RU2314831C2 - Медицинские устройства, устойчивые к инфицированию - Google Patents
Медицинские устройства, устойчивые к инфицированию Download PDFInfo
- Publication number
- RU2314831C2 RU2314831C2 RU2004125584/15A RU2004125584A RU2314831C2 RU 2314831 C2 RU2314831 C2 RU 2314831C2 RU 2004125584/15 A RU2004125584/15 A RU 2004125584/15A RU 2004125584 A RU2004125584 A RU 2004125584A RU 2314831 C2 RU2314831 C2 RU 2314831C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- linezolid
- medical device
- mic
- adhesion
- effective amount
- Prior art date
Links
- 0 *c1c(*)c(*O)cc(N*)c1 Chemical compound *c1c(*)c(*O)cc(N*)c1 0.000 description 2
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
- A61K31/42—Oxazoles
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2/00—Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor
- A61L2/16—Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor using chemical substances
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
- A61L27/54—Biologically active materials, e.g. therapeutic substances
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L29/00—Materials for catheters, medical tubing, cannulae, or endoscopes or for coating catheters
- A61L29/14—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. lubricating compositions
- A61L29/16—Biologically active materials, e.g. therapeutic substances
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L31/00—Materials for other surgical articles, e.g. stents, stent-grafts, shunts, surgical drapes, guide wires, materials for adhesion prevention, occluding devices, surgical gloves, tissue fixation devices
- A61L31/14—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
- A61L31/16—Biologically active materials, e.g. therapeutic substances
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
- A61L2300/20—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices containing or releasing organic materials
- A61L2300/204—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices containing or releasing organic materials with nitrogen-containing functional groups, e.g. aminoxides, nitriles, guanidines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
- A61L2300/40—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a specific therapeutic activity or mode of action
- A61L2300/404—Biocides, antimicrobial agents, antiseptic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2400/00—Materials characterised by their function or physical properties
- A61L2400/18—Modification of implant surfaces in order to improve biocompatibility, cell growth, fixation of biomolecules, e.g. plasma treatment
Abstract
Изобретение относится к медицине. Описан способ профилактики инфицирования микроорганизмами, связанного с медицинскими устройствами, где способ включает стадии получения медицинского устройства и введения в данное медицинское устройство эффективного количества линезолида. Описан улучшенный способ профилактики инфекций, связанных с медицинскими устройствами. 3 н. и 14 з.п. ф-лы, 11 ил., 6 табл.
Description
ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ
Данная заявка заявляет преимущества предварительной патентной заявки США № 60/380656 от 15 мая 2002 и предварительной патентной заявки США № 60/350767 от 22 января 2002.
ПРЕДПОСЫЛКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Область изобретения
Данное изобретение касается в основном противодействия инфицированию микроорганизмами, связанному с имплантированными медицинскими устройствами. В частности, данное изобретение касается применения оксазолидиноновых соединений, таких как линезолид, для профилактики инфицирования, связанного с медицинскими устройствами.
Описание относящейся к делу технологии
Для лечения ряда болезней или других состояний человека часто применяют имплантируемые медицинские устройства, изготовленные из биоматериалов (например, биологически совместимых материалов, известных специалистам в данной области, таких как металлы, полимерные или керамические материалы). Развитие микроорганизмов на поверхностях таких медицинских устройств после имплантации происходит относительно редко, но может вызывать серьезные и дорогие осложнения, такие как необходимость удаления или замены имплантированного устройства или интенсивное лечение вторичных инфекций.
Успехи в создании материалов и в хирургической технике, сопряженные с демографией стареющего народонаселения, предполагают возрастающую потребность в имплантируемых медицинских устройствах в течение нескольких следующих десятилетий. Имплантируемые устройства включают, например, шовные материалы, ортопедические приспособления, стенты, катетеры, проволочные направители, шунты (например, гемодиализные шунты или цереброспинальные шунты), протезы (например, протезы сердечных клапанов или протезы суставов), кардиостимуляторы, нейронные стимуляторы и трансплантаты сосудов. Однако главным ограничительным фактором при использовании имплантируемых устройств является риск развития на биоматериалах микробов, таких как бактерии, с образованием биологических пленок, которые могут быть причиной серьезных инфекций, таких как остеомиелит, эндокардит или септический шок. Такие инфекции могут иметь место, несмотря на профилактическое введение антибиотиков при имплантационной хирургии, что стало стандартной практикой для таких хирургических операций.
Следовательно, эффективное лечение инфекций часто влечет за собой удаление имплантированного устройства. Таким образом, существует потребность в улучшенных способах профилактики инфекций, связанных с медицинскими устройствами.
КРАТКОЕ СОДЕРЖАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
В целом, данное изобретение касается способов профилактики инфекций, связанных с медицинскими устройствами, посредством ингибирования бактериальной адгезии к поверхности устройства. Согласно одному аспекту настоящего изобретения способ получения устойчивого к инфекциям медицинского устройства для применения в организме человека или животного включает стадии получения медицинского устройства и введения в данное медицинское устройство эффективного количества противомикробного агента, содержащего оксазолидиноновое соединение.
Согласно другому аспекту данного изобретения способ ингибирования адгезии бактерий к медицинскому устройству включает стадии получения антибактериального средства, содержащего линезолид или его фармацевтически приемлемую соль, и доставку к данному медицинскому устройству антибактериального средства.
Согласно еще одному аспекту данного изобретения способ ингибирования бактериальной адгезии к имплантированному медицинскому устройству включает стадии имплантации медицинского устройства в организм человека или животного и применения антибактериального средства, содержащего оксазолидинон, или его фармацевтически приемлемую соль, к имплантированному медицинскому устройству.
Согласно еще одному аспекту данного изобретения способ ингибирования бактериальной адгезии к имплантированному медицинскому устройству включает стадии введения пациенту, нуждающемуся в имплантации медицинского устройства, фармацевтической композиции, содержащей оксазолидинон или его фармацевтически приемлемую соль, и имплантации данному пациенту медицинского устройства.
Согласно еще одному аспекту данного изобретения устойчивое к микробной адгезии медицинское устройство для применения в организме человека или животного включает эффективное количество линезолида или его фармацевтически приемлемой соли.
Эти и другие аспекты и преимущества данного изобретения будут ясны из следующего подробного описания.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
На фиг. 1 представлен график, иллюстрирующий эффекты субингибирующих концентраций (меньше минимальной ингибирующей концентрации) линезолида и ванкомицина на адгезию S. aureus UC-20205 к полистирольным поверхностям.
На фиг. 2 представлен график, иллюстрирующий эффекты субингибирующих концентраций линезолида и ванкомицина на адгезию S. aureus UC-20206 к полистирольным поверхностям.
На фиг. 3 представлен график, иллюстрирующий эффекты субингибирующих концентраций линезолида и ванкомицина на адгезию S. epidermidis UC-20207 к полистирольным поверхностям.
На фиг. 4 представлен график, иллюстрирующий эффекты субингибирующих концентраций линезолида и ванкомицина на адгезию S. epidermidis UC-20208 к полистирольным поверхностям.
На фиг. 5 представлен график, иллюстрирующий эффекты субингибирующих концентраций линезолида и ванкомицина на адгезию S. epidermidis RP62A к полистирольным поверхностям.
На фиг. 6A-D представлены фотографии, полученные на сканирующем электронном микроскопе, показывающие микроколонии S. aureus UC-20205, прилипшие к полистирольной поверхности: (A) неинфицированный контроль; (B) инфицированный/необработанный контроль; (C) инфицированная культура, обработанная линезолидом при одной четверти МИК и (D) инфицированная культура, обработанная ванкомицином при одной четверти МИК.
На фиг. 7A-D представлены фотографии, полученные на сканирующем электронном микроскопе, показывающие микроколонии S. epidermidis RP62A, прилипшие к полистирольной поверхности: (A) не инфицированный контроль; (B) инфицированный/необработанный контроль; (C) инфицированная культура, обработанная линезолидом при одной четверти МИК и (D) инфицированная культура, обработанная ванкомицином при одной четверти МИК.
На фиг. 8A-F показаны графики ингибирующих эффектов профилактической и отсроченной обработки линезолидом или ванкомицином при терапевтических (равных или больших МИК) и субтерапевтических (одна вторая МИК) концентрациях на адгезию стафилококка к полистирольным плоскостям, как подробно показано в таблице 4.
На фиг. 9A-F показаны графики ингибирующих эффектов профилактической и отсроченной обработки линезолидом или ванкомицином на уровнях МИК и субМИК (одна вторая МИК) на адгезию стафилококка к полистирольным плоскостям, как подробно показано в таблице 5. Существенные отличия от контроля указаны звездочкой (*=p<0,05).
На фиг. 10A-D показаны фотографии, полученные на сканирующем электронном микроскопе, демонстрирующие эффекты профилактической (0 ч) и отсроченных (2, 4 и 6 ч) обработок линезолидом при 1 мкг/мл (одна вторая МИК) колоний S. epidermidis RP62A, прилипших к поверхности из полистирола.
На фиг. 11A-D показаны фотографии, полученные на сканирующем электронном микроскопе, демонстрирующие эффекты профилактической (0 ч) и отсроченных (2, 4 и 6 ч) обработок ванкомицином при 1 мкг/мл (одна вторая МИК) колоний S. epidermidis RP62A, прилипших к поверхности из полистирола.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Оксазолидиноны представляют класс синтетических антибактериальных агентов. Оксазолидиноновые соединения известны в данной области. В некоторых вариантах оксазолидиноновые соединения могут иметь формулу:
или его фармацевтически приемлемой соли, где:
А обозначает структуру i, ii, iii или iv
В выбран из циклоалкила, замещенного циклоалкила, циклоалкенила, замещенного циклоалкенила, арила, замещенного арила, het и замещенного het, или
В и один R3 вместе с атомами углерода фенила, к которым присоединены В и один R3, образуют het, причем het необязательно является замещенным het;
Х обозначает группу, выбранную из -СН2-NH-C(O)-R4, -СН2-R4 и -СН2-Y-R4;
каждый Y обозначает O, S или -NH-;
каждый R1 и R2 независимо выбран из Н, -ОН, амино, алкила, алкокси, алкенила, замещенного амино, замещенного алкила, замещенного алкокси и замещенного алкенила;
каждый R3 независимо выбран из Н, алкила, алкокси, амино, NO2, CN, галогена, замещенного алкила, замещенного алкокси и замещенного амино; и
каждый R4 независимо выбран из Н, -ОН, амино, алкила, замещенного алкила, алкокси, замещенного алкокси, алкенила, замещенного алкенила, циклоалкила, замещенного циклоалкила, циклоалкенила, замещенного циклоалкенила, het, замещенного het, арила и замещенного арила.
Использованы следующие определения, если не определено по-другому.
Содержание атомов углерода различных углеродсодержащих фрагментов указано префиксом, обозначающим минимальное и максимальное количество атомов углерода в данном фрагменте, например, префикс Сi-j обозначает фрагмент с содержанием атомов углерода от "i" до "j" включительно. Таким образом, например, C1-7 алкил обозначает алкил с 1-7 атомами углерода, включительно.
