RU2009114691A - Связывающие молекулы - Google Patents
Связывающие молекулы Download PDFInfo
- Publication number
- RU2009114691A RU2009114691A RU2009114691/10A RU2009114691A RU2009114691A RU 2009114691 A RU2009114691 A RU 2009114691A RU 2009114691/10 A RU2009114691/10 A RU 2009114691/10A RU 2009114691 A RU2009114691 A RU 2009114691A RU 2009114691 A RU2009114691 A RU 2009114691A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- gene
- heavy chain
- gene segment
- gene segments
- human mammal
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/569—Single domain, e.g. dAb, sdAb, VHH, VNAR or nanobody®
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Processing Of Solid Wastes (AREA)
- General Preparation And Processing Of Foods (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
1. Способ получения антитела, имеющего только тяжелую цепь, включающий: ! стимуляцию антигеном не относящегося к человеку млекопитающего, имеющего локус тяжелой цепи, который: ! содержит множество генных сегментов V, которые кодируют одну или более аминокислотных мутаций (i) на границе контакта с VL для снижения гидрофобности и (ii) в других положениях для преодоления структурной нестабильности; ! содержит, по меньшей мере, один генный сегмент D и, по меньшей мере, один генный сегмент J; ! лишен генных сегментов, кодирующих домен CH1, или сконструирован для предотвращения экспрессии функционального домена CH1; и ! при экспрессии в ответ на стимуляцию антигеном обеспечивает продукцию антитела, имеющего только тяжелую цепь, лишенного CH1, имеющего растворимый VH-домен, кодируемый геном VH, который включает предпочтительный генный сегмент V, включенный в указанный ген VH в результате реаранжировки VDJ и созревания аффинности. ! 2. Способ по п.1, где предпочтительный генный сегмент V и необязательно предпочтительные сегменты D и J далее модифицированы посредством созревания аффинности, приводящего к повышенной стабильности и растворимости полученного VH-домена, включенного в антитело, имеющее только тяжелую цепь. ! 3. Способ по п.1 или 2, где указанное не относящееся к человеку млекопитающее получают посредством: ! получения трансгена in vitro, включающего указанный локус; и ! внесения указанного трансгена в пригодную клетку, из которой предстоит получить указанное не относящееся к человеку млекопитающее. ! 4. Способ по п.3, где клетка представляет собой эмбриональную стволовую клетку или овоцит. ! 5. Способ по п.1 или 2, где указанное не от�
Claims (25)
1. Способ получения антитела, имеющего только тяжелую цепь, включающий:
стимуляцию антигеном не относящегося к человеку млекопитающего, имеющего локус тяжелой цепи, который:
содержит множество генных сегментов V, которые кодируют одну или более аминокислотных мутаций (i) на границе контакта с VL для снижения гидрофобности и (ii) в других положениях для преодоления структурной нестабильности;
содержит, по меньшей мере, один генный сегмент D и, по меньшей мере, один генный сегмент J;
лишен генных сегментов, кодирующих домен CH1, или сконструирован для предотвращения экспрессии функционального домена CH1; и
при экспрессии в ответ на стимуляцию антигеном обеспечивает продукцию антитела, имеющего только тяжелую цепь, лишенного CH1, имеющего растворимый VH-домен, кодируемый геном VH, который включает предпочтительный генный сегмент V, включенный в указанный ген VH в результате реаранжировки VDJ и созревания аффинности.
2. Способ по п.1, где предпочтительный генный сегмент V и необязательно предпочтительные сегменты D и J далее модифицированы посредством созревания аффинности, приводящего к повышенной стабильности и растворимости полученного VH-домена, включенного в антитело, имеющее только тяжелую цепь.
3. Способ по п.1 или 2, где указанное не относящееся к человеку млекопитающее получают посредством:
получения трансгена in vitro, включающего указанный локус; и
внесения указанного трансгена в пригодную клетку, из которой предстоит получить указанное не относящееся к человеку млекопитающее.
4. Способ по п.3, где клетка представляет собой эмбриональную стволовую клетку или овоцит.
5. Способ по п.1 или 2, где указанное не относящееся к человеку млекопитающее получают посредством гомологичной рекомбинации, при которой указанное множество мутантных генных сегментов V и, необязательно, указанных генных сегментов D и J заменяют эквивалентные генные сегменты в эндогенной локусе тяжелой цепи, причем указанные локусы тяжелой цепи лишены функциональности CH1 у не относящегося к человеку млекопитающего.
6. Способ по п.1, где не относящееся к человеку млекопитающее включает множество локусов тяжелой цепи, по меньшей мере, один из которых является таким, как определено в п.1, и все из которых находятся на разных хромосомах.
7. Способ по п.6, где один или более локусов содержат природные генные сегменты V и остальные локусы содержат один или несколько сконструированных генных сегментов V.
8. Способ по п.6, где локусы на каждой хромосоме отличаются.
9. Способ по п.6, где локусы на каждой хромосоме являются одинаковыми.
10. Способ по п.1, где генные сегменты V представляют собой мутированные генные сегменты V человека.
11. Способ по п.1, где локус включает множество генных сегментов D.
