RU2010100911A - Плазмида, содержащая нуклеотидную последовательность, кодирующую модифицированный предшественник инсулина, и способ ее трансфекции в клетки млекопитающего, трансгенное млекопитающее, продуцирующее указанный предшественник, и способ его получения - Google Patents
Плазмида, содержащая нуклеотидную последовательность, кодирующую модифицированный предшественник инсулина, и способ ее трансфекции в клетки млекопитающего, трансгенное млекопитающее, продуцирующее указанный предшественник, и способ его получения Download PDFInfo
- Publication number
- RU2010100911A RU2010100911A RU2010100911/10A RU2010100911A RU2010100911A RU 2010100911 A RU2010100911 A RU 2010100911A RU 2010100911/10 A RU2010100911/10 A RU 2010100911/10A RU 2010100911 A RU2010100911 A RU 2010100911A RU 2010100911 A RU2010100911 A RU 2010100911A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- modified
- insulin precursor
- plasmid according
- plasmid
- acid sequence
- Prior art date
Links
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical class N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract 31
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims 6
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 title 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 title 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 claims abstract 34
- 239000002243 precursor Substances 0.000 claims abstract 26
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims abstract 13
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 claims abstract 13
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 claims abstract 8
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 claims abstract 8
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 claims abstract 8
- 241000283707 Capra Species 0.000 claims abstract 7
- 108010076119 Caseins Proteins 0.000 claims abstract 7
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract 6
- 102000011632 Caseins Human genes 0.000 claims abstract 4
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 claims abstract 4
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims abstract 4
- 235000021247 β-casein Nutrition 0.000 claims abstract 4
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 claims abstract 3
- 108700024394 Exon Proteins 0.000 claims abstract 2
- 101001035782 Gallus gallus Hemoglobin subunit beta Proteins 0.000 claims abstract 2
- 108091092195 Intron Proteins 0.000 claims abstract 2
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 claims abstract 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 claims abstract 2
- 239000012212 insulator Substances 0.000 claims abstract 2
- PBGKTOXHQIOBKM-FHFVDXKLSA-N insulin (human) Chemical group C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H]1CSSC[C@H]2C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3NC=NC=3)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC1=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O)=O)CSSC[C@@H](C(N2)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)C1=CN=CN1 PBGKTOXHQIOBKM-FHFVDXKLSA-N 0.000 claims abstract 2
- 210000004216 mammary stem cell Anatomy 0.000 claims abstract 2
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 claims abstract 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims 11
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 claims 11
- 210000001082 somatic cell Anatomy 0.000 claims 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims 4
- VOUAQYXWVJDEQY-QENPJCQMSA-N 33017-11-7 Chemical class OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)NCC(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N1[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O)CCC1 VOUAQYXWVJDEQY-QENPJCQMSA-N 0.000 claims 3
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 claims 3
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims 3
- 239000002502 liposome Substances 0.000 claims 3
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 claims 2
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 claims 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 claims 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 claims 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 claims 2
- 241000894007 species Species 0.000 claims 2
- FJVAQLJNTSUQPY-CIUDSAMLSA-N Ala-Ala-Lys Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN FJVAQLJNTSUQPY-CIUDSAMLSA-N 0.000 claims 1
- 101000946377 Bos taurus Alpha-lactalbumin Proteins 0.000 claims 1
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 claims 1
- 102100029727 Enteropeptidase Human genes 0.000 claims 1
- 108010013369 Enteropeptidase Proteins 0.000 claims 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 claims 1
- 208000013016 Hypoglycemia Diseases 0.000 claims 1
- 101000993774 Ovis aries Insulin Proteins 0.000 claims 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 claims 1
- 108010076181 Proinsulin Proteins 0.000 claims 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 claims 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 claims 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 claims 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 claims 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 claims 1
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 claims 1
- 230000002218 hypoglycaemic effect Effects 0.000 claims 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 claims 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 claims 1
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 claims 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 claims 1
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 claims 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 claims 1
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 claims 1
