RU2012119266A - Иммунохимическое определение одиночных мишеней - Google Patents

Иммунохимическое определение одиночных мишеней Download PDF

Info

Publication number
RU2012119266A
RU2012119266A RU2012119266/15A RU2012119266A RU2012119266A RU 2012119266 A RU2012119266 A RU 2012119266A RU 2012119266/15 A RU2012119266/15 A RU 2012119266/15A RU 2012119266 A RU2012119266 A RU 2012119266A RU 2012119266 A RU2012119266 A RU 2012119266A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
target
substrate
sample
enzyme
molecules
Prior art date
Application number
RU2012119266/15A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2566714C2 (ru
Inventor
Еспер ЛОХСЕ
Original Assignee
Дако Денмарк А/С
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Дако Денмарк А/С filed Critical Дако Денмарк А/С
Publication of RU2012119266A publication Critical patent/RU2012119266A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2566714C2 publication Critical patent/RU2566714C2/ru

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/58—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances
    • G01N33/581—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances with enzyme label (including co-enzymes, co-factors, enzyme inhibitors or substrates)
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G01N33/54306—Solid-phase reaction mechanisms

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)

Abstract

1. Способ визуализации одиночной отдельной единицы мишени в образце, где указанная мишень иммобилизирована, включающийа) инкубацию образца, содержащего популяцию отдельных единиц мишени с одним или более чем одним связывающим агентом, где(1) по меньшей мере один из связывающих агентов содержит фермент;(2) по меньшей мере один из связывающих агентов способен непосредственно связываться с отдельной одиночной единицей мишени,и формирование одного или более чем одного дискретного одиночного сайта-мишени с фракционной субпопуляцией отдельных одиночных единиц мишени, где каждый одиночный дискретный сайт-мишень представляет собой комплекс из одной отдельной одиночной единицы указанной фракционной субпопуляции и одного или более чем одного связывающего агента, по меньшей мере один из которых содержит фермент;в) инкубацию образца (а) в водном растворе (i), содержащемпероксидное соединение в количестве, которое составляет менее 2 мМ,первый субстрат фермента, связанный с дискретными одиночными сайтами-мишенями (а), ивторой субстрат указанного фермента,где указанный первый субстрат является водорастворимым богатым электронами соединением, которое(3) способно образовывать радикалы в реакции с указанным ферментом, и(4) способно сшивать молекулы указанного второго субстрата в присутствии указанного фермента и пероксидного соединения, образуя нерастворимый в воде полимерный продукт указанного второго субстрата,и где указанный второй субстрат представляет собой конъюгированную молекулу, содержащую по меньшей мере два соединения, которые способны выступать в качестве субстратов указанных ферментов, и определяему

Claims (64)

