RU2017141919A

RU2017141919A - Способ получения пузырьков с трансмембранным градиентом рн

Info

Publication number: RU2017141919A
Application number: RU2017141919A
Authority: RU
Inventors: Жан-Кристоф ЛЕРУ; Винсент Форстер; Валентина АГОСТОНИ
Original assignee: Ферзантис Аг
Priority date: 2015-05-04
Filing date: 2016-05-03
Publication date: 2019-06-04
Also published as: AU2016256979B2; AU2016256979A1; US20220287971A1; BR112017023578A2; PT3291797T; DK3291797T3; EP3291797B1; CN107750156B; EP3291797A1; HK1250663A1; JP2018519370A; RU2017141919A3; US11376218B2; RU2717824C2; MX2017014130A; ES2826896T3; WO2016177741A1; CN107750156A; CA2987844A1; JP6715265B2

Claims

1. Способ получения пузырьков с трансмембранным градиентом рН, включающий стадии:

а) получения пузырьков, состоящих из по меньшей мере одного матричного вещества в водной среде, имеющей осмолярность не более чем 200 мОсм/л, где матричное вещество выбирают из группы, состоящей из амфифильных липидов и амфифильных блоксополимеров,

b) смешивания пузырьков с основным или кислым буфером, имеющим осмолярность, составляющую по меньшей мере на 200 мОсм/л выше, чем осмолярность водной среды стадии a) для применения осмотического шока к пузырькам и для получения пузырьков, наполненных буфером и

с) разведения смеси водной среды и основного или кислого буфера, содержащего пузырьки, наполненные буфером, путем добавления нейтрализующего раствора для получения пузырьков с трансмембранным градиентом рН, суспендированных в суспензионном буфере, где суспензионный буфер отличается от основного или кислого буфера по значению pH.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что пузырьки, полученные на стадии a), стерилизуют для получения стерилизованных пузырьков перед осуществлением стадии b) с такими стерилизованными пузырьками.

3. Способ по п.1, отличающийся тем, что пузырьки хранят в течение первого периода времени до осуществления стадии b).

4. Способ по п.1, отличающийся тем, что стадию b) осуществляют при температуре, которая ниже, чем температура перехода фаз матричного вещества.

5. Способ по п.1, отличающийся тем, что стадию b) осуществляют при температуре не более чем 35°C.

6. Способ по п.1, отличающийся тем, что осмолярность основного или кислого буфера составляет по меньшей мере 250 мОсм/л.

7. Способ по п.1, отличающийся тем, что смесь водной среды и основного или кислого буфера, в котором суспендированы пузырьки, наполненные буфером, в конце стадии b) имеют осмолярность по меньшей мере 200 мОсм/л.

8. Способ по п.1, отличающийся тем, что нейтрализующий раствор имеет осмолярность от 250 мОсм/л до 550 мОсм/л.

9. Способ по п.1, отличающийся тем, что нейтрализующий раствор включает по меньшей мере одно вещество, выбираемое из группы, состоящей из глицерина, ксилита, TRIS, глюкозы, солей магния, гидроксида натрия, солей натрия и солей кальция.

10. Способ по п.1, отличающийся тем, что значение pH суспензионного буфера, содержащего пузырьки с трансмембранным градиентом рН, находится в диапазоне от 5,5 до 8,5.

11. Способ по п.1, отличающийся тем, что водную среду выбирают из группы, состоящей из воды, водных растворов органических солей, водных растворов неорганических солей, водных растворов органических веществ и их комбинаций.

12. Способ по п.1, отличающийся тем, что матричное вещество выбирают из группы, состоящей из дипальмитоилфосфатидилхолина, 1,2-дистеароил-sn-глицеро-3-фосфоэтаноламин-N-[метокси(PEG)-2000], холестерина и 1-пальмитоил-2-олеоил-sn-глицеро-3-фосфохолина и их комбинаций.