RU2318500C2 - Способ воздействия на организм путем адресной доставки биологически активных веществ в митохондрии, фармацевтическая композиция для его осуществления и соединение, применяемое для этой цели - Google Patents
Способ воздействия на организм путем адресной доставки биологически активных веществ в митохондрии, фармацевтическая композиция для его осуществления и соединение, применяемое для этой цели Download PDFInfo
- Publication number
- RU2318500C2 RU2318500C2 RU2005132217/15A RU2005132217A RU2318500C2 RU 2318500 C2 RU2318500 C2 RU 2318500C2 RU 2005132217/15 A RU2005132217/15 A RU 2005132217/15A RU 2005132217 A RU2005132217 A RU 2005132217A RU 2318500 C2 RU2318500 C2 RU 2318500C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- mitochondria
- cells
- compound
- skq1
- cell
- Prior art date
Links
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 90
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 title claims abstract description 82
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 25
- 239000013543 active substance Substances 0.000 title abstract description 9
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title abstract description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 39
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 19
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims abstract description 16
- -1 hydrogen ions Chemical class 0.000 claims abstract description 14
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 claims abstract description 14
- 239000012636 effector Substances 0.000 claims abstract description 11
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 10
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 claims abstract description 4
- 229940088623 biologically active substance Drugs 0.000 claims abstract description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 119
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 claims description 81
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 claims description 81
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 claims description 47
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 claims description 42
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 23
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 claims description 23
- 239000003504 photosensitizing agent Substances 0.000 claims description 22
- 239000003642 reactive oxygen metabolite Substances 0.000 claims description 22
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 21
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 18
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims description 18
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 16
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 claims description 15
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 claims description 15
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 14
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N d-alpha-tocopherol Natural products OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 14
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 14
- 239000000411 inducer Substances 0.000 claims description 13
- 230000003244 pro-oxidative effect Effects 0.000 claims description 13
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 12
- JSQFXMIMWAKJQJ-UHFFFAOYSA-N [9-(2-carboxyphenyl)-6-(ethylamino)xanthen-3-ylidene]-diethylazanium;chloride Chemical group [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(NCC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O JSQFXMIMWAKJQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 claims description 11
- 230000035806 respiratory chain Effects 0.000 claims description 10
- 108010063104 Apoptosis Regulatory Proteins Proteins 0.000 claims description 9
- 102000010565 Apoptosis Regulatory Proteins Human genes 0.000 claims description 9
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 claims description 9
- 238000011161 development Methods 0.000 claims description 9
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 claims description 9
- 230000025608 mitochondrion localization Effects 0.000 claims description 9
- 238000002428 photodynamic therapy Methods 0.000 claims description 9
- RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-O triphenylphosphanium Chemical group C1=CC=CC=C1[PH+](C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-O 0.000 claims description 9
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims description 8
- 230000035899 viability Effects 0.000 claims description 8
- 230000032683 aging Effects 0.000 claims description 7
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 claims description 7
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 7
- DYEFUKCXAQOFHX-UHFFFAOYSA-N Ebselen Chemical compound [se]1C2=CC=CC=C2C(=O)N1C1=CC=CC=C1 DYEFUKCXAQOFHX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 102000019197 Superoxide Dismutase Human genes 0.000 claims description 6
- 108010012715 Superoxide dismutase Proteins 0.000 claims description 6
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 claims description 6
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 6
- 229950010033 ebselen Drugs 0.000 claims description 6
- IEQIEDJGQAUEQZ-UHFFFAOYSA-N phthalocyanine Chemical group N1C(N=C2C3=CC=CC=C3C(N=C3C4=CC=CC=C4C(=N4)N3)=N2)=C(C=CC=C2)C2=C1N=C1C2=CC=CC=C2C4=N1 IEQIEDJGQAUEQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N α-tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N 0.000 claims description 6
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims description 5
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 claims description 5
- 230000006882 induction of apoptosis Effects 0.000 claims description 5
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims description 5
- BQVCCPGCDUSGOE-UHFFFAOYSA-N phenylarsine oxide Chemical group O=[As]C1=CC=CC=C1 BQVCCPGCDUSGOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- NPCOQXAVBJJZBQ-UHFFFAOYSA-N reduced coenzyme Q9 Natural products COC1=C(O)C(C)=C(CC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C)C(O)=C1OC NPCOQXAVBJJZBQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- HPLNQCPCUACXLM-PGUFJCEWSA-N ABT-737 Chemical compound C([C@@H](CCN(C)C)NC=1C(=CC(=CC=1)S(=O)(=O)NC(=O)C=1C=CC(=CC=1)N1CCN(CC=2C(=CC=CC=2)C=2C=CC(Cl)=CC=2)CC1)[N+]([O-])=O)SC1=CC=CC=C1 HPLNQCPCUACXLM-PGUFJCEWSA-N 0.000 claims description 4
- ACTIUHUUMQJHFO-UHFFFAOYSA-N Coenzym Q10 Natural products COC1=C(OC)C(=O)C(CC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C)=C(C)C1=O ACTIUHUUMQJHFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 4
- QIGBRXMKCJKVMJ-UHFFFAOYSA-N Hydroquinone Chemical compound OC1=CC=C(O)C=C1 QIGBRXMKCJKVMJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 230000002424 anti-apoptotic effect Effects 0.000 claims description 4
- 235000017471 coenzyme Q10 Nutrition 0.000 claims description 4
- ACTIUHUUMQJHFO-UPTCCGCDSA-N coenzyme Q10 Chemical compound COC1=C(OC)C(=O)C(C\C=C(/C)CC\C=C(/C)CC\C=C(/C)CC\C=C(/C)CC\C=C(/C)CC\C=C(/C)CC\C=C(/C)CC\C=C(/C)CC\C=C(/C)CCC=C(C)C)=C(C)C1=O ACTIUHUUMQJHFO-UPTCCGCDSA-N 0.000 claims description 4
- 125000002704 decyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 4
- 230000003993 interaction Effects 0.000 claims description 4
- 125000001147 pentyl group Chemical group C(CCCC)* 0.000 claims description 4
- 239000012453 solvate Substances 0.000 claims description 4
- 229930003799 tocopherol Natural products 0.000 claims description 4
- 239000011732 tocopherol Substances 0.000 claims description 4
- 235000010384 tocopherol Nutrition 0.000 claims description 4
- 229960001295 tocopherol Drugs 0.000 claims description 4
- 229940035936 ubiquinone Drugs 0.000 claims description 4
- LYPFDBRUNKHDGX-SOGSVHMOSA-N N1C2=CC=C1\C(=C1\C=CC(=N1)\C(=C1\C=C/C(/N1)=C(/C1=N/C(/CC1)=C2/C1=CC(O)=CC=C1)C1=CC(O)=CC=C1)\C1=CC(O)=CC=C1)C1=CC(O)=CC=C1 Chemical compound N1C2=CC=C1\C(=C1\C=CC(=N1)\C(=C1\C=C/C(/N1)=C(/C1=N/C(/CC1)=C2/C1=CC(O)=CC=C1)C1=CC(O)=CC=C1)\C1=CC(O)=CC=C1)C1=CC(O)=CC=C1 LYPFDBRUNKHDGX-SOGSVHMOSA-N 0.000 claims description 3
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 3
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 claims description 3
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 claims description 3
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 claims description 3
- 230000035876 healing Effects 0.000 claims description 3
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims description 3
- FIKAKWIAUPDISJ-UHFFFAOYSA-L paraquat dichloride Chemical group [Cl-].[Cl-].C1=C[N+](C)=CC=C1C1=CC=[N+](C)C=C1 FIKAKWIAUPDISJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- 150000004032 porphyrins Chemical class 0.000 claims description 3
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 3
- 210000001938 protoplast Anatomy 0.000 claims description 3
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 claims description 3
- 229960002197 temoporfin Drugs 0.000 claims description 3
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 claims description 2
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 claims description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 2
- 229940044683 chemotherapy drug Drugs 0.000 claims description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 2
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 claims description 2
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 claims description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims 3
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims 2
- 125000001183 hydrocarbyl group Chemical group 0.000 claims 2
- FKUYMLZIRPABFK-RLAZMVNUSA-N plastoquinone 9 Chemical compound CC(C)=CCC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C(C)=C/CC1=CC(=O)C(C)=C(C)C1=O FKUYMLZIRPABFK-RLAZMVNUSA-N 0.000 claims 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims 2
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 claims 2
- 125000002298 terpene group Chemical group 0.000 claims 2
- ODHXBMXNKOYIBV-UHFFFAOYSA-O triphenylazanium Chemical compound C1=CC=CC=C1[NH+](C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 ODHXBMXNKOYIBV-UHFFFAOYSA-O 0.000 claims 2
- AZQWKYJCGOJGHM-UHFFFAOYSA-N 1,4-benzoquinone Chemical compound O=C1C=CC(=O)C=C1 AZQWKYJCGOJGHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 claims 1
- YJPIGAIKUZMOQA-UHFFFAOYSA-N Melatonin Natural products COC1=CC=C2N(C(C)=O)C=C(CCN)C2=C1 YJPIGAIKUZMOQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 claims 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 claims 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 claims 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 claims 1
- 238000002657 hormone replacement therapy Methods 0.000 claims 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 claims 1
- 229960003987 melatonin Drugs 0.000 claims 1
- DRLFMBDRBRZALE-UHFFFAOYSA-N melatonin Chemical compound COC1=CC=C2NC=C(CCNC(C)=O)C2=C1 DRLFMBDRBRZALE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- ZJTLZYDQJHKRMQ-UHFFFAOYSA-N menadiol Chemical compound C1=CC=CC2=C(O)C(C)=CC(O)=C21 ZJTLZYDQJHKRMQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229940100434 menadiol Drugs 0.000 claims 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims 1
- AICOOMRHRUFYCM-ZRRPKQBOSA-N oxazine, 1 Chemical compound C([C@@H]1[C@H](C(C[C@]2(C)[C@@H]([C@H](C)N(C)C)[C@H](O)C[C@]21C)=O)CC1=CC2)C[C@H]1[C@@]1(C)[C@H]2N=C(C(C)C)OC1 AICOOMRHRUFYCM-ZRRPKQBOSA-N 0.000 claims 1
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 claims 1
- 210000004560 pineal gland Anatomy 0.000 claims 1
- IJBLJLREWPLEPB-IQSNHBBHSA-N plastoquinol-9 Chemical compound CC(C)=CCC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC1=CC(O)=C(C)C(C)=C1O IJBLJLREWPLEPB-IQSNHBBHSA-N 0.000 claims 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 claims 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 claims 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 claims 1
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 claims 1
- IMFACGCPASFAPR-UHFFFAOYSA-O tributylazanium Chemical compound CCCC[NH+](CCCC)CCCC IMFACGCPASFAPR-UHFFFAOYSA-O 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 36
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 21
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 21
- 230000007423 decrease Effects 0.000 abstract description 13
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 12
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 abstract description 12
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 abstract description 12
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 abstract description 8
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 abstract description 8
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 abstract description 6
- 230000002411 adverse Effects 0.000 abstract 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 abstract 1
- GVZFUVXPTPGOQT-UHFFFAOYSA-M mitoq Chemical compound CS([O-])(=O)=O.O=C1C(OC)=C(OC)C(=O)C(CCCCCCCCCC[P+](C=2C=CC=CC=2)(C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC=CC=2)=C1C GVZFUVXPTPGOQT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 41
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 26
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 25
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 21
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 description 16
- AIACLXROWHONEE-UHFFFAOYSA-N 2,3-dimethylcyclohexa-2,5-diene-1,4-dione Chemical compound CC1=C(C)C(=O)C=CC1=O AIACLXROWHONEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 14
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 14
- 208000002177 Cataract Diseases 0.000 description 13
- 210000000695 crystalline len Anatomy 0.000 description 13
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 12
- 238000003782 apoptosis assay Methods 0.000 description 12
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 12
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 12
- 230000005522 programmed cell death Effects 0.000 description 12
- 208000002780 macular degeneration Diseases 0.000 description 11
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 10
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 10
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 10
- IOLCXVTUBQKXJR-UHFFFAOYSA-M potassium bromide Chemical compound [K+].[Br-] IOLCXVTUBQKXJR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 10
- 210000001525 retina Anatomy 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 10
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 10
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 10
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 9
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 8
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 8
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 8
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 8
- 206010028851 Necrosis Diseases 0.000 description 7
- OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M Superoxide Chemical compound [O-][O] OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 7
- BXJGUBZTZWCMEX-UHFFFAOYSA-N 2,3-dimethylbenzene-1,4-diol Chemical compound CC1=C(C)C(O)=CC=C1O BXJGUBZTZWCMEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 6
- 230000009471 action Effects 0.000 description 6
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 6
- 239000013256 coordination polymer Substances 0.000 description 6
- YPHMISFOHDHNIV-FSZOTQKASA-N cycloheximide Chemical compound C1[C@@H](C)C[C@H](C)C(=O)[C@@H]1[C@H](O)CC1CC(=O)NC(=O)C1 YPHMISFOHDHNIV-FSZOTQKASA-N 0.000 description 6
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 6
- 230000034994 death Effects 0.000 description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 6
- SQGYOTSLMSWVJD-UHFFFAOYSA-N silver(1+) nitrate Chemical compound [Ag+].[O-]N(=O)=O SQGYOTSLMSWVJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 6
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102100030497 Cytochrome c Human genes 0.000 description 5
- 108010075031 Cytochromes c Proteins 0.000 description 5
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N Dioxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229930003427 Vitamin E Natural products 0.000 description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 5
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 5
- WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N gamma-tocopherol Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC1CCC2C(C)C(O)C(C)C(C)C2O1 WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 5
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 5
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 5
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 5
- 229960001866 silicon dioxide Drugs 0.000 description 5
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 5
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 5
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 5
- 239000011709 vitamin E Substances 0.000 description 5
- 229940046009 vitamin E Drugs 0.000 description 5
- 235000019165 vitamin E Nutrition 0.000 description 5
- 150000005208 1,4-dihydroxybenzenes Chemical class 0.000 description 4
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 4
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 4
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 4
- 108010026389 Gramicidin Proteins 0.000 description 4
- MJVAVZPDRWSRRC-UHFFFAOYSA-N Menadione Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(C)=CC(=O)C2=C1 MJVAVZPDRWSRRC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 4
- ROOXNKNUYICQNP-UHFFFAOYSA-N ammonium persulfate Chemical compound [NH4+].[NH4+].[O-]S(=O)(=O)OOS([O-])(=O)=O ROOXNKNUYICQNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 4
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 4
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- 229960004905 gramicidin Drugs 0.000 description 4
- ZWCXYZRRTRDGQE-SORVKSEFSA-N gramicidina Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C4=CC=CC=C4NC=3)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C4=CC=CC=C4NC=3)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C4=CC=CC=C4NC=3)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC=O)C(C)C)CC(C)C)C(=O)NCCO)=CNC2=C1 ZWCXYZRRTRDGQE-SORVKSEFSA-N 0.000 description 4
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 4
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 4
- 210000003632 microfilament Anatomy 0.000 description 4
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 description 4
- 230000000149 penetrating effect Effects 0.000 description 4
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 4
- 238000011533 pre-incubation Methods 0.000 description 4
- 230000010410 reperfusion Effects 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 4
- IUDGNRWYNOEIKF-UHFFFAOYSA-N 11-bromo-undecanoic acid Chemical compound OC(=O)CCCCCCCCCCBr IUDGNRWYNOEIKF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 3
- CJTVWCISWNOGQA-UHFFFAOYSA-N 5-(10-bromodecyl)-2,3-dimethylcyclohexa-2,5-diene-1,4-dione Chemical compound CC1=C(C)C(=O)C(CCCCCCCCCCBr)=CC1=O CJTVWCISWNOGQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000006587 Glutathione peroxidase Human genes 0.000 description 3
- 108700016172 Glutathione peroxidases Proteins 0.000 description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 3
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 3
- 241000235015 Yarrowia lipolytica Species 0.000 description 3
- 230000006793 arrhythmia Effects 0.000 description 3
- 206010003119 arrhythmia Diseases 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 210000004351 coronary vessel Anatomy 0.000 description 3
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 3
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 3
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 3
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 3
- 230000001338 necrotic effect Effects 0.000 description 3
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 3
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 3
- 229940121649 protein inhibitor Drugs 0.000 description 3
- 239000012268 protein inhibitor Substances 0.000 description 3
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 3
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 3
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 3
- 229910001961 silver nitrate Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 2
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010025421 Macule Diseases 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241000235648 Pichia Species 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 2
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100033220 Xanthine oxidase Human genes 0.000 description 2