1. Способ визуализации одиночной отдельной единицы мишени в образце, где указанная мишень иммобилизирована, включающий
а) инкубацию образца, содержащего популяцию отдельных единиц мишени с одним или более чем одним связывающим агентом, где
(1) по меньшей мере один из связывающих агентов содержит фермент;
(2) по меньшей мере один из связывающих агентов способен непосредственно связываться с отдельной одиночной единицей мишени,
и формирование одного или более чем одного дискретного одиночного сайта-мишени с фракционной субпопуляцией отдельных одиночных единиц мишени, где каждый одиночный дискретный сайт-мишень представляет собой комплекс из одной отдельной одиночной единицы указанной фракционной субпопуляции и одного или более чем одного связывающего агента, по меньшей мере один из которых содержит фермент;
в) инкубацию образца (а) в водном растворе (i), содержащем
пероксидное соединение в количестве, которое составляет менее 2 мМ,
первый субстрат фермента, связанный с дискретными одиночными сайтами-мишенями (а), и
второй субстрат указанного фермента,
где указанный первый субстрат является водорастворимым богатым электронами соединением, которое
(3) способно образовывать радикалы в реакции с указанным ферментом, и
(4) способно сшивать молекулы указанного второго субстрата в присутствии указанного фермента и пероксидного соединения, образуя нерастворимый в воде полимерный продукт указанного второго субстрата,
и где указанный второй субстрат представляет собой конъюгированную молекулу, содержащую по меньшей мере два соединения, которые способны выступать в качестве субстратов указанных ферментов, и определяемую метку, где определяемая метка выбрана из группы, состоящей из флуоресцентных, люминесцентных, радиоактивных или хромогенных веществ или членов пар специфического связывания,
с образованием, таким образом, дискретных депозитов второго субстрата на дискретных одиночных сайтах-мишенях (а) и визуализацией указанных одиночных сайтов-мишеней (а).
2. Способ по п.1, где один или более чем один связывающий агент является членом пары специфического связывания.
3. Способ по п.1, где сайты-мишени создаются с меньшинством одиночных отдельных единиц мишени, присутствующих в образце.
4. Способ по п.1, где сайты-мишени создаются с большинством одиночных отдельных единиц мишени, присутствующих в образце.
5. Способ по п.1, где фермент является ферментом с оксидоредуктазной активностью.
6. Способ по п.5, где фермент обладает пероксидазной или фенолоксидазной активностью.
7. Способ по п.6, где фермент является пероксидазой хрена, пероксидазой сои или лакказой или функциональным аналогом указанных ферментов.
8. Способ по п.1, где первый субстрат фермента с оксидоредуктазной активностью является соединением, которое содержит структуру формулы (I):
Figure 00000001
,
где
R1 представляет собой арил или винил,
R2, R3 и R4 независимо представляют собой H, N-(X)2, O-(X)2, где X представляет собой алкил, винил, арил или H, и где R2, R3 и R4 не одновременно представляют собой H,
где
H представляет собой водород;
O представляет собой кислород.
9. Способ по п.1, где соединение является 3,3'-диаминобензидином или его производным.
10. Способ по п.1, где соединение является феруловой кислотой или ее производным.
11. Способ по п.9, где количество 3,3'-диаминобензидина или его производного составляет менее 1 мМ.
12. Способ по п.1, где конъюгированная молекула содержит по меньшей мере одно соединение в качестве субстрата фермента с оксидоредуктазной активностью, которое определяется формулой (II):
Figure 00000002
,
где
R1 представляет собой -H, -O-X, N(X)2 или-S-X;
R2 представляет собой -H, -O-X, -N(X)2 или -S-X;
R3 представляет собой -H, -OH, -NH2 или-SH;
R4 представляет собой -H, -O-X, -N(X)2 или -S-X;
R5 представляет собой -H, -O-X, N(X)2 или-S-X;
R6 представляет собой -CON(X)2 или СО-Х,
где
H представляет собой водород;
O представляет собой кислород;
S представляет собой серу;
N представляет собой азот;
X представляет собой Н, алкил или арил.
13. Способ по п.12, где по меньшей мере два соединения определяются формулой (II).
14. Способ по п.13, где по меньшей мере два соединения, определяемые формулой (II), являются одинаковыми соединениями.
15. Способ по п.13, где по меньшей мере два соединения, определяемые формулой (II), являются различными соединениями.
16. Способ по п.12, где соединения выбраны из группы, состоящей из коричной кислоты, феруловой кислоты, кофейной кислоты, аминокоричной кислоты или синапиновой кислоты или их производных.
17. Способ по п.1, где конъюгат содержит по меньшей мере один остаток тирозина в качестве субстрата фермента.
