RU2006114793A - Способ получения трансгенных млекопитающих, которые продуцируют экзогенные белки в молоке, и трансгенные млекопитающие, полученные таким способом - Google Patents
Способ получения трансгенных млекопитающих, которые продуцируют экзогенные белки в молоке, и трансгенные млекопитающие, полученные таким способом Download PDFInfo
- Publication number
- RU2006114793A RU2006114793A RU2006114793/13A RU2006114793A RU2006114793A RU 2006114793 A RU2006114793 A RU 2006114793A RU 2006114793/13 A RU2006114793/13 A RU 2006114793/13A RU 2006114793 A RU2006114793 A RU 2006114793A RU 2006114793 A RU2006114793 A RU 2006114793A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- growth hormone
- mammal
- human
- plasmid
- transgenic
- Prior art date
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Claims (77)
1. Плазмида, содержащая ген, кодирующий представляющий интерес белок, оперативно связанный с промотором бета-казеина и геном β-лактамазы.
2. Плазмида по п.1, где указанным представляющим интерес белком является гормон роста.
3. Плазмида по п.2, где указанный гормон роста является гормоном роста млекопитающего.
4. Плазмида по п.3, где указанным гормоном роста млекопитающего является гормон роста человека, бычий гормон роста, свиной гормон роста, овечий гормон роста, козий гормон роста или гормон роста грызунов.
5. Плазмида по п.4, где указанным гормоном роста млекопитающего является гормон роста человека.
6. Плазмида по п.5, которая представляет собой плазмиду pRβhGH.
7. Плазмида по п.6, дополнительно содержащая ген резистентности к неомицину.
8. Плазмида по п.7, которая представляет собой плазмиду pRNeo.
9. Плазмида по п.8, дополнительно содержащая ген, кодирующий зеленый флуоресцирующий белок (GFP), оперативно связанный с промотором цитомегаловируса (CMV).
10. Плазмида по п.9, которая представляет собой плазмиду pRNeoGreen.
11. Плазмида по п.5, где промотор бета-казеина содержит 1230 п.н. полноразмерного промотора бета-казеина и 49 п.н. первого некодирующего экзона гена бета-казеина.
12. Плазмида по п.11, дополнительно содержащая ген резистентности к неомицину.
13. Плазмида по п.12, которая представляет собой плазмиду pVEβcashGH.
14. Линейный фрагмент плазмиды по п.8, где указанный ген β-лактамазы вырезан в результате расщепления ApaLI.
15. Линейный фрагмент плазмиды по п.10, где указанный ген β-лактамазы вырезан в результате расщепления под действием ApaLI.
16. Линейный фрагмент плазмиды по п.13, где указанный ген β-лактамазы вырезан в результате расщепления под действием ApaLI.
17. Плазмида pRβhGH.
18. Плазмида pRNeo.
19. Плазмида pRNeoGreen.
20. Способ трансфекции генетических конструкций по пп.1-19 в клетки млекопитающего, включающий в себя комбинирование катионных липидов для использования в липосомах.
21. Трансгенное млекопитающее, отличное от человека, которое продуцирует рекомбинантный гормон роста в молоке.
22. Трансгенное млекопитающее, отличное от человека, по п.21, где указанное млекопитающее относится к виду крупного рогатого скота, виду свиней, виду овец, виду коз или виду грызунов.
23. Трансгенное млекопитающее, отличное от человека, по п.22, где указанное млекопитающее относится к виду крупного рогатого скота.
24. Трансгенное млекопитающее, отличное от человека, по п.21, где указанным гормоном роста является гормон роста млекопитающего.
25. Трансгенное млекопитающее, отличное от человека, по п.24, где указанным гормоном роста млекопитающего является гормон роста человека, бычий гормон роста, свиной гормон роста, овечий гормон роста, козий гормон роста или гормон роста грызунов.
26. Трансгенное млекопитающее, отличное от человека, по п.25, где указанным гормоном роста млекопитающего является гормон роста человека.
27. Трансгенное млекопитающее, отличное от человека, по п.26, где указанный гормон роста человека продуцируется на уровне, примерно превышающем 1,0 г hGH/л молока.
28. Трансгенное млекопитающее, отличное от человека, по п.27, где указанный гормон роста человека продуцируется на уровне, примерно превышающем 2,0 г hGH/л молока.
29. Трансгенное млекопитающее, отличное от человека, по п.28, где указанный гормон роста человека продуцируется на уровне, примерно превышающем 3,0 г hGH/л молока.