- 108010093894 Xanthine oxidase Proteins 0.000 description 2
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 229910001870 ammonium persulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 2
- FJDQFPXHSGXQBY-UHFFFAOYSA-L caesium carbonate Chemical compound [Cs+].[Cs+].[O-]C([O-])=O FJDQFPXHSGXQBY-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229910000024 caesium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 230000004611 cancer cell death Effects 0.000 description 2
- 206010061592 cardiac fibrillation Diseases 0.000 description 2
- 230000003293 cardioprotective effect Effects 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N chloroform;methanol Chemical compound OC.ClC(Cl)Cl WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940126214 compound 3 Drugs 0.000 description 2
- 230000008828 contractile function Effects 0.000 description 2
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 2
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000000254 damaging effect Effects 0.000 description 2
- DIOQZVSQGTUSAI-UHFFFAOYSA-N decane Chemical compound CCCCCCCCCC DIOQZVSQGTUSAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000005786 degenerative changes Effects 0.000 description 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 2
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 2
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 2
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000002600 fibrillogenic effect Effects 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 2
- FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N hypoxanthine Chemical compound O=C1NC=NC2=C1NC=N2 FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 230000006525 intracellular process Effects 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 description 2
- 210000002311 liver mitochondria Anatomy 0.000 description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 2
- 229910052753 mercury Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- IKEOZQLIVHGQLJ-UHFFFAOYSA-M mitoTracker Red Chemical compound [Cl-].C1=CC(CCl)=CC=C1C(C1=CC=2CCCN3CCCC(C=23)=C1O1)=C2C1=C(CCC1)C3=[N+]1CCCC3=C2 IKEOZQLIVHGQLJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 210000001700 mitochondrial membrane Anatomy 0.000 description 2
- 230000006540 mitochondrial respiration Effects 0.000 description 2
- 230000004660 morphological change Effects 0.000 description 2
- 230000004899 motility Effects 0.000 description 2
- 230000003680 myocardial damage Effects 0.000 description 2
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 2
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 2
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 2
- FKUYMLZIRPABFK-IQSNHBBHSA-N plastoquinone-9 Chemical compound CC(C)=CCC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC1=CC(=O)C(C)=C(C)C1=O FKUYMLZIRPABFK-IQSNHBBHSA-N 0.000 description 2
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 2
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 2
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 2
- XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M propidium iodide Chemical compound [I-].[I-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CCC[N+](C)(CC)CC)=C1C1=CC=CC=C1 XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000006862 quantum yield reaction Methods 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 229940080817 rotenone Drugs 0.000 description 2
- JUVIOZPCNVVQFO-UHFFFAOYSA-N rotenone Natural products O1C2=C3CC(C(C)=C)OC3=CC=C2C(=O)C2C1COC1=C2C=C(OC)C(OC)=C1 JUVIOZPCNVVQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008054 signal transmission Effects 0.000 description 2
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 2
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 2
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 2
- 210000002377 thylakoid Anatomy 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N triphenylphosphine Chemical compound C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 description 2
- 235000012711 vitamin K3 Nutrition 0.000 description 2
- 239000011652 vitamin K3 Substances 0.000 description 2
- 229940041603 vitamin k 3 Drugs 0.000 description 2
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 2
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GKYBHMOTABOUND-UHFFFAOYSA-M 10-(5-methoxy-2-methyl-3,6-dioxocyclohexa-1,4-dien-1-yl)decyl-triphenylphosphanium;bromide Chemical compound [Br-].O=C1C(OC)=CC(=O)C(C)=C1CCCCCCCCCC[P+](C=1C=CC=CC=1)(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 GKYBHMOTABOUND-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- LCPVQAHEFVXVKT-UHFFFAOYSA-N 2-(2,4-difluorophenoxy)pyridin-3-amine Chemical compound NC1=CC=CN=C1OC1=CC=C(F)C=C1F LCPVQAHEFVXVKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010009924 Aconitate hydratase Proteins 0.000 description 1
- ITPDYQOUSLNIHG-UHFFFAOYSA-N Amiodarone hydrochloride Chemical compound [Cl-].CCCCC=1OC2=CC=CC=C2C=1C(=O)C1=CC(I)=C(OCC[NH+](CC)CC)C(I)=C1 ITPDYQOUSLNIHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000046053 Betta Species 0.000 description 1
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 1
- 201000004569 Blindness Diseases 0.000 description 1
- KSFOVUSSGSKXFI-GAQDCDSVSA-N CC1=C/2NC(\C=C3/N=C(/C=C4\N\C(=C/C5=N/C(=C\2)/C(C=C)=C5C)C(C=C)=C4C)C(C)=C3CCC(O)=O)=C1CCC(O)=O Chemical compound CC1=C/2NC(\C=C3/N=C(/C=C4\N\C(=C/C5=N/C(=C\2)/C(C=C)=C5C)C(C=C)=C4C)C(C)=C3CCC(O)=O)=C1CCC(O)=O KSFOVUSSGSKXFI-GAQDCDSVSA-N 0.000 description 1
- UOPKBTHEMVXHNR-GPKTZOODSA-O CCNc(cc1O2)c(C)cc1C(c(cccc1)c1C(OCCCCCCCCCCC(C(C(C)=C1C)=O)=CC1=O)=O)=C(C=C1C)C2=C/C1=[NH+]/CC Chemical compound CCNc(cc1O2)c(C)cc1C(c(cccc1)c1C(OCCCCCCCCCCC(C(C(C)=C1C)=O)=CC1=O)=O)=C(C=C1C)C2=C/C1=[NH+]/CC UOPKBTHEMVXHNR-GPKTZOODSA-O 0.000 description 1
- WSNMPAVSZJSIMT-UHFFFAOYSA-N COc1c(C)c2COC(=O)c2c(O)c1CC(O)C1(C)CCC(=O)O1 Chemical compound COc1c(C)c2COC(=O)c2c(O)c1CC(O)C1(C)CCC(=O)O1 WSNMPAVSZJSIMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- BMZRVOVNUMQTIN-UHFFFAOYSA-N Carbonyl Cyanide para-Trifluoromethoxyphenylhydrazone Chemical compound FC(F)(F)OC1=CC=C(NN=C(C#N)C#N)C=C1 BMZRVOVNUMQTIN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000003952 Caspase 3 Human genes 0.000 description 1
- 108090000397 Caspase 3 Proteins 0.000 description 1
- 102000011727 Caspases Human genes 0.000 description 1
- 108010076667 Caspases Proteins 0.000 description 1
- 102100035882 Catalase Human genes 0.000 description 1
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 1
- 108010052832 Cytochromes Proteins 0.000 description 1
- 102000018832 Cytochromes Human genes 0.000 description 1
- 102100039868 Cytoplasmic aconitate hydratase Human genes 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 241000178951 Endomyces Species 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N Hypoxanthine nucleoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012404 In vitro experiment Methods 0.000 description 1
- 102000003855 L-lactate dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 108700023483 L-lactate dehydrogenases Proteins 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-L Malonate Chemical compound [O-]C(=O)CC([O-])=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 102000029749 Microtubule Human genes 0.000 description 1
- 108091022875 Microtubule Proteins 0.000 description 1
- 238000011785 NMRI mouse Methods 0.000 description 1
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 description 1
- FKUYMLZIRPABFK-UHFFFAOYSA-N Plastoquinone 9 Natural products CC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCC1=CC(=O)C(C)=C(C)C1=O FKUYMLZIRPABFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940123573 Protein synthesis inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 201000007737 Retinal degeneration Diseases 0.000 description 1
- 206010038848 Retinal detachment Diseases 0.000 description 1
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 1
- 241000235070 Saccharomyces Species 0.000 description 1
- BGDKAVGWHJFAGW-UHFFFAOYSA-N Tropicamide Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(CO)C(=O)N(CC)CC1=CC=NC=C1 BGDKAVGWHJFAGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004243 Tubulin Human genes 0.000 description 1
- 108090000704 Tubulin Proteins 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000003970 Vinculin Human genes 0.000 description 1
- 108090000384 Vinculin Proteins 0.000 description 1
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 241000235013 Yarrowia Species 0.000 description 1
- LGDAGYXJBDILKZ-UHFFFAOYSA-N [2-methyl-1,1-dioxo-3-(pyridin-2-ylcarbamoyl)-1$l^{6},2-benzothiazin-4-yl] 2,2-dimethylpropanoate Chemical compound CC(C)(C)C(=O)OC=1C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)N(C)C=1C(=O)NC1=CC=CC=N1 LGDAGYXJBDILKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 229940087168 alpha tocopherol Drugs 0.000 description 1
- 229960005260 amiodarone Drugs 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 description 1
- 238000011319 anticancer therapy Methods 0.000 description 1
- 239000000823 artificial membrane Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003012 bilayer membrane Substances 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 210000005013 brain tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N caesium atom Chemical class [Cs] TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000004413 cardiac myocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000003532 cataractogenesis Effects 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 208000037887 cell injury Diseases 0.000 description 1
- 230000009087 cell motility Effects 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 210000004671 cell-free system Anatomy 0.000 description 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 1
- SIHHLZPXQLFPMC-UHFFFAOYSA-N chloroform;methanol;hydrate Chemical compound O.OC.ClC(Cl)Cl SIHHLZPXQLFPMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000010428 chromatin condensation Effects 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 1
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000008602 contraction Effects 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 210000004292 cytoskeleton Anatomy 0.000 description 1
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 1
- ZAKOWWREFLAJOT-UHFFFAOYSA-N d-alpha-Tocopheryl acetate Natural products CC(=O)OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C ZAKOWWREFLAJOT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 239000002274 desiccant Substances 0.000 description 1
- 230000000249 desinfective effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 150000004662 dithiols Chemical group 0.000 description 1
- 230000035622 drinking Effects 0.000 description 1
- 238000001493 electron microscopy Methods 0.000 description 1
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 230000037149 energy metabolism Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 1
- 239000012259 ether extract Substances 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 208000030533 eye disease Diseases 0.000 description 1
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000009931 harmful effect Effects 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical group 0.000 description 1
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000000687 hydroquinonyl group Chemical group C1(O)=C(C=C(O)C=C1)* 0.000 description 1
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 238000009399 inbreeding Methods 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 210000005240 left ventricle Anatomy 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 230000003859 lipid peroxidation Effects 0.000 description 1
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000003712 lysosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000001868 lysosomic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 238000001906 matrix-assisted laser desorption--ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000001840 matrix-assisted laser desorption--ionisation time-of-flight mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 210000004688 microtubule Anatomy 0.000 description 1
- 230000008811 mitochondrial respiratory chain Effects 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000013425 morphometry Methods 0.000 description 1
- 239000006870 ms-medium Substances 0.000 description 1
- 230000036457 multidrug resistance Effects 0.000 description 1
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 1
- 238000006395 oxidase reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 239000003016 pheromone Substances 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- XYFCBTPGUUZFHI-UHFFFAOYSA-O phosphonium Chemical compound [PH4+] XYFCBTPGUUZFHI-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 150000004714 phosphonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000002186 photoactivation Effects 0.000 description 1
- 230000002165 photosensitisation Effects 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- TYPBXRFGTISSFB-UHFFFAOYSA-M potassium;3-morpholin-4-ylpropane-1-sulfonic acid;hydroxide Chemical compound [OH-].[K+].OS(=O)(=O)CCCN1CCOCC1 TYPBXRFGTISSFB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 1
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 1
- 239000000007 protein synthesis inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229950003776 protoporphyrin Drugs 0.000 description 1
- 238000005086 pumping Methods 0.000 description 1
- 210000001747 pupil Anatomy 0.000 description 1
- 150000004059 quinone derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 150000004053 quinones Chemical class 0.000 description 1
- 125000004151 quinonyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 1
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 1
- 238000010405 reoxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 1
- 230000004258 retinal degeneration Effects 0.000 description 1
- 230000004264 retinal detachment Effects 0.000 description 1
- 230000002207 retinal effect Effects 0.000 description 1
- 201000008525 senile cataract Diseases 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 210000001626 skin fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 description 1
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 description 1
- CHQMHPLRPQMAMX-UHFFFAOYSA-L sodium persulfate Substances [Na+].[Na+].[O-]S(=O)(=O)OOS([O-])(=O)=O CHQMHPLRPQMAMX-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 150000003505 terpenes Chemical group 0.000 description 1
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 1
- 229960000984 tocofersolan Drugs 0.000 description 1
- 229940042585 tocopherol acetate Drugs 0.000 description 1
- 231100000167 toxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 1
- 229960004791 tropicamide Drugs 0.000 description 1
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 1
- 229940040064 ubiquinol Drugs 0.000 description 1
- QNTNKSLOFHEFPK-UPTCCGCDSA-N ubiquinol-10 Chemical compound COC1=C(O)C(C)=C(C\C=C(/C)CC\C=C(/C)CC\C=C(/C)CC\C=C(/C)CC\C=C(/C)CC\C=C(/C)CC\C=C(/C)CC\C=C(/C)CC\C=C(/C)CCC=C(C)C)C(O)=C1OC QNTNKSLOFHEFPK-UPTCCGCDSA-N 0.000 description 1
- 206010046766 uterine cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000012991 uterine carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 229940124549 vasodilator Drugs 0.000 description 1
- 239000003071 vasodilator agent Substances 0.000 description 1
- 230000004393 visual impairment Effects 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 239000002076 α-tocopherol Substances 0.000 description 1
- 235000004835 α-tocopherol Nutrition 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/66—Phosphorus compounds
- A61K31/665—Phosphorus compounds having oxygen as a ring hetero atom, e.g. fosfomycin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
- C07F9/02—Phosphorus compounds
- C07F9/28—Phosphorus compounds with one or more P—C bonds
- C07F9/54—Quaternary phosphonium compounds
- C07F9/5442—Aromatic phosphonium compounds (P-C aromatic linkage)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/12—Ketones
- A61K31/122—Ketones having the oxygen directly attached to a ring, e.g. quinones, vitamin K1, anthralin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
- A61K47/545—Heterocyclic compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P39/00—General protective or antinoxious agents
- A61P39/06—Free radical scavengers or antioxidants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/14—Drugs for disorders of the endocrine system of the thyroid hormones, e.g. T3, T4
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/24—Drugs for disorders of the endocrine system of the sex hormones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/24—Drugs for disorders of the endocrine system of the sex hormones
- A61P5/26—Androgens
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
- C07F9/02—Phosphorus compounds
- C07F9/28—Phosphorus compounds with one or more P—C bonds
- C07F9/54—Quaternary phosphonium compounds
- C07F9/5456—Arylalkanephosphonium compounds
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09B—ORGANIC DYES OR CLOSELY-RELATED COMPOUNDS FOR PRODUCING DYES, e.g. PIGMENTS; MORDANTS; LAKES
- C09B11/00—Diaryl- or thriarylmethane dyes
- C09B11/04—Diaryl- or thriarylmethane dyes derived from triarylmethanes, i.e. central C-atom is substituted by amino, cyano, alkyl
- C09B11/10—Amino derivatives of triarylmethanes
- C09B11/24—Phthaleins containing amino groups ; Phthalanes; Fluoranes; Phthalides; Rhodamine dyes; Phthaleins having heterocyclic aryl rings; Lactone or lactame forms of triarylmethane dyes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09B—ORGANIC DYES OR CLOSELY-RELATED COMPOUNDS FOR PRODUCING DYES, e.g. PIGMENTS; MORDANTS; LAKES
- C09B69/00—Dyes not provided for by a single group of this subclass
- C09B69/001—Dyes containing an onium group attached to the dye skeleton via a bridge
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области биологии и медицины. Предлагается соединение общей формулы (I):
где А - эффекторная группа, L - линкерное звено, В - представляет собой Скулачев-ион Sk или заряженный гидрофобный пептид. Соединение может быть использовано для приготовления фармацевтической композиции для адресной (направленной) доставки биологически активных веществ в митохондрии, осуществляемой за счет электрохимического потенциала ионов водорода в митохондрии. Изобретение также может быть полезным при лечении заболеваний и состояний, связанных с нарушением нормального функционирования митоходрий, в частности заболеваний, связанных с повышенным образованием свободных радикалов и активных форм кислорода. Заявленное изобретение, благодаря направленному накоплению биологически активного вещества в митохондриях, позволяет увеличить эффективность последнего, снизить общую дозировку, вероятность и силу побочных эффектов: 6 н. и 20 з.п. ф-лы, 14 ил.
Description
Область техники, к которой относится изобретение
Данное изобретение относится к области биологии и медицины, и в частности может быть использовано в медицине для приготовления фармацевтической композиции для адресной (направленной) доставки биологически активных веществ в митохондрии, осуществляемой за счет электрохимического потенциала ионов водорода в митохондрии. Кроме того, изобретение относится к способу воздействия на организм, который предусматривает указанную доставку требуемых биологически активных веществ в митохондрии.
Уровень техники
Митохондрии живой клетки играют ключевую роль в ряде важнейших внутриклеточных процессов, таких как энергетический обмен в клетке (самая главная функция митохондрии - обеспечение клетки энергией), метаболизм определенных веществ (например, жирных кислот) и др. Также митохондрии участвуют в образовании и утилизации свободных радикалов и активных форм кислорода (СР и АФК) - крайне реакционно способных веществ, способных влиять на множество процессов в клетке. Наконец, в последнее десятилетие была доказана ключевая роль митохондрии в процессе запрограммированной клеточной смерти.
Известно большое количество заболеваний, связанных с нарушением нормального функционирования митохондрий. К ним относят все заболевания, связанные с повышенным образованием СР и АФК, одиночной или массовой гибелью клеток в составе ткани или органа, нарушением программы клеточного самоубийства - апоптоза, нарушением в обмене жирных кислот и так далее.
Полагают, что, воздействуя на митохондрии, можно влиять на самые разные аспекты жизнедеятельности клетки и всего организма.
В рамках этого изобретения предлагается новая технология воздействия на митохондрии живой клетки при помощи направленной, адресной доставки и накопления в этих органеллах различных биологически активных веществ.
