RU2012120102A - Способ получения белков в pichia pastoris, у которых отсутствует поддающаяся обнаружению перекрестная связующая активность по отношению к антителам против антигенов клетки-хозяина - Google Patents
Способ получения белков в pichia pastoris, у которых отсутствует поддающаяся обнаружению перекрестная связующая активность по отношению к антителам против антигенов клетки-хозяина Download PDFInfo
- Publication number
- RU2012120102A RU2012120102A RU2012120102/10A RU2012120102A RU2012120102A RU 2012120102 A RU2012120102 A RU 2012120102A RU 2012120102/10 A RU2012120102/10 A RU 2012120102/10A RU 2012120102 A RU2012120102 A RU 2012120102A RU 2012120102 A RU2012120102 A RU 2012120102A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- activity
- host cell
- glycan
- mannosyl transferase
- antigens
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/475—Growth factors; Growth regulators
- C07K14/505—Erythropoietin [EPO]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/06—Antianaemics
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
- C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
- C07K14/4715—Pregnancy proteins, e.g. placenta proteins, alpha-feto-protein, pregnancy specific beta glycoprotein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
- C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
- C07K14/4721—Lipocortins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
- C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
- C07K14/4743—Insulin-like growth factor binding protein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/475—Growth factors; Growth regulators
- C07K14/485—Epidermal growth factor [EGF] (urogastrone)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- C07K14/521—Chemokines
- C07K14/523—Beta-chemokines, e.g. RANTES, I-309/TCA-3, MIP-1alpha, MIP-1beta/ACT-2/LD78/SCIF, MCP-1/MCAF, MCP-2, MCP-3, LDCF-1, LDCF-2
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- C07K14/53—Colony-stimulating factor [CSF]
- C07K14/535—Granulocyte CSF; Granulocyte-macrophage CSF
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- C07K14/54—Interleukins [IL]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- C07K14/555—Interferons [IFN]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/59—Follicle-stimulating hormone [FSH]; Chorionic gonadotropins, e.g. HCG; Luteinising hormone [LH]; Thyroid-stimulating hormone [TSH]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/605—Glucagons
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- C07K14/70546—Integrin superfamily
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- C07K14/70578—NGF-receptor/TNF-receptor superfamily, e.g. CD27, CD30, CD40, CD95
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- C07K14/715—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for cytokines; for lymphokines; for interferons
- C07K14/7151—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for cytokines; for lymphokines; for interferons for tumor necrosis factor [TNF], for lymphotoxin [LT]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/745—Blood coagulation or fibrinolysis factors
- C07K14/755—Factors VIII, e.g. factor VIII C (AHF), factor VIII Ag (VWF)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/81—Protease inhibitors
- C07K14/8107—Endopeptidase (E.C. 3.4.21-99) inhibitors
- C07K14/811—Serine protease (E.C. 3.4.21) inhibitors
- C07K14/8114—Kunitz type inhibitors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/81—Protease inhibitors
- C07K14/8107—Endopeptidase (E.C. 3.4.21-99) inhibitors
- C07K14/811—Serine protease (E.C. 3.4.21) inhibitors
- C07K14/8121—Serpins
- C07K14/8125—Alpha-1-antitrypsin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/81—Protease inhibitors
- C07K14/8107—Endopeptidase (E.C. 3.4.21-99) inhibitors
- C07K14/811—Serine protease (E.C. 3.4.21) inhibitors
- C07K14/8121—Serpins
- C07K14/8128—Antithrombin III
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/22—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against growth factors ; against growth regulators
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/80—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for fungi
- C12N15/81—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for fungi for yeasts
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/10—Transferases (2.)