- IXIBAKNTJSCKJM-BUBXBXGNSA-N bovine insulin Chemical class C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H]1CSSC[C@H]2C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3NC=NC=3)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC1=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O)=O)CSSC[C@@H](C(N2)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)[C@@H](C)CC)C(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)C1=CN=CN1 IXIBAKNTJSCKJM-BUBXBXGNSA-N 0.000 abstract 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K67/00—Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New or modified breeds of animals
- A01K67/027—New or modified breeds of vertebrates
- A01K67/0275—Genetically modified vertebrates, e.g. transgenic
- A01K67/0278—Knock-in vertebrates, e.g. humanised vertebrates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/62—Insulins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
- C12N15/8509—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells for producing genetically modified animals, e.g. transgenic
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/87—Introduction of foreign genetic material using processes not otherwise provided for, e.g. co-transformation
- C12N15/873—Techniques for producing new embryos, e.g. nuclear transfer, manipulation of totipotent cells or production of chimeric embryos
- C12N15/877—Techniques for producing new mammalian cloned embryos
- C12N15/8771—Bovine embryos
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2207/00—Modified animals
- A01K2207/15—Humanized animals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2217/00—Genetically modified animals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2227/00—Animals characterised by species
- A01K2227/10—Mammal
- A01K2227/101—Bovine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2267/00—Animals characterised by purpose
- A01K2267/01—Animal expressing industrially exogenous proteins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2830/00—Vector systems having a special element relevant for transcription
- C12N2830/008—Vector systems having a special element relevant for transcription cell type or tissue specific enhancer/promoter combination
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
1. Плазмида, включающая последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую модифицированный предшественник инсулина, функционально связанный с промотором, управляющим экспрессией указанной последовательности нуклеиновой кислоты в клетках молочной железы млекопитающих. ! 2. Плазмида по п.1, в котором промотор представляет собой бета-казеиновый промотор. ! 3. Плазмида по п.1, дополнительно включающая ген устойчивости к антибиотику. ! 4. Плазмида по п.1, в котором ген устойчивости к антибиотикам представляет собой ген устойчивости к неомицину. ! 5. Плазмида по п.1, в котором модифицированный предшественник инсулина представляет собой модифицированный предшественник инсулина млекопитающего. ! 6. Плазмида по п.1, в котором модифицированный предшественник инсулина представляет собой модифицированный предшественник человеческого инсулина, модифицированный предшественник коровьего инсулина, модифицированный предшественник свиного инсулина, модифицированный предшественник овечьего инсулина, модифицированный предшественник козьего инсулина или модифицированный предшественник инсулина грызунов. ! 7. Плазмида по п.1, которая представляет собой pβmhuIP. ! 8. Плазмида по п.1, которая представляет собой pNJK IP. ! 9. Плазмида по п.1, которая представляет собой pβKLE IP. ! 10. Плазмида по п.1, дополнительно включающая последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующей козий β-казеиновый промотор, и последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующей фрагмент инсулятора куриного β-глобина, включающего последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующий интроны и нетранслируемые экзоны из козьего гена β-казеина. ! 11. Плазмида по п.1,
Claims (27)
1. Плазмида, включающая последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую модифицированный предшественник инсулина, функционально связанный с промотором, управляющим экспрессией указанной последовательности нуклеиновой кислоты в клетках молочной железы млекопитающих.
2. Плазмида по п.1, в котором промотор представляет собой бета-казеиновый промотор.
3. Плазмида по п.1, дополнительно включающая ген устойчивости к антибиотику.
4. Плазмида по п.1, в котором ген устойчивости к антибиотикам представляет собой ген устойчивости к неомицину.
5. Плазмида по п.1, в котором модифицированный предшественник инсулина представляет собой модифицированный предшественник инсулина млекопитающего.
6. Плазмида по п.1, в котором модифицированный предшественник инсулина представляет собой модифицированный предшественник человеческого инсулина, модифицированный предшественник коровьего инсулина, модифицированный предшественник свиного инсулина, модифицированный предшественник овечьего инсулина, модифицированный предшественник козьего инсулина или модифицированный предшественник инсулина грызунов.
7. Плазмида по п.1, которая представляет собой pβmhuIP.
8. Плазмида по п.1, которая представляет собой pNJK IP.
9. Плазмида по п.1, которая представляет собой pβKLE IP.
10. Плазмида по п.1, дополнительно включающая последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующей козий β-казеиновый промотор, и последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующей фрагмент инсулятора куриного β-глобина, включающего последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующий интроны и нетранслируемые экзоны из козьего гена β-казеина.
11. Плазмида по п.1, дополнительно включающая последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующей нетранслируемый фрагмент первого экзона гена β-казеина.
12. Плазмида по п.1, дополнительно включающая последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую фрагмент коровьего гена α-лактальбумина и последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую сайт расщепления энтерокиназы, который находится выше по ходу транскрипции от модифицированного предшественника инсулина.
13. Плазмида по п.1, в котором модифицированный предшественник инсулина включает модифицированный С-пептид.
