RU2168337C2 - Способ лечения с введением лекарственных препаратов и генов посредством электропорации - Google Patents
Способ лечения с введением лекарственных препаратов и генов посредством электропорации Download PDFInfo
- Publication number
- RU2168337C2 RU2168337C2 RU98100256/14A RU98100256A RU2168337C2 RU 2168337 C2 RU2168337 C2 RU 2168337C2 RU 98100256/14 A RU98100256/14 A RU 98100256/14A RU 98100256 A RU98100256 A RU 98100256A RU 2168337 C2 RU2168337 C2 RU 2168337C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- electrodes
- tissue
- needles
- tumor
- generator
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61N—ELECTROTHERAPY; MAGNETOTHERAPY; RADIATION THERAPY; ULTRASOUND THERAPY
- A61N1/00—Electrotherapy; Circuits therefor
- A61N1/18—Applying electric currents by contact electrodes
- A61N1/32—Applying electric currents by contact electrodes alternating or intermittent currents
- A61N1/327—Applying electric currents by contact electrodes alternating or intermittent currents for enhancing the absorption properties of tissue, e.g. by electroporation
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61N—ELECTROTHERAPY; MAGNETOTHERAPY; RADIATION THERAPY; ULTRASOUND THERAPY
- A61N1/00—Electrotherapy; Circuits therefor
- A61N1/18—Applying electric currents by contact electrodes
- A61N1/32—Applying electric currents by contact electrodes alternating or intermittent currents
- A61N1/325—Applying electric currents by contact electrodes alternating or intermittent currents for iontophoresis, i.e. transfer of media in ionic state by an electromotoric force into the body
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M35/00—Means for application of stress for stimulating the growth of microorganisms or the generation of fermentation or metabolic products; Means for electroporation or cell fusion
- C12M35/02—Electrical or electromagnetic means, e.g. for electroporation or for cell fusion
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61N—ELECTROTHERAPY; MAGNETOTHERAPY; RADIATION THERAPY; ULTRASOUND THERAPY
- A61N1/00—Electrotherapy; Circuits therefor
- A61N1/02—Details
- A61N1/04—Electrodes
- A61N1/05—Electrodes for implantation or insertion into the body, e.g. heart electrode
- A61N1/0502—Skin piercing electrodes
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Radiology & Medical Imaging (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Zoology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Electromagnetism (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Electrotherapy Devices (AREA)
Abstract
Изобретения относятся к лечению заболеваний людей и других млекопитающих, в частности к способам и устройствам по применению регулируемых электрических полей для введения in vivo генов и фармацевтических соединений в живые клетки пациента путем электропорации. Техническим результатом является повышение эффективности лечения и удобство в эксплуатации используемых для лечения средств. Изобретение использует устройство для наложения электрических полей на выбранный участок живого тела, включающее опорные средства, блок электродов, установленных на опорных средствах, по меньшей мере часть электродов выполнена в форме игл для проникновения в ткань, и электрический импульсный генератор, выполненный с возможностью подачи электрических импульсных сигналов высокой амплитуды на электроды для электропорации клеток, находящихся между ними, причем блок электродов состоит из противоположных пар электродов, установленных на опорных средствах на расстоянии друг от друга, а генератор имеет средства для избирательной подачи на электроды сигналов, параметры которых пропорциональны расстоянию между электродами, при этом средства переключения выполнены с возможностью подачи сигналов на противоположные пары электродов. Способ электропорации для введения молекул в клетки с использованием импульсного генератора высокоамплитудных электрических сигналов и блока нескольких электродов, выполненных в форме игл для проникновения в ткань, включает введение молекулярного раствора в ткань, установку электродов с возможностью размещения между ними выбранной ткани, введение их в ткань и подключение электродов к генератору, параметры сигналов которого выбирают пропорционально расстоянию между электродами, причем подключают к генератору противоположные пары электродов. 2 с. и 24 з.п. ф-лы, 2 табл., 24 ил.
Description
Настоящее изобретение относится к лечению заболеваний людей и других млекопитающих, в частности, к улучшенному способу и устройству по применению регулируемых электрических полей для введения in vivo генов и фармацевтических соединений в живые клетки пациента путем электропорации.
В 1970-х годах было открыто, что электрические поля можно применять для создания пор в клетках, не вызывая у последних перманентных повреждений. Это открытие позволило осуществлять внедрение больших молекул в цитоплазму клетки. Известно, что гены и другие молекулы, такие как фармацевтические соединения, могут быть введены в живые клетки способом, известным как электропорация. Гены или другие молекулы перемешивают с живыми клетками в буферной среде и короткими импульсами прикладывают сильные электрические поля. Клеточные мембраны временно становятся пористыми, так что гены или молекулы проникают в клетки. Там они могут изменять геном клетки.
Электропорация недавно была предложена в качестве одного подхода для лечения определенных заболеваний, таких как рак. Например, при лечении определенных типов рака методом химиотерапии необходимо, применяя довольно высокие дозы препарата, чтобы убить раковые клетки, не убивать при этом неприемлемо большое количество нормальных клеток. Этой цели можно достигнуть, если химиотерапевтический препарат может быть введен непосредственно внутрь раковых клеток. Некоторые из самых лучших противоопухолевых препаратов, например, блеомицин, в нормальных условиях не могут проникать через мембраны определенных раковых клеток. Однако электропорация позволяет вводить блеомицин в такие клетки.
Лечение рака - одно из терапевтических применений электропорации. Результаты проведенных экспериментов на лабораторных млекопитающих приведены в работах: Okino, М., E. Kensuke, 1990. The Effects of a Single High Voltage Electrical Stimulation with an Anticancer Drug on in vivo Growing Malignant Tumors. Jap. Journal of Surgery. 20: 197-204. Mir, LM., Orlowski, J. Belehradek Jr., and C. Paotetti. 1991. Electrochemotherapy Potentiation of Antitumor Effect of Bleomycin by Local Electric Pulses. Eur. J.Cancer. 27: 68-72. Клинические исследования были проведены и изложены в работе: Mir, L.M., М. Belehradek, С. Domenge, S. Orlowski, В. Poddevin, et al. 1991. Electrochemotherapy, a Novel Antitumor Treatment: First Clinical Trial. C.R. Acad. Sci. Paris. 313: 613-618.
Такое лечение выполняют путем инфузии противоопухолевого вещества непосредственно в опухоль и наложения электрического поля на опухоль, расположенную между двух электродов. Сила поля должна быть тщательно откорректирована, таким образом, чтобы электропорация клеток опухоли проходила при минимальном повреждении или вообще без повреждения нормальных или здоровых клеток. В нормальных условиях это можно осуществить на наружных опухолях, накладывая электроды на противоположные стороны опухоли так, что между электродами создается электрическое поле. Расстояние между электродами можно измерить, а напряжение, подаваемое затем на электроды, должно быть рассчитано по формуле E=V/d (E=сила электрического поля, В/см: V=напряжение, B; d=расстояние, см). Установка электродов для лечения внутренних опухолей, а также измерение расстояния между электродами - задача трудная. В патенте US 5439440 описан аппарат для in vivo электропорации, где электродные иглы введены в тело. В патенте US 5273525 описан шприц для введения молекул и макромолекул путем электропорации, у которого иглы для инъекции выполняют еще и функцию электродов. Это позволяет размещать электроды непосредственно под поверхностью внутри или рядом с опухолями так, что электрические поля можно генерировать в ткани, предполагаемой для электропорации опухолевых клеток.
В документе WO-A 94/22526 описано устройство, включающее совокупность игольчатых электродов для введения в ткань, предназначенную для лечения и устанавливающую объем лечения. Иглы образуют пары, и переключатель последовательно направляет импульс от генератора в различные пары игл.
Исследования также показали, что путем электропорации в клетки млекопитающих можно вводить нуклеотидные последовательности большого размера (до 630 т. н. п.) (Eanault, et al., Gene (Amsterdam), 144(2):205. 1994; Nucleic Acids Research, 15(3): 1311. 1987; Knutson, et al, Anal. Biochem., 164:44. 1987; Gibson, et al., EMBO J., 6(8):2457, 1987; Dower, et al., Genetic Engineering, 12: 275, 1990; Mozo, et al., Plant Molecular Biology, 16:917, 1991), таким образом, например, обеспечивая эффективный способ генной терапии.
Соответственно, задачей данного изобретения является создание улучшенного устройства, которое можно удобно и эффективно располагать для генерации заранее заданных электрических полей в заранее отобранной ткани.
Задачей данного изобретения также является создание улучшенного устройства, в котором имеются эффективные и удобные средства для расстановки электродов в ткани для введения терапевтических соединений в ткань и приложения к ткани электрических полей.
В соответствии с основным аспектом данного изобретения электродный аппарат для применения электропорации на участке тела больного представляет собой поддерживающий элемент, совокупность рядов противопоставленных пар игольчатых электродов, расположенных с возможностью регулирования на поддерживающем элементе и предназначенных для введения в ткань на выбранных участках и расстояниях друг от друга, а также средства, включающие генератор сигнала и переключатель, для приложения электрического сигнала на выбранные пары электродов для создания электрического поля заданной силы.
Другой аспект данного изобретения включает иглы, предназначенные для инъекции лечебных препаратов в ткань, а также в качестве электродов для генерирования электрических полей на участках клеток ткани.
Еще в одном аспекте изобретения предусмотрен терапевтический способ с применением аппарата с рядом игл для лечения клеток, особенно опухолевых.
Цель, преимущества и особенности данного изобретения можно будет легче понять из следующего подробного описания в сочетании с чертежами, на которых:
Фиг. 1 - вид сбоку в вертикальном разрезе узла иглы в соответствии с предпочтительным вариантом выполнения изобретения.
Фиг. 1 - вид сбоку в вертикальном разрезе узла иглы в соответствии с предпочтительным вариантом выполнения изобретения.
Фиг. 2 - вид снизу варианта выполнения изобретения фиг. 1.
Фиг. 3 - чертеж устройства, где в перспективе показан другой вариант выполнения изобретения.
Фиг. 4 - вид в перспективе варианта выполнения изобретения, показанного на фиг. 3, в собранном виде.
Фиг. 5 - вид в перспективе селекторного переключателя для электродного узла, показанного на фиг. 4.
Фиг. 6а-6в - схематический вид выбранных контактных положений для переключателя на фиг. 5.
Фиг. 7 - вид в перспективе следующего варианта выполнения изобретения.
Фиг. 8 - вид в перспективе еще одного варианта выполнения изобретения.
Фиг. 9а-9г - вид сверху, иллюстрирующий предпочтительную форму электродов и последовательность применения.
Фиг. 10а и 10б демонстрируют объем опухоли через 43 дня электрохимиотерапии с блеомицином на Panc-3 ксенотрансплантированных голых мышах, (D= препарат; E=электропорация).
Фиг. 11 - иллюстрация опухолевого роста клеток Panc-3 после электрохимиотерапии блеомицином у голых мышей.
Фиг. 12а и 12б демонстрируют объем опухоли после 20 и 34 дней электрохимиотерапии блеомицином соответственно в крупноклеточной карциноме легких (ККЛ) ксенотрансплантированных голых мышей, (D=препарат; E=электропорация).
Фиг. 13 демонстрирует объем опухоли через 34 дня электрохимиотерапии блеомицином в крупноклеточной карциноме легких (ККЛ) ксенотрансплантированных голых мышей. Стрелкой указано повторное лечение одной мыши на 27 день. (D=препарат; E=электропорация).
Фиг. 14а и 14б демонстрируют доимпульсную дозировку неокарциностатином в Panc-3 и ККЛ соответственно, на модели голой мыши.
Фиг. 14в и 14г демонстрируют постимпульсную дозировку неокарциностатином в Panc-3 на модели голой мыши.
Применяемый здесь термин "молекулы" включает фармацевтические агенты, гены, антитела и другие белки. Одно терапевтические применение электропорации у человека состоит в инфузии противоопухолевого лекарства и электропорации его в опухоль, применяя импульсы электрического напряжения между электродами, расположенными на противоположных сторонах опухоли - электрохимиотерапия (ЭХТ). Настоящее изобретение главным образом предназначено для осуществления ЭХТ, такой как описано у Okino, Mir и др., проведенной на неповерхностных опухолях, таких как опухоли внутри тела. Однако она может быть использована и для других терапевтических применений.
На фиг. 1 показан узел иглы, для ясности обозначенный в целом номером 10. Узел иглы представляет собой удлиненную трубку 12, предпочтительно по форме представляющую собой полую ось из нержавеющей стали. Держатель центральной иглы 14 закреплен на нижнем конце оси 12 с центральным отверстием 16 для приема и направления центральной иглы 18. Ось 12 имеет щель 20, через которую тянется игольчатый электрод 18 изнутри оси 12 наружу, где его закрепляют зажимом 22 на наружной поверхности трубки 12.