- C12N9/1048—Glycosyltransferases (2.4)
- C12N9/1051—Hexosyltransferases (2.4.1)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
- C12P21/005—Glycopeptides, glycoproteins
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Hematology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Gynecology & Obstetrics (AREA)
- Pregnancy & Childbirth (AREA)
- Mycology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
Abstract
1. Способ получения рекомбинантного гликопротеина в, у которого отсутствует поддающаяся обнаружению перекрестная связующая активность с антителами, полученными против антигенов клетки-хозяина, который включает:(a) предоставление рекомбинантной клетки-хозяина, которая не проявляет активность β-маннозилтрансферазы 2 в отношениигликана илигликана и не проявляет по меньшей мере одну активность, выбранную из активности β-маннозилтрансферазы 1 и активности β-маннозилтрансферазы 3 в отношениигликана илигликана, и которая содержит молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую рекомбинантный гликопротеин;(b) выращивание клетки-хозяина в среде в условиях, эффективных для экспрессии рекомбинантного гликопротеина; и(c) извлечение рекомбинантного гликопротеина из среды с получением рекомбинантного гликопротеина, у которого отсутствует поддающаяся обнаружению перекрестная связующая активность с антителами, полученными против антигенов клетки-хозяина.2. Способ по п.1, где клетка-хозяин не проявляет активность β-маннозилтрансферазы 2, активность β-маннозилтрансферазы 1 и активность β-маннозилтрансферазы 3 в отношениигликана илигликана.3. Способ по п.1, где клетка-хозяин дополнительно не проявляет активность β-маннозилтрансферазы 4 в отношениигликана илигликана.4. Способ по п.1, где поддающуюся обнаружению перекрестную связующую активность с антителами, полученными против антигенов клетки-хозяина, определяют в сэндвич-ELISA.5. Способ по п.1, где поддающуюся обнаружению перекрестную связующую активность с антителами, полученными против антигенов клетки-хозяина, определяют в вестерн-блоттинге.6. Способ по п.1, где рекомбинантн
Claims (24)
1. Способ получения рекомбинантного гликопротеина в Pichia pastoris, у которого отсутствует поддающаяся обнаружению перекрестная связующая активность с антителами, полученными против антигенов клетки-хозяина, который включает:
(a) предоставление рекомбинантной клетки-хозяина Pichia pastoris, которая не проявляет активность β-маннозилтрансферазы 2 в отношении N-гликана или O-гликана и не проявляет по меньшей мере одну активность, выбранную из активности β-маннозилтрансферазы 1 и активности β-маннозилтрансферазы 3 в отношении N-гликана или O-гликана, и которая содержит молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую рекомбинантный гликопротеин;
(b) выращивание клетки-хозяина в среде в условиях, эффективных для экспрессии рекомбинантного гликопротеина; и
(c) извлечение рекомбинантного гликопротеина из среды с получением рекомбинантного гликопротеина, у которого отсутствует поддающаяся обнаружению перекрестная связующая активность с антителами, полученными против антигенов клетки-хозяина.
2. Способ по п.1, где клетка-хозяин не проявляет активность β-маннозилтрансферазы 2, активность β-маннозилтрансферазы 1 и активность β-маннозилтрансферазы 3 в отношении N-гликана или O-гликана.
3. Способ по п.1, где клетка-хозяин дополнительно не проявляет активность β-маннозилтрансферазы 4 в отношении N-гликана или O-гликана.
4. Способ по п.1, где поддающуюся обнаружению перекрестную связующую активность с антителами, полученными против антигенов клетки-хозяина, определяют в сэндвич-ELISA.
5. Способ по п.1, где поддающуюся обнаружению перекрестную связующую активность с антителами, полученными против антигенов клетки-хозяина, определяют в вестерн-блоттинге.
6. Способ по п.1, где рекомбинантный гликопротеин представляет собой терапевтический гликопротеин.