30. Трансгенное млекопитающее, отличное от человека, по п.29, где указанный гормон роста человека продуцируется на уровне, примерно превышающем 4,0 г hGH/л молока.
31. Трансгенное млекопитающее, отличное от человека, по п.30, где указанный гормон роста человека продуцируется на уровне, примерно превышающем 5,0 г hGH/л молока.
32. Трансгенное млекопитающее, отличное от человека, по п.31, у которого указанный гормон роста человека продуцируется на уровне, примерно превышающем 6,0 г hGH/л молока.
33. Трансгенное млекопитающее, отличное от человека, по п.21, где продуцирование указанного рекомбинантного гормона роста указанным млекопитающим стимулирует указанное млекопитающее к продуцированию большего количества молока, содержащего указанный гормон роста.
34. Трансгенное млекопитающее, отличное от человека, по п.21, геном которого содержит интегрированную плазмиду, при этом указанная плазмида содержит ген гормона роста, оперативно связанный с промотором, который управляет экспрессией указанного гена в клетках молочной железы указанного млекопитающего.
35. Трансгенное млекопитающее, отличное от человека, по п.34, где указанное млекопитающее относится к виду крупного рогатого скота, виду свиней, виду овец, виду коз или виду грызунов.
36. Трансгенное млекопитающее, отличное от человека, по п.35, где указанное млекопитающее относится к виду крупного рогатого скота.
37. Трансгенное млекопитающее, отличное от человека, по п.34, где указанным геном гормона роста является ген гормона роста человека, ген бычьего гормона роста, ген свиного гормона роста, ген овечьего гормона роста, ген козьего гормона роста или ген гормона роста грызунов.
38. Трансгенное млекопитающее, отличное от человека, по п.37, где указанным геном гормона роста является ген гормона роста человека.
39. Трансгенное млекопитающее, отличное от человека, по п.38, где промотором является промотор бета-казеина.
40. Трансгенное млекопитающее, отличное от человека, по п.39, где плазмида представляет собой плазмиду pRβhGH.
41. Трансгенное млекопитающее, отличное от человека, по п.40, где указанная плазмида дополнительно содержит ген резистентности к неомицину.
42. Трансгенное млекопитающее, отличное от человека, по п.41, где указанная плазмида представляет собой плазмиду pRNeo.
43. Трансгенное млекопитающее, отличное от человека, где продуцирование указанного рекомбинантного гормона роста указанным млекопитающим стимулирует указанное млекопитающее к продуцированию большего количества молока, содержащего указанный гормон роста.
44. Трансгенное млекопитающее, отличное от человека, относящееся к виду крупного рогатого скота, которое продуцирует рекомбинантный гормон роста человека в молоке, геном которого содержит интегрированную плазмиду, при этом указанная плазмида содержит ген гормона роста человека и промотор бета-казеина, который управляет экспрессией указанного гена в клетках молочной железы указанного млекопитающего.
45. Трансгенное млекопитающее, отличное от человека, по п.44, где указанная плазмида представляет собой плазмиду pRβhGH.
46. Трансгенное млекопитающее, отличное от человека, по п.45, где указанная плазмида дополнительно содержит ген резистентности к неомицину.
47. Трансгенное млекопитающее, отличное от человека, по п.46, где указанная плазмида представляет собой плазмиду pRNeo.
48. Трансгенное млекопитающее, отличное от человека, по п.44, где указанную интегрированную плазмиду обнаруживают в соматических клетках и половых клетках указанного млекопитающего.
49. Трансгенное млекопитающее, отличное от человека, по п.44, где продуцирование рекомбинантного гормона роста человека указанным млекопитающим стимулирует указанное млекопитающее к продуцированию большего количества молока, содержащего указанный гормон.
50. Способ получения трансгенного млекопитающего отличного от человека, включающий в себя
a) получение гена, который кодирует гормон роста;
b) клонирование указанного гена в плазмиде, при этом указанный ген оперативно связывают с промотором, который будет управлять экспрессией указанного гена в клетках молочной железы, с получением экспрессирующей плазмиды;
c) трансфекцию соматических клеток указанной экспрессирующей плазмидой, так чтобы включить указанную плазмиду в геном указанных клеток, с получением в результате трансгенных соматических клеток;
d) удаление ядра из зрелого ооцита, с получение энуклеированного ооцита;
e) слияние одной из указанных трансгенных соматических клеток с указанным энуклеированным ооцитом, с получением одноклеточного эмбриона;
f) имплантацию указанного эмбриона в матку готового к оплодотворению млекопитающего; и
g) мониторинг беременности вплоть до рождения трансгенного млекопитающего.
