RU2511577C2 - Аналоги инсулиноподобного фактора роста-1 (igf-1), содержащие аминокислотную замену в положении 59 - Google Patents
Аналоги инсулиноподобного фактора роста-1 (igf-1), содержащие аминокислотную замену в положении 59 Download PDFInfo
- Publication number
- RU2511577C2 RU2511577C2 RU2012106302/10A RU2012106302A RU2511577C2 RU 2511577 C2 RU2511577 C2 RU 2511577C2 RU 2012106302/10 A RU2012106302/10 A RU 2012106302/10A RU 2012106302 A RU2012106302 A RU 2012106302A RU 2511577 C2 RU2511577 C2 RU 2511577C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- higf
- seq
- asn
- leu
- arg
- Prior art date
Links
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 title claims abstract description 14
- 101000599951 Homo sapiens Insulin-like growth factor I Proteins 0.000 title abstract description 60
- 102100037852 Insulin-like growth factor I Human genes 0.000 title abstract description 59
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 title abstract description 10
- 101150088952 IGF1 gene Proteins 0.000 title 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 22
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 18
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 15
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 6
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 4
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 claims abstract description 3
- 239000000556 agonist Substances 0.000 claims abstract 18
- 108090000723 Insulin-Like Growth Factor I Proteins 0.000 claims description 18
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 17
- KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N D-lysine Chemical compound NCCCC[C@@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N 0.000 claims description 13
- ONIBWKKTOPOVIA-SCSAIBSYSA-N D-Proline Chemical compound OC(=O)[C@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-SCSAIBSYSA-N 0.000 claims description 12
- QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N D-alanine Chemical compound C[C@@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N 0.000 claims description 12
- MTCFGRXMJLQNBG-UWTATZPHSA-N D-Serine Chemical compound OC[C@@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UWTATZPHSA-N 0.000 claims description 8
- ROHFNLRQFUQHCH-RXMQYKEDSA-N D-leucine Chemical compound CC(C)C[C@@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-RXMQYKEDSA-N 0.000 claims description 6
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 3
- 208000020221 Short stature Diseases 0.000 claims description 3
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 3
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 claims description 3
- 208000020084 Bone disease Diseases 0.000 claims description 2
- 206010022489 Insulin Resistance Diseases 0.000 claims description 2
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 claims description 2
- 208000015100 cartilage disease Diseases 0.000 claims description 2
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 claims description 2
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 claims description 2
- 208000028774 intestinal disease Diseases 0.000 claims description 2
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 claims description 2
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 claims description 2
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 2
- 102000004218 Insulin-Like Growth Factor I Human genes 0.000 claims 16
- 206010000599 Acromegaly Diseases 0.000 claims 1
- 206010006895 Cachexia Diseases 0.000 claims 1
- 208000020446 Cardiac disease Diseases 0.000 claims 1
- 208000001380 Diabetic Ketoacidosis Diseases 0.000 claims 1
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 claims 1
- 208000017442 Retinal disease Diseases 0.000 claims 1
- 206010038923 Retinopathy Diseases 0.000 claims 1
- 208000022531 anorexia Diseases 0.000 claims 1
- 206010061428 decreased appetite Diseases 0.000 claims 1
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 claims 1
- 206010020718 hyperplasia Diseases 0.000 claims 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 claims 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 claims 1
- 208000016261 weight loss Diseases 0.000 claims 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 claims 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 26
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 abstract description 26
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 abstract description 6
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 abstract description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 4
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- 206010013883 Dwarfism Diseases 0.000 abstract 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 abstract 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 abstract 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 75
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 54
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 54
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 52
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 46
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 39
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 37
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 37
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 35
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- 125000000998 L-alanino group Chemical group [H]N([*])[C@](C([H])([H])[H])([H])C(=O)O[H] 0.000 description 32
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 32
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 31
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N trifluoroacetic acid Substances OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 29
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 27
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 24
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 24
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 24
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 22
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Chemical compound CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 19
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 19
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 18
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 18
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 17
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 17
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 17
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 16
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 16
- FUOOLUPWFVMBKG-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoisobutyric acid Chemical compound CC(C)(N)C(O)=O FUOOLUPWFVMBKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N Cysteine Chemical compound SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 15
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 14
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 13
- -1 Leu Chemical compound 0.000 description 12
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 11
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 11
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 11
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 125000000510 L-tryptophano group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2N([H])C([H])=C(C([H])([H])[C@@]([H])(C(O[H])=O)N([H])[*])C2=C1[H] 0.000 description 10
- SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N N-Methylpyrrolidone Chemical compound CN1CCCC1=O SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 10
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 10
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 9
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 8
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 8
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 7
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 7
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 7
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 7
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Substances C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- XUJNEKJLAYXESH-UWTATZPHSA-N D-Cysteine Chemical compound SC[C@@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UWTATZPHSA-N 0.000 description 6
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 6
- 210000004900 c-terminal fragment Anatomy 0.000 description 6
- PJJJBBJSCAKJQF-UHFFFAOYSA-N guanidinium chloride Chemical compound [Cl-].NC(N)=[NH2+] PJJJBBJSCAKJQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 6
- 102000028416 insulin-like growth factor binding Human genes 0.000 description 6
- 108091022911 insulin-like growth factor binding Proteins 0.000 description 6
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 6
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 6
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 6
- 238000000870 ultraviolet spectroscopy Methods 0.000 description 6
- KLBPUVPNPAJWHZ-UMSFTDKQSA-N (2r)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-tritylsulfanylpropanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)O)NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21)SC(C=1C=CC=CC=1)(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 KLBPUVPNPAJWHZ-UMSFTDKQSA-N 0.000 description 5
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 5
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 5
- 239000012867 bioactive agent Substances 0.000 description 5
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 5
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 5
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 5
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 5
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 4
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 4
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- PZBFGYYEXUXCOF-UHFFFAOYSA-N TCEP Chemical compound OC(=O)CCP(CCC(O)=O)CCC(O)=O PZBFGYYEXUXCOF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 4
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 4
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 4
- 229960000789 guanidine hydrochloride Drugs 0.000 description 4
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 4
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 4
- 238000011894 semi-preparative HPLC Methods 0.000 description 4
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 4
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 4
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 4
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 4
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 4
- 150000007970 thio esters Chemical group 0.000 description 4
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QWXZOFZKSQXPDC-NSHDSACASA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)propanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 QWXZOFZKSQXPDC-NSHDSACASA-N 0.000 description 3
- HNICLNKVURBTKV-NDEPHWFRSA-N (2s)-5-[[amino-[(2,2,4,6,7-pentamethyl-3h-1-benzofuran-5-yl)sulfonylamino]methylidene]amino]-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)pentanoic acid Chemical compound C12=CC=CC=C2C2=CC=CC=C2C1COC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)NS(=O)(=O)C1=C(C)C(C)=C2OC(C)(C)CC2=C1C HNICLNKVURBTKV-NDEPHWFRSA-N 0.000 description 3
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010053070 Glutathione Disulfide Proteins 0.000 description 3
- 206010053759 Growth retardation Diseases 0.000 description 3
- 102000038455 IGF Type 1 Receptor Human genes 0.000 description 3
- 108010031794 IGF Type 1 Receptor Proteins 0.000 description 3
- 125000002059 L-arginyl group Chemical group O=C([*])[C@](N([H])[H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])N([H])C(=N[H])N([H])[H] 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 3
- 206010002026 amyotrophic lateral sclerosis Diseases 0.000 description 3
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 3
- 238000010382 chemical cross-linking Methods 0.000 description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 3
- YPZRWBKMTBYPTK-BJDJZHNGSA-N glutathione disulfide Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@H](C(=O)NCC(O)=O)CSSC[C@@H](C(=O)NCC(O)=O)NC(=O)CC[C@H](N)C(O)=O YPZRWBKMTBYPTK-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 3
- 125000001183 hydrocarbyl group Chemical group 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 239000003701 inert diluent Substances 0.000 description 3
- 238000011221 initial treatment Methods 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 3
- YPZRWBKMTBYPTK-UHFFFAOYSA-N oxidized gamma-L-glutamyl-L-cysteinylglycine Natural products OC(=O)C(N)CCC(=O)NC(C(=O)NCC(O)=O)CSSCC(C(=O)NCC(O)=O)NC(=O)CCC(N)C(O)=O YPZRWBKMTBYPTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 3
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 3
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 3
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 3
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 3
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 3
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- ZPGDWQNBZYOZTI-SFHVURJKSA-N (2s)-1-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonyl)pyrrolidine-2-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21 ZPGDWQNBZYOZTI-SFHVURJKSA-N 0.000 description 2
- REITVGIIZHFVGU-IBGZPJMESA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-[(2-methylpropan-2-yl)oxy]propanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](COC(C)(C)C)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 REITVGIIZHFVGU-IBGZPJMESA-N 0.000 description 2
- CBPJQFCAFFNICX-IBGZPJMESA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-4-methylpentanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 CBPJQFCAFFNICX-IBGZPJMESA-N 0.000 description 2
- UMRUUWFGLGNQLI-QFIPXVFZSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-6-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]hexanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](CCCCNC(=O)OC(C)(C)C)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 UMRUUWFGLGNQLI-QFIPXVFZSA-N 0.000 description 2
- FGRBYDKOBBBPOI-UHFFFAOYSA-N 10,10-dioxo-2-[4-(N-phenylanilino)phenyl]thioxanthen-9-one Chemical compound O=C1c2ccccc2S(=O)(=O)c2ccc(cc12)-c1ccc(cc1)N(c1ccccc1)c1ccccc1 FGRBYDKOBBBPOI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 2
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 2
- 102000003746 Insulin Receptor Human genes 0.000 description 2
- 108010001127 Insulin Receptor Proteins 0.000 description 2
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N L-cystine Chemical compound [O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])CSSC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 2
- 125000000174 L-prolyl group Chemical group [H]N1C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[C@@]1([H])C(*)=O 0.000 description 2
- 239000004909 Moisturizer Substances 0.000 description 2
- FYYSQDHBALBGHX-YFKPBYRVSA-N N(alpha)-t-butoxycarbonyl-L-asparagine Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(N)=O FYYSQDHBALBGHX-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SMWDFEZZVXVKRB-UHFFFAOYSA-N Quinoline Chemical compound N1=CC=CC2=CC=CC=C21 SMWDFEZZVXVKRB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000013275 Somatomedins Human genes 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical group 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 2
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 2
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 2
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 2
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 2
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 208000037824 growth disorder Diseases 0.000 description 2
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 2
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 2
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 2
- 229910000040 hydrogen fluoride Inorganic materials 0.000 description 2
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 2
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 2
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 230000001333 moisturizer Effects 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 239000012264 purified product Substances 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- JQWHASGSAFIOCM-UHFFFAOYSA-M sodium periodate Chemical compound [Na+].[O-]I(=O)(=O)=O JQWHASGSAFIOCM-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000007909 solid dosage form Substances 0.000 description 2
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 2
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 2
- DVOOXRTYGGLORL-VKHMYHEASA-N (2r)-2-(methylamino)-3-sulfanylpropanoic acid Chemical compound CN[C@@H](CS)C(O)=O DVOOXRTYGGLORL-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- TYEIDAYBPNPVII-NFJMKROFSA-N (2r)-2-amino-3-sulfanylbutanoic acid Chemical compound CC(S)[C@H](N)C(O)=O TYEIDAYBPNPVII-NFJMKROFSA-N 0.000 description 1
- JAUKCFULLJFBFN-VWLOTQADSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-[4-[(2-methylpropan-2-yl)oxy]phenyl]propanoic acid Chemical compound C1=CC(OC(C)(C)C)=CC=C1C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21 JAUKCFULLJFBFN-VWLOTQADSA-N 0.000 description 1
- SJVFAHZPLIXNDH-QFIPXVFZSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-phenylpropanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)O)NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21)C1=CC=CC=C1 SJVFAHZPLIXNDH-QFIPXVFZSA-N 0.000 description 1
- KJYAFJQCGPUXJY-UMSFTDKQSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-4-oxo-4-(tritylamino)butanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)O)NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21)C(=O)NC(C=1C=CC=CC=1)(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 KJYAFJQCGPUXJY-UMSFTDKQSA-N 0.000 description 1
- KSDTXRUIZMTBNV-INIZCTEOSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)butanedioic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 KSDTXRUIZMTBNV-INIZCTEOSA-N 0.000 description 1
- CNBUSIJNWNXLQQ-NSHDSACASA-N (2s)-3-(4-hydroxyphenyl)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]propanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 CNBUSIJNWNXLQQ-NSHDSACASA-N 0.000 description 1
- FHOAKXBXYSJBGX-YFKPBYRVSA-N (2s)-3-hydroxy-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]propanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FHOAKXBXYSJBGX-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- WBIIPXYJAMICNU-AWEZNQCLSA-N (2s)-5-[amino-[(4-methylphenyl)sulfonylamino]methylidene]azaniumyl-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]pentanoate Chemical compound CC1=CC=C(S(=O)(=O)NC(N)=NCCC[C@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C(O)=O)C=C1 WBIIPXYJAMICNU-AWEZNQCLSA-N 0.000 description 1
- VVNYDCGZZSTUBC-LURJTMIESA-N (2s)-5-amino-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O VVNYDCGZZSTUBC-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- ATUMDPHEFWGCJF-HNNXBMFYSA-N (2s)-6-[(2-chlorophenyl)methoxycarbonylamino]-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]hexanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCNC(=O)OCC1=CC=CC=C1Cl ATUMDPHEFWGCJF-HNNXBMFYSA-N 0.000 description 1
