RU2014120420A - Способ определения зиготности гена fad3 в каноле - Google Patents

Способ определения зиготности гена fad3 в каноле Download PDF

Info

Publication number
RU2014120420A
RU2014120420A RU2014120420/10A RU2014120420A RU2014120420A RU 2014120420 A RU2014120420 A RU 2014120420A RU 2014120420/10 A RU2014120420/10 A RU 2014120420/10A RU 2014120420 A RU2014120420 A RU 2014120420A RU 2014120420 A RU2014120420 A RU 2014120420A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
probe
primer
amplicon
nucleotide polymorphism
interest
Prior art date
Application number
RU2014120420/10A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2630998C2 (ru
Inventor
Ласанта Чандана УБАЯСЕНА
Зое ЭЛЕРТ
Чандра Шекара А. ЧАННАБАСАВАРАДХЯ
Манджу ГУПТА
Original Assignee
ДАУ АГРОСАЙЕНСИЗ ЭлЭлСи
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by ДАУ АГРОСАЙЕНСИЗ ЭлЭлСи filed Critical ДАУ АГРОСАЙЕНСИЗ ЭлЭлСи
Publication of RU2014120420A publication Critical patent/RU2014120420A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2630998C2 publication Critical patent/RU2630998C2/ru

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07HSUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H21/00Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids
    • C07H21/04Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids with deoxyribosyl as saccharide radical
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12QMEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12QMEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6888Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms
    • C12Q1/6895Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms for plants, fungi or algae
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12QMEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/156Polymorphic or mutational markers

Abstract

1. Способ определения зиготности растения канолы, содержащего ген fad-3c, причем упомянутый способ включает в себя:получение геномного образца ДНК от упомянутого растения канолы;получение приведенного в контакт образца посредством приведения упомянутого геномного образца ДНК в контакт с первым праймером и вторым праймером, причем упомянутый первый праймер преимущественно связывается с участком упомянутого гена fad-3c, расположенным против хода транскрипции от локализации представляющего интерес однонуклеотидного полиморфизма, упомянутый второй праймер преимущественно связывается с участком упомянутого гена fad-3c, расположенным по ходу транскрипции от представляющего интерес однонуклеотидного полиморфизма, причем упомянутый первый праймер и упомянутый второй праймер производят ампликон, когда подвергаются условиям полимеразной цепной реакции (ПЦР);подвергание упомянутого приведенного в контакт образца условиям ПЦР, причем производится упомянутый ампликон;предоставление возможности каждому из первого флуоресцентного зонда и второго флуоресцентного зонда гибридизоваться с ампликоном в течение периода времени и при температуре 50-70 градусов Цельсия, причем упомянутый первый флуоресцентный зонд преимущественно гибридизуется с упомянутым ампликоном, когда упомянутый представляющий интерес однонуклеотидный полиморфизм не присутствует в упомянутом ампликоне, упомянутый второй флуоресцентный зонд преимущественно гибридизуется с упомянутым ампликоном, когда упомянутый представляющий интерес однонуклеотидный полиморфизм присутствует в упомянутом ампликоне;повышение упомянутой температуры пос

Claims (16)

