RU2129717C1 - Способ экспресс - диагностики герпетических нейроинфекций у детей - Google Patents
Способ экспресс - диагностики герпетических нейроинфекций у детей Download PDFInfo
- Publication number
- RU2129717C1 RU2129717C1 RU93040836A RU93040836A RU2129717C1 RU 2129717 C1 RU2129717 C1 RU 2129717C1 RU 93040836 A RU93040836 A RU 93040836A RU 93040836 A RU93040836 A RU 93040836A RU 2129717 C1 RU2129717 C1 RU 2129717C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- herpes
- cerebrospinal fluid
- antigen
- herpetic
- antibodies
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 33
- XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N IDUR Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(I)=C1 XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N 0.000 title abstract description 22
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 43
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 43
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 43
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims abstract description 33
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 claims abstract description 26
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims abstract description 18
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 11
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 11
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 claims abstract description 9
- 239000000902 placebo Substances 0.000 claims abstract description 9
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 claims abstract description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 8
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 claims abstract description 6
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 claims abstract description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 4
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims abstract description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 claims abstract description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 claims abstract description 3
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 claims description 41
- 230000003602 anti-herpes Effects 0.000 claims description 20
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 claims description 12
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 10
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 10
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 claims description 4
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 claims 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 2
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 18
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 18
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 18
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 8
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 7
- 230000000521 hyperimmunizing effect Effects 0.000 description 7
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 7
- 206010019973 Herpes virus infection Diseases 0.000 description 6
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 5
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 5
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 4
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 4
- 208000000903 Herpes simplex encephalitis Diseases 0.000 description 4
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 4
- 239000003547 immunosorbent Substances 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 4
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 description 3
- 229960002319 barbital Drugs 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 3
- 208000037018 Herpes simplex virus encephalitis Diseases 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010027285 Meningoencephalitis herpetic Diseases 0.000 description 2
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 2
- MKUXAQIIEYXACX-UHFFFAOYSA-N aciclovir Chemical compound N1C(N)=NC(=O)C2=C1N(COCCO)C=N2 MKUXAQIIEYXACX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 230000002920 convulsive effect Effects 0.000 description 2
- 206010014599 encephalitis Diseases 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 2
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 2
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- GEYOCULIXLDCMW-UHFFFAOYSA-N 1,2-phenylenediamine Chemical compound NC1=CC=CC=C1N GEYOCULIXLDCMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010048962 Brain oedema Diseases 0.000 description 1
- 208000014912 Central Nervous System Infections Diseases 0.000 description 1
- 206010051290 Central nervous system lesion Diseases 0.000 description 1
- 206010010071 Coma Diseases 0.000 description 1
- 102000000989 Complement System Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010069112 Complement System Proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000034657 Convalescence Diseases 0.000 description 1
- 206010014612 Encephalitis viral Diseases 0.000 description 1
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 description 1
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 1
- 208000007542 Paresis Diseases 0.000 description 1
- 229920002334 Spandex Polymers 0.000 description 1
- 208000010513 Stupor Diseases 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 208000006752 brain edema Diseases 0.000 description 1
- 230000024203 complement activation Effects 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 1
- 238000001784 detoxification Methods 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 210000000540 fraction c Anatomy 0.000 description 1
- 206010019465 hemiparesis Diseases 0.000 description 1
- 230000008588 hemolysis Effects 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 238000003119 immunoblot Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 201000011475 meningoencephalitis Diseases 0.000 description 1
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 230000000926 neurological effect Effects 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 238000010837 poor prognosis Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000012113 quantitative test Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000004759 spandex Substances 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 201000002498 viral encephalitis Diseases 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Способ включает индикацию герпетического антигена, противогерпетических антител и уровня иммунного комплекса в цельном ликворе и сыворотке крови ребенка. Цельный ликвор и сыворотку крови, взятую в разведении 1:10, соединяют при равных объемных соотношениях со стандартным герпетическим антигеном или противогерпетической иммунной сывороткой или плацебо. Добавляют к полученным смесям по 1-2 гемолитические дозы сыворотки морской свинки в качестве экзогенного комплемента, взятии в удвоенном объеме относительно объема указанных смесей. Полученные растворы выдерживают. Затем с использованием иммуноферментного анализа определяют в пробе, содержащей цельный ликвор и стандартный герпетический антиген, а также в пробе. содержащей сыворотку крови и стандартный герпетический антиген. уровень противогерпетических антител. Определяют в пробе, содержащей цельный ликвор и противогерпетическую иммунную сыворотку, а также в пробе, содержащей сыворотку криви и противогерпетическую иммунную сыворотку, уровень герпетического антигена. Определяют в пробе, содержащей цельный ликвор и плацебо, а также в пробе, содержащей сыворотку крови и плацебо, уровень иммунного комплекса. И при уровне герпетического антигена (АГ) в ликворе более 60% относительно контроля, а уровне противогерпетических антител (AТ) 20% диагностируют острую форму герпетической нейроинфекции. При этом при отсутствии в ликворе иммунного комплекса (ИК) - начало, а при уровне ИК в ликворе 50-60%- 5-6 дней от начала заболевания. При уровне АГ в ликворе или сыворотке крови от 20 до 60%. уровне ИК в ликворе более 50% и уровне AT в ликворе до 20% диагностируют окончание острого периода активации герпетической нейроинфекции. При уровне АГ в ликворе до 20% и уровне AT в ликворе более 50% диагностируют легкую форму герпетической нейроинфекции или период ранней реконваленции. При уровне AT в ликворе более 60% и отсутствии АГ диагностируют исход инфекционного процесса. Способ позволяет поставить диагноз заболевания и по лабораторным данным установить фазу заболевания. 2 табл.
Description
Изобретение относится к медицине, в частности, к диагностике герпетических поражений центральной нервной системы у детей.
Известен ряд тестов диагностики герметических инфекций, основанных на обнаружении противогерпетических антител: радиоиммунный, твердофазный, иммуноферментный и другие тесты. С помощью этих методов в последние годы удается легко ставить диагноз герпетической инфекции в ранние сроки заболевания по наличию у ребенка антител класса IgM в крови и ликворе. Значительно в меньшей степени используется система экспресс-диагностики указанными тестами герметического антигена в пробах крови и ликворе.
Недостатком всех указанных методов является невозможность в одной системе одновременно оценить уровень антигена, антител, циркулирующего иммунного комплекса. В лабораторной практике в настоящее время отсутствует тест-система, позволяющая проводить подобный анализ.
Наиболее близким к предлагаемому способу является способ диагностики герпетической инфекции ЦНС с предполагаемым герпетическим энцефалитом, основанный на выявлении в крови и ликворе антител в реакции иммуноблотинга к специально очищенному белку gB вируса герпеса (Kahlon J, Chaffcrjee S. Lakeman et al. Dctioction of antibodjes to herpes simplex virus the ceribcospinal fluid of patiens with HVE. J. Infect. Dis., 1987, 155, 1, p. 38-44).
Авторы определяли у больных с энцефалитом антитела к белку gB вируса герпеса в 95% обследованных биопсий. В то же время при других методах выявления антител к герпесу /4-х кратный прирост комплемент-связывающих антител и другие/ в первые 8 дней заболевания диагностика герпетического энцефалита была в меньшем проценте случаев /от 50 до 64%/. Более того необходимо отметить, что в острой фазе герметической инфекции ЦНС часто происходит задержка в выработке антител и образовании иммунного комплекса, так что поставить этиологический диагноз без выявления герметического антигена в ликоворе практически невозможно. Если же инфекционный процесс в ЦНС протекает в умеренной степени, то первично вырабатывающиеся антитела вступают в иммунный комплекс с вирусным антигеном в пределах ЦНС и выявить в этих условиях антиген или антитела становится достаточно трудно.
Сущность предлагаемого способа заключается в том, что для установления этиологии, тяжести и характера герпетической инфекции нервной системы у больного в крови и ликворе определяют концентрацию герметического антигена, противогерпетических антител, общего иммунного комплекса в крови и ликворе в унитарной системе жидкостного иммуно-ферментного теста. Предложенный авторами способа экспресс-диагностики может помочь в устранении недостатков способа, описанного в прототипе. Устраняется также один из главных недостатков базового способа - необходимость использования для проведения реакции выявления антител специально очищенного белка gB вируса герпеса простого.
В предлагаемом способе возможно использование различных жидкостных иммуноферментных тестов, основанных однако на одновременном совместном выявлении герпетического антигена, противогерпетических антител и образованного иммунного комплекса. Может быть две разновидности таких жидкостных иммуноферментных методов, дающих возможность определения этих факторов у больного - иммуноферментный метод, основанный на использовании фермент-меченых антиглобулинов или с помощью ферментного определения комплемента, участвующего в выявлении антигена, антител и иммунного комплекса. Другие разновидности более сложны и нуждаются в использовании сложных многокомпонентных препаратов-диагностикумов.
Целью предлагаемого изобретения является установление диагноза герпетической инфекции ЦНС, а также оценка тяжести и периода ее течения. Поставленная цель достигается тем, что путем сочетания вносимых в реакцию ингредиентов - стандартного герпетического антигена, экспериментальной противогерпетической гипериммунной сыворотки и точно титрованного количества комплемента в ликовре и крови больных определяют одномоментно герпетический антиген, специфические антитела и иммунный комплекс. Основные принципы метода - иммуноферментное определение концентрации комплемента при определении всех указанных факторов и жидкостная система постановки иммуноферментной реакции. С помощью такого принципа создается возможность идентификации указанных факторов и унификации конечного показателя при выполнении способа.
Способ осуществляется следующим образом.
Цельный ликвор больного и его сыворотка крови в разведении 1:10 соединяют в равных объемах альтернативно со стандартным герпетическим антигеном или противогерпетической иммунной сывороткой /10-20 вируснейтрализующих доз/. Далее в приготовленные смеси добавляют 1-2 гемолитических дозы экзогенного комплемента /сыворотки морской свинки/, разведенного до удвоенного объема смеси, полученной до внесения. Полученные растворы выдерживают в термостате при 37oC в течение 60-90 мин и затем определяют в ферментной реакции уровень свободного комплемента в пробах.
Методически при постановке способа в индикацию включаются следующие пробы.
1. Цельный ликвор и стандартный герпетический антиген - реакция для определения противогерпетических антител в ликворе.
2. Цельный ликвор и гипериммунная противогерпетическая сыворотка - реакция для определения герпетического антигена в ликворе.
3. Цельный ликвор + плацебо /мединалово-вероналовый буфер/ - реакция для определения иммунного комплекса в ликворе.
4. Сыворотка больного /1:10/ и стандартный герпетический антиген - реакция для определения антител в крови больного.
5. Сыворотка больного /1:10/ и гипериммунная противогерпетическая сыворотка - реакция для определения герпетического антигена в крови больного.
6. Сыворотка больного /1:10/ + плацебо /мединалово-вероналовый буфер/ - реакция для определения иммунного комплекса в крови больных.
Во все пробы с 1 по 6-ю вносятся 1-2 дозы стандартного комплемента. Контролем для вносимой дозы комплемента служит проба 7 - комплемент + плацебо /мединалово-вероналовый буфер/.
После проведения реакции свободный неадсорбированный комплемент определяют во всех семи пробах в любом из современных количественных тестов, желательно с использованием иммуноферментного анализа. Заявители использовали для этого ферментное выявление комплемента косвенно по активности каталазы бараньих эритроцитов после дополнительного внесения в пробы гемолитической системы, состоящей из 1,0% бараньих эритроцитов и соответствующей гемолитической сыворотки /5-10 гемолитических доз/. После добавления этой системы и проведении реакции при 24-26oC до появления первых следов гемолиза в пробах N 7 в пробы добавлялась смесь 3,0% перекиси водорода и 0,2% раствора ортофенилендиамина. Пробы выдерживались в течение 10 мин после появления оранжевого окрашивания, реакция останавливалась 0,9N H2SO4 и измерялась концентрация каталазы эритроцитов спектрофотометрически на иммуноферментном анализаторе формы Abbott (492 нм). Активность обнаруженной каталазы линейно соответствовала уровню свободного, несорбированного на иммунные комплексы в пробах комплемента.
Величину свободного комплемента можно определять и в других иммуноферментных реакциях (например, по сорбции его на антитела к фракции C1 комплемента, сорбированные на твердой матрице).
После определения активности свободного комплемента оцениваются результаты по следующим параметрам: снижение активности комплемента в пробах 1 и 4 означает наличие в крови или ликворе больного соответственно антител к вирусу герпеса, аналогичное уменьшение уровня комплемента в пробах 2 и 5 означает наличие антигена в ликворе или крови больных. Уменьшение комплемента в пробе 3 соответствует количеству имеющегося в ликоворе иммунного комплекса, а в пробе 6 - аналогичный показатель, отражающий наличие иммунного комплекса в крови. Дополнительно после установления содержания иммунных комплексов в ликворе в пробах 3 и 6 после установления снижения свободного комплемента, т. е. наличия иммунных комплексов, их специфичность, а именно наличие в этом иммунном комплексе герпетического антигена, добавляют на 30-35 мин гипериммунную противогерпетическую сыворотку /10-20 нейтрализующих доз/ и определяют специфичность иммунного комплекса по увеличению уровня комплемента по сравнению с исходной пробой 3 и 6, а также пробой 7.
С помощью всех указанных разновидностей реакций в данном способе удается определить у больного одновременно в ликворе и крови специфический герметический антиген /1-го или 2-го серотипа/, противогерпетические антитела, а также в этих пробах общий иммунный и специфический иммунный комплекс. Определение антигена основано на том, что вносимые противогерпетические антитела в виде противогерпетической гипериммунной сыворотки образуют с эндогенными герпетическим антигеном в крови или ликворе специфический иммунный комплекс "ин витро", сорбирующий на себе внесенный в реакцию комплемент. Обратным образом выявление противогерпетических эндогенных антител у больного основано на определении сорбции комплемента на образующийся "ин витро" иммунный комплекс антител больного и вносимого антигена вируса простого герпеса 1-го или 2-го серотипа.
Иммунный комплекс общего характера выявляется по простой сорбции вносимого комплемента в ликвор или сыворотку крови больного. Необходимо отметить, что при герпетической инфекции ЦНС в ликворе и особенно в крови величина этого иммунного комплекса практически соответствует количеству специфического иммунного комплекса /антиген герпеса + антитело/, циркулирующего в организме больного эндогенно. Однако для доказательства его специфичности нами включена в исследование разновидность метода его определения с дополнительным внесением гипериммунной специфической противогерпетической сыворотки. Основана эта разновидность на том, что при минимальном времени контакта /30-35 мин/ гипериммунные антитела вытесняют антиген из эндогенного иммунного комплекса и этот процесс сопровождается десорбцией с иммунного комплекса компонентов комплемента, которые увеличивают величину гемолитического комплемента и, следовательно, выхода каталазной активности изэритроцитов.
Для количественной характеристики полученных показателей можно использовать непосредственные показатели, полученные на иммуноферментном анализаторе, либо оценивать по уровню снятия активности от уровня пробы 7 /в процентах/.
Пример 1. Больной Яккола, 5 лет. Поступил в клинику НИИ детских инфекций с диагнозом "Вирусный энцефалит, корково-подкорковая форма". Состояние средней тяжести, судорожный синдром, сопор, гемипарез. При диагностике на герпетическую инфекцию заявляемым способом установлено:
Вирусологический диагноз: Герпетический менингоэнцефалит, конец острой фазы заболевания /вариант 2-3, см. далее/.
Вирусологический диагноз: Герпетический менингоэнцефалит, конец острой фазы заболевания /вариант 2-3, см. далее/.
Исход заболевания: Больной получал гормоны, виролекс, дегидрационную и дезинтоксикационную терапию. Выздоровление в удовлетворительном состоянии с минимальными неврологическими остаточными явлениями.
Совершенно другие показатели выявляются в случае поражений ЦНС с тяжелым течением и неблагоприятным прогнозом.
Пример 2. Больная Семенова, 2 года 3 мес. Поступила в клинику НИИ детских инфекций с диагнозом "Тяжелый вирусный менингоэнцефалит", "Судорожный коматозный синдром. Отек и набухание головного мозга с дислокацией".
При диагностике на герпетическую инфекцию заявляемым способом установлено:
Вирусологический диагноз: Герпетический менингоэнцефалит. Первично острая форма инфекции. Прогноз плохой /вариант 1, см. далее/.
Вирусологический диагноз: Герпетический менингоэнцефалит. Первично острая форма инфекции. Прогноз плохой /вариант 1, см. далее/.
Исход заболевания: Больная, несмотря на проводимое лечение, включая и специфическую терапию виролексом, погибла на 5-ый день от поступления в клинику в связи с отеком мозга и его дислокацией.
Использование предлагаемого способа позволяет не только точно поставить диагноз герпетической инфекции, но и, предположительно, установить фазу инфекционного процесса и прогноз заболевания. Возможно вычленить 4 варианта течения и прогноза заболевания.
Вариант 1. У больного высокий уровень антигена в ликворе /более 60%/, при низкой концентрации антител в ликворе /менее 20%/. В данном случае - это первичная острейшая форма герпетической инфекции. При отсутствии в ликворе иммунных комплексов - раннее начало, при наличии иммунных комплексов /в пределах 50-60%/ - 5-6 дней от начала инфекции. В первом варианте, даже при наличии иммунных комплексов, но при отсутствии в пределах ЦНС антител - прогноз плохой.
Вариант 2. У больного умеренная концентрация антигена в ликворе или крови /от 20 до 60%/, наличии иммунного комплекса /более 50%/, но при отсутствии или минимальном содержании антител в ликворе /до 20%/. В данном случае у больного конец острого периода активации герпетической инфекции. Прогноз при наличии иммунного комплекса - средний.
Вариант 3. У больного антиген в ликворе минимален /до 20%/ или полностью отсутствует, но в ЦНС определяются антитела к вирусу герпеса /более 50%/ - это либо легкая форма герпетической инфекции, либо период ранней реконвалесценции.
Вариант 4. Значительная концентрация у больного антител в ликворе /более 65%/, отсутствует антиген и умеренная концентрация иммунного комплекса - это практически исход инфекционного процесса.
При вариантах 3 и 4 прогноз благоприятный, особенно если антитела обнаруживаются также и в крови.
Необходимо отметить, что при 1-м варианте в достаточном проценте у больного выявляются такие осложнения, как гепатит /размножение вируса герпеса в печени/, а также аллергические осложнения.
Таким образом представленный способ позволяет не только поставить диагноз герпетической инфекции, но и по лабораторным данным установить фазу заболевания и дать предположительный прогноз исхода инфекционного процесса.
Преимуществами данного способа является его высокая чувствительность так как этап реакции проходит фазу иммуноферментного определения исследуемых факторов, унификация цифровых показателей результатов, выявление в однотипной реакции нескольких параметров - антигена, антител, иммунного комплекса. Кроме того, необходимо отметить, что постановка данного способа по его этапам физиологична, чем твердофазные иммуноферментные способы, где при проведении реакции трудно учесть ряд сторон патогенеза инфекционного герпетического процесса. К таковым сторонам относятся - наличие иммунного комплекса и влияние на него собственного или дополнительного внесенного комплемента, одновременное присутствие в крови и ликворе герпетического вируса и его антигенов и свободных противовирусных антител, а также роль в образовании иммунного комплекса растворимых сывороточных факторов. Все эти стороны могут быть установлены при выполнении реакций данным способом и внимательной оценке получаемых цифровых показателей.
Claims (1)
- Способ экспресс-диагностики герпетической нейроинфекции у детей, включающий индикацию герпетического антигена и противогерпетических антител в цельном ликворе и сыворотке крови ребенка, отличающийся тем, что дополнительно определяют в цельном ликворе и сыворотке крови ребенка уровень иммунного комплекса, при этом цельный ликвор и сыворотку крови, взятую в разведении 1: 10, соединяют при равных объемных соотношениях со стандартным герпетическим антигеном или противогерпетической иммунной сывороткой или плацебо, добавляют к полученным смесям по 1-2 гемолитические дозы сыворотки морской свинки в качестве экзогенного комплемента, взятой в удвоенном объеме относительно объема указанных смесей, полученные растворы выдерживают и затем с использованием иммуноферментного анализа определяют в пробе, содержащей цельный ликвор и стандартный герпетический антиген, а также в пробе, содержащей сыворотку крови и стандартный герпетический антиген, уровень противогерпетических антител, определяют в пробе, содержащей цельный ликвор и противогерпетическую иммунную сыворотку, а также в пробе, содержащей сыворотку крови и противогерпетическую иммунную сыворотку, уровень герпетического антигена, и определяют в пробе, содержащей цельный ликвор и плацебо, а также в пробе, содержащей сыворотку крови и плацебо, уровень иммунного комплекса, далее оценивают уровни перечисленных показателей относительно контроля и при уровне герпетического антигена (АГ) в ликворе более 60% относительно контроля, а уровне противогерпетических антител (АТ) 20% диагностируют острую форму герпетической нейроинфекции, при этом при отсутствии в ликворе иммунного комплекса (ИК) - начало, а при уровне ИК в ликворе 50-60%- 5-6 дней от начала заболевания, при уровне АГ в ликворе или сыворотке крови от 20 до 60%, уровне ИК в ликворе более 50% и уровне АТ в ликворе до 20% диагностируют окончание острого периода активации герпетической нейроинфекции, при уровне АГ в ликворе до 20% и уровне АТ в ликворе более 50% диагностируют легкую форму герпетической нейроинфекции или период ранней реконваленции, а при уровне АТ в ликворе более 60% и отсутствии АГ диагностируют исход инфекционного процесса.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU93040836A RU2129717C1 (ru) | 1993-08-11 | 1993-08-11 | Способ экспресс - диагностики герпетических нейроинфекций у детей |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU93040836A RU2129717C1 (ru) | 1993-08-11 | 1993-08-11 | Способ экспресс - диагностики герпетических нейроинфекций у детей |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU93040836A RU93040836A (ru) | 1997-11-27 |
| RU2129717C1 true RU2129717C1 (ru) | 1999-04-27 |
Family
ID=20146446
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU93040836A RU2129717C1 (ru) | 1993-08-11 | 1993-08-11 | Способ экспресс - диагностики герпетических нейроинфекций у детей |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2129717C1 (ru) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2225614C2 (ru) * | 2002-01-11 | 2004-03-10 | Научно-исследовательский институт детских инфекций | Способ выявления антигена вируса папилломы человека |
| RU2341797C1 (ru) * | 2007-06-22 | 2008-12-20 | ФГУ Ростовский НИИ акушерства и педиатрии Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию | Способ прогнозирования генерализованной формы герпес-вирусной инфекции у детей первых месяцев жизни |
| RU2488822C1 (ru) * | 2012-01-18 | 2013-07-27 | Федеральное государственное учреждение научно-исследовательский институт детских инфекций Федерального медико-биологического агентства | Способ определения антител к оппортунистическим инфекциям в ликворе детей |
-
1993
- 1993-08-11 RU RU93040836A patent/RU2129717C1/ru active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Kahlon J. Et al., Detection of antibodies to Herpes simplex virus in the cerebrospinal fluid of patient with HVE, J.Infect.Dis., 1987, vol.155, 1, p.38-44. Букринская А.Г. Методы экспресс-диагностики вирусных инфекций. В кн: Индикация вирусов.-М.: Медицина, 1984, с.30-31. Малая медицинская энциклопедия/ Под ред. В.И.Покровского.-М.: Советская энциклопедия, 1991, т.1, с.437. * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2225614C2 (ru) * | 2002-01-11 | 2004-03-10 | Научно-исследовательский институт детских инфекций | Способ выявления антигена вируса папилломы человека |
| RU2341797C1 (ru) * | 2007-06-22 | 2008-12-20 | ФГУ Ростовский НИИ акушерства и педиатрии Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию | Способ прогнозирования генерализованной формы герпес-вирусной инфекции у детей первых месяцев жизни |
| RU2488822C1 (ru) * | 2012-01-18 | 2013-07-27 | Федеральное государственное учреждение научно-исследовательский институт детских инфекций Федерального медико-биологического агентства | Способ определения антител к оппортунистическим инфекциям в ликворе детей |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Kang et al. | Comparison of ABO antibody titers on the basis of the antibody detection method used | |
| US5187065A (en) | Method and materials for detecting lyme disease | |
| CN101819207B (zh) | 一种纳米微球免疫比浊法检测α1-微球蛋白的试剂盒 | |
| CA2099374C (en) | Diagnostic method for detecting the rupture of fetal membranes and test kit employing the method | |
| CN104215779B (zh) | 一种检测血红蛋白结合alpha-突触核蛋白的方法 | |
| CA1146852A (en) | Reagent for latex agglutination | |
| JP4704662B2 (ja) | 免疫学的ラテックス比濁分析方法及びその試薬 | |
| CN110531085A (zh) | 一种测定人体神经丝轻链蛋白含量的磁微粒化学发光检测试剂盒及其制备方法 | |
| CN107957495A (zh) | 一种ck-mb检测试剂盒及其使用方法 | |
| CN109324181B (zh) | 一种免疫层析用封闭剂组合物、用途、及免疫层析试剂盒的制备方法 | |
| Mizuta et al. | Radioimmunoassay of" free thyroxin" in dried blood spots on filter paper-preliminary observations on the effective differentiation of subjects with congenital hypothyroidism from those with subnormal thyroxin-binding globulin and normal subjects. | |
| US3426123A (en) | Diagnostic test for infectious mononucleosis with aldehyde treated equine erythrocytes | |
| CN109444431A (zh) | 一种心脏肌球蛋白结合蛋白c的定量检测方法及检测试剂盒 | |
| US4476230A (en) | Process for the kinetic determination of immunocomplexes | |
| JP2618629B2 (ja) | 特異的な免疫学的定量方法 | |
| JPS6022295B2 (ja) | 赤血球凝集試験用水性溶媒 | |
| GB2217335A (en) | Compositions for isolation and immobilisation of C-reactive protein in body liquids | |
| RU2147130C1 (ru) | Способ определения кровопотери из желудочно-кишечного тракта | |
| Grenett et al. | Identification and quantitation of sickle cell hemoglobin with an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) | |
| JP3290520B2 (ja) | 抗リン脂質抗体測定法 | |
| SU1323959A1 (ru) | Способ определени специфичности иммунных комплексов | |
| NO153987B (no) | Fremgagsmaate for bestemmelse av celletype eller forenlighet paa en fast matrise. | |
| Diamandis et al. | Labelling strategies in time-resolved fluoroimmunoassays and immunofluorometric assays | |
| JP3290521B2 (ja) | 抗リン脂質抗体測定法 | |
| JPS63235868A (ja) | リウマチ因子定量法 |