- TYEIDAYBPNPVII-STHAYSLISA-N (2s,3s)-2-amino-3-sulfanylbutanoic acid Chemical compound C[C@H](S)[C@@H](N)C(O)=O TYEIDAYBPNPVII-STHAYSLISA-N 0.000 description 1
- LJRDOKAZOAKLDU-UDXJMMFXSA-N (2s,3s,4r,5r,6r)-5-amino-2-(aminomethyl)-6-[(2r,3s,4r,5s)-5-[(1r,2r,3s,5r,6s)-3,5-diamino-2-[(2s,3r,4r,5s,6r)-3-amino-4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-6-hydroxycyclohexyl]oxy-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl]oxyoxane-3,4-diol;sulfuric ac Chemical compound OS(O)(=O)=O.N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](N)C[C@@H](N)[C@@H]2O)O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)N)O[C@@H]1CO LJRDOKAZOAKLDU-UDXJMMFXSA-N 0.000 description 1
- FVTVMQPGKVHSEY-UHFFFAOYSA-N 1-AMINOCYCLOBUTANE CARBOXYLIC ACID Chemical compound OC(=O)C1(N)CCC1 FVTVMQPGKVHSEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TUSDEZXZIZRFGC-UHFFFAOYSA-N 1-O-galloyl-3,6-(R)-HHDP-beta-D-glucose Natural products OC1C(O2)COC(=O)C3=CC(O)=C(O)C(O)=C3C3=C(O)C(O)=C(O)C=C3C(=O)OC1C(O)C2OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 TUSDEZXZIZRFGC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WOXWUZCRWJWTRT-UHFFFAOYSA-N 1-amino-1-cyclohexanecarboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1(N)CCCCC1 WOXWUZCRWJWTRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NILQLFBWTXNUOE-UHFFFAOYSA-N 1-aminocyclopentanecarboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1(N)CCCC1 NILQLFBWTXNUOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PAJPWUMXBYXFCZ-UHFFFAOYSA-N 1-aminocyclopropanecarboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1(N)CC1 PAJPWUMXBYXFCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001637 1-naphthyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2C(*)=C([H])C([H])=C([H])C2=C1[H] 0.000 description 1
- ORXSLDYRYTVAPC-UHFFFAOYSA-N 2-(4-sulfanylphenyl)acetic acid Chemical compound OC(=O)CC1=CC=C(S)C=C1 ORXSLDYRYTVAPC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001622 2-naphthyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2C([H])=C(*)C([H])=C([H])C2=C1[H] 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 1
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N Busulfan Chemical compound CS(=O)(=O)OCCCCOS(C)(=O)=O COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 1
- 208000032544 Cicatrix Diseases 0.000 description 1
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001263 FEMA 3042 Substances 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 102000018997 Growth Hormone Human genes 0.000 description 1
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 1
- 235000003332 Ilex aquifolium Nutrition 0.000 description 1
- 235000002296 Ilex sandwicensis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002294 Ilex volkensiana Nutrition 0.000 description 1
- 102000004374 Insulin-like growth factor binding protein 3 Human genes 0.000 description 1
- 108090000965 Insulin-like growth factor binding protein 3 Proteins 0.000 description 1
- FFFHZYDWPBMWHY-VKHMYHEASA-N L-homocysteine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCS FFFHZYDWPBMWHY-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 208000006302 Laron syndrome Diseases 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- QXOHLNCNYLGICT-YFKPBYRVSA-N Met-Gly Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O QXOHLNCNYLGICT-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 208000026072 Motor neurone disease Diseases 0.000 description 1
- 241000872931 Myoporum sandwicense Species 0.000 description 1
- 208000018737 Parkinson disease Diseases 0.000 description 1
- LRBQNJMCXXYXIU-PPKXGCFTSA-N Penta-digallate-beta-D-glucose Natural products OC1=C(O)C(O)=CC(C(=O)OC=2C(=C(O)C=C(C=2)C(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)O2)OC(=O)C=2C=C(OC(=O)C=3C=C(O)C(O)=C(O)C=3)C(O)=C(O)C=2)O)=C1 LRBQNJMCXXYXIU-PPKXGCFTSA-N 0.000 description 1
- 102000015731 Peptide Hormones Human genes 0.000 description 1
- 108010038988 Peptide Hormones Proteins 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 229920000954 Polyglycolide Polymers 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000001647 Renal Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- WOUIMBGNEUWXQG-VKHMYHEASA-N Ser-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O WOUIMBGNEUWXQG-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000022967 Short stature due to partial GHR deficiency Diseases 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000906446 Theraps Species 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010046543 Urinary incontinence Diseases 0.000 description 1
- 159000000021 acetate salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002877 alkyl aryl group Chemical group 0.000 description 1
- VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N alprazolam Chemical compound C12=CC(Cl)=CC=C2N2C(C)=NN=C2CN=C1C1=CC=CC=C1 VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 1
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 1
- MWPLVEDNUUSJAV-UHFFFAOYSA-N anthracene Chemical compound C1=CC=CC2=CC3=CC=CC=C3C=C21 MWPLVEDNUUSJAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008365 aqueous carrier Substances 0.000 description 1
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000012911 assay medium Substances 0.000 description 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid group Chemical group C(C1=CC=CC=C1)(=O)O WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000005841 biaryl group Chemical group 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 230000008468 bone growth Effects 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 229940110456 cocoa butter Drugs 0.000 description 1
- 235000019868 cocoa butter Nutrition 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 239000002285 corn oil Substances 0.000 description 1
- 235000005687 corn oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 1
- 229960003067 cystine Drugs 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 238000000132 electrospray ionisation Methods 0.000 description 1
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 1
- 239000002702 enteric coating Substances 0.000 description 1
- 238000009505 enteric coating Methods 0.000 description 1
- 206010015037 epilepsy Diseases 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 1
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 238000001730 gamma-ray spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 235000003642 hunger Nutrition 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- 230000007954 hypoxia Effects 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 1
- 229940023383 increlex Drugs 0.000 description 1
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002608 insulinlike Effects 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 description 1
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 1
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 description 1
- 150000002596 lactones Chemical class 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000008297 liquid dosage form Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 108010000594 mecasermin Proteins 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 108010005942 methionylglycine Proteins 0.000 description 1
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000002297 mitogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000010413 mother solution Substances 0.000 description 1
- 208000005264 motor neuron disease Diseases 0.000 description 1
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 201000006938 muscular dystrophy Diseases 0.000 description 1
- 210000002346 musculoskeletal system Anatomy 0.000 description 1
- 210000004898 n-terminal fragment Anatomy 0.000 description 1
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 230000000626 neurodegenerative effect Effects 0.000 description 1
- 230000000926 neurological effect Effects 0.000 description 1
- 230000003961 neuronal insult Effects 0.000 description 1
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 1
- 239000012457 nonaqueous media Substances 0.000 description 1
- 239000007764 o/w emulsion Substances 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000002895 organic esters Chemical class 0.000 description 1
- 230000011164 ossification Effects 0.000 description 1
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 229960001639 penicillamine Drugs 0.000 description 1
- 239000000813 peptide hormone Substances 0.000 description 1
- 239000002304 perfume Substances 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000053 physical method Methods 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 239000004633 polyglycolic acid Substances 0.000 description 1
- 239000005373 porous glass Substances 0.000 description 1
- 229940124606 potential therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 231100000241 scar Toxicity 0.000 description 1
- 230000037387 scars Effects 0.000 description 1
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical compound O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 239000008247 solid mixture Substances 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 230000037351 starvation Effects 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 239000003206 sterilizing agent Substances 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 230000036435 stunted growth Effects 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 125000000547 substituted alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- FZUJWWOKDIGOKH-UHFFFAOYSA-N sulfuric acid hydrochloride Chemical compound Cl.OS(O)(=O)=O FZUJWWOKDIGOKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- LRBQNJMCXXYXIU-NRMVVENXSA-N tannic acid Chemical compound OC1=C(O)C(O)=CC(C(=O)OC=2C(=C(O)C=C(C=2)C(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)O2)OC(=O)C=2C=C(OC(=O)C=3C=C(O)C(O)=C(O)C=3)C(O)=C(O)C=2)O)=C1 LRBQNJMCXXYXIU-NRMVVENXSA-N 0.000 description 1
- 235000015523 tannic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920002258 tannic acid Polymers 0.000 description 1
- 229940033123 tannic acid Drugs 0.000 description 1
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 1
- 230000008736 traumatic injury Effects 0.000 description 1
- ZGYICYBLPGRURT-UHFFFAOYSA-N tri(propan-2-yl)silicon Chemical compound CC(C)[Si](C(C)C)C(C)C ZGYICYBLPGRURT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002221 trityl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1C([*])(C1=C(C(=C(C(=C1[H])[H])[H])[H])[H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/65—Insulin-like growth factors, i.e. somatomedins, e.g. IGF-1, IGF-2
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
- A61K38/30—Insulin-like growth factors, i.e. somatomedins, e.g. IGF-1, IGF-2
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/14—Prodigestives, e.g. acids, enzymes, appetite stimulants, antidyspeptics, tonics, antiflatulents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/04—Drugs for skeletal disorders for non-specific disorders of the connective tissue
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/02—Ophthalmic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/12—Drugs for disorders of the metabolism for electrolyte homeostasis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/06—Drugs for disorders of the endocrine system of the anterior pituitary hormones, e.g. TSH, ACTH, FSH, LH, PRL, GH
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/48—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones
- A61P5/50—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones for increasing or potentiating the activity of insulin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
Abstract
Настоящее изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к новому пептидному аналогу инсулиноподобного фактора роста-1 (IGF-1), содержащему аминокислотную замену метионина в положении 59 на Asn, Leu, Nle, Ile, Arg, A6c, Glu, Trp или Tyr, а также другие дополнительные замены, вставки и делеции. Указанный пептид или его фармацевтически приемлемую соль используют в составе фармацевтической композиции для лечения IGF-1-опосредованных заболеваний, а также в способе лечения низкорослости. Изобретение позволяет получить аналог-агонист IGF-1, обладающий повышенной биологической активностью по сравнению с нативным IGF-1. 3 н. и 14 з.п. ф-лы, 2 табл.
Description
Область изобретения
Настоящее изобретение относится к новым аналогам инсулиноподобного фактора роста-1 (IGF-1), к фармацевтическим композициям, содержащим указанные аналоги, и к применению указанных аналогов для лечения состояний, опосредованных IGF-1-рецептором, таких как низкорослость, терапии диабета, лечения нейродегенеративных заболеваний и для восстановления хряща. Более конкретно, настоящее изобретение относится к новым аналогам IGF-1, содержащим аминокислотную замену в положении 59, например (Asn59)hIGF-1(1-70)-OH и другую(ие) замену(ы), как это определено в описании.
Предшествующий уровень техники
IGF-1 представляет собой полипептидный гормон длиной 70 аминокислот, характеризующийся инсулиноподобной и митогенной ростовой биологической активностью. Данный гормон усиливает рост клеток в различных тканях, включая мышечно-скелетные системы, печень, почки, кишечник, ткани нервной системы, сердце и легкие.
IGF-1 дикого типа имеет следующую аминокислотную последовательность с тремя межцепочечными дисульфидными мостиками, где боковые цепи каждой пары остатков A6 и A48, A47 и A52 и A18 и A61 образуют дисульфидную связь (SEQ ID NO:50):
Хотя IGF-1 присутствует в разнообразных тканях организма, обычно он находится в неактивной форме, в которой он связан с IGF-связывающим белком (IGFBP). Известны шесть родственных IGFBP, и их обозначают IGFBP1-IGFBP6. См., например, Holly and Martin, "Insulin-like Growth Factor Binding Proteins: A Review of Methodological Aspects of Their Purification, Analysis and Regulation," Growth Regul., 4(Suppl 1):20-30 (1994). IGFBP играют важную роль в регуляции IGF-1 за счет наличия ингибиторного и/или стимулирующего эффектов на действие IGF-1. Например, примерно 90% циркулирующего IGF-1 присутствует в тримолекулярном комплексе, содержащем IGFBP-3 и чувствительную к кислотности дополнительную молекулу. IGF-1 в составе таких комплексов не может связываться с поверхностными рецепторами, и поэтому он не активен биологически. IGF-1, присутствующий в составе тримолекулярного комплекса, также характеризуется существенно более продолжительным периодом полужизни, чем не входящий в комплекс IGF-1.
Нарушение действия IGF-1 может вносить вклад в некоторые физиологические нарушения, включая нейродегенеративные заболевания, такие как болезнь двигательного нейрона (т.е. боковой амиотрофический склероз (ALS)), мышечная дистрофия и рассеянный склероз, заболевания хрящей, такие как остеоартрит, костные заболевания, такие как остеопороз, воспалительные заболевания, такие как ревматоидный артрит, ишемические повреждения органов, таких как сердце, головной мозг или печень, и так далее.
Как хорошо известно специалистам в данной области, известные и потенциальные варианты применения IGF-1 разнообразны и многочисленны. Например, в ряде исследований сообщается о применении IGF-1 в качестве потенциального терапевтического средства для лечения нейродегенеративных состояний. См., например, Kanje et al., Brain Res., 486:396-398 (1989); Hantai et al., J. Neurol. Sci., 129:122-126 (1995); Contreras et al., Pharmac. Exp. Therap., 274:1443-1499 (1995); Di Giulio et al., Society for Neuroscience, 22:1960 (1996); Di Giulio et al., Society for Neuroscience, 23:894 (1997); Hsu et al., Biochem. Mol. Med., 60(2):142-148 (1997); Gorio et al., Neuroscience, 82:1029-1037 (1998). Терапия IGF-1 показана при многих неврологических состояниях, включая ALS, инсульт, эпилепсию, болезнь Паркинсона, болезнь Альцгеймера, острое травматическое повреждение и другие нарушения, ассоциированные с травмой, старением, заболеванием или повреждением. См., например, патенты США № 5093137; 5652214; 5703045; международные публикации WO 90/1483 и WO 93/02695.
Применение терапии IGF-1 при различных других состояниях упоминается в ряде публикаций. См. например, Schalch et al., "Modern Concepts of Insulin-Like Growth Factors," ed. Spencer (Elsevier, New York), p. 705-714 (1991); Clemmons and Underwood, J. Clin. Endocrinol. Metab., 79(1):4-6 (1994); и Langford et al., Eur. J. Clin. Invest., 23(9):503-516 (1993) (относящиеся, например, к резистентным к инсулину состояниям и диабету); и O'Shea et al., Am. J. Physiol., 264:F917-F922 (1993) (относящаяся, например, к почечной недостаточности). Также см. патент США № 7258864 (относящийся к низкорослости); патенты США № 5110604 и 5427778 (относящиеся, например, к заживлению ран); патент США № 5126324 (относящийся, например, к сердечным заболеваниям и задержке роста); патент США № 5368858 (относящийся, например, к дефектам или повреждениям хряща); патенты США № 5543441 и 5550188 (относящиеся, например, к косметической пересадке ткани); патент № 5686425 (относящийся, например, к ткани шрамов, локализованной мышечной дисфункции и недержанию мочи); и патент США № 5656598 (относящийся, например, к росту кости). Также см. международные публикации WO 91/12018 (относящуюся, например, к заболеваниям кишечника); WO 92/09301 и WO 92/14480 (относящиеся, например, к заживлению ран); WO 93/08828 (относящуюся, например, к повреждению нейронов, ассоциированному с ишемией, гипоксией или нейродегенерацией); WO 94/16722 (относящуюся, например, к устойчивости к инсулину); WO 96/02565A1 (относящуюся, например, к комплексу IGF/IGFBP для стимуляции образования кости и для регуляции реструктурирования кости); публикацию заявки на выдачу патента США 2003/0100505 (относящуюся, например, к остеопорозу) и публикацию заявки на выдачу патента США 2005/0043240 (относящуюся к ожирению).
Хотя терапию IGF-1 используют для ряда физиологических показаний, результаты иногда непредсказуемы. Краткосрочные благоприятные эффекты иногда не сохраняются (см., например, Miller et al., Kidney International, 46:201-207 (1994)), и могут возникать неблагоприятные побочные эффекты, в частности, от введения высоких доз и/или длительного введения (см., например, Jabri et al., Diabetes, 43:369-374 (1994); Wilton, Acta Paediatr., 393:137-141 (1992)). Также сообщалось, что высокие концентрации IGF-1 повышают риск рака предстательной железы (Chan et al., Science, 278:563-566 (1998)).
В соответствии с этим в данной области существует потребность в лучших путях лечения состояний, которые реагируют на IGF-1 и/или другие белки, которые связываются с белками, связывающими инсулиноподобный фактор роста. Настоящее изобретение удовлетворяет данные потребности и дополнительно предоставляет другие связанные с ними преимущества.
Сущность изобретения
Как обнаружено авторами настоящего изобретения, за счет замены остатка метионина в положении 59 IGF-1 дикого типа, который является химически нестабильным и может легко окисляться другой аминокислотой, как описано в настоящем документе, например, (Asn59)hIGF-1(1-70)-OH, полученные в результате аналоги IGF-1 становятся химически более стабильными и как таковые менее чувствительными к окислению во время продукции, очистки, хранения и т.д.