Термин "галоген" относится к атому галогена, выбранному из Cl, Br, I и F.
Термин "алкил" относится к фрагментам как с линейной, так и разветвленной цепью. До тех пор пока специально не указано по-другому, алкильные фрагменты включают от 1 до 6 атомов углерода.
Термин "алкенил" относится к фрагментам с линейной и разветвленной цепью, содержащим, по меньшей мере, одну группу -С=C-. До тех пор пока специально не указано по-другому, алкенильные фрагменты включают от 1 до 6 атомов углерода.
Термин "алкинил" обозначает фрагменты с линейной и разветвленной цепью, содержащие, по меньшей мере, одну группу -CC-. До тех пор пока специально не указано по-другому, алкинильные фрагменты включают от 1 до 6 атомов углерода.
Термин "алкокси" обозначает -O-алкильные группы.
Термин "циклоалкил" обозначает циклический алкильный фрагмент. До тех пор пока специально не указано по-другому, циклоалкильные фрагменты включают от 3 до 9 атомов углерода.
Термин "циклоалкенил" обозначает циклический алкенильный фрагмент. До тех пор пока специально не указано по-другому, циклоалкильные фрагменты включают от 3 до 9 атомов углерода и, по меньшей мере, одну группу -С=C- в циклическом кольце.
Термин "амино" обозначает -NH2.
Термин "арил" обозначает фенил и нафтил.
Термин "het" обозначает моно- или бициклические системы колец, содержащие, по меньшей мере, один гетероатом, выбранный из О, S и N. Каждое моноциклическое кольцо может быть ароматическим, насыщенным или частично ненасыщенным. Бициклическая система колец может включать моноциклическое кольцо, содержащее, по меньшей мере, один гетероатом, конденсированное с циклоалкильной или арильной группой. Бициклическая система колец может также включать моноциклическое кольцо, содержащее, по меньшей мере, один гетероатом, конденсированное с другим het, моноциклической кольцевой системой.
Примеры "het" включают, но не ограничены, пиридин, тиофен, фуран, пиразолин, пиримидин, 2-пиридил, 3-пиридил, 4-пиридил, 2-пиримидинил, 4-пиримидинил, 5-пиримидинил, 3-пиридазинил, 4-пиридазинил, 3-пиразинил, 4-оксо-2-имидазолил, 2-имидазолил, 4-имидазолил, 3-изоксазолил, 4-изоксазолил, 5-изоксазолил, 3-пиразолил, 4-пиразолил, 5-пиразолил, 2-оксазолил, 4-оксазолил, 4-оксо-2-оксазолил, 5-оксазолил, 1,2,3-оксатиазол, 1,2,3-оксадиазол, 1,2,4-оксадиазол, 1,2,5-оксадиазол, 1,3,4-оксадиазол, 2-тиазолил, 4-тиазолил, 5-тиазолил, 3-изотиазол, 4-изотиазол, 5-изотиазол, 2-фуранил, 3-фуранил, 2-тиенил, 3-тиенил, 2-пирролил, 3-пирролил, 3-изопирролил, 4-изопирролил, 5-изопирролил, 1,2,3,-оксатиазол-1-оксид, 1,2,4-оксадиазол-3-ил, 1,2,4-оксадиазол-5-ил, 5-оксо-1,2,4-оксадиазол-3-ил, 1,2,4-тиадиазол-3-ил, 1,2,4-тиадиазол-5-ил, 3-оксо-1,2,4-тиадиазол-5-ил, 1,3,4-тиадиазол-5-ил, 2-оксо-1,3,4-тиадиазол-5-ил, 1,2,4-триазол-3-ил, 1,2,4-триазол-5-ил, 1,2,3,4-тетразол-5-ил, 5-оксазолил, 3-изотиазолил, 4-изотиазолил, 5-изотиазолил, 1,3,4,-оксадиазол, 4-оксо-2-тиазолинил, 5-метил-1,3,4-тиадиазол-2-ил, тиазолдион, 1,2,3,4-тиатриазоле, 1,2,4-дитиазолон, фталимид, хинолинил, морфолинил, бензоксазоил, диазинил, триазинил, хиноксалинил, нафтиридинил, азетидинил, пирролидинил, гидантоинил, оксатиоланил, диоксоланил, имидазолидинил и азабицикло[2.2.1]гептил.
Термин "замещенный алкил" обозначает алкильный фрагмент, включающий 1-4 заместителя, выбранных из галогена, het, циклоалкила, циклоалкенила, арила, -OQ10, -SQ10, -S(O)2Q10, -S(O)Q10, -OS(О)2Q10, -C(=NQ10)Q10, -SC(O)Q10, -NQ10Q10, -C(O)Q10, -C(S)Q10, -C(O)OQ10, -OC(О)Q10, -C(О)NQ10Q10, -C(O)C(Q16)2OC(O)Q10, -CN, =O, =S, -NQ10C(O)Q10, -NQ10C(О)NQ10Q10, -S(О)2NQ10Q10, -NQ10S(O)2Q10, -NQ10S(O)Q10, -NQ10SQ10, -NO2 и -SNQ10Q10-. Причем каждый из het, циклоалкила, циклоалкенила и арила необязательно замещен 1-4 заместителями, независимо выбранными из галогена и Q15.
Термин "замещенный арил" обозначает арильный фрагмент, имеющий 1-3 заместителя, выбранных из -OQ10, -SQ10, -S(O)2Q10, -S(O)Q10, -OS(O)2Q10, -C(=NQ10)Q10, -SC(О)Q10, -NQ10Q10, -C(О)Q10, -C(S)Q10, -C(O)OQ10, -OC(O)Q10, -C(О)NQ10Q10, -C(О)C(Q16)2OC(О)Q10, -CN, -NQ10C(O)Q10, -NQ10C(O)NQ10Q10, -S(О)2NQ10Q10, -NQ10S(О)2Q10, -NQ10S(O)Q10, -NQ10SQ10, -NO2, -SNQ10Q10, алкила, замещенного алкила, het, галогена, циклоалкила, циклоалкенила и арила. Причем het, циклоалкил, циклоалкенил и арил необязательно замещены 1-3 заместителями, выбранными из галогена и Q15.
Термин "замещенный het" обозначает фрагмент het, включающий 1-4 заместителя, выбранные из -OQ10, -SQ10, -S(O)2Q10, -S(O)Q10, -OS(O)2Q10, -C(=NQ10)Q10, -SC(O)Q10, -NQ10Q10, -C(О)Q10, -C(S)Q10, -C(О)OQ10, -OC(O)Q10, -C(O)NQ10Q10, -C(O)C(Q16)2OC(O)Q10, -CN, =О, =S, -NQ10C(О)Q10, -NQ10C(О)NQ10Q10, -S(О)2NQ10Q10, -NQ10S(О)2Q10, -NQ]0S(O)Q10, -NQ10SQ10, -NO2, -SNQ]0Q]0, алкила, замещенного алкила, het, галогена, циклоалкила, циклоалкенила и арила. Причем het, циклоалкил, циклоалкенил и арил необязательно замещены 1-3 заместителями, выбранными из галогена и Q15.
Термин "замещенный алкенил" обозначает алкенильный фрагмент, включающий 1-3 заместителя: -OQ10, -SQ10, -S(О)2Q10, -S(О)Q10, -OS(O)2Q10, -C(=NQ10)Q10, -SC(O)Q10, -NQ10Q10, -C(О)Q10, -C(S)Q10, -C(О)OQ10, -OC(O)Q10, -C(О)NQ10Q10, -C(О)C(Q16)2OC(О)Q10, -CN, -O, -S, -NQ10C(O)Q10, -NQ10C(O)NQ10Q10, -S(О)2NQ10Q10, -NQ10S(О)2Q10, -NQ10S(O)Q10, -NQ10SQ10, -NO2, -SNQ10Q10, алкила, замещенного алкила, het, галогена, циклоалкила, циклоалкенила и арила. Причем het, циклоалкил, циклоалкенил и арил необязательно замещены 1-3 заместителями, выбранными из галогена и Q15.
Термин "замещенный алкокси" обозначает алкокси-фрагмент, включающий 1-3 заместителя: -OQ10, -SQ10, -S(О)2Q10, -S(О)Q10, -OS(O)2Q10, -C(=NQ10)Q10, -SC(O)Q10, -NQ10Q10, -C(О)Q10, -C(S)Q10, -C(О)OQ10, -OC(O)Q10, -C(О)NQ10Q10, -C(О)C(Q16)2OC(О)Q10, -CN, =О, =S, -NQ10C(O)Q10, -NQ10C(O)NQ10Q10, -S(О)2NQ10Q10, -NQ10S(О)2Q10, -NQ10S(O)Q10, -NQ10SQ10, -NO2, -SNQ10Q10, алкила, замещенного алкила, het, галогена, циклоалкила, циклоалкенила и арила. Причем het, циклоалкил, циклоалкенил и арил необязательно замещены 1-3 заместителями, выбранными из галогена и Q15.
Термин "замещенный циклоалкенил" обозначает циклоалкенильный фрагмент, включающий 1-3 заместителя: -OQ10, -SQ10, -S(O)2Q10, -S(O)Q10, -OS(O)2Q10, -C(=NQ10)Q10, -SC(O)Q10, -NQ10Q10, -C(О)Q10, -C(S)Q10, -C(О)OQ10, -OC(O)Q10, -C(O)NQ10Q10, -C(О)C(Q]6)2OC(О)Q10, -CN, -О, =S, -NQ10C(O)Q10, -NQ10C(O)NQ10Q10, -S(O)2NQ10Q10, -NQ10S(O)2Q10, -NQ10S(О)Q10, -NQ10SQ10, -NO2, -SNQ10Q10, алкила, замещенного алкила, het, галогена, циклоалкила, циклоалкенила и арила. Причем het, циклоалкил, циклоалкенил и арил необязательно замещены 1-3 заместителями, выбранными из галогена и Q15.
Термин "замещенный амино" обозначает амино-фрагмент, в котором один или оба аминных водорода замещены группой, выбранной из -OQ10, -SQ10, -S(O)2Q10, -S(О)Q10, -OS(О)2Q10, -C(=NQ10)Q10, -SC(O)Q10, -NQ10Q10, -C(O)Q10, -C(S)Q10, -C(О)OQ10, -OC(О)Q10, -C(О)NQ10Q10, -C(O)C(Q16)2OC(O)Q10, -CN, O, =S, -NQ10C(О)Q10, -NQ10C(О)NQ10Q10, -S(O)2NQ10Q10, -NQ10S(O)2Q10, -NQ10S(O)Q10, -NQ10SQ10, -NO2, -SNQ10Q10, алкила, замещенного алкила, het, галогена, циклоалкила, циклоалкенила и арила. Причем het, циклоалкил, циклоалкенил и арил необязательно замещены 1-3 заместителями, выбранными из галогена и Q15.