Верхний конец электрода 18 может быть прикреплен к винту 24 для присоединения к электрической цепи. Нижний конец трубчатого держателя 12 имеет крепеж 26 для удержания втулки 28, несущей несколько игл, а также фиксирующую втулку 30 для фиксации и удержания на месте втулки 28.
Несколько игл 32 фиксируют во впадинах 34, расположенных на равном расстоянии по периметру на внешней поверхности втулки 28. Таким образом получают кольцеобразный блок игл, расположенных через одинаковые промежутки, на демонстрационном образце изобретения - восемь игл. Иглы удерживают на месте с помощью опоясывающего зажима 36 с концевыми ушками, закрепленными вместе винтом или гайкой и болтом 38, который также служит для электрического подключения игл. С помощью опоясывающего зажима 36 подключают напрямую и удерживают иглы на месте.
Данный электродный узел предназначен для приложения электрической энергии на живую ткань, когда в нее введены иглы. Центральная игла 18 играет роль одного электрода, например, анода или катода, а другая игла или кольцевой набор игл 32 функционирует как противоположный электрод. Когда зажимы установлены и закреплены, все эти иглы находятся в фиксированных положениях. Одна или более игл могут быть полыми или трубчатыми по форме для введения молекул генов, лекарств или других веществ в ткань.
В одном варианте проведения операции центральная игла должна быть установлена нужным образом для достижения требуемого проникновения в ткань. Этого достигают путем ослабления давления зажима 22 центральной иглы и смещением центральной иглы 18 наружу или внутрь, как видно на фиг. 1, так что она вытягивается из держателя центральной иглы 14 на необходимое расстояние проникновения. Затем иглу прижимают зажимом. После этого кольцевые иглы 32 укрепляют таким образом, чтобы достичь требуемого проникновения в ткань. Это можно осуществить путем ослабления давления опоясывающего зажима 36 и смещения игл 32 в необходимое положение. Небольшие смещения можно также выполнять, перемещая втулку 28 в направлениях к концу оси 12 и обратно. Терапевтическое вещество можно вводить в ткань через одну или более таких игл или отдельно.
После того, как проникновение всех игл отрегулировано, ось 12 крепко захватывают, и иглы вводят в ткань на необходимую глубину. Затем к электродному узлу подключают соответствующий импульсный генератор и на электроды подают необходимое напряжение. Перед подачей тока в ткань вводят соответствующее количество терапевтического веществ, такого как гены или молекулы подходящего для лечения химического или фармацевтического препарата.
Модификация этого электродного узла может включать сплошной непроникающий электрод (не показан) вместо центральной иглы. Непроникающий центральный электрод может быть проводником любой подходящей формы, такой как кнопка или пластинка, прикрепленная на конце оси 12 для контакта с поверхностной тканью. Набор кольцевых игл может быть установлен для проникновения в ткань на нужную глубину, когда центральный электрод остается на тканевой поверхности. Электрическая энергия может идти от проникающих игл через ткань к центральному электроду на поверхности. Эти модификации могут применяться при лечении околоповерхностных опухолей, где кольцевой набор электродов установлен таким образом, чтобы окружить опухоль. Центральный электрод устанавливают так, чтобы электроэнергия шла через опухоль на центральный электрод.
Другие преимущества этого электродного узла заключаются в том, что все иглы 18 и 32 могут быть независимо установлены так, чтобы достичь требуемого проникновения. Втулка для игл 28 может быть также установлена на таком расстоянии от конца оси 12, чтобы можно было непосредственно наблюдать введение центральной и кольцевых игл. Кроме того, втулка 28 может иметь любой размер и конфигурацию для того, чтобы окружить область ткани, предназначенную для лечения. На иглы можно также подавать энергию попарно, как описано на фиг. 3-6.
Как указано на фиг. 3 и 4, вариант выполнения узла с кольцевым расположением игольчатых электродов представлен на чертеже под номером 40. Этот игольчатый узел представляет собой кольцевой блок игл 42-52, закрепленных на равном расстоянии на втулке 54, установленной на удлиненной цилиндрической оси 56. Втулка 54 предпочтительно выбрана с таким диаметром, чтобы установить иглы вокруг опухоли или другой ткани, предназначенной для лечения. Одна или несколько игл могут быть полыми для возможности введения молекул терапевтического вещества, как будет описано более подробно ниже.
Узел гнезда электрического разъема представляет собой корпус 58, имеющий центральный выход, или отверстие 60 для входа оси 56 и кольцеобразного узла гнезд 62-72 для установки концов игл 42-52. Гнезда 62-72 электрически присоединяют иглы к подводящим проводам 74-84, которые соединены с распределяющим переключателем, как будет описано ниже.
Гнездо электрического разъема 58 крепится на ось 56, причем концы игл входят в электрогнезда 62-72 для соединения с подводящими проводами 74-84. Ось 56, несущая втулку 54 с набором игл, крепится вместе с гнездовым узлом 58 в держателе 86, приспособленном для захвата рукой. Держатель 86 имеет удлиненную цилиндрическую форму, приспособленную для удерживания рукой при манипуляции. Держатель 86 имеет переднее гнездо с выдающейся вперед трубчатой осью 88, имеющей отверстие 90, в которое входит ось 56, в то время как ось 88 входит в отверстие (не указано), расположенное на разъеме 58. Ось 56 входит в отверстие 90 и имеет кольцевую выемку, или впадину 92, при помощи которой ось закрепляется удерживающим фиксатором, представляющим собой поперечную пробку 94 в отверстии 96, смещенную к одной стороне и имеющую отверстие 98, в которое входит кольцевая выемка 92, где она и крепится в держателе. Пружина 102, укрепленная в отверстии 96, смещает пробку 94 в запирающее положение. Ось 56 можно освободить для удаления путем надавливания на конец 100 пробки 94.
Держатель в собранном виде, как показано на фиг. 4, можно удерживать в руке, погружая иглы в выбранную область ткани. Иглы 42-52 предпочтительно расположены так, чтобы окружить выбранную для лечения ткань. Одна или более игл 42-52, как отмечено ранее, могут быть полыми для возможности введения необходимого терапевтического вещества. Электродные проводники 74-84 подсоединяют затем в предпочтительном порядке к узлу поворотного переключателя, показанному на фиг. 5, который дает возможность выбора противоположных пар игл для активации, или приложения электрического потенциала.
Узел переключателя, обозначенный номером 104, включает стационарный корпус 106, который в приведенном варианте обычно имеет цилиндрическую форму и который закреплен на роторе 108 с разделенными контактами 110 и 112, соединенными парой проводников 114 и 116 с импульсным силовым генератором 115. Роторные контакты 110 и 112 расположены на корпусе 106 так, чтобы быть в связи с кольцевыми контактами 118, 120, 122, 124, 126 и 128, с которыми соединены проводники 74-84.
Как указано на фиг. 6а, б и в, ротор 108 имеет внутреннюю часть с контактами 110 и 112, каждый из которых соединяет мостиком два контакта 118-128, к которым присоединены проводники 74-84 для соединения с источником тока. Внутренние контакты 110 и 112 вращаются с ротором 108 и могут быть выборочно установлены для токопроводящего контакта с парами внутренних контактов 118-128 так, чтобы активировать противоположные пары игольчатых электродов. Это дает возможность оператору выборочно размещать электроды, окружающие выбранную ткань, и выборочно создавать направление электрического поля, требуемое для оптимального лечения. Ротор 108 позволяет выборочно генерировать поле около и внутри ткани по всем направлениям.
На фиг. 7 представлен другой вариант выполнения ряда параллельно размещенных регулируемых электродов, генерирующих электрическое поле, как описано в основной заявке. Набор электродов, обозначенный номером 130, включает в себя пару разделенных в пространстве рядов 132 и 134 проводящих игольчатых электродов 136 и 138, закрепленных на диэлектрической стойке или опорном элементе 140. Блок игл 132 удерживается в фиксированном зажиме 142, который позволяет устанавливать иглы 136 по глубине относительно элемента 140.
Иглы 138 установлены на подвижном зажиме 146, который установлен с возможностью регулировки на опорном элементе 140 при помощи прижимного винта 148. Иглы (136 и 138) каждая снабжены фиксатором проникновения 144. Зажимной винт-регулятор расстояния промежутка 148 фиксирует зажим 146 в выбранной позиции на опорном элементе 140. Датчик расстояния промежутка 150 определяет расстояние между блоками игл 132 и 134 и генерирует сигнал, который поступает на импульсный генератор через проводящий кабель 152. Генератор импульсов присоединен к игольчатым электродам посредством кабелей 154 и 156.
На фиг. 8 приведены детали держателя игл, или шаблона, для различных вариантов установки разделенных в пространстве параллельных блоков игл. Этот вариант выполнения включает основной держатель 158, имеющий набор смежно расположенных параллельных выемок 160, в которые могут быть установлены выбранные иглы 162 и 164 в выбранном пространственном отношении. Этот держатель может служить для установки пары игольчатых электродов 162 и 164 с противоположными зарядами, как показано на чертеже. Они могут быть выборочно расположены в выбранном пространственном отношении для размещения на противоположных сторонах выбранной ткани. Иглы фиксируются в выемках при помощи зажима, или пластины, 159. Кроме того, держатель можно применять в комбинации с дополнительным держателем для обеспечения работы нескольких рядов на противоположных сторонах избранной ткани. Иглы можно подключить через проводники 166 и 168 к подходящему импульсному генератору. В каждом ряду могут быть размещены по крайней мере два электрода или по крайней мере пять электродов.
На фиг. 9а-9г представлен дополнительный аспект изобретения. В соответствии с пояснением, сочетание электродов может принимать форму отдельных игл 170 и 172, которые могут быть первыми введены непосредственно в выбранную область ткани или рядом с ней, например, как показано, в противоположные стороны опухоли 174. После этого иглы могут быть соединены со шприцем или другим источником молекул и применены для введения избранного молекулярного раствора в тканевую область. Иглы могут быть неэлектропроводными, и пару электродов 176 и 178, как показано на фиг. 9б, селективно вводят в ткани через отверстие, или просвет соответствующих игл, как показано, а затем иглу удаляют, как показано на фиг. 9в. Каждый из электродов 176 и 178 снабжен удлиненным изолированным проводником 180 и 182 с токопроводящими кончиками.
Пара проводников 188 и 190 от подходящего электрогенератора может быть затем присоединена к концам проводников электродов при помощи микрозажимов 192 и 194, как показано на фиг. 9г, затем через электроды подают электрический потенциал. Он генерирует в ткани поле и электропорирует клетки избранной ткани, такой как опухолевая или подобная ей. Эта электропорация дает возможность избранным молекулам входить в клетки ткани и более эффективно убивать или изменять клетки необходимым образом. Эта форма иглы и электрода может быть применена в любом или во всех вышеописанных устройствах.
Эти узлы с игольчатыми электродами, как описано выше, позволяют in vivo располагать электроды внутри или вблизи подповерхностных опухолей или других тканей. В то время как в данной заявке основное внимание уделено электрохимиотерапии, варианты выполнения изобретения могут быть применены в других видах лечения, таких, как генная терапия определенных органов тела.
Природа генерируемого электрического поля определяется природой ткани, размером выбранного участка ткани и его расположением. Желательно, чтобы поле было как можно более однородным и имело точную амплитуду. Чрезмерная сила поля приводит к лизису клеток, тогда как низкая сила поля приводит к понижению эффективности. Электроды можно устанавливать и управлять ими многими способами, включая те из них, что описаны в основной заявке, но не ограничиваясь ими. Электроды можно легко накладывать вручную и при помощи пинцета в случае внутреннего наложения.
Форма волны электрического сигнала, подаваемого импульсным генератором, может быть экспоненциально затухающим импульсом, прямоугольным импульсом, униполярной осциллирующей импульсной серией волн или биполярной осциллирующей импульсной серией волн. Сила электрического поля может быть от 0,2 кВ/см до 20 кВ/см. Длительность импульса может быть от 10 мкс до 100 мс. Количество импульсов может быть от одного до ста. Конечно, форма волны, сила электрического поля и длительность импульса также зависят от типа клеток и типа молекул, предназначенных для ввода в клетки путем электропорации.
Различные параметры, включая силы электрического поля, необходимые для электропорации любой известной клетки, можно почерпнуть из научных статей, касающихся предмета, а также из базы данных, поддерживаемой компанией Genetronics Inc., San Diego, California, владельцем данной заявки. Электрические поля, необходимые для клеточной электропорации in vivo, например, ЭХТ, схожи по амплитуде с полями, необходимыми для клеток in vitro. Они находятся в диапазоне от 100 В/см до нескольких кВ/см. Это подтверждено изобретателями в их собственных экспериментах и в экспериментах других ученых, опубликованных в научной литературе. О первом in vivo применении импульсных электрических полей в области химиотерапии для лечения опухолей было доложено в Японии Окино в 1987 году.
