RU2009122202A - Чистая форма рапамицина и способ ее выделения и очистки - Google Patents

Abstract

1. Чистая форма рапамицина с общим содержанием примесей менее 1,2%, при этом указанный рапамицин содержит примеси менее 0,15% при RRT 1,34, 0,92 и 0,69 мин. ! 2. Рапамицин по п.1, имеющий чистоту предпочтительно 98,8%. ! 3. Рапамицин по п.1, полученный посредством ферментационной питательной среды. ! 4. Рапамицин по п.1, где указанный рапамицин получают посредством высокоэффективной жидкостной хроматографии. ! 5. Рапамицин по п.1, где указанный рапамицин находится в кристаллической форме. ! 6. Способ выделения и очистки рапамицина, включающий: ! а) обработку ферментационной питательной среды, экстрактов или растворов растворителем, не смешивающимся с водой, и концентрацию; ! b) добавление растворителя, смешивающегося с водой, для осуществления отделения присутствующих примесей; ! с) необязательно связывание растворителя, содержащего продукт со стадии (b) с инертным твердым веществом, промывку инертного твердого вещества основанием и кислотой с последующим элюированием; ! d) воздействие на элюат со стадии (с) или на растворитель, содержащий продукт со стадии (b) хроматографией с использованием силикагеля; ! е) кристаллизацию продукта, полученного со стадии (d); ! f) воздействие на раствор продукта со стадии (е) хроматографией с гидрофобным взаимодействием или хроматографией с обращенной фазой; и ! g) рекристаллизацию для получения рапамицина, по существу, в чистой форме. ! 7. Способ по п.6, в котором растворитель, не смешивающийся с водой, выбирают из группы, включающей углеводороды, гетероциклические соединения, простые и сложные эфиры. ! 8. Способ по п.6, в котором растворитель, не смешивающийся с водой, выбирают из группы, включающей бензол, тол

Claims (30)

1. Чистая форма рапамицина с общим содержанием примесей менее 1,2%, при этом указанный рапамицин содержит примеси менее 0,15% при RRT 1,34, 0,92 и 0,69 мин.

2. Рапамицин по п.1, имеющий чистоту предпочтительно 98,8%.

3. Рапамицин по п.1, полученный посредством ферментационной питательной среды.

4. Рапамицин по п.1, где указанный рапамицин получают посредством высокоэффективной жидкостной хроматографии.

5. Рапамицин по п.1, где указанный рапамицин находится в кристаллической форме.

6. Способ выделения и очистки рапамицина, включающий:

а) обработку ферментационной питательной среды, экстрактов или растворов растворителем, не смешивающимся с водой, и концентрацию;

b) добавление растворителя, смешивающегося с водой, для осуществления отделения присутствующих примесей;

с) необязательно связывание растворителя, содержащего продукт со стадии (b) с инертным твердым веществом, промывку инертного твердого вещества основанием и кислотой с последующим элюированием;

d) воздействие на элюат со стадии (с) или на растворитель, содержащий продукт со стадии (b) хроматографией с использованием силикагеля;

е) кристаллизацию продукта, полученного со стадии (d);

f) воздействие на раствор продукта со стадии (е) хроматографией с гидрофобным взаимодействием или хроматографией с обращенной фазой; и

g) рекристаллизацию для получения рапамицина, по существу, в чистой форме.

7. Способ по п.6, в котором растворитель, не смешивающийся с водой, выбирают из группы, включающей углеводороды, гетероциклические соединения, простые и сложные эфиры.

8. Способ по п.6, в котором растворитель, не смешивающийся с водой, выбирают из группы, включающей бензол, толуол, бутанол, дихлорметан, хлороформ, этилацетат, изобутилацетат и бутилацетат.

9. Способ по п.6, в котором растворитель, не смешивающимся с водой, представляет собой этилацетат.

10. Способ по п.6, в котором растворитель, смешивающийся с водой, выбирают из группы, включающей воду, спирты, кетоны и диэлектрические апротонные растворители.

11. Способ по п.6, в котором растворитель, смешивающийся с водой, выбирают из группы, включающей воду, метанол, этанол, изопропиловый спирт, ацетон и ацетонитрил.

12. Способ по п.6, в котором инертное твердое вещество выбирают из группы, включающей диатомовую землю, песок, активированный древесный уголь, силикагель и полимерную смолу.

13. Способ по п.6, в котором инертное твердое вещество представляет собой диатомовую землю.

14. Способ по п.6, в котором инертное твердое вещество представляет собой активированный древесный уголь.

15. Способ по п.6, в котором используемым основанием является или органическое, или неорганическое основание.

16. Способ по п.6, в котором используемым основанием является неорганическое основание.

17. Способ по п.6, в котором основанием является бикарбонат натрия.

18. Способ по п.6, в котором используемой кислотой является или органическая, или неорганическая кислота.

19. Способ по п.6, в котором используемой кислотой является неорганическая кислота.

20. Способ по п.6, в котором кислотой является хлористоводородная кислота.

21. Способ по п.6, в котором элюирование проводится с использованием органического растворителя, выбранного из группы, включающей ацетон, этилацетат, хлороформ, дихлорметан, гексан, петролейный эфир, метанол и диэтиловый эфир или их смеси.

22. Способ по п.6, в котором элюирование проводится с использованием ацетона.

23. Способ по п.6, в котором кристаллизация проводится с использованием простых эфиров.

24. Способ по п.6, в котором кристаллизация проводится с использованием диэтилового простого эфира.

25. Способ по п.6, в котором хроматография с гидрофобным взаимодействием проводится с полимерной смолой, выбранной из группы, включающей полистирол, поли(стирол-дивинилбензол), поли(акрилат) и поли(метакрилат).

26. Способ по п.6, в котором хроматография с обращенной фазой проводится со смолой, выбранной из группы, включающей диоксид кремния, связанный с С4, С8 и С18 углеводородом.

27. Способ по п.6, в котором элюирование в хроматографии с гидрофобным взаимодействием или в хроматографии с обращенной фазой проводится с использованием растворителей, выбранных из группы, включающей метанол, ацетон, ацетонитрил, воду, этанол, пропанол, бутанол и тетрагидрофуран или их смесь.

28. Способ по п.6, в котором рекристаллизация проводится с использованием органических растворителей, выбранных из группы, включающей ацетонитрил, ацетон, метанол, этанол, пропанол, бутанол, хлороформ, дихлорметан, этилацетат, гексан и гептан.

29. Способ по п.6, в котором очищенный продукт является одной из изомерных форм рапамицина, а именно изомером А, изомером В или изомером С.

30. Способ по п.6, в котором очищенный продукт является изомером В рапамицина.