ru) * | 1999-11-02 | 2002-07-10 | Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии СО РАМН | Дифференциально-диагностическая среда для выделения листерий |
RU2201957C2 (ru) * | 2001-05-04 | 2003-04-10 | Научно-производственное объединение "Питательные среды" | Питательная среда для идентификации листерий |
RU2232194C1 (ru) * | 2003-01-08 | 2004-07-10 | Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии СО РАМН | Способ приготовления питательной среды для культивирования и количественного учета листерий (listeria monocytogenes) в объектах внешней среды |
-
2014
- 2014-10-29 RU RU2014143435/10A patent/RU2562859C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2161655C2 (ru) * | 1998-11-10 | 2001-01-10 | Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии СО РАМН | Питательная среда для культивирования и количественного учета иерсиний и листерий в объектах внешней среды |
RU2184782C2 (ru) * | 1999-11-02 | 2002-07-10 | Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии СО РАМН | Дифференциально-диагностическая среда для выделения листерий |
RU2201957C2 (ru) * | 2001-05-04 | 2003-04-10 | Научно-производственное объединение "Питательные среды" | Питательная среда для идентификации листерий |
RU2232194C1 (ru) * | 2003-01-08 | 2004-07-10 | Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии СО РАМН | Способ приготовления питательной среды для культивирования и количественного учета листерий (listeria monocytogenes) в объектах внешней среды |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
БУЗОЛЕВА Л.С. и др., Влияние летучих метаболитов прорастающих семян и размножение бакетрий Listeria monocytogenes, Прикладная биохимия и микробиология, 2012,Т.48, N3, стр.1-5. Продукты пищевые. Методы выявления и определения бактерий .Listeria monocytogenes, ГОСТ Р 51821 - 2002, М,Стандартинформ, 2010 стр.116-128 * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2668172C2 (ru) * | 2016-12-28 | 2018-09-26 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Пастера Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека" (ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера) | Способ выращивания факультативно-анаэробных микроорганизмов |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN105002121B (zh) | 一株简单芽孢杆菌及其应用 | |
CN107699499B (zh) | 一株米曲霉za127及其应用 | |
CN104726378B (zh) | 采用强化耐盐微生物菌剂提高盐胁迫草坪草保护酶活性的方法 | |
Pervin et al. | Characterization of Rhizobia from Root Nodule and Rhizosphere of Lablab purpureus and Vigna sinensis in Bangladesh | |
Kushwaha et al. | Antagonistic activity of Trichoderma spp,(a bio-control agent) against isolated and identified plant pathogens | |
JP2017532062A (ja) | 有用および機能性微生物を用いた微生物均質抽出物およびその製造方法 | |
CN104756754B (zh) | 一种牛樟芝子实体的栽培方法 | |
Grumezescu et al. | Advances in biotechnology for food industry | |
CN104403952B (zh) | 一种菌核侧耳新菌种及其栽培方法和应用 | |
CN104789494B (zh) | 采用强化垃圾堆肥微生物菌剂提高草皮抗盐性的方法 | |
RU2562859C1 (ru) | СПОСОБ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ Listeria monocytogenes НА ПИТАТЕЛЬНОЙ СРЕДЕ, ПРИГОТОВЛЕННОЙ НА ОСНОВЕ ЛИСТОВОГО САЛАТА (Lactuca sativa) | |
CN104823716A (zh) | 一种菌类共生菌丝粉的培养及制备方法 | |
Ikechi-Nwogu et al. | Comparative evaluation of growth media for the cultivation of fungal cultures | |
Nazari | Sonicated date syrup media preparation for microbial culture | |
CN104357342B (zh) | 一种新疆地方特色馕面团优质酵母及其在制馕中的应用 | |
CN103849575B (zh) | 一种单细胞蛋白的生产方法 | |
KR20070008381A (ko) | 인삼 성분이 함유된 새송이 버섯의 재배방법 | |
AU2021106648A4 (en) | A method for formulating vegetables and fruits waste culture medium for industrial fungi cultivation | |
CN107699531A (zh) | 一种沙棘属植物根瘤内生菌分离培养方法 | |
S Zaher et al. | How culture medium pH range influence phytoplankton growth performance and biochemical content | |
RU2518282C1 (ru) | Питательная среда для глубинного культивирования туляремийного микроба | |
Vicenţiu-Bogdan et al. | Study of preliminary biotechnological conditions for Pleurotus ostreatus cultivation on submerged system | |
CN105294309A (zh) | 一种野生双孢蘑菇子实体人工培养方法 | |
CN105695554B (zh) | 一种通过菌藻共培养提高叶黄素产量的方法 | |
EP3450418A1 (en) | Method for obtaining a plant-growth-promoting composition comprisingpseudomonas putida |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20161030 |