Преимущества такого подхода очевидны - направленное накопление вещества позволяет увеличить эффективность его применения, снизить общую дозировку (так как эффективная концентрация достигается за счет многократного накопления вещества в определенном компартменте клетки), снизить вероятность и силу побочных эффектов.
Само устройство митохондрий предоставляет уникальную возможность для такой адресации - функционирующие митохондрии активно выкачивают из себя в цитоплазму ионы водорода и, таким образом, создают на своей внутренней мембране мощнейший электрохимический потенциал ионов водорода - протонный потенциал.
Исследования в области биоэнергетики позволили к настоящему времени создать большое количество веществ, способных проникать сквозь мембраны и накапливаться в митохондриях за счет энергии протонного электрохимического потенциала - такие вещества получили название "ионов Скулачева" (Green DE, "The electromechanochemical model for energy coupling in mitochondria", 1974, Biochem. Biophys. Acta., 346:27-78). Эти ионы, как правило, не обладают ярко выраженной биологической активностью. Настоящее изобретение заключается в использовании ионов Скулачева в составе нового соединения, содержащего, помимо самого иона, другое желательное вещество для адресной доставки в митохондрии этого другого вещества, которое в контексте данного изобретения названо эффектором.
К настоящему моменту известно крайне ограниченное количество биологически активных соединений, адресно доставляемых в митохондрии за счет энергии электрохимического потенциала ионов водорода. К таким веществам можно отнести, например, антиоксиданты, описанные в US 6331532 и ЕР 1047701 (вещества митохинол (MitoQ), митовитамин Е (MitoVitE) и ЕР 1534720 (миметики супероксиддисмутазы или глутатионпероксидазы, соединенные с трифенилфосфонием). Некоторые из этих веществ и их активность описаны в работах, упомянутых ниже.
Вещества, содержащие миметики супероксиддисмутазы или глутатионпероксидазы заявлены в ЕР 1534720 как митохондриально адресованные антиоксиданты для лечения и профилактики болезней, связанных с окислительным стрессом и т.п. В экспериментальных примерах описания изобретения ЕР 1534720 приведены данные об их способности проникать в митохондрии и их антиоксидантном действии в растворе и при взаимодействии с изолированными митохондриями. Никаких данных о действии этих веществ на клетки или на организм в целом не приведено. В то же время есть данные о высокой реакционной способности указанных миметиков по отношению к сульфгидрильным группам белков. Такая реакционная способность должна вызывать резкое снижение эффективности митохондриально адресованных антиоксидантов, содержащих миметики супероксиддисмутазы или глутатионпероксидазы (эбселен), что, в свою очередь, ставит под сомнение их применимость. Это подтверждается данными, приведенными в статье Filipovska A, Kelso GF, Brown SE, Beer SM, Smith RA, Murphy MP. J. Biol. Chem. 2005, 280(25):24113-26. В этой работе было показано, что эбселен, соединенный с остатком, адресно доставляющим его в митохондрии (все соединение названо митоэбселен) обладает той же эффективностью, что и обычный эбселен. Другими словами, адресация соединений типа митоэбселена, если и повышает их антиоксидантное действие, то такое преимущество нивелируется нежелательной побочной активностью митоэбселена.
MitoVitE также представляет собой митохондриально адресованный антиоксидант, содержащий трифенилфосфоний в качестве адресующей группы и остаток витамина Е в качестве антиоксиданта. В описании изобретения ЕР 1047701 приведены данные об антиоксидантном действии этого вещества в гомогенате мозга крысы, способности MitoVitE вещества проникать в изолированные митохондрии и в клетки в культуре; также показано, что в концентрации до 10 мкМ MitoVitE не влияет на жизнеспособность клеток в культуре, а дальнейшее повышение концентрации MitoVitE приводит к снижению выживаемости клеток. Однако никакого антиоксидантного действия MitoVitE на отдельные клетки, а также на ткани, органы или целый организм показано не было. Действие MitoVitE на клетки в культуре описано в статье Jauslin ML, Meier Т, Smith RA, Murphy MP, FASEB J. 2003 17(13):1972-4. Из данной работы следует, что действие MitoVitE по предотвращению запрограммированной гибели клеток не исчезает на фоне разобщителя FCCP (3-флюорометил-карбонилцианид фенилгидразон), то есть в условиях, когда направленное накопление MitoVitE в митохондриях невозможно. Эти данные свидетельствуют о том, что митохондриальная адресация MitoVitE если и имеет место, то не играет решающей роли в биологической активности этого соединения.
Митохондриально адресованный антиоксидант MitoQ и его варианты (MitoQ5, MitoQ3) представляют собой убихинон (убихинол в восстановленной форме), соединенный с трифенилфосфонием через С-10 линкерную группу (С-5, С-3 соответственно). В описании изобретения US 6331532 MitoQ заявлен как действующее вещество композиций, предназначенных для лечения и профилактики заболеваний, связанных с окислительным стрессом. В экспериментах, приведенных в описании изобретения, показаны антиоксидантные свойства MitoQ в растворе, способность этого вещества проникать в изолированные митохондрии, влияние на эффективность дыхания изолированных митохондрии. Однако не приводится никаких данных о действии MitoQ на отдельные клетки, ткани, органы, о наличии или отсутствии токсичности.
Дополнительные данные по активности MitoQ приведены в WO 2005019233 той же группы изобретателей, где показана эффективность MitoQ для предотвращения перекисного окисления липидов на изолированных митохондриях, а также в работе (Adlam VJ, Harrison JC, Porteous CM, James AM, Smith RA, Murphy MP, Sammut IA, 2005, FASEB J. 19:1088-95). В этой статье приведен единственный пример действия MitoQ на организм в эксперименте по скармливанию этого вещества крысам, с последующим изучением свойств их сердца на системе Лагендорфа (изолированного перфузионного сердца). Приведенные данные косвенно подтверждают заявление, что MitoQ можно использовать для профилактики или лечения ишемического повреждения миокарда. Однако в описываемой работе есть целый ряд неточностей и неопределенных мест, которые не позволяют убедительно доказать такое заявление. Так, используемая авторами работы 30-минутная нормотермическая ишемия с последующей реперфузией - это часто применяемая модель ишемического повреждения миокарда. Однако ее существенным недостатком является электрическая нестабильность сердца во время реперфузии. Известно, что часть сердец не восстанавливает свою активность вовсе из-за периодической или постоянной фибрилляции, и практически в каждом опыте такой серии возникает периодическая аритмия. В цитируемой статье нет указаний ни об аритмии, ни о фибрилляции. Поэтому остается неясным, характеризуют ли полученные авторами средние величины целую группу образцов или только те опыты, в которых аритмия была менее выраженной. Кроме того, по приведенным выше причинам, количество животных в каждой серии (6) явно недостаточно для данной модели.
Отчасти предположение о некорректности полученных авторами данных подтверждается довольно странным наблюдением значительного прироста сократительной функции как в контрольной, так и в опытных сериях в условиях реперфузии, которая неизбежно должна была бы сопровождаться гибелью кардиомиоцитов. Такой результат возможен, если при расчете сократительной функции использовали только те сердца, которые продолжали работать, исключая "выключившиеся", вошедшие, однако, в подсчет скорости перфузии. Такой способ очевидно некорректен. Хотя средние данные на любом сроке реперфузии в группе, обработанной MitoQ выше, чем в группах, обработанных контрольными препаратами, эти группы между собой не сопоставлены и достоверны ли различия между ними, неясно. Таким образом, основной вывод авторов о том, что только MitoQ является кардиопротекторным соединением, выглядит не вполне убедительным. Такое мнение подкрепляется отсутствием в группах, обработанных контрольными веществами, результатов исследования ультраструктуры, выхода лактатдегидрогеназы, цитохрома С, каспазы 3, комплекса 1 и аконитазной активности в митохондриях.
В общем, детальное изучение данной работы показывает наличие весьма слабых мест на этапе отбора и анализа результатов. Вероятно, авторский коллектив не имеет большого опыта работы на данной модели. Таким образом, можно утверждать, что кардиопротекторное действие MitoQ остается недоказанным.
Кроме того, следует отметить, что при наличии весьма обнадеживающих результатов по действию MitoQ на культуры клеток, есть несколько наблюдений, ставящих под сомнение возможность практического применения этого соединения. В опытах на культурах клеток было показано, что свое аитиоксидантное и противоапоптозное действие MitoQ оказывает при его концентрации в среде около 1 мкМ. На данный момент считается доказанным, что в этих условиях концентрация MitoQ в митохондриях может достигать 1 мМ. В то же время в работе Smith RA, Porteous CM, Gane AM, Murphy MP, Proc Natl Acad Sci USA, 2003, 100(9):5407-12 было показано, что при скармливании MitoQ лабораторным животным его накопление в тканях мозга и в сердечной мышце - местах, наиболее уязвимых для окислительного стресса - происходит до максимальной концентрации 100 пмоль на грамм живого веса. Расчеты показывают, что при такой концентрации MitoQ в ткани, даже максимально насыщенной митохондриями (сердечной мышце), концентрация MitoQ внутри митохондрий не превышает 100 нмоль. То есть более чем в 1000 раз меньше, чем концентрация, при которой достигались эффекты, продемонстрированные на культуре клеток. При этом увеличить дозировку, назначаемую лабораторным животным, хотя бы в 10 раз не позволяет токсичность препарата.
Таким образом, существующий уровень техники раскрывает только один тип митохондриально адресованных соединений - вещества, заявляемые как митохондриально адресованные антиоксиданты. Никаких других митохондриально адресованных биологически активных соединений к настоящему моменту неизвестно. Следует отметить, что и раскрытые вещества, заявляемые как митохондриально адресованные антиоксиданты, не решают поставленной задачи, поскольку их биологическая активность описана крайне слабо и перспективы практического применения для заявленных целей неопределенны. Кроме того, для большинства из раскрытых соединений уже доказана их неэффективность.
Сущность изобретения
В основе изобретения лежит принцип концентрации биологически активных веществ в митохондриях живой клетки за счет использования энергии электрохимического потенциала ионов водорода и ионов Скулачева. Такой подход неожиданно позволил многократно снизить дозировку используемых биологически активных веществ, направленно эффективно воздействовать на митохондрии, которые являются ключевым элементом в важнейших внутриклеточных процессах, что предоставляет возможность многократно снизить вероятность и силу нежелательных побочных эффектов.
Таким образом, одним из аспектов настоящего изобретения является способ воздействия на организм при помощи биологически активных веществ, адресно доставляемых в митохондрии за счет энергии электрохимического потенциала ионов водорода.
Другим аспектом изобретения является композиция для адресной доставки биологически активного вещества в митохондрии клетки, включающая в себя соединение, состоящее из адресующей части, обеспечивающей доставку всего соединения в митохондрии, линкерной группы и эффектора - вещества, обладающего требуемой биологической активностью. В целом такое соединение может быть представлено общей формулой:
где А - эффекторная группа, представляющая собой:
а) антиоксидант (II)
и/или его восстановленная форма,
где m - целое число 1-3; Y - одинаковые или разные заместители, представляющие собой низший алкил или низший алкокси; или два вицинальных Y связаны между собой таким образом, что образуют структуру:
и/или его восстановленную форму,
где R1 и R2 одинаковые или разные заместители, независимо друг от друга представляющие собой низший алкил или низший алкокси;
б) прооксидант,
в) индуктор апоптоза,
г) ингибитор антиапоптозных белков митохондриальной локализации,
д) фотосенсибилизатор.
В этом аспекте изобретения в соединении композиции:
антиоксидант представляет собой соединение, способное взаимодействовать с СР и АФК, нейтрализуя их опасные свойства. Предпочтительно, чтобы при этом в своей радикальной форме это соединение могло взаимодействовать с дыхательной цепью митохондрий и таким образом восстанавливать свои антиоксидантные свойства для следующего взаимодействия с СР и/или АФК. Предпочтительным антиоксидантом, отвечающем структуре II является 2,3-диметил-1,4-бензохинол (остаток пластохинона - сильнейшего антиоксиданта из тилакоидов протопластов, то есть одного из самых насыщенных СР и АФК мест в живой природе);
прооксидант представляет собой соединение, способное образовывать и/или стимулировать образование свободных радикалов и/или активных форм кислорода при попадании в клетку: паракват, менадион, органические гидропериксные соединения;
индуктор апоптоза представляет собой соединение, которое будучи доставленным в митохондрии тем или иным образом активирует запрограммированную гибель клетки (апоптоз), предпочтительным индуктором апоптоза в составе соединения (I) является фениларсеноксид, известный как наиболее успешный в настоящее время - индуктор образования поры;
ингибитор антиапоптозных белков митохондриальной локализации представляет собой соединение, способное взаимодействовать с одним или более антиапоптозных белков, находящимися в митохондрии (в том числе встроенными в митохондриальную мембрану) и подавлять активность этих белков. Предпочтительным ингибитором антиапоптозных белков митохондриальной локализации является АВТ737. Полагают, что они особенно полезны для использования в комбинации с химиотерапийным агентом для облегчения индукции апоптоза;
фотосенсибилизатор представляет собой соединение, способное образовывать синглетный кислород или другие АФК или СР при облучении светом, предпочтительными фотосенисибилизаторами являются фталоцианин, содержащий или не содержащий металлический заместитель и его комплексы: порфирин и его производные, в частности, BDP-Mac или BDP-MaD; фоскан (mTHPC).
L - линкерное звено, представляющее собой:
а) простую или разветвленную углеводородную цепь, не обязательно замещенную одним или более заместителем и которая при необходимости содержит одну или более двойную или тройную связь;
б) природную изопреноидную цепь;
n - целое число 1-20;
В - адресующая группа, представляющая собой:
а) Скулачев-ион Sk:
Sk+Z-,
где Sk - липофильный катион, Z - фармакологически приемлемый анион;
б) заряженный гидрофобный пептид из 1-20 аминокислот;
за исключением соединений, в которых А представляет собой убихинон (то есть 2-метил-4,5-диметокси-3,6-диоксо-1,4-циклогексадиенил) или токоферол или миметик супероксиддисмутазы или эбселен, при том что L - дивалентный децил или дивалентный пентил или дивалентный пропил, а В - трифенилфосфоний;
а также его сольваты, изомеры или пролекарственные формы и фармакологически приемлемый носитель.
Следующим аспектом изобретения является терапевтический или профилактический (предотвращающий) агент - соединение, отвечающее структуре (I), - полезный при заболеваниях, для устранения, предупреждения или облегчения которых эффективным является снижение количества свободных радикалов и/или активных форм кислорода в отдельных клетках, тканях, участках, органах, во всем организме, с помощью митохондриально адресованных антиоксидантов. В связи с этим аспектом изобретения предлагается:
применение митохондриально адресованных антиоксидантов, отвечающих структуре (I) для увеличения продолжительности жизни человека или другого животного;
применение терапевтического или профилактического агента, полезного при заболевании, связанном со старением организма и усилением окислительного стресса;
в частности применение митохондриально адресованных антиоксидантов для борьбы с заболеваниями глаз, связанными с окислительным стрессом и/или массовой гибелью клеток сетчатки или других типов клеток, вовлеченных в процессы, обеспечивающие зрение; для борьбы с катарактой, макулодистрофией сетчатки;
применение митохондриально адресованных антиоксидантов, отвечающих структуре (I), для лечения или профилактики заболеваний, связанных с массовой запрограммированной смертью клеток в тканях и органах и и/или связанных с распространением в пораженной ткани сигналов, инициирующих запрограммированную гибель клеток;
применение митохондриально адресованных антиоксидантов, отвечающих структуре (I) для профилактики и/или лечения сердечно-сосудистых заболеваний, для которых показана ключевая роль запрограммированной гибели клетки, апоптоза или некроза; для профилактики и/или лечения инфаркта, инсульта; для предотвращения вредных последствий реоксигенации;
применение митохондриально адресованных антиоксидантов, отвечающих структуре (I), во время хирургических операций для защиты здоровых тканей от повреждения;
применение митохондриально адресованных антиоксидантов, отвечающих структуре (I), в трансплантологии для борьбы с отторжением тканей и для сохранения трансплантационного материала;
применение митохондриально адресованных антиоксидантов, отвечающих структуре (I), в косметологии для преодоления последствий ожогов, улучшения заживания ран и хирургических швов;
применение митохондриально адресованных антиоксидантов в качестве противовоспалительного средства.
Кроме того, аспектом изобретения является терапевтический или профилактический (предотвращающий) агент, отвечающий структуре (I), для онкологических заболеваний. В связи с этим аспектом изобретения предлагается:
применение митохондриально адресованных антираковых препаратов для борьбы с метастазированием, ангиогенезом, в том числе для направленного запуска запрограммированной клеточной смерти в раковых клетках;
применение качестве митохондриально адресованных антираковых препаратов митохондриально адресованных прооксидантов отвечающих структуре (I), предпочтительно митохондриально адресованный паракват, митохондриально адресованный менадион, или митохондриально адресованные антиоксиданты, неспособные восстанавливаться дыхательной цепью митохондрий и таким образом проявляющие прооксидантные свойства (например, дезмитоксимито Q);
применение в качестве митохондриально адресованных антираковых препаратов митохондриально адресованных индукторов апоптоза, отвечающих структуре (I). Такой подход предпочтителен по сравнению с использованием традиционных индукторов апоптоза, поскольку митохондрии предоставляют большое количество возможностей для запуска запрограммированной клеточной смерти. Одним из предпочтительных способов такого запуска является сшивание сульфгидрильных групп белков, располагающихся в мембране митохондрий через эффекторную группу митохондриально адресованного индуктора апоптоза. Предпочтительной эффекторной группой такого соединения является фениларсеноксид;
применение в качестве митохондриально адресованных антираковых препаратов, отвечающих структуре (I), митохондриально адресованных ингибиторов антиапоптозных белков митохондриальной локализации. Предпочтительными белками, активность которых должны подавлять такие препараты, являются bc1-2 и родственные белки. Одним из предпочтительных ингибиторов является АВТ737.