Каждый Q10 независимо выбран из -H, алкила, циклоалкила, het, циклоалкенила и арила. Причем het, циклоалкил, циклоалкенил и арил необязательно замещены 1-3 заместителями, выбранными из галогена и Q13.
Каждый Q11 независимо выбран из -H, галогена, алкила, арила, циклоалкила и het. Причем алкил, арил, циклоалкил и het необязательно замещены 1-3 заместителями, независимо выбранными из галогена, -NO2, -CN, =S, =O и Q14.
Каждый Q13 независимо выбран из Q11, -OQ11, -SQ11, -S(O)2Q11, -S(O)Q11, -OS(О)2Q11, -C(=NQ11)Q11, -SC(О)Q11, -NQ11Q11, -C(O)Q11, -C(S)Q11, -C(O)OQ11, -OC(О)Q11, -C(О)NQ11Q11, -C(O)C(Q16)2OC(O)Q10, -CN, =O, =S, -NQ11C(O)Q11, -NQ11C(О)NQ11Q11, -S(O)2NQ11Q11, -NQnS(О)2Q11, -NQ11S(O)Q11, -NQ11SQ11, -NO2 и -SNQ11Q11.
Каждый Q14 обозначает -H или заместитель, выбранный из алкила, циклоалкила, циклоалкенила, фенила или нафтила, каждый необязательно замещен 1-4 заместителями, независимо выбранными из -F, -Cl, -Br, -I, -OQ16, -SQ16, -S(O)2Q16, -S(O)Q16, -OS(O)2Q16, -NQ16Q16, -C(O)Q16, -C(S)Q16, -C(О)OQ16, -NO2, -C(О)NQ16Q16, -CN, -NQ16C(O)Q16, -NQ16C(O)NQ16Q16, -S(O)2NQ16Q16 и -NQi6S(О)2Q16. Причем алкил, циклоалкил и циклоалкенил необязательно дополнительно замещены =O или =S.
Каждый Q15 обозначает алкил, циклоалкил, циклоалкенил, het, фенил или нафтил, каждый необязательно замещен 1-4 заместителями, независимо выбранными из -F,-Cl, -Br, -I, -OQ16, -SQ16, -S(О)2Q]6, -S(O)Q16, -OS(O)2Q16, -C(=NQ16)Q16, -SC(O)Q16, -NQ16Q16, -C(О)Q16, -C(S)Q16, -C(O)OQ]6, -OC(O)Q16, -C(O)NQ16Q16, -C(О)C(Q16)2OC(О)Q16, -CN, -NQ16C(О)Q16, -NQ16C(O)NQ16Q16, -S(O)2NQ16Q16, -NQ16S(O)2Q16, -NQ16S(O)Q16, -NQ16SQ16, -NO2 и -SNQ16Q16. Причем алкил, циклоалкил и циклоалкенил необязательно замещены =O или =S.
Каждый Q16 независимо выбран из -H, алкила и циклоалкила. Причем алкил и циклоалкил необязательно включают 1-3 атома галогена.
Другие примеры оксазолидиноновых соединений и способов получения оксазолидиноновых соединений можно найти, например, в следующих публикациях, которые во всей своей полноте включены здесь в виде ссылок.
Патенты США №№ 5225565; 5182403; 5164510; 5247090; 5231188; 5565571; 5547950; 5952324; 5968962; 5688792; 6069160; 6239152; 5792765; 4705799; 5043443; 5652238; 5827857; 5529998; 5684023; 5627181; 5698574; 6166056; 6051716; 6043266; 6313307 и 5523403.
PCT заявки и публикации PCT/US93/04850, WO94/01110; PCT/US94/08904, WO95/07271; PCT/US95/02972, WO95/25106; PCT/US95/10992, WO96/13502; PCT/US96/05202, WO96/35691; PCT/US96/12766; PCT/US96/13726; PCT/US96/14135; PCT/US96/17120; PCT/US96/19149; PCT/US97/01970; PCT/US95/12751, WO96/15130, PCT/US96/00718, WO96/23788, WO98/54161, WO99/29688, WO97/30995, WO97/09328, WO95/07271, WO00/21960, WO01/40236, WO99/64417 и WO01/81350.
В некоторых вариантах оксазолидинон может иметь следующую формулу:
Оксазолидиноны, подходящие для данного изобретения, обычно являются грамположительными антибактериальными средствами. Некоторые оксазолидиноновые соединения, полезные в данном изобретении, описаны в патенте США № 5688792, полное раскрытие которого включено здесь посредствам ссылки. Другие подходящие оксазолидиноновые соединения имеют следующую формулу II:
или представляют их фармацевтически приемлемые соли, где
n равно 0, 1 или 2;
R выбран из группы, включающей:
водород;
C1-C8 алкил, необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, включающей F, Cl, гидрокси, C1-C8 алкокси, C1-C8 ацилокси или CH2-фенил;
C3-C6 циклоалкил;
амино;
C1-C8 алкиламино;
C1-C8 диалкиламино или
C1-C8 алкокси;
R5 в каждом случае независимо выбран из группы, состоящей из H, CH3, CN, CO2H, CO2R и (CH2)mR10, где m равно 1 или 2;
R6 в каждом случае независимо выбран из группы, состоящей из H, F и Cl;
R7 представляет собой H, исключая случаи, когда R1 является CH3, тогда R7 представляет собой H или CH3;
R10 выбран из группы, состоящей из H, OH, OR, OCOR, NH2, NHCOR и N(R11)2; и
R11 в каждом случае независимо выбран из группы, включающей H, пара-толуолсульфонил и C1-C4 алкил, необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из Cl, F, OH, C1-C8 алкокси, амино, C1-C8 алкиламино и C1-C8 диалкиламино.
Используемое здесь выражение "фармацевтически приемлемые соли" относится к аддитивным солям органических и неорганических кислот исходного соединения. Примерами солей, полезных для данного изобретения, являются, например, гидрохлорид, гидробромид, гидройодид, сульфат, фосфат, ацетат, пропионат, лактат, мезилат, малеат, малат, сукцинат, тартрат, цитрат, 2-гидроксиэтилсульфат, фумарат и подобные.
Одно подходящее оксазолидиноновое соединение, имеющее структуру:
имеет название по IUPAC (S)-N-[[3-[3-фтор-4-(4-морфолин)фенил]-2-оксо-5-оксазолидинил]метил]ацетамид. Данное соединение широко известно как линезолид и демонстрирует особо эффективную антибактериальную активность.
Соединение линезолид можно получить любым подходящим способом, включая, например, общие способы, описанные в патенте США № 5688792. Кратко говоря, гетероарильный заместитель, например оксазиновая или тиазиновая часть, взаимодействует с функционализованным нитробензолом в присутствии подходящего основания, предпочтительно в органическом растворителе, таком как ацетонитрил, тетрагидрофуран или этилацетат. Нитрогруппу восстанавливают либо гидрированием, либо применяя подходящий восстановитель, например, водный гидросульфит натрия, получая анило-соединение. Анило-соединение превращают в его бензил- или метил-уретановое производное, депротонируют литиевым реагентом, получая подходящий литий-содержащий промежуточный продукт, и обрабатывают (-)-(R)-глицидилбутиратом, получая сырое оксазолидиноновое соединение. Подходящий способ получения линезолида более подробно описан в примере 5 патента США № 5688792.
Согласно одному варианту данного изобретения способ получения устойчивого к инфицированию медицинского устройства для применения в организме человека или животного включает стадии получения медицинского устройства и введения в данное медицинское устройство эффективного количества противомикробного средства, содержащего оксазолидиноновое соединение.
Оксазолидиноновое соединение может представлять собой соединение формулы I, которое описано выше. Оксазолидиноновое соединение может быть линезолидом или его фармацевтически приемлемой солью.
Медицинское устройство может представлять собой, например, шовный материал, ортопедическое приспособление, стент, катетер, проволочный направитель, шунт (например, гемодиализный шунт или цереброспинальный шунт), протез (например, протез сердечного клапана или протез сустава), кардиостимулятор, нейронный стимулятор и трансплантат сосуда. Медицинское устройство может быть изготовлено из биоматериалов (например, биологически совместимых материалов, известных специалистам в данной области, таких как металлы, полимерные или керамические материалы). Противомикробное средство можно включить в медицинское устройство согласно способам, известным специалистам в данной области, таким как погружение медицинского устройства в раствор (например, водный раствор), содержащий противомикробное средство, или, например, способами, описанными в одной из следующих ссылок: патент США № 3987797; патент США № 4563485; патент США № 4875479; патент США № 4946870; патент США № 5306289; патент США № 5584877; патент США № 5607685; патент США № 5788979; патент США № 6143037; патент США № 6238687; WO 00/56283 и WO 01/28601, раскрытие которых включено здесь в виде ссылок. Медицинское устройство может включать полимерный материал, и можно провести совместную экструзию данного полимерного материала с антибактериальным средством. Способ получения устойчивого к инфицированию медицинского устройства может также включать стадию нагревания данного медицинского устройства до температуры от примерно 100 до примерно 121°С. Способ может включать стадию нагревания устройства в автоклаве согласно способам, известным специалистам в данной области (например, нагревание устройства до температуры от примерно 100 до примерно 121°С при давлении от примерно 15 до примерно 20 фунт/дюйм2 (от примерно 1,055 до примерно 1,406 кг/см2) в течение примерно 15-20 мин). Обнаружено, что линезолид (оксазолидинон) в противоположность другим антибактериальным соединениям неожиданно является устойчивым к термическому разложению при температурах, по меньшей мере, до приблизительно 121°С.
Для лечения микробных инфекций обычно вводят эффективное количество оксазолидинонового соединения при терапевтической дозе в диапазоне от примерно 0,1 до примерно 100, более предпочтительно от примерно 3,0 до примерно 50 мг/кг веса тела/день. Понятно, что дозировка может варьироваться в зависимости от потребностей пациента, тяжести подлежащей лечению бактериальной инфекции и конкретного применяемого соединения. Можно применять дозировки, обеспечивающие содержание в крови примерно 2-4-кратной минимальной ингибирующей концентрации (МИК) антибактериального средства. Конечно, МИК конкретного противомикробного агента различна для каждого бактериального вида. Благоприятным является то, что оксазолидиноновые соединения неожиданно демонстрируют антиадгезионные свойства при концентрациях значительно ниже МИК. В результате оксазолидиноновые соединения после разового введения дозы ингибируют бактериальную адгезию в течение более длительных периодов времени, чем другие противомикробные средства, которые демонстрируют антиадгезионные свойства при концентрациях, равных или больших, чем МИК таких агентов. Неожиданные свойства оксазолидиноновых соединений особо полезны при ингибировании бактериальной адгезии на поверхностях медицинских устройств, которые помещают в организм человека или животного в области, в которых имеет место меньшая концентрация противомикробного средства по сравнению с другими областями тела, например, в области с низким или слабым кровообращением, или с более высокими вариациями концентрации противомикробного средства после дозирования. Благодаря данным неожиданным свойствам оксазолидиноновых соединений концентрация оксазолидинонового соединения в организме человека или животного около медицинского устройства остается эффективной для действия антиадгезионного средства и составляет величину меньше МИК. Как описано ниже в примерах, обнаружено, что линезолид является неожиданно эффективным для предотвращения бактериальной адгезии на поверхностях биологически-совместимых материалов при концентрациях ниже МИК, даже при концентрациях ниже одной четверти МИК. Данные материалы, если имплантированы, могут быть эффективны для предотвращения бактериальной адгезии при субингибирующих концентрациях. Предотвращение бактериальной адгезии способствует эффективному лечению бактериальных инфекций, в особенности таких, которые происходят на или рядом с местом имплантации медицинских устройств, разрушая типичный бактериальный патогенез, например, адгезию бактерий к биоматериалам с образованием многоклеточного окружения, которое предохраняет бактерии от противомикробных средств, и защите носителя.