12. Способ по п.1, где локус включает множество генных сегментов J.
13. Способ по п.1, где локус содержит, по меньшей мере, один генный сегмент, кодирующий константный участок.
14. Способ по п.13, где в локусе содержится множество генных сегментов, кодирующих константные участки.
15. Способ по п.13, где генные сегменты, кодирующие константный участок, являются человеческими.
16. Способ по п.1, где каждый генный сегмент D и J является человеческим.
17. Способ по п.1, где каждый генный сегмент V кодирует белок, который имеет мутацию в одном или нескольких из положений 37, 44, 45 и 47.
18. Способ по п.17, где каждый генный сегмент V кодирует белок, который имеет мутации во всех из положений 37, 44, 45 и 47.
19. Способ по п.17, где генный сегмент V кодирует белок, где в положении 37 остаток представляет собой фенилаланин, в положении 44 остаток представляет собой глутаминовую кислоту, в положении 45 остаток представляет собой глутамин и/или в положении 47 остаток представляет собой глицин.
20. Способ по п.1, где каждый генный сегмент V кодирует белок, который имеет мутацию в любом из положений 5 и 14.
21. Способ по п.20, где каждый генный сегмент V кодирует белок, который имеет мутации в обоих из положений 5 и 14.
22. Способ по п.20, где генный сегмент V кодирует белок, где в положении 5 остаток представляет собой глутамин и/или в положении 14 остаток представляет собой аланин.
23. Антитело, имеющее только тяжелую цепь, обладающее VH-доменом, кодируемым частично любым из генных сегментов V, указанных на фигуре 3.
24. Способ по п.1, дополнительно включающий выделение антителопродуцирующих клеток из указанного трансгенного не относящегося к человеку млекопитающего и получение гибридом для продукции антител, имеющих только тяжелую цепь.
25. Антитело, имеющее только тяжелую цепь, полученное способом по п.24.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
GBGB0618345.3A GB0618345D0 (en) | 2006-09-18 | 2006-09-18 | Binding molecules |
GB0618345.3 | 2006-09-18 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2009114691A true RU2009114691A (ru) | 2010-10-27 |
Family
ID=37310122
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2009114691/10A RU2009114691A (ru) | 2006-09-18 | 2007-09-18 | Связывающие молекулы |
Country Status (13)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20090271880A1 (ru) |
EP (1) | EP2079759A2 (ru) |
JP (1) | JP2010503659A (ru) |
KR (1) | KR20090114350A (ru) |
CN (1) | CN101573378A (ru) |
AU (1) | AU2007298661A1 (ru) |
BR (1) | BRPI0717020A2 (ru) |
CA (1) | CA2663828A1 (ru) |
GB (1) | GB0618345D0 (ru) |
MX (1) | MX2009002972A (ru) |
RU (1) | RU2009114691A (ru) |
WO (1) | WO2008035216A2 (ru) |
ZA (1) | ZA200901815B (ru) |
Families Citing this family (17)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR101443473B1 (ko) * | 2004-07-22 | 2014-09-22 | 에라스무스 유니버시티 메디컬 센터 로테르담 | Vh 결합 영역의 분리 방법 |
WO2009013620A2 (en) * | 2007-06-11 | 2009-01-29 | Erasmus University Medical Center Rotterdam | Homologous recombination |
US20110123527A1 (en) | 2008-05-23 | 2011-05-26 | Hiroaki Shizuya | Method of generating single vl domain antibodies in transgenic animals |
ES2613730T3 (es) | 2008-12-18 | 2017-05-25 | Erasmus University Medical Center Rotterdam | Animales transgénicos no humanos que expresan anticuerpos humanizados y su uso |
GB0905023D0 (en) * | 2009-03-24 | 2009-05-06 | Univ Erasmus Medical Ct | Binding molecules |
SG181477A1 (en) | 2009-12-10 | 2012-07-30 | Regeneron Pharma | Mice that make heavy chain antibodies |
RU2750219C2 (ru) * | 2010-08-02 | 2021-06-24 | Ридженерон Фармасьютикалз, Инк. | Мыши, у которых вырабатываются связывающие белки, содержащие vl-домены |
CA2859408C (en) | 2011-12-20 | 2020-06-16 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Humanized light chain mice |
PL2967012T3 (pl) | 2013-03-14 | 2021-04-19 | Erasmus University Medical Center Rotterdam | Transgeniczne ssaki inne niż człowiek do wytwarzania przeciwciał |
US10993420B2 (en) | 2013-03-15 | 2021-05-04 | Erasmus University Medical Center | Production of heavy chain only antibodies in transgenic mammals |