В одном из аспектов настоящее изобретение относится к пептидным вариантам (т.е. аналогам) IGF-1 следующей формулы (I):
в которой:
A-1 представляет собой Met, Ser или делетирована;
A1 представляет собой Gly, Ala, Asn, Asp, Gln, Glu или делетирована;
A2 представляет собой Pro, Ala, Arg, Asp, Gln, Glu, Lys или делетирована;
A3 представляет собой Glu, Ala, Asp, Gln или делетирована;
A4 представляет собой Thr, Ala, Asn, Asp, Gln, Glu, Ser;
A5 представляет собой Leu, Acc, Ala, Ile или Val;
A6 представляет собой Cys, D-Cys, hCys, D-hCys, β-Me-Cys, D-β-Me-Cys, N-Me-Cys, D-N-Me-Cys, Ala, Pen или D-Pen;
A7 представляет собой Gly, Ala, Asn, Asp, Gln или Glu;
A8 представляет собой Ala, Arg, Asn, Asp, Gln, Glu или Lys;
A9 представляет собой Glu, Ala, Asp или Gln;
A10 представляет собой Leu, Acc, Ala, Ile или Val;
A11 представляет собой Val, Ala, Ile или Leu;
A12 представляет собой Asp, Ala, Arg, Asn, Gln, Glu или Lys;
A13 представляет собой Ala, Asn, Asp, Gln, Glu, Ile, Leu или Val;
A14 представляет собой Leu, Acc, Ala, Ile или Val;
A15 представляет собой Gln, Ala, Asn, Asp или Glu;
A16 представляет собой Phe, Ala, Asn, Asp, Gln, Glu, Trp или Tyr;
A17 представляет собой Val, Ala, Ile или Leu;
A18 представляет собой Cys, D-Cys, hCys, D-hCys, β-Me-Cys, D-β-Me-Cys, N-Me-Cys, D-N-Me-Cys, Ala, Pen или D-Pen;
A19 представляет собой Gly, Ala, Asn, Asp, Gln или Glu;
A20 представляет собой Asp, Ala, Asn, Gln или Glu;
A21 представляет собой Arg, Ala, Asn, Asp, Gln, Glu или Lys;
A22 представляет собой Gly, Ala, Asn, Asp, Gln или Glu;
A23 представляет собой Phe, Ala, Trp или Tyr;
A24 представляет собой Tyr, Ala, Phe или Trp;
A25 представляет собой Phe, Ala, Trp или Tyr;
A26 представляет собой Asn, Ala, Asp, Gln, Glu, Ser или Thr;
A27 представляет собой Lys, Ala, Arg, Asn, Asp, Gln, Glu или Pro;
A28 представляет собой Pro, Ala, Arg или Lys;
A29 представляет собой Thr, Ala, Asn, Asp, Gln, Glu или Ser;
A30 представляет собой Gly, Ala, Asn, Asp, Gln или Glu;
A31 представляет собой Tyr, Ala, Phe или Trp;
A32 представляет собой Gly, Ala, Asn, Asp, Gln или Glu;
A33 представляет собой Ser, Ala, Thr или Val;
A34 представляет собой Ser, Ala, Asn, Asp, Gln, Glu или Thr;
A35 представляет собой Ser, Ala, Asn, Asp, Gln, Glu или Thr;
A36 представляет собой Arg, Ala, Asn, Asp, Gln, Glu или Lys;
A37 представляет собой Arg, Ala, Asn, Asp, Gln, Glu или Lys;
A38 представляет собой Ala, Asn, Asp, Gln или Glu;
A39 представляет собой Pro, Ala, Arg или Glu;
A40 представляет собой Gln, Ala, Asn, Asp или Glu;
A41 представляет собой Thr, Ala, Asn, Asp, Gln, Glu или Ser;
A42 представляет собой Gly, Ala, Arg, Asn, Asp, Gln, Glu или Lys;
A43 представляет собой Ile, Ala, Arg, Asn, Asp, Gln, Glu или Lys;
A44 представляет собой Val, Ala, Arg, Asn, Asp, Gln, Glu, Ile, Leu или Lys;
A45 представляет собой Asp, Ala, Arg, Asn, Gln, Glu или Lys;
A46 представляет собой Glu, Ala, Arg, Asn, Asp, Gln или Lys;
A47 представляет собой Cys, D-Cys, hCys, D-hCys, β-Me-Cys, D-β-Me-Cys, N-Me-Cys, D-N-Me-Cys, Ala, Pen или D-Pen;
A48 представляет собой Cys, D-Cys, hCys, D-hCys, β-Me-Cys, D-β-Me-Cys, N-Me-Cys, D-N-Me-Cys, Ala, Pen или D-Pen;
A49 представляет собой Phe, Ala, Arg, Ile, Leu, Lys, Ser, Thr, Trp, Tyr или Val;
A50 представляет собой Arg, Ala, Lys, Ser или Thr;
A51 представляет собой Ser, Aib, Ala, Arg, Lys или Thr;
A52 представляет собой Cys, D-Cys, hCys, D-hCys, β-Me-Cys, D-β-Me-Cys, N-Me-Cys, D-N-Me-Cys, Ala, Pen или D-Pen;
A53 представляет собой Asp, Ala, Arg, Asn, Gln, Glu, Lys, Ser или Thr;
A54 представляет собой Leu, Acc, Ala, Ile или Val;
A55 представляет собой Arg, Ala, Ile, Leu, Lys, Phe, Trp, Tyr или Val;
A56 представляет собой Arg, Ala, Asn, Asp, Gln, Glu или Lys;
A57 представляет собой Leu, Acc, Ala, Ile или Val;
A58 представляет собой Glu, Acc, Ala, Arg, Asn, Asp, Gln или Lys;
A59 представляет собой Acc, Ala, Arg, Asn, Asp, Gln, Glu, Ile, Leu, Lys, Nle, Ser, D-Ser, Thr, Trp, Tyr или Val;
A60 представляет собой Tyr, Ala, Phe или Trp;
A61 представляет собой Cys, D-Cys, hCys, D-hCys, β-Me-Cys, D-β-Me-Cys, N-Me-Cys, D-N-Me-Cys, Ala, Pen или D-Pen;
A62 представляет собой Ala, Asn, Asp, Gln, Glu, Ile, Leu или Val;
A63 представляет собой Pro, D-Pro, Ala, Ser, Thr или делетирована;
A64 представляет собой Leu, D-Leu, des-Leu, Ala, Ile, Val или делетирована;
A65 представляет собой Lys, D-Lys, des-Lys, Ala, Arg, Ile, Leu, Val или делетирована;
A66 представляет собой Pro, D-Pro, Ala или делетирована;
A67 представляет собой Ala, D-Ala, Aib или делетирована;
A68 представляет собой Lys, D-Lys, Ala, Arg, Ile, Leu, Val или делетирована;
A69 представляет собой Ser, D-Ser, Aib, Ala, Thr или делетирована;
A70 представляет собой Ala, D-Ala, Asn, Asp, Gln, Glu или делетирована;
A71 представляет собой Asn, Ala, Asp, Gln, Glu, Lys, Ser, Thr или делетирована; и
R1 представляет собой OH или NH2;
при условии, что боковые цепи каждой пары остатков A6 и A48, A47 и A52 и A18 и A61 образуют дисульфидную связь; и
также при условии, что, когда A59 представляет собой Leu, Ile, Nle, Thr или Val, аналог содержит по меньшей мере одну дополнительную аминокислотную замену или вставку, определенную в настоящем документе.
В формуле (I) предпочтительные аминокислотные замены и дополнения определены следующим образом:
A-1 представляет собой Met, Ser или делетирована;
A1 представляет собой Gly или делетирована;
A2 представляет собой Pro, Lys или делетирована;
A3 представляет собой Glu или делетирована;
A4 представляет собой Thr;
A5 представляет собой Leu;
A6 представляет собой Cys, hCys, β Me-Cys, N-Me-Cys или Pen;
A7 представляет собой Gly;
A8 представляет собой Ala;
A9 представляет собой Glu;
A10 представляет собой Leu;
A11 представляет собой Val;
A12 представляет собой Asp;
A13 представляет собой Ala;
A14 представляет собой Leu;
A15 представляет собой Gln;
A16 представляет собой Phe;
A17 представляет собой Val;
A18 представляет собой Cys, hCys, β-Me-Cys, N-Me-Cys или Pen;
A19 представляет собой Gly;
A20 представляет собой Asp;
A21 представляет собой Arg;
A22 представляет собой Gly;
A23 представляет собой Phe;
A24 представляет собой Tyr;
A25 представляет собой Phe;
A26 представляет собой Asn;
A27 представляет собой Lys, Arg или Pro;
A28 представляет собой Pro или Lys;
A29 представляет собой Thr;
A30 представляет собой Gly;
A31 представляет собой Tyr;
A32 представляет собой Gly;
A33 представляет собой Ser;
A34 представляет собой Ser;
A35 представляет собой Ser;
A36 представляет собой Arg;
A37 представляет собой Arg;
A38 представляет собой Ala;
A39 представляет собой Pro;
A40 представляет собой Gln;
A41 представляет собой Thr;
A42 представляет собой Gly;
A43 представляет собой Ile;
A44 представляет собой Val;
A45 представляет собой Asp;
A46 представляет собой Glu;
A47 представляет собой Cys, hCys, β-Me-Cys, N-Me-Cys или Pen;
A48 представляет собой Cys, hCys, β-Me-Cys, N-Me-Cys или Pen;
A49 представляет собой Phe, Arg, Leu или Thr;
A50 представляет собой Arg или Ser;
A51 представляет собой Ser, Aib, Arg или Thr;
A52 представляет собой Cys, hCys, β-Me-Cys, N-Me-Cys или Pen;
A53 представляет собой Asp, Arg или Ser;
A54 представляет собой Leu или A6c;
A55 представляет собой Arg или Tyr;
A56 представляет собой Arg или Gln;
A57 представляет собой Leu;
A58 представляет собой Glu или Arg;
A59 представляет собой A6c, Arg, Asn, Asp, Gln, Glu, Ile, Leu, Nle, Ser, D-Ser, Trp или Tyr;
A60 представляет собой Tyr или Phe;
A61 представляет собой Cys, hCys, β-Me-Cys, N-Me-Cys или Pen;
A62 представляет собой Ala или Asn;
A63 представляет собой Pro, D-Pro, Thr или делетирована;
A64 представляет собой Leu, D-Leu, des-Leu или делетирована;
A65 представляет собой Lys, D-Lys, des-Lys, Arg или делетирована;
A66 представляет собой Pro, D-Pro или делетирована;
A67 представляет собой Ala, D-Ala, Aib или делетирована;
A68 представляет собой Lys, D-Lys, Arg или делетирована;
A69 представляет собой Ser, D-Ser, Aib, Thr или делетирована;
A70 представляет собой Ala, D-Ala, Glu или делетирована; и
A71 представляет собой Asp, Glu, Lys, Ser или делетирована.
Подмножество соединений, охватываемое формулой (I), включает соединения, в которых A59 представляет собой Asn.
Другое подмножество соединений, охватываемое формулой (I), включает соединения, в которых A59 представляет собой Leu, где указанные соединения содержат по меньшей мере одну дополнительную аминокислотную замену или вставку, выбранную из группы, состоящей из Arg27, Arg65, Arg68, Leu49, β-Me-Cys47, β-Me-Cys52, Thr51, Thr69, Asp71, Glu71, Lys71 и Ser71.
Еще одно подмножество соединений, охватываемое формулой (I), включает соединения, в которых A59 представляет собой Nle, где указанные соединения содержат по меньшей мере одну дополнительную аминокислотную замену, выбранную из группы, состоящей из Aib51, Aib67, Aib69, A6c54, N-Me-Cys47, N-Me-Cys48, Pen52 и Pen61.
Еще одно подмножество соединений, охватываемое формулой (I), включает соединения, в которых A59 представляет собой Ile, где указанные соединения содержат по меньшей мере одну аминокислотную замену, выбранную из группы, состоящей из Arg58, Arg49, Arg51 и Arg53.
Еще одно подмножество соединений, охватываемое формулой (I), включает соединения, в которых A59 представляет собой Arg, Asp, A6c, Gln, Glu, Ser, Trp или Tyr.
Предпочтительные соединения формулы (I) представляют собой:
Пример 1: (Asn59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:1)
Пример 2: (Asn59)hIGF-1(1-62)-OH; (SEQ ID NO:2)
Пример 3: (Asn59)hIGF-1(4-70)-OH; (SEQ ID NO:3)
Пример 4: (Pro27, Lys28, Asn59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:4)
Пример 5: (Pro27, Lys28, Asn59)hIGF-1(1-62)-OH; (SEQ ID NO:5)
Пример 6: (Ser53, Asn59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:6)
Пример 7: (Ser-Gly1, Asn59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:7)
Пример 8: (Asn59, Thr63, des-Leu64, des-Lys65, Glu70)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:8)
Пример 9: (Tyr55, Asn59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:9)
Пример 10: (Thr49, Asn59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:10)
Пример 11: (Asn59,62)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:11)
Пример 12: (Asn59, Phe60)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:12)
Пример 13: (Ser50, Asn59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:13)
Пример 14: (Gln56, Asn59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:14)
Пример 15: (Asn59, D-Pro63)hIGF-1(1-70)-OH;
Пример 16: (Asn59, D-Leu64)hIGF-1(1-70)-OH;
Пример 17: (Asn59, D-Lys65)hIGF-1(1-70)-OH;
Пример 18: (Asn59, D-Pro66)hIGF-1(1-70)-OH;
Пример 19: (Asn59, D-Ala67)hIGF-1(1-70)-OH;
Пример 20: (Asn59, D-Lys68)hIGF-1(1-70)-OH;
Пример 21: (Asn59, D-Ser69)hIGF-1(1-70)-OH;
Пример 22: (Asn59, D-Ala70)hIGF-1(1-70)-OH;
Пример 23: (Arg27,65,68, Leu59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:15)
Пример 24: (Leu59, Arg65,68)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:16)
Пример 25: (Leu49,59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:17)
Пример 26: (β-Me-Cys52, Leu59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:18)
Пример 27: (β-Me-Cys47, Leu59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:19)
Пример 28: (Leu59, Glu71)hIGF-1(1-71)-OH; (SEQ ID N0:20)
Пример 29: (Leu59, Asp71)hIGF-1(1-71)-OH; (SEQ ID NO:21)
Пример 30: (Leu59, Lys71)hIGF-1(1-71)-OH; (SEQ ID NO:22)
Пример 31: (Leu59, Ser71)hIGF-1(1-71)-OH; (SEQ ID NO:23)
Пример 32: (Leu59, Thr69)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:24)
Пример 33: (Thr51, Leu59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:25)
Пример 34: (N-Me-Cys47, Nle59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:26)
Пример 35: (Nle59, Aib69)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:27)
Пример 36: (N-Me-Cys48, Nle59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:28)
Пример 37: (Nle59, Aib67)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:29)
Пример 38: (hCys52, Nle59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQIDNO:30)
Пример 39: (Aib51, Nle59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID N0:31)
Пример 40: (Pen52, Nle59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:32)
Пример 41: (Nle59, Pen61)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:33)
Пример 42: (A6c54, Nle59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:34)
Пример 43: (Arg53, Ile59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:35)
Пример 44: (Arg49, Ile59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:36)
Пример 45: (Arg51, Ile59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:37)
Пример 46: (Arg58, Ile59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:38)
Пример 47: (A6c59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:39)
Пример 48: (Asp59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:40)
Пример 49: (Trp59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:41)
Пример 50: (Ser59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:42)
Пример 51: (Tyr59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:43)
Пример 52: (Glu59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:44)
Пример 53: (Gln59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:45)
Пример 54: (Arg59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:46) и
Пример 55: (Met-Gly1, Asn59)hIGF-1(1-70)-OH. (SEQ ID NO:47)
Подробное описание изобретения
В заявке используются следующие общепринятые сокращения:
Acc: 1-амино-1-цикло(C3-C9)алкилкарбоновая кислота
Acc включает:
A3c: 1-амино-1-циклопропанкарбоновую кислоту
A4c: 1-амино-1-циклобутанкарбоновую кислоту
A5c: 1-амино-1-циклопентанкарбоновую кислоту
A6c: 1-амино-1-циклогексанкарбоновую кислоту
Aib: α-аминоизомасляная кислота
Ala или A: аланин
Arg или R: аргинин
Asn или N: аспарагин
Asp или D: аспарагиновая кислота
Cys или C: цистеин
цистин: дисульфидный димер цистеина
hCys: гомоцистеин
β-Me-Cys: бета-метилцистеин, т.е.
(2S,3S)-2-амино-3-меркаптомасляная кислота
N-Me-Cys: N-метилцистеин
Gln или Q: глутамин
Glu или E: глутаминовая кислота
Gly или G: глицин
Ile или I: изолейцин
Leu или L: лейцин
des-Leu: делетированный Leu
Lys или K: лизин
des-Lys: делетированный Lys
Met или M: метионин
Nle: норлейцин
Pen: пеницилламин
Phe или F: фенилаланин
Pro или P: пролин
Ser или S: серин
Thr или T: треонин
Trp или W: триптофан
Tyr или Y: тирозин
Val или V: валин
Все сокращения (например, Ala) аминокислот в данном описании обозначают структуру -NR-CR'(R”)-CO-, в которой каждый из R' и R” независимо представляет собой водород или боковую цепь аминокислоты (например, R'=H и R”=CH3 для аланина) и в которой R=H или CH3, кроме пролина, т.е.