Как правило, периодичность, с которой вводят регулярные дозы эффективного количества фармацевтической композиции, содержащей один или более оксазолидиноновых соединений с целью ингибирования бактериальной адгезии, следует регулировать для поддержания концентрации данной фармацевтической композиции у пациента рядом с имплантированным устройством примерно на уровне или выше половины МИК для данной фармацевтической композиции или на уровне или выше одной четверти МИК для данной фармацевтической композиции. Композиции, включающие антибактериальные средства, которые не имеют неожиданных антиадгезионных свойств при концентрациях оксазолидиноновых соединений ниже МИК, требуют более высоких эффективных количеств активного средства и/или более частого введения дозы.
Согласно другому варианту способ ингибирования адгезии бактерий к медицинскому устройству включает стадии получения антибактериального агента, содержащего линезолид или его фармацевтически приемлемую соль, и введения данного антибактериального средства в медицинское устройство. Антибактериальное средство можно включить в медицинское устройство согласно способам, известным специалистам в данной области, таким как погружение медицинского устройства в раствор (например, водный раствор), содержащий противомикробное средство. Данный способ ингибирования адгезии бактерий к медицинскому устройству может включать стадию нагревания данного медицинского устройства до температуры от примерно 100 до примерно 121°С. Например, устройство перед применением можно нагревать в автоклаве с целью стерилизации согласно способам, известным специалистам в данной области (например, нагревая устройство до температуры от примерно 100 до примерно 121°С при давлении от примерно 15 до примерно 20 фунт/дюйм2 (от примерно 1,055 до примерно 1,406 кг/см2) в течение примерно 15-20 мин). Количество оксазолидинонового соединения в организме человека или животного или около медицинского устройства, которое является эффективным для антиадгезионного средства, может быть меньше МИК.
Согласно еще одному варианту способ ингибирования бактериальной адгезии к имплантированному медицинскому устройству включает стадии имплантации медицинского устройства в организм человека или животного и доставку к имплантированному медицинскому устройству антибактериального агента, содержащего оксазолидинон или его фармацевтически приемлемую соль. (Например, антибактериальное средство можно применять, приводя раствор, пасту, гель или гранулы, содержащие антибактериальное средство, в контакт с устройством после его имплантации.)
Согласно еще одному варианту способ ингибирования бактериальной адгезии к имплантированному медицинскому устройству включает стадии введения фармацевтической композиции, содержащей оксазолидинон или его фармацевтически приемлемую соль, пациенту, нуждающемуся в имплантированном медицинском устройстве, и имплантации медицинского устройства пациенту. Фармацевтические композиции можно вводить согласно способам, известным специалистам в данной области, таким как пероральное введение или внутривенное введение. Данные композиции можно вводить до, во время и/или после хирургической операции по имплантации медицинского устройства. Как описано выше, для лечения микробных инфекций эффективное количество оксазолидинонового соединения, такого как линезолид, вводят при обычной терапевтической дозировке. Благоприятным является то, что оксазолидиноновые соединения неожиданно демонстрируют антиадгезионные свойства при концентрациях значительно ниже МИК. В результате оксазолидиноновые соединения после разового введения дозы ингибируют бактериальную адгезию в течение более длительных периодов времени чем другие противомикробные средства, которые демонстрируют антиадгезионные свойства при концентрациях, равных или больших, чем МИК.
Согласно еще одному варианту устойчивое к микробной адгезии медицинское устройство для применения в организме человека или животного включает линезолид или его фармацевтически приемлемую соль. Концентрация линезолида в устройстве меняется. Обычно концентрацию линезолида в устройстве устанавливают на уровне, достаточном для создания концентрации линезолида в организме человека или животного около медицинского устройства, которая составляет, по меньшей мере, половину МИК или, по меньшей мере, одну четверть МИК.
Для разработки устойчивых к инфекциям медицинских устройств и способов авторы сравнивали эффекты линезолида и ванкомицина на адгезию коагулаза-положительных и -отрицательных стафилококков к полистирольным поверхностям. Ванкомицин, гликопептид, который ингибирует синтез клеточных стенок, выбран в качестве сравнительного агента, так как его часто применяют в качестве профилактического агента при имплантации протезных устройств. В качестве прямого измерения адгезии применяют модифицированную методику анализа на микротитровальном планшете, описанную Christensen и др., J. Clin. Microbiol. 22(6): 996-1006 (1985). Данная методика основана на том, что бактериальные клетки прилипают к полимерному материалу и друг к другу, образуя макроколонию, плотность которой измеряют спектрофотометрически после окрашивания красителем кристаллическим фиолетовым. Надежность данного исследования оценивают при помощи прилипающих и не прилипающих стафилококковых штаммов сравнения и подтверждают анализом изображения с применением сканирующей электронной микроскопии.
Важность адгезии к пластикам, как модельного показателя вирулентности, подкреплена некоторыми клиническими исследованиями (см. работы Davenport и др., J. Infect. Dis. 153(2): 332-339 (1986); Deighton и др., J. Clin. Microbiol. 28(11): 2442-2447 (1990)). Стафилококковые штаммы, которые прилипают к биоматериалам и развиваются на них, чаще связаны со значительным инфицированием, чем не прилипающие штаммы.
Многие разнообразные методики используются для изучения эффектов противомикробных средств на бактериальное прилипание, образование биологических пленок и коммуникацию клетка-клетка. В широком смысле способы можно разделить на две группы, статические и динамические. Описанное здесь исследование адгезии является статической моделью, с использованием в качестве подложки полистирол. (При динамическом подходе используют ламинарный поток бактериальной суспензии через перфузионную камеру с каналами, содержащими исследуемые материалы.) В данной статической модели фотографии сравнительного штамма RP62A, полученные на сканирующем электронном микроскопе, показывают многоклеточные макроколонии со структурами типа столбиков, разделенными пространствами, заполненными водой. См. фиг. 7A-D. Данное обнаружение показательно для присутствия биологической пленки. Статические модели позволяют провести быстрое тестирование нескольких клинических изолятов относительно набора противомикробных средств.
На данной модели показано, что линезолид неожиданно является эффективным для профилактики адгезии и образования колоний стафилококков при субтерапевтических концентрациях (то есть концентрациях меньше минимальной ингибирующей концентрации (МИК)). Приведенные ниже примеры иллюстрируют, что линезолид при концентрациях меньше МИК и даже таких низких, как одна четверть МИК, оказывают значительные ингибирующие эффекты на клеточную адгезию для всех исследованных штаммов. В противоположность этому субтерапевтические уровни ванкомицина не ингибируют адгезию стафилококков у четырех из пяти исследованных штаммов.
Другие исследователи показали, что в противоположность эффективности линезолида субингибирующие концентрации ванкомицина имеют минимальную активность или не имеют активности в отношении бактериальной адгезии. (Смотри работы Carsenti-Etesse и др., Antimicrob. Agents Chemother. 37(4): 921-923 (1993); Rupp и др., J. Antimicrob. Chemother. 41: 155-161 (1998); Schadow и др., J. Infect. Dis. 157 (1): 71-77 (1988); Wilcox и др., J. Antimicrob. Chemother. 27: 577-587 (1991)).
В другом аспекте оксазолидиноны, такие как линезолид, неожиданно демонстрируют длительную эффективность при ингибировании адгезии коагулаза-отрицательных стафилококков к полистирольным поверхностям при субМИК концентрациях.
Следующие примеры демонстрируют иллюстративные варианты данного изобретения.
ПРИМЕРЫ
Пример 1
Бактериальные изоляты
Изоляты стафилококков получают из крови пациентов с сепсисом, связанным с применением катетера. Изоляты специфицируют, применяя идентификационную систему API STAPH (bioMerieux, Marcy-l'Etoile, France), и отбирают на основании их адгезионных свойств. Референсные штаммы S. epidermidis RP62A и S. hominis SP-2 получают от American Type Culture Collection (Manassas, Virginia). RP62A продуцирует полисахаридные адгезины и демонстрирует сильную адгезию к поверхностям из синтетических полимеров. SP-2 не является адгезивным штаммом и используется в качестве отрицательного контроля для исследования адгезии. Пригодные для работы клеточные штаммы (1 мл аликвоты) замораживают в триптиказо-соевом бульоне (TSB) с 20% глицерином и хранят в парах жидкого азота. Перед каждым экспериментом аликвоту размораживают и субкультивируют на планшетах с кровяным агаром при 37°C в течение 24 час.
Пример 2
Противомикробные агенты
В данном исследовании используют линезолид (Pharmacia Corp., Kalamazoo, Michigan) и ванкомицин (Sigma Chemical Co., St. Louis, Missouri).
Линезолид и ванкомицин растворяют в смеси 20% диметилсульфоксид/вода, стерилизуют фильтрованием через мембранный фильтр 0,22 мкм (PALL Gelman Laboratory, Ann Arbor, Michigan) и разбавляют в TSB до подходящих рабочих концентраций. Конечная концентрация ДМСО составляет менее 0,1% во всех исследуемых ячейках.
Пример 3
Определение минимальных ингибирующих концентраций
Значение минимальной ингибирующей концентрации (МИК) для каждого клинического изолята определяют методом микроразведений (NCCLS 2000), применяя условия, при которых измеряют адгезию. МИК определяют как наименьшую концентрацию линезолида или ванкомицина, которая ингибирует >99,0% бактериального роста по сравнению с культурами, не содержащими лекарства (контроли роста). Ингибирование роста оценивают по показаниям оптической плотности мутности культур через 18 ч инкубации с лекарством. Так как визуальная интерпретация конечных значений МИК может быть субъективной, спектрофотометрические измерения мутности культур позволяют стандартизовать оценки величин МИК между и внутри обработок лекарством. Отмечают величину МИК для каждого штамма, а также величины для половины (½ МИК) и одной четверти (¼ МИК) МИК. Противомикробные средства при концентрациях, равных МИК, ликвидируют вирулентность любого данного организма, так как данные концентрации ингибируют или убивают агрессивный организм. Для изучения эффектов противомикробных средств на факторы вирулентности, такие как адгезия клеток, следует использовать концентрации ниже дозы, которая предотвращает рост или убивает организм.