Импульсные генераторы для выполнения описанных здесь процедур стали и продолжают оставаться доступными на рынке в течение ряда лет. Одним из них является генератор сигналов ELECTRO CELL MANIPULATOR, модель ECM 600, поставляемый компанией GENETRONICS, INC., San Diego, California, U.S.A. Генератор сигналов ECM 600 генерирует импульс от полной разрядки конденсатора, в результате чего получается экспоненциально затухающая форма волны. Электрический сигнал, генерируемый этим генератором сигналов, характеризуется быстрым повышением во времени и экспоненциальным хвостом. В генераторе сигналов длину импульса электропорации устанавливают путем выбора одного из десяти хронометрирующих резисторов, обозначенных R1-R10. Они активны как в режиме высокого напряжения (РВН) (емкость устанавливают равной пятидесяти микрофарадам), так и в режиме низкого напряжения (РНН) (диапазон емкости от 25 до 3,175 микрофарад).
Генератор сигналов ЕСМ 600 имеет контрольную кнопку, которая позволяет корректировать амплитуду заряда установленного напряжения, поданного на внутренние конденсаторы, в интервале от 50 до 500 В при РНН и от 0,05 до 2,5 кВ при РВН. Амплитуда электрического сигнала высвечивается на дисплее, вмонтированном в генератор сигналов ЕСМ 600. Кроме того, данное устройство имеет ряд кнопочных выключателей для контроля над длительностью импульса в режиме РНН при одновременном использовании резисторов, включенных параллельно выходу, и набора из семи переключаемых аддитивных конденсаторов.
Генератор сигналов ЕСМ 600 также содержит кнопку единичного автоматического заряда и импульса. Эту кнопку можно использовать как для включения зарядки внутренних конденсаторов до установленного напряжения, так и для подачи импульса к внешним электродам в автоматическом цикле, для которого требуется менее 5 секунд. Затем можно воспользоваться кнопкой ручного управления для многократного включения заранее заданного электрического поля.
Предпочтительно в предложенном терапевтическом способе использовать систему электропорации с прямоугольным импульсом. Например, можно использовать прибор ElectroSquarePorator (T820), также поставляемый компанией GENETRONICS, INC.
Системы подачи прямоугольных импульсов при электропорации подают регулируемые электрические импульсы, которые быстро возрастают до установленного напряжения, остаются на заданном уровне в течение заданного времени (длительность импульса) и затем быстро снижаются до нуля. Этот тип систем дает большую трансформационную эффективность при электропорации растительного протопласта и линий клеток млекопитающих, чем система экспоненциального затухания.
Прибор ElectroSquarePorator (T820) является первой коммерчески доступной системой электропорации с прямоугольной формой импульсов, позволяющей генерировать до 3000 В. Длительность импульса может быть установлена от 5 мкс до 99 мс. Прямоугольные электропорационные импульсы обладают более щадящим действием на клетки, что приводит к большей жизнеспособности клеток.
Прибор ElectroSquarePorator (T820) активен как в режиме высокого напряжения (РВН) (100-3000 В), так и в режиме низкого напряжения (РНН) (50-500 В). Длительность импульса при РНН составляет примерно 0,3-99 мс, а при РВН - 5-99 мкс. В приборе T820 имеется возможность получения многократных импульсов, примерно от 1 до 99 импульсов.
Мир и др. применяли прямоугольные импульсы в электрохемотерапии, которая позволяет осуществлять введение хемотерапевтических агентов в раковые опухоли. Мышей инъецировали низкой дозой блеомицина. Затем раковые опухоли подвергали электропорации, в результате чего происходило уменьшение или полное исчезновение опухолей (Mir, L.M., Eur. J.Cancer., 27(1):68.1991).
Сондерс сравнивал прямоугольные и экспоненциально затухающие импульсы при электропорации растительного протопласта. Электропорация прямоугольными импульсами имела более высокую трансформационную эффективность, чем электропорация экспоненциально затухающими импульсами. Он также сообщил, что оптимизация параметров электропорации намного легче при применении прямоугольных импульсов, поскольку достаточная трансформационная эффективность может быть получена в более широком диапазоне напряжений (Saunders, Guide to Electroporation and Electrofusion, pp. 227-247, 1991).
Терапевтический способ по изобретению включает электротерапию, также называемую здесь электропорационной терапией, с использованием устройства по изобретению для доставки макромолекул к клетке или ткани. Как описано ранее, термин "макромолекула" или "молекула", используемый здесь, относится к лекарствам (например, химиотерапевтическим агентам), нуклеиновым кислотам (например, полинуклеотидам), пептидам и полипептидам, включая антитела. Термин "полинуклеотиды" включает ДНК, кДНК или РНК последовательности.
Лекарства, предполагаемые для применения в способе по изобретению, представляют собой типичные химиотерапевтические агенты, имеющие противоопухолевый или цитотоксический эффект. Такие лекарства или агенты включают блеомицин, неокарциностатин, сурамин и цисплатин. Другие химиотерапевтические агенты известны специалистам в данной области (см., например, The Merck Index). Химический состав агента диктует наиболее подходящее время для введения лекарства в зависимости от применения электрического импульса. Например, вне связи с конкретной теорией, полагают, что лекарство, имеющее низкую изоэлектрическую точку (например, неокарциностатин, изоэлектрическая точка = 3,78), было бы, наверное, более эффективно, если вводить его после электропорации для того, чтобы избежать электростатического взаимодействия сильно заряженного лекарства внутри поля. Кроме того, такие лекарства, как блеомицин, которые имеют сильно отрицательный log P (где P - коэффициент разделения между октанолом и водой) и большой размер (М=1400), а также гидрофильны, прочно связываясь вследствие этого с липидной мембраной, очень медленно диффундируют в опухолевую клетку, и их обычно вводят до или фактически одновременно с электрическим импульсом. Электропорация облегчает вход блеомицина или других схожих лекарств в опухолевую клетку путем создания пор в клеточной мембране.
Может быть желательно модулировать экспрессию гена в клетке путем введения молекулы предложенным в изобретении способом. Термин "модулировать" предполагает подавление экспрессии гена, если он сверхэкспрессируется, или увеличение экспрессии, если он недостаточно экспрессируется. Когда нарушение клеточной пролиферации связано с экспрессией гена, может быть применена последовательность нуклеиновой кислоты, которая влияет на экспрессию гена на уровне трансляции. При этом способе используют, например, антисмысловую нуклеиновую кислоту, рибозимы или триплексные агенты, которые блокируют транскрипцию или трансляцию специфичной мРНК, либо маскируя эту мРНК антисмысловой нуклеиновой кислотой или триплексным агентом, либо разрезая ее рибозимом.
Антисмысловые нуклеиновые кислоты - это ДНК или РНК молекулы, которые комплементарны по крайней мере части специфичной молекулы мРНК (Weintraub, Scientific American, 262:40, 1990). В клетке антисмысловые нуклеиновые кислоты гибридизуются с соответствующей мРНК, образуя двухцепочечную молекулу. Антисмысловые нуклеиновые кислоты влияют на трансляцию мРНК, поскольку клетка не будет транслировать мРНК, которая оказывается двухцепочечной. Предпочтительны антисмысловые олигомеры около 15 нуклеотидов, поскольку их легко синтезировать и они менее вероятно будут представлять проблемы по сравнению с большими молекулами при вводе в клетку-мишень. Применение антисмысловых способов для подавления трансляции генов in vitro хорошо известно (Marcus-Sakura, Anal. Biochem., 172:289, 1988).
Применение олигонуклеотида для остановки транскрипции известно как триплексная стратегия, поскольку олигомер наматывается вокруг двойной спирали ДНК, образуя трехцепочечную спираль. Таким образом, триплексные соединения должны быть созданы, чтобы узнавать уникальный сайт на выбранном гене (Maher, et al. Antisense Res. and Dev., 1(31:227, 1991, С., Anticancer Drug Design, 6161:569, 1991).
Рибозимы - это молекулы РНК, обладающие способностью специфично расщеплять другую одноцепочечную РНК способом, аналогичным для рестрикционных эндонуклеаз ДНК. Модифицируя нуклеотидные последовательности, которые кодируют эти РНК, можно создавать молекулы, которые узнают специфичные нуклеотидные последовательности на молекуле РНК и расщепляют ее (Cech, J.Amer. Med. Assn., 260:3030, 1988). Основное преимущество этого способа в том, что поскольку они являются сиквенс-специфичными, то инактивируются только мРНК с особенными последовательностями.
Существует два основных типа рибозимов, а именно тип тетрахимены (tetrahymena) (Hasselhoff, Nature, 334:585. 1994) и тип "головки молотка". Рибозимы типа tetrahymena узнают последовательности длиной 4 основания, тогда как рибозимы типа "головки молотка" узнают последовательности оснований длиной 11-18 оснований. Чем длиннее последовательность узнавания, тем больше вероятность того, что последовательность встретится только лишь на участке мРНК молекулы-мишени. Соответственно, рибозимы типа "головки молотка" предпочтительнее рибозимов типа tetrahymena для инактивации участка специфичной мРНК, и последовательности узнавания из 18 оснований предпочтительнее более коротких последовательностей узнавания.
Данное изобретение также обеспечивает генную терапию для лечения клеточных пролиферативных и иммунологических расстройств, обусловленных специфичным геном или его отсутствием. Такая терапия будет достигать своего терапевтического эффекта при введении специфичного смыслового или антисмыслового полинуклеотида в клетку с таким расстройством. Доставка полинуклеотидов может быть достигнута с применением рекомбинантного вектора экспрессии, такого как химерный вирус, или полинуклеотид может быть доставлен в виде, например, "голой" ДНК.
Различные вирусные векторы, которые могут быть применены для генной терапии, как здесь сообщается, включают аденовирус, вирус герпеса, вирус коровьей оспы или, предпочтительно, РНК вирус, такой как ретровирус. Предпочтительно, ретровирусный вектор - это производное мышиных или птичьих ретровирусов. Примеры ретровирусных векторов, в которые может быть вставлен единичный чужеродный ген, включают, но не ограничиваются следующими: вирус лейкемии мышей Молонея (MoMuLV), вирус саркомы мышей Харвея (HaMuSV), вирус опухоли молочных желез мышей (MuMTV) и вирус саркомы Рауса (RSV). Для человека может быть применен вирус лейкемии гиббонов (GaLV). Ряд других ретровирусных векторов может инкорпорировать несколько генов. Все эти векторы могут переносить или инкорпорировать ген селективного маркера, чтобы трансдуцированные клетки могли быть идентифицированы и произведены.
Терапевтические пептиды или полипептиды также могут быть включены в терапевтический способ по изобретению. Например, иммуномодуляторные агенты и другие модификаторы биологического ответа могут быть введены при инкорпорации, осуществляемой клеткой. Термин "модификаторы биологического ответа" обозначает вещества, которые включаются в модификацию иммунного ответа. Примеры модификаторов иммунного ответа включают такие соединения как лимфокины. Лимфокины включают фактор некроза опухоли, интерлейкины 1, 2 и 3, лимфотоксин, фактор активации макрофагов, фактор торможения миграции, колониестимулирующий фактор, α-, β-, γ-интерферон и их подтипы.
Также включены полинуклеотиды, которые кодируют метаболические ферменты и белки, включая антиангиогенезисные соединения, например, Фактор VIII или Фактор IX.
Макромолекулы по изобретению также включают молекулы антител. Термин "антитело" применяется для обозначения интактных молекул, а также их фрагментов, таких как Fab или F(ab')2.
Применение лекарства, полинуклеотида или полипептида в способе по изобретению, может быть, например, парентеральное путем инъекции, быстрой инфузии, носоглоточной абсорбции, дермальной абсорбции или перорально. В случае опухоли, например, хемотерапевтический или другой агент может быть введен локально, системно или непосредственно инъецирован в опухоль. Когда лекарство, например, вводится прямо в опухоль, целесообразно вводить лекарство "веерным" способом. Термин "веерный" относится к введению лекарства с изменением направления иглы во время введения лекарства или к множественному введению во многих направлениях, подобно открытому ручному вееру, а не в виде болюса, чтобы обеспечить большее распределение лекарства по опухоли. По сравнению с объемом, который обычно используют в практике, желательно увеличить объем раствора, содержащего лекарство, когда лекарство вводят (например, инъецируют) в опухоль, чтобы обеспечить адекватное распределение лекарства по опухоли. Например, как описано здесь в примерах, специалист обычно вводит 50 мкл раствора, содержащего лекарство, однако результаты сильно улучшаются при увеличении объема до 150 мкл. Предпочтительно инъекцию следует проводить очень медленно и лучше по периферии, чем по центру опухоли, где внутреннее давление очень высоко.
Предпочтительно молекулы применяют "фактически одновременно" с электропорационным лечением. Термин "фактически одновременно" значит, что молекулярное и электропорационное лечение применяют обоснованно близко друг к другу во времени. Введение молекулярного или терапевтического агента может проводиться с любыми интервалами в зависимости от таких факторов, например, как природа опухоли, состояние пациента, размер и химические характеристики молекул и период полураспада молекул.