Пептид по данному изобретению также обозначают в настоящем документе в другом формате, например (Asn59)hIGF-1(1-70)-OH (SEQ ID NO:1), с аминокислотами, замещенными по сравнению с природной последовательностью, размещенными между скобками (т.е. Asn вместо Met в положении 59 IGF-1 дикого типа). Интервал, находящийся в скобках, относится к тем аминокислотам, которые находятся в аналоге. Например, “IGF-1(4-68)-OH” (SEQ ID NO:48) указывает, что аналог содержит аминокислоты от 4 до 68, которые соответствуют пептидной последовательности IGF-1 дикого типа. “NH2” в “IGF-1(1-70)-NH2” (SEQ ID NO:49) указывает на то, что C-конец пептида амидирован. “IGF-1(1-70)” или “IGF-1(1-70)-OH” указывает на то, что C-конец представляет собой свободную кислоту (SEQ ID NO:50).
Некоторые другие сокращения, применяемые в настоящем документе, определены следующим образом:
Act: ацетонитрил
Boc: трет-бутилоксикарбонил
BSA: бычий сывороточный альбумин
DCM: дихлорметан
DIPEA: диизопропилэтиламин
DMEM: модифицированная по способу Дульбекко среда Игла
ДМФА: диметилформамид
DTT: дитиотреитол
ESI: ионизация электрораспылением
FCS: эмбриональная телячья сыворотка
Fmoc: 9-флуоренилметилоксикарбонил
HBTU: гексафторфосфат 2-(1H-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония
HOBt: N-гидроксибензотриазол
ВЭЖХ: высокоэффективная жидкостная хроматография
LC-MS: жидкостная хроматография-масс-спектрометрия
MPAA: 4-меркаптофенилуксусная кислота
NMP: N-метилпирролидинон
OtBu: O-трет-бутиловый сложный эфир
Pbf: 2,2,4,6,7-пентаметилдигидробензофуран-5-сульфонил
QC: контроль качества
tBu: трет-бутил
TCA: трихлоруксусная кислота
TCEP: трис-2-карбоксиэтилфосфин
TIS: триизопропилсилан
ТФУК: трифторуксусная кислота
Tris: 2-амино-2-(гидроксиметил)-1,3-пропандиол
Trt: тритил
УФ-спектроскопия: ультрафиолетовая спектроскопия
«Алкил» относится к углеводородной группе, содержащей один или несколько атомов углерода, где множественные атомы углерода, если они присутствуют, соединены одинарными связями. Примеры этой группы включают, но не ограничиваются ими, метил, этил, пропил и бутил. Алкильная углеводородная группа может быть линейной или может содержать одну или несколько ветвей или циклических групп, примеры которых включают, но не ограничиваются ими, изопропил и трет-бутил.
«Замещенный алкил» относится к алкилу, в котором один или несколько водородных атомов углеводородной группы заменены одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена, OH, CN, SH, NH2, NHCH3, NO2, (C1-2)-алкила, замещенного 1-6 галогенами, CF3, OCH3, OCF3 и (CH2)0-4-COOH. В других вариантах осуществления присутствуют 1, 2, 3 или 4 заместителя.
«Арил» относится к необязательно замещенной ароматической группе, по меньшей мере с одним кольцом, имеющим конъюгированную систему пи-электронов, содержащей до трех конъюгированных или конденсированных кольцевых систем. Арил включает карбоциклический арил, гетероциклический арил и биарильные группы. Предпочтительно, арил представляет собой 5- или 6-членное кольцо. Предпочтительные атомы для гетероциклического арила представляют собой один или несколько атомов серы, кислорода и/или азота. Примеры арила включают фенил, 1-нафтил, 2-нафтил, индол, хинолин, 2-имидазол и 9-антрацен. Арильные заместители выбирают из группы, состоящей из -C1-20-алкила, -C1-20-алкокси, галогена, -OH, -CN, -SH, -NH2, -NO2, -C1-20-алкила, замещенного галогенами, -CF3, -OCF3 и -(CH2)0-20-COOH. В других вариантах осуществления арил содержит 0, 1, 2, 3 или 4 заместителя.
«Алкиларил» относится к «алкилу», присоединенному к «арилу».
Процедуры синтеза
Представленные в качестве примера аналоги IGF-1 по настоящему изобретению получали посредством первой стадии синтеза пептидных фрагментов, второй стадии сшивания (лигирования) и третьей стадии фолдинга. Следующие процедуры синтеза иллюстрируют, как специалист-химик может обеспечить получение любого из представленных в качестве примера аналогов IGF-1 по настоящему изобретению.
A) Синтез пептидного фрагмента (Gln 56 , Asn 59 )hIGF-1(48-70)-OH, т.е. Cys-Phe-Arg-Ser-Cys-Asp-Leu-Arg-Gln-Leu-Glu-Asn-Tyr-Cys-Ala-Pro-Leu-Lys-Pro-Ala-Lys-Ser-Ala-OH_(SEQ ID NO:51)
Основанный на Fmoc твердофазный пептидный синтез применяли для сборки указанного в заголовке пептидного фрагмента с использованием вспомогательной микроволновой обработки на пептидном синтезаторе Liberty (CEM; Matthews, NC, USA). Первый фрагмент из 14 остатков, например остатков 57-70 hIGF-1, или пептид из C-концевых кислот синтезировали в масштабе 1,0 ммоль с использованием Fmoc-Ala-смолы Ванга (0,72 мг-экв./г). Полученный в результате пептидный фрагмент затем разделяли на четыре партии по 0,25 ммоль для удлинения и разделения. Образец смолы массой 1,36 г помещали в коническую пробирку на 50 мл вместе с 15 мл раствора 1:1 ДМФА и DCM, которую загружали в заданное положение в синтезатор. Затем смолу переносили в реакционный сосуд посредством автоматического процесса синтезатора. Использовали стандартный протокол Liberty для масштаба 1,0 ммоль. Протокол включал удаление N-концевой защитной группы Fmoc путем обработки 20 мл 20% пиперидина, содержащего 0,1 M HOBt в ДМФА. Исходная стадия снятия защиты с помощью микроволновой энергии (45 ватт, максимальная температура 75°C) и барботирования азотом (3 секунды включено, 7 секунд выключено) продолжалась в течение 30 секунд. Из реакционного сосуда удаляли раствор и смолу тщательно промывали ДМФА несколько раз. Затем добавляли следующую аминокислоту (цикл 1), которую следовало присоединить к растущему пептиду (Fmoc-Ser(tBu)-OH), полученную в виде маточного раствора 0,2 M в ДМФА (15 мл, 3 эквивалента). Добавляли 6,0 мл 0,45 M (3 эквивалента) HBTU в ДМФА, после чего вносили 3,0 мл 2 M (6 эквивалентов) DIPEA в NMP. Стадию присоединения проводили с использованием микроволновой энергии (20 ватт, максимальная температура 75°C) с барботированием азотом в том же отношении, как на стадии снятия защиты, в течение периода 5 минут. Затем из реакционного сосуда удаляли раствор в слив и повторяли стадию присоединения.
Протокол присоединения для Fmoc-Cys(Trt)-OH представлял собой слегка модифицированную версию стандартного протокола. Для остатков Cys в течение первых 2 минут не использовали микроволновую энергию.
Затем следовал 4-минутный отрезок использования микроволновой энергии (20 ватт, максимальная температура 50°C). Все аминокислоты вводили одинаковым путем, используя стратегию двойного присоединения на всем протяжении целой последовательности. Циклы синтеза для указанного в заголовке пептидного фрагмента после первого Ser были следующими: цикл 2, Fmoc-Lys(Boc)-OH; цикл 3, Fmoc-Ala-OH; цикл 4, Fmoc-Pro-OH; цикл 5, Fmoc-Lys(Boc)-OH; цикл 6, Fmoc-Leu-OH; цикл 7, Fmoc-Pro-OH; цикл 8, Fmoc-Ala-OH; цикл 9, Fmoc-Cys(Trt)-OH; цикл 10, Fmoc-Tyr(tBu)-OH; цикл 11, Fmoc-Asn(Trt)-OH; цикл 12, Fmoc-Glu(OtBu)-OH; и цикл 13, Fmoc-Leu-OH.
Как только исходный пептидный фрагмент был завершен, смолу переносили обратно в коническую пробирку на 50 мл с использованием ДМФА в качестве растворителя. Смолу вручную равномерно разделяли на четыре образца, которые помещали в четыре конические пробирки на 50 мл, которые затем устанавливали обратно в синтезатор. Оставшуюся часть указанного в заголовке пептида синтезировали в масштабе 0,25 ммоль. Используемый протокол был тем же самым, как тот, который использовали для синтеза в большем масштабе, однако использовали меньшие количества реагентов. Удаление N-концевой защитной группы Fmoc состояло из обработки раствором, содержащим 10 мл 20% пиперидина и 0,1 M HOBt в ДМФА. Исходная стадия снятия защиты с помощью микроволновой энергии (45 ватт, максимальная температура 75°C) и барботирования азотом (3 секунды включено, 7 секунд выключено) продолжалась в течение 30 секунд. Затем из реакционного сосуда удаляли раствор и смолу тщательно промывали несколько раз ДМФА. Затем вводили следующую аминокислоту (цикл 14), полученную в виде 0,2 M маточного раствора в ДМФА (5,0 мл, 4 эквивалента), в растущий пептид (Fmoc-Gln(tBu)-OH). Затем добавляли 2,0 мл 0,45 M раствора (4 эквивалента) HBTU в ДМФА, после чего вносили 1,0 мл 2 M раствора (8 эквивалентов) DIPEA в NMP.
Протоколы присоединения для Fmoc-Cys(Trt)-OH и Fmoc-Arg(Pbf)-OH представляли собой слегка модифицированные версии стандартного протокола. Для присоединения остатков Cys микроволновую энергию вначале выключали на первые 2 минуты, затем включали на 4 минуты (20 ватт, максимальная температура 50°C). Для присоединения остатков Arg микроволновую энергию не использовали при первом присоединении, однако требовалась вторая стадия стандартного присоединения. В циклах 14, 16 и 21 использовали процедуру кэппинга, которая следовала непосредственно за стадией присоединения, включающей добавление 7 мл 0,5 M уксусного ангидрида, содержащего 0,015 M HOBt и 2 мл 2 M DIPEA, причем оба соединения были растворены в NMP, используя при этом многостадийный протокол микроволновой обработки (50 ватт в течение 30 секунд с максимальной температурой 65°C, затем без обработки в течение 30 секунд, 50 ватт в течение 30 секунд с максимальной температурой 65°C, затем без обработки в течение 30 секунд). Циклы синтеза для указанного в заголовке пептидного фрагмента после Gln были следующими: цикл 15, Fmoc-Arg(Pbf)-OH; цикл 16, Leu-OH; цикл 17, Fmoc-Asp(OtBu)-OH; цикл 18, Fmoc-Cys(Trt)-OH; цикл 19, Fmoc-Ser(tBu)-OH; цикл 20, Fmoc-Arg(Pbf)-OH; цикл 21, Fmoc-Phe-OH; и цикл 22, Fmoc-Cys(Trt)-OH.
После завершения пептидного остова удаляли N-концевую защитную группу Fmoc, а смолу вновь промывали ДМФА. Затем смолу переносили обратно в коническую пробирку на 50 мл с использованием ДМФА в качестве растворителя для переноса.
Смолу переносили в реакционный сосуд с фильтром из пористого стекла. Удаляли ДМФА и смолу интенсивно промывали DCM. Пептидный фрагмент отщепляли и освобождали от защиты обработкой следующим реагентом: 5% TIS : 5% вода : 90% ТФУК. Реакционную смесь оставляли инкубироваться в течение 3 часов при комнатной температуре и постоянном перемешивании. Затем раствор фильтровали в коническую пробирку на 50 мл. Уровень ТФУК снижали упариванием в потоке газообразного азота. Пептидный фрагмент осаждали добавлением 40 мл холодного простого этилового эфира с последующим центрифугированием при 3000 об/мин в течение 30 минут при 4°C в центрифуге с охлаждением (Sorvall Legend RT; Thermo Fisher, San Jose, CA, USA). Полученный в результате осадок растворяли в 0,1% ТФУК в воде перед очисткой путем препаративной ВЭЖХ, укомплектованной колонкой с обращенной фазой C18 (Luna, 10 мкм, колонка 250×21,2 мм), с использованием градиента 0-60% ацетонитрила (0,1% ТФУК) в течение 50 минут при скорости потока 10 мл/мин. Очищенный пептидный фрагмент анализировали путем ВЭЖХ (Luna C18, 3 мкм, колонка 4,6×100 мм) с градиентом 5-80% ацетонитрила (0,08% ТФУК) в течение 30 минут со скоростью потока 1 мл/мин и путем масс-спектрометрии (LCQ Advantage; Thermo Fisher, San Jose, CA, USA). Пептидный фрагмент затем лиофилизировали и хранили при -50°C для дальнейшего применения.
B) Синтез пептидного фрагмента hIGF-1(1-47)-тиоэфир, т.е. Gly-Pro-Glu-Thr-Leu-Cys-Gly-Ala-Glu-Leu-Val-Asp-Ala-Leu-Gln-Phe-Val-Cys-Gly-Asp-Arg-Gly-Phe-Tyr-Phe-Asn-Lys-Pro-Thr-Gly-Tyr-Gly-Ser-Ser-Ser-Arg-Arg-Ala-Pro-Gln-Thr-Gly-Ile-Val-Asp-Glu-Cys-тиоэфирпропионил-Leu-NH 2 (SEQ ID NO:52)
N-концевой пептидный фрагмент, например остатки 1-47 hIGF-1, объединяли с использованием основанного на Boc-химии твердофазного пептидного синтеза. Для синтеза в масштабе 0,5 ммоль использовали пептидный синтезатор ABI 433A (Applied Biosystems; Foster City, CA, USA), модифицированный для запуска стандартного протокола FastBoc. Реакционный сосуд, содержащий 0,645 мг 0,77 мг-экв./г смолы Tampal, помещали на синтезатор. Для набухания смолы вводили ДМФА. Протокол ABI FastBoc 0,5 использовали для получения фрагмента. Каждый цикл состоял из деблокирования N-концевой защитной группы Boc с помощью чистой ТФУК с последующей обильной промывкой ДМФА. Предварительно упакованные картриджи на 2,0 ммоль (4 эквивалента) каждой аминокислоты затем растворяли в 0,40 M HBTU и ДМФА. После полного растворения каждой аминокислоты раствор автоматически перемещали в емкость для активации. Раствор DIPEA (чистого) вводили в сосуд для активации и подвергали воздействию смолы в течение длительного периода. Реакционный сосуд опорожняли и смолу промывали ДМФА. Для картриджей Arg/Asn требовалось продолжительное время активации, чтобы гарантировать растворимость. Кроме того, любую аминокислоту, добавленную непосредственно после присоединения остатка Gln, промывали DCM до и после выполнения протокола деблокирования. Время присоединения составляло 30 минут. Следующие аминокислоты использовали для указанного в заголовке пептидного фрагмента: Boc-Arg(Tos)-OH, Boc-Asp(cHex)-OH, Boc-Glu(cHex)-OH, Boc-Asn(Xan)-OH, Boc-Cys(4Me-Bzl)-OH, Boc-Lys(ClZ)-OH, Boc-Gln-OH, Boc-Ser(OBzl)-OH, Boc-Thr(OBzl)-OH и Boc-Tyr(BrZ)-OH.