51. Способ по п.50, где указанным промотором является промотор бета-казеина и где указанным гормоном роста является гормон роста человека.
52. Способ по п.51, где экспрессирующей плазмидой является плазмида pRβhGH.
53. Способ по п.52, где указанная экспрессирующая плазмида дополнительно содержит ген резистентности к неомицину.
54. Способ по п.53, где указанной экспрессирующей плазмидой является плазмида pRNeo.
55. Способ по п. 50, где указанное млекопитающее относится к крупному рогатому скоту, у которого в молоке продуцируется рекомбинантный гормон роста человека, геном которого содержит интегрированную плазмиду, при этом указанная плазмида содержит ген гормона роста человека и промотор бета-казеина, который управляет экспрессией указанного гена в клетках молочной железы указанного млекопитающего.
56. Способ по п.55, где указанной плазмидой является плазмида pRβhGH.
57. Способ по п.56, где указанная плазмида дополнительно содержит ген резистентности к неомицину.
58. Способ по п.57, где указанной плазмидой является плазмида pRNeo.
59. Способ по п.50, где указанными соматическими клетками являются фибробласты.
60. Способ по п.50, где указанные трансгенные соматические клетки получают путем их выделения из организма самки, трансгенной по продукции указанного рекомбинантного гормона роста в ее молоке.
61. Способ по п.60, где указанными трансгенными соматическими клетками являются фибробласты.
62. Способ получения трансгенного млекопитающего, отличного от человека, включающий в себя
a) суперовуляцию самки млекопитающего, отличного от человека, которая является трансгенной по продукции рекомбинантного гормона роста в ее молоке;
b) искусственное оплодотворение указанного млекопитающего спермой, полученной от самца нетрансгенного млекопитающего, отличного от человека, с получением эмбрионов;
c) сбор указанных эмбрионов;
d) имплантацию указанных эмбрионов в матку млекопитающего, готового к оплодотворению; и
e) мониторинг беременности вплоть до рождения трансгенного млекопитающего.
63. Способ получения трансгенного млекопитающего, отличного от человека, включающий в себя
a) суперовуляцию самки млекопитающего, отличного от человека, которая является трансгенной по продукции рекомбинантного гормона роста в ее молоке;
b) искусственное оплодотворение указанного млекопитающего спермой, полученной от самца млекопитающего, отличного от человека, который является трансгенным по продукции указанного рекомбинантного гормона роста, с получением эмбрионов;
c) сбор указанных эмбрионов;
d) имплантацию указанных эмбрионов в матку млекопитающего, готового к оплодотворению; и
e) мониторинг беременности вплоть до рождения трансгенного млекопитающего.
64. Способ получения трансгенного млекопитающего, отличного от человека, включающий в себя
a) суперовуляцию самки нетрансгенного млекопитающего, отличного от человека;
b) искусственное оплодотворение указанного млекопитающего спермой, полученной от самца млекопитающего, отличного от человека, который является трансгенным по продукции указанного рекомбинантного гормона роста, с получением эмбрионов;
c) сбор указанных эмбрионов;
d) имплантацию указанных эмбрионов в матку млекопитающего, готового к оплодотворению; и
e) мониторинг беременности вплоть до рождения трансгенного млекопитающего.
65. Способ по любому из пп.50, 60, 62, 63 или 64, где указанное млекопитающее относится к виду крупного рогатого скота, виду свиней, виду овец, виду коз или виду грызунов.
66. Способ по п.65, где указанное млекопитающее относится к виду крупного рогатого скота.
67. Способ по любому из пп.50, 60, 62, 63 или 64, где указанным гормоном роста является гормон роста млекопитающего.
68. Способ по п.67, где указанным гормоном роста млекопитающего является гормон роста человека, бычий гормон роста, свиной гормон роста, овечий гормон роста, козий гормон роста или гормон роста грызунов.
69. Способ по п.68, где указанным гормоном роста млекопитающего является гормон роста человека.
70. Способ по п.69, где указанное млекопитающее продуцирует гормон роста человека на уровне, примерно превышающем 1,0 г hGH/л молока.
71. Способ по п.70, где указанное млекопитающее продуцирует гормон роста человека на уровне, примерно превышающем 2,0 г hGH/л молока.
72. Способ по п.71, где указанное млекопитающее продуцирует гормон роста человека на уровне, примерно превышающем 3,0 г hGH/л молока.