Пример 4
Исследование адгезии
Эффекты линезолида и ванкомицина на адгезию стафилококка к полистиролу определяют, применяя принятый тест на микротитровальном плншете, описанный Christensen и др. (Christensen и др., J. Clin. Microbiol 22(6): 996-1006 (1985).) Были сделаны незначительные модификации методики. Кратко говоря, инокулят создают прямым способом из суспензии колоний, применяя инокуляционную систему Prompt™ Inoculation System (Becton Dickinson, Sparks, Maryland). Бактериальную суспензию, мутность которой равна 0,5 по стандарту McFarland, разбавляют в TSB до концентрации 1 x 106 колониеобразующих единиц на мл (CFU/мл). Сто микролитров клеточной суспензии добавляют в полистирольные ячейки с плоским дном (Corning Costar, Corning, NY), содержащим 100 мкл TBS, с лекарством и без него. Конечная концентрация инокулята в ячейке составляет примерно 5 x 105 CFU/мл. Планшеты инкубируют при 37°C в статических условиях на воздухе. Через 18 ч после инфицирования измеряют оптическую плотность бактериального роста при длине волны 595 нм на регистрирующем устройстве для микротитровальных планшетов (Vmax; Molecular Devices, Sunnyvale, CA). Для количественного определения прилипших бактерий среду аккуратно отсасывают и каждую ячейку промывают три раза физиологическим раствором с фосфатным буфером, удаляя свободно флотирующие "планктонные" клетки. Затем фиксируют прилипшие "неподвижные" клетки смесью 3,7% (об./об.) формальдегид/2% (мас./об.) ацетат натрия и окрашивают 0.1% (мас./об.) кристаллическим фиолетовым. Избыток красителя смывают деионизированной водой и сушат планшеты на воздухе в течение 4 ч. Оптическую плотность прилипших бактерий определяют при длине волны 550 нм. Для определения оптимальных длин волн для измерения мутности при росте и подкрашенных прилипших клеток (данные не показаны) проводят предварительные исследования. Для компенсации исходного поглощения показания оптической плотности от ячеек, обработанных стерильной средой, фиксатором и красителем, как описано выше, усредняют и затем вычитают из всех исследуемых и контрольных ячеек. Относительное ингибирование адгезии или роста выражают следующим уравнением: (OD контрольной ячейки - OD обработанной ячейки/OD контрольной ячейки) x 100, где OD равно средней оптической плотности для ячеек в шести повторностях из двух отдельных экспериментов (три повторности на эксперимент). Контроль определяют как инфицированные культуры, не содержащие лекарства.
Пример 5
Статистические методы
Первичная интенсивность, непостоянная в данном исследовании, является измерением для бактериальных клеток, прилипших к полистиролу через 18 час. развития. Для определения, существуют ли статистически значимые различия между обработанными группами (МИК, ½ МИК и ¼ МИК) по сравнению с инфицированными/необработанными контролями, применяют односторонний анализ дисперсии по Kruskal-Wallis (ANOVA) для каждого клинического штамма. Статистическую значимость определяют через p-величины <0,05. Звездочкой (*) отмечают все тестовые значения меньше или равные определенному уровню значимости.
Пример 6
Сканирующая электронная микроскопия
Полуколичественную оценку микроорганизмов, прилипших к поверхности из полистирола, устанавливают методом сканирующей электронной микроскопии (SEM). Бактериальные культуры S. aureus UC-20205 и S. epidermidis RP62A помещают на предметные стекла камеры Lab-Tek® (Nalge Nunc International, Naperville, Illinois) в тех же условиях, которые применяют при исследовании адгезии. Среду отсасывают и каждую камеру промывают три раза физиологическим раствором с фосфатным буфером, удаляя планктонные клетки. Неподвижные клетки, которые прилипли к полимерной поверхности, а также друг к другу, фиксируют в течение 2 ч в 3% глутаральдегиде в 0,1M фосфатном буфере (pH 7.3). Раствор тетроксида осмия (1%) применяют в качестве второго фиксатора. Образцы последовательно дегидратируют водными растворами этанола (30-100%) с последующей сушкой в критической точке при помощи гексаметилдисилазана. Предметные стекла оставляют сушиться на ночь и затем покрывают золотом, используя установку для автоматического нанесения покрытия Polaron E5200 SEM (Polaron Instruments). Микроколонии исследуют, применяя сканирующий электронный микроскоп ISI DS 130.
Пример 7
Величины минимальных ингибирующих концентраций (МИК)
Данные МИК для шести клинических изолятов представлены ниже в таблице 1.
| Таблица 1 | |||
| In vitro активность линезолида и ванкомицина относительно стафилококковых изолятов, выделенных у пациентов с сепсисом, связанным с применением внутрисосудистого катетера | |||
| Вид | Штамм | МИК+ | (мкг/мл) |
| линезолид | ванкомицин | ||
| S. aureus | UC-20205 UC-20206 |
2 4 |
1 1 |
| S. epidermidis | UC-20207 UC-20208 RP62A |
2 2 2 |
2 2 2 |
| S. hominis | SP-2 | 2 | 1 |
+ Минимальная ингибирующая концентрация
Оба вещества линезолид и ванкомицин демонстрируют высокую активность против всех исследованных организмов. Величины МИК близки для двух антибактериальных агентов за исключением одного штамма (S. aureus UC-20206), который показывает немного более высокое значение для линезолида (4 мкг/мл) по сравнению с ванкомицином (1 мкг/мл).
Пример 8
Эффекты субингибирующих концентраций на адгезию
Экспериментальные результаты для эффектов субингибирующих концентраций линезолида на адгезию штаммов S. aureus и S. epidermidis представлены ниже в таблице 2.
| Таблица 2 | ||||
| Ингибирующие эффекты терапевтических и субтерапевтических обработок линезолидом на бактериальную адгезию клинических изолятов, которые способны образовывать колонии на абиотических поверхностях | ||||
| Вид | Штамм | Лекарство мг/мл |
Адгезия | |
| Средн.OD550 ++ | % Ингибирования | |||
| S.aureus | UC-20205 | 2,0+ 1,0 0,5 контроль |
0,001 ± 0,001* 0,005 ± 0,007* 0,013 ± 0,007* 0,531 ± 0,107* |
99,7 99,0 97,6 - |
| UC-20206 | 4,0+ 2,0 1,0 контроль |
0,003 ± 0,003* 0,002 ± 0,002* 0,001 ± 0,002* 0,224 ± 0,027* |
98,5 99,3 99,4 - |
|
| S.epidermidis | UC-20207 | 2,0+ 1,0 0,5 контроль |
0,010 ± 0,005* 0,007 ± 0,002* 0,513 ± 0,227* 2,220 ± 0,310* |
99,5 99,7 76,9 - |
| UC-20208 | 2,0+ 1,0 0,5 контроль |
0,000 ± 0,001* 0,001 ± 0,002* 1,342 ± 0,791* 1,831 ± 0,208* |
100,0 99,9 26,7 - |
|
| RP62A | 2,0+ 1,0 0,5 контроль |
0,001 ± 0,001* 0,002 ± 0,002* 0,125 ± 0,133* 2,805 ± 0,294* |
100,0 99,9 95,5 - |
|
* Существенно отличается от инфицированных/необработанных контрольных культур (р<0,05)
+ Минимальная ингибирующая концентрация
++ Величины представляют средние значения оптической плотности ячеек в шести повторностях из двух отдельных экспериментов (три повторности на эксперимент) ± стандартное отклонение
Экспериментальные результаты для эффектов субингибирующих концентраций ванкомицина на адгезию штаммов S. aureus и S. epidermidis представлены ниже в таблице 3.
| Таблица 3 | ||||
| Ингибирующие эффекты терапевтических и субтерапевтических обработок ванкомицином на бактериальную адгезию клинических изолятов, которые способны образовывать колонии на абиотических поверхностях | ||||
| Вид | Штамм | Лекарство мг/мл |
Адгезия | |
| Средн.OD550 ++ | %Ингибирования | |||
| S.aureus | UC-20205 | 1,0+ 0,5 0,25 контроль |
0,000 ± 0,001* 0,012 ± 0,013* 0,730 ± 0,202* 0,584 ± 0,098* |
100,0 98,0 0,0 - |
| UC-20206 | 1,0+ 0,5 0,25 контроль |
0,000 ± 0,003* 0,267 ± 0,044* 0,192 ± 0,020* 0,219 ± 0,026* |
99,9 0,0 12,5 - |
|
| S.epidermidis | UC-20207 | 2,0+ 1,0 0,5 контроль |
0,001 ± 0,002* 2,799 ± 0,120* 2,177 ± 0,424* 2,129 ± 0,406* |
100,0 0,0 0,0 - |
| UC-20208 | 2,0+ 1,0 0,5 контроль |
0,000 ± 0,001* 2,716 ± 0,400* 2,165 ± 0,150* 1,844 ± 0,138* |
100,0 0,0 0,0 - |
|
| RP62A | 2,0+ 1,0 0,5 контроль |
0,000 ± 0,002* 1,728 ± 0,952* 2,816 ± 0,377* 2,727 ± 0,257* |
100,0 36,6 0,0 - |
|
* Существенно отличается от инфицированных/необработанных контрольных культур (р,05)
+ Минимальная ингибирующая концентрация
++ Величины представляют средние значения оптической плотности ячеек в шести повторностях из двух отдельных экспериментов (три повторности на эксперимент) ± стандартное отклонение
Экспериментальные результаты, представленные выше в таблицах 2 и 3 и показывающие эффекты субингибирующих концентраций линезолида и ванкомицина на адгезию штаммов S. aureus и S. epidermidis, обобщены и представлены графически на фиг. 1-5. В частности, на фиг. 1-5 приведены графики, иллюстрирующие эффекты субингибирующих концентраций линезолида и ванкомицина на адгезию штаммов S. aureus и S. epidermidis к полистиролу: (фиг. 1) S. aureus UC-20205; (фиг. 2) S. aureus UC-20206; (фиг. 3) S. epidermidis UC-20207; (фиг. 4) S. epidermidis UC-20208 и (фиг. 5) S. epidermidis RP62A.
Как показано в таблице 2 и на фиг. 1-5, линезолид является высоко эффективным в подавлении бактериальной адгезии к полистирольным поверхностям при половине МИК. Процент ингибирования адгезии относительно контроля больше или равен 99,0% для всех оцениваемых штаммов. Данные оптической плотности для адгезии обработанных линезолидом культур существенно (p,05) снижены по сравнению с инфицированными/необработанными культурами. Линезолид эффективен также в предотвращении адгезии при одной четверти МИК для всех штаммов кроме одного (S. epidermidis UC-20208). Отмечают также статистическую разницу в показаниях оптической плотности для обработанных культур относительно необработанных для 4 из 5 исследованных штаммов. В противоположность этому, как показано в таблице 3 и на фиг. 1-5, субингибирующие концентрации ванкомицина демонстрируют минимальную активность или ее отсутствие относительно бактериальной адгезии, за исключением одного штамма (S. aureus UC-20205), на который воздействовали половиной МИК.