После последнего цикла присоединения смолу промывали DCM и сушили. С пептидного фрагмента снимали защиту и отщепляли его от смолы с использованием обработки 10 мл фтороводорода и анизола. Реакции давали проходить в течение 70 минут, причем к этому моменту фтороводород вымывали струей азота. Остаток промывали простым эфиром и затем пептид растворяли в 10-15 мл ТФУК. Пептидный фрагмент осаждали путем фильтрования ТФУК в 40 мл холодного простого этилового эфира с последующим центрифугированием при 3000 об/мин в течение 30 минут при 4°C в центрифуге с охлаждением (Sorvall Legend RT; Thermo Fisher, San Jose, CA, USA). Полученный в результате осадок растворяли в 0,1% ТФУК в воде и очищали путем препаративной ВЭЖХ, укомплектованной колонкой с обращенной фазой C18 (Luna, 10 мкм, колонка 250×21,2 мм), с использованием градиента 20-40% ацетонитрила (0,1% ТФУК) в течение 120 минут со скоростью потока 10 мл/мин. Очищенный пептидный фрагмент анализировали путем ВЭЖХ (Luna C18, 3 мкм, колонка 4,6×100 мм) с градиентом 5-80% ацетонитрила (0,08% ТФУК) в течение 30 минут со скоростью потока 1 мл/мин и путем масс-спектрометрии (LCQ Advantage; Thermo Fisher, San Jose, CA, USA). Затем пептидный фрагмент лиофилизировали и хранили при -50°C для дальнейшего использования.
C) Общая процедура сшивания
Полноразмерные аналоги hIGF-1 конструировали способом химического сшивания, которое происходит в природе между N-концевым фрагментом со сложным тиоэфиром, например hIGF-1(1-47)-S-(CH2)2C(0)-Leu-NH2 (SEQ ID NO:52), и C-концевым фрагментом, например (Gln56, Asn59)hIGF-1(48-70)-OH (SEQ ID NO:51), который содержит на своем N-конце остаток цистеина.
Для начала способа получения указанного в заголовке пептида 5,5 мг C-концевого фрагмента hIGF-1 растворяли в 0,5 мл буфера для сшивания (200 мМ фосфат натрия, pH 8,5, 6M гидрохлорид гуанидина) в пробирке Эппендорфа на 1,5 мл. К данному раствору добавляли 100 мкл раствора TCEP (40 мг/мл) и смесь встряхивали. Смесь переносили во вторую пробирку Эппендорфа, содержащую 6,5 мг N-концевого фрагмента hIGF-1 со сложным тиоэфиром. Реагенты тщательно смешивали. Небольшой образец (5 мкл) удаляли и анализировали путем LC-MS (LCQ Deca XP; Thermo Fisher, San Jose, CA, USA). К реакционной смеси добавляли 100 мкл раствора MPAA (20 мг/мл) с последующим перемешиванием. Образцы (5 мкл) периодически извлекали, чтобы следить за процессом реакции с использованием LC-MS. Приблизительно через 3,5 часа, когда реакция была близка к завершению, смесь гасили и разбавляли добавлением 9,5 мл 0,1% ТФУК в воде. Продукт сшивания очищали путем полупрепаративной ВЭЖХ (Vydac 218TP101510, C18, 10-15 мкм, 10×250 мм) в градиенте 5-80% ацетонитрила (0,1% ТФУК) в течение 40 минут со скоростью потока 5 мл/мин. Пик продукта лиофилизировали и хранили при -50°C. Массу не подвергшегося фолдингу продукта сшивания определяли путем физического измерения.
D) Общая процедура фолдинга (окислительно-восстановительная пара глутатиона) для примера 14, т.е. (Gln 56 , Asn 59 )hIGF-1 (1-70)-OH (SEQ ID NO:14)
Белок, полученный в процессе сшивания на стадии C), как описано выше, растворяли в буфере для сшивания (200 мМ фосфат натрия, pH 8,5, 6M гидрохлорид гуанидина) до концентрации 1 мг/мл. Затем добавляли буфер для фолдинга (100 мМ Tris, pH 8,5, 1 мМ окисленный глутатион, 10 мМ восстановленный глутатион) до достижения конечной концентрации белка 0,25 мг/мл. Обеспечивали осуществление процесса фолдинга в течение 3 часов. После этого реакцию гасили путем добавления по каплям ТФУК до достижения в реакционной смеси pH ≤3. Затем продукт очищали путем полупрепаративной ВЭЖХ (Vydac 218TP101510, C18, 10-15 мкм, колонка 10×250 мм) в градиенте 5-60% ацетонитрила (0,1% ТФУК) в течение 40 минут со скоростью потока 5 мл/мин. Продукт лиофилизировали. Содержание белка определяли путем повторного растворения продукта в 0,1% ТФУК в воде, измеряя затем оптическую плотность при 280 нм (спектрофотометр NanoDrop ND1000). Затем белок анализировали для QC (ВЭЖХ и MS).
E) Процедура окисления для получения (глиоксилил-Gly 1 , Asn 59 )hIGF-1(1-70)-OH (SEO ID NO:53) из примера 7, т.е. (Ser-Gly 1 , Asn 59 )hIGF-1(1-70)OH (SEQ ID NO:7)
Массу подвергнутого фолдингу аналога hIGF-1 определяли по оптической плотности при 280 нм в 0,1% ТФУК в воде (спектрофотометр NanoDrop ND1000). Белок, полученный в процессе фолдинга на стадии D), как описано выше, повторно растворяли в 50 мМ имидазольном буфере (pH 7,0) до конечной концентрации 2 мг/мл (2,66×10-4 M). Добавляли периодат натрия (NaIO4) (4 эквивалента), растворенный в имидазольном буфере, и полученный в результате раствор осторожно перемешивали. Реакции давали происходить при комнатной температуре без дальнейшего перемешивания. Через 5 минут реакцию гасили добавлением 10 эквивалентов этиленгликоля. Смеси давали отстояться в течение 15 минут при комнатной температуре. Смесь разбавляли 0,1% ТФУК в воде до конечного объема 10 мл. Затем продукт очищали путем полупрепаративной ВЭЖХ (Vydac 218TP101510, C18, 10-15 мкм, колонка 10×250 мм) в градиенте 5-60% ацетонитрила (0,1% ТФУК) в течение 40 минут со скоростью потока 5 мл/мин. Затем продукт лиофилизировали и хранили при -50°C до необходимого применения.
F) Процедура синтеза для примера 27, т.е. (β-Me-Cys 47 , Leu 59 )hIGF-1(1-70)-OH (SEQ ID NO:19)
Указанный в заголовке белок объединяли путем нативного химического сшивания с использованием hIGF(1-46)-тиопропионил-Leu-NH2 (SEQ ID NO:54) и C-концевого фрагмента, т.е. (β-Me-Cys47, Leu59)hIGF-1(47-70) (SEQ ID NO:55). Сложный тиоэфир белка (7,4 мг, 1,45 мкмоль) и C-концевой фрагмент (3,8 мг, 1,38 мкмоль) растворяли в буфере для сшивания (6 M гидрохлорид гуанидина в 200 мМ фосфате натрия, pH 8,5, 400 мкл) и TCEP (80 мкл, 40 мг/мл, pH 7). Добавляли катализатор MPAA (80 мкл, 20 мг/мл, pH 7). Прогрессирование реакции отслеживали путем LC-MS на LCQ Deca XP (Thermo Finnigan) с колонкой Luna C18(2) (5 мкм, 4,6×100 мм) в градиенте 5-80% ацетонитрила (0,1% ТФУК) в течение 30 минут. Реакцию гасили разбавлением 1:10 dH2O c 0,1% ТФУК (об./об.). Неочищенную смесь центрифугировали и пропускали через стеклянный фильтр с порами 1,0 мкм для удаления какого-либо осадка MPAA. Полноразмерный белок очищали с использованием линейного градиента B 5-60% в течение 40 минут со скоростью потока 5 мл/мин на Vydac C18 (10 мкм, 10×250 мм). Белок определяли количественно путем УФ-спектроскопии (спектрофотометр NanoDrop ND1000) и лиофилизировали для дальнейшего применения.
Находящийся на хранении белок (1,8 мг, 235 нмоль) растворяли в растворе 200 мМ H2PO4 -, 6 M гуанидиния-HCl, имеющем pH 8,5, до концентрации 1,0 мг/мл. Буфер для фолдинга (100 мМ Tris, 10 мМ глутатион, 1 мМ окисленный глутатион при pH 8,5) добавляли к раствору до достижения конечной концентрации белка 250 мкг/мл. Смесь оставляли инкубироваться при комнатной температуре, осуществляя при этом мониторинг методом ВЭЖХ. Как только достигалось равновесие (что визуализировалось в виде стабильного профиля ВЭЖХ), реакцию гасили путем перемешивания либо с уксусной кислотой, либо с ТФУК для доведения pH раствора до 3. Раствор очищали с использованием вначале стеклянного фильтра с порами 1,0 мкм и затем полупрепаративной колонки.
Подвергнутый фолдингу белок очищали с использованием линейного градиента B 5-60% в течение 40 минут со скоростью потока 5 мл/мин. Белок определяли количественно путем УФ-спектроскопии (спектрофотометр NanoDrop ND1000) и лиофилизировали. Получали приблизительно 92 мкг очищенного продукта с представлением выхода 5%. Массу белка подтверждали на Finnigan LCQ Advantage MAX MS.
G) Процедура синтеза для примера 36, т.е. (N-Me-Cys 48 , Nle 59 )hIGF-1(1-70)-OH (SEQ ID NO:28)
Указанный в заголовке белок объединяли путем нативного химического сшивания с использованием hIGF-1(1-46)-тиопропионил-Leu-NH2 (SEQ ID NO:52) и C-концевого фрагмента, т.е. (N-Me-Cys48, Nle59)hIGF-1(48-70) (SEQ ID NO:56). Сложный тиоэфир белка (4,3 мг, 824 нмоль) и C-концевой фрагмент (2,1 мг, 790 нмоль) растворяли в буфере для сшивания (400 мкл, 6 M гидрохлорид гуанидина в 200 мМ фосфате натрия, pH 8,5) и TCEP (80 мкл, 40 мг/мл, pH 7). Добавляли катализатор MPAA (80 мкл, 20 мг/мл, pH 7). Прогрессирование реакции отслеживали, используя LC-MS на LCQ Deca XP (Thermo Finnigan) с колонкой Luna C18(2) (5 мкм, 4,6×100 мм) в градиенте 5-80% ацетонитрила (0,1% ТФУК), в течение 30 минут. Реакцию гасили разбавлением 1:10 dH2O c 0,1% ТФУК (об./об.). Неочищенную смесь центрифугировали и пропускали через стеклянный фильтр с порами 1,0 мкм для удаления какого-либо осадка MPAA. Полноразмерный белок очищали с использованием линейного градиента B 5-60% в течение 40 минут со скоростью потока 5 мл/мин на Vydac C18 (10 мкм, 10×250 мм). Белок определяли количественно путем УФ-спектроскопии (спектрофотометр NanoDrop ND1000) и лиофилизировали для дальнейшего применения.
Находящийся на хранении белок растворяли в растворе 200 мМ H2PO4 -, 6 M гуанидиния-HCl (pH 8,5) до достижения концентрации 1,0 мг/мл. Буфер для фолдинга (100 мМ Tris, 10 мМ глутатион, 1 мМ окисленный глутатион, pH 8,5) добавляли к раствору до достижения конечной концентрации белка 250 мкг/мл. Смесь оставляли инкубироваться при комнатной температуре, осуществляя при этом мониторинг методом ВЭЖХ. Как только достигалось равновесие (что визуализировалось в виде стабильного профиля ВЭЖХ), реакцию гасили либо уксусной кислотой, либо ТФУК до pH 3. Раствор очищали с использованием вначале стеклянного фильтра с порами 1,0 мкм и затем полупрепаративной колонки.
Подвергнутый фолдингу белок очищали с использованием линейного градиента B 5-60% в течение 40 минут со скоростью потока 5 мл/мин. Белок определяли количественно путем УФ-спектроскопии (спектрофотометр NanoDrop ND1000) и лиофилизировали. Получали приблизительно 0,415 мг очищенного продукта с предоставлением выхода 10,6%. Массу белка подтверждали на Finnigan LCQ Advantage MAX MS.
Специалистом в данной области могут быть получены другие пептиды по изобретению с использованием процедур синтеза, аналогичных тем, которые раскрыты в указанных выше примерах. Физические данные для соединений, примеры которых приведены в настоящем документе, даны в таблице 1.
Таблица 1 | |||
Номер примера | Мол. масса (ожидаемая) | Мол. масса (ESI-MS) | % очистки (ВЭЖХ) |
1 | 7631,6 | 7631,6 | 99,9 |
2 | 6838,6 | 6839,5 | 95,2 |
3 | 7348,3 | 7347,9 | 93,0 |
4 | 7631,6 | 7632,1 | 97,7 |
5 | 6838,6 | 6839,3 | 95,9 |
6 | 7603,6 | 7602,5 | 99,9 |
7 | 7718,7 | 7718,7 | 99,9 |
8 | 7452,3 | 7454,1 | 99,9 |
9 | 7638,6 | 7639,7 | 99,9 |
10 | 7585,5 | 7586,0 | 99,9 |
11 | 7674,6 | 7675,3 | 99,9 |
12 | 7615,6 | 7616,9 | 99,9 |
13 | 7562,5 | 7563,6 | 99,9 |
14 | 7603,6 | 7605,1 | 98,5 |
15 | 7631,6 | 7634,1 | 96,8 |
16 | 7631,6 | 7633,2 | 97,2 |
17 | 7631,6 | 7632,9 | 95,1 |
18 | 7631,6 | 7631,6 | 96,7 |
19 | 7631,6 | 7631,9 | 97,9 |
20 | 7631,6 | 7631,8 | 98,5 |
21 | 7631,6 | 7631,7 | 97,6 |
22 | 7631,6 | 7631,8 | 98,1 |
23 | 7714,7 | 7713,9 | 99,9 |
24 | 7686,7 | 7686,7 | 99,9 |
25 | 7596,6 | 7596,7 | 99,9 |
26 | 7644,7 | 7645,5 | 99,9 |
27 | 7644,7 | 7644,9 | 99,9 |
28 | 7759,8 | 7760,4 | 100 |
29 | 7745,8 | 7746,5 | 100 |
30 | 7758,8 | 7758,4 | 100 |
31 | 7717,7 | 7718,5 | 100 |
32 | 7644,7 | 7645,5 | 100 |
33 | 7644,7 | 7645,4 | 95,5 |
34 | 7644,7 | 7643,9 | 100 |
35 | 7628,7 | 7628,1 | 94,0 |
36 | 7644,7 | 7644,8 | 99,9 |
37 | 7644,7 | 7644,6 | 99,9 |
38 | 7644,7 | 7645,3 | 99,9 |
39 | 7628,7 | 7628,4 | 99,9 |
40 | 7658,7 | 7658,8 | 99,9 |
41 | 7658,7 | 7658,8 | 99,9 |
42 | 7642,7 | 7641,7 | 99,9 |
43 | 7671,8 | 7672,4 | 99,9 |
44 | 7641,7 | 7641,8 | 99,9 |
45 | 7699,8 | 7701,0 | 97,7 |
46 | 7657,7 | 7658,7 | 96,1 |
47 | 7642,7 | 7640,9 | 99,9 |
48 | 7632,6 | 7632,5 | 99,9 |
49 | 7703,7 | 7704,0 | 99,9 |
50 | 7604,6 | 7604,7 | 99,9 |
51 | 7680,7 | 7680,5 | 100 |
52 | 7646,6 | 7646,2 | 100 |
53 | 7645,6 | 7644,9 | 100 |
54 | 7673,7 | 7674,7 | 99,9 |
Функциональные анализы
A) Анализ связывания с рецептором IGF-1 in vitro
Получали мембраны для исследований связывания радиоактивного лиганда путем гомогенизации клеток MCF-7 человека, экспрессирующих природный рецептор IGF-1 в 20 мл ледяного 50 мМ Tris-HCl посредством Brinkman Polytron (Westbury, NY, USA) (режим 6, 15 сек). Гомогенаты промывали дважды при центрифугировании (39000 g/10 минут) и конечные осадки ресуспендировали в 50 мМ Tris-HCl, содержащем 2,5 мМ MgCl2 и 0,1% BSA.