73. Способ по п.72, где указанное млекопитающее продуцирует гормон роста человека на уровне, примерно превышающем 4,0 г hGH/л молока.
74. Способ по п.73, где указанное млекопитающее продуцирует гормон роста человека на уровне, примерно превышающем 5,0 г hGH/л молока.
75. Способ по п.74, где указанное млекопитающее продуцирует гормон роста человека на уровне, примерно превышающем 6,0 г hGH/л молока.
76. Способ по любому из пп.50, 60, 62, 63 или 64, где продуцирование указанного рекомбинантного гормона роста указанным млекопитающим стимулирует указанного млекопитающего к продуцированию большего количества молока, содержащего указанный гормон роста.
77. Способ по любому из пп.50, 60, 62, 63 или 64, где ген, кодирующий указанный рекомбинантный гормон роста, оперативно связанный с промотором, который управляет экспрессией указанного гена в клетках молочной железы, находится в соматических клетках и половых клетках указанного млекопитающего.
Applications Claiming Priority (7)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US50673603P | 2003-09-30 | 2003-09-30 | |
| US50673503P | 2003-09-30 | 2003-09-30 | |
| US60/506,736 | 2003-09-30 | ||
| US60/506,735 | 2003-09-30 | ||
| US55602604P | 2004-03-25 | 2004-03-25 | |
| US60/556,027 | 2004-03-25 | ||
| US60/556,026 | 2004-03-25 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2006114793A true RU2006114793A (ru) | 2007-11-10 |
| RU2390562C2 RU2390562C2 (ru) | 2010-05-27 |
Family
ID=38957993
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2006114793/13A RU2390562C2 (ru) | 2003-09-30 | 2004-09-29 | Способ получения трансгенных млекопитающих, которые продуцируют экзогенные белки в молоке, и трансгенные млекопитающие, полученные таким способом |
| RU2006114685/13A RU2360002C2 (ru) | 2003-09-30 | 2004-09-29 | Способ продуцирования экзогенного белка в молоке трансгенных млекопитающих и способ очистки белков из молока |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2006114685/13A RU2360002C2 (ru) | 2003-09-30 | 2004-09-29 | Способ продуцирования экзогенного белка в молоке трансгенных млекопитающих и способ очистки белков из молока |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (2) | RU2390562C2 (ru) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2525712C2 (ru) * | 2012-07-10 | 2014-08-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт биологии гена Российской академии наук | Способ создания трансгенных животных со стабильным и высоким уровнем экспрессии целевого белка в молоке |
-
2004
- 2004-09-29 RU RU2006114793/13A patent/RU2390562C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2004-09-29 RU RU2006114685/13A patent/RU2360002C2/ru not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2390562C2 (ru) | 2010-05-27 |
| RU2006114685A (ru) | 2007-11-10 |
| RU2360002C2 (ru) | 2009-06-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0347431B1 (en) | Expression of proteins in milk | |
| US5750172A (en) | Transgenic non human mammal milk | |
| US20080060089A1 (en) | Process for producing exogenous protein in the milk of transgenic mammals and a process for purifying proteins therefrom | |
| JP4102450B2 (ja) | 胎仔線維芽細胞による効率的な核移入 | |
| EP0871357B1 (en) | Method for development of transgenic goats | |
| US20090187999A1 (en) | Process for Producing Exogenous Protein in the Milk of Transgenic Mammals and a Process For Purifying Proteins Therefrom | |
| EP1661456B1 (en) | Method of constructing nuclear-transplanted egg, parthenogenetic embryo and parthenogenetic mammal | |
| RU2006114793A (ru) | Способ получения трансгенных млекопитающих, которые продуцируют экзогенные белки в молоке, и трансгенные млекопитающие, полученные таким способом | |
| CN1402781A (zh) | 克隆和转基因哺乳动物的生产方法 | |
| JP5078074B2 (ja) | 核移植卵、単為発生胚および単為発生非ヒト哺乳動物の作出方法 | |
| CN101413003A (zh) | 在转基因哺乳动物的奶中生产外源蛋白的方法以及从其中纯化蛋白的方法 | |
| US7659443B2 (en) | Method of constructing nucleus-implanted egg, parthenogenetic embryo and parthenogenetic mammal | |
| KR20110117841A (ko) | Ｐｅｐｃｋ 과발현 형질전환 복제 개과 동물 및 이의 생산방법 | |
| MXPA06003480A (en) | A process of making transgenic mammals that produce exogenous proteins in milk and transgenic mammals produced thereby |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20110930 |