7. Способ по п.5, где терапевтический гликопротеин выбран из группы, состоящей из эритропоэтина (EPO); цитокинов, таких как интерферон α, интерферон β, интерферон γ и интерферон ω; и гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (GCSF); GM-CSF; факторов свертывания, таких как фактор VIII, фактор IX и белок C человека; антитромбина III; тромбина; α-цепи растворимого рецептора IgE; иммуноглобулинов, таких как IgG, фрагменты IgG, слитые IgG и IgM; белков иммуноадгезии и других Fc-слитых белков, таких как растворимые слитые белки рецептора TNF-Fc; слитых белков RAGE-Fc; интерлейкинов; урокиназы; химазы; и ингибитора трипсина мочи; IGF-связывающего белка; эпидермального фактора роста; рилизинг-фактора гормона роста; слитого белка аннексина V; ангиостатина; фактора роста эндотелия сосудов-2; ингибирующего миелоидные предшественники фактора 1; остеопротегерина: α-1-антитрипсина; α-фетопротеинов; ДНКазы II; крингла 3 плазминогена человека; глюкоцереброзидазы; связывающего TNF белка 1; фолликулостимулирующего гормона; ассоциированного с цитотоксическими T-лимфоцитами антигена 4 - Ig; трансмембранного активатора и модулятора кальция и лиганда циклофилина; глюкагоноподобного белка 1; и агониста рецептора IL-2.
8. Способ по п.1, где генетически конструируют клетку-хозяина для получения гликопротеинов, которые содержат человекоподобные N-гликаны.
9. Способ по п.1, где генетически конструируют клетку-хозяина для получения гликопротеинов, которые содержат преимущественно N-гликан, выбранный из Man5GlcNAc2, GlcNAcMan5GlcNAc2, GalGlcNAcMan5GlcNAc2, NANAGalGlcNAcMan5GlcNAc2, GlcNAcMan3GlcNAc2, GlcNAc(1-4)Man3GlcNAc2, Gal(1-4)GlcNAc(1-4)Man3GlcNAc2 и NANA(1-4)Gal(1-4)GlcNAc(1-4)Man3GlcNAc2.
10. Композиция, которая содержит один или более рекомбинантных гликопротеинов, полученных способом по п.1.
11. Способ получения зрелого эритропоэтина человека в Pichia pastoris, содержащего преимущественно заканчивающиеся сиаловой кислотой биантенарные N-гликаны и не обладающего поддающейся обнаружению перекрестной связующей активностью с антителами, полученными против антигенов клетки-хозяина, который включает:
(a) предоставление рекомбинантной клетки-хозяина Pichia pastoris, которая генетически сконструирована для получения заканчивающихся сиаловой кислотой биантенарных N-гликанов и которая не проявляет активность β-маннозилтрансферазы 2 в отношении N-гликана или O-гликана и не проявляет по меньшей мере одну активность, выбранную из активность β-маннозилтрансферазы 1 и активности β-маннозилтрансферазы 3, в отношении N-гликана или O-гликана и которая содержит две или более молекулы нуклеиновой кислоты, каждая из которых кодирует слитый белок, содержащий зрелый эритропоэтин человека, слитый с сигнальным пептидом, который нацелен на эндоплазматическую сеть и который удаляется, когда слитый белок находится в ЭР;
(b) выращивание клетки-хозяина в среде в условиях, эффективных для экспрессии и процессинга первого и второго слитых белков; и
(c) извлечение зрелого эритропоэтина человека из среды с получением зрелого эритропоэтина человека, содержащего преимущественно заканчивающиеся сиаловой кислотой биантенарные N-гликаны и не обладающего поддающейся обнаружению перекрестной связующей активностью с антителами, полученными против антигенов клетки-хозяина.
12. Способ по п.11, где клетка-хозяин дополнительно не проявляет активность β-маннозилтрансферазы 2, активность β-маннозилтрансферазы 1 и активность β-маннозилтрансферазы 3 в отношении N-гликана или O-гликана.
13. Способ по п.12, где клетка-хозяин дополнительно не проявляет активность β-маннозилтрансферазы 4 в отношении N-гликана или O-гликана.
14. Способ по п.11, где сигнальный пептид представляет собой сигнальный пептид αMATpre S. cerevisiae или сигнальный пептид лизоцима курицы.
15. Способ по п.11, где по меньшей мере одна молекула нуклеиновой кислоты кодирует слитый белок, где эритропоэтин слит с сигнальным пептидом αMATpre S. cerevisiae, и по меньшей мере одна молекула нуклеиновой кислоты кодирует слитый белок, где эритропоэтин слит с сигнальным пептидом αMATpre S. cerevisiae сигнальным пептидом лизоцима курицы.