Для анализа аликвоты инкубировали с 0,05 нМ [125I]IGF-1. Иногда включали немеченые конкурентные тестируемые пептиды. Конечный объем для анализа составлял 0,25 мл. После периода инкубации, равного 120 минут, (20°C) связанный [125I]IGF-1 (~2000 Ки/ммоль, Perkin Elmer Life Sciences, Boston, MA, USA) отделяли от свободных радиоактивных частиц путем центрифугирования при 3000 об/мин в течение 10 минут. Супернатант декантировали и радиоактивные частицы, захваченные осадком, считывали путем гамма-спектрометрии (Wallac LKB, Gaithersburg, MD, USA). Специфическое связывание определяли как общий связанный [125I]IGF-1 минус тот, что связывался в присутствии 100 нМ IGF-1.
Данные по связыванию рецептора IGF-1 in vitro (т.е. значения ЕС50) для соединений, приведенных в качестве примеров в настоящем документе, приведены в таблице 2.
B) Анализ биологической активности IGF-1 in vitro
Мышиные клетки 3T3/R (получены от Dr. Е. Rozengurt из UCLA в Los Angeles, СА, USA) культивировали в 24-луночном планшете (DMEM+10% FCS) и инкубировали в течение 2 суток в культуре.
Для анализа среду удаляли и промывали один раз бессывороточной DMEM. Затем инкубировали без сыворотки в течение 24 часов. После сывороточного голодания добавляли [3Н]-тимидин и пептиды IGF-1. Затем клетки инкубировали в течение 24 часов при 37°C.
В конце инкубации среду аспирировали. Затем клетки отмывали ледяным 0,9% раствором NaCl. Затем добавляли 5% ледяной раствор ТСА для инкубации в течение 30 минут при 4°C. ТСА аспирировали и лунки инкубировали с 95% этанолом в течение 4 часов. Затем среду переносили во флакон для жидкостной сцинтилляции с целью оценки радиоактивности.
Данные по биологической активности IGF-1 in vitro (т.е. значения ЕС50) для соединений, примеры которых приведены в настоящем документе, также приведены в таблице 2.
C) Скрининг in vitro пептидов IGF-1 на перекрестную реактивность с инсулиновым рецептором на клетках U2OS
Клетки U2OS (каталожный № 93-0466С3, DiscoveRX Corporation, Fremont, СА, USA) высевали в количестве 6×105 клеток/мл в 96-луночный покрытый поли-D-лизином планшет за 16 часов до анализа в бессывороточной среде для анализа. Инсулин дикого типа (каталожный № 10908, Sigma, St. Louis, MO, USA), IGF-1 дикого типа (Increlex®, Tercica, Inc., Brisbane, CA, USA) или тестируемый пептид IGF-1, описанный в настоящей заявке, добавляли в интервале доз от 10 мкМ (микромолярная) до 0,15 нм (наномолярная) и инкубировали в течение 3 часов при 37°C с 5% CO2. Реагент PathHunter™ (каталожный № 93-001, DiscoveRX) получали по инструкциям производителя и добавляли в каждую лунку. Планшеты инкубировали при комнатной температуре в течение 1 часа. Люминесценцию считывали на спектрофотометре для многомаркерного анализа планшетов Envision 2104 (PerkinElmer, Inc., Waltham, MA, USA). Анализировали активность каждого тестируемого пептида и сообщали в виде максимального/минимального (max/min) значений. Данные in vitro по перекрестной реактивности с инсулиновым рецептором (т.е. значения max/min) для соединений, примеры которых приведены в настоящем документе, также представлены в таблице 2.
Обнаружено, что многие из соединений, примеры которых приведены в настоящем документе, являются значительно более активными, чем IGF-1 дикого типа, который характеризуется значением IC50 4,59 нМ, значением EC50 3,75 нМ и значением max/min 2,1.
Таблица 2 | |||
Номер примера | IC50 (нМ) | EC50 (нМ) | max/min |
1 | 0,57 | 0,51 | 2,1 |
2 | 0,50 | 2,31 | N/A |
3 | 2,41 | 7,17 | N/A |
4 | 0,88 | 1,90 | N/A |
5 | 1,14 | 1,89 | N/A |
6 | 0,66 | 0,98 | N/A |
7 | 4,11 | 7,41 | N/A |
8 | 19,02 | 32,00 | N/A |
9 | 3,62 | 8,31 | N/A |
10 | 2,90 | 1,09 | N/A |
11 | 1,85 | 3,34 | N/A |
12 | 1,47 | 5,11 | N/A |
13 | 1,25 | 7,02 | N/A |
14 | 5,94 | 3,56 | N/A |
15 | 0,81 | 3,70 | N/A |
16 | 2,61 | 7,59 | N/A |
17 | 2,77 | 4,59 | N/A |
18 | 0,72 | 3,33 | N/A |
19 | 2,77 | 7,69 | N/A |
20 | 1,60 | 3,13 | N/A |
21 | 1,57 | 3,95 | N/A |
22 | 0,91 | 4,22 | N/A |
23 | 2,69 | 3,86 | N/A |
24 | 2,89 | 2,60 | N/A |
25 | 2,40 | 6,72 | N/A |
26 | 3,60 | 1,28 | N/A |
27 | 0,58 | 1,13 | N/A |
28 | 3,25 | 2,12 | N/A |
29 | 13,25 | 4,86 | N/A |
30 | 1,95 | 1,87 | N/A |
31 | 2,03 | 1,18 | N/A |
32 | 2,66 | 5,45 | N/A |
33 | 2,25 | 2,30 | N/A |
34 | N/A | N/A | N/A |
35 | 3,64 | 3,15 | N/A |
36 | N/A | N/A | N/A |
37 | 23,25 | 3,42 | N/A |
38 | 23,13 | 4,21 | N/A |
39 | 28,10 | 0,93 | N/A |
40 | N/A | N/A | N/A |
41 | N/A | N/A | N/A |
42 | 1,49 | 2,01 | N/A |
43 | 1,27 | 5,08 | N/A |
44 | 6,31 | 3,69 | N/A |
45 | 9,27 | 6,24 | N/A |
46 | N/A | N/A | N/A |
47 | 1,46 | 1,31 | N/A |
48 | 18,49 | 1,81 | N/A |
49 | 4,54 | 2,69 | N/A |
50 | 30,63 | 2,63 | N/A |
51 | 2,18 | 1,29 | N/A |
52 | 1,29 | 2,44 | N/A |
53 | N/A | N/A | N/A |
54 | 3,49 | 2,34 | N/A |
Введение
Аналоги IGF-1 по данному изобретению могут быть представлены в форме фармацевтически приемлемых солей. Примеры таких солей включают, но не ограничиваются ими, соли, образованные с органическими кислотами (например, уксусной, молочной, малеиновой, лимонной, яблочной, аскорбиновой, янтарной, бензойной, метансульфоновой, толуолсульфоновой или памовой кислотой), неорганическими кислотами (например, соляной кислотой, серной кислотой или фосфорной кислотой) и полимерными кислотами (например, дубильной кислотой, карбоксиметилцеллюлозой, полимолочной, полигликолевой кислотой или сополимерами полимолочной-гликолевой кислот).
Обычный способ получения соли пептида по настоящему изобретению хорошо известен в данной области и может быть осуществлен стандартными способами обмена соли. Например, соль ТФУК пептида по настоящему изобретению (соль ТФУК образуется в результате очистки пептида с использованием препаративной ВЭЖХ, в которой элюирование происходит содержащими ТФУК буферными растворами) преобразовывали в другую соль, такую как ацетатная соль, путем растворения пептида в небольшом количестве 0,25 н. водного раствора уксусной кислоты. Полученный в результате раствор наносили на колонку для полупрепаративной ВЭЖХ (Zorbax, 300 SB, C-8). Элюирование с колонки проводят (1) 0,1 н. водным раствором ацетата аммония в течение 0,5 часов, (2) 0,25 н. водным раствором уксусной кислоты в течение 0,5 часов и (3) линейным градиентом (от 20% до 100% раствора B в течение 30 мин) при скорости потока 4 мл/мин (раствор A представляет собой 0,25 н. водный раствор уксусной кислоты, и раствор B представляет собой 0,25 н. уксусную кислоту в смеси ацетонитрил/вода в соотношении 80:20). Фракции, содержащие пептид, собирают и лиофилизируют досуха.
Дозировка активного ингредиента в композициях по данному изобретению может варьировать; однако необходимо, чтобы количество активного ингредиента было таким, чтобы получалась подходящая лекарственная форма. Выбранная дозировка зависит от требуемого терапевтического эффекта, от пути введения и от длительности лечения. Дозировка легко определяется профессиональным, компетентным врачом-терапевтом.
Соединения по данному изобретению могут быть введены пероральным, парентеральным (например, путем внутримышечной, интраперитонеальной, внутривенной или подкожной инъекции или посредством имплантата), назальным, вагинальным, ректальным, сублингвальным или местным путем введения и могут быть составлены с фармацевтически приемлемыми носителями для обеспечения лекарственных форм, подходящих для каждого пути введения.
Твердые лекарственные формы для перорального введения включают капсулы, таблетки, пилюли, порошки и гранулы. В таких твердых лекарственных формах активное соединение смешивают по меньшей мере с одним инертным фармацевтически приемлемым носителем, таким как сахароза, лактоза или крахмал. Такие лекарственные формы могут также включать, в качестве обычной практики, дополнительные субстанции, которые отличаются от таких инертных разбавителей, например смазки, такие как стеарат магния. В случае капсул, таблеток и пилюль лекарственные формы могут также включать буферные средства. Таблетки и пилюли могут быть дополнительно получены с энтеросолюбильными покрытиями.
Жидкие лекарственные формы для перорального введения включают, без ограничения, фармацевтически приемлемые эмульсии, растворы, суспензии, сиропы, эликсиры и т.п., содержащие инертные разбавители, обычно используемые в данной области, такие как вода. Помимо таких инертных разбавителей, композиции могут также включать вспомогательные средства, такие как увлажнители, эмульгирующие и суспендирующие средства, а также подсластители, вкусовые добавки и отдушки.
Препараты по данному изобретению для парентерального введения включают, без ограничения, стерильные водные или неводные растворы, суспензии, эмульсии и т.п. Примеры неводных растворителей или носителей включают пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, растительные масла, такие как оливковое масло и кукурузное масло, желатин и вводимые путем инъекции органические сложные эфиры, такие как этилолеат. Такие лекарственные формы могут также содержать вспомогательные средства, такие как консерванты, увлажняющие, эмульгирующие и диспергирующие средства. Препараты можно стерилизовать, например, путем фильтрования через задерживающий бактерии фильтр, путем введения в композиции стерилизующих средств, путем облучения композиций и/или путем нагревания композиций. Фармацевтические композиции, содержащие новые аналоги IGF-1, описываемые в настоящем документе, могут также быть получены в форме стерильных твердых композиций, которые могут растворяться в стерильной воде или какой-либо другой стерильной инъецируемой среде непосредственно перед использованием.
Композиции для ректального или вагинального введения предпочтительно представляют собой суппозитории, которые могут содержать, в дополнение к активному веществу, эксципиенты, такие как масло какао или воск для суппозиториев.
Композиции для назального или сублингвального введения также получают со стандартными эксципиентами, хорошо известными в данной области.
Кроме того, соединение по данному изобретению можно вводить в композиции с замедленным высвобождением, такие как композиции, описанные в следующих патентах и патентных заявках. В патенте США № 5672659 описаны композиции с замедленным высвобождением, содержащие биоактивное средство и сложный полиэфир. В патенте США № 5595760 описаны композиции с замедленным высвобождением, содержащие биоактивное средство в гелеобразной форме. В патенте США № 5821221 описаны композиции с замедленным высвобождением, содержащие биоактивное средство и хитозан. В патенте США № 5916883 описаны композиции с замедленным высвобождением, содержащие биоактивное средство и циклодекстрин. В публикации PCT WO 99/38536 описаны абсорбируемые композиции с замедленным высвобождением, содержащие биоактивное средство. В публикации PCT WO 00/04916 описан способ получения микрочастиц, содержащих терапевтическое средство, такое как пептид, в системе эмульсии «масло в воде». В публикации PCT WO 00/09166 описаны комплексы, содержащие терапевтическое средство, такое как пептид, и фосфорилированный полимер. В публикации PCT WO 00/25826 описаны комплексы, содержащие терапевтическое средство, такое как пептид, и полимер, несущий неполимеризуемый лактон.
Кроме того, изобретение, описанное в патенте США № 7258864, относится к способу лечения субъекта с дефицитом инсулиноподобного фактора роста-1 (IGFD), включающему введение пациенту педиатрического профиля эффективного количества немодифицированного IGF-1, где субъект характеризуется следующим: a) во время лечения или перед исходным лечением IGF-1 имеет или имел рост, по меньшей мере, приблизительно на 2 стандартных отклонения (SD) ниже нормального среднего роста для соответствующего возраста и пола, и b) во время лечения или перед исходным лечением IGF-1 имеет или имел уровень IGF-1 в крови, по меньшей мере, приблизительно на -1 SD ниже нормальных средних уровней, где субъект не страдает от синдрома Ларона или синдрома частичной нечувствительности к гормону роста и где указанное введение эффективно для лечения IGFD у субъекта.
Аналогично, изобретение, описанное в WO 2006/130769, относится к способу лечения субъекта с идиопатической низкорослостью (ISS), включающему введение пациенту педиатрического профиля, страдающему ISS, характеризующемуся неполной активностью или неполной сигнализацией эндогенного гормона роста, количества IGF-1, эффективного для ускорения роста у субъекта, где субъект дополнительно характеризуется следующим: a) во время лечения или перед исходным лечением IGF-1 имеет или имел рост, по меньшей мере, приблизительно на 2 стандартных отклонения (SD) ниже нормального среднего роста для соответствующего возраста и пола, и b) имеет уровни GH и IGF-1 в крови, которые являются, по меньшей мере, нормальными для субъекта того же возраста и пола.
Кроме того, новые аналоги, описываемые в настоящем документе, могут быть введены отдельно или в сочетании с другим терапевтическим средством, что определяется профессиональным врачом-терапевтом.
Если не определено иначе, все технические и научные термины, используемые в настоящем документе, имеют то же значение, которое им обычно придается специалистом в области, к которой относится настоящее изобретение. Также, все публикации, патентные заявки, патенты и другие ссылки, указанные в настоящем документе, включены, таким образом, в него путем ссылки, причем каждая в полном объеме.