Препараты для парентерального введения включают стерильные водные или неводные растворы, суспензии и эмульсии. Примерами неводных растворителей являются пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, растительные масла, такие как оливковое масло, и инъецируемые органические сложные эфиры, такие как этилолеат. Носители для окклюзионных повязок могут применяться для увеличения проницаемости кожи и увеличения абсорбции антигена. Формы жидкой дозировки для перорального применения могут в общем представлять собой липосомный раствор, содержащий жидкую форму дозировки. Подходящие формы для суспендирования липосом включают эмульсии, суспензии, растворы, сиропы и эликсиры, содержащие инертные разбавители, обычно используемые в практике, такие как очищенная вода. Кроме инертных разбавителей, такие композиции могут также включать адъюванты, увлажняющие агенты, эмульгирующие и суспендирующие агенты. Кроме того, вазоконстрикторные агенты могут применяться для сохранения терапевтического агента, локализованного перед импульсацией.
Любая клетка может быть обработана способом по изобретению. Пояснительные примеры, приведенные здесь, демонстрируют применение способа по изобретению для лечения опухолевых клеток, например, поджелудочной железы и легкого. Другие расстройства клеточной пролиферации поддаются лечению путем электропорации по изобретению. Термин "расстройства клеточной пролиферации" обозначает как злокачественные, так и незлокачественные клеточные популяции, которые часто имеют видимые отличия от окружающей ткани как морфологически, так и генотипически. Злокачественные клетки (т.е., опухоль или рак) развиваются как результат многостадийного процесса. Способ по изобретению применим в лечении раковых и других заболеваний различных систем органов, особенно, например, клеток поджелудочной железы и легкого, а также клеток сердца, почек, мышц, груди, ободочной кишки, простаты, тимуса, семенника и яичника. Предпочтительным объектом для лечения является человек.
Следующие примеры предназначены для иллюстрации, но они не ограничивают изобретение. Поскольку процедуры являются типичными, специалистами могут быть альтернативно применены другие известные процедуры.
Примеры
Следующие примеры иллюстрируют применение электрохимиотерапии (ЭХТ) низкодифференциированной опухоли поджелудочной железы человека (Panc-3), ксенотрансплантированной подкожно на левый бок голой мыши. Одна лечебная процедура включала инъекцию блеомицина (0,5 ед. в 0,15 мл физиологического раствора) в опухоль, применяя "веер", как здесь описано, после которой через 10 минут следовало применение 6 прямоугольных электрических импульсов с использованием патентуемого блока игольчатых электродов, расположенных по периметру окружности диаметром 1 см. Блоки игл, имеющие различные диаметры (например, 0,5 см, 0,75 см и 1,5 см), также можно использовать для приспосабливания под опухоли различных размеров. Фиксаторы различной высоты могут быть вставлены в центр блока электродов для проникновения игл в опухоль на разную глубину. Встроенный механизм позволял переключать электроды для максимального перекрытия опухоли импульсным полем. Электрические параметры были следующие: 1300 В/см и 6x99 мкс импульсов, разделенных интервалами в 1 с.
Следующие примеры иллюстрируют применение электрохимиотерапии (ЭХТ) низкодифференциированной опухоли поджелудочной железы человека (Panc-3), ксенотрансплантированной подкожно на левый бок голой мыши. Одна лечебная процедура включала инъекцию блеомицина (0,5 ед. в 0,15 мл физиологического раствора) в опухоль, применяя "веер", как здесь описано, после которой через 10 минут следовало применение 6 прямоугольных электрических импульсов с использованием патентуемого блока игольчатых электродов, расположенных по периметру окружности диаметром 1 см. Блоки игл, имеющие различные диаметры (например, 0,5 см, 0,75 см и 1,5 см), также можно использовать для приспосабливания под опухоли различных размеров. Фиксаторы различной высоты могут быть вставлены в центр блока электродов для проникновения игл в опухоль на разную глубину. Встроенный механизм позволял переключать электроды для максимального перекрытия опухоли импульсным полем. Электрические параметры были следующие: 1300 В/см и 6x99 мкс импульсов, разделенных интервалами в 1 с.
Результаты показали тяжелый некроз и эдему в области лечения почти у всех мышей. В то время как у мышей группы, подвергнутой лечению (D+E+; D= лекарство, E= электрическое поле), наблюдали значительное уменьшение объема опухоли (после незначительного начального возрастания вследствие эдемы), в контрольной группе (D+E-) объем опухоли заметно увеличивался. Почти полную регрессию опухоли наблюдали у 90% мышей, подвергнутых лечению ЭХТ через 28 дней. Реакции не наблюдали у 10% мышей. Полная регрессия без прощупываемой опухоли наблюдалась в 60% случаев через 77 дней после начала лечения. Однако у 20% мышей наблюдался вторичный рост опухоли через 35 дней после лечения, но в гораздо более медленном темпе по сравнению с контролем. Это наблюдение связали с неполной обработкой большой первичной опухоли, где глубина иглы была ниже, чем Z-размер опухоли. Гистологический анализ опухолевых образцов показал тени некротических опухолевых клеток в D+E+ группе по сравнению с живыми и некротическими клетками в D+E-группе. Предварительные опыты с опухолью крупноклеточной карциномы легких человека, ксенотрансплантированной голым мышам, также показали очень обнадеживающие результаты лечения с применением ЭХТ и блеомицина.
Пример 1:
Опухолевая клеточная линия Panc-3, низкодифференцированная линия клеток аденокарциномы поджелудочной железы была предоставлена AntiCancer, Inc., San Diego. Для ЭХТ экспериментов брали ткань у имеющихся мышей, в которых поддерживали опухолевую линию, разрезали на очень маленькие кусочки диаметром 1 мм каждый и 8-10 кусочков хирургически ксенотрансплантировали в подкожный разрез, сделанный на левом боку голых мышей, и затем закрывали 6,0 хирургическим швом. После того, как размер средней опухоли достигал около 5 мм, мыши с прощупываемыми опухолями были случайным образом разделены на 10 мышей контрольной группы (D+E-; D=лекарство, E=электрическое поле) и 10 мышей для ЭХТ лечения, то есть для инъекции блеомицина, за которой следовали импульсы (D+E+) от ВТХ генератора прямоугольных импульсов T820. Измеряли размер опухоли и рассчитывали объем опухоли по формуле:
(II/6)•a•b•c,
где a, b и c - соответственно, длина, ширина и толщина опухоли. 0,5 единиц Блеомицина (Sigma Chemicals) растворяли в 0,15 мл 0,9% NaCl и инъецировали внутрь опухоли каждой мыши "веерным" методом как контрольной (D+E-), так и подвергнутой лечению (D+E+) группы. Через 10 минут после инъекции каждую мышь из D+E+ группы подвергали импульсам от ВТХ T820 электропоратора прямоугольных импульсов с использованием блока игольчатых электродов, как описано в настоящем изобретении. Были использованы следующие электрические параметры: сила поля 1300 В/см, 6 импульсов по 99 мкс каждый с интервалом в 1 с.
Опухолевая клеточная линия Panc-3, низкодифференцированная линия клеток аденокарциномы поджелудочной железы была предоставлена AntiCancer, Inc., San Diego. Для ЭХТ экспериментов брали ткань у имеющихся мышей, в которых поддерживали опухолевую линию, разрезали на очень маленькие кусочки диаметром 1 мм каждый и 8-10 кусочков хирургически ксенотрансплантировали в подкожный разрез, сделанный на левом боку голых мышей, и затем закрывали 6,0 хирургическим швом. После того, как размер средней опухоли достигал около 5 мм, мыши с прощупываемыми опухолями были случайным образом разделены на 10 мышей контрольной группы (D+E-; D=лекарство, E=электрическое поле) и 10 мышей для ЭХТ лечения, то есть для инъекции блеомицина, за которой следовали импульсы (D+E+) от ВТХ генератора прямоугольных импульсов T820. Измеряли размер опухоли и рассчитывали объем опухоли по формуле:
(II/6)•a•b•c,
где a, b и c - соответственно, длина, ширина и толщина опухоли. 0,5 единиц Блеомицина (Sigma Chemicals) растворяли в 0,15 мл 0,9% NaCl и инъецировали внутрь опухоли каждой мыши "веерным" методом как контрольной (D+E-), так и подвергнутой лечению (D+E+) группы. Через 10 минут после инъекции каждую мышь из D+E+ группы подвергали импульсам от ВТХ T820 электропоратора прямоугольных импульсов с использованием блока игольчатых электродов, как описано в настоящем изобретении. Были использованы следующие электрические параметры: сила поля 1300 В/см, 6 импульсов по 99 мкс каждый с интервалом в 1 с.
Мышей наблюдали каждый день, и отмечали каждый смертельный случай и любые признаки патологического состояния. Через равные интервалы измеряли размеры опухоли и наблюдали регрессию/прогрессию опухолевого роста. Другая группа голых мышей с ксенотрансплантатом линии крупноклеточной карциномы легких также была подвергнута обработке схожим способом, как в случае Panc-3 опухолей.
На фиг. 10а и 10б показан анализ объема опухоли, определенного за период 43 дня после ЭХТ с использованием блеомицина для Panc-3 опухолей. Наблюдалось очень сильное различие между подвергнутыми и не подвергнутыми лечению мышами по показателю объема опухоли. После примерно 24 дней лечения существенно заметной опухоли не наблюдали. Результаты фиг. 10 также приведены ниже в таблице 1. Иллюстрация очевидной регрессии опухоли показана на фиг. 11.
Эксперимент с Panc-3 был повторен с применением опухолевой клеточной линии крупноклеточной карциномы легких (ККЛ), 177 (AntiCancer, San Diego, CA). Результаты были схожими с найденными для блеомицина и Panc-3, как показано на фиг. 12а и 12б. В одном эксперименте наблюдался рецидив опухоли, которая была повторно обработана на 27 день (фиг. 13), и через 7 дней опухоли не обнаружили.
Модели Panc-3 и ККЛ были использованы с лекарством неокарциностатином (НКС), следуя тем же процедурам, что обозначены выше. Как показано на фиг. 14а и 14б, предимпульсное введение НКС способом, схожим для опытов с блеомицином, вообще не было эффективно для уменьшения объема опухоли. Полагают, что из-за низкой изоэлектрической точки НКС электростатическое взаимодействие препятствовало входу лекарства в опухолевую клетку. Поэтому эксперимент был повторен с подачей импульса в начале и пост-импульсным инъецированием НКС.
Фиг. 14в показывает начальный объем опухоли (I) по сравнением с конечным объемом опухоли (F) на 13 день после лечения 7 мышей (мыши 1-7). У нескольких мышей (1, 2, 4 и 7) наблюдали увеличение объема опухоли, но это, вероятно, связано с эдемой. Однако, как показано на фиг. 14г, когда отдельную группу из 5 мышей проверяли на 23 день, то все мыши показали заметное уменьшение объема опухоли.
Сравнение фиг. 14а и б с 14в и г показало, что лечение НКС с пост-импульсом было более эффективно, чем предимпульсное введение НКС.
Выводы
Настоящие примеры показывают возможность эффективного лечения низкодифференцированной опухоли поджелудочной железы (Panc-3) и крупноклеточной опухоли легких (ККЛ), подкожно ксенотрансплантированных голым мышам, по электрохимиотерапевтическому протоколу с применением блеомицина или НКС и игольчатых электродов. Другие аналогичные химиотерапевтические агенты также могут быть эффективны с применением способа по изобретению.
Настоящие примеры показывают возможность эффективного лечения низкодифференцированной опухоли поджелудочной железы (Panc-3) и крупноклеточной опухоли легких (ККЛ), подкожно ксенотрансплантированных голым мышам, по электрохимиотерапевтическому протоколу с применением блеомицина или НКС и игольчатых электродов. Другие аналогичные химиотерапевтические агенты также могут быть эффективны с применением способа по изобретению.
Результаты показали, что полная регрессия Panc-3 опухоли достигнута у 60% в обработанной группе без видимой прощупываемой опухоли даже через 77 дней после однократной обработки. Частичную регрессию (80% уменьшение объема опухоли) наблюдали в 30% случаев, и только в 10% не было реакции (табл.2).
Гистологическое изучение ясно показало сильный некроз в районе опухоли для группы, подвергавшейся ЭХТ, в то время как в контрольной группе некроза не было. Внутриопухолевая инъекция лекарства большим объемом блеомицина в сочетании с "веерным" способом для максимально равномерного распределения лекарства по объему опухоли, оказалась очень эффективной по сравнению с обычным способом инъекции лекарства до подачи импульса.
Хотя настоящее изобретение описано на основе предпочтительного варианта выполнения, нужно понимать, что возможны различные модификации без отхода от основной идеи изобретения. Соответственно, данное изобретение ограничено лишь приведенными пунктами формулы изобретения.