14. Плазмида по п.1, в котором модифицированный С-пептид включает аминокислоты, обычно не обнаруживающиеся в природном проинсулине.
15. Плазмида по п.1, в котором модифицированный С-пептид включает следующие три аминокислоты: Ala-Ala-Lys.
16. Плазмида по п.1, в котором модифицированный предшественник инсулина дополнительно включает модифицированную В-цепь.
17. Плазмида по п.1, в котором модифицированный предшественник инсулина содержит модифицированную В-цепь, содержащую всю аминокислотную последовательность природной В-цепи, за исключением аминокислот С-конца.
18. Способ трансфекции плазмидой по любому из пп.1-17 клеток млекопитающего, включающий введение плазмиды в липосому и контактирование указанной липосомы с клетками млекопитающего.
19. Способ по п.18, в котором липосомы представляют собой катионные липиды.
20. Трансгенное млекопитающее, отличное от человека, которое включает плазмиду по любому из пп.1-17 и образует в своем молоке модифицированный предшественник инсулина.
21. Трансгенное млекопитающее по п.20, в котором плазмиду обнаруживают в соматических и половых клетках млекопитающего.
22. Трансгенное млекопитющее по п.20, в котором млекопитающее принадлежит к видам крупного рогатого скота, свиней, овец, коз или грызунов.
23. Трансгенное млекопитающее по п.20, в котором млекопитающее принадлежит к видам крупного рогатого скота.
24. Трансгенное млекопитающее по п.20, в котором у трансгенного млекопитающего отсутствует гипогликемия.
25. Способ создания отличного от человека трансгенного млекопитающего, включающий трансфекцию соматических клеток плазмидой по любому из пп.1-17, при которой плазмида инкорпорируется в геном клеток с получением в результате трансгенных соматических клеток, энуклеацию зрелой яйцеклетки с получением яйцеклетки с удаленным ядром, слияние одной из соматических клеток с указанной яйцеклеткой с образованием одноклеточного эмбриона, имплантацию эмбриона в матку млекопитающего-реципиента и мониторинг беременности до рождения трансгенного млекопитающего.
26. Способ по п.25, в котором соматические клетки представляют собой фибробласты.
27. Способ по п.25, в котором трансгенные соматические клетки получают выделением из самки, являющейся трансгенной по продукции в молоке модифицированного предшественника инсулина.
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US92909507P | 2007-06-13 | 2007-06-13 | |
| US92909807P | 2007-06-13 | 2007-06-13 | |
| US60/929,095 | 2007-06-13 | ||
| US60/929,098 | 2007-06-13 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2010100911A true RU2010100911A (ru) | 2011-07-20 |
Family
ID=40156522
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2010100911/10A RU2010100911A (ru) | 2007-06-13 | 2008-06-13 | Плазмида, содержащая нуклеотидную последовательность, кодирующую модифицированный предшественник инсулина, и способ ее трансфекции в клетки млекопитающего, трансгенное млекопитающее, продуцирующее указанный предшественник, и способ его получения |
| RU2010100910/10A RU2010100910A (ru) | 2007-06-13 | 2008-06-13 | Способ получения инсулина (варианты) |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2010100910/10A RU2010100910A (ru) | 2007-06-13 | 2008-06-13 | Способ получения инсулина (варианты) |
Country Status (11)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US20090187999A1 (ru) |
| EP (2) | EP2061896A1 (ru) |
| JP (2) | JP2010528678A (ru) |
| CN (2) | CN101802210A (ru) |
| AU (2) | AU2008266993A1 (ru) |
| BR (1) | BRPI0811390A2 (ru) |
| CA (2) | CA2690565A1 (ru) |
| CO (2) | CO6300794A2 (ru) |
| MX (2) | MX2009013421A (ru) |
| RU (2) | RU2010100911A (ru) |