18. Способ по п.1, где конъюгаты каждого из по меньшей мере двух соединений, способных выступать в качестве субстратов фермента, связанных с отдельными сайтами-мишенями, отделены друг от друга в конъюгированной молекуле 30 или менее чем 30 последовательно связанными атомами, а определяемая метка отделена от любого из указанных субстратов 30 или более чем 30 последовательно связанными атомами.
19. Способ по п.18, где по меньшей мере 30 последовательно связанных атомов, отделяющих в конъюгированной молекуле метку от любого субстрата фермента с оксидоредуктазной активностью, включают от 2 до 10 повторов следующей формулы (III)
Figure 00000003
,
где R1 и R2 выбраны среди NH и O, a R3 выбран среди метила, этила, пропила, CH2OCH2 и (CH2OCH2)2, и где имеется не более трех последовательно повторяющихся этилокси-групп.
20. Способ по п.1, где второй субстрат представляет собой популяцию одинаковых конъюгированных молекул или популяцию различных конъюгированных молекул, где конъюгированные молекулы являются такими, как указано в любом из пп.12-19.
21. Способ по п.1, где способ включает этап (б'), который предшествует этапу (б), где образец инкубировали в водном растворе (ii), который представляет собой водный раствор (i), не содержащий второй субстрат.
22. Способ по п.1, который включает по меньшей мере один этап промывания.
23. Способ по п.1, также включающий этап (в), в котором определяются одиночные сайты-мишени (б).
24. Способ по п.23, где этап (в) включает следующие подэтапы:
в') инкубацию образца (б), содержащего дискретные депозиты второго субстрата на дискретных одиночных сайтах-мишенях (а), со связывающим агентом, способным специфически связываться с определяемой меткой депонированного второго субстрата и формирование комплекса, содержащего одну или более чем одну молекулу депонированного второго субстрата и одну или более чем одну молекулу указанного связывающего агента,
(в'') определение в образце (в') связывающего агента, связанного с дискретными депозитами второго субстрата, тем самым определение одиночных сайтов-мишеней и тем самым определение одиночной единицы мишени, связанной с указанным одиночным сайтом-мишенью.
25. Способ по п.24, где связывающий агент включает фермент.
26. Способ по п.24, где связывающий агент содержит определяемую метку, выбранную среди хромогенных, флуоресцентных, люминесцентных или радиоактивных веществ или членов пары специфического связывания.
27. Способ по п.1, где одиночный дискретный депозит второго субстрата на одиночном сайте-мишени имеет округлую форму и определяется в двумерном поле как визуально различимая точка.
28. Способ по п.27, где отдельная точка является точкой с диаметром, который составляет примерно 0,4 мкм или более.
29. Способ по п.1, где мишень является выбранной биологической или химической молекулой-мишенью, частицей, молекулярным или клеточным комплексом, молекулярной или клеточной структурой, вирусом или микроорганизмом, либо фрагментом указанной молекулы-мишени, частицы, комплекса, структуры, вируса или микроорганизма.
30. Способ по п.29, где мишенью является биологический маркер.
31. Способ по п.1, где отдельная единица мишени выбрана среди отдельной одиночной биологической или химической молекулы, отдельной одиночной частицы, отдельного одиночного молекулярного или клеточного комплекса, отдельной одиночной молекулярной или клеточной структуры, или отдельного одиночного вируса или микроорганизма, или отдельных одиночных фрагментов указанной молекулы, частицы, комплекса, структуры, вируса или микроорганизма.
32. Способ по п.1, где образец представляет собой биологический, химический или экологический образец.
33. Способ по п.1, где образец представляет собой гистологический образец.
34. Способ по п.29, где мишень представляет собой белок или нуклеиновую кислоту или их фрагмент или производное.
35. Способ по п.34, где белок представляет собой клеточный мембранный рецептор или цитоплазматический белок или цитоплазматическую нуклеиновую кислоту.
36. Способ по п.1, включающий один или более чем один этап после любого из определенных этапов.
37. Способ по п.1, в котором по меньшей мере один из этапов автоматизирован, или который дополнительно включает по меньшей мере один автоматизированный этап.
38. Способ определения отдельных одиночных единиц иммобилизированной мишени в образце, где мишень присутствует в образце в широком динамическом диапазоне концентраций, включающий
а) инкубацию образца с одним или более чем одним связывающим агентом, где
(1) по меньшей мере один из связывающих агентов включает фермент;
(2) по меньшей мере один из связывающих агентов способен непосредственно связываться с отдельной одиночной единицей указанной мишени,