Также аспектом изобретения является использование в качестве митохондриально адресованного антиракового препарата композиции, включающей в себя отвечающие структуре (I) митохондриально адресованные ингибиторы антиапоптозных белков митохондриальной локализации и обычные препараты, индуцирующие запрограммированную гибель раковых клеток.
Также аспектом изобретения является использование в качестве митохондриально адресованного антиракового препарата композиции, включающей в себя отвечающие структуре (I) митохондриально адресованные антиоксиданты и обычные препараты, индуцирующие запрограммированную гибель раковых клеток. В этом аспекте изобретения предпочтительным является использование антиоксидантов, соединенных с липофильными катионами, поскольку в раковых клетках наблюдается повышенная, по сравнению со здоровыми клетками, активность ферментов, способных откачивать липофильные катионы из этих клеток (ферменты системы множественной лекарственной устойчивости). Таким образом, митохондриально адресованный антиоксидант будет преимущественно накапливаться в здоровых клетках, что приведет к их преимущественному выживанию в условиях антираковой терапии, что в свою очередь снизит силу нежелательных последствий такой терапии;
применение митохондриально адресованных антиоксидантов для увеличения эффективности химиотерапии и радиотерапии рака;
применение в качестве митохондриально адресованного антиракового препарата митохондриально адресованного фотосенсибилизатора;
применение в фотодинамической терапии рака митохондриально адресованного фотосенсибилизатора, позволяющего уничтожать раковые клетки за счет митохондриальной индукции апоптоза. Такой подход имеет ряд существенных преимуществ перед традиционными методами фотодинамической терапии, поскольку а) позволяет уничтожать раковые клетки с помощью запрограммированной клеточной смерти, а не некротизации (приводящей к целому ряду нежелательных последствий), б) позволяет существенно снизить концентрацию применяемого фотосенсибилизатора, что снижает вероятность возникновения и силу побочных эффектов;
применение митохондриально адресованного антиоксиданта SkQ1 в качестве предпочтительного антиракового агента.
Еще одним аспектом изобретения является применение митохондриально адресованного антиоксиданта, содержащего в качестве адресной группы остаток структуры (III), для лечения заболеваний, связанных с обменом веществ; диабета.
Также аспектом изобретения является метод обеззараживания ткани, крови, другой субстанции, содержащей клетки и клеточные элементы, при помощи свободных радикалов. В рамках этого метода нужные клетки и клеточные элементы защищены от окислительного стресса при помощи митохондриально адресованного антиоксиданта, а болезнетворные агенты уничтожаются свободными радикалами.
Другим аспектом изобретения является применение митохондриально адресованных антиоксидантов в биотехнологии для увеличения жизнеспособности клеток животных или человека в культуре для исследовательских или технологических нужд. Этот аспект изобретения основывается на факте, что в большом количестве случаев концентрация кислорода в культуральной среде при выращивании клеток в культуре существенно превышает концентрацию кислорода в ткани, что резко увеличивает вероятность окислительного стресса у клеток, что, в свою очередь, ведет к повышенной вероятности апоптоза или некроза, снижает жизнеспособность таких клеток. Обработка клеток митохондриально адресованным антиоксидантом резко снижает остроту окислительного стресса. Также обработка митохондриально адресованным антиоксидантом значительно увеличивает биомассу клеток, что приводит к их большей продуктивности. В связи с этим аспектом предлагается:
применение митохондриально адресованных антиоксидантов для увеличения продуктивности животных (в том числе человеческих), растительных или грибковых клеток в культуре, при использовании для продукции фармакологических препаратов; белков; антител;
применение митохондриально адресованных антиоксидантов для увеличения продуктивности целых растений, при использовании для продукции фармакологических репаратов: белков, антител;
применение митохондриально адресованных антиоксидантов для увеличения продуктивности клеток дрожжей и других грибов родов Saccharomyces, Pichia, Hansenula, Endomyces, Yarrowia в культуре, при использовании для продукции фармакологических препаратов: белков, антител;
применение митохондриально адресованных антиоксидантов для увеличения жизнеспособности растительных протопластов в культуре, при использовании для продукции фармакологических препаратов: белков, антител; при использовании для получения генетически модифицированных растений;
применение митохондриально адресованных антиоксидантов при получении генетически модифицированных растений для увеличения жизнеспособности регенерирующих растений, клеток в каллусах;
применение митохондриально адресованных прооксидантов для борьбы с болезнетворными микроорганизмами - грибами, простейшими, бактериями;
применение митохондриально адресованных индукторов апоптоза для борьбы с болезнетворными микроорганизмами - грибами, простейшими, бактериями;
Следующим аспектом изобретения является метод синтеза митохондриально адресованных антиоксидантов, использующих липофильный катион в качестве адресной группы.
Краткое описание фигур
На фиг.1 показано проникновение SkQ1 через искусственную мембрану.
На фиг.2 продемонстрировано; спонтанное окисление производных хинолов MitoQ и SkQ1.
На фиг.3 показано увеличение скорости окисления производных хинолов "MitoQ" и "SkQ1" при введении в систему супероксидного радикала. А - скорость окисления восстановленных форм кислородом воздуха и супероксидным радикалом; Б - скорость окисления восстановленных форм только супероксидным радикалом.
На фиг.4 представлено восстановление "MitoQ" и "SkQ1" дыхательной цепью митохондрий печени крысы (0,2 мг/мл белка), энергизованных сукцинатом (5 мМ) в присутствии 2 μM ротенона.
На фиг.5 описывается окисление хинолов "MitoQ" и "SkQ1" дыхательной цепью митохондрий печени крысы. "MitoQ" и "SkQ" за счет дыхательной цепи митохондрий, энергизованных сукцинатом (5 мМ) в присутствии 2 μМ ротенона. После полного восстановления производных хинола дыхательную цепь блокировали 25 мМ малонатом и измеряли скорость реокисления "MitoQ" и "SkQ"
На фиг.6 показано цитотоксическое действие SkQ1 и mitoQ на клетки линии Hela. % живых клеток пропорционален ОП492 МТТ-формазана.
На фиг.7 показано влияние SkQ и других препаратов на заболеваемость крыс OXYS макулодистрофией. По оси ординат - % глаз с дегеративными изменениями макулярной области сетчатки.
На фиг.8 приведен процент глаз с изменениями макулы 2-й степени. Прием SkQ1 не только снизил заболеваемость макулодистрофией, но и существенно снизил выраженность изменения сетчатки. По оси ординат - % глаз со 2-й стадией заболевания.
На фиг.9 описываются дегенеративные изменения в макулярной области сетчатки OXYS до приема препаратов и после 45-дневного курса KBr, SkQ1 или витамина Е.
На фиг.10 описано влияние SkQ1 и других препаратов на заболеваемость крыс OXYS катарактой. По оси ординат - % глаз с изменениями хрусталиков.
На фиг.11 приведен процент глаз с изменениями хрусталиков 2-й степени. Прием SkQ1 не только снизил заболеваемость, но и существенно снизил выраженность тяжести течения катаракты. По оси ординат - % глас с изменениями, соответствующими 2-й стадии заболевания.
На фиг.12 показано состояние хрусталиков крыс OXYS перед началом приема препаратов и после 45-дневного курса KBr, SkQ1 и витамина Е.
На фиг.13 описано влияние трех концентраций SkQ1 на выживаемость мышей с привитой асцитной карциномой Эрлиха.
На фиг.14 показано действие ингибитора синтеха белка, циклогексимида Д (ЦгД) и антиоксидантов на клетки Yarrowia lipolytica, обработанные 5 мМ перекисью водорода. Выживаемость оценивали по количеству образовавшихся колоний на твердой среде. На твердую среду клетки переносили через 3 часа инкубации.
Осуществление изобретения
Ниже приведены ряд экспериментальных примеров, чтобы проиллюстрировать возможность осуществления изобретения, в частности действие веществ, отвечающих структуре (I), в соответствии с изобретением. Эти примеры призваны лишь подтвердить обоснованность притязаний и не должны восприниматься как ограничивающие область его использования или применения.
Экспериментальный пример I: синтез веществ структуры (I) - 2,3-диметил-1,4-бензохинон-5-децилового эфира родамина G.
Было синтезировано соединение SkQR1, отвечающее структуре (I) и содержащее в качестве адресующей группы остаток родамина G, а в качестве антиоксидантной эффекторной группы - остаток пластохинона, выбранного поскольку он является природным антиоксидантом, присутствующим в наиболее насыщенном СР и АФК месте в живой природе - тилакоидах хлоропластов растений.
В работе использовали следующие реагенты и растворители: 2,3-Диметил-гидрохинон, 11-бромундекановая кислота, родамин G, N,N'-дициклогексилкарбодиимид, бромноватистокислый калий, азотнокислое серебро, персульфат аммония, карбонат цезия фирм Fluka, Aldrich, Sigma, Merck; Silicagel 60 (0,063-0,2 мм) фирмы Merck и растворители отечественного производства: диметилформамид, дихлорметан, хлороформ, метанол, изопропанол, этилацетат, бензол, ацетонитрил и другие. Очистку и абсолютирование растворителей проводили по стандартным методикам
В работе использовали метод тонкослойной хроматографии (ТСХ) на пластинах Kieselgel 60 F254 (Merck). Соединения, содержащие группы, поглощающие в УФ-области, обнаруживали с помощью хемископа Брумберга. Соединения, содержащие хиноновое кольцо, обнаруживали в парах аммиака. Соединения, содержащие родамин, обнаруживали визуально.
Ультафиолетовые спектры поглощения регистрировали на спектрофотометре "Cary 50 Bio" фирмы "Varian".
Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) выполнялась на приборе Adjilent 1100 в градиенте ацетонитрила в 10 мМ Н3PO4.
Масс-спектрометрометрические анализы проводили методом TOF MALDI MS на масс-спектрометрах Ultraflex и Autoflex фирмы Bruker Daltonik (Германия), оснащенных лазером 337 нм и методом ESI MS.
ИК-спектры регистрировали в пленке на приборе Specord 40.
ПМР и С13-ЯМР были зарегистрированы при температуре 303К на приборе Brucker Avance-400.
Синтез SkQR1 представлен на схеме (Схема 1)
Синтез 2,3-диметил-1,4-бензохинона (2)
В раствор 0.34 г (2 ммоль) бромноватистокислого калия в 6 мл воды и 0.3 мл 5Н серной кислоты при перемешивании и нагревании при 60°С прибавили 0.83 г (6 ммоль) 2,3-диметилгидрохинона. Затем температуру реакции подняли до 80°С. После завершения реакции реакционную смесь охладили до комнатной температуры и экстрагировали эфиром. Эфирный экстракт промыли водой и сушили безводным хлористым кальцием. Осушитель отфильтровали, фильтрат упарили в вакууме. Вес остатка 0.74 г (90%). Вещество растворили в 20 мл эфира и пропустили через слой силикагеля (30×30 мм), дополнительно промыли силикагель эфиром несколько раз. Эфир упарили и получили 0.67 г хроматографически чистого (99.37% по ВЭЖХ) 2,3-диметил-1,4-бензохинона.
ТСХ: Rf 0.46 (хлороформ); ВЭЖХ: τ=17.6 мин (0-90% В за 26.4 мин; А: 10 мМ Н3PO4; В: ацетонитрил); Т.пл. 60°С; УФ-спектр (метанол): λmax 209 нм, 256 нм, 344 нм.
Синтез 2,3-диметил- 5-(10'-бромдецил)-1,4-бензохинона (3)
136 мг (1 ммоль) 2,3-Диметил-1,4-бензохинона (2) растворили в 10 мл смеси ацетонитрила и воды (1:1) и прибавили 292 мг (1.1 ммоль) 11-бромундекановой кислоты и 170 мг (1 ммоль) азотнокислого серебра. Смесь нагрели до 60-70°С и в раствор по каплям добавили раствор 228 мг (1 ммоль) персульфата аммония в 10 мл воды. Нагревание продолжали еще 1 час, реакционную смесь охладили и экстрагировали эфиром. Эфирный раствор промыли разбавленным раствором бикарбоната натрия, сушили сернокислым магнием и упаривали. Остаток очищали флаш-хроматографией на колонке с силикагелем. Выход соединения 3 в виде темно-красного масла 70%.
ТСХ: Rf 0.62 (хлороформ); ВЭЖХ: τ=23 мин (79-90% В за 26.4 мин; А: 10 мМ Н3PO4; В: ацетонитрил); УФ-спектр (метанол): λmax 207 нм, 258 нм, 344 нм; MALDI-TOF MS: вычислено для C18H27O2Br: 355.3; найдено m/z 356.1 (МН+; 100%); ИК: 2928, 2336, 1600, 1496, 1304 см-1.
Синтез цезиевой соли родамина G (4)
200 мг (0.48 ммоль) Родамина G растворяли в 6 мл метанола, добавляли 1 мл 2 М водного раствора карбоната цезия. Продукт выделяли фильтрованием, промывали эфиром, сушили в вакууме при 60°С. Выход соединения 4 в виде темно-фиолетового кристаллического вещества 210 мг (80%).
Т.пл. >250°С (разл.).
Синтез 10-(2',3'-диметил-1',4'-бензохинон-5'-деканоил)родамина G
190 мг Соединения 4 суспендировали в 5 мл ДМФА, добавили 200 мг (0.56 ммоль) соединения 3. Смесь нагревали до 50°С и перемешивали 48 часов при этой температуре, после чего растворитель удаляли в вакууме. Выделение продукта проводили методом колоночной хроматографии на силикагеле в системе хлороформ-метанол (4:1). Фракцию, содержащую основной продукт, упаривали, к остатку добавляли 150 мкл 5Н раствора хлористого водорода в диоксане, снова упаривали, полученное масло кристаллизовали под бензолом. Выход: 160 мг (65%).
ТСХ: Rf 0.68 (хлороформ-метанол, 4:1); Rf 0,80 (хлороформ-метанол-вода, 65:25:4);
ВЭЖХ: τ=23.9 мин. (0-90% В за 26.4 мин; А: 10 мМ Н3PO4; В: ацетонитрил);
Т.пл. 178-180°С (разл.);
УФ (этанол): λmax 250, 350, 535 нм, ε535=80000;
Элементный анализ: вычислено для С44Н53ClN2O5: С, 72.86; Н, 7.36; С1, 4.89; N, 3.86; найдено: С, 72.53; Н, 7.21; Cl, 4.22; N, 3.61;
ES MS: вычислено для C44H51N2O5 688,89; найдено m/z 689,4 (MH+; 100%);
ИК (пленка): 3200, 2928, 2336, 1700, 1685, 1600, 1496, 1304 см-1;
1Н-ЯМР (400 МГц; DMSO-d6; нумерация атомов указана на структуре, приведенной ниже): 0,95-1,25 м.д. (неразр.м., 14Н, 2'', 3'', 4'', 5'', 6'', 7'', 8'' -(СН2)7); 1,24 м.д. (т., 6Н, J=6,8 Гц, 2'''', 2''''' -(СН3)2); 1,41 м.д. (квинт., 2Н, J=7,5 Гц); 1,92 и 1,94 м.д. (каждый сигнал - с., 3Н, 4''', 5''' -(СН3)2); 2,09 м.д. (с., 6Н, 2,7 -(СН3)2); 3,48 м.д. (квинт., 4Н, - 1'''', 1'''' -(СН2)2); 3,85 м.д. (т., 2Н, J=6,3 Гц, 1'' -СН2); 6,57 м.д. (с., 1Н, Н3 ,); 6,80 и 6,91 м.д. (каждый сигнал - с., 3Н, H1, Н5 и Н4, Н8); 7,44 м.д. (дд., 1Н; J1=7,8, J2=1 Гц; Н6 ,,,); 7,74 м.д. (т., 2Н, J=5,8 Гц; 3,6 -NH); 8,60-8,70 м.д. (м. 2Н, Н4 ,,, и Н5 ,,,); 8,22 м.д. (дд, 1Н, J1=8,2; J2=1,1 Гц, Н3 ,,,).
13С-ЯМР (400 МГц; DMSO-d6): 11,59 и 11,98 м.д. (4''', 5''' -(СН3)2); 13,45 м.д. (2'''' и 2''''' -(СН3)2); 17,29 м.д. (2,7 -(СН3)2); 25,07, 27,29, 27,57, 28,25, 28,39, 28,51, 28,55, 28,56 и 28,65 м.д. (2'', 3'', 4'', 5'', 6'', 7'', 8'' 9'', 10'' -(CH2)9); 37,86 м.д. (1'''', 1''''' -(N-CH2)2); 64,96 м.д. (1'' -СН2); 93,45 м.д. (С4 и С5); 112,78 м.д. (C1 и C8); 125,32 м.д. (С4 ,); 128,38 м.д. (С5 ,); 129,78 и 130,75 м.д. (С1 , и С2 ,); 130,20 и 130,22 м.д. (С5 ,, C8a и С9а); 131,77 м.д. (С2); 132,85 м.д. (С9 ,,,); 132,88 м.д. (С3 ,); 139,79 и 140,36 м.д. (С4 ,,, и С5 ,,,); 148,40 м.д. (С1 ,,,); 155,71 и 156,6 м.д. (С4а-С10а и С3 ,,,-С6 ,,,); 164,98 м.д. (COOR); 186,91 и 187,00 м.д. (С3 ,,, и С6 ,,,).