| WO (2) | WO2008156670A1 (ru) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20120123089A1 (en) * | 2009-07-09 | 2012-05-17 | Biocon Limited | Preparative non-linear gradient based chromatographic method and purified products thereof |
| CN102816819B (zh) * | 2012-08-13 | 2014-10-29 | 山东阿华生物药业有限公司 | 提高人胰岛素前体融合蛋白酶切转换成b30缺苏氨酸人胰岛素产率的方法 |
| TW201446962A (zh) * | 2013-02-13 | 2014-12-16 | Lab Francais Du Fractionnement | 具有修飾的糖化作用之蛋白質及其製造方法 |
| EP2956480B1 (en) | 2013-02-13 | 2019-09-04 | Laboratoire Français du Fractionnement et des Biotechnologies | Highly galactosylated anti-tnf-alpha antibodies and uses thereof |
| US10362771B2 (en) | 2014-11-20 | 2019-07-30 | Kyoto University | Method for knock-in of DNA into target region of mammalian genome, and cell |
| CN105219774B (zh) * | 2015-10-10 | 2019-04-30 | 广西大学 | 猪胰岛素特异性表达启动子pip2及其应用 |
| CN117327681B (zh) * | 2022-12-31 | 2024-06-18 | 义翘神州(泰州)科技有限公司 | 促进哺乳动物细胞表达蛋白正确折叠的分子伴侣质粒及其应用 |
Family Cites Families (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4654324A (en) * | 1981-08-27 | 1987-03-31 | Eli Lilly And Company | Human proinsulin pharmaceutical formulations |
| US5322775A (en) * | 1986-06-30 | 1994-06-21 | Pharmaceutical Proteins Ltd. | Peptide production |
| US5633076A (en) * | 1989-12-01 | 1997-05-27 | Pharming Bv | Method of producing a transgenic bovine or transgenic bovine embryo |
| US5831141A (en) * | 1991-01-11 | 1998-11-03 | United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Expression of a heterologous polypeptide in mammary tissue of transgenic non-human mammals using a long whey acidic protein promoter |
| US6011197A (en) * | 1997-03-06 | 2000-01-04 | Infigen, Inc. | Method of cloning bovines using reprogrammed non-embryonic bovine cells |
| CN1058972C (zh) * | 1997-08-15 | 2000-11-29 | 中国农业大学 | 用动物乳房生产人的生长激素 |
| US6451527B1 (en) * | 1997-08-29 | 2002-09-17 | Selective Genetics, Inc. | Methods using genetic package display for selecting internalizing ligands for gene delivery |
| US20030005468A1 (en) * | 1998-06-19 | 2003-01-02 | Meade Harry M. | Methods and vectors for improving nucleic acid expression |
| EP1090132A1 (en) * | 1998-06-26 | 2001-04-11 | PPL Therapeutics (Scotland) Limited | Methods for production of recombinant polypeptides |
| IL149003A0 (en) * | 1999-10-14 | 2002-11-10 | Genzyme Transgenic Corp | Methods of producing a target molecule in a transgenic animal and purification of the target molecule |
| US7105314B2 (en) * | 2001-04-02 | 2006-09-12 | Novo Nordisk A/S | Method for making human insulin precursors |
| EP1685245A4 (en) * | 2003-09-30 | 2007-01-03 | Sterrenbeld Biotechnologie North America Inc | METHOD FOR PRODUCING TRANSGENER MAMMERS THAT PRODUCE EXOGENE PROTEINS IN THE MILK, AND THEREFORE PRODUCED TRANSGENIC MAMMALS |
| CN101413003A (zh) * | 2003-09-30 | 2009-04-22 | 斯特林贝尔德生物技术北美公司 | 在转基因哺乳动物的奶中生产外源蛋白的方法以及从其中纯化蛋白的方法 |
-
2008
- 2008-06-13 JP JP2010512197A patent/JP2010528678A/ja not_active Withdrawn
- 2008-06-13 CN CN200880022998.8A patent/CN101802210A/zh active Pending
- 2008-06-13 CA CA2690565A patent/CA2690565A1/en not_active Abandoned
- 2008-06-13 JP JP2010512195A patent/JP2010528677A/ja not_active Withdrawn
- 2008-06-13 CN CN200880022856A patent/CN101755054A/zh active Pending
- 2008-06-13 RU RU2010100911/10A patent/RU2010100911A/ru unknown
- 2008-06-13 US US12/138,529 patent/US20090187999A1/en not_active Abandoned
- 2008-06-13 AU AU2008266993A patent/AU2008266993A1/en not_active Abandoned
- 2008-06-13 BR BRPI0811390-4A2A patent/BRPI0811390A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2008-06-13 WO PCT/US2008/007400 patent/WO2008156670A1/en active Application Filing
- 2008-06-13 CA CA2690564A patent/CA2690564A1/en not_active Abandoned
- 2008-06-13 US US12/138,526 patent/US20090228999A1/en not_active Abandoned