и формирование одного или более чем одного дискретного первого сайта-мишени с первой фракционной субпопуляцией отдельных одиночных единиц мишени, где каждый одиночный дискретный первый сайт-мишень содержит комплекс из одной отдельной одиночной единицы указанной первой фракционной субпопуляции отдельных одиночных единиц и одного или более чем одного связывающего агента, по меньшей мере один из которых содержит фермент с оксидоредуктазной активностью;
б) инкубацию образца (а) с первым субстратом фермента, связанным с первыми сайтами-мишенями (а), первой популяцией молекул второго субстрата указанного фермента и пероксидным соединением в соответствии с этапом (б) п.1, с образованием, таким образом, дискретных депозитов молекул второго субстрата первой популяции на первых сайтах-мишенях (а);
в) инкубацию образца (б) с раствором перекиси водорода в количестве, достаточном для гашения остаточной активности, связанной с первыми одиночными сайтами-мишенями (а);
г) инкубацию образца (в) с одним или более чем одним связывающим агентом, где
(1) по меньшей мере один из связывающих агентов содержит фермент;
(2) по меньшей мере один из связывающих агентов способен непосредственно связываться с отдельной единицей указанной мишени,
с образованием, таким образом, одного или более чем одного дискретного второго сайта-мишени со второй фракционной субпопуляцией отдельных одиночных единиц мишени, где каждый одиночный дискретный второй сайт-мишень содержит комплекс из одной отдельной единицы указанной второй фракционной субпопуляции отдельных одиночных единиц и одного или более чем одного связывающего агента, по меньшей мере один из которых содержит фермент;
д) инкубацию образца (г) с первым субстратом фермента, связанным со вторыми одиночными сайтами-мишенями, второй популяцией молекул второго субстрата указанного фермента и пероксидным соединением в соответствии с этапом (б) п.1, с формированием, таким образом, дискретных депозитов молекул второго субстрата второй популяции на вторых сайтах-мишенях (г);
е) определение в образце дискретных депозитов молекул второго субстрата первой популяции на первых сайтах-мишенях как первых визуально различимых точек и определение, таким образом, одной или более чем одной отдельной одиночной единицы первой популяции мишени;
ж) определение в образце дискретных депозитов молекул второго субстрата второй популяции на вторых сайтах-мишенях как вторых визуально различимых точек и определение, таким образом, одной или более чем одной отдельной одиночной единицы второй популяции мишени.
39. Способ по п.38, где связывающие агенты этапа (а) и этапа (г) являются одним и тем же связывающим агентом.
40. Способ по п.38, где связывающие агенты (а) и (г) являются различными связывающими агентами.
41. Способ по п.38, где молекулы второго субстрата первой популяции и молекулы второго субстрата второй популяции являются различными конъюгированными молекулами.
42. Способ по п.38, где молекулы второго субстрата выбраны среди соединений, определенных в любом из пп.12-19, а молекулы первого субстрата выбраны среди соединений, определенных в любом из пп.8-10.
43. Способ по 38, который включает по меньшей мере один дополнительный этап.
44. Способ по п.38, где образцом является гистологический образец.
45. Способ по п.38, включающий один или более чем один этап после любого из определенных этапов.
46. Способ по п.38, в котором по меньшей мере один из этапов автоматизирован, или который дополнительно включает по меньшей мере один автоматизированный этап.
47. Способ визуализации и определения отдельных одиночных единиц по меньшей мере двух различных иммобилизированным мишеней, присутствующих в образце, включающий
а) инкубацию образца с одним или более чем одним связывающим агентом, способным связывать первую мишень, где
(1) по меньшей мере один из связывающих агентов содержит фермент;
(2) по меньшей мере один из связывающих агентов способен непосредственно связываться с отдельной одиночной единицей первой мишени,
с образованием, таким образом, одного или более чем одного дискретного первого одиночного сайта-мишени с отдельными одиночными единицами первой мишени, где каждый одиночный дискретный первый сайт-мишень содержит комплекс одной отдельной одиночной единицы первой мишени и одного или более чем одного связывающего агента, по меньшей мере один из которых содержит фермент;
б) инкубацию образца (а) с первым субстратом фермента, связанным с первыми одиночными сайтами-мишенями, первой популяцией молекул второго субстрата указанного фермента и пероксидным соединением в соответствии с этапом (б) п.1, с образованием, таким образом, дискретных депозитов молекул второго субстрата первой популяции на первых одиночных сайтах-мишенях (а);