По аналогичной методике было получено другое соединение, отвечающее структуре (I) - SkQ1: представляющее собой 2,3-диметил-1,4-бензохинон-5-децил-трифенил фософоний бромид. Это соединение отличается от описанного выше SkQR1 тем, что в качестве адресующей группы в нем использован трифенилфосфоний. Эффекторная и линкерная группы оставлены те же, что и в ранее описанном соединении
Синтез митохондриального антиоксиданта SkQ1 представлен на схеме (Схема 2):
Синтез включает в себя следующие стадии:
1. Окисление 2,3-диметилгидрохинона (1) в соответствующий 2,3-диметил-1,4-бензохинон (2) бромноватистокислым калием.
2. Присоединение 11-бромундекановой кислоты (3) к полученному 2,3-диметил-1,4-бензохинону (2) в присутствии нитрата серебра и персульфата натрия.
3. Образование целевого соединения (5) в результате реакции с трифенилфосфином в атмосфере кислорода.
Полученное вещество представляет собой сухое вещество желто-коричневого цвета с высокой степенью гигроскопичности.
По результатам исследований строения вещества методами ядерного магнитного резонананса, высокоэффективной жидкостной хроматографии, масс-спектрометрии была установлена тождественность строения полученного вещества заданной формуле. Чистота образца не менее 98,5%.
Контроль чистоты продукта проводился двумя методами: при помощи высокоэффективной жидкостной хроматографии высокого давления - ВЭЖХ и с помощью ПМР высокого разрешения (500 МГц). Два способа регистрации чистоты продукта SkQ1 потребовались в связи с выраженными поверхностно-активными свойствами этого соединения, при которых затруднен процесс хроматографии веществ.
Содержание SkQ1 в полученном препарате, определенное методом ВЭЖХ, составляет 98.55%. Данные ядерного магнитного резонанса представлены ниже:
1H-NMR (CDCl3; δ, ppm): 7.82-7.58 (m, 15H aromatics); 6.38 (s, 1H, H-5); 3,6 (m, 2H, СН2Р(Ph)3); 2.25 (m, 2H, СН2СН2СН2СН2СН2СН2СН2СН2СН2СН2Р(Ph)3); 1.90 (br s, 6H, СН3); 1.55, 1.32, 1.15 (3m, 6H, 3СН2).
HQSC (DMSO; δ, ppm): 8.15 (br s, 1H, tautomeric ОН), 7.88-7.20 (m, 15H, aromatics); 7.08 (br s, 1H, tautomeric OH), 6.38 (s, 1H, H-5); 3.55 (m, 2H, СН2Р(Ph)3); 2.4 (m, 2H, СН2СН2СН2СН2СН2СН2СН2СН2СН2СН2Р(Ph)3); 2.05, 1.90 (2s, each of 3H, СН3); 1.5 (m, 6H, 3СН2).
13C-NMR (DMSO; δ, ppm): 147.83, 144.65 (C-1, С-4); 134.75-129.97 (Ph); 113.01 (СН2Р(Ph)3; 12.72-11.89 (СН3).
ESI-MS (m/z): [M]+ calc. 537.7, found 537.4.
Также по аналогичной методике было синтезировано соединение, отвечающее структуре (I), 10-(2-метил-5-метокси-3,6-диоксо-1,4-циклогексадиенил)-децил-трифенилфосфоний бромид (DMMQ). В этом соединении в качестве эффекторной группы использован дезметоксиубихинон. Это вещество способно взаимодействовать с СР, АФК и кислородом, но на основании его структуры и имеющихся знаний о функционировании митохондрий можно заключить, что оно не будет восстанавливаться дыхательной цепью митохондрий, а следовательно будет проявлять прооксидантные, цитотоксичные свойства.
Экспериментальный пример 2: "Перенос соединений, отвечающих структуре (I), через искусственную липидную мембрану".
Было показано, что тестовое соединение, отвечающее структуре I (было использовано соединение SkQ1), проникает сквозь бислойную фосфолипидную мембрану, двигаясь по градиенту концентрации и распределяясь по обе стороны мембраны в соответствии с уравнением Нернста. Следовательно SkQ1 является проникающим катионом.
Методика эксперимента применялась в целом ряде работ по изучению способности различных ионов проникать сквозь билипидную мембрану и подробно описана в статье Starkov АА, Bloch DA, Chernyak BV, Dedukhova VI, Mansurova SA, Symonyan RA, Vygodina TV, Skulachev VP, 1997, Biochem. Biophys Acta, 1318, 159-172. Этот метод заключается в использовании двух заполненных водным раствором камер, разделенных бислойной мембраной, и регистрации перемещения заряженного вещества, способного проникать сквозь такую мембрану, из одной камеры в другую.
В описываемом эксперименте мембрана изготавливалась из смеси фосфотидилхолина и дифитонаила, растворенных в декане, камеры по обе стороны мембраны заполнялись буфером 50 mM TrisHCl, рН 7.4, содержащим 10-7 М SkQ1.
Проводили титрование SkQ1 в концентрациях от 10-7 М до 10-5 М. Показано, что в отрезке от 4·10-6 М до 4·10-5 М распределение SkQ1 отвечает уравнению Нернста для идеально проникающих сквозь мембрану заряженных молекул. При меньших концентрациях уравнение Нернста не выполняется (результаты приведены на фиг.1).
Следовательно, соединение SkQ1 (2,3-диметил-1,4-бензохинон-5-децил-трифенил фософоний) является жирорастворимым веществом, способным проникать через биологические мембраны в катионной форме.
Экспериментальный пример 3: "Антиоксидантные свойства соединений, отвечающих структуре (I)".
Было показано, что тестовое соединение, отвечающее структруре (I) - митохондриальный антиоксидант SkQ1, является сильнейшим антиоксидантом, превышающим по активности опубликованные ранее антиоксиданты, заявленные как митохондриально адресованные в изобретении US 6331532 (вещество MitoQ).
Стабильность во времени восстановленных (хинольных) форм SkQ1 и MitoQ исследовали методом анализа абсолютных спектров поглощения данных соединений в диапазоне от 240 до 310 нм, полученных при помощи двухлучевого спектрофотометра Pye Unicam SP1100, Англия. Производные хинонов восстанавливали тетрагидроборатом натрия в среде измерения, содержавшей 20 мМ MOPS-KOH, рН=7,6. Кювета сравнения не содержала SkQ1 или MitoQ, восстановитель вносили в обе кюветы, измерения проводили по окончании выделения водорода. Степень восстановленности хинонов оценивали по величине площади пика методом взвешивания, для сравнения измеряли абсолютное значение поглощения в максимуме при 267 нм. Как следует из данных, представленных на фиг.2, восстановленная (хинольная) форма SkQ1 более устойчива к окислению кислородом воздуха, чем MitoQ.
Для ответа на вопрос о сравнении антиоксидантной активности восстановленных форм мы измерили скорость окисления хинолов супероксид-анион радикалом, генерируемым в системе ксантиноксидаза/гипоксантин. Полученные данные, представленные на фиг.3а, свидетельствуют, что скорость окисления SkQ1 примерно вдвое превышает таковую для MitoQ. Это может послужить указанием, что SkQ1 более активен как антиоксидант и его восстановленная (активная) форма более устойчива к спонтанному окислению кислородом воздуха, чем MitoQ и обладает большим сродством к супероксидному радикалу. Фиг.3б отражает скорость окисления восстановленных хинольных форм супероксидным радикалом за вычетом вклада окисления за счет атмосферного кислорода. Легко заметить, насколько SkQ1 лучше взаимодействует с супероксидным радикалом, чем MitoQ.
Проведенные эксперименты убедительно демонстрируют, что SkQ1 обладает более сильными антиоксидантными свойствами, чем его аналоги. В растворе SkQ1 способен эффективно реагировать с АФК и нейтрализовать их. При этом существенным преимуществом этого антиоксиданта является его низкая реакционная способность по отношению к обычному кислороду, а, следовательно, низкие прооксидантные свойства.
Экспериментальный пример 4: "Изучение взаимодействия соединений, отвечающих структуре (I) с митохондриями".
Ключевым преимуществом митохондриально адресованных антиокисдантов, предложенных в рамках этого изобретения, является их способность восстанавливаться дыхательной цепью митохондрий. Этим свойством обусловлено принципиальное отличие этих соединений от традиционных антиоксидантов - возможность безопасной нейтрализации радикальной формы изобретенных соединений и многократного их использования для нейтрализации СР и АФК.
Для изучения возможности восстановления тестовых соединений (SkQ1 и его аналога MitoQ) дыхательной цепью митохондрий измеряли скорость изменения соотношения окисленной и восстановленной форм в присутствии субстратов дыхания в среде выделения митохондрий печени крысы. Измерения проводили в присутствии митохондрий (концентрация белка 0,2 мг/мл).
Полученные данные (см. фиг.4, 5) свидетельствуют, что оба соединения в одинаковой степени успешно восстанавливаются энергизованными митохондриями и впоследствии окисляются со скоростями, существенно превышающими скорость спонтанного окисления (кислородом воздуха).
Также этот экспериментальный пример позволяет сделать вывод о том, что SkQ1 в области концентраций вплоть до 10 мкМ не подавляет дыхание митохондрий, при этом стимулируя "сопряженное" дыхание митохондрий - то есть их нормальное функционирование. Также было показано, что SkQ1 стабилен в условиях инкубации в биологических средах во временах, соответствующих длительности экспериментов (десятки минут). Аспектом, подтверждаемым этим примером является то, что SkQ1 в опытах in vitro с индукцией окисления восстановленного митохондриями хинола посредством генерируемых АФК (супероксидного радикала в ксантиноксидазной реакции) продемонстрировал явное преимущество, в сравнении с MitoQ, в отношении сродства к АФК и стабильности во времени.
Экспериментальный пример 5: "Сравнение токсичности различных митохондриальных антиоксидантов для клеток в культуре".
В этом экспериментальном примере сравниваются степень токсичности митохондриального антиоксиданта MitoQ, раскрываемого уровнем техники, и соединения SkQ1, предложенного в рамках изобретения.
В ходе эксперимента равные концентрации SkQ и MitoQ добавлялись к культуре клеток и через 2 час подсчитывался процент живых клеток. Полученные результаты, приведенные на фиг.6, однозначно свидетельствуют о существенно меньшей токсичности SkQ. Так ЛД50 (концентрация при которой гибнет 50% клеток) для SkQ составляет около 20 мкМ, в то время как для MitoQ ЛД50 более чем в 3 раза меньше - около 7 мкМ. Эти результаты также подтверждаются другим экспериментом, в котором изучалось токсическое действие SkQ и MitoQ на клетки в присутствии перекиси водорода (в концентрации 50, 100 или 200 мкМ). Так же как и в предыдущем случае, MitoQ оказался существенно более токсичным соединением. ЛД50 на фоне 100 мкМ перекиси водорода в для MitoQ составляла 4 мкМ, в то время как для SkQ она была равна 20 мкМ, то есть не отличалась от ЛД50 чистого препарата. Следовательно, на фоне сильного окислительного стресса токсичность SkQ более чем в 5 раз меньше, чем токсичность MitoQ.
Таким образом, можно утверждать, что обеспечиваемые настоящим изобретением митохондриальные антиоксиданты, отвечающие структуре (I), обладают существенно более низкой токсичностью, по сравнению с веществами, раскрываемыми уровнем техники и заявленными в качестве митохондриальных антиоксидантов. Это различие может быть легко объяснено с учетом результатов экспериментального примера 3, где были продемонстрированы более сильные антиоксидантные и менее выраженные прооксидантные свойства SkQ по сравнению с MitoQ.
Экспериментальный пример 6: "Защитное действие соединений, отвечающих структуре (I), на различные типы человеческих клеток".
В этом примере нами установлено, что соединение, отвечающее структуре (I) с антиоксидантной функцией (митохондриально адресованный антиоксидант), защищает клетки в культуре от окислительного стресса, вызванного Н2О2.
В экспериментах использовали нормальные диплоидные фибробласты из кожи и легких человека, клетки карциномы матки человека линии HeLa и клетки лимфомы человека линии U937. Клетки культивировали в стандартных средах (DMEM или RPMI) в присутствии 10% фетальной сыворотки при 37°С в атмосфере 5% СО2. Эксперименты проводили на культурах, достигших 30-50% конфлюэнтности. H2O2 вносили однократно и анализировали клетки через 18-24 ч после добавки. Апоптотическую гибель регистрировали по конденсации хроматина и фрагментации ядер после окраски клеток Hoechst 33342 (1 мкг/мл, 15 мин). Подсчитывали по 300-500 клеток на препарат и усредняли данные по 3-5 независимым опытам. Некротическую гибель определяли по окрашиванию ядер йодистым пропидием (2 мкг/мл, 5 мин).
В предварительных экспериментах были определены дозы Н2O2 (от 50 мкМ до 200 мкМ), вызывающие значительный (60-80%) апоптоз без заметного некроза в различных типах клеток. Было подтверждено, что апоптоз во всех случаях сопровождается падением мембранного потенциала митохондрий, выходом цитохрома с из митохондрий в цитоплазму и активацией каспаз.
В экспериментах с антиоксидантом SkQ1 были определены оптимальные условия для защитного антиапоптозного действия. Показано, что инкубация клеток с 20 нМ SkQ1 в течение 6 дней значительно повышает резистентность клеток к Н2O2. Присутствие антиоксиданта в среде инкубации с H2O2 не требовалось и не усиливало защитный эффект. В частности, в опытах с фибробластами легкого человека 100 мкМ Н2O2 вызывала апоптоз в 60+/-5% клеток, а после преинкубации с 20 нМ SkQ1 это значение составляло 7+/-3%. Практически полная защита наблюдалась и при 200 мкМ H2О2 (80+1-5% апоптоза в контроле и клеток, а это значение составляло 12+1-5%. после преинкубации с 20 нМ SkQ1). При повышении дозы Н2O2 до 500 мкМ защитное действие SkQ1, но в этих условиях наблюдалась массовая некротическая гибель клеток. Аналогичные результаты были получены и с другими типами клеток.
Таким образом, антиоксиданты типа SkQ1 в чрезвычайно низких концентрациях эффективно защищают клетки различного типа от апоптоза, вызванного окислительным стрессом. Следовательно, такие соединения и композиции на их основе должны быть эффективны для предотвращения запрограммированной гибели клеток в различных тканях, органах, во всем организме. Это обнаруженное свойство SkQ может быть использовано для лечения или профилактики заболеваний, в которых эффективным терапевтическим методом является снижение окислительного стресса и/или блокирование запрограммированной клеточной смерти.
Экспериментальный пример 7: "Предотвращение распространения апоптозного сигнала соединениями, отвечающими структуре (I)"
Передача апоптозного сигнала от клеток к клеткам на значительные расстояния блокируется антиоксидантами типа SkQ1.
В экспериментах использовали клетки линии HeLa. Клетки, выращенные на покровном стекле, обрабатывали различными апоптогенами (фактор некроза опухолей (ФНО), ставроспорин, Н2O2) в течение 3 ч. Затем реагенты отмывали и помещали стекло с клетками (индуктор) в чашку Петри вплотную к стеклу, на котором клетки не были обработаны (реципиент). Через 16-18 ч совместного культивирования анализировали апоптоз на обоих стеклах, окрашивая клетки Hoechst 33342, как описано выше.
Предварительные опыты показали, что в условиях, когда на стекле-индукторе апоптоз составлял 80-90%, на стекле-реципиенте 30-50% клеток так же имели апоптозную морфологию. Контрольные эксперименты показали, что в этой модели не происходит переноса первичного апоптогена к клеткам-реципиентам. Передача апоптозного сигнала не требовала прямого контакта клеток и ослаблялась при увеличении объема среды. Добавление в среду совместной инкубации каталазы (2500 Е/мл) предотвращало апоптоз клеток-реципиентов, практически не влияя на апоптоз (вызванный ФНО или ставроспорином) клеток-индукторов. Таким образом, основным переносчиком сигнала апоптоза являлась Н2O2.
Клетки-индукторы инкубировали с 20 нМ SkQ1 в течение 6 дней, что не препятствовало развитию апоптоза, вызванного ФНО (10-50 нг/мл, с добавлением 1 мкМ эметина) или ставроспорина (2 мкМ). После совмещения стекол и совместной инкубации апоптоз, вызванный ФНО, на стекле-индукторе составлял 95+/-5% в контроле и 90+/-5% после инкубации с SkQ1. На стекле-реципиенте апоптоз в контроле составлял 37+/-4%, а в случае преинкубации индуктора с SkQ1 - 17+1-3%. Следует учитывать, что апоптоз в контрольном опыте без ФНО составлял 12+/-3% на обоих стеклах, что было связано с токсическим действием эметина. Таким образом, защитное действие SkQ1 было почти полным. Сходные результаты были получены, когда с SkQ1 проинкубировали клетки-реципиенты. Апоптоз в этом случае снижался до 16+/-4%. Аналогичный защитный эффект наблюдался и при индукции апоптоза ставроспорином.