1. Способ определения зиготности растения канолы, содержащего ген fad-3c, причем упомянутый способ включает в себя:
получение геномного образца ДНК от упомянутого растения канолы;
получение приведенного в контакт образца посредством приведения упомянутого геномного образца ДНК в контакт с первым праймером и вторым праймером, причем упомянутый первый праймер преимущественно связывается с участком упомянутого гена fad-3c, расположенным против хода транскрипции от локализации представляющего интерес однонуклеотидного полиморфизма, упомянутый второй праймер преимущественно связывается с участком упомянутого гена fad-3c, расположенным по ходу транскрипции от представляющего интерес однонуклеотидного полиморфизма, причем упомянутый первый праймер и упомянутый второй праймер производят ампликон, когда подвергаются условиям полимеразной цепной реакции (ПЦР);
подвергание упомянутого приведенного в контакт образца условиям ПЦР, причем производится упомянутый ампликон;
предоставление возможности каждому из первого флуоресцентного зонда и второго флуоресцентного зонда гибридизоваться с ампликоном в течение периода времени и при температуре 50-70 градусов Цельсия, причем упомянутый первый флуоресцентный зонд преимущественно гибридизуется с упомянутым ампликоном, когда упомянутый представляющий интерес однонуклеотидный полиморфизм не присутствует в упомянутом ампликоне, упомянутый второй флуоресцентный зонд преимущественно гибридизуется с упомянутым ампликоном, когда упомянутый представляющий интерес однонуклеотидный полиморфизм присутствует в упомянутом ампликоне;
повышение упомянутой температуры после периода времени, определенного на стадии предоставления возможности;
регистрацию упомянутой флуоресценции, создаваемой каждым из упомянутых первого и второго зондов во время стадии повышения; и
определение зиготности упомянутого растения канолы, причем стадия определения содержит сравнение флуоресценции, создаваемой каждым из первого и второго зондов, причем флуоресценция первого и второго зондов, преимущественно соответствующая флуоресценции, создаваемой в гомозиготном SNP-положительном контрольном образце, указывает на наличие упомянутого представляющего интерес однонуклеотидного полиморфизма, флуоресценция первого и второго зондов, преимущественно соответствующая флуоресценции, создаваемой в гомозиготном SNP-отрицательном контрольном образце, указывает на отсутствие наличия упомянутого представляющего интерес однонуклеотидного полиморфизма, и флуоресценция первого и второго зондов, преимущественно соответствующая флуоресценции, создаваемой в гетерозиготном SNP-положительном контрольном образце, указывает на то, что упомянутое растение канолы содержит первый аллель, содержащий упомянутый представляющий интерес однонуклеотидный полиморфизм, и второй аллель, не содержащий упомянутый представляющий интерес однонуклеотидный полиморфизм.
2. Способ по п. 1, в котором упомянутые ампликоны состоят из 91-154 пар оснований.
3. Способ по п. 1, в котором упомянутый однонуклеотидный полиморфизм состоит из полиморфизма G->A.
4. Способ по п. 3, в котором упомянутая последовательность дикого типа содержит в упомянутой локализации глицин.
5. Способ по п. 1, в котором упомянутый способ применяют для верификации интрогрессии при селекции у кроссбредных растений канолы.
6. Способ по п. 1, в котором упомянутые праймеры содержат SEQ ID NO: 2 и SEQ ID NO: 3, и упомянутые первый и второй зонд содержат SEQ ID NO: 5 и 4.
7. Способ по п. 1, в котором упомянутые первый и второй зонды помечены как флуоресцентным красителем, так и гасителем.
8. Способ по п. 7, в котором упомянутый первый зонд содержит FAM в качестве упомянутого флуоресцентного красителя на 5'-конце упомянутого первого зонда и MGB-гаситель на 3'-конце упомянутого первого зонда.
9. Способ по п. 7, в котором упомянутый второй зонд помечен VIC на 5'-конце упомянутого второго зонда и MGB-гасителем на 3'-конце упомянутого второго зонда.
10. Способ по п. 1, в котором упомянутый второй зонд содержит SEQ ID NO: 4.
11. Способ по п. 1, в котором результаты флуоресценции упомянутого способа считывают непосредственно в планшет-ридере.
12. Способ по п. 1, в котором упомянутый образец ДНК получают от растения канолы в поле.
13. Способ по п. 1, в котором стадия повышения включает в себя повышение упомянутой температуры с по существу однородными приращениями температуры за период времени.
14. Способ по п. 1, в котором упомянутую флуоресценцию, создаваемую каждым из упомянутых первого и второго зондов во время стадии повышения, регистрируют на стадии регистрации во время каждого приращения на стадии повышения.
15. Набор для осуществления способа по п. 1, причем упомянутый набор содержит упомянутый первый праймер, упомянутый второй праймер, упомянутый первый зонд и упомянутый второй зонд.
16. Набор по п. 15, в котором упомянутый первый праймер состоит из SEQ ID NO: 2, упомянутый второй праймер состоит из SEQ ID NO: 3, упомянутый первый зонд состоит из SEQ ID NO: 5, и упомянутый второй зонд состоит из SEQ ID NO: 4.
RU2014120420A 2011-10-21 2012-10-19 Способ определения зиготности гена fad3 в каноле RU2630998C2 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201161550170P 2011-10-21 2011-10-21
US61/550,170 2011-10-21
PCT/US2012/061000 WO2013059578A1 (en) 2011-10-21 2012-10-19 Method to determine zygosity of the fad3 gene in canola