в) инкубацию образца (б) с раствором перекиси водорода в количестве, достаточном для гашения остаточной активности фермента, связанной с первыми одиночными сайтами связывания (а);
г) инкубацию образца (в) с одним или более чем одним связывающим агентом, способным связываться со второй мишенью, где
(1) по меньшей мере один из связывающих агентов содержит фермент;
(2) по меньшей мере один из связывающих агентов способен непосредственно связываться с отдельной единицей второй мишени,
с образованием одного или более чем одного дискретного второго одиночного сайта-мишени с отдельными одиночными единицами второй мишени, где каждый одиночный дискретный второй сайт-мишень содержит комплекс одной отдельной единицы второй мишени и одного или более чем одного связывающего агента, по меньшей мере один из которых содержит фермент;
д) инкубацию образца (г) с первым субстратом, связанным со вторыми отдельными сайтами связывания, второй популяцией молекул второго субстрата фермента с оксидоредуктазной активностью и пероксидным соединением в соответствии с этапом (б) п.1, с образованием, таким образом, дискретных депозитов молекул второго субстрата второй популяции на вторых сайтах-мишенях (г);
е) определение в образце дискретных депозитов молекул второго субстрата первой популяции на первых сайтах-мишенях в качестве первых визуально различимых точек, таким образом, определение одной или более чем одной отдельной единицы первой мишени;
ж) определение в образце дискретных депозитов молекул второго субстрата второй популяции на вторых сайтах-мишенях в качестве вторых визуально различимых точек и, таким образом, определение одной или более чем одной отдельной одиночной единицы второй мишени.
48. Способ по п.47, где по меньшей мере две мишени являются различными биологическими молекулами.
49. Способ по п.47, где по меньшей мере две мишени являются различными нуклеиновокислотными последовательностями или различными белками.
50. Способ по п.47, где по меньшей мере одна из мишеней является нуклеиновой кислотой, и по меньшей мере одна другая является белком.
51. Способ по п.47, где молекулы второго субстрата первой популяции и второго субстрата второй популяции являются различными молекулами второго субстрата.
52. Способ по п.47, где молекулы второго субстрата выбраны среди соединений, определенных в любом из пп.12-19, а молекулы первого субстрата выбраны среди соединений, определенных в любом из пп.8-10.
53. Способ по п.47, который включает по меньшей мере один дополнительный этап.
54. Способ по п.47, где образцом является гистологический образец.
55. Способ по п.47, включающий один или более чем один этап, предшествующий любому из определенных этапов.
56. Способ по п.47, включающий один или более чем один этап после любого из определенных этапов.
57. Способ по п.47, в котором по меньшей мере один из этапов автоматизирован, или который дополнительно включает по меньшей мере один автоматизированный этап.
58. Способ количественной оценки иммобилизированной мишени в образце, включающй
г) обработку образца в соответствии со способом по любому из предыдущих пп.;
е) подсчет визуально различимых точек в образце; и
е) количественную оценку мишени в образце.
59. Способ по п.58, где отдельные точки подсчитывают вручную или автоматически.
60. Способ по п.58 или 59, в котором количество мишени оценивается относительным образом как количество мишени на референсный маркер, объем образца или площадь образца.
61. Способ диагностики заболевания у пациента, включающий этап обработки биологического образца, полученного от пациента, в соответствии со способом по любому из пп.1-60.
62. Способ оценки эффективности терапевтического лечения у пациентов, включающий этап обработки биологического образца, полученного от пациента, в соответствии со способом по любому из пп.1-60.
63. Способ прогнозирования риска развития заболевания у пациента или прогнозирования вероятности восстановления или ухудшения заболевания, включающий этап обработки и анализа биологического образца, полученного от пациента, в соответствии с любым из способов пп.1-60.
64. Анализ, включающий этап определения одиночных единиц мишени в соответствии со способом по любому из пп.1-60.
RU2012119266/15A 2009-10-20 2010-10-15 Иммунохимическое определение одиночных мишеней RU2566714C2 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US25311609P 2009-10-20 2009-10-20
US61/253,116 2009-10-20
PCT/DK2010/000137 WO2011047680A1 (en) 2009-10-20 2010-10-15 Immunochemical detection of single target entities