Claims (17)
1. Аналог-агонист IGF-1 формулы (I),
в которой:
A-1 представляет собой Ser или делетирована;
A1 представляет собой Gly или делетирована;
A2 представляет собой Pro или делетирована;
A3 представляет собой Glu или делетирована;
A4 представляет собой Thr;
A5 представляет собой Leu;
A6 представляет собой Cys;
A7 представляет собой Gly;
A8 представляет собой Ala;
A9 представляет собой Glu;
A10 представляет собой Leu;
A11 представляет собой Val;
A12 представляет собой Asp;
A13 представляет собой Ala;
A14 представляет собой Leu;
A15 представляет собой Gln;
A16 представляет собой Phe;
A17 представляет собой Val;
A18 представляет собой Cys;
A19 представляет собой Gly;
A20 представляет собой Asp;
A21 представляет собой Arg;
A22 представляет собой Gly;
A23 представляет собой Phe;
A24 представляет собой Tyr;
A25 представляет собой Phe;
A26 представляет собой Asn;
A27 представляет собой Lys, Arg или Pro;
A28 представляет собой Pro или Lys;
A29 представляет собой Thr;
A30 представляет собой Gly;
A31 представляет собой Tyr;
A32 представляет собой Gly;
A33 представляет собой Ser;
A34 представляет собой Ser;
A35 представляет собой Ser;
A36 представляет собой Arg;
A37 представляет собой Arg;
A38 представляет собой Ala;
A39 представляет собой Pro;
A40 представляет собой Gln;
A41 представляет собой Thr;
A42 представляет собой Gly;
A43 представляет собой Ile;
A44 представляет собой Val;
A45 представляет собой Asp;
A46 представляет собой Glu;
A47 представляет собой Cys, β-Me-Cys;
A48 представляет собой Cys;
A49 представляет собой Phe, Arg, Leu или Thr;
A50 представляет собой Arg или Ser;
A51 представляет собой Ser или Thr;
A52 представляет собой Cys или β-Me-Cys;
A53 представляет собой Asp, Arg или Ser;
A54 представляет собой Leu или A6c;
A55 представляет собой Arg или Tyr;
A56 представляет собой Arg или Gln;
A57 представляет собой Leu;
A58 представляет собой Glu;
A59 представляет собой Asn, Leu, Nle, Ile, Arg, A6c, Glu, Trp, Tyr;
A60 представляет собой Tyr или Phe;
A61 представляет собой Cys;
A62 представляет собой Ala или Asn;
A63 представляет собой Pro, D-Pro или делетирована;
A64 представляет собой Leu, D-Leu или делетирована;
A65 представляет собой Lys, D-Lys, Arg или делетирована;
A66 представляет собой Pro, D-Pro или делетирована;
A67 представляет собой Ala, D-Ala или делетирована;
A68 представляет собой Lys, D-Lys, Arg или делетирована;
A69 представляет собой Ser, D-Ser, Aib, Thr или делетирована;
A70 представляет собой Ala, D-Ala или делетирована; и
A71 представляет собой Glu, Lys, Ser или делетирована;
R1 представляет собой OH или NH2;
при условии, что боковые цепи каждой пары остатков A6 и A48, A47 и A52 и A18 и A61 образуют дисульфидную связь; и
также при условии, что, когда A59 представляет собой Leu, Ile или Nle, аналог содержит по меньшей мере одну дополнительную замену или вставку аминокислоты согласно Формуле I;
или его фармацевтически приемлемая соль.
в которой:
A-1 представляет собой Ser или делетирована;
A1 представляет собой Gly или делетирована;
A2 представляет собой Pro или делетирована;
A3 представляет собой Glu или делетирована;
A4 представляет собой Thr;
A5 представляет собой Leu;
A6 представляет собой Cys;
A7 представляет собой Gly;
A8 представляет собой Ala;
A9 представляет собой Glu;
A10 представляет собой Leu;
A11 представляет собой Val;
A12 представляет собой Asp;
A13 представляет собой Ala;
A14 представляет собой Leu;
A15 представляет собой Gln;
A16 представляет собой Phe;
A17 представляет собой Val;
A18 представляет собой Cys;
A19 представляет собой Gly;
A20 представляет собой Asp;
A21 представляет собой Arg;
A22 представляет собой Gly;
A23 представляет собой Phe;
A24 представляет собой Tyr;
A25 представляет собой Phe;
A26 представляет собой Asn;
A27 представляет собой Lys, Arg или Pro;
A28 представляет собой Pro или Lys;
A29 представляет собой Thr;
A30 представляет собой Gly;
A31 представляет собой Tyr;
A32 представляет собой Gly;
A33 представляет собой Ser;
A34 представляет собой Ser;
A35 представляет собой Ser;
A36 представляет собой Arg;
A37 представляет собой Arg;
A38 представляет собой Ala;
A39 представляет собой Pro;
A40 представляет собой Gln;
A41 представляет собой Thr;
A42 представляет собой Gly;
A43 представляет собой Ile;
A44 представляет собой Val;
A45 представляет собой Asp;
A46 представляет собой Glu;
A47 представляет собой Cys, β-Me-Cys;
A48 представляет собой Cys;
A49 представляет собой Phe, Arg, Leu или Thr;
A50 представляет собой Arg или Ser;
A51 представляет собой Ser или Thr;
A52 представляет собой Cys или β-Me-Cys;
A53 представляет собой Asp, Arg или Ser;
A54 представляет собой Leu или A6c;
A55 представляет собой Arg или Tyr;
A56 представляет собой Arg или Gln;
A57 представляет собой Leu;
A58 представляет собой Glu;
A59 представляет собой Asn, Leu, Nle, Ile, Arg, A6c, Glu, Trp, Tyr;
A60 представляет собой Tyr или Phe;
A61 представляет собой Cys;
A62 представляет собой Ala или Asn;
A63 представляет собой Pro, D-Pro или делетирована;
A64 представляет собой Leu, D-Leu или делетирована;
A65 представляет собой Lys, D-Lys, Arg или делетирована;
A66 представляет собой Pro, D-Pro или делетирована;
A67 представляет собой Ala, D-Ala или делетирована;
A68 представляет собой Lys, D-Lys, Arg или делетирована;
A69 представляет собой Ser, D-Ser, Aib, Thr или делетирована;
A70 представляет собой Ala, D-Ala или делетирована; и
A71 представляет собой Glu, Lys, Ser или делетирована;
R1 представляет собой OH или NH2;
при условии, что боковые цепи каждой пары остатков A6 и A48, A47 и A52 и A18 и A61 образуют дисульфидную связь; и
также при условии, что, когда A59 представляет собой Leu, Ile или Nle, аналог содержит по меньшей мере одну дополнительную замену или вставку аминокислоты согласно Формуле I;
или его фармацевтически приемлемая соль.
2. Аналог-агонист IGF-1 по п.1, где указанный аналог представляет собой:
(Asn59)hIGF-1(1-70)-ОН; (SEQ ID NO: 1)
(Asn59)hIGF-1(1-62)-OH; (SEQ ID NO: 2)
(Asn59)hIGF-1(4-70)-OH; (SEQ ID NO: 3)
(Pro27, Lys28, Asn59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 4)
(Pro27, Lys28, Asn59)hIGF-1(1-62)-OH; (SEQ ID NO: 5)
(Ser53, Asn59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 6)
(Ser-1-Gly1, Asn59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 7)
(Tyr55, Asn59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 9)
(Thr49, Asn59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 10)
(Asn59,62)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 11)
(Asn59, Phe60)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 12)
(Ser50, Asn59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 13)
(Gln56, Asn59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 14)
(Asn59, D-Pro63)hIGF-1(1-70)-OH;
(Asn59, D-Leu64)hIGF-1(1-70)-OH;
(Asn59, D-Lys65)hIGF-1(1-70)-OH;
(Asn59, D-Pro66)hIGF-1(1-70)-OH;
(Asn59, D-Ala67)hIGF-1(1-70)-OH;
(Asn59, D-Lys68)hIGF-1(1-70)-OH;
(Asn59, D-Ser69)hIGF-1(1-70)-OH;
(Asn59, D-Ala70)hIGF-1(1-70)-OH;
(Arg27,65,68, Leu59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 15)
(Leu59, Arg65, 68)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 16)
(Leu49, 59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 17)
(β-Me-Cys52, Leu59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 18)
(β-Me-Cys47, Leu59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 19)
(Leu59, Glu71)hIGF-1(1-71)-OH; (SEQ ID NO: 20)
(Leu59, Lys71)hIGF-1(1-71)-OH; (SEQ ID NO: 22)
(Leu59, Ser71)hIGF-1(1-71)-OH; (SEQ ID NO: 23)
(Leu59, Thr69)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 24)
(Thr51, Leu59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 25)
(Nle59, Aib69)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 27)
(A6c54, Nle59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 34)
(Arg53, Ile59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 35)
(Arg49, Ile59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 36)
(A6c59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 39)
(Trp59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 41)
(Tyr59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 43)
(Glu59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 44) или
(Arg59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 46)
или его фармацевтически приемлемая соль.
(Asn59)hIGF-1(1-70)-ОН; (SEQ ID NO: 1)
(Asn59)hIGF-1(1-62)-OH; (SEQ ID NO: 2)
(Asn59)hIGF-1(4-70)-OH; (SEQ ID NO: 3)
(Pro27, Lys28, Asn59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 4)
(Pro27, Lys28, Asn59)hIGF-1(1-62)-OH; (SEQ ID NO: 5)
(Ser53, Asn59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 6)
(Ser-1-Gly1, Asn59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 7)
(Tyr55, Asn59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 9)
(Thr49, Asn59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 10)
(Asn59,62)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 11)
(Asn59, Phe60)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 12)
(Ser50, Asn59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 13)
(Gln56, Asn59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 14)
(Asn59, D-Pro63)hIGF-1(1-70)-OH;
(Asn59, D-Leu64)hIGF-1(1-70)-OH;
(Asn59, D-Lys65)hIGF-1(1-70)-OH;
(Asn59, D-Pro66)hIGF-1(1-70)-OH;
(Asn59, D-Ala67)hIGF-1(1-70)-OH;
(Asn59, D-Lys68)hIGF-1(1-70)-OH;
(Asn59, D-Ser69)hIGF-1(1-70)-OH;
(Asn59, D-Ala70)hIGF-1(1-70)-OH;
(Arg27,65,68, Leu59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 15)
(Leu59, Arg65, 68)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 16)
(Leu49, 59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 17)
(β-Me-Cys52, Leu59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 18)
(β-Me-Cys47, Leu59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 19)
(Leu59, Glu71)hIGF-1(1-71)-OH; (SEQ ID NO: 20)
(Leu59, Lys71)hIGF-1(1-71)-OH; (SEQ ID NO: 22)
(Leu59, Ser71)hIGF-1(1-71)-OH; (SEQ ID NO: 23)
(Leu59, Thr69)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 24)
(Thr51, Leu59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 25)
(Nle59, Aib69)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 27)
(A6c54, Nle59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 34)
(Arg53, Ile59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 35)
(Arg49, Ile59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 36)
(A6c59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 39)
(Trp59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 41)
(Tyr59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 43)
(Glu59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 44) или
(Arg59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 46)
или его фармацевтически приемлемая соль.
3. Аналог-агонист IGF-1 по п.1, в котором А59 представляет собой Asn; или его фармацевтически приемлемая соль.
4. Аналог-агонист IGF-1 по п.3, где указанный аналог представляет собой:
(Asn59)hIGF-1(1-70)-ОН; (SEQ ID NO: 1)
(Asn59)hIGF-1(1-62)-ОН; (SEQ ID NO: 2)
(Asn59)hIGF-1(4-70)-OH; (SEQ ID NO: 3)
(Pro27, Lys28, Asn59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 4)
(Pro27, Lys28, Asn59)hIGF-1(1-62)-OH; (SEQ ID NO: 5)
(Ser53, Asn59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 6)
(Ser-1-Gly1, Asn59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 7)
(Tyr55, Asn59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 9)
(Thr49, Asn59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 10)
(Asn59, 62)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 11)
(Asn59, Phe60)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 12)
(Ser50, Asn59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:13)
(Gln56, Asn59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:14)
(Asn59, D-Pro63)hIGF-1(1-70)-OH;
(Asn59, D-Leu64)hIGF-1(1-70)-OH;
(Asn59, D-Lys65)hIGF-1(1-70)-OH;
(Asn59, D-Pro66)hIGF-1(1-70)-OH;
(Asn59, D-Ala67)hIGF-1(1-70)-OH;
(Asn59, D-Lys68)hIGF-1(1-70)-OH;
(Asn59, D-Ser69)hIGF-1(1-70)-ОН; или
(Asn59, D-Ala70)hIGF-1(1-70)-OH;
или его фармацевтически приемлемая соль.
(Asn59)hIGF-1(1-70)-ОН; (SEQ ID NO: 1)
(Asn59)hIGF-1(1-62)-ОН; (SEQ ID NO: 2)
(Asn59)hIGF-1(4-70)-OH; (SEQ ID NO: 3)
(Pro27, Lys28, Asn59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 4)
(Pro27, Lys28, Asn59)hIGF-1(1-62)-OH; (SEQ ID NO: 5)
(Ser53, Asn59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 6)
(Ser-1-Gly1, Asn59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 7)
(Tyr55, Asn59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 9)
(Thr49, Asn59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 10)
(Asn59, 62)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 11)
(Asn59, Phe60)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 12)
(Ser50, Asn59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:13)
(Gln56, Asn59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO:14)
(Asn59, D-Pro63)hIGF-1(1-70)-OH;
(Asn59, D-Leu64)hIGF-1(1-70)-OH;
(Asn59, D-Lys65)hIGF-1(1-70)-OH;
(Asn59, D-Pro66)hIGF-1(1-70)-OH;
(Asn59, D-Ala67)hIGF-1(1-70)-OH;
(Asn59, D-Lys68)hIGF-1(1-70)-OH;
(Asn59, D-Ser69)hIGF-1(1-70)-ОН; или
(Asn59, D-Ala70)hIGF-1(1-70)-OH;
или его фармацевтически приемлемая соль.
5. Аналог-агонист IGF-1 по п.1, в котором А59 представляет собой Leu; или его фармацевтически приемлемая соль.
6. Аналог-агонист IGF-1 по п.5, в котором указанная по меньшей мере одна дополнительная замена или вставка аминокислоты выбрана из группы, состоящей из Arg27, Arg65, Arg68, Leu49, β-Me-Cys47, β-Me-Cys52, Thr51, Thr69, Glu71, Lys71 и Ser71; или его фармацевтически приемлемая соль.
7. Аналог-агонист IGF-1 по п.5 или 6, где указанный аналог представляет собой:
(Arg27, 65, 68, Leu59)hIGF-1(1-70)-ОН; (SEQ ID NO: 15)
(Leu59, Arg65, 68)hIGF-1(1-70)-ОН; (SEQ ID NO: 16)
(Leu49, 59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 17)
(β-Me-Cys52, Leu59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 18)
(β-Me-Cys47, Leu59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 19)
(Leu59, Glu71)hIGF-1(1-71)-OH; (SEQ ID NO: 20)
(Leu59, Lys71)hIGF-1(1-71)-OH; (SEQ ID NO: 22)
(Leu59, Ser71)hIGF-1(1-71)-OH; (SEQ ID NO: 23)
(Leu59, Thr69)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 24) или
(Thr51, Leu59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 25)
или его фармацевтически приемлемая соль.
(Arg27, 65, 68, Leu59)hIGF-1(1-70)-ОН; (SEQ ID NO: 15)
(Leu59, Arg65, 68)hIGF-1(1-70)-ОН; (SEQ ID NO: 16)
(Leu49, 59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 17)
(β-Me-Cys52, Leu59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 18)
(β-Me-Cys47, Leu59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 19)
(Leu59, Glu71)hIGF-1(1-71)-OH; (SEQ ID NO: 20)
(Leu59, Lys71)hIGF-1(1-71)-OH; (SEQ ID NO: 22)
(Leu59, Ser71)hIGF-1(1-71)-OH; (SEQ ID NO: 23)
(Leu59, Thr69)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 24) или
(Thr51, Leu59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 25)
или его фармацевтически приемлемая соль.
8. Аналог-агонист IGF-1 по п.1, в котором А59 представляет собой Nle; или его фармацевтически приемлемая соль.
9. Аналог-агонист IGF-1 по п.8, в котором указанная по меньшей мере одна дополнительная замена аминокислоты представляет собой Aib69 или A6c54; или его фармацевтически приемлемая соль.
10. Аналог-агонист IGF-1 по п.8 или 9, где указанный аналог представляет собой:
(Nle59, Aib69)hIGF-1(1-70)-ОН; (SEQ ID NO: 27) или
(A6c54, Nle59)hIGF-1(1-70)-ОН; (SEQ ID NO:34)
или его фармацевтически приемлемая соль.
(Nle59, Aib69)hIGF-1(1-70)-ОН; (SEQ ID NO: 27) или
(A6c54, Nle59)hIGF-1(1-70)-ОН; (SEQ ID NO:34)
или его фармацевтически приемлемая соль.
11. Аналог-агонист IGF-1 по п.1, где А59 представляет собой Ile; или его фармацевтически приемлемая соль.
12. Аналог-агонист IGF-1 по п.11, в котором указанная по меньшей мере еще одна замена аминокислоты представляет собой Arg49 или Arg53; или его фармацевтически приемлемая соль.