16. Способ по п.11, где кодоны последовательности нуклеиновой кислоты молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующей эритропоэтин, оптимизируют для экспрессии в Pichia pastoris.
17. Способ по п.11, где поддающуюся обнаружению перекрестную связывающую активность с антителами, полученными против антигенов клетки-хозяина, определяют в сэндвич-ELISA.
18. Способ по п.11, где поддающуюся обнаружению перекрестную связывающую активность с антителами, полученными против антигенов клетки-хозяина, определяют в вестерн-блоттинге.
19. Способ по п.11, где извлечение зрелого эритропоэтина человека, содержащего преимущественно заканчивающиеся сиаловой кислотой биантенарные N-гликаны и не обладающего поддающейся обнаружению перекрестной связующей активностью с антителами, полученными против антигенов клетки-хозяина, из среды включает стадию катионообменной хроматографии.
20. Способ по п.11, где извлечение зрелого эритропоэтина человека, содержащего преимущественно заканчивающиеся сиаловой кислотой биантенарные N-гликаны и не обладающего поддающейся обнаружению перекрестной связующей активностью с антителами, полученными против антигенов клетки-хозяина, из среды включает стадию гидроксиапатитовой хроматографии.
21. Способ по п.11, где извлечение зрелого эритропоэтина человека, содержащего преимущественно заканчивающиеся сиаловой кислотой биантенарные N-гликаны и не обладающего поддающейся обнаружению перекрестной связующей активностью с антителами, полученными против антигенов клетки-хозяина, из среды включает стадию анионообменной хроматографии.
22. Композиция, которая содержит зрелый эритропоэтин человека, содержащий преимущественно заканчивающиеся сиаловой кислотой биантенарные N-гликаны и не обладающий поддающейся обнаружению перекрестной связующей активностью с антителами, полученными против антигенов клетки-хозяина, который получен способом по п.18, и фармацевтически приемлемую соль.
23. Композиция по п.22, где зрелый эритропоэтин человека, содержащий преимущественно заканчивающиеся сиаловой кислотой биантенарные N-гликаны и не обладающий поддающейся обнаружению перекрестной связующей активностью с антителами, полученными против антигенов клетки-хозяина, конъюгирован с гидрофильным полимером.
24. Композиция по п.23, где гидрофильный полимер представляет собой полимер полиэтиленгликоля.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US25231209P | 2009-10-16 | 2009-10-16 | |
US61/252,312 | 2009-10-16 | ||
PCT/US2010/052140 WO2011046855A1 (en) | 2009-10-16 | 2010-10-11 | Method for producing proteins in pichia pastoris that lack detectable cross binding activity to antibodies against host cell antigens |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2012120102A true RU2012120102A (ru) | 2013-12-10 |
Family
ID=43876456
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2012120102/10A RU2012120102A (ru) | 2009-10-16 | 2010-10-11 | Способ получения белков в pichia pastoris, у которых отсутствует поддающаяся обнаружению перекрестная связующая активность по отношению к антителам против антигенов клетки-хозяина |
Country Status (12)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US9139632B2 (ru) |
EP (1) | EP2488657B1 (ru) |
JP (1) | JP2013507921A (ru) |