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2012119266A true RU2012119266A (ru) 2013-11-27
RU2566714C2 RU2566714C2 (ru) 2015-10-27

Family

ID=43413892

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2012119266/15A RU2566714C2 (ru) 2009-10-20 2010-10-15 Иммунохимическое определение одиночных мишеней

Country Status (8)

Country Link
US (1) US9091691B2 (ru)
EP (1) EP2491390B1 (ru)
JP (1) JP5836958B2 (ru)
CN (2) CN102713626B (ru)
BR (1) BR112012009492A2 (ru)
CA (1) CA2777411C (ru)
RU (1) RU2566714C2 (ru)
WO (1) WO2011047680A1 (ru)

Families Citing this family (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2201058B1 (en) * 2007-09-18 2017-04-12 Dako Denmark A/S A rapid and sensitive method for detection of biological targets
US10180426B2 (en) 2010-11-08 2019-01-15 Dako Denmark A/S Quantification of single target molecules in histological samples
EP2646795B1 (en) * 2010-11-29 2019-02-20 Dako Denmark A/S Methods for analyzing images of specimens processed by a programmable quantitative assay
EP2649446B1 (en) * 2010-12-06 2016-02-24 Dako Denmark A/S Combined histological stain
EP2699691B1 (en) * 2011-04-19 2017-10-18 Dako Denmark A/S New method for enzyme-mediated signal amplification
EP2788757B1 (en) * 2011-11-08 2016-12-21 Dako Denmark A/S New method for evaluation of target in histological sample
ES2678211T3 (es) 2012-03-27 2018-08-09 Ventana Medical Systems, Inc. Conjugados de señalización y procedimientos de uso
EP2904374B1 (en) * 2012-10-08 2023-11-29 Ventana Medical Systems, Inc. Methods and kits for clarifying pigmented samples
CN103134852A (zh) * 2013-02-04 2013-06-05 复旦大学 一种核酸适配体靶上富集和激光酶解检测蛋白质的方法
WO2015184144A1 (en) * 2014-05-28 2015-12-03 Siemens Healthcare Diagnostics Inc. Rare molecule signal amplification
CA3008353A1 (en) 2015-12-18 2017-06-22 Dako Denmark A/S Chromogenic peroxidase substrates
AU2019280824A1 (en) * 2018-06-08 2020-11-26 Ultivue, Inc. Multiplexed catalyzed reporter deposition
CN110736736B (zh) * 2018-07-18 2022-10-14 上海索昕生物科技有限公司 一种均相化学发光poct检测方法及利用该检测方法的装置
CN109507004B (zh) * 2018-11-21 2021-11-02 杭州海世嘉生物科技有限公司 一种自然沉降细胞制片染色工作站控制方法及系统
US11237170B2 (en) 2018-12-04 2022-02-01 Aat Bioquest, Inc. Styryl phenols, derivatives and their use in methods of analyte detection
EP4031658A1 (en) * 2019-08-07 2022-07-27 DB Biotech, AS Improved horseradish peroxidase polypeptides
CN117405878B (zh) * 2023-10-12 2024-06-11 上海领检科技有限公司 一种二氧化硅微球复合物及其制备方法和用途

Family Cites Families (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2546991B2 (ja) * 1986-06-26 1996-10-23 コニカ株式会社 パ−オキシダ−ゼ酵素反応を用いた特定成分の測定方法
DE3856559T2 (de) 1987-05-21 2004-04-29 Micromet Ag Multifunktionelle Proteine mit vorbestimmter Zielsetzung
ATE151110T1 (de) 1988-09-02 1997-04-15 Protein Eng Corp Herstellung und auswahl von rekombinantproteinen mit verschiedenen bindestellen
ES2052027T5 (es) 1988-11-11 2005-04-16 Medical Research Council Clonacion de secuencias de dominio variable de inmunoglobulina.
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
US5196306A (en) 1989-03-29 1993-03-23 E. I. Du Pont De Nemours And Company Method for the detection or quantitation of an analyte using an analyte dependent enzyme activation system
US5401847A (en) 1990-03-14 1995-03-28 Regents Of The University Of California DNA complexes with dyes designed for energy transfer as fluorescent markers
GB9015198D0 (en) 1990-07-10 1990-08-29 Brien Caroline J O Binding substance
US5804404A (en) * 1996-01-22 1998-09-08 Dako Corporation Stable substrate-chromogen solutions for enenzyme activity detection
US5688966A (en) 1996-07-26 1997-11-18 E. I. Du Pont De Nemours And Company Compounds and method for synthesizing sulfoindocyanine dyes
US5863748A (en) 1997-03-14 1999-01-26 New Life Science Products, Inc. p-Hydroxycinnamoyl-containing substrates for an analyte dependent enzyme activation system
EP0919811A1 (en) * 1997-12-01 1999-06-02 Universiteit Maastricht Immunoassay method and kit
US6372937B1 (en) 1998-11-09 2002-04-16 Mark Norman Bobrow Enhanced catalyzed reporter deposition
US6767716B2 (en) * 2000-06-17 2004-07-27 Brij P. Giri Chemluminescent systems containing unsaturated 1,2-dioxetanes
US20030180814A1 (en) * 2002-03-21 2003-09-25 Alastair Hodges Direct immunosensor assay
CN1595150A (zh) * 2003-09-10 2005-03-16 上海长岛生物技术有限公司 一种稳定的新型即用型底物－dab显色液
JP4292297B2 (ja) * 2004-08-11 2009-07-08 国立大学法人 鹿児島大学 免疫組織化学的染色による抗原の検出方法
DE602006020577D1 (de) 2005-07-01 2011-04-21 Dako Denmark As Monomere und polymere linker zur konjugierung von biologischen molekülen und anderen stoffen
CA2687178C (en) 2007-05-23 2014-02-04 Ventana Medical Systems, Inc. Polymeric carriers for immunohistochemistry and in situ hybridization
EP2201058B1 (en) * 2007-09-18 2017-04-12 Dako Denmark A/S A rapid and sensitive method for detection of biological targets
CN102325895B (zh) * 2009-02-19 2015-09-23 丹麦达科有限公司 缀合物分子