- 2008-06-13 MX MX2009013421A patent/MX2009013421A/es not_active Application Discontinuation
- 2008-06-13 EP EP08768440A patent/EP2061896A1/en not_active Withdrawn
- 2008-06-13 WO PCT/US2008/007398 patent/WO2008156668A1/en active Application Filing
- 2008-06-13 AU AU2008266995A patent/AU2008266995A1/en not_active Abandoned
- 2008-06-13 MX MX2009013371A patent/MX2009013371A/es not_active Application Discontinuation
- 2008-06-13 EP EP08768438A patent/EP2061895A1/en not_active Withdrawn
- 2008-06-13 RU RU2010100910/10A patent/RU2010100910A/ru unknown
-
2010
- 2010-01-13 CO CO10002774A patent/CO6300794A2/es not_active Application Discontinuation
- 2010-01-13 CO CO10002779A patent/CO6300796A2/es not_active Application Discontinuation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CA2690564A1 (en) | 2008-12-24 |
| AU2008266993A1 (en) | 2008-12-24 |
| US20090228999A1 (en) | 2009-09-10 |
| EP2061895A1 (en) | 2009-05-27 |
| AU2008266995A1 (en) | 2008-12-24 |
| WO2008156670A1 (en) | 2008-12-24 |
| EP2061896A1 (en) | 2009-05-27 |
| JP2010528678A (ja) | 2010-08-26 |
| CN101755054A (zh) | 2010-06-23 |
| WO2008156668A1 (en) | 2008-12-24 |
| CN101802210A (zh) | 2010-08-11 |
| US20090187999A1 (en) | 2009-07-23 |
| CA2690565A1 (en) | 2008-12-24 |
| JP2010528677A (ja) | 2010-08-26 |
| CO6300796A2 (es) | 2011-07-21 |
| MX2009013421A (es) | 2010-03-22 |
| MX2009013371A (es) | 2010-01-25 |
| CO6300794A2 (es) | 2011-07-21 |
| RU2010100910A (ru) | 2011-07-20 |
| BRPI0811390A2 (pt) | 2014-12-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2010100911A (ru) | Плазмида, содержащая нуклеотидную последовательность, кодирующую модифицированный предшественник инсулина, и способ ее трансфекции в клетки млекопитающего, трансгенное млекопитающее, продуцирующее указанный предшественник, и способ его получения | |
| CN104561095A (zh) | 一种能够生产人神经生长因子的转基因小鼠的制备方法 | |
| CA2781619C (en) | Maternally induced sterility in animals | |
| US20100305039A1 (en) | Production of collagen in the milk of transgenic mammals | |
| Ward et al. | The genetic engineering of production traits in domestic animals | |
| AU2004278763A1 (en) | A process of making transgenic mammals that produce exogenous proteins in milk and transgenic mammals produced thereby | |
| WO2012068769A1 (zh) | 一种定点整合外源基因的方法 | |
| US20060212948A1 (en) | Method of constructing nuclear-transplanted egg parthenogenetic embryo and parthenogenetic mammal | |
| DK2993234T3 (en) | Vector Targeted CMP Acetylneuramic Acid Hydroxylase, Transgenic Animal for Xenotransplantation Introduced with the Vector and Method of Preparation thereof | |
| JPH10502816A (ja) | α−ラクトアルブミン遺伝子構造物 | |
| KR101236724B1 (ko) | 단백질 과발현 카세트를 포함하는 유전자 타겟팅 넉인 벡터, 이의 제조 방법 및 이 벡터가 도입된 이종간 이식용 형질전환 복제동물 | |
| WO2024032398A1 (zh) | 特异性提高乳铁蛋白基因表达量的方法及应用 | |
| US10036041B2 (en) | Method for positioning and integrating transgene and use thereof | |
| RU2006114793A (ru) | Способ получения трансгенных млекопитающих, которые продуцируют экзогенные белки в молоке, и трансгенные млекопитающие, полученные таким способом | |
| Frazier | Animal Transgenesis and Cloning | |
| EP3020273A1 (en) | A method of producing biotechnological drugs using transgenic bovine animals | |
| US7659443B2 (en) | Method of constructing nucleus-implanted egg, parthenogenetic embryo and parthenogenetic mammal | |
| KR20110117841A (ko) | Ｐｅｐｃｋ 과발현 형질전환 복제 개과 동물 및 이의 생산방법 | |
| Houdebine et al. | Transgenic rabbits to prepare pharmaceutical proteins | |
| Laible | Conference VIII | |
| Michalska | Production and characterization of transgenic mice and pigs carrying the porcine growth hormone gene | |
| KR20120092534A (ko) | Ｐｅｐｃｋ 과발현 형질전환 복제 개과 동물 및 이의 생산방법 |