RU2007124377A - Выделение и очистка белка - Google Patents

Выделение и очистка белка Download PDF

Info

Publication number
RU2007124377A
RU2007124377A RU2007124377/13A RU2007124377A RU2007124377A RU 2007124377 A RU2007124377 A RU 2007124377A RU 2007124377/13 A RU2007124377/13 A RU 2007124377/13A RU 2007124377 A RU2007124377 A RU 2007124377A RU 2007124377 A RU2007124377 A RU 2007124377A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
homogenate
density
sequence
cells
rpbla
Prior art date
Application number
RU2007124377/13A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2420585C2 (ru
Inventor
МУХИКА Мари Долорес ЛУДЕВИД (ES)
МУХИКА Мария Долорес ЛУДЕВИД
ВИРХИЛИ Мириам БАСТИДА (ES)
ВИРХИЛИ Мириам БАСТИДА
РОЙО Бланка ЛЬОМПАРТ (ES)
РОЙО Бланка ЛЬОМПАРТ
ЛУНА Пабло МАРСАБАЛЬ (ES)
ЛУНА Пабло МАРСАБАЛЬ
КЕТГЛАС Маргарита ТОРРЕНТ (ES)
КЕТГЛАС Маргарита ТОРРЕНТ
Original Assignee
Эра Биотеч, С.А. (Es)
Эра Биотеч, С.А.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Эра Биотеч, С.А. (Es), Эра Биотеч, С.А. filed Critical Эра Биотеч, С.А. (Es)
Publication of RU2007124377A publication Critical patent/RU2007124377A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2420585C2 publication Critical patent/RU2420585C2/ru

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K1/00General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/14Extraction; Separation; Purification
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K14/00Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575Hormones
    • C07K14/61Growth hormone [GH], i.e. somatotropin
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K14/00Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/415Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from plants
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K14/00Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/415Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from plants
    • C07K14/425Zeins
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K14/00Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/475Growth factors; Growth regulators
    • C07K14/485Epidermal growth factor [EGF], i.e. urogastrone
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K14/00Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575Hormones
    • C07K14/585Calcitonins
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K19/00Hybrid peptides, i.e. peptides covalently bound to nucleic acids, or non-covalently bound protein-protein complexes
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14Fungi; Culture media therefor
    • C12N1/16Yeasts; Culture media therefor
    • C12N1/18Baker's yeast; Brewer's yeast
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09Recombinant DNA-technology
    • C12N15/10Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8216Methods for controlling, regulating or enhancing expression of transgenes in plant cells
    • C12N15/8221Transit peptides
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8241Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
    • C12N15/8242Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with non-agronomic quality (output) traits, e.g. for industrial processing; Value added, non-agronomic traits
    • C12N15/8257Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with non-agronomic quality (output) traits, e.g. for industrial processing; Value added, non-agronomic traits for the production of primary gene products, e.g. pharmaceutical products, interferon
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K2319/00Fusion polypeptide
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K2319/00Fusion polypeptide
    • C07K2319/01Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
    • C07K2319/04Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing an ER retention signal such as a C-terminal HDEL motif
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K2319/00Fusion polypeptide
    • C07K2319/70Fusion polypeptide containing domain for protein-protein interaction
    • C07K2319/735Fusion polypeptide containing domain for protein-protein interaction containing a domain for self-assembly, e.g. a viral coat protein (includes phage display)

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Claims (20)

1. Способ очистки рекомбинантного слитого белка, экспрессированного в качестве рекомбинантных подобным белковым тельцам скоплений (RPBLA) в клетках-хозяевах, который включает стадии:
(a) получения водного гомогената трансформированных клеток-хозяев, которые экспрессируют слитый белок в виде рекомбинантных подобных белковым тельцам скоплений, где указанные RPBLA обладают заранее определенной плотностью;
(b) образования частей с различной плотностью в гомогенате с получением части, которая содержит относительно повышенную концентрацию RPBLA, и части, которая содержит относительно сниженную концентрацию RPBLA; и
(c) отделения части со сниженной концентрацией RPBLA от части с относительно повышенной концентрацией RPBLA, таким образом очищая указанный слитый белок.
2. Способ по п.1, в котором указанная заранее определенная плотность RPBLA является большей, чем плотность по существу всех эндогенных белков клетки-хозяина, находящихся в гомогенате.
3. Способ по п.1 или 2, в котором указанный слитый белок содержит две последовательности, связанные друг с другом, в которых одна последовательность представляет собой индуцирующую белковые тельца последовательность, и другая представляет собой последовательность представляющего интерес продукта.
4. Способ по п.1 или 2, в котором указанные части с различной плотностью в гомогенате получают посредством центрифугирования гомогената в присутствии раствора, обеспечивающего неравномерную плотность.
5. Способ по п.1 или 2, в котором указанные части с различной плотностью получают с помощью градиента плотности.
6. Способ по п.1 или 2, в котором указанные части с различной плотностью получают с помощью слоя с определенной плотностью, обладающего плотностью меньшей, чем плотность указанных RPBLA.
7. Способ по п.1 или 2, в котором указанные части с различной плотностью получают с помощью супернатанта и осадка, полученных после центрифугирования гомогената при низкой скорости.
8. Способ по п.1, в котором указанные клетки-хозяева представляют собой клетки высших растений.
9. Способ по п.1, в котором указанные клетки-хозяева представляют собой клетки грибов.
10. Способ по п.9, в котором указанные клетки-хозяева грибов представляют собой клетки дрожжей.
11. Способ по п.1, в котором указанные клетки-хозяева представляют собой клетки водорослей.
12. Способ по п.1, в котором указанные клетки-хозяева представляют собой клетки животных.
13. Способ по п.12, в котором указанные клетки-хозяева животных представляют собой клетки млекопитающих.
14. Способ по п.1 или 2, в котором указанный слитый белок дополнительно включает линкерную последовательность между индуцирующей белковые тельца последовательностью и последовательностью представляющего интерес продукта.
15. Способ по п.1, в котором индуцирующая белковые тельца последовательность содержит проламин или модифицированный проламин.
16. Способ по п.15, в котором последовательность проламина представляет собой гамма-зеин, альфа-зеин или проламин риса.
17. Способ по п.1 или 2, в котором RPBLA обладают плотностью, составляющей от приблизительно 1,1 до приблизительно 1,35 г/мл.
18. Способ по п.1 или 2, в котором гомогенат получают из свежей биомассы.
19. Способ по п.1 или 2, в котором гомогенат получают из высушенной биомассы.
20. Способ по п.1 или 2, включающий дополнительную стадию выделения RPBLA.
RU2007124377/10A 2004-11-29 2005-11-29 Выделение и очистка белка RU2420585C2 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GBGB0426161.6A GB0426161D0 (en) 2004-11-29 2004-11-29 Protein isolation and purification
GB0426161.6 2004-11-29

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2007124377A true RU2007124377A (ru) 2009-01-10
RU2420585C2 RU2420585C2 (ru) 2011-06-10

Family

ID=33561507

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2007124377/10A RU2420585C2 (ru) 2004-11-29 2005-11-29 Выделение и очистка белка

Country Status (12)

Country Link
US (1) US20060123509A1 (ru)
EP (1) EP1819820A1 (ru)
JP (1) JP2008521767A (ru)
KR (1) KR20070091157A (ru)
CN (1) CN101103114B (ru)
AR (1) AR051517A1 (ru)
AU (1) AU2005308922B2 (ru)
BR (1) BRPI0517120A (ru)
CA (1) CA2589158A1 (ru)
GB (1) GB0426161D0 (ru)
RU (1) RU2420585C2 (ru)
WO (1) WO2006056484A1 (ru)

Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2224792B1 (es) * 2002-06-28 2007-02-16 Era Plantech, S.L. Produccion de peptidos y proteinas por acumulacion de cuerpos proteicos derivados de reticulos endoplasmico en plantas.
GB0426160D0 (en) * 2004-11-29 2004-12-29 Era Plantech S L Production of proteins
US8163880B2 (en) 2006-02-23 2012-04-24 Era Biotech S.A. Production of biologically active proteins
US9555097B2 (en) 2006-02-23 2017-01-31 Era Biotech, S.A. Recombinant protein bodies as immunogen-specific adjuvants
EP2552934B1 (en) * 2010-03-30 2015-07-15 Novozymes A/S Crystal metabolite recovery
EP2418284A1 (en) 2010-08-13 2012-02-15 ERA Biotech, S.A. Protein body-inducing polypeptide sequences
EP2468870A1 (en) * 2010-12-23 2012-06-27 Philip Morris Products S.A. Method for expressing desxoyribonuclease in plants
EP2468871A1 (en) * 2010-12-23 2012-06-27 Philip Morris Products S.A. Method for producing apolipoprotein in plants
JP6073247B2 (ja) 2011-01-17 2017-02-01 フィリップ・モーリス・プロダクツ・ソシエテ・アノニム 植物で核酸を発現させるベクター
RU2711936C2 (ru) 2011-01-17 2020-01-23 Филип Моррис Продактс С.А. Экспрессия белка в растениях
DE102015107846A1 (de) 2015-05-19 2016-11-24 Johann Wolfgang Goethe-Universität Frankfurt Synthetische Organellen in Hefe
CN105285314A (zh) * 2015-09-14 2016-02-03 哈尔滨工业大学 一种13KDa大米醇溶蛋白的提取方法
CN108503686A (zh) * 2018-05-07 2018-09-07 江苏省中国科学院植物研究所 一种植物总蛋白的提取方法及其专用提取液

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4215040A (en) * 1978-12-22 1980-07-29 The Procter & Gamble Company Density separation process
FR2500937B1 (ru) 1981-02-27 1983-04-15 Thomson Csf
US5948682A (en) * 1991-02-22 1999-09-07 Sembiosys Genetics Inc. Preparation of heterologous proteins on oil bodies
CA2305628C (en) 1997-09-30 2008-08-26 The Regents Of The University Of California Production of proteins in plant seeds
AU2003239895C1 (en) * 2002-05-24 2010-01-07 Medtronic, Inc. Methods and DNA constructs for high yield production of polypeptides
ES2224792B1 (es) * 2002-06-28 2007-02-16 Era Plantech, S.L. Produccion de peptidos y proteinas por acumulacion de cuerpos proteicos derivados de reticulos endoplasmico en plantas.
GB0426160D0 (en) * 2004-11-29 2004-12-29 Era Plantech S L Production of proteins
US9555097B2 (en) * 2006-02-23 2017-01-31 Era Biotech, S.A. Recombinant protein bodies as immunogen-specific adjuvants
US8163880B2 (en) * 2006-02-23 2012-04-24 Era Biotech S.A. Production of biologically active proteins
EP2418284A1 (en) * 2010-08-13 2012-02-15 ERA Biotech, S.A. Protein body-inducing polypeptide sequences

Also Published As

Publication number Publication date
JP2008521767A (ja) 2008-06-26
CN101103114A (zh) 2008-01-09
CN101103114B (zh) 2013-01-02
GB0426161D0 (en) 2004-12-29
AU2005308922A1 (en) 2006-06-01
RU2420585C2 (ru) 2011-06-10
KR20070091157A (ko) 2007-09-07
WO2006056484A1 (en) 2006-06-01
BRPI0517120A (pt) 2008-09-30
EP1819820A1 (en) 2007-08-22
CA2589158A1 (en) 2006-06-01
US20060123509A1 (en) 2006-06-08
AU2005308922B2 (en) 2011-07-28
AR051517A1 (es) 2007-01-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2007124377A (ru) Выделение и очистка белка
WO2006042158A3 (en) Methods and compositions for improving recombinant protein production
RU2007124369A (ru) Производство белков
CN102329381B (zh) 同时分离高纯度的藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白的方法与应用
CN102140476B (zh) 重组葡萄球菌蛋白a基因、含有该基因的表达载体及用途
JP2010512160A5 (ru)
WO2021258650A1 (zh) 一种重组类人细胞外基质结构蛋白的制备方法
CN108929874A (zh) 一种特异性结合高表达pdl1蛋白的细胞的核酸适配体及其应用
CN104402975B (zh) 抗衰老短肽及其制备方法
Franks Characterization of proteins
CN116693692B (zh) 一种重组贻贝粘蛋白及其制备方法
CN115819590A (zh) 抗猪红细胞膜抗体的制备及应用
WO2017097119A1 (zh) 一种生物活性肽
CN105713945A (zh) 一种扇贝抗氧化肽的制备方法
CN103710367B (zh) 一种重组人激肽释放酶1及其编码基因和制备方法
CN108396047A (zh) 一种小公鱼免疫调节肽的制备方法
Thompson et al. High-level expression of a wheat LMW glutenin subunit using a baculovirus system
CN110317813B (zh) 三疣梭子蟹C型凝集素PtCLec2基因及其编码蛋白和应用
CN101948519A (zh) 厚壳贻贝足丝黏附蛋白及其编码序列和制备方法
US8067198B2 (en) Protein expression system
Norbeck et al. Gene linkage of two‐dimensional polyacrylamide gel electrophoresis resolved proteins from isogene families in Saccharomyces cerevisiae by microsequencing of in‐gel trypsin generated peptides
CN111363028A (zh) 重组人源ⅰ型胶原蛋白、表达菌株及其构建方法
WO2002038790A1 (fr) Procede permettant de produire un extrait de germes
CN107074920B (zh) 芋螺毒素多肽κ-CPTx-btl03、其制备方法及应用
WO2005123937A3 (en) Methods for expressing rnp particles in eukaryotic cells

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20131130