RU2303596C2 - Фармакологически активное соединение нового дауэр-феромона спящего состояния, способ для его выделения и определения (характеризации) - Google Patents

Фармакологически активное соединение нового дауэр-феромона спящего состояния, способ для его выделения и определения (характеризации) Download PDF

Info

Publication number
RU2303596C2
RU2303596C2 RU2005118102/04A RU2005118102A RU2303596C2 RU 2303596 C2 RU2303596 C2 RU 2303596C2 RU 2005118102/04 A RU2005118102/04 A RU 2005118102/04A RU 2005118102 A RU2005118102 A RU 2005118102A RU 2303596 C2 RU2303596 C2 RU 2303596C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
pheromone
sleeping
fraction
compound
column
Prior art date
Application number
RU2005118102/04A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2005118102A (ru
Inventor
Йоунг Ки ПАИК (KR)
Йоунг Ки ПАИК
Пан Йоунг ДЗЕОНГ (KR)
Пан Йоунг ДЗЕОНГ
Original Assignee
Кдр Байотек. Ко., Лтд.
Йоунг Ки ПАИК
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Кдр Байотек. Ко., Лтд., Йоунг Ки ПАИК filed Critical Кдр Байотек. Ко., Лтд.
Publication of RU2005118102A publication Critical patent/RU2005118102A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2303596C2 publication Critical patent/RU2303596C2/ru

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D309/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings
    • C07D309/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D309/08—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D309/10—Oxygen atoms
    • C07D309/12—Oxygen atoms only hydrogen atoms and one oxygen atom directly attached to ring carbon atoms, e.g. tetrahydropyranyl ethers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D309/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings
    • C07D309/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D309/08—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D309/10—Oxygen atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H15/02—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures
    • C07H15/04—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures attached to an oxygen atom of the saccharide radical

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Child & Adolescent Psychology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)

Abstract

Настоящее изобретение относится к новому фармакологически активному соединению нового дауэр-феромона спящего состояния, имеющего следующую структурную формулу I:
Figure 00000001
и способу его выделения и очистки, а также определению структуры этого вещества, который заключается в том, что приготавливается этанольный экстракт, путем концентрирования жидкой среды в целом этанолом, после культурирования C.elegans на жидкой базальной S.среде, а затем эта этанольная фракция дополнительно экстрагируется этилацетатом. Затем примеси удаляются из этилацетатного экстракта путем адсорбционной хроматографии на силикагеле, и экстракт феромона выделяется и очищается с помощью хроматографических процедур на колонке с аминными группами, с использованием различных растворителей в качестве элюентов. Затем соединение феромона полностью выделяется и характеризуется посредством эксклюзионной ВЭЖХ. Это соединение применяется для передачи спящего состояния. 4 н. и 8 з.п. ф-лы, 8 ил., 7 табл.

Description

Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к новому Дауэр-феромону спящего состояния и к определению его структуры, более конкретно, к Дауэр-феромону, который может индуцировать стадию спящего состояния личинки у С.elegans. Настоящее изобретение также относится к новому способу эффективного выделения и очистки физиологически активного феромона спящего состояния и к определению структуры этого вещества.
Уровень техники
Феромоны определяются как вещества, которые используются для общения между индивидуумами одного и того же вида. Феромоны обычно получают в форме смесей, посредством множества стадий разделения, включая экстракцию органическими растворителями и жидкостную колоночную хроматографию.
В начале 1980 годов сообщалось, что С.elegans может секретировать тип феромона, названного «Дауэр-феромон» или «феромон спящего состояния», конститутивно секретируемое вещество, служащее в качестве индикатора плотности популяции (Golden and Riddle 1982, Golden and Riddle 1984a, Golden and Riddle 1984 с), который может индуцировать стадию спящего состояния у С.elegans, когда они встречаются с неблагоприятными условиями окружающей среды, такими как тепло, отсутствие корма и скученность. Хотя его существование известно в течение более двух десятилетий, его структура, молекулярная масса и физические свойства до сих пор не известны (Riddle, D.L., Science, 218: 578-580, 1982).
В соответствии с предыдущими исследованиями феромон, секретируемый C.elegans, существует в исключительно низкой концентрации. Из-за его возможностей в плане управления процессами старения и стрессом у C.elegans, феромон спящего состояния широко изучается. Однако до сих пор, поскольку он недоступен в виде отдельных молекул, большинство исследователей используют неочищенные (сырые) экстракты C.elegans, которые, как предполагается, содержат феромон спящего состояния, а также и другие соединения.
По этой причине, необходимо выделение чистого феромона спящего состояния из экстрактов и определение его структуры для исследований старения, стресса и других клеточных функций C.elegans. Вероятно, феромон спящего состояния должен детектироваться с помощью еще не идентифицированного рецептора феромона, который связан с путем сигнализации циклического ГМФ (цГМФ, циклический гуанозинмонофосфат), содержащего daf-11 (Birnby et al. 2000). Известно, что феромон спящего состояния С.elegans является очень стабильным и гидрофобным и имеет хроматографические свойства, сходные со свойствами гидроксилированных жирных кислот и желчных кислот.
В этой статье, авторы описывают очистку, идентификацию и молекулярную характеристику С.elegans - специфичного феромона спящего состояния.
Описание изобретения
Авторы настоящего изобретения провели широкие исследования в течение многих лет для выделения нового класса Дауэр-феромона спящего состояния, который может широко использоваться для исследований старения, стресса, передачи сигнала и различных биологических проблем. В результате, авторы обнаружили, что экстракт, полученный от C.elegans, которые изучаются в качестве хорошей животной модели для различных заболеваний, содержит новый феромон спящего состояния, и очистка этого экстракта посредством процедур постадийного разделения приводит к получению чистого феромона спящего состояния. На основе этих данных возможно получение нового Дауэр-феромона спящего состояния.
По этой причине, целью настоящего изобретения является создание нового феромона спящего состояния, которое включает в себя экстрагирование C.elegans одним или несколькими растворителями, выбранными из группы, состоящей из воды, спиртов и этилацетата, и хроматографическое разделение с различными растворителями в качестве элюентов.
Другой целью настоящего изобретения является получение 6-(3,5-дигидрокси-6-метилтетрагидропиран-2-илокси)гептановой кислоты или ее солей, которые могут быть представлены нижеприведенной формулой I:
Структурная формула I
Figure 00000004
Еще одной целью настоящего изобретения является получение композиции обладающей активностью, индуцирующей спящее состояние, которая включает в себя 6-(3,5-дигидрокси-6-метилтетрагидропиран-2-илокси)гептановую кислоту или ее соли и фармацевтически приемлемый носитель.
Еще одной целью настоящего изобретения является получение фармацевтической композиции для индуцирования спящего состояния C.elegans или управления процессом старения животных.
Еще одной целью настоящего изобретения является создание способа для выделения и очистки феромона спящего состояния с использованием нескольких хроматографических процедур.
Способ включает в себя стадии
1) экстрагирования этанолом C.elegans, которые выращены на S.базальной жидкой среде путем скармливания Escherichia coli;
2) экстрагирования этилацетатом этанольных экстрактов, полученных на стадии 1;
3) эффективного удаления примесей из этилацетатных фракций с помощью адсорбционной хроматографии на силикагеле;
4) разделения и очистки феромона спящего состояния с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием различных колонок с аминными группами.
Другие цели и преимущества настоящего изобретения станут ясны из следующего далее описания.
Выше кратко описаны некоторые из наиболее существенных целей настоящего изобретения. Эти цели должны рассматриваться только как иллюстрация некоторых наиболее существенных признаков и применений настоящего изобретения. Многие другие полезные результаты могут быть получены посредством применения описываемого изобретения иным способом или модификации настоящего изобретении в рамках раскрытия в описании. Соответственно, другие цели и более глубокое понимание настоящего изобретения могут быть осуществлены посредством ссылок на подробное описание предпочтительного варианта осуществления, в добавление к рамкам настоящего изобретения, определенным формулой изобретения.
Краткое описание чертежей
Фиг.1 представляет схему, которая иллюстрирует постадийный способ для выделения и очистки соединения феромона по настоящему изобретению из C.elegans;
Фиг.2 представляет собой типичную хроматограмму, которая иллюстрирует обогащение активных фракций посредством ВЭЖХ на колонках с аминными группами, с использованием градиентного элюирования дистиллированной водой и изопропанолом в качестве растворителя;
Фиг.3 представляет собой хроматограмму ВЭЖХ, с выделением по молекулярной массе (W251), которая осуществляется при условиях изократического элюирования, с использованием метанола в качестве растворителя;
Фиг.4 представляет собой график спектра водородного ядерного магнитного резонанса (1H-ЯМР), полученного с помощью использования дейтерированного метанола (CD3OD) в качестве растворителя;
Фиг.5 представляет собой график спектра углеродного ядерного магнитного резонанса (13C-ЯМР), полученного с помощью использования дейтерированного метанола (CD3OD) в качестве растворителя;
Фиг.6 представляет собой график, иллюстрирующий молекулярный масс-спектр, полученный в положительном режиме с использованием масс-спектрометра квадрупольного типа;
Фиг.7 представляет собой график, иллюстрирующий результаты измерения масс-спектра феромона в присутствии ацетата натрия во время процесса измерения в положительном режиме, с использованием масс-спектрометра квадрупольного типа; и
Фиг.8 представляет собой график, иллюстрирующий результат измерения масс-спектра в отрицательном режиме, с использованием масс-спектрометра квадрупольного типа.
Наилучший способ для осуществления изобретения
Здесь, далее, заявка будет иллюстрироваться более подробно.
Выделенный феромон для цели настоящего изобретения представляет собой 6-(3,5-дигидрокси-6-метилтетрагидропиран-2-илокси)гептановую кислоту или ее соли, которые могут быть представлены формулой I, ниже. Соединение формулы I явно индуцирует стадию спящего состояния у червей.
Структурная формула I
Figure 00000004
Соединение формулы I может быть приготовлено в виде фармацевтической композиции с фармацевтически приемлемыми наполнителями или носителями. В частности, композиция может быть желательной для использования в качестве различных экспериментальных реагентов для управления стадией спящего состояния у животных и для исследования механизмов старения, стресса, трансдукции сигналов, неврологических заболеваний и метаболических заболеваний.
Новое соединение феромона или его соль, которая представляет собой физиологически активный материал, который фактически способен индуцировать вхождение C.elegans в стадию спящей личинки, когда этот чистый феромон добавляется в среду обитания. Как обнаружено, оно представляет собой новое соединение феромона, которое имеет указанную выше структурную формулу I, и его химическая формула представляет собой 6-(3,5-дигидрокси-6-метилтетрагидропиран-2-илокси)гептановую кислоту.
Первой целью настоящего изобретения является получение отдельной молекулы Дауэр-феромона спящего состояния C. elegans, высокой степени очистки, в больших количествах, которые могут быть использованы для исследования старения, передачи сигнала, регуляции обмена и стресса. Вторая цель заключается в определении его химической структуры и в проверке того, является ли выделенный чистый феромон спящего состояния новым и содержит ли он биологически функциональное соединение, индуцирующее спящее состояние, используя различные аналитические методики и биологические анализы.
Соединение феромона или его соль, которая выделяется и характеризуется в настоящем изобретении, представляет собой соединение, секретируемое C. elegans, проявляет активность феромона спящего состояния.
Фракция активного феромона, которая в настоящее время используется многими исследователями для изучения старения, передачи сигнала и стресса, представляет собой неочищенный экстракт, который приготавливают посредством экстракции этанолом культуры C. elegans. По этой причине, при доступности чистого феромона спящего состояния, теперь возможным становится исследование старения, передачи сигнала и стресса, в которых участвует феромон спящего состояния.
Предпочтительные варианты осуществления настоящего изобретения даже будут описаны более подробно в сочетании с прилагаемыми таблицами и чертежами.
Хотя выше подробно описывались предпочтительные варианты осуществления настоящего изобретения, необходимо четко понять, что множество вариаций и/или модификаций основных концепций изобретения, рассматриваемого здесь, которые могут применяться специалистами в данной области, также соответствуют духу и находятся в рамках настоящего изобретения, как определено прилагаемой формулой изобретения.
Вариант осуществления
После культурирования C. elegans в S.базальной жидкой среде, в течение 5 дней, при температуре 20°C, посредством кормления Escherichia coli (OP50), они дополнительно культурируются в течение дополнительных 10 дней посредством дополнительного питания.
Разделение на центрифуге осуществляется с получением питательной среды, после того как у 70% червей наступает стадия спящей личинки. Жидкая фаза культурных сред получается посредством удаления червей и Escherichia coli путем фильтрования на мембране, с использованием мембранного фильтра 0,45 мкм.
Чистая среда в порошкообразном состоянии может быть получена посредством полного дегидратирования (высушивания) сред с помощью вакуумного испарителя.
Этанол добавляют к порошкообразной форме среды и осуществляют экстракцию этого раствора этанолом. Этот процесс повторяют 3 раза.
Для исследования того, может ли этанольный экстракт (A) индуцировать стадию спящей личинки, осуществляют исследования спящего состояния на червях, которых выращивают в среде S.
Таблица 1 показывает активность A относительно индуцирования спящего состояния. Если А демонстрирует активность в плане индуцирования спящего состояния, ее дополнительно экстрагируют этилацетатом. Вкратце, высушенную А растворяют в дважды дистиллированной воде и экстрагируют равным объемом этилацетата. Эту процедуру экстрагирования повторяют 5 раз.
Таблица 2 показывает результат анализа этилацетатного экстракта (B) на активность относительно индуцирования спящего состояния C.elegans. После подтверждения активности B относительно индуцирования спящего состояния, экстракты, полученные с помощью описанного выше способа, загружают в адсорбционную колонку с силикагелем, которую уравновешивают гексаном:этилацетатом:метанолом = 7:7:1. Активную форму феромона спящего состояния (C), которая адсорбировалась на колонке, элюируют метанолом.
Таблица 3 сводит вместе результаты анализов индуцирования спящего состояния с помощью фракции (C), полученной на колонке с силикагелем. Для дальнейшей очистки C осуществляют разделение посредством ВЭЖХ с использованием колонки с аминными группами. Вкратце, фракция C растворяется в метаноле и разбавляется дважды дистиллированной водой (MeOH:ddH2O = 1:1). Этот раствор, содержащий C, загружается в колонку с аминными группами, которая уравновешивается с помощью раствора изопропанола (изопропанол:вода=1:1). Фракция феромона спящего состояния, связанная с колонкой (фракция D), элюируется с помощью градиентного раствора этого же растворителя. Таблица 4 показывает картину зависимости профиля элюирования от времени, полученную с помощью хроматографии на колонке с аминными группами.
Таблица 5 кратко описывает результат анализа индуцирования спящего состояния с использованием активных фракций D после хроматографии на колонке с аминными группами. Наконец, феромон спящего состояния (E) полностью выделяется и очищается с помощью эксклюзионной колоночной хроматографии (разделения по размерам молекул), с использованием метанола в качестве раствора элюента.
Таблица 6 сводит вместе результаты анализа активности индуцирования спящего состояния очищенного Дауэр-феромона. Чистый феромон спящего состояния, характеризуемый с помощью описанных выше процедур, определяется как структурная формула I, а его химическая формула представляет собой 6-(3,5-дигидрокси-6-метилтетрагидропиран-2-илокси)гептановую кислоту или ее натриевую соль.
6-(3,5-дигидрокси-6-метилтетрагидропиран-2-илокси)гептановая кислота может взаимодействовать с основанием, с получением ее соли своей формы. Основание может быть основанием, образующим соль щелочного или щелочноземельного металла, которая является фармацевтически приемлемой. Например, в качестве основания, могут использоваться натрий, калий, магний или кальций.
Молекулярная масса чистого феромона спящего состояния, 6-(3,5-дигидрокси-6-метилтетрагидропиран-2-илокси)гептановой кислоты, равна 276 Дальтон, а ее молекулярная формула представляет собой C13H24O6. Однако молекулярная масса его выделенной формы оказывается равной 299 Дальтон, поскольку связывается с 1 молекулой натрия посредством нековалентной связи, чтобы он проявлял биологическую активность.
Различие в молекулярной массе между чистой формой и выделенной обнаруживается при анализе с помощью квадрупольного тандемного масс-спектрометра, согласно которому 1 молекула натрия нековалентно связывается с кислотной формой. В дополнение к этому, очищенное соединение феромона, 6-(3,5-дигидрокси-6-метилтетрагидропиран-2-илокси)гептановая кислота, также может принимать форму аммониевой соли, что приводит к подтверждению ее молекулярной массы, равной 276 Дальтон.
Для определения химической структуры феромона по настоящему изобретению, имеющего формулу I, анализируют спектр водородного ядерного магнитного резонанса (1H-ЯМР), с использованием дейтерированного метанола (CD3OD) в качестве растворителя. И спектр углеродного ядерного магнитного резонанса (13C-ЯМР) также может анализироваться с использованием дейтерированного метанола (CD3OD) в качестве растворителя.
Химический сдвиг представлен с помощью единиц м.д. Определенные химические сдвиги 1H- и 13C-ЯМР получают с помощью методики двухмерного ЯМР, такой как спектры 1H-1H DQF-COSY, 13C-1H HMBC. Результаты представлены в таблице 7. То есть, результат анализа спектров 1H ЯМР (МГц), 13C ЯМР (МГц) феромона спящего состояния подтверждает, что его молекулярная формула представляет собой 6-(3,5-дигидрокси-6-метилтетрагидропиран-2-илокси)гептановую кислоту.
Промышленная применимость
Как описано выше, по настоящему изобретению, авторам удалось получить новый феромон спящего состояния из C.elegans и определить его химическую структуру как 6-(3,5-дигидрокси-6-метилтетрагидропиран-2-илокси)гептановую кислоту, которая может существовать в форме ее различных солей. Так изобретение авторов может привести к исследованиям старения, передачи сигнала, стресса, метаболизма, ожирения и неврологических расстройств. Кроме того, настоящее изобретение приводит авторов к разработке молекул - кандидатов в фармакологически полезные лекарственные средства для многочисленных типов заболеваний.
Таблица 1
  Активность этанольного экстракта в отношении индуцирования спящего состояния
Формирование стадии спящей личинки (%) 100
Популяция личинок в спящем состоянии 173
Таблица 2
  Активность этилацетатной фракции в отношении индуцирования спящего состояния
Формирование стадии спящей личинки (%) 100
Популяция личинок в спящем состоянии 194
Таблица 3
  Активность фракции, связанной на силикагеле, в отношении индуцирования спящего состояния
Формирование стадии спящей личинки (%) 100
Популяция личинок в спящем состоянии 110
Таблица 4
Время (минуты) Скорость потока
(мл/мин)		 Изопропанол
(%)		 Дистиллированная вода (%)
0 2 100 0
5 2 100 0
35 2 0 100
45 2 0 100
Таблица 5
  Активность фракций после колонки с аминными группами в отношении индуцирования спящего состояния
Формирование стадии спящей личинки (%) 100
Популяция личинок в спящем состоянии 92
Таблица 6
  Активность фракции после колонки W251 (очищенная форма) в отношении индуцирования спящего состояния
Формирование стадии спящей личинки (%) 100
Популяция личинок в спящем состоянии 62
Таблица 7
  Атом DEPT 1Н (м.д.) 13С (м.д.) DQF-COSY HMBC(H->C)
Феромон 1 COOH   177,299   С-2,3
2 CH2 2,299 34,583 Н-3 С-3
3 CH2 1,644 25,415 Н-2 С-2,4,5,6,7
4 CH2 1,469 29,955 Р-3,5 С-2,3,5
5 CH2 1,500 37,121 Н-6 С-3,4,6,7
1,584
6 CH 3,808 71,331 Н-5,7 С-5,7
7 CH8 1,145 18,327 Н-6 С-5
2' CH 4,663 96,559 Н-3' С-4'
3' CH 3,734 69,027 Н-2',4' С-2',4'
4' CH2 1,791 34,934 Н-3',5' С-2',5',6'
1,974
5' CH 3,584 67,445 Н-4',6' С-3',4',6',7'
6' CH 3,644 70,218 Н-5',7' С-4',5',7'
7' CH8 1,236 17,175 Н-6' С-5',6'

Claims (12)

1. Соединение Дауэр-феромона спящего состояния, представленное следующей структурной формулой I:
Figure 00000005
или его соли.
2. Соединение феромона спящего состояния или его соли по п.1, где соединение феромона представляет собой 6-(3,5-дигидрокси-6-метилтетрагидропиран-2-илокси)гептановую кислоту.
3. Соединение феромона спящего состояния или его соли по п.1, где соль представляет собой натриевую соль 6-(3,5-дигидрокси-6-метилтетрагидропиран-2-илокси)гептановой кислоты.
4. Соединение феромона спящего состояния или его соли по п.1, где соли присоединения дополнительно формируются путем взаимодействия 6-(3,5-дигидрокси-6-метилтетрагидропиран-2-илокси)гептановой кислоты с основанием соли щелочного или щелочноземельного металла.
5. Соединение феромона спящего состояния или его соли по п.1, где феромон спящего состояния получают экстрагированием С. elegans одним или несколькими растворителями, выбранными из группы, состоящей из воды, спиртов и этилацетата, и хроматографическим разделением с помощью различных растворителей в качестве элюентов.
6. Фармацевтическая композиция для индуцирования спящего состояния, которая включает 6-(3,5-дигидрокси-6-метилтетрагидропиран-2-илокси)гептановую кислоту или ее соли и фармацевтически приемлемый носитель.
7. Фармацевтическая композиция по п.6, в которой композиция индуцирует спящее состояние С. elegans.
8. Способ выделения и характеризации соединения феромона спящего состояния или его солей, представленных следующей структурной формулой I:
Figure 00000006
,
включающий стадии:
экстрагирования всей культуральной среды С. elegans этанолом (фракция А);
экстрагирования фракции А этилацетатом, с получением фракции В после растворения этанольного экстракта в воде;
удаления примесей из фракции В посредством адсорбционной хроматографии на силикагеле (фракция С);
выделения и очистки фракции С посредством ВЭЖХ с использованием колонки с аминными группами, с получением фракции D; и
полной очистки фракции D с получением чистого соединения феромона спящего состояния с помощью дополнительной колоночной ВЭЖХ для разделения (исключения) молекул по размерам.
9. Способ по п.8, в котором стадия удаления включает стадии удаления примесей путем хроматографии на адсорбционной колонке с силикагелем, уравновешенной гексаном:этилацетатом:метанолом=7:7:1, а затем элюирования частично очищенной фракции феромона адсорбционной колоночной хроматографией на силикагеле, где колонка элюируется метанолом.
10. Способ по п.9, в котором фракцию феромона получают путем выделения и очистки частично очищенной фракции феромона с помощью ВЭЖХ на колонке с аминными группами с помощью градиентного элюирования композицией раствора изопропанола и дистиллированной воды.
11. Способ по п.10, в котором биологически активное соединение феромона выделяют с помощью ВЭЖХ на колонке (W251), отделяющей фракцию феромона по молекулярной массе, посредством изократического элюирования метанольным растворителем.
12. Применение соединения феромона спящего состояния или его соли, представленного следующей структурной формулой I:
Figure 00000007
для передачи сигнала спящего состояния.
RU2005118102/04A 2002-11-14 2003-10-07 Фармакологически активное соединение нового дауэр-феромона спящего состояния, способ для его выделения и определения (характеризации) RU2303596C2 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR10-2002-0070591 2002-11-14
KR1020020070591A KR100700884B1 (ko) 2002-11-14 2002-11-14 약학적으로 유용한 노화 및 스트레스 조절용 신규 페로몬 화합물 및 그 분리정제방법

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2005118102A RU2005118102A (ru) 2006-01-20
RU2303596C2 true RU2303596C2 (ru) 2007-07-27

Family

ID=36147023

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2005118102/04A RU2303596C2 (ru) 2002-11-14 2003-10-07 Фармакологически активное соединение нового дауэр-феромона спящего состояния, способ для его выделения и определения (характеризации)

Country Status (13)

Country Link
US (1) US7119213B2 (ru)
EP (1) EP1603894B1 (ru)
JP (1) JP2006506420A (ru)
KR (1) KR100700884B1 (ru)
CN (1) CN1323078C (ru)
AT (1) ATE404549T1 (ru)
AU (1) AU2003265002A1 (ru)
BR (1) BR0315265A (ru)
CA (1) CA2462181A1 (ru)
DE (1) DE60322969D1 (ru)
MX (1) MXPA05005103A (ru)
RU (1) RU2303596C2 (ru)
WO (1) WO2004043944A1 (ru)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100556335B1 (ko) 2004-02-05 2006-03-03 정만길 6알-(3,6-디데옥시-엘-아라비노-헥소피라노실옥시)헵타노익산, 그 제조방법 및 그를 포함하는 장기휴면 유발효과
CN103958538A (zh) * 2011-08-08 2014-07-30 博伊斯汤普森植物研究所 控制线虫的小分子化合物
US9868754B2 (en) 2011-08-08 2018-01-16 California Institute Of Technology Utility of nematode small molecules
KR101384330B1 (ko) * 2012-01-17 2014-04-14 연세대학교 산학협력단 다우몬을 유효성분으로 함유하는 항염증용 약학적 조성물
CN109843309A (zh) 2016-08-25 2019-06-04 加利福尼亚技术学院 自身免疫性和炎性疾病的蛔甙治疗
EP3969460A4 (en) 2019-05-17 2023-03-08 California Institute Of Technology ASCAROSIDE DERIVATIVES AND METHODS OF USE

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP3227030B2 (ja) * 1993-06-10 2001-11-12 日東電工株式会社 生理活性δ−ラクトンの合成方法
US6077867A (en) 1998-01-21 2000-06-20 Fideline Pig appeasing pheromones to decrease stress, anxiety and aggressiveness

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
YOSHIKAWA KAZUKO ET AL, J. of Natural Products, 1998, 61(4), p.440-445. *

Also Published As

Publication number Publication date
CA2462181A1 (en) 2004-05-14
KR100700884B1 (ko) 2007-03-29
JP2006506420A (ja) 2006-02-23
EP1603894A1 (en) 2005-12-14
AU2003265002A1 (en) 2004-06-03
US20050075389A1 (en) 2005-04-07
US7119213B2 (en) 2006-10-10
ATE404549T1 (de) 2008-08-15
BR0315265A (pt) 2005-08-23
EP1603894B1 (en) 2008-08-13
MXPA05005103A (es) 2005-09-30
KR20040042338A (ko) 2004-05-20
CN1323078C (zh) 2007-06-27
WO2004043944A1 (en) 2004-05-27
EP1603894A4 (en) 2006-09-27
DE60322969D1 (de) 2008-09-25
CN1692107A (zh) 2005-11-02
RU2005118102A (ru) 2006-01-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Dickey et al. Identification of okadaic acid from a Caribbean dinoflagellate, Prorocentrum concavum
CN107417745A (zh) 线虫小分子的应用
CN107102082B (zh) 液相色谱-质谱/质谱法测定蜂王浆中双甲脒及其代谢产物残留量的方法
RU2303596C2 (ru) Фармакологически активное соединение нового дауэр-феромона спящего состояния, способ для его выделения и определения (характеризации)
Lembke et al. Attraction pheromone of the benthic diatom Seminavis robusta: studies on structure-activity relationships
CN110818585B (zh) 一种从九香虫中同时制备五种多巴胺类化合物的分离方法
Uhlig et al. 2-Amino-14, 16-dimethyloctadecan-3-ol, a new sphingosine analogue toxin in the fungal genus Fusarium
Yaegashi et al. Isolation and Biological Activity of 9-epi Tetrodotoxin and Isolation of Tb-242B, Possible Biosynthetic Shunt Products of Tetrodotoxin from Pufferfish
CN114516893B (zh) 罗汉果新黄酮类化合物、其制备方法及在蜜蜂引诱剂中的应用
CN110330544A (zh) 一种4,4,1-双环甾类化合物及其制备方法和用途
CN112159440B (zh) 一种酚苷类化合物及其制备方法和用途
US7317114B2 (en) Process to obtain dibenzylbutyrolactonic lignans, process to obtain synthetic derivatives from lignans bearing anti-Chagas chemoprophylactic and therapeutical activities
CN115141112A (zh) 一种乙酰左旋肉碱杂质、其制备及检测方法和用途
CN114957362A (zh) 一种昆仑雪菊抗炎活性成分的分离方法
CN109856268B (zh) 一种利用高效液相色谱快速检测多种抗生素的方法
CN109609568B (zh) 一种采用固体发酵法制备苦马豆素的方法
RU2269780C1 (ru) Способ определения o-(2,3-дигидро-2,2-диметил-7-бензофуранил)-n-метилкарбамата в биологическом материале
JP2757342B2 (ja) イソインドリノン誘導体及びこれを有効成分とする子宮頚癌細胞の殺細胞剤並びにその製造方法
JP2792010B2 (ja) フタリド誘導体及びこれを有効成分とする子宮頚癌細胞の殺細胞剤
KR102672024B1 (ko) 두룸아마이드 a의 제조 방법
JP2734136B2 (ja) オクタデセン酸誘導体及びこれを有効成分とする子宮頚癌細胞の殺細胞剤
CN114031517B (zh) 马齿苋中一种含氮有机酸及其提取分离方法
CN115286597B (zh) 一种沙棘籽粕中5-羟色胺的分离制备方法及用途
CN114874199B (zh) 一种同时制备环氧橙皮油素和环氧佛手柑素的方法
JP7491523B2 (ja) 下痢性貝毒を産生する渦鞭毛藻からオカダ酸及び／又はジノフィシストキシンを製造する方法

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20111008