KR (1) | KR20120084734A (ru) |
CN (2) | CN102648286A (ru) |
AU (1) | AU2010307098A1 (ru) |
BR (1) | BR112012008862A2 (ru) |
CA (1) | CA2776392A1 (ru) |
ES (1) | ES2589655T3 (ru) |
MX (1) | MX2012004381A (ru) |
RU (1) | RU2012120102A (ru) |
WO (1) | WO2011046855A1 (ru) |
Families Citing this family (18)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP2906587B9 (en) * | 2011-04-01 | 2021-01-06 | Genomatica, Inc. | Methods and compositions for improved production of fatty acids and derivatives thereof |
EP2800809B1 (en) | 2012-01-05 | 2018-03-07 | Glykos Finland Oy | Protease deficient filamentous fungal cells and methods of use thereof |
EP2852610B1 (en) | 2012-05-23 | 2018-07-11 | Glykos Finland Oy | Production of fucosylated glycoproteins |
EP2895199B1 (en) * | 2012-09-11 | 2019-08-21 | Centre for Bioseparation Technology-VIT | Methods for producing recombinant factor viii chains from non-filamentous fungi, their functional reconstitution and applications thereof |
CA2890048C (en) | 2012-12-03 | 2022-05-03 | Merck Sharp & Dohme Corp. | O-glycosylated carboxy terminal portion (ctp) peptide-based insulin and insulin analogues |
WO2014138188A1 (en) | 2013-03-07 | 2014-09-12 | The General Hospital Corporation | Human ctla4 mutants and use thereof |
KR102111078B1 (ko) | 2013-07-04 | 2020-05-18 | 노파르티스 아게 | O-만노실트랜스퍼라제 결핍 사상균 세포 및 이의 이용 방법 |
DK3019602T3 (en) | 2013-07-10 | 2018-11-12 | Glykos Finland Oy | MULTIPLE PROTEASE-DEFECTED FILAMENTARY FUNGAL CELLS AND PROCEDURES FOR USE THEREOF |
CA2954974A1 (en) | 2014-07-21 | 2016-01-28 | Glykos Finland Oy | Production of glycoproteins with mammalian-like n-glycans in filamentous fungi |
US10329323B2 (en) * | 2014-07-25 | 2019-06-25 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health & Human Services | Method for purifying antibodies using PBS |
CN104946675A (zh) * | 2015-07-02 | 2015-09-30 | 江苏敖众生物科技有限公司 | 一种鸡蛋清溶菌酶基因(rjm)的克隆及其酵母表达方法 |
CN106957362B (zh) * | 2016-01-12 | 2021-06-18 | 华北制药集团新药研究开发有限责任公司 | 一种毕赤酵母宿主蛋白抗体的制备方法及其应用 |
JP2021534763A (ja) * | 2018-08-21 | 2021-12-16 | クララ フーズ カンパニー | 微生物におけるタンパク質のグリコシル化の修飾 |
EP3927731A4 (en) | 2019-02-19 | 2022-12-28 | The Regents of the University of Colorado, a body corporate | BISPECIFIC IMMUNOTOXINS FOR TARGETING HUMAN CD25S-CCR4+ TUMORS AND REGULATORY T-CELLS |
CN110684771A (zh) * | 2019-10-30 | 2020-01-14 | 福建师范大学 | 一种不受甘油和葡萄糖抑制的可诱导启动子及利用该启动子构建的毕赤酵母表达载体 |
CN113549560B (zh) * | 2020-04-24 | 2024-02-13 | 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 | 一种用于糖蛋白制备的工程化酵母构建方法及其菌株 |
CN113754739A (zh) * | 2020-06-03 | 2021-12-07 | 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 | 一种冠状病毒s蛋白rbd糖蛋白的制备方法及其应用 |
CN113621041A (zh) * | 2021-09-26 | 2021-11-09 | 江南大学 | 一种截短的马铃薯糖蛋白Patatin及其制备方法 |
Family Cites Families (21)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US181041A (en) * | 1876-08-15 | Improvement in cultivators | ||
US4818700A (en) | 1985-10-25 | 1989-04-04 | Phillips Petroleum Company | Pichia pastoris argininosuccinate lyase gene and uses thereof |
AU2001256762A1 (en) | 2000-05-17 | 2001-11-26 | Mitsubishi Pharma Corporation | Process for producing protein with reduction of acidic sugar chain and glycoprotein produced thereby |