Достоверность исследования адгезии с применением микротитровальных планшетов оценивают при использовании референсных штаммов S. hominis SP2 (не прилипает) и S. epidermidis RP62A (сильно прилипает). Средние показания оптической плотности для SP2 и RP62A составляют 0,059 ± 0,004 и 2,789 ± 0,266, соответственно. Значения находятся в диапазоне от 0,055 до 0,067 для SP2 и от 2,466 до 3,234 для RP62A. Представленные здесь данные отражают 12 повторностей (ячеек) на штамм. Данные результаты аналогичны результатам, задокументированным в опубликованных сообщениях (смотри работу Deighton и др., J. Clin. Microbiol 28 (11): 2442-2447 (1990)), и показывают, что исследование на микротитровальном планшете для определения адгезии является достоверным и воспроизводимым. Ни линезолид, ни ванкомицин не способствуют адгезии не прилипающего штамма SP2 (данные не показаны).
На фиг. 6 и 7 показаны фотографии, полученные на сканирующем электронном микроскопе, для S. aureus UC-20205 и S. epidermidis RP62A при воздействии линезолида и ванкомицина при одной четверти МИК. Конкретно, на фиг. 6A-D представлены фотографии, полученные на сканирующем электронном микроскопе, показывающие микроколонии S. aureus UC-20205, прилипшие к полистирольной поверхности: (A) не инфицированный контроль; (B) инфицированный/необработанный контроль; (C) инфицированная культура, обработанная линезолидом при одной четверти МИК и (D) инфицированная культура, обработанная ванкомицином при одной четверти МИК. На фиг. 7A-D представлены фотографии, полученные на сканирующем электронном микроскопе, показывающие микроколонии S. epidermidis RP62A, прилипшие к полистирольной поверхности: (A) не инфицированный контроль; (B) инфицированный/необработанный контроль; (C) инфицированная культура, обработанная линезолидом при одной четверти МИК и (D) инфицированная культура, обработанная ванкомицином при одной четверти МИК. В инфицированных/необработанных культурах на поверхности клеток штамма UC-20205 наблюдают белки адгезины, тогда как RP62A демонстрирует множественные слои неподвижных клеток, которые прилипают к полимерной поверхности, а также друг к другу. Клеточная агрегация в многоклеточные слои "неподвижных сообществ" является показателем образования биологических пленок. К сожалению, фиксирующие и дегидратирующие средства, применяемые для обработки образцов, растворяют данную внеклеточную матрицу, делая видным только каркас. Данные микрофотографии культур, которые профилактически обработаны субингибирующими концентрациями линезолида или ванкомицина, подкрепляют выводы исследования на микротитровальном планшете. Количество прилипших бактерий, которые наблюдают на полистирольной поверхности, значительно снижено в культурах, обработанных линезолидом, по сравнению с необработанными культурами. Видно только несколько микроколоний изолятов. В культурах, обработанных ванкомицином, не отмечают влияния на бактериальную адгезию для обоих исследованных штаммов.
Пример 9
Ингибирующие эффекты линезолида на адгезию стафилококков в зависимости от времени обработки
Изучают антиадгезионные эффекты линезолида и ванкомицина на три изолята S. epidermidis (UC-20207, UC-20208 и RP62A), выделенных из крови пациентов с инфицированием через ток крови, связанным с применением катетера.
Как показано ниже в таблице 4, бактериальные суспензии (5 x 105 CFU/мл) добавляют в полистирольные ячейки и обрабатывают линезолидом или ванкомицином при концентрации от половины МИК до четырехкратной МИК через 0, 2, 4 или 6 ч после инокуляции. Эффекты лекарств на бактериальную адгезию измеряют через 18 ч после начала обработки, применяя количественное спектрофотометрическое исследование.
| Таблица 4 | |||
| Временная схема исследования адгезии | |||
| Обрабатываемая группа | Время между инокуляцией и обработкой линезолидом или ванкомицином (ч) | Время между обработкой линезолидом или ванкомицином и спектрофотометрическим исследованием (ч) | Время между инокуляцией и спектрофотометрическим исследованием (ч) |
| 1 | 0 | 18 | 18 |
| 2 | 2 | 18 | 20 |
| 3 | 4 | 18 | 22 |
| 4 | 6 | 18 | 24 |
Относительное ингибирование адгезии выражают следующим уравнением (OD контрольной ячейки - OD обработанной ячейки/OD контрольной ячейки) х 100, где OD обозначает среднюю оптическую плотность для шести повторенных ячеек из двух отдельных экспериментов (три повторности на эксперимент). Контролем являются инфицированные культуры, не содержащие лекарства.
Первичная интенсивность, непостоянная в данном исследовании, измерялась для бактерий, прилипших к полистирольным поверхностям через 18-24 ч развития. Для определения, существуют ли статистически значимые различия между обработанными группами (4хМИК, 2хМИК, МИК и ½МИК) по сравнению с инфицированными/необработанными контролями, применяют множественные сравнения согласно тесту Dunnett (Montgomery, Design and Analysis of Experiments (1991)) для каждого клинического штамма. Различия считают статистически значимыми, если p < 0,05.
Ниже в таблице 5 представлены экспериментальные результаты для ингибирующих эффектов терапевтических (МИК) и субтерапевтических (половина МИК) обработок линезолидом штаммов S. epidermidis для различных интервалов времени до обработки. Величины, имеющие статистически значимую разницу по сравнению с контролем, указаны звездочкой (*).
| Таблица 5 | |||||||||
| Ингибирующие эффекты терапевтических и субтерапевтических обработок линезолидом на штаммы S. epidermidis при различных интервалах времени до обработки | |||||||||
| Штамм | Линезолид мкг/мл | Отсроченная обработка с введением лекарства по схеме | |||||||
| 0 час.+ Средняя OD550 |
%§ | 2 час.+ Средняя OD550 |
%§ | 4 час.+ Средняя OD550 |
%§ | 6 час.+ Средняя OD550 |
%§ | ||
| UC-20207 | 8,0 4,0 2,0¶ 1,0 контроль |
0,005 ± 0,002* 0,009 ± 0,004* 0,024 ± 0,005* 0,084 ± 0,049* 2,391 ± 0,214* |
99,8 99,6 99,0 96,5 - |
0,009 ± 0,003* 0,007 ± 0,001* 0,004 ± 0,002* 0,064 ± 0,046* 2,530 ± 0,228* |
99,6 99,7 99,8 97,5 - |
0,028 ± 0,020* 0,022 ± 0,010* 0,356 ± 0,418* 0,921 ± 0,119* 2,913 ± 0,285* |
99,0 99,2 87,8 68,4 - |
0,662 ± 0,103* 1,558 ± 0,094* 2,938 ± 0,119* 2,757 ± 0,173* 2,658 ± 0,181* |
75,1 41,4 0,0 0,0 - |
| UC-20208 | 8,0 4,0 2,0¶ 1,0 контроль |
0,000 ± 0,001* 0,002 ± 0,001* 0,001 ± 0,001* 0,001 ± 0,002* 1,161 ± 0,224* |
100,0 99,8 99,9 99,9 - |
0,004 ± 0,001* 0,004 ± 0,001* 0,003 ± 0,000* 0,003 ± 0,001* 1,434 ± 0,108* |
99,7 99,7 99,8 99,8 - |
0,000 ± 0,003* 0,000 ± 0,001* 0,000 ± 0,003* 0,856 ± 0,472* 1,099 ± 0,170* |
100,0 100,0 100,0 22,1 - |
0,092 ± 0,053* 0,363 ± 0,280* 0,602 ± 0,300* 0,127 ± 0,133* о,842 ± 0,259* |
89,1 56,8 0,0 0,0 - |
| PR62A | 8,0 4,0 2,0¶ 1,0 контроль |
0,002 ± 0,002* 0,002 ± 0,002* 0,004 ± 0,004* 0,000 ± 0,002* 2,234 ± 0,223* |
99,9 99,9 99,8 100,0 - |
0,003 ± 0,001* 0,003 ± 0,002* 0,001 ± 0,001* 0,000 ± 0,000* 1,915 ± 0,272* |
99,8 99,9 99,9 100,0 - |
0,000 ± 0,001* 0,002 ± 0,004* 0,003 ± 0,005* 0,000 ± 0,001* 1,268 ± 0,179* |
100,0 99,8 99,8 100,0 - |
0,021 ± 0,010* 0,082 ± 0,051* 0,083 ± 0,067* 0,274 ± 0,183* 1,266 ± 0,539* |
98,4 93,5 93,4 78,4 - |
* Существенно отличается от инфицированных/необработанных контрольных культур (р<0,05)
+ Время после инфицирования (ч)
++ Величины представляют собой средние значения оптической плотности ячеек в шести повторностях из двух отдельных экспериментов (три повторности на эксперимент) ± стандартное отклонение
§ - Процент ингибирования бактериальной адгезии относительно контролей ([OD контрольной ячейки - OD обработанной ячейки/OD контрольной ячейки] х 100).
¶ - Минимальная ингибирующая концентрация (МИК).
Ниже в таблице 6 представлены экспериментальные результаты для ингибирующих эффектов терапевтических (МИК) и субтерапевтических (половина МИК) обработок ванкомицином штаммов S. epidermidis при различных интервалах времени до обработки. Величины, имеющие статистически значимую разницу по сравнению с контролем, указаны звездочкой (*).