Also Published As

Publication number Publication date
CN104714007B (zh) 2017-04-12
CN104714007A (zh) 2015-06-17
CN102713626A (zh) 2012-10-03
BR112012009492A2 (pt) 2017-06-13
CA2777411A1 (en) 2011-04-28
US20120270242A1 (en) 2012-10-25
JP2013508691A (ja) 2013-03-07
WO2011047680A1 (en) 2011-04-28
CN102713626B (zh) 2015-03-04
RU2566714C2 (ru) 2015-10-27
EP2491390B1 (en) 2014-03-26
EP2491390A1 (en) 2012-08-29
JP5836958B2 (ja) 2015-12-24
US9091691B2 (en) 2015-07-28
CA2777411C (en) 2018-06-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2012119266A (ru) Иммунохимическое определение одиночных мишеней
US11753673B2 (en) Methods, compositions, and kits for blocking a capture probe on a spatial array
US10550422B2 (en) Methods and compositions for labeling nucleic acids
WO2022060798A1 (en) Methods of releasing an extended capture probe from a substrate and uses of the same
JP2013508691A5 (ru)
US20120164632A1 (en) Quantitation of cellular dna and cell numbers using element labeling
CN105136882B (zh) 基于dna模拟酶诱导苯胺聚合的电化学检测dna甲基转移酶活性的检测方法
Gilbride Molecular methods for the detection of waterborne pathogens
Liu et al. Recognition and selectivity analysis monitoring of multicomponent steroid estrogen mixtures in complex systems using a group-targeting environmental sensor
CN113340863B (zh) 一种无酶循环放大核酸适配体传感器及其制备方法和应用
US20190259469A1 (en) Method for Evaluating Genotoxicity of Substance
Rana et al. Signal amplification for imaging mass cytometry
Gamboa da Costa et al. Quantification of tamoxifen DNA adducts using on-line sample preparation and HPLC-electrospray ionization tandem mass spectrometry
US20220298562A1 (en) Methods and systems for sensitive and multiplexed analysis of biological samples using high-performance cleavable, detectably-labeled tyramide
Otteneder et al. Reaction of Malondialdehyde− DNA Adducts with Hydrazines Development of a Facile Assay for Quantification of Malondialdehyde Equivalents in DNA
Ibanez et al. DNA detection using a triple readout optical/AFM/MALDI planar microwell plastic chip
CN110161093A (zh) 一种检测组蛋白乙酰转移酶活性的光电化学生物传感器及其制备方法
Killinger et al. Chemoproteomic analyses by activity‐based protein profiling
EP0933380B1 (en) Method of searching for physiologically active substances and process for producing the same
KR101186699B1 (ko) 휘발성 유기화합물에 대한 위해성 평가용 바이오마커 및 이의 용도
Degens A novel approach for assessing the pattern of catabolic potential of soil microbial communities
Pham Highly Sensitive and Multiplexed Single Cell In-situ Protein Imaging with Cleavable Fluorescent Probes
Ollodart Methods in Continuous Culture: Mutation Accumulation, Evolution, and Aging
Scarborough Solid phase synthesis of ferrocene-biotin bioconjugates and reactivity with avidin. A paradigm for development of electrochemical biosensors
Ibáñez Development of a polymeric planar microwell device (pMALDI chip) for enhancing protein analysis in combination with MALDI-TOF, MS instrumentation

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20201016