DE60139720D1 (de) | 2000-06-28 | 2009-10-08 | Glycofi Inc | Verfahren für die Herstellung modifizierter Glykoproteine |
US7449308B2 (en) | 2000-06-28 | 2008-11-11 | Glycofi, Inc. | Combinatorial DNA library for producing modified N-glycans in lower eukaryotes |
US8697394B2 (en) * | 2000-06-28 | 2014-04-15 | Glycofi, Inc. | Production of modified glycoproteins having multiple antennary structures |
US7863020B2 (en) | 2000-06-28 | 2011-01-04 | Glycofi, Inc. | Production of sialylated N-glycans in lower eukaryotes |
US20080124763A1 (en) | 2001-04-24 | 2008-05-29 | Erwin Sablon | Constructs and methods for expression of recombinant proteins in methylotrophic yeast cells |
CA2462842A1 (en) | 2001-10-04 | 2003-04-17 | Sapporo Breweries Limited | Method of selecting barley variety, barley .beta.-amylase gene and process for producing malt alcoholic beverage |
US7514253B2 (en) | 2003-05-16 | 2009-04-07 | Glycofi, Inc. | URA5 gene and methods for stable genetic integration in yeast |
US20080305992A1 (en) | 2003-11-24 | 2008-12-11 | Neose Technologies, Inc. | Glycopegylated erythropoietin |
WO2005065019A2 (en) | 2003-12-24 | 2005-07-21 | Glycofi, Inc. | Methods for eliminating mannosylphosphorylation of glycans in the production of glycoproteins |
US7479389B2 (en) | 2004-03-02 | 2009-01-20 | Glycofi, Inc. | ARG1, ARG2, ARG3, HIS1, HIS2, HIS5, HIS6 genes and methods for stable genetic integration |
AU2005238308B8 (en) * | 2004-04-29 | 2009-10-08 | Glycofi, Inc. | Methods for reducing or eliminating alpha-mannosidase resistant glycans in the production of glycoproteins |
DE102004027816A1 (de) * | 2004-06-08 | 2006-01-05 | Bioceuticals Arzneimittel Ag | Verfahren zur Reinigung von Erythropoietin |
US7004906B1 (en) | 2004-07-26 | 2006-02-28 | Siemens Medical Solutions Usa, Inc. | Contrast agent imaging with agent specific ultrasound detection |
AU2006316838B2 (en) | 2005-11-15 | 2012-04-12 | Glycofi, Inc | Production of glycoproteins with reduced O-glycosylation |
US20090181041A1 (en) | 2006-01-23 | 2009-07-16 | Jan Holgersson | Production of proteins carrying oligomannose or human-like glycans in yeast and methods of use thereof |
EP2027271A4 (en) | 2006-05-19 | 2010-06-09 | Glycofi Inc | RECOMBINANT VECTORS |
US7851438B2 (en) | 2006-05-19 | 2010-12-14 | GlycoFi, Incorporated | Erythropoietin compositions |
CA2705925C (en) | 2007-12-19 | 2019-03-12 | Glycofi, Inc. | Yeast strains for protein production |
-
2010
- 2010-10-11 JP JP2012534262A patent/JP2013507921A/ja active Pending
- 2010-10-11 MX MX2012004381A patent/MX2012004381A/es not_active Application Discontinuation
- 2010-10-11 CN CN2010800577907A patent/CN102648286A/zh active Pending
- 2010-10-11 CN CN201410094457.3A patent/CN104031961A/zh active Pending
- 2010-10-11 US US13/501,350 patent/US9139632B2/en active Active
- 2010-10-11 AU AU2010307098A patent/AU2010307098A1/en not_active Abandoned
- 2010-10-11 RU RU2012120102/10A patent/RU2012120102A/ru not_active Application Discontinuation
- 2010-10-11 BR BR112012008862A patent/BR112012008862A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2010-10-11 CA CA2776392A patent/CA2776392A1/en not_active Abandoned
- 2010-10-11 WO PCT/US2010/052140 patent/WO2011046855A1/en active Application Filing
- 2010-10-11 KR KR20127009494A patent/KR20120084734A/ko not_active Application Discontinuation