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2017128518A Division RU2017128518A (ru) 2011-10-21 2012-10-19 Способ определения зиготности гена fad3 в каноле

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2014120420A true RU2014120420A (ru) 2015-11-27
RU2630998C2 RU2630998C2 (ru) 2017-09-15

Family

ID=48136263

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2017128518A RU2017128518A (ru) 2011-10-21 2012-10-19 Способ определения зиготности гена fad3 в каноле
RU2014120420A RU2630998C2 (ru) 2011-10-21 2012-10-19 Способ определения зиготности гена fad3 в каноле

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2017128518A RU2017128518A (ru) 2011-10-21 2012-10-19 Способ определения зиготности гена fad3 в каноле

Country Status (17)

Country Link
US (3) US9663832B2 (ru)
EP (2) EP2768984B1 (ru)
JP (1) JP2014530624A (ru)
CN (1) CN104011225A (ru)
AR (1) AR088407A1 (ru)
AU (1) AU2012325990B2 (ru)
CA (1) CA2852934C (ru)
ES (1) ES2660976T3 (ru)
HK (1) HK1201076A1 (ru)
HU (1) HUE037107T2 (ru)
IN (1) IN2014DN03017A (ru)
NO (1) NO2823060T3 (ru)
PL (1) PL2768984T3 (ru)
PT (1) PT2768984T (ru)
RU (2) RU2017128518A (ru)
UA (1) UA114301C2 (ru)
WO (1) WO2013059578A1 (ru)

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5176995A (en) 1985-03-28 1993-01-05 Hoffmann-La Roche Inc. Detection of viruses by amplification and hybridization
US4683202A (en) 1985-03-28 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying nucleic acid sequences
US4683195A (en) 1986-01-30 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying, detecting, and/or-cloning nucleic acid sequences
US4965188A (en) 1986-08-22 1990-10-23 Cetus Corporation Process for amplifying, detecting, and/or cloning nucleic acid sequences using a thermostable enzyme
AR006830A1 (es) * 1996-04-26 1999-09-29 Du Pont Aceite de soja con alta estabilidad oxidativa
DE60037735T2 (de) * 1999-08-26 2009-01-02 Calgene Llc, Davis Pflanzen mit veränderten mehrfachungesättigten fettsäuren
CA2284246A1 (en) * 1999-10-01 2001-04-01 Agriculture And Agrifood Canada Of Agriculture And Agri-Food Plant fatty acid desaturases and alleles therefor
DK1613725T3 (da) * 2003-02-11 2012-10-29 Dow Agrosciences Llc Ændrede FAD2- og FAD3-gener i brassica og påvisning heraf ved hjælp af molekylære markører
EP2136911A2 (en) * 2007-01-19 2009-12-30 Biodot, Inc. Systems and methods for high speed array printing and hybridization
CN101591697A (zh) * 2008-05-27 2009-12-02 北京华安佛医药研究中心有限公司 一种检测巯基嘌呤甲基转移酶基因a719g多态性位点基因型的试剂盒、方法和用途
WO2011060946A1 (en) 2009-11-20 2011-05-26 Bayer Bioscience N.V. Brassica plants comprising mutant fad3 alleles
EP2513319A4 (en) * 2009-12-17 2013-05-08 Univ Missouri PLANT GENES ASSOCIATED WITH SEED OIL CONTENT AND METHODS OF USE
US20110151441A1 (en) 2009-12-18 2011-06-23 Dow Agrosciences Llc Endpoint taqman methods for determining zygosity of corn comprising tc1507 events
CN101818196B (zh) * 2009-12-28 2012-02-08 华中农业大学 甘蓝型油菜低亚麻酸分子标记及其制备方法与应用
BR112013009001A2 (pt) * 2010-10-12 2016-07-05 Monsanto Technology Llc planta e semente de soja correspondendo a evento transgênico mon87712 e métodos para deteção das mesmas