ES2762640T3 (es) | 2014-03-21 | 2020-05-25 | Regeneron Pharma | Proteínas VL de unión a antígeno que exhiben diferentes características de unión |
WO2015143414A2 (en) | 2014-03-21 | 2015-09-24 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Non-human animals that make single domain binding proteins |
WO2016062989A1 (en) * | 2014-10-22 | 2016-04-28 | Crescendo Biologics Limited | Human vh domain scaffolds |
EP3209699A1 (en) * | 2014-10-22 | 2017-08-30 | Crescendo Biologics Limited | Vh scaffold |
CN107438622A (zh) | 2015-03-19 | 2017-12-05 | 瑞泽恩制药公司 | 选择结合抗原的轻链可变区的非人动物 |
CN108486125B (zh) * | 2018-03-27 | 2024-01-05 | 重庆金迈博生物科技有限公司 | 一种核酸分子及其在制备人源单域抗体中的应用 |
CN114134144A (zh) * | 2020-09-04 | 2022-03-04 | 北京仁源欣生生物科技有限公司 | 一种非人哺乳动物或其子代的制备方法及其应用 |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US7129084B2 (en) * | 2000-08-03 | 2006-10-31 | Therapeutic Human Polyclonals, Inc. | Production of humanized antibodies in transgenic animals |
GB0110029D0 (en) * | 2001-04-24 | 2001-06-13 | Grosveld Frank | Transgenic animal |
GB0228210D0 (en) * | 2002-12-03 | 2003-01-08 | Babraham Inst | Single chain antibodies |
KR101443473B1 (ko) * | 2004-07-22 | 2014-09-22 | 에라스무스 유니버시티 메디컬 센터 로테르담 | Vh 결합 영역의 분리 방법 |
-
2006
- 2006-09-18 GB GBGB0618345.3A patent/GB0618345D0/en not_active Ceased
-
2007
- 2007-09-18 AU AU2007298661A patent/AU2007298661A1/en not_active Abandoned
- 2007-09-18 MX MX2009002972A patent/MX2009002972A/es not_active Application Discontinuation
- 2007-09-18 US US12/441,581 patent/US20090271880A1/en not_active Abandoned
- 2007-09-18 EP EP07825742A patent/EP2079759A2/en not_active Withdrawn
- 2007-09-18 WO PCT/IB2007/003647 patent/WO2008035216A2/en active Application Filing
- 2007-09-18 CA CA002663828A patent/CA2663828A1/en not_active Abandoned
- 2007-09-18 KR KR1020097007769A patent/KR20090114350A/ko not_active Application Discontinuation
- 2007-09-18 JP JP2009527923A patent/JP2010503659A/ja not_active Withdrawn
- 2007-09-18 CN CNA2007800428188A patent/CN101573378A/zh active Pending
- 2007-09-18 BR BRPI0717020-3A patent/BRPI0717020A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2007-09-18 RU RU2009114691/10A patent/RU2009114691A/ru unknown
- 2007-09-18 ZA ZA200901815A patent/ZA200901815B/xx unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US20090271880A1 (en) | 2009-10-29 |
WO2008035216A9 (en) | 2008-10-02 |
KR20090114350A (ko) | 2009-11-03 |
MX2009002972A (es) | 2009-05-11 |
CN101573378A (zh) | 2009-11-04 |
EP2079759A2 (en) | 2009-07-22 |
BRPI0717020A2 (pt) | 2013-10-08 |
AU2007298661A1 (en) | 2008-03-27 |
ZA200901815B (en) | 2010-06-30 |
JP2010503659A (ja) | 2010-02-04 |
CA2663828A1 (en) | 2008-03-27 |
WO2008035216A3 (en) | 2009-05-14 |
GB0618345D0 (en) | 2006-10-25 |
WO2008035216A2 (en) | 2008-03-27 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2009114691A (ru) | Связывающие молекулы | |
AU2018203713B2 (en) | Histidine engineered light chain antibodies and genetically modified non-human animals for generating the same | |
US20240180130A1 (en) | Non-human animals with modified immunoglobulin heavy chain sequences | |
JP6759303B2 (ja) | Vlドメインを含む結合タンパク質を作製するマウス | |
US20220217955A1 (en) | Non-Human Animals Expressing pH-Sensitive Immunoglobulin Sequences | |
JP6698718B2 (ja) | Vlドメインを含む重鎖を発現するヒト化齧歯動物 | |
CN105861548B (zh) | Adam6小鼠 | |
JP2019162144A (ja) | 同起源の抗体可変領域遺伝子セグメントをクローニングおよび発現させるための迅速な方法 | |
JP2020530760A5 (ru) | ||
RU2008134517A (ru) | Получение антител из одних тяжелых цепей в трансгенных животных | |
RU2011129459A (ru) | Трансгенные животные (не человек), экспрессирующие гуманизированные антитела, и их применение | |
ATE481483T1 (de) | Verfahren zur herstellung eines rekombinanten polyklonalen proteins | |
AU2016232715A1 (en) | Non-human animals that select for light chain variable regions that bind antigen | |
JP4102435B2 (ja) | 酵素多様化を促進する方法 | |
JP7525579B2 (ja) | Vlドメインを含む重鎖を発現するヒト化齧歯動物 | |
AU2017219080B2 (en) | Non-human animals expressing ph-sensitive immunoglobulin sequences | |
JP2021512651A (ja) | 核酸分子およびヒト化抗体における核酸分子の応用 | |
Eichmann | Post-Nobel science II | |
NZ740900B2 (en) | Mice that make binding proteins comprising vl domains |