- 2010-10-11 EP EP10823888.2A patent/EP2488657B1/en active Active
- 2010-10-11 ES ES10823888.2T patent/ES2589655T3/es active Active
-
2014
- 2014-01-15 US US14/155,878 patent/US20140200180A1/en not_active Abandoned
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
MX2012004381A (es) | 2012-06-01 |
EP2488657A1 (en) | 2012-08-22 |
KR20120084734A (ko) | 2012-07-30 |
US20120232007A1 (en) | 2012-09-13 |
EP2488657A4 (en) | 2013-10-30 |
US9139632B2 (en) | 2015-09-22 |
EP2488657B1 (en) | 2016-07-06 |
BR112012008862A2 (pt) | 2019-09-24 |
ES2589655T3 (es) | 2016-11-15 |
CA2776392A1 (en) | 2011-04-21 |
AU2010307098A1 (en) | 2012-04-26 |
CN104031961A (zh) | 2014-09-10 |
CN102648286A (zh) | 2012-08-22 |
WO2011046855A1 (en) | 2011-04-21 |
JP2013507921A (ja) | 2013-03-07 |
US20140200180A1 (en) | 2014-07-17 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2012120102A (ru) | Способ получения белков в pichia pastoris, у которых отсутствует поддающаяся обнаружению перекрестная связующая активность по отношению к антителам против антигенов клетки-хозяина | |
WO2020228390A1 (zh) | 一种酵母发酵小分子重组纤连蛋白肽及其制备方法和应用 | |
US10808019B2 (en) | Nucleic acid molecules encoding cytokine fusion proteins comprising tumor necrosis factor (TNF) superfamily ligands | |
CN105517578B (zh) | 具有降低的受体介导的清除率的生物活性多肽单体-免疫球蛋白Fc片段缀合物以及制备其的方法 | |
KR100496356B1 (ko) | 포유동물세포배양으로생산되는단백질의시알릴화조절방법 | |
JP2010505874A5 (ru) | ||
CA2462930A1 (en) | Remodeling and glycoconjugation of peptides | |
HRP20150307T1 (hr) | Upotreba ljudskih stanica podrijetlom iz ljudske leukemije za eksprimiranje protutijela | |
CN102164949A (zh) | 新型重组融合蛋白 | |
CA2359840A1 (en) | Glycosylated leptin compositions and related methods | |
US20090105455A1 (en) | Purified interleukin-15/fc fusion protein and preparation thereof | |
IE63487B1 (en) | Lymphotoxin, nucleic acid encoding it, vectors incorporating the nucleic acid and cells transformed therewith, methods of obtaining lymphotoxin, and lymphotoxin neutralizing antibody | |
CN107261124B (zh) | 一种新生血管生成抑制肽及其透明质酸修饰物的制备方法与应用 | |
WO2012094321A4 (en) | Personalized production of biologics and method for reprogramming somatic cells | |
US20220306684A1 (en) | Use of cation-exchange chromatography in the flow-through mode to enrich post-translational modifications | |
TWI628279B (zh) | 重組酵母菌轉形株及使用該轉形株製備免疫球蛋白fc片段之方法 | |
KR101955366B1 (ko) | 인터페론 베타-엘라스틴 재조합 단백질 및 이의 생산방법 | |
AU746411B2 (en) | Preparation of glycosylated tumor necrosis factor | |
US20070264710A1 (en) | Process for Purifying Human Thrombopoietin with High Content of Sialic Acid | |
EP3705492A1 (en) | Method for preparing, in high yield, conjugate in which colony stimulating factor and polyol are conjugated | |
Jenkins et al. | Changes in the Glycosylation of Interferon-γ during Culture | |
IL275602A (en) | IL-22 polypeptides and IL-22 FC fused proteins and methods of use | |
CN116621989A (zh) | 一种多聚化结构单体及其用途 | |
JENKINS et al. | CHANGES IN THE GLYCOSYLATION OF INTERFERON-Y DURING CULTURE | |
CN116574193A (zh) | 一种可抑制肿瘤坏死因子的简化巨球蛋白及合成方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
FA92 | Acknowledgement of application withdrawn (lack of supplementary materials submitted) |
Effective date: 20140515 |