RU2009138925A - Определение и идентификация микроорганизмов на прозрачных проницаемых мембранах - Google Patents

Abstract

1. Устройство для определения, идентификации, или подсчета микроорганизмов которое включает: ! контейнер с питательной средой для поддержания роста микроорганизмов; пористый элемент, находящийся в контакте с питательной средой и который позволяет питательным веществам проходить насквозь и поддерживать рост клеток, где пористый элемент переносится для последующей обработки индикаторами или для визуальной инспекции, и, где пористый элемент прозрачный, водопроницаемый и проницаемый для питательных и индикаторных веществ. ! 2. Устройство, описанное в п.1, где пористый элемент - водопроницаемая мембрана, которая является непроницаемой для микроорганизмов, но выдерживающая автоклавирование, гидрофильная, нефлуоресцентная, бесцветная, и стойкая к секретируемым клеточным ферментам. ! 3. Устройство, описанное в п.1, где питательная среда содержит только вещества, которые не предотвращают или подавляют микробный рост, и где питательная среда являются или плотной питательной средой общего назначения или селективной или дифференциальной питательной средой. ! 4. Устройство, описанное в п.1, включающее пористый элемент установленный сверху питательной среды в контейнере с или без верхнего слоя питательной среды. ! 5. Устроство, описанное в п.1, где пористый элемент выбирается из группы состоящей из: регенерированной целлюлозы, целофана, купрофана или диализной мембраны. ! 6. Устройство, описанное в п.1, где пористый элемент - проницаемая мембрана с регулярными или нерегулярными порами в пределах 1000-107 Да. ! 7. Устройство, описанное в п.1, где питательная среда находится в твердом, полутвердом или жидком состоянии и где порист

Claims (20)

1. Устройство для определения, идентификации, или подсчета микроорганизмов которое включает:

контейнер с питательной средой для поддержания роста микроорганизмов; пористый элемент, находящийся в контакте с питательной средой и который позволяет питательным веществам проходить насквозь и поддерживать рост клеток, где пористый элемент переносится для последующей обработки индикаторами или для визуальной инспекции, и, где пористый элемент прозрачный, водопроницаемый и проницаемый для питательных и индикаторных веществ.

2. Устройство, описанное в п.1, где пористый элемент - водопроницаемая мембрана, которая является непроницаемой для микроорганизмов, но выдерживающая автоклавирование, гидрофильная, нефлуоресцентная, бесцветная, и стойкая к секретируемым клеточным ферментам.

3. Устройство, описанное в п.1, где питательная среда содержит только вещества, которые не предотвращают или подавляют микробный рост, и где питательная среда являются или плотной питательной средой общего назначения или селективной или дифференциальной питательной средой.

4. Устройство, описанное в п.1, включающее пористый элемент установленный сверху питательной среды в контейнере с или без верхнего слоя питательной среды.

5. Устроство, описанное в п.1, где пористый элемент выбирается из группы состоящей из: регенерированной целлюлозы, целофана, купрофана или диализной мембраны.

6. Устройство, описанное в п.1, где пористый элемент - проницаемая мембрана с регулярными или нерегулярными порами в пределах 1000-10⁷ Да.

7. Устройство, описанное в п.1, где питательная среда находится в твердом, полутвердом или жидком состоянии и где пористый элемент проводит питательные вещества из среды к микроорганизмам, расположенным сверху пористого элемента.

8. Устройство, описанное в п.1, кроме того включающее:

множество пористых элементов, расположенных на или в питательной среде, параллельно для параллельного тестирования.

9. Тест-набор для определения, идентификации или подсчета микроорганизмов, включающий:

контейнер с питательной средой для поддержания роста микроорганизмов; пористый элемент находящийся в контакте с питательной средой, несущий колонии непосредственно на пористом элементе или на питательной среде расположенной сверху пористого элемента и для переноса колоний для последующего процесса индикации, где пористый элемент прозрачен, водо-проницаем, проницаем для питательных и индикаторных веществ и вторичная среда действующая как носитель для освобождения молекул индикатора для окраски колоний.

10. Тест-система в соответствии с п.9, где вторичная среда выбирается из группы, состоящей из: агарозы, каррагинана, желатины или иного геля, способного к затвердеванию, и где концентрация указанных гелей может быть в примерных пределах 0,1%-10% и растворенных в воде, буфере, растворе хлорида натрия или жидкой питательной среде.

11. Тест-система в соответствии с п.9, где индикатором для микроколоний может служить хромогенный субстрат, флуорогенный субстрат или радиоактивно меченые антитела.

12. Метод для определения, идентификации и подсчета микроорганизмов, включающий шаги:

подготовка контейнера со средой с пористым элементом наверху или под поверхностью среды, где среда имеет питательные вещества для поддержания роста микроорганизмов;

заливка жидкого образца в контейнер по площади пористого элемента;

удержание микроорганизмов на фильтрующем элементе или на среде на поверхности пористого элемента;

инкубирование контейнера;

перенос пористого элемента и любой среды на его поверхности из контейнера на вторичную среду с индикатором с целью оценки микроорганизмов;

перенос пористого элемента со вторичной среды в прибор для определения и идентификации клеток; и

выявление формы колоний для определения, идентификации и подсчета микроорганизмов.

13. Метод, описанный в п.12, где выявление формы производится вручную или с помощью анализатора идентификации и узнавания образов.

14. Метод, описанный в п.12, включающий стадию определения общего числа живых микроорганизмов (ОЧЖМ).

15. Метод, описанный в п.12, где устройством для определения и идентификации клеток служит микроскоп или автоматическая система для анализа образов.

16. Метод, описанный в п.12, где вторичная среда содержит индикаторное вещество, способствующее идентификации микроорганизмов на пористом элементе.

17. Метод, описанный в п.12, где пористый элемент удерживает как нефильтруемые, так и фильтруемые образцы.

18. Метод изготовления устройства для определения микроорганизмов, включающий:

контейнер с питательной средой;

установка пористого элемента сверху среды в контейнере; и

заливка дополнительной жидкой среды на пористый элемент и на верхнюю поверхность среды в контейнере, где и среда в контейнере, и дополнительная жидкая среда имеют питательные вещества, поддерживающие клеточный рост.

19. Метод, описанный в п.18, дополнительно включающий шаги:

создание отверстия в верхней поверхности среды для вставления фильтрующего элемента;

установка фильтрующего элемента в отверстие таким образом, чтобы верхняя поверхность фильтрующего элемента была на одном уровне или ниже, чем верхняя поверхность.

20. Метод, описанный в п.19, где способ создания отверстия включает следующие шаги:

установка прокладки на верхней поверхности среды;

заливка жидкой среды на прокладку и на верхнюю поверхность среды с целью формирования верхней поверхности;

позволить жидкой среде хотя бы частично затвердеть для создания тонкого слоя среды на поверхности прокладки; и

удалить прокладку вместе с тонким слоем среды на поверхности с целью создания отверстия в среде.