Also Published As

Publication number Publication date
AR088407A1 (es) 2014-05-28
US20130102002A1 (en) 2013-04-25
CN104011225A (zh) 2014-08-27
PL2768984T3 (pl) 2018-07-31
CA2852934C (en) 2023-01-03
EP2768984A4 (en) 2015-07-01
US20170298451A1 (en) 2017-10-19
NO2823060T3 (ru) 2018-07-14
RU2630998C2 (ru) 2017-09-15
UA114301C2 (uk) 2017-05-25
US20200140962A1 (en) 2020-05-07
ES2660976T3 (es) 2018-03-26
IN2014DN03017A (ru) 2015-05-08
EP3342882A1 (en) 2018-07-04
EP2768984A1 (en) 2014-08-27
CA2852934A1 (en) 2013-04-25
AU2012325990B2 (en) 2018-04-19
AU2012325990A1 (en) 2014-04-24
WO2013059578A1 (en) 2013-04-25
HUE037107T2 (hu) 2018-08-28
HK1201076A1 (en) 2015-08-21
EP2768984B1 (en) 2018-01-10
PT2768984T (pt) 2018-04-17
JP2014530624A (ja) 2014-11-20
RU2017128518A (ru) 2019-02-04
US9663832B2 (en) 2017-05-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NZ598598A (en) Detection of aad-1 event das-40278-9
RU2012125961A (ru) Растения сои, устойчивой к гербицидам, и способы их идентификации
JP2013505020A5 (ru)
CN107488711B (zh) 点突变的基因型检测的方法及其试剂盒
RU2013113407A (ru) Способы улавливания и секвенирования нуклеиновых кислот
CN105779574B (zh) 抗稻瘟病基因Pi2的HRM检测方法及其应用
WO2015178978A2 (en) Strand exchange hairpin primers that give high allelic discrimination
CN103710432A (zh) 用于cyp2c9和vkorc1基因芯片检测的特异性引物对和探针
JP2015533281A (ja) 複数の異なる核酸標的配列を同時に増幅する方法
Narshimulu et al. Potentiality of evenly distributed hypervariable microsatellite markers in marker‐assisted breeding of rice
CN103525925A (zh) 用于cyp2c19基因芯片检测的特异性引物对和探针
RU2012126088A (ru) Детектирование aad-12-события 416 у сои
RU2012153685A (ru) Применение специфических маркеров гена коричневой средней жилки 3 (brown midrib-3) у кукурузы для интрогрессии признаков
CN112695114B (zh) 一种用于检测抗稻瘟病Pik基因的SNP分子标记及其应用
CN107488731B (zh) 水稻抗褐飞虱基因bph9基因内特异snp共显性分子标记引物及应用
KR20120005596A (ko) Multiplex real-time PCR 법을 이용한 병원성 Vibrio 종의 동시 탐지 방법
CA2845444C (en) Soybean markers linked to phytophthora resistance
Abdolmohammadi et al. High resolution melting as an alternative method to genotype diacylglycerol O-acyltransferase 1 (DGAT1) K232A polymorphism in cattle.
KR20090087488A (ko) 다수의 대립 유전자의 하플로타입의 결정방법
Braglia et al. Tubulin-based polymorphism (TBP) in plant genotyping
RU2014120420A (ru) Способ определения зиготности гена fad3 в каноле
Ostezan et al. Target region sequencing and applications in plants
WO2011092792A1 (ja) 特定カビ検出用マイクロアレイ、及び特定カビ検出用マイクロアレイの使用方法
Lee et al. Allele-specific polymerase chain reaction for the discrimination of elite Korean cattle associated with high beef quality and quantity
CN1678753A (zh) 监测引物延伸和多态性检测反应的方法和组合物

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20181020