| Таблица 6 | |||||||||
| Ингибирующие эффекты терапевтических и субтерапевтических обработок ванкомицином штаммов S. epidermidis при различных интервалах времени до обработки | |||||||||
| Штамм | Ванкомицин мкг/мл | Отсроченная обработка с введением лекарства по схеме | |||||||
| 0 час.+ Средняя OD550 |
§% | 2 час.+ Средняя OD550 |
§% | 4 час.+ Средняя OD550 |
§% | 6 час.+ Средняя OD550 |
§% | ||
| UC-20207 | 8,0 4,0 2,0¶ 1,0 контроль |
0,003 ± 0,002* 0,003 ± 0,002* 0,005 ± 0,004* 2,389 ± 0,175* 2,297 ± 0,180* |
99,9 99,9 99,8 0,0 - |
0,007 ± 0,003* 0,006 ± 0,003* 0,014 ± 0,010* 2,723 ± 0,294* 2,542 ± 0,169* |
99,7 99,8 99,4 0,0 - |
0,028 ± 0,014* 0,033 ± 0,010* 2,693 ± 0,527* 2,824 ± 0,153* 2,794 ± 0,224* |
99,0 98,8 3,6 0,0 - |
0,326 ± 0,046* 3,050 ± 0,343* 2,979 ± 0,168* 2,959 ± 0,245* 2,839 ± 0,140* |
88,5 0,0 0,0 0,0 - |
| UC-20208 | 8,0 4,0 2,0¶ 1,0 контроль |
0,001 ± 0,001* 0,001 ± 0,001* 0,001 ± 0,000* 1,865 ± 0,309* 1,171 ± 0,139* |
99,9 99,9 99,9 0,0 - |
0,000 ± 0,001* 0,000 ± 0,001* 0,014 ± 0,036* 1,865 ± 0,435* 1,509 ± 0,155* |
100,0 100,0 99,1 0,0 - |
0,006 ± 0,002* 0,239 ± 0,261* 2,414 ± 0,558* 1,752 ± 0,566* 1,606 ± 0,252* |
99,6 85,1 0,0 0,0 - |
3,099 ± 0,351* 1,555 ± 0,206* 1,281 ± 0,555* 1,127 ± 0,463* 0,890 ± 0,374* |
0,0 0,0 0,0 0,0 - |
| PR62A | 8,0 4,0 2,0¶ 1,0 контроль |
0,001 ± 0,001* 0,002 ± 0,002* 0,002 ± 0,002* 2,664 ± 0,632* 2,159 ± 0,278* |
99,9 99,9 99,9 69,3 - |
0,000 ± 0,001* 0,000 ± 0,002* 0,000 ± 0,001* 1,147 ± 0,527* 1,958 ± 0,310* |
100,0 100,0 100,0 41,1 - |
0,004 ± 0,004* 0,003 ± 0,004* 1,312 ± 0,936* 2,311 ± 0,318* 1,858 ± 0,261* |
99,8 99,8 29,4 0,0 - |
0,025 ± 0,030* 1,562 ± 0,573* 2,114 ± 0,439* 2,202 ± 0,238* 1,928 ± 0,266* |
98,7 19,0 0,0 0,0 - |
* Существенно отличается от инфицированных/необработанных контрольных культур (р<0,05)
+ Время после инфицирования (ч)
++ Величины представляют средние значения оптической плотности ячеек в шести повторностях из двух отдельных экспериментов (три повторности на эксперимент) ± стандартное отклонение.
§ - Процент ингибирования бактериальной адгезии относительно контролей ([OD контрольной ячейки - OD обработанной ячейки/OD контрольной ячейки] х 100).
¶ - Минимальная ингибирующая концентрация (МИК).
Терапевтические уровни (МИК) линезолида демонстрируют высокую антиадгезионную активность после обработок, отсроченных на 2 и 4 часа. См. таблицу 5, фиг. 8 и 9. Процент ингибирования адгезии относительно контролей, составляет от 87,8% до 100%. Даже при субтерапевтических концентрациях (половина МИК) подавление адгезии стафилококков все еще очевидно в большинстве культур; средние ингибирующие эффекты составляют 99,1%±1,4 (2 ч) и 63,5%±39,2 (4 ч). См. фиг. 10. Линезолид при 4хМИК также оказывает существенные ингибирующие эффекты (87,5%±11,7) в культурах, которые обработаны с 6-часовой задержкой. Терапевтические уровни ванкомицина, вводимого через 2 ч после инфицирования, одинаково эффективны. Однако субтерапевтические концентрации демонстрируют минимальную активность или ее отсутствие относительно клеточной адгезии. Смотри таблицу 6, фиг. 8, 9 и 11. Если обработку ванкомицином откладывают на 4-6 ч, то только самые высокие концентрации (> МИК) демонстрируют антиадгезионную активность.
Данные результаты показывают, что оксазолидиноны, такие как линезолид, имеют важное значение для противомикробной профилактики у пациентов с имплантированными медицинскими устройствами.
Предыдущее подробное описание дано только для ясности понимания, и, таким образом, его не следует понимать как ненужное ограничение, и специалистам в данной области могут быть ясны модификации в рамках объема данного изобретения.
Claims (17)
1. Способ получения медицинского устройства, устойчивого к адгезии микробов, где указанный способ включает введение эффективного количества линезолида в указанное медицинское устройство, где эффективное количество линезолида составляет величину менее чем минимальная ингибирующая концентрация (МИК) линезолида.
2. Способ по п.1, где стадия введения включает погружение медицинского устройства в водный раствор, содержащий линезолид.
3. Способ по пункту 1, где медицинское устройство содержит полимерный материал и стадия введения включает совместную экструзию полимерного материала с линезолидом.
4. Способ по п.1, дополнительно включающий нагревание медицинского устройства после стадии введения до температуры от примерно 100 до примерно 121°С.
5. Способ по п.1, где медицинское устройство представляет собой шовный материал, ортопедическое приспособление, стент, катетер, проволочный направитель, шунт, протез, кардиостимулятор, нейронный стимулятор или трансплантат сосуда.
6. Способ по п.1, где эффективное количество линезолида составляет около одной четверти МИК для S. aureus UC-20205.
7. Способ по п.1, где эффективное количество линезолида составляет около половины МИК для S. aureus UC-20205.
8. Способ предотвращения или ингибирования адгезии микробов к медицинскому устройству, где способ включает введение эффективного количества линезолида в указанное медицинское устройство, где эффективное количество линезолида составляет величину менее чем минимальная ингибирующая концентрация линезолида.
9. Способ по п.8, где стадия введения включает погружение медицинского устройства в водный раствор, содержащий линезолид.
10. Способ по п.8, дополнительно включающий нагревание медицинского устройства после стадии введения до температуры от примерно 100 до примерно 121°С.
11. Способ по п.8, где медицинское устройство представляет собой шовный материал, ортопедическое приспособление, стент, катетер, проволочный направитель, шунт, протез, кардиостимулятор, нейронный стимулятор или трансплантат сосуда.
12. Способ по п.8, где адгезия микробов вызвана стафилококками.
13. Способ по п.8, где стафилококки выбраны из группы, состоящей из S. aureus, S. epidermidis и S. hominis.
14. Способ по п.8, где эффективное количество линезолида составляет около одной четверти МИК для S. aureus UC-20205.
15. Способ по п.8, где эффективное количество линезолида составляет около половины МИК для S. aureus UC-20205.
16. Медицинское устройство, устойчивое к адгезии микробов, для применения в организме человека или животного, включающее эффективное количество линезолида, где эффективное количество линезолида составляет величину менее чем минимальная ингибирующая концентрация линезолида.
17. Медицинское устройство по п.16, которое представляет собой шовный материал, ортопедическое приспособление, стент, катетер, проволочный направитель, шунт, протез, кардиостимулятор, нейронный стимулятор или трансплантат сосуда.
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US35076702P | 2002-01-22 | 2002-01-22 | |
| US60/350,767 | 2002-01-22 | ||
| US38065602P | 2002-05-15 | 2002-05-15 | |
| US60/380,656 | 2002-05-15 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2004125584A RU2004125584A (ru) | 2005-04-20 |
| RU2314831C2 true RU2314831C2 (ru) | 2008-01-20 |
Family
ID=27616780
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2004125584/15A RU2314831C2 (ru) | 2002-01-22 | 2003-01-21 | Медицинские устройства, устойчивые к инфицированию |
Country Status (15)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US7322965B2 (ru) |
| EP (1) | EP1467773A1 (ru) |
| JP (1) | JP2005515029A (ru) |
| KR (1) | KR20040077753A (ru) |
| CN (1) | CN1301751C (ru) |
| BR (1) | BR0307066A (ru) |
| CA (1) | CA2469665A1 (ru) |
| CO (1) | CO5611101A2 (ru) |
| HK (1) | HK1072909A1 (ru) |
| MX (1) | MXPA04007067A (ru) |
| NO (1) | NO20043494L (ru) |
| NZ (1) | NZ533694A (ru) |
| PL (1) | PL371335A1 (ru) |
| RU (1) | RU2314831C2 (ru) |
| WO (1) | WO2003061715A1 (ru) |
Families Citing this family (44)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2314831C2 (ru) | 2002-01-22 | 2008-01-20 | Фармация Энд Апджон Компани | Медицинские устройства, устойчивые к инфицированию |
| TW200420573A (en) * | 2002-09-26 | 2004-10-16 | Rib X Pharmaceuticals Inc | Bifunctional heterocyclic compounds and methods of making and using same |
| JP2006523229A (ja) * | 2003-03-05 | 2006-10-12 | リブ−エックス ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド | 二官能性複素環式化合物ならびにその製造および使用方法 |
| WO2004084973A2 (en) * | 2003-03-24 | 2004-10-07 | Becton, Dickinson And Company | Invisible antimicrobial glove and hand antiseptic |
| WO2005042554A1 (en) * | 2003-10-30 | 2005-05-12 | Rib-X Pharmaceuticals, Inc. | Bifunctional macrolide heterocyclic compounds and methods of making and using the same |
| US20070270357A1 (en) * | 2003-11-18 | 2007-11-22 | Farmer Jay J | Bifunctional Macrolide Heterocyclic Compounds and Methods of Making and Using the Same |
| EP1723159B1 (en) | 2004-02-27 | 2019-06-12 | Melinta Therapeutics, Inc. | Macrocyclic compounds and methods of making and using the same |
| US8512294B2 (en) * | 2006-07-28 | 2013-08-20 | Becton, Dickinson And Company | Vascular access device antimicrobial materials and solutions |
| US20090024096A1 (en) * | 2007-07-20 | 2009-01-22 | Baxter International Inc. | Immobilization of dyes and antimicrobial agents on a medical device |
| US9005263B2 (en) * | 2007-08-17 | 2015-04-14 | The Invention Science Fund I, Llc | System, devices, and methods including actively-controllable sterilizing excitation delivery implants |
| US20090163977A1 (en) * | 2007-08-17 | 2009-06-25 | Searete Llc, A Limited Liability Corporation Of The State Of Delaware | System, devices, and methods including sterilizing excitation delivery implants with cryptographic logic components |
| US8162924B2 (en) | 2007-08-17 | 2012-04-24 | The Invention Science Fund I, Llc | System, devices, and methods including actively-controllable superoxide water generating systems |
| US8734718B2 (en) * | 2007-08-17 | 2014-05-27 | The Invention Science Fund I, Llc | Systems, devices, and methods including catheters having an actively controllable therapeutic agent delivery component |
| US20090163964A1 (en) * | 2007-08-17 | 2009-06-25 | Searete Llc, A Limited Liability Corporation Of The State Of Delaware | System, devices, and methods including sterilizing excitation delivery implants with general controllers and onboard power |
| US8460229B2 (en) | 2007-08-17 | 2013-06-11 | The Invention Science Fund I, Llc | Systems, devices, and methods including catheters having components that are actively controllable between transmissive and reflective states |
| US8753304B2 (en) * | 2007-08-17 | 2014-06-17 | The Invention Science Fund I, Llc | Systems, devices, and methods including catheters having acoustically actuatable waveguide components for delivering a sterilizing stimulus to a region proximate a surface of the catheter |
| US20090177254A1 (en) * | 2007-08-17 | 2009-07-09 | Searete Llc, A Limited Liability Of The State Of The State Of Delaware | System, devices, and methods including actively-controllable electrostatic and electromagnetic sterilizing excitation delivery system |
| US8702640B2 (en) * | 2007-08-17 | 2014-04-22 | The Invention Science Fund I, Llc | System, devices, and methods including catheters configured to monitor and inhibit biofilm formation |
| US8706211B2 (en) * | 2007-08-17 | 2014-04-22 | The Invention Science Fund I, Llc | Systems, devices, and methods including catheters having self-cleaning surfaces |
| US20090048648A1 (en) * | 2007-08-17 | 2009-02-19 | Searete Llc, A Limited Liability Corporation Of The State Of Delaware | Self-sterilizing device |
| US8366652B2 (en) * | 2007-08-17 | 2013-02-05 | The Invention Science Fund I, Llc | Systems, devices, and methods including infection-fighting and monitoring shunts |
| US8647292B2 (en) * | 2007-08-17 | 2014-02-11 | The Invention Science Fund I, Llc | Systems, devices, and methods including catheters having components that are actively controllable between two or more wettability states |
| US20110160644A1 (en) * | 2007-08-17 | 2011-06-30 | Searete Llc, A Limited Liability Corporation Of The State Of Delaware | Systems, devices, and methods including catheters configured to release ultraviolet energy absorbing agents |
| US20110152751A1 (en) * | 2008-12-04 | 2011-06-23 | Searete Llc, A Limited Liability Corporation Of The State Of Delaware | Systems, devices, and methods including catheters having UV-Energy emitting coatings |
| US20110295090A1 (en) | 2008-12-04 | 2011-12-01 | Searete Llc, A Limited Liability Corporation Of The State Of Delaware | Systems, devices, and methods including implantable devices with anti-microbial properties |
| US8585627B2 (en) * | 2008-12-04 | 2013-11-19 | The Invention Science Fund I, Llc | Systems, devices, and methods including catheters configured to monitor biofilm formation having biofilm spectral information configured as a data structure |
| US8821455B2 (en) * | 2009-07-09 | 2014-09-02 | Becton, Dickinson And Company | Antimicrobial coating for dermally invasive devices |
| US20110065798A1 (en) * | 2009-09-17 | 2011-03-17 | Becton, Dickinson And Company | Anti-infective lubricant for medical devices and methods for preparing the same |
| US9750928B2 (en) | 2013-02-13 | 2017-09-05 | Becton, Dickinson And Company | Blood control IV catheter with stationary septum activator |
| US9695323B2 (en) | 2013-02-13 | 2017-07-04 | Becton, Dickinson And Company | UV curable solventless antimicrobial compositions |
| US9750927B2 (en) | 2013-03-11 | 2017-09-05 | Becton, Dickinson And Company | Blood control catheter with antimicrobial needle lube |
| US9327095B2 (en) | 2013-03-11 | 2016-05-03 | Becton, Dickinson And Company | Blood control catheter with antimicrobial needle lube |
| US9789279B2 (en) | 2014-04-23 | 2017-10-17 | Becton, Dickinson And Company | Antimicrobial obturator for use with vascular access devices |
| US9675793B2 (en) | 2014-04-23 | 2017-06-13 | Becton, Dickinson And Company | Catheter tubing with extraluminal antimicrobial coating |
| US10376686B2 (en) | 2014-04-23 | 2019-08-13 | Becton, Dickinson And Company | Antimicrobial caps for medical connectors |
| US10232088B2 (en) | 2014-07-08 | 2019-03-19 | Becton, Dickinson And Company | Antimicrobial coating forming kink resistant feature on a vascular access device |
| JP7066615B2 (ja) | 2015-08-18 | 2022-05-13 | コーメディクス・インコーポレーテッド | 抗菌性縫合糸を含む抗菌性創傷閉鎖材料、及びそれを用いた創傷閉鎖法 |
| US10493244B2 (en) | 2015-10-28 | 2019-12-03 | Becton, Dickinson And Company | Extension tubing strain relief |
| EP3389735B1 (en) | 2015-12-19 | 2022-03-23 | Cardiac Pacemakers, Inc. | Biologically inert coating for implantable medical devices |
| WO2017218787A1 (en) | 2016-06-16 | 2017-12-21 | Cardiac Pacemakers, Inc. | Hydrophilization and antifouling of enhanced metal surfaces |
| WO2018031692A1 (en) | 2016-08-09 | 2018-02-15 | Cardiac Pacemakers, Inc. | Functionalized peg for implantable medical devices |
| EP3496775B1 (en) | 2016-08-09 | 2021-05-05 | Cardiac Pacemakers, Inc. | Durable antimicrobial layer for implantable medical devices |
| CN110087704B (zh) | 2016-12-18 | 2022-06-10 | 心脏起搏器股份公司 | 抗感染药物流出装置 |
| EP3554624A1 (en) | 2016-12-18 | 2019-10-23 | Cardiac Pacemakers, Inc. | Infection fighting drug eluting lead boot |
Family Cites Families (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4723950A (en) * | 1984-12-12 | 1988-02-09 | C. R. Bard, Inc. | Urine drainage bag outlet with barrier against microbial infection |
| US5055455A (en) * | 1988-09-28 | 1991-10-08 | Brigham And Women's Hospital | Capsular polysaccharide adhesin antigen, preparation, purification and use |
| US20050222632A1 (en) | 1992-05-17 | 2005-10-06 | Obino Stan F | Device and method for the treatment of cardiac disorders |
| DK0623615T3 (da) | 1993-05-01 | 1999-12-13 | Merck Patent Gmbh | Adhæsionsreceptor-antagonister |
| US5688792A (en) * | 1994-08-16 | 1997-11-18 | Pharmacia & Upjohn Company | Substituted oxazine and thiazine oxazolidinone antimicrobials |
| EP0744971A1 (en) * | 1994-02-15 | 1996-12-04 | Biosearch Italia S.p.A. | Central venous catheters loaded with antibiotics of the ramoplanin group preventing development of catheter related infections |
| US5624704A (en) * | 1995-04-24 | 1997-04-29 | Baylor College Of Medicine | Antimicrobial impregnated catheters and other medical implants and method for impregnating catheters and other medical implants with an antimicrobial agent |
| US6132765A (en) * | 1996-04-12 | 2000-10-17 | Uroteq Inc. | Drug delivery via therapeutic hydrogels |
| WO2001095876A1 (en) * | 2000-06-09 | 2001-12-20 | Baylor College Of Medicine | The combination of antimicrobial agents and bacterial interference to coat medical devices |
| WO2003008389A1 (en) | 2001-07-16 | 2003-01-30 | Ranbaxy Laboratories Limited | Oxazolidinone derivatives as potential antimicrobials |
| US20030219461A1 (en) * | 2000-09-12 | 2003-11-27 | Britten Nancy J. | Parenteral combination therapy for infective conditions |
| RU2314831C2 (ru) | 2002-01-22 | 2008-01-20 | Фармация Энд Апджон Компани | Медицинские устройства, устойчивые к инфицированию |
| WO2004014392A1 (en) | 2002-07-29 | 2004-02-19 | Ranbaxy Laboratories Limited | Oxazolidinone derivatives as antimicrobials |
-
2003
- 2003-01-21 RU RU2004125584/15A patent/RU2314831C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2003-01-21 KR KR10-2004-7011249A patent/KR20040077753A/ko not_active Application Discontinuation
- 2003-01-21 BR BR0307066-2A patent/BR0307066A/pt not_active IP Right Cessation
- 2003-01-21 CN CNB03802392XA patent/CN1301751C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2003-01-21 PL PL03371335A patent/PL371335A1/xx not_active Application Discontinuation
- 2003-01-21 WO PCT/US2003/001710 patent/WO2003061715A1/en active Application Filing
- 2003-01-21 CA CA002469665A patent/CA2469665A1/en not_active Abandoned
- 2003-01-21 MX MXPA04007067A patent/MXPA04007067A/es not_active Application Discontinuation
- 2003-01-21 JP JP2003561656A patent/JP2005515029A/ja active Pending
- 2003-01-21 EP EP03732006A patent/EP1467773A1/en not_active Withdrawn
- 2003-01-21 NZ NZ533694A patent/NZ533694A/en unknown
- 2003-01-21 US US10/348,066 patent/US7322965B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2004
- 2004-08-17 CO CO04079878A patent/CO5611101A2/es not_active Application Discontinuation
- 2004-08-20 NO NO20043494A patent/NO20043494L/no not_active Application Discontinuation
-
2005
- 2005-06-29 HK HK05105508A patent/HK1072909A1/xx not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL371335A1 (en) | 2005-06-13 |
| WO2003061715A1 (en) | 2003-07-31 |
| EP1467773A1 (en) | 2004-10-20 |
| CA2469665A1 (en) | 2003-07-31 |
| CO5611101A2 (es) | 2006-02-28 |
| US20030176848A1 (en) | 2003-09-18 |
| NZ533694A (en) | 2006-08-31 |
| BR0307066A (pt) | 2004-12-28 |
| CN1617746A (zh) | 2005-05-18 |
| NO20043494L (no) | 2004-08-20 |
| JP2005515029A (ja) | 2005-05-26 |
| RU2004125584A (ru) | 2005-04-20 |
| HK1072909A1 (en) | 2005-09-16 |
| KR20040077753A (ko) | 2004-09-06 |
| CN1301751C (zh) | 2007-02-28 |
| MXPA04007067A (es) | 2004-11-01 |
| US7322965B2 (en) | 2008-01-29 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2314831C2 (ru) | Медицинские устройства, устойчивые к инфицированию | |
| KR101955636B1 (ko) | 항생제 그리고 분산제 또는 항-부착제를 포함하는 조성물 | |
| RO122247B1 (ro) | Compoziţii farmaceutice de tizoxanidă şi nitazoxanidă | |
| AP1103A (en) | Pharmaceutical compositions of tizoxanide and nitazoxanide. | |
| CN114748692B (zh) | 一种基于介孔二氧化硅的表面功能化钛基植入体及其制备方法与应用 | |
| US20220241461A1 (en) | Bioimplant with evanescent coating film | |
| CN113440654B (zh) | 一种载药抗菌涂层及其制备方法 | |
| EP2317998A1 (en) | Fulvic acid and antibiotic combination | |
| JP2004501683A (ja) | 埋込可能医療装置用抗菌物質レザバー | |
| EA013519B1 (ru) | Противобактериальный или педикулоцидный препарат, содержащий аллицин | |
| AU2003237472A1 (en) | Infection-resistant medical devices | |
| TW202108187A (zh) | 塗覆抗微生物肽於生物材料之方法及藉此塗覆之生物材料 | |
| RU2114913C1 (ru) | Способ определения эффективной дозы антисептического препарата, электролизного раствора гипохлорита натрия, для лечения и профилактики гнойно-воспалительных заболеваний | |
| WO2024085926A2 (en) | Compositions and methods of treating, preventing or inhibiting a facultative anaerobe infection | |
| CN109908126A (zh) | 半胱氨酸在制备抗真菌生物被膜药物中的应用 | |
| US20190000786A1 (en) | Methods of diagnosing and treating infected implants | |
| CN117180242A (zh) | 龙血素a在制备抗幽门螺杆菌药物中的应用 | |
| CN116855410A (zh) | 一株粘质沙雷氏菌pdaw2和沙雷菌素及制备方法和应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20080122 |