13. Аналог-агонист IGF-1 по п.11 или 12, где указанный аналог представляет собой:
(Arg53, Ile59)hIGF-1(1-70)-ОН; (SEQ ID NO: 35) или
(Arg49, Ile59)hIGF-1(1-70)-ОН; (SEQ ID NO:36)
или его фармацевтически приемлемая соль.
(Arg53, Ile59)hIGF-1(1-70)-ОН; (SEQ ID NO: 35) или
(Arg49, Ile59)hIGF-1(1-70)-ОН; (SEQ ID NO:36)
или его фармацевтически приемлемая соль.
14. Аналог-агонист IGF-1 по п.1, в котором А59 представляет собой Arg, A6c, Glu, Trp или Tyr; или его фармацевтически приемлемая соль.
15. Аналог-агонист IGF-1 по п.14, где указанный аналог представляет собой:
(A6c59)hIGF-1(1-70)-ОН; (SEQ ID NO: 39)
(Trp59)hIGF-1(1-70)-ОН; (SEQ ID NO: 41)
(Tyr59)hIGF-1(1-70)-ОН; (SEQ ID NO: 43)
(Glu59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 44) или
(Arg59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 46)
или его фармацевтически приемлемая соль.
(A6c59)hIGF-1(1-70)-ОН; (SEQ ID NO: 39)
(Trp59)hIGF-1(1-70)-ОН; (SEQ ID NO: 41)
(Tyr59)hIGF-1(1-70)-ОН; (SEQ ID NO: 43)
(Glu59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 44) или
(Arg59)hIGF-1(1-70)-OH; (SEQ ID NO: 46)
или его фармацевтически приемлемая соль.
16. Фармацевтическая композиция для применения при лечении IGF-1-опосредованных состояний или заболеваний, содержащая эффективное количество аналога-агониста по любому из пп.1-15, где указанное состояние или заболевание выбраны из группы, состоящей из низкорослости, ожирения, потери массы, кахексии, анорексии, нейродегенеративных нарушений, связанных с фиброзом состояний, нарушений хрящевой ткани, костных заболеваний, воспалительных нарушений, кишечных нарушений, резистентности к инсулину, диабета, диабетического кетоацидоза, синдрома Рабсона-Менденхолла, ретинопатии, акромегалии, фиброзно-мышечной гиперплазии и сердечных нарушений; и где указанное лечение включает стадию введения нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества указанного аналога или фармацевтической композиции.
17. Способ лечения низкорослости, включающий стадию введения субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного аналога-агониста по любому из пп.1-15 или фармацевтической композиции по п.16.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US27154909P | 2009-07-22 | 2009-07-22 | |
US61/271,549 | 2009-07-22 | ||
PCT/US2010/002062 WO2011011072A2 (en) | 2009-07-22 | 2010-07-22 | Analogues of insulin-like growth factor-1 (igf-1) having amino acid substitution at position 59 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2012106302A RU2012106302A (ru) | 2013-08-27 |
RU2511577C2 true RU2511577C2 (ru) | 2014-04-10 |
Family
ID=43499582
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2012106302/10A RU2511577C2 (ru) | 2009-07-22 | 2010-07-22 | Аналоги инсулиноподобного фактора роста-1 (igf-1), содержащие аминокислотную замену в положении 59 |
Country Status (14)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US8759299B2 (ru) |
EP (1) | EP2456788B1 (ru) |
JP (2) | JP5571186B2 (ru) |
KR (1) | KR101417872B1 (ru) |
CN (1) | CN102510757B (ru) |
AU (1) | AU2010275010B2 (ru) |
BR (1) | BR112012001363A2 (ru) |
CA (1) | CA2768621C (ru) |
ES (1) | ES2562260T3 (ru) |
HK (1) | HK1170748A1 (ru) |
MX (1) | MX2012000757A (ru) |
RU (1) | RU2511577C2 (ru) |
UA (1) | UA103104C2 (ru) |
WO (1) | WO2011011072A2 (ru) |
Families Citing this family (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102510757B (zh) * | 2009-07-22 | 2015-03-18 | 益普生制药股份有限公司 | 在第59位置处具有氨基酸替换的胰岛素样生长因子-1(igf-1)类似物 |
US8691771B2 (en) | 2010-05-21 | 2014-04-08 | Merrimack Pharmaceuticals, Inc. | Bi-specific fusion proteins for tissue repair |
CN104114575B (zh) * | 2011-12-15 | 2019-04-09 | 爱德迪安(北京)生物技术有限公司 | 具有降血糖作用的化合物、组合物及其用途 |
EP3865147A1 (en) | 2015-10-02 | 2021-08-18 | Silver Creek Pharmaceuticals, Inc. | Bi-specific therapeutic proteins for tissue repair |
JP7248952B2 (ja) | 2019-03-22 | 2023-03-30 | 株式会社ジャノメ | 電動ミシン |
WO2023139250A1 (en) | 2022-01-24 | 2023-07-27 | Oak Hill Bio Limited | Lot release assays for igf‐1/igfbp complexes |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1985000831A1 (en) * | 1983-08-10 | 1985-02-28 | Amgen | Microbial expression of insulin-like growth factor |
US4745179A (en) * | 1984-04-02 | 1988-05-17 | Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. | 59 Valine insulin-like growth factor I and process for production thereof |
US4888286A (en) * | 1984-02-06 | 1989-12-19 | Creative Biomolecules, Inc. | Production of gene and protein analogs through synthetic gene design using double stranded synthetic oligonucleotides |
RU95107663A (ru) * | 1992-08-28 | 1996-11-20 | Мерк Энд Ко. | Бензо-конденсированные лактамы, ускоряющие высвобождение соматотропного гормона, способы их получения, способы лечения, композиции |
US20030191065A1 (en) * | 1999-01-06 | 2003-10-09 | Yves Dubaquie | Modified proinsulin variants and composition containing same |
WO2005087797A1 (en) * | 2004-03-09 | 2005-09-22 | Microbia, Inc. | Methods and compositions for the treatment of gastrointestinal disorders |
Family Cites Families (25)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS60501989A (ja) * | 1983-08-10 | 1985-11-21 | アムジエン | インシュリン様成長因子の微生物発現 |
GB8408473D0 (en) * | 1984-04-02 | 1984-05-10 | Fujisawa Pharmaceutical Co | 59 val-insulin-like growth factor i |
US5242811A (en) * | 1985-03-26 | 1993-09-07 | Biogen, Inc. | Production of human somatomedin C |
US6310040B1 (en) | 1991-11-08 | 2001-10-30 | Cephalon, Inc. | Treating retinal neuronal disorders by the application of insulin-like growth factors and analogs |
US5672659A (en) | 1993-01-06 | 1997-09-30 | Kinerton Limited | Ionic molecular conjugates of biodegradable polyesters and bioactive polypeptides |
US5824642A (en) | 1994-04-07 | 1998-10-20 | Genentech, Inc. | Treatment of partial growth hormone insensitivity syndrome |
US5595760A (en) | 1994-09-02 | 1997-01-21 | Delab | Sustained release of peptides from pharmaceutical compositions |
US5665702A (en) | 1995-06-06 | 1997-09-09 | Biomeasure Incorporated | Ionic molecular conjugates of N-acylated derivatives of poly(2-amino-2-deoxy-D-glucose) and polypeptides |
US5916883A (en) | 1996-11-01 | 1999-06-29 | Poly-Med, Inc. | Acylated cyclodextrin derivatives |
CN1289256A (zh) | 1998-01-29 | 2001-03-28 | 波利曼德有限公司 | 可吸收的微颗粒 |
WO2000004916A1 (en) | 1998-07-23 | 2000-02-03 | Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques Sas | Encapsulation of water soluble peptides |
AR020650A1 (es) | 1998-08-10 | 2002-05-22 | Poly Med Inc | Polimeros fosforilados y conjugados de los mismos |
EP1144013B1 (en) | 1998-11-02 | 2007-03-21 | Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques S.A.S. | Lactone bearing absorbable polymers |
DE60016560T2 (de) | 1999-01-06 | 2005-12-15 | Genentech, Inc., South San Francisco | Mutierte variante des insulin-ähnlichen wachstumsfaktor-i (igf-i) |
US20030100505A1 (en) | 1999-11-01 | 2003-05-29 | Chiron Corporation | Compositions and methods of therapy for IGF-I-responsive conditions |
NZ548359A (en) * | 2001-02-09 | 2007-11-30 | Genentech Inc | Method of identifying indirect agonists of insulin-like growth factor-1 |
KR20060003862A (ko) | 2003-03-14 | 2006-01-11 | 네오스 테크놀로지스, 인크. | 수용성분기폴리머 및 그 접합체 |
AU2004238364A1 (en) | 2003-05-12 | 2004-11-25 | Affymax, Inc. | Spacer moiety for poly(ethylene glycol) -modified peptides |
WO2005020898A2 (en) | 2003-08-21 | 2005-03-10 | Tercica, Inc. | Methods of reducing visceral fat by increasing levels of insulin-like growth factor-i (igf-i) |
ATE536186T1 (de) | 2003-09-12 | 2011-12-15 | Tercica Inc | Verfahren zur behandlung von igf-1 (insulin-like growth factor 1)-mangel |
EP1674113A1 (en) | 2004-12-22 | 2006-06-28 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Conjugates of insulin-like growth factor-1 (IGF-1) and poly(ethylene glycol) |
JP2008545752A (ja) | 2005-06-02 | 2008-12-18 | テルシカ インコーポレーティッド | 成長障害を処置するための方法 |
CN101395179B (zh) | 2006-03-06 | 2013-01-02 | 凯尔杰有限公司 | 具有胰岛素样生长因子-i活性的肽及其用途 |
EP2032154A2 (en) * | 2006-06-09 | 2009-03-11 | Novartis Ag | Stabilized insulin-like growth factor polypeptides |
CN102510757B (zh) * | 2009-07-22 | 2015-03-18 | 益普生制药股份有限公司 | 在第59位置处具有氨基酸替换的胰岛素样生长因子-1(igf-1)类似物 |
-
2010
- 2010-07-22 CN CN201080041981.4A patent/CN102510757B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2010-07-22 UA UAA201202007A patent/UA103104C2/ru unknown
- 2010-07-22 ES ES10773526.8T patent/ES2562260T3/es active Active
- 2010-07-22 BR BR112012001363A patent/BR112012001363A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2010-07-22 WO PCT/US2010/002062 patent/WO2011011072A2/en active Application Filing
- 2010-07-22 AU AU2010275010A patent/AU2010275010B2/en not_active Ceased
- 2010-07-22 US US13/386,220 patent/US8759299B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2010-07-22 CA CA2768621A patent/CA2768621C/en not_active Expired - Fee Related
- 2010-07-22 KR KR1020127004456A patent/KR101417872B1/ko not_active IP Right Cessation
- 2010-07-22 JP JP2012521623A patent/JP5571186B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2010-07-22 EP EP10773526.8A patent/EP2456788B1/en not_active Not-in-force
- 2010-07-22 RU RU2012106302/10A patent/RU2511577C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2010-07-22 MX MX2012000757A patent/MX2012000757A/es active IP Right Grant
-
2012
- 2012-11-13 HK HK12111503.3A patent/HK1170748A1/zh not_active IP Right Cessation
-
2014
- 2014-05-02 JP JP2014095141A patent/JP2014169309A/ja active Pending
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1985000831A1 (en) * | 1983-08-10 | 1985-02-28 | Amgen | Microbial expression of insulin-like growth factor |
US4888286A (en) * | 1984-02-06 | 1989-12-19 | Creative Biomolecules, Inc. | Production of gene and protein analogs through synthetic gene design using double stranded synthetic oligonucleotides |
US4745179A (en) * | 1984-04-02 | 1988-05-17 | Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. | 59 Valine insulin-like growth factor I and process for production thereof |
RU95107663A (ru) * | 1992-08-28 | 1996-11-20 | Мерк Энд Ко. | Бензо-конденсированные лактамы, ускоряющие высвобождение соматотропного гормона, способы их получения, способы лечения, композиции |
US20030191065A1 (en) * | 1999-01-06 | 2003-10-09 | Yves Dubaquie | Modified proinsulin variants and composition containing same |
WO2005087797A1 (en) * | 2004-03-09 | 2005-09-22 | Microbia, Inc. | Methods and compositions for the treatment of gastrointestinal disorders |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
RN 97199-05-8. * |
RN 97199-10-5. БД STN on the web, Chemical abstract (CA), AN 103: 49152, Заявка N * |
БД STN on the web, Chemical abstract (CA), AN 113: 53729, Заявка N * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
MX2012000757A (es) | 2012-08-03 |
EP2456788A4 (en) | 2012-12-05 |
HK1170748A1 (zh) | 2013-03-08 |
JP2014169309A (ja) | 2014-09-18 |
AU2010275010A1 (en) | 2012-02-09 |
JP2012533622A (ja) | 2012-12-27 |
ES2562260T3 (es) | 2016-03-03 |
CA2768621A1 (en) | 2011-01-27 |
JP5571186B2 (ja) | 2014-08-13 |
US8759299B2 (en) | 2014-06-24 |
EP2456788A2 (en) | 2012-05-30 |
BR112012001363A2 (pt) | 2016-11-08 |
UA103104C2 (ru) | 2013-09-10 |
WO2011011072A2 (en) | 2011-01-27 |
AU2010275010B2 (en) | 2013-10-24 |
US20120190616A1 (en) | 2012-07-26 |
KR20120093828A (ko) | 2012-08-23 |
RU2012106302A (ru) | 2013-08-27 |
WO2011011072A3 (en) | 2011-04-07 |
KR101417872B1 (ko) | 2014-07-09 |
EP2456788B1 (en) | 2015-12-16 |
CA2768621C (en) | 2016-04-05 |
CN102510757B (zh) | 2015-03-18 |
CN102510757A (zh) | 2012-06-20 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2511577C2 (ru) | Аналоги инсулиноподобного фактора роста-1 (igf-1), содержащие аминокислотную замену в положении 59 | |
JP5361988B2 (ja) | 成長因子−模倣(mimicking)ペプチド及びその用途 | |
JP2001527507A (ja) | 改良された環状crf拮抗剤 | |
IL101452A (en) | Analogs of the factor that releases the growth hormone, their preparation and the pharmaceutical preparations that contain them | |
BRPI0709427A2 (pt) | "construto cìclico, composição farmacêutica e uso de um composto | |
CN112876552A (zh) | 长效肾上腺髓质素衍生物 | |
WO2007049904A1 (en) | Peptides exhibiting efficacies of improvement in skin conditions or treatment of periodental diseases | |
KR100629013B1 (ko) | Igf-ⅰ 및 -ⅱ를 억제하는 gh-rh의 길항 유사체 | |
RU2335506C2 (ru) | Пептидные аналоги gh-rh с антагонистическим действием, способ снижения уровня gh, способ снижения уровня igf-i и igf-ii, применение для ингибирования роста раковых клеток, фармакологически приемлемая композиция (варианты) | |
JPH0786120B2 (ja) | ポリペプチド | |
EP0283956B1 (en) | Fluorine containing atrial natriuretic peptides | |
JPH1053599A (ja) | 胃腸運動刺激活性を示す環状モチリン−様ポリペプチド | |
CN113072617A (zh) | 一种多肽化合物及其应用 | |
WO2011011071A2 (en) | Analogues of insulin-like growth factor-1 (igf-1) | |
WO2011011073A1 (en) | Site-specific pegylated or site-specific lipidated igf-1 and analogues of igf-1 | |
CN110678550A (zh) | 长效肾上腺髓质素衍生物 | |
US20170087205A1 (en) | Replacement Therapy for Natriuretic Peptide Deficiencies | |
JPH09221500A (ja) | カルシトニン類似体 | |
JPH08505393A (ja) | 誘導体化カルシトニン | |
HU201566B (en) | Process for producing new analoguse of activatin factor of human growth hormon and pharmaceutical and veterinair compositions containing them |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20200723 |