Измерения показали, что при совместной инкубации клеток-индукторов (обработанных ФНО) и клеток-реципиентов, содержание Н2O2 в среде значительно возрастает (по сравнению с контролем, где инкубировались необработанные клетки) уже через 2-3 ч после совмещения стекол. Измеренная через 24 ч концентрация Н2O2 составила 140+/-20 нМ. Если клетки-индукторы были принкубированы с SkQ1, то концентрация Н2O2 составила лишь 40+/-10 нМ. Преинкубация клеток-реципиентов с SkQ1 не вызывала снижения концентрации H2O2.
Следовательно, антиоксиданты типа SkQ1 в чрезвычайно низких концентрациях предотвращают выработку апоптозного сигнала клетками, подвергшимися обработке апоптогенами различной природы. Эти же антиоксиданты эффективно защищают клетки-реципиенты от апоптоза вызванного сигналом, передающимся через среду от клеток-индукторов.
Передача апоптозного сигнала может лежать в основе патогенеза заболеваний (инфарктов, инсульта, посттравматические патологии), при которых участки ткани, подвергшиеся повреждению, окружены расширяющейся зоной апоптозных клеток.
Экспериментальный пример 8: "Защитное действие соединений, отвечающих структуре (I), при фотодинамическом повреждении клеток"
Антиоксиданты типа SkQ1 ингибируют токсическое действие синглетного кислорода, возникающего при фотоактивации фотосенсибилизаторов, и предотвращают некротическую гибель клеток, вызванную фотодинамическим воздействием на митохондрии.
Защиту от повреждающего действия синглетного кислорода изучали в искусственной липидной мембране, содержащей грамицидин и фталоцианиновый фотосенсибилизатор. Измерения тока ионов через грамицидиновый канал показали, что активация фото сенсибилизатора короткой вспышкой света приводит к быстрой инактивации канала. Эффект полностью снимался азидом натрия, что указывает на определяющую роль синглетного кислорода в инактивации грамицидина.
Защиту от фотодинамического действия изучали на культуре клеток HeLa. Клетки инкубировали с фотосенсибилизатором хлорметил Х-розамином (0,5 мкМ, 15 мин), который избирательно накапливался в митохондриях. Клетки освещали зеленым светом (в максимуме поглощения фотосенсибилзатора 580 нм) через объектив микроскопа Axiovert 200М (Zeiss, Германия) в течение 1-2 мин и анализировали через 5 ч. Некротическую гибель определяли по окрашиванию ядер йодистым пропидием (2 мкг/мл, 5 мин).
Было обнаружено, что SkQ1 в концентрации 1 мкМ полностью предотвращает светозависимую инактивацию грамицидина в искусственной липидной мембране, содержащей фталоцианиновый фотосенсибилизатор.
При фотодинамической обработке клеток наблюдалась 100% некротическая гибель клеток. Если клетки проинкубировали с 20 нМ SkQ1 в течение 6 дней, то некроз после фотодинамической обработки составлял 25+/-5%. В опытах, где 1 мкМ SkQ добавляли за 1 ч до освещения, некроз составлял 15+/-5%. Повышение концентрации SkQ не давало дополнительной защиты, а понижение до 0,5 мкМ заметно ослабляло эффект.
Из полученных результатов можно заключить, что антиоксиданты типа SkQ1 в чрезвычайно низких концентрациях предотвращают повреждающее действие синглетного кислорода, возникающего при освещении фотосенсибилизаторов. Если фотосенсибилизатор локализуется в митохондриях, то такие антиоксиданты эффективно защищают клетки от некроза, вызванного фотодинамической обработкой.
Экспериментальный пример 9: "Защитное действие соединений, отвечающих структуре (I), при катаракте и макулодистрофии, связанных со старением"
Увеличение продолжительности жизни в развитых странах ведет к постарению населения и сопровождается ростом заболеваемости "болезнями пожилого возраста", среди которых в наступившем столетии, по данным ВОЗ, на третье место после онкологических заболеваний и остеопороза выйдут дистрофия сетчатки и катаракта. Выявление факторов риска этих заболеваний, разработка способов их профилактики имеют огромное экономическое значение, поскольку именно они становятся основной причиной потери зрения у людей старшего возраста. В литературе активно обсуждается вопрос о влиянии характера питания на вероятность развития этих патологий органа зрения. Как показывают эпидемиологические исследования, она существенно снижается при высоком уровне потребления антиоксидантов, но, в то же время, попытки с их помощью затормозить развитие катаракты и макулодистрофии далеко не всегда оказываются успешными.
Число рекламируемых фармакологических препаратов и биологически активных добавок, обладающих свойствами антиоксидантов, растет, однако объективная оценка их эффективности, как правило, не проводится. И это не удивительно - корректную оценку результатов терапии профилактики существенно затрудняют позднее выявление и индивидуальные особенности течения этих заболеваний. В такой ситуации традиционно на помощь приходят биологические модели и, как показали наши исследования, уникальные возможности для оценки эффективности препаратов может дать использование преждевременно стареющих крыс OXYS, которая может служить универсальной моделью старения органа зрения. Эти животные были получены селекцией и инбридингом крыс Вистар, чувствительных к катарактогенному эффекту галактозы. Генетически обусловленный дефект метаболизма, выражающийся в сниженной устойчивости крыс OXYS к окислительному стрессу, приводит к таким изменениям в их организме, которые могут рассматриваться как синдром ускоренного старения. Изменения хрусталиков появляются у них к 2 мес, в 6 мес обнаруживаются у 100% крыс OXYS (у крыс Вистар - 5%), в 12 мес катарактой поражаются оба глаза. По данным офтальмоскопических, биомикроскопических и морфологических исследований, катаракта у крыс OXYS по характеру соответствует сенильной катаракте человека и развивается на фоне прогрессирующей макулодистрофии. Первые признаки заболевания регистрируются в 6 недель и достигают выраженных стадий к 4-6 месячному возрасту. По характеру проявлений картина поражений глазного дна у крыс OXYS соответствует наблюдаемым в клинической практике изменениям сетчатки пациентов с макулодистрофией - центральной инволюционной хориоретинальной дегенерацией.
Целью этой части изобретения явилось исследование влияния препарата SkQ на развитие у крыс OXYS катаракты и макулярной дегенерации.
Работа проведена на 120 крысах-самцах OXYS и Вистар. Животные содержались по 5 особей при естественном освещении и получали стандартный гранулированный корм и воду без ограничения. В возрасте 1,5 мес. после предварительного расширения зрачков 1% тропикамидом крысы были осмотрены с помощью прямого офтальмоскопа "Betta" (Германия). С 1,5 до 3 мес, в возрасте, критическом для развития выраженных изменений в органе зрения крыс OXYS, часть животных получала SkQ1 (50 нмоль на кг массы тела), КВг (50 нмоль на кг) или витамин Е - альфа-токоферола ацетат ("Уралбиофарм") по 20 мг на кг. Последний традиционно используется нами как препарат сравнения. Препараты животные получали перед едой на сухарике стандартного размера, группы интактного контроля получали только сухарик. После окончания курса животные были повторно осмотрены. Для предупреждения субъективности в оценке результатов приема препаратов все соответствующие надписи с клеток были заранее удалены.
Состояние хрусталиков оценивали в соответствии с принятой в клинической практике классификацией в баллах: 0 баллов - хрусталик прозрачный, 1 - очаговые нежные помутнения, 2 - множественные очаги помутнения и 3 - интенсивное помутнение коры или ядра хрусталика. Наличие и степень выраженности очаговых изменений в макулярной области оценивали согласно общепринятой классификации: 0 - изменения отсутствуют; 1 - 1-я стадия заболевания, при которой появляются друзы в заднем полюсе глаза, 2 - 2-я стадия, развитие в макуле и парамакулярной области проминирующего очага желтого цвета с четкими контурами размером до 0,5-1 диаметра диска (экссудативная отслойка ретинального пигментного эпителия) и 3 - 3-я стадия с обширными кровоизлияниями в макулярную область.
Результаты
Офтальмоскопический осмотр не выявил изменений в хрусталиках и макулярной области сетчатки крыс Вистар ни в 1,5, ни в 3 мес. В то же время уже в 1,5 мес. 20% глаз крыс OXYS уже имели начальную стадию катаракты (1 балл), а 10% - макулярную дегенерацию 1 стадии.
В возрасте 3 мес. в группе интактного контроля в 90% глаз у крыс OXYS выявлялись изменениями хрусталиков, в том числе в 35% глаз изменения соответствовали 2 стадии катаракты. 85% глаз интактных животных было поражено макулодистрофией, 16% из них - второй стадии (фиг.8).
В группе крыс OXYS, получавших КВг, 93% глаз имели изменения хрусталиков, при этом 57% хрусталиков (от общего количества глаз) имели изменения, соответствующие 2-й стадии катаракты. В 87% глаз крыс этой группы были выявлены изменения в макулярной области сетчатки, в 13% случаев изменения сетчатки соответствовали 2 стадии заболевания.
У животных, получавших SkQ1, изменения хрусталиков регистрировались в 46% глаз, однако все они соответствовали 1 стадии. Изменения макулярной области сетчатки выявлены у 38% крыс OXYS этой группы, по степени все они также соответствовали 1 стадии.
У крыс, получавших витамин Е, в возрасте 3 мес в 58% глаз регистрировались изменения хрусталиков, 12% глаз - с изменениями, соответствующими 2 стадии заболевания. Изменения макулярной области сетчатки выявлены у 54% крыс OXYS этой группы, в том числе в 8% глаз заболевание соответствовало 2 стадии макулодистрофии. В графическом виде результаты этих экспериментов приведены на фиг.7-12.
Таким образом, этот экспериментальный пример убедительно демонстрирует эффективность использования SkQ1 в профилактике возрастных заболеваний органа зрения, а, следовательно, и эффективность митохондриальных антиоксидантов, отвечающих структуре (I), для борьбы с заболеваниями, связанными с окислительным стрессом.
Экспериментальный пример 10: Защитное действие митохондриального антиоксиданта SkQ1 на сердечную мышцу.
Известно, что активные формы кислорода (АФК) в малых концентрациях оказывают на сердечную мышцу регуляторное, а в высоких - токсическое действие. При испытании препарата SkQ1 обнаружена его способность модулировать действие АФК. Опыты проведены на изолированном сердце крыс, получавших препарат внутривенно или с пищей (50 мкг/кг). После внутривенного введения сердце брали в опыт через 2 часа, а после добавления к пище - через 2 недели. Сердце перфузировали ретроградно по стандартной методике раствором Кребса с постоянной скоростью, регистрируемое при этом перфузионное давление (ПД) характеризовало тонус коронарных сосудов. Измеряли также спонтанную частоту сокращений и изоволюмическое давление в левом желудочке. Регистрировали изменение указанных показателей при 40-минутном введении 150 мкМ Н2O2 - стандартного генератора АФК.
В серии с однократным внутривенным введением SkQ1 после двукратного увеличения скорости потока перфузионное давление в обеих группах повысилось примерно одинаково (120-125 мм рт.ст.). Введение Н2O2 оказывало обычное двухфазное действие - начальное снижение ПД сменялось его повышением. В контрольной группе минимальный уровень ПД составил 95+5 мм рт.ст., а в группе получавших SkQ1 - 77+2 мм рт.ст. (р<0,02). Максимальное снижение ПД по сравнению с исходным уровнем до введения в среднем составило 28+3 мм рт.ст и -43+5 мм рт.ст., соответственно (р<0,05). В серии с длительным приемом SkQ максимальное снижение ПД в среднем в контрольной группе составило 21+5 мм рт.ст., а в группе получавших SkQ1 38+5 мм рт.ст. (р<0,03). Достоверная разница между группами сохранялась и в конце введения Н2O2 5+6 мм рт.ст. и 29+6 мм рт.ст. соответственно (р<0,03). Таким образом, как однократное, так и длительное применение SkQ1 потенцировало начальный вазодилататорный эффект Н2O2-. Кроме того, при длительном применении SkQ1 уменьшалось токсическое действие Н2O2 на коронарные сосуды.
Таким образом, можно заключить, что препарат SkQ1 потенцирует регуляторное и уменьшает токсическое действие АФК на коронарные сосуды изолированного сердца. Это действие SkQ1 может быть использовано для борьбы с сердечно-сосудистыми заболеваниями.
Экспериментальный пример 11: "Действие соединений, отвечающих структуре (I), на морфологию и подвижность нормальных и опухолевых клеток"
Антиоксиданты типа SkQ1 вызывают морфологические изменения клеток в культуре, что сопровождается уменьшением их подвижности и усилением прикреплености клеток к подложке.
Нормальные фибробласты кожи и легких человека и клетки HeLa культивировали при низкой плотности клеток (20-30% конфлюэнтности). Морфометрию клеток проводили, измеряя площадь клеток, дисперсию и элонгацию. Структуры цитоскелета изучали, окрашивая фиксированные препараты клеток фаллоидин-родамином (актиновые филаменты), антителами на тубулин (микротрубочки) и винкулин (контакты с подложкой). Подвижность клеток изучали с помощью микровидеосъемки.
Фибробласты, проинкубированные с 20 нМ SkQ1 в течение 6 дней, имели резко измененную морфологию. Средняя площадь клеток возрастала в 2,9 раза, индекс дисперсии снижался в 2,4 раза, а индекс элонгации уменьшался с 2,34 до 0,69. Содержание актиновых филаментов возрастало в 3,7 раза, так что их плотность на единицу площади составляла 136% от контроля. Актиновые филаменты были собраны в мощные пучки - стресс-фибриллы. Значительно возрастало количество контактов с подложкой. Подвижность фибробластов резко падала. Все наблюдавшиеся изменения не замедляли пролиферацию фибробластов. Аналогичные измерения, проведенные на клетках HeLa, показали, что их средняя площадь возрастает в 2,6 раза (без изменения параметров дисперсии и элонгации), а содержание актиновых филаментов растет так, что средняя плотность сохраняется.
Таким образом, морфологические изменения клеток, а также уменьшение их подвижности под действием антиоксидантов типа SkQ1 указывает на снижение способности клеток к распространению и метастазированию.
Экспериментальный пример 12: "Цитотоксическое действие соединений, отвечающих структуре (I), на опухолевые клетки"
Соединения, отвечающие структуре (I), и несущие прооксидантные и белок-модифицирующие функции, могут вызывать открытие неселективной поры в митохондриях, набухание митохондрий, выход цитохрома с из межмембранного пространства в цитоплазму и апоптоз. Направленные в митохондрии ингибиторы антиапоптозных белков могут усиливать апоптоз, вызванный этими соединениями и известными препаратами химиотерапии.
Показано, что прооксиданты и вещества сшивающие вицинальные дитиолы (фениларсен оксид, ФАО) индуцируют открытие неселективной поры и набухание митохондрий как в бесклеточной системе, так и в клетках. В частности, в опытах на лимфоцитах тимуса индукция поры ФАО приводила к выходу ионов Са2+ из митохондрии в цитоплазму. В этих клетках с помощью электронной микроскопии были видны митохондрии с набухшим матриксом. ФАО обладает высокой неспецифической токсичностью, что не позволяет исследовать механизм выхода цитохрома с и связанного с этим апоптоза. В ряде клеточных моделей показано, что агенты, индуцирующие пору, вызывают выход цитохрома с в цитоплазму и апоптоз. Можно полагать, что адресная доставка ФАО и подобных соединений в митохондрии уменьшит их неспецифическую токсичность и позволит индуцировать апоптоз в клетках-мишенях. Ранее было показано, что соединения, несущие положительный заряд (производные фосфония и родамина), накапливаются и удерживаются в митохондриях быстрорастущих опухолевых клеток значительно эффективнее, чем в нормальных клетках. Все это позволяет рассчитывать на получение эффективных и селективных антираковых препаратов на основе соединений, отвечающих структуре (I).
Экспериментальный пример 13: "Антиопухолевое действие соединений, отвечающих структуре (I), на примере асцитной карциномы"
Для проверки способности соединений, отвечающих структуре (I), помогать при онкологических заболеваниях было проверено действие вещества SkQ1 на мышей с искусственно привитой асцитной карциномой Эрлиха - обычную модель развития острого онкологического заболевания.
SkQ1 давался мышам линии NMRI вместе с питьем в различных концентрациях - 10, 1, или 0,1 мкМ. Результаты (выживаемость мышей с предварительно привитой асцитной карциномой) приведены на фиг.13. Отрицательным контролем в эксперименте служила вода, положительным - известный антираковый препарат цисплатин.
Полученные результаты демонстрируют противоопухолевое действие митохондриально адресованных антираковых препаратов, отвечающих структуре (I).
Экспериментальный пример 14: "Фотодинамическое действие соединений, избирательно направленных в митохондрии"
Соединения, отвечающие структуре (I) и несущие фотосенсибилизаторные функции, могут вызывать выход цитохрома с из межмембранного пространства в цитоплазму и апоптоз.
