RU2004105179A

RU2004105179A - 6-фосфоглюконолактоназа из escherichia coli, фрагмент днк, бактерия, принадлежащая к роду escherichia, -продуцент l-аминокислоты, и способ получения l-аминокислоты

Info

Publication number: RU2004105179A
Application number: RU2004105179/13A
Authority: RU
Inventors: Данила Вадимович Зименков (RU); Данила Вадимович Зименков; Андрей Юрьевич Гулевич (RU); Андрей Юрьевич Гулевич; Александра Юрьевна Скороходова (RU); Александра Юрьевна Скороходова; Жанна Иосифовна Каташкина (RU); Жанна Иосифовна Каташкина; Александр Дмитриевич Киверо (RU); Александр Дмитриевич Киверо; Ирина Владимировна Бирюкова (RU); Ирина Владимировна Бирюкова; Сергей Владимирович Машко (RU); Сергей Владимирович Машко
Original assignee: Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) (RU); Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ)
Priority date: 2004-02-25
Filing date: 2004-02-25
Publication date: 2005-08-10
Also published as: CN101052707B; CN101052707A

Claims

1. 6-Фосфоглюконолактоназа, выбранная из группы, состоящей из следующих белков:

(A) белок, включающий последовательность аминокислот, приведенную в списке последовательностей под номером 2 (SEQ ID NO:2);

(B) белок, включающий последовательность аминокислот, содержащую делеции, замены, вставки или добавление одной или нескольких аминокислот в последовательности аминокислот, приведенной в списке последовательностей под номером 2 (SEQ ID NO:2), который обладает как минимум 70% гомологией по отношению к аминокислотной последовательности, приведенной под номером 2 (SEQ ID NO:2), и который обладает активностью 6-фосфоглюконолактоназы.

2. Фрагмент ДНК, кодирующий 6-фосфоглюконолактоназу по п.1.

3. Бактерия - продуцент L-аминокислоты, отличающаяся тем, что указанная бактерия модифицирована таким образом, что активность 6-фосфоглюконолактоназы по п.1 повышена.

4. Бактерия по п.3, отличающаяся тем, что указанная бактерия принадлежит к семейству Enterobacteriaceae.

5. Бактерия по п.3, отличающаяся тем, что указанная 6-фосфоглюконолактоназа получена из бактерии, принадлежащей к роду Escherichia.

6. Бактерия по п.3, отличающаяся тем, что активность 6-фосфоглюконолактоназы повышена путем модификации последовательности, контролирующей экспрессию гена 6-фосфоглюконолактоназы на хромосоме указанной бактерии таким образом, что экспрессия уазанного гена усилена.

7. Бактерия по п.6, отличающаяся тем, что природный промотор указанного гена заменен на более сильный промотор.

8. Бактерия по п.6, отличающаяся тем, что ген, кодирующий 6-фосфоглюконолактоназу, выбран из группы, состоящей из

(a) ДНК, включающая последовательность нуклеотидов с 1 по 996, приведенной в списке последовательностей под номером 1 (SEQ ID NO:1);

(b) ДНК, которая гибридизуется в жестких условиях с последовательностью нуклеотидов с 1 по 996, приведенной в списке последовательностей под номером 1(SEQ ID NO:1), или с зондом, приготовленным на основании указанной последовательности нуклеотидов, и кодирует белок, обладающий активностью 6-фосфоглюконолактоназы.

9. Бактерия по п.8, отличающаяся тем, что жесткими условиями являются условия, при которых отмывка осуществляется при 60°С, концентрация соли соответствует 1xSSC и 0.1% SDS, а продолжительность отмывки составляет 15 мин.

10. Бактерия по п.3, отличающаяся тем, что указанная бактерия модифицирована таким образом, что экспрессия открытой рамки считывания yddG усилена.

11. Бактерия по п.3, отличающаяся тем, что указанной L-аминокислотой является ароматическая L-аминокислота, выбранная из группы, состоящей из L-триптофана, L-фенилаланина и L-тирозина.

12. Способ получения L-аминокислоты, включающий стадии выращивания бактерии по п.3 в питательной среде, и выделения накопленной L-аминокислоты из культуральной жидкости.

13 Способ по п.12, отличающийся тем, что указанной L-аминокислотой является ароматическая L-аминокислота.

14. Способ по п.13, отличающийся тем, что указанной L-аминокислотой является L-триптофан.

15. Способ по п.14, отличающийся тем, что в указанной бактерии усилена экспрессия генов биосинтеза ароматических аминокислот.