Claims (26)
1. Устройство для наложения электрических полей на выбранный участок живого тела, включающее опорные средства, блок электродов, установленных на опорных средствах, по меньшей мере часть электродов выполнена в форме игл для проникновения в ткань, и электрический импульсный генератор, выполненный с возможностью подачи электрических импульсных сигналов высокой амплитуды на электроды для электропорации клеток, находящихся между ними, причем блок электродов состоит из противоположных пар электродов, установленных на опорных средствах на расстоянии друг от друга, а генератор имеет средства для избирательной подачи на электроды сигналов, параметры которых пропорциональны расстоянию между электродами, отличающееся тем, что средства переключения выполнены с возможностью подачи сигналов на противоположные пары электродов.
2. Устройство по п.1, отличающееся тем, что выбранные пары электродов задают углы прямоугольника.
3. Устройство по п.2, отличающееся тем, что блок электродов включает электроды, установленные на опорных средствах в виде двух пространственно разделенных рядов с возможностью их регулирования относительно друг друга.
4. Устройство по п.2, отличающееся тем, что блок электродов включает электроды, установленные на опорных средствах на равном расстоянии друг от друга по кольцу.
5. Устройство по п.4, отличающееся тем, что средства переключения включают поворотный переключатель.
6. Устройство по п.1 или 2, отличающееся тем, что все электроды являются игольчатыми электродами.
7. Устройство по п. 4 или п.5, отличающееся тем, что опорные средства представляют собой втулку, установленную на оси.
8. Устройство по п.1, отличающееся тем, что, по меньшей мере, один из игольчатых электродов имеет просвет для инъекции молекул в ткань.
9. Устройство по любому из пп. 1, 2, 4 или 5, отличающееся тем, что электроды выполнены с возможностью регулирования относительно опорных средств для регулировки глубины проникновения.
10. Устройство по п.1, отличающееся тем, что в него введены трубчатые иглы для введения в ткань молекулярного раствора и последующего прохождения через них электродов.
11. Устройство по п.10, отличающееся тем, что трубчатые иглы выполнены с возможностью их извлечения без извлечения электродов.
12. Устройство по любому из пп.1, 2 или 4, отличающееся тем, что генератор импульсов генерирует импульсы в количестве от одного до ста импульсов для формирования электрического поля напряженностью от 0,2 до 20 кВ/см.
13. Устройство по п.1, отличающееся тем, что блок электродов включает множество игольчатых электродов, размещенных в виде двух параллельных рядов, а средства переключения выполнены так, что подают на электроды одного ряда сигнал одной полярности, а на электроды другого ряда - сигнал другой полярности.
14. Устройство по п.13, отличающееся тем, что в каждом ряду размещены, по крайней мере, два электрода.
15. Устройство по п.13, отличающееся тем, что в каждом ряду размещены, по крайней мере, пять электродов.
16. Способ электропорации для введения молекул в клетки с использованием импульсного генератора высокоамплитудных электрических сигналов и блока нескольких электродов, выполненных в форме игл для проникновения в ткань, включающий введение молекулярного раствора в ткань, установку электродов с возможностью размещения между ними выбранной ткани, введение их в ткань и подключение электродов к генератору, параметры сигналов которого выбирают пропорционально расстоянию между электродами, отличающийся тем, что подключают к генератору противоположные пары электродов.
17. Способ по п.16, отличающийся тем, что устанавливают электроды, задающие углы в прямоугольнике, причем первый и второй электроды представляют собой пару трубчатых игл для введения в ткань молекулярного раствора и последующего прохождения через них электродов.
18. Способ по п. 17, отличающийся тем, что трубчатые иглы извлекают, оставляя электроды в ткани.
19. Способ по п.16, отличающийся тем, что блок электродов включает центральный электрод, вокруг которого расположены электроды в форме игл, при этом центральный электрод подключают к одному выходу генератора, а другие электроды - к другому выходу генератора.
20. Способ по п. 19, отличающийся тем, что для подключения электродов используется поворотный переключатель.
21. Способ по п.16, отличающийся тем, что молекулярный раствор выбирают из группы, состоящей из химиотерапевтического агента, полинуклеотида и полипептида.
22. Способ по п.21, отличающийся тем, что химиотерапевтический агент является блеомицином.
23. Способ по п.16, отличающийся тем, что выбирают ткань поджелудочной железы, или легкого, или сердца, или почки, или мышцы, или молочной железы, или ободочной кишки, или простаты, или тимуса, или семенника, или яичника.
24. Способ по п.16, отличающийся тем, что блок электродов состоит из нескольких противоположных пар электродов в форме игл, которые выборочно подключают к импульсному генератору.
25. Способ по п.24, отличающийся тем, что пары электродов подключают к импульсному генератору последовательно.
26. Способ по п.16, отличающийся тем, что молекулярный раствор вводят или внутрь опухоли, или системно, или локально.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US08/467,566 US5702359A (en) | 1995-06-06 | 1995-06-06 | Needle electrodes for mediated delivery of drugs and genes |
US08/467,566 | 1995-06-06 | ||
US08/537,265 | 1995-09-29 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU98100256A RU98100256A (ru) | 1999-11-27 |
RU2168337C2 true RU2168337C2 (ru) | 2001-06-10 |
Family
ID=23856229
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU98100256/14A RU2168337C2 (ru) | 1995-06-06 | 1996-05-22 | Способ лечения с введением лекарственных препаратов и генов посредством электропорации |
Country Status (2)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US5702359A (ru) |
RU (1) | RU2168337C2 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2595009C2 (ru) * | 2012-02-07 | 2016-08-20 | Джузеппе КАЧЧЬЯ | Прибор электропорации, содержащий продолговатый аппликатор, кольцевые электроды и гнездо для шприца |
Families Citing this family (244)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5702359A (en) * | 1995-06-06 | 1997-12-30 | Genetronics, Inc. | Needle electrodes for mediated delivery of drugs and genes |
US5993434A (en) * | 1993-04-01 | 1999-11-30 | Genetronics, Inc. | Method of treatment using electroporation mediated delivery of drugs and genes |
IL108775A (en) * | 1994-02-25 | 2003-09-17 | Univ Ramot | Method for efficient incorporation of molecules into cells |
US6322548B1 (en) | 1995-05-10 | 2001-11-27 | Eclipse Surgical Technologies | Delivery catheter system for heart chamber |
US6041252A (en) * | 1995-06-07 | 2000-03-21 | Ichor Medical Systems Inc. | Drug delivery system and method |
US9289618B1 (en) | 1996-01-08 | 2016-03-22 | Impulse Dynamics Nv | Electrical muscle controller |
US8825152B2 (en) | 1996-01-08 | 2014-09-02 | Impulse Dynamics, N.V. | Modulation of intracellular calcium concentration using non-excitatory electrical signals applied to the tissue |
US7167748B2 (en) | 1996-01-08 | 2007-01-23 | Impulse Dynamics Nv | Electrical muscle controller |
US8321013B2 (en) | 1996-01-08 | 2012-11-27 | Impulse Dynamics, N.V. | Electrical muscle controller and pacing with hemodynamic enhancement |
JP4175662B2 (ja) | 1996-01-08 | 2008-11-05 | インパルス ダイナミクス エヌ.ヴイ. | 電気的筋肉制御装置 |
US9713723B2 (en) | 1996-01-11 | 2017-07-25 | Impulse Dynamics Nv | Signal delivery through the right ventricular septum |
CA2253549C (en) * | 1996-06-18 | 2005-10-25 | Alza Corporation | Device for enhancing transdermal agent delivery or sampling |
ATE231015T1 (de) * | 1996-09-17 | 2003-02-15 | Deka Products Lp | System zur medikamentenabgabe durch transport |
EA002087B1 (ru) * | 1997-04-03 | 2001-12-24 | Электрофект Ас | Способ введения фармацевтических препаратов и нуклеиновых кислот в скелетную мышцу |
US6261281B1 (en) | 1997-04-03 | 2001-07-17 | Electrofect As | Method for genetic immunization and introduction of molecules into skeletal muscle and immune cells |
US5873849A (en) * | 1997-04-24 | 1999-02-23 | Ichor Medical Systems, Inc. | Electrodes and electrode arrays for generating electroporation inducing electrical fields |
ATE290403T1 (de) | 1997-06-30 | 2005-03-15 | Roussy Inst Gustave | Verbesserung der verabreichung der nukleinsäure in zellen der plurizellulären eukaryotischen organismen und kombination zur durchführung des verfahrens |
EP0991426B2 (fr) | 1997-06-30 | 2007-03-28 | Institut Gustave Roussy | Procede de transfert d'acide nucleique dans le muscle strie |
JP4102545B2 (ja) | 1997-07-16 | 2008-06-18 | メタキュアー エヌブイ | 平滑筋制御装置 |
US6096037A (en) | 1997-07-29 | 2000-08-01 | Medtronic, Inc. | Tissue sealing electrosurgery device and methods of sealing tissue |
US6055453A (en) * | 1997-08-01 | 2000-04-25 | Genetronics, Inc. | Apparatus for addressing needle array electrodes for electroporation therapy |
US6241701B1 (en) * | 1997-08-01 | 2001-06-05 | Genetronics, Inc. | Apparatus for electroporation mediated delivery of drugs and genes |
US6216034B1 (en) | 1997-08-01 | 2001-04-10 | Genetronics, Inc. | Method of programming an array of needle electrodes for electroporation therapy of tissue |
SE9704076D0 (sv) | 1997-11-06 | 1997-11-06 | Holdingbolaget Vid Goeteborgs | Method for permeabilisation of cell structures and use thereof |
US6356783B1 (en) | 1997-11-20 | 2002-03-12 | David R. Hubbard, Jr. | Multi-electrode and needle injection device for diagnosis and treatment of muscle injury and pain |
AU733053C (en) | 1998-02-24 | 2001-11-29 | Boston Scientific Limited | High flow rate dialysis catheters and related methods |
US6027488A (en) * | 1998-06-03 | 2000-02-22 | Genetronics, Inc. | Flow-through electroporation system for ex vivo gene therapy |
US20040229363A1 (en) * | 1998-06-24 | 2004-11-18 | Ed Nolan | High efficiency transfection based on low electric field strength, long pulse length |
DE69936866T2 (de) * | 1998-06-26 | 2008-04-30 | Genetronics, Inc., San Diego | Synergismus von photodynamischen und elektropermeationseffekten auf die zellvitalität als ein neues cytotoxisches mittel |
EP1102608A4 (en) | 1998-07-13 | 2008-09-17 | Genetronics Inc | METHOD AND APPARATUS FOR THE ELECTRICALLY SUPPORTED SURFACE APPLICATION OF COSMETIC MEANS |
US7922709B2 (en) | 1998-07-13 | 2011-04-12 | Genetronics, Inc. | Enhanced delivery of naked DNA to skin by non-invasive in vivo electroporation |
JP2003505114A (ja) | 1998-07-13 | 2003-02-12 | ジェネトロニクス、インコーポレーテッド | パルス電場による皮膚および筋肉を標的とした遺伝子治療 |
US6678556B1 (en) * | 1998-07-13 | 2004-01-13 | Genetronics, Inc. | Electrical field therapy with reduced histopathological change in muscle |
WO2000004949A1 (en) | 1998-07-20 | 2000-02-03 | Ichor Medical Systems, Inc. | Electroporation electrodes |
US6319901B1 (en) | 1998-10-15 | 2001-11-20 | Ichor Medical Systems, Inc. | Methods for prolonging cell membrane permeability |
WO2006073671A1 (en) | 2004-12-09 | 2006-07-13 | Impulse Dynamics Nv | Protein activity modification |
US9101765B2 (en) | 1999-03-05 | 2015-08-11 | Metacure Limited | Non-immediate effects of therapy |
US8700161B2 (en) | 1999-03-05 | 2014-04-15 | Metacure Limited | Blood glucose level control |
US8666495B2 (en) | 1999-03-05 | 2014-03-04 | Metacure Limited | Gastrointestinal methods and apparatus for use in treating disorders and controlling blood sugar |
US6678558B1 (en) * | 1999-03-25 | 2004-01-13 | Genetronics, Inc. | Method and apparatus for reducing electroporation-mediated muscle reaction and pain response |
EP1171189B1 (en) | 1999-03-25 | 2016-05-11 | Inovio Pharmaceuticals, Inc. | Apparatus for reducing electroporation-mediated muscle reaction and pain response |
US7171264B1 (en) * | 1999-05-10 | 2007-01-30 | Genetronics, Inc. | Intradermal delivery of active agents by needle-free injection and electroporation |
EP1183068A4 (en) | 1999-05-10 | 2008-12-17 | Gentronics Inc | ENHANCED ACTIVE AGENT DELIVERY METHOD BY ELECTROPORATION |
US7190997B1 (en) * | 1999-06-04 | 2007-03-13 | Impulse Dynamics Nv | Drug delivery device |
US6300108B1 (en) | 1999-07-21 | 2001-10-09 | The Regents Of The University Of California | Controlled electroporation and mass transfer across cell membranes |
US6326177B1 (en) | 1999-08-04 | 2001-12-04 | Eastern Virginia Medical School Of The Medical College Of Hampton Roads | Method and apparatus for intracellular electro-manipulation |
US6904324B2 (en) * | 1999-12-01 | 2005-06-07 | Meagan Medical, Inc. | Method and apparatus for deploying a percutaneous probe |
US6493592B1 (en) | 1999-12-01 | 2002-12-10 | Vertis Neuroscience, Inc. | Percutaneous electrical therapy system with electrode position maintenance |
US6516226B1 (en) | 1999-12-01 | 2003-02-04 | Vertis Neuroscience, Inc. | Percutaneous electrical therapy system for minimizing electrode insertion discomfort |
US6549810B1 (en) | 1999-12-01 | 2003-04-15 | Vertis Neuroscience, Inc. | Percutaneous electrical therapy system with electrode depth control |
US6560491B1 (en) | 1999-12-01 | 2003-05-06 | Vertis Neuroscience, Inc. | Percutaneous electrical therapy system providing electrode axial support |
US6556869B1 (en) | 1999-12-01 | 2003-04-29 | Vertis Neuroscience, Inc. | Electrode introducer for a percutaneous electrical therapy system |
US6539264B1 (en) | 1999-12-01 | 2003-03-25 | Vertis Neuroscience, Inc. | Percutaneous electrical therapy system with sharp point protection |
US6912424B2 (en) * | 1999-12-01 | 2005-06-28 | Meagan, Medical, Inc. | Apparatus and method for coupling therapeutic and/or monitoring equipment to a patient |
US6522927B1 (en) | 1999-12-01 | 2003-02-18 | Vertis Neuroscience, Inc. | Electrode assembly for a percutaneous electrical therapy system |
US6622051B1 (en) | 1999-12-01 | 2003-09-16 | Vertis Neuroscience, Inc. | Percutaneous electrical therapy system with electrode entry angle control |
US6542780B1 (en) * | 1999-12-01 | 2003-04-01 | Vertis Neuroscience, Inc. | Method and apparatus for electrically coupling a percutaneous probe |
US6549797B1 (en) | 1999-12-01 | 2003-04-15 | Vertis Neuroscience, Inc. | Electrode remover for a percutaneous electrical therapy system |
AU2189000A (en) | 1999-12-15 | 2001-06-25 | University Of South Florida | Electroporation device and method |
US6905498B2 (en) | 2000-04-27 | 2005-06-14 | Atricure Inc. | Transmural ablation device with EKG sensor and pacing electrode |
US6932811B2 (en) | 2000-04-27 | 2005-08-23 | Atricure, Inc. | Transmural ablation device with integral EKG sensor |
US6546935B2 (en) | 2000-04-27 | 2003-04-15 | Atricure, Inc. | Method for transmural ablation |
US20020107514A1 (en) | 2000-04-27 | 2002-08-08 | Hooven Michael D. | Transmural ablation device with parallel jaws |
WO2001089455A2 (en) | 2000-05-22 | 2001-11-29 | Merck & Company, Inc. | System and method for assessing the performance of a pharmaceutical agent delivery system |
WO2002000278A2 (en) * | 2000-06-26 | 2002-01-03 | Microheart, Inc. | Method and apparatus for treating ischemic tissue |
US6892099B2 (en) | 2001-02-08 | 2005-05-10 | Minnesota Medical Physics, Llc | Apparatus and method for reducing subcutaneous fat deposits, virtual face lift and body sculpturing by electroporation |
US8251986B2 (en) | 2000-08-17 | 2012-08-28 | Angiodynamics, Inc. | Method of destroying tissue cells by eletroporation |
US6697670B2 (en) | 2001-08-17 | 2004-02-24 | Minnesota Medical Physics, Llc | Apparatus and method for reducing subcutaneous fat deposits by electroporation with improved comfort of patients |
US6795728B2 (en) | 2001-08-17 | 2004-09-21 | Minnesota Medical Physics, Llc | Apparatus and method for reducing subcutaneous fat deposits by electroporation |
US7118555B2 (en) * | 2000-09-21 | 2006-10-10 | Meagan Medical, Inc. | Method and apparatus for repositioning a percutaneous probe |
US6701190B2 (en) | 2000-10-10 | 2004-03-02 | Meagan Medical, Inc. | System and method for varying characteristics of electrical therapy |
US6671557B1 (en) | 2000-10-10 | 2003-12-30 | Meagan Medical, Inc. | System and method for providing percutaneous electrical therapy |
US20040138621A1 (en) | 2003-01-14 | 2004-07-15 | Jahns Scott E. | Devices and methods for interstitial injection of biologic agents into tissue |
US7740623B2 (en) | 2001-01-13 | 2010-06-22 | Medtronic, Inc. | Devices and methods for interstitial injection of biologic agents into tissue |
WO2002072781A2 (en) * | 2001-03-13 | 2002-09-19 | University Of South Florida | Electromanipulation device and method |
US6625486B2 (en) | 2001-04-11 | 2003-09-23 | Advanced Cardiovascular Systems, Inc. | Method and apparatus for intracellular delivery of an agent |
US7127284B2 (en) * | 2001-06-11 | 2006-10-24 | Mercator Medsystems, Inc. | Electroporation microneedle and methods for its use |
US20040204669A1 (en) * | 2001-07-05 | 2004-10-14 | Hofmann Gunter A. | Apparatus for electroporation mediated delivery for drugs and genes |
US6994706B2 (en) | 2001-08-13 | 2006-02-07 | Minnesota Medical Physics, Llc | Apparatus and method for treatment of benign prostatic hyperplasia |
USRE42016E1 (en) | 2001-08-13 | 2010-12-28 | Angiodynamics, Inc. | Apparatus and method for the treatment of benign prostatic hyperplasia |
ATE350471T1 (de) * | 2001-11-27 | 2007-01-15 | Cellectricon Ab | Verfahren zur kombinierten parallelen zuführung von agentien und elektroporation für zellstrukturen und verwendung davon |
AU2002360540A1 (en) * | 2001-12-04 | 2003-06-17 | University Of Southern California | Method for intracellular modifications within living cells using pulsed electric fields |
US7967816B2 (en) | 2002-01-25 | 2011-06-28 | Medtronic, Inc. | Fluid-assisted electrosurgical instrument with shapeable electrode |
JP2005530695A (ja) * | 2002-02-15 | 2005-10-13 | ザイコス インク. | 生理活性物質を細胞内に導入するエレクトロポレーション法 |
WO2003075978A2 (en) | 2002-03-07 | 2003-09-18 | Merck & Co., Inc. | Clinical syringe with electrical stimulation aspects |
US8209006B2 (en) * | 2002-03-07 | 2012-06-26 | Vgx Pharmaceuticals, Inc. | Constant current electroporation device and methods of use |
DK1480720T3 (en) * | 2002-03-07 | 2018-12-03 | Inovio Pharmaceuticals Inc | ELECTRODE DEVICE FOR CONSTANT POWER ELECTROPORATION |
US7245963B2 (en) * | 2002-03-07 | 2007-07-17 | Advisys, Inc. | Electrode assembly for constant-current electroporation and use |
US7218962B2 (en) * | 2002-03-29 | 2007-05-15 | Boston Scientific Scimed, Inc. | Magnetically enhanced injection catheter |
US6912417B1 (en) * | 2002-04-05 | 2005-06-28 | Ichor Medical Systmes, Inc. | Method and apparatus for delivery of therapeutic agents |
DE60322523D1 (de) | 2002-04-16 | 2008-09-11 | Cyto Pulse Sciences Inc | Ien mit übersetzenden elektrischen feldern und elektroden-polaritäts-umkehr |
US7328064B2 (en) | 2002-07-04 | 2008-02-05 | Inovio As | Electroporation device and injection apparatus |
US20040078063A1 (en) * | 2002-10-17 | 2004-04-22 | Mclaren Brian | Electrical apparatus and methods for denaturing venoms and toxins |
US11439815B2 (en) | 2003-03-10 | 2022-09-13 | Impulse Dynamics Nv | Protein activity modification |
WO2004080533A1 (en) | 2003-03-10 | 2004-09-23 | Impulse Dynamics Nv | Apparatus and method for delivering electrical signals to modify gene expression in cardiac tissue |
US7288092B2 (en) | 2003-04-23 | 2007-10-30 | Atricure, Inc. | Method and apparatus for ablating cardiac tissue with guide facility |
US8792985B2 (en) | 2003-07-21 | 2014-07-29 | Metacure Limited | Gastrointestinal methods and apparatus for use in treating disorders and controlling blood sugar |
ES2543832T3 (es) | 2003-12-24 | 2015-08-24 | The Regents Of The University Of California | Ablación de tejido con electroporación irreversible |
US8298222B2 (en) | 2003-12-24 | 2012-10-30 | The Regents Of The University Of California | Electroporation to deliver chemotherapeutics and enhance tumor regression |
DE602004027165D1 (de) * | 2003-12-31 | 2010-06-24 | VGX Pharmaceuticals LLC | Reduzierung von arthritis und lahmheit bei personen unter supllement von wachstumshormon freisetzendem hormon (ghrh) |
EP1713828B1 (en) * | 2004-01-20 | 2011-04-27 | VGX Pharmaceuticals, LLC | Enhanced secretion/retention of growth hormone releasing hormone (ghrh) from muscle cells by species-specific signal peptide |
GB0402569D0 (en) * | 2004-02-05 | 2004-03-10 | Neurodan As | Nerve and/or muscle stimulation electrodes |
PT1729848E (pt) | 2004-03-08 | 2015-08-28 | Ichor Medical Systems Inc | Dispositivo melhorado para uma administração electricamente mediada de agentes terapêuticos |
WO2006119467A2 (en) | 2005-05-04 | 2006-11-09 | Impulse Dynamics Nv | Protein activity modification |
US11779768B2 (en) | 2004-03-10 | 2023-10-10 | Impulse Dynamics Nv | Protein activity modification |
US8352031B2 (en) | 2004-03-10 | 2013-01-08 | Impulse Dynamics Nv | Protein activity modification |
JP2005278480A (ja) * | 2004-03-29 | 2005-10-13 | Fujitsu Ltd | 物質導入装置及び物質導入用チップ |
ES2611284T3 (es) | 2004-04-01 | 2017-05-08 | The General Hospital Corporation | Aparato para tratamiento cutáneo y remodelación de tejido |
US20050226991A1 (en) * | 2004-04-07 | 2005-10-13 | Hossainy Syed F | Methods for modifying balloon of a catheter assembly |
US7530980B2 (en) | 2004-04-14 | 2009-05-12 | Atricure, Inc | Bipolar transmural ablation method and apparatus |
JP4504082B2 (ja) * | 2004-04-28 | 2010-07-14 | 富士通株式会社 | 液体注入装置 |
EP1750608B1 (en) | 2004-06-02 | 2012-10-03 | Medtronic, Inc. | Ablation device with jaws |
MX2007000893A (es) * | 2004-07-23 | 2007-04-18 | Advisys Inc | La hormona liberadora de hormona de crecimiento mejora la respuesta inmune inducida por la vacunacion. |
GB0502384D0 (en) * | 2005-02-04 | 2005-03-16 | Instrumedical Ltd | Electro-surgical needle apparatus |
WO2006084173A1 (en) * | 2005-02-04 | 2006-08-10 | The Johns Hopkins University | Electroporation gene therapy gun system |
WO2006097934A2 (en) | 2005-03-18 | 2006-09-21 | Metacure Limited | Pancreas lead |
US20060293730A1 (en) | 2005-06-24 | 2006-12-28 | Boris Rubinsky | Methods and systems for treating restenosis sites using electroporation |
US8114070B2 (en) * | 2005-06-24 | 2012-02-14 | Angiodynamics, Inc. | Methods and systems for treating BPH using electroporation |
US7647122B2 (en) * | 2005-07-26 | 2010-01-12 | Medtronic, Inc. | Surgical needle driver |
JP2009518044A (ja) * | 2005-12-07 | 2009-05-07 | ジェネトロニクス,インコーポレイティド | 可変容積エレクトロポレーションチャンバー及びその使用方法 |
EA200870252A1 (ru) * | 2006-02-11 | 2009-02-27 | Дженетроникс, Инк. | Устройство и способ одноигольного электропорообразования in vivo |
US20080287857A1 (en) * | 2006-02-11 | 2008-11-20 | Rune Kjeken | Device and method for single-needle in vivo electroporation |
US20080045880A1 (en) * | 2006-02-11 | 2008-02-21 | Rune Kjeken | Device and method for single-needle in vivo electroporation |
PL1991303T3 (pl) | 2006-03-03 | 2021-10-11 | Oncosec Medical Incorporated | Sposób i urządzenie do leczenia mikroskopowych nowotworów pozostałych w tkankach po resekcji chirurgicznej |
WO2007117651A2 (en) * | 2006-04-07 | 2007-10-18 | University Of South Florida | Passive electric field focus system for in vivo and in vitro applications |
DK2032057T3 (da) * | 2006-06-12 | 2010-02-08 | Region Hovedstaden V Herlev Ho | Elektrodeindføringsindretning |
WO2008006019A2 (en) * | 2006-07-06 | 2008-01-10 | Advisys Inc. | Growth hormone releasing hormone treatment to decrease cholesterol levels |
US8007493B2 (en) | 2006-10-16 | 2011-08-30 | Syneron Medical Ltd. | Methods and devices for treating tissue |
US8142426B2 (en) | 2006-10-16 | 2012-03-27 | Syneron Medical Ltd. | Methods and devices for treating tissue |
US8273080B2 (en) | 2006-10-16 | 2012-09-25 | Syneron Medical Ltd. | Methods and devices for treating tissue |
WO2008048620A2 (en) | 2006-10-16 | 2008-04-24 | The Regents Of The University Of California | Gels with predetermined conductivity used in irreversible electroporation of tissue |
US8133216B2 (en) | 2006-10-16 | 2012-03-13 | Syneron Medical Ltd. | Methods and devices for treating tissue |
EP2409727B1 (en) | 2006-10-17 | 2018-10-03 | Inovio Pharmaceuticals, Inc. | Electroporation devices for electroporation of cells in mammals |
US20090036958A1 (en) * | 2007-08-01 | 2009-02-05 | Primaeva Medical, Inc. | Methods and devices for treating tissue |
US20080312647A1 (en) * | 2007-06-15 | 2008-12-18 | Primaeva Medical, Inc. | Methods and devices for treating tissue |
US8845630B2 (en) | 2007-06-15 | 2014-09-30 | Syneron Medical Ltd | Devices and methods for percutaneous energy delivery |
KR101642523B1 (ko) * | 2008-01-17 | 2016-07-25 | 제네트로닉스, 인코포레이티드 | 가변성 전류 밀도 단일 바늘 전기 천공 시스템 |
WO2009121009A2 (en) | 2008-03-27 | 2009-10-01 | The Regents Of The University Of California | Irreversible electroporation device for use in attenuating neointimal |
CN102016023A (zh) | 2008-04-04 | 2011-04-13 | 宾夕法尼亚州立大学托管会 | 使用il-28和组合物的疫苗和免疫治疗及其使用方法 |
CN107083391A (zh) * | 2008-04-04 | 2017-08-22 | 宾夕法尼亚大学托管会 | 屈曲病毒蛋白共有序列、编码该屈曲病毒蛋白共有序列的核酸分子和组合物及其使用方法 |
US9198733B2 (en) * | 2008-04-29 | 2015-12-01 | Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. | Treatment planning for electroporation-based therapies |
US10245098B2 (en) | 2008-04-29 | 2019-04-02 | Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. | Acute blood-brain barrier disruption using electrical energy based therapy |
EP2280741A4 (en) | 2008-04-29 | 2012-06-13 | Virginia Tech Intell Prop | IRREVERSIBLE ELECTROPORATION FOR THE PRODUCTION OF TISSUE OBJECTS |
US8992517B2 (en) | 2008-04-29 | 2015-03-31 | Virginia Tech Intellectual Properties Inc. | Irreversible electroporation to treat aberrant cell masses |
US11272979B2 (en) | 2008-04-29 | 2022-03-15 | Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. | System and method for estimating tissue heating of a target ablation zone for electrical-energy based therapies |
US10448989B2 (en) | 2009-04-09 | 2019-10-22 | Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. | High-frequency electroporation for cancer therapy |
US9867652B2 (en) | 2008-04-29 | 2018-01-16 | Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. | Irreversible electroporation using tissue vasculature to treat aberrant cell masses or create tissue scaffolds |
US9283051B2 (en) | 2008-04-29 | 2016-03-15 | Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. | System and method for estimating a treatment volume for administering electrical-energy based therapies |
US10272178B2 (en) | 2008-04-29 | 2019-04-30 | Virginia Tech Intellectual Properties Inc. | Methods for blood-brain barrier disruption using electrical energy |
US10702326B2 (en) | 2011-07-15 | 2020-07-07 | Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. | Device and method for electroporation based treatment of stenosis of a tubular body part |
US10238447B2 (en) | 2008-04-29 | 2019-03-26 | Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. | System and method for ablating a tissue site by electroporation with real-time monitoring of treatment progress |
US10117707B2 (en) | 2008-04-29 | 2018-11-06 | Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. | System and method for estimating tissue heating of a target ablation zone for electrical-energy based therapies |
US11254926B2 (en) | 2008-04-29 | 2022-02-22 | Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. | Devices and methods for high frequency electroporation |
WO2009137609A2 (en) | 2008-05-06 | 2009-11-12 | Cellutions, Inc. | Apparatus and systems for treating a human tissue condition |
WO2009137800A2 (en) | 2008-05-09 | 2009-11-12 | Angiodynamics, Inc. | Electroporation device and method |
WO2009155526A2 (en) | 2008-06-20 | 2009-12-23 | Angiodynamics, Inc. | Device and method for the ablation of fibrin sheath formation on a venous catheter |
US9681909B2 (en) | 2008-06-23 | 2017-06-20 | Angiodynamics, Inc. | Treatment devices and methods |
KR101054828B1 (ko) | 2009-01-22 | 2011-08-05 | 신경민 | 고주파 열 치료용 전극 장치 |
WO2010085765A2 (en) | 2009-01-23 | 2010-07-29 | Moshe Meir H | Therapeutic energy delivery device with rotational mechanism |
WO2010093692A2 (en) | 2009-02-10 | 2010-08-19 | Hobbs Eamonn P | Irreversible electroporation and tissue regeneration |
US11382681B2 (en) | 2009-04-09 | 2022-07-12 | Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. | Device and methods for delivery of high frequency electrical pulses for non-thermal ablation |
US11638603B2 (en) | 2009-04-09 | 2023-05-02 | Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. | Selective modulation of intracellular effects of cells using pulsed electric fields |
WO2010118387A1 (en) | 2009-04-09 | 2010-10-14 | Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. | Integration of very short electric pulses for minimally to noninvasive electroporation |
USD630321S1 (en) | 2009-05-08 | 2011-01-04 | Angio Dynamics, Inc. | Probe handle |
US8903488B2 (en) | 2009-05-28 | 2014-12-02 | Angiodynamics, Inc. | System and method for synchronizing energy delivery to the cardiac rhythm |
US9895189B2 (en) | 2009-06-19 | 2018-02-20 | Angiodynamics, Inc. | Methods of sterilization and treating infection using irreversible electroporation |
EP2453856B1 (en) | 2009-07-15 | 2019-02-20 | NewSouth Innovations Pty Limited | Agent provided to the cochlea and cochlear implant |
EP2477659A4 (en) | 2009-09-14 | 2014-01-15 | Univ Pennsylvania | IMMUNOTHERAPEUTIC VACCINES AND AGENTS COMPRISING THE ALPHA IL-15 RECEPTOR AND / OR NUCLEIC ACID MOLECULES ENCODING THE SAME, AND METHODS OF USING THE SAME |
US20110118732A1 (en) | 2009-11-19 | 2011-05-19 | The Regents Of The University Of California | Controlled irreversible electroporation |
WO2011092710A2 (en) | 2010-02-01 | 2011-08-04 | Metacure Limited | Gastrointestinal electrical therapy |
WO2012041867A2 (en) | 2010-09-27 | 2012-04-05 | China Agricultural University | Combined antigen and dna vaccine for preventing and treating autoimmune diseases |
US9700368B2 (en) | 2010-10-13 | 2017-07-11 | Angiodynamics, Inc. | System and method for electrically ablating tissue of a patient |
CN102631243B (zh) * | 2011-02-15 | 2014-09-17 | 成功大学 | 电磁热疗法的治疗器具 |
WO2012172424A1 (en) | 2011-06-15 | 2012-12-20 | Crontech Pharma Ab | Injection needle and device |
WO2013066427A1 (en) | 2011-06-28 | 2013-05-10 | Inovio Pharmaceuticals, Inc. | A miniminally invasive dermal electroporation device |
US9078665B2 (en) | 2011-09-28 | 2015-07-14 | Angiodynamics, Inc. | Multiple treatment zone ablation probe |
WO2013067652A1 (en) | 2011-11-10 | 2013-05-16 | Beijing Advaccine Biotechnology Co., Ltd. | Facilitator-dna combination vaccine |
US9414881B2 (en) | 2012-02-08 | 2016-08-16 | Angiodynamics, Inc. | System and method for increasing a target zone for electrical ablation |
CN103239734B (zh) | 2012-02-10 | 2016-02-24 | 北京艾棣维欣生物技术有限公司 | 用于预防和/或治疗呼吸道合胞病毒感染的疫苗 |
US9144459B2 (en) | 2012-07-19 | 2015-09-29 | Cook Medical Technologies Llc | Endoscopic ultrasound ablation needle |
SI2931304T1 (sl) | 2012-12-13 | 2021-11-30 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Cepivo proti WT1 |
WO2014194244A1 (en) | 2013-05-30 | 2014-12-04 | Duke University | Enzyme-catalyzed synthesis of site-specific and stoichiometric biomolecule-polymer conjugates |
US10392611B2 (en) | 2013-05-30 | 2019-08-27 | Duke University | Polymer conjugates having reduced antigenicity and methods of using the same |
US10364451B2 (en) | 2013-05-30 | 2019-07-30 | Duke University | Polymer conjugates having reduced antigenicity and methods of using the same |
WO2014201511A1 (en) | 2013-06-21 | 2014-12-24 | Gary David Housley | Method and apparatus for close-field electroporation |
KR20160037196A (ko) | 2013-07-31 | 2016-04-05 | 더 보드 오브 트러스티스 오브 더 유니버시티 오브 아칸소 | 종양 연관된 탄수화물 항원을 표적으로 하는 암을 치료하고 예방하기 위한 조성물과 방법 |
WO2015054012A1 (en) | 2013-10-07 | 2015-04-16 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Vaccines with interleukin-33 as an adjuvant |
WO2015070027A1 (en) | 2013-11-07 | 2015-05-14 | University Of Southern California | Use of ikk epsilon inhibitors to activate nfat and t cell response |
EP3068427A1 (en) | 2013-11-14 | 2016-09-21 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Hiv-1 env dna vaccine plus protein boost |
KR20160091350A (ko) | 2013-11-29 | 2016-08-02 | 더 트러스티스 오브 더 유니버시티 오브 펜실바니아 | 중동 호흡기 증후군 코로나바이러스(MERS-CoV) 백신 |
KR102395498B1 (ko) | 2014-01-06 | 2022-05-09 | 더 트러스티스 오브 더 유니버시티 오브 펜실바니아 | Pd1 및 pdl1 항체 및 백신 조합 및 면역요법을 위한 이들의 사용 |
US10166321B2 (en) | 2014-01-09 | 2019-01-01 | Angiodynamics, Inc. | High-flow port and infusion needle systems |
RU2699278C2 (ru) * | 2014-05-02 | 2019-09-04 | Конинклейке Филипс Н.В. | Устройство для инактивации бактерий |
EP3143124A4 (en) | 2014-05-12 | 2018-01-17 | Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. | Selective modulation of intracellular effects of cells using pulsed electric fields |
CA2962799A1 (en) | 2014-10-01 | 2016-04-07 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Vaccines having an antigen and interleukin-21 as an adjuvant |
US10694972B2 (en) | 2014-12-15 | 2020-06-30 | Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. | Devices, systems, and methods for real-time monitoring of electrophysical effects during tissue treatment |
ES2929532T3 (es) | 2015-01-29 | 2022-11-30 | Univ Pennsylvania | Combinaciones de inhibidores de puntos de control y vacunas y su uso en inmunoterapia |
US10385115B2 (en) | 2015-03-26 | 2019-08-20 | Duke University | Fibronectin type III domain-based fusion proteins |
WO2017024182A1 (en) | 2015-08-04 | 2017-02-09 | Duke University | Genetically encoded intrinsically disordered stealth polymers for delivery and methods of using same |
US11752213B2 (en) | 2015-12-21 | 2023-09-12 | Duke University | Surfaces having reduced non-specific binding and antigenicity |
WO2017112825A2 (en) | 2015-12-21 | 2017-06-29 | Duke University | Polymer conjugates having reduced antigenicity and methods of using the same |
PE20181501A1 (es) | 2015-12-30 | 2018-09-18 | Inovio Pharmaceuticals Inc | Dispositivo de electroporacion con arreglo de agujas extraible con sistema de bloqueo |
MY201757A (en) | 2016-03-28 | 2024-03-15 | Ichor Medical Systems Inc | Method and apparatus for delivery of therapeutic agents |
US11246924B2 (en) | 2016-04-01 | 2022-02-15 | Duke University | Alpha-helical peptide nanofibers as a self-adjuvanting vaccine platform |
KR102624967B1 (ko) | 2016-04-29 | 2024-01-16 | 이노비오 파마수티컬즈, 인크. | 제제의 전달을 향상시키기 위한 콘드로이티나제 및/또는 히알루로니다제의 생체내 용도 |
US20170340283A1 (en) * | 2016-05-24 | 2017-11-30 | Ironwood Electronics, Inc. | Needle probe array and methods regarding same |
WO2017210476A1 (en) | 2016-06-01 | 2017-12-07 | Duke University | Nonfouling biosensors |
IT201600068691A1 (it) * | 2016-07-01 | 2018-01-01 | Igea S P A | Sistema di movimentazione e controllo per elettrodi espandibili di un manipolo utilizzabile in un procedimento di elettro-porazione |
EP3512868A4 (en) | 2016-09-14 | 2020-04-15 | Duke University | NANOPARTICLES BASED ON TRIBLOCK POLYPEPTIDE FOR THE DELIVERY OF HYDROPHILIC DRUGS |
CN110023326A (zh) | 2016-09-23 | 2019-07-16 | 杜克大学 | 具有lcst行为的非结构化无重复多肽 |
US10905492B2 (en) | 2016-11-17 | 2021-02-02 | Angiodynamics, Inc. | Techniques for irreversible electroporation using a single-pole tine-style internal device communicating with an external surface electrode |
US10376495B2 (en) | 2016-11-23 | 2019-08-13 | University Of South Florida | Small molecules that mimic or antagonize actions of granulocyte colony-stimulating-factor (G-CSF) |
US11235132B2 (en) | 2016-12-22 | 2022-02-01 | Ohio State Innovation Foundation | Interpenetrating microstructures for nanochannel-based cargo delivery |
WO2018132732A1 (en) | 2017-01-12 | 2018-07-19 | Duke University | Genetically encoded lipid-polypeptide hybrid biomaterials that exhibit temperature triggered hierarchical self-assembly |
US10813935B2 (en) | 2017-02-23 | 2020-10-27 | Transgenex Nanobiotech, Inc. | Methods and compositions for treating drug resistance in cancer |
US10272052B2 (en) | 2017-02-24 | 2019-04-30 | University Of South Florida | Compositions and methods for the treatment of tauopathies |
US11318155B2 (en) | 2017-02-24 | 2022-05-03 | University Of South Florida | Hsp90 activator Aha1 drives production of pathological tau aggregates |
US11554097B2 (en) | 2017-05-15 | 2023-01-17 | Duke University | Recombinant production of hybrid lipid-biopolymer materials that self-assemble and encapsulate agents |
WO2019006374A1 (en) | 2017-06-30 | 2019-01-03 | Duke University | ORDER AND DISORDER AS A DESIGN PRINCIPLE FOR STIMULI-SENSITIVE BIOPOLYMER NETWORKS |
GB201710973D0 (en) | 2017-07-07 | 2017-08-23 | Avacta Life Sciences Ltd | Scaffold proteins |
US11590345B2 (en) | 2017-08-08 | 2023-02-28 | Pulse Biosciences, Inc. | Treatment of tissue by the application of energy |
US10850095B2 (en) | 2017-08-08 | 2020-12-01 | Pulse Biosciences, Inc. | Treatment of tissue by the application of energy |
US10857347B2 (en) | 2017-09-19 | 2020-12-08 | Pulse Biosciences, Inc. | Treatment instrument and high-voltage connectors for robotic surgical system |
US11607537B2 (en) | 2017-12-05 | 2023-03-21 | Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. | Method for treating neurological disorders, including tumors, with electroporation |
AU2019222659B2 (en) | 2018-02-13 | 2024-04-04 | Nanovis, LLC | Inactivating bacteria with electric pulses and antibiotics |
US11311329B2 (en) | 2018-03-13 | 2022-04-26 | Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. | Treatment planning for immunotherapy based treatments using non-thermal ablation techniques |
US11925405B2 (en) | 2018-03-13 | 2024-03-12 | Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. | Treatment planning system for immunotherapy enhancement via non-thermal ablation |
WO2020028806A1 (en) | 2018-08-02 | 2020-02-06 | Duke University | Dual agonist fusion proteins |
US11571569B2 (en) | 2019-02-15 | 2023-02-07 | Pulse Biosciences, Inc. | High-voltage catheters for sub-microsecond pulsing |
BR102019013578A2 (pt) * | 2019-06-28 | 2021-01-05 | Eqt Equipamentos E Tecnologia Ltda. | Ponta aplicadora de eletroporação para procedimento de eletroquimioterapia |
US11950835B2 (en) | 2019-06-28 | 2024-04-09 | Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. | Cycled pulsing to mitigate thermal damage for multi-electrode irreversible electroporation therapy |
US11512314B2 (en) | 2019-07-12 | 2022-11-29 | Duke University | Amphiphilic polynucleotides |
EP4025144B1 (en) * | 2019-09-02 | 2023-09-06 | Mirai Medical Limited | Electroporation apparatus |
WO2021074695A1 (en) | 2019-10-16 | 2021-04-22 | Avacta Life Sciences Limited | PD-L1 INHIBITOR - TGFβ INHIBITOR BISPECIFIC DRUG MOIETIES. |
IL295697A (en) | 2020-02-25 | 2022-10-01 | Inovio Pharmaceuticals Inc | Vaccines against corona virus and methods of use |
CA3177949A1 (en) | 2020-05-14 | 2021-11-18 | Stephanie RAMOS | Vaccines for recurrent respiratory papillomatosis and methods of using the same |
GB202101299D0 (en) | 2020-06-09 | 2021-03-17 | Avacta Life Sciences Ltd | Diagnostic polypetides and methods |
EP4165183A1 (en) | 2020-06-12 | 2023-04-19 | University of Rochester | Encoding and expression of ace-trnas |
WO2022234003A1 (en) | 2021-05-07 | 2022-11-10 | Avacta Life Sciences Limited | Cd33 binding polypeptides with stefin a protein |
WO2023057946A1 (en) | 2021-10-07 | 2023-04-13 | Avacta Life Sciences Limited | Serum half-life extended pd-l1 binding polypeptides |
TW202334196A (zh) | 2021-10-07 | 2023-09-01 | 英商阿法克塔生命科學有限公司 | Pd-l1結合多肽 |
WO2023150753A1 (en) | 2022-02-07 | 2023-08-10 | University Of Rochester | Optimized sequences for enhanced trna expression or/and nonsense mutation suppression |
WO2023224829A1 (en) * | 2022-05-16 | 2023-11-23 | Vector Surgical, Llc | Intracellular treatment device and methods of use thereof |
WO2024102187A1 (en) | 2022-11-07 | 2024-05-16 | Pinetree Therapeutics, Inc. | Combination therapy comprising bispecific antibodies comprising an nrp1 binding domain |
Family Cites Families (29)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US1099062A (en) * | 1913-12-10 | 1914-06-02 | Peter P Laposkey | Electric scalp appliance. |
US3773051A (en) * | 1972-03-01 | 1973-11-20 | Research Corp | Method and apparatus for stimulation of body tissue |
US4116238A (en) * | 1976-08-18 | 1978-09-26 | Midgard Electronics Company, Inc. | High voltage constant current source for iontophoresis |
US4528265A (en) * | 1982-05-11 | 1985-07-09 | Becker Robert O | Processes and products involving cell modification |
US4784757A (en) * | 1987-07-13 | 1988-11-15 | Nelson Edgar E | Solid material separator |
US5128257A (en) * | 1987-08-31 | 1992-07-07 | Baer Bradford W | Electroporation apparatus and process |
US5389069A (en) * | 1988-01-21 | 1995-02-14 | Massachusetts Institute Of Technology | Method and apparatus for in vivo electroporation of remote cells and tissue |
JP2798459B2 (ja) * | 1988-01-21 | 1998-09-17 | マサチユセツツ・インスチチユート・オブ・テクノロジー | エレクトロポレーションを利用した診断装置及び分子の組織内移動装置 |
WO1989010690A1 (en) * | 1988-05-02 | 1989-11-16 | University Of South Florida | Method for electrofusing biological particles to tissues |
US4955378A (en) * | 1988-05-02 | 1990-09-11 | University Of South Florida | Apparatus and methods for performing electrofusion at specific anatomical sites |
CS275292B2 (en) * | 1989-02-22 | 1992-02-19 | Cvut Fakulta Elektrotechnick | Private rehabilitation apparatus with ion transcutaneous acceleration |
US5036850A (en) * | 1989-08-25 | 1991-08-06 | Staodyn, Inc. | Biphasic pulse output stage for electronic stimulating device |
US5097833A (en) * | 1989-09-19 | 1992-03-24 | Campos James M | Transcutaneous electrical nerve and/or muscle stimulator |
US5137817A (en) * | 1990-10-05 | 1992-08-11 | Amoco Corporation | Apparatus and method for electroporation |
US5507781A (en) * | 1991-05-23 | 1996-04-16 | Angeion Corporation | Implantable defibrillator system with capacitor switching circuitry |
US5411525A (en) * | 1992-01-30 | 1995-05-02 | Cardiac Pacemakers, Inc. | Dual capacitor biphasic defibrillator waveform generator employing selective connection of capacitors for each phase |
US5273525A (en) * | 1992-08-13 | 1993-12-28 | Btx Inc. | Injection and electroporation apparatus for drug and gene delivery |
US5688233A (en) * | 1992-08-17 | 1997-11-18 | Genetronics, Inc. | Electronincorporation enhanced transdermal delivery of molecules |
US5318514A (en) * | 1992-08-17 | 1994-06-07 | Btx, Inc. | Applicator for the electroporation of drugs and genes into surface cells |
US5468223A (en) * | 1992-11-30 | 1995-11-21 | C.N.R.S. Paris | Electrochemotherapy |
FR2703253B1 (fr) * | 1993-03-30 | 1995-06-23 | Centre Nat Rech Scient | Applicateur d'impulsions electriques pour traitement de tissus biologiques. |
US5702359A (en) * | 1995-06-06 | 1997-12-30 | Genetronics, Inc. | Needle electrodes for mediated delivery of drugs and genes |
US5993434A (en) * | 1993-04-01 | 1999-11-30 | Genetronics, Inc. | Method of treatment using electroporation mediated delivery of drugs and genes |
US5439440A (en) * | 1993-04-01 | 1995-08-08 | Genetronics, Inc. | Electroporation system with voltage control feedback for clinical applications |
US6041252A (en) * | 1995-06-07 | 2000-03-21 | Ichor Medical Systems Inc. | Drug delivery system and method |
US6261281B1 (en) * | 1997-04-03 | 2001-07-17 | Electrofect As | Method for genetic immunization and introduction of molecules into skeletal muscle and immune cells |
EA002087B1 (ru) * | 1997-04-03 | 2001-12-24 | Электрофект Ас | Способ введения фармацевтических препаратов и нуклеиновых кислот в скелетную мышцу |
US5873849A (en) * | 1997-04-24 | 1999-02-23 | Ichor Medical Systems, Inc. | Electrodes and electrode arrays for generating electroporation inducing electrical fields |
US6009347A (en) * | 1998-01-27 | 1999-12-28 | Genetronics, Inc. | Electroporation apparatus with connective electrode template |
-
1995
- 1995-06-06 US US08/467,566 patent/US5702359A/en not_active Expired - Lifetime
-
1996
- 1996-05-22 RU RU98100256/14A patent/RU2168337C2/ru active
-
2004
- 2004-02-20 US US10/783,161 patent/US20050192542A1/en not_active Abandoned
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2595009C2 (ru) * | 2012-02-07 | 2016-08-20 | Джузеппе КАЧЧЬЯ | Прибор электропорации, содержащий продолговатый аппликатор, кольцевые электроды и гнездо для шприца |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US20050192542A1 (en) | 2005-09-01 |
US5702359A (en) | 1997-12-30 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2168337C2 (ru) | Способ лечения с введением лекарственных препаратов и генов посредством электропорации | |
CA2218255C (en) | Method of treatment using electroporation-mediated delivery of drugs and genes | |
KR100756252B1 (ko) | 일렉트로포레이션에 의한 약제와 유전자 전달 방법 및 장치 | |
US6241701B1 (en) | Apparatus for electroporation mediated delivery of drugs and genes | |
US6216034B1 (en) | Method of programming an array of needle electrodes for electroporation therapy of tissue | |
US5501662A (en) | Implantable electroporation method and apparatus for drug and gene delivery | |
US20040204669A1 (en) | Apparatus for electroporation mediated delivery for drugs and genes | |
EP1171189B1 (en) | Apparatus for reducing electroporation-mediated muscle reaction and pain response | |
MXPA97008316A (en) | Method of treatment using administration of drugs and genes through electroporac |