Показано, что прототипы фотосенсибилизаторов, несущие положительный заряд (родамины, хлорметил-Х-розамин), накапливаются в митохондриях и при умеренном освещении вызывают апоптоз в опухолевых клетках различного типа. Аналогичные молекулы, не адресованные в митохондрии, вызывают при освещении преимущественно некротическую гибель (что сопряжено с потенциальными осложнениями воспалительной природы при фотодинамической терапии). Исследованные прототипы не используются в практике, т.к. имеют низкий квантовый выход и максимум поглощения в зеленой области спектра. Применяемые в клинике фотосенсибилизаторы на основе производных протопорфирина и фталоцианинов имеют высокий квантовый выход, максимум поглощения в красной области (что повышает эффективность воздействия на углубленные ткани), но накапливаются в основном в лизосомах и индуцируют некроз. Адресная доставка подобных молекул в митохондрии в составе соединений, отвечающих структуре (I), позволит индуцировать апоптоз опухолевых клеток светом низкой интенсивности и в красной области спектра.
Показано, что соединения, несущие положительный заряд (производные родамина и фосфония), накапливаются и удерживаются в митохондриях быстрорастущих опухолей в значительно большей степени, чем в клетках нормальных тканей. Можно полагать, что фотосенсибилизаторы на основе соединений, отвечающих структуре (I), будут избирательно накапливаться в опухолях, что повысит их эффективность при использовании в фотодинамической терапии.
Экспериментальный пример 15: Защитное действие митохондриального антиоксиданта SkQ1 на клетки грибов на примере клеток дрожжей Yarrowia lipolytica.
Нами было показано, что SkQ1, митохондриальный антиоксидант отвечающий структуре (I) частично предотвращает гибель клеток Yarrowia lipolytica, вызванную перекисью водорода в концентрации 10 мМ.
Как видно из фиг.14, эффект циклогексимида Д, токоферола и SkQ сопоставимы по значению. Действие циклогексимида было продемонстрировано нами ранее, и оно объясняется необходимостью нормального функционирования синтеза белка в клетках для протекания апоптоза. Концентрация альфа-токоферола была взята равной 25 мкМ, поскольку именно эта концентрация давала максимальный эффект по защите от феромон- и амиодарон-индуцированной программируемой клеточной смерти на клетках Saccharomyces cerevisiae (Pozniakovsky AI, Knorre DA, Markova 0V, Hyman AA, Skulachev VP, Severin FF., 2005, J Cell Biol. 168(2):257-69). Такая концентрация оказалась настолько же эффективна, насколько эффективны на порядок меньшая концентрация SkQ1. Полученные результаты свидетельствуют о полезности митохондриально адресованных антиоксидантов для клеток грибов, о том, что вещества типа SkQ1 можно применять для защиты промышленных продуцентных культур дрожжей, других грибов и микроорганизмов.
Экспериментальный пример 16: Действие митохондриального антиоксиданта SkQ1 на развитие высших растений.
При выращивании расчеренкованных растений на искусственной агаризованной среде MS с добавлением 1 мкМ SkQ1 (3 растения) и без добавления этого вещества в контрольных растениях (3 шт). Растения (черешки) помещались в 50 мл пробирки с прозрачными стенками и в течение 3-х недель находились в климокамере с постоянной температурой 27 градусов, периодическим освещением (14 часов света, 10 часов темноты). Далее растения подвергались темновому стрессу - в течение 7 дней они находились в полной темноте.
При этом контрольные растения обесцветились, а растения, выросшие на среде с добавлением SkQ1 сохранили зеленую окраску. Далее растения были возвращены в нормальный световой режим и выращивались еще 20 дней. В результате растения, выращиваемые на среде с добавлением SkQ1 более чем в 3 раза превосходили по размерам контрольные.
Этот экспериментальный пример демонстрирует полезное действие митохондриально адресованных антиоксидантов на растения в целом. Следовательно, такие соединения могут быть применены для выращивания растений на искусственных средах (необходимая стадия при получении генетически модифицированных растений), для увеличения жизнеспособности культур растительных клеток, в сельском хозяйстве для увеличения жизнеспособности сельскохозяйственных культур.
Специалисту в данной области должно быть понятно, что на основании этих примеров, а также описания заявки могут быть сделаны очевидные дополнения или изменения, которые позволят получить все заявленные соединения и композиции, полезные для целей данного изобретения. Все эти очевидные дополнения и изменения входят в объем притязаний по данному изобретению, отраженный в формуле изобретения, приведенной далее.
Claims (26)
1. Композиция, содержащая [терапевтически] эффективное количество соединения формулы (I) для адресной доставки биологически активного вещества в митохондрии клетки
где А - эффекторная группа, представляющая собой
а) антиоксидант (II)
и/или его восстановленная форма,
где m - целое число 1-3; Y - одинаковые или разные заместители, представляющие собой низший алкил или низший алкокси; или два вицинальных Y связаны между собой таким образом, что образуют структуру
и/или его восстановленную форму,
где R1 и R2 одинаковые или разные заместители, независимо друг от друга представляющие собой низший алкил или низший алкокси;
при условии, что антиоксидант способен взаимодействовать с ферментами дыхательной цепи митохондрий таким образом, чтобы нейтрализовывалась его радикальная форма, образующаяся после взаимодействия с СР и АФК, и регенерировалась исходная (полностью восстановленная) форма; или
б) прооксидант; или
в) индуктор апоптоза или ингибитор антиапоптозных белков митохондриальной локализации; или
г) фотосенсибилизатор;
L - линкерное звено, представляющее собой
а) простую или разветвленную углеводородную цепь, не обязательно замещенную одним или более заместителем и при необходимости содержащую одну или более двойную или тройную связь;
б) природную изопреноидную цепь;
n - целое число 1-20;
В - представляет собой
а) Скулачев-ион Sk:
Sk+Z-,
где Sk - липофильный катион, Z - фармакологически приемлемый анион;
б) заряженный гидрофобный пептид из 2-20 аминокислот;
за исключением соединений, в которых
А представляет собой одно из следующих соединений: а) убихинон (то есть 2-метил-4,5-диметокси-3,6-диоксо-1,4-циклогексадиенил), б) токоферол, в) миметик супероксиддисмутазы, г) эбселен, при этом L представляет собой дивалентный децил, или дивалентный пентил, или дивалентный пропил, а В представляет собой трифенилфосфоний;
или его фармакологически приемлемые соли, сольваты, изомеры и фармакологически приемлемый носитель.
2. Композиция по п.1, в которой антиоксидант представляет собой 2,3-диметил-1,4-бензохинол (пластохинон) или его восстановленную форму (пластохинол).
3. Композиция по п.1, в которой индуктор апоптоза представляет собой фениларсеноксид.
4. Композиция по п.1, в которой ингибитором антиапоптозных белков митохондриальной локализации является АВТ737.
5. Композиция по п.1, в которой прооксидантом является паракват, менадиол, органические гидроперикисные соединения.
6. Композиция по п.1, в которой фотосенсибилизатор представляет собой фталоцианин, содержащий или не содержащий металлический заместитель и его комплексы; порфирин и его производные, в частности, BDP-Mac или BDP-MaD; или фоскан (mTHPC).
7. Композиция по п.1, в которой указанный Sk - липофильный катион, представляет собой трифенилфосфоний, трифениламмоний, трибутиламмоний.
8. Композиция по п.1, в которой указанный Sk представляет собой родамин G.
9. Применение композиции по любому из пп.1-8 для снижения количества свободных радикалов и активных форм кислорода в клетке.
10. Применение по п.9, когда клетка находится в организме человека или другого млекопитающего; является растительной клеткой и/или находится в составе растения на любой стадии его развития, в том числе и генетически модифицированного; находится в культуре растительных клеток или протопластов; является грибковой клеткой и/или находится в культуре грибковых клеток; в том числе для увеличения жизнеспособности и/или продуктивности клеток-продуцентов препаратов, фармакологически применимых белков, пептидов, антител.
11. Применение по п.9, в условиях, когда клетка является нормальной, или раковой, или стволовой клеткой млекопитающего, в том числе человека, находится в культуре клеток, в том числе и культуре нормальных, раковых, стволовых клеток; в том числе для увеличения жизнеспособности и/или продуктивности клеток-продуцентов препаратов; фармакологически применимых белков, пептидов, антител.
12. Применение по любому из пп.9-11 для лечения пациента или животного, для которого полезным является снижение количества свободных радикалов и активных форм кислорода в организме.
13. Применение по любому из пп.9-11 для защиты здоровых клеток от повреждения во время химиотерапии, радиотерапии или фотодинамической терапии рака; во время обеззараживания крови или другой субстанции, содержащей здоровые клеточные элементы при помощи свободных радикалов, активных форм кислорода или веществ их образующих.
14. Применение по любому из пп.9-11 для косметических процедур, для заживления хирургических швов, предотвращения поражения здоровых тканей во время хирургических операций, заживления или предотвращения ожогового поражения тканей, против воспалений, для сохранения трансплантационного материала, для борьбы с отторжением трансплантируемых тканей и органов.
15. Применение композиции по любому из пп.1-8 для борьбы с онкологическими заболеваниями, подавления и предотвращения метастазирования и ангиогенеза, уничтожения раковых клеток; для использования в химиотерапии или фотодинамической терапии рака; для использования в комбинации с другими препаратами химиотерапии, фотодинамической терапии, в сочетании с радиотерапией рака.
16. Применение по п.15 для индукции или облегчения индукции апоптоза, повышения чувствительности к индукторам апоптоза в клетках раковой или другой опухоли, а также в других клетках, где это необходимо.
17. Применение любой из композиций по пп.1-8 для увеличения продолжительности жизни организма, борьбы со старением; в том числе применение в комбинации с гормональной терапией, в частности в комбинации с гормонами эпифиза, щитовидной железы, в том числе с дигидроэпиандростероном, мелатонином.
18. Соединение общей формулы (I)
где А - эффекторная группа, представляющая собой
а) антиоксидант
и/или его восстановленная форма,
где m - целое число 1-3; Y - одинаковые или разные заместители, представляющие собой низший алкил или низший алкокси; или два вицинальных Y связаны между собой таким образом, что образуют структуру
и/или его восстановленную форму,
где R1 и R2 одинаковые или разные заместители, независимо друг от друга представляющие собой низший алкил или низший алкокси;
при условии, что антиоксидант способен взаимодействовать с ферментами дыхательной цепи митохондрий таким образом, чтобы нейтрализовывалась его радикальная форма, образующаяся после взаимодействия с СР и АФК, и регенерировалась исходная (полностью восстановленная) форма; или
б) прооксидант; или
в) индуктор апоптоза или ингибитор антиапоптозных белков митохондриальной локализации; или
г) фотосенсибилизатор;
L - линкерное звено, представляющее собой:
а) простую или разветвленную углеводородную цепь, не обязательно замещенную одним или более заместителем и при необходимости содержащую одну или более двойную или тройную связь;
б) природную изопреноидную цепь;
n - целое число 1-20;
В - представляет собой
а) Скулачев-ион Sk:
Sk+Z-,
где Sk - липофильный катион;
Z - фармакологически приемлемый анион;
б) заряженный гидрофобный пептид из 2-20 аминокислот, за исключением соединений, в которых А представляет собой одно из следующих соединений: а) убихинон (то есть 2-метил-4,5-диметокси-3,6-диоксо-1,4-циклогексадиенил), б) токоферол, в) миметик супероксиддисмутазы, г) эбселен, при этом L представляет собой дивалентный децил, или дивалентный пентил, или дивалентный пропил, а В представляет собой трифенилфосфоний;
или его фармакологически приемлемые соли, сольваты, изомеры.
19. Соединение по п.18, где индуктор апоптоза представляет собой фениларсеноксид, и ингибитором антиапоптозных белков митохондриальной локализации является АВТ737.
20. Соединение по п.18, где фотосенсибилизатор представляет собой фталоцианин, содержащий или не содержащий металлический заместитель и его комплексы; порфирин и его производные, в частности BDP-Mac или BDP-МаD; или фоскан (mTHPC).
21. Соединение по п.18, где указанный Sk - липофильный катион, представляет собой родамин G, трифенилфосфоний, трифениламмоний.
23. Соединение по п.18, где L - дивалентный децил.
24. Соединение по п.18, где L - дивалентный пентил.
25. Соединение по п.18, где Sk - остаток родамина G.
26. Способ синтеза соединения по п.18, включающий в себя следующие стадии:
а) окисление гидрохинона структуры 1.1 подходящим окислителем с образованием бензохинона 1.2
б) образование производного 1.3
в) присоединение остатка В-М к соединению 1.3 с образованием целевого продукта IA
где Y, L, В, m, n - такие, как указано выше; V - Br, Cl, I или ОН; М - уходящая группа.
Priority Applications (13)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2005132217/15A RU2318500C2 (ru) | 2005-10-18 | 2005-10-18 | Способ воздействия на организм путем адресной доставки биологически активных веществ в митохондрии, фармацевтическая композиция для его осуществления и соединение, применяемое для этой цели |
KR1020087009246A KR20080059228A (ko) | 2005-10-18 | 2006-07-24 | 미토콘드리아로의 생물학적 활성물질의 표적 전달에 의해유기체에 작용하는 방법, 상기 방법을 수행하기 위한 약제조성물, 및 목적을 위해 이용되는 화합물 |
CA002626305A CA2626305A1 (en) | 2005-10-18 | 2006-07-24 | Method of acting upon organism by targeted delivery of biologicaly active substances into m itochondria, pharmaceutical composition for carrying out said method, and compound usedfor the purpose |
BRPI0617417-5A BRPI0617417A2 (pt) | 2005-10-18 | 2006-07-24 | composiÇço, uso da composiÇço, composto, mÉtodo para a sÍntese do composto |
AU2006302751A AU2006302751A1 (en) | 2005-10-18 | 2006-07-24 | Method of acting upon organism by targeted delivery of biologicaly active substances into m itochondria, pharmaceutical composition for carrying out said method, and compound used for the purpose |
CNA2006800388754A CN101300014A (zh) | 2005-10-18 | 2006-07-24 | 通过靶向转运生物活性物质到线粒体中而对有机体产生作用的方法、实现该方法的药物组合物及用于此目的的化合物 |
EP06784084A EP1937277A1 (en) | 2005-10-18 | 2006-07-24 | Method of acting upon organism by targeted delivery of biologicaly active substances into m itochondria, pharmaceutical composition for carrying out said method, and compound used for the purpose |
JP2008536535A JP2009511626A (ja) | 2005-10-18 | 2006-07-24 | 生物活性組成物をミトコンドリアへ標的化導入することにより、有機組織に作用する方法、該方法を行うための医薬組成物、及びそのために用いられる化合物 |
MX2008004939A MX2008004939A (es) | 2005-10-18 | 2006-07-24 | Metodo para influir sobre un organismo por distribucion dirigida de sustancias biologicamente activas en mitocondrias, composicion farmaceutica para llevar a cabo el metodo y compuesto usado para el proposito. |
PCT/RU2006/000394 WO2007046729A1 (en) | 2005-10-18 | 2006-07-24 | Method of acting upon organism by targeted delivery of biologicaly active substances into m itochondria, pharmaceutical composition for carrying out said method, and compound used for the purpose |
US11/972,437 US9328130B2 (en) | 2005-10-18 | 2008-01-10 | Method of treating organism by biologically active compounds specifically delivered into mitochondria, pharmaceutical composition required for the use of the method and a compound applicable for this purpose |
ZA200803350A ZA200803350B (en) | 2005-10-18 | 2008-04-15 | Method of acting upon organism by targeted delivery of biologically active substances into mitochondria, pharmaceutical composition for carrying out said method, and compound used for the purpose |
IL190951A IL190951A0 (en) | 2005-10-18 | 2008-04-17 | Method of acting upon organism by targeted delivery of biologicaly active substances into mitochondria, pharmaceutical composition for carrying out said method, and compound used for the purpose |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2005132217/15A RU2318500C2 (ru) | 2005-10-18 | 2005-10-18 | Способ воздействия на организм путем адресной доставки биологически активных веществ в митохондрии, фармацевтическая композиция для его осуществления и соединение, применяемое для этой цели |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2005132217A RU2005132217A (ru) | 2007-04-27 |
RU2318500C2 true RU2318500C2 (ru) | 2008-03-10 |
Family
ID=37962744
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2005132217/15A RU2318500C2 (ru) | 2005-10-18 | 2005-10-18 | Способ воздействия на организм путем адресной доставки биологически активных веществ в митохондрии, фармацевтическая композиция для его осуществления и соединение, применяемое для этой цели |
Country Status (13)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US9328130B2 (ru) |
EP (1) | EP1937277A1 (ru) |
JP (1) | JP2009511626A (ru) |
KR (1) | KR20080059228A (ru) |
CN (1) | CN101300014A (ru) |
AU (1) | AU2006302751A1 (ru) |
BR (1) | BRPI0617417A2 (ru) |
CA (1) | CA2626305A1 (ru) |
IL (1) | IL190951A0 (ru) |
MX (1) | MX2008004939A (ru) |
RU (1) | RU2318500C2 (ru) |
WO (1) | WO2007046729A1 (ru) |
ZA (1) | ZA200803350B (ru) |
Cited By (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2010056145A1 (ru) * | 2008-11-12 | 2010-05-20 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Митотехнология" | Способ умеренного повышения протонной проводимости биологических мембран при помощи митохондриально- адресованных делокализованных катионов |
US8349902B2 (en) | 2007-01-29 | 2013-01-08 | Mitotech Sa | Pharmaceutical compositions useful for preventing and treating oncological diseases |
US8518915B2 (en) | 2007-06-29 | 2013-08-27 | Mitotech Sa | Use of mitochondrially-addressed compounds for preventing and treating cardiovascular diseases |
US8557733B2 (en) | 2006-10-20 | 2013-10-15 | Mitotech S.A. | Composition for regenerating and stimulating growth of plants and for adapting plants to different stress factors |
US8658624B2 (en) | 2006-10-20 | 2014-02-25 | Mitotech Sa | Pharmaceutical compositions for preventing and treating eye pathologies |
RU2527519C2 (ru) * | 2010-06-24 | 2014-09-10 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Митотех" | Мягкие катионные митохондриальные разобщители |
US9233903B2 (en) | 2009-11-13 | 2016-01-12 | Mitotech Sa | Pharmaceutical substances on the basis of mitochondria-addressed antioxidants |
RU2593956C2 (ru) * | 2011-08-04 | 2016-08-10 | Министерство Сельского Хозяйства И Сельскохозяйственной Продукции Ее Величества Королевы Канады По Праву | Органоидно-направленные наноносители |
US9427444B2 (en) | 2007-01-29 | 2016-08-30 | Mitotech Sa | Pharmaceutical and cosmetic compositions for accelerated healing of wounds and other surface damages |
US9439916B2 (en) | 2007-04-11 | 2016-09-13 | Mitotech Sa | Composition for decelerating the aging in the organism and for extending the life time thereof and the use of said composition |
US9724313B2 (en) | 2009-06-10 | 2017-08-08 | Mitotech Sa | Pharmaceutical composition for use in medical and veterinary ophthalmology |
RU2637279C2 (ru) * | 2015-12-25 | 2017-12-01 | Сергей Петрович Кречетов | Способ фотодинамической терапии |
RU2703952C2 (ru) * | 2015-05-20 | 2019-10-22 | Иммунворк Инк. | Молекулярные конструкции с нацеливающими и эффекторными элементами и способы их применения |
RU2727901C1 (ru) * | 2016-12-01 | 2020-07-24 | Спрингтайд Венчерс С.Р.О. | Соединения для лечения нарушений, связанных со старением |
Families Citing this family (32)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP2066680B1 (en) * | 2006-09-28 | 2012-08-08 | Medical Research Council | Triphenylphosphonium thionitrite nitric oxide donors |
US9045505B2 (en) * | 2006-09-28 | 2015-06-02 | University Of Otago | Nitric oxide donors |
JP5616798B2 (ja) * | 2008-03-14 | 2014-10-29 | スティーブン・ジョン・ラルフStephen John RALPH | ミトコンドリア由来の抗ガン化合物 |
CN102046178B (zh) | 2008-04-01 | 2013-05-08 | 安蒂博汀医药公司 | 用于皮肤护理的组合物和方法 |
US10039722B2 (en) | 2008-10-14 | 2018-08-07 | Bioelectron Technology Corporation | Treatment of oxidative stress disorders including contrast nephropathy, radiation damage and disruptions in the function of red cells |
WO2011162633A1 (ru) * | 2010-06-24 | 2011-12-29 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Mиtotex" | Мягкие катионные митохондриальные разобщители |
US20130288985A1 (en) * | 2010-07-15 | 2013-10-31 | The Schepens Eye Research Institute Inc. | Compositions and methods of treatment of corneal endothelium disorders |
EP2600857A4 (en) * | 2010-08-06 | 2014-06-11 | Edison Pharmaceuticals Inc | TREATMENT OF OCHONDRIAL DISEASES WITH NAPHTHOCHINONES |
WO2012110435A1 (en) * | 2011-02-14 | 2012-08-23 | Basf Se | Bio process additives |
JO3733B1 (ar) * | 2011-04-05 | 2021-01-31 | Bayer Ip Gmbh | استخدام 3,2-دايهيدروايميدازو[1, 2 -c]كوينازولينات مستبدلة |
CA2837437C (en) | 2011-06-03 | 2020-12-15 | Mitotech Sa | Oral formulations of mitochondrially-targeted antioxidants and their preparation and use |
GB201117095D0 (en) * | 2011-09-30 | 2011-11-16 | Univ Exeter The | Novel hydrogen sulfide releasing compounds |
EP2671574A1 (en) | 2012-06-04 | 2013-12-11 | VitaK B.V. | Use of vitamin K to decrease allograft failure and patient mortality after organ transplantation |
US20150216820A1 (en) | 2012-09-07 | 2015-08-06 | Edison Pharmaceuticals, Inc. | Quinone derivatives for use in the modulation of redox status of individuals |
US20140329776A1 (en) | 2012-09-21 | 2014-11-06 | Mitotech S.A. | Mitochondria-Targeted Antioxidants for Treatment of Age-Related Brain Disorders |
KR101490580B1 (ko) * | 2013-02-15 | 2015-02-05 | 경북대학교 산학협력단 | 미토콘드리아 타겟팅용 펩타이드 |
WO2015063553A2 (en) * | 2013-04-11 | 2015-05-07 | Mitotech S.A. | Mitochondrially-targeted timoquinones and toluquinones |
EA034726B1 (ru) * | 2014-02-25 | 2020-03-13 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Митотех" | Косметическая композиция на основе митохондриально-адресованных антиоксидантов |
US9919049B2 (en) | 2014-06-02 | 2018-03-20 | University Of Exeter | Combinations of a photosensitizer with a hydrogen sulfide donor, thioredoxin inhibitor or nitroxide for use in photodynamic therapy |
WO2016154545A1 (en) * | 2015-03-26 | 2016-09-29 | Petrov Anton Dmitrievich | Contact lenses and other eye-contacting matrices carrying mitochondrially-targeted antioxidants |
CN105506053B (zh) * | 2015-12-30 | 2018-06-19 | 北京农学院 | 一种草莓果肉细胞凋亡的检测方法 |
US20210246144A1 (en) | 2017-06-26 | 2021-08-12 | Mitotech S.A. | A set of mitochondria-targeted compounds |
RU2020120686A (ru) * | 2017-11-24 | 2021-12-24 | Лунелла Байотек, Инк. | Соединения производных трифенилфосфония для эрадикации раковых стволовых клеток |
US20210121570A1 (en) * | 2018-06-21 | 2021-04-29 | Georgios VOUGIOUKALAKIS | Method |
CN109232216A (zh) * | 2018-11-11 | 2019-01-18 | 苏州怡彼得生物技术有限公司 | 一种线粒体靶向抗氧化剂skq1二季膦盐衍生物的合成方法 |
CN109232219A (zh) * | 2018-11-11 | 2019-01-18 | 苏州怡彼得生物技术有限公司 | 一种线粒体靶向抗氧化剂skq1中间体2,3-二甲基-对苯醌的合成方法 |
CN110872220B (zh) * | 2019-12-19 | 2022-04-26 | 苏州怡彼得生物技术有限公司 | 一种靶向抗氧化剂skq1中间体2,3-二溴-5,6-二甲基-对苯醌的合成方法 |
CN111117379A (zh) * | 2020-01-13 | 2020-05-08 | 广州铭汇建设工程有限公司 | 管道防锈涂料 |
EP4210695A1 (en) | 2020-09-09 | 2023-07-19 | Social Profit Network | Methods and compositions for delivery of biotin to mitochondria |
CN112341493B (zh) * | 2020-10-21 | 2023-08-15 | 重庆医药高等专科学校附属第一医院(重庆市职业病防治院重庆市第六人民医院重庆市中毒控制中心) | 一种基于三苯基膦修饰的线粒体靶向褪黑素及其制备方法和应用 |
CN113480528B (zh) * | 2021-08-16 | 2023-05-30 | 四川大学华西医院 | 一种专一靶向线粒体且高效产生单线态氧的咪唑类光敏剂及其制备方法 |
WO2023194946A1 (en) * | 2022-04-06 | 2023-10-12 | Kashiv Biosciences, Llc | An improved cell culture process for production of protein |
Family Cites Families (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6331532B1 (en) * | 1998-11-25 | 2001-12-18 | University Of Otago | Mitochondrially targeted antioxidants |
JP4590523B2 (ja) * | 1997-11-25 | 2010-12-01 | アンティポディーン ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド | ミトコンドリアを標的とする抗酸化剤 |
CA2354743A1 (en) * | 2001-08-07 | 2003-02-07 | University Of Otago | Mitochondrially targeted antioxidants |
US6984636B2 (en) * | 2002-08-12 | 2006-01-10 | Medical Research Council | Mitochondrially targeted antioxidants |
RU2487880C2 (ru) * | 2003-08-22 | 2013-07-20 | Антиподин Фармасьютикалз Инк. | Направленно вводимые в митохондрии производные убихинона в качестве антиоксидантов для снижения окислительного стресса, фармацевтическая композиция, способ получения, способ лечения |
-
2005
- 2005-10-18 RU RU2005132217/15A patent/RU2318500C2/ru active IP Right Revival
-
2006
- 2006-07-24 CA CA002626305A patent/CA2626305A1/en not_active Abandoned
- 2006-07-24 EP EP06784084A patent/EP1937277A1/en active Pending
- 2006-07-24 JP JP2008536535A patent/JP2009511626A/ja active Pending
- 2006-07-24 AU AU2006302751A patent/AU2006302751A1/en not_active Abandoned
- 2006-07-24 MX MX2008004939A patent/MX2008004939A/es not_active Application Discontinuation
- 2006-07-24 BR BRPI0617417-5A patent/BRPI0617417A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2006-07-24 CN CNA2006800388754A patent/CN101300014A/zh active Pending
- 2006-07-24 KR KR1020087009246A patent/KR20080059228A/ko not_active Application Discontinuation
- 2006-07-24 WO PCT/RU2006/000394 patent/WO2007046729A1/en active Application Filing
-
2008
- 2008-01-10 US US11/972,437 patent/US9328130B2/en active Active
- 2008-04-15 ZA ZA200803350A patent/ZA200803350B/xx unknown
- 2008-04-17 IL IL190951A patent/IL190951A0/en unknown
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
FILIPOVSKA A et al., Synthesis and characterization of a triphenylphosphonium-conjugated peroxidase mimetic. Insights into the interaction of ebselen with mitochondria, J Biol Chem. 2005 Jun 24; 280(25):24113-26. Epub 2005 Apr 14, найдено в PubMed, PMID: 15831495. ADLAM VJ et al., Targeting an antioxidant to mitochondria decreases cardiac ischemia-reperfusion injury, FASEB J. 2005 Jul; 19(9):1088-95, найдено в PubMed, PMID: 15985532. * |
Jauslin ML et al., Mitochondria-targeted antioxidants protect Friedreich Ataxia fibroblasts from endogenous oxidative stress more effectively than untargeted antioxidants, FASEB J. 2003 Oct; 17(13): 1972-4. Epub 2003 Aug 15, найдено в PubMed, PMID: 12923074. * |
Cited By (16)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US8557733B2 (en) | 2006-10-20 | 2013-10-15 | Mitotech S.A. | Composition for regenerating and stimulating growth of plants and for adapting plants to different stress factors |
US8658624B2 (en) | 2006-10-20 | 2014-02-25 | Mitotech Sa | Pharmaceutical compositions for preventing and treating eye pathologies |
US9408859B2 (en) | 2007-01-29 | 2016-08-09 | Mitotech S.A. | Pharmaceutical compositions useful for preventing and treating cancer |
US9427444B2 (en) | 2007-01-29 | 2016-08-30 | Mitotech Sa | Pharmaceutical and cosmetic compositions for accelerated healing of wounds and other surface damages |
US8349902B2 (en) | 2007-01-29 | 2013-01-08 | Mitotech Sa | Pharmaceutical compositions useful for preventing and treating oncological diseases |
US9439916B2 (en) | 2007-04-11 | 2016-09-13 | Mitotech Sa | Composition for decelerating the aging in the organism and for extending the life time thereof and the use of said composition |
US8518915B2 (en) | 2007-06-29 | 2013-08-27 | Mitotech Sa | Use of mitochondrially-addressed compounds for preventing and treating cardiovascular diseases |
US9308214B2 (en) | 2008-11-12 | 2016-04-12 | Mitotech S.A. | Method for moderately increasing the proton conductivity of biological membranes with the aid of mitochondria-targeted delocalized cations |
WO2010056145A1 (ru) * | 2008-11-12 | 2010-05-20 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Митотехнология" | Способ умеренного повышения протонной проводимости биологических мембран при помощи митохондриально- адресованных делокализованных катионов |
US9724313B2 (en) | 2009-06-10 | 2017-08-08 | Mitotech Sa | Pharmaceutical composition for use in medical and veterinary ophthalmology |
US9233903B2 (en) | 2009-11-13 | 2016-01-12 | Mitotech Sa | Pharmaceutical substances on the basis of mitochondria-addressed antioxidants |
RU2527519C2 (ru) * | 2010-06-24 | 2014-09-10 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Митотех" | Мягкие катионные митохондриальные разобщители |
RU2593956C2 (ru) * | 2011-08-04 | 2016-08-10 | Министерство Сельского Хозяйства И Сельскохозяйственной Продукции Ее Величества Королевы Канады По Праву | Органоидно-направленные наноносители |
RU2703952C2 (ru) * | 2015-05-20 | 2019-10-22 | Иммунворк Инк. | Молекулярные конструкции с нацеливающими и эффекторными элементами и способы их применения |
RU2637279C2 (ru) * | 2015-12-25 | 2017-12-01 | Сергей Петрович Кречетов | Способ фотодинамической терапии |
RU2727901C1 (ru) * | 2016-12-01 | 2020-07-24 | Спрингтайд Венчерс С.Р.О. | Соединения для лечения нарушений, связанных со старением |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
AU2006302751A1 (en) | 2007-04-26 |
IL190951A0 (en) | 2009-09-22 |
ZA200803350B (en) | 2009-02-25 |
CA2626305A1 (en) | 2007-04-26 |
EP1937277A1 (en) | 2008-07-02 |
JP2009511626A (ja) | 2009-03-19 |
US20080176929A1 (en) | 2008-07-24 |
KR20080059228A (ko) | 2008-06-26 |
RU2005132217A (ru) | 2007-04-27 |
CN101300014A (zh) | 2008-11-05 |
WO2007046729A1 (en) | 2007-04-26 |
BRPI0617417A2 (pt) | 2011-07-26 |
MX2008004939A (es) | 2008-09-12 |
US9328130B2 (en) | 2016-05-03 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2318500C2 (ru) | Способ воздействия на организм путем адресной доставки биологически активных веществ в митохондрии, фармацевтическая композиция для его осуществления и соединение, применяемое для этой цели | |
Shikov et al. | Naphthoquinone pigments from sea urchins: Chemistry and pharmacology | |
V Skulachev et al. | Mitochondrial-targeted plastoquinone derivatives. Effect on senescence and acute age-related pathologies | |
Babizhayev | Antioxidant activity of L-carnosine, a natural histidine-containing dipeptide in crystalline lens | |
US20060135623A1 (en) | Decrease in oxidative stress status through the administration of natural products and pharmaceutical drugs | |
US5601806A (en) | Methods for scavenging active oxygen compounds and preventing damage from ultra violet B rays using taurine analogues | |
CA2397684A1 (en) | Mitochondrially targeted antioxidants | |
EP1321138B1 (en) | Coenzyme Q10 for the treatment of ocular diseases | |
HU224553B1 (hu) | Átészterezési eljárás klorofill- és bakterioklorofill C-133, C-173 diészterek előállítására | |
WO2011059355A1 (ru) | Фармацевтические субстанции на основе митохондриально-адресованных антиоксидантов | |
Srivastav et al. | Photosensitized rose Bengal-induced phototoxicity on human melanoma cell line under natural sunlight exposure | |
WO2012177100A2 (en) | Composition comprising phosphatidylcholine as an active ingredient for attenuating toxicity of anticancer agent | |
PT92546B (pt) | Processo para a preparacao de composicoes farmaceuticas contendo derivados de arilo heterociclicos para o tratamento de tumores malignos da mama | |
US9308214B2 (en) | Method for moderately increasing the proton conductivity of biological membranes with the aid of mitochondria-targeted delocalized cations | |
US20030050283A1 (en) | Composition for the treatment and/or prevention of macular degeneration, method for its manufacture, and its use for treating the eye | |
US5965493A (en) | Therapeutic Quassinoid preparations with antineoplastic, antiviral, and herbistatic activity | |
CA2088994C (en) | Therapeutically active mixture of glutathion and anthocyan compounds | |
US5925620A (en) | Therapeutically active mixture of glutathione and anthocyanin compounds | |
Papasani et al. | Cardioprotective effect of naringin against doxorubicin induced cardiomyopathy in rats | |
US20160200749A1 (en) | Biologically active compounds specifically delivered into mitochondria | |
Atayik et al. | Mitochondria-associated cellular senescence mechanisms: Biochemical and pharmacological perspectives. | |
KR19990071183A (ko) | 순환기 질환의 예방 및 치료 효능을 갖는 홍경천 추출물 | |
Babizhayev | Potentiation of intraocular absorption and drug metabolism of N-acetylcarnosine lubricant eye drops: drug interaction with sight threatening lipid peroxides in the treatment for age-related eye diseases | |
EP2586776A1 (en) | Soft cationic mitochondrial uncouplers | |
US20020123531A1 (en) | Triaryl methane dyes and their use as photochemotherapeutic agents |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20101019 |
|
NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20131120 |
|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20141019 |
|
NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20160410 |
|
HE4A